Метаболизм циклических нуклеотидов в лимфоидных органах жвачных животных при внешнем и внутреннем радиационном воздействии

Щукин, Михаил Васильевич

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Метаболизм циклических нуклеотидов в лимфоидных органах жвачных животных при внешнем и внутреннем радиационном воздействии
ВАК РФ 03.00.01, Радиобиология

Автореферат диссертации по теме "Метаболизм циклических нуклеотидов в лимфоидных органах жвачных животных при внешнем и внутреннем радиационном воздействии"

яга ел

министерство сельского хозяйсть^ аз г

и продовольствия российской федерации

МОСКОВСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ АКАДЕМИЯ ВЕТЕРИНАРНОЙ МЕДИЦИНЫ И БИОТЕХНОЛОГИИ им. К.И. СКРЯБИНА

На правах рукописи

Щукин Михаил Васильевич

МЕТАБОЛИЗМ ЦИКЛИЧЕСКИХ НУКЛЕОТИДОВ В ЛИМФОИДНЫХ ОРГАНАХ ЖВАЧНЫХ ЖИВОТНЫХ ПРИ ВНЕШНЕМ И ВНУТРЕННЕМ РАДИАЦИОННОМ ВОЗДЕЙСТВИИ

03.00.01 - радиобиология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Москва 2000

Работа выполнена в Московской государственной академии ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина.

Научный руко водите л ь: академик РАСХН, доктор ветери-

нарных наук профессор [Белов А.Д.

Официальные оппоненты: доктор биологических наук,

профессор Котов Н. Н. кандидат биологических

наук, старший научный сотрудник Грехова Н. В.

Ведущая организация: Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины.

сертационного совета Д 120.36.05 по защите диссертаций на соискание ученой степени доктора наук в Московской государственной академии ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина (109472, Москва, ул. Академика Скрябина, 23, тел. 377-91-17).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке академии. Автореферат разослан мая 2000 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета Сафонов Н.А.

Защита состоится <//» июня 2000 г. в /3 часов на заседании дис-

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы. Интенсивное развитие атомной энергетики и широкое использование радионуклидов в народном хозяйстве ведет к накоплению радиоактивных веществ в окружающей среде и попаданию их в организм человека и животных. Это создает вероятность возникновения аварийных ситуаций и лучевого воздействия на человека и животных.

Несмотря на огромный фактический материал по различным вопросам биологического действия ионизирующих излучений, до сих пор не решены проблемы ранней диагностики, патогенеза и прогноза исходов, а также поиска и отбора эффективных средств профилактики и лечения острых и хронических лучевых поражений.

Изучение системы регуляции внутриклеточного метаболизма в основные периоды острой лучевой болезни расширяет и углубляет знания о реакции целостного организма на облучение, способствует более глубокому раскрытию патогенеза лучевой болезни. Кроме того, эти данные могут быть полезны для комплексной ранней диагностики и определения тяжести лучевого поражения сельскохозяйственных животных, прогнозирования исхода и своевременного определения дальнейшего использования пораженных животных, а также для организации зооветеринарных мероприятий в зонах повышенной радиации и при возможных авариях на атомных предприятиях. Практически все стороны метаболизма в различных клеточных системах регулируются циклическими нуклеотидами (ц-АМФ, ц-ГМФ), что определяет особую их значимость для выяснения патогенеза при воздействии ионизирующей радиации на организм животных и прежде всего на его высокочувствительную лимфоидную ткань.

Цель и задачи исследования заключались в выявлении состояния системы циклических нуклеотидов в лимфоидной ткани (тимусе, селезенке, лимфоузлах) в основные периоды острой лучевой болезни овец в эксперименте и при хроническом внешнем и внутреннем облучении крупного рогатого скота, находящегося на загрязненной радионуклидами территории в результате аварии на Чернобыльской АЭС.

Исходя из этого, были определены конкретные задачи исследования:

- изучить метаболизм циклических нуклеотидов в лимфоидных тканях и содержание циклических нуклеотидов в крови овец в норме и различные периоды острой лучевой болезни легкой и средней степени ' тяжести;

- изучить метаболизм циклических нуклеотидов в лимфоидных тканях и содержание циклических нуклеотидов в крови крупного рогатого скота, подвергшегося хроническому воздействию ионизирующего излучения в результате чернобыльской катастрофы;

- оценить некоторые показатели неспецифического иммунитета у крупного рогатого скота в условиях хронического воздействия ионизирующего излучения;

- оценить возможность использования показателей состояния системы циклических нуклеотидов в оценке тяжести лучевого поражения при остром и хроническом облучении.

Научная новизна полученных результатов состоит в том, что впервые проведено исследование метаболизма цАМФ и цГМФ в тканях лимфоидной системы у здоровых баранов, а также в периоды первичной реакции, разгара и разрешения лучевой болезни легкой и средней степени тяжести. Впервые показано, что в крови баранов происходит изменение уровня цАМФ и цГМФ, .связанное с дозой облучения и периодами острой лучевой болезни (ОЛБ). В период разгара ОЛБ содержание циклических нуклеотидов возрастало с наибольшим значением на 7-10 сутки после облучения, что обусловлено их выходом в межклеточное пространство в результате повреждения клеточных мембран.

В лимфоидных органах облученных баранов установлены глубокие, связанные с дозой, изменения в обмене циклических нуклеотидов, обусловленные нарушением процессов регуляции их метаболизма.

Из всех исследованных тканей в тимусе происходят более глубокие и длительные изменения в метаболизме циклических нуклеотидов, восстановления которых не наблюдалось даже в период разрешения ОЛБ. В лимфатических узлах система метаболизма цАМФ и цГМФ оказалась наиболее радиорезистентной.

В лимфоидных тканях коров, пострадавших от чернобыльского загрязнения, впервые было обнаружено существенное усиление как процессов биосинтеза, так и расщепления цАМФ и цГМФ, которые наиболее выражены были в тимусе животных.

Нарушение в системе метаболизма циклических нуклеотидов в тканях лимфатической системы приводит к снижению общей резистентности организма животных, появляющееся в увеличении обсемененно-сти микрофлорой кожных покровов животных, пострадавших от чернобыльского облучения.

Научно-практическое значение работы заключается в том, что полученные результаты дополняют имеющиеся в литературе сведения о патогенезе острой лучевой болезни у сельскохозяйственных животных. Впервые изучена реакция клеточных регуляторов обмена веществ цАМФ и цГМФ в радиочувствительных лимфоидных тканях при ОЛБ легкой и средней степени тяжести. Эти данные раскрывают тесную связь метаболизма внутриклеточных регуляторов обмена веществ в лимфоидных органах облученных животных с периодом и тяжестью лучевой болезни. В условиях радионуклидного загрязнения среды у пострадавших животных выявлены сходные изменения в метаболизме циклических нуклеотидов в тимусе, селезенке и лимфоузле, что приводит к снижению общей резистентности животных, проявляющейся в увеличении обсемененности микроорганизмами носового зеркала у КРС. Эти данные необходимы для разработки системы лечебно-профилактических мероприятий для животных, подверженных радиационному воздействию.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены на Всесоюзной конференции молодых ученых по сельскохозяйственной радиологии (Обнинск, 1983); на II Всесоюзной конференции по сельскохозяйственной радиологии (Обнинск, 1984); на научно-координационном совещании "Возможности и перспективы радиоиммунологического анализа в животноводстве и ветеринарии (Иваново, 1985); на научно-координационном совещании по использованию радионуклидов в изучении обмена веществ для повышения продуктивности сельскохозяйственных животных (Омск, 1986, ДСП); на I Всесоюзном радиобиологическом съезде (Москва, 1989); на III Всесоюзной конференции по сельскохозяйственной радиологии (Обнинск, 1990), Республиканской научно-методической конференции 26-27 марта 1996 г. (Москва, 1996), Третьем съезде по радиационным исследованиям (Москва, 1997), а также на ежегодных научных итоговых конференциях МВА.

Объем и структура диссертации. Работа изложена на 181 странице машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов, заключения, выводов и практических предложений, приложения. Работа иллюстрирована 18 рисунками и 26 таблицами. Список литературы включает 164 источника, из них 122 отечественных и 42 зарубежных.

Основные положения, выносимые на защиту.

- При острой лучевой болезни (ОЛБ) у баранов изменение метаболизма циклических нуклеотидов в лимфоидных тканях связано с тяжестью и периодом острой лучевой болезни. Наибольшей радиочувствительностью по данным показателям обладает тимус, а наименьшей лимфотические узлы.

- В крови облученных баранов концентрация циклических нуклеотидов повышается в соответствии с тяжестью их клинического состояния и по времени связана с периодом максимальнй гибели радиочувствительных клеток в организме животных.

В отдаленный период облучения животных, в результате чернобыльского загрязнения среды, выявлены глубокие изменения в метаболизме внутриклеточной системы адаптации, регулируемой цАМФ и цГМФ, в органах лимфоидной ткани, что отражается на общей резистентности организма пострадавших животных.

Публикация работ. По материалам диссертации опубликовано 9 печатных работ.

Материалы и методы исследований

Работа выполнена на кафедре радиобиологии, рентгенологии и гражданской обороны Московской государственной академии ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина в период с 1982 по 1996 гг. в комплексе с сотрудниками и аспирантами кафедры. Она является частью проводимых комплексных исследований по изучению патогенеза и разработке методов профилактики и лечения острой лучевой болезни, а также влияния аварийного радионуклидного выброса ЧАЭС на сельскохозяйственных животных.

По разделу острой лучевой болезни экспериментальные исследования проводили на 27 клинически здоровых баранах породы финский ландрас 1,5-летнего возраста, которые содержались в виварии МВА в условиях, соответствующих зоогигиеническим требованиям. В течение месяца животных адаптировали к условиям вивария и затем, разделив на 3 группы по принципу аналогов, использовали в эксперименте.

В первую группу вошло 11 баранов, облученных в дозе 0,96 Гр (100 Р), во вторую - И животных, облученных в дозе 3,84 Гр (400 Р), третья - контрольная группа - состояла из 5 необлученных баранов.

Общее одностороннее (правостороннее) облучение проводили на терапевтической рентгеновской установке РУМ-11 в институте химической физики АН СССР. Режим облучения: мощность дозы составля-

ла 0,11 Гр/мин при силе тока - 15 мА, напряжение 210 кВ, фильтр - 1,0 мм А1, +0,5 ммСи, кожно-фокусное расстояние - 95 см. С помощью клинического дозиметра 27012-РТ (ГДР) определяли равномерность облучения животных.

Материалом для радиоиммунологических, радиоизотопных и биохимических исследований служили сыворотка и плазма крови, ткани тимуса, лимфоузлов, селезенки. Кровь брали из яремной вены всегда в утренние часы (с 9 до 10 часов перед кормлением) до облучения, а также через 30 мин., 3 часа на 1-е, 2-е, 3-й, 5-е, 7-е, 10-е, 15-е, 20-е, 25-е, 30-е сутки после облучения. Для радиоиммунологического исследования гормонов и циклических нуклеотидов на холоде получали стабилизированную ЭДТА (этилендиаминтетраацетат №) плазму. Препараты тканей у баранов 1 -ой и 2-ой групп брали через 3 часа после облучения (по 3 головы), на 7-е сутки (по 4 головы) и 30-е сутки (по 3 головы). При аналогичных условиях брали материал и от контрольных животных.

Радиоиммунологическим методом с помощью тест-наборов определяли циклические нуклеотиды (цАМФ и цГМФ) в плазме крови, тимусе, селезенке, лимфоузлах.

Второй раздел работы, посвященный изучению влияния аварийного радионуклидного выброса ЧАЭС на метаболизм циклических нуклеотидов в тканях иммунной системы и общие показатели естественной резистентности сельскохозяйственных животных, был выполнен в хозяйствах Гомельской области (совхоз "Стреличево" и колхоз имени XXI Партсъезда Хойникского района; совхоз "Наровлянский" и колхоз "Советская Белоруссия" Наровлянского района) (1988-1989). Контролем служили незагрязненные радионуклидами хозяйства: с-з "Октябрьский" Октябрьского района Гомельской области, с-з Романова Бешенковского р-на и к-з "Прогресс" Витебского района Витебской области. Выбор экспериментальных хозяйств был обусловлен различным уровнем загрязненности радионуклидами, обеспечивающих соответствующий уровень гамма-фона местности и загрязненность радионуклидами кормов.

Плотность загрязнения угодий '"Сэ и 908г к-за им. XXI Партсъезда

2 2 137 2

отд. «Новоселки» составлял 703 кБк/м (19 Ки/км ) по Сэ и 74 кБк/м (2 Ки/км2) по 90 Бг; в отд. «Рудное» по ,37Сэ - 555 кБк/м2 (15 Ки/км2) и 908г - 111 кБк/м2 (3 Ки/км2); в совхозе «Стреличево» в отд. «Мокиши» 740 кБк/м2 (20 Ки/км2) по '"Сб и 92,5 кБк/м2 (2,5 Ки/км2) по 90Бг; в отд. «Рудаков» 444 кБк/м2 (12 Ки/км2) по шСб и 74 кБк/м2 (2 Ки/км2) по 905г; в колхозе «Советская Белоруссия» уровень загрязнения по '"Сб

составлял 444 кБк/км2 (12 Ки/км2), а в с-зе Наровлянский 1110 кБк/м2 (30 Ки/км2). В контрольных хозяйствах уровень загрязнения по l37Cs не превышал 37 кБк/м2 (1 Ки/км2).

Корма животные получали с угодий соответствующих х-в. Наиболее загрязненным было сено в совхозе "Наровлянский", которое находилось в пределах 3589-4500 Бк/кг. Силос, солома и концентрированные корма были гораздо чище (607-1047 Бк/кг). В других хозяйствах корма были загрязнены в меньшей степени.

Исследовали крупный рогатый скот различного возраста. Кровь у животных брали из яремной вены в утренние часы до кормления. Непосредственно в хозяйствах проводили гематологические исследования, определяли микробную обсемененность носового зеркала у животных, а также получали сыворотку и плазму крови.

Для исследования метаболизма циклических нуклеотидов на мясокомбинатах отбирали образцы проб тимуса, селезенки, лимфатических узлов у телок в возрасте 2-2,5 лет из загрязненного и чистого х-в. Образцы тканей помещали в пластиковые контейнеры, охлаждали до -20°С и хранили в жидком азоте до проведения анализа. Перед определением цАМФ и цГМФ ткань гомогенизировали ультразвуковым дезинтегратором УРСК-7Н-18 (СССР) при частоте 20 кГц.

Клиническое состояние баранов оценивали по общепринятым методам. Подсчет эритроцитов и лейкоцитов у баранов и у КРС в венозной крови проводили на приборе "Picoscaie" (ВНР). Содержание гемоглобина в крови (в г%) определяли на фотометре "Linson" (LKB-Швеция), согласно стандартным методикам.

Циклические нуклеотиды (ц-АМФ и ц-ГМФ) в плазме крови и го-могенатах тканей определяли радиоиммунологическим с помощью наборов Cyclic AMP, Cyclic GMP ("Amersham", Англия) и Cyclic АМР/|251/, Cyclic GMP/I25I/ (ЧССР). Аденилатциклазную и гуанилат-циклазную активности определяли методом РИА по приросту концентрации цАМФ и соответственно цГМФ в инкубационной среде с соответствующими тканевыми экстрактами. Активность фосфодиэстеразы циклических нуклеотидов определяли по убыли цАМФ и цГМФ в инкубационной среде после добавления тканевых экстрактов. Содержание гормонов: тироксина (Т4), трийодтиронина (ТЗ), тироксинсвязы-вающего глобулина (ТСГ), инсулина, методом РИА, стандартными наборами: РИО-ИНС-ПГ-1251; РИО-ТЗ-ПГ; РИО-Т4-ПГ; РИО-ТСГ-ПГ.

Уровень обсемененности микрофлорой поверхности носового зеркала животных определяли по методу H.A. Клемпарской и Г.А. Шаль-

новой (1966). Активность лизоцима в сыворотке крови - по степени лизирования клеточных оболочек Мшг. ^косЫЫсиз.

Расчет доз внутреннего и внешнего облучения животных проводили с помощью доз по специальной программе компьютерного расчета, разработанной во Всероссийском научно-исследовательском институте сельскохозяйственной радиологии и агроэкологии РАСХН (г. Обнинск), авторы Р. М. Алексахин, И. А. Сарапульцев, Е. В. Спирин, Д. Б. Удалов.

Статистическую обработку результатов проводили по критерию Стьюдента.

Результаты собственных исследований

Облучение баранов в дозах 0,96 Гр и 3,84 Гр привело к развитию острой лучевой болезни легкой и средней тяжести с ее характерными периодами: первичной реакцией на облучение, латентным периодом (1-3 сут), периодами разгара (4-20 сут) и разрешения лучевой болезни (с 21 дня).

Лучевая болезнь легкой степени (0,96 Гр) протекала на фоне слабо выраженных изменений клинико-гематологических показателей. При этом характерными оказались изменения в системе белой крови. В популяции нейтрофилов установлен сдвиг ядра влево. Наибольшие изменения наблюдали в интервале от 3 часов до 7 суток после облучения. В этот период количество лимфоцитов колебалось в пределах от 30,4+3,74 % до 40,5+3,51% - при дозе 0,96 Гр против 47,1±3,64 в контроле. При ОЛБ средней степени тяжести (3,84 Гр) были четко выражены изменения клинико-гематологических показателей с явным проявлением желудочно-кишечного синдрома (3-10 сутки). Изменения в системе белой крови были глубокими и стойкими, нормализация которых не наступала к концу наблюдения (30 сутки). Доля лимфоцитов при этом снижалась более чем в 2 раза уже через 3 часа после облучения.

Изменение концентрации цАМФ и цГМФ в плазме крови облученных баранов представлено на рис. 1 и 2.

Контроль * » о,М Гр ,Ы Гр

О МИЛ 30 а 1су1 2су1 3 сут 6 сут 7 сг/т 10 мин час« сут

15 сут

го су*

25 30 сут сут

Рис. 1. Динамика содержания цАМФ в плазме крови контрольных и облученных баранов

По нашему мнению, повышение концентрации цАМФ в плазме крови происходит в результате его выхода из клеток радиочувствительных тканей после их интерфазной и репродуктивной гибели. Поскольку концентрация цАМФ в клетках млекопитающих на порядок выше, чем цГМФ, то уровень цГМФ в плазме крови из-за его выхода из поврежденных клеток меняется незначительно по сравнению с цАМФ. Действительно, через 7 суток после облучения содержание в плазме крови цАМФ было выше, чем у необлученных баранов на 58,5% при дозе 0,96 Гр и на 77,5% при дозе 3,84 Гр, а уровень цГМФ был повышен незначительно: на 9% и 32,8% соответственно. У 2 баранов с неблагоприятным прогнозом концентрация цАМФ и цГМФ в плазме крови возрастала в 2-3 раза за 2-3 дня до гибели.

^ Ш Контроль | * • 0,96 Гр ! _!—3,84 Гр 1

М 3 1 сут 2 сут 3 сут 5 сут 7 сут 10 16 мин часа сут сут

го

сут

25 сут

30 сут

Р и с. 2. Изменения содержания цГМФ в плазме крови контрольных и облученных баранов

На содержание цАМФ и цГМФ в тканях существенное влияние оказывают многие гормоны. В частности инсулин снижает уровень цАМФ, активируя фосфодиэстеразу, а глюкагон его повышает, действуя через аденилатциклазный комплекс. Радиоиммунологическое оп-

ределение инсулина показало, что его содержание у здоровых необлу-ченных баранов в сыворотке крови находилось в пределах от 10,88+1,03 мкед/мл до 12,5+0,96 мкед/мл в течение всего срока наблюдения. На 1 сутки после облучения животных в дозе 0,96 Гр концентрация инсулина была повышена на 67% по отношению к контролю, которое в дальнейшем вплоть до 7-х суток было в пределах исходных значений. Наибольший уровень гормона отмечали в период разгара ОЛБ (на 7 и 10 сут.). Его концентрация в эти сроки составляла 163,9% и 164 % от исходного значения. Период разрешения лучевой болезни характеризовался снижением уровня гормона. У животных, облученных в дозе 3,84 Гр, были отмечены аналогичные, но более существенные изменения динамики концентрации гормона. Так, уже в период первичной реакции на облучение выявлена тенденция к увеличению уровня инсулина, а через сутки его концентрация почти в 2,8 раза превышала контрольные значения. В дальнейшем его концентрация в крови менялась циклично с максимумом на 10 сут. (в 1,9 раза над контролем). Период выздоровления сопровождался нормализацией концентрации гормона.

Концентрация ТЗ была снижена в течение всего времени наблюдения после облучения обеими дозами. В период первичной реакции уже через 30 минут после облучения в дозе 0,96 Гр происходит снижение уровня гормона до 1,42+0,25 нмоль/л. В последующие сроки отмечалось стойкое снижение концентрации трийодтиронина с наименьшим содержанием в период разгара лучевой болезни на 5-7 сутки (1,12+0,2 и 1,09+0,13 нмоль/л соответственно Р<0,05). К концу наблюдений его концентрация постепенно восстанавливалась, однако так и не достигала контрольного уровня.

Облучение в дозе 3,84 Гр вызывало более глубокие изменения при аналогичной динамике.

Концентрация тироксина (Т4) изменялась в меньшей степени. Его содержание снижалось незначительно со вторых суток после облучения дозой 0,96 Гр до 25 суток, а при дозе 3,84 Гр снижение было с 5-х суток до конца нашего наблюдения.

Содержание тироксинсвязывающего глобулина (ТСГ) незначительно возросло после облучения в дозе 0,96 Гр и к 2-м суткам и составило 1,99+0,27 мкмоль/л (Р>0,05). В дальнейшем отмечали стойкое его снижение вплоть до конца наблюдений. Доза 3,84 Гр вызывала аналогичную динамику изменений концентрации ТСГ.

В плазме крови телят и нетелей, содержащихся на загрязненной радионуклидами территории (к-з XXI Партсъезда) концентрация

цАМФ и цГМФ, что для всех исследуемых групп была более высокой по сравнению с животными из "чистых" хозяйств.

1 *«С1 /сую* Л) суток ¿'пел / сугок й

ш Концентрация цАМО, % к контролю ]

п Активность адвнмязтциклззы, контролю Сазаяьнгя в Активность аденилатциклазы. %к контролюстммулировлнмая < «Относительная способность». активации, контролю

■ А<тиа*ос1вФДЭ2"1С-?' цАМФ, % к контролю

Р и с. 3. Содержание цАМФ, активность аденилатциклазы и ФДЭ цАМФ в гомогенате селезенки у контрольных и облученных баранов

Метаболизм циклических нуклеотидов во всех тканях осуществляется аденилатциклазным и гуанилатциклазным комплексом, под действием которых происходит биосинтез цАМФ и цГМФ, соответственно. Расщепление цАМФ и цГМФ до биологически неактивных продуктов осуществляется фосфодиэстеразой циклических нуклеотидов, локализованной в тех же самых тканях.

При ОЛБ баранов все стороны метаболизма циклических нуклеотидов в лимфоидной ткани подвержены глубоким изменениям, коррелирующим с дозой и периодами ОЛБ.

После облучения животных в дозе 0,96 Гр содержание цАМФ в селезенке начинало снижаться уже через 3 часа и достигало наименьших значений в период разгара ОЛБ на 7 сутки (50% от контрольного уровня). Аналогичная динамика установлена и для дозы 3,84 Гр, однако глубина изменений концентрации цАМФ при этом была более выраженной (42 % от контроля), что безусловно отражает глубину радиационных поражений клеточных систем в селезенке в этот период (рис.3). При обеих дозах облучения снижение цАМФ в селезенке обусловлено за счет одного и того же механизма: при активизации ферментативной активности аденилатциклазы происходит более интенсивная активация фосфодиэстеразы, что и обеспечивает закономерное снижение уровня цАМФ в ткани селезенки. Следует подчеркнуть, что именно в период разгара ОЛБ на 7-е сутки в крови этих животных выявлено наибольшее количество содержания цАМФ. Следовательно, снижение содержания цАМФ в селезенке животных, обусловленное нарушением в согласо-

ванной работе ферментных систем ответственных за синтез и расщепление цАМФ, сопровождается еще и более интенсивным выходом цАМФ в межклеточное пространство и сосудистое русло, а главное гибелью и цитолизом радиочувствительных клеток. С увеличением дозы облучения эти явления протекают интенсивнее.

В период разрешения ОЛБ содержание цАМФ в селезенке повышается. При ОЛБ легкой степени оно фактически достигает на 30 сутки контрольных значений, а при ОЛБ средней степени тяжести концентрация цАМФ почти в 2 раза превышала контроль. Эти данные указывают на активизацию компенсаторно-восстановительных процессов в селезенке. Чем больше доза облучения, тем интенсивнее проходят в селезенке процессы восстановления поврежденных тканей, важнейшую роль в регуляции которых выполняет цАМФ.

В тимусе облученных в дозе 0,96 Гр баранов содержание цАМФ изменяется так же как и в селезенке. Наименьшее его количество выявлено в период разгара ОЛБ, а на 30 сутки концентрация цАМФ была выше контрольного значения на 40%. Изменения уровня цАМФ обусловлены так же как и в селезенке за счет дисбаланса ферментных систем синтеза и расщепления цАМФ. Динамика изменения содержания цАМФ в тимусе при дозе облучения 0,96 Гр близка по своим значениям к подобным изменениям цАМФ в селезенке при дозе облучения 3,84 Гр.

В лимфатических узлах система метаболизма цАМФ оказалась наиболее радиорезистентной из всех исследованных лимфоидных тканей. При этом в период разгара ОЛБ в них выявлено существенное увеличение концентрации цАМФ (в 1,8 и 2 раза), адекватно отражающее активизацию функциональной активности аденилатциклазы. В период разрешения ОЛБ показатели метаболической системы цАМФ приближались к контрольному уровню (рис.4).

Контроль 3 часа 7 суток ^ ^30 сутои 3 часа 7 суток 30 суток

□ Канцлмграция цГМФ, %к контролю

□ Активность гуанилэтциклазы, % к контролю

О Активность ФДЭ 10-7 М цГМФ,%к контролю

Р и с. 4. Содержание цГМФ, активность гуанилатциклазы и фосфодиэсте-разы цГМФ в гомогенате селезенки у контрольных и облученных баранов

Содержание цГМФ в гомогенате селезенки у необлученных баранов составляло 0,819+0,117 пмоль/ мг белка. Через 3 часа и 7 суток после облучения в дозе 0,96 Гр концентрация цГМФ несущественно отличалась от контрольных значений. В период разрешения ОЛБ содержание цГМФ в селезенке повышалось в 4,1 раза. При облучении животных в дозе 3,84 Гр концентрация цГМФ последовательно возрастала в селезенке, достигая своего максимального значения (450%) на 30 сутки после облучения. Изменение концентрации цГМФ происходит за счет нарушения в работе ферментов, определяющих метаболизм цГМФ в клетках. При этом активность фосфодиэстеразы была повышена во все исследованные сроки при обеих дозах облучения. В период разгара ОЛБ активность этого фермента была наибольшей и достигала 205% и 225% от контрольного уровня. Активность гуанилатцик-лазы при этом изменялась незначительно. Решающее значение на содержание цГМФ в клетках селезенки, очевидно, оказывает изменение проницаемости мембран. К 30 суткам после облучения активность гуа-нилатциклазы существенно повышается, что и обеспечивает накопление цГМФ в ткани селезенки. Увеличение гуанилатциклазной активности напрямую связано с накоплением в клетках продуктов перекисного окисления липидов, являющихся основными активаторами работы данного фермента. Эти данные убедительно демонстрируют процесс постепенного истощения антиоксидантной системы у облученных животных. При ОЛБ легкой степени тяжести накопление цГМФ в ткани селезенки происходит в период разрешения ОЛБ. При облучении баранов в большей дозе (3,84 Гр) этот процесс наступает уже на 7 сутки. Следовательно, истощение антиоксидантной системы в этом случае происходит гораздо быстрее.

В тимусе облученных баранов обнаружена подобная картина изменения концентрации цГМФ.

Содержание ц-ГМФ в гомогенате лимфатического узла у необлученных баранов составляло 2,70+0,26 пмоль/мг белка. Через 3 часа после облучения концентрация ц-ГМФ увеличилась на 30 % при дозе 0,96 Гр (Р>0,05) и на 44 % при дозе 3,84 Гр. В период разгара лучевой болезни выявлено наибольшее содержание цГМФ, которое достигало 7,47+0,74 пмоль/мг белка (Р<0,01) при легкой степени ОЛБ и 9,08+0,61 пмоль/мг белка при средней. Следует заметить, что повышение концентрации цГМФ происходит в этот период неадекватно активности гуанилатциклазы. Ибо при незначительной активизации функции гуа-нилатциклазы, происходит более существенная активизация функции фосфодиэстеразы цГМФ. Следовательно, решающее значение на воз-

растание содержания цГМФ в этот период оказывает понижение его секреции через плазматические мембраны клеток.

В лимфоидной ткани коров, пострадавших от чернобыльского загрязнения в целом, обнаружена существенная активизация как процессов биосинтеза, так и расщепления цАМФ и цГМФ. Кроме того, среди

СЭМ1ГХ тканей лимфоидной системы более глубокие изменения выявлены для тимуса.

Функция аденилатциклазы в тимусе стимулирована на всех уровнях. Так, базальная активность повышена в 3,3 раза. Гор-монстимулированная (изопротеренолом) - в 3,1 раза (Р<0,05) и КаР-стимулированная повышена в 3,5 раза. Однако, в это же самое время активность фосфодиэстеразы, расщепляющей цАМФ, повышена в 2,8 раза (Р<0,05). Содержание цАМФ в ткани при этом составляло 78,7% от контроля.

Система циклического гуанозинмонофосфата также активизирована, однако, в меньшей степени. Так, активность аденилатциклазы в присутствии была повышена в 2,8 раза, а стимулируемая Мп+2 -1,6 раза (Р<0,01). При этом работа фосфодиэстеразы по расщеплению цГМФ была усилена, на 39,1% по отношенгао к контролю. Уровень же цГМФ в тимусе составлял 5,46 нмоль/мг белка (82,8% от контроля).

Аналогичные результаты были получены в тканях лимфоузла и селезенки. Однако, содержание цАМФ в этих тканях имело лишь тенденцию к повышению по отношению к контролю в отличие от тимуса. Полученные нами данные по активации всей системы метаболизма циклических нуклеотидов в тканях иммунной системы указывают о существенной активизации процессов, направленных на её обновление.

Несмотря на существенную активизацию процессов биосинтеза и распада циклических нуклеотидов, их содержание в селезенке и лимфоузле было близким контрольному уровню. Однако в тимусе содержание цАМФ и цГМФ было понижено, что как и в случае с острым облучением баранов подтверждает большую радиочувствительность тимуса. Это оказывает дезинтегрирующее влияние на те звенья иммунитета, которые контролируются в организме тимусом.

Обсемененность кожи животных различными микроорганизмами является одним из показателей неспецифической резистентности организма, который в норме у здоровых животных зависит от сезона.

У животных всех возрастных групп на загрязненной территории было выявлено увеличение обсемененности микрофлорой носового зеркала. Наибольшие изменения при этом отмечены у животных к-за

"Советская Белоруссия", с-за "Наровлянский", а также у телят отд. "Новоселки" к-за XXI Партсъезда. Увеличение этого показателя указывает на ослабление резистентности организма этих животных. При анализе лизоцимной активности выявлены нарушения сезонной зависимости у животных из пострадавших хозяйств.

ВЫВОДЫ

1. В крови облученных баранов содержание цАМФ и цГМФ изменяется в соответствии с дозой облучения и периодами ОЛБ:

- Во время первичной реакции концентрация цАМФ и цГМФ в плазме крови повышается, соотношение цАМФ/цГМФ нарушено. В латентный период их концентрация постепенно нормализуется.

- В период разгара ОЛБ содержание циклических нуклеотидов резко возрастало с наибольшим значением на 7-10 сутки, что совпадает со временем максимальной гибели радиочувствительных клеток в организме.

- В период разрешения лучевой болезни содержание циклических нуклеотидов постепенно снижалось. Чем больше доза облучения, тем медленнее происходит нормализация этих показателей.

2. Облучение вызывает существенное нарушение метаболизма циклических нуклеотидов в лимфоидных органах баранов.

- В селезенке содержание цАМФ снижалось уже через 3 часа после облучения в дозе 0,96 Гр и достигало наименьших значений на 7-10 сутки (50% от контроля). При дозе 3,84 Гр глубина изменений более значительна. Нарушения обусловлены за счет более выраженной активизацией ферментативного гидролиза цАМФ по сравнению с его синтезом. При разрешении ОЛБ содержание цАМФ в селезенке повышается в соответствие с дозой облучения в основном за счет снижения скорости его расщепления.

- В тимусе в метаболизме цАМФ происходят аналогичные, но более глубокие и длительные изменения, восстановления которых не наблюдается даже в период разрешения ОЛБ. В лимфатических узлах система метаболизма цАМФ оказалась наиболее радиорезистентной.

зенке и тимусе существенно повышается: в селезенке в 4,1 раза (0,96 Гр) и 4,5 раза (3,84 Гр). В лимфатическом узле система метаболизма цГМФ обеспечивает активное его накопление в ткани во все исследованные сроки.

4. Среди исследованных гормонов (ТЗ, Т4, ТСГ и инсулина) наибольшим изменениям подвержено содержание наиболее биологически активного трийодтиронина с минимальной концентрацией в период разгара ОЛБ.

5. В лимфоидных тканях коров, пострадавших от чернобыльского загрязнения, было обнаружено усиление как процессов биосинтеза, так и расщепления цАМФ и цГМФ, которые наиболее выражены в тимусе животных.

- В тимусе базальная активность повышена в 3,3 раза, гормонсти-мулированная - в 3,1 раза и ЫаР-стимулированная повышена в 3,5 раза. Активность фосфодиэстеразы при этом была усилена в 2,8 раза. Содержание цАМФ в ткани при этом составляло 78,7% от контроля. Система обмена цГМФ была активизирована в меньшей степени.

- В крови пострадавших животных соотношение цАМФ/цГМФ изменено в сторону увеличения доли цАМФ. Концентрация цАМФ у телят повышена в 2-4 раза, цГМФ в 1,5-2,9 по сравнению с контролем.

6. У животных из загрязненных радионуклидами районов изменяются показатели неспецифической резистентности:

- нарушены сезонные изменения лизоцимной активности. У коров весной она минимальна, а осенью достоверно выше контрольных значений. У молодняка активность лизоцима снижается во все сроки исследования;

- обсемененность микрофлорой у животных из загрязненных радионуклидами территорий выше, чем в контрольных хозяйствах, что указывает на снижение общей резистентности их организма.

Сведения о практическом использовании результатов исследования

1. Материалы диссертации включены в учебник А. Д. Белова, В. А. Киршина /Ветеринарная радиобиология. - М.: Агропромиздат, 1987.-287 с.

2. Учебник Радиобиология/ А.Д. Белов, В.А. Киршин, Н.П. Лысенко, В.В. Пак, Л.В. Рогожина. - М.: Колос, 1999. - 384 с.

3. Результаты исследований используются в учебном процессе при чтении лекций и проведении лабораторно-практических

занятий на кафедре радиобиологии, рентгенологии и ГО МГАВМиБ им. К.И. Скрябина.

Рекомендации по использованию научных выводов

1. Результаты по оценке состояния метаболизма циклических нук-леотидов в радиочувствительной лимфоидной ткани животных в комплексе с клинико-гематологическими методами могут быть использованы для выявления глубины и прогноза острой лучевой болезни овец. 2. Выявленные нарушения в механизмах гуморальной регуляции внутриклеточного и тканевого метаболизма в тканях иммунной системы, осуществляемой циклическими нуклеотидами у животных, пострадавших от чернобыльского облучения, могут использоваться для разработки лечебно-профилактических мероприятий по стимуляции резистентности пострадавших животных.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО МАТЕРИАЛАМ ДИССЕРТАЦИИ

1. Щукин М.В. Влияние рентгеновского облучения на уровень инсулина в сыворотке крови баранов // Всесоюзная научная конференция молодых ученых по е.- х. радиологии: Тез. докл. - Обнинск, 1983. - С. 63-64.

2. Белов А.Д., Щукин М.В. Влияние рентгеновского облучения на уровень циклического аденозинмонофосфата в плазме крови баранов//Вторая Всесоюзная конференция по с.-х. радиологии: Тез. докл. - Обнинск, 1984. - Т. 2. -С. 88.

3. Белов А.Д., Щукин М.В. Уровень циклического аденозинмонофосфата в плазме крови баранов при острой лучевой болсзни//Возможности и перспективы радиоиммунологического анализа в животноводстве и ветеринарии: Тез. докл. - Иваново, 1985. -С. 73 -74.

4. Белов А.Д., Щукин М.В. Изучение динамики инсулина в сыворотке крови барана радиоиммунологическим методом//Использование радионуклидов в изучении обмена веществ, для повышения продуктивности с.-х. животных: Тез. докл. - Омск, 1986. -С. 36-37. ДСП.

5. Белов А. Д., Щукин М. В. Содержание циклических нуклеотидов в тимусе и селезенке баранов при острой лучевой болезни различной степени тяжести//1 Всесоюзный радиологический съезд: Тез. докл. - Пущино, 1989. - Т. V. -С. 1018-1019.

6. Белов А. Д., Щукин М. В. Радиоиммунологическое исследование циклических нуклеотидов в плазме крови баранов при острой лучевой болезни // Третья Всесоюзная конференция по с.-х. радиологии: Тез. докл. - Обнинск, 1990.-Т. II.-С. 151-152.

7. Щукин М. В. Уровень тиреоидных гормонов баранов при острой лучевой болезни // Новое в диагностике, лечении и профилактике болезней животных: Межвузовский сб. науч. тр. МВА им. К. И. Скрябина, 1996. - С. 126 - 131.

8. Белов А.Д., Щукин M.B. Содержание циклического З1 51-аденозинмонофосфата (ц-АМФ) в плазме крови здоровых и облученных баранов на разных стадиях острой лучевой болезни//Новое в диагностике, лечении и профилактике болезней животных: Межвузовский сб. науч. тр. МВА им. К.И. Скрябина, 1996. - С. 115 - 117.

9. Белов А. Д., Щукин INI. В. Метаболизм циклических нуклеотидов в различные периоды острой лучевой болезни овец//Третий съезд по радиационным исследованиям. - Москва, 14 - 17 октября 1997 г.: Тез. докладов. - М., 1997.-Т. 1.-С. 385-386.

Сдано в производство 12.05.2000 г. Ризограф Тираж 100 Заказ 239

Типография Московской государственной академии ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина 109472, Москва, ул. Академика Скрябина, 23

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Щукин, Михаил Васильевич

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

Функция циклических нуклеотидов в клетках животных.

Пострадиационные нарушения метаболизма циклических нуклеотидов в тканях и плазме крови.

ГЛАВА 2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Материалы исследований.

Клинико-гематологические методы исследования.

Радиоиммунологическое определение ц-АМФ и ц-ГМФ в гомогенатах тканей.

Радиоиммунологическое определение ц-АМФ с помощью набора Cyclic AMP

Amersham".

Радиоиммунологическое определение ц-АМФ с помощью наборов Cyclic AMP

ЧССР).

Радиоиммунологическое определение ц-ГМФ с помощью наборов.

Cyclic GMP 1251 (ЧССР).

Определение активности аденилатциклазы.

Определение активности гуанилатциклазы.

Определение активности фосфодиэстеразы.

Методы определения показателей иммунобиологической реактивности организма.

Расчет доз внутреннего и внешнего облучения животных.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Клинико - гематологические показатели у здоровых и облученных баранов на разных стадиях острой лучевой болезни.

3.2. Клинико-гематологические показатели у животных, находящихся на "чистой" и загрязненной радионуклидами территориях.

3.3. Гормональный статус экспериментальных животных.

3.4. Содержание циклического 3:5-аденозинмонофосфата в плазме крови здоровых и облученных баранов на разных стадиях. острой лучевой болезни.

3.5. Содержание циклического 3,5-гуанозинмонофосфата в плазме крови здоровых и облученных баранов на ранних стадиях острой лучевой болезни.84 3.6. Содержание циклических нуклеотидов (цАМФ и цГМФ) в плазме крови у крупного рогатого скота из "чистых" и загрязненных радионуклидами районов.

3.7. Метаболизм циклических нуклеотидов в различные периоды острой лучевой болезни овец.

3.8. Метаболизм ц-АМФ и ц-ГМФ в различных тканях коров, находящихся на"чистой" и загрязненной радионуклидами территории.

3.9. Лизоцимная активность сыворотки крови у животных, находящихся на чистой и загрязненной радионуклидами территории.

3.10. Обсемененность микроорганизмами кожного покрова крупного рогатого скота, находящегося на "чистой" и загрязненной радионуклидами территории.

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Метаболизм циклических нуклеотидов в лимфоидных органах жвачных животных при внешнем и внутреннем радиационном воздействии"

Актуальность темы. Интенсивное развитие атомной энергетики и широкое использование радионуклидов в народном хозяйстве ведет к накоплению радиоактивных веществ в окружающей среде и попаданию их в организм человека и животных. Наряду с этим, постоянно расширяется использование ионизирующих излучений в радиационно-биологической технологии для стерилизации, консервирования, обеззараживания и увеличения сроков хранения пищевых продуктов, сырья животного происхождения, биологических препаратов, а также для стимуляции роста и развития животных. Все это создает вероятность возникновения аварийных ситуаций и лучевого воздействия на человека и животных.

Изучение системы регуляции внутриклеточного метаболизма в основные периоды острой лучевой болезни расширяет и углубляет знания о реакции целостного организма на облучение, способствует более глубокому раскрытию патогенеза лучевой болезни. Кроме того, эти данные могут быть полезны для комплексной ранней диагностики и определения тяжести лучевого поражения сельскохозяйственных животных, прогнозирования его исхода и своевременного определения направления дальнейшего использования пораженных животных, а также для организации зооветеринарных мероприятий в зонах повышенной радиации и при возможных авариях на атомных предприятиях. Практически все стороны метаболизма в различных клеточных системах регулируются 6 циклическими нуклеотидами (ц-АМФ, ц-ГМФ), что определяет особую значимость нарушений их обмена в этиопатогенез.

Чернобыльская катастрофа вызвала беспрецедентное по своим масштабам и характеру загрязнение радионуклидами окружающей среды, в результате которого животные, находящиеся на загрязненной территории в течение всей своей жизни, подвергаются как внешнему, так и инкорпорированному хроническому облучению. Характерными особенностями радиационной ситуации после аварии являются: а) доминирующая роль облучения щитовидной железы радионуклидами йода в начальный период; б) отсутствие больших доз кратковременного острого облучения; в) протяженный во времени характер облучения в последующий период со значительным вкладом внутреннего облучения за счет скармливания загрязненных радионуклидами кормов.

В этой ситуации большое значение приобретают сведения о состоянии компенсаторно-восстановительных и адаптационных процессов облученного организма, контролируемых эндокринной системой. Передача гормональной информации клеткам и регулирование множества биохимических процессов осуществляется циклическими нуклеотидами. В этой связи актуальны данные о роли эндокринной и циклазной систем в организме, подвергавшихся или подвергающихся хроническому воздействию малых доз ионизирующей радиации.

Естественно, что изменения системы регуляции внутриклеточного метаболизма не могут стать непосредственной причиной скорой гибели облученного животного. Однако нарушения компенсаторно-восстановительных процессов, иммунной реактивности могут сказаться на жизнеспособности облученного организма. Кроме того, не исключается возможность и комплексного воздействия на организм животных различных химических соединений (удобрения, гербициды и т.п.), используемых в современных технологиях получения кормов и кормовых добавок. Существенное влияние на физиологическое состояние, рост и развитие животных может оказывать химический состав почв по наличию в 7 них микроэлементов (йода, молибдена, кобальта и других) (Ковальский В. В. 1974; Лукашов К. И., Комракова С. Г. 1986).

Таким образом, при аварийных ситуациях в естественных условиях содержания животных мы можем иметь дело с комбинированным воздействием радионуклидов и химических соединений на фоне хронического дефицита ряда микроэлементов. Поэтому оценить вклад радиационного компонента в этих условиях оказывается весьма сложно. К настоящему времени практически еще не разработаны объективные критерии оценки хронического воздействия ионизирующей радиации в малых дозах. Неизвестно состояние наиболее чувствительных субклеточных структур, а также функции регуляторных тканевых и клеточных систем в частности циклических нуклеотидов в условиях хронического облучения в малых дозах, тем более при комбинированном воздействии. В этой связи целесообразно проводить углубленные научные исследования состояния регуляторных систем клеточного метаболизма животных, находящихся на "чистой" и загрязненной радионуклидами территории. Особенно это важно для радиочувствительных органов и тканей. Одной из самых радиочувствительных тканей, играющих огромную роль в выживаемости облученных животных, являются органы иммунной системы - тимус, лимфатические узлы, селезенка. При этом циклические нуклеотиды занимают центральное звено регуляции обмена веществ лимфоидных тканей.

Цель и задачи исследования. Цель настоящей работы заключалась в выявлении состояния системы циклических нуклеотидов в лимфоидной ткани (тимусе, селезенке, лимфоузлах) в основные периоды острой лучевой болезни овец в эксперименте и при хроническом внешнем и внутреннем облучении крупного рогатого скота, находящегося на загрязненной радионуклидами территории в результате аварии на Чернобыльской АЭС. Исходя из этого были определены конкретные задачи исследований: 8

- изучить метаболизм циклических нуклеотидов в лимфоидной ткани и содержание циклических нуклеотидов в крови овец в норме в различные периоды острой лучевой болезни легкой и средней степени тяжести;

- изучить метаболизм циклических нуклеотидов в лимфоидных органах и содержание циклических нуклеотидов в крови крупного рогатого скота, подвергавшегося хроническому воздействию ионизирующего излучения в результате Чернобыльской катастрофы;

- оценить факторы неспецифической резистентности у крупного рогатого скота в условиях хронического воздействия ионизирующего излучения;

- оценить возможность использования показателей состояния системы циклических нуклеотидов в оценке тяжести лучевого поражения при остром и хроническом течении.

Научная новизна полученных результатов состоит в том, что впервые проведено исследование метаболизма цАМФ и цГМФ в тканях лимфоидной системы у здоровых баранов, а также в периоды первичной реакции, разгара и разрешения лучевой болезни легкой и средней степени тяжести. Впервые показано, что в крови баранов происходит изменение уровня цАМФ и цГМФ связанное с дозой облучения и периодами ОЛБ. В период разгара ОЛБ содержание циклических нуклеотидов возрастало с наибольшим значением на 7-10 сутки после облучения, что обусловлено их выходом в межклеточное пространство в результате повреждения клеточных мембран.

В лимфоидных органах облученных баранов установлены глубокие, связанные с дозой, изменения в обмене циклических нуклеотидов обусловленные нарушением процессов регуляции их метаболизма.

Из всех исследованных тканей в тимусе происходят более значительные и длительные изменения в метаболизме циклических нуклеотидов, восстановления которых не наблюдались даже в период разрешения ОЛБ. В лимфатических узлах система метаболизма цАМФ и цГМФ оказалась наиболее радиоре9 зистентной.

В лимфоидной ткани коров, пострадавших от чернобыльского загрязнения, впервые было обнаружено существенное усиление как процессов биосинтеза, так и расщепления цАМФ и цГМФ, которые были наиболее выражены в тимусе животных.

Нарушение в системе метаболизма циклических нуклеотидов в тканях лимфатической системы приводит к снижению общей резистентности организма животных, проявляющееся в увеличении обсемененности микрофлорой кожных покровов животных, пострадавших от чернобыльского облучения.

В условиях радионуклидного загрязнения среды у пострадавших животных выявлены сходные изменения в метаболизме циклических нуклеотидов в тимусе, селезенке и лимфоузле, что приводит к снижению общей резистентности животных, проявляющейся в увеличении обсемененности микроорганизмами носового зеркала у КРС. Эти данные необходимы для разработки системы лечебно-профилактических мероприятий для животных, подверженных радиационному воздействию.

Практические предложения: Результаты по оценке состояния метаболизма циклических нуклеотидов в радиочувствительной лимфоидной ткани животных в комплексе с клинико-гематологическими методами могут быть использованы для выявления глубины и прогноза ОЛБ овец.

Выявленные нарушения в механизмах гуморальной регуляции внутриклеточного и тканевого метаболизма в тканях иммунной системы, осуществляемой циклическими нуклеотидами у животных, пострадавших от чернобыльской катастрофы были использованы сотрудниками кафедры радиобиологии для разработки лечебно-профилактических мероприятий по стимуляции резистентности пострадавших животных. Эти материаллы вошли в учебник «Радиобиология» (Белов А.Д., Киршин В.А., Лысенко Н.П., Пак В.В., Рогожина Л.В., 1999 г.)

Реализация результатов работы^ Результаты исследований используются в учебном процессе при чтении лекций и проведении лабораторно-практических занятий на кафедре радиобиологии, рентгенологии и ГО МВА. Материалы диссертации включены в учебник "Ветеринарная радиобиология" А.Д. Белова, В.А. Киршина (М., Агропромиздат, 1987 г. ) и учебник "Радиобиология" А.Д. Белов, В.А. Киршин, Н.П. Лысенко, В.В. Пак, Л.В. Рогожина (М., Колос, 1999).

Публикация работ. По материалам диссертации опубликовано 9 работ.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены на Всесоюзной конференции молодых ученых по сельскохозяйственной радиологии (Обнинск, 1983); на II Всесоюзной конференции по сельскохозяйственной радиологии (Обнинск, 1984); на научно-координационном совещании "Возможности и перспективы радиоиммунологического анализа в животноводстве и ветеринарии (Иваново, 1985); на научно-координационном совещании по использованию радионуклидов в изучении обмена веществ для повышения продуктивности сельскохозяйственных животных (Омск, 1986, ДСП); на I Всесоюзном радиобиологическом съезде (Москва, 1989); на III Всесоюзной конференции по сельскохозяйственной радиологии (Обнинск, 1990), а также на ежегодных научных итоговых конференциях МВА, Республиканской научно-методической конференции 26-27 марта 1996 г. (Москва, 1996), Третьем съезде по радиацион

11 ным исследованиям (Москва, 1997).

Всего в экспериментах с внешним облучением было обследовано 27 голов баранов. Кроме того, проводили длительные наблюдения за сельскохозяйственными животными, содержавшимися в условиях радиоактивного загрязнения территории после аварии на ЧАЭС. Всего в хозяйствах Гомельской и Витебской областей было обследовано 231 голова крупного рогатого скота. Основные положения выносимые на защиту:

- При острой лучевой болезни (ОЛБ) у баранов происходит изменение метаболизма циклических нуклеотидов в лимфоидных тканях, зависящее от ее тяжести и периода. Наибольшей радиочувствительностью обладает тимус, а наименьшей лимфотические узлы. Селезенка по радиочувствительности занимает промежуточное положение.

- В крови облученных баранов концентрация циклических нуклеотидов повышается в -Соответствии с тяжестью их клинического состояния и с наибольшее ее значение совпадает с периодом максимально гибели радиочувствительных клеток в организме животных.

- В отдаленный период после облучения животных, в результате чернобыльского загрязнения среды выявлены глубокие изменения в метаболизме внутриклеточной системы адаптации, регулируемой цАМФ и цГМФ, в органах лимфоидной ткани, что отражается на общей резистентности организма пострадавших животных.

Заключение Диссертация по теме "Радиобиология", Щукин, Михаил Васильевич

ВЫВОДЫ:

-во время первичной реакции концентрация цАМФ и цГМФ в плазме крови повышается, соотношение цАМФ\цГМФ нарушено. В латентный период их концентрация постепенно нормализуется.

-В период разгара ОЛБ содержание циклических нуклеотидов резко возрастает с наибольшим значением на 7 -10 сутки, что совпадает со временем максимальной гибели радиочувствительных клеток в организме.

-В период разрешения лучевой болезни уровень циклических нуклеотидов постепенно снижалось, не достигая контрольных значений. Чем больше доза облучения, тем медленнее происходит нормализация этих показателей.

- За 2 - 3 дня до гибели баранов концентрация цГМФ в плазме крови превышала среднее значение этого показателя у выживших животных в 2 раза, что может служить критерием неблагоприятного исхода лучевой болезни. 2. Облучение вызывает существенное нарушение метаболизма циклических нуклеотидов в лимфоидных органах баранов.

- В селезенке содержание цАМФ снижается уже через 3 часа после облучения в дозе 0,96 Гр и достигает наименьших значений на 7-10 сутки (50% от контроля). При дозе 3,84 Гр глубина изменений более значительна. Нарушения обусловлены за счет более выраженной активизации ферментативного гидролиза цАМФ по сравнению с его синтезом. При разрешении ОЛБ содержание цАМФ в селезенке повышается в соответствие с дозой облучения в основном за счет снижения скорости его расщепления.

- В тимусе в метаболизме цАМФ происходят аналогичные, но более глубокие и длительные изменения, восстановление которых не наблюдается

153 даже в период разрешения ОЛБ. В лимфатических узлах система метаболизма цАМФ оказалась наиболее радиорезистентной.

3. Метаболизм цГМФ в период первичной реакции и разгара ОЛБ изменяется в меньшей степени, чем цАМФ. При разрешении ОЛБ, за счет нарушения в работе ферментов обмена, содержание цГМФ в селезенке и тимусе существенно повышается: в селезенке в 4,1 раза (0,96 Гр) и 4,5 раза (3,84 Гр). В лимфатическом узле система метаболизма цГМФ обеспечивает активное его накопление в ткани во все исследованные сроки.

4. Среди исследованных гормонов (ТЗ, Т4 ТСГ и инсулина) наибольшим изменениям подвержено содержание наиболее биологически активного трийод-тиронина с минимальной концентрацией в период разгара ОЛБ.

5. В лимфоидных тканях коров пострадавших от чернобыльского загрязнения было обнаружено усиление, как процессов биосинтеза, так и расщепления цАМФ и цГМФ, которые наиболее выражены в тимусе животных.

- В тимусе базальная активность повышена в 3,3 раза, гормонстимулиро-ванная - в 3,1 раза и ЫаР- стимулированная повышена в 3,5 раза. Активность фосфодиэстеразы при этом была усилена в 2,8 раза. Содержание цАМФ в ткани при этом составляло 78,7% от контроля. Система обмена цГМФ была активизирована в меньшей степени.

-В крови пострадавших животных соотношение цАМФ/цГМФ изменено в сторону увеличения доли цАМФ. Концентрация цАМФ у телят повышена в 24 раза, цГМФ в 1,5-2,9 по сравнению с контролем

6. У животных из загрязненных радионуклидами районов изменяются показатели неспецифической резистентности:

154-OL

СВЕДЕНИЯ О ПРАКТИЧЕСКОМ ИСПОЛЬЗОВАНИИ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ

1. Материалы диссертации включены в учебник А. Д. Белов, В. А. Киршин/Ветеринарная радиобиология. - М.: Агропромиздат, 1987. -287 с.

2. Учебник Радиобиология/ А. Д. Белов, В.А. Киршин, Н.П. Лысенко, В.В. Пак, Л.В. Рогожина. - М.: Колос, 1999. - 384 с.

3. Результаты исследований используются в учебном процессе при чтении лекций и проведении лабораторно-практических занятий на кафедре радиобиологии, рентгенологии и ГО МГАВМиБ им. К. И. Скрябина

РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ НАУЧНЫХ ВЫВОДОВ

2. Выявленные нарушения в механизмах гуморальной регуляции внутриклеточного и тканевого метаболизма в тканях иммунной системы, осуществляемой циклическими нуклеотидами у животных пострадавших от чернобыльского облучения могут использоваться для разработки лечебно-профилактических мероприятий по стимуляции резистентности пострадавших животных.

155

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Комплексные исследования здоровых и облученных баранов (в дозах 0,96 и 3,84 Гр),а также крупного рогатого скота из "чистых" и загрязненных радионуклидами районов Гомельской области позволили охарактеризовать метаболизм циклических нуклеотидов при острой лучевой болезни овец различной степени тяжести и при хроническом смешанном облучении крупного рогатого скота.

Физиологический уровень циклических нуклеотидов в плазме крови животных характеризовался значительными сезонными колебаниями. У здоровых половозрелых баранов породы финский Ландрас с октября по май содержание цАМФ в плазме крови менялось от 57,3+4,8 до 85,7+7,1 пмоль/мл, а цГМФ от 51,3+5,1 до 64,5+4,8 пмоль/мл. У крупного рогатого скота черно-пестрой породы из "чистых" хозяйств Витебской и загрязненного х-ва (к-з XXI Партсъезда) Гомельской областей выявлены выраженные сезонные колебания уровня циклических нуклеотидов.

Клинико-гематологические исследования показали, что общее односто

146 роннее рентгеновское облучение в дозах 0,96 и 3,84 Гр вызывает острую лучевую болезнь легкой и средней степени тяжести с четырьмя характерными периодами: первичная реакция на облучение (до 1 сут.), латентный период (1-4 сут.), период разгара (5-20 сут.) и период разрешения лучевой болезни (21-30 сут.).

У облученных баранов концентрация трийодтиронина снижена в течение всего времени наблюдения после облучения обеими дозами. В период первичной реакции уже через 30 минут после облучения в дозе 0,96 Гр происходит снижение уровня гормона. Наименьшее содержание ТЗ выявлено в период разгара лучевой болезни на 5-7 сутки (1,12+0,2 и 1,09+0,13 нмоль/л соответственно Р<0,05). В дальнейшем наблюдалось постепенное восстановление данного показателя. У баранов облученных в дозе 3,84 Гр изменения уровня ТЗ были более глубокие. В период первичной реакции (30 мин и 3 часа) уровень гормонов составлял 1,58+0,21 и 1,39+0,3 нмоль/л, что на 21,8 и 30,8% ниже контрольного значения соответственно. В период мнимого благополучия было отмечено значительное снижение содержания Т3, особенно на 3-е сутки после облучения (45,8 % от контрольного уровня) и к моменту разгара ОЛБ, на 5,7-е сутки содержание трийодтиронина почти в 2 раза было ниже контроля (Р<0,05). К 30-м суткам содержание ТЗ постепенно восстанавливалось, однако так и не достигало контрольных значений (на 12% ниже).

Концентрация инсулина в крови облученных животных изменялась цик лично. При большей дозе облучения эти колебания были более выраженными.

Первичная реакция на облучение дозой 3,84 Гр сопровождалась незначительным увеличением концентрации цАМФ и цГМФ в плазме крови - на 26 % и

147

15% соответственно, а при облучении в дозе 0,96 Гр уровень цАМФ был на 40 % выше исходного, цГМФ в пределах контрольных значений.

В селезенке в период первичной реакции на облучение скорость синтеза цАМФ была выше контрольной в 1,8 раза при дозе 3,84 Гр и в 1,7 раза при дозе 0,96 Гр, а скорость синтеза цГМФ была в пределах контрольных значений.

В тимусе в период первичной реакции на облучение скорость синтеза цАМФ была увеличена в 2,4 раза при дозе 3,84 Гр и в 2 раза при дозе 0,96 Гр, скорость синтеза цГМФ была в пределах контрольных значений. Это указывает на гораздо большую радиочувствительность системы метаболизма циклического АМФ в тимусе.

В лимфатическом узле уровень цАМФ был незначительно выше контрольного при облучении дозой 0,96 Гр, а при дозе 3,84 Гр наоборот ниже на 28 % (Р>0,05). При этом скорость синтеза цАМФ была выше контрольного в 2,4 раза при дозе 0,96 Гр и в 2,3 при дозе 3,84 Гр, а скорость ферментативного распада была незначительно снижена. Уровень цГМФ был выше в 1,3 раза при дозе 0,96 Гр и в 1,4 раза при дозе 3,84 Гр. Уровень гуанилатциклазы при этом был ниже на 11 % и 16 % соответственно (Р>0,05), а уровень фосфодиэстеразы был в пределах контрольных значений.

В период разгара острой лучевой болезни концентрация цАМФ и цГМФ в плазме крови увеличивалась в 1,6-2,0 и 1,3-1,5 раза соответственно при дозе 3,84 Гр и в 1,5-1,7 раза при дозе 0,96 Гр.

Повышение концентрации цАМФ и цГМФ обусловлено их выходом в межклеточное пространство в результате гибели радиочувствительных клеток.

В селезенке и тимусе в период разгара лучевой болезни при обеих дозах содержание цАМФ было снижено. При этом активность аденилатциклазы и фосфодиэстеразы были повышены. Однако относительная способность к активации была существенно снижена. Особенно это отмечено для тимуса, где она

148 составляла 42,6 % при дозе 0,96 Гр и 56,3 % при дозе 3,84 Гр. В селезенке способность к активации существенно снижена при дозе 3,84 Гр ( 57,1 %).

В лимфатическом узле через 7 суток после облучения концентрация цАМФ была существенно увеличена: в 1,8 раза при дозе 0,96 Гр и в 2,1 раза при дозе 3,84 Гр. При этом также резко возрастала активность аденилатциклазы, при незначительном возрастании фосфодиэстеразы.

Содержание цГМФ в селезенке при дозе 0,96 Гр было близко к контрольным значениям, а при дозе 3,84 Гр возрастало в 1,7 раза, при этом активность гуанилатциклазы была на уровне контрольных значений, а активность фосфодиэстеразы даже выше.

В тимусе прослеживается сходная картина, а в лимфатическом узле в период разгара лучевой болезни происходит резкое увеличение уровня цГМФ - в 2,8 раза при дозе 0,96 Гр и в 3,4 раза при дозе 3,84 Гр. При этом активность аденилатциклазы и фосфодиэстеразы также возрастали.

В период разрешения лучевой болезни концентрация цАМФ в плазме крови устойчиво снижалась и постепенно нормализовалось хотя к концу наблюдения не достигало исходного значения, превышая их на 37 % при дозах 3,84 Гр и 26 % при дозе 0,96 Гр к концу наблюдения было незначительно выше исходных (на 15-17 %).

В селезенке в период исхода лучевой болезни содержание цАМФ и ба-зальной активности аденилатциклазы при дозе 0,96 Гр было в пределах контрольных значений, а при дозе 3,84 Гр уровень цАМФ превышал контрольные показатели в 1,9. При этом базальная активность аденилатциклазы была незначительно выше, а активность фосфодиэстеразы снижена на 36 %. Содержание цГМФ через 30 суток после облучения превышала контрольные показатели в 4,1 раза при дозе 0,96 Гр и в 4,5 при дозе 3,84 Гр. Активность гуанилатциклазы при этом была выше соответственно в 1,6 и 1,9 раза. Активность фосфодиэсте

149 разы возрастала незначительно: в 1,4 раза при дозе 0,96 Гр и 1,35 при дозе 3,84 Гр.

Результаты измерения концентрации циклических нуклеотидов в плазме крови телят и нетелей, содержащихся на загрязненной радионуклидами территории (к-з XXI Партсъезда), показали, что для всех исследуемых групп характерно более высокое содержание циклических нуклеотидов по сравнению с животными из "чистых" хозяйств. Однако концентрация циклических нуклеотидов в тканях при этом была близка контрольным значениям. Более интенсивный синтез циклических нуклеотидов в лимфоидной ткани не приводит к повышению их внутриклеточной концентрации, следовательно у пострадавших животных, происходит более интенсивное высвобождение циклических нуклеотидов из клеток.

В тканях тимуса, селезенке и брыжеечного лимфоузла телок, содержавшихся на загрязненной радионуклидами территории, была увеличена как скорость их биосинтеза, так и распада. Наиболее значительные изменения активности аденилатциклазы (АЦ) отмечены в тимусе и брыжеечном лимфоузле. Ба-зальная активность АЦ в этих тканях у телок из Гомельской области была выше в 3,25 и 3,0 раза соответственно, но активность в присутствии 10"5 М изопроте-ренола была повышена в меньшей степени, так что относительная способность к активации оказалось соответственно равной 68,7 % и 48,0 % от контроля. Активность фосфодиэстеразы цАМФ в тимусе была увеличена в 2,7 раза, а в брыжеечном лимфоузле в 1,5 раза. Эти различия очевидно обусловили тенденцию к снижению концентрации цАМФ в тимусе с 16,22+2,36 пмоль до 12,77+3,87 пмоль/мг белка (Р>0,05) и повышению с 19,3+1,5 пмоль до 22,16+0,7 пмоль/мг белка (Р>0,05). В гомогенате селезенки концентрация цАМФ также незначительно увеличивается с 13,46+1,55 пмоль/мг белка до 18,8+1,74 пмоль/мг белка (Р>0,05). Следует отметить, что в селезенке происходит увеличение относительной способности аденилатциклазы к активации изопротеренолом в 1,62

150 раза. Базальная и гормонстимулированная активность аденилатциклазы в селезенке телок из Гомельской области была выше соответствующих показателей у телок из Витебской области в 2,51 и 3,07 раза (Р<0,05). Активность фосфодиэ-стеразы цАМФ была также увеличена в 1,47 раза (Р>0,05).

Несмотря на существенную активизацию метаболизма циклических нук-леотидов их содержание в селезенке и лимфоузле было близким контрольному уровню, что обеспечивается адекватным усилением биосинтеза и расщепления циклических нуклеотидов в тканях. Однако в тимусе было выявлено снижение содержания цАМФ и цГМФ, что, как и в случае с острым облучением бараном, подтверждает большую радиочувствительность тимуса по сравнению с другими органами лимфоидной ткани.

Полученные нами данные по активации всей системе метаболизма циклических нуклеотидов в тканях иммунной системы указывают на активизацию процессов направленных на её обновление.

Для оценки защитной функции организма обследовали обсемененность носового зеркала и содержание лизоцима у КРС в загрязненных хозяйствах Гомельской области.

У взрослых животных и молодняка Октябрьского района установлены сезонные изменения обсемененности кожи микрофлорой: увеличение в летний и уменьшение в осенний периоды. Наибольшие изменения в росте микрофлоры отмечены у животных колхоза "Советская Белоруссия", совхоза "Наровлян-ский", а также у телят отделения "Новоселки" колхозе имени XXI Партсъезда. Увеличение этого показателя указывает на ослабление резистентности организма этих животных.

Следует обратить внимание на взаимосвязь показателей естественной резистентности - лизоцимной активности и роста микрофлоры у животных из "чистой" и загрязненной зон. У контрольных животных в летний период несмотря на повышенную активность лизоцима по сравнению с осенью, количест

151 во колоний на I см больше. Видимо это связано с изменением других фактора в естественной резистентности.

Неадекватность изменений показателей естественной резистентности у коров колхоза "Советская Белоруссия" и колхоза имени XXI Партсъезда (отд, "Рудное"), а также у коров с пораженной щитовидной железой (совхоз "Стрели-чево") в летний период указывает на напряженность защитных механизмов у этих животных. В целом у животных в условиях радионуклидного загрязнения среды обсемененность микрофлорой была выше, чем в контрольных хозяйствах, что говорит о снижении общей резистентности организма животных, особенно эти изменения выражены для телят младшего возраста.

Полученные данные по оценке общей резистентности организма у животных, находящихся в условиях радионуклидного загрязнения среды очень хорошо согласуются с результатами по оценке состояния системы циклических нук-леотидов в лимфоидной ткани пострадавших коров и могут быть использованы в качестве простого интегрального теста оценки общей резистентности организма.

152

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Щукин, Михаил Васильевич, Москва

1. Акоев И.Г. Проблемы постлучевого восстановления. М: Атомиздат I970.-C.368.

2. Алексахин P.M., Поваляев А.П., Соколов В.А., и др. Радиационные аварии и агропромышленное производство. / Сельскохозяйственная радиоэкология. Под ред. P.M. Алексахина и H.A. Корнеева М.: Экология. 1982. С.316-365.

3. Белов А.Д., Косенко A.C., Пак В.В. и др. Практикум по ветеринарной радиобиологии. М., Агропромиздат, 1988.- 240 с.

4. Белов А.Д., Лысенко Н.П. Влияние рентгеновского облучения на кортикотропин-высвобождающую активность гипоталамуса баранов.// 2-я Всесоюзн. научн. конф. по с.-х. радиологии: Тез. докл. Обнинск, 1984. Т. 2 - С. 89.156

5. Белов А.Д., Тиганов B.C. Содержание гонадотропинов и тестостерона в крови баранов при острой лучевой болезни.// 2-я Всесоюз. научн. конф. по с.-х. радиологии: Тез. докл. Обнинск, 1984.Т. 2. С. 88.

6. Болышев Л.Н., Смирнов Н.В. Таблицы математической статистики. М., Наука, 1983. -416 с.

7. Булгарина Т.В., Васильев В.Ю., Северин Е.С. Механизмы действия и биологическая роль 3,:5-АМФ-зависимых протеинокиназ.//Под ред. С.Е.Северина. М., Наука, 1979. С. 31-45.

8. Вакуленко А.Д., Васильев H.A., Кудрявцева В.Н. и др. Функциональное состояние и морфология щитовидной железы у коров после157воздействия 1131 .//I Всесоюз. раб. съезд. Тез. докл. Пушино, 1989. С. 10661067.

9. Васильев А.И., Гаврилей В.И., Кучеренко Н.Е. и др. Активность Са2+-АТФазы и ферментов метаболизма цАМФ в нервной ткани крыс на разных стадиях острого лучевого поражения.//Радиобиология. 1982. Т7 22. - N 6,-С. 815-817.

10. Вербовников Е.А., Остапец H.H., Блюм Я.Б. Механизмы радиочувствительности клеточного ядра: роль вторичных посредников и сопряженных с ними систем фосфорилирования белков.//Всесоюзный радиобиологический съезд: Тез. докл. Пущино, 1989. С. 1019-1021.

11. Владимиров В.Г., Антушевич А.Е. Изменения в системе циклических нуклеотидов в тканях облученного организма. //Радиобиология, 1988, Т. 28,N2.-С. 201-204.

12. Владимиров А.Ю., Арчаков А.И. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. М., Наука, 1972. 252 с.

13. Воейков B.JI. Сопряжение рецепторов гормонов и нейромедиаторов с аденилатциклазой.// Итоги науки и техники./ Биологическая химия. Т.2, М.,ВИНИТИ, 1984.- 172 с.

14. Гоксадзе Г.К., Малацидзе М.А. Влияние рентгеновского облучения на уровень цАМФ в головном мозгу крыс.// I Всесоюзный радиобиологический съезд: Тез. докл., Пущино, 1989. С. 1024-1025.

15. Голощапов П.В. Изучение аутофлоры кожи при хроническом поступлении в организм животных и их потомства стронция -90. 1972.- с.77.158

16. Гольчинская В.Ю. Влияние ТТГ на содержание ПГЕ и циклических нуклеотидов в ткани щитовидной железы человека. // Пробл. эндокринологии, 1984, N 1.- С. 28-31.

17. Гольчинская В.Ю. Простагландины и щитовидная желе-за.//Физиологический журнал. 1989, Т. 35, N 1. С. 103-112.

18. Гольчинская В.Ю., Ром-Богуславская Е.С., Лилле Ю.Э. Влияние ПГЕ2 с рецепторами и их влияние на активность аденилатциклазы в ткани щитовидной железы человека.//Биол. экспер. биол. и медицины. 1986, Т. 1104, N3. С. 306-309.

19. Гончаренко E.H., Кудряшов Ю.Б. Гипотеза эндогенного фона радиорезистентности. М., МГУ, 1980. 176 с.

20. Городецкая С.Ф. Влияние экзогенного цАМФ на некоторые показатели клеточного и гуморального иммунитета.//Иммунология и аллергия, 1987,-N21.-С. 86-87.

21. Данилов B.C., Козлов Ю.П. Поражение мембранных структур клетки проникающей радиацией.ПО механизмах природной и модифицированной радиочувствительности./Под ред. И.М.Пархоменко. М., МГУ,1973. -С. 14-25.

22. Дедов В.И. Некоторые данные и аспекты сравнительного изучения биологического действия внешнего и внутреннего об лучения.//Известия АН СССР. Сер. биол.- 1984,- N 6. С. 946-949.

23. Дедов В.И. Отдаленные последствия внутреннего облучения эндокринной системы самок крыс.//Известия АН СССР. Сер. биол.-1982.- N 3. -С. 454-458.

24. Дедов В.И. Пострадиационное нарушение нейроэндокринного взаимодействия.//Мед. радиология. 1980.- Т. 25.- N 11. С. 59-68.

25. Дедов В.И., Норец Т.А. Реакция эндокринной системы самцов на введение 8е75-селенита натрия.// Радиобиология. 1981. Т. 11. N 4.- С. 553-557.159

26. Дедов В.И., Норец Т.А. Состояние нейроэндокринной системы у самцов крыс разного возраста в условиях длительного внутреннего об лучения.//Известия АН СССР. Сер. биол,- 1981,- N 5. С. 785-789.

27. Дедов В.И., Норец Т.А. Состояние эндокринной системы у крыс в условиях длительного внутреннего облучения. Сообщ. I. Гипофиз-тиреодная система.//Радиобиология. 1981.- Т. 11.- N 3.- С. 401-406.

28. Дмитриенко Н.П., Комисаренко C.B., Горошникова Т.В. Изучение аденилатциклазны лимфоцитов тимуса и селезенки крысы.//Биохимия. 1980. -T. 45.-N 10.-С. 1810-1818.

29. Животнова Н.И. Активность фосфодиэстеразы 3':5'-циклоАМФ в некоторых тканях животных при действии ионизирующей радиации, ряда модифицирующих агентов и нервных дистрофиях.- Автореф. дис. канд. биол. наук. Пущино, 1976. С. 25 с.

30. Животнова Н.И., Филиппович И.В., Романцев Е.Ф. Влияние облучения на активность фосфодиэстеразы 3,:5,-цикло АМФ в изолированных тимоцитах крыс.//Докл. АН СССР. 1975. Т. 222,- N З.-С. 736-739.

31. Исамов H.H., Синькова Л.Б., Вакуленко А.Д. и др. Уровень иммунореактивного инсулина у овец в весенний и осенний периоды.//2-я Всесоюзн. конф. по с.-х. радиологии: Тез. докл. Обнинск, 1984. Т. 2 - С. 127.

32. Карташов П.А. Лучевая болезнь овец.//Вестник с.-х. науки. 1970. -N6.- С. 74-78.

33. Карташов П.А. Ранняя диагностика острой лучевой болезни овец.//Ветеринария. 1970. N 8. - С. 82-84.

34. Карташов П.А., Киршин В.А., Ильин В.Г. и др. Лучевая болезнь сельскохозяйственных животных. М.: Колос, 1978. 271 с.

35. Киршин В. А., Малиев В.М. Радиационная патология лимфообразования. I Всесоюзный радиобиологич. съезд. Тез. докл. М., 1989г. с. 200-201.160

36. Киршин ВА., Бударков В.А. Ветеринарная противорадиационная защита. М.: Агропромиздат, 1990. 207 с.

37. Кисельгоф Е.И. Активность фосфодиэстеразы цАМФ в тканях крыс при длительном фракционированном гамма -облучении.//Радиобиология. 1983. Т7 23. - N 6.- С. 796-798.

38. Ковальский В.В. Геохимическая экология. М., Наука, 1974.-300 с.

39. Котеров А.Н. Активнсть фосфодиэстеразы цАМФ плазмы крови собак при острой лучевой болезни.//4-й Всесоюзн. симп. по медицинской энзимологии: Тез. докл. Алма-Ата, 1983. С. 135.

40. Котеров А.Н., Никольский A.B., Романцев Е.Ф. Влияние ио-нирирующей радиации на содержание циклических нуклеотидов в плазме крови собак.//4-й Всесоюзн. симп. "Циклические нуклеотиды": Тез. докл., Минск, 1982. С. 77-78.

41. Котов H.H. Получение меченного Н3 и Р32-3;5-АМФ и изучение его экскреции и распределения в организме в норме и после облучения. .- Автореф. дис. канд. биол. наук. Москва, 1969. 25 с.

42. Кругликов Б.П. Гематологическая реакция на тотальное облучение ионизирующей радиацией./УСельскохозяйственная биология. 1986. N 11. - С. 91-96.

43. Кругликов Б.П., Васильев A.B., Шевченко A.C. Действие ионизирующих излучений на сельскохозяйственных животных./ Сельскохозяйственная радиоэкология. Под ред. P.M. Алексахина и H.A. Корнеева М.: Экология. 1992. С. 174-195.

44. Кудряшов Ю.Б., Гончаренко E.H. Роль биологически активных веществ (радиотоксинов) в лучевом поражении.//Радиобиология, 1970, Т. 10, N 2. С. 212-229.

45. Кузин A.M. Структурно-метаболическая гипотеза в радиобиологии. М.: Наука, 1970.-222 с.

46. Кузин A.M. Молекулярная радиобиология клеточного ядра.М.: Атомиздат, 1973. 208 с.

47. Кузин A.M. Актуальные проблемы радиобиологии.//Современные вопросы радиобиологии. М., 1980.-С.6-7.

48. Кузин A.M., Сложеникина Л.В., Ушакова Т.В. Действие гамма-облучения изолированных клеток печени эмбрионов крысы на активность ад ени л атцик л азы.// Док л. АН СССР. 1977, Т. 233, N 5. С. 978-980.

49. Кулинский В.И. Циклические нуклеотиды и радиорезистентность. Сообщение I. Радиобиология , 1978, т. 18. N.2 с. 175-177.

50. Кульчитская O.K. Адренергическая регуляция активности аденилатциклазы миокарда крыс различного возраста.//Вопр. мед. химии, 1985, N4.-С. 91-93.

51. Кучеренко Н.Е., Бабенюк Ю,Д., Васильев А.Н. и др. Влияние универсальных систем регуляции клеточного метаболизма в условиях действия ионизирующей радиации.//П Всесоюзный радиобиологический съезд. Тез. докл. Пущино, 1989. С. 1030-1031.

52. Линская А.И., Серкиз Я.И., Танчук Л. Б. и др. Особенности радиационных нагрузок в организмах и тканях животных, находящихся в условиях хронического внутреннего и внешнего облучения. I Всес. радиобиол. съезд. Тез. докл. М., 1989.- с.213.162

53. Лукашов К.И., Копракова С.Г. Ландшафногеохимические исследования в белорусской ССР в связи с эндемическим зобом.// Известия Всесоюз. географического общества, 1986, Т. 118, N 1. С. 75-83.

54. Лысенко Н.П. Влияние рентгеновского облучения на уровень АКТГ и кортизола в плазме крови баранов.//Всесоюзн. научн. конф. молодых ученых по с.-х. радиологии: Тез. докл. Обнинск, 1983. -С. 63.

55. Лысенко Н.П. Состояние гипоталамо-гипофиз-надпочечниковой системы у овец при рентгеновском облучении.- Дис.- канд. биол. наук. Москва, 1987. 186 с.

56. Мазурик В.К. Радиобиологические основы биохимической индикации лучевого поражения.//Итоги науки и техники. Радиационная биология. Т.З Биологическая индикация лучевых поражений./Под ред. Е.Ф. Романцева. М., ВИНИТИ, 1986. С. 39-102.

57. Маленченко А.Ф. Биологические эффекты сочетанного действия нитрита натрия и излучения. I Всес. радиобиол. съезд. Тез. докл. М. 1989. с. 215-216.

58. Малацидзе М.А. и др. Влияние простагландина Е. на систему цАМФ и радиочувствительность клеток В-82 культивируемых in vitro.//Hay4. докл. высшей школы. Биол. науки, 1984, п 2. С. 33-37.

59. Мальцев В.Н. Сравнительная радиочувствительность различных механизмов иммунитета, М., 1981г. с. 18-22.

60. Митюкова Т.А. Анализ некоторых пострадиационных изменений в систме простагландинов и циклического АМФ тканей крыс.//7-й съезд белорусского физиологич. общества им. И.П.Павлова: Тез.докл., Витебск, 1987. -С. 160-161.163

61. Митюкова Т. А. Циклические нуклеотиды и простагландины слизистой оболочки гастро-дуоденальной зоны крыс на отдаленных сроках после рентгеновского облучения в малой дозе./1-й Всесоюзн.радиологич. съезд: Тез. докл. Пущино, 1989, Т. 4. С. 832-833.

62. Мороз Б.Б. О гиперкортицизме и его роли в патогенезе острой лучевой болезни.//Радиобиология. 1972. Т. 12. - N 1. - С. 96-102.

63. Мороз Б.Б., Кендыщ И.Н. Радиобиологический эффект и эндокринные факторы.М.: Агропромиздат, 1975.- 232 с.

64. Новоселова Е.Г., Попов В.И. Изменение метаболизма липидов и структуры тканей при хроническом гамма-облучении./ I Всесоюзн. симп."Молекулярно-клеточные механизмы хронич. действия ионизир. излучения на биологич. системы".Тез. докл. Пущино, 1990. -С. 90.

65. Орехов А.Н. О влиянии ионизирующей радиации на систему цАМФ. Дисс. . канд. биол. наук.- Пущино, 1978.- 150 с.

66. Орехов А.Н., Сафразьян H.JL, Соболев A.C. и др. Пострадиационные нарушения в системе циклического АМФ лимфоидных клеток селезнки и тимуса мышей.//Бюл. экспер. биол. и мед. 1978. Т.85. - N 2. - С. 164-167.

67. Прилепская Е.П., Бударков В.А. Определение концентрации циклических нуклеотидов в плазме крови овец, телят и коров радиометрическим протеинсутарационным методом.//2-я Всесоюзн. конф. по с.-х. радиологии.: Тез. докл. Обнинск, 1984. Т. 2. - С. 107.

68. Розен В.В. Основы эндокринологии. М.: Высш. школа, 1984.-336 с.

69. Романцев Е.Ф., Блохина В.Д., Жуланова З.И. и др. Молекулярные механизмы лучевой болезни. М.,Медицина, 1984. 208 с.

70. Романцев Е.Ф., Прянишникова E.H. Биохимическая рецепция и ионизирующее облучение организма.//Радиобиология, 1987, Т. 27, N 3. С. 291296.164

71. Рыбалкин С. Д. Изучение механизмов влияния радиации на активность фосфодиэстеразы циклических нуклеотидов. Дисс. к.б.н.М., 1985. -200 с.

72. Рыбалкин С.Д., Куренная Г.С., Соболев A.C. Исследование множественных форм фосфодиэстеразы циклических нуклеотидов в тимоцитах мышей.//Биохимия, 1984, Т. 49, N 12. С. 1927-1933.

73. Рыбалкин С.Д., Тертов В.В., Соболев A.C. Пострадиационные изменения в системе цГМФ тимуса и печени мышей.//Радиобиология, 1983, Т. 23,N5.-С. 612-615.

74. Склободская И.Э., Жаворонков Л.П., Дубовик Б.В. Влияние ингибирования биосинтеза простагландинов на состояние гемопоэза облученных мышей.//Радиобиология.1984.- Т. 24.- N 1.- С. 56-58.

75. Сложеникина Л.В., Ушакова Т.Е., Кузин A.M. Ферменты метаболизма цАМФ в тканях крыс в отдельные сроки после облучения.//Всес. радиобиол. съезд: Тез. докл. Пущино, 1989, Т. 5. С. 1044.

76. Сложеникина Л.В., Ушакова Т.Е., Михайлец Л.П., Кузин A.M. К вопросу о опосредовании действия ионизирующего излучения на актвиность аденилатциклазы клеток печени эмбрионов крысы.//Радиобиология, 1980. Т. 20, N 1. С. 29-34.

77. Соболев A.C. Радиоационная биохимия циклических нуклеотидов. М., Энергоатомиздат, 1987. 100 с.

78. Соболев A.C. Латеральная подвижность белков аденилатцик-лазного комплекса.//5-й Всесоюзн. симп. "Циклические нуклеотиды и система регуляции ферментативных реакций".Тез. докл. Рязань,1985. С. 19-20.165

79. Соболев A.C. Пострадиационные изменения в системе циклического АМФ органов и тканей различающихся по радиопоражаемости. "проблемы природной и модифицированной радиочувствительности./Под ред. М.М.Калистратовой, А.М.Кузина. М.: Наука, 1983.- С. 206-212.

80. Соболев A.C., Орехов А.Н., Чирков Ю.Ю. и др. О влиянии ионизирующей радиации на активность аденилатциклазы, фосфодиэстеразы цАМФ и уровень цАМФ в печени мышей.//Докл. АН СССР. 1977, Т. 232, N. 6. -С. 1445-1447.

81. Стрельцова З.М. Отдаленные последствия лучевого поражения. Общие вопросы проблемы отдаленных последствий и пути ее решения. К. 1971. с. 10-37.

82. Сяткин С.П. Модифицированный метод определения белка в пробах с повышенным содержанием липо- и гликопротеидов.//Вопросы мед. химии, 1981, N 1. С. 136-138.

83. Таракулов Я.Х., Саатов Т.С., Халиков С.К. и др. Циклические нуклеотиды и регуляция клеточного метаболизма. "Фан" Уз. ССР, 1983. 240 с.

84. Тертов В.В., Рыбалкин С.Д., Соболев A.C. Влияние ионизирующей радиации на систему цГМФ в тканях мышей.//Радиобиология системы циклических нуклеотидов./Под ред. А.С.Соболева. М., Наука, 1980. С. 20.

85. Тимченко В.Г. Тромбо-гемареологический гомеостаз в облученном организме. I Всес. радиобиол. съезд. Тез. докл. М., 1989, с.239-240.

86. Ткачук В.А. Введение в молекулярную эндокринологию. М., МГУ, 1983. 256 с.

87. Торчинский Ю.М. Сера в белках. М., Наука, 1977. 303 с.

88. Федоров H.A. Биологическое и клиническое значение циклических нуклеотидов. М., Медицина, 1979. 184 с.

89. Ходжиахметов Г., Ранлекулов Н., Нишанбаев К.Н. Влияние малой дозы ионизирующего излучения на активность ферментов системы цАМФ166тимоцитов кур в онтогенезе.//1 Всесоюзн. радиобиологический съезд. Тез. докл. Пущино, 1989,- С. 1052.

90. Ходжиахметов Г., Хамидов Д.Х., Нишанбаев К.Х., Далимова С.Н. Влияние доинкубационного облучения на активность аденилатциклазы и содержание циклических нуклеотидов тимуса в онтогенезе кур.//Радиобиология, 1977, Т. 27, N 6. С. 828-831.

91. Худайкулов Э.С., Мухамеджанов Х.С., Меметов Ф.Ю., Халиков С.К. Исследования содержания цГМФ и простагландина F2a при действии ионизирующей радиации.//Радиобиология системы циклических нуклеотидов./Под ред. А.С.Соболева. М., Наука, 1980. С. 45-46.

92. Цудзевич Б.А., Верхогляд И.Н., Андрейчук Т.Р. и др. Компоненты системы вторичных менеджаров на ранних этапах лучевого поражения.//Информ. бюл. Науч. сов. АН СССР по проблемам радиобиологии. 1989, N35. С. 21.

93. Цудзевич Б.А., Верхогляд И.Н., Кириченко О.Н. Система циклических нуклеотидов и простагландинов при лучевом поражении и в условиях защиты.//1 Всесоюзн. радиобиологический съезд. Тез. докл. Пущино, 1989,- С. 1053-1054.

94. Чард Т. Радиоиммунологические методы. М.: Мир, 1981,-260 с.

95. Чирков Ю.Ю., Сербии П., Соболев A.C. ц-АМФ-зависимое фосфорилирование в тканях облученных мышей.//Радиобиология. 1982.- Т. 22. N 1.-С. 96-99.

96. Чирков Ю.Ю, Тыщук И.А., Белушкина H.H., Северина И.С. Гуанилатциклаза тромбоцитов крови человека.//Биохимия, 1987, Т.52. N 6. С. 956-963.

97. Шарова J1.A. Циклические нуклеотиды в плазме крови собак и обезьян после облучения.//Радиобиологические подходы к динамике лучевых поражений. Л., 1989. С. 90-94.167

98. Шевченко A.C. Определение активности ферментов метаболизма циклического аденозинмонофосфата в клетках крови овец и лошадей.// С.-х. биология. 1988. N 6. С.124-125.

99. Шевченко A.C. Изменение активности аденилатцикдазы в лимфоцитах и тромбоцитах облученных овец.// Радиобиология. 1990. Т.30. N 3. С.308-311.

100. Шевченко A.C. Активность аденилатциклазы в лимфоцитах и тромбоцитах облученных животных.// Тезисы докладов 2-го Радиобиологичеокого съезда (Киев. 20-25 сентября 1993 года). Пущино. 1993. Т.З. С.1138.

101. Шевченко A.C., Аверин B.C. Коноплева И.В. и др. Оценка показателей гормонального статуса и активности аденилатциклазы в отдаленные сроки после аварии на Чернобыльской АЭС. //Радиационная биология. Радиоэкология. 1994. Т.34. N 3. С.323-326.

102. Шевченко A.C., Вакуленко А.Д. Исамов H.H. Увеличение активации простагландином Е| аденилатциклазы в клетках крови животных, находившихся в регионе воздействия аварии на Чернобыльской АЭС. // Докл. ВАСЯМ. 1990. N 11. С. 55-58.

103. Шевченко Л.С., Вакуленко А.Д., Шевченко Т.С. Увеличение активации аденилатциклазы в клетках крови животных с радиационный гипотиреозом./ Тезисы докладов 3 Всесоюз. конф. по с.-х. радиологии. Обнинск. 1990. С. 164.168

104. Шевченко А.С., Шевченко Т.С. Активность аденилатциклазы в тромбоцитах овец.//2-я Всесоюзн. конф. по с.-х. радиологии: Тез. докл. Обнинск, 1984.- Т. 2.- С. 106.

105. Шевченко А.С., Шевченко Т.С., Коноплева И.В., Круглова С.В. Активность аденилатциклазы и фософдиэстеразы в клетках крови облученных животных.//Механизмы действия ионизирующего излучения на структуру и функции белков: Тез. докл. Пущино, 1986. С. 83.

106. Шиян Р.Б., Лазарева А.В., Романюк О.В. Влияние ионизирующей радиации на цАМФ в печени и слизистой тонкой кишки крыс.//1-й Всес. радиобиол. съезд: Тез. докл. Пущино, 1989, Т. 5.-С. 1056.

107. Штреффер К. Радиационная биохимия. М., Атомиздат, 1972.-200 с.

108. Asami К., Furuno L.Inhibition by x-rays of isoproterenol-induced increase in cAMP content in Parotid gland is not due to direct action on the plasma membranes.//Int. J.Radiat. Biol. 1981, V. 39. P. 665-669.

109. Beavo J.A., Hansen R.S., Harrison S.A. et al. Identification and properties of cyclic nucleatide phosphodiesterases. //Mol. Cell.Endocrinol. 1982, V. 28, N3,-P. 387-410.169

110. Burke G., Chang L.L., Srabo M. Thyrotropin and ciclic nucleotides effects on prostaglandin levels in isolated thyroid cells.//Science. 1973, V. 180.- P. 872-875.

111. Cuatrecasas P., Hollenberg M.D.Advances in Protein Chemistry. N.Y.: Acad. Press, 1976, V. 30,-P. 251-451.

112. Curnoro R., Nuttal F. Effect of Prostaglandin E, Administration on the Lives Glycogen Synthetase and Phosphorilase Systems.//J. Biol. Chem. 1972, V. 247.- P.1892-1898.

113. Dubos M., Tine J., Neveux Y. et al. Variations du tanx d adenosine 3, 5-monophosphate cycligue (AMPc) chez des chiens izzadies enterectomises.//Ann. endocrin. 1976, V.37,N2.-P. 123-124.

114. Dumont J.E., Roger P., Van Sande L. et al. Control of thyroid function and qrowth.// Steroid. Biochem. 1984, V. 20, N 6,- P. 1436.

115. Fretcher P.W., Niswender G.D. Effect of PGF2a on progesterone secretion and adenylate cyclase activity in ovine luteal tissue.//Prostaglandins. 1982, V. 23.- P.803-818.

116. Gerard C., Haye B., Jacquemin C. Effect of arachidonate on cultured pig thyroid cells and theiz stimulation by thyrotropin.//FEBS Letters. 1981, V. 132, N 1.-P.23-28.

117. Gerber G.B., Altman K.K. Tissues and waiter fluids.//Radiation biochemistry./K.I. Altman, G.B. Gerber, S. Okada. N 4:Academic Press, 1970, V. 2,396 p.

118. Garbers D.L., Murad F. Guanylate cyclase assay methods.//Advances in Ciclic Nucleotide Research. N. V.: Raven Press, 1979, V. 10,- P. 57-67.

119. Gilman A.G. G-protein and dual control of adenylate cyclase.//Cell. 1984, V. 36, N3,-P. 577-579.

120. Goldberg N.D., Haddox M.K. Cyclic GMP metabolism and involvement in biological regulation.//Ann. Rev. Biochem. 1977,V. 46.- P. 823-896.170

121. Hamet P. Cyclic nucleotides in clinial pharmacology.// Trends Pharm. Sci. 1983, V. 4, N5,-P. 218-221.

122. Houslay M.D., Gordon L.M. The activity of adenylate cyclase is regulated by the nature of its lipid environment.//Curr. Top. Membr. Transp. 1983, V. 18,- P. 180-231.

123. Kakiuchi S. Short history overview of cyclic AMP research.//Asian med. J. 1979, V. 22, N 7,- P. 426-439.

124. Kuhel F. Prostaglandins, cyclic nucleotides and cell function.//Prostaglandins. 1974, V. 5. P. 325-340.

125. Landendorff H. Zum wirkungsmechanismus strahlen resis ten nzerhohender Substanzen.//Strahlen thera rapie. 1970. Bd. 140, H. 4,- S. 428-432.

126. Mashiter K., Field J.B. The thyroid gland.// The prostaglandins. N.Y.: 1974, V. 2.- P.47-73.

127. Mittal C.K., Murad F. Properties and oxidative regulation of guanylate cyclase.// J. Cyclic Nucleotide Res. 1977, V. 3,- P. 471-486.

128. Pausescu E., Popercu M., Paun C., Teodosiu T. Dynamics of the changes in the tissular levels of cyclic AMP after cobalt-60 gamma-irradiation.//Stralen therapie. 1976, Bd.l51,H.2.- 165-171.

129. Robison G.A., Butcher R.W., Sutherland E.W. Cyclic AMP. N 4: Academic Press, 1971.- 531 p.

130. Rodbell M. The role of hormone receptors and GTP -regulatory proteins in membrane transduction.//Nature. 1980, V. 284, N 5751.- P. 17-22.

131. Sarkar S.R., Singh L.R., Uniyal B.P., Chaudhuri B.W. Effect of ionizing radiation on tissue cyclic AMP and GMP experimental rats.//Strahlen therapie. 1984, V. 160, N 10.- P.631-635.171

132. Schultz G. general Principles of Assays for Adenylate Cyclase and Guanylate Cyclase Activity .//Methods in Enzymology. N 4: Fcfdemic Press, 1974, V. 38. Pt.C.- P. 115-124.

133. Scott R. Effect of Prostaglandins, Epinephine and NaF on Human Leukocyte, Plattelet and Liver Adenyl cyclase.//Blood. 1970, V. 36.- P.514-516.

134. Stater T. Free radical mechanisms in tissue injury.// Biochem. J. 2984, V. 222, N 1,- P.1-15.

135. Sobolev A.S.,Rosenkrans A. A., Kazarov A.R. A Studi of mechanisms of post-irradiation changes in adenylate cyclase activity.//Internat. J. Radiat. Biol. 1983, V. 44, N 1.- P.31-39.

136. Sobolev A.S., Tertov V.V., Rybalkin S.D. A Srudy of rat liver guanylate cyclase activation by peroxides of fatty acids, carbonil compounds and biogenic amenes.//Biochem. Biophys. Acta. 1983, V. 756, N 1,- P.92-105.

137. Sobolev A.S., Tertov V.V., Rybalkin S.D. The cGMP system in irradiated animals changes in cGMP content and activités of guanylate cyclase and cyclic nucleotide phosphdiesterase.//Act. Radiol. Oncol. 1984, V. 23, N 5.- P. 367373.

138. Stiles G.L., Caron M.C., Lefkowitz R.J. B-Adrenergic receptors: Biochemical mechanisms of physiological regulation.// Physiol. Revs. 1984, V. 64, N 2.-P.661-743.

139. Sweat F., Wincek T. The stimulation of hepatic adenylate cyclase by prostaglandin E.//Biochem. Biophys. Res. Commun. 1973, V. 55.- P.522-529.

140. Takasu N., Charrier B., Manchomp J. Modulation of adenylate cyclic AMP responce by thyrotropin and prostaglandin E2 in cultured thyroid cells.//Europ. J. Biochem. 1978, V. 90, N 1.-P.35.

141. Takasu N., Sato S., Tsukui T. et al. Comparison of prostaglandin Ei and TSH-stimulation of ciclic AMP syntesis in thyroid tissues from euthyroid subjects and rati ens.//J. Clin. Endocrinol, and Metabol. 1976, N 43.- P. 69-79.172

142. Thompson W.J., Terasaki W.L., Epstein P.M., Strada S.J. Assay of Cyclic Nucleotide Phosphodiesterase and Resolution of Multiple Molecular Forms of the Enzyme.//Advances in Cyclic Nucleotide research. N. 4: Raven Press, 1079, V. 10.-P.69-92.

143. Trocha P.J., Catravas G.N. Prostaglandins, lysosomes and radiation injury .//Adv. Prostaglandin and Thromboxane Res. Papers 4 th Int. Prostaglandin Conf. N 4.: Raven Press. 1980, V. 7,- P. 851-856.

144. Trocha P.J., Catravas G.N. Variation in cyclic nucleotide levels and lysosomal enzyme activities in the irradiated rat.//Radiat. Res. 1980, V. 83, N 3.-P.658-667.

145. Vamashita L., Sweat F. The stimulation of rat liver adenylate cyclase.//Biochem. Biophys. Res. Commun. 1976, V. 70,- P. 438-444.

146. Van den Bosch 1/ Intracellular phospolipases AN Biochem. Biophis. Acta. 1980, V. 604.- P. 191-246.

147. Walker D.J., Eisen V. Effect of ionizing radiation on 1,5-hydroxyprostaglandindehydrogenase (PGDH) activity in tissues.//Int. J. Radiat. Biol. 1979, V. 36.-P. 399-407.

148. Zenser T.V., De Rubertis F., Curnow R.T. Effect of Prostaglandins on Hepatic Adenylate Cyclase Activity and Cyclic Adenosine 3,5-monophosphate Content.//EndocrinoIogy. 1974, V. 94.- P. 1404-1410.173

Информация о работе

Щукин, Михаил Васильевич
кандидата биологических наук
Москва, 2000
ВАК 03.00.01

Диссертация

Метаболизм циклических нуклеотидов в лимфоидных органах жвачных животных при внешнем и внутреннем радиационном воздействии - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Метаболизм циклических нуклеотидов в лимфоидных органах жвачных животных при внешнем и внутреннем радиационном воздействии - тема автореферата по биологии, скачайте бесплатно автореферат диссертации

Похожие работы