Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Метаболические аспекты формирования переходных адаптационно-компенсаторных процессов при экстремальном действии гипоксии

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Метаболические аспекты формирования переходных адаптационно-компенсаторных процессов при экстремальном действии гипоксии"

На правах рукопису

тимочко

Михайло Федорович

МЕТАБОЛІЧНІ АСПЕКТИ ФОРМУВАННЯ ПЕРЕХІДНИХ АДАПТАЦІЙНО-КОМПЕНСАТОРНИХ ПРОЦЕСІВ ПРИ ЕКСТРЕМАЛЬНІЙ ДІЇ ГІПОКСІЇ

03.00.04 — біохімія

03.00.12 —фізіологія людини і тварин

Автореферат дисертації на здобуття наукового ступеню доктора біологічних наук

ЛЬВІВ — 1992

Офіційні опоненти — доктор біологічних наук,

професор В. Й. СКОРОХІД доктор біологічних наук, професор М. М. ВЕЛИКИЙ доктор медичних наук, професор Л. М. КАРПЕНКО

Провідна організація — Український державний медичний уні-’ верситет ім. акад. О. О. Богомольця

Захист дисертації відбудеться « ...аТгНА.........і925р-

£■? годині на засіданні спеціалізованої ради Д 120.17.01 при Львівській академії ветеринарної медицини (290010, м. Львів, вул. Пекарська, 50).

З дисертацією можна ознайомитися в бібліотеці академії. Автореферат розісланий ......... 1992 р.

Вчений секретар спеціалізованої ради, доцент

Е. М. МАКУХ

. ^ ЗЗГАЛШ XAPJUCIOTCT^'P0BQ5;'#/ ■

Актуальність проблеми.Адаптація як процес перебудови генетично ¡мінованих структурно-функціональних систем відповідно до змін ювица е центральною проблемою сучасно! медико-біологічної :, а такок актуальною при вивченні біохімічних механізмів фор-тя компенсаторних реакцій органі эму в екстремальних умовах.

На сьогодні відомо, що ‘у механізмі формування адаптаційних про-і прирізних впливах вирішальні' роль відіграє активація і перв-за енергетичного обміну, яка проходить на всіх рівнях інтегра-¡ргзпхзму ( <5.3ЛИеерсон, 1973; Л.Е. Панин,1983), Одним із су?- ,

: і ешидходівчих механізмів цього процесу с модуляція термі-тх стадій енергопродукції, в основному-локалізованих у функціо-шх структурах мітохоедрій ( И.Н. Кондразова, 198?; В.И.Кулнн-, 1937). - -

У численних дослідженнях достатньо широко описані найвагливіпі si: основних стадій стресу і наведений фактичний матеріал, який гонливо доводить, що в екстремальних умовах метаболічний гомео-динамічної системі: переводиться на новий стаціонарнії;': рівень' іхунок активації енергетичного обміну, цо настроас біосистегг.: тотальний режим функціонування у відповідності до змінених ( Г.Селье, I960; В.П.Казначеев, 1974; A.¿l.ApoaDCK!iíi,I97G). гнуто значних успіхів у вивченні біорегуляторних механізмів пемзи структурно-функціональни;: систем, а таког проаналізована ані закономірності термодинаміки біологічних процесів у перєхід-еріодм адаптаційного снвдроцу ( Г.Селье,1972; В.П.Горизонтов,

; ä-З.Мзерсон, I9SI). Проте феноменологічний та лінійно-дискрет-яідхід при вивченні основних принципі^ розвитку адаптаційних цій, а такок неадекватність вясперимегггальткі моделей і. издсаиЯ сть методів оцінки цих процесів ще не дозволяє розшифрувати біо-чні механізми переходу структурно-функціональних систем з одко-таціонарного стану в інший, а також сформулювати основні законог ості і завдяки яким 0іосистема у відповідь на дію екстремального opa адекватно перебудовується відповідно до характеру різішх вів.

Тому стас очевидним, ¡до для розуміння значення енерготігчггсго • ну і ролі кисневозалеяннх реакцій у забезпеченні переходу иета-зму відкритої системи на новий стаціонарний рівень необхідно торонньо дослідити механізми формування гошокінезу^ використо-Y. широкий комплекс моделей і метбдІІЇІЩШм^^сГ^налізу, а

' - 2 - ■ . ' . ■ їакод глибие вивчити роль і взаємозв'язок інтенсивності, потртно та спряяеноссі сксидазних та оксигеназких процесів у перехідні пі ріоди екстремального стану. .

Мета'і завдання досліджень. Основно» метою нашої роботи булі вивчення окисно-відновного метаболізму- у мітохондріях печінки пр; формуванні перехідних адаптаційних процесів організму під впливо: єастромадьної дії гіпоксії, а також визначення в даних умовах ігр' ■гєріїв оцінки ефективності мобілізації та засвоєння вільної енер в компенсації і суперкомпенсації функціонуючих структур при їх б мімічних реконструкціях та застосуванні коригуючих профілактичнії І лікувальних впливів. . . .

• Для досягнення цієї 'мети необхідно- було вирішити такі конкр ні завдання; .

І. Провести порівняльний аналіз характеру перебудови сгрук но-меїаболічних станів мітохондрій печінки високо- і низькореоис тентнмх щурів на різних етапах перехідного періоду при екстремал ній дії гіпоксії. ,

• 2. Вивчити кореляційну залежність активності мітохокдріальн

онсцдоредуктоз і ошісно-біднобного потенціалу НЕ клітинки,у, ткв нинночу і сисгешому рівнях при формуванні структурно-кетаболічя перехідій:: адаптаційних процесів- ■

3. .Дослідити біохімічні механізм: спрякення перекисгек і он дазних реакцій у перехідних мобілізаційно-компенсаторнихуяроцєсс ' 4. Встановити акачення інтенсивності обміну аденінових нукл

тцдів у процесі трансформації вільної енергії при формуванні ноі структурно-метаболічних (стаціонарних) станів у перехідний періс адаптаційного синдрому.. ■ . ' . -:

, 5. Вияснити роль потуаносгі енергетичного обміну в ефектив* ті мобілізації і засвоєння вільної енергії в процесі структурно-таболічної адаптаційної перебудові! функціонуючих систем.

6.;Охарактеризувати динаміку окисно-відновних станів НДЦ-пг і метаболітів у різних компартментах ( мітохондріях, цитозолі . і ві), і,визначити їх роль у підтриманні інтенсивності, і спряженос’ обмінних процесів при переході на вщі% рівень функціонування.

. 7. Вивчити критерії оцінки ефективності мобілізації і засв<

ня вільної енергії в адаптаційно-компенсаторних процесах і розрі ?и схемй метаболічної. корекціг при неадекватних реакціях органі! ра дію різних стресортіх,Лак$отя. ■. ■■■ \

Наукова нов літ роботи». '

У роботі проведений комплексний порівняльний аналіз етапів структурно-метаболічної перебудови мітсхондріп печінки иурів з різ-ноз резистентністю в перехідні періоди формування адаптаційних процесів при адекватних і неадекватних реакціях на•екстремальні ашшви. Встановлено, ідо фазова мобілізаційно-компенсаторна перебу- ' доїт стаціонарних станів е найбільа ефективною, якщо тривалість і частота екстремальних вплизів відповідає періодові реституції. ' Коли фазові зміни в часі будуть довгими або коротшими від інтервалу між повторшклї впливами, то метаболічне перетворення вільної енергії буде неадаптогенне і маки ефектиян».

Вперше виявлено, що інтенсивність- окисно-відновних реаісцік мітохондрій е суттєвою данкоп у визначенні характеру перехідних адаптаційних процесів на рівні організму. Показано також, що потук-ність енергетичного обміну с базовим показником, а спряганість [метаболічних реакцій - ефекторним проявом у механізмі формування нового стаціонарного стану; доведено, що всі фізико-хімічні параметри, які характеризують взаемозв"язок інтенсивності, потужності і. спряженості обмінних процесів, с основними критеріях«« визначення ' спрямованості адаптаційно-компенсаторних процесів в умовах різних стресорних впливів.

Отримані нові дані, які свідчать про те, що ліпоперекиснна метаболізм у системі кисневозол««щ;х реакцій с засобом мобілізації енергетичних ресурсів, а ферментна онтиокисна активність не пригнічує іх інтенсивності, а спрямовує цей високомобільний субстратаий потік в оксидазний обмін, і ступінь спрягання цих юісневозалегних рзакцій у перехідний період реально характеризує адекватність адаптаційних процесів. ’ ' . ' '

У проведених дослідвеннях експериментально підтверджено теоретичне положення про провідну роль окисно-відновних процесів у адаптації організму до реальних умов життя і продемонстровано перспективність використаєш цих пояазників енергетичного обміну для оцінки адекватності реакцій організму на, відповідні екзогенні £ ендогенні стимули, а такса для прогнозування необхідності аасто-сування і добору найбільв раціональних коригуючих впливів. . '..

У роботі такса вперше обгрунтовано принципи і схеми застосування в комплексній терапії препаратів, які 6 забезпечували най-вшцу ефективність компенсації, репарації і адаптації функціонуючих структур при неадекватних і патотогг^кг^кщях; організму на різ-

-4- .

ні екстремальні впливи. , . /'

Теоретичне і практичне значення. . .

5 Комплексне вивчення перехідних 'біохімічних адаптаційних йроце-сів при екстремальній дії гіпоксії сприяло- глибшому розкриттю иолеку лярних механізмів мобілізації, трансформації і засвоєння вільно:; енергії при форканні нового стаціонарного стану з вищим рівнем . резистентності, ЩО ДОЗВОЛИЛО 8 НОВИХ ‘'ПОЗИЦІ Й підійти до розуміння переходу стресу в дастрес. ' , ! . .

Стримані в роботі експериментальні дані дають можливість розширити існуючі уявлення про. патогенетичні порушення, які лежать в основі неспецифічних дистрофія і різних специфічних захворювань.

Результати даної; роботи можуть служити основою визначення адекватних режимів перебування людини в екстремальних умовах і лімітуван ні оптимальних фізичних навантажень з профілактичною метою і для під вищення спортивної майстерності, а також для розробки нових методів, оцінки ефективності адаптаційних процесів і впровадження в практику найбільш раціональних схем лікування з використанням таких метаболічних показників, як с?ан і напрям окисно-відновних процесів,сг.ів-відноиеннк ваісту окислених і відновлених метаболітів вуглеводного;, ліпідного і білкового обмінів, в також спряженість кисневозалєжних реакцій і катаболічних та анаболічних перетворень, які найбільш інтегрально інформують про характер розвитку компенсаторних і ■ супєр- . компенсаторних реакцій організму при гіпоксії та інших екстремальних впливах. - . - , ■ , ■ /. '

Крім того.ехсяериментально апробовано і рекомендовано до застос} вання в клінічній практиці комплекс препаратів,що забезпечують підвисання інтенсивності,потужності і спряженості обмінних процесів,які сприять «феотнвноцу профілактичному і лікувальному захисту організм ' цу при неадекватних реакціях формування нового стаціонарного стану < в перехідний період адаптаційного синдрому. : ; , ■

^Викидом в роботі нова концепція адаптаційно-компенсаторних . процесів може бути використана в навчальних закладах при читанні яемрй і проведенні практичних занять з біохімії та фізіології. ' Безпосереднє визначення окисно-відновного стану вільних НДД-пар і метаболітів як інтегральних показників енергопродукції -і енергоспс живання. в різних компартментах клітини і крові може згіайти широке -праігаичав застосування як критерій оцінки адекватності режимів харчі вбійя яри відпбвідній емоційно-фізичній активності, а також б а?га-нізації' таких діегоко»ділвксгі-втякі "забезпечували б найви:цу киттедіялі ' ласть.. і адаптаційну продукгивійсть організмів. ;' '

ыплекс пристог.увань- і удосконалених методів визначення різких гшків окисного метаболізму (напруження кисюз, окисно-відновного ціалу,тканинного дихання), які представлені трьома винаходами і цпропозиціямн,широко впроваджені на кафедрах біологічної хімії, дьної і патологічної фізіології,онкології,терапії?педіатрії,траь-огії,н9врології, а такон в лабораторіях науково-дослідного секто-вівського медичного інституту.]іа основі розробленого і апробовв-у Львівській обласній клінічній лікарні інформаційного лкста ши-впроваджуеться в практику міських лікарень методика відбору хво-укровим діабетом для трансплантації клітин підшлункової залози. Апробація роботи і публікації; / ,

Основні положення .дисертації доповідались на ЕІ-УІ Українських иічних,Х-ХУ Всесоюзних і УП-МІІ Українських фізіологічних з"їадах, ов обговорювалися на п'ятнадцяти симпозіумах і дев"яти Всесоюзних вічних,біофізичних і фізіологічних конференціях за період 1972 -р.Крім того,окремі теоретичні і практичні аспекти даної роботи викладені на міжнародних семінарах і конгресах. .

а тему дисертації опубліковано 27 наукових праць,а таког три ви-

и,два інформаційні листи і двадцять рацпропозиції,які були впро-іЦ у лабораторну і клінічну практику.

£"ем і структура роботи.

обота викладена на 2оІ сторінці машинописного тексту,включаючи 5лиць і Ь рисунків.Дисертація складається із вступу,огляду літеру опису методів дослідження,результатів злзсних досліджень.загаль-обговорення,висновків, списку використаної літератури вітчизня-зарубіжних авторів,а такох додатків (актів впровадження).

МАТЕРІАЛИ 1 МЕТОДИ ДОСЛІДЖЕННЯ ксперименти проводились на статевозрілих безпородких щурах-самцях 170-230 г; утрітмувашг в увозвах стандартного картатого - раціону, ослідаень відбирались високо- і низькорезистентні (ВР і ЕР) до сії цурі,у,яких розривалась адекватна і неадекватна захисна адап-на реакція на екстремальні впливи. Поділ- тварин на групи за їх ідуальною стійкістю до гострої, гіпоксичної гіпоксії проводили ом В.А.Березовського (1975). ■

кстремальний стан у тварин обох піддослідних груп викликали,три-п^/рів у барокамері "на висоті" 10 тис.м/атм.тиск 196 т рт.ст;/ гом 20 хв. ' .

Біохімічні механізми 'адаптації вивчали в перехідний період, у класичній схемі' стресу характепизувФье^-реакціями тривоги \ у гівхах першх годин після •'екстрестатьното впливу і почат-

■ . ' ' ■ ' - 6 - _ . ковими процесами переходу у стадію резистентності у пераі дні _ ватку загального адаптаційного сиццрому.

Відповідно до цього біохімічну оцінку енергетичного і плас ного обміну,в мітохощіріях тканини печінки і у іфові високо- і низькорезистентних щурів проводили через 0,5; З? 24 і 72 години після гіпоксичного впливу, тобто у періоди найбільш характерних фазових змін параметрів метаболічних функцій.

У окремих соріях дослідів, проведених для визначення'ролі теноивності і потужності окисно-відновних реакцій мітоховдрій у формуванні адаптаційно-компенсаторних процесів, піддослідним тв ршіам перед гіпоксичним впливом парентерально вводили препарати язі безпосередньо модулюють дані параметри енергетичного обміну Дая підвищення біоенергетичної потужності циклу Кребса та інтен кості термінальної ланки окислення за З год. перед гіпоксією щу внутрішньочеревно вводили такі препарати (окремо і в.,комплексі) нікотинамід ( 2 мг/100 г маси), убіхінон (5 иг/100 г), цитохром (10 мг/100 г), унітіол (10 мг/100 г) і глутамінову кислоту (50 100 г). . ■ ' ' .

З метою більш детального вивчення взаємозалежності спряжен ті та інтенсивності окислення субстратів вуглеводної, ліпідної 1 білкової природи і активності різних синтезів, які під час заве; иення перехідного періоду використовуються у репаративно-компені торних і суперкомпенсаторних процесах мітохондрій, проведено' рд досліджень, у яких визначали швидкість залучення, радіоактивного вуглеср (І-*4С) ацетату і аланіну до ліпідно-білкових компонент, мітохоцаріальних структур. . .

У окремих модельних дослідженнях на мітохондріях проведено «отмапаулнй, пкаор.иид..?,, ряд .пирапірое:. мідиву інтенсивності та пот; ності окисних реакцій на ефективність засвоєння вільної енергії репараційно- компенсаторних процесах? функціонуючих структур за участю оксидоредуктазних систем.

Нітоховдрії тканини печінки виділяли методом диференціальні центрифугування ( и.Но^еЬоог., 1955). Швидкість дихання та окисні фосфоршшвання визначали полярографічним методом ( И.Н.Кондрашо; 1973). Після запису полярограм хількість мїтохокдріалького білк; визнавали методом Доурі ( к.Ьо.уіу еі ьі., 1951), а ліпідів -методом Фольча ( ?<ї.л>ісЬ еі «і., .. 1957). Активність ферментів дихального ланцюга, визначали за швидкістю відновлення і окислеш цитохроцу с у мттоховдріях-печінии, зруйнованих заморожуванням :

.■ - . . • )зноро=уЕа:птт; НЛР? -rüftorpo“ о-редуктазну і сукцинат-цитохром -редуктазиу авташосгх - методом Дк.Д.Берштейна і РЛІеннієле [978). а цитохром с-оксидазну - методом Т.Д.Дстдофа (1974). Ак--¡вшсть тжозо-б-фосфат-дегідрогеназн ( Г-б-ЗЩГ) у тканині пе-:йки і еритроцитах визначали за швидкістю відновлення НАД®’' н.л.КтЬз, 1973), активність сукцинатдегідрогенпзи (СДГ) у лі»*- ' ;цитах - за кількістю утворених гранул формазану ( Нарциссов,

>39). ■

Огснсно-відновшіП потенціал (ОШ) як інтегральний показник геенсивності окисних процесів у тканинах печінки, ц"язак, крові і 'ІШЗЗІЇ иітохоцпрій вимірювали потенціометричним методом (Е.М. іргородський,'1955). . _ ‘ '

. Вміст лактату, пірувату, глутамату,„¿-кетоглутарату, ^-окси-"гирату, ацетоацетату, сукцинатуАй, АД$ і А® визначали ензи-¡тичними нетодани ( и.вегєкеуаг t 1963), а вміст аміаку і не-іганічного фосфату (Нй) - спектрофотометричними методами ( к ■ lo-ягу, 1950). Сечова кислота у сироватці крові визначалась методом

йлера (1972). ...-г - .

Кп основі визначення концентрації метаболітів і констант рів— ваги дегідрогсназних систем (ДДГ, НАД* - ГДГ* ОВДГ) розраховува-оначеннк відношення вільних НДЦ*/ НАДН в цитоплазмі і мітохоад-их ( H.:..Krebu, 1970). Отримані величини вмісту аденозинфосфа-в використовували для розрахунку енергетичного заряду (ЕЗ),аде~ латного потенціалу (ДІЇ) і потенціалу фосфорилюванж: (П5)

Átkmgon, 1975). .. ‘

Рівень перекисного окислення ліпідів (ПОЛ) у суспензії міто-идрій, гомогенатах тканин і сироватці крові оцінювали за вміс-м первинних продуктів цього процесудієнових кон"югатів (ДК) .Пляцер, 1970) і одного з кінцевих метаболітів - малонового ди-ьдегіду (І4ДА) (Р.А.Тимирбулатов, Е.И.Селезнев,1981), Інтенсив-сть перекисного окислення вимірювали хемілюмінесцентним методом .А.Веселовский, 1967). Стан антиокисної системи печінки і крові значали за активніста супероксиддиймутази (СОД) (С.Чавари,І985), галази (М.А.Королюк,І958) і глутатіонпероксидази (ГП) (В.И.Моин, 36).

Швидкість синтезу білків і ліпідів оцінювали за зміно» їх істу і інтенсивності залучення (І-^^С) ацетату і (2-^^С) аланіну складу вільних жирних кислот та ліпопротеїдних компонентів мі-ісондрій... ' ...

. Статистичну обробку результатів проводили методом варіаційної статистики з використанням критерію Стьюдента. Зміни показників , вважалися вірогідними при р< 0,05. ‘

’ РЕЗУЛЬТАТИ ДОСЛІДИШ, ТА IX ОБГОВОРЕННЯ'-

' І. Визначення ролі окисно-відновних реакцій у формуванні перехідних компенсаторних процесів .

У численних дослідженнях енергетичного обміну на різних стадіях стрес-реакції доведено, що активація окисних процесів є суттєвою для структурно-метаболічної перебудови функціонуючих систем при екстремальних впливах (Ф.З.Меерсон,І973; М.Н.Кондрашова,І974;Л.Е.Па- • ник,1980). Проте біохімічні механізми перехіднихпроцесів формування нових стаціонарних станів далеко не вивчені. Особливо недостатньо враховується в комплексних дослідженнях роль інтенсивності окисно-відновних реакцій .у мобілізації енергетичних ресурсів і засвоєнні вільної енергії в компенсації, репарації і суперкомпенсації , функціонуючих систем. .. , . .

■ У цьому розділі роботи використаний чутливий полярографічний . метод, що дас змогу визначити динаміку змін споживання кисни, які характеризують перехід матаболізму мітохоидрій із стану спокою в активний та відрегульований, і вивчено залежність цих метаболічних перетворень від .‘інтенсивності окисних процесів. . . 'V;'. .

■ У результаті проведених досліджень встановлено (рис.І),^о -зйач-на перевага інтенсивності окисних процесів у мітохондрія-/. печінки ВР щурів забезпечує більп .ефективне засвоєння вільно: енергії, про що свідчить високий рівень спряження окисного фосфорилювання (ДК=3,4 -0,07), двидкості фосфорилюважя (Ух=І92,41^11,35с^ 'Щку) ,динхт-рофенольного потенціалу (ДЙ2о=90,І±г,4 —, порівняно з НР . сдфаот; де-вгдпрядні'тказнккггдорівншетг ДК = 2.81-0,16; :

Уф = І67,5І±5,5 і »V 75,62іі,64 .

. Ця залежність ще більше помітна в перехідні періоди екстре-пального стану при дії гіпоксії. Як показують результати досліджень, показані на рис.І, вже через ЗО хв. після дії гіпоксії із

зростання!.: інтенсивності окисних процесів у мітоховдріях печінки , .

ВР дурів значно-підвищується ефективність,засвоєння вільної енергії, що в кінцевому результаті забезпечує суперкомгіенсацію . функціонуючих структур. Про це свідчить зростання активності фермен- . тір дихального ланцюга - цитохромоксвдазі: (ЦО), НАДІ;! - цитохром :

с-редуктази ( ШДН- - ЦР ) і сукцинат-цитохром с-редуктаз» (С-ЦР) .

її О ?~5їлку

А-0 с

А|'

ЛЇ|Ф ,Ф

і

_ і

г~і і

і і

11 із

ДНФ

£|«>{

і І 11 и

ДВФ

*|С-(

•*1 1

І І їх

А|

ДНЧ

її І

і і'. 11

! ! и

.т

Контроль ЗО хв З год. ІЬ год. 72 год.

-----ВР. ----НР ' . . .

с. І. Окисні процеси в иітохондріях печінки ВР і НР ¡цурів на різних етапах перехідного постгіноксичного періоду

ат 0

АДФ

10 с

АДФ

.-І - ,4=^^

Контроль 10 хв

АДФ

І

і

,20 хв

¿Ні)

АДФ

І

\

АДФ

ДНФ

Г" •-] . І

І 1 1—І

ЗО хв

введення АДФ че-"рез КОЕНІ 10 ХВ інкубації

_введення АДФ через ЗО хв інкубації

2. Характер зцін фосфорилюючої активності иітохондрій печінки ІР щурів при повторному введенні АДФ в середовище інкубації

- І0-- . _ відповідно на 70; 57 і 195$ ( р < 0,05), а такоЕ підвищення вміс ту діпідно-білковпх компонентів у мітоховдріольннх мембранах на 84 і 65$ ( р <0,05), що помітно на '3-тю годину постгіпоксії/-'

- Ка фоні вихідного низького рівно інтенсивності окисних процесів у мітоховдріях НР щурів екстремальні впливи гіпоксії ВИКЛИ] вть неадекватні реакції (рис.І), що приводить до'значних структуї но-метаболічних порушень, найбільше виражених через 3 год. у дво* кратному зменшенні активності окисно-відновних ферментів та игле: ліпідно-білкових компонентів мітоховдріальних мембран. ,

3 метоп глибшого вивчення впливу інтенсивності окисних проце сів додатково проведена серія модельних досліакень, у яких показ* но (рис.2), що періодичне ( 'з інтервалом 10 хв) додавання ДЦ5 до суспензії иітохондрій, виділених з і г тканини печінки ВР цурів, забезпечує прогресуюче зросташя швидкості фосфорилювання і запоС гає спонтанному старінню органоїдів та зростанню їх оптичної гусі ни, яке особливо помітне-у паралельній пробі, де інкубація міто-хондрій проводилась без повторних стимулюючих впливів ДЦФ. Відсуі кість такого ефекту в пробах мітохондрій, добутих з печінки НР пс рів, де питома кількість білку була значно ( ь 2 рази) менаоп,

. вказус на значення потужності кисневозалеаного енєргообміну в забезпеченні реалізації, інтенсивності окисних процесів у адекватнії адаптаційний реконструкції функціонупчія структур.

- 4 2. Вивчення перекисних процесів при ' :; ;

■ переході структурно-метаболічних станів '

. ' на'новий рівень-функціонування - , '

. у дальшому вивченні біохімічних механізмів перехідних процес і визначенні їх ефективності особливе значення має . оцінка спркже-

■ пості’ яипневозалежнюг реакцгй’, що забезпечують мобілізацію і утгої зацію снсргетищіих ресурсів,'а таког їх залучення до синтетичних процесів, які підтримують стабільність оновлення і підвищення активності. функціонуючих структур відповідно до характеру екстре-ЫВЛЫШХ впливів. *' ‘

. Результати дослідження амін вмісту первинних і кінцевих продуктів ДОЛ та антиокисної активності (АОА) у тканині печінки тварин з різною резистентністю при найбільше виражених структурно-метаболічних перебудовах після екстремального впливу гіпоксії показали (табл.І), що характер, змін відповідних показників у періоди екстремального стану мас значну відмінність у ВР і НР тварин.

Характер змін вмісту продуктів ПОЛ (мкмоль/г тканини) і активності ферментів аняганнсної дії (мкмоль/хв*г ткашнш) на різних етапах перехідного постгіпоксвадого періоду <пи б)

Умови І ОД І ДІС " і сод ; Каталвза : І'П

Високо р Є 3 II стен т н і щурі

Контроль 610,02* 9,57 120,92* 5,74 624,70 * 7,50 166,40 ± 10,88 83,98 * 6,61

ЗО хв 421,50* 10,92 233,20*14,01 938,96*11,25 '208,24*8,95 93,46 ± 6,67 .

р < 0,05 р <0,05 р 4 0,06 р ¿0,05 р > 0,05

3 год. 680,50*13,60 205,20* 7,10 875,00* 10,40 262,00* 12,70 127,50*10,80 -

р <0,05 р<0,05 р <0 ,0І5 р< 0,05 р<0,05

24 год. 730,40*12,60 103,10*6,90 637,50*9,30 230,50*9,40 , 174,10* 6,40 .

р <0,05 р > 0,05 р >0,05 р < 0,05 р <0,05

72 год. 663,30*15,60 80,90*5,03 596,98*13,32 159,90*12,80 97,60* 5,30

р <0,05 р<0,05 ■ р?0,05 р >0,05 Р >0,05 ;

Низько резистен т н і щ у р і

Контроль 421,00*7,50 81? ,'40* 4,70 370,40* 9,90 109,80* 8,30 73,20 * 8,60

ЗО хв. 482,10*8,90 Іі£,60* 5,50 173,50*31,40 83,24* 5,91 69,40 * 8,20

р < 0,05 •р <0,05 р^0,05 . р * 0,05 р ;>0,05

3 год.- 521,60*9-,20 ІЗр,10*11,40 284,80*10,80 75,90*. 6,63 56,60 * 6,80

1 р <0,05 р < 0,05 р < 0,05 р с 0,05 р<0,05

24 год. 491,40*10,02 152,14*10,97 354,30*10,80 88,90 * 7,90 66,50 * 9,50

р <0,05 р і 0,05 р<0,05 р>0,05 р < 0,05

72 год: 441,82*16,90 16?,70*6,00 365,80* 17,70 130,50 *7,80 75,90 * 7,10

р <0,05 . р с 0,05 р>0,05 р<0,05 р >0,05

У вихідному стані для БР щурів у тканині печінки і крові рівень ГІОЛ і АОА за всіма визначеними параметрами є значно вк^ш, ніж у НР тварин. Пряма залежність інтенсивності' переписних реакцій у стаціонарному стані від резистентності піддослідних тварин показує, що відповідний рівень потоку енергії у нєрівноважшгх система'.; в суттєвіш для механізму формування адаптаційних реакцій організму і забезпечення його резистентності. У ВР тварин чіткіша виражена активація ГОЛ, що виявляється вже через ЗО хв. після гіпоксичного впливу; більшою е також швидкість переходу ліпопере-ки снаго метаболізму до стаціонарного стану, що відбувається у ме^ жах 3 год. після дії.екстремального фактора. Усе це є важливим свідченням того, що потужність систем, які підтримують інтенсивну мобілізацію енергетичних ресурсів за участю радикальних реакцій, значно підвищує ефективність адаптаційно! перебудови ліпо-протеїдних- структур мітохондрій. Це підтверджується також посиленим використанням ацетату в синтезі білково-ліпідних

компонентів мітохоцпрій, що виявляється у двократному зростанні їх радіоактивності саме на 3-тю годину екстремального стану в печінці БР щурів, де інтенсивність і потужність оксидазних і ок-сигеназних процесів була вищою порівняно з вихідним станом, а також із рівнем цих реакцій у НР щурів у аналогічних експериментальних умовах. г • .

Підтримання у ЗР тварин значної інтенсивності ПО.” ,нр фоні високої активності <Щ, каталази і глутатіонпероксидаз;: через ЗО хв. після гіпоксичного впливу С табл.І) говорить про те, що антиокисна система не пригнічує перекислі реакції , а координує їх і спрямовує потік їх метаболітів у оксидазні процеси, рівень яхвх, у ¿»©»чергу,забезпечуй студінь ефективності фосфортш-Вання і активацію .різних синтезів та створює основу адаптаційної потужності організму. ,

Особливості метаболізму кінцевих продуктів ПОЛ, що в основ ному виражаються у зменшенні.вмісту ЇЩА в гомогенатах печінки ВР щурів через ЗО хв. після гіпоксичного впливу при високій активності вільнорадикальних і перекислих процесів, свідчить про інтенсивну утилізацію ЩА в окисно-відновних реакціях. Висока активність.антиокисних ферментів, найбільше виражена у перехідний період, сприяє залученню продуктів ПОЗІ до енергетичного, обміну шяхом безпосереднього продукування Ш1А,. а такоазахисним

• . . . . - І',І ” ■

підтриманням стабільності і високої активності функціонуючих структур мітохондрій, що утилізують ці продукти. - і

У окремій ссрії досліджень'показано, що при застосуванні інгібіторів окисного фосфорилтовання і білкового синтезу ГІПОІССЛЧНИй вплив приводить до значного зр остання вмісту ІЩк і зменшення концентрації первинних продуктів ПОЛ відповідно на 85 і 47%, а то-кок; зниження АОА {активності ООД - на 54$ і католази - на 49^5, що вказує на.значення окисно-відновних процесів мітохондрій і в утилізації кінцевих продуктів ПОЛ і підтримшті оптимальної активності вільиорадикальних реахсцій мобілізації енергетичних ресурсів, і у засвоєнні вільної енергії у різних синтезах, які підтри-і.$еїь високу активність ферментіь акгисстсіїої дії і забезпечують стабілізацію клітинних мембран. '

Характерні зміни перешених реакцій і АОА у гомогенатах печінки НР щурів після дії гіпоксії (табл.І), очевидно, зумовлені головним чином низькою потужністю окисно-відновних процесів иіто-хондрій, які не можуть забезпечити ні належної мобілізації енергетичних ресурсів у оксигеназних реакціях, ні утилізації цих ресурсів у оксидазних процесах навіть при адекватній силі і тривалості екстремального впливу. Такий метаболічний стан, можливо с основною причиною прогресуючого нагромадження !ДА ні- 3-тв годину після гіпоксичмого впливу, а також пригнічення анаболічних процесів, які забезпечують стабільність мітохочдріальних мембран, а таксг активність окисно-вішювннх та антиокисіш;: процесів. Це, очевидно, і с причиною сповільнення перехідного процесу відновлення вихідного стану, що у НР щурів завершується на третій день після гіпоксичного впливу.

Про значення потужності окисно-відновних процесів у механізмі формування адаптаційної структурно-метаболічної перебудови ' ; свідчать також дослідження, у яких попереднє (перед гіпоксією) ■ введення НР тваринам суспензії мітохондрій або.окремих ферментів дихального ланцюга (цитохрому с, убіхінону) сприяє підвищенню вмісту первинних та .зниження кінцевих продуктів ПОЛ відповідно на 45 і 22% ( р с0,05) і зменшує реституцію функціонуючих структур клітини у перехідний період, а також підвищує загальну резистентність щурів. . , .

' Виявлене значення співвідношення про- і антиокисних процесіг у механізмі перебудови енергетичного обміну, що на рівні цілого організму виявляється у однонаправлеиих фазових змінах ПОЛ і

і

АОА у крові, синхронних із органо-специфічними реакціями на екстремальні впливи у ВР і НР тварин, дає можливість використовувати ці показники як критерій адекватності мобілізації енергетичного потенціалу і актуальних можливостей трансформації потоку енергії . в адаптаційне формування нового стаціонарного рівню і підвищення резистентності окремих органів і організму в цілому.

Виявлений високий ступінь кореляції =8,5) спряженості про— і ацгиокиених процесів з напрямом адаптаційної реакції у перехідні періоди дав можливість розробити нові методи визначення співвідношення ліпопероксидації і антиокисної активності, а такоа критерії оцінки спряженості кисневозалеяних і анаболічних процесів, які успішно впровадкулться у практику. ; «■

- 3. Вивчення характеру обміні1 адекінових нуклсотидІЕ ^

на різних етапах перехідного постгіпоксичйого періоду Ключове завдання аденіннуклеотидів у процесах продукування та засвоєння енергії при формуванні структурної організації функціональної активності біосистем, а також у регуляторних механіг— мах різних рівнів показус, цо безпосереднє вивчення обміну ЛТї,

ДДО, АМ2 та їх метаболітів.с необхідною умовою розуміння того, ■

як енергія, цо звільняється при зросташі інтенсивності оіи:с;с:>: процесів, більа ефективно засвоюється у підтвиканиі елементарнії:: .функцій 2-і і тим і організіу, як інтенсифікація енергетичного обміну при екстремальних станах, з точки зору термодинаміки, здати; з:.- '

■безпечитк перехід функціонуючих структур на вичий рівень організації і постійну еволюційну адаптацію-організму. . "

Результати експериментальних досліджень (табл.2) показують, цо ще у вихідному стені у ПІДДОСЛІДНИХ.ЦурІЕ. різних гррт виявлено -значна різниця у потужності акумуляції вільної енергії, яка осо-посередньо виражається у синтезі мзкроертічкпг молекул і формувая-ні іятозгоздріальних структурі потупііать яких знаходиться у прямій ааленшості від розистзтпості. Епяцлено також залежність між резистентністю і так званим єденілатним запасом та потуашіств мітохонд-ріелншх структур, яка свідчить про те, що даний структурно-метаболічний потенціал клітин є вихідним і базисним резервом, який за-безпечус відповідну надійність і ефективність адаптаційних проце-

■ СІВ. ■ ' ■. . . ; • . . -

Дальший аналіз обміну ааеніннуїглеотидів, що’, відбувається у ■ перехідний період мобілізації та формування резистентності прк дії . гіпоксії * не їіяьки діас .шягазість вивчити механізм мобілізації .

w-- ... _

BP í ÍÍP іцурів на різких етапах перехідного постгіпоксичного періоду (мкколь/г тканини,п=57

Умови : ATS : АД4 * ; a?w ; lis : ап : n® І E3

Високо резист Є H T и i щурі

Контроль 3,1*0,13 0,9*0,11 0,4*0,02 3,7*0,12 4,5*0,18 1,0*0,05 0,60*0,06

ЗО хв. 2,4*0,12 1,2*0,13 0,5*0,04 4,2*0,14 4,1*0,16 • 2,‘1*0,12 0,73*0,04

p <0,05 p <0,05 p >0,05 p >0,05 p > 0,05 • pe 0,05 p < 0,05

3 год. 3,3*0,15 1,4*0,12 I,I*0,C6 4,9*0,16 5,5*0,15 2,0*0,11 0,70*0,07

, p> 0,05 p <0,05 p < 0,05 p< 0,05 p <0,05 p¿ 0,05 p< 0,05

24 год.. 3,2*0,14 1,1*0,11 0,8*0,05 4,7*0,17 5,0*0,14 1,6*0,09 0,74*0,06

p> 0,05 p >0,05 p >0,05 p >0,05 p >0,05 p < 0,05 p> 0,05

72 год. 2,8*0,12 0,6*0,13 0,^0,02 4,3*0,15 . 4,2*0,16 0,9*0,08 0,82*0,07

p 7 0,05 p >0,05 p >0,05 p > 0,05 p >0,05. p >0,05 p ^0,05

H к з M o резист Є H T H i щурі

Контроль 2,5*0,12 0,6*0,05 0,5*0,04 3,5*0,17 3,6*0,17 : 0,9*0,00 0,78*0,06

.30 хв. 1,9*0,11 0,4*0,02 0,4*0,03 3,9*0,14 -J2,7±0,I4 0,8*0,07 0,70*0,05

p< 0,05' p>0,05 p> 0,05 p >0,05 p¿0,05 p >0,05 p> 0,05

3 год.. 0,8*0’,06 0,6*0,04 0,7*0,05 4,1*0,05 3,1*0,12 1,37*0,11 0,67*0,05

p <0,05 p>0,05 p 7 0,05 p> 0,05 p <0,05* p <0,05 p <0,05

24 год. 2,1*0,13 0,7*0,06 0,6*0,03 4,6*0,13 3,4*0,14 1,5*0,07 0,72*0,06

p»0,05 p > P,05 p > 0,05 p < 0,05 p >0,05 'p < 0,05 p> 0,05

72 год. 2,4±0,I4 0,8*0,04 ' 0,7*0,05 4,6*0,15 3,9*0,I? 1,6*0,09 0,73*0,07

p >0,05 p >P,05 p >0,05 P< 0,05 p?0,05 p <0,05 p > 0,05

■■ - 15- '

адаптаційних разєрзіз організму, але і еиявляс ті особливості інтенсифікації окисних реакцій, ¡ш забезпечують відповідну ефеї^ тивність засвоєння вільної енергії, характерну в екстремальних умовах дзд БР і НР щурів. .

У £Р щурів незначне зменшення сумарного вмісту аденішуклес тоді? за рахунок АТ$, найпомітніше через ЗО хв., приводить до і і тенсифікації окисних процесів під впливом зростаючого потенціалу фосфоршшвашя, що активус аеробний ресянтез АТЗ у відповідь на метаболічну перебудову функціонуючі« структур. Реалізація -цього екстрепного механізму адаптації в основному забезпечується шлях< збільшення у мітохоцяріях вмісту ДЦ5, який е безпосереднім акцеї тором фосфату, в також за рахунок зростання в даних умовах вміс АМ5 яs основного алостеричиого активатора, дегідрогеназ гліколіз; і циклу трикарбонових кислот, які збільшують притік субстратів, протонів і електронів для окисно-відновних реакцій.

Таке форсування енергетичного обміну у відповідь на екстро цальну дію гіпоксії е, очевидно, проявом метаболічного мобілізу чого інтенсифікуючого енергетичного адаптаційного резерву кліти здатного до короткий інтервал часу компенсувати витрату енергії і вже через 3 год. забезпечити, відновлення рівню АТО та ліпопро ідних структур мхтохондріГі (табл.2). . .

Характер змін вмісту аденіннуклеотидів, відзначений у ткан печінки ЕР щурів після екстремального впливу гіпоксії (табл. 2),

' В5ф«2асться у попітнілому зниженні вмісту АЇО і AJ&, що в осної нону приводить до активації анаеробного енергетичного обміну, .с ЕІЛЬНЗ! зменшення рІВКВ АД5 і ААЭ не сприяє активації дегідрогеї циклу трикарбонових кислот, а також підтриманню потенціалу фос^ ряяЕваша і донорио-акцвпторннх.реакцій у дихальному ланцюгу. Шявлені порушення енергетичного обміну-,- ЩО-розвиваються' те у ранні періоди екстремальної дії гіпоксії, змеязують П$ до криті miz езачеиь, що не тільна ослаблює спрягсність окисного фосфор Еання і викликає відставання ресинтезу AIS від його сповивання але значно порушує спряхеність катаболічних реакцій, які підтр муать окисно-відновний потенціал, і ефективність засвоєння віл енергії у процесах синтезу і репарації функціонуючих структур.

Особливо важливим метаболічним прказшіком диско ординації шяу аденіннуклеотидів у тканині печійки у перехідні періоди екстремального стану е зростання концентрації сечової кислоти. Значне підвищення її вмісту, (на 83?, р <0,05), з одного боку,

•' - У7- .

вказує на порушення використання метаболітів циклічних реакцій пуринових нуіяеатріп, а з другого - на неадекватність реакції формувзния адаптаційних процесів.

Підтвердженням даного'висновку є результати .досліджень,, у '¡лях з високо» достовірністю показане дальпє прогресуюче зменшення «місту сумарних аденіннуклеотидів, потенціалу фосфорилювання і с-гергетачного заряду поряд із зростанням вністу сечової кислоти, ¿.¿¿бі-іісе ішракене у печінці НР тварин через 3 год. після дії гі-, ' ' ' ' ■ •

7 ГР сур і в протилеала спрямованість змін вищезгаданих показників'обміну аденіннуклеотидів у відповідні періоди екстремального сч*кну & ііідгввущаааіяг! того, що спряженість обмінних процесів Ьса— растеризуй адекватність інтенсивності мобілізації енергетичних ро-сурсіз і ефективності засвоєння вільної енергії у процесі адаптаційної перебудови функціонуючих структур.-)* ■ . .

Оскільки спряженість обмінних процесів!, що конкретно вирага-вться у ресинтезі АЗД та його метаболітів, які беруть безпосеред-нэ участь у синтезі нуклеїнових кислот і ліпідно-білкових компонентів мітоховдрій, що в цілому сприяє зростанню потужності окисно-відновних процесія і розширює1лімітуппі ланки окисних реакцій /:;:хги:ького ганцага. ' '

У низькорезистентких тварин при відповідних екстремальних :;плипах підбувасться порушення спряженості анаболічних і катаболіч-гг»;х прсаесів, про що свідчить зростання вмісту сечової кислоті:, а !’?с изалтлиііікоі пореуудивк с їіг.:~ тркгаляя і ээаерчуоться чевез ~2 год.

Такчц чином, виявлена залежість ефективності адаптаційного процесу, як« визначасться за тривалістю перехідного періоді’, від потузності і .спряженості, енергетичного обміну дає мовлявість яігет-рпстситя терміну "адекватність." для означення відповідності сили екстремального впливу до потенціалу засобів, цо здійснить мобілізацію ресурсів вихідного функціонального стану і формування нового більш потужного структурно-метаболічного рівню у БР тварин на протязі 3 годин, а у НР - 3 діб.

Перевірко цього положення показала, що найбільш адекватними для, НР тварин виявились повторні сеанси гіпоксії-з 3-7-добозии інтервалом, а для ВР.тварин оптимум знаходився в меаах 3-24 годин.

У даних умовах при повторній дії гіпоксії протягом двох місяців резистентність НР і БР тварин зростає у 2 рази. Із зменшення;.! чи

збільшенням інтервалу часу повторного впливу гіпоксії адаптаційна ефективність значно падає і у ВР, і у КР тварин, що виявляється у зменшенні тривалості часу життєздатності у гіпоксичних умовах на 80 і 120% відповідно. ' ' .

Тому визначення швидкості і ефективності адаптаційно! перебудови енергетичного обміну з урахування»? спряженості обміну аденіннуклеотидів дає можливість не тільки оцінити адекватність екстремального впливу до резервних-можливостей функціонуючих систем і організму, але і дозволяє профілактично організувати такий режим повторних впливів,'які <5 цілеспрямовано забезпечували ефективний розвиток адаптаційного процесу в екстремальних умовах.

' Особливі з'начення має визначення адаптаційних механізмів,які формуються у перехідні періоди дії комплексу стрес-факторів,коли регуляція спряженості енергетичного і пластичного обміну можлива тільки за рахунок медикаментозної корекції, яка може'збільшувати потужність і спряженість енергетичного і пластичного обміну і здатна підтримувати високу інтенсивність окксно-відновних процесі зменшуючи тим самим тривалість часу поступового переходу на нови рівень резистентності та на випрій ступінь неспецифічної реактивності. Така корекція вимагає детальнішого аналізу адекватності інтенсифікації окисних процесів, які забезпечили б високу спряженість катаболічних реакцій різних рівнів проміжного обміну і ефе»

<_ тивніое засвоєння вільної енергії у репаративно-відновних процес«

4. Ьинчення ролі окисно-відновних реакцій

у механізмі регуляції метаболізму перехідних процесів при екстремальному стані

У даному підрозділі роботи визначення стаціонарних концентрі цій' окремих метаболіті» гліколізу £ циклу ’ трттрботвях яисяог -та розрахунки величини відношення вільних ЩДМЗДН у різних ком партментах печінки та у крові в перехідні етапи постгіпоксичного періоду дало можливість вивчити роль окисно-відновних реакцій стаціонарного стану клітини у визначенні спрямованості реакцій проміжного обміну при формуванні адаптаційної перебудови. Проведені комплексні дослідження і аналіз концентрації метаболітів і кофакторі» у ранні періоди після гіпоксичних впливів показують (табл.3,4), що перебудова метаболічних станів у ВР тварин в оснс ному спрямована на компенсацію енергетичного дефіциту, який розвивається у відповідних екстремальних умовах. Про це свідчить

СО

►3

о о

^3 - 'О- ‘

V . *-♦ w О ^

¿ g5# «

о - о- о сл о ел о сл ►Ч о

«а « 'сз • »а

V 0!л®

О

- *Z3

S N

¿+я

« о

Q СЛ

О

63

8*8?

я г: w tr н и

О

й и*

• о

‘¿э

-v3 ►? го

го о ¿*

>3

I

о

Sf

о

¿Г »

О

*-4

ÍO лзу

о

•в • тз

V Е .N

Я JÍ я

о «Г' о сл е? сл

Ж

О 14-- О

О - ^_> о

О’ о СП о сл

• . -, Jffc. £ö- .

О о

*с? » rj- TJ

V К * G*

Р

о-о-о СЛ о ело СП М м

ГС *

*ь

О СЛ

хл Я тз

^ л н* о

Я о

о о. .г*

93 А

«о

tt

о

о

.«•»

о*

»U

о

%2

*0

V

о

г

го

* тз

5 А

1-і- с о *

- о

о сл

о

- *а ~ *а

ÖV 5 к ь- С tt о - о - о -о * о -

ел о сл

о

• >U * 4M»

о

ь *.

¿гя

• -о о сл

с..

і"* »а

ft N О ó * О О сл .-U

8 о и

X »•

а

о,

ГО

£ О ' м

A3

Н*4

W

Ó

О

<&

S

«о

»Cw

iï-

Г/

ьЗ

О д

в « гэ » •а

о œ V >—* GD /ч

>-г О «+ О W О !■+• О о

8 *о *VÍ т сл і о СП

О

-

Y¿ о

Г“1 *

Ö '■

ö-.c . - о о сп о а.

- * і

И* а С

с

О

в :> СС> (t. ТЗ И •-2 О З і

*?

-у '

H-

с

л tu О t+ . о -

rjj С

f-ч о 'о - 'а « ^

^ й V 2 л

о и- OI+ а - о - о *

о - о- о СЛ о СЛО сл нч ГО

о Б* о я* о • о - о -о - о с сл о СЛО сл ГО £»

И4

со го

«хз • ТЗ* 'С V *

Р Ö’PSP

о - о* о

СЛ о СЛН4 СП

о га

о о тэ « »о- *о

\у ГО . »ft» ^ 'V «о Л h-* 74 О 1+0 1+0

с <• о -0-00 СЛ о СЛО сл

о о

'О - 'О*

V о,, О *3

О 1+ оТІ^4 >- 0*00 о - о -сл о ело о ►-* с сл

нн CJ и CJ ■о »—« ^ ж с: о

ГГ» ГО h~4 'Т? i-j

Г>1 и* с f—t «. J »л °5 14- Ч- ■Í

6 • o’ ч- а

о « (“ CJ

о сл о с;. с о í-<

г f-Ч ст. 1~ч .м Í4 en --

. ' .Таблиця 4.

. Окисно-відновний стан вільних НЛД-ппр в цитоплазмі і мітохондріях печінки та у крові на різних етапах посугіпоксичного перехідного -періоду (концентрації метаболітів у " печінці взяті з трбл. З, п = б)

Умови ; . І І Піруват, і мкмоль/мл 5 Лектат, : мкмоль/ил і ЛДД+/І1ДДЛ

В и с о к о р е 3 И С т е н т ні Щур і

Контроль 603,69*31,71 5,42*0,25 0,11*0,001 1,61*0,04 603,69*31,75

30 хв. 1141,98*53,71 18,03*0,82 0,25-0,003 1,88*0,05 1279,96*67,32

р<0,05; р ¿0,05 р <0,05 р <0,05 р< 0,05

3 год. 1323,54*71,80 '14,48*0,73 0,19*0,004 1,13*0,07 1514,44*12,47

р<: 0,05 р < 0,05 р <0,05 р < 0,05 р<0,05 -

24 год. 867,17*41,|3 7,95*0,35 0,16*0,030- 1,57*0,06 9І8,ІІ±45,ЗІ

• р<0,05- р<0,05 р <0,05 р>0,05 р<0,05

72 год. 563,58*25,40 7,14*0,32 0,12*0,008 1,94*0,08 557,25*25,32

р<0,05 р >0,05 р >0,05 р<0,05 р >0,05

Н и э ь к о р ез и стент ні щур і

Контроль 411,19*27,31 4,26*0,21 0,09*0,003' 2,13*0,07 384,27*17,35

30 хв. 262,08*14,95 3,60*0,16 0,06*0,002 2,73*0,06 222,44*12,47

рс0,05 р ^0,05 р<г0,05 р е. 0,05 р < 0,05

3 год. 173,25*11,45 2,63*0,12 0,04*0,001 2,92*0,да 123,41*0,37

. р 10,05'" р<0,05 р<0,05 р ¿ 0,05 р<0,05

24 год. 286,50-14,37 4,60*0*21 0,07*0,002 2,53*0,05 249,26*13,75

р<0,05 р < 0,05 - р >0,05 р <0,05 р<0,05

72 гоп: 466.60±24.54 6.08*0,31. 0,10*0,008 2,22*0,04 <»5,81*21,37

тивація потоку спряаених катаболічних процесів вуглеводного, підного X білкового обміну, цо приводить до зростати на 30-ій плині *гаі:т: ішсоколабільних субстратів 'циклу трикарбонових кист і гліколізу, як сукцинат, */_-кетоглутарвт і піруват, які на отязі 3 тоаіпі-здатні ке тільки компенсувати енергетичний дефі-т, але і активізувати синтетичні суперкомпенсаторні процесі:, яких ефективно використовуються відповідні недооккслекі нета-

іЛІгЛІ. ■ '

У. даних умовах розрахунок відношення НАД+Лі£ДК з використанім безпосередньо виміряних стаціонарних концентрацій окислених відновлених метаболітів ИДД-валегких дегідрогеназ, строго лска-ізованих у відповідних клітцкних коипартиентах, показує (табл.4), з зростання окисленості ІІАД-пар у мітохоцдріях і цитоплазмі гепа-зцитів ВР тварин у ранні періоди формування адаптаційних процесів істотним активуючим фактором, який внаслідок інтенсифікації ¡сисних процесів Забезпечує корінну перебудову анаеробного і ае-обного енергетичного обміну. Така,перебудова зумовлйс вмикання ільа швидкого варіанту циклу Креб.са, який приводить до лркскоре-ото утворення ^{-кстоглутарату і янтарної-кислот:: череп гпанг--міназшіі иунт. П;о роль трансаглназ у ранніЛ період ко*яекса-і: нергетнчного дефіциту свідчать дослідження, у яких встановлене шіження змісту аденіннуклеоткдів у печінці ( на 75%, р'С,05) зтіаенч-; резистентності тварин, яким, ло гіпоксі; вподдл:; ікгі-ітор трансаміназ - амінооцтову кислоту.

Особливе значення має підтримання високого окисно -відновного ютенціалу нікотинамідів для акійваціх ліпідного'обміну - потужно-■о джерела багатих на енергію сполук, а також найбільш ємкісного іепо пояню. Якщо зростання ЇХ'концентрації, у’зкащіьіі.цечінші.ЗЕ. . тварин у перпі хвилин»! екстремального сїану забезпечує постачак-ія водню в окисно-відновні процеси і синтез АТй, то через З гсд. таке зростання є вже наслідкон синтезу,- який сприяє використанні) іроміжних багатих на водень сполук у ендергонічних реакціях.Така разова спрямованість ліпідного обміну не тільки забезпечує коїззен-:ацію Енергетичного дефіциту, що розвивається у ранні періоді; вкстрегляьногб' стану", зле і спр’.іпс адаптаційній перебудові обуін-щг/. процесів, оскільки зростання вмісту таких недоокислеїшх метаболітів, як кетонові Тіла, молочна кислота і аміак у перехідні періоди екстремального стані' й печінці БР тварин при високій спряженості активує ферментативніїх «икооистакня як у

енергетичному, так і у пластично^ обміні. ' •

Інша спрямованість білкового, ліпідного і вуглеводного м боліаму виявлена у HP тварин. У відповідні періоди екстремаль: стану нагромадження НАДН приводить до переваги ліпідного обмі; над білковин і алостеричкого інгібування піруватдегідрогенззи та активації піруваткарбоксклази, що сприяє нагромадженню ¡дав вооцтової кислоти і пригніченню сукцинатдегідроґеназк, a в к і цеваму результаті - виникненню значного енергетичного дефіцит Така ситуація також зумовлює порушення регенерації у дентозоф ному циклі трансгідрогеиазних реакцій і пригнічення використа НДЦя та ацетилСоА для синтезу жирних кислот, а значне зменией АИ пригнічує глюконеогенез і синтез білку.

Підтвердсзниям розйитку такої дискоординації головних ме лічних шляхів, які в основноцу підтримують інтенсивність окис зідновних процесів, е значне зростання вмісту молочної, глуте вої і жирних кислот, а також кетонових тіл, що відзначається тканині печінки HP тварин вже у перші годині: після екстремалі гіпоксичного впливу. . • : : ■ ' ‘

Основною альтернативное реакцією кошексації енергодефії в даних умовах с надмірне нагромадження янтарної кислоти, які безпечуе 'реахтиваців сукцннатдегідрогеназн і екстренне відної синтезу АТй та корекції інакх порушень, що а часом (на 3-тю -добу) завершується повнов нормалізацією 'метаболізму. Проте в умовах формування адаптаційно-компенсаторних реакція моядиве відсутності у цей несприятливий інтервал часу повторних ексті мальних впливів. Як показують результати досліджень, повтор» (через 24 год.) дія гіпоксії чи інших екстремальних факторів водить до значніших- порушень еггряженостт обкіиптх процесів і витку.всіх проявів дистресу. . ^ ■ :

Виявлена пряма кореляційна залежність (1= 9,1) характе змін вищезгаданих метаболітів у плазмі крові і тканині печін ВР і HP тварин с важливим свідченням того, що напрям і спряж обмінних процесів, що визначають окисно-відновний потенціал тинного рівню, забезпечує їх остаточну інтеграцію на рівні о нізму. ' , ' ■ '

5. Вивчекія ролі метаболічної корекції у механізмі 1 формування адаптаційног-компенсаторних процесів Комплексний аналіз біохімічних досліджень ролі інтенсиі потужності і спряженості окисно-відновних процесів у неханіс

Ьрмування адаптаціГіно-компенсяторних реакцій дає можливість ЗгруКТузаїі! ряд принцип і з регуляції обмінних процес ІЕ І ВИЯВИТИ х спрямованість, чо характеризує структурно-метаболічну ефектив-ість перебудови функціонуючих систем. Проте виявлення визначаль-і:х ланок у механізмі формування, перехідних процесів і показників, ::і кайоб"сат!ізніше інформують про адекватність реалізації адзп-шійних реакцій організму, ще вимагає ряду уточнень. -

У даній сері! досліджень селективне підвищення інтексигаос-

і, поі’уяності і спряженості окисно-відновних процесів, викликане зливом фаршрепаратів, дало можливість встановити кореляційну ілежніеть між досліджуваними метаболічними параметра!,»: і станом ісугстичного обміну, характерного для окремі;: організмів у екг-земальних ситуаціях, а також обгрунтувати ряд закономірностей ¡гуляці ї обміну речовин на рівні метаболітів і кофакторів та ;інити їх ефекторні прояви на клітинному, органному і систецному :внях. ... _

Безпосереднє підвищення вмісту піридиннуклеотидІЕ у клітинах ічіііки.лід.лпливом!иікотинаміду показало, ще інтенсифікація окис-[х процесів, підтриг<увана високим редокс-потенціалои, якиіі зрзс-п після введення нікотинаміду і дії гіпоксії у крові : печінці ’ і К? тварин, е визначально» для інтеграції спряженості прочін-і’о обміну, а таког для підтримання ефективності впкзристаїсід ■дссг:;іслелих метаболітів у адаптаційних процесе:: (табл.5).Осзб-ви вагліізс значення у підтриманій редокс-яотенціалу ЛиД:. співвідношення окислених і відновлених метаболітів, і такої: лехних від них метаболічних станів, які формуються у перехіл-й період стресу, має інтенсивність переносу протонів і електро-

в.у дихальному ланцюгу, що в основному визначає його потужність.

При перевірці цієї залежності було підтверджено, цо попереа-(перед гіпоксією) введення окремих ко;/лонентів дихального ланга (убіхінону і цитохрому с), які значно підвищують потужність го "вузьких місць", сприяє зростанню редокс-потенціалу НАД^ЛіАДВ вмісту окислених метаболітів у’ тканині печінки і сироватці зві і високо-; і низькорезистентгегх шурів (табл.5).

Проте окисно-відновний потенціал НАД+ДіАДгі у ВР тварин зрос-з у значно' більшій мірі, нік у НР. Така відмінність зумовлена ,і,цо у НР щурів при гіпоксії більце виражена деструкція міто--ідріалбних мембран, і введення окремих компонентів дихального -щегз не сприяє їх фіксації .і.відповідно.. інтенсифікації окис-

. -24- • ■ = ■ ■

них процесів. Про це свідчить більш значйе зростання у плазмі ■ крові ПОЛ - одного з провідних і пускових механізмів поруаекня ,ліпідно-білкових взаємодій і модифікації мембранних ферментів. У дослідженнях на групі КР тварш було показано, що підвищення потужності окисно-відновних процесів попереднім введенням перен щиків електронів (цитохрому с,убіхінону) і стабілізаторів біоие ран (фосфоліпідів та «»¿-токоферолу) значно підвиїцувало адаптаційну ефективність такого типу корекції (табл.5).

. ' Таблиця 5. •

: Вплив нікотинаїлду, цитохрому с, убіхінону і токоферолу на концентрацію метаболітів (икмоль/г тканини) і окисно-відновний стан вільних НДД-пар у печінці НР іцурів через 3 години після ГІП0КСИ'4Н0Г0 впливу ( п = 6) Ф ■

Умови : Лактат ' Піруват • В -Окси- : ¿¿-Кето- :НАД+Жй

. • ' '■ : оутират ; глутарат

Контроль 2,4*0-,07. 0,10*0,01 0,25-0,04 0,12*0,02 375,00*5

Гіпоксія 3,І±С,05 0,06*0,00 § 1 О 0,07±0,00 ^173,25*1

р 4 0,05 р ¿0,05 р<0,05 Р ^ 0,05. р<0,С

Нікотин- 2,4*0,02 0,11*0,03 0,21*0,04 0,19*0,02 412,91*2

амід + гіпоксія р < 0,05 р >0,05 ’ р< С,05 .? с 0,05 р<:0,С

Іфітохзом 1,9*0,06- 0,14*0,01 0,15^0,04 0,25*0,05 678,09*2

с + у5і-хінок + р > С ,05 . ріС.0,05 ,р <-0,05 р ¿0,05 Р40,С

гіпоксія

Штохроу а + уоіхі-нон + . 1,6*0,05 р*-0,05 0,24*0,05 р 4 0,05 0,08*0,01 р< 0,05 0,33*0,07 1386,25*Є р*-0,05 р4 0,0

токоферол*

+ гіпоксія • ■ і ■ .4

.Оскільки висока інтенсивність і потужність ОКИСНО-ВІДНОВНІ' процесів залежить від окисленості НАД* і термінальних ланок дихального ланцюга, а також від рівно ендергонічного відновлена піридккнуклеотиді в, то вивчення спряженості цих процесів дало можливість виявити найбільш суттєві фактори і критерії ’ спрямув£ ня потоку речовин і енергії при переході функціонуючих структ^ в одного стаціонарного стану в інший. ,

Експериментальні дослідження з введенням чурам до гіпоксії унітіолу, який підтримує високий рівень сульфгідрильних груп і

івнгус активність ферментів переносу електронів у дихального щагу та,окездоредукців вільних нікотинамідів, показали, цо іхронне зростання активності дегідрогеназ та оксидоредуктаз ; тканині печінки, і в лімфоцитах І табл.б) підвищувало ефек-зність адаптаційного процесу у ЕР тварин при гіпоксії, цо вира-Ю-.Ь у дсозсратному зростанні їх загальної резистентності.

Отже ефективність метаболічної корекції окисних процесів за-¡лечується послідовним підвищенням огсисно-відновного потенціалу ) ад+ЛіДЩІ, збільшенням.потужності переносу електронів у редокс-ішзгу, а також інтенсифікацією циклічних донорно-акцепторних ре-іік та залученням різних метаболічних иллхів До циклу Кребсг, що ’енскфікус потік вільної енергії*і забезпечує її елективне вико-:тання в різних синтезах. Про це свідчать результати досліджень ібл.6,7),_у яких НР щурам після екстремального впливу гіпоксії ідили комплекс фармакологічних препаратів (нікотинамід, укітіол, ?охром с, фосфоліпіди, токоферол і глутамат), який, підв,ицупчи :енсквиість і потужність окисних процесів, сприяв зростанка ¡яженості і ефективності адептпційної перебудові:. Цо виражалося :короченні перехідного період;' і е змінах такі;:': параметрів енеї'-'ичного обміну, як стан окисно-відновних процесів, активність :іідоредуктао та швидкість утилізації недооккслеїшх метаболітів, шлчення яких у арові иайбільп інтегрально характеризує основні ши мобілізації, реалізації і актуалізації обілніг,:” процесіп при >муванні нового стаціонарного стану. ■

Необхідно відзначити, що посилення окисно-відновних процесів і дії застосованого нами фармкомплексу і гіпоксії, як показали :лідження, забезпечується не тільки зростанням, потоку метаболі-і і електронів, але і за рахунок збільшення вмісту коферментів іерментіз дихального ланцвга. Таке підвищення потужності оішсно-шовних реакцій корелює з-резистентністю організму і показує, спряженість катаболічнйх і анаболічних процесів на вищих рів: інтеграції визначає напрям і ефективність адаптаційної реакції, ?акож об"єктивно інформує про адекватність реакції організму на ¡тр.емальні впливи.. . ' _

Це’підтверджують однокзправлені зміни в тканині, печінки і ' ¡троцитах активності Г-5-5ДГ - ферчєнта,, який найбільш інтеграль відображає напрям синтетичних процесів організму і активність іго при розвитку неадекватної реакції у НР тварин двократно зни-:ться і в печінці,1 і с ези-роштах, а аж профілактичній тл ліку-

. ' Таблиця 6.

Зміни активності ферментів дихального, дшщага иітохондрій тканини печінки і лімфоцитів НР щурів при введенні до гіпоксі унітіолу (шшоль/хв. *г тканини, п=б)

Умови І ІР : печінки І НАДН-ЦР ; печінки : с-цр ; печінки і ОЦГ І ■ од : печінки Í лімфо;

Контроль 3,24*0,29 (до ГІПОКСІЇ) З.год. 1,50*0,01 ПІСЛЯ р / п п£ч ГІПОКСІЇ • Р<и,ио Унітіол, 4,73*0,25 З.год. р 4.0,05 ПІСЛЯ ^ ’ ГІПОКСІЇ 1,78*0,11 0,76-0,07 р с0,05 1,92*0,10 р <.0,05 1,71*0,07 0,61*0,20 p¿0,05 2,51*0,35 р<.0,05 0,67*0,04 7,54* 0 0,35*0,02 3,72*0,1 p¿0,05 p¿0,0¡ 1,17*0,03 13,42*0 р <0,05 р <0,(

’ , ’ Таблиця 7, Зміна вмісту метаболісів вуглеводного і ліпідного обмін;' (мкмоль/г Тканини) та окисно-відновного потенціалу НАД-пар у і НР щурів при введенні фармкокплексу препаратів (нікотинаміду, цитохрому с, убіхінону, токоферолу, глутамату (після гіпоксії

Умови .І ' Лактат 4 1 Піруват • І НАД+/ОД • . : д-икск- : ■ т : 'бутират : ***

Контроль 2,13*0,07 0,08±0,01 337,83*16,31 С,23*0,01 120,8Г

(до гі- . . .

поксії) .

З.год. 2,92*0,08 0,04*0,00 123,43*6,37 0,45*0,02 184,61=

Йпоксії Р< 0,05 • р¿0,05. p<Qr05 , р<(

Введення 1,54*0,08 '0,17*0,ОХ 994,49*44,13 0', 12*0,04 82,40*5

комплексу, р ¿0,05 P¿0,05 р<0,05 р/

після . .

гіпоксії ' . .

вальній дії комплексу препаратів (нікотинаміду, цитохрому с.укі-тіолу, токоферолу, глутамату і фосфоліпідів) підтримується на оптимально«у рівні. _' . -

. Отяе, як свідчить проведений аналіз результатів власних досліджень і даних літератури, основнаї: принципом йиттєдіяльності, адаптації і розвитку органі зг.'у є інтенсифікація окисних процесів, яяа забезпечує найбільш ефективну мобілізацію і засвоєння вільної енергії при функціональній активності. Реалізація цього принципу по суті забезпечується потужністю структурно-каталітичного і суб-стратно-енергетичного потенціалі' функціонуючих систем, -є такон адекватністю реакції організму на відповідні стимули екзо- і ендогенного походження, при яких підтримується весь комплекс спряжених катаболічних і анаболічних реакція. Неадекватне реагування організму, яке розвивається під впливом факторів різної природі: і інтенсивності - і сильний, і слабких - при інтервалах їх повторно! дії, що синхронно не співпадають з періодом завершення перехідного процесу, в основному виражається дисбалансом екзергонічних і ендер-гонічнях- реакцій, 'паї приводять до.значних поруаені градієнтів концентрації субстратів, необхідних для підтримана" нового стаціонарного стану біосистемп.

Виявлені прикииш мають важливе значена', і у *уцдаменїально:£, плані для дальшого вивчення еволкціаного прогресу глттсдікльності організмів, і у прикладному віднесе.*--.і длл вироблення нові:;: методів оцінки ефективності розвитку здаптаційно-кошенегторикх процесів і раціональності впровадження в практику різних схем профілактичних і лікувальних впливів, які б змащували неадекватність реакції організму в різних екстремальних сигуаціях.

Врахувалик тоютг жгчн::х повемшків«. як стан, і напрям

окисно-відновнихп процесів, співвідношення окислених і відновлених метаболітів вуглеводного, ліпідного і білкового обміну, а також спряженість кисневозалежшіх реакцій і катаболічних і анаболічних процесів дає можливість не тільки характеризувати інтенсивність мобілізації і засвоєння вільної енергії у окремих метаболічних станах при формуванні нових стаціонарних рівнів, але сприяє визначенню причин екзогенного і ендогенного походження, які порушують механізми підтримання належної інтенсивності при неадекватних впливах і реакціях організкіу. .

' Така оцінка в надзвичайно важливою-вгумовах-інтенсивного науково-технічного прогресу,* де летййй-яй^ніколи,відчуває єі:с?ре-

.. ' -28 - ' мальність у всій складності, коли особливо необхідна раціональна .регламентація екзогенних' екстремальних впливів і корекція ендогенної стимуляції інтенсивності, потужності і спряженості внергетичг ного і пластичного обміну при формуванні адаптаційних реакцій організму. , ' . , ~

Не меншу роль дані принципи відіграють при їх впровадженні в клінічну практику при розробці високочутливих тестів, що дасть можливість визначити найраніпі порушення енергетичного і пластичного обміну при різних неспецифічних дистрофіях і специфічних патогенетичних процесах, а також у .безпосередній організації івдивіду-альних схе?.і лікуваякл з застосуванням фармакологічних препаратів, що забезпечують підаицення потужності і спряженості окисно-відновних процесів, відновлення інтенсивності енергетичного обміну біо-систец те нормалізацію реактивності організму. .

• . ВИСНОВКИ : .

1. Механізм формування перехідних адаптаційних процесів в

основному реалізується через мобілізаційно-компенсаторні фазові зміні!, які забезпечусь своєрідну струхтурно-ме?аболічі:у перебудову стаціонгрн;:?: сгаігів. . \

2. Ефективність циклу фазових змін гдадтацік-гої реорганізації

досягається при угоні, кзг.: стимуятчі впливи прк наявній потужності *ункці опальна: засобів забезпечують постійне перетворення енергії е спряжених метаболічних ароцеоах при переході на новий стаціонарний стан. Основними.параметрами, які визначають ефективність адаптаційної перебудови організму при екстремальному впливі, є інтенсивність окисних реакцій, потужність функціонуючих структур' і спряженість обмінних процесів. • .

■ 3. Інтенсивніств • одгсно^відновних рсакцтй- мітохоздрій леаю*ь в основі формування перебудови енергетичного обміну на рівні організму і є пусковою та найбільа інформативною ланкою, що визначає , напрйц перехідних процесів, які характеризують, повноту мобілізації енергетичного потенціалу і його засвоєння в різних еццергонічних реакціях, що забезпечують стабілізацію клітинних мембран і супер-компенсацію ферментативних і функціональних систем. .

4. Вища потужність енергетичного обміну у високорезистентних організмів, у яких вмикання компенсаторних і суперкомпенсаторних процесів е більп сввдким, ніг у низькорезистентних, вказує на те, іцо даний парами обміну є_<5ааисвш.:.у механізмі адаптаційної перебудов!: і найкраще піддасться корекції для підтримання актив-

сішсних реакцій і ефективності мобілізації та засвоєння здічної онаргії при' формуванні нового стаціонарного стану.

5. Ступінь ''спрявення кисневозалеяних реакцій у перехідний а реально характеризує адекватність адаптаційних реакцій вллє більш тонкі, корелятивні зв"язки між їх складовиші, зсоляе раціональне використання коригуючих ВПЛИВІВ ДЛЯ щзаня ефективності' адаптації.

6. Структурно-метаболічні та фізико-хімічні параметри, які рально визначають взаемозв"язок інтенсивності, потужності яжеиості обмінних процесів на різних рівнях організації ¡існуючих структур, с основний показником, цс характеризує ' іення метаболічної анергії та Ефективність костенсації і ■ації організм в екстремальних умовах. .

7. Тривалість адаптаційної бтрухтурно-метабодічної перебу-функціонувчмх систем на рівні оршйзиу визначає його реак-:сть і толерантність’ до різних екстремальних впливів, а та-:арактеризує швидкість, перехідних процесів на рівні метабо-іх систем, що дає можливість прогнозувати апєквзтність рсак-зри повторній дії ’різних екстремальних факторів. -

8. Невідповідність періодичних екстремальні;:-: впливів до інгуського часу реституції приводить до зниження ефективності 5єння вільно: енергії, що вказує на необхідність екстре.чко: кггії реяику тривалості і частоти дії різних факторів.

3. Метаболічна гсорекція, слрямояанг на підвищення адгшть-ої ефективності неадекватних реакцій організму, в основ-полягає у раціональному застосуванні фізичних і хімічних вів, спрямованих на підтримання належної інтенсивності, по-остгг спрякеностт обипрвпг реакцій,' ял здбеаиечургв зтлгк-я тривалості перехідних процесів і підвищення резистентності нізму. .

- зо -

; СПИСОК РОБІТ, ОПУБЛІКОВАНИХ НА ТЕМУ ДИСЕРТАЦІЇ

І.1, Тимочко M.S. Залежність, розвитку компенсаторних прої від рівня енергетичного обміну // Тези доповідей XI з"їзду 2 ського фізіол. товариства. - Київ: Наукова думка,1982. -:С.<

2. Тимочко M.S. .Мисаковець О.Г. Особливості забезпечені електролітного гомеостазу в клітинах з різним рівнем енергеї обміну // Тези доповідей XI з"хзду Українського фізіол.това^

- Київ: Наукова думка, 1982. - С.408. '

3. Мксаковець О.Г., Тимочко M.S. Особливості обмінних сів в тканинах речінки і слизової оболонки тонкого киаечникг при дії гідрокортизону // Тези доповідей ІУ Українського біс з"їзду. - Київ: Наукова думка, 1982. - 4.2. - С.98.

4..Тимочко M.S., Терлецька 0.1., Ткаченко О.Р. Вплив ад ну на деякі показники енергетичного і пластичного обміну в р тканинах щурів // Тези доповідей ІУ Українського біохім. з"ї Київ: Наукова думка, 1982. - 4.2. - С. 201-202. ■

І. Тимочко M.S., Терлецкая 0.11., Шсаковец А.Г, Слецифи компенсации пострадиационных изменений клеточных структур' с кыг уровней внергизациг. // Тезисы докл. I Бсесопзк. биофпз. K., 1962. - С. 133-134. . . -

6. Тимочко M.S. Метод совместного определения перёкнсно

ления липидов к антиокислительной активности в клиническэП п хирургического лечения заболеваний печени // Рекомендации по зультатам научных исследований для внедрения в практику:Хир Львов, 1983. - С.30. .

7. Еанаспк Е.К., Мисаковец А.Г., Тимочко M.S. Роль инте;

ности и сопряженности окислительно-восстановительных процесс поддержании электролитного гомеостаза // Физиол. журн. - 198 T.3I, » 3. - С. 296-301. '

8. Тимочко Ы.Ф. Роль кисневозалежних реакцій у механізм мування компенсаторних процесів // Тези доповідей У Українсь: біохім. з"їзду. 4.2. - Київ, 1987, - С.258.

. 9. Тимочко M.S.,Ясницкий P.C., Шлемкевич М.П. 0 значим* кислородзависимых реакций в поддержании кислородного гомеості при экстремальных состояниях // Тезисы докл. научн.конф. "Бт медицине". - Л., 1988. - С.187.

-IQ. Тимочко M.S. Определение активности перекисного окі липидов для дифференциальной диагностики заболеваний печени ,

¡ьнке випроси клинической хкрургші. - Львов, ISSB. - C.94-S5,

. II. їиночко. Іі.55., /шсхсевич-Я.ІІ. Особенности изменения ІГІІСЛО-•;сго баланса гір;: гипокспчесноГ: гипоксии // Проблема патологии ¡сперименте и клинике. - Льзос, 1959. - Вып.П. - С.32-33.

12. Перекисние процессы п ’яітолоцдрилх при гидразиновом поре-:і: почепі: и профилактическом действии «^-токоферола / Е.И.Паня-

’u',3,ïhvo4Ko, З.В.Мартштк :: др. // Проблевд патологии в экс-і менте V. клинике, - Львов, 1959. - Вып.П. - C.Su-9I.

13. Тимочко I.Î.S.,.Мартынюх В.В., Ковальчук С. , Влияние акти-иачтй нонола к; энергетические процессы е мнтсхоццриях печен;;-'// >яе**ы патологи:: в эксперименте -и. клинике. - Львов, I99C. - Вкя.

- С. 67-65. _ .

И. Ти!.:очтсо М.5., Мартынам? В.Б. ,Ковальчук С.К. Влияние анти-гданта ионола на процессы переішеного окисления липидов ЛІ0Л/ ¡тохондрил:: печени // Проблею:. патологии в эксперименте и клини-

- Львов, 1990. - Вал. 12. - С. 68-59. . ' '

15. Ясниськип Р;С. Мисаковець О.Г., Тиночко Î.Î.5. Зміни нал-:ir. nz інтенсивності опреш:: метаболічних ланок-.при екстремаль- _ станах організму //Збірник матеріалі:; XI с "їзду Українського :ол. tc^p^vtü. - Київ: Наукова думка,1990. - Т.2. - С.203-204.

І С. Марты'-"'.< D.B/, ІСовальчук C.Ü., Ті».: очко !■!. І. .1"оі::лп;:т::чсс-действне антиоксидантов пр:: гідразиново:- пораненні, пвчен.!: //

:ск докл. il сьезда фаруакологоь І'ССР п іермакологип: состо.чниг: :рспектпви исследований". - Харьков, 1990. - С.201-202.

17. ’Индекс антиокислитсльной активности биологического материа-! В.Б.Мертыкюк, С.Н.Ковальчук, М.Ф.Ьщочко и др. //Лаб. дело. -[. - » 3. - С. 19-22. - . . ;. ■ • ■ . ,

16. Скляров А.К., ГГанасюк ЕЛ.,' Дінотпга-Й1.'®.' Отглителвяо-вас-~ швительные реакции и напряжение кислорода в слизистой оболочке до»-крыс'при действий медиаторных веществ // Физиол.журнал

3. - І99І. - Т.77, R IO. - С. 86-92.

. 19. Тимочко M.Q., Коробод З.К. , Федорович И.П. Антиоксидант-свойства окси- и метмиоглобина //Укр. биохим. журнал. - 1992.1, $ 5.,0.83-65. ,

20. Використання' видових і тканинних ' особливостей енергетич-та перекисних процесів для моделювання різних рівнів неспеци-гої резистентності організму / !.!.$. Тимочко, В.Б.Мартинак,

. Терлецька та ін. // Тези доповідей'-Укдаїкьької • науково-прак-їо; конференції' "Актуальні питання-використання лабораторних

тварин в медико-бiолoriчних дослхдквкнях", - Чернхвцх, 1992. '

- 21. Изучение роли метаболического фона в формировании отве

ной реакции ори моделировании различных типов адаптационного пр цесса / Ы.Ф.Тиыочко, Я.И.Алексёвич, В.Б.На^тынюк и др. // Тезис ' докл. меадунгр. сишозиума "Лабораторные животные в медико-биол гических и биотехнологических исследованиях". - М., 1992.

■- 22. Даниленко М.В., Банась D.K., ГоШш Е.А., Цедына И.Р.,

Осадчих Т.В., Гуренко Е.С., Тимочко М.®. Способ определения фу* нального состояния центральной нервной систем. А.с. .1426542 А : СССР, А 61 В ЮЛЮ, 01 М 33/48, Заявлено 24.07.84, Опубл. 30. Бш. Р 35. - 3 с. '

23. Мартынвк В.Б., Ковальчук С*Н., Ъшочко 1!.5. Способ ощ лония антиокислительной активности сыворотки крови. А.с. I425K А I СССР, 01 № 33/43. Заявлено 05.03.64. Опубл. 23.09.63. Беи № 35 - 2 с. -

. 24. Маслова А.И., Зименкоьский Б.С., Тыг.очко M.S., Алексе« Я.И. А/ - 9 - йлуорвнилиден) - Л/ - ( 5 - броксалицил) гидразид, обладающий антигипоксическим действием. А.с. I57380C А ‘I СССР,

С 07 С 243/33, А 61 к 31/16 Заявд. 21.09.88. Зарег. 22.02.90. -

1 -25. Pavlovnky ii.F.„ Boyko ¡..I., ^ecarcnko Г.I., ,1'yxaochku Changes of lipid peroxidiiation in diabetic parier.tr before ы ufter allotraasplbntetioa of pancreatic islet o&II culturt // < Internatioukl eyspociux Troncplaat&tiob of endocrine рьдегеи*.

lbstracte.- ’/r^jbckt. Bt-njt., Yu^oelevin, October 27-2У, lOtt.-.

, 26. Tymochko !~,F., Alekaevich Уь.Х., Bobkov jfu.G.,

Kovalchuk S.;-. ihtrraucological fcodification of. AnienJ. Survive under Hypoxic Conditione // JDZJ2TA; -T99I* - Т.'ЭЭ,Uj 1.-ЛЭ 27. Orel G.L., Kolociytsev-Y.I., Piivlovskjr K.P., Ty=?ochko Posoibility of lipid peroxidation.indiceB use for prediction о eurgeiy outcposee in malignant obstructive jaundice // lot Alps /Adrib congress on Hept.to-puncree.to-billlar eursery. bnd medicin Abstract book.- Ljubljana, Sloveaia, Ь.ву 7-9, 1992.- P.21.