Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Механизм повышения резистентности организма животных под действием растительных полисахаридов в норме и при патологии

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Механизм повышения резистентности организма животных под действием растительных полисахаридов в норме и при патологии"

На правах рукописи

СЫЧЕВ ИГОРЬ АНАТОЛЬЕВИЧ

Механизм повышения резистентности организма животных под действием растительных полисахаридов в норме и при патологии

03 00.13 - физиология 14 00 16 - патологическая физиология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук

Москва 2008

003168992

Работа выполнена на кафедрах нормальной физиологии и патологической физиологии Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Российский государственный медицинский университет Федерального агенства по здравоохранению и социальному развитию»

Научные консультанты, член-корреспондент РАМН, доктор медицинских наук, профессор Геннадий Васильевич Порядин; доктор биологических наук, профессор Виктор Михайлович Смирнов.

Официальные оппоненты- доктор биологических наук, профессор Раевский

Владимир Вячеславович, ГУ НИИ высшей нервной деятельности и нейрофизиологии РАН, доктор биологических наук, старший научный сотрудник Саноцкая Наталия Владимировна, ГУ НИИ общей патологии и патофизиологии РАМН, доктор медицинских наук, профессор Воложин Александр Ильич, ГОУ ВПО Московский государственный медико-стоматологический университет.

Ведущая организация

Московская медицинская академия имени И М Сеченова.

Защита диссертации состоится «11_» июня 2008 г. в 13. часов на заседании диссертационного совета Д 212.203 10 при ГОУ ВПО Российском университете дружбы народов по адресу. 117198, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, д 8.

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке ГОУ ВПО Российского университета дружбы народов по адресу 117198, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, д 8

Автореферат разослан « 05 » мая 2008 г.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор медицинских наук, профессор

Н, В. Ермакова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы

Повышение резистентности организма, противостоящего воздействию неблагоприятных факторов внешней среды, - наиболее актуальная задача современной медицины. Состояние организма и направленность протекающих в нем процессов контролируется взаимодействием трех систем: иммунной, нервной и гормональной. В связи с общим ухудшением экологической ситуации необходим поиск различного рода биологически активных соединений природного происхождения, стимулирующих функции иммунной системы

Лекарственные препараты, созданные из природного сырья, обладают целым рядом преимуществ перед синтетическими, они легко усваиваются организмом человека или животного; как правило, не обладают побочными эффектами, очень редко проявляют токсичность Широко распространены в различных климатических зонах растения Донника желтого (Melilotus off), издавна используемого в народной и в официальной медицине. Растения Донника входят в состав мягчительных и слабительных сборов, применяются в качестве припарок, как местное раздражающее и отвлекающее средство [Гаммерман А Ф, Гром И. И, 1976], его отвары и настои понижают возбудимость нервной системы и используются при неврастениях и кардиоспазмах, бессоннице, истерии, обладают свойствами антикоагулянтов и способны снижать артериальное давление.

Настой, отвар, а также мазь с цветками Донника применяют при фурункулезе, гнойных ранах, отеках суставов, при воспалении среднего уха [Чиков П. С , Стекольников JI. И, Мурох В И, 1972], для лечения бронхита, бессонницы, мигрени в виде ванн и компрессов

Мелиоцин (препарат га листьев Донника) является достаточно сильным биостимулятором, превосходящим биостимулирующее действие экстракта алоэ [Гаммерман А Ф, Гром И И, 1976].

Полисахариды стимулируют иммунную систему организма, усиливая процесс фагоцитоза, увеличивая количество антителообразующих клеток и продукцию ими антител, повышают количество лимфоцитов крови, лимфоидных органов [Смолина Т П и др, 1994, Афанасьев В А и др, 1999, Мансимова О В и др, 1998, Конопля Е Н и др, 1998, Назарова И В. и др, 1999]

Установлен факт активации процессов кроветворения некоторыми полисахаридами, особенно процесса эритропоэза [Гольдберг Е Д. и др, 1997, Захаров Ю М, 1994; Федорова И М, 1996]

Полисахариды растений активизируют ферментные системы клеток крови, ускоряют заживление ран

Растительные полисахариды повышают уровень обмена веществ, при введении в организм, что способствует процессам регенерации и роста, усилению пролиферации наиболее быстро делящихся клеток Есть данные о том, что полисахариды растений защищают организм от облучения

[Фриденштейн А. Я, Лурия Е А., 1980; Филиппова С А., 1990; Лебедев В Г. и др., 2000; Симанина Е. В. и др. 1997; Иванов С. Д, 2000].

Механизм действия полисахаридов на организм человека и животных еще не достаточно изучен. Есть лишь некоторые отрывочные сведения о спектре биологической активности полисахаридов различных растений.

Поэтому важно изучение механизмов стимулирующего действия на организм биологически активных структурных полисахаридов растений Донника желтого: ВРПК - водорастворимого полисахаридного комплекса, и ПЕКТИНА - смеси пектиновых веществ - полисахаридных комплексов ВРПК и ПЕКТИН образуют поверхностную часть клеточных оболочек и межклеточный матрикс растительных фотосинтезирующих надземных частей растений

Учитывая современное состояние фармацевтической промышленности, доступность сырья и низкую стоимость получения природных полисахаридов, изучение механизмов их действия и внедрение их для использования в медицине и ветеринарии является актуальной задачей.

Цель и задачи исследования

Целью настоящей работы явилось выявление основных эффектов полисахаридов Донника желтого на организм здоровых животных и при патологии и изучение механизмов их реализации.

Достижение поставленной цели предполагало решение следующих

задач

1. Исследовать влияние препаратов полисахаридов Донника желтого на организм здорового животного (физическую работоспособность; изменение массы тела; состояние органов иммунной системы - изменение массы и структуры тимуса, селезенки, костного мозга, их клеточного состава; кроветворение, клеточный и биохимический состав периферической крови, активность фагоцитоза, ферментных систем клеток крови, клеток иммунной системы) и характер суточных и сезонных биоритмов.

2 Изучить действие полисахаридов на процессы кроветворения в организме животных при анемии (состояние костного мозга и селезенки; количество и качество кроветворных эритробластических островков, клеточный и биохимический состав периферической крови)

3. Исследовать противовоспалительное действие полисахаридов (по характеру развития воспаления, составу периферической крови; активности ферментных систем клеток крови и фагоцитарной реакции, перекисному окислению липидов; выраженности антиоксидантной реакции)

4. Изучить радиопротекторное действие полисахаридов Донника желтого (по состоянию органов иммунной защиты - тимуса, селезенки, костного мозга; уровню физиологической активности клеток тимуса, селезенки, костного мозга и уровню продуцируемых ими молекул, клеточному составу крови).

Научная новизна работы

В условиях эксперимента впервые установлено, что полисахариды Донника желтого ВРПК и ПЕКТИН повышают неспецифическую резистентность организма здоровых животных и усиливают их физическую работоспособность за счет активации ферментных систем АТФ-азы, оксидаз, усиления процессов синтеза веществ клетками организма, стимуляции процессов гемопоэза

Выявлено, что полисахариды ПЕКТИН и ВРПК оказывают противовоспалительное действие, восстанавливая структуру костного мозга и селезенки, увеличивают количество, лимфоидных фолликулов, клеточность Т- и В-зон белой пульпы селезенки, нормализуя клеточный и биохимический состав крови, стимулируя клетки моноцитарно-макрофагальной системы, увеличивая в них количество РНК и синтез молекул-регуляторов (гликопротеинов, протеогликанов, гликозаминогликанов), повышают уровень функциональной активности и количество оксидазных и гидролитических ферментов и фагоцитарной активности клеток за счет активации гидролитических ферментов и пероксидазной и каталазной ферментных систем, повышения антиоксидантной активности мембранных ферментных систем клеток.

Установлено, что полисахариды стимулируют гемопоэз при анемии, частичном и полном облучении средними дозами 7-лучей, увеличивая количество эритробластических островков костного мозга и селезенки, клеточность этих органов и их массу, количество эритроцитов и гемоглобина в периферической крови

Теоретическая и практическая значимость работы

Научные положения диссертационной работы углубляют представления о механизмах биологического действия полисахаридов из Донника желтого, расширяют возможности их практического использования

Полученные данные о механизмах стимуляции полисахаридами из Донника желтого процессов кроветворения в здоровом организме, при облучении и различных видах анемии делают возможным создание на основе ВРПК и ПЕКТИНА лекарственных средств и препаратов для стимуляции процессов кроветворения

Данные о механизме противовоспалительного и иммуностимулирующего действия полисахаридов, полученные в ходе исследований, могут быть использованы для коррекции воспалительных процессов различного генеза

Выявленная способность полисахаридов из Донника желтого повышать работоспособность животных может послужить основой создания кормовых и пищевых добавок на основе полисахаридов Донника в ветеринарии.

Результаты исследований биологической активности полисахаридов так же могут быть использованы в курсе лекций по органической химии, биохимии, физиологии для студентов и преподавателей, написания

методических руководств по использованию лекарственных растений и биологически активных полисахаридов растительного происхождения

Положения, выносимые на защиту

1 Полисахариды Донника желтого ВРПК и ПЕКТИН повышают неспецифическую резистентность организма здоровых животных и усиливают их работоспособность за счет активации ферментных систем АТФ-азы, оксидаз, усиления процессов синтеза клетками, стимуляции процессов гемопоэза

2 Полисахариды усиливают фагоцитарную активность клеток крови за счет повышения активности гидролитических ферментов и увеличения их количества

3. Стимуляция полисахаридами процессов гемопоэза, при различных видах облучения и в случае анемии осуществляется посредством действия полисахаридов на клетки моноцитарно-макрофагальной системы и клеток стромы кроветворных органов, синтезирующих молекулы гликозаминогликанов, протеогликанов и гликопротеинов - регуляторов процессов кроветворения.

4. Противовоспалительная активность полисахаридов связана с активацией ими ферментов пероксидазной и катапазной систем, с активацией процессов фагоцитоза, усилением антиоксидантной активности мембран клеток, а так же с активацией функций иммунной системы (с усилением выработки антител, с активацией Т-зависимого иммунного ответа)

Апробация работы

Основные результаты работы доложены и обсуждены на совместном заседании кафедры нормальной физиологии и кафедры патологической физиологии Российского государственного медицинского университета 06 12 2006 г

Результаты работы были доложены на межрегиональной научно-практической конференции «Социально-гигиенический мониторинг здоровья населения», Рязань, март 2000 г., межрегиональной научно-практической конференции «Социально-гигиенический мониторинг здоровья населения», Рязань, март 2001 г

Публикации. По теме диссертации опубликовано 25 научные работы из них- 3 монографии, 13 статей в рецензируемых журналах.

Объем и структура диссертации.

Диссертация изложена на 234 страницах машинописного текста Состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, обсуждения, выводов, практических рекомендаций и списка цитированной литературы, который включает 253 источника, из них 138 отечественных и 115 зарубежных. Работа содержит 18 таблиц, 4 схемы, 58 рисунков и микрофотографий, б

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследования

Работа выполнена на лабораторных животных 500 крыс породы Вистар обоего пола и 100 мышей породы Balb/c - обоего пола. Опытную группу составили 400 крыс и 80 мышей, контрольную -100 крыс и 20 мышей.

Животные получали полисахаридные препараты ВРПК и ПЕКТИН растений Донника желтого Melilotus off в дозах 0,5, 0,1 и 0,05 г/кг массы тела per os, внутривенно и внутримышечно.

Все животные содержались в стандартных условиях вивария В работе использованы следующие экспериментальные модели

1. Облучение животных в дозе 400 рентген

2. Модель асептического экссудативного воспаления

3. Анемия, вызываемая бензолом и вызываемая уксуснокислым свинцом

В работе использованы следующие методы

1 Получение полисахаридных препаратов из растений Донника желтого (по оригинальной методике)

2 Оценка физической работоспособности животных (плавательный

тест)

3. Гистологические, гистохимические, биохимические и иммунологические методы

Таблица 1

Общий объем проведенных исследований

Эксперименты Модели Количество животных Методы

крысы мыши

Влияние полисахаридов Донника желтого на здоровых животных (физическую работоспособность, систему кроветворения, кровь, иммунную систему) и характер суточных и сезонных биоритмов 210 50 Получение полисахаридных препаратов ВРПК и Пектин из растений донника желтого. Биохимические Гистологические Гистохимические Иммунологические Цитологические Биометрические

Определение работоспособности животных (плавательный тест)

Влияние полисахаридов Донника желтого на зкспериментал ьных животных в условиях патологии Модель частичного и полного обучения в дозе 400 рентген 140

Модель асептического воспаления 60

Модель бензольной и свинцовой анемии 90 50

Получение полисахаридов (по оригинальной методике) Для проведения исследований нами была разработана методика получения полисахаридных компонентов из Донника желтого.

1. Растения донника (Melilotus off.), собранные в фазе начала цветения, высушивали и измельчали.

2. Методом предварительной экстракции 60% этанолом удаляли из растительного сырья органические кислоты, полифенолы, аминокислоты, аминосахара, гликозиды и др

3 Экстрагировали ВРПК из предварительно обработанного и очищенного сырья горячей дистиллированной водой 1,5 часа на кипящей водяной бане

4 Осаждали ВРПК из концентрированного экстракта (в вакуумном роторном испарителе) 96% этанолом.

5. Очищали ВРПК 96% этанолом, ацетоном, эфиром, переосаждением

6. Экстрагировали ПЕКТИН из сырья, из которого предварительно извлекали ВРПК, горячим 1% раствором лимоннокислого аммония на кипящей водяной бане 1,5 часа.

7. Экстракты сгущали в вакуумном роторном испарителе или вымораживанием, ПЕКТИН осаждали из концентрированного экстракта избытком 96% этанола.

8 Очищали ПЕКТИН 96% этанолом, ацетоном, смесью спирта и эфира, высушивали и измельчали

9 Методом предварительной экстракции 60% этанолом удаляли из растительного сырья органические кислоты, полифенолы, аминокислоты, аминосахара, гликозиды и др

Таблица 2

Характеристика полисахаридов

ВРПК ПЕКТИН

1 2 3

Общая характеристика Аморфное вещество светлосерого цвета Аморфное вещество светлосерого или кремового цвета

Смешанный биополимер Смешанный биополимер

Пептидогликан Пептидогликан

Содержат полипептидную цепь Содержит полипептидную цепь меньшего размера

Состав моносахариды - глюкоза, галактоза, рамноза, арабиноза, уроновые кислоты, аминосахара - глюкозамин и галактозамин моносахариды - глюкоза, галактоза, рамноза, арабиноза, ксилоза, манноза, уроновые кислоты (в 2 раза больше) аминосахара - глюкозамин и галактозамин (в 1,5 раза меньше)

Молекулярная масса 87958,7-96565,3 72425,5-81587,4

Растворимость Растворяется в воде и в физиологическом растворе, образуя коллоидный раствор с рН 6,0-6,3 Растворяется в воде и в физиологическом растворе, образуя коллоидный раствор с рН 4,7-5,4, т к содержит больше уроновых кислот

1 2 3

Структура полисахарида Структурный полисахарид включает в свой состав инкрустирующие полисахариды, полипептидную цепочку, часть водорастворимых пектинов Структурный полисахарид включает в свой состав водорастворимые пектины, часть неводорастворимых пектинов, небольшую полипептидную цепь, пектиновую кислоту

Расположение и функция На поверхности клеточных оболочек и в межклеточном веществе, выполняет функцию агрегации клеток друг с другом в ткани, являясь тканевым и органным антигеном В поверхностной части клеточной оболочки и отчасти на поверхности оболочки, выполняя функцию скрепления волокон, гемицеллюлоз и целлюлозы и отчасти выполняет функцию рецептора, скрепляющего клетки между собой

По строению и функциям похож на гликозаминогликаны и протеогликаны животных, влияет на пролиферацию клеток и их дифференцировку По строению и функциям похож на гликозаминогликаны и протеогликаны животных, влияет на пролиферацию клеток и их дифференцировку

Полученные полисахариды использовали в биологических исследованиях

ОСНОВНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Эффект полисахаридов Донника желтого на интактных животных

Исследования показали, что введение в течение 8-10 суток полисахаридов Донника желтого подопытным животным в дозе 0,5 г/кг оказывало существенное влияние на общее состояние животных У них меняется поведение Животные становятся более спокойными, пропадает агрессивность. Шерстяной покров становится более густым. Под воздействием полисахаридов у подопытных животных повышается аппетит и увеличивается масса тела максимально на 30 сутки введения на 20,5% по сравнению с контролем под действием ПЕКТИНА и на 24,8% под действием ВРПК (рис 1) Рост массы тела обусловлен увеличением мышечной массы

У подопытных животных значительно усиливается физическая работоспособность (плавательный тест), особенно на 10 сутки приема препаратов, превосходя контроль в среднем на 38,4% (рис. 2)

Физическая работоспособность животных повышается за счет увеличения мышечной массы и активации №+,К+-АТФ-азы Все полисахариды оказывали существенное воздействие на активность фермента в концентрации МО"4 ВРПК превосходил контроль на 120% (т.е. в 6раз), а пектин был в 3,8 раза эффективнее контроля С понижением концентрации

до 1-Ю"6 активность препаратов ВРПК и пектин снижалась на 24,5%, а случае концентрации МО"8 их активность понизилась в 2 раза (рис. 3).

Общие изменения организма животных сопровождаются изменением состояния внутренних органов и тканей и отдельных функциональных систем.

Под влиянием ВРПК на 5-е сутки увеличивается на 30,7% масса селезенки, а под действием ПЕКТИНА на 26,7%. На 8-е сутки ее масса несколько уменьшается, однако превышая контроль на 21,8% - под влиянием ВРПК и на 18,7% - под влиянием ПЕКТИНА.

На 3-е сутки возрастает общая клеточность селезенки. В структуре органа в этот период времени увеличивается число вторичных фолликулов за счет ускорения процесса созревания клеток и происходит увеличение количества первичных фолликулов за счет стимуляции лимфопоэза

Во вторичных фолликулах мантийный слой и центры размножения очень плотно заполняются клетками На 42,5% под влиянием ВРПК и на 36,7% под действием ПЕКТИНА возрастает численность Т-лимфоцитов в Т-зависимой области белой пульпы и, особенно, на границе между Т- и В-зонами белой пульпы В белой пульпе на 3 и особенно на 5 сутки введения полисахаридов увеличивается численность «розеток» (на 32,7% - ВРПК; на 27,4% - ПЕКТИН), состоящих из центрального макрофага и лимфоцитов, его окружающих Увеличивается количество плазматических клеток

В красной пульпе увеличивается количество клеток эритроидного ряда, мегакариоцитов, кольцеядерных лейкоцитов.

10 15 20 25 30 37

Сутки

Рис. 1 Изменение массы тела животного при приеме ВРПК в дозе 0,5 г/кг

массы тела

ш

о Н-[-1-1-1-1-1-1-

5 10 15 20 25 30 37 Сутки

Рис 2 Влияние ВРПК на физическую работоспособность животных

□ Контроль Л ВРПК П Пектин

Рис 3 Действие полисахаридов донника на Ма+,К+-АТФ-азу

Вблизи крупных сосудов увеличивается количество кольцеядерных лейкоцитов, особенно к 5 суткам опыта Так же возрастает количество эритроидных клеток Количество РНК на 1-е сутки опыта под действием полисахаридов максимально в макрофагах и клетках стромы, на 3-5 сутки - в макрофагах и лимфоцитах, на 8-10 сутки количество РНК приходит в норму Количество гликозаминогликанов, гликопротеинов и протеогликанов максимально увеличивается в клетках стромы и макрофагах на 1-3 сутки опыта.

В костном мозге начиная со 2-3 суток опыта происходит общее увеличение клеточности за счет активной пролиферации слабо

11

дифференцированных клеток. Количество эритробластических островков 3 класса и инволюционирующих уменьшается за счет созревания и выхода в кровь созревающих эритроцитов. Общее количество островков немного уменьшается по сравнению с контролем.

На 3-5 сутки эксперимента появляются новые эритробластические островки 1 класса и особенно увеличивается численность эритробластических островков 2 и 3 классов зрелости. Общее количество кроветворных островков увеличивается. Возрастает количество мегакариоцитов, кольцеядерных лейкоцитов, лимфоцитов.

На 7-10 сутки введения полисахаридов общая клеточность снижается, количество эритробластических островков 1 и 2 классов повышено, а численность островков 3 класса зрелости и инволюционирующих снижается до нормы. Общее количество островков остается повышенным, поэтому количество эритроцитов и гемоглобина на 10 сутки опыта снижается. Количество лейкоцитов продолжает увеличиваться (особенно кольцеядерных) (рис. 4).

Рис. 4. Изменение количества эритробластических островков костного мозга под действием полисахаридов

Количество РНК в клетках стромы и макрофагах на 1-3 сутки превышает контроль под действием ВРПК на 33,5%, а под влиянием ПЕКТИНА на 27,6%. На 5 сутки количество РНК снижается и превышает контроль при введении ВРПК на 11,5%, а при введении ПЕКТИНА - на 8,3%. На 8-10 сутки количество РНК снижается до уровня контроля.

Повышение активности РНК приводит к усилению синтетических процессов.

Количество молекул-регуляторов гемопоэза - гликозаминогликанов, протеогликанов и гликопротеинов максимально увеличивается на 3 сутки и превосходит контроль под влиянием ВРПК на 25,5%, а при введении ПЕКТИНА - на 23,2%; на 7-10 сутки введения полисахаридов количество молекул-регуляторов превышает контроль на 10,8% под действием ВРПК и на 7,3% под влиянием ПЕКТИНА.

Масса тимуса максимально возрастает на 7 сутки введения полисахаридов под действием ВРПК на 55,6%, под влиянием ПЕКТИНА на

48,4%. Клеточность органа повышается в течение 7 суток введения полисахаридов в корковой зоне долек органа на 54,2% под влиянием ВРПК и на 46,7% под действием ПЕКТИНА В мозговой области органа клеточность увеличивается на 3-7 сутки на 33,7% под влиянием ВРПК и на 28,6% под действием ПЕКТИНА. На 10 сутки опыта клеточность снижается как в корковой, так и в мозговой зоне долек тимуса, но остается выше норы Масса органа снижается почти до нормы к 10 суткам введения полисахаридов

Введение животным полисахаридов Донника желтого сопровождалось выраженными изменениями в периферической крови (рис 5) На 2 сутки введения ВРПК в крови подопытных животных количество моноцитов возрастает в 2,2 раза, а под действием ПЕКТИНА на 1 сутки в 2,5 раза.

Введение ВРПК подопытным крысам способствует повышению количества лимфоцитов максимально на 5 сутки на 21,5%, введение ПЕКТИНА на 3 сутки опыта на 17,6%

Количество сегментоядерных лейкоцитов уменьшается у подопытных крыс под действием ВРПК на 5 сутки на 38,5%, а при введении ПЕКТИНА на 41,7%. К 10 суткам эксперимента количество лейкоцитов и моноцитов нормализуется, а лимфоцитов остается повышенным на 5-7% под действием полисахаридов

Количество эритроцитов и гемоглобина под действием ВРПК возрастает максимально на 5 сутки введения на 32% и 36% соответственно, а под влиянием ПЕКТИНА на 5 сутки введения на 26% и 32% На 10 сутки введения полисахаридов количество эритроцитов и гемоглобина остается незначительно повышенным (на 5-8%)

Количество РНК повышается в моноцитах, лейкоцитах, лимфоцитах под влиянием ВРПК в 2,3 раза, под действием ПЕКТИНА в 2,1 раза на 3 сутки введения и снижается до нормы на 8-10 день

Количество ферментов оксидаз под действием ВРПК в моноцитах повышается на 26%, а в лейкоцитах на 21% на 3 сутки опыта Введение ПЕКТИНА подопытным крысам повышает количество оксидаз в моноцитах на 22%, а в лейкоцитах на 18% в те же сроки эксперимента

В плазме крови под действием ВРПК количество аг-макроглобулинов на 2 сутки эксперимента превышает контроль на 55,6%, под влиянием ПЕКТИНА на 21,7% на 3 сутки

На 2 сутки введения ВРПК фракция р-макроглобулинов снижается на 13,27% ПЕКТИН снижает р-макроглобулины на 22,7%

Уровень у-глобулинов под действием ВРПК на 5 сутки превышает контроль на 52,7%, а под влиянием ПЕКТИНА на 3 сутки на 39,2%

К 7-10 суткам опыта количество а2- и Р-макроглобулинов нормализуется, а уровень у-глобулинов повышен на 28% под влиянием ВРПК и на 18,5% под действием ПЕКТИНА.

Нами установлено, что полисахариды оказывают выраженное действие на клетки иммунной системы и фагоцитоз (табл 2) ВРПК повышает количество В-лимфоцитов в крови подопытных крыс на 3 сутки опыта на 12,5%, а ПЕКТИН на 13,4% по сравнению с контролем На 10-й день

эксперимента количество этих клеток выше нормы на 5-7%. Общее количество Т-лимфоцитов под действием ВРПК на 3 сутки превышает контроль на 12,1%, а под влиянием ПЕКТИНА на 14,3%. Численность Т-хелперов возрастает максимально на 3 сутки введения ВРПК на 14,2%, а под действием ПЕКТИНА на 11,6% и снижается до уровня контроля на 10 сутки опыта. Численность цитотоксических Т-клеток под влиянием ВРПК на 3 сутки введения уменьшается с 11% до 5%, а под влиянием ПЕКТИНА с 12% до 7% на 5 сутки опыта. На 5-7 день эксперимента количество цитотоксических Т-клеток возрастает до нормы.

Фагоцитоз под влиянием ВРПК усиливается на 12%, а при введении ПЕКТИНА на 11% на 3 сутки эксперимента, что происходит из-за увеличения количества моноцитов и повышения их функциональной активности. Уменьшение количества моноцитов и лейкоцитов способствует снижению фагоцитоза на 5 день опыта до уровня контроля. Фагоцитарное число под действием ВРПК и ПЕКТИНА в 1,5-2 раза превосходит контроль соответственно.

Л~% лимфоцитов

К - % количества клеток крови в контроле 2, 3,5,8 - сутки эксперимента

Рис. 5. Изменение клеточного состава крови крыс под действием препарата ВРПК в дозе 0,1 г/кг массы тела

В эксперименте на мышах ВРПК выраженно стимулировал иммунную реакцию у подопытных животных при введении им эритроцитов крыс: количество иммунных бляшек в селезенке через 4 дня иммунизации составило в контроле 19,2 АОК на 1 млн клеток селезенки и 57,7 АОК на 1 млн клеток селезенки в опытной группе (р < 0,01).

Таблица 3.

Изменение иммунологических показателей крови здоровых животных под действием полисахаридов Донника желтого

Препарат и его доза % Т-розетко-образующих % Т-хелперов %Т-цитотоксич %В-лимфоцитов % фагоцитоза Фагоцитарное число

Контроль 55,10 ± 0,11 44,12±0,31 11,2 ± 0,3 26,2 ±0,2 60,66±0,31 4,1 ±0,3

ПЕКТИН 1 доза 59,33 ± 0,34 44,21±0,16 15,33±0,41 28,33 ±0,42 65,3 ±0,5 4,8 ±0,5

ПЕКТИН 3 дозы 66,38 ±0,42 55,23±0,41 11,1 ±0,3 35,95 ±0,36 71,3±0,3 6,23 ±0,13

ПЕКТИН 5 доз 50,33 ±0,27 44,51 ±0,13 6,8410,42 23,31 ±0,41 44,2 ±0,6 4,37 ±0,27

ПЕКТИН 7 доз 55,33 ±0,15 43,67±0,51 11,67±0,38 33,01 ±0,21 60,33±0,48 5,31 ±0,61

ПЕКТИН 10 доз 60,01 ±0,36 45,33±0,33 14,67+0,25 31,34 ±0,46 62,6710,24 5,39 ±0,19

ВРПК 2 дозы 64,67 ±0,37 55,26±0,37 5,49 + 0,42 33,42 ±0,46 72,25±0,34 8,81 ±0,23

ВРПК 5 доз 62,51 ±0,54 52,49±0,24 7,64 ±0,24 25,14 ±0,27 56,1410,41 8,35 ±0,12

Р<0,01 Р <0,01 Р<001 Р < 0,01 Р < 0,01 Р 0,01

Влияние полисахарида ВРПК на характер суточных и сезонных биоритмов (по показателям крови, массы тела и иммунокомпетентных органов).

Влияние полисахарида на суточные и сезонные биоритмы организма экспериментальных животных изучали при однократном и пятикратном введении ВРПК в дозе 0,1 г/кг массы тела внутримышечно в утренние и вечерние часы летом и зимой, полученные показатели сравнивали с контролем (экспериментальные животные без введения полисахаридов), (табл. 4)

Как видно из таблицы 4, однократное введение ВРПК практически не влияет на суточные и сезонные биоритмы животных 5-ти кратное введение полисахарида оказывает заметное влияние на суточные биоритмы в изменении массы тимуса, эритробластических островков костного мозга, гемоглобина Данные, полученные в зимнее время, превосходят цифры, полученные летом 5-ти кратное введение ВРПК в утренние часы оказывается более эффективным в зимнее время, масса тимуса превосходит вечерние значения на 11,7%, количество эритробластических островков - на 3,0%, уровень гемоглобина - на 11%, эритроцитов - на 4,5%

Пятикратное введение ВРПК заметно влияет на сезонные биоритмы организма подопытных крыс. Зимой под влиянием утреннего введения полисахарида масса тимуса на 4,1%, количество гемоглобина на 12,4%, а численность эритробластических островков на 16,0% больше, чем летом при тех же условиях.

Таблица 4

Характер изменения суточных и сезонных биоритмов под влиянием полисахарида ВРПК

Исследуемые группы и параметр Контроль Лето Контроль Зима

на фоне однократного введения полисахарида на фоне пятикратного введения полисахарида на фоне однократного введения полисахарида на фоне пятикратного введения полисахарида

утро вечер утро вечер утро вечер утро вечер

Масса тела, г 161,7± 2,5 170,3 ± 3,4 167,4 ± 2,9 186,8 ± 3,2 184,2± 5,1 200,0 ± 1,1 213,0 ± 2,4 209,6 ± 5,3 242,3 ± 2,7 246,3 ± 3,5

Масса тимуса, г 0,240 ± 0,012 0,260 ± 0,035 0,258 ± 0,018 0,332 ± 0,023 0,331 ± 0,035 0,265 ± 0,012 0,278 ± 0,019 0,271 ± 0,015 0,349 ± 0,014 0,319 ± 0,021

Масса селезенки, г 0,796 ± 0,021 0,832 ± 0,014 0,862 ± 0,021 0,924 ± 0,027 0,916 ± 0,022 1,320 ± 0,031 1,429 ± 0,033 1,3794 ± 0,025 1,457 ± 0,021 1,395 ± 0,022

Эритроциты, 0,0 6,21 ± 0,26 6,52 ± 0,31 6,43 ± 0,12 7,74 ± 0,25 7,37 ± 0,18 6,05 ± 0,15 6,52 ± 0,18 6,38 ± 0,22 7,08 ± 0,13 6,62 ± 0,22

Гемоглобин, г'л 118,0± 2,8 126,5 ± 3,3 124,3 ± 5,4 151,0± 3,2 151,0± 2,2 120,0 ± 3,1 139,6 ± 2,4 129,4 ± 5,7 162,6 ± 2,3 140,3 ± 1,8

Моноциты, 'лл 3,11 ± 0,28 6,23 ± 0,32 5,64 ± 0,24 5,63 ± 0,54 4,83 ± 0,34 3,54 ± 0,52 7,74 ± 0,21 6,65 ± 0,15 8,23 ± 0,22 7,34 ± 0,24

Лимфоциты, жл 70,21 ± 0,12 74,82 ± 0,21 73,53 ± 0,24 85,21 ± 0,17 83,13 ± 0,13 68,54 ± 0,26 74,53 ± 0,18 73,14 ± 0,21 79,54 ± 0,24 76,55 ± 0,17

•^-глобулин 10,15 ± 0,18 11,24 ± 0,16 10,91 ± 0,17 13,98 ± 0,22 13,75 ± 0,21 18,31 ± 0,21 20,12 ± 0,18 19,63 ± 0,22 25,33 ± 0,32 22,14 ± 0,24

аг-глобулнн 12,65 ± 0,23 13,62 ± 0,51 13,24 ± 0,27 14,71 ± 0,32 14,12 ± 0,27 10,72 ± 0,29 11,41 ± 0,18 11,24 ± 0,24 16,25 ± 0,51 14,75 ± 0,28

Эритробластические островки костного мозга 177,0 ± 8,13 179,18 ± 1,21 180,34 ± 3,42 179,33 ± 2,18 180,55 ± 2,21 182,12 ± 5,13 187,61 ± 2,13 184,34 ± 3,12 183,81 ± 1,22 184,02 ± 3,22

Масса селезенки под действием 5 утренних доз ВРПК увеличивается летом на 9,7% больше, чем зимой. Количество у-глобулинов под влиянием 5 утренних доз полисахарида, введенных летом, на 24,5% больше, чем зимой.

Увеличение общего уровня обмена веществ приводит к более быстрой стимуляции эритропоэза в зимний период времени и введение 5 доз ВРПК зимой заметно повышает количество эритробластических островков костного мозга, эритроцитов, уровень гемоглобина по сравнению с летом

Влиянием зимних 5 доз ВРПК на иммунную систему проявляется в более сильной стимуляции тимуса, увеличении его массы по сравнению с летом

Влияние 5 доз полисахарида в летнее время увеличивает массу селезенки сильнее, чем зимой, что связано с усилением функций р-лимфоцитов и плазматических клеток и проявляется в большем увеличении уровня у-глобулинов в летнее время под влиянием ВРПК В летний период организм подвержен более сильному антигенному действию окружающей среды, поэтому он более сильно реагирует на введение полисахарида

Основные этапы механизма воздействия ВРПК на организм подопытных животных описаны в предыдущей главе, но он корректируется действием факторов среды, времени суток и сезонов года

Таким образом, введение ВРПК и ПЕКТИНА увеличивает количество моноцитов крови, повышая уровень РНК в них и усиливая синтез гликозаминогликанов и протеогликанов. Эти молекулы активируют лимфоциты, лейкоциты, макрофаги и стромальные клетки селезенки, костного мозга и тимуса Макрофаги и клетки стромы органов синтезируют и выделяют про1еогликаны и гликопротеины - регуляторы процессов гемопоэза и иммунопоэза Лимфоциты также продуцируют у-глобулины и молекулы-регуляторы, входящие в состав а2-макроглобулинов Это увеличивает количество эритробластических островков, эритроцитов, гемоглобина, лимфоцитов Активация ферментных систем клеток и увеличение их количества приводит к повышению уровня обмена веществ, усилению физической активности, влияет на суточные и сезонные биоритмы изменения количества эритробластических островков, эритроцитов, гемоглобина, массы тимуса и селезенки (схема 1)

Влияние полисахаридов на животных с анемией.

Экспериментальную анемию вызывали введением подопытным животным 10% раствора уксуснокислого свинца или бензола

Периферическая кровь животных с экспериментальной анемией содержит в 2-2,5 раза меньшее число эритроцитов и гемоглобина, количество лейкоцитов под действием бензола снижено на 59,5%, а под действием уксуснокислого свинца - на 34,8% (табл. 5).

Таблица 5

Периферическая кровь животных с экспериментальной анемией

Состав крови На фоне введения бензола На фоне введения уксуснокислого свинца Здоровые животные

Эритроциты 2,4 ±0,1 2,21 ±0,03 5,51 ±0,13

Гемоглобин 37,3 ± 0,1 44,2 ± 0,2 82,3 ± 0,2

Лейкоциты 3,0 ±0,2 6,5 ± 0,2 10,8 ±0,4

Масса селезенки уменьшается под действием бензола на 30,4% по сравнению с контролем, а под действием уксуснокислого свинца на 28,5%

Клеточность селезенки (особенно красной пульпы органа) снижается под влиянием бензола на 33,6% по сравнению с контролем, а под влиянием уксуснокислого свинца на 35,2% Становятся заметны элементы стромы органа- клетки, сосуды, волокна.

Клеточность костного мозга снижается под влиянием бензола на 32,7%, а под действием уксуснокислого свинца на 35,2% Уменьшается общее количество эритробластических островков на 22,7% и на 29,5% Заметно снижается количество кольцеядерных лейкоцитов. Становятся заметны элементы стромы органа сосуды, волокна, стромальные клетки, сосуды несколько расширены

Как показали наши исследования, под влиянием 7 доз ВРПК масса селезенки возрастает и на 5-7% превышает норму Клеточность органа увеличивается, превышая норму на 6-8% В красной пульпе увеличивается количество клеток эритроидного ряда, кольцеядерных лейкоцитов, мегакариоцитов В белой пульпе увеличивается количество лимфоцитов Структура органа нормализуется ВРПК стимулирует выделение клетками стромы и макрофагами гликозаминогликанов и протеогликанов, количество которых возрастает на 5 и 7 сутки опыта и снижается на 10 день эксперимента.

В костном мозге животных с экспериментальной анемией начиная с 3 дня введения полисахаридов увеличивается количество эритробластических островков 1 и 2 классов на 12,3% и 16,4% соответственно Количество их достигает нормальных величин лишь на 7 день введения полисахаридов Ускоряется процесс дифференцировки и созревшие эритроциты выходят в кровоток, увеличивая количество гемоглобина и эритроцитов в кровяном русле до нормы. Возрастает численность кольцеядерных лейкоцитов на 7 сутки на 25-57% Ускоряется процесс созревания и выхода этих клеток в кровь. Количество гликозаминогликанов и протеогликанов возрастает на 3-5 день опыта и снижается на 7-10 сутки в клетках стромы и макрофагах, но немного превосходит норму и на 10 сутки введения

юо 80 60 40

20 0

Рис. 6. Антианемическое действие ВРПК Количество гемоглобина (1), эритроцитов (2), лейкоцитов (3).

Показатели интактных животных (I); при свинцовой анемии (II) и свинцовой анемии на фоне введения ВРПК (III)

Полисахариды активируют клетки моноцитарно-макрофагальной системы, которые синтезируют и выделяют в кровь молекулы-регуляторы, активизирующие клетки стромы костного мозга и селезенки, синтезирующие гликозаминогликаны и протеогликаны, которые ускоряют процессы пролиферации и дифференцировки клеток эритроидного, лимфоидного и лейкоцитарного рядов. Количество клеток в крови на 7сутки введения ВРПК нормализуется, а на 10 сутки увеличивается на 5,5-8,8%. Уровень гемоглобина нормализуется на 7 сутки введения полисахарида, а на 10 сутки - на 8,6-9,3% превышает норму. Количество лейкоцитов нормализуется на 7 день опыта (табл. 6).

Таблица 6.

Картина в крови экспериментальных животных с бензольной анемией на фоне введения препарата ВРПК в дозе 0,5 г/кг

Состав крови На фоне введения бензола 3 сутки | 5 сутки | 7 сутки 10 сутки

введение полисахаридного препарата

Эритроциты 2,4 ±0,1 2,33+0,02 3,31 ±0,04 5,23 ±0,03 5,31 ±0,02

Гемоглобин 37,3+0,1 34,3 ± 0,3 48,0 + 0,2 74,0 ± 0,07 88,2 ± 0,04

Лейкоциты 3,0 ± 0,2 6,2 ± 0,03 6,9 + 0,03 10,1 ±0,02 9,75 ± 0,02

Р < 0,05

Аналогичные изменения происходили в кроветворных органах животных, получавших полисахариды на фоне анемии, вызываемой уксуснокислым свинцом. Клеточный состав периферической крови также нормализовался к 7-10 суткам введения полисахаридов (рис. 6).

Изменение параметров, 120 % к контролю

Возможно, что в регуляции процессов гемопоэза участвуют различные виды лимфоцитов, количество которых изменяется под действием молекул, выделяемых моноцитами и лейкоцитами. Т-хелперы могут активизировать клетки стромы, усиливая в них продукцию гликозаминогликанов и протеогликанов. В суммарном виде механизм антианемического действия полисахаридов Донника желтого представлен на схеме 2.

Механизм противовоспалительного действия полисахаридов Асептическое воспаление моделировали введением 0,1 мл 2,5% раствора формалина под апоневроз стропы лапки крысы. Под действием формалина развивается отек конечности и через 4 часа он становится максимальным, а объем лапки на 64% выше нормы. Количество лейкоцитов в крови при этом в 3,2 раза выше нормы. СОЭ достигает максимума на 3 сутки опыта и в 2,2 раза выше нормы. Активность фагоцитоза клеток крови крыс с воспалением на 3 сутки на 12,3% выше нормы. Количество молекул РНК в клетках крови на 12,3% выше нормы уже на 1 сутки опыта, а число молекул миелопероксидаз и оксидаз повышается на 3 день. Перекисная резистентность мембран эритроцитов крови понижена, поэтому уровень гемолиза эритроцитов на 1 -3 сутки опыта достигает 95%.

Величина отека, количество лейкоцитов, СОЭ, активность фагоцитоза постепенно уменьшаются и достигают нормы к 8 дню опыта.

Количество РНК, ферментов миелопероксидаз и оксидаз на 8 сутки опыта на 5-7% превышают норму.

Контроль --Р--ВРПК 1

Рис. 7. Влияние препарата ВРПК на развитие воспалительного отека

Контроль о- Пектин

Рис 8 Влияние препарата ПЕКТИН на развитие воспалительного отека

В ходе исследований выявлено, что под действием полисахаридов отек воспаленной конечности на первые сутки меньше, чем в контроле и превышает норму на 35,8% под влиянием ВРПК и на 37,8% под действием ПЕКТИНА. На 5 день введения оба полисахарида нормализуют объем воспаленной конечности (рис 7, рис. 8)

Величина СОЭ под действием ВРПК и ПЕКТИНА в 1,8-2 раза соответственно выше нормы, но ниже чем в контроле уже на первые сутки опыта ВРПК нормализует СОЭ на 6 сутки введения При введении ПЕКТИНА СОЭ на 13% выше нормы на 6 день опыта (табл. 5).

Количество лейкоцитов под действием полисахаридов в день введения на 13-15% ниже, чем в контроле Оба полисахарида нормализуют численность лейкоцитов на 7 день введения (табл 7).

Таблица 7.

Характер изменения количества лейкоцитов периферической крови у животных при воспалении и на фоне введения полисахаридов Донника желтого

Препарат 4ч 3 сут 5 сут 7суг Норма

Контроль 33528 ±192 19878 ±624 19391 ±328 11458 ±259 10834,7 ± 292,0

Бутадион 28345 ± 352 25837 ±724 15124 ±254

ВРПК 31878 ±257 25937 ± 602 19586 ± 124 10255 ±211

Пектин 32627 ±312 19428 ±215 16510 ±205 10854 ±205

Р < 0,05

Активность фагоцитоза уже на 1 день введения полисахаридов ВРПК и ПЕКТИНА соответственно на 16,8 и 18,9% выше контроля (рис. 9). Полисахариды значительно повышают фагоцитарный индекс (на 26-31,7%). Даже на 7 день опыта активность фагоцитоза под влиянием ВРПК на 10,3% выше нормы, а под действием ПЕКТИНА - на 15,7%.

1 сутки 3 сутки

5 сутки 7 сутки

¡3 Физраствор+формалин И ВРПК □ Пектин

Рис. 9. Влияние полисахаридов ВРПК и ПЕКТИН на развитие фагоцитоза клеток крови при воспалении

Количество РНК в клетках крови под действием полисахаридов максимально на 3 день введения и превышает контроль при действии ВРПК на 23,3%, а под влиянием ПЕКТИНА - на 26,3%. На 7 день количество РНК незначительно превышает норму в клетках подопытных животных.

Активность ферментов миелопероксидаз и оксидаз максимально возрастает при введении ВРПК на 32,5%, а под влиянием ПЕКТИНА - на 37,1% к 3-5 дню опыта, а на 7 сутки введения полисахаридов лишь незначительно превышает норму (рис. 10).

I

Рис. 10. Изменение активности оксидаз под действием ПЕКТИНа в клетках

селезенки крыс

ВРПК и ПЕКТИН повышают перекисную резистентность эритроцитов уже на 3 день опыта, снижая процент гемолизированных клеток до 65,3 и 73,5% соответственно по сравнению с контролем. На 7 день процент гемолизированных клеток снижен при введении ВРПК до 43,2%, а под действием ПЕКТИНА - до 44,9% от уровня контроля.

700 600 500 400 300 200 100 о

Рис. 11. Антиоксидантное действие полисахаридов донника желтого

Полисахариды активируют систему моноцитов-макрофагов, синтезирующих и выделяющих гликопротеины, протеогликаны и гликозаминогликаны, которые ускоряют созревание предшественников Т- и В-лимфоцитов в лимфоидных органах. Лимфоциты активируют процесс фагоцитоза, повышают активность ферментных систем фагоцитов. Возможно, полисахариды активируют непосредственно фагоцитарную функцию моноцитов и лейкоцитов. Возрастает количество плазматических клеток селезенки и усиливается синтез ими у-глобулинов, что активирует фагоцитоз. Лимфоциты стимулируют клетки крови, увеличивая уровень РНК и ферментов оксидаз и миелопероксидаз в них. Полисахариды могут активно взаимодействовать с веществами мембран клеток, повышая их перекисную резистентность и активируя ферментные системы в них. Структура полисахаридов способствует их активному взаимодействию со свободными радикалами и пероксидными молекулами, образующимися в очаге воспаления. Полисахариды проявляют при этом антиоксидантную активность, которая в большей степени выражена у ВРПК (рис. 11). Активация фагоцитоза и синтетической активности клеток способствует уменьшению отека и восстановлению структуры тканей, нормализации состава плазмы крови и СОЭ (схема 3).

Механизм радиопротекторного действия полисахаридов

Как показали наши исследования, полное или частичное облучение здоровых крыс в дозе 400 рентген вызывает заметные изменения в организме животных.

Доза-1Е-8 Доза-1Е-6 Доза - 1Е-4

В Контроль В ВРПК а Пектин

Масса тимуса у полностью облученных крыс уменьшается на 53,4%, масса селезенки на 32,3%. У крыс с одной необлученной кроветворной территорией масса тимуса уменьшается на 31,2%, масса селезенки на 7,9% У животных с 2 необлученными кроветворными территориями масса тимуса снижается на 19,3%, а селезенки на 10%.

Клеточность костного мозга у полностью облученных крыс уменьшается на 33,2%, у животных с необлученным хвостом на 26%, а с необлученным бедром и хвостом на 18%. Заметно уменьшается количество эритробластических островков в костном мозге Нарушается структура и уменьшается клеточность тимуса и селезенки. Становятся заметны элементы стромы органов, сосуды, волокна, ретикулярные клетки и макрофаги. Сосуды расширены, нет четких границ между отдельными зонами органов. У полностью облученных крыс все изменения выражены сильнее.

В крови полностью облученных крыс уменьшается количество эритроцитов на 16,5%, гемоглобина на 18%, лимфоцитов на 24,3%, повышается количество лейкоцитов на 34%, моноцитов на 43%, атипичных клеток в 2,2 раза по сравнению с нормой

У животных с сохранением от облучения одной или двух кроветворных территорий количество эритроцитов уменьшается на 8-7%, гемоглобина на 12-15%, лимфоцитов на 24-13%, численность лейкоцитов увеличивается на 35-33%, моноцитов в 1,7 и в 1,5 раза соответственно по сравнению с нормой.

Количество молекул РНК в клетках костного мозга у полностью облученных крыс снижается до 38,5%, а у частично облученных до 56,5% и 70% от уровня нормы

Количество гликозаминогликанов и протеогликанов у полностью облученных животных составило 35,6%, у крыс с частичным облучением 53,8% и 59,4% от уровня нормы

Введение 5 доз ПЕКТИНа полностью облученным крысам способствует увеличению массы тимуса на 30,4%, селезенки на 14,7% по сравнению с контролем (облученные животные). У частично облученных животных с необлученным хвостом и хвостом и бедром увеличивается масса тимуса на 15,8% и 17,3%, а масса селезенки на 9,8% и 9,4% по сравнению с контролем соответственно. Масса органов возрастает за счет увеличения их клеточности и частичного восстановления структуры, особенно у крыс с необлученным бедром и хвостом. Клеточность костного мозга (микрофото 8, микрофото 10) увеличивается у полностью облученных крыс на 6,9%, а у частично облученных (хвост) на 8,7% и (бедро и хвост) на 16,2% по сравнению с контролем У животных с необлученным хвостом и, в большей степени, у крыс с необлученным хвостом и бедром увеличивается количество эритробластических островков Это приводит к ускорению созревания и выходу в кровь эритроцитов, количество которых возрастает у полностью облученных крыс на 7,8%, а у частично облученных на 9,4% и на 16,8% Количество гемоглобина увеличивается у полностью облученных 24

крыс под действием ПЕКТИН на 11,6%, лимфоцитов на 9,2% У животных с необлученным хвостом гемоглобин возрастает на 11,7%, а у крыс с необлученными бедром и хвостом на 17,8%, лимфоцитов на 14,8% и на 24,7% соответственно по сравнению с контролем При этом количество атипичных клеток в крови крыс с необлученным бедром и хвостом в 2,2 раза ниже, чем в контроле (табл 8)

Таблица 8.

Изменение клеточного состава крови облученных крыс под влиянием полисахарида ПЕКТИН

Группа животных Препарат, доза Эритроциты Гемоглобин Лимфоциты Сегменто-ядерные лейкоциты Моноциты Атипичные клетки

Здоровые животные Контроль 5,57 142,7 74,5 21,0 3,0 -

Сохранение двух кроветворных территорий Пектин 0,5 г/кг 5,02 135,3 74,3 23,3 3,0 3,3

Контроль - 4,55 119,6 56,3 31,2 4,3 7,3

Сохранение одной кроветворной территории Пектин 0,5 г/кг 4,62 125,6 65,6 28,6 4,6 7,3

Контроль - 3,89 103,3 56,3 31,6 5,2 4,0

Полное облучение Пектин 0,5 г/кг 4,31 Н8,2 68,1 31,3 4,0 3,3

Контроль - 3,8 106,6 57,3 38,5 4,6 10,0

р < 0,01 р <0,01 р <0,01 р й 0,01 р <0,01 р 5 0,01

Под влиянием ПЕКТИНа количество РНК в клетках костного мозга возрастает при полном облучении на 15,8%, у крыс с необлученным хвостом на 16,3%, а у животных с необлученным бедром и хвостом на 21,3% по сравнению с контролем (рис. 12).

Повышение количества молекул РНК способствует увеличению синтеза гликоаминогликанов и протеогликанов, количество которых возрастает в клетках костного мозга полностью облученных крыс на 12,2%, у животных с необлученным хвостом на 15%, а у крыс с необлученным бедром и хвостом на 17% выше, чем в контроле.

Увеличение количества молекул-регуляторов гемопоэза (рис 13) способствует увеличению количества эритробластических островков в структуре костного мозга у животных с полным облучением на 8,5%, у крыс с необлученным хвостом на 13,8%, а у животных с 2 необлученными кроветворными территориями на 18,2% по сравнению с контролем.

100 80 60 40 20 0

-

5 --1г

■ Вез полисахарида □ Полисахарид

Здоровые крысы

Полное облученне

Частичное облучение (хвост)

Частичное облучение (бедро и хвост)

Рис. 12. Количество РНК в клетках облученных животных под действием

ПЕКТИНА

100 ео 60 40 20 о

ГЁ=

17-

Я Без полисахарида □ Полисахарид

Здоровые крысы Полное облучение

Частичное Частичное

облучение облучение

(хвост) (бедро и хвост)

Рис. 13. Количество регуляторных молекул в клетках костного мозга облученных животных под действием ПЕКТИНА

ПЕКТИН в организме частично и полностью облученных крыс вызывает повышение количества РНК в клетках стромы и макрофагах костного мозга, селезенки и тимуса, усиливает синтез этими клетками гликозаминогликанов, протеогликанов, гликопротеинов - регуляторов гемопоэза. Увеличивается количество эритробластических островков костного мозга, активируются процессы пролиферации и дифференцировки клеток лимфоидного и эритроидного рядов. Усиливается синтез элементов стромы органов, восстанавливается их структура и клеточность, масса нормализуется. У частично облученных животных процессы восстановления структуры и клеточности происходят быстрее, т. к. сохранилось большее количество колониеобразующих клеток костного мозга. В крови нормализуется количество эритроцитов и гемоглобина, лимфоцитов, снижается количество атипичных клеток и лейкоцитов. Механизм радиопротекторного действия полисахаридов Донника желтого представлен на схеме 4.

Схема 1. Механизм действия полисахаридов на здоровых животных

1) Увеличение количества лимфоцитов в корковой зоне

2) Увеличение количества лимфоцитов в мозговой зоне

3) Ускорение процесса дифференцировки и выхода в кровь

4) Рост клеточности и массы

Тимус

1) Увеличение количества фолликулов

2) Увеличение числа лимфоцитов на границе Т- и В-зон фолликула.

3) Увеличение количества АОК и плазмоцитов, увеличение в крови у-глобулинов

4) Увеличение количества кольцеядериых лейкоцитов в красной пульпе, торможение дифференцировки

5) Увеличение клеток в Т-зоне фолликула

6) Рост клеточности и массы

Селезенка

Увеличение в крови Т- и В-лимфоцитов, эршроцитов и гемоглобина, у- и а2-макроглобулинов, уменьшение лейкоцитов

1) Увеличение количества ЭОI, П, III классов

2) Ускорение созревания ЭО IV класса зрелости и инволюционирующих

3) Увеличение количества эритроцитов и гемоглобина в крови

4) Увеличение количества лимфоидных клеток, активация пролиферации

5) Торможение дифференцировки лейкоцитарных форм

6) Рост клеточности

Костный мозг

ВРПК

Пектин

Моноциты Макрофаги

РНК-

Гликозаминогликаны

Протеогликаны

Гликопротеины

Клетки стромы и макрофаги органов

РНК-

Гликозаминогликаны

Протеогликаны

Гликопротеины

Активация фагоцитоза

Повышение антиоксидактной резистентности

Синтез

Активация bV/К^АТФазы

Активация обмена веществ

Рост массы тела и органов

Активация физической работоспособности

Схема № 2. Механизм антианемической активности полисахаридов

1) Увеличение количества клеток в корковой и мозговой зонах

2) Ускорение созревания и выхода в кровь Т-лимфоцитов

Тимус

ВРПК

Пектин

Моноциты Макрофаги

РНК-

1) Увеличение количества фолликулов

2) Увеличение числа лимфоцитов на границе Т- и В-зон фолликула

3) Увеличение количества АОК и плазмоцитов, синтез у-глобулинов

4) Увеличение количества кольцеядерных лейкоцитов в красной пульпе

5) Увеличение массы и клеточности

Селезенка

1) Увеличение количества ЭОI, П, П1 классов

2) Ускорение дифференцировки и созревания предшественников эритроцитов ЭО IV класса зрелости и инволюционирующих

3) Выход эритроцитов в кровь

4) Активация пролиферации и дифференцировки лимфоцитов

5) Увеличение клеточности

Костный мозг

Гликозаминогликаны

Протеогликаны

Гликопротеины

Клетки стромы и макрофаги органов

РНК

Гликозаминогликаны

Протеогликаны

Гликопротеины

Синтез белков плазмы

Синтез ферментов

Повышение уровня обмена веществ

Увеличение в крови-1) эритроцитов и гемоглобина,

2) лимфоцитов;

3) лейкоцитов,

4) нормализация состава плазмы

Схема № 3. Механизм противовоспалительной активности полисахаридов

1) Увеличение количества клеток в корковой и мозговой зонах

2) Выход в кровь Т-лимфоцитов

1) Увеличение количества фолликулов

2) Увеличение числа Т- и В-лимфоцитов на границе зон фолликула.

3) Увеличение количества АОК и плазмоцитов, синтез у-глобулинов

4) Торможение лейкопоэза

5) Выход в кровь Т- и В-лимфоцитов

1) Пролиферация и дифференцировка эритроцитов и разных форм ЭО

2) Пролиферация и дифференцировка лимфоцитов, активация лимфопоэза.

3) Угнетение лейкопоэза

Костный мозг

ВРПК Пектин

Гликозаминогликаны

Протеогликаны

Гликопротеины

Активация фагоцитоза

Активация обмена веществ и синтез волокон и молекул межклеточного вещества

Антиоксидантная активность

ПОЛ

Схема № 4. Механизм радиопротекторного действия полисахаридов

1} Увеличение клеточности в корковой и в мозговой зоне

2) Ускорение созревания лимфоцитов

3) Нормализация структуры

4) Повышение массы

1) Увеличение клеточности

2) Увеличение количества лимфоидных фолликулов

3) Повышение количества клеток в красной и белой пульпе

4) Увеличение массы органа.

5) Нормализация структуры

У частично облученных крыс восстановление клеточности и структуры происходит быстрее и выражено стволовых клеток и их потомков

1) Активация пролиферации красного и белого ростков крови (особенно у частично облученных крыс)

2) Увеличение количества ЭО

3) Ускорение созревания клеток-предшественников

4) Увеличение клеточности

5) Нормализация структуры

| большей степени из-за сохранения в необлученной части

ВРПК

В крови нормализуется клеточный состав,

увеличивается количество эритроцитов, гемоглобина, лейкоцитов, лимфоцитов, снижается количество атипичных клеток

Пектин

Моноциты Макрофаги

РНК-

Гликозаминогликаны

Протеогликаны

Гликопротеины

Активация

синтеза ферментов

Клетки стромы и макрофаги органов

Повышение обмена веществ*4

РНК

Гликозаминогликаны

Протеогликаны

Гликопротеины

Восстановление структуры органов

Активация фагоцитоза

Синтез волокон и молекул стромы и межклеточного вещества

Выводы

1. Полисахариды Донника желтого ВРПК и ПЕКТИН повышают общую неспецифическую резистентность организма, стимулируя активность АТФ-азы и уровень обмена веществ, вызывают увеличение мышечной массы животного и, тем самым, улучшают общее состояние животных и повышают их физическую работоспособность

2 Полисахариды ВРПК и ПЕКТИН, увеличивая синтез РНК в клетках, стимулируют гемопоэз, увеличивая в периферической крови количество моноцитов (в 2,2-2,6 раза), лимфоцитов (на 11,6-21,5%) эритроцитов (на 26-32%) уровень гемоглобина (на 32-38%), аг-макроглобулинов (на 22-25%), активность ферментных систем клеток крови и фагоцитоз.

3. Полисахариды ВРПК и ПЕКТИН, оказывают влияние на структуру костного мозга, селезенки и тимуса, повышая синтетическую активность в клетках стромы, что сопровождается увеличением их массы на 27-31% и 48-55%, соответственно.

• Увеличение массы костного мозга сопровождается увеличением в 1,5 раза его клеточности (количества эритробластических островков 1-2 класса зрелости, клеток лимфоидного ряда, кольцеядерных лейкоцитов, мегакариоцитов),

• Увеличение массы селезенки сопровождается увеличением на 37-43% ее клеточности (количества лимфоидных фолликулов -первичных вторичных и Т-лимфоцитов в структуре белой пульпы, плазматических клеток и «розеток», состоящих из центрального макрофага и лимфоцитов, клеток эритроидного ряда, кольцеядерных лейкоцитов в области красной пульпы),

• Увеличение массы тимуса сопровождается увеличением на 45-54% клеточности корковой зоны и на 33-36% мозговой зоны

4. Под влиянием полисахарида ВРПК меняются суточные и сезонные биоритмы, что проявляется изменением эритропоэза и массы иммуннокомпетентных органов

5 Полисахариды ВРПК и ПЕКТИН, оказывают выраженную аитианемическую активность при экспериментальной анемии, увеличивая количество РНК в клетках кроветворных органов и усиливая синтез молекул гликозоаминогликанов и протеогликанов, что приводит к увеличению клеточности костного мозга, количества эритробластических островков, ускорению созревания клеток эритроидного и лимфоидного ряда, и нормализации клеточного состава крови

6. Полисахариды ВРПК и ПЕКТИН, обладают выраженным противовоспалительным действием, ускоряя синтез и выделение макрофагов и моноцитов и увеличивая их функциональную активность, что способствует усилению фагоцитоза, снижению проницаемости сосудистой стенки и нормализации на 7-8 сутки введения объема воспаленной конечности, СОЭ и количества лейкоцитов в крови.

7. ПЕКТИН обладает радиопротекторным действием на организм полностью или частично облученных животных, усиливая функциональную активность клеток моноцитарно-макрофагальной системы и клеток стром костного мозга и селезенки, повышая уровень РНК на 15,8-21%, гликозаминогликанов и протеогликанов в макрофагах и клетках стромы костного мозга на 13,3-16,1% Под влиянием ПЕКТИНА количество эритробластических островков в костном мозге облученных животных возрастает на 8,5-17%, активируются процессы эритропоэза и лимфопоэза, что способствует восстановлению структуры органов и нормализации состава крови.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Данные о механизмах действия полисахаридов Донника на системы организма в норме и при различных видах патологии можно использовать в курсе лекций по нормальной и патологической физиологии, биохимии и биоорганической химии

ВРПК и ПЕКТИН можно использовать как основу для создания биологически активных добавок и лекарственных форм в ветеринарии и медицине

Возможно создание на основе полисахаридов Донника лекарственных препаратов, стимулирующих процессы кроветворения и иммуногенеза после проведения соответствующих клинических исследований.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1 Сычев И. А , Подобуев Г. А. Полисахариды донника / Сб научных трудов по животноводству.-Рязань РСХИ, 1995 -С. 41-42

2 Сычев И. А, Подобуев Г А Выделение водорастворимых полисахаридов из растений семейства бобовых / Сб научных трудов по животноводству. - Рязань. РСХИ, 1995. - С 43-44

3 Сычев И. А., Подколзин А. А, Донцов В. И, Кобелева Г. Ю., Харченко О. Н Иммуннокоррегирующее, антианемическое и адаптогенное действие полисахаридов из донника лекарственного // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 1996 -№6. -С 661-663.

4 Сычев И. А., Колосова Т. Ю. Экспериментальное выделение биологически активных полисахаридов из экологически чистых растений донника желтого / Материалы межрегиональной научно-практической конференции «Социально-гигиенический мониторинг здоровья населения» -Рязань, 2000. - С 202-204

5. Сычев И. А, Донцов И А., Колосова Т Ю. Экспериментальное изучение антиоксидантной активности полисахаридов донника желтого и их действия на Ыа+,К+-АТФазу / Материалы межрегиональной научно-практической конференции «Социально-гигиенический мониторинг здоровья населения». - Рязань, 2000. - С 204-207. 32

6. Сычев И. А., Смирнов В. М, Колосова Т. Ю. Фагоцитозсгимулирующие действие полисахаридов донника желтого И Биохимия на рубеже XXI века: Межрегиональный сборник научных трудов. - Рязань: РГМУ, 2000. - С 505-509.

7 Сычев И А., Колосова Т Ю, Родина Е. В, Денисова 3. И. Динамика изменений биохимических показателей крови животных под действием полисахаридов донника желтого // Материалы межрегиональной научно-практической конференции «Социально-гигиенический мониторинг здоровья населения». -Рязань- РГМУ, 2001 - С. 217-218

8. Сычев И А , Колосова Т, Ю., Родина Е. В., Денисова 3 И Изучение действия полисахаридов донника желтого на клеточный состав белой крови крыс У/ Материалы межрегиональной научно-практической конференции «Социально-гигиенический мониторинг здоровья населения» - Рязань РГМУ,2001.-С 218-219.

9. Сычев И А, Смирнов В М, Колосова Т Ю Изучение противовоспалительного действия полисахаридов донника желтого // Российский медико-биологический вестник им академика И. П Павлова -Рязань- РГМУ, 2002 - № 3-4. - С. 71-76

10. Сычев И А, Смирнов В М Фагоцитозстимулирующее действие полисахаридов донника желтого // Российский медико-биологический вестник им академика И. П Павлова - Рязань РГМУ, 2003 - № 1-2 -С 58-63.

11 Сычев И.А, Смирнов В.М. Состояние селезенки крыс при действии полисахаридов донника желтого (пектина) // Вестник Российского государственного медицинского университета. - 2004 -К» 6(37) -С 85-95.

12. Сычев И А Влияние полисахарида донника желтого пектин на некоторые свойства иммунной системы животных // Российский медико-биологический вестник им. академика И П Павлова - Рязань- РГМУ, 2004 -№1-2 - С 75-82.

13. Сычев И А. Влияние полисахарида донника желтого ВРПК на некоторые свойства иммунной системы животных II Российский медико-биологический вестник им академика И. П Павлова - Рязань РГМУ, 2004 -№3-4 -С 71-78

14 Сычев И А, Порядин Г. В, Смирнов В. М Действие полисахаридов на систему крови крыс // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины -2006 -№5.-С. 530-533.

15 Сычев И.А, Смирнов В М, Колосова Т Ю Действие полисахаридов донника желтого на систему крови облученных животных // Российский медико-биологический вестник им академика И. П. Павлова -Рязань- РГМУ, 2006. -№ 1 - С. 51-55.

16. Сычев И. А, Смирнов В. М, Порядин Г. В. Действие полисахаридов донника желтого на систему кроветворения в норме и при патологии // Российский медико-биологический вестник им. академика И П.Павлова -Рязань:РГМУ,2006.-№4.-С. 71-78.

17. Сычев И. А, Смирнов В. М., Порядин Г. В., Колосова Т Ю Влияние полисахаридов донника желтого на мембраны эритроцитов при перекисном окислении II Российский медико-биологический вестник им. академикам П. Павлова. - Рязань- РГМУ, 2006 -№3-4 -С 71-78.

18 Сычев И. А, Порядин Г. В., Смирнов В. М. Механизм повышения неспецифической резистентности организма под действием полисахаридов Донника желтого Монография / Ряз обл. ин-т развития образования. -Рязань, 2006. - 144 с

19.Сычев И.А, Порядин Г. В., Смирнов В М Способ получения полисахаридов Патент на изобретение №2296132 I Федеральная служба по интеллектуальной собственности, патентам и товарным знакам, 27 03 2007 г.

20 Сычев И. А., Смирнов В М., Порядин Г. В. Полисахариды донника желтого: Монография / Ряз обл ин-т развития образования - Рязань, 2007. -124 с

21. Сычев И А, Смирнов В. М, Порядин Г В. Механизм действия полисахаридов донника желтого на здоровых животных // Вестник Российского государственного медицинского университета - 2007 -№3(56).-С. 55-60

22 Сычев И. А., Смирнов В. М, Порядин Г. В Механизм радиопротекторного действия полисахарида донника желтого - пектина // Вестник Российского государственного медицинского университета — 2008 -№1(60) -С 49-53

23. Сычев И. А. Механизм противовоспалительного действия полисахаридов донника желтого П Российский медико-биологический вестник им академика И П Павлова. - Рязань. РГМУ, 2008. - № 2. -С 61-64

24 Сычев И А Действие полисахаридов на процессы кроветворения в норме и при различных видах патологии: Монография / Ряз обл. ин-т развития образования - Рязань, 2008. - 82 с

Сычев Игорь Анатольевич (Россия)

Механизм повышения резистентности организма животных под действием растительных полисахаридов в норме и при патологии

ВРПК и ПЕКТИН получали из растений донника желтого по оригинальной методике Полисахариды повышают общую резистентность организма животных Механизм действия препаратов при введении в организм заключается в активации клеток макрофагально-моноцитарной системы, которые синтезируют и выделяют протеогликаны, гликопротеины, гликозаминогликаны - стимуляторы эритропоэза и лимфопоэза. Полисахариды увеличивают количество эритробластических островков костного мозга, а в структуре селезенки становится больше лимфатических фолликулов, возрастает численность клеток в Т-зоне и в области контакта Т- и B-зон фолликулов, повышается ферментативная активность оксидаз, АТФ-азы, активируется фагоцитоз Под влиянием ВРПК и ПЕКТИНА в крови изменяется количество Т- и B-лимфоцитов, возрастает численность эритроцитов и гемоглобина, а2- и у-макроглобулинов Полисахариды стимулируют процессы синтеза молекул и волокон, нормализуют структуру костного мозга и селезенки при различных видах облучения, количество клеток крови при анемии, структуру воспаленной конечности

Sychev Igor Anatolyevich (Russia)

The mechanism of raising of animal organism resistance without a pathology or with it under the influence of vegetative polysaccharides

WDPC and Pectin were extracted from the Melilotus off. plants Polysaccharides raise the resistance of animal organisms The mechanism of preparations action consists of the activation of monocytes and macrophages functions. The cells secrete the molecules - stimulators of hemopoiesis The number of erythroblastic islands raises m bone marrow And the number of lymphatic follicles and T and В lymphocytes raises m the spleen structure WDPC and Pectin stimulate the ferment-system activity and phagocytosis Polysaccharides change the number of T- and B- blood lymphocytes, erythrocytes and hemoglobin, a2- and y-macroglobuhns and activate the immune system Polysaccharides intensify the processes of synthesis, normalize the structure of bone marrow and spleen during the irradiations processes. Polysaccharides raise the number of blood-cells in the animal organisms with anemia. Polysaccharides normalize also structure of inflammatory limbs

Подписано в печать 29 04 2008 г Формат 60x84 1/16 Объем 2,09 уел-печ л Тираж 100экз Заказ №930 Бесплатно

Издательство Рязанского областного института развития образования 390023, г Рязань, ул Урицкого, д 2а.

Отпечатано в научно-методическом отделе Рязанского областного института развития образования 390023, г Рязань, ул Урицкого, д 2а

Содержание диссертации, доктора биологических наук, Сычев, Игорь Анатольевич

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. ОПЫТ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ПОЛИСАХАРИДОВ РАСТИТЕЛЬНОГО И ЖИВОТНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ ДЛЯ ПОВЫШЕНИЯ

РЕЗИСТЕНТНОСТИ ОРГАНИЗМА.

1.1. ПОЛИСАХАРИДЫ, ИХ РАЗНОВИДНОСТЬ И ФУНКЦИИ.

1.2. БИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ ПОЛИСАХАРИДОВ РАСТИТЕЛЬНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ.

Глава 2. МА ТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ МОДЕЛИ.

2.2. ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ МЕТОДЫ.

Глава 3. ДЕЙСТВИЕ ПОЛИСАХАРИДОВ НА ЗДОРОВЫХ ЖИВОТНЫХ.

3.1. ИЗМЕНЕНИЕ ОБЩЕГО СОСТОЯНИЯ ЖИВОТНЫХ.

3.2. ВЛИЯНИЕ ПОЛИСАХАРИДА ВРПК НА ФИЗИЧЕСКУЮ

РАБОТОСПОСОБНОСТЬ ЖИВОТНЫХ.

3.3. ИЗМЕНЕНИЕ СТРУКТУРЫ И КЛЕТОЧНОСТИ ЛИМФОИДНЫХ ОРГАНОВ ЗДОРОВЫХ ЖИВОТНЫХ.

3.4. ДЕЙСТВИЕ ПОЛИСАХАРИДОВ НА ИЗМЕНЕНИЕ СОСТАВА ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ.

3.5. ВЛИЯНИЕ ПОЛИСАХАРИДОВ НА СООТНОШЕНИЕ БЕЛКОВЫХ

ФРАКЦИЙ СЫВОРОТКИ КРОВИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ.

3.6. ВЛИЯНИЕ ПОЛИСАХАРИДОВ НА ИММУНОКОМПЕТЕНТНЫЕ КЛЕТКИ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ ЖИВОТНЫХ И ФАГОЦИТОЗ.

3.7. ВЛИЯНИЕ ПОЛИСАХАРИДА ВРПК НА ХАРАКТЕР СУТОЧНЫХ

И СЕЗОННЫХ БИОРИТМОВ.

Глава 4. ВЛИЯНИЕ ПОЛИСАХАРИДОВ НА ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ И СТРУКТУРУ КРОВЕТВОРНЫХ ОРГАНОВ ЖИВОТНЫХ

С ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ АНЕМИЕЙ.

4.1. ДЕЙСТВИЕ ВРПК НА ЖИВОТНЫХ ПРИ ПАТОЛОГИИ КРОВИ.

4.2. МЕХАНИЗМ ВЛИЯНИЯ ПОЛИСАХАРИДОВ НА ПРОЦЕСС

КРОВЕТВОРЕНИЯ.

Глава 5. ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНОЕ ДЕЙСТВИЕ ПОЛИСАХАРИДОВ.

5.1. ВОСПАЛИТЕЛЬНЫЙ ОТЕК.

5.2. ВЛИЯНИЕ ПОЛИСАХАРИДОВ НА ЛЕЙКОЦИТАРНЫЕ РЕАКЦИИ ОРГАНИЗМА.

5.3. ФАГОЦИТАРНАЯ АКТИВНОСТЬ.

5.4. ПЕРЕКИСНОЕ ОКИСЛЕНИЕ.

5.5. МЕХАНИЗМ ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНОГО ДЕЙСТВИЯ

ПОЛИСАХАРИДОВ.

Глава 6. РАДИОПРОТЕКТОРНОЕ ДЕЙСТВИЕ ПОЛИСАХАРИДА ПЕКТИН.

6.1. ИЗМЕНЕНИЕ МАССЫ КЛЕТОЧНОСТИ И СТРУКТУРЫ ОРГАНОВ КРОВЕТВОРЕНИЯ И ЛИМФОИДНОЙ СИСТЕМЫ ОБЛУЧЕННЫХ

ЖИВОТНЫХ ПОД ДЕЙСТВИЕМ ПЕКТИНА.

6.2. ИЗМЕНЕНИЕ КЛЕТОЧНОГО СОСТАВА КРОВИ ОБЛУЧЕННЫХ ЖИВОТНЫХ ПОД ДЕЙСТВИЕМ ПОЛИСАХАРИДА ПЕКТИН.

6.3. ВЛИЯНИЕ ПЕКТИНА НА КОЛИЧЕСТВО РЕГУЛЯТОРНЫХ МОЛЕКУЛ КРОВЕТВОРНЫХ ОРГАНОВ ОБЛУЧЕННЫХ ЖИВОТНЫХ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Механизм повышения резистентности организма животных под действием растительных полисахаридов в норме и при патологии"

Актуальность проблемы

Лекарственные препараты, созданные из природного сырья, обладают целым рядом преимуществ перед синтетическими: они легко усваиваются организмом человека или животного; как правило, не обладают побочными эффектами; очень редко проявляют токсичность. Широко распространены в различных климатических зонах растения Донника желтого (Melilotus off.), издавна используемого в народной и в официальной медицине. Растения Донника входят в состав мягчительных и слабительных сборов, применяются в качестве припарок, как местное раздражающее и отвлекающее средство [Гаммерман А. Ф., Гром И. И., 1976]; его отвары и настои понижают возбудимость нервной системы и используются при неврастениях и кардиоспазмах, бессоннице, истерии; обладают свойствами антикоагулянтов и способны снижать артериальное давление.

Настой, отвар, а также мазь с цветками Донника применяют при фурункулезе, гнойных ранах, отеках суставов, при воспалении среднего уха [Чиков П. С., Стекольников JL И., Мурох В. И., 1972]; для лечения бронхита, бессонницы, мигрени в виде ванн и компрессов.

Мелиоцин (препарат из листьев Донника) является достаточно сильным биостимулятором, превосходящим биостимулирующее действие экстракта алоэ [Гаммерман А. Ф., Гром И. И., 1976].

Полисахариды стимулируют иммунную систему организма, усиливая процесс фагоцитоза, увеличивая количество антителообразующих клеток'и продукцию ими антител, повышают количество лимфоцитов крови, лимфоидных органов [Смолина Т. П. и др., 1994; Афанасьев В. А. и др., 1999; Мансимова О. В. и др., 1998; Конопля Е. Н. и др., 1998; Назарова И. В. и др., 1999].

Установлен факт активации процессов кроветворения некоторыми полисахаридами, особенно процесса эритропоэза [Гольдберг Е. Д. и др., 1997; Захаров Ю. М., 1994; Федорова И. М., 1996].

Полисахариды растений активизируют ферментные системы клеток крови, ускоряют заживление ран.

Растительные полисахариды повышают уровень обмена веществ, при введении в организм, что способствует процессам регенерации и роста, усилению пролиферации наиболее быстро делящихся клеток. Есть данные о том, что полисахариды растений защищают организм от облучения [Фриденштейн А. Я., Лурия Е. А., 1980; Филиппова С. А., 1990; Лебедев В. Г. и др., 2000; Симанина Е. В. и др. 1997; Иванов С. Д., 2000].

Механизм действия полисахаридов на организм человека и животных еще не достаточно изучен. Есть лишь некоторые отрывочные сведения о спектре биологической активности полисахаридов различных растений.

Поэтому важно изучение механизмов стимулирующего действия на организм биологически активных структурных полисахаридов растений Донника желтого: ВРПК - водорастворимого полисахаридного комплекса, и ПЕКТИНА - смеси пектиновых веществ - полисахаридных комплексов. ВРПК и ПЕКТИН образуют поверхностную часть клеточных- оболочек и межклеточный матрикс растительных фотосинтезирующих надземных частей растений.

Учитывая современное состояние фармацевтической промышленности, доступность сырья и низкую стоимость получения природных полисахаридов, изучение механизмов их действия и внедрение их для использования в медицине и ветеринарии является актуальной задачей.

Цель исследования

В условиях эксперимента выявить основные эффекты полисахаридов Донника желтого на организм здоровых животных и при патологии и изучить основные механизмы их реализации.

Задачи исследования

Исходя из цели в работе поставлены следующие задачи:

1. Исследовать влияние препаратов полисахаридов Донника желтого на организм здорового животного:

- физическую работоспособность;

- изменение массы тела;

- состояние органов иммунной системы; изменение массы и структуры тимуса, селезенки, костного мозга, их клеточного состава;

- процесс кроветворения;

- клеточный и биохимический состав крови;

- фагоцитоз;

- активность ферментных систем клеток крови и иммунной системы;

- роль РНК и протеогликанов и гликопротеинов клеток крови и кроветворных органов.

2. Изучить действие полисахаридов на процессы кроветворения в организме животных в условиях развития анемии:

- состав периферической крови;

- биохимический состав плазмы крови;

- состояние костного мозга и селезенки;

- количества и качества кроветворных эритробластических островков;

- роль РНК протеогликанов и гликопротеинов клеток крови и кроветворных органов.

3. Исследовать возможное противовоспалительное действие полисахаридов и их влияние на:

- состояние воспаленной конечности;

- состав периферической крови;

- активность ферментных систем клеток крови;

- активность фагоцитарной реакции;

- процесс перекисного окисления липидов;

- выраженность антиоксидантной реакции.

4. Выяснить возможное защитное действие полисахаридов Донника желтого от облучения и, в случае его обнаружения, изучить:

- состояние органов иммунной защиты - тимуса, селезенки, костного мозга;

- клеточный состав крови;

- уровень физиологической активности клеток тимуса, селезенки, костного мозга и уровень продуцируемых ими молекул.

Научная значимость и новизна работы

Впервые установлено, что полисахариды Донника желтого ВРПК и пектин повышают неспецифическую резистентность организма здоровых животных и усиливают их физическую работоспособность. Это происходит за счет активации ферментных систем АТФ-азы, оксидаз, усиления процессов синтеза веществ клетками организма, стимуляции процессов гемопоэза. Полисахариды стимулируют клетки моноцитарно-макрофагальной системы, увеличивая в них количество РНК и синтез молекул-регуляторов (гликопротеинов и протеогликанов, гликозаминогликанов и др.), повышают уровень функциональной активности и количество оксидазных и гидролитических ферментов и фагоцитоз. Возрастает количество молекул-регуляторов в плазме крови. Увеличивается количество эритробластических островков костного мозга и селезенки, клеточность этих органов и их масса. Полисахариды проявляют свойства слабых антигенов - стимулируют клетки иммунной системы, превосходя в этом отношении полисахариды других растений. В селезенке увеличивается количество лимфоидных фолликулов, клеточность Т- и В-зон белой пульпы. Нарастает численность антителообразующих клеток. В крови увеличивается количество эритроцитов и гемоглобина, лимфоцитов, моноцитов, меняется соотношение количеств Т- и В-клеток, в плазме крови повышается уровень у-глобулинов.

Полисахариды стимулируют гемопоэз не только в здоровом организме, но и при различных видах анемии и при частичном и, в меньшей степени, при полном облучении средними дозами у-лучей. Активация клеток моноцитарно-макрофагальной системы и клеток стромы кроветворных органов приводит к увеличению в них количества молекул РНК, синтезу и выделению молекул-регуляторов кроветворения: гликозаминогликанов, протеогликанов и гликопротеинов. Возрастает количество эритробластических островков, созревающих лейкоцитов, Т- и В-лимфоцитов, восстанавливается структура костного мозга и селезенки. Клеточный и биохимический состав крови нормализуется.

Полисахариды пектин и ВРПК оказывают противовоспалительное действие, что также связано с активацией ими клеток моноцитарно-макрофагальной системы, синтезирующих и выделяющих молекулы-регуляторы функций иммунной системы. В селезенке нарастает количество антителообразующих клеток, усиливается синтез антител, увеличивается масса, клеточность тимуса и селезенки. В крови меняется соотношение Т- и В-лимфоцитов, активируется Т-зависимый иммунный ответ.

Возрастает уровень фагоцитарной активности клеток за счет активации гидролитических ферментов и пероксидазной и каталазной ферментных систем. Повышается антиоксидантная активность мембранных ферментных систем клеток.

Мы показали, что в отличие от большинства известных растительных, дрожжевых и бактериальных полисахаридов, полисахариды Донника желтого стимулируют физическую работоспособность, процессы кроветворения в норме, при облучении и анемии, обладают иммуностимулирующим и противовоспалительным действием, что является ценными свойствами, предполагающими их использование в гематологии и лечении воспаления.

Теоретическая и практическая ценность работы

В экспериментальном исследовании определяли некоторые стороны механизмов действия полисахаридов, выделенных из Донника желтого. Получены новые важные данные о механизмах стимуляции полисахаридами процессов кроветворения в здоровом организме, при облучении и различных видах анемии. Вскрыты некоторые стороны механизма противовоспалительного и иммуностимулирующего действия молекул полисахаридов. Определены элементы механизма повышения работоспособности здорового организма.

Полученные в ходе исследований данные могут быть использованы для создания кормовых и пищевых добавок на основе полисахаридов Донника в медицине и в ветеринарии. Возможно создание на основе ВРПК и< пектина лекарственных препаратов, применяемых для стимуляции процессов кроветворения, лечения воспаления, анемии, стимуляции физической работоспособности. Результаты исследований биологической активности полисахаридов так же могут быть использованы в курсе лекций по органической химии, биохимии, физиологии для студентов и преподавателей, написания методических руководств по использованию лекарственных растений и биологически активных полисахаридов растительного происхождения.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Полисахариды Донника желтого ВРПК и пектин повышают неспецифическую резистентность организма здоровых животных и усиливают их работоспособность за счет активации ферментных систем АТФ-азы, оксидаз, усиления процессов синтеза клетками, стимуляции процессов гемопоэза.

2. Полисахариды усиливают фагоцитарную активность клеток крови за счет повышения активности гидролитических ферментов и увеличения их количества.

3. Стимуляция полисахаридами процессов гемопоэза в здоровом организме, при различных видах облучения и в случае анемии осуществляется посредством действия полисахаридов на клетки моноцитарно-макрофагальной системы и клеток стромы кроветворных органов, синтезирующих молекулы гликозаминогликанов, протеогликанов и гликопротеинов — регуляторов процессов кроветворения.

4. Противовоспалительная активность полисахаридов связана с активацией ими ферментных систем, процессов фагоцитоза, усилением антиоксидантной активности мембран клеток, а так же с повышением функций иммунной системы (с усилением выработки антител, с активацией Т-зависимого иммунного ответа).

Внедрение

Внедрение, результатов исследований проведено на базе Рязанского областного института развития образования в курсах лекций: «Биологически активные вещества лекарственных растений», «Лекарственные растения, их использование в медицинской практике и учебном процессе», читаемых для преподавателей средних школ, лицеев, гимназий и при написании методического пособия «Лекарственные растения Рязанской области», учебного пособия «Строение и функции углеводов». Кроме того, данные исследования используются на базе Рязанского государственного медицинского университета в курсе лекций «Биологически активные полисахариды лекарственных растений» - для врачей и студентов.

Результаты, полученные в работе, вошли в монографию «Механизм повышения неспецифической резистентности организма под действием полисахаридов Донника желтого».

Апробация работы

Материалы диссертации были обсуждены на совместном заседании кафедры нормальной физиологии и кафедры патологической физиологии Российского государственного медицинского университета.

Публикации

По теме диссертации опубликовано: 3 монографии и 13 статей в рецензируемых журналах, а также 9 тезисов конференций.

Объем и структура диссертации

Текст диссертации изложен на 234 страницах с использованием 18 таблиц, 4 схемы, 59 рисунков и микрофотографии. Список литературы содержит 253 источника; из них 138 отечественных и 115 зарубежных.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Сычев, Игорь Анатольевич

Выводы

1. Полисахариды Донника желтого ВРПК и пектин повышают общую неспецифическую резистентность организма, стимулируя активность АТФ-азы и уровень обмена веществ, вызывают увеличение мышечной массы животного и, тем самым, улучшают общее состояние животных и повышают их физическую работоспособность.

2. Полисахариды ВРПК и пектин, увеличивая синтез РНК в клетках, стимулируют гемопоэз, увеличивая в периферической крови количество моноцитов (в 2,2-2,6 раза), лимфоцитов (на 11,6-21,5%) эритроцитов (на 26-32%) уровень гемоглобина (на 32-38%), а2-макроглобулинов (на 22-25%), активность ферментных систем клеток крови и фагоцитоз.

3. Полисахариды ВРПК и пектин, оказывают влияние на структуру костного мозга, селезенки и тимуса, повышая синтетическую активность в клетках стромы, что сопровождается увеличением их массы на 27-31% и 48-55%, соответственно.

• Увеличение массы костного мозга сопровождается увеличением в 1,5 раза его клеточности (количества эритробластических островков 1-2 класса зрелости, клеток лимфоидного ряда, кольцеядерных лейкоцитов, мегакариоцитов);

• Увеличение массы селезенки сопровождается увеличением на 37-43% ее клеточности (количества лимфоидных фолликулов -первичных вторичных и Т-лимфоцитов в структуре белой пульпы, плазматических клеток и «розеток», состоящих из центрального макрофага и лимфоцитов, клеток эритроидного ряда, кольцеядерных ■ лейкоцитов в области красной пульпы);

• Увеличение массы тимуса сопровождается увеличением на 45-54% клеточности корковой зоны и на 33-36% мозговой зоны.

4. Под влиянием полисахарида ВРПК меняются суточные и сезонные биоритмы, что проявляется изменением эритропоэза и массы иммуннокомпетентных органов.

5. Полисахариды ВРПК и пектин, оказывают выраженную антианемическую активность при экспериментальной анемии, увеличивая количество РНК в клетках кроветворных органов и усиливая синтез молекул гликозоаминогликанов и протеогликанов, что приводит к увеличению клеточности костного мозга, количества эритробластических островков, ускорению созревания клеток эритроидного и лимфоидного ряда, и нормализации клеточного состава крови.

6. Полисахариды ВРПК и пектин, обладают выраженным противовоспалительным действием, ускоряя синтез и выделение макрофагов и моноцитов и увеличивая их функциональную активность, что способствует усилению фагоцитоза, снижению проницаемости сосудистой стенки и нормализации на 7-8 сутки введения объема воспаленной конечности, СОЭ и количества лейкоцитов в крови.

7. Пектин обладает радиопротекторным действием на организм полностью или частично облученных животных, усиливая функциональную активность клеток моноцитарно-макрофагальной системы и клеток стром костного мозга и селезенки, повышая уровень РНК на 15,8-21%, гликозаминогликанов и протеогликанов в макрофагах и клетках стромы костного мозга на 13,3-16,1%. Под влиянием пектина количество эритробластических островков в костном мозге облученных животных возрастает на 8,5-17%, активируются процессы эритропоэза и лимфопоэза, что способствует восстановлению структуры органов и нормализации состава крови.

Библиография Диссертация по биологии, доктора биологических наук, Сычев, Игорь Анатольевич, Москва

1. Афанасьев В. А., Бровкина И. Л., Прокопенко Л. Г. Влияние полисахаридов ромашки аптечной на функциональное состояние иммунной системы при охлаждении // Человек и его здоровье: Сб. науч. работ. Курск, 1999.-71-73 с.-Вып. 2.

2. Афанасьев В. А. Иммуномодулирующее действие фосфолипидов и растительных гетерополисахаридов при холодовом стрессе: автореф. дис. . д-ра мед. наук: 14.00.36 / Рос. гос. мед. ун-т, Курский гос. мед. ун-т. М., 1999.-38 с.

3. Афанасьев В. А., Ласкова И. Л., Прокопенко Л. Г. Влияние растительных гетерополисахаридов, связанных с эритроцитарным носителем, на функциональное состояние иммунной системы при охлаждении организма

4. Человек и его здоровье: Сб. науч. работ. Курск, 1999. - 73-75 с.

5. Афанасьев В. А., Ласкова И. Л., Утешев Б. С. Иммуномодулирующее действие связанных с эритроцитарным носителем растительных гетерополисахаридов при иммерсионном охлаждении // Экспериментальная и клиническая фармакология. — 1999. № 5. — 31-34 с.

6. Базарный В. В., Ястребов А. П. Действие некоторых иммуномодуляторов на гемопоэз // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 1993. — № 1.

7. Баценовский В. А., Барышников А. Ю. Молекулы клеточной адгезии человека // Успехи современной биологии. 1994. - Т. 144. - № 6.

8. Бочков А. Ф., Афанасьев В. А., Зайков Г. Е. Угдеводы. М.: Наука, 1980.-С. 238.

9. Бышевский А. И., Терсенов О. А. Биохимия для врача. Изд. «Уральский рабочий», 1994. - 384 е.: ил.

10. Бычков С. М., Кузьмина С. А. Протеогликаны и клетки // Бюллетень экспер. биологии и медицины. 1996. - № 2. - С. 124-127.

11. Василенко Ю. К., Москаленко С. В., Кайшева Н. Ш., Фролова Л. М., Щербак С. Н., Мокин Ю. Н. Получение и изучение физико-химических и гепатопротекторных свойств пектиновых веществ // Химикофармацевтический журнал. 1997. - № 6. - 28-29 с.

12. Василенко Ю. К., Саджая JT. А., Компанцева Е. В., Москаленко С. В., Парфентьева Е. П., Фролова JI. М., Мокин Ю. Н. Биофармацевтическая эффективность гранул изониазида с пектином // Химико-фармацевтический журнал. 1999. - № 8. - 38-40 с.

13. Воргова JI. В., Захаров Ю. М. О взаимосвязи тренированности животных, порфиринового обмена и показателей эритрона // Физиологический журнал СССР им. И. М. Сеченова. 1989. - Т. 75. - № 6.

14. Воргова JI. В., Захаров Ю. М. О взаимосвязи тренированности животных, порфиринового обмена и показателей эритрона // Физиологический журнал СССР им. И. М. Сеченова. 1989. - Т. 75. -№12.-С. 1725-1729.

15. Воргова JI. В., Захаров Ю. М. О взаимосвязи тренированности животных, порфиринового обмена и показателей эритрона

16. Физиологический журнал СССР им. И. М. Сеченова. 1989. - Т. 76. - № 2. -С. 200-206.

17. Воротынская С. Л., Витовская Г. А., Гиршович М. 3., Фролова Н. Ю., Ивин Б. А. Гетерополисахариды с лекарственными средствами пуринового ряда // Химико-фармацевтический журнал. — 1995. -№4.-41-43 с.

18. Гаммерман А. Ф., Гром И. И. Лекарственные растения европейской части СССР. М.: Медицина, 1976. - 328 с.

19. Гольдберг Е. Д., Дыгай А. М., Захаров Ю. М. К вопросу о специфичности механизмов регуляции кроветворения при различных экспериментальных воздействиях // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 1991. — № 3. - С. 7-10.

20. Гребнева О. П., Анчикова Л. И. Применение микрокристаллической целлюлозы в лечении гиперплазии щитовидной железы у детей // Казан.медицинский журнал. 1999. - № 6. - 412-414 с.

21. Грудева-Попова Ж. Г., Цветкова Т. 3. Экспериментальное изучение влияния пектиновых веществ на неспецифическую защиту организма //Клинич. лаб. диагностика. 1999. -№ 3. — 15-18 с.

22. Давыдова М. С. и др. Изучение условий гидролиза водорастворимых полисахаридов вегетативной части топинамбура // Социально-гигиенический мониторинг здоровья населения. Рязань: РязГМУ. - Ч. 2. - С. 391-393.

23. Даффус Б., Даффус Д. Углеводный обмен растений. М.: Агропромиздат, 1986. - 185 с.

24. Домарацкая Е. И., Прянишникова О. Д., Хрущов Н. Г. Клоногенные кроветворные клетки (КОЕ-С) в пре- и постнатальном онтогенезе мыши //Онтогенез. 1996.-Т. 21.-№ 1.-С. 81-88.

25. Дьяконов И. А. Влияние иммобилизации в полисахаридные гранулы на функциональные свойства клеток животных: Автореф. дис. . канд. биол. наук: 03.00.25 / Ин-т цитологии Рос. АН. СПб., 1993. - 18 е.: ил.

26. Енгалычева Е. И., Рожкова В. Н., Ладыгина Е. Я. О противовоспалительной активности полисахаридов мать-и-мачехи // Фармация. 1982. - № 2. - С. 37-39.

27. Ермолаев В. В. Функциональная активность биоаминсодержащих структур костного мозга после действия малых доз рентгеновского излучения: Автореф. дис. . канд. мед. наук: 14.00.23 / Рос. гос. мед. ун-т. -М., 1997.-26 с.

28. Задорожнова Н. Н., Ляшенко В. А., Дроженников В. А. Активизирующее действие полисахаридов с различной молекулярной массой на макрофаги в эксперименте // Иммунология. — 1985. № 2. - С. 73-74.

29. Захаров Ю. М. Лекции по* физиологии' системы крови // Медицинский вестник. Челябинск, 1998. - № 19 (74). - 152 с.

30. Захаров Ю. М. Современный взгляд на регуляцию кроветворения // Физиологический журнал им. И. М. Сеченова. 1991. - Т. 77. - №12. -С. 91-101.

31. Захаров Ю. М., Варыпаева Л. П. Фагоцитарная активность, центрального макрофага эритробластического островка при экспериментальном торможении и стимуляции эритропоэза // Гематология и трнсфузиология. 1992. - Т. 37. - № 9. - С. 21-23.

32. Захаров Ю. М., Варыпаева Л. П. Эффект эритропоэтина на фагоцитарную активность центрального макрофага эритробластического островка у крыс // Российский физиологический журнал им. И. М. Сеченова. 1997. - Т. 83. -№ 4. - С. 86-91.

33. Захаров Ю. М. и др. О роли макрофагов костного мозга в регуляции эритропоэза при различных состояниях эритрона // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. -1991.-Т. 3.-№3. — С. 36-38.

34. Захаров Ю. М. и др. Влияние секреторных продуктов нейтрофилов на эритропоэз в эритробластических островках костного мозга // Физиологический журнал им. И. М. Сеченова. 1995. - Т. 81. - № 2. -С. 53-57.

35. Захаров Ю. М., Медяник Б. В. О закономерностях реконструкции эритропоэза в эритробластических островках костного мозга у крыс // Физиологический журнал им. И. М. Сеченова. 1994. - Т. 80. - № 3. — С. 76-82.

36. Захаров Ю. М., Медяник Б. В. О пролиферативной активности эритробластов в эритробластических островках костного мозга у крыс

37. Физиологический журнал им. И. М. Сеченова. 1997. — Т. 83. - № 7.

38. Захаров Ю. М., Рассохин А. Г. Эритробластический островок. М.: Медицина, 2002. - 280 е.: ил.

39. Кисляк Н. С., Ленская Р. В. Клетки крови у детей в норме и патологии. М.: Медицина, 1978. - 256 с.

40. Кит Ю. Я., Семенов Д. В., Кулигина Е. В., Рихтер В. А. Влияние нуклеиновых кислот и полисахаридов на фосфотрансферазную активность препаратов секреторного иммуноглобулина А, выделенных из молока человека // Биохимия. 2000. - № 2. - С. 284-290.

41. Кодина Т. В., Юдин Г. В., Шишло В. К., Антропова Ю. Г. Реактивные преобразования лимфатических узлов при эндолимфатической перфузии реополиглюкина // Проблемы лимфологии и количественной патологии: Сб. ст. М., 1997. - С. 70-71

42. Комаров Ф. И., Коровкин Б. Ф., Меньшиков В. В. Биохимические исследования в клинике. М.: Медицина, 1984. - 407 е.: илл.

43. Константинова Н. А., Крылова Н. В., Цыбульский А. В., Оводов Ю. С., Елеков Г. Б. Фагоцитозстимулирующее действие полисахаридов, выделенных из культуры ткани женьшеня // Антибиотики и химиотерапия. 1989. - Т. 34. - № 10. - С. 755-760.

44. Конторова В. И. Пространственно-временная организация внеклеточного матрикса // Онтогенез. 1994. - Т. 25. - № 1. - С. 14-30.

45. Кочетков Н. К., Бочков А. Ф., Дмитриев Б. А., Усов А. И., Чижов А. С., Шибаев В. Н. Химия углеводородов. М.: Химия, 1967.

46. Лавренова Г. Ю. Влияние некоторых растительных полисахаридов на коагулянтную активность крови животных // Фармакология и токсикология. 1986. - Т. 49. - № 4. - С. 38-40.

47. Ларская И. А., Барышева Т. С., Заботин А. И. Особенности изменения внеклеточного матрикса клеток в процессе развития суспензионной культуры Triticum timopheevii zhuk // Цитология. 2005. -№7.-С. 602-608.

48. Лилли Р. Гистологическая техника и практическая гистохимия. -М.: Мир, 1969. 685 е.: илл.

49. Максимова О. В., Максимов М. Ф., Конопля Е. Н. Изучение механизмов реализации иммуномодулирующей активности полисахаридного комплекса лабазника шестилепестного // Человек и его здоровье: (Сб. науч. работ). Курск, 2000. - Вып. 3. С. 208-209.

50. Мансимова О. В. Иммуномодулирующая и регенерационная активность лабазника шестилепестного: Автореф. дис. . канд. мед. наук: 14.00.36 / Курский гос. мед. ун-т. Курск, 1999. - 22 е.: ил.

51. Мансимова О. В., Конопля Е. Н., Сухомлинов Ю. А. Влияние гетерополисахаридов лабазника шестилепестного на процессы репаративной регенерации в гепатоцитах // Человек и его здоровье: Сб. науч. работ. -Курск, 1998.- 120-121 с.

52. Маркизов П. В. Экспериментальная фармакотерапия полисахаридным комплексом алоэ древовидного повреждений поджелудочной железы: Автореф. дис. . канд. мед. наук: 14.00.25 / Рос. АН. Сиб. отд-ние. Ин-т общ. и эксперим. биологии. Улан-Удэ, 2000. - 24 с.

53. Муравьева Т. И. Фармакосанирующие эффекты полисахаридов растительного происхождения: Автореф. дис. . д-ра фармац. наук: 15.00.02, 14.00.25 / С.-Петерб. гос. хим.-фармац. акад., Моск. мед. акад. им. И. М. Сеченова. СПб., 1999. - 39 е.: ил.

54. Назарова И. В. Влияние полисахаридов из морских водорослей и трав на систему комплемента: Автореф. дис. . канд. мед. наук: 14.00.25 / Ин-т биологии моря Дальневост. отд-ния Рос. АН. Владивосток, 1999. -24 с.

55. Овчинников В. П. Биоорганическая химия. М.: Медицина, 1988.920 с.

56. Пальцев М. А., Иванов А. А. Межклеточные взаимодействия. М.: Медицина, 1995. - 224 е.: ил.

57. Попов Г. К., Вельский М. С., Починский А. Г. Роль гликозаминогликапов в регуляции гемопоэза // Материалы конференции института по итогам научных исследований в XII пятилетке. Челябинск, 1990.-90-92 с.

58. Попов С. В. Функциональные реакции нейтрофилов и макрофагов на растительные полисахариды: Автореф. дис. . канд. биол. наук: 03.00.13 / Ин-т физиологии Коми науч. центра Урал, отд-ния Рос. АН. Сыктывкар, 1999.- 19 с.: ил.

59. Потиевский Э. Г. Антибактериальное действие пектина: Эксперим. микробиол. исслед.: Автореф. дис. . д-ра мед. наук: 03.00.07 / Омская гос. мед. акад. Челябинск, 1996. - 27 е.: ил.

60. Потиевский Э. Г. Пектин комплексный антибактериальный и антидиарейный продукт // Мор. медицинский журнал. - 1999. — № 2. — С. 45-46.

61. Потиевский Э. Г. О возможных механизмах антимикробного действия пектина при острых инфекционных диареях // Антибиотики и химиотерапия. 1996. -№ 7-8. - 40-42 с.

62. Редько К. Г. Профилактика развития деформирующего артроза коленного сустава природными полисахаридами = Prevention of development of knee joint deforming arthrosis by natural polysaccharides: (Experimental study):

63. Эксперим. исслед.): автореф. дис. . канд. мед. наук: 14.00.22 / С.-Петерб, гос. мед. ун-т им. И. П. Павлова. СПб, 1996. 17 с.

64. Ремезова О. В., Рыженков В. Е., Лозовский В. Т. Гиполипидемическое действие некрахмального полисахарида крилапол // Эфферент. терапия. 1998. - № 2. - 27-32 с.

65. Ройт А., Бростофф Дж., Мейл Д. Иммунология. М.: Изд. «Мир», 2000.-592 е.: ил.

66. Руководство по иммунофармакологии / Под ред. М. М. Дейла, Дж. К. Формена. М.: Медицина, 1998. - 332 е.: ил.

67. Саджая Л. А. Биохимическое обоснование путей снижения гепатотоксичности изониазида на основе сочетания с полисахаридами: Автореф. дис. . канд. фармац. наук: 14.00.25 / Пятигор. гос. фармац. акад. — Пятигорск, 1999. 22 е.: ил.

68. Сапин М. Р., Этинген Л. Е. Иммунная система человека. М.: Медицина, 1996. - 304 е.: ил.

69. Синилова Н. Г., Дуплищева А. П., Ромашевская Е. И., Нысякин Е. В., Туманян М. А. Химическая структура и иммуномодулирующая активность высокомолекулярных полисахаридов // Вопросы мед. химии. 1987. - Т. 33. - Вып. 6. - С. 103-107.

70. Сливкин А. И., Лапенко В. Л., Сунцова Н. С., Сироткина Г. Г., Белохвостова А. Т. Синтез и иммуномодулирующая активность полиэлектролитов на основе гликанов // Химико-фармацевтический журнал. -1997.-№2.-28-30 с.

71. Смоляр В. И., Салий Н. С., Григоренко С. Н., Грачева Л. Ф., Лаврушенко Л. Ф., Цапко Е. В., Колесников М. М. Влияние нового экзополисахарида на организм животных // Вопросы питания. 1991. - № 2. -С. 60-63.

72. Спектор Е. Б., Ананенко А. А., Политова Л. Н. Определение общей антиокислительной активности плазмы крови и ликвора // Лабораторное дело. 1984. - № 1. - С. 26-28.

73. Справочник по клиническим лабораторным методам исследований. 2-е изд., испр. и доп. / Под ред. проф. Е. А. Кост. М.: Медицина, 1975.

74. Стекольников Л. И., Мурох В. И. Целебные кладовые природы. -Мн.: Ураджай, 1980.

75. Степаненко В. Н. Химия и биохимия углеводов (полисахариды): Т. 11. М.: Высшая школа, 1977. - С. 327.

76. Суркова В. К., Даутова 3. А., Басченко И. А., Вавилова О. В. Белково-полисахаридный состав тканей глаза при ожогах хлорацетофенономв эксперименте // Новые технологии в офтальмологии: Сб. науч. тр. Уфа, 2000.- 170-174 с.

77. Сухомлинов Ю. А., Мансимова О. В., Конопля Е. Н. Иммуномодулирующее действие гетерополисахаридов лабазника шестилепестного // Человек и его здоровье: Сб. науч. работ. — Курск, 1998. — 119-120 с.

78. Сычев И. А., Подобуев Г. А. Полисахариды донника / Сб. научных трудов по животноводству. Рязань: РСХИ, 1995. - С. 41-42.

79. Сычев И. А., Подобуев Г. А. Выделение водорастворимых полисахаридов из растений семейства бобовых / Сб. научных трудов по животноводству. Рязань: РСХИ, 1995. - С. 43-44.

80. Сычев И. А. Биологическая активность полисахаридов Донника желтого: Автореф. дис. . канд. биол. наук: 02.00.10 / Рос. гос. мед. ун-т. М., 1995.-22 е.: ил.

81. Сычев И. А. Влияние полисахарида ВРПК Донника желтого на некоторые свойства иммунной системы животных // Российский медико-биологический вестник им. акад. И. П. Павлова. — Рязань; М.: НПЦ «Информационные технологии», 2004. № 3-4. - С. 24-29.

82. Сычев И. А., Смирнов В. М. Состояние селезенки крыс при действии полисахаридов Донника желтого (пектина) // Вестник Российского государственного медицинского университета. 2004. — № 6(37). - С. 85-95.

83. Сычев И. А., Порядин Г. В., Смирнов В. М. Действие полисахаридов на систему крови крыс // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2006. - № 5. - С. 530-533.

84. Третьякова Т. Б. Гликозаминогликаны в регуляции кроветворения при кровопотере: Автореф. дис. . канд. мед. наук : 14.00.16

85. Урал. гос. мед. акад. Екатеринбург, 1999. - 28 е.: ил.

86. Тюкавкина Н. С., Бауков В. П. Биоорганическая химия. М.: Медицина, 1988. 412 с.

87. Уилсон Б., Уильяме К. Методы практической биохимии. М.: Мир, 1978.-С. 136-159.

88. Уистлер Р. А., Вольфром М. J1. Методы химии углеводов. М.: Мир, 1967.-512 с.

89. Фриденштейн А. Я., Лурия Е. А. Клеточные основыкроветворного м'икроокружения. -М.: Медицина, 1980.-216 е., ил.

90. Чиков П. С. Лекарственные растения. М.: Агропромиздат, 1989.

91. Шиффман Ф. Дж. Патофизиология крови. М.-СПб.: изд. «Binom», 2000.-446 е.: ил.

92. Шишкова И. В., Прокопенко Л. Г. Иммуномодулирующее действие растительных гетерополисахаридов при инфицированных ожогах кожных покровов // Актуальные вопросы дерматовенерологии. Курск, 2000.-161-163 с.

93. Шкурупий В. А., Лукьянова Е. С., Ефремов А. В. Влияние инфузий декстрана на деструктивные процессы в паренхиме печени присиндроме длительного сдавления // Бюлетень экспериментальной биологии и медицины. 1998. -№ 5. - 592-595 с.

94. Щепеткин И. А. Активация макрофагов растительными полисахаридами // Антибиотики и химиотерапия: Ежемесячный научно-практический журнал / МЗ РФ, Гос. научный центр по антибиотикам. М.: Медицина, 2004. - Т. 49. - № 1. - С. 35-42.

95. Яковлев А. И., Конопля А. И., Ласкова И. Л., Кедровская Н. Н. Изучение механизмов иммуностимулирующего действия некоторых растительных гетерополисахаридов // Фармакология и токсикология. 1988. -№ 5. — С. 68-71.

96. Яковлев А. И. О полисахаридном составе соцветий // Химия природных соединий. 1980. - № 2. - С. 248-249.

97. Яковлев Ф. А. Сравнительное изучение полисахаридного состава смолевки татарской и смолевки поникшей // Материалы итоговой научной студенческой конференции (25 апр. 2003 г.) / Ред. О. Е. Коновалов. Рязань: РязГМУ, 2003.-С. 19-20.

98. Яковлева Е. А., Яковлев А. И., Прокопенко Л. Г. Использование растительных гетерополисахаридов для коррекции иммунного ответа при действии на организм вибрации // Фармакология и токсикология. 1990. -Т. 53. -№ 3. - С. 43-46.

99. Adler К. L., Peng P. Н., Peng R. К., Klasing К. С. The kinetics of hemopexin and alphal-acid glycoprotein levels induced by injection of inflammatory agents in chickens. Avian Dis. 2001 Apr-Jun; 45(2): 289-96.

100. Backhouse N., Delporte C., Negrete R., Feliciano S. A., Lopez-Perez J. L. Bioactive phenolic derivatives from Acaena splendens methanol extract. Phytother Res. 2002 Sep; 16(6): 562-6.

101. Bonina F., Puglia C., Tomaino A., Saija A., Mulinacci N., Romani A., Vincieri FF. In-vitro antioxidant and in-vivo photoprotective effect of three lyophilized extracts of Sedum telephium L. leaves. J Pharm Pharmacol. 2000 Oct; 52(10): 1279-85.

102. Briskin B. S., Demidov D. A. Enterosorption with pectin-containing medication in the treatment of peritonitis. Khirurgiia (Mosk). 2005; (4): 14-9. Russian.

103. Chang G. Т., Min S. Y., Kim J. H., Kim S. H., Kim J. K., Kim С. H. Anti-thrombic activity of Korean herbal medicine, Dae-Jo-Whan and its herbs. Vascul Pharmacol. 2005 Oct; 43(4): 283-8. Epub 2005 Oct 14.

104. Chao K. P., Hua K. F., Hsu H. Y., Su Y. C., Chang S. T. Antiinflammatory activity of sugiol, a diterpene isolated from Calocedrus formosana bark. Planta Med. 2005 Apr; 71(4): 300-5.

105. Cho С. H., Mei Q. В., Shang P., Lee S. S., So H. L., Guo X., Li Y. Study of the gastrointestinal protective effects of polysaccharides from Angelica sinensis in rats. Planta Med. 2000 May; 66(4): 348-51.

106. Cho S. H., Kim Т. H., Lee N. H., Son H. S., Cho I. J., Ha T. Y. Effects of Cassia tora fiber supplement on serum lipids in Korean diabetic patients. J Med Food. 2005 Fall; 8(3): 311-8.

107. Choi D. Y., Huh J. E., Lee J. D., Cho E. M., Baek Y. H., Yang H. R., Cho Y. J., Kim К. I., Kim D. Y., Park D. S. Uncaria rhynchophylla induces angiogenesis in vitro and in vivo. Biol Pharm Bull. 2005 Dec; 28(12): 2248-52.

108. Cifiiente D. A., Simirgiotis M. J., Favier L. S., Rotelli A. E., Pelzer L. E. Antiinflammatory activity from aerial parts of Baccharis medullosa, Baccharis rufescens and Laennecia sophiifolia in mice. Phytother Res. 2001 Sep; 15(6): 529-31.

109. Cruz-Vega D. E., Aguilar A., Vargas-Villarreala J., Verde-Star M. J., Gonzalez-Garza M. T. Leaf extracts of Carlowrightia cordifolia induce macrophage nitric oxide production. Life Sci. 2002 Feb 1; 70(11): 1279-84.

110. Das M., Sur P., Gomes A., Vedasiromoni J. R., Ganguly D. K. Inhibition of tumour growth and inflammation by consumption of tea. Phytother Res. 2002 Mar; 16 Suppl 1: S40-4.

111. De Melo G. O., Muzitano M. F., Legora-Machado A., Almeida T. A.,

112. De Oliveira D. В., Kaiser C. R., Koatz V. L., Costa S. S. C-glycosylflavones from the aerial parts of Eleusine indica inhibit LPS-induced mouse lung inflammation. Planta Med. 2005 Apr; 71(4): 362-3.

113. Gao Y., Tang W., Dai X., Gao H., Chen G., Ye J., Chan E., Koh H. L., Li X., Zhou S. Effects of water-soluble Ganoderma lucidum polysaccharides on the immune functions of patients with advanced lung cancer. J Med Food. 2005 Summer; 8(2): 159-68.

114. Gertsch J., Schoop R., Kuenzle U., Suter A. Echinacea alkylamides modulate TNF-alpha gene expression via cannabinoid receptor CB2 and multiple signal transduction pathways. FEBS Lett. 2004 Nov 19; 577(3): 563-9.

115. Gokhale А. В., Damre A. S., Kulkami K. R., Saraf M. N. Preliminary evaluation of anti-inflammatory and anti-arthritic activity of S. lappa, A. speciosa and A. aspera. Phytomedicine. 2002 Jul; 9(5): 433-7.

116. Greenspan P., Bauer J. D., Pollock S. H., Gangemi J. D., Mayer E. P., Ghaffar A., Hargrove J. L., Hartle D. K. Antiinflammatory properties of the muscadine grape (Vitis rotundifolia). J Agric Food Chem. 2005 Nov 2; 53(22): 8481-4.

117. Gressley T. F., Armentano L. E. Effect of abomasal pectin infusion on digestion and nitrogen balance in lactating dairy cows. J Dairy Sci. 2005 Nov; 88(11): 4028-44.

118. Grzanna R., Phan P., Polotsky A., Lindmark L., Frondoza C. G. Ginger extract inhibits beta-amyloid peptide-induced cytokine and chemokine expression in cultured THP-1 monocytes. J Altern Complement Med. 2004 Dec; 10(6): 1009-13.

119. Guo R., Zhai L., Liu Z., Wang H., Zhao Y., Sun Y., Zou H. Study on inhibition on alpha-glucosidase and analysis of the hypoglycemic composition of lobster sauce. Zhong Yao Cai. 2005 Jan; 28(1): 38-40. Chinese.

120. Hai-Yang G., Ping S., Li J. I., Chang-Hong X., Fu T. Therapeutic effects of Lycium barbarum polysaccharide (LBP) on mitomycin С (MMC)-induced myelosuppressive mice. J Exp Ther Oncol. 2004 Oct; 4(3): 181-7.

121. Hegazy R. A., el-Faramawy A. A. Substitution of sugar cane bagasse in the chicken diet and immune response. Nahrung. 2001 Oct; 45(5): 364-7.

122. Hernandez-Perez M., Rabanal Gallego R. M. Analgesic and antiinflammatory properties of Sideritis lotsyi var. Mascaensis. Phytother Res. 2002 May; 16(3): 264-6.

123. Hernandez-Perez M., Rabanal R. M. Evaluation of the antinflammatory and analgesic activity of Sideritis canariensis var. pannosa in mice. J Ethnopharmacol. 2002 Jun; 81(1): 43-7.

124. Hong Т., Jin G. В., Cho S., Cyong J. C. Evaluation of the antiinflammatory effect of baicalein on dextran sulfate sodium-induced colitis in mice. Planta Med. 2002 Mar; 68(3): 268-71.

125. Ibrahim Т., Cunha J. M., Madi K., da Fonseca L. M., Costa S. S., Goncalves Koatz V. L. Immunomodulatory and anti-inflammatory effects of Kalanchoe brasiliensis. Int Immunopharmacol. 2002 Jun; 2(7): 875-83.

126. Ji Y. В., Ji C. F., Zou X., Gao S. Y. Study on the effects of two kinds of cactus polysaccharide on erythrocyte membrane protein and fluidity of the lipid in SI80 mice. Zhongguo Zhong Yao Za Zhi. 2004 Oct; 29(10): 967-70. Chinese.

127. Jin H. Z., Lee J. H., Lee D., Hong Y. S., Kim Y. H., Lee J. J. Inhibitors of the LPS-induced NF-kappaB activation from Artemisia sylvatica. Phytochemistry. 2004 Aug; 65(15): 2247-53.

128. Jantaratnotai N., Utaisincharoen P., Piyachaturawat P., Chongthammakun S., Sanvarinda Y. Inhibitory effect of Curcuma comosa on NOproduction and cytokine expression in LPS-activated microglia. Life Sci. 2006 Jan 2; 78(6): 571-7. Epub 2005 Aug 16.

129. Kaiho Т., Tanaka Т., Tsuchiya S., Yanagisawa S., Takeuchi O., MiuraM., Saigusa- N., Miyazalci M. Effect of the herbal medicine Dai-kenchu-to for serum ammonia in hepatectomized patients. Hepatogastroenterology. 2005 Jan-Feb; 52(61): 161-5.

130. Kasahara, Y., Yasukawa K., Kitanaka S., Khan M. Т., Evans F. J. Effect of methanol extract from flower petals of Tagetes patula L. on acute and chronic inflammation model. Phytother Res. 2002 May; 16(3): 217-22.

131. Kim J. S., Narula-A. S., Jobin C. Salvia miltiorrhiza water-soluble extract, but not its constituent salvianolic acid B; abrogates LPS-induced NF-kappaB signalling in intestinal epithelial cells. Clin Exp Immunol. 2005 Aug; 141(2): 288-97.

132. Kim M. High-methoxyl pectin has greater enhancing effect on glucose uptake in intestinal perfused rats. Nutrition. 2005 Mar; 21(3): 372-7.

133. Kim M. S., Shigenaga J. K., Moser A. H., Feingold K. R., Grunfeld C. Suppression of estrogen-related receptor alpha and medium-chain acyl-coenzyme A dehydrogenase in the acute-phase response. J Lipid Res. 2005 Oct; 46(10): 2282-8. Epub 2005 Aug 1.

134. Kodama N., Asakawa A., Inui A., Masuda Y., Nanba H. Enhancement of cytotoxicity of NK cells by D-Fraction, a polysaccharide from Grifola frondosa. Oncol Rep. 2005 Mar; 13(3): 497-502.

135. Kuduk-Jaworska J., Szpunar J., Gasiorowski K., Brokos B. Immunomodulating polysaccharide fractions of Menyanthes trifoliata L. ZNaturforsch С. 2004 Jul-Aug; 59(7-8): 485-93.

136. Kuo Y. C., Tsai W. J., Wang J. Y., Chang S. C., Lin C. Y., Shiao M. S. Regulation of bronchoalveolar lavage fluids cell function by the immunomodulatory agents from Cordyceps sinensis. Life Sci. 2001 Jan 19; 68(9): 1067-82.

137. Lazareva E. В., Smirnov S. V., Khvatov V. В., Spiridonova T. G.,

138. Bitkova E. E., Shramko L. U., Men'shikov D. D. Oral administration of pectins for prophylaxis and treatment of purulent septic complications in patients with burns. N. V. Sklifosovsky Clinical and Research Institute for Emergency Medicine, Moscow.

139. Letendre M., D'Aprano G., Delmas-Patterson G., Lacroix M. Isothermal calorimetry study of calcium caseinate and whey protein isolate edible films cross-linked by heating and gamma-irradiation. J Agric Food Chem. 2002 Oct 9; 50(21): 6053-7.

140. Lo H. C., Yang J. G., Liu В. C., Chen Y. W., Huang Y. L., Poon S. L., Liu M. Y., Huang В. M. The effects of Tremella aurantia on testosterone and corticosterone productions in normal and diabetic rats. Arch Androl. 2004 Nov-Dec; 50(6): 395-404.

141. Luk J. M., Tam P., Fan S. Т., Koo M. W. Immunosuppressive effects of Tripterygium wilfordii polysaccharide on LPS-stimulated human monocytes. Transplant Proc. 2000 Nov; 32(7): 2013-5. No abstract available.

142. Manna S. K., Sah N. K., Newman R. A., Cisneros A., Aggarwal В. B. Oleandrin suppresses activation of nuclear transcription factor-kappaB, activator protein-1, and c-Jun NH2-terminal kinase. Cancer Res. 2000 Jul 15; 60(14): 3838-47.

143. Marin-Rodriguez M. C., Orchard J., Seymour G. B. Pectate lyases, cell wall degradation and fruit softening. Horticulture Research International, Plant Genetics and Biotechnology Department, Wellesbourne, Warwickshire1. CV35 9EF, UK.

144. Muruganandan S., Srinivasan K., Chandra S., Tandan S. K., Lai J., Raviprakash V. Anti-inflammatory activity of Syzygium cumini bark. Fitoterapia. 2001 May; 72(4): 369-75.

145. Musial W., Kubis A. A. Some interactions of natural and synthetic anionic polymers with biologically active substances. Polim Med. 2005; 35(1): 39-46. Review. Polish.

146. Harada Т., Masuda S., Arii M., Adachi Y., Nakajima M., Yadomae Т., Ohno N. Soy isoflavone aglycone modulates a hematopoietic response in combination with soluble beta-glucan: SCG. Biol Pharm Bull. 2005 Dec; 28(12): 2342-5.

147. Harput U. S., Saracoglu I., Ogihara Y. Stimulation of lymphocyte proliferation and inhibition of nitric oxide production by aqueous Urtica dioica extract. PhytotherRes. 2005 Apr; 19(4): 346-8.

148. Nergard С. S. , Kiyohara H., Reynolds J. C., Thomas-Oates J. E.,

149. Matsumoto Т., Yamada H., Patel Т., Petersen D., Michaelsen Т. E., Diallo D.,i

150. Obara N., Hasegawa M., Kodama O. Induced volatiles in elicitor-treated and rice blast fungus-inoculated rice leaves. Biosci Biotechnol Biochem. 2002 Dec; 66(12): 2549-59.

151. Qiu Z., Jones K., Wylie M., Jia Q., Orndorff S. Modified Aloe barbadensis polysaccharide with immunoregulatory activity. Planta Med. 2000 Mar; 66(2): 152-6.

152. Olano-Martin E., Gibson G. R., Rastell R. A. Comparison of the in vitro bifidogenic properties of pectins and pectic-oligosaccharides. School of Food Biosciences, The University of Reading, Whiteknights, Reading, UK.

153. Pandey R., Maurya R., Singh G., Sathiamoorthy В., Naik S. Immunosuppressive properties of flavonoids isolated from Boerhaavia diffusa Linn. Int Immunopharmacol. 2005 Mar; 5(3): 541-53.

154. Popov S. V., Popova G. Y., Ovodova R. G., Ovodov Y. S. Antiinflammatory activity of the pectic polysaccharide from Comarum palustre. Fitoterapia. 2005 Jun; 76(3-4): 281-7.

155. Park E. J., Kim В., Eo H., Park K., Kim Y., Lee H. J., Son M., Chang Y. S., Cho S. H., Kim S., Jin M. Control of IgE and selective T(H)1 and T(H)2 cytokines by PG102 isolated from Actinidia arguta. J Allergy Clin Immunol. 2005 Nov; 116(5): 1151-7.

156. Rilantono L. I., Yuwono H. S., Nugrahadi T. Dietary antioxidative potential in arteries. Clin Hemorheol Microcirc. 2000; 23(2-4): 113-7.

157. Sandoval M., Charbonnet R. M., Okuhama N. N., Roberts J., KrenovaZ., Trentacosti A. M., Miller M. J. Cat's claw inhibits TNFalpha production and scavenges free radicals: role in cytoprotection. Free Radic Biol Med. 2000 Jul 1; 29(1): 71-8.

158. Shao W., Xu W., Li A., Xi Y., Wang C. Pharmacokinetic studies of quercetin-hydroxypropyl-beta-cyclodextrin inclusion compound in rats. Zhong Yao Cai. 2005 Jan; 28(1): 47-50. Chinese.

159. Shi H. Z., Gao N. N„ Li Y. Z., Yu J. G., Fan Q. C., Bai G. E. Effects of active fractions from Lycopus lucidus L. F04 on platelet aggregation and thrombus formation. Space Med Med Eng (Beijing). 2004 Oct; 17(5): 313-7.

160. Shi H. Z., Gao N. N., Li Y. Z., Yu J. G., Fan Q. C., Bai G. E., Xin В. M. Effects of L.F04, the active fraction of Lycopus lucidus, on erythrocytes rheological property. Chin J Integr Med. 2005 Jun; 11(2): 132-5.

161. Singh В., Sahu P. M., Sharma M. K. Anti-inflammatory and antimicrobial activities of triterpenoids from Strobilanthes callosus nees. Phytomedicine. 2002 May; 9(4): 355-9.

162. Shon Y. H., Kim J. H., Nam K. S. Effect of Astragali radix extract on lipopolysaccharide-induced inflammation in human amnion. Biol Pharm Bull. 2002 Jan; 25(1): 77-80.

163. Sun H., Zheng Q. Haemolytic activities and adjuvant effect of Gynostemma pentaphyllum saponins on the immune responses to ovalbumin in mice. Phytother Res. 2005 Oct; 19(10): 895-900.

164. Suyenaga E. S., Reche E., Farias F. M., Schapoval E. E., Chaves C. G., Henriques A. T. Antiinflammatory investigation of some species of Mikania. Phytother Res. 2002 Sep; 16(6): 519-23.

165. Tang X., Tian X., Ci L. Preparation and evaluation of pH-dependent , gradient-release pellets for TCM. Drug Dev Ind Pharm. 2004; 30(10): 1079-87.

166. Tingjun H., Rongliang Z. Promotion of Sophora subprosrate polysaccharide on nitric oxide and interleukin-2 production in murine T lymphocytes: implicated Ca2+ and protein kinase C. Int Immunopharmacol. 2004 Jan; 4(1): 109-18.

167. Trommer H., Neubert R. H. The examination of polysaccharides as potential antioxidative compounds for topical administration using a lipid model system. Int J Pharm. 2005 Jul 14; 298(1): 153-63.

168. Tuinier R., Rolin C., de Kruif C. G. Electrosorption of pectin onto casein micelles. Biomacromolecules. 2002 May-Jun; 3(3): 632-8.

169. Veiga V. F. Jr., Zunino L., Calixto J. В., Patitucci M. L., Pinto A. C. Phytochemical and antioedematogenic studies of commercial copaiba oils available in Brazil. Phytother Res. 2001 Sep; 15(6): 476-80.

170. Villasenor I. M., Canlas A. P., Pascua M. P., Sabando M. N., Soliven L. A. Bioactivity studies on Cassia alata Linn, leaf extracts. Phytother Res., 2002 Mar; 16 Suppl 1: S93-6.

171. Voegeling S., Fantuzzi G. Regulation of free and bound leptin and soluble leptin receptors during inflammation in mice. Cytokine. 2001 Apr 21; 14(2): 97-103.

172. Wu Y., Ou-Yang J. P., Wu K., Wang Y., Zhou Y. F., Wen C. Y. Hypoglycemic effect of Astragalus polysaccharide and its effect on PTP1B. Acta Pharmacol Sin. 2005 Mar; 26(3): 345-52.

173. Wu M. J., Weng C. Y., Wang L., Lian T. W. Immunomodulatory mechanism of the aqueous extract of sword brake fern (Pteris ensiformis Burm.). J Ethnopharmacol. 2005 Apr 8; 98(1-2): 73-81.

174. Xie W. G., Shao N. S., Ma X. C., Ding Q. X., Zhao X., Liu N. L., Wei Y. S., Wang H. X., Chen K. J. Study on serum proteome of rat endotoxemia treated by figwort root. Zhongguo Zhong Yao Za Zhi. 2004 Sep; 29(9): 877-82. Chinese.

175. Xue J. P., Shi L. Y., Zhang A. M. Microtuber induction in vitro from Rehmannia glutinosa. Zhongguo Zhong Yao Za Zhi. 2002 Nov; 27(11): 824-7. Chinese.

176. Yamamoto Y., Aoyama S., Hamaguchi N., Rhi G. S. Antioxidative and antihypertensive effects of Welsh onion on rats fed with a high-fat high-sucrose diet. Biosci Biotechnol Biochem. 2005 Jul; 69(7): 1311-7.

177. Yang Т., Jia M., Mei Q. Effect of Angelica sinensis polysaccharide on lymphocyte proliferation and cytokine induction. Zhong Yao Cai. 2005 May; 28(5): 405-7. Chinese.

178. Yang X. P., Schaper F., Teubner A., Lammert F., Heinrich P. C., Matern S., Siewert E. Interleukin-6 plays a crucial role in the hepatic expression of SOCS3 during acute inflammatory processes in vivo. J Hepatol. 2005 Oct; 43(4): 704-10.

179. Yao C., Wei W., Li X., Hosoi K. Acute phase protein induction by experimental inflammation in the salivary gland. J Oral Pathol Med. 2005 Jul; 34(6): 364-7.

180. Yesilada E., Bedir E., Calis I., Takaishi Y., Ohmoto Y. Effects oftriterpene saponins from Astragalus species on in vitro cytokine release. J Ethnopharmacol. 2005 Jan 4; 96(1-2): 71-7.

181. Zhao G., Kan J., Li Z., Chen Z. Characterization and immunostimulatory activity of an (1—>6)-a-D-glucan from the root of Ipomoea batatas. Int Immunopharmacol. 2005 Aug; 5(9): 1436-45.

182. Zhang G. L., Wang Y. H„ Ni W., Teng H. L., Lin Z. B. Hepatoprotective role of Ganoderma lucidum polysaccharide against BCG-induced immune liver injury in mice. World J Gastroenterol. 2002 Aug; 8(4): 728-33.