Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Люминесцентно-гистохимический анализ биоаминсодержащих структур селезенки при ауто- и изотрансплантации костного мозга

ВАК РФ 03.00.25, Гистология, цитология, клеточная биология

Автореферат диссертации по теме "Люминесцентно-гистохимический анализ биоаминсодержащих структур селезенки при ауто- и изотрансплантации костного мозга"

На правах рукописи

ТАБАЕВА НАДЕЖДА НИКОЛАЕВНА

ЛЮМИНЕСЦЕНТНО-ГИСТОХИМИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ БИОАМИНСОДЕРЖАЩИХ СТРУКТУР СЕЛЕЗЕНКИ ПРИ АУТО- И ИЗОТРАНСПЛАНТАЦИИ КОСТНОГО МОЗГА

03.00.25 — гистология, цитология, клеточная биология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

1_Ю3453202

Саранск, 2008

003453202

Работа выполнена на кафедре цитологии, эмбриологии, гистологии Медицинского института Чувашского государственного университета им. И.Н. Ульянова

Научный руководитель: доктор биологических наук,

профессор Любовцева Любовь Алексеевна

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор Котляров Андрей Александрович доктор биологических наук, профессор Сыч Виталий Федорович

Ведущее учреждение: ГОУВПО "Московский государственный

медико-стоматологический институт

Защита состоится « _05_» _декабря_ 2008 г. в

_10:00_ часов на заседании диссертационного совета

диссертационного совета Д.212.117.01 при ГОУВПО "Мордовский государственный университет им. Н.П. Огарева" (430000, Республика Мордовия, г. Саранск, ул. Большевистская, 68).

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке ГОУВПО "Мордовский государственный университет им. Н.П. Огарева" (430000, Республика Мордовия, г. Саранск, ул. Большевистская, 68). Автореферат диссертации опубликован на официальном сайте Мордовского государственного университета WWW.mrsu.ru Е-пшЫзоуеШтгеи.ги

Автореферат разослан «_3_»_ноября_2008 г.

Ученый секретарь диссертационного совета. профессор ^ В П. Балашов

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы: в настоящее время все чаше и чаще в лечении «безнадежных» онкологических больных, а также после облучения большими дозами радиации применяют или пересадку костного мозга, или вводят стволовые клетки. Этот метод в настоящее время получил термин «клеточная терапия». Однако, для получения и размножения стволовых клеток необходимы современные технологии и сложное, дорогостоящее тестирование. В связи с чем, пересадка костного мозга может обойтись значительно дешевле и быть более эффективной, так как вводятся не только стволовые клетки, но и вещества необходимые для роста этих клеток. Действие введенных клеток и веществ идет под воздействием, как местного регулирующего звена, так и всей вегетативной частью нервной и иммунной систем организма. Как известно, регуляция многих органов на месте происходит при помощи особых биоаминсодержащих структур, в состав которых входят многие компоненты, в том числе тучные и гранулярные люминесцнрующие клетки (ГЛК) (Любовцева Л.А., 1993; Ермолаев В.В., 1997; Кирпичникова Е.А., 2004; Агафонкин С.А., 2006).

Исследование автономной, местной регуляции, с помощью биогенных аминов, в центральных и периферических органах иммунитета при подсадке костного мозга ранее никем не изучалось. При различных пересадках костного мозга, мы опосредованно изучали его действие на динамику иммунных процессов в периферическом иммунном и кроветворном органе -селезенке. Биогенные амины, находящиеся в селезенке, влияют на клеточное микроокружение и способствуют тому или иному направлению цитодифференцировки лимфоцитов.

В костном мозге, где происходит ангигеннезависимая дифференцировка В-лимфоцитов, нейромедиаторы также являются трансмиттерами, и участвуют в дифференцировке клеток и их созревании. В связи с чем, 1гмеется возможность определить действие трансплантата как собственного, так и чужеродного в виде костного мозга на аппарат местного саморегулирования селезенки.

Таким образом, мы попытались выяснить влияние разных пересадок костного мозга на динамику морфологических изменений белой и красной пульпы селезенки, и исследовать взаимодействие нейромедиаторов с помощью корреляционных связей между нейроаминами как в самих биоаминсодержащих структурах, так и между ними.

Цель и задачи исследования Целью настоящего исследования пилятся тучение ка ранних сроках влияния ауто- и изогенной пересадки костного мозга на биоаминсодержащие структуры селезенки.

В связи с поставленной целью были определены задачи исследования:

1. Выявить локализацию нейромедиаторов в биоаминсодержащих структурах селезенки на ранних стадиях после ауто- и изогенной пересадки костного мозга.

2. Определить корреляционные взаимосвязи между пейро.медиаторам и в ГЛК периартер иалыюй, мантийной, краевой зонах, центра размножения и красной пульпе, а также в тучных клетках у интактных и экспериментальных животных.

3. Сравнить корреляционную связь по катехоламинам (КА/КА); серотонину (С/С); по гистамину (Г/Г) между ГЛК/ГЛК и ГЛК/гучные клетки разных зон белой и красной пульпы селезенки через 30 и 60 мин после ауто-и изогенной трансплантации костного мозга.

4. Исследовать серотониновый индекс в ГЛК и тучных клетках селезенки в местах их нахождения у экспериментальных животных.

5. Изучить локализацию и степень сульфатации гепарина, как биоамшшнакгивирующего вещества, на ранних сроках после ауто- и изогенной трансплантации костного мозга.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА

1. Впервые показано, что пересадка костного мозга, существенно влияет на распределение нейромедиаторов в самих биоаминсодержащих структурах селезенки, и оказывает значительное воздействие на корреляционные взаимосвязи между нейроаминами в содержащих их структурах.

2. Впервые выявлено, что разные виды пересадок костного мозга по-разному изменяют корреляционные взаимосвязи между биоаминсодержащими структурами красной и белой пульпы. Выявляются бласпрансформирующиеся (БТЛ) группы лимфоцитов, вокруг которых определяются биоаминсодержащие ГЛК.

3. Впервые исследован серотониновый индекс в биоаминсодержащих структурах отдельных зон белой и красной пульпы селезенки, который показывает ведущую роль одного из медиаторов на разных сроках после ауто- и изогенной трансплантации костного мозга.

4. Определено, что ауто- и изогенная трансплантация костного мозга по-разному влияет на степень сульфатации гепарина.

Научно-практическая значимость работы. Результаты исследования впервые показывают активность нейромедиаторов в биоаминсодержащих структурах селезенки при пересадке костного мозга. Разные пересадки костного мозга влияют на изменение корреляционных связей в аминосодержащих структурах красной и белой пульпы селезенки, и приводят к перераспределению в структурах гистамина, катехоламинов и серотонина, что, очевидно, изменяет регуляцию и направление цитодифференцировки лимфоцитов. Выявлено, что ведущим медиатором в биоаминсодержащих структурах селезенки является в первую очередь серотонин и только потом, гистамин. Показано, что бласттрансформация лимфоцитов происходит при активном участии биоаминсодержащих структур, нейроамины в которых образуют корреляционные связи с ГЛК и тучными клетками как белой, так и красной пульпе селезенки.

Полученные результаты используются в лекциях, читаемых на кафедре

цитологии, эмбриологии, гистологии ФГОУ ВПО «Чувашский государственный университет им. И.Н. Ульянова».

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ

1. Между адренергическими нервными волокнами, тучными и гранулярными люминесцирующими клетками существуют тесные взаимосвязи. В селезенке крыс из биоаминсодержащих структур преобладают ГЛК.

2. Пересадка костного мозга, существенно влияет на перераспределение нейромедиаторов как в самих биоаминсодержащих структурах, так и оказывает значительное воздействие на корреляционную связь по нейроаминам между этими структурами в разных зонах селезенки.

3. Изопересадка костного мозга вызывает более глубокие изменения в перераспределении корреляционных связей, чем аутопересадка. Вызывает изменение формы мальпигиевых телец, появлению в большем числе БТЛ как в белой, так и в красной пульпе и активацию тромбоцитарного ростка.

4. Ведущим медиатором в изучаемых структурах является серотонин, после изопересадки ведущим медиатором становится НА

5. Ауто- и изопересадка костного мозга влияет на численность тучных клеток, их дегрануляцию и сульфатацию гепарина в них.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ

Работа была доложена в 1999 г. на XXXVII международной студенческой конференции «Студент и научно-технический прогресс» в г. Новосибирске. В 1999г.на конференции в г. Екатеринбурге «Физика в биологии и медицине», на международной конференции по иммунологии в 2000 г. в г. Эйлат, Израиль; на международном конгрессе в 2002 г. по иммунореабилитацни Cannes, France; на Всероссийском семинаре «Генетика продолжительности жизни и старения» в Сыктывкаре, 2008; на Всероссийской конференции с международным участием, посвященный 85-летию со дня рождения Д.С. Гордон в г. Чебоксары в 2008.

Объем работы. Диссертационный материал изложен на 119 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов, выводов и списка цитируемой литературы, содержащего 170 источников, из них отечественных 130 и зарубежных 40. Диссертация, иллюстрирована 5 таблицами, 48 рисунками.

Публикации по теме диссертации. Основные положения диссертации отражены в 6 опубликованных статьях, 1 из которых является международной, 1 - центральной.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Объектом исследования были белые беспородные крысы, самцы, общей массой около 180±20 гр., в количестве 100. Из них 10 животных были шгтактными. Десяти животным вводили физиологический раствор -

контрольная группа. Третью группу составили экспериментальные крысы, которым вводили свой же костный мозг (40 крыс). Четвертую - костный мозг брали от другой крысы такого же возраста, веса и этого же помета и вводили также в хвостовую вену (40 крыс).

Под эфирным наркозом фиксировали правую заднюю конечность белой крысы, обрабатывали операционное поле 70% раствором этилового спирта, удаляли кожный покров, тупым методом по межмышечным фасциям выделяли бедренную кость, рассекали ее в области эпифиза и с помощью инсулинового шприца вакуумным методом извлекали 1 ЕД (25 мкл) костного мозга, смешивали с 2 ЕД (50 мкл) 0,85 % раствора натрия хлорида и полученную клеточную суспензию в количестве 1 ЕД (25 мкл) вводили в хвостовую вену.

Селезенку извлекали под эфирным наркозом через 30 и 60 мин после введения костного мозга и делали хриостатные срезы толщиной 15 мкм.

Методы исследования.

1. Для выявления изменений, происшедших в опытных группах применяли общую окраску гематоксилин - эозин. Препараты изучали на микроскопе сравнения.

2. Люминесцентно гистохимическим методом Фалька (FalK В. et al., 1962) изучали катехоламины и серотонин.

3. Люминесцентно-гистохимическим методом Кросса (Cross S.A. et al., 1971) исследовали гистамин

4. Количественно концентрации КА, серотонина и гистамина в аминосодержащих структурах селезенки оценивались с помощью цитоспектрофлуориметрии на люминесцентном микроскопе ЛЮМАМ-4 с применением фотометрической насадки ФМЭЛ-1А. Для определения гистамина служил интерференционный фильтр 7 (515 им), катехоламинов - 6 (480 нм), серотонина - (525 нм). Наблюдение велось при напряжении 900 вольт с зондом 0,5. Показания снимались с измерительной части усилителя вольтметра в условных единицах (у.е.) (Карнаухов В.Н., 1978).

5. Корреляционный анализ проводили для установления взаимосвязи между БА в изучаемых структурах. Сильная положительная корреляционная связь (более 0,5) означает повышение концентрации каждого БА в корреляционной паре, по-видимому, связанное с определенным естественным фактором регуляции. Отрицательная корреляционная указывает, что содержание одного Б А возрастает при убывании другого.

6. О биоашншой обеспеченности органа и его функциональном состоянии можно судить не только по абсолютным показателям содержания отдельных БА, но и их соотношениям (Вайсфельд И.Л. с соавт., 1981). Соотношение С и КА (ls) принято называть серотониновым индексом. Он вычисляется по формуле Is = [ (уровень СТ) / (уровень КА) ) / п, где и -число наблюдений. Когда Is больше единицы, можно говорить о преобладании в клетке серотонина. Если Is меньше единицы, то в такой клетке преобладают КА.

7. Представление о количественном распределении тучных и

гранулярных клеток дает метод подсчета их в 5 нолях зрения микроскопа при увеличении об. 90, ок. 10. В работе приводятся следующие показатели: М -средняя арифметическая величина содержания клеток в 5 полях зрения; т' -ошибка средней арифметической величины. Статистическую достоверность определяли критерием Стьюдента (Гланц С., 1999).

8. Окраска полихромным толуидиновым синим по Уина применялась для определения степени сульфатации гепарина в тучных клетках Ортохромную (голубую) окраску дает моно- и дисульфатированный, незрелый гепарин. Бета-метахроматическую (чернильно-фиолетовую) дает трехсульфатированный, созревающий гепарин и гамма-метахроматическая (пурпурная) окраска присуща зрелому, пятисульфатированному гепарину.

9. Статистическая обработка материала проводилась с помощью персональной ЭВМ Pentium-20032 ММХ с использованием пакета программ Microsoft Office (Word и Excell).

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ II ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Качественные и количественные изменения бмоамннсодержащих структур селезенки после аутогенной пересадки красного костного мозга

Ранее люминесцентно-гистохимическими методами селезенку изучали И.Г. Зеленова (1965); Л.А. Сысоева (1986); Л.Винокур (1988); Н.Н. Голубцова (2002). Выявлено, что наибольшее содержание К А, серотонина и гистамина выявляется в ГЛК и тучных клетках и в адренергических нервных волокнах. В селезенке крыс преобладают ГЛК, которые расположены около центра размножения, периартериальной зоны, в мантийной и краевой зонах, а также в красной пульпе. Тучные клетки в большом числе определяются в капсуле, меньше в септах, которые располагаются по адвентищш сосудов и около нервных волокон.

При исследовании на гистамин по рисунку 1 можно видеть, что наибольшее его содержание у интактных крыс определяется в ГЛК периартериальной зоне и центре размножения. Наибольшее содержание серотонина выявлено в ГЛК мантийной и краевой зон.

Через 30 мин после аутотрансплантацпи содержание серотонина в ГЛК всех зон снижается (рис. 2), но происходит увеличение содержания гистамина в ГЛК центра размножения и красной пульпы.

Через 60 мин после аутогенной пересадки костного мозга ГЛК около периартериальной зоны перестают выявляться. Содержание всех биогенных аминов в ГЖ всех зон, за исключением содержания гистамина в ГЛК центра рсилшижешм снижается или восстанавливается (рис.3). Начинают определяться шаровидные группы лимфобластов в мантийной, краевой зонах и в красной пульпе селезенки. Появление около них ГЛК говорит о том, что эти клетки активно участвуют в процессах бласттрансформации и иммуногенеза.

[огистамин шэ катехоламины □ серотонин ]

Рис. 1. Распределение биогенных аминов в Г'ЛК зон селезенки интактных крыс. А - ГЛК периартериальной зоны; Б - ГЛК центра размножения; В -ГЛК мантийной зоны; Г - ГЛК красной пульпы; Д - тучные клетки.

Через 30 мин после аутопересадки

[агистамин га катехоламины □ серотонин I

Рис. 2. Распределение биогенных аминов в ГЛК зон селезенки крыс через 30 мин после аутотрансплантации костного мозга. А - ГЛК периартериальной зоны; Б - ГЛК центра размножения; В - ГЛК мантийной зоны; Г - ГЛК красной пульпы; Д - тучные клетки; Е - ГЛК около БТК.

Через 60 мин после аутопересадки

|~п гистамин □ катехоламины □ серотонинГ

Рис. 3. Распределение биогенных аминов в ГЛК зон селезенки крыс через 60 мин после аутотрансплантации костного мозга. А - ГЛК периартериальной зоны; Б - ГЛК центра размножения; В - ГЛК мантийной зоны; Г - ГЛК красной пульпы; Д - тучные клетки; Е - ГЛК около БТЛ.

Рис. 4. Распределение биогенных аминов в ГЛК зон селезенки крыс через 30 мин после изогенной трансплантации костного мозга. А - ГЛК периартериальной зоны; Ь - 1 ЛК центра размножения; В - ГЛК мантийной зоны; Г - ГЛК красной пульпы; Д - тучные клетки; Е - ГЛК около бласттрансформирующихся (БТЛ) лимфоцитов

Через 30 мин после изогенной пересадки в ГЛК периартериальной зоны не определяется гистамин, но увеличивается содержание КА.

Перестают выявляться ГЛК в мантийной зоне. Резко возрастает содержание шстамина в ГЛК центра размножения (рис. 4). Увеличивается число групп лимфобластов, которые имеют положительную реакцию на моноамины и гепарин. Около таких групп в виде цепочки по периферии расположены ГЛК и тучные клетки.

Через 60 мин также в ГЛК периартериальной зоны не выявляется гистамин, не определяются ГЛК мантийной зоны. Увеличивается содержание гистамина в ГЛК красной пульпы. В ГЛК около БТЛ увеличивается содержание серотонина (рис. 5).

В тучных клетках остается только гистамин, что, возможно, является компенсаторной реакцией на отсутствие гистамина в некоторых ГЛК.

Рис. 5. Распределение биогенных аминов в ГЛК зон селезенки крыс через 60 мин после изотрансплантации костного мозга. А - ГЛК периартериальной зоны; Б - ГЛК центра размножения; В - ГЛК мантийной зоны; Г - ГЛК красной пульпы; Д - тучные клетки; Е - ГЛК около БТЛ.

Корреляционный анализ биогенных аминов внутри ГЛК разных зон селезенки у интактных крыс.

У интактных крыс, при исследовании корреляционных связей между нейроаминами, выяснилось, что в ГЛК периартериальной зоны связь между КА и серотонином, а также между КА и гистамином сильная, между серотонином и гистамином также сильная, но отрицательная. В ГЛК центра размножения корреляционные взаимоотношения между всеми парами очень сильные, равные 0,8 - 0,9. В ГЛК мантийной и краевой зон связь между КА и серотонином слабая, равная 0,2, между КА и гистамином сильная, но отрицательная, а между серотонином и гистамином очень слабая, отрицательная. В ГЛК красной пульпы связь между всеми парами сильная, но между КА и серотонином отрицательная (табл.1). В тучных клетках связь хорошая, но между КА и гистамином - ниже средней, равная 0,45.

Корреляционный анализ биогенных аминов виутри ГЛК н тучных клетках селезенки после аутопересадки костного мозга

Через 30 мнн после аугоперссадкн в ГЛК периартериальной зоны связь в парах КА/ серотошга и серотонин/гистамин ослабевает до 0,6, между КА/гастамипом становится слабой. В ГЛК центра размножения все связи остаются сильными. В мантийной зоне везде связь сильная, но между серотонином/гистамином остается отрицательной. В краевой зоне ГЛК перестают выявляться. Появляются БТЛ, около которых в красной пульпе появляются ГЛК. Между всеми парами связь сильная отрицательная, но между серотонином/гистамином она положительная. В ГЛК красной пульпы связь остается сильной отрицательной между КА/серотонином, во все остальных случаях она слабая. В тучных клетках связь между КА/серотонином становится сильной отрицательной.

Таблица 1

Корреляционные связи между биогенными аминами внутри ГЛК н тучных клетках разных зон селезенки при ауто- н изопересадке.

ГЛК и тк Связи Интактная Через 30 Через 60 Через 30 Через 60

в группа мин мин после мин после мин

парах после ауто- изо- после

ауто- пересадки пересадки изо-

пересадки пересадки

Периартериальная Зона КА/С 0,6 0,65 - -0,4 -0,6*

КА/Г 0,9 0,4 - - -

С/Г -0,6 0,6* - - -

Центр размножения КА/С 0,9 0,9 0,6 -0,6* -0,5

КА/Г 0,8 0,6 0,4 0,2 0,7

С/Г 0,9 0,6 0,7 0,2 0,3

Мантийная зона КА/С 0,2 0,87" 0,7* - -

КА/Г -0,85 0,9* -0,97* - -

С/Г -0,2 -0,9* -0,75* - -

Красная пульпа КА/С -0,8 -0,8 0,6* -0,75 -0,7

КА/Г 0,8 0,3 0,8 -0,93* 0,3

С/Г 0,6 0,2 -0,7* 0,8 0,2

Около БТЛ КА/С -0,6 0,6* 0,2 0,2

КА/Г -0,8 0,7* 0,4 -0,9*

С/Г 0,7 -0,7* -0,4 -0,2

Тучные клетки КА/С КА/Г 0,8 0,45 -0,9* 0,3 0,9« 0,95

-0,7*

С/Г 0,6 0,9 - -0,6*

Примечание: * - обозначены достоверные изменения.

Через 60 мнн после аутопересадки костного мозга в ГЛК реактивного центра корреляционные связи между КА/серотонином, между

серотонином/гастамином остаются выше среднего, а между КА/шстамином связь становится ниже средней. В ГЛК мантийной зоны связи сильные, но между серотоншюм/гастамином, КА/гистамином они отрицательные. В ГЛК красной пульпы связи сильные, но серотонином/гистамином она становится отрицательной. В ГЛК около бласттрансформирующихся лимфоцитов все связи выше среднего, но между серотонином/гастамином она также становится отрицательной. Гистаминсодержащие тучные клетки частично дегранулируют. В них остается сильная положительная корреляционная связь между КА/серотонином.

Корреляционный аналнз биогенных амннов между ГЛК /ГЛК и ГЛК/ тучные клетки в разных зонах селезенки после аутоперссадкн костного мозга

У интактных животных по КА/КА между ГЛК периартериальной зоны и ГЛК центра размножения, ГЛК периартериальной и краевой зонами, а также между ГЛК периартериальной зоны и ГЛК красной пульпы корреляционная связь сильная положительная. Между ГЛК периартериальной зоны и тучными клетками, ГЛК центра размножения и ГЛК красной пульпы связи сильные отрицательные.

По корреляционным связям С/С между ГЛК периартериальной зоны и центром размножения мальпигиева тельца существует сильная связь. Во всех остальных случаях связи средней силы отрицательные или слабые.

По корреляционным связям гистамин/гистамин между ГЛК все связи с периартериальной зоной являются положительными сильными, за исключением связи между ГЛК периартериальной зоны и ГЛК центра размножения, где связь средняя. Все связи между ГЛК центра размножения и ГЛК других зон - сильные, отрицательные, за исключением связи между ГЛК зоны размножения и ГЛК краевой зоны, где связь отрицательная, средняя (см. табл. 2).

Через 30 мин после аутоперссадкн костного мозга в селезенке крыс по КА/КА между ГЛК периартериальной зоны и ГЛК центра размножения мальпигиева тельца существует средняя положительная связь, также как между ГЛК периартериальной и краевой зон. Между ГЛК периартериальной зоны и ГЛК красной пульпы связь ослабляется, но остается сильной. Между ГЛК периартериальной зоны и тучными клетками связь сильная положительная. Во всех остальных корреляционных парах связь отрицательная (табл. 2). По корреляционным взаимосвязям С/С между ГЛК периартериальной и краевой связь разрушается из-за отсутствия ГЛК в этих зонах.

Положительной остается только связь между ГЛК периартериальной зоной и ГЛК центра размножения. Во всех остальных зонах она становится отрицательной (табл. 2). По корреляционным взаимодействиям гистамин/гистамин связь остается положительной только между ГЛК периартериальной зоны и ГЛК центра размножения, а также между ГЛК зоны размножения и ГЛК красной пульпы. Во всех остальных случаях они

Таблица 2

Корреляционный анализ биогенных аминов между иснроаминами в бноамннсодср/кащих структурах селезенки после аутонересадкн костного мозга.

Коррел ГЛК ГЛК ГЛК ГЛК ГЛК ГЛК ГЛК

пара периартер периартер периартер центра центра центра периарт

Биогенн иалыюй иальнои иалыюй размно размно размно ериальн

ых зоны—Г зоны—Г зоны—ту жения жения жения ои зоны

амииов ЛК ЛК чные —ГЛК —ГЛК —тучн - центра

краевой красной клетки краевой красной ые размно

зоны пульпы зоны пульп клетки жения

Интакт КАТСА 0,71 0,87 -0,63 -0,8 -0,65 -0,36 0,6

ныв

С/С 0,28 -0,49 -0,46 0,3 -0,45 -0,42 0,9

г/г 0,9 0,78 0,75 -0,55 -0,67 -0,7 0,52

Через КА/КА 0,48 0,75 0,9* -0,96 -0,6-1 -0,5 0,46

30 мин после ауго-

С/С Не выявл -0,7* -0,7' Не ВЫЯШ1 -0,45 -0,5 0,66

переса

дки г/г -0,93« -0,5 -0,5 -0,59 0,83* -0,32 0,63

Через КА/КА Не выявл Не выявл Не выявл 0,73* -0,6 0,57 Не

60 мин выявл

после ауго-переса

С/С Не выявл Не выявл Не выявл Не -0,68* 0,8« Не

ВЫЯВЛ выявл

ДКИ г/г Не выявл Не выявл Не выявл -0,59 -0,32 Не ВЫЯВЛ Не выявл

Примечание: * - обозначены достоверные изменения.

становятся отрицательными (табл. 2).

Через 60 мин после аутопересадки костного мозга в селезенке крыс по КА/КА между ГЛК периартериалыюй зоны и ГЛК других зон связи разрушаются. Возникав сильная нилижшелыши сьязь между ГЛК центра размножешм и ГЛК краевой зоны. Между ГЛК центра размножения и тучными клетками связь средняя положительная. Между ГЛК центра размножения и ГЛК красной пульпы связь становится еще более сильной отрицательной (табл.2). По С/С остается отрицательная корреляционная связь между ГЛК центра размножения и ГЛК 1срасной пульпы, сильная положительная связь возникает между ГЛК центра размножения и тучными

клетками. Во всех остальных парах связи разрушаются.

По корреляционным взаимосвязям гистамин/ гистамин остается связь только в двух случаях: между ГЛК центра размножения и ГЛК красной пульпы, а также между ГЛК зоны размножения и ГЛК краевой зоны, при этом они отрицательные (табл. 2).

Серотошшовый индекс после аутопересадки костного мозга через 30 мин и 1 час

У интактных животных и через 30 мин после аутопересадки в ГЛК белой пульпы и в тучных клетках серотониновый индекс остается выше единицы, что говорит о том, что в этих структурах ведущим медиатором является серотонин. В ГЛК красной пульпы серотониновый индекс меньше единицы, что говорит о том, что ведущим медиатором в этих структурах являются КА. Через 60 мин после аутопересадки в тучных клетках и ГЛК как белой, так и красной пульпы ведущим медиатором является серотонин.

Таким образом, через 60 мин после подсадки костного мозга в ГЛК красной пульпы селезенки происходит смена медиаторного реагирования и ведущим медиатором здесь становится серотонин.

При исследовании на гепарин через 30 мин после аутогенной пересадки костного мозга наблюдается неравномерное окрашивание среза. Часть лимфоидных узелков имеют овальную, вытянутую формы, зоны различаются плохо, несколько смешаны, но не во всех, в некоторых - зоны различимы, Сохранен центр размножения, а краевая и мантийная зоны окрашены неравномерно. Все клетки окрашены интенсивно, ортохромно.

Красная пульпа инфильтрирована лимфоцитами. Лимфоциты встречаются в виде скоплений. В них выявляются бластные формы клеток с большим ядром и тоненьким ободком цитоплазмы. У некоторых из mix цитоплазма становится бета2-метахроматичной.

Предполагается, что происходит образование БТЛ. Иногда в центре такого скопления выявляются макрофаги с хорошо заметным ядром. В красной пульпе встречаются 1-2 дегранулированые тучные клетки с бета2-метахроматичными гранулами.

При исследовании на гепарнн через 60 мин после аутогенной пересадки костного мозга большинство мальпигаевых телец теряют свои очертания. Расширяется периартериальная зона и центр размножения. В некоторых из них зоны различаются плохо, несколько смешаны. Краевая и мантийная зоны окрашены неравномерно, в них обнаруживаются группы лимфоцитов и лимфобластов с бета2-метахромазией, что говорит о бласттрансформации. Происходит смешение белой пульпы с красной. Синусоиды расширены. От краевой зоны иногда тянется шлейф из лимфоцитов. Красная пульпа инфильтрирована лимфоцитами. Лимфоциты образуют скопления. Иногда в центре такого скопления выявляются макрофаги с хорошо заметным ядром. В красной пульпе встречаются множество тучных клеток с бета2-метахроматичными гранулами и гранулами необычного зеленого цвета. Много дегранулированных тучных клеток. Просвет сосудов расширен.

Корреляционный анализ биогенных аминов внутри ГЛК и тучных клеток селезенки после шзогенной пересадки костного мозга

Через 30 мин после изогенной пересадки в ГЛК периартериалыюй зоны корреляционная связь в паре КА/серотонин слабая, отрицательная. В ГЛК центра размножения связь между КА/серотоншюм сильная, но отрицательная, между КА/гистамином, серотонин/гистамин связь очень слабая. В ГЛК красной пульпы корреляционные связи в парах КА/серотошш и КА/гистамин сильные, но отрицательные, а между

серотонином/шстамином связь сильная, положительная 0,8. В ГЛК около БТЛ корреляционная связи между КА/серотошшом, КА/гистамином слабые положительные, а между серотонином/гистамином слабая, отрицательная. В тучных клетках связи сильные, между К А/серотонином она положительная, в остальных парах отрицательные (табл. 1).

Через 60 мин после изогенной пересадки костного мозга в ГЛК периартериалыюй зоны связь в паре КА/серотонин сильная отрицательная.

В ГЛК реактивного центра корреляционная связь между КА/серотошшом средняя отрицательная, между серотонином/гистамином слабая положительная, а между КА/гистамином связь становится сильной положительной. ГЛК мантийной зоны не определяются. В ГЛК красной пульпы связи слабые положительные между серотонином/гистамином и между КА/гистамином, а между КА/серотонином она сильная отрицательная. В ГЛК около БТЛ корреляционные связи между КА/серотошшом и серотонин/гистамином слабые, но в последней паре она отрицательная, а между КА/гистамином сильная отрицательная. Моноаминсодержащие тучные клетки дегранулируют, в связи с чем, все корреляционные связи подсчитать невозможно.

Результаты корреляционного анализа мевду ГЛК разных зон селезенки через 30 мин после нзогенного введения костного мозга

При исследовании корреляционных связей по К А/К А через 30 мин после изогенной пересадки костного мозга становится сильной положительной связь между ГЛК центра размножения и ГЛК красной пульпы, сильной отрицательной связь между ГЛК реактивной зоны и тучными клетками (табл. 3). В остальных парах связи либо разрушаются, либо они слабые отрицательные. Возникли новые связи по КА между ГЛК около БТЛ и ГЛК периартериалыюй зоны, ГЛК БТЛ и ГЛК реактивной зоны, но эти связи или сверхслабые или слабые (0, 07 и 0,3 соответственно).

По связям С/С через 30 мин после изогенной пересадки костного мозга между ГЛК периартериальной зоны и центром размножения, связь ослабла до 0,3, при этом она стала отрицательной. Между ГЛК периартериалыюй зоны и ГЛК красной пульпы связь повысилась до -0,63. Между ГЛК центра размножения и ГЛК красной пульпы по сравнению с интактными животными связь поменяла свой знак на противоположный. Очень сильная связь возникла между ГЛК около БТЛ и ГЛК периартериальной зоны.

Корреляционные связи гистамин/гастамин между ГЛК центра

размножения и ГЛК красной пульпы, ГЛК центра размножения и тучными клетками уменьшились. В остальных парах они разрушились.

Таблица 3

Результаты корреляционного анализа биогенных аминов между ГЛК /ГЛК и ГЛК/тучными клетками в разных зонах селезенки после нзопересадкн костного мозга

Пара биог. Амин

ГЛК периарте риалыю й

зоны—Г ЛК

краевой зоны

ГЛК периарте риалыш И

зоны—Г ЛК

красной пульпы

ГЛК

периарте

рналыю

й

зоны—ту

чные

клетки

ГЛК

центра

размно

ження

—ГЛК

краево

и зоны

ГЛК

центра

размно

жения

—ГЛК

красно

й пульп

ГЛК

центра

размно

ження

—тучн

ые

клетки

ГЛ

nepi

тер]

MIOÍ

зон цен раз» жен

~~О,

Пнтактн ые

K/VKA

0,71

0,87

-0,63

-0,8

-0,65

-0,36

С/С

0,28

-0,49

-0,46

0,3

-0,45

-0,42

0,

Г/Г

0,9

0,78

0,75

0,5

-0,67

-0,69

Через 30 мин после нзопересадкн

КА/КА

Не выявл

-0,34

-0,18

Не выявл

0,61*

-0,84*

-0

С/С

Не выявл

-0,63*

-0,46

Не выявл

0,5

0,7*

Г/Г

Не выявл

Не выявл

Не выявл

Не выявл

-0,39

-0,15

вы

Через 60 инн после нзопересадкн

КА/КА

Не выявл

Не выявл

-0,57

Не выявл

-0,3

Не выявл

С/С

Не выявл

-0,61*

Не выявл

Не выявл

-0,4

Не выявл

Г/Г

Не выявл

Не выявл

Не выявл

Не выявл

-0,75

-0,31

0,

О,

Примечание: * - обозначены достоверные изменения.

Результаты корреляционного анализа между ГЛК разных зон селекпкн через 60 мин после нзогениого введения костного мозга.

При исследовашш корреляционных связей КА/КА через 60 мин после изогешюй пересадки костного мозга между ПГК периартериалыюй зоны и ГЛК центра размножения, а также между ГЛК периартернальной зоны и тучными клетками, отмечается их восстановление. Между ГЛК центра размножения и ГЛК красной пульпы связь вновь стала отрицательной, но слабой (табл. 3). Возникли новые связи по КА .между ГЛК около островков размножения/и периартериалыюй и ГЛК реактивной зонами, но эти связи слабые (0,45 и 0,24 соответственно).

Корреляционные связи серотонин/серотошш через 60 мин после изогешюй пересадки костного мозга между ГЛК периартериалыюй зоны и ГЛК центра размножения становятся вновь положительными сильными. Снизились корреляционные взаимодействия между ГЛК около БТЛ/ ГЛК центра размножения, и ГЛК около БТЛ /ГЛК периартериалыюй зоны.

Корреляционные связи гистамин/гистамин через 60 мин после изогенной пересадки костного мозга связи между ГЛК периартериалыюй зоны и ГЛК центра размножения; между ГЛК реактивной зоны и тучными клетками слабые, в последнем случае - отрицательные. Между ГЛК центра размножения и ГЛК красной пульпы корреляционные взаимосвязи стали такими же как у интактных животных. Между ГЛК около БТЛ и ГЛК периартериалыюй зоны корреляционные взаимодействия стали сильные, но отрицательные.

Серотониновый индекс. После изогенной пересадки костного мозга через 30 мин и час серотониновый индекс в ГЛК периартериалыюй зоны, ГЛК реактивного центра, ГЛК красной пульпы остается ниже единицы, В тучных клетках, ГЛК около БТЛ серотониновый индекс становится намного выше единицы, т.е. ведущим медиатором здесь остается серотонин.

Через 30 мин после изогенной подсадки костного мозга при исследовании препаратов на гепарин окраска была неравномерной. Форма малышгиевых телец сохранена, но расположение лимфоцитов в ней групповое. Много псевдофолликулов в периартериалыюй и мантийной зонах. Краевой синус около мальпигиева тельца расширен. В центрах скопления лимфоцитов находятся макрофаги. В красной пульпе имеются бета2-метахроматичные псевдофолликулы (идет бласттрансформация). Определяются мегакариоциты. В септах появляются в большом количестве ортохромные тучные клетки.

Через 60 мин форма малышгиевых телец не всегда сохранена. Лимфоциты образувл ijjynnbi. Много лнмфепдпых узелкез в самом малышгиевом тельце. Имеется оголение стромы. В красной пульпе образуются бета?.-метахроматичные тучные клетки, здесь много властных форм клеток. Продолжают определяться мегакариоциты. В септах определяются бета2-метахромны е тучные клетки, наблюдается их дегрануляция.

ВЫВОДЫ

1. Основной биоаминсодержащей структурой в селезенке крыс являются гранулярные люминесцирующие клетки, которые тесно контактируют с адренергаческими нервными волокнами. Тучные клетки в селезенке в основном находятся в капсуле и трабекулах по адвентиции сгенок сосудов.

2. При ауготрансплантащш костного мозга через 60 мин гранулярные люминесцирующие клетки периартериальной зоны перестают выявляться, снижается содержание биоаминов в гранулярных люминесцирующих клетках остальных зон, появляются бласттрансформирующиеся лимфоциты, около которых также определяются гранулярные люминесцирующие клетки.

3. Через 60 мин при аутогенной пересадки костного мозга корреляционные связи сохраняются между гранулярными люминесцирующими клетками центра размножения/ гранулярными люминесцирующими клетками красной пульпы и тучными клетками. Выявленные гранулярные люминесцирующие клетки около бласттрансформирующихся лимфоцитов, образующие корреляционные связи с гранулярными люминесцирующими клетками центра размножения и гранулярными люминесцирующими клетками периартериальной зон через гистамин.

4.Через 30 и 60 мин после изогенной пересадки костного мозга не определяются гранулярные люминесцирующие клетки мантийной и краевой зон; гистамин в гранулярных люминесцирующих клетках периартериальной зоны. Гранулярные люминесцирующие клетки около бласттрансформирующихся лимфоцитов выявляются уже с 30 мин после трансплантации костного мозга. Происходит увеличение числа гистаминовых тучных клеток в красной пульпе селезенки. Начинают определяться мегакариоциты.

5, Через 30 мин после изогенной пересадки костного мозга корреляционные связи меняют свой знак на противоположный между гранулярными люминесцирующими клетками центра размножения и гранулярными люминесцирующими клетками красной пульпы. Между гранулярными люминесцирующими клетками около образовавшихся бласттрансформирующихся групп лимфоцитов в мантийной, краевой зонах, красной пульпе, и гранулярными люминесцирующими клетками периартериальной зоны образуются корреляционные связи.

6. Через 60 мин после аутотрансплантации костного мозга серотониновый индекс в гранулярных люминесцирующих клетках белой, красной пульпы, в тучных клетках становится выше единицы. При изотрансплантации в гранулярных люминесцирующих клетках большинства зон серотониновый индекс становится меньше единицы.

СПИСОК ПУБЛИКАЦИЙ 1.Волков, A.B. Влияние ауто- и гетеропересадки костного мозга на локализацию биоаминсодержащих структур тимуса, селезенки и костного мозга. / A.B. Волков, О'.С. Глазырина, H.H. Григорьева (Табаева), Е.В.

Любовцева. // Биология. Студент и научно-технический прогресс: Материалы XXXVII международной студенческой конференции. - Новосибирск. 1999. -С.118-119.

2.Любовцева, Е.В. Влияние рентгеновского облучения на костномозговое кроветворение / Е.В. Любовцева, Н.Н. Григорьева (Табаева). // Физика в биологии и медицине. - Екатеринбург. 1999 г. - С.88.

3. Golubtsova N.N. Quantitative analysis of the granule Luminescent and mast cells in the organs of immune and nonimmune system / N.N. Golubtsova, E.A. Guryanova, A.V. Moskovsky, S.A. Agafonkin, N.N. Tabaeva, L.A. Lubovtseva // International journal on immunorehabilitational. - Эйлат, Израиль, May 2000. -V. 2,-№2. -referatl71.-P. 53.

4.Любовцева, Л.А. Возрастные и видовые различия эндокриноподобных клеток в структурах тимуса / Л.А. Любовцева, Е.В. Любовцева, Н.Н. Табаева, Е.А. Гурьянова, Н.Е. Яшина. // Всероссийский семинар «Генетика продолжительности жизни и старения», - Сыктывкар, 2008.

5.Табаева, Н.Н. Влияние ауто- и изогенной пересадки костного мозга на качественное и количественное изменение биоаминсодержащих структур селезенки / Н.Н. Табаева, Л.А. Любовцева, Е.В. Любовцева, Е.А. Гурьянова, Н.Е. Гималдинова, Н.Н. Тихонова // Морфология в теории и практике: материалы Всероссийской конференции с международным участием, посвященный 85-летию со дня рождения Д.С. Гордон. - Чебоксары: ЧГУ им. Ульянова, 2008. - С. 125-126.

6. Табаева Н.Н. Влияние аутоиересадки костного мозга на состояние биоаминсодержащих структур селезенки / Н.Н. Табаева, Е.В. Любовцева, Е.А. Гурьянова, Л.А. Любовцева // Российский иммунологический журнал, 2008 - том 2 (11) - №23 - С. 113.

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Табаева, Надежда Николаевна

Список сокращений.

ВВЕДЕНИЕ.

Актуальность темы.

Цель и задачи исследования.

Научная новизна.

Положения, выносимые на защиту.

Научно-практическая значимость работы.

Апробация работы.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1 Общие сведения о строении и функции селезенки.

1.2. Исторические сведения об исследовании селезенки люминесцентными методами.

1.3. Роль тучных клеток как носителей биогенных аминов.

1.4 Гранулярные люминесцирующие клетки.

1.5 Красный костный мозг.

1.6 Гистамин и его функции.

1.7 Серотонин и его функции.

1.8. Катехоламины и их метаболизм.

1.9. Медиаторные взаимодействия.

1.10. Гепарин и его функциональная значимость.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Материал исследования.

2.2. Методы'исследования.

ГЛАВА 3. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

3.1 Исследование селезенки пнтактных крыс.

3.1.1. Исследование срезов селезенки интактных крыс после окраски гемотоксилином-эозином.

3.1.2. Исследование не обработанных срезов селезенки интактных крыс.

3.1.3. Исследование селезенки интактных крыс на гистамин.

3.1.4. Локализация катехоламинов и серотонина в структурах селезенки интактных крыс.

3.2. Качественное п количественное изменения биоаминсодержащих структур селезенки после аутогенного введения костного мозга.

3.2.1. Исследование селезенки через 30 и 60 мин после аутогенного введения костного мозга при окраске гемотоксилипом-эозпном.

3.2.2. Распределение гистамина в структурах селезенки после аутогенной пересадки костного'мозга через 30 и 60 мин.

3.2.3. Распределение моноампнов в структурах селезенки после аутогенной пересадки костного мозга через 30 и 60 мин.

3.3. Корреляционный анализ биогенных аминов в гранулярных люминесцентных и тучных клетках селезенки интактных крыс.

3.4. Корреляционным анализ биогенных аминов в гранулярных люминесцентных и тучных клетках селезенки после аутогенной пересадки костного мозга через 30 и 60 мин.

3.5. Результаты корреляционного анализа между гранулярными люминесцентными клетками разных зон селезенки через 30 и 60 мин после аутогенного введения костного мозга.

3.6 Серотонпновый индекс после аутогенной пересадки костного мозга через 30 и 60 мин.

3.7. Исследование на гепарин через 30 и 60 минут после аутогенной пересадки костного мозга.

3.8. Качественное и количественное изменения биоаминсодержащих структур селезенки после изогенного введения костного мозга.

3.8.1. Исследование селезенки через 30 и 60 мин после изогенного введения костного мозга при окраске гемотоксилином-эозипом.

3.8.2. Распределение гистамина в структурах селезенки после изогенной пересадки костного мозга через 30 и 60 мин.

3.8.3. Распределение моноаминов в структурах селезенки после изогенной пересадки костного мозга через 30 и 60 мин.

3.9. Корреляционный анализ биогенных аминов в гранулярных люминесцентных и тучных клетках селезенки после изогенной пересадки костного мозга через 30 и 60 мин.

ЗЛО. Результаты корреляционного анализа между гранулярными люминесцентными клетками разных зон селезенки через 30 и 60 мин после изогенного введения костного мозга.

3.11. Серотониновый индекс после изогенной пересадки костного мозга через 30 и 60 мин.'.

3.12. Исследование на гепарин через 30 и 60 мин после изогенной пересадки костного мозга.

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Люминесцентно-гистохимический анализ биоаминсодержащих структур селезенки при ауто- и изотрансплантации костного мозга"

Актуальность темы

В настоящее время все чаше и чаще в лечении «безнадежных» онкологических больных, а также после облучения большими дозами радиации применяют или пересадку костного мозга, или вводят стволовые клетки. Однако, для получения и размножения стволовых клеток необходимы современные технологии и сложное, дорогостоящее тестирование. В связи с чем, пересадка костного мозга может обойтись значительно дешевле и быть более эффективной, так как вводятся не только стволовые клетки, но и вещества необходимые для роста этих клеток. Действие введенных клеток и веществ идет под воздействием, как местного регулирующего звена, так и всей вегетативной части нервной и иммунной систем организма. Как известно, регуляция многих органов на месте происходит при помощи особых биоаминсодержащих структур, в состав которых входят многие компоненты, в том числе тучные (ТК) и гранулярные люминесцирующие клетки (ГЛК) (Любовцева Л.А., 1993; Агафонкин С.А., 2006).

Исследование автономной, местной регуляции, с помощью биогенных аминов (БА), в центральных и периферических органов иммунитета, при подсадке костного мозга, ранее никем не изучалось. При различных пересадках костного мозга, мы опосредованно изучали его действие на изменение иммунных процессов в периферическом иммунологическом органе - селезенке. Селезенка является периферическим органом иммунитета, а биогенные амины, находящиеся в нем, влияют па его микроокружение и способствуют тому пли иному направлению цитодифференцпровки лимфоцитов.

Костный мозг, как известно, является центральным органом иммунитета, где происходит антигенпезависимая дифференцировка В-лимфоцитов и единственным органом у взрослого человека, в котором происходит миелоидное кроветворение (А. Хэм, Д. Кормак, 1983). Здесь также нейромедиаторы являются трансмиттерами и участвуют в дифференцировке клеток и их созревании. В связи, с чем можно исследовать действие пересадки костного мозга на антигензависимую дифференцировку аппарата местного саморегулирования в селезенке.

Таким образом, мы попытались выявить влияние ауто и изотрансплантации костного мозга на морфологические особенности селезенки. Кроме того, исследовать корреляционные связи между нейроаминами в биоаминсодержащпх структурах, а также корреляционные связи между биоаминсодержащими клетками по биоаминам.

Цель и задачи исследования

Целью настоящего исследования является изучение на ранних сроках влияния ауто- и изогенной пересадки костного мозга на биоаминсодержащие структуры селезенки.

В связи с поставленной целью были определены задачи исследования:

1. Выявить локализацию нейромедиаторов в биоаминсодержащих структурах селезенки на ранних стадиях после ауто- п изогенной пересадки костного мозга.

2. Определить корреляционные взаимосвязи между нейромедиаторами в гранулярных люминесцирующих клетках периартериальиой, мантийной, краевой зонах, центра размножения и красной пульпе, а также в тучных клетках у интактных и экспериментальных животных.

3. Сравнить корреляционную связь по катехоламинам (КА/КА); серотонину (С/С); по гистамину (Г/Г) между гранулярнымн люминесцирующими клетками, а также между гранулярными люмипесцирующими и тучными клетками разных зон белой и красной пульпы селезенки через 30 и 60 мин после ауто- и изогенной трансплантации костного мозга.

4. Исследовать серотониновый индекс в гранулярных люминесцирующих и тучных клетках селезенки в местах их нахождения у экспериментальных животных.

5. Изучить локализацию и степень сульфатации гепарина, как биоаминмнактивирующего вещества, на ранних сроках после ауто- и изогенной трансплантации костного мозга.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА

1. Впервые показано, что пересадка костного мозга, существенно влияет па распределение нейромедиаторов в самих биоаминсодержащих структурах селезенки, и оказывает значительное воздействие на корреляционные взаимосвязи между пейроаминами в содержащих их структурах.

2. Впервые выявлено, что разные виды пересадок костного мозга по-разному изменяют корреляционные взаимосвязи между биоаминсодержащими структурами красной и белой пульпы. Выявляются бласгтрансформирующиеся (БТЛ) группы лимфоцитов, вокруг которых определяются биоаминсодержащие гранулярные люминесцирующие клетки.

3. Впервые исследован серотоннновый индекс (СИ) в биоаминсодержащих структурах отдельных зон белой и красной пульпы селезенки, который показывает ведущую роль одного из медиаторов на разных сроках после ауто- и изогенной трансплантации костного мозга.

4. Определено, что ауто- и изогенная трансплантация костного мозга по-разному влияет на степень сульфатации гепарина.

ПОЛОЖЕНИЯ ДИССЕРТАЦИИ, выносимые на защиту

1. Адренергическпе нервные волокна, тучные и гранулярные люминесцирующие клетки тесно взаимосвязаны между собой. В селезенке крыс из биоаминсодержащих структур преобладают гранулярные люминесцирующие клетки.

2 Пересадка костного мозга, существенно влияет на распределение нейромедиаторов в самих биоаминсодержащих структурах селезенки, и оказывает значительное воздействие на корреляционные взаимодействие между нейроаминами в содержащих их структурах.

3 Гранулярные люмииесцирующие клетки, расположенные около зон мальпигиева тельца и в красной пульпе взаимодействуют между собой, образуя тесные корреляционные связи. После ауто- и изогенной пересадки костного мозга эти связи нарушаются. Изопересадка костного мозга активнее способствует образованию скоплений лпмфоидных клеток.

4.Ведущим медиатором в изучаемых структурах является серотонии, после изопересадки ведущим медиатором становится норадреналин.

5. Ауто- и изопересадка костного мозга влияет на численность тучных клеток, их дегрануляцню и сульфатацию гепарина в них.

Научно-практическая зпачимос гь работы

Настоящее исследование входит в Координационный план РАМН (№ гос. Регистрации 01970007431 г.) по теме «Гистохимия биогенных аминов в морфофункциоиальном состоянии органов и тканей в норме и эксперименте»и выполнено в соответствии с приказом Министерства Здравоохранения и образования СССР №742 от 13.11.1984г. «Об утверждении правил проведения работ с использованием экспериментальных животных».

Результаты исследования существенно расширяют представления о регуляции процессов пролиферации и дифференцировки в структурах селезенки. Ауто- и изопересадка костного мозга изменяют корреляционные взаимоотношения в аминосодержащих структурах в красной и белой пульпе селезенки, и приводят к перераспределению в структурах гистамина, катехоламинов и серотонина, что, очевидно, изменяет регуляцию и направление цитодифференцировки лимфоцитов. Выявлен ведущий медиатор в биоаминсодержащих структурах селезенки, которым является в серотонин. Происходит смена серотонинового индекса, что влияет на функциональную направленность иммунологических свойств лимфоцитов.

Полученные результаты используются в лекциях, читаемых на кафедре цитологии, эмбриологии, гистологии ФГОУ ВПО «Чувашский государственный университет им. И.Н. Ульянова». al 1робация рабо гы

Результаты исследований изложены на международной студенческой конференции в г. Екатеринбурге 1999 г. «Физика в биологии и медицине», на ХХХУ11 международной студенческой конференции 1999, г. Новосибирск. «Студент и научно-технический прогресс», студенческой конференции на научно-практической конференции «Здоровье населения и физическое воспитание», г. Чебоксары, 2008; На симпозиуме в Израиле, 2000, на конгрессе во Франции в г. Каннах в 2002, на Всероссийском семинаре в Сыктывкаре, 2008, па Всероссийской конференции в г. Чебоксарах, посвященный 85-летию со дня рождения Д.С. Гордон в 2008 г.

СТРУКТУРА И ОБЪЕМ ДИССЕРТАЦИИ Диссертационный материал изложен на 121 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов, выводов и списка цитируемой литературы, содержащего 170 источников, из них отечественных 130 и зарубежных 40. Диссертация, иллюстрирована 5 таблицами, 52 рисунками.

Заключение Диссертация по теме "Гистология, цитология, клеточная биология", Табаева, Надежда Николаевна

ВЫВОДЫ

1. Основной биоаминсодержащей структурой в селезенке крыс являются гранулярные люминесцирующие клетки, которые тесно контактируют с адренергическими нервными волокнами. Тучные клетки в селезенке в основном находятся в капсуле и трабекулах по адвентиции стенок сосудов.

2. При аутотрансплантации костного мозга через 60 мин гранулярные люминесцирующие клетки периартериальной зоны перестают выявляться, снижается содержание биоаминов в гранулярных люминесцирующих клетках остальных зон, появляются бласттрансформирующиеся лимфоциты, около которых также определяются гранулярные люминесцирующие клетки.

3. Через 60 мин при аутогенной пересадки костного мозга корреляционные связи по биогенным аминам сохраняются между гранулярными люминеецирующими клетками центра размножения/ гранулярными люминеецирующими клетками красной пульпы и тучными клетками. Выявленные гранулярные люминесцирующие клетки около бласттрансформирующихся лимфоцитов, образуют корреляционные связи с гранулярными люминеецирующими клетками центра размножения и гранулярными люминеецирующими клетками периартериальной зон через гистамин.

4.Через 30 и 60 мин после изогенной пересадки костного мозга не определяются гранулярные люминесцирующие клетки мантийной и краевой зон; гистамин в гранулярных люминесцирующих клетках периартериальной зоны. Гранулярные люминесцирующие клетки около бласттрансформирующихся лимфоцитов выявляются уже с 30 мин после трансплантации костного мозга. Происходит увеличение числа гистаминовых тучных клеток в красной пульпе селезенки. Начинают определяться мегакариоциты.

5. Через 30 мин после изогенной пересадки костного мозга корреляционные связи по биогенным аминам меняют свой знак на противоположный между гранулярными люминеецирующими клетками центра размножения и гранулярными люминесцирующими клетками красной пульпы. Между гранулярными люминесцирующими клетками около образовавшихся бласттрансформирующихся групп лимфоцитов в мантийной, краевой зонах, красной пульпе, и гранулярными люминесцирующими клетками периартериальной зоны образуются корреляционные связи по биоаминам.

6. Через 60 мин после аутотрансплантации костного мозга серотониновый индекс в гранулярных люминесцирующих клетках белой, красной пульпы, в тучных клетках становится выше единицы: При изотрансплантации в гранулярных люминесцирующих клетках белой и красной пульпы серотониновый индекс становится меньше единицы.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Табаева, Надежда Николаевна, Саранск

1. Абрамов, В.В. Взаимодействие иммунной и нервной систем / В.В. Абрамов. — Новосибирск: Наука, 1988. 165 с.

2. Авакян, О.М. Современные данные о механизме высвобождения и захвате катехоламинов, возможности и перспективы их фармакологической регуляции / О.М. Авакян. // Журн. всесоюзн. хим. об-ва им. Д.И. Менделеева. М: Медицина, 1986. - Т.21. - С.85-90.

3. Агафонкин, С.А. Исследование биогенных аминов и биоаминсодержащих структур костного мозга человека при нарушении гемопоэза / С.А. Агафонкин. // Автореф. дис.канд. мед. наук. -М.,2006. 25 с.

4. Агафонкин, С.А, Математическое моделирование процессов местной регуляции костномозгового кроветворения человека при анемии различного генеза / С.А. Агафонкин. // Сб. Математические модели и их приложение. Чебоксары, 2004. - Вып. 6. - С. 169 - 176.

5. Адо, А. Д. Общая аллергология / А.Д. Адо. // Изд. 2-е М., 1978 - С. 25.

6. Акмаев, И.Г. Нейро-иммуно-эндокринные механизмы в регуляции гомеостатических функций / И.Г. Акмаев. // Механизмы функционирования висцеральных систем: тез. междун. конф., посвящ. 150-ле тию акад. И.П. Павлова. СПб., 1999. - С.237-239.

7. Акмаев, И.Г. Нейро-иммупо-эндокринные взаимодействия в физиологии и патологии / И.Г. Акмаев. // XVTII съездфизиологического общества им. И.П. Павлова. — Казань, 2001. С. 296.

8. Альперина, E.JI. Формирование иммунного ответа при инверсии нейрохимической установки мозга в условиях зоосоциального конфликта / E.JI. Альперина, Т.А. Павина, JI.B. Девойно. // 3-й съезд филологов Сибири и Дальнего Востока. Новосибирск, 1997. - С. 7.

9. Ю.Анчикова, И.В. Количественное люминесцентно-гистохимическое исследование лимфатических узлов / И.В. Аичикова. // Морфология и люминесцентная гистохимия. — Чебоксары, 1983. — С. 60-62.

10. Афанасьев, Ю.И. Гистология / Ю.И. Афанасьев, Н.А. Юрина // М, 2003. -С. 55-57.

11. Базян, А.С. Принципы функционирования и физиологическая роль аутоадренорецепторов / А.С. Базян // Физиол. и биохим. медиат. процессов / А.С. Базян. // Тезисы докладов 5 Всес. Конф1 Попв. 90-летпю со дня рожд. Х.С. Коштоянца. Москва, 1990. - С. 28-29.

12. И.Балаклеевский, А.И. Парамагнитные центры крови у лиц, перенёсших острую лучевую болезнь / И.В. Зосимова, В.И. Клименко. // Врачеб. дело.-М: Медицина, 1990. -№4.-С. 14-17.

13. Бережная, Н.М. Тучные клетки и гистамин: физиологическая роль / Н.М. Бережная, Р.И. Сепиашвили. // Аллергология и иммунология. -2003. -Т4.-№3. С. 29-38.

14. Божко, Г.Х. Влияние катехоламинов на синтез белков и нуклеиновых кислот / Г.Х. Божко. // Проблемы эндокринологии. М: Медицина, 1984. - Т.30. - №2. - С.3-9.

15. Бочкарев, В.А. Возрастной спектр тучных клеток / В.А. Бочкарев, Д.С. Гордон, С.Н. Андреев. // Морфология и гистохимия тканей в норме, патологии и эксперименте. Чебоксары, 1992. - С. 98-103.

16. Булыгина, Г.В. Долговременные эффекты введения тирозина в раннем отогенезе па артериальное давление и функцию адренокортикальной системы у крыс с наследственной артериальной гипертензией / Г.В.

17. Булыгина // II съезд физиологов Сибири и Дальнего Востока. Тезисы научн. сообщ. Часть 1. Новосибирск, 1995. - С. 64-65.

18. Быков, В.л. Цитология и общая гистология. / В.Л. Быков. Санкт-Петербург СОТИС, 1997.

19. Быков, В.Л. Секреторные механизмы и секреторные продукты тучных клеток В.Л. Быков. //Морфология, 1999-Т. 115. -№ 2. -С. 64-72.

20. Быков, В.Л. Развитие и гетерогенность тучных клеток / В.Л. Быков. // Морфология. 2000- № 2 - С. 86-92.

21. Вайсфельд, И.Л. Обмен гистамина в организме человека и животных / И.Л. Вайсфельд // Биогенные амины. М, 1967. - С. 24-30

22. Вайсфельд, И.л. Гистамин в биохимии и физиологии / И.л. Вайсфельд, Г.Н. Кассиль. // М.: Наука, 1981. № 2. - С. 19-24.

23. Воробьев, Н.В. Биохимия человека / Н.В. Воробьев. // М.: Наука, 1968. -С. 57-64.

24. Воронкова, О.В. Серотониновый индекс в биоаминсодержащих структурах селезенки при водном воздействии кальция / О.В. Воробьева. // Материалы Всероссийской конференции «Морфология в теории и практике». Чебоксары, 2008. - С. 59-60.

25. Гланц С. Медико-биологическая статистика / С. Гланц. // М.: Практика, 1999-459 с.

26. Гольдберг, Е.Д. Методы выделения гемопоэтических островков костного мозга / Е.Д. Гольдберг, A.M. Дыгай, Ю.М. Захаров. // Гематология и трансфузиология. М, 1990. - N 3. - С. 20-22.

27. Гордон, Д.С. Адренергическая иннервация лимфоидных органов (учебное пособие) / Д.С. Гордон, В.Е. Сергеева, И.Г. Зеленова. // Чебоксары: ЧТУ им. И.Н. Ульянова, 1980. С.41.

28. Гордон, Д.С. Холпнергическая иннервация лимфоидных органов (учебное пособие) / Д.С. Гордон, В.Е. Сергеева, И.В. Батурова. // Чебоксары: ЧТУ им. И.Н. Ульянова, 1982. С. 32.

29. Гордон, Д.С. Иммуноцитохимическая люминесцентно-морфологическая идентификация клеток органов иммунной системы / Д.С. Гордон, Л.А. Любовцева, О.И. Олангин. // Российские морфологические ведомости, 1999. -№1-2. С. 55.

30. Гордон, Д.С. Колебания уровня клеточных биоаминов при адаптации организма к антигенам и гормонам. Д.С. Гордон, В.Е. Сергеева, Л.А. Любовцева // Чебоксары: ВИНИТИ, 1990 В.90. - С. 44-56.

31. Гордон, Д.С. Нейромедиаторы лимфоидных органов / Д.С. Гордон, В.Е. Сергеева, И.Г. Зеленова// Л.: Наука, 1982. -128 с.

32. Гордон, Д.С. Гепариновая пннактивация моноаминов в структурах соединительной ткани и крови / Д.С. Гордон // Реактивность п пластичность эпителия и соединительной ткани в нормальных и патологических условиях. Свердловск, 1974. С. 44.

33. Горкин, В.З. Аминооксидазы и их значение в медицине / В.З. Горкин // М.: Медицина, 1981. 336 с.

34. Гурьянова, Е.А. Биоаминное обеспечение структур кожи в области точек акупунктуры у животных и человека в норме / Е.А. Гурьянова // Автореф. На соис.к.м.н. Саранск, 2003. - 24 с.

35. Гущин, Г.В. Проблемы локальных механизмов взаимодействия нервной и иммунной систем / Г.В. Гущин // Взаимодействие нервной и иммунной систем: Тез. докл. Всесоюзного симпозиума. Л.; Ростов-на-Дону, 1990.-С. 66.

36. Девойно, Л.В. Моноаминергические системы в регуляции иммунных реакций / Л.В. Девойно, Р.Ю. Илыоченко. // Новосибирск: наука. Сиб. Отделение, 1983.-231 с.

37. Девойно, Л.В. Экстраиммунный нейромедиаторный механизм иммуномодуляции / Л.В. Девойно // 11 съезд физиологов Сибири и дальнего Востока: Тез. научн. сообщ. Часть 1. Новосибирск, 1995. - С. 128-129.

38. Дыгало, Н.Н. Модификация онтогенеза катехоламиновой системы коры головного мозга гормональным индуктором / НИ. Дыгало, Т.С. Калинина, А.А. Милова. // Физиология и биохимия медиаторных процессов: Тез. Докл. V Всес. Конф. -М., 1990.-с.61.

39. Дюговская, Л.А. Роль гистамина в функциональной супрессии активности тимоцитов. //Актуальные проблемы современной патофизиологии. Киев. 1981.-С. 126-128.

40. Елисеев, В.Г. Гистология / Ю.И. Афанасьев, Н.А. Юрина // М: Медицина, 1983.-С. 78-85.

41. Елисеева, JI.С. Специфическое связывание серотонина клетками интактных и иммунизированных мышей / Л.С. Елисеева, Л.Е. Стефанович, B.C. Панова. // Регуляция иммунного гомеостаза. Л.: Изд-во НИИэксперим. мед., 1982.-С. 139-140.

42. Елисеева, Л.С. Развитие иммунного ответа на белковый антиген в условиях повышенного уровня серотонина / Л.С. Елисеева // Автореф. На соискание ученой степени д.б.н. М. 1974. - 34 с.

43. Ермолаев, В.В. Влияние решгсновского излучения на локализацию биогенных аминов в костном мозге / В.В. Ермолаев // Автореф. дис.канд. мед. наук. М.,2004. - 23 с.

44. Ермолаев, В.В. Воздействие рентгеновского облучения на биоаминное обеспечение структур костного мозга / В.В. Ермолаев // Медицинский журнал Чувашии, 1996. -№ 3-4. С.35-40.

45. Кайнова, А.С. Биогенные амины в клинике / А.С. Кайнова, А.И. Квятковская, И.Н. Михайлова. // М.: Медицина, 1970. С. 22-32.

46. Калужская, В.И. Содержание гистамина и свободного гепарина в крови у детей меннгококковой инфекцией / В.И. Калужская // Педиатрия, 1978.-№ 1.с. 17.

47. Каменский, А.А. Связь нейротропной активности некоторых пептидов с системой биогенных аминов мозга / А.А. Каменский, Л.В. Анюнова,

48. Н.Ю. Сарычева, Т.И. Власова. // Физиология и биохимия медиаторных процессов: Тезисы докл. V Всес. конф. М., 1990. — С. 133.

49. Квасов, С.Г. Содержание норадреналина и серотоннна в гипоталамусе при трансплантации костного мозга и введении циклофосфана / С.Г. Квасов, Леонова Л.К. // Физиология и патология иммунной системы. -М., Медицина, 2003. Т.5. - №2. - С. 141.

50. Кветной, И.М. АПУД-система (структурно-функциональная организация, биологическое значение в норме и патологии)/ И.М. Кветной // Успехи физиол. Наук, 1987. Т. 18. - №1. - С. 84-95.

51. Кветной, И.М. Мелатонинпродуцирующие клетки: регуляция межклеточных взаимодействий / И.М. Кветной, В.В. Южаков // Реактивность и регенерация тканей: Тез. Докл. — Л., 1990. С. 30.

52. Кветной, И.М. Диффузная эндокринная система / И.М. Квегной, В.В. Южаков // Руководство по гистологии. СПб.: Спецлпт. 2001. — Т.2. — С. 509-541.

53. Корнева, Е.А. Гормоны и иммунная система , Е.А. Корнева, Шхинек Э.К. // Л.: Наука, 1988. 250 с.

54. Корсакова, Н.В. Морфофункциональные изменения гнстаминсодержащих структур хрусталика под влиянием внешнего химического раздражения глазного яблока / Н.В. Корсакова // Морфологические ведомости. Москва-Берлин, 2004. - № 1-2. - С.54.

55. Креймерман, Г.М. Особенности обеспечения катехоламинами и серотонином эндометрия небеременных животных / Г.М. Креймерман

56. Экспериментальная и прикладная морфология. Чебоксары, 1988. -С.84-89.

57. Кудряшов, Б.А. Комплекс серотонпн-гепарин и его физиологическое значение в осуществлении защитной реакции противосвертывающей системы / Б.А. Кудряшов // Вопросы медицинской химии, 1973. Вып. З.-Т. 19. - С.269-275.

58. Кузьмин, А.И. Микродиномическое исследование секреции катехоламинов в надпочечнике крысы при гиповолюмической гипотензнп / А.И. Кузьмин, В.Н. Селиванов, С.П. Анисимов. // Физиол. Журнал, 1990. Т. 76. - №2. - С. 227-232.

59. Кырстя, М.Д. Гистамин / М.Д. Кырстя. // Успехи современ. биол., 1961. -Вып. l.-T. 51.-С. 21-33.

60. Лабори Г. Метаболические и фармокологические основы нейрофизиологии / Г. Лабори. // М., 1974. С. 67.

61. Леонова, Л.К. Влияние пересадки красного костного мозга на уровень биогенных аминов гипоталамуса / Л.К. Леонова // Материалы Всероссийской конференции «Морфология в теории и практике». -Чебоксары, 2008. С. 91-92.

62. Лопунова, Ж. К. Возможные причины гетерогенности гистохимических свойств тканевых базофилов / Ж.К. Лопунова, Д.С. Гордон. // Архив анатомии, гистологии, эмбриологии, 1986. № 12. — С. 78-81.

63. Лопунова, Ж.К. Тучные клетки желудка человека и собаки, их соотношение со структурой и функцией фундальных желез / Ж.К.

64. Лопунова. // Арх. анатомии, гистологии и эмбриологии, 1971. Т. 60. — №4.-С. 32-37.

65. Лопунова, Ж.К. Анализ тридцатилетнего изучения тканевых базофилов в норме и патологии / Ж.К. Лопунова // Кубанск. научн. мед. Вестник, 1995. -№ 5-6.-С 46-48.

66. Лопунова, Ж.К. О выявлении основных белков в цитоплазме тучных клеток / Ж.К. Лопунова // Цитология, 1972. Т. 14. - С. 266-268.

67. Лузикова, Е.М. Влияние глюкокортикоидов на CD-68 позитивные клетки разных морфо-функциональных зон селезенки / Е.М. Лузикова. // Материалы Всероссийской конференции «Морфология в теории и практике». Чебоксары, 2008. - С. 59-60.

68. Лукашин, Б.П. Изменение процессов пролиферации и дпфференцпровки клеток костного мозга белых мышей под влиянием гепарина / Б.П. Лукашин, Л.И. Ненаркова. // Бюлл. экспер. биол. и мед. 1977.-С. 737.

69. Лукашин, Б.П. Влияние гепарина на общий адаптационный синдром / Б.П. Лукашин, Я.В. Агапов // Ж. Бюлл. Экспер. биол. и мед., 1975. № 9.-С. 16.

70. Любовцева, Е.В. Влияние антигенов на локализацию нейромедиаторов в нервных структурах костного мозга Е.В. Любовцева // Бабухинские чтения в Орле. Москва, 2005. С. 130-131.

71. Любовцева, Л.А. Локализация гистамина в структурах вилочковой железы в норме и условиях экспиремента / JI.A. Любовцева // Автореферат диссертации кандидата биологических наук. — М., 1980. — С. 24.

72. Любовцева, Л. А. Влияние серотонина на пролиферацию клеток костного мозга / Л.А. Любовцева, А.В. Борисов. //Морфология и люминесцентная гистохимия: ЧТУ им. И.Н. Ульянова. Чебоксары, 1983.-С. 124-126.

73. Любовцева, Л. А. Люминесцелтно-гистохимическое исследование аминсодержащих структур костного мозга, тимуса и крови при действии нейромедиаторов и антигенов / Л.А. Любовцева. -Чебоксары: издат. чувашского университета, 1993. 100с.

74. Любовцева, Л.А. Функциональная активность аминосодержащих структур костного мозга, тимуса и крови при действии нейромедиаторов и антигенов. Чебоксары. 1993. — 121 С.

75. Любовцева Л.А. Люминесцентно-гистохимическое исследование структур костного мозга / Л.А. Любовцева. Чебоксары: издат. чувашского университета, 1993. — Чебоксары, 1998. — 96 с.

76. Любовцева, Л.А. Функциональная активность аминосодержащих структур костного мозга, тимуса и крови при действии нейромедиаторов и антигенов / Л.А. Любовцева. // Автореф. дисс.д-ра биол. наук. -М, 1994. -34 с.

77. Малышев, В.В. Динамика развития и пути предупреждения повреждений сердца при стрессе / В.В. Малышев. // Нарушение механизмов регуляций и их коррекция, 1989. Т.З. - С.979.

78. Машковский, М.Д. Лекарственные средства / М.Д. Машковский // М.: Медицина, 1994. Т. 1. - С.344-365.

79. Митерев, Г.Ю. Дифференцировка и функционирование клеток Т-лимфоидной системы / Г.Ю. Митерев. // Гематология и трансфузиологпя. М. 1990. - № 11. - С 34-37.

80. Московский, А.В. Распределение биологически активных веществ в развивающемся зубе па поздних этапах эмбриогенеза / А.В. Московский. // Стоматология. Москва, 2003. - №1. - С. 4-6.

81. Московский, А.В. Динамика содержания нейромедиаторов в ампносодержащих структурах в период гистогенеза твердых тканей зуба / А.В. Московский, В.Ф. Московский. // Морфология. СПб: «Эскулап», 2004. -№1. - С. 76-79.

82. Московский, А.В. Индуктивное влияние биологически активных веществ на процессы дифференцировки клеток зуба / А.В. Московский, В.Ф. Московский. // Стоматология. М.: Медиа Сфера, 2004. №5. - С. 4-9.

83. Новиков, И.И. Кровеносные сосуды костного мозга / И.И. Новиков // Автореферат диссертации доктора медицинских наук. — VI., 1968. — С. 28.

84. Пащенков, М.В., Пинегин Б.В. Основные свойства дендритных клеток / М.В. Пащенков, Б.В. Пинегин // Иммунология, 2001. -№4. С. 7-15.

85. Петрова, Т.Д. Нейромедиаторное обеспечение микроструктур тимуса при овариоэктомии и эстрогенном воздействии / Т.Л. Петрова // Автореф. дне. канд. мед. Наук, 1999. 24 с.

86. Петров, Р. В. Иммунология / Р.В. Петров // М.: Медицина, 1983. С. 54-68.

87. Полчанинова, В.В. Морфология. 1988. - Т. 6. - С. 231.

88. Попова, Н.К. 5-НТ-рецепторы в регуляции мотивацпонного поведения / Н.К. Попова, Т.Г. Амстиславская, К.С. Науменко // XVIII съезд физиологического общества им. И.П. Павлова. Казань, 2001. - С.200.

89. Проценко, В.А. Тканевые базофилы и базофильные гранулоциты крови / В.А. Проценко, С.И. Шпак, С.М. Доценко. М., Медицина, 1987.- 170 с.

90. Реброва О.Ю. Статистический анализ медицинских данных / О.Ю. Реброва // М.: Медиа Сфера, 2002. С. 12-198.

91. Ромейс, Б. Гистохимические методы исследования / Б. Ромейс // М.: Медицина, 1954. 101 с.

92. Сергеева, В.Е. Люминесцентно-гистохимическая характеристика ранней реакции моноаминсодержащих структур тимуса на антигенное воздействие / В.Е. Сергеева. Чебоксары: Издательство Чувашского государственного университета, 1992. — 351 с.

93. Сергеева, В.Е. Нейромедиаторные биоамины в клетках центральных и периферических иммунокомпетентных органов / Т.Л. Петрова, Л.А. Любовцева, П. Каястха, О.И. Олангин, Д.С. Гордон // International J. on Immunorehabilitation, 1999. №12. - P.15.

94. Сергеева, В.Е. Гисто топография кагехоламинов в зобной железе млекопитающих / В.Е. Сергеева // Бюл. эксперим. биол. и мед., 1974. — №4.-С. 115-118.

95. Сергеева, В.Е. Люминесцентная морфология и адрепергпческая иннервация вилочковой железы / В.Е. Сергеева // Автореф. на соиск. к.б.н. — М. 1976.-С. 34.

96. Скурихин, Е.Г. Моноаминергический контроль пролиферации и дифференцировки прекурсоров грануломоноцитопоэза при невротических воздействиях / Е.Г. Скурихин, О.В. Першпна, М.Ю.

97. Минакова, A.M. Дыгай, Е.Д. Гольдберг. // Бюлл. эксперим. биол. и мед. -М.: Изд-во РАМН, 2006. Т. 141.-№6. -С. 616-621.

98. Смородченко, А.Т. Лимфатические узлы в норме и при антигенном воздействии (учебное пособие)/ А.Т. Смородченко. -Чебоксары: ЧТУ им. И.Н. Ульянова, 1996. С. 76.

99. Соломонова, В.Г. Взаимодействие медиаторных систем, гипотеза и факты / В.Г. Соломонов, Л.В. Сорокин // Физиол. и биохим. медиат. процессов: Тез. Докл. V Всес. конф. поев. 90-летию со дня рождения Х.С. Коштоянца. М., 1990. С. 281.

100. Старкова, Н.Г. Клиническая эндокринология (проблемы фармакотерапии) / Н.Г. Старкова. М.: Медицина, 1983. - 156 с.

101. Стручко, Г.Ю. Морфофункциональное исследование тпмуса и иммунобиохимических показателей крови после спленэктомин и пммунокоррекции / Г.Ю. Стручко // Автореф. дис. докт. мед. наук. — Саранск , 2003. 23 с.

102. Сысоева, Л.А. Люминесцентно-гистохимическая характеристика ранней реакции моноаминосодержащих структур селезенки на антигенное воздействие / Л.А. Сысоева // Автореферат дис. канд. биол. наук. М., 1987. - 20 с.

103. Сысоева, Л.А. О принадлежности люминесцирующих моноаминсодержащих клеток селезенки к АПУД-спстеме / Л.А. Сысоева, А.Г. Гунин. // Чебоксары: ЧГУ им. И.Н. Ульянова, 1982. С. 16-20.

104. Тихонова, Н.Н. Влияние изогенной миелотрансплантации на биоамппсодержащие структуры костного мозга крыс / Н.Н. Тихонова, Л.А. Любовцева. // Материалы Всероссийской конференции «Морфология в теории и практике». Чебоксары, 2008. - С. 130-137.

105. Трунова, Г.В. Морфофункцнопальпая характеристика популяции тучных клеток у мышей BALB/C и C57BI/6 при холодовом воздействии / Г.В. Трунова. // Бюлл. эксперим. биол. и мед. М.: Изд-во РАМН, 2004. - Т. 138. - № 8. - С. 207-209.

106. Федосеев, Е.А. Развитие реакции трансплантант против хозяина и ее влияние на беременность у мышей после введения гепарина / Е.А. Федосеев. // Ж. Бюлл. Экспер. Биологии и медицины, 1977. № 3 . - С 312.

107. Фролов, Е.П. Непрогуморальпые механизмы регуляции иммунологических процессов / Е.П. Фролов // М. Медицина, 1975. — 78 с.

108. Хрущев, Н.Г. Проблема прохождения фибробластов в постнатальном онтогенезе млекопитающих / Н.Г. Хрущев // Остеогенез, 1974. №5. - С.3-12.

109. Хэм, А. Гистология / А. Хэм, Д.М. Кормак // М.: Мир, 1983. Т. 2.- 153 с.

110. Чернух, А. Л. Кожа. Строение, функция, общая патология / А.Л. Чернух, Е.П. Фролов. // М.: Медицина, 1982. 336 с.

111. Юрина, Н.А. Соединительные ткани. Развитие, строение и функции клеток и межклеточного вещества (учебное пособие) / Н.А. Юрина, А.И. Радостина // М.: Изд-во ун-та дружбы народов, 1987. С.1 18

112. Юрина, Н.А. Тучные клетки и их роль в организме (учебное пособие) / Н.А. Юрипа, А.И. Радостина // М.: Изд-во ун-та дружбы народов, 1979. С. 48.

113. Юрина, Н.А. Межтканевые и межклеточные взаимодействия и их регуляция в органах иммунной защиты / Н.А. Радостина. // Морфология и развитие органов иммунной системы. М. Пермь, 1988. -С. 43.

114. Яглов, В.В. Актуальные проблемы биологии диффузной эндокринной системы / В.В. Яглов //Архив АГЭ. М., 1989. - С. 14-29.

115. Яглов, В.В. Биология диффузной эндокринной системы (курс лекций) /В.В. Яглов // М.: 1999. 89 с.

116. Andreesen R.Human makrophage maturation intro; expession of functional transferrin bending sites of hing affinity / R. Andreesen, R.G. Sephton, S.Gald, R.S. Atkins.//Blut., 1988. P.77-83.

117. Andersen, B. Urogenital Chlamydia trachomatis infections in general practice: diagnosis, treatment, follow-up and contact tracing / B. Andersen, L. Ostergaard, B. Nygard, F. Olesen. // Fam. Pract., 1998. Vol. 15. - №3,-P.223-228.

118. Barath, P. Biogenic amine and precurson untake bu thyroid mast cells

119. P. Barath, G.U. Csaba. // Akta morphol. Acad, sci hung., 1975. -j V.22. -№23-4.-P. 327-330.

120. Bencsath, M. Murine and human hematopoietic colony formation: a possible regulatory role for intercellular histamine / M. Bencsath, J. Gidali, L.J. Brandes, A. Falus. // Acta. Biol. Hung., 2002. Vol.53. - №3. - P.299-306.

121. Blazser, I., Comisso I., Leiat U.L., Faralos C. The hematon, a complex morphogenetic unit in primate bone marrow / I. Blazser, I. Comisso, U.L. Leiat, C. Faralos. // Int. J. Cell. Clon., 1991. V9. - №4. - P.394.

122. Borst, M. Untersuchungen uber die Porfyria mit besonderer Berucksichtigung der Porfyria congenital / M. Borst, H. Konigsdorfer. // Leipzig, 1929. P. 243.

123. Cao Wen-hong Myeloid and erytroid hemopoiesis supported by human bone marrow fibroblasts in vitro / Cao Wen-hong, O. Wang, Xu You-heng.//J. Clin. Med. 1992.-V. 105,- №7. -P. 544-548.

124. Carlson, B.M. Human Embriology and Development Biology / B.M. Carlson. // St. Louis. Mosby, 1994. - P.46.

125. Cross, S.A.M. A Stindi of themethods available for the cytochem: cal localization of histamine by fluorescence induced with o-phthalaldehyde or acetaldehude / S.A.M. Cross, S.W.B. Ewen Rost. // J.Histochem,1971. -P. 471-476.

126. Czarnetzki, B.M. In vitro generation of mast cell-like cells from human peripheral mononuclear phagocytes / B.M. Czarnetzki, Kruger Gabiele, Sterry Wolfram, 1982. P. 172.

127. David Hume. The biology of macrochages / David Hume // Sci. Progr., 1988. P. 485-494.

128. Dvorak, A.M. Immunoglobulin E-mediated degranulation of isolated human Lung mast cells / A.M. Dvorak, E.S. Schulman, S.P. Peters // Lab. Invest, 1985.-V.53.-P. 45-56.

129. Endo I. Macrophages can produce factors capable of inducinghistidine decarboxylase, a histamine forming enzyme in vivo in the liver, spleen and lung of mike /1. Endo, R. Suzuki, K. Kumagai // Cell Immunol., 1986.-P. 13-22.

130. Erenko, O. Monoamine-containing small cells in the superior cervical ganglion of the rat and an organ composed of them / O. Erenko, M. I larkonen. // Acta Physiol. Scand., 1965. V.63. - P. 511-514.

131. Fallc, B. Fluorescence of catecholamines and related compaund condensend withl formaldehyde / B. Falk, N. Hillarp, G. Thime, A. Torp A. // J. Histohem. Cytohem, 1962. № 10. - P. 348-354

132. Galli, S.J. Morphology, biochemistry, and function of basophils and mast cells / S.J. Galli, A.M. Dvorak, H.F. Dvorak // In: Hematology, 4th ed. -New York, McGraw-Hill, 1990. P. 840-845.

133. Grube, D. Morfhology and function of the tnteroendocrine cells / D. Grube, W.G. Forssmann. // Horm. and Metab. Res., 1979. №11. - P. 589606.

134. Hamperl, H. Uber Fluoreszenzmikroskopie H. Hamperl, N. Schummelfeder. // Ciba-Symposium, 1961. V.9. - №2. - P. 50-63.

135. Joan Gil, Niff Judith M. Early cell alterations induced by histamine and epinephrine in rabbit lung / Joan Gil, Niff Judith M.// Amer. J. Pysiol, 1984.-246. 1.- Pt. l.-S. 69-76.

136. Jounger, R.E. Production of histaminerelease enhancing factor /HREF/ by PHA stimulated mononuclear cells / R.E. Jounger, H.G.Herrod. //J. Allergy and Clin Immunol, 1985. 75.1. - Pt. 2.-S. 109.

137. Kosenow, W. Lebende Blutzellen im Fluoreszenz- und Phasenkontrasmikroskop. / W. ICosenow, Basel, 1956.

138. Maestroni, G.I.M. Sympathetic regulation of hemopoisis. Direct noradrenrgic modulation of myelocyte and lymphocyte progenitor cells in mouse bone marrow / G.I.M. Maestroni, A. Conti, E. Pedrinic // Acta med. Rom., 1991 .-V.29 №3. - P295-310

139. Meretey, K. Effective histamine on the N-cell Colony formation of PHA-stimulated cells / K.Meretey, H.D. C-hien, A. Falus, E. Waicz. // Agents and Action, 1989. V.27 - №1-2. - P.215-217.

140. Metcalfe, D.D. Baram D. and Mekori Y. Mast cells / D.D. Metcalfe, D. Baram D., Y. Mekori. // Physiol. Rev., 1997. V.77. - P. 1033-1079.

141. Nakaya, N. Histamine incorporation into murine myeloblasts and promyelocytes. Formation of a histamine transport system / N. Nakaya, K. Tasaka. // Biochem Pharmakol., 1988. V.37. - №23. - P.4523-4530.

142. Pearse, A.G. The diffuse neuroendocrine system: falsification end verification of a. concept. In.: Cellular basis of chemical messengers in the digestive system./ A.G. Pearse. // Acad. Press. London, Toronto, Sidney, 1981.-P. 13-19.

143. Rohnberg, M.L. Owman ch. regional variation in the presence of mast cells in the mammalian brain / M.L. Rohnberg, J. Edvinssons. // Agents and Actions, 1973. V 3. - №3. - P. 191.

144. Schwartz, L. Biology of mast cells and basophils / L. Schwartz, T. Huff. // In: Allergy: Principles and practice 4th. St.Louis, Mosby-Year Book Inc., 1993,- P. 135-168.

145. Seidel, H.J. Mechanisms of erythro-idcell ^differentiation H.J. Seidel 11 Blut., 1983.-V.46.-P. 171-173.

146. Tavassoli M., KataokaM., Collier Betty//Jama. 1984. 23. S. 3141.

147. Teraoka Iiiroki. Nicotinic receptor-mediated Ca2" mobilization and catecholamine secretion in chick adrenal chromaffin cells / Teraoka Hiroki, Matsuzawa FCumiko, Mamyama Yutaka. // Proc. Jap. Acad. В., 1996. V. 72. - №3. - P.52-55.

148. Tsuiki, K. Synthesis ofserotonin in traumatized rat brain / K. Tsuiki, A. Takada, S. Nagahiro, M. Gridisa, M. Diksis, H.M. Pappius //J. Neurochem, 1995.-V.64. №3. - P. 1319-1325.

149. Whisler R.L.,Newhouse Y.G., Lachman L.B.//J.Immunol. 1985. V. 135. P. 172.

150. Wong, P.T. Microdialysis study on striatal dopamine, 5HT and metabilites in conscious rats after various treatments: Evidence for extravesicular release of dopamine / Wong P.T.-H., teo W.L., Lee T.// NeuroReport.,1993.-V.5 №1. - P.53-76.

151. Yates, J.C. Ventricular disfunction and necros proccdur by adrenochrome metabolite of epinephrine: relation to pathogenesis i catecholamine cardiomyopathy / Yates, J.C., Beamis R.E., Dhalla N.S. // Amer. Heart. J., 1981 V. 102. - №2. - P.210-221.

152. Yamatodani A., Inagaki N., Itowi N. // J. Pharmacol. And Toxicol. Suppl., 1987 .- 60.3.-P. 75.