Консорциумы микроорганизмов на основе почвенных азотфиксирующих цианобактерий и их агробиотехнологический потенциал

Зяблых, Роман Юрьевич

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Консорциумы микроорганизмов на основе почвенных азотфиксирующих цианобактерий и их агробиотехнологический потенциал
ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Автореферат диссертации по теме "Консорциумы микроорганизмов на основе почвенных азотфиксирующих цианобактерий и их агробиотехнологический потенциал"

На правах рукописи

ЗЯБЛЫХ Роман Юрьевич

КОНСОРЦИУМЫ МИКРООРГАНИЗМОВ НА ОСНОВЕ ПОЧВЕННЫХ АЗОТФИКСИРУЮЩИХ ЦИАНОБАКТЕРИЙ И ИХ АГРОБИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИЙ ПОТЕНЦИАЛ

03.00.07 - микробиология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Ставрополь - 2008

003458947

Работа выполнена в ФГОУ ВПО «Вятская государственная сельскохозяйственная академия».

Научный руководитель:

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор Панкратова Евгения Матвеевна.

доктор ветеринарных наук, профессор Мануйлов Игорь Михайлович;

доктор биологических наук, доцент Назарько Марина Дмитриевна.

Ведущая организация:

ГУ Зональный НИИСХ Северо-Востока им. Н.В. Рудницкого Российской академии сельскохозяйственных наук.

Защита диссертации состоится__ 2009 г. в

■//,¿20 часов на заседании диссертационного советд/ДМ 212.256.09 в Ставропольском государственном университете по адресу: 355009, г. Ставрополь, ул. Пушкина, 1, корп. 2, комн. 506.

С диссертацией можно познакомиться в библиотеке Ставропольского государственного университета.

Автореферат разослан_ ^ _2008 г,

Ученый секретарь диссертационного совета

Ржепаковский И.В.

Общая характеристика работы Актуальность темы. Цианобактерии (ЦБ) привлекают к себе внимание специалистов разных профилей в связи с древностью их происхождения, особенностями гено-а и широчайшими адаптационными свойствами (Панкратова Е.М., 1998), позволив-ими им сохраниться в течение миллиардолетий в виде и ныне процветающей груп-ы микроорганизмов. Исследования Э.А. Штиной и ее школы показали, что нет ючв, в которых бы не обнаруживались ЦБ (Штина Э.А., Голлербах М.М., 1976). При пределенных условиях они могут вызывать «цветение» почвы подобное <цветению» водоемов (Панкратова Е.М., 1987; Домрачева Л.И., 2005). В настоящее ремя очевидна положительная экологическая роль ЦБ в почве в качестве азотфикса-оров, накопителей органического вещества, центров микрокосмов, с удивительными пособностями к симбиотрофным взаимоотношениям (Лобакова Е.С. и др., 2001; Rai .N. et al., 2000). Последнее свойство ЦБ особенно интересно в связи со смещением арадигмы использования в биотехнологии не монокультур микроорганизмов, а кон-орциумов (Заварзин Г.А., 2003). В природе ЦБ никогда не наблюдаются в виде попу-хяций клеток одного вида, а находятся в сообществах, и, оставаясь эдификаторами икросообществ, они могут менять микробный состав, что дает возможность -онструирования искусственных микроконсорциумов на основе этих организмов. В сследованиях кафедры ботаники, физиологии растений и микробиологии ВГСХА азрабатывается новое направление использования циано-бактериальных консорциу-ов в агробиотехнологии, которое требует углубленного изучения взаимоотношений икробов и ЦБ, с одной стороны, с другой - ЦБ и растений. Учитывая фрагментар-ость сведений в этом направлении в отечественной и зарубежной литературе, в дан-ой работе частично восполняется данный пробел.

Цель и задачи исследований. Целью данной работы было изучение возможности . ормирования на основе почвенных азотфиксирующих цианобактерий Nostoc palu-osum Kiitz., шт. 18, Nostoc linckia (Roth.) Bom. et Flah. шт. 271, искусственных ста-ильных микробных консорциумов и использование их в агробиотехнологии.

Перед работой стояли следующие задачи:

изучить искусственные консорциумы между аксеничными культурами Nostoc paludosum, 18 и Nostoc linckia, 271:

с видами Rhizobium leguminosarum bv. viceae (Frank 1879) Frank 1889, R. legumi-nosarum bv. trifolii Dangeard 1926, Mesorhizobium loti Jarvis et al. 1982, Bradyrhizo-biumsp. (Lupinus) (Schroeter 1886) Eckhardt et al. 1931;

и Agrobacterium radiobacter (Beijerinck and van Delden 1902) Conn 1942, Pseudomonas fluorecens Migula 1895.

выявить характер взаимных влияний в би- и трехкомпонентных консорциумах цианобактерий и хемотрофных бактерий и локализацию хемотрофных вселенцев в аксеничной культуре цианобактерий;

исследовать возможность замены агар-агара на химические полимеры с гелифи-цирующими свойствами;

изучить действие циано-ризобиальных консорциумов на клевер и лядвенец и сложных циано-бактериальных консорциумов при выгонке рассады капусты.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Возможность конструирования микробных консорциумов на основе почвенных азотфиксирующих цианобактерий.

2. Возможность использования созданных микробных циано-бактериальных консорциумов при возделывании бобовых культур и выгонке рассады капусты. Новизной работы является углубление направления использования азотфиксирующих ЦБ как автотрофного компонента для культивирования хемотрофных бактерий с целью создания искусственных стабильных микробных консорциумов направленного действия. Новым является утверждение о совместимости ЦБ с агрономически значимыми организмами - бактериями рр. Rhizobium, Agrobacteri-ит, Pseudomonas. Установлено, что ЦБ не обнаруживают реакции при смене бактериального партнера, не выявляя специфики по отношению к «вселенцам» разных видов. Новым является обнаружение консортов в околоклеточной слизи ЦБ, что свидетельствует об образовании устойчивых взаимоотношений между партнерами искусственно созданного консорциума. Искусственные консорциумы обладали повышенной жизнеспособностью по сравнению с аксеничными культурами, что выражалось в увеличении нитрогеназной активности и содержания хлорофилла «а». Прием создания микробных консорциумов на основе почвенных азотфиксирующих ЦБ открывает новые перспективы в использовании микробных препаратов в агрономии и, с большой вероятностью, может быть использован для решения общих задач биотехнологии, где возникает потребность в стабильно работающих микробных сообществах. Исследования выполнялись на кафедре ботаники, физиологии растений и микробиологии им. Э.А. Штиной ВГСХА в рамках исследовательской работы, имеющей государственную регистрацию 01.200.201264. На VIII Международном салоне инноваций и инвестиций (Москва, ВВЦ, 2008) разработка «Цианобактерии как основа нового направления при создании агробиопрепа-ратов» была удостоена диплома и бронзовой медали.

Апробация работы. Материалы работы были доложены на Всероссийской конференции «Микробиология почв и земледелие», Санкт-Петербург, 1998; на 14 Республиканской молодежной научной конференции, Сыктывкар, 2000; Всероссийской конференции «Аграрная наука на современном этапе» Санкт-Петербург, Пушкин, 2002; I Всероссийской научно-практической конференции, Киров: Вятская ГСХА, 2004; на Международной научно-практической конференции, посвященной 110-летию Вятской сельскохозяйственной опытной станции (Зональный НИИСХ Северо-Востока им. Н.В. Рудницкого), 2005; на VIII Международном салоне инноваций и инвестиций (Москва, ВВЦ, 2008).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 9 работ, 1 работа в рецензируемом журнале, одобренном ВАК РФ.

Личный вклад автора. Все исследования по теме диссертации проводились лично автором или при его непосредственном участии (соавторы указаны при изложении результатов работы), включая постановку задач исследования, сбор полевого материала, получение экспериментальных данных и их математическую обработку, а также обобщение и интерпретацию полученных результатов.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 175 страницах машинописного текста и состоит из введения, четырех глав, выводов, практических реко-

мендаций и двух приложений. Работа содержит 14 рисунков, 21 таблицу. Библиография представлена 361 источниками, из которых 131 на иностранных языках.

Глава I. Обзор литературы В первой главе представлено таксономическое положение ЦБ и некоторые физиологические и морфологические особенности этих организмов, делающие их привлекательными объектами для создания искусственных микробных консорциумов. Рассмотрены природные сообщества ЦБ, возможные связи между партнерами таких сообществ, основы их образования. Проанализированы различные взаимоотношения ЦБ с сопутствующей микрофлорой, как в культурах, так и в естественных экотопах, взаимовлияние партнеров и характер отношений, складывающийся в циано-бактери-альных консорциумах in situ, а также жизнеспособность ЦБ в аксеничном состоянии. Дано понятие искусственного консорциума и показан широкий круг естественных симбиозов ЦБ с разнообразными организмами, а также попытки составления искусственных консорциумов на их основе.

Глава II. Объекты и методы исследования Объекты исследования. Основным объектом для работы выбраны культуры ЦБ Nostocpaludosum Kütz., шт. 18 и Nostoc linckia (Roth.) Bom. EtFlah. шт. 271 из коллекции водорослей и ЦБ ВГСХА (Штина Э.А., Панкратова Е.М., 1983). Штаммы поддерживаются на безазотистой среде Громова № 6 (Громов Б.В, Титова H.H., 1983) с 1,5% агаром в люминостате при освещенности 2-3 тыс. лк и температуре 22-25°С. Бактериально чистые культуры этих ЦБ получены путем разработанной на кафедре ботаники прописи (Панкратова Е.М., Калинин A.A., 1994). Консорциумы из ЦБ рода Nostoc и хемотрофных бактерий были названы нами агроцианами. При их культивировании также использовали жидкую безазотистую среду Громова № 6. Для изучения возможности замены агар-агара на другой гелеобразователь и с целью снижения себестоимости питательных сред для культивирования агроциана изучали полиметилметакриламидные гелеобразующие полимеры приоритет в разработке которых принадлежит кафедре органической химии Вятского государственного университета, имеющей патенты на различные полимеры этого ряда (Хитрин C.B. и др., А. с. № 1754728, 1992 и др.). Культуры симбиотрофных бактерий: Rhizobium leguminosarum bv. viceae, шт. 1022, Rhizobium leguminosarum bv. tri-olii, шт. 348 a, Mesorhizobium loti, шт. 1801, Bradyrhizobium sp. (Lupinus), шт. 1676 и хемотрофные бактерии Agrobacterium radiobacter, шт. 17 vi Pseudomonas fluoresces, шт. ABX получены из коллекции ВНИИСХМ (Пушкин, С.-Петербург). Хемотрофные бактерии сохраняли на агаризованных средах (с 2% содержанием агар-агара) в холодильнике при температуре +2...+5°С с частотой пересева 1-2 раза в месяц. Клубеньковые бактерии поддерживались в культуре на агаризованном 2% бобовом отваре (Теппер Е.З. и др., 1987), агробактерии на агаризованной среде ДАС (Бере-стецкий O.A. и др., 1985). Для псевдомонад была выбрана среда Кинг В (Смирнов В.В. и др., 1990). В качестве тест-грибов был использован Fusarium culmorum (W.G.Sm.) Sacc. (ВНИИСХМ). Гриб культивировали на жидких и агаризованных (2%) средах сусло-агаре и Чапеке. Культуры гриба хранили в холодильнике при температуре +2.. .+5°С с частотой пересева 3-4 раза в год. Контроль за состоянием гриба осуществляли визуально и микроскопически.

Методы исследований. Рост культур ЦБ учитывали по накоплению сухого вещества и содержанию пигментов (хлорофилла и фикобилинов) на ФЭКе (Викторов Д.П., 1969) и спектрофотометре (Фотосинтез и биопродуктивность: методы определения, 1989). Анализ слизистых чехлов клеток ЦБ проводили в живом нефиксированном виде: 1) окраска раствором конгорот; 2) исследование слизистых чехлов по методу Бурри (Красильников А.П., 1986). Микрофотосъемку осуществляли при инструментальном увеличении х 1350 на фотопластинки типа «Микро». Отбор почвенных монолитов с растениями бобовых осуществляли с учетом рендомизирован-ной пробы по методике Г.С. Посыпанова (1991). Нитрогеназную активность исследовали методом ацетиленовой редукции (Hardy R.W.F. et al., 1973). Хроматографиче-ское разделение и детектирование в газовых смесях выполняли на хроматографе «ЛХМ-8МД» с пламенно-ионизационным детектором и сорбентом Poropak Q. Нитрогеназную активность клубеньков исследовали по общепринятой методике с ацетиленом (Умаров М.М., 1986). При определении нитрогеназной активности ЦБ и агро-цианов исследуемые образцы досвечивали в люминостате и экспонировали в течение 2,5 часов при температуре 20°С и освещенности 2-3 тыс. люкс. Численность клеток микроорганизмов в культурах и почве исследовали методом высева на селективные среды по общепринятым микробиологическим методам (Руководство к практиче,-ским занятиям по микробиологии, 1983). Численность клеток ЦБ в жидких культурах определяли под микроскопом в камере Горяева, принятым в гидробиологической практике (Сиренко Л.А. и др., 1975). Эффективность применения агроциана определяли: на клевере сортов «Дымковский» и «Трио», на лядвенце рогатом сортов «Солнышко» и «Смоленский 1» и капусте белокочанной среднепоздней сорта «Крюмон». Ряд морфометрических критериев у сельскохозяйственных культур определяли по Г.С. Посыпанову (1991). Микровегетационные опыты закладывали в стеклянных сосудах емкостью 1,2 л на промытом, прокаленном и проавтоклавиро-ванном речном песке по методике З.И. Журбицкого (1968). Вегетационные опыты на лядвенце рогатом были заложены в вегетационном домике в деревянных ящиках размером 1,7 х 3 м, с толщиной почвы 0,25 м. Полевые мелкоделяночные опыты по изучению эффективности агроциана на лядвенце рогатом закладывали на дерново-подзолистой почве Кировской области в ГНУ ЗНИИСХ Северо-Востока им. Н.В. Рудницкого. В защищенном грунте опыты по действию инокуляции сложными микробными консорциумами проводили в АОЗТ «Красногорский». Подробная методика опытов дана при рассмотрении результатов. Агрохимические анализы почвы проведены в областной агрохимической лаборатории Кировской области и в лаборатории ЗНИИСХ Северо-Востока им. Н.В. Рудницкого. Статистическую обработку экспериментальных данных проводили по В.А. Вознесенскому (1969) и Б.А. Доспехову (1985) на ПК с программой STATGRAPHICS for Windows v. 2.1.

Глава III. Составление микробных циано-бактериальных консорциумов

1. Принцип подбора партнеров консорциумов

ЦБ Nostoc paludosum, шт. 18 и Nostoc linckia, шт. 271 были выбраны согласно нескольким критериям. Штаммы изолированы из почв Кировской области, т.е. того региона, где проводилась экспериментальная работа. Предыдущие исследования (Калинин A.A., 1995) показали высокие темпы азотфиксации, образования биомассы и технологичность культивирования, в частности, легкую отделяемость от

культуральной среды. ЦБ были получены в аксеничном состоянии, что являлось непременным условием для составления искусственных консорциумов. Сапротроф-ные культуры бактерий (виды p. Rhizobium,Agrobacterium radiobacter, шт. 17, Pseudomonas fluorescens, шт. АВХ) являются перспективными для целей агробиотехно-логии, на их основе во ВНИИСХМ созданы биопрепараты (ризоторфин, псевдобак-терин, агрисол и др.) и прошли предварительный отбор на эффективность при инокуляции семян сельскохозяйственных культур (Кожемяков А.П., Доросинский М.М., 1989). Бактерии Pseudomonas fluorescens и Agrobacterium radiobacter относятся к группе Plant Growth-Promoting Rhizobacteria (PGPR) - ростстимулирующих ризо-бактерий, обладающих широким набором полезных для растений свойств (Воронин А.М., 1998; Schroth M.N. et al., 1982; и др.). Среди важных аспектов выбора был и тот, что бактерии р. Pseudomonas являлись естественными спутниками ЦБ Nostoc aludosum, шт. 18 (Юнг Л.А., 1975). Частота встречаемости их в ЦБ культурах очень высока, что предполагает не случайность их присутствия в околоклеточной слизи (Андреюк Е.И. и др., 1990). Все указанные хемотрофные бактерии являются типичными представителями ризосферы большинства растений. 2. Совместимость сапротрофных бактерий в консорциумах с цианобактерпями. Консорциумы Nostocpaludosum и Nostoc linckia с бактериями р.Rhizobium

Бактерии p. Rhizobium - один из старейших микробиологических объектов, нашедших применение в агробиотехнологии. Но испытания нитрагина в Географической сети опытов (Кожемяков А.П., Тихонович И.А., 1998) показали, что эффект инокуляции не всегда стабилен. В нашей работе мы изучали возможность совмещения ЦБ с клубеньковыми бактериями (КБ). При этом исходили из предположения, что ЦБ представят эколого-трофическую нишу внутри слизистых оберток, что будет способствовать длительному сохранению инокуляционного начала ризобий и повышению конкуренции по отношению к аборигенным штаммам в почве. Решение проблемы требовало ответа на вопрос о совместимости ЦБ с бактериями р. Rhizobium. Исследованные бинарные сочетания фототрофов с КБ представлены на подписи к рисунку 1. Инокулят Nostoc paludosum соответствовал 0,01 г на 50 мл среды (по сухому веществу). Все испытанные бактериальные консорты оказались совместимы с фототрофным компонентом (рис. 1). На рисунке 1 (А и Б) виден отклик двух видов ностока на подсев КБ. На 15-е сутки популяции Nostoc paludosum и Nostoc linckia достигают определенного «пула» клеток, после чего наступает фаза экспоненциального роста. На 65-е сутки культивирования консорциума, численность клеток фототрофа продолжает возрастать, вопреки тому, что к этому времени в аксеничных культурах начинается процесс ауто-ингибирования. Сравнительное микроскопирование, проведенное нами у аксеничных культур ЦБ и цианобактерий в составе консорциума, показало, что образование акинет и разрушение хлорофилла в ассоциативной культуре отодвигается на четвертый-пятый месяц культивирования, которые в чистой культуре наблюдаются уже на второй месяц роста ЦБ. Расположение номинантов на представленных популяционных кривых (рис. 1, А и Б) не требует математической обработки, так как мало отличается по абсолютным показателям. По реакции фототрофов на подселение бактериальных партнеров можно сказать, что подселение ризобий не оказывает специфического действия на рост ЦБ.

sum+ Mesorhizobium loti, шт. 1801; 3. N. paludosum +Bradyrhizobium sp. (Lupinus), шт. 1676. Г -1 ,N. linckia+Rhizobium leguminosarum bv. trifolii, шт. 348 a; 2. N. linckia + Mesorhizobium loti, шт. 1801; 3. N.linckia +Bradyrhizobium sp. (Lupinus), шт. 167. Длительность сокультивирования партнеров 50 дней.

Поэтому мы попытались исследовать наиболее благоприятное время для подсева хемотрофного партнера. Полученные результаты отражены на рисунке 2. Подсев Rhizobium leguminosarum к ЦБ на 10-е сутки показывает замедленный рост, так ка изменения численности не происходит, а на 20-е сутки увеличение численности хе мотрофа идет параллельно увеличению ксеромассы фототрофа. Отчетливо видно, что численность партнеров консорциума начинает возрастать при вступлении ЦБ фазу логарифмического роста, когда поток экскретируемых веществ ЦБ максима лен. Динамика микробного компонента консорциума (рис. 1, В и Г) показывает, чт консорциум не только сохраняется, но и претерпевает определенные изменения при одновременном посеве фототрофа и хемотрофа последний снижает свою чис ленность. По-видимому, это связано с изменением среды обитания: до подсева ри зобии культивировались на бобовом отваре, а при пересеве попадали в жидкую ми неральную безазотистую среду Громова № 6. Поэтому падение численности може быть вызвано отсутствием питательного субстрата для гетеротрофных бактерий Предположение оказалось верным: по мере нарастания биомассы ностока происхо дит постепенное увеличение титра ризобий.

бактерий. Предположение оказалось верным: по мере нарастания биомассы носто-ка происходит постепенное увеличение титра ризобий.

Рисунок 2 - Влияние цианобактерии N05100 ра1ис1о5ит (3) на численность клеток ЮигоЫшп ^шшюзагит Ьу. укеае при подсеве ШшоЫит на 10-е сутки (1) и на 20-е сутки (2) культивирования ностока.

Анализ фотосинтетических пигментов у Nostoc paludosum и Nostoc linckia (рис. 3) показывает, что Nostoc paludosum содержит большее количество хлорофилла «а», чем Nostoc linckia. Очевиден вывод, что при подсеве к ним бактериальных консортов количество хлорофилла во всех вариантах увеличивается. Вместе с тем, не обнаруживается специфики влияния разных видов ризобий на оба вида ЦБ. Из этого следует, что подсев к аксеничным культурам ЦБ бактерий p. Rhizobium положительно сказывается на содержании основного фотосинтетического пигмента культур, и косвенно указывает на повышении их жизнеспособности. В случае с фи-кобилиновыми пигментами обнаруживается тенденция к снижению их содержания в консорциумах. По-видимому, это связано с их вспомогательной ролью в фотосинтетических реакциях и при стимулировании синтеза хлорофилла «а» потребность в дополнительных пигментах снижается.

Рисунок 3 - Содержание фотосинтетических пигментов у цианобактерий Nostoc paludosum и Nostoc linckia в монокультуре и при подсеве клубеньковых бактерий

Обозначения: 1 - N. paludosum - монокультура; 2 — N. paludosum + Mesorhizobium loti; 3 - N. paludosum + Bradyrhizobium sp. (Lupinus); 4 - N. paludosum + Rhizobium kguminosarum bv. trifolii. Варианты 5, б, 7, 8 — соответственно той же схемы для Nostoc linckia. F7] - хлорофилл «а» (максимум поглощения -665 нм)Щ-другие пигменты (максимумы поглощения -630, 645 нм)

Nostoc paliriolujn.l 8

В целом, общее количество пигментов в консорциальных культурах достоверно превосходит таковую величину контрольных вариантов, а ростовые процессы и состояние ЦБ культуры улучшаются в присутствии хемотрофных партнеров. 3. Консорциумы цианобактерии Nostoc paludosum с Agrobacterium radiohacter и Pseudomonas ßuorescens

Рассматривалась возможность существования двух и трехкомпонентных консорциумов, а также разные сроки подсева гетеротрофов к фототрофу. Изучены консорциумы: Nostoc paludos ит+Pseudomonas fluorescens; Nostoc paludo-sum+Agrobacterium radiohacter; Nostoc paludosum+Pseudomonas fluores-

картину, полученную на двухкомпонентных консорциумах ЦБ с ризобиями. Гомео-стаз культур наступал, начиная с 20-25 суток, при первоначальном титре подсеваемых бактерий 105-106 кл./мл., стабилизируясь на уровне 107 кл./мл сапротрофного консорта. Обе испытанные популяции сапротрофов оказались совместимыми с ЦБ, более того, замедляя их старение в экстенсивных культурах. Заманчивым оказалось испытание сложных консорциумов, которые могли быть составлены из более многочисленных спутников ЦБ. В этом случае нами был взят тот же штамм Nos toc paludosum и сапротрофные бактерии Pseudomonas fluorescens и Agrobacterium ra-diobacter, являющиеся обычными спутниками ЦБ in situ. Темпы роста ЦБ в составе консорциума и ее рост в монокультуре представлены в таблице 1.

Таблица 1 - Рост цианобактерии Nostocpaludosum,IS на безазотистой среде

Варианты Ксеромасса Нитрогеназная активность, нмоль С2Н4/ мг час

на 15-е сутки на 35-е сутки

мг %к контролю мг %к контролю

Nostoc paludosum, 18- монокультура 23,4±0,97 100 61,7±2,25 100 0,35

Nostoc paludosum, 18+Pseudomonas flu-orescens+Agrobacterium radiobacter 34,8±1,21 149 85,7±2,11 139 0,49

Примечание: Данные приведены для консорциума с одновременным посевом бактерий и цианобакгерий. Количество первоначального инокулюма — 11,5 ± 0,5 мг

Особенности поведения популяций хемотрофных бактерий в поликультуре также определялись состоянием автотрофного компонента (рис. 4). Так, внутрипопуляци-онные взаимоотношения хемотрофных бактерий, по-видимому, ближе всего примыкают к нейтрализму, хотя зеркальная пульсация динамики обеих популяционных кривых (1 и 2) предполагает на определенных этапах конкуренцию за какой-либо

На 20-е и 30-е сутки сокультивирования наблюдалось расхождение популяционных кривых с преобладанием численности псевдомонад над агробактериями. К концу наблюдения их взаимодействия в консорциуме стабилизируются и смешанная циано - бактериальная ассоциация достигает, очевидно, гомеостатического состояния. Вместе с тем, резонно предположить другой сценарий развития поликультуры. Пульсации кривых численности отражают конкуренцию хемотрофов за один или несколько факторов роста, которая и будет продолжаться в дальнейшем. При этом популяции одного из видов динамически меняют свою численность и доминируют

туры. Пульсации кривых численности отражают конкуренцию хемотрофов за один или несколько факторов роста, которая и будет продолжаться в дальнейшем. При этом популяции одного из видов динамически меняют свою численность и доминируют на тех или иных этапах жизни консорциума. Поэтому внутри такой ниши, как слизистый чехол, может действовать правило Гаузе: только один вид может доминировать в определенных условиях.

4. Местонахождение партнеров в консорциумах

При создании стабильного консорциума возникал естественный вопрос о локализации бактериального партнера и тесноте создаваемых отношений. Совместными исследованиями с Е.М. Панкратовой и А.Л. Ковиной удалось установить, что ризо-бии проникают внутрь слизистого чехла ЦБ и могут претерпевать там цитологические изменения, превращаясь из палочковидной формы в кокковую (рис. 5).

Рисунок 5 - А. N. paludo-

sum (1), содержащий бак- 'W^.rWEJiíaí'í»

е <

¡агит (2) (фазово - контрастный микроскоп, х 1350). К&айШшАа ____

Бактерии в слизи имеют

коккоидную форму, в то ^ ф - , 1

время как нативные бакте- "

рии - палочковидные (Б), у ч лврЧ^^ЭРГ ~' г -ц

ж^ъ ШшЯк-____ ,

А Б

Созданный консорциум сохранялся в течение ряда лет при пассажах на свежую среду при разных гидротермических режимах и не терял жизнеспособности. Таким образом были получены прямые свидетельства существования целостной системы при конструировании аксеничных культур ЦБ с популяциями хемотрофных бактерий.

5. Возможность использования полиметилметакриламидных (ПММА) полимеров как гелеобразователей для культивирования консорциумов

Использование ПММА полимеров изучалось с одной стороны, с целью стабилизации существования искусственных консорциумов с ликвидацией возможной конкуренции со стороны посторонней микрофлоры, и, во-вторых, возможность их использования в качестве альтернативы агар-агару. При изучении 7 номеров полимеров было показано: большинство (4 из 7) не обладают свойством быстрой реструктуризации, необходимой для постановки микробиологических исследований; наибольший гелеобразующий эффект отмечен у полимеров № 1 и 10, которые по своим физико-химическим параметрам сходны с агар-агаром; гелеобразующий эффект у большинства полимеров усиливается при добавлении агар-агара до 1,5%, что не является удовлетворительным, т.к. 2% агар сам по себе отличный гелеобразова-гель; испытанные полимеры оказались токсичными для ЦБ и предполагаемых партнеров консорциума (клубеньковых бактерий, псевдомонад и др.), что делает их непригодными для культивирования консорциума; отсутствие антифунгального действия оставляет возможность для испытания ПММА в качестве гелеобразовате-ля для сред, культивирующих грибную микрофлору.

5*«

Глава IV. Примеры практического использования циано-бактериальных консорциумов

Нестабильность эффекта инокуляции семян бобовых культур ризобиальными препаратами обусловлена многими причинами: генотипом растений и азотфиксиру-ющих микроорганизмов, ингибирующим действием экссудатов семян на бактерии, конкуренцией производственных штаммов ризобий с аборигенными популяциями этих бактерий. Последние оказываются столь активными, что до 100% клубеньков бывает сформировано «местными» штаммами, которые, как правило, обладают низким потенциалом симбиотической азотфиксации (Denton et al., 2002). Другая причина - поиск подходящей почвенной микрониши, в которой интродуцируемые бактерии могли бы выжить в течение длительного времени и обеспечить эффект от инокуляции. В связи с этим трудно предположить конечное действие бактеризации и, таким образом, все успехи в создании высокоэффективных штаммов не имеют значения, если не обеспечить этим штаммам преимущества при образовании клубеньков (Тихонович И.А., 1996). В искусственном консорциуме, названном нами агроцианом, ЦБ предназначается роль не только носителя и особой экологической ниши, защищающей своего партнера от конкурирующей аборигенной микрофлоры, а также роль энергогенератора. Вместе с тем ЦБ оказывают самостоятельное воздействие на почву и растение в качестве сильного азотфиксатора, стимулятора роста корней и ингибитора грибной инфекции.

1. Эффективность консорциума Nostoc paludosum, 18 - Rhizobium legumi-nosarum bv. trifolii, шт. 348 а на клевере луговом (Trifolium pratense L.)

Влияние агроциана исследовали в полевом опыте на клевере луговом (Trifolium pratense L.). Были взяты два сорта местной селекции - среднеспелый районированный сорт Дымковский и ультрараннеспелый сорт Трио. В качестве микросимбионта в консорциуме с ЦБ был взят производственный штамм Rhizobium leguminosarum bv. trifolii, шт. 348 а. Оба сорта оказались отзывчивыми на инокуляцию (табл. 2), которая способствовала повышению биомассы надземных органов, числа клубеньков и их нитрогеназной активности. Превышение исследованных показателей над неинокулированным контролем у всех сортов достоверно в варианте с агроцианом.

Таблица 2 - Влияние бактеризации семян на клевер луговой сортов

Дымковский и Трио

Сорт Варианты Биомасса, г/м2 Число клубеньков, шт./на 1 растение Нитрогеназная активность клубеньков, нмоль СгШг в час

Дымковский Без бактеризации (контроль) 175,6 16,6 0,30

ЯЫгоЬшт 278,9 21,6 0,26

Ыо51ос +К.ЫгоЫит 370,4 30,8 0,36

Трио Без бактеризации (контроль) 165,9 20.2 0,19

РМюЫит 175,6 24,0 0,38

N05(00 +11Ы2оЬшт 356,9 25,4 0,51

Примечание, Данные достоверны для варианта с агроцианом на уровне г > 0,95

Показателем, характеризующим взаимодействие макро- и микросимбионтов, является активность фермента нитрогеназы. У сорта Дымковский нитрогеназная активность превысила контрольные показатели только в варианте с обработкой агроцианом, а тривиальная обработка не дала эффекта. Хотя на корнях растений этого

сорта клубеньков сформировалось больше, но они были менее активны. Оба сорта в вегетационных опытах, проведенных в условиях Кировской области (Устюжанин И.А., 2003) показывали высокий коэффициент азотфиксации, которая в полевых условиях в большей мере проявилась у раннеспелого сорта Трио, чем у сорта Дымковский.

2. Эффективность консорциума Nostoc paludosum, 18 - Mesorhizobium loti, шт. 1801 (агроциана) на лядвенце рогатом {Lotus corniculatus L.)

Эффективность агроциана на лядвенце рогатом исследовали на двух сортах -Солнышко (местной селекции) и Смоленский 1 (селекции с.-х. опытной станции им. И. Энгельгардта). Анализ корневой системы показал, что количество клубеньков на обоих сортах в контрольном варианте было ниже, чем при обработке ризоби-ями и агроцианом (табл. 3).

Таблица 3 - Влияние инокуляции семян на содержание хлорофилла, ксеромассу

и развитие симбиотического аппарата лядвенца рогатого

Сорт, Вариант Ксеромасса растений, г/м2 Содержание хлорофилла, % Количество клубеньков, ШТ./1 растение Эффективность симбиоза, балл Нитрогеназная активность, нмоль С2Н4/г в час

Смоленский 1 450,0±2б,5 1Д0±0,01 26,3±2,2 2 0,34±0,04

Контроль

Mesorhizobium loti 489,9±28,7 1,15±0,02 30,1±2,8 3 0,41±0,04

Nostoc paludosum -Mesorhizobium loti 541,6±32,0 1,15±0,02 37,7±2,4 4 и 5 0,56±0,04

Солнышко 320,7±28,0 1,26±0,04 31,5±2,9 2 0,39±0,06

Контроль

Mesorhizobium loti 407,0±33,6 1,27±0,06 32,7±3,0 3 0,52±0,05

Nostoc paludosum -Mesorhizobium loti 521,£±34,3 1,27±0,04 40,1±3,1 4 и 5 0,6б± 0,05

Примечание: На обоих сортах данные достоверны для варианта с агроцианом на уровне Р > 0,95.

Наиболее эффективный симбиоз наблюдался на обоих сортах в варианте с применением агроциана. В варианте с обработкой семян чистой культурой Mesorhizobium loti фиксация азота клубеньками усилилась на 20,6%, а в варианте с обработкой агроцианом на 64,7%. Несмотря на высокую нитрогеназную активность и различия в эффективности симбиоза, бактеризация семян не вызвала достоверных различий в высоте растений у обоих сортов. По-видимому, это вызвано морфологическими особенностями сортов. Установлена прямая зависимость ксеромассы растений от вида бактериальной обработки, что, вероятно, явилось следствием различий растений по количеству клубеньков и активности нитрогеназы. Показатель содержания хлорофилла под влиянием инокуляции испытывает меньшие изменения, чем нитро-геназная активность, где влияние агроциана проявилось более ярко. Хотя в лабораторных опытах в чистых циано-бактериальных консорциумах тенденция увеличения хлорофилла очевидна (рис. 2). Подводя итоги по изучению инокуляции семян клевера и лядвенца агроцианом, можно сделать твердое заключение, что, несмотря на наличие в почве диких штаммов ризобий, бактериальная обработка оказалась высокоэффективным приемом перед стандартной обработкой семян монокультурой клеток Rhizobium leguminosarum bv. trifolii и Mesorhizobium loti.

3. Эффективность консорциума Nostoc paludosum, 18-Agrobacterium radiobacter, ium.l7-Pseudomona$ fluorescens, шт. ABX(агроциана) на капусте белокочанной (.Brassica oleracea L.)

В силу высокой отзывчивости капуста является излюбленным тест-объектом для изучения результативности обработок азотобактерином (Мишустин E.H., Шильни-кова В.К., 1968), фосфобактерином (Базилинская М.В., 1989) и ЦБ (Соколов O.A. и др., 1996).

3.1. Вегетационный опыт

Изучали стимулирующее и антифунгальное действие трехкомпонентного консорциума - агроциана на капусте белокочанной, на провоцирующем фоне Fusarium culmorum. Опыт закладывали в стеклянных вегетационных сосудах в песчаной культуре, в промытом, прокаленном, проавтоклавированном речном песке. Влажность субстрата поддерживали на уровне 60-80% от ПВ. Полив растений осуществляли стерильной средой Кнопа. Инокулят вносили дважды, вместе с поливной нормой: при закладке и через 1 месяц. Количество инокулюма при разовом внесении составило: Nostoc paludosum 90 ± 5 мг, Agrobacterium radiobacter 1,0-1,5 • 108 кл/мл, Pseudomonas fluorescens 0,5-1,0 • 108 кл/мл. Fusarium culmorum также вносили дважды в виде суспензии по 5 мл с титром 105-10б КОЕ/мл. Варианты опыта состояли из: 1 - контрольных сосудов; 2 - сосудов, инокулированных агроцианом: Nostocpaludosum+ Agrobacterium radiobacter+ Pseudomonas fluorescen; 3 - сосудов, инокулированных Fusarium culmorum; 4 - сосудов, инокулированных агроцианом и Fusarium culmorum. Повторность пятикратная, количество опытных растений в варианте - 20 штук. Длительность опыта 60 дней. Больше всего растений сохранилось к концу опыта во втором варианте, обработанном агроцианом (93,7%), меньше в третьем варианте, где инокулятом служил Fusarium culmorum (56,2%). Стимулирующий эффект наиболее проявился в варианте с инокуляцией агроцианом, где триплетный консорциум достоверно увеличил показатели надземной части и корневой системы растений капусты. В четвертом варианте, на фоне инфицирования Fusarium culmorum, стимулирующее действие агроциана было выражено слабее. Микробиологический анализ субстрата, проведенный при снятии опыта по группам внесенных микроорганизмов показал, что обработка консорциумом (агроцианом) оказала супрессивное действие на развитие гриба Fusarium culmorum, практически на порядок снижая его численность (рис. 6). Прослеживается аллелопатическое взаимодействие гриба с популяциями хемотрофов, входящих в состав агроциана, они также снижают свою численность. Антагонистическое действие агроциана на развитие Fusarium culmorum может быть связано с антифунгальным действием псевдомонад и агробактерий, способных к синтезу антибиотических веществ (Смирнов В.В. и др., 1984; Поздняков В.Н., 1998). Вместе с тем, антигрибную активность может проявлять и цианобактериальная компонента консорциума. Ранее отмечалось, что стимулирующий эффект ЦБ на растения сопряжен с их обеззараживающим действием, в ряде случаев сопоставимый с применением химических протравителей -гранозана и ТМТД (Панкратова Е.М., 1970). Такое воздействие можно объяснить способностью ЦБ выделять бактериоцин и другие антибиотики, угнетающие патогенную микрофлору (Flores Е., Wölk С.Р., 1986; Kajiyama S. et al., 1998).

тыс.КОЕ/МЛ

Рис. 6 - Численность гетеротрофных микроорганизмов в субстрате на момент окончания опыта.

Условные обозначения: ЕЭ - Pseudomonas fluorescens; ЕЗ - Agrobacterium radiobacter. EEI - Fusarium culmorum;

Агроциан Fusarium Агроциан+Fusarium ваРиант опыта

Таким образом, влияние агроциана на грибную инфекцию может быть объяснено синергическим действием цианобактериальных и бактериальных компонентов консорциума.

3.2. Защищенный грунт

Сложный агроциан был испытан в защищенном грунте на капусте сорта «Крю-мон» в теплицах, производственным назначением которых была выгонка рассады. Агроцианы составляли из ранее изученных комплементарных сочетаний Nostoc paludosum и хемотрофных бактерий Agrobacterium radiobacter и Psudomonas fluo-rescens. Размер делянки 1 м2, количество растений на делянке 400 штук. Количество инокулята при разовом внесении на делянку: 5 г гигромассы Nostoc paludosum с титром Agrobacterium radiobacter и Psudomonas fluorescens 2,0-3,0 ' 107 кл/мл. Препарат разводили в 500 мл среды Громова № 6 без азота и равномерно наносили на делянку дважды - до всходов капусты и и по всходам в фазу двух-трех настоящих листочков. Контрольный вариант одновременно увлажнялся эквивалентным количеством среды Громова (повторность пятикратная). Контрольные делянки перед посевом семян были обработаны фунгицидом - коллоидной серой. Рассада высаживалась в открытый грунт в фазе 4-5 настоящих листочков. После внесения консорциума в почву опытных делянок изменилась численность микроорганизмов, выявляемых на селективных средах, в сравнении с контрольным вариантом (табл. 4). Интересным является показатель численности грибов, так как последние могли быть возбудителями микозных заболеваний рассады. Даже на фоне применения коллоидной серы в качестве фунгицида в контрольном варианте, обработка почвы агроцианом, привела к снижению их общего количества в 2 раза. В то же время наблюдалось увеличение числа аммонификаторов, олигонитрофилов и микроорганизмов, сформировавших колонии на среде ДАС. Поэтому, в целом по этим видам можно сделать заключение о повышении биологической активности почвы. Обработка микробным композитом улучшила качество рассады капусты по следующим показателям: количеству листьев, гигромассе и ксеромассе надземной части (табл. 5). Особенно значимым для дальнейшего приживления рассады явилось улучшение показателей корневой системы. На опытных делянках ни одно растение не было поражено грибными заболеваниями и корневыми гнилями.

Таблица 4 - Изменение численности некоторых групп микроорганизмов почвы _под влиянием агроциана (млн. / г абс. сух, почвы)_

Среды Вариант МПА Чапек ДАС Эшби

Контроль (без инокуляции) 2,4±0,67 0,14±0,01 0,24±0,08 0,45±0,04

Агроциан 3.7±0.2 9 154,2' 0.07±0.02 - 200,0" 0.52±0,14 116,7' 0.66±0.13 146,7*

Примечание: В числителе даны абсолютные значения, в знаменателе - отношение к контролю, принятому за 100 %.' - уровень значимости Р > 0,95

Таблица 5 - Влияние агроциана на качество рассады капусты перед посадкой _ в открытый грунт (в среднем на одно растение)_

Вариант Высота, см Площадь листьев, см2 Надземная часть Корневая система

Количестве листьев, шт. Гигро- масса, г Ксеро-масса, г Объем корневой системы, см3 Ксеро-мас-са, мг.

Контроль 8,40+0,41 139,29±12,3 4,49+0,05 11,35+1,51 0,78±0,09 0,80±0,19 0,06±0,01

Агроциан 9.92±0.62 201.27+13.7 5,02+0,13 15.77+1.16 1.09±0,1 1,10+0.08 0.08±0.01

118,0' 144,5' 111,8* 138,9' 139,7' 137,5' 133,4'

Примечание: В числителе даны абсолютные значения, в знаменателе - отношение к контролю, принятому за 100 %. уровень значимости Р> 0,95

Таким образом, обработка биопрепаратом (агроцианом) оказалась сопоставима с применением химических средств защиты растений, что делает их более выигрышными в плане экологической безопасности при получении пищевых продуктов, при этом достоверно повышая конечный выход продукции. Антибиотики и антигрибные вещества, продуцируемые агроцианом, не мигрируют в высшие растении, как химические пестициды и, следовательно, при обработке растений циано-бактериальным консорциумом мы получаем экологически безопасные продукты питания.

Выводы

1. На современном этапе господствует парадигма, что наиболее действенными в агробиотехнологии являются смешанные микробные культуры (консорциумы), обладающие широким спектром действия. Настоящая работа продолжает и углубляет новое направление - использование в качестве основы таких консорциумов цианобактерий. Эти организмы способны к оксигенному фотосинтезу и усвоению молекулярного азота воздуха, что удешевляет состав сред для их культивирования; они непременный компонент почвенной микробиоты и могут вступать в контакт с самой разнообразной микрофлорой, что предполагает возможность создания искусственных ассоциаций (консорциумов) на их основе.

2. Изучены взаимоотношения партнеров в бинарных и триплетных искусственных консорциумах между аксеничными культурами азотфиксирующих цианобактерий Nostoc linckia (Roth.) Born. Et Flah. шт. 271 и Nostoc paludosum Kütz., шт. 18 (из коллекции ВГСХА) с клубеньковыми бактериями р. Rhizobium, а также ЦБ Nostoc paludosum Kütz., шт. 18 с бактериями нашедшими применение в агро-биопрепаратах - Agrobacterium radiobacter, шт. 17 w. Pseudomonas fluorescen, шт. АВХ.

3. Вселяемые микробные консорты проникают в околоклеточную слизь цианобак-терий, что предполагает возникновение тесных взаимоотношений между партнерами. Цианобактерии не элиминируют подселяемых бактериальных спутников. В бинарных консорциумах не отмечено антагонизма между «вселенцами», хотя в триплетных - на определенных этапах развития реакция отдельных популяций микробов в консорциуме может быть различна. Искусственные консорциумы сохраняются длительное время в лабораторных условиях при периодических пассажах на свежие среды, что доказывает их жизнеспособность.

4. Аксеничные культуры цианобактерий при подсеве программируемых бактерий, достоверно не изменяя количества фикобилипротеинов, увеличивают содержание хлорофилла «а» и нитрогеназную активность. Продлевается логарифмическая фаза роста цианобактерий, что повышает жизнеспособность консорциальной культуры перед аксеничной.

5. Предпочтительной для создания циано-бактериальных консорциумов является фаза логарифмического роста фототрофного организма, когда численность клеток микробных консортов напрямую зависит от биомассы цианобактерий, обеспечивающих их энергетическим материалом.

6. Культивирование искусственных консорциумов возможно в жидких и агаризо-ванных безазотистых средах (среда Громова № 6), рекомендованных для роста цианобактерий. Попытка заменить агар-агар на семейство водонабухающих по-лиметилметакриламидных полимеров, обладающих хорошей способностью к ге-лификации, оказалась неудачной из-за токсичности данных полимеров для предполагаемых партнеров консорциума. Попутно обнаружено, что данные полимеры могут быть пригодны для культивирования грибов.

7. Искусственные консорциумы, которые нашли применение в практике возделывания сельскохозяйственных культур, получили название агроцианов. Бинарный циано-ризобиальный консорциум показал высокую эффективность по сравнению со стандартным приемом нитрагинизации семян, достоверно увеличивая на клевере сортов Дымковский и Трио и лядвенце сортов Смоленский 1 и Солнышко количество клубеньков, нитрогеназную активность, содержание сухого вещества и урожайность. Отмечены различия в сортовой отзывчивости как у клевера, так и у лядвенца, что оставляет возможность по дальнейшему подбору сортов с высокой эффективностью к комплексным микробным обработкам.

8. Триплетный циано - бактериальный консорциум Nostoc paludosum+ Agrobacteri-ит radiobacter + Pseudomonas ßuorescens показал эффективность при выгонке рассады капусты в условиях защищенного грунта, улучшая товарные качества продукции: объем корневой системы, площадь листьев, содержание сухого вещества. Одновременно агроциан оказал ингибирующее действие на развитие Fusarium culmorum, черной ножки и килы. Эффективность санитарного действия агроциана была сравнима с обработкой посевов коллоидной серой, что оставляет возможность разработки еще одного экологически чистого агроприема.

Практические рекомендации

1. ЦБ могут быть использованы для создания микробных консорциумов направленного действия с бактериями р. Rhizobium, Agrobacterium radiobacter, Pseu-

domonas fluorescens, в которых фототрофу предназначена роль защитного контейнера, предохраняющего вселенцев от аборигенной микрофлоры, колебаний гидротермического режима, а также стимулятора роста растений и ингибитора грибной инфекции.

2. Созданные консорциумы могут быть использованы при инокуляции семян бобовых культур и обработке почвы при выгонке рассады капусты, увеличивая урожай бобовых культур и товарные качества рассады.

Список основных работ, опубликованных по теме диссертации:

1. Зяблых, Р.Ю. К вопросу о взаимоотношениях цианобактерий и бактерий рода Rhizobium в совместных культурах / Р.Ю. Зяблых // Актуальные проблемы биологии: Тез. докл. конф. - Сыктывкар, 1996. - С. 50.

2. Зяблых, Р.Ю. Совместное применение цианобактерий Nostoc paludosum и клубеньковой бактерии Rhizobium lotus для инокуляции лядвенца рогатого / Р.Ю. Зяблых // Тез. докл. 14 Республиканской молодёжной научной конференции. -Сыктывкар, 2000. - Т. II. - С. 84-85.

3. Зяблых, Р.Ю. Действие циано-бактериального консорциума на развитие фитопа-тогенного гриба Fusarium culmorum в вегетационном опыте с капустной рассадой / Р.Ю. Зяблых // Аграрная наука на современном этапе: Сб. науч. тр. Все-росс. конф. - Санкт-Петербург - Пушкин, 2002. - С. 205.

4. Зяблых, Р.Ю. Агроконсорциумы в борьбе с почвенными фитопатогенами / Р.Ю. Зяблых // Матер, науч. сессии РАЕ и РАЕН. - Киров, 2004. - С. 185-186.

5. Панкратова, Е.М. Конструирование микробных культур на основе синезелёной водоросли Nostoc paludosum Kütz / Е.М. Панкратова, Р.Ю. Зяблых, A.A. Калинин, A.JI. Ковина и др. // Альгология. — 2004. - Т. 14. - № 4. - С. 445-458.

6. Pankratova, J.M. Designing of microbial binary cultures based on blue-green algae (Cyanobacteria) Nostoc paludosum Kütz / J.M. Pankratova, RJu. Zyablikh, A.A. Kalinin, A.L Kovina et al. // International Journal on Algae. - 2004. - V. 6. - N 3. - P. 290-304.

7. Панкратова, Е.М. Результаты и перспективы использования цианобактерий в биотехнологии / Е.М. Панкратова, A.A. Калинин, A.JI. Ковина, Л.В. Трефилова, Р.Ю. Зяблых // Всеросс. симпозиум «Биотехнология микробов» (с международным участием), посвящённый 120-летию со дня рождения академика В.Н. Шапошникова. -М.: МАКС Пресс, 2004. - С. 71.

8. Калинин, A.A. Взаимоотношения цианобактерий Nostoc paludosum и клубеньковых бактерий при совместном культивировании / A.A. Калинин, Р.Ю. Зяблых, Е.М. Панкратова // Основные итоги и приоритеты научного обеспечения АПК Евро-Северо-Востока: Материалы международной научно-практической конференции, посвященной 110-летию Вятской сельскохозяйственной опытной станции (Зональный НИИСХ Северо-Востока им. Н.В. Рудницкого). В 2-х т. - Киров: НИИСХ Северо-Востока, 2005. - Т. 1. - С. 227-280.

9. Панкратова, Е.М. Цианобактерия Nostoc paludosum Kütz как основа для создания агрономически полезных микробных ассоциаций на примере бактерий рода Rhizobium / Е.М. Панкратова, JI.B. Трефилова, Р.Ю. Зяблых, И.А. Устюжанин // Микробиология. - 2008. - Т. 77. - № 2. - С. 266-272.

Заказ № 321. Подписано к печати 2.12.2008 г. Тираж 100 экз. Формат 60x84 1/16. Бумага офсетная. Усл.п.л.1,0.

ФГОУ ВПО «Вятская государственная сельскохозяйственная академия» 610017, г.Киров, Октябрьский пр-т,133. Отпечатано в типографии Вятской ГСХА.

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Зяблых, Роман Юрьевич

Введение.

Глава I. Обзор литературы

1.1. Современное представление о таксономическом положении цианобактерий.

1.2. Цианобактерии - как объекты биотехнологии.

1.2.1. История возникновения циано — бактериальных сообществ.

1.3. Циано - бактериальное сообщество как целостная система.

1.3.1. Экзометаболиты цианобактерий.

1.3.2. Взаимоотношения цианобактерий с сопутствующей микрофлорой в культурах и естественных экотопах.

1.3.2.1. Состав микрофлоры цианобактерий в культурах.

1.3.2.2. Состав циано - бактериальных сообществ in situ.

1.3.3. Жизнеспособность цианобактерий в аксеничном состоянии.

1.4. Взаимовлияние партнеров и характер отношений, складывающийся в консорциуме.

1.5. Естественные и искусственные консорциумы цианобактерий.

1.6. Понятие об искусственных консорциумах.

Глава II. Объекты и методы исследований

2.1. Объекты исследований.

2.1. Методы исследований.

2.1. Агроклиматические условия района проведения опытов.

Глава П1. Составление микробных циано -бактериальных консорциумов

3.1. Составление микробных циано - бактериальных консорциумов.

3.1.1. Консорциумы Nos toc paludosum и Nos toc linckia с Rhizobium leguminosarum bv. viceae, гит. 1022, Rhizobiam leguminosàrum bv. trifolii, ium.348ta, Mesorhizobium loti, шт. 1801, Bradyrhizobium sp. (Lupinus), шт.

3.1.2. Консорциумы Nostocpaludosum с Agrobacterium radiobacter и Pseudomonas fluorescens.

3.2. Локализация ризобий в циано - ризобиальных консорциумах.

3.3. Подбор питательных сред для культивирования консорциума.

3.3.1. Возможность использования полиметилметакриламидных полимеров для культивирования консорциума.

Глава IV. Примеры практического использования консорциумов

4.1. Эффективность консорциума Мз^/осpa¡udosum, шт. 18 - КЫгоЫит leguminosarum bv. trifolii, шт.348 а на клевере луговом (Trifolium pratense L.).

4.2. Эффективность консорциума Nostoc paludosum, шт. 18 — Mesorhizobium loti, шт. 1801 (агроциана) на лядвенце рогатом (Lotus corniculatus L.).

4.2.1. Влияние агроциана на лядвенец рогатый в вегетационном опыте.

4.2.2. Влияние агроциана на лядвенец рогатый в полевом опыте.

4.3. Эффективность консорциума Nostoc paludosum, 18 - Agrobacterium radiobacter, шт. 17 - Pseudomonas fluorescens, ni r.ABX (агроциана) на капусте белокочанной (Brassica oleracea L.).

4.3.1. Вегетационный опыт.

4.3.2. Защищенный грунт.

Выводы.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Консорциумы микроорганизмов на основе почвенных азотфиксирующих цианобактерий и их агробиотехнологический потенциал"

Актуальность темы. Цианобактерии привлекают к себе внимание специалистов разных профилей в связи с древностью их происхождения, особенностями генома и широчайшими адаптационными свойствами (Панкратова Е.М., 1998), позволившими им сохраниться в течение миллиардолетий в виде и ныне процветающей группы микроорганизмов. В поле зрения биологов они попали благодаря способности к бурному развитию в водных экосистемах, получившему название «цветение» воды и приводящему к вредным экологическим последствиям. В то же время исследования Э.А. Штиной и ее школы показали, что нет почв, в которых бы не обнаруживались цианобактерии (Штина Э.А., Голлербах М.М., 1976). При определенных условиях они могут вызывать «цветение» почвы подобное «цветению» водоемов (Панкратова Е.М., 1987; Домрачева Л.И., 1998 а, б).

В настоящее время становится ясной положительная экологическая роль цианобактерий в почве в качестве азотфиксаторов, накопителей органического вещества, центров микрокосмов как автотрофных организмов, с удивительными способностями к симбиотрофным взаимоотношениям (Горелова O.A. и др., 1997; Лобакова Е.С. и др., 2001; Rai A.N. et al.5 2000; и др.). Последнее свойство цианобактерий особенно интересно в связи со смещением парадигмы использования в биотехнологии не монокультур микроорганизмов, а консорциумов (Заварзин Г.А., 2003). В природе цианобактерии никогда не наблюдаются в виде популяций клеток одного вида. Они находятся в тесных взаимоотношениях, прежде всего, с микрофлорой, находящейся в слизи и окружающей их клетки. Исследования показали, что состав спутников цианобактерий очень лабилен и зависит от изменения условий местообитания. Аксеничные культуры цианобактерий существуют только в лабораторных условиях. В природе они находятся в сообществах и оставаясь эди-фикаторами микросообществ, они могут менять микробный состав, что дает возможность конструирования искусственных микроконсорциумов на основе этих организмов.

В исследованиях кафедры ботаники, физиологии растений и микробиологии ВГСХА разрабатывается новое направление использования циано-бактериальных консорциумов в агробиотехнологии, которое требует углубленного изучения взаимоотношений микробов с цианобактериями с одной стороны, и с другой - цианобактерий и растений. Учитывая фрагментарность сведений в этом направлении в отечественной и зарубежной литературе, в данной работе частично восполняется данный пробел.

Цель и задачи исследований. Целью данной работы было изучение возможности формирования на основе почвенных азотфиксирующих цианобактерий Nostoc paludosum Kiitz., шт.18, Nostoc linckia (Roth.) Born, et Flah. шт.271, искусственных стабильных микробных консорциумов и использование их в агробиотехнологии.

Перед работой стояли следующие задачи:

• изучить искусственные консорциумы между аксеничными культурами Nostoc paludosum, 18 и Nostoc linckia, 271:

- с видами Rhizobium leguminosarum bv. viceae (Frank, 1879) Frank 1889, R. leguminosarum bv. trifolii Dangeard 1926, Mesorhizobium loti Jarvis et al. 1982, Bradyrhizobium sp. (Lupinus) (Schroeter, 1886) Eckhardt et al. 1931.

- и Agrobacterium radiobacter (Beijerinck and van Delden 1902) Conn 1942, Pseudomonas fluorecens Migula 1895.

• выявить характер взаимных влияний в би- и трехкомпонентных консорциумах цианобактерий и хемотрофных бактерий и локализацию хемо-трофных вселенцев в аксеничной культуре цианобактерий;

• исследовать возможность замены агар-агара на химические полимеры с гелифицирующими свойствами;

• изучить действие циано-ризобиальных консорциумов на клевер и лядве-нец и сложных циано-бактериальных консорциумов при выгонке рассады капусты.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Возможность конструирования микробных консорциумов на основе почвенных азотфиксирующих цианобактерий.

2. Возможность использования созданных микробных циано-бактериальных консорциумов при возделывании бобовых культур и выгонке рассады капусты.

Новизной работы является углубление нового направления использования азотфиксирующих цианобактерий как автотрофного компонента для культивирования хемотрофных бактерий с целью создания искусственных стабильных микробных консорциумов направленного действия. Новым является утверждение о совместимости ЦБ с агрономически значимыми организмами — бактериями рр. Rhizobium, Agrobacterium, Pseudomonas. Установлено, что ЦБ не обнаруживают реакции при смене бактериального партнера, не выявляя специфики по отношению к «вселенцам» разных видов. Новым является обнаружение консортов в околоклеточной слизи ЦБ, что свидетельствует об образовании устойчивых взаимоотношений между партнерами искусственно созданного консорциума. Искусственные консорциумы обладали повышенной жизнеспособностью по сравнению с аксеничными культурами, что выражалось в увеличении нитрогеназной активности и содержания хлорофилла а.

Прием создания микробных консорциумов на основе азотфиксирующих цианобактерий открывает новые перспективы в использовании микробных препаратов в агрономии и, с большой вероятностью, может быть использован для решения общих задач биотехнологии, где возникает потребность в стабильно работающих микробных сообществах.

Исследования выполнялись на кафедре ботаники, физиологии растений и микробиологии ВГСХА в рамках исследовательской работы, имеющей государственную регистрацию 01.200.201264.

Апробация работы. Материалы работы были доложены на Всероссийской конф. «Микробиология почв и земледелие», Санкт — Петербург, 1998; на 14 Республиканской молодежной научной конференции, Сыктывкар, 2000; Всероссийской конференции «Аграрная наука на современном этапе», Санкт-Петербург, Пушкин. 2002; I Всероссийской научно - практической конференции, Киров: Вятская ГСХА, 2004; конференции, посвященной 75-летию основания Вятской государственной сельскохозяйственной академии «Науке нового века - знания молодых», 2005 г; на Международной научно - практической конференции, посвященной 110-летию Вятской сельскохозяйственной опытной станции (Зональный НИИСХ Северо-Востока им. Н.В. Рудницкого), 2005; на VIII Международном салоне инноваций и инвестиций (Москва, ВВЦ, 2008), где разработка «Цианобактерии как основа нового направления при создании агробиопрепаратов» была удостоена диплома и бронзовой медали (приложение 1).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 9 работ, 1 работа в рецензируемом журнале, одобренном ВАК РФ.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 175 страницах машинописного текста и состоит из введения, 4 глав и выводов. Работа содержит 14 рисунков, 21 таблицу, 2 приложения. Библиография представлена 361 источником, из которых 131 на иностранных языках.

Заключение Диссертация по теме "Микробиология", Зяблых, Роман Юрьевич

Выводы

2. Изучены взаимоотношения партнеров в бинарных и триплетных искусственных консорциумах между аксеничными культурами азотфикси-рующих цианобактерий Nostoc linckia (Roth.) Born. Et Flah. шт. 271 и Nos toc paludosum Kiitz., шт. 18 (из коллекции ВГСХА) с клубеньковыми бактериями р. Rhizobium, а также ЦБ Nostoc paludosum Kütz., шт. 18 с бактериями нашедшими применение в агробиопрепаратах — Agrobacte-rium radiobacter, шт.17 и Pseudomonas fluorescen, шт. АВХ.

3. Вселяемые микробные консорты проникают в околоклеточную слизь цианобактерий, что предполагает возникновение тесных взаимоотношений между партнерами. Цианобактерии не элиминируют подселяемых бактериальных спутников. В бинарных консорциумах не отмечено антагонизма между «вселенцами», хотя в триплетных - на определенных этапах развития реакция отдельных популяций микробов в консорциуме может быть различна. Искусственные консорциумы сохраняются длительное время в лабораторных условиях при периодических пассажах на свежие среды, что доказывает их жизнеспособность.

5. Предпочтительной для создания циано - бактериальных консорциумов является фаза логарифмического роста фототрофного организма, когда численность клеток микробных консортов напрямую зависит от биомассы цианобактерий, обеспечивающих их энергетическим материалом.

6. Культивирование искусственных консорциумов возможно в жидких и агаризованных безазотистых средах (среда Громова № 6), рекомендованных для роста цианобактерий. Попытка заменить агар-агар на семейство водонабухающих полиметилметакриламидных полимеров, обладающих хорошей способностью к гелификации, оказалась неудачной из-за токсичности данных полимеров для предполагаемых партнеров консорциума. Попутно обнаружено, что данные полимеры могут быть пригодны для культивирования грибов.

7. Искусственные консорциумы, которые нашли применение в практике возделывания сельскохозяйственных культур, получили название агро-цианов. Бинарный циано - ризобиальный консорциум показал высокую эффективность по сравнению со стандартным приемом нитрагинизации семян, достоверно увеличивая на клевере сортов Дымковский и Трио и лядвенце сортов Смоленский 1 и Солнышко количество клубеньков, нитрогеназную активность, содержание сухого вещества и урожайность. Отмечены различия в сортовой отзывчивости как у клевера, так и у ляд-венца, что оставляет возможность по дальнейшему подбору сортов с высокой эффективностью к комплексным микробным обработкам.

8. Триплетный циано - бактериальный консорциум Nostoc paludosum + Agrobacterium radiobacter + Pseudomonas ßuorescens показал эффективность при выгонке рассады капусты в условиях защищенного грунта, улучшая товарные качества продукции: объем корневой системы, площадь листьев, содержание сухого вещества. Одновременно агроциан оказал ингибирующее действие на развитие Fusarium culmorum, черной ножки и килы. Эффективность санитарного действия агроциана была сравнима с обработкой посевов коллоидной серой, что оставляет возможность разработки еще одного экологически чистого агроприема.

Практические рекомендации

1. ЦБ могут быть использованы для создания микробных консорциумов направленного действия с бактериями р. Rhizobium, Agrobacterium radiobacter, Pseudomonas ßuorescens, в которых фототрофу.предназначена роль защитного контейнера, предохраняющего вселенцев от аборигенной микрофлоры, колебаний гидротермического режима, а также стимулятора роста растений и ингибитора грибной инфекции.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Зяблых, Роман Юрьевич, Киров

1. Авилов, И.А. Методы получения аксеничных культур сине-зеленых водорослей (цианобактерий) / И.А. Авилов // Культивирование коллекционных штаммов водорослей: Межвуз. сб. науч. тр. - Л.: ЛГУ. - 1983. -С. 129- 145.

2. Агроклиматические ресурсы Кировской области. Л.: Гидрометеоиз-дат. - 1974.-112 с.

3. Айзенман, Б.Е. Антибиотические свойства бактерий / Б.Е. Айзенман. — Киев: Наукова думка. 1973. - 183 с.

4. Алексахина, Т.И. Водоросли в светло-каштановой почве под лесными полосами / Т.И. Алексахина // Повышение устойчивости защитных насаждений в полупустыне. М.: Наука. - 1981. - С. 172-173.

5. Андреева, H.A. Азотфиксирующие микроорганизмы ризосферы риса, выращиваемого бессменно и в севообороте / H.A. Андреева // Бюллетень ВНИИ с.-х. микробиологии. 1985. - № 42. - С. 37 - 40.

6. Андреюк, Е.И. Цианобактерии / Е.И. Андреюк, Ж.П Коптева, В.В. Защита. Киев: Наукова думка. - 1990. - 195 с.

7. Бабьева, И.П. Биология почв: Учебник / И.П. Бабьева, Г.М. Зенова. 2-е изд., перераб. и доп. - М.: Изд-во МГУ. - 1989. - 336 с.

8. Базилинская, М.В. Биоудобрения / М.В. Базилинская. М.: Агропром-издат. - 1989.- 128 с.

9. Бажина, Е.В. Взаимосвязь некоторых почвенных водорослей и грибов / Е.В. Бажина // Современное состояние и перспективы изучения почвенных водорослей в СССР. Киров. - 1966. - С. 4 - 5.

10. Бажина, Е.В. / Е.В. Бажина, Э.А. Штина // Тр. Кировского с.х. института. 1967. - 20. - вып. 40. - С. 78 - 86.

11. Бактериальная палеонтология / Пособие по бактериальной палеонтологии. / Под. ред А.Ю. Розанова. М.: ПИН РАН. - 2002. - 188 с.

12. Белимов, A.A. Эффективность инокуляции ячменя смешанными культурами диазотрофов: Автореф. дис . канд. биол. наук. / A.A. Белимов. -Л. 1990.-19 с.

13. Белимов, A.A. Влияние pH почвы на взаимодействие ассоциативных бактерий с ячменем / A.A. Белимов, A.M. Кунакова, Е.В Груздева // Микробиология. 1998. - Т. 67. - № 4. - С. 561 - 568.

14. Бершова, О.И. Взаимоотношения синезеленых водорослей — возбудителей «цветения» воды с бактериями / О.И. Бершова, Ж.П. Коптева, Е.В. Танцюренко // «Цветение» воды. Киев: Наук, думка. - 1968. — С. 159-171.

15. Воронин, A.M. Ризосферные бактерии рода Pseudomonas, способствующие росту и развитию растений / A.M. Боронин // Соросовский образовательный журнал. 1998. - № 10. - С. 25 - 31.

16. Бурзин, М.Б. Способы фоссилизации Oscillatoriales (Cyanophyta): влияние типа сохранности на разнообразие микрофоссилий / М.Б. Бурзин, В.К. Орлеанский // Альгология. 1995. - Т.5. - №1. - С.78 - 89.

17. Бурзин, М.Б. Докембрийские предтечи «пионеров суши» / М.Б. Бурзин // Природа. 1998. - №3. - С. 83 - 95.

18. Васюк, Л.Ф. Ассоциативные азотфиксаторы и условия их эффективного применения / Л.Ф. Васюк // Бюлл. ВНИИ с. х. микробиологии. — 1985.-№42.-С. 16-19.

19. Вернадский, В.И. Биосфера / В.И. Вернадский — Л. 1926. - 146 с.

20. Весталл, Ф., Вэлш, М. Некоторые ископаемые микробные сообщества: Бактериальная палеонтология. / Под ред. А.Ю.Розанова. — М.: ПИН РАН. 2002. - С. 84 - 90.

21. Викторов, Д.П. Малый практикум по физиологии растений / Д.П. Викторов. М.: Высшая школа. - 1969. - 119 с.

22. Вознесенский, В.А. Первичная обработка экспериментальных данных /

23. B.А. Вознесенский. — Л.: Наука. 1969. - 83 с.

24. Вятские клевера / Киселев, Н.П., Кормщиков, А.Д., Никифорова, Е.В. и др. Киров. - 1995. - 275 с.

25. Гавриленко, В.Ф. Избранные главы физиологии растений: Учеб. Пособие / В.Ф. Гавриленко, М.В. Гусев, К.А. Никитина, П. Хоффманн. М.: Изд-воМГУ. - 1986.-440 с.

26. Генетика симбиотической азотфиксации с основами селекции / Под ред. И.А. Тихоновича, H.A. Проворова. СПб.: Наука. - 1998. - 194 с.

27. Герасименко, Л.М. Цианобактерии, циано бактериальные сообщества, маты, биопленки / Л.М. Герасименко, Г.Т. Ушатинская / Под ред. А.Ю. Розанова // Бактериальная палеонтология. - М.: ПИН РАН. - 2002 а.1. C. 36 47.

28. Герасименко, JI.M. Фосфатизация / Л.М. Герасименко, Т.Г. Ушатин-ская. / Под ред. А.Ю.Розанова //Бактериальная палеонтология. — М.: ПИН РАН. 2002 б. - С. 59 - 65.

29. Герасименко, Л.М. Актуалистическая палеонтология циано бактериальных сообществ: Автореф. дис. . докт.биол.наук / Л.М. Герасименко. -М. -2002 в.-70 с.

30. Герасименко, Л.М. Маты Microcoleus из алкалофильных и галофиль-ных сообществ / Л.М Герасименко, Л.Л. Митюшина, Б.Б. Намсараев // Микробиология. 2003 - Т. 72. - № 1. - С. 84 - 92

31. Герман, Т.Н. Органический мир миллиард лет назад / Т.Н. Герман — Л.: Наука. 1990.-50 с.

32. Гиляров, A.M. Становление эволюционного подхода как объяснительный принцип для экологии / A.M. Гиляров // Журнал Общей Биологии. -Т. 64. -№ 1.-2003.-С. 3-22.

33. Глаголева, О.Б. Экологическая характеристика бактериального звена альго-бактериальных ассоциаций / О.Б. Глаголева, Г.М. Зенова // Вестн. МГУ. Сер. Почвоведение. - 1992. - № 3. - С. 19 - 25.

34. Гоготов, И.Н. Перспективы использования азотфиксирующих фото-трофных бактерий в биотехнологии / И.Н. Гоготов // Фототрофные микроорганизмы. Пущино. - 1988. — С. 95 - 107

35. Голлербах, М.М. Определитель пресноводных водорослей СССР / М.М. Голлербах, Е.К. Коссинская, В.И. Полянский. Т. 2. Синезеленые водоросли. — М.: Сов. Наука. - 1953. - 652 с.

36. Голлербах, М.М. Почвенные водоросли / М.М. Голлербах, Э.А. Штина Л.: Наука. - 1969. - 228 с.

37. Головлев, Е.Л. О старых проблемах новой систематики бактерий / Е.Л. Головлев // Микробиология. 1998. - Т. 67. - № 2. - С. 281 - 286.

38. Голубкова, Н.С. Компоненты лишайников и их взаимоотношения / Н.С. Голубкова // Жизнь растений: в 6-ти т. М.: Просвещение. - 1977. - Т. З.-С. 380-389.

39. Гончарова, A.B. Получение безбактериальной культуры Oscillatoria splendida Grew. / A.B. Гончарова // Биология внутренних вод: Информ. бюлл. 1975. - № 27. - С. 54 - 56.

40. Горелова, O.A. Пространственная интеграция партнеров и гетероморфизм цианобактерии Nostoc muscorum CALU 304 в смешанной культуре с тканью раувольфии / O.A. Горелова // Микробиология. 2000. - Т. 69.-№4.-С. 565-573.

41. Горелова, O.A. Ультраструктура клеточной поверхности гетероморф-ных клеток Nostoc muscorum CALU 304 в смешанной культуре с тканью раувольфии / O.A. Горелова // Микробиология. 2001. - Т. 70. - № З.-С. 337-347.

42. Горелова, O.A. Образование и ориентированное распространение гор-могониев цианобактерий в модельных системах с тканями высших растений / O.A. Горелова, Т.Г. Корженевская, М.В. Гусев // Вестн. Моск. Ун-та, сер. 16. / Биология. 1995. - № 4. - С. 19 - 27.

43. Горелова, O.A. Гетероморфизм цианобактерии Nostoc sp. микросимбионта мха Blasia pusilla / O.A. Горелова, О.И. Баулина, А.Г. Щелманова, Т.Г. Корженевская, М.В. Гусев // Микробиология. 1996 а. - Т. 65. - № 6.-С. 824-832.

44. Горелова, O.A. Формирование гормогониев и их таксис при взаимодействии цианобактерий и растений / O.A. Горелова, О.И. Баулина, М.В. Гусев, Т.Г. Корженевская // Автотрофные микроорганизмы: Тез. докл. -М.: Изд-во МГУ. 1996 б. - С.30.

45. Горелова, O.A. Формирование гормогониев и их таксис при взаимодействии цианобактерий и растений / O.A. Горелова, О.И. Баулина, Т.Г.

46. Корженевская, M.B. Гусев // Микробиология. 1997. - Т. 66. - № 6. - С. 800-806.

47. Горелова, O.A. Образование гигантских и ультрамикроформ Nostoc muscorum CALU 304 при взаимодействии с культивируемыми тканями раувольфии / O.A. Горелова, Т.Г. Корженевская. // Микробиология. -2002. Т. 71. - № 5. - С. 654 - 651.

48. Горелова, O.A. Динамика накопления и деструкции цианофицина в клетках цианобактерий при взаимодействии с растительными тканями / O.A. Горелова, С.Ю. Клейменов // Микробиология. 2003. - Т. 72. - № З.-С. 361 -369.

49. Горюнова, C.B. Водоросли продуценты токсических веществ / C.B. Горюнова, Н.С. Демина-М.: Наука. - 1974.-256 с.

50. Горюнова, C.B. Фитогормоны и другие факторы роста у водорослей / C.B. Горюнова // «Развитие и значение водорослей в почвах Нечерноземной зоны»: Материалы межвузовской конференции. / Пермь. 1977. -С. 101 - 102.

51. Горюнова, C.B. Природное продуцирование веществ сильного биологического действия / C.B. Горюнова // Экологическое прогнозирование. М.: Наука. - 1979. - С. 49 - 54.

52. Горюнова, C.B. Синезеленые водоросли (биохимия, физиология, роль в практике). -М.: Наука. 1969. - 228 с.

53. Громов, Б.В. Коллекция культур водорослей Биологического института Ленинградского университета / Б.В. Громов // Тр. Ин-та / Петергоф, биол. институт Ленинград, ун-та. 1965. — № 19. - С. 125 — 130.

54. Громов, Б.В. Микроорганизмы — паразиты водорослей: Автореф. дис. . .докт. биол. наук / Б.В Громов. Л. - 1972. - 42 с.

55. Громов, Б.В. Ультраструктура синезеленых водорослей / Б.В. Громов — Л.: Наука. 1976.-94 с.

56. Громов, Б.В. Коллекция культур водорослей лаборатории микробиологии Биологического института Ленинградского университета / Б.В. Громов H.H. Титова // Культивирование коллекционных штаммов водорослей. Ленинград. - 1983. - С. 3 - 27.

57. Громов, Б.В. Биологически активные вещества (БАВ) цианобактерий / Б.В. Громов // Автотрофные микроорганизмы. М.: «Диалог - МГУ». -1996 а.-С. 8.

58. Громов, Б.В. Цианобактерии в биосфере / Б.В. Громов // Соросовский образовательный журнал. 1996 б. - № 9. - С. 33 - 39.

59. Гусев, М.В. Биология синезеленых водорослей: Курс лекции / М.В. Гусев М.: Изд-во Московского ун-та. - 1968. - 101 с.

60. Гусев, М.В. Принципы выделения, очистки и культивирования сине-зеленых водорослей. М.: Изд-во МГУ. - 1964. - С. 55 - 65.

61. Гусев, М.В. Цианобактерии (физиология и метаболизм) / М.В. Гусев, К.А. Никитина М.: Наука. - 1979. - 228 с.

62. Гусев, М.В. Получение аксеничных эксплантантов из талломов морских водорослей / М.В. Гусев, А.Х. Тамбиев, H.H. Кирикова, P.P. Асла-нян, H.H. Шелястина // Вест. МГУ. Сер. 16., Биологическая. - 1984. -№5.-С. 716-721.

63. Добровольская, Т.Г. Структура бактериальных сообществ почв / Т.Г. Добровольская М.: ИКЦ «Академия». - 2002. - 282 с.

64. Догадина, Т.В. О положении водорослей в системе органического мира / Т.В. Догадина // XIII конф. по споровым раст. Средней Азии и Казахстана, 4-6 сентября 1989 г.: Тез. докл. Ташкент. - 1989. - С. 18-19.

65. Домрачева, Л.И. Продукция водорослей в дерново — подзолистой почве, определенная при ежесуточном учете / Л.И. Домрачева // Динамика микробиологических процессов в почве: Тез. докл. — Таллин. 1974. -4.1.-С. 161-163.

66. Домрачева, Л.И. Особенности альгобактериального комплекса при «цветении» почвы / Л.И. Домрачева, П.А. Кожевин, О.Н. Лебедева // Вестник МГУ. Сер. Почвоведение. - 1986. - № 3. - С. 15 - 19.

67. Домрачева, Л.Й. Индикационная роль «цветения» почвы при оценке её состояния / Л.И. Домрачева // Экология и почвы. — Пущино. 1998 а. -Т. 2.-С. 104-119.

68. Домрачева, Л.И. «Цветение» почвы в агроэкосистемах и закономерности его развития: Автореф. дис. .докт. биол. наук / Л.И. Домрачева -Москва. 1998 6.-46 с.

69. Домрачева, Л.И. Антифузариозная активность почвенных цианобакте-рий / Л.И. Домрачева, А.Н. Третьякова // Аграрная наука Северо-Востока Европейской части России на рубеже тысячелетий. — Киров. -2000. Т.2. - С. 197-199.

70. Домрачева, Л.И. Использование цианобактерий как экологически безопасного метода борьбы с фузариозами / Л.И. Домрачева, А.Н. Третьякова, Л.В. Трефилова // Экология -Здоровье -Жизнь — 2002 а. — С. 46 — 48.

71. Домрачева, Л.И. Цианобактериальное ингибирование фузариозных инфекций / Л.И. Домрачева, Л.В. Трефилова, И.Л. Ветлужских // Вопросы экологии и природопользования в аграрном секторе. М.: АНК. - 2003. -С. 236-240.

72. Дробышева, Л.В. Оценка коллекции и создание исходного материала клевера лугового с повышенной симбиотической азотфиксацией: Автореф. дисс.кан. с.-х. наук/ Л.В. Дробышева. — М. 1990.- 16 с.

73. Дубинин, A.B. Отсутствие роста цианобактерии Microcoleus chthono-plastes в чистой культуре / A.B. Дубинин, JI.M. Герасименко, C.JI. Ве-нецкая, М.В. Гусев // Микробиология. 1992. - Т. 61. - № 1. - С. 57 - 63.

74. Еленкин, A.A. Синезеленые водоросли СССР / A.A. Еленкин — M.-JI. -1936.-684 с.

75. Еленкин, А. А. Синезеленые водоросли СССР / А. А. Еленкин // Специальная (систематическая) часть. JL: Изд-во АН СССР. - Вып.2. - 1949.- 984 с.

76. Емцев, В.Т. Микробиология / В.Т. Емцев, E.H. Мишустин М.: Колос.- 1993.-383 с.

77. Емцев, В.Т. Микробиология / В.Т. Емцев, E.H. Мишустин М.: Дрофа. -2005.-445 с.

78. Еськов, К.Ю. История Земли и жизни на ней / К.Ю. Еськов // Наука, Интерпериодика М.: МИРОС-МАИК. - 2000. - С. 352.

79. Жилкина, И.Н. Особенности движения синезеленых водорослей / И.Н. Жилкина, A.C. Герась // Ботанический журнал. 1981. - Т.66. - № 7. — С. 1006-1014.

80. Журбицкий, З.И. Теория и практика вегетационного метода / З.И. Жур-бицкий М.: Наука. - 1968. - 268 с.

81. Заварзин, Г.А. Биоценоз в природе и промышленных условиях / Г.А. Заварзин Пущино. - 1987. - С. 3 - 11.

82. Заварзин, Г.А. Развитие микробиальных сообществ в истории Земли / Г.А. Заварзин // Проблемы доантропогенной эволюции биосферы. М.: Наука. 1993а. - С.212 - 222.

83. Заварзин, Г.А. Шестой международный симпозиум помикробной экологии GIAM. 6. - 19936. - Т.62. - Вып. 5. - С. 970 - 976.

84. Заварзин, Г.А. Смена парадигмы в биологии / Г.А. Заварзин // Вест. РАН. 1995. - Т.65. - С. 8 - 17.

85. Заварзин, Г.А. Введение в природоведческую микробиологию / Г.А. Заварзин, H.H. Колотилова // Учебное пособие. — М.: Книжный дом «Университет». 2001. — 256 с.

86. Заварзин, Г.А. Современные бактерии и бактериальные сообщества. Прокариотная клетка как система. Бактериальная палеонтология / Под ред. А.Ю.Розанова. М.: ПИН РАН. - 2002. - С.6-36.

87. Заварзин, Г.А. Лекции по природоведческой микробиологи / Г.А. Заварзин М.: Наука. - 2003. - 348 с.

88. Заварзин, Г.А., Колотилова, H.H. Введение в природоведческую микробиологию: Учебное пособие / Г.А. Заварзин, H.H. Колотилова М.: Книжный дом «Университет». ~ 2001. - 256 с.

89. Звягинцев, Д.Г. Почва и микроорганизмы / Д.Г. Звягинцев М.: Изд-во МГУ. - 1987.-256 с.

90. Звягинцева, И.С. Взаимодействие галобактерий и цианобактерий в га-лофильном цианобактериальном сообществе / И.С. Звягинцева, Л.М. Герасименко, H.A. Кострикина, Е.С. Булыгина, Г.А. Заварзин, // Микробиология. 1995. - Т. 64. - № 2. - С. 252 - 258

91. Зенова, Г.М. Экологические связи водорослей в биоценозах / Г.М Зено-ва, Э.А. Штина, Э.А., С.Н. Дедыш, О.Б. Глаголева, A.A. Лихачева, Т.А. Грачева // Микробиология. 1995. - Т. 64. - № 2. - С. 149 - 164.

92. Зильберман, E.H. Получение водорастворимых полимеров модификацией полиметилметакрилата аминоспиртами / E.H. Зильберман, C.B. Хитрин, Р.И. Спасская, Т.П. Кучина // ВМС. 1981. - Т. 23 Б. - Вып. 12.-С. 889-891.

93. Игуменов, B.JT. Иммобилизация клеток Agrobacterium radiobacter 56 / 136 на твердых носителях / В.Л. Игуменов, // Микроорганизмы в сельском хозяйстве: Тез. IV Всесоюз. науч. конф. 20 24 октября 1992 г. — Пущино. - 1992. - С. 72 - 73.

94. Кабиров, P.P. Популяционный подход при изучении почвенных водорослей агрофитоценозов / P.P. Кабиров // Агрофитоценозы и экологические пути повышения их стабильности и продуктивности. — Ижевск. 1988.-С. 60.

95. Казанцева, Е.В. Эффективность предпосевной обработки семян сои бактериями рода Pseudomonas и Rhizobium / E.B. Казанцева, Л.Ф. Аш-марина // Вклад молодых ученых в развитие сиб. аграр. Науки. Новосибирск. - 1999. - С. 95 - 96.

96. Калинин, A.A. Цианобактерии как возможные компоненты диазотроф-ных микробных ассоциаций и их влияние на растения: Дис. . канд. биол. наук / A.A. Калинин. Киров. - 1995. — 126 с.

97. Калинин, A.A. Цианобактерии как возможные компоненты диазотроф-ных микробных ассоциаций и их влияние на растения: Автореф. дис. . канд.биол.наук / A.A. Калинин. М. - 1995. - 23 с.

98. Кевбрин, В.Б. Выделение и идентификация Pseudomonas nautica гетеротрофного спутника цианобактерий Microcoleus chthonoplastes / В.Б. Кевбрин, H.A. Кострикина, A.M. Лысенко // Микробиология. - 1994. -Т. 63. - № 6. - С. 1072 - 1080.

99. Киприанова, Е.А. Высокоактивное антибиотическое вещество, выделенное из бактерий рода Pseudomonas / Е.А. Киприанова, A.C. Рабинович, О.И. Бойко, Л.Ю. Каминская // Антибиотики. 1969. - Т. 14. - № 3. -С. 228-231.

100. Ковина, А.Л. Азотфиксирующие цианобактерии как основа для создания сложных микробных препаратов / А.Л. Ковина, Е.М. Панкратова, Г.Н. Перминова // Агрономическая наука достижения и перспективы: Тез. докл. - Киров. - 1994. - С. 14.

101. Ковина, А.Л. Взаимоотношения клубеньковых бактерий и цианобактерий при совместном культивировании / А.Л. Ковина, Р.Ю. Зяблых // Тез. докл. науч. конф.: Почва, биология растений и агротехника их возделывания. Киров. - 1997. - С. 20-23.

102. Ковина, А.Л. Микробные агроконсорциумы на основе цианобактерий: Дис. . канд. биол. наук/А.Л. Ковина. Киров. - 2001. - 158 с.

103. Кожемяков, А.П. Использование инокулянтов бобовых и биопрепаратов комплексного действия в сельском хозяйстве / А.П. Кожемяков, И. А. Тихонович // Докл. РАСХН. 1998 - N 6. - С. 7 - 10.

104. Козицкая, В.Н. Влияние некоторых фенольных соединений на жизнедеятельность синезеленой водоросли Microcystis aeruginosa / В.Н. Козицкая // Гидробиол. журн. 1987. — Т. 23. - № 1. — С. 51- 56.

105. Кондратьева, Е.Н. Фототрофные микроорганизмы / Е.Н. Кондратьева, И.В. Максимова, В.Д. Самуилов. -М.: Изд-во МГУ. 1989. - 376 с.

106. Кондратьева, Е.Н. Автотрофные прокариоты / Е.Н. Кондратьева. М.: Изд-во Московского ун-та. - 1996. - 303 с.

107. Кондратьева, Н.В. О недопустимости подчинения номенклатуры водорослей (Cyanophyta) действию международного кодекса номенклатуры бактерий / Н.В. Кондратьева // Ботанический журнал. — 1981. — Т. 66. -№2.-С. 215-226.

108. Кондратьева, Н.В. Морфология популяций прокариотических водорослей / Н.В. Кондратьева. Киев: Наук. Думка. - 1989. - 176 с.

109. Коптева, Ж.П. Физиологические особенности и взаимоотношения некоторых синезеленых водорослей и бактерий: Автореф. дисс. . канд. биол. наук / Ж.П. Коптева. Киев. - 1973. - 29 с.

110. Корженевская, Т.Г. Экспериментальная симбиология (на примере син-цианозов растений): Автореф. дис. . докт. биол. наук / Т.Г. Корженевская. М. -1990.-49 с.

111. Красильников, А.П. Микробиологический словарь справочник / А.П. Красильников. — Минск: Беларусь - 1986. - 351 с.

112. Крылов, И.Н. Окремненные микроорганизмы в водорослево — бактериальных пленках термальных источников Камчатки / И.Н. Крылов, В.К. Орлеанский, Г.А. Заварзин // Докл. АН СССР. 1983. - 268 - № 6. - С. 1483 - 1485.

113. Крылов, И.Н. Влияние синезеленых водорослей на осаждение карбоната кальция / И.Н. Крылов, В.К. Орлеанский // Изв. АН СССР. Сер. геол.- 1986. № 3. - С. 123 - 128.

114. Крылов, И.Н. К образованию кремнистых микрофоссилий / И.Н. Крылов, Н.С. Тихомирова // Палеонтологии, журнал. — 1988. №3. - С. 3 -8.

115. Крылов, И.Н. Окремненние: вечные препараты / И.Н. Крылов, В.К. Орлеанский, Н.С. Тихомирова // Природа. 1989. - № 4. - с. 73 - 78.

116. Кузьменко, М.И. Влияние водорослей на бактериальную деструкцию белков в природных водах / М.И. Кузьменко, А.К. Рябов // Гидробиол. журн. 1980. - Т. 16. - № 2. - С. 72-77.

117. Кырвел, Н.С. Окременелые строматолиты среднего кембрия Сибирской платформы / Н.С. Кырвел // Альгология. 1996. — Т. 6. - № 1. - С. 62 -69.

118. Лабутова, Н.М. Влияние Agrobacterium radiobacter на популяцию фито-патогенного гриба Fusarium solani при различных условиях в почве / Н.М. Лабутова, H.A. Вишневская // Микробиология почв и земледелие: Тез. докл. С. - Петербург. - 1998. - С. 39.

119. Лапинскас, Э.Б. О повышении эффективности инокуляции в Литовской ССР / Э.Б. Лапинскас, Д.Ю. Амбразайтене,// Тр. Литовского НИИ земледелия. 1991. - Т. 22 - С. 40 - 48.

120. Лобакова, Е.С. Особенности цианобактериально бактериальных комплексов микросимбионтов растительных синцианозов / Е.С. Лобакова, Г.А. Дольникова, Т.Г. Корженевская // Микробиология. - 2001 а - Т. 70 -№ 1 - С. 128-134.

121. Максимова, И.В. Светозависимый антибактериальный эффект водорослей и его экологическое значение / И.В. Максимова, O.A. Сидорова // Гидробиол. журн. 1986. - Т. 22. - № 6. - С. 3 - 11.

122. Мезенцева, Г.В. Возможные пути трансформации органического вещества азотфиксирующих цианобактерий в почве: Дис. . канд. бил. наук / Г.В. Мезенцева. Киров. - 1986. - 190 с.

123. Мезенцева, Г.В. Возможные пути трансформации органического вещества азотфиксирующих цианобактерий в почве: Автореф. дис. . канд. биол. наук / Г.В. Мезенцева. Л. - 1987. - 17 с.

124. Мезенцева, Г.В. Возможные пути трансформации органического вещества азотфиксирующих Cyanophyta в почве / Г.В. Мезенцева // Альгология. 1992. - Т. 2. - № 4. - С. 27 - 31.

125. Методы физиолого биохимического исследования водорослей в гидробиологической практике / Под ред. Л.А.Сиренко, А.И.Сакевича, Л.Ф.Осипова и др. - Киев: Наук.думка. - 1975. - 247 с.

126. Мишустин, E.H. Биологичсекая фиксация атмосферного азота / E.H. Мишустин, В.К. Шильникова. — М.: Наука. 1968. — 532 с.

127. Михайлова, Е.К. О методике получения бактериологически чистых культур синезеленых водорослей из родов Oscillatoriale и Phormidium / E.K. Михайлова // Узб. биол. журн. 1961. - № 4. - С. 10 - 14.

128. Монастырский, O.A. Опасные грибы. Сельскохозяйственные аспекты исследования токсинообразующих грибов / O.A. Монастырский // Arpo XXI. 1998. - № 10. - С. 18 - 19.

129. Монастырский, O.A. Роль культурных растений в эволюции токсинообразующих грибов / O.A. Монастырский // Совр. микология в России. Тр. 1 съезда микологов России. М. - 2002. - С. 267.

130. Муронец, Е.М. Синтез индолилуксусной кислоты сапрофитной ассоциативной бактерией Agrobacterium radiobacter / Е.М. Муронец, Н.В. Белавина, Т.Н. Митронова, C.B. Каменева // Микробиология. 1997. -Т. 66.-№4. с. 506-513.

131. Натмен, П.С. Клубеньковые бактерии в почве / П.С. Натмен // Почвенная микробиология. М.: Колос. - 1979. - С. 141 - 167.

132. Некрасова, К.А. Трофические связи почвенных животных и водорослей (на примере коллембол) / К.А. Некрасова // Почвенная фауна и биологическая активность осушенных и рекультивированных торфяников. — М.: Наука. 1980. - С. 160 - 166.

133. Никитин, Д.И. Синтрофные сообщества гетеротрофных микроорганизмов в биосфере / Д.И. Никитин // Микроорганизмы как компоненты биогеоценоза. Алма-Ата. - 1982. - С.27 - 28.

134. Никитина, З.И. Микробиологический мониторинг наземных экосистем / З.И. Никитина. Новосибирск: Наука. - 1991. — 220 с.

135. Нице, Лазер. Микробиологическая активность почвы в условиях адаптивного земледелия: Автореф. дис. . докт. биол. наук / Лазер. Нице. -М. 1995. -38 с.

136. Новикова, Н.И. О характере взаимодйствия клубеньковых бактерий козлятника Rhizobium galegae с бобовыми растениями / Н.И. Новикова, В.И. Сафронова, Е.А. Павлова // Сельскохозяйственная биология. — 1992.-№ 5.-С. 105-110.

137. Олюнина, Л.Н. Продуцирование индолил-3-уксусной кислоты ризо-сферными бактериями рода Pseudomonas в процессе роста / Л.Н. Олюнина, В.П. Шабаев // Микробиология. 1996. - Т. 65. - № 6. - С. 813 -817.

138. Определитель бактерий Берги. Т.1. изд. 9 / Под ред. Хоулта Дж. и др. -М.: Мир. 1997.-520 с.

139. Орлеанский, В.К. Циано бактериальные маты - аналоги ископаемых строматолитов (лабораторное моделирование) / Под ред. А.Ю.Розанова // Бактериальная палеонтология. - М.: ПИН РАН. - 2002. - С. 47 - 51.

140. Османова, P.A. Синезелёные водоросли почв южной Туркмении и их участие в накоплении азота: Дис. . канд. бдол. наук / P.A. Османова. -Ашхабад. 1968. - 149 с.

141. Панкратова, Е.М. Изменение состава культуральной среды в процессе роста почвенных синезеленых водорослей / Е.М. Панкратова // Тр. / Кировского с.-х. института. 1967. - вып. 40. — С. 202 - 207.

142. Панкратова, Е.М. О роли азотфиксирующих синезеленых водорослей и сопутствующих им олигонитрофильных бактерий в фиксации свободного азота / Е.М. Панкратова // Ботанический журнал. — 1970. — Т. 55. -№ 11.-С. 1611-1618.

143. Панкратова, Е.М. Роль азотфиксирующих синезеленых водорослей (цианобактерий) в накоплении азота и повышении плодородия почвы: Дис. докт. биол. наук / Е.М. Панкратова. — Киров. 1980 а. - 495 с.

144. Панкратова, Е.М. Роль азотфиксирующих синезеленых водорослей (цианобактерий) в накоплении азота и повышении плодородия почвы: Автореф. дис. . докт. биол. наук / Е.М. Панкратова. — Москва. 1981. -39 с.

145. Панкратова, Е.М. Участие цианобактерий в круговороте азота в почве и создании её плодородия / Е.М. Панкратова И Успехи микробиологии. -М.: Наука. 1987. - Т. 21. - С. 212-242.

146. Панкратова, Е.М. Значение синезеленых водорослей (цианобактерий) в круговороте азота в почвах умеренной зоны / Е.М. Панкратова, Г.В. Мезенцева // Бюлл. ВНИИ с.-х. микробиологии. 1985. - № 42. - С. 48 -51.

147. Панкратова, Е.М. Аксенизация цианобактерий / Е.М. Панкратова, A.A. Калинин // «Агрономическая наука достижения и перспективы»:Тез. докл. науч. конф. — Киров. - 1994. - С. 19.

148. Панкратова, Е.М. Конструирование микробных культур на основе си-незеленой водоросли Nostoc paludosum Kütz. / Е.М. Панкратова, Р.Ю. Зяблых, A.A. Калинин, A.JI. Ковина, JI.B. Трефилова // Альгология. Т. 14. - № 4. 2004 а. - С. 445 - 458.

149. Панкратова Е.М. Практические пути использования цианобактерий / Е.М. Панкратова, JI.B. Трефилова, Р.Ю. Зяблых, A.JI. Ковина, И.А. Устюжанин // Материалы научной сессии РАЕ и РАЕН. — Киров. 2004 б. - С. 198 - 202.

150. Перминова, Г.Н. Биомасса и продукция водорослей в тундровых почвах / Г.Н. Перминова // Ботан. журн. 1980. - Т. 65. - С. 859 - 863.

151. Перминова, Г.Н. Водоросли как продуценты тундровых биогеоценозов / Г.Н. Перминова, P.P. Кабиров, В.М. Киприянов // Споровые растения тундровых биогеоценозов. Сыктывкар. - 1982. - С. 81 — 94.

152. Пиневич, A.B. Оксигенная фототрофия: Руководство по эволюционной клеточной биологии / A.B. Пиневич, С.Г. Аверина СПб.: Изд-во С.-Петерб. ун-та. - 2002. - 236 с.

153. Поздняков, В.Н. Почвенные бактерии антагонисты фитопатогенной микрофлоры / В.Н. Поздняков // Биотехнология. - 1998. - № 1. - С. 29 -32.

154. Посыпанов, Г.С. и др. Рекомендации по повышению симбиотической фиксации азота воздуха и белковой продуктивности многолетних бобовых трав в Нечернозёмной зоне / Г.С. Посыпанов. — М.: Агропромиз-дат, 1986.-16 с.

155. Поеыпанов, Г.С. Методы изучения биологической фиксации азота воздуха / Г.С. Посыпанов. М.: Агропромиздат. - 1991. - 300 с.

156. Пошон, Ж. Почвенная микробиология: Пер. с фр / Ж. Пошон, Г. де Баржак. -М.: Иностр. лит-ра. 1960. - 560 с.

157. Проворов, H.A. Генетико-эволюционные основы учения о симбиозе / H.A. Проворов // Журнал Общей Биологии. 2001. - Т. 62 - № 6. - С. 472-495.

158. Розанов, А.Ю. Циано — бактериальные маты — источник материнского вещества нефти: Бактериальная палеонтология / Под ред. А.Ю. Розанова. М.: ПИН РАН. - 2002 а. - С. 114 -115.

159. Розанов, А.Ю. Ископаемые бактерии. Осадкообразование и рудогенез: Бактериальная палеонтология / Под ред. А.Ю.Розанова. М.: ПИН РАН. - 2002 б. - С. 107 - 113.

160. Рубенчик, Л.И. О получении чистых культур некоторых синезеленых водорослей / Л.И. Рубенчик, О.И. Бершова, В.А. Кордюм // Гидробиол. журн.- 1972.-Т. 8. № З.-С. 114-118.

161. Руководство к практическим занятиям по микробиологии 2-е изд. / Ред. Н.С.Егоров. М.: Изд. МГУ. - 1983.-221 с.

162. Рыбальский, Н.Г. Экобиотехнологический потенциал консорциумов микроорганизмов / Н.Г. Рыбальский, С.П. Лях. М.: ВНИИПИ. - 1990. -Т. 1,- 176 с.

163. Садчиков, А.П. Утилизация прижизненных и посмертных выделений Chlorella vulgaris бактериальным сообществом / А.П. Садчиков, A.C. Куликов // Биол. науки. 1992. - № 7. - С. 29-36.

164. Садчиков, А.П. Влияние концентрации белка на протеолитическую активность бактерий (на примере Bacillus subtilis) / А.П. Садчиков, O.A. Френкель // Гидробиол. журн. 1993. - Т. 29. - № 4. - С. 81-85.

165. Садчиков, А.П. Ферментативная и гетеротрофная активность водорослей и бактерий при потреблении меченых аминокислот, дипептидов и белков / А.П. Садчиков, O.A. Френкель, Л.Г. Дмитровский, С.А. Еремин //Гидробиол. журн. 1993. - Т.29. - №3. - С. 71-75.

166. Сакевич, А.И. Экзометаболиты пресноводных водорослей / А.И. Саке-вич. Киев: Наук, думка, 1985. — 199 с.

167. Сакевич, А.И. Выделение и реассимиляция метаболитов водорослей / А.И. Сакевич // Альгология. 1998. - Т 8. - № 2. - С. 178 - 186.

168. Сакевич, А.И. Суточные изменения содержания внеклеточных органических веществ в культуре синезеленых водорослей и в природной воде при «цветении» / А.И. Сакевич, А.Ф. Осипов, В.М. Царенко // Гидробиол. журн. 1980. - XVI. - № 2. - С. 83 - 88.

169. Сакевич, А.И. Взаимосвязь между темпами прироста водорослевой массы и концентрацией внеклеточных органических соединений / А.И. Сакевич, А.Ф. Осипов // Гидробиол. журн. 1983. - Т. 19. - № 5. - С. 71 -74.

170. Саут, Р. Основы альгологии / Р. Саут, А. Уиттик. — М.: Мир. 1990. -597 с.

171. Селях, И.О. Синтез и секреция гормоноподобных соединений у циано-бактерий / И.О. Селях, Л.Р. Семенова // Автотрофные микроорганизмы: Материалы международной научной конференции. М. - 2000. - С. 163 - 164.

172. Сергеев, В.Н. Протерозойская история цианобактерий и их современное состояние / В.Н. Сергеев, JI.M. Герасименко, Г.А. Заварзин // Микробиология. 2002. - Т. 71. - № 6. - С. 725 - 740

173. Сиренко, JI.A. Физиологические основы размножения синезеленых водорослей в водохранилищах / JI.A. Сиренко. — Изд-во Наук. Думка, Киев. 1972. - 203 с.

174. Сиренко, JI.A. Биологически активные вещества водорослей и качество воды / JT.A. Сиренко, В.Н. Козицкая. — Киев: Наук. Думка. 1988. - 256 с.

175. Сиренко, JI.A. Роль Cyanophyta в природе / JI.A. Сиренко, Н.В. Кондратьева // Альгология. 1998. - Т. 8. - № 2. - с. 117 - 131.

176. Смирнов, В.В. Бактерии рода Pseudomonas / В.В. Смирнов, Е.А. Ки-прианова. — Киев: Наукова думка. 1990. — 263 с.

177. Соколов, М.С. Биологическая защита растений в США / М.С. Соколов, Е.В. Литвишко // Защита растений. 1993. - № 11. - С. 18-20.

178. Соколова, Г.Д. Особенности борьбы с токсиногенными грибами рода Fusarium / Г.Д. Соколова, Т.Л. Девяткина // Совр. микология в Р. 1 съезд микологов России: Тезисы докл. — М.'— 2002. — С. 272 - 273.

179. Сорта и гибриды овощных и бахчевых культур России: Каталог / Москва, ФГНУ «Росинформагротех». 2001. - 244 с.

180. Телитченко, М.М. Введение в проблемы биохимической экологии / М.М. Телитченко. М.: Наука. - 1990. - 288 с.

181. Теппер, Е.З. Практикум по микробиологии / Е.З. Теппер, В.К. Шильни-кова, Г.И. Переверзева. -М.: Агропромиздат. 1987. — 238 с.

182. Тихонович, И.А. Повышение эффективности симбиотической азотфик-сации у бобовых / И.А. Тихонович // Доклады РАСХН. 1996. - № 6. -С. 6-9.

183. Третьякова, А.Н. Антифунгальные свойства почвенных водорослей. Методы изучения и практического использования почвенных водорослей.// Тр. / Кировского с.х. ин-та. Киров. - 1972. - С. 171-175.

184. Третьякова, А.Н. О характере взаимоотношений почвенных водорослей с плесневыми грибами / А.Н. Третьякова // Вопросы повышения плодородия почв и урожайность сельскохозяйственных культур Кировской области. Пермь. - 1981. - С. 149 - 155.

185. Туларанов, А. Изучение цитокининподобных веществ у Nostoc mus-corum / А. Туларанов, Ю. Ходжаев, В. Доева // XIII Конф. По споровым раст. Средней Азии и Казахстана, 4-6 сентября 1989 г.: Тез. докл. — Ташкент. 1989. - С. 80 - 81.

186. Тюлин, B.B. Почвы Кировской области / В.В Тюлин. — Киров: Волго-Вятское книжное изд-во. 1976. - 228 с.

187. Умаров, М.М. Ассоциативная азотфиксация / М.М. Умаров. М.: Изд-во МГУ. 1986. - 153 с.

188. Устюжанин, И.А. Реакция новых сортов клевера лугового на инокуляцию клубеньковыми бактериями в условиях Северо-восточного региона Европейской части России. — Дисс. . канд. с.х. наук / И.А. Устюжанин. Киров. - 2003. - 220 с.

189. Ушатинская, Т.Г. Процесс окремнения: Бактериальная палеонтология / Под ред. А.Ю.Розанова. М.: ПИН РАН. - 2002. - С. 66 - 67.

190. Фотосинтез и биопродуктивность: методы определения / Под ред А.Т. Мокроносова и А.Г. Ковалева. М.: Агропромиздат. - 1989. - С. 480.

191. Хеппер, K.M. Внеклеточные полисахариды почвенных бактерий / K.M. Хеппер // Почвенная микробиология. М.: Колос. - 1979. - С. 120 -140.

192. Хитрин, C.B. Превращение полиметил(мета)акрилатов под действием спиртов и аминов и влияние условий взаимодействия на состав сополимеров / C.B. Хитрин, С.И. Багаев, Н.В. Колотилова // ВМС. 1990. -Т. 32 А. - Вып. 9. - С. 1854 - 1860.

193. Цавкелова, Е.А. Микробиота поверхности корней орхидных / Е.А. Цав-келова, Т.А. Чердынцева, Е.С. Лобакова, Г.Л. Коломейцева, А.И. Нетрусов // Микробиология. 2001. - Т. 70. - № 4. - С. 567 - 573.

194. Цавкелова, Е.А. Особенности локализации ассоциативных цианобакте-рий на корнях эпифитных орхидей / Е.А. Цавкелова, Е.С. Лобакова, Г.Л. Коломейцева, Т.А. Чердынцева, А.И. Нетрусов // Микробиология. -2003 а.-Т. 72.-№ 1.-С. 99- 104.

195. Цавкелова, Е.А. Ассоциативные цианобактерии, выделенные с корней эпифитных орхидей / Е.А. Цавкелова, Е.С. Лобакова, Г.Л. Коломейцева, Т.А. Чердынцева, А.И. Нетрусов // Микробиология. 2003 б. - Т.72 -№ 1.-С. 105 - 110.

196. Чан Данг Кэ. Биохимический состав клеток синезеленых водорослей и их выделений в процессе роста, развития и деградации: Автореф. дисс. . канд. биол. наук / Чан Данг Кэ. - М. - 1980. - 20 с.

197. Шапиро, И.А. Адаптация лишайников к экстремальным условиям существования в связи с их азотным обменом: Автореф. дисс. . докт. биол. наук / H.A. Шапиро. JI. - 1991. - 32 с.

198. Шемякин, М.М. Химия антибиотиков / М.М. Шемякин, A.C. Хохлов, М.Н. Колесов. -М.: Изд-во АН СССР. 1961. - 1550 с.

199. Широких, A.A. Атлас микроорганизмов сельскохозяйственных растений / A.A. Широких, И.Г. Широких, Т.К. Шешегова. Киров. - 2004. -48 с.

200. Шлегель, Г. Общая микробиология: Пер. с нем / Г. Шлегель. М.: Мир. - 1987.-567 с.

201. Штина, Э.А. Экология почвенных водорослей. / Э.А. Штина, М.М. Голлербах. -М.: Наука. 1976. — 143 с.

202. Штина Э.А. Почвенные водоросли как компонент биогеоценоза. / Э.А. Штина. М.: Наука. - 1984. - С. 66 - 81.

203. Штина, Э.А. Взаимодействие азотфиксирующих синезеленых водорослей с микроорганизмами спутниками / Э.А. Штина, Е.М. Панкратова // Актуальные проблемы биологии синезеленых водорослей. - М. -1974.-С. 61-78.

204. Штина, Э.А. Коллекция культур микроскопических водорослей Кировского сельскохозяйственного института / Э.А. Штина, Е.М. Панкратова // Культивирование коллекционных штаммов водорослей: Сб. межвуз. науч. тр. Л.: ЛГУ. - 1983. - С. 81 - 86.

205. Эттенборо, Д. Жизнь на Земле / Д. Эттенборо. М.: Мир, 1984. - 174 с.

206. Юнг, Л.А. Бактерии-спутники почвенных синезеленых водорослей и их роль в жизни альго-бактериального ценоза. Почвы и приемы повышения эффективности их использования / Л.А. Юнг // Тр. / Кировского с.-х. ин-та. Пермь. - 1975. - С. 113 - 127.

207. Alexander, V.A. Nitrogen fixation by blue green algae in polar and subpolar regions / V.A. Alexander // Nitrogen fixation by free-living microorganisms / Ed. Stewart W.D.P. - Cambridge: University Press, Cambridge. -1975.-V. 6.-471 p.

208. Alexander, M. Microbial communities and interactions: A prelude / M. Alexander // Manual of environmental microbiology. Wash. (D.C.). 1997. -P. 5 - 13.

209. Al-Maadhidi, J. Effects of the fungi Trichoderma harziamem and Aspergillus flavus on the nitrogen fixation and growth of the alga / J. Al-Maadhidi, E. Henriksson // Oikos. 1980. -N 35. - P. 115-119.

210. Angadi, S.B. Nitrogen fixation and production of extracellular nitrogen by Hapalosiphon confervaceus Borzi and Nostoc microscopicum Carm. ex Born, et Flah. / S.B. Angadi, S.G. Bharati // Beitr. Biol. Pflanz. 1983. - V. 58.-N2.-P. 205-209.

211. Attia, A. The efficiency improvementof mineral of fertilizers used and maize yield by arbuscular mycorrhizal fungi and plant growth-promoting rhizobac-teria / A. Attia // Ann. agr. Sc. 1999. - V. - 44. - N 1. - P. 41 - 53.

212. Baghi, S.N. Algicidal substance production by a novel isolate of Oscillatoria sp. / S.N. Baghi, V.S. Chauhan, A. Palod, // Forum Microbiol. 1989. - V. 12. —N 1 -2.-P. 100.

213. Baghi, S.N. Algicidal properties of a bloom-forming blue-green alga, Oscillatoria sp. / S.N. Baghi, A. Palod, V.S. Chauhan,// J. Basic Microbiol. -1990.-V. 30.-Nl.-P. 21 -29.

214. Baldinger, I. Sand-liquid method for purification of cultures from contaminants /1. Baldinger // Phycologia. 1979. - V. 18. - N 2. - P. 165 - 166.

215. Bazzichelli, G. Structural modifications in the extracellular investment of Nostoc commune Vauch. during the life cycle / G. Bazzichelli, N. Abdela-had, F. Ventola // Journal of ultrastructure research. 1985. - N 2. - P. 174 -181.

216. Bell, W.H. The Phycosphere revisited: laboratory studies of the relationship between heterothrophic bacteria and microalgae / W.H. Bell //11 International phycological congress. Copenhagen. 1985. - P. 10.

217. Belnap, J. Nitrogen fixation in biological soil crusts from southeast Utah, USA / J. Belnap // Biology and fertility of soil, 2002. V. 35. - № 2. - P. 128-135.

218. Belnap, J. Soil microstructure in soils of the Colorado plateau: the role of the cyanobacterium Microcoleus vaginatus / J. Belnap, J. Gardner // Great Basil Natur. 1993. - V. 53. -N 1. - P. 40-47.

219. Bienvenida, R.R. Cultural studies on blue-green algae. I. Nostoc linckia (Roth) Bornet. / R.R. Bienvenida, P.A. Macario // Philipp. J. Sci. 1986. -V. 115.-N3.-P. 199-211.

220. Bergey's Manual of Determination Bacteriology. 9th Edition. Baltimore: Williams and Wilkins. 1994. - 787 p.

221. Bjalfe, G. Nitrogen fixation in culture of algae and other microorganisms / G Bjalfe // Physiol. Plant. 1962. - V. 15. - P. 122 - 129.

222. Bothe, H. Hydrogen production by algae / H. Bothe // Experientia. — 1982. — V. 32.-N l.-P. 59-64.

223. Bowen, J.D. Simulating bacterial clustering around phytoplankton cells in a turbulent ocean / J.D. Bowen, K.D. Stolzenbach, S.W. Chisholm // Limnol. and Oceanogr. 1993. - V. 38.-N 1. - P. 115-118.

224. Bunt, J.S. Isolation of bacteria free cultures from hormogone - producting blue-green algae / J.S. Bunt // Natura. - 1961. - V. 192. - N 4609. - P. 169 -205.

225. Caldwell, D.E. Bacteriological characterization of phytoplankton cell surfaces / D.E. Caldwell, S.G. Caldwell // Environment, biogeochemical and Geomicrobiol. Ann. Arbor. - Mich. - 1978. -V. 1. - P. 101 - 107.

226. Cameron, R.E. Cold desert characteristics and problems relevant to other arid lands / R.E. Cameron // Arid lands and perspective. Tuscon (Arizona). -1969.-P. 169-205.

227. Cameron, R.E. The role of algae in tundra soils / R.E. Cameron, A.D. Knox, F.A. Morelli // Vegetation and Production Ecology of an Alaska Arctic Tundra. New York. - 1978. - P. 207 - 227.

228. Cannel, R.J.P. Results of a largescale screening programme to defect anti-bacreria activity from freshwater algae / R.J.P. Cannel, A.M. Owcoanka, J.M. Walker //Brit. Phycol. J. 1988. -V. 23. -N l.-P. 41 -44.

229. Carr, N.G. The Biology of Cyanobacteria / N.G. Carr, B.H. Whitton. // Berkely: Univ. Cal. Press. 1982. - 688 p.

230. Chauhan, K.L. Cytokinin-like substances in blue-green algae / K.L. Chau-han, A.B. Gupta // Curr. Sci. 1984. - V. 53. - N 6. - P. 324 - 325.

231. Chrost, R.J. Extracellular release of organic products and growth of bacteria in Anabaena cylindrica (blue-green alga) / R.J. Chrost, D. Brezeska // Acta Microbiol. Pol. 1978. - V. 27. - N 3. - P. 287 - 295.

232. Covency, M.F. Bacterial metabolism of algal extracellular carbon / M.F. Covency, R.G. Wetzel // Hydrobiologia. 1989. - V 173. - N 2. - P. 141149.

233. Cupac, S. Chemical composition and morphological structure of the mucilaginous sheath of the cyanobacterium Nostoc D / S. Cupac, M. Gantar // Biomed. Lett. 1992. - V.47.-N 186.-P. 133- 138.

234. Dryanovska, O.A. Combined cultivation of Rhizobium leguminosarum with Chlamydomonas reinhardi / O.A. Dryanovska, N.S. Zakova // Докл. болг. АН. 1985.-V. 38-№ 10.-P. 1383 - 1385.

235. Enkehard, T.A proposal for adoption of the term "mass" and some of its derivatives in biological papers / T.A Enkehard // Pedobiologia. 1986 - 39. — N4.-P. 303-306.

236. Erdmann, N. 14СОг Fixation Pattern of cyanobacteria / N. Erdmann, U. Schiewer // Biochem. Physiol. Pflanzen. 1985. - V. 180. - P. 515 - 532.

237. Fitzsimons, A.G. The isolation and growth of axenic culture of planctonic blue-green algae / A.G. Fitzsimons, R.V. Smith // Brit. Phycol. J. 1984. -V. 19.-N2.-P. 157-162.

238. Flores, E. Production by filamentous, nitrogen-fixing cyanobacteri, of a bac-teriocin and of other antibiotics that kill related strains / E. Flores, C.P. Wolk //Arch. Microbiol. 1986.-V. 145.-N 3.-P. 215-219.

239. Fogg, G.E. The comparative physiology and biochemistry of the blue-green algae / G.E. Fogg // Bact. Rev. 1956. - V. 20. - N 3. - P. 148 - 165.

240. Fogg, G.E. In situ determinations of biological nitrogen fixation in Antarctica / G.E. Fogg, W.D.P. Stewart // Brit. Antarct. Surv. Bui. 1968. -N15. -P. 39-46.

241. Gallon, J.P. N2- fixation in photoautotrophs adaptation to a specialized way of life / J.P. Gallon // Third European Nitrogen Fixation Conference. Sept. 20-24, 1998 - De Blije Werelt Lunteren - The Netherlands. - L.39. - S.10.

242. Gantar, M. Mechanical damage of roots provides enhanced colonization of the wheat endorhizosphere by the dinitrogen-fixing cyanobacterium Nostoc sp. strain 2S9B / M. Gantar // Biology and fertility of soils. 2000 - V.32. -N3.-P. 250-255.

243. Geitler, L. Einige kritische Bemerkungen zy neuen zusammen fassenden Dorstellungen der Morphologie und Systematic der Cyanophyceen / L. Geitler // Plant. Syst. And Evol. 1979. - V. 132. - N. 1-2. - P. 153 - 160.

244. Gerard, V.A. Nitrogen-fixation by cyanobacteria associated with Codium fragile (Chlorophyta): environmental effects and transfer of fixed nitrogen / V.A. Gerard, S.E. Dunham, G. Rosenberg // Marine Biology. 1990. - V. 105.-P. 1-8.

245. Gyurian, I. Photosynthesis, nitrogen fixation and enzyme activities in Chla-mydomonas Azotobacter symbiosis /1. Gyurian, N.H. Nghia, G. et al. Foth // Biochem. Physiol. Pflanzen. - 1986. - 13 d. 181. -N 3. - S. 147 - 153.

246. Glagoleva, O.V. Ammonium unfluence of nitrogenase activity of rhizos-phere nitrogen fixing bacteria in pure and mixed cultures / O.V. Glagoleva, A.K. Zlotnikov, M.M. Umarov. 1997. - P. 226 - 231.

247. Gleason, F.K. Site action of the natural algicide, cyanobacterin, in the blue-green alga, Synechococcus sp. / F.K. Gleason, J.L. Paulson // Arch. Microbiol. 1984. - V. 138. -N 3. - P. 273 - 277.

248. Gleason, F.K. Effect of the natural algicide, cyanobacterin, on a herbicide-resistant mutant of Anacystis nidylans R2 / F.K. Gleason, D.E. Case, K.D. Sipprell, T.S. Magnuson//Plant Sei. 1986. - V. 46. -N 1. -P. 5-10.

249. Granhall, U. Nitrogenase activity in relation to intracellular organisms in Sphagnum mosses / U. Granhall, A.V. Hofsten // Physiol. Plant. 1976. - V. 36.-N l.-P. 88-94.

250. Grobbellaar, N. The identification of the coralloid root endophytes of the southern African cycads and ability of the isolated to fix dinitrigen / N. Grobbellaar, W.E. Scott, W. Hattingh, J. Marshall // S. Afr. J. Bot. 1987. -V. 53.-P. Ill - 118.

251. Grover, I.S. Nitrogen fixation by Gloeocapsa / I.S. Grover, Sanil. Puri // Phykos.- 1979.-V. 18.-N 1 -2.-P. 125- 127.

252. Handbook of Symbiotic Cyanobacteria / Ed. Rai A.N., Boca Raton, Florida: CRC Press. 1990.-253 p.

253. Hardy, R.W.F. Applications of the acetilen-ethylene assay for measurement of nitrogen fixation / R.W.F. Hardy, R.C. Burns, R.D. Holsten // Soil. Biol. Biochem. 1973. - № 5. - P. 47 - 81.

254. Heinbokel, J.F. Occurrence of Richelia intracellularis (Cyanophyta) within the diatoms Hemiaulus haukii and H. membranaceus off Hawaii / J.F. Heinbokel // J. Phycol. 1986. - V. 22. - N 3. - P. 399 - 403.

255. Herbst, V. Metabolic coupling between the alga Oscillatoria redekei and accompanying bacteria / V. Herbst, J. Overbeer // Naturwissenschaften. -1978. V. 65. - N 11. - S. 598 - 599.

256. Houchins, J.P. The physiology and biochemistry of hydrogen metabolism in cyanobacteria / J.P. Houchins // Biochim. et Biophys. Acta: Rev. Bioenerg. — 1984. V.768 (BR 12). - N 3 - 4. - P. 227 - 255.

257. Jakob, H. Compatibilités, antagonisms et antibioses entre queques algues du sol / H. Jakob // Rev. Gggen. Bot. 1961. -V"! 68. - P. 5 — 72.

258. James, E.K. Tolerance to anoxia and post-anoxia in the Gunnera-Nostocthsymbiosis / E.K. James, R.M.M. Grawford, W.B. Silvester //10 International congress on Nitrogen Fixation. Saint-Petersburg, Russia. - 1995. -Post. 403.

259. Karagatzides, J.D. Nitrogen fixation in the high arctic tundra at Sarcpa Lake, Northwest Territories / J.D. Karagatzides, M.C. Lewis, H.M. Schulman // Can. J. Bot. 1985. - V. 63. - N 5. - P 974 - 979.

260. Kellar, P.E. A comparative study of nitrogen fixation by the Anabaena — Azolla symbiosis and freeOliving populations of Anabaena spp. in Lake Ngahewa, New Zealand / P.E. Kellar, C.R. Goldman, // Oecologia. 1979. -V. 43.-N3.-P. 269-281.

261. Koranyi, P. Characterization ofon artificial nitrogen fixing alga - bacterium endocytobiosis / P. Koranyi, I. Gyurian, P. et al. Stefanovits // Symbiosis. - 1990.-V. 8.-N2.-P. 175-187.

262. Krüger, G.H.J. The effect of physico-chemical factors on growth relevant to the mass culture of axenic Mycrocystis / G.H.J. Krüger, J.M. Eloff // Water Environ, Algal Toxins and Health. New-York, London. 1981. - P. 193 -229.

263. Kumar, D.B.S. Fusarial wilt suppression and crop improvement through two rhizobacterial strains in chick pea growing in soils infested with Fusarium oxysporum f. sp. ciceris / D.B.S. Kumar // Biol. Fertil. Soils. 1999. - V. 29. — N 1. — P. 87-91.

264. Laloraya, V.K., Mitra, A.K. // Current Sei. / V.K. Laloraya, A.K. Mitra. -1964. 33. -N 20. - P. 33 - 35.

265. Laloraya V.K., Mitra A.K. // Taxonomy and biology of blue-green algae, Madras / V.K. Laloraya, A.K. Mitra. 1970. - P. 357 - 385.

266. Lambert, R.L. Nitrogen fixing moss associations in the subalpine zone of the white Mountains / R.L. Lambert, W.A. Reiners // New Hampshire. Arct. a. Alp. Res. - 1979. - V. 11. - N 3. - P. 325 - 333.

267. Lewin, R. Molecular clocks run out of time / R. Lewin // New sei. 1990. — V. 125.-N. 1703.-P. 38-41.

268. Liaimer, A. Isolation of host plant induced cDNAs from Nostoc sp. strain PCC 9229 forming symbiosis with the angiosperm Gunnera spp. / A. Liaimer, A. Matveyev, B. Bergman // Symbiosis, 2001. -V. 31. P. 293 - 307.

269. Madan, M. Some biologically active extracellular products of blue-green algae / M. Madan, K.G. Mukerji // Phykos. 1979. - V. 18. - N 1 - 2. - P. 73 -82.

270. Marshall, J. Comparative morphological and physiological study on cyano-bionts of Encephalartos trasvenosus / J. Marshall, T.C. Huang, T.J. Chow // S. Afr. J. Bot. 1989. - V. 55. - P. 574 - 580.

271. Martin, W. Gene transfer to the nucleus and the evolution of chloroplasts / W. Martin, B. Stoebe, V. Goremykin, S. Hansmann, M. Hasegawa, K.V. Kowallik // Natura (London, England), 1998. V. 393. - N 6681. - P. 162 -165.

272. Meffert, M.E. Net release of nitrogenous compounds by axenic and bacteria-containing cultures of Oscillatoria redekei (Cyanophyta) / M.E. Meffert, H. Zimmermann-Telschow // Arch. Hydrobiol. 1979. - V. 87. -N 2. - P. 125 -138.

273. Milbank, I.N. Nitrogen metabolism in lichen V. The forms of nitrogen re-leasedby the blue-green phycobiont in Peltigera spp. / I.N. Milbank // New Phytol.- 1974 a. -V. 73. P. 1171 - 1181.

274. Milbank, I.N. Associations with blue-green algae / I.N. Milbank // Biol. Nitrogen Fixation. Amsterdam e.a. 1974 b. - P. 238 - 264.

275. Mitchell, J.G. Microzones surrounding phytoplankton from the basis for a stratified marine microbiol ecosystem / J.G. Mitchell, A. Okubo, J. A. Fuhrman//Nature. 1985. -V. 316.-N 6023. - P. 58-59.

276. Miiller, U. Interaction of species in an Anabaena flos-aquae association from the Pludsee (East-Holstein, Federal Republic of Germany) / U. Miiller, P.Y. Sengbusch // Oecologia. 1983. - V. 58. - N 2. - P. 215 - 219.

277. Nalewaiko, С. Photosynthesis and excretion in varios planktonic algae / C. Nalewaiko // Limnol. and Oceanogr. ~ 1966. V. 11. -N 1. - P. 1 - 10.

278. Nath, B.S. Algicidal properties a bloom-forming blue-green alga Oscillato-ria sp. / B.S. Nath P. Archna, C.V. Singh // J. Basic Microbiol. 1990. - V. 30.-N 1.-P. 31-39.

279. Nobles, D.R. Cellulose in cyanobacteria. Origin of vascular plant cellulose synthase / D.R. Nobles, D.K. Romanovicz R.M. Jr. Brown // Plant physiology (Lancaster, Pa.). 2001. - V. 127. - N 2. - P. 529 - 542.

280. Nowak, W. Reisolierungsversuche von Knollchenbakterien (Rhizobium sp.) aus Boden. Zbl. Bakteriol., Parasitenkunde, Infektionskrankh. und Hyg., Abt. 2 / W. Nowak, A. Netzsch-Lehner. - 1965. - V. 119. - N 6. - P. 570 -578.

281. Paerl, H.W. In sity H2-production and utilization by natural populations of N2 fixing blue-green algae / H.W. Paerl // Can. J. Bot. - 1982. - V. 60. - N 12.-P. 2542-2546.

282. Paerl, H.W. Transfer of N2 and CO? fixation products from Anabaena oscil-lariodes to associated bacteria during inorganic carbon sufficiency and deficiency / H.W. Paerl // J. Phycol. 1984. - V. 20. - N 4. - P. 600 - 608.

283. Paerl, H.W. Microzone formation: its role in the enhancement of aquatic N2 fixation / H.W. Paerl // Limnol. and Oceanogr. 1985. - V. 30. - N 6. - P. 1246- 1252.

284. Paerl, H.W. Significance of bacterial — Anabaena (Cyanophyceae) associations with respect to N2-fixation in freshwater / H.W. Paerl, P.E. Kellar // J. Phycol. 1978. - V.14. - P. 254 - 260.

285. Pankow, H. Über endophytische Algen in bzw. auf der Gallerthülle von Microcystis Kolonien / H. Pankow // Arch. Protistenk. - 1986. - V. 132. -N4.-P. 377-380.

286. Peters, G.A. Blue-green algae and algal associations / G.A. Peters // Bioscience. 1978. - V.28. - N 9. - P. 580 - 585".

287. Peters, G.A. The Azolla-Anabaena symbiosis: basis biology / G.A. Peters, J.C. Meeks // Ann. Rev. PI. Physiol PI. Mol. Biol. 1989. - V. 40. - P. 193 -210.

288. Puri, Sunil. Nitrogen fixation and release of extracellular nitrogen by Anabaena G. 102 / Sunil Puri, I.S. Grover // Phykos. 1981. - V. 20. - N 1 - 2. -P. 99-101.

289. Rai, A.N. Cyanobacterium plant symbioses / A.N. Rai, E. Söderbäck, B. Bergman // New Phytol. - 2000. - V. 147. - P. 449 - 481.

290. Rajalakshmi, N. Axenisation of the nitrogen-fixing unicellular cyanobacterium Gloeocapsa (Gloeothece) sp. / N. Rajalakshmi // Proc. Indian natn. Sei. Acad. 1985. - N 2. - P. 254 - 258.

291. Rao, D.L. The effect of surface growth of blue-green algae and bryophytes on some microbiological, biochemical and physical soil properties / D.L. Rao, R.G. Burns // Biol. Fertil. Soils. 1990 a. - V. 9. -N 3. - P. 239 - 244.

292. Rao, D.L. Use blue-green algae and bryophyte biomass as a source of nitrogen for oil-seed rape / D.L. Rao, R.G. Burns // Biol. Fertil. Soils. 1990 b. -V. 10.-N l.-P. 60-64.

293. Rasmussen, U. Yhe Gunnera Nostoc symbiosis / U. Rasmussen, C. Jotlihansson, B. Bergman // 10 International congress of Nitrogen Fixation. -Saint-Petrsburg, Russia. 1995. - Post. 406.

294. Reddy, P.M. Nitrogen fixation by moss-alga; association in grassland / P.M. Reddy, P.A. Roger // Soil Biol, and Biochem. 1981. - V. 13. - N 6. - P. 537-538.

295. Reisser, W. Endosymbiotic cyanobacteria and cyanellae / W. Reisser // Cell Interact. Berlin e.a. 1984. - P. 91 - 112.

296. Rinaldi, L.M.R. Ricerche sulla simbiosi azotofissatrice di Cycas revolute / L.M.R. Rinaldi, M.C. Margheri, R. Materassi // Ann. microbial, ed enzimol. 1988. -V. 38. -N2. - P. 231 -237.

297. Rippka, R. Genetic assighments strain histories and properties of pure cultures of cyanobacteria / R. Rippka, J. Deruelles, J.B. Waterbury, M. Herd-man, R.Y. Stanier // J. Gen. Microbiol. 1979. - V. 111. - N 1. - P. 1 - 61.

298. Rothaup, K.O. Stimulation of phosphorus-limited phytoplankton by bacte-riovorous flagellates in laboratory experiment / K.O. Rothaup // Limnol. and Oceanogr. 1992. - V. 37. - N 4. - P. 750 - 759.

299. Schopf, J.W. The proterozoic biosphaere: a multidisciplinary study. Cambridge: Cambridge Univ.Press. / J.W. Schopf, C. Klein. 1992. - 1348 p.

300. Schroth, M.N. Disease Suppressive soil and root colonizing bacteria / M.N. Schroth, J.G. Hancock// Science. - 1982. - V. 216. -P. 1376 - 1381.

301. Shelat, I.A. Screening of Chlorophycae for antifungal activity / I.A. Shelat // Geobios.- 1980.-V. 7.-N4.-P. 153-155.

302. Shi, Ding-Ji. The Azolla Anabaena association: historical perspective, symbiosis and energy metabolism / Ding-Ji Shi, O. Hall David // Bot. Rev. — 1988. - V. 54. -N 4. - P. 353 - 386.

303. Sieminska, J. Pozycja sinic (Cyanophyta) w swiecie organizmow / J. Sie-minska, // Kosmos (PPL). 1979. - V. 28. - N 4. - P. 425 - 430.

304. Silvester, W.B. / W.B. Silvester, D.R. Smith // Nature. 1969. - V. 224. - P. 1231.

305. Silvester, W.B. The Gunnera-Nostoc Symbiosis: A Model of Nutritional interdependence / W.B. Silvester // Second International Congress on Symbiosis, 1997. V. 53. - P. 768 - 783.

306. Sindhu, S.S. Antagonistic effect of Pseudomonas spp. on pathogenic fungi and enhancement of growth of green gram (Vigna radiata) /S.S. Sindhu, S.K. Gupta, K.R. Dadarwal // Biol. Fertil. Soils. 1999. - V. 29. - N 1. - P. 62-68.

307. Smith, V.R. Bryophyte-cyanobacteria associations on sub-Antarctic Marion Island: are they important in nitrogen fixation? / V.R. Smith, P.J. Ashton // S. Afr. J. Antarct. Res. 1981. - N 10 - 11. - P. 24 - 26.

308. Söderbäck, E. Developmental patterns related to nitrogen fixation the Nos-toc-Gunnera Magellanica symbioses / E. Söderbäck, B. Bergman // Physiol. Plant. 1990. - V. 79. - N 2. - Pt 2. - P. 98.

309. Stal, L.J. Isolation and characterization of Cyanobacteria from a marine microbial mat / L.J. Stal, W.E. Krumbein // Bot. Mar. 1985. - V. 28. - P. 351 -365.

310. Stanier, R.W. The concept of bacterium / R.W. Stanier, C.B. van Niel // Arch. Microbiol. 1962. - V. 42. - P. 17 - 35.

311. Stanier, R.W. Proposal to place the nomenclature of the Cyanobacteria (blue-green algae) under the rules of the International Code of Nomenclature of Bacteria / R.W. Stanier, W.R. Sistrom, T.A. Hansen // Int. J. Syst. Bact. -1978.-V. 28.-P. 335-336.

312. Straa, V. Ökologie ist. wenn zwei sich finden / V. Straa // Natur. (BRD). —1989. N 12. - P. 74 — 76.

313. Straskrabovä, Coupling of bacteria with phytoplankton during spring in di-mictic reservoirs / V. Straskrabovä // 5-th Int. Symp. Microb. Ecol. Kyoto.1990.-P. 76.

314. Stewart, W. D.P. Some aspects of structure and function in N2-fizing Cyanobacteria / W. Stewart // Ann. and Rev. Microbiol. 1980. - V. 34. - P. 497-536.

315. Stewart, W.D. Cytophaga that kills or lyses algae / W.D. Stewart, R.M. Brown // Science. 1969. - V. 164. - P. 1523-1524.

316. Stewart, W. D.P. The cyanophyte-hepatic symbiosis / W. D.P Stewart, G.A. Rodgers // Nitrogen fixation and the interchange of nitrogen and carbon. -New Ohytol. 1977. - V. 78. - N 2. - P. 459 - 471.

317. Sutherland, I.W. A natural terrestrial biofilm / I.W. Sutherland // Journal of industrial microbiology & biotechnology, 1996. V. 17. - N 3 - 4. - P. 281 -283.

318. Techan, I.T. Use of antibiotics to purity blue-green algae / I.T. Techan, J. Gould // Nature. 1961. - V. 192. -N 4809. - P. 356 - 365.

319. Thomas, S.P. Ammonium excretion by an a-methionine-Da-sulfoximine-resistant mutant of the rice field cyanobacteriiim Anabaena siamensis / S.P. Thomas, A. Laritsky, S. Boussiba // Appl. and Environ. Microbiol. 1990. -V. 56. - N 11. - P. 3499 - 3504.

320. Tison, D. L. Dissolvedorganic matter utilization and oxygen uptake in algal-bacterial microcosvs / D. L. Tison, A.I. Lingg // Can. J. Microbiol. 1979. -V. 25.-N l.-P. 1315-1320.

321. Tozum, S.R.D. The effects of methyl viologen on Gloeocapsa sp. LB 795 and their relationship to the inhibition of acethylene reduction (nitrogen fixation) by oxygen / S.R.D. Tozum, I.R. Gallon // J. Gen. Microbiol. 1979. -V. 111. —N2. — P. 313-326.

322. Vaidya, B.S. Observations on unusual akinete formation in Anabaena azol-lae in isolation culture / B.S. Vaidya, Johny Thomas // Proc. Indian Acad. Sci. Plant. Sci. 1989. - V. 99. - N 5. - P. 467 - 477.

323. Vance, B.D. // J. Phycol. 1966. - N 3. - P. 258 - 236.

324. Vidaver, A.K. Prospects for control of phytopathogenic bacteria by bacteriophages and bacteriocins / A.K. Vidaver // Ann. Rev. Microbiol. 1976. — V. 14.-P. 451 -465.

325. Vigstad, H. Epiphytic nitrogen-fixing cyanobacteria in arctic vegetation / H. Vigstad, R. Myklebust, A. Endal, B. Solhein // 10-th International Congress on Nitrogen Fixation: Fundamentals and Applications. Kluwer Acad. Publ. - 1995.-P. 781.

326. Viner, A. Cyanobacteria in New Zeland inland waters: experimental studies / A. Viner // N.Z.J. Mar. and Freshwater Res. 1987. - V. 21. - N 3. - P. 503-507.

327. Whyte, L.G. Method for isolation cyanobacteria-lysing streptomycetes from soil I L.G. Whyte, A. Maule, D.R. Cullimore // J. Appl. Bacteriol. 1985. -V. 58. -N2.-P. 195- 197.

328. Woese, C.R. Towards a Natural System of Organisms: Proposal for the Domains Arhaea, Bacteria and Eucarya / C.R. Woese, O. Kandler, M.L. Wheeliss // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1990. - Vol.87. - P. 4576 - 4579.

329. World Catalogue of Algae // Publish. World Data Center on Microorganisms (WDC) of the World Federation for Culture Collections. RIKEN, Saitama, Japan. - 1987. - 146 p.

330. Zimmerman, W.J. Enzymatic, lectin and morphological characterization and classification of presumptive cyanobionts from Azolla Lam. / W.J. Zimmerman, B.H. Rosen, T.A. Lumpkin // New Phytol. 1989. - V. 113. - N 4. -P. 497-503.

Информация о работе

Зяблых, Роман Юрьевич
кандидата биологических наук
Киров, 2008
ВАК 03.00.07

Диссертация

Консорциумы микроорганизмов на основе почвенных азотфиксирующих цианобактерий и их агробиотехнологический потенциал - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы