Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

Клинико-патогенетические особенности векторных инфекций у собак в пренатальный период

ВАК РФ 06.02.02, Кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов

Автореферат диссертации по теме "Клинико-патогенетические особенности векторных инфекций у собак в пренатальный период"

Работа выполнена в Государственном научном учреждении СевероКавказский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт Российской академии сельскохозяйственных наук

Научный руководитель:

Официальные оппоненты:

Ведущая организация:

Бутенков Александр Иванович

доктор ветеринарных наук

Тимченко Людмила Дмитриевна доктор ветеринарных наук, профессор, заведующая проблемной научно-исследовательской

лабораторией экспериментальной

иммуноморфологии, иммунопатологии и иммунобиотехнологии НИИ прикладной биотехнологии института живых систем при ФБОУ ВПО «Северо-Кавказский федеральный университет» (СКФУ)

Дерезина Татьяна Николаевна, доктор ветеринарных наук, профессор кафедры внутренних незаразных болезней,

патофизиологии, клинической диагностики, фармакологии и токсикологии ФГБОУ ВПО «Донской ГАУ»

ФГБОУ ВПО «Волгоградский государственный аграрный университет»

Защита состоится 25 декабря 2013 года в 12 часов на заседании диссертационного совета Д, 006.106.01 при Государственном научном учреждении Северо-Кавказский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт Российской академии сельскохозяйственных наук.

346421, Ростовская область, г. Новочеркасск, Ростовское шоссе, 0

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке: ГНУ СевероКавказский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт Россельхозакадемии - 346421, Ростовская область, г. Новочеркасск, Ростовское шоссе, 0.

Автореферат разослан ¿2 ноября 2013 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, д.б.н. профессор

.М. Ермаков

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Векторные инфекции собак, передающиеся иксодовыми клещами, встречаются во многих регионах России (S.R. Telford Ш, 2002; Э.И. Коренберг, 2002). Ростовская область является активным природным очагом риккетсиозов и бабезиоза собак (М.А. Раевская, 2011). Однако распространенность этих нозологий среди собак разных половозрастных групп, многолетняя и сезонная динамика заболеваемости, а также их клиническая характеристика и лабораторная диагностика остаются недостаточно изученными.

В течение последних 10-15 лет на территории многих стран Европы, а также в России, были зарегистрированы новые природно-очаговые инфекционные заболевания, ассоциированные с иксодовыми клещами -эрлихиоз и анаплазмоз собак (J.S. Dumler, 2001; Ogden, 2002; B.B. Малеев, 2004; A.A. Нафеев, 2007). Наличие их в Ростовской области подтверждено работами отечественных ученых в 2010 году (С.Н. Карташов, 2010, М.А. Раевская, 2011). В связи с чем, представляется актуальным изучить эрлихиоз, анаплазмоз собак и векторные микст-инфекции с их участием в структуре природно-очаговых трансмиссивных заболеваний популяции собак, выяснить особенности их клинического течения, динамику патогенетических изменений и лабораторной диагностики.

Степень разработанности проблемы. Вопросам диагностики и терапии векторных инфекций у собак посвящены работы ряда авторов (С.Н. Карташов, 2010, М.А. Раевская, 2011), однако, представленные данные, отражающие спектр клинико-патогенетических изменений при векторных микст-инфекциях у собак в пренатальном периоде скудны. Это не позволяет выделить диагностические параметры подтверждения диагноза, установления тяжести течения заболевания и назначения адекватной терапии, что и послужило целью для нашего исследования.

Цель работы. Изучить структуру векторных инфекций популяции собак в Ростовской области, выяснить клинико-патогенетические особенности векторных инфекций у собак в разном физиологическом состоянии, разработать способ диагностики, оценки тяжести и терапию собак с данной патологией.

Достижение намеченной цели осуществлялось решением следующих

задач:

1. выяснить структуру векторных инфекций в популяции собак Ростовской области, уточнить инцидентность векторных инфекций у собак в пренатальный период;

2. разработать диагностический набор для выявления векторных микст-инфекций у собак;

3. выяснить клинико-патогенетические особенности микст-инфекций у собак с учетом физиологического состояния животного;

4. выяснить степени тяжести векторных инфекций в зависимости от физиологического состояния животного;

5. на основании полученных данных разработать схему терапии собак больных векторными микст-инфекциями в разном физиологическом состоянии.

Научная новизна. Наши исследования позволили дополнить этиологическую структуру природно-очаговых векторных инфекций у собак в Ростовской области. Она представлена бабезиозами и новыми для собак в Ростовской области эрлихиозом и анаплазмозом, выявлены различные варианты микст-инфекций более чем у 30% собак. Уточнены клинические особенности эрлихноза, анаплазмоза и различных вариантов векторных микст-инфекций у собак в пренатальном периоде. Заболевание протекает преимущественно в виде гемморагического и гепатопривного синдромов.

Впервые представлена клинико-лабораторная характеристика векторных йикст-инфекций (эрлихиоз, анаплазмоз и бабезиоз), изучены клинико-лабораторные изменения при микст-инфекциях у собак в пренатальный период. Определены критерии тяжелого течения заболевания и выздоровления животных.

Теоретическая и практическая значимость. Разработана тактика клинико-лабораторной диагностики всего спектра векторных инфекций у собак. Создан алгоритм последовательности дифференциально-диагностических действий при векторных инфекциях у собак, что позволит ветеринарному врачу, аргументировано поставить диагноз на эрлихиоз, анаплазмоз, бабезиоз и их сочетанное течение. Предложены диагностические параметры купирования инфекционного процесса векторных микст-инфекций у собак в разном физиологическом состоянии. Разработаны патогенетически обоснованные схемы комплексной терапии собак, больных векторными микст-инфекциями.

Степень достоверности и апробация работы. Достоверность полученных данных обоснована значительным объемом исследований, использованием современных методов, в том числе вариационной статистики по программе Statistica for Windows.

Основные результаты диссертационной работы доложены и одобрены на заседаниях ученого совета ГНУ СКЗНИВИ; на IV Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы биологии, нанотехнологий и медицины», г. Ростов-на-Дону, 2011; Всероссийской научно-практической конференции «Актуальные аспекты паразитарных заболеваний в современный период» г. Ростов-на-Дону, 2011; Всероссийской научно-практической конференции «Научное обеспечение инновационного развития отечественного животноводства» г. Новочеркасск, 2011; Международной научно-практической конференции «Пути интенсификации производства и переработки продуктов животноводства», г. Черкесск, 2011; Всероссийской научно-практической конференции «Научные проблемы и современные тенденции развития отечественного животноводства в условиях ВТО» г. Новочеркасск, 2013.

Личный вклад автора. Автору принадлежит ведущая роль в выборе направления диссертационного исследования. Планирование работы, поиск и анализ литературы по теме диссертации, подбор животных для исследования, клиническое обследование больных животных, формирование базы данных, статистическая обработка, обобщение и анализ полученных результатов, формулировка выводов, написание статей и диссертации выполнены лично

автором. Методы исследования (ПЦР диагностика, биохимические исследования) освоены диссертантом и проведены им самостоятельно. Вклад автора является определяющим и заключается в непосредственном участии на всех этапах исследования.

Реализация результатов исследований. Проведено внедрение результатов исследования в практическую работу ветеринарных клиник Ростовской области, внедрен алгоритм диагностического поиска и распознавания векторных микст-инфекций у собак, внедрены новые схемы лечения векторных инфекций. В работу ГБУ РО Ростоблветлаборатории в отделе донозологической и клинической диагностики, лаборатории функциональной диагностики болезней животных ГНУ СКЗНИВИ Россельхозакадемии, внедрены тест-системы для ПЦР диагностики векторных инфекций у собак.

Практические предложения реализуются в учебном процессе при чтении лекций и проведении лабораторно-практических занятий на кафедре внутренних незаразных болезней и патофизиологии Дон ГАУ по курсу «Болезни мелких домашних животных».

Публикации. По теме диссертации издано 10 работ, из них 4 в журналах, рекомендованных ВАК.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 119 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, результатов собственных исследований, заключения, выводов и указателя литературы, включающего 83 отечественных и 109 зарубежных источника. Диссертация иллюстрирована 21 таблицей, 10 рисунками.

Основные положения, выносимые на защиту. 1. Этиологическая структура векторных инфекций у собак в Ростовской области. 2. Клинико-диагностический алгоритм векторных инфекций у собак, основные клининико-лабораторные критерии тяжести течения заболевания у собак в зависимости от состава микст-инфекции и физиологического состояния животного. 3. Основные терапевтические схемы при векторных микст-инфекциях у собак.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 2.1. Материалы, методы и объемы исследований

Исследование проводилось на базе ГНУ СКЗНИВИ Россельхозакадемии в лаборатории функциональной диагностики болезней животных в 2010-2013 годах.

Материалом для оценки эпизоотической ситуации по векторным инфекциям собак служили результаты собственных лабораторных исследований проб крови собак, данные патологоанатомического вскрытия, а также отчетная документация Управления ветеринарии Ростовской области.

Стандартное обследование, которое проводили всем животным, включало сбор информации о содержании животного, анамнеза жизни и болезни. Ретроспективно на основании ветеринарной документации, оценивалось количество поступлений пациента в ветеринарные клиники, длительность и тяжесть болезни. Проводился физикальный осмотр,

стандартные лабораторные исследования (гематологические и биохимические), ЭКГ, ПЦР диагностика, рентгенография органов грудной клетки, УЗИ органов брюшной полости при дифференциальной диагностике неинфекционных заболеваний.

Для диагностики векторных инфекций использовали разработанный нами диагностический набор для обнаружения эрлихий, анаплазм и бабезий методом ПЦР. Дифференциальную диагностику между эрлихиозом, анаплазмозом, бабезиозом, лептоспирозом и аденовирусным гепатитом проводили в ГБУ Ростоблветлаборатория путем постановки реакции микроаглютинации и методом ПЦР.

Оценку тяжести болезни проводили по клиническим симптомам, характеризующим общее состояние животного. Температуру тела измеряли ректально термометром. Пульс прощупывали у собак на внутренней стороне бедра на бедренной артерии, оценивали по частоте и качеству. Определяли частоту сердечных сокращений по пульсовой волне при соблюдении всех правил данного исследования.

Морфологический анализ крови включал определение общего количества лейкоцитов и отдельных видов, выраженное в процентах (лейкограмма), эритроцитов, тромбоцитов, количество гемоглобина, гематокритную величину, средний объем эритроцита (MCV), среднее содержание гемоглобина в эритроците (МСН) и среднюю концентрацию гемоглобина в эритроците (МСНС). Кровь исследовали на гематологическом анализаторе «Cobas Micros» «АВХ MICROS 60 ОТ 80» (Франция). Дифференциальный подсчет лейкоцитов проводили по общепринятой методике (Кондрахин И.П., 1985).

Определение биохимических показателей крови собак проводили на автоматическом биохимическом анализаторе А-15 с помощью соответствующих диагностических наборов компании BioSystems (Франция).

Об эффективности разработанных способов лечения судили по количеству заболевших и павших животных, продолжительности течения и наличию рецидивов болезни, по клинико-лабораторным показателям у собак подопытной и контрольной групп.

Цифровой материал диссертации обработан статистически по критерию Стьюдента для проверки достоверности различий и электронных таблиц Microsoft Excel for Windows (Г.Ф. Лакин, 1990). Для статистической обработки цифровых показателей руководствовались математическим методом Стариковой Т.Т., Троценко JI.C., 2002 г. Для статистической обработки данных были применены прикладные компьютерные программы «Statgraphics» и «Quatro pro».

2.2. Эпизоотическая ситуация по векторным инфекциям собак и их ассоциациям в Ростовской области

В течении 5-и лет с 2009 по 2013 гг., из 14-и ветеринарных клиник Ростовской области нами были получены 1675 проб крови собак, в анамнезе у которых было поражение иксодовыми клещами. Диагноз векторные инфекции был поставлен 1483-м собакам, что составило 88,5 % от всех укушенных клещами собак. Среди заболевших животных 255-и был поставлен диагноз

видов бабезий, был выбран «стандартный» вариант ПЦР. С этой целью были сконструированы праймеры ВгоэР (5'-СТСАССАСЮТССАСАСАААСО-3') и ВгозЯ (З'-ОТАСОАТТОАСАОАТТСАТАССТС-З') к В. гозз1, ВсапР (5'-ОАТТСТТТОООТСХУГСОТСгС АТО-З') и ВсапИ (5'-

С0ТТСТТА0ТТ(30ТСвА0ТСАТ-3') к В. сашэ и ВуоёР (5'-ТОТСТСОТТААТТСССТТААС-З') и Вуо^К. (5'-

ОААСОАСАССТТААССТСгСТААСТ-З') к В. уовеН. Постановку ПЦР проводили в реакционной смеси стандартного состава с использованием 10 пкМ каждого праймера, 5 мкл раствора кДНК с добавлением 3 мМ М§С12.

2.4. Результаты морфологических и биохимических исследований крови у собак больных векторными инфекциями

Нами были проведены морфологические и биохимические исследования крови у собак больных векторными инфекциями.

Таблица 2

Показатели крови у собак, больных моноинфекциями (эрлихиоз и _анаплазмоз), самцы и нещенные самки, п=270_

Показатели больные животные, гол (%)

клинические ( юрмы болезни

п=57(21,1) п=132 (48,9) п=47(17,4) п=34 (12,6)

легкая средняя тяжелая крайне тяжелая

Гемоглобин, г/л 118,32±6,25* 102,55±5,ЗГ 99,31±3,28*"* 75,37±4,05""

Эритроциты, хЮ'^/л 7,40±0,31 4,80±0,91" 3,70±0,78" 3,10±0,40

Гематокрит 0,45±0,05 0,39±0,06 0,31±0,01 0,27±0,02"

АлАТ, Е/л 101,30±11,35 125,10±7,31 147,17±11,45 163,24±9,64*

Мочевина, ммоль/л 10,95±1,45 15,90±0,48* 24,60±0,64* 31,30±3,37"*

Билирубин, мкмоль/л 7,31 ±2,41 12,21±0,46"" 13,00±2,55 15,08±2,47

рН плазмы 7,40±0,05 7,42±0,01 7,42 ±0,05 7,44±0,03

Протромб. время, с 8,30±0,23 9,10±0,21 10,21±1,55 13,8±1,58

- р<0,05; - р<0,01; -р<0,001

При этом выяснилось, что у собак больных моноинфекциями (эрлихиоз или анаплазмоз) на момент постановки диагноза в половине случаев регистрировалось заболевание средней тяжести, характеризующееся незначительным снижением гемоглобина и эритроцитов (до 102,5±5,3 г/л и 4,8±0,9хЮ12/л соответственно^ умеренным повышением уровня мочевины и билирубина. Тогда как легкая и тяжелая форма встречались у 21,1 и 17,4 % собак заболевших векторной моноинфекцией. Крайне тяжелое клиническое течение заболевания встречалось у 12,6 % собак и характеризовалось резким снижением показателей красной крови и повышением мочевины и билирубина до 31,3±3,37 ммоль/л и 15,08±2,47 мкмоль/л соответственно (табл. 2).

Вместе с тем у 56% собак с этой же патологией, но находящихся во второй половине пренатального периода, заболевание манифестировалось тяжелым клиническим течением, в 24% случаев средней тяжестью и только у 8% собак отмечалось легкое клиническое течение заболевания. Кроме того

даже при одинаковом клиническом течении заболевания отмечались более выраженные изменения биохимических показателей (табл.3).

Таблица 3

Показатели крови у собак, больных моноинфекциями (эрлихиоз и

Показатели больные животные, гол (%)

клинические формы болезни

п=2 (8) п=6 (24) п=14 (56) п=3 (12)

легкая средняя тяжелая крайне тяжелая

Гемоглобин, г/л 109,39±4,62 95,70±10,58 81Д1±6,67 66,30±3,87"

Эритроциты, хЮ"/л 6,90±0,30 4,50±0,22 3,50±0,60 2,60±0,31"

Гематокрит 0,40±0,10 0,35±0,03 0Д9±0,15 2,00±0,02

АлАТ, Е/л 127,50±9,10 15б,13±13,06" 332,42±13,57*" 387Д1±13,71"*

Мочевина, мМоль/л 11,76±3,27 16,32±3,328 26,78±4,46*' 37,84±6,71"

Билирубин, мКмоль/л 9,18±0,93 13,93±0,46" 15,19±2,66 17,80±1,62

рН плазмы 7,40±0,01 7,40±0,01 7,42±0,03 7,43±0,01

Протромб. время, с 9,10±0,86 9,90±1,50 12,99±2,65" 16,50±2,83"

- р<0,05; - р«0,01; - ¡><0,001

У 63% собак больных ассоциацией эрлихиоз и анаплазмоз заболевание клинически протекало тяжело, в 23% клиническое течение заболевание сопровождалось средней тяжестью, а легким клиническим течение заболевание характеризовалось только у 5,6 % собак (табл.4).

Таблица 4

Показатели крови у собак, больных ассоциацией эрлихиоз и анаплазмоз, самцы и нещенные самки, п=55

Показатели больные животные, гол (%)

клинические формы болезни

п=3 (5,6) п=13 (23,6) п=35 (63,6) п=4(7,2)

легкая средняя тяжелая крайне тяжелая

Гемоглобин, г/л 111,35±7,25 95Д±7,37 82,30±5,31 65,60±5,11

Эритроциты, х1012/л 6,40±0,92 4,80±0,9Г 3,10±0,78" 2,40±0,40"*

Гематокриг 0,41±0,05 0,36±0,06 0,27±0,01 0,19±0,02*

АлАТ, Е/л 117,30±8,35 189,10±11,91 199,17±12,76 201,31±10,22

Мочевина, ммоль/л 10,95±0,95 14,90±1,48 19,60±0,64" 35,80±0,22"

Билирубин, мкмоль/л 10,21±2,35 14,21±0,46*" 17,00±1,55'" 19,08±2,47""

рН плазмы 7,40±0,05 7,41±0,01 7,42±0,05 7,44±0,03

Протромб. время, с 9,50±0,15 11,30±0,81 12,21 ±0,5 8 16,80±0,51

- р<0,05; - р<0,01; - р<0,001

При этом, надо отметить, что эта же ассоциация у собак во второй половине пренательного периода, клинически тяжело проявлялась у 75% животных, в легкой клинической форме отсутствовало, и только по 12,5% собак болели со средним и крайне тяжелым клиническим течением заболевания (табл.5).

Текст научной работыДиссертация по сельскому хозяйству, кандидата ветеринарных наук, Вольвак, Андрей Олегович, Новочеркасск

РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ НАУК ГОСУДАРСТВЕННОЕ НАУЧНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ

СЕВЕРО-КАВКАЗСКИЙ ЗОНАЛЬНЫЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ВЕТЕРИНАРНЫЙ ИНСТИТУТ

04201455747

Вольвак Андрей Олегович

На правах ру^писи

КЛИНИКО-ПАТОГЕНЕТИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ВЕКТОРНЫХ ИНФЕКЦИЙ У СОБАК В ПЕРИНАТАЛЬНЫЙ

ПЕРИОД

06.02.02 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

ДИ С СЕРТАЦИЯ

на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Научный руководитель: доктор ветеринарных наук, Бутенков Александр Иванович

ВВЕДЕНИЕ...........................................................................................................3

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.....................................................................................8

1.1. Историческая справка....................................................................................8

1.2. Токсономическое положение и свойства возбудителей риккетсиозов.....10

1.3. Заболевания, вызываемые риккетсиями.....................................................14

1.4. Распространение, векторы и природные резервуары возбудителей риккетсиозов собак.............................................................................................18

1.5. Особенности клинического течения риккетсиозов....................................24

1.6. Диагностика риккетсиозов..........................................................................31

1.7. Лечение инфекций вызванных риккетсиями.............................................36

1.8. Профилактические меры.............................................................................38

1.9. Заключение..................................................................................................39

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ...........................................................40

2.1. Материал и методы исследований..............................................................40

2.2. Распространение векторных инфекций собак в Ростовской области.......43

2.3. Разработка диагностических наборов для выявления и идентификации векторных инфекций..........................................................................................46

2.4. Клинико-патогенетические особенности векторных инфекций у собак..50

2.5. Сравнительная эффективность методов лечения собак, больных эрлихиозом и анаплазмозом...............................................................................76

4. ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ......................................89

5. ВЫВОДЫ......................................................................................................100

6. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.......-...................................................102

7. СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ......................................103

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы. Векторные инфекции собак, передающиеся иксодовыми клещами, встречаются во многих регионах России (S.R. Telford III, 2002; Э.И. Коренберг, 2002). Ростовская область является активным природным очагом векторных инфекций и бабезиоза собак (М.А. Раевская, 2011). Однако распространенность этих нозологий среди собак разных половозрастных групп, многолетняя и сезонная динамика заболеваемости, а также их клиническая характеристика и лабораторная диагностика остаются недостаточно изученными.

В течение последних 10-15 лет на территории многих стран Европы, а также в России, были зарегистрированы новые природно-очаговые инфекционные заболевания, ассоциированные с иксодовыми клещами -эрлихиоз и анаплазмоз собак (J.S. Dumler, 2001; Ogden, 2002; B.B. Малеев, 2004; A.A. Нафеев, 2007). Наличие их в Ростовской области подтверждено работами отечественных ученых в 2010 году (С.Н. Карташов, 2010, М.А. Раевская, 2011). В связи с чем, представляется актуальным изучить эрлихиоз, анаплазмоз собак и векторные микст-инфекции с их участием в структуре природно-очаговых трансмиссивных заболеваний популяции собак, выяснить особенности их клинического течения, динамику патогенетических изменений и лабораторной диагностики.

Степень разработанности проблемы. Вопросам диагностики и терапии векторных инфекций у собак посвящены работы ряда авторов (С.Н. Карташов, 2010, М.А. Раевская, 2011), однако, представленные данные, отражающие спектр клинико-патогенетических изменений при векторных микст-инфекциях у собак в перинатальном периоде скудны. Это не позволяет выделить диагностические параметры подтверждения диагноза, установления тяжести течения заболевания и назначения адекватной терапии, что и послужило целью для нашего исследования.

Цель работы. Изучить структуру векторных инфекций популяции собак в Ростовской области, выяснить клинико-патогенетические особенности векторных инфекций у собак в разном физиологическом состоянии, разработать способ диагностики, оценки тяжести и терапию собак с данной патологией.

Достижение намеченной цели осуществлялось решением следующих

задач:

1. выяснить структуру векторных инфекций в популяции собак Ростовской области, уточнить инцидентность векторных инфекций у собак в перинатальный период;

2. разработать диагностический набор для выявления векторных микст-инфекций у собак;

3. выяснить клинико-патогенетические особенности микст-инфекций у собак с учетом физиологического состояния животного;

4. выяснить степени тяжести векторных инфекций в зависимости от физиологического состояния животного;

5. на основании полученных данных разработать схему терапии собак больных векторными микст-инфекциями в разном физиологическом состоянии.

Научная новизна. Наши исследования позволили дополнить этиологическую структуру природно-очаговых векторных инфекций у собак в Ростовской области. Она представлена бабезиозами и новыми для собак в Ростовской области эрлихиозом и анаплазмозом, выявлены различные варианты микст-инфекций более чем у 30% собак. Уточнены клинические особенности эрлихиоза, анаплазмоза и различных вариантов векторных микст-инфекций у собак в перинатальном периоде. Заболевание протекает преимущественно в виде гемморагического и гепатопривного синдромов.

Впервые представлена клинико-лабораторная характеристика векторных микст-инфекций (эрлихиоз, анаплазмоз и бабезиоз), изучены

клинико-лабораторные изменения при микст-инфекциях у собак в перинатальном периде. Определены критерии тяжелого течения заболевания и выздоровления животных.

Теоретическая и практическая значимость. Разработана тактика клинико-лабораторной диагностики всего спектра векторных инфекций у собак. Создан алгоритм последовательности дифференциально-диагностических действий при векторных инфекциях у собак, что позволит ветеринарному врачу, аргументировано поставить диагноз на эрлихиоз, анаплазмоз, бабезиоз и их сочетанное течение. Предложены диагностические параметры купирования инфекционного процесса векторных микст-инфекций у собак в разном физиологическом состоянии. Разработаны патогенетически обоснованные схемы комплексной терапии собак, больных векторными микст-инфекциями.

Степень достоверности и апробация работы. Достоверность полученных данных обоснована значительным объемом исследований, использованием современных методов, в том числе вариационной статистики по программе Statistica for Windows.

Основные результаты диссертационной работы доложены и одобрены на заседаниях ученого совета ГНУ СКЗНИВИ; на IV Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы биологии, нанотехнологий и медицины», г. Ростов-на-Дону, 2011; Всероссийской научно-практической конференции «Актуальные аспекты паразитарных заболеваний в современный период» г. Ростов-на-Дону, 2011; Всероссийской научно-практической конференции «Научное обеспечение инновационного развития отечественного животноводства» г. Новочеркасск, 2011; Международной научно-практической конференции «Пути интенсификации производства и переработки продуктов животноводства», г. Черкесск, 2011; Всероссийской научно-практической конференции «Научные проблемы и современные тенденции развития отечественного животноводства в условиях ВТО» г. Новочеркасск, 2013.

Личный вклад автора. Автору принадлежит ведущая роль в выборе направления диссертационного исследования. Планирование работы, поиск и анализ литературы по теме диссертации, подбор животных для исследования, клиническое обследование больных животных, формирование базы данных, статистическая обработка, обобщение и анализ полученных результатов, формулировка выводов, написание статей и диссертации выполнены лично автором. Методы исследования (ПЦР диагностика, биохимические исследования) освоены диссертантом и проведены им самостоятельно. Вклад автора является определяющим и заключается в непосредственном участии на всех этапах исследования.

Реализация результатов исследований. Проведено внедрение результатов исследования в практическую работу ветеринарных клиник Ростовской области, внедрен алгоритм диагностического поиска и распознавания векторных микст-инфекций у собак, внедрены новые схемы лечения векторных инфекций. В работу ГБУ РО Ростоблветлаборатории в отделе донозологической и клинической диагностики, лаборатории функциональной диагностики болезней животных ГНУ СКЗНИВИ Россельхозакадемии, внедрены тест-системы для ПЦР диагностики векторных инфекций у собак.

Практические предложения реализуются в учебном процессе при чтении лекций и проведении лабораторно-практических занятий на кафедре внутренних незаразных болезней и патофизиологии Дон ГАУ по курсу «Болезни мелких домашних животных».

Публикации. По теме диссертации издано 10 работ, из них 4 в журналах, рекомендованных ВАК.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 127 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, результатов собственных исследований, заключения, выводов и указателя литературы, включающего 83 отечественных и 114 зарубежных источника. Диссертация иллюстрирована 24 таблицами, 19 рисунками.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Этиологическая структура векторных инфекций у собак в Ростовской области.

2. Клинико-диагностический алгоритм векторных инфекций у собак, основные клининико-лабораторные критерии тяжести течения заболевания у собак в зависимости от состава микст-инфекции и физиологического состояния животного.

3. Основные терапевтические схемы при векторных микст-инфекциях у

собак.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 1.1. Историческая справка

Риккетсиозы собак представляют собой группу инфекционных заболеваний животных семейства псовых, в том числе домашних собак, широко распространенные во всём мире [1, 27, 64].

Несмотря на несколько случаев заболеваний, сопровождающихся моноцитарным синдромом, описанных на японском языке в 1950-х, эрлихиоз действительно приобрел значение в гуманитарной медицине в последние десять лет, после первого случая установления диагноза в США и постоянно растущих описаний случаев заболевания людей во всем мире. Между тем, эрлихиоз хорошо известное заболевание в ветеринарной медицине в течение почти столетия. Впервые он был описан у жвачных животных. В то время как риккетсиозы у собак были обнаружены за 25 лет до переименования их в эрлихиоз [9, 88, 123, 142, 187].

Массовое диагностирование у животных и у человека риккетсиозов, в том числе обнаружение новых возбудителей может быть связано с неблагоприятными эпидемиологическими условиями, а также и с совершенствованием методов и инструментов диагностики [23, 96, 154].

В настоящее время моноцитарный эрлихиоз собак, вероятно, является наиболее распространенным и лучше изученным у собак. При этом диагностировать его не так легко и, следовательно, ветеринарный врач играет важную роль в раннем выявлении этого заболевания. Что касается риккетсий, молекулярная диагностика имеет решающее значение, несколько альтернативных методов доступны для практиков, но их специфичность ниже, а чтобы обеспечить высокую производительность необходимы надежные инструменты [42, 136, 197].

Моноцитарный эрлихиоз собак вызывается возбудителем Ehrlichia canis, который имеет тропизм для одноядерных клеток. Он был обнаружен в 1935 году в Алжире и был назван Rickettsia Canis [125]. Родовое имя Ehrlichia

было дано ему 10 лет спустя в честь Пауля Эр лиха [63]. Эрлихиоз собак позже был описан в других странах по всему миру [28, 100, 147, 193]. Особое значение эрлихиоз приобрел во время войн в Корее и Вьетнаме, когда эрлихиоз обусловил гибель многих собак армии США. При этом в течении 5-ти лет погибло около 300 собак, и кроме того, все собаки погибли от тяжелой панцитопении [9, 43, 146, 178]. Впоследствии моноцитарный эрлихиоз собак вызвал интерес в 1987 году, когда Е. chaffeensis, был идентифицирован как возбудитель моноцитарного эрлихиоза человека. В 1996 году было доказано, что заражение собак Е. chaffeensis вызывает у них признаки, идентичные заражению Е. canis [1, 41, 62, 84,170].

У человека эрлихиоз был впервые диагностирован в 1986 году в США путем обнаружения эрлихий в крови. В 1990 была проведена генетическая экспертиза возбудителя изолированного из крови человека, и он был назван Е. chaffeensis [42, 63, 70].

В Японии возбудители эрлихиоза были впервые выделены в 1950 г., но при этом первоначально их относили к риккетсиям и лишь в 1984 г. возбудитель идентифицирован как Ehrlichia sennetsu. Заболевание, получившее название «лихорадка сеннетцу», наблюдалось в ограниченном регионе Японии. Всего с 1953 по 1978 гг. наблюдалось 46 случаев. В различных штатах США заболеваемость колеблется в пределах 3, 3—5, 3 на 100 000 населения в год [41, 63, 64, 70].

Эрлихиозы и анаплазмозы являются типичными трансмиссивными природно-очаговыми зоонозами. Клещи родов Dermacentor, Rhipicephalus, Amblyomma являются основными переносчиками заболеваний у животных, у человека основным переносчиком являются клещи рода Ixodes. Наибольшее патогенное значение для человека имеют виды Ehrlichia chaffeensis, E.muris и Anaplasma phagocytophilum [27, 120, 189]. Возбудители эрлихиозов собак, такие как E.canis и E.ewingii в единичных случаях описаны как возбудители заболевания у человека [28, 90, 163].

Определенный интерес представляет я группа не связанных с клещами эрлихий, относящихся к роду ЫеопскеА^а [23, 42, 160], переносчиками которых являются гельминты, а заражение происходит алиментарным путем. Заражение человека происходит при употреблении недостаточно обработанной рыбы, пораженной инфицированными трематодами [1, 43, 63, 129].

Тяжелые заболевания лошадей и собак вызывает ТЧ.(Е.) тйси локализующаяся в трематодах, паразитирующих в улитках и различных водных насекомых. Заражение первых происходит при поедании травы с зараженными улитками, или с водой из открытых водоемов [28, 42, 63, 86].

1.2. Токсономическое положение и свойства возбудителей риккетсиозов

Риккетсиозы - заболевания многих видов животных и человека, обусловленные внутриклеточными паразитами, передающиеся преимущественно трансмиссивно, проявляющиеся абортами и послеродовыми эндометритами, лихорадками, пневмониями, ринитами, поражением лимфатической системы и форменных элементов крови [1, 81, 144, 186].

Первое сообщение об одном из возбудителей эрлихиоза, вызывающего пятнистую лихорадку Скалистых гор было сделано в 1909 году Говардом Тейлором Риккетсом, который погиб при ее исследовании и в честь которого был назван возбудитель [21, 71, 87, 153].

Риккетсии представлены как патогенными, так и непатогенными видами, в природе обитают преимущественно в организме насекомых, грызунов, диких и сельскохозяйственных животных [4, 60, 81, 103, 188].

Систематика эрлихиозов в настоящее время претерпела капитальную перестройку после разработки в биологии инструментов молекулярной диагностики и непрекращающимся открытием новых штаммов и видов [162].

Некоторые возбудители были переименованы, и кроме того при систематизации возбудителей в разное время использовались различные подходы [139].

Эрлихии - это небольшие облигатные внутриклеточные бактерии, которые заражают клетки крови многих млекопитающих и людей [97, 172]. Грамотрицательные, но, как и риккетсии, они отличается от большинства из этих грамотрицательных бактерий отсутствием производства эндотоксина и их основным вектором передачи [107]. Согласно определителя бактерий Берджи (1984; 1994), риккетсии классифицировались следующим образом: царство Procariotae, отдел Gracilicutes, секция 9 - Rickettsii et Chlamydii, порядок Rickettsiales [42, 64, 109], который включал три семейства: Rickettsiaceae, Bartonellaceae и Anaplasmataceae, которые паразитируют на фагоцитах и эритроцитах [54, 172]. В семейство Rickettsiaceae входили следующие роды Rickettsia, Rochalimaea, Coxiella, Ehrlichia, Cowdria, Neorickettsia, Wolbachia и Rickettsiella. В семейства Bartonellaceae два рода: Bartonella и Grahamella. В семейство Anaplasmataceae четыре рода: Anaplasma, Aegyptianella, Haemobartonella, Eperhytrozoon [1, 61, 127]. Порядок Rickettsiales первоначально включал все строгие внутриклеточные бактерии, однако в настоящее время хламидиоз был вторично отделен от этого порядка. В семействе Rickettsiaceae первыми были установлены роды и виды на основе фенотипических критериев: их экология, эпидемиология, серологическое типирование патогенности для человека и животных, и реакция Вейля (серологическая реакция с различными серотипами бактерий рода Proteus sp.) [169]. Эти критерии были использованы для определения трех родов - Rickettiseae, Wolbachieae и Ehrlichieae - последний, в составе родов Ehrlichia и Cowdria Neorickettsia [155]. Они располагаются в паразитофорной вакуоли клетки-хозяина, в то время как элементы род�