Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

Клинико-морфологическое обоснование эффективности применения гамавитфорте при лечении больных бабезиозом и парвовирусным энтеритом собак

ВАК РФ 06.02.01, Разведение, селекция, генетика и воспроизводство сельскохозяйственных животных

Автореферат диссертации по теме "Клинико-морфологическое обоснование эффективности применения гамавитфорте при лечении больных бабезиозом и парвовирусным энтеритом собак"

На правах рукописи

005015321

Чермошенцева Галина Владимировна

КЛИНИКО-МОРФОЛОГИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ ПРИМЕНЕНИЯ ГАМАВИТФОРТЕ ПРИ ЛЕЧЕНИИ БОЛЬНЫХ БАБЕЗИОЗОМ И ПАРВОВИРУСНЫМ ЭНТЕРИТОМ СОБАК

06.02.01 - «Диагностика болезней и терапия животных, патология, онкология и морфология животных»

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

1 2 (;;ДР Ш

Саратов-2012

005015321

Работа выполнена в ФГБОУ ВПО «Саратовский государственный аграрный университет им. Н.И. Вавилова»

Научный руководитель: доктор ветеринарных наук, профессор Анников Вячеслав Васильевич

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор кафедры терапии, клинической диагностики, фармакологии и радиобиологии ФГБОУ ВПО «Саратовский государственный аграрный университет им. Н.И. Вавилова» Калюжный Иван Исаевич

доктор ветеринарных наук, профессор, заведующий кафедрой терапии и клинической диагностики с рентгенологией ФГБОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана» Зухрабов Мирзабек Гашимович

Ведущая организация: ФГБОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины»

Защита состоится 22 марта 2012 года в часов на заседании диссертационного совета Д 220.061.01 при ФГБОУ ВПО «Саратовский государственный аграрный университет им. Н.И. Вавилова» по адресу: 410005, г. Саратов, ул. Соколовая, 335, диссертационный зал, тел. 8-(8452)-69-25-32.

Отзывы просим высылать по адресу: ФГБОУ ВПО «Саратовский государственный аграрный университет им. Н.И. Вавилова», 410012, г. Саратов, Театральная площадь, д. 1, ученому секретарю диссертационного совета Д 220.061.01; e-mail: Domnitskiy09@yandex.ru.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВПО «Саратовский ГАУ им. Н.И. Вавилова».

Автореферат разослан февраля 2012 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета

И.Ю. Домницкий

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Бабезиоз собак в последнее время приобретает массовый характер и наносит существенный ущерб здоровью животных, а развивающиеся при этом вторичные иммунодефицитные состояния также обуславливают повышенную восприимчивость организма к бактериальным и вирусным инфекциям (Кошелева М.И., 2006).

В настоящее время парвовирусный энтерит входит в группу пяти самых распространенных инфекционных болезней собак России (Фомин В.Ю., 2007). Болезнь сопровождается сильной лейкопенией, следствием чего являются иммунный дисбаланс и развитие вторичных патологий, нередко приводящих к летальному исходу (Тумина И.В., Анников В.В., 2006).

Анализ обобщенных литературных данных свидетельствует о ведущей роли иммунологических нарушений в механизмах возникновения и развития многих патологий у животных (Верховский O.A., 1996; Федоров Ю.Н., 2000; Игнатов П.Е., 2002; Логинов С.И., 2001).

Предлагаемый компанией ЗАО «Гамаветфарм» комплексный препарат гамавитфорте, который содержит в качестве действующих веществ интерферон альфа-2Ь человеческий рекомбинантный, среду 199 и воду для инъекций, призван решить проблему вторичного иммунодефицита. Гамавитфорте содержит физиологически сбалансированную смесь 20 аминокислот, 17 витаминов, фрагментов нуклеиновых кислот, важнейшие минералы и микроэлементы, а также экстракт плаценты и иммуностимулятор (нуклеинат натрия). In vitro установлено, что благодаря этому составу он оказывает мощное общеукрепляющее и трофическое действие на организм, стимулирует неспецифический иммунитет и кроветворение, способствует снятию интоксикации, нормализует кислотно-щелочной баланс, биохимические показатели и формулу крови, снимает последствия окислительного стресса.

При этом в литературе нами не обнаружено данных, подтверждающих вышесказанное предположение на практике (in vivo).

Приведенные выше рассуждения обозначили актуальность и направления настоящей работы.

Цель исследования. На основании клинико-морфологических и биохимических исследований обосновать эффективность применения гамавитфорте при бабезиозе и парвовирусном энтерите собак.

Для реализации поставленной цели были определены следующие задачи:

1. Выявить клинико-морфологаческие изменения при бабезиозе и парвовирусном энтерите собак как факторы, способствующие развитию вторичного иммунодефицита.

2. На основании динамики биохимических изменений оценить деток-сикационные свойства гамавитфорте.

3. Оценить состояние и динамику клеточного звена иммунитета при использовании гамавитфорте.

4. Оценить состояние и динамику гуморального звена иммунитета при лечении собак, больных бабезиозом и парвовирусным энтеритом.

5. На основании клинико-гематологических, биохимических и иммуно-ло!ических изменений дать рекомендации к применению гамавитфорте.

6. Оценить экономическую эффективность включения в схему терапии гамавитфорте.

Научная новизна. Впервые:

- определено с помощью исследований количества Т-лифоцитов и С-реактивного белка, что гамавитфорте активизирует клеточное звено иммунитета собак, больных парвовирусным энтеритом и бабезиозом;

- установлено на основании исследований количества В-лимфоцитов и иммуноглобулинов А, М, С, что гамавитфорте активизирует гуморальное звено иммунитета собак, больных парвовирусным энтеритом и бабезиозом;

- доказано на основании клинико-гематологических исследований, что гамавитфорте способствует ранней нормализации гемопоэза;

- установлено на основании биохимических исследований, что гамавитфорте способствует ускорению детоксикации организма собак, больных бабезиозом и парвовирусным энтеритом.

Теоретическая и практическая значимость.

Полученные данные расширяют представление о клинико-морфо-биохимических изменениях при парвовирусном энтерите и бабезиозе собак, особенностях развивающегося иммунного дисбаланса и механизме коррекции возникающих осложнений, открывают новые возможности для научно обоснованного подхода к коррекции и профилактике осложнений, возникающих вследствие снижения резистентности. Разработанная технология лечения предусматривает наряду со специфической терапией, коррекцией водно-солевого баланса быстрое устранение развивающегося иммунного дисбаланса путем включения в схему терапии комплексного полиаминокислотного препарата.

Результаты гематологических, биохимических и иммунологических исследований легли в основу положения о возможности устранения и профилактики иммунного дисбаланса, развивающегося вследствие парвовирусного энтерита и бабезиоза собак.

Результаты исследований используются в практической работе ветеринарных врачей г. Москвы, Пензы, Волгограда, Саратова и Саратовской области, а также при чтении лекций и проведении лабораторно-практических занятий на кафедрах «Эпизоотология», «Паразитология и инвазионные болезни» для студентов специальности 111801 - «Ветеринария» ГОУ ВПО «Российский университет дружбы народов», «Эпизоотология», «Анатомия», «Терапия и клиническая диагностика с рентгенологией» ФГБОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана» для студентов факультета ветеринарной медицины, «Терапия, клиническая диагностика, фармакология и радиобиология» ФГБОУ ВПО «Саратовский государственный аграрный университет им. Н.И. Вавилова».

Разработаны «Методические положения по комплексному лечению больных бабезиозом и парвовирусным энтеритом собак с использованием современных иммуномодулирукмцих препаратов», рассмотренные и одобренные 20 октября 2011 г. на секции «Вегеринарная биотехнология» ОВМ РАСХН.

Связь исследования с научной программой.

Диссертация выполнена в рамках научно-исследовательской работы в соответствии с планом НИР ФГБОУ ВПО «Саратовский ГАУ им. Н И. Вавилова», регистрационный номер 313-С от 09.03.2010 г.

Апробация работы.

Основные положения диссертационной работы отражены в итоговых отчетах кафедры паразитологии, эпизоотологии и ВСЭ Саратовского государственного аграрного университета им. Н.И. Вавилова за 2009-2011 гт. Материалы диссертации доложены и обсуждены на конференциях профессорско-преподавательского состава и аспирантов Саратовского государственного аграрного университета им. Н.И. Вавилова (2010-2011), а также на 7-й и 8-й Всероссийских научно-практических конференциях «Современные проблемы устойчивого развития агропромышленного комплекса России» (Ростов на Дону, 2010-2011); мел-региональной научно-практической конференции «Актуальные проблемы ветеринарии и животноводства» (Самара, 2010); Международном научно-практическом симпозиуме (Саратов, март 2011; V Международной научно-практической конференции «Современные тенденции развития медицины (Одесса (Украина) и Лондон (Великобритания), 2011); заседании секции «Ветеринарная биотехнология» ОВМ РАСХН (п. Биокомбинат, Щелковский р-н, Московская обл. октябрь 2011).

Публикации результатов исследования. По материалам диссертации опубликовано 10 печатных работ, в том числе 2 в журналах, рекомендованных ВАК РФ. Общий объем работ составляет 3,26 печ. л., из них 1,54 печ. л. принадлежат лично автору.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Особенности динамики клинико-морфобиохимических изменений при лечении собак, больных бабезиозом и парвовирусным энтеритом.

2. Состояние клеточного звена иммунитета при использовании гама-витфорте.

3. Состояние гуморального звена иммунитета при использовании гама-витфорте.

4. Терапевтическая эффективность применения гамавитфорте.

Объем и структура диссертации. Рукопись диссертации состоит из

введения, четырех глав, выводов, практических предложений, списка литературы и приложений. Изложена на 122 страницах машинописного текста. Приложения содержат сведения о проделанной работе. Иллюстрирована 20

рисунками, 14 таблицами. Список литературы включает в себя 205 источников, из них отечественных - 123, зарубежных - 82.

Предмет, материалы и методы исследований.

Структура опыта Работа основана на результатах клинических исследований, проведенных в период с 2009 по 2012 г. на базе кафедры «Паразитология, эпизоотология и ВСЭ» ФГБОУ ВПО «Саратовский ГАУ им. Н И. Вавилова», ветеринарной клиники ООО «ХАКС +» и ветеринарной клиники ООО «Универ» (Москва).

Рис. 1. Структура исследований

Предметом для исследований послужили больные бабезиозом (п = 68) в возрасте от 1 года до 5 лет и парвовирусным энтеритом собаки (л = 60) в возрасте от 2 до 6 мес. Животные были подобраны в 2 группы следующим образом: по 34 головы при бабезиозе собак и по 30 голов при парвовирусном

энтерите в каждой по принципу аналогов. Содержание - домашне-выгульное, кормление - фабричные сухие корма.

Материалом для исследований послужили кровь и каловые массы больных бабезиозом и иарвовирусным энтеритом собак.

При выполнении поставленных задач проводили клинические (я = 940), визуально-диагностические (УЗИ) (и = 256), гематологические (п = 572), биохимические (п = 572), иммунологические (и = 640), иммунохроматогра-чические (п = 60) и серологические (и = 136) исследования, а также микроскопическое исследование мазков крови (и = 68).

Клинические исследования проводили по общепринятым методикам (Постников B.C., 1986); визуально-диагностические (УЗИ) - на аппарате Mindray DP-6600 по стандартной технологии (Бушарова Е.В., 2011). При этом изучали состояние и границы печени, желчного пузыря, почек. Общий анализ крови проводили на автоматическом гемоанализаторе «Hemascrin», подсчет лейкограммы - по общепринятой методике (Быкова Н.Д., 2007). Биохимические исследования сыворотки крови выполняли на автоматическом анализаторе «BTS-358». Серологические исследования проводили для дифференциальной диагностики бабезиоза от инфекционного гепатита и леп-тоспироза плотоядных. Инфекционный гепатит плотоядных исключали методом полимеразной цепной реакцией в лаборатории «Артвет» (Москва). Лептоспироз - в реакции микроаглютинации. При этом исключали наличие таких серовариантов, как Leptospira Canicola, L. icterohaemorrhagiae, L. grippotyphosa и L . Pomona. Исследования проводили в лаборатории «Артвет» (Москва). Иммунологические исследования сыворотки крови выполняли на автоматическом анализаторе «Stat Fax 4700». При иммунологических исследованиях определяли состояние клеточного и гуморального звеньев иммунитета (Т- и B-лимфоциты методом розеткообразования, иммуноглобулины А, М, G - методом ИФА с помощью стрипов Dya Sys (Германия) (Фролов В.М., 1991)). При бабезиозе собак клинический диагноз подтверждали исследованием мазков из периферической крови, окрашенных лейкодивом с целью обнаружения в эритроцитах бабезий (Ятусевич А.И., Заблоцкий В.Т., 1995). Клинический диагноз при парвовирусном энтерите собак подтверждали экспресс-диагностикой VetExpert CPV Ag (Япония) для парвовирусных инфекций плотоядных, с помощью которых выявляли антиген парвовирусного энтерита в фекалиях инфицированных животных. Статистическую обработку полученных данных проводили с помощью программы Statistika 6 на компьютере Intel Celeron.

Результаты собственных исследований. Динамика гематологических и биохимических показателей при лечении

больных бабезиозом и парвовирусным энтеритом собак Клинико-гематологические и биохимические показатели организма больных

бабезиозом собак

Клинически начало бабезиоза характеризовалось повышением температуры тела, тахикардией, одышкой, отсутствием аппетита. Через сутки болез-

7

ни видимые слизистые оболочки становились анемичными, а позже циано-тичными.

К исходу третьих суток появлялось иктеричное окрашивание слизистых оболочек ротовой полости, конъюнктивы и даже кожи вследствие гемолиза эритроцитов и снижения экскреции билирубина в желчные капилляры. Снижение детоксикационной функции печени приводило к нарастанию интоксикации, дегидратации и активизации вторичной микрофлоры, что клинически проявлялось саливацией, рвотой, дегидратацией, реже диареей.

При исследовании мазка крови в день поступления животных в клинику была обнаружена локализация бабезий как внутри эритроцита (в количестве 2-8 экземпляров), так и вне клетки.

Анализ крови показал снижение уровня гемоглобина (до 74,7 ± 0,2г/л), существенное снижение количества эритроцитов (3,3 ± 0,1x10 /л), цветного показателя (0,7 ± 0,01) и гематокрита (28,6 ± 0,2 %).

Отмечался сдвиг ядра лейкограммы влево, о чем свидетельствовало появление в циркуляторном русле юных нейтрофилов (4,2 ± 0,2 %), наблюдались эозинофилия (11,2 ± 0,2 %), снижение сегментоядерных клеток (39,1 ± ± 0,2 %). Также отмечали повышение количества лимфоцитов (31,6 ± 0,2 %) и моноцитов (13,6 ± 0,2 %) по сравнению с нормой.

Результаты исследований показали, что бабезиоз сопровождался глубокими деструктивными процессами в печени, а также в почках.

Бабезиоз сопровождался холестатическими отклонениями, о чем свидетельствовало увеличение уровня холестерола (норма 2,9-6,5 ммоль/л, у больных 9,4 ± 0,1 ммоль/л), гаммаглютаминтрансферазы (норма 1,0-10,0 ЬГ/Ь, у больных 13,5 ± 0,4 и/Ь) и билирубина (норма 0,1-10,3 мкмоль/л, у больных 21,1 ± 1,3 мкмоль/л). Это привело к нарушению образования и оттока желчи и, как следствие, желтушному окрашиванию слизистых и кожи.

При данной патологии отмечали также нарушение мембран гепатоцитов, о чем свидетельствует увеличение содержания количества аспартатами-нотрансферазы (127,6 ± 2,3 и/Ь), аланинаминотрансферазы (190,0 + 5,6 Ы/Ь), гаммаглютаминтрансферазы (13,5 ± 0,4 и/Ь), щелочной фосфатазы (111,9 ± ± 0,4 и/Ь).

Динамика гематологических и биохимических показателей при лечении больных бабезиозом собак

Схема лечения больных бабезиозом собак включала в себя имидосан, эссенциале форте, 0,9%-й раствор натрия хлорида или 5%-й глюкозы с 5%-й аскорбиновой кислотой, 5%-й энрофлоксацин. Дополнительно в комплекс лечебных мероприятий животным первой (опытной) группы в схему лечения для снятия интоксикации и стабилизации мембран клеток включили гама-витфорте, собакам второй (контрольной) - гамавит.

Уже через сутки терапии в обеих группах отмечали исчезновение саливации, а у животных первой группы исчезла рвота. Во второй группе у 9 из 34 собак отмечалась рвота. Ректальная температура и прием воды нормализовались в обеих группах. Цвет слизистых по-прежнему был иктеричный у животных обеих групп. Отсутствие саливации и рвоты у животных первой

8

группы, по нашему мнению, объяснялось более выраженными детоксикаци-онными свойствами, которые проявил гамавитфорте.

Через трое суток терапии у собак первой группы нормализовался аппетит, животные были активны, слизистые оболочки по-прежнему иктеричны. У животных второй группы наблюдали слабый аппетит, видимые слизистые оболочки оставались иктеричными, они были малоподвижны.

По истечении пятых суток проводимого лечения в первой группе животных клинические симпгомы болезни практически исчезли, кроме икте-ричного окрашивания слизистых оболочек. Во второй группе собак улучшений не произошло.

Исследования, проведенные в более поздние сроки, позволили ощутимее оценить детоксикационное влияние гамавитфорте на организм больных животных.

На первые сутки терапии значимых изменений в гематологических показателях в обеих группах не наблюдали.

На третьи сутки лечения в крови первой группы животных, получавших гамавитфорте, наблюдали повышение уровня гемоглобина (86,5 ± 0,2 г/л), количества эритроцитов (3,8 ± 0,03><1012/л) и, соответственно, гематокрита (31,2 ± 0,3 %) (рис. 2, 3). Что касается лейкограммы, то в ней произошло увеличение количества сегментоядерных клеток (45,7 ± 0,2 %). Остальные показатели оставались на прежнем уровне.

■ количество эритроцитов ( ОДЫ!)

^ количество эр I ГГрОЦ ИТОВ (ко нтр ОЛЬ

гемоглобин (опыт)

до начала 1-е сутки 3-й сутки 5-е сутки т гемогаобин(контроль) лечения лечения, лечения лечения

Рис. 2. Динамика содержания эритроцитов и гемоглобина при лечении больных бабезиозом собак (и = 68)

Во второй группе произошло незначительное повышение уровня гемоглобина (78,3 ± 0,4г/л), гематокрита (29,2 ± 0,2 %) и количества эритроцитов (3,4 ± 0,01 хЮ12/л).

К пятым суткам проводимой терапии у животных первой труппы гематологические показатели находились в границах физиологической нормы. Так, уровень гемоглобина составил 117,7 ± 0,2 г/л, количество эритроцитов возросло до 5,0 ± 0,02x1012/л. Соответственно увеличились уровень гематокрита (37,7 ± 0,2 %) и цветной показатель (0,9 ± 0,01). Уменьшилось количест-

9

\

во юных нейтрофилов (2,2 ± 0,2 %), произошло увеличение количества сег-ментоядерных клеток (до 62,7 ± 0,3 %), что привело к нормализации лейко-граммы. Отмечали снижение количества лимфоцитов (21,3 ± 0,2 %) и моноцитов (7,6 ± 0,2 %) до нормы.

Гематологические показатели у собак второй группы к этому сроку приходили в соответствии с физиологической нормой менее заметно.

40

30

•■"> с;

20 15 J 0

шн

¡»¡¡■г

¡¡Я

■

я

■

до начала 1-е сутки 3-й сутки 5-е сутки лечения лечения лечения лечения

»количество лейкоцитов (опыт)

;§ гош-гаеетво лейка цитов (контроль)

$ пшагокрит (опыт)

® гематокрнт (контроль)

Рис. 3. Динамика гематокрита и содержания лейкоцитов при лечении больных бабезиозом собак (и = 68)

При проведении биохимического исследования крови собак на 1-е, 3-й и 5-е сутки терапии после назначения гамавитфорте получили следующие результаты.

250 200 .150 100

50

до начала 1-е сутки ¿-и сутки 5-е су тки лечения лечения лечения лечения

ш ошишруопн общий

(опыт) я биллнрубин общий

(контроль) ш АЛТ (опыт)

ш АЛТ (контроль)

s ACT (опыт)

ш ACT (контроль)

Ш креатишга (опыт)

»креатинин (контроль)

Рис. 4. Динамика некоторых биохимических показателей крови при лечении больных бабезиозом собак (я = 68)

Из результатов, представленных на рис. 4, следует, что комплексная терапия уже через сутки дала явно выраженный положительный эффект как в

Ю

J

1 -й, так и во 2-й группе. Однако у собак первой группы биохимические показатели функций печени и почек нормализовывались быстрее, что позволило через 5 суток интенсивной терапии снизить до нормы уровень общего билирубина (9,8 ± 0,6 мкмоль/л), ГТТ (8,7 ± 0,4 U/L) и холестерола (6,0 ± ± 1,4 ммоль/л). У собак контрольной группы уровень холестерола (7,3 ± ±1,1 ммоль/л) и креатинина (142,0 ± 6,3 ммоль/л) оставался выше физиологической нормы.

Превышение показателей ЩФ (93,3 ± 0,9 U/L), ACT (51,0 ± 1,4U/L), АЛТ (71,0 ± 1,3U/L) во второй группе говорит о незавершенности детоксикацион-ных и репаративных процессов у больных животных. У собак опытной группы, получавших гамавитфорте, вышеназванные показатели были близки к референтным (ЩФ - 78,2 ± 1,3 U/L; ACT - 47,4 ± 0,8 U/L; АЛТ - 64,8 ± ± 1,6 U/L).

Клинико-гематологические и биохимические показатели организма больных парвовирусным энтеритом собак

Клинически начало парвовирусного энтерита характеризовалось повышением температуры тела, депрессией, вялостью, отсутствием аппетита, саливацией, рвотой, диарей сероватого цвета с примесью крови и резким специфическим запахом, беспокойством животных при пальпации мягкой брюшной стенки.

При проведении гематологических исследований на момент обращения за ветеринарной помощью (3-й сутки болезни) отмечали эритропению (3,3 ± ± 0,6*1012/л), анемию (79,3 ± 1,6 г/л) при значительном лейкоцитозе (19,5 ± ± 1,5x10%). Эритропения и анемия, очевидно, являются патогномоничными для начала парвовирусного энтерита, что обусловлено негативным влиянием продуктов распада и бурного размножения парвовируса в пейеровых бляшках и красном костном мозге. Повышенный гематокрит указывает на обезвоживание организма и необходимость проведения регидратационных мероприятий (62,3 ± 1,1 %). Значительный лейкоцитоз (19,5 ± 1,5><109/л) свидетельствовал о включении и состоятельности на этом этапе защитно-приспособительных реакций организма. Полученные данные противоречат сложившемуся мнению о том, что начало парвовирусного энтерита сопровождается лейкопенией. Однако, в ходе дальнейшего исследования (4-5-е сутки) это мнение подтвердилось. СОЭ повысилась до 29,8 ± 0,3 мм/ч. Кроме того, отмечался сдвиг регенеративного ядра лейкограммы влево (юных - 3,3 ± 0,3 %, палочкоядерных нейтрофилов - 8,2 ± 0,3 %, базофилов - 2,1 ± 0,2 %). Остальные показатели оставались в пределах физиологической нормы.

При биохимическом исследовании крови отмечали двукратное повышение содержания трансфераз (АЛТ - 103,2 ± 1,3 U/L, ACT - 88,3 ± 2,3 U/L); кроме того, незначительную гиперкальцемию (4,3 ± 0,5 ммоль/л) и гипер-фосфатемшо (5,6 ± 0,4 ммоль/л). При этом кальций-фосфорное отношение было нарушено (0,8). Следует отметить, что уровень щелочной фосфатазы был повышен (332,8 ± 8,9 U/L). Данное состояние можно объяснить как и возрастными особенностями собак (возраст 2-6 мес.), так и начинающимися нарушениями процессов реадсорбции кальция в кишечнике.

11

Обращает на себя внимание более чем двукратное повышение уровня лактатдегидрогеназы (753,8 ± 8,4 и/Ь), что характеризует, очевидно, начало яркого воспалительного процесса в стенках кишечника.

Динамика гематологических и биохимических показателей организма

при лечении больных парвовирусным энтетри гом собак Схема лечения больных парвовирусным энтеритом собак включала в себя Гискан-5, 0,9%-й физиологический раствор, цефтриаксон, метрогил, преднизолон, но-шпу, контрикал, омепразол. При снижении уровня общего белка ниже нормы (55 г/л) дополнительно вводили инфезол-40.

В комплекс лечебных мероприятий животным первой (опытной) группы в схему лечения для снятия интоксикации, стабилизации мембран клеток и повышения резистентности организма включили гамавитфорте, а собакам второй (контрольной) - гамавит в дозах, рекомендованных производителем.

Уже через сутки терапии при гематологическом исследовании крови у собак опытной (первой) группы отмечали повышение содержания эритроцитов с 3,3 ± 0,6 до 3,8 ± 0,2x1012/л, ослабление лейкоцитоза с 19,5 ± 1,5 до 10,6 ± 1,6хЮ9/л, СОЭ - с 29,8 ± 0,3 до 26,3 ± 1,0 мм/ч. Примечательно, что количество гемоглобина продолжало снижаться (79,3 ±1,6 г/л в начале лечения и 71,4 ± 1,1 г/л через сутки терапии). Количество юных нейтрофилов с 3,3 ± 0,3 возросло до 4,0 ± 0,9 %. Гематологические изменения крови у собак второй (контрольной) группы выглядели следующим образом. Усилились эритропения (3,3 ± 0,6><1012/л до лечения и 3,0 ± 0,2х1012/л через сутки), анемия (79,3 ± 1,6 г/л до лечения и 72,4 ± 1,3 г/л через сутки) (рис. 5, 6),

Рис.

8 количество эритроцитов (опыт)

I количество эритроцитов (контроль) I гемоглобин (опыт)

Ш гемоглооин

до 1-е 3-й 5-е 7-е гемоглобин

начала сутки сутки сутки сутки (контроль)

лечения лечения лечения лечения лечения 5. Динамика гематологических показателей при лечении больных парвовирусным энтеритом собак (п = 60)

30 25 20 15 10 5 0

Ш количество лейкоцитов (опыт)

Ш количество лейкоцитов (контроль) Ж СОЭ (опыт)

1 СОЭ (контроль)

до 1-е 3-й 5-е 7-е начала сутки сутки сутки сутки лечения лечения лечения лечения лечения Рис. 6. Динамика гематологических показателей при лечении больных парвовирусным энтеритом собак (п = 60)

На третьи сутки терапии при общеклиническом анализе крови отмечали незначительный эритроцитоз у животных опытной группы (4,3 ± 0,3х1012/л), незначительно возросла СОЭ относительно первых суток терапии (с 26,3 ± ± 1,0 до 27,0 ± 0,8 мм/ч). Количество лейкоцитов резко снизилось (в первой группе - 4,9 ± 0,9x10%, во второй 3,8 ± 0,ЗхЮ9/л). Существенных изменений в лейкограмме к этому сроку не наблюдали. Очевидно, значительная лейкопения обусловила иммунодепрессию и развившиеся в последствие клинические признаки.

При исследовании крови на 5-е сутки лечения у животных опытной (первой) группы отмечали нормализацию содержания эритроцитов и г емоглобина (5,6 ± 0,7><1012/л и 120,8 ± 3,3 г/л соответственно). К указанному сроку у собак второй группы эти показатели составили 4,0 ± 0,9хЮ12/л и 98,3 ± ± 2,1 г/л соответственно.

Лейкопения в обеих группах продолжалась. Однако следует отметить, что у собак второй группы эти показатели снизились до 1,5 ± 0,4x109/л, что в 4 раза ниже нормы. Очевидно, это стало причиной гибели одной собаки из второй группы.

В анализе крови собак первой группы на 7-е сутки лечения отмечали повышение содержания лейкоцитов до нижней границы физиологической нормы (6,4 ± 0,3х109/л), в то время как во 2-й группе этот показатель составлял 4,6 ± 0,2x109/л при уровне эритроцитов и гемоглобина в пределах физиологической нормы в обеих группах.

При биохимическом исследовании (рис. 7) через трое суток терапии отмечали нормализацию уровня трансфераз в обеих группах. Следует отметить, что во второй группе эти показатели находились на верхних границах физиологической нормы (АЛТ - 60,2 ± 2,7 U/L, ACT - 56,8 ± 1,2 U/L). Содержание кальция через трое суток составило 2,7 ± 0,2 ммоль/л в обеих группах, фос-

фора в первой группе - 2,4 ± 0,4 ммоль/л, во второй - 2,6 ± 0,4 ммоль/л. При этом нормализовалось кальций-фосфорное отношение. Уровень щелочной фосфатазы оставался высоким (в первой группе - 339,2 ± 6,1 и/Ь, во второй -487,4 ± 7,6 1_Г/Ь). Очевидно, это связано с процессами катаболизма растущего организма (возраст щенков 2-6 мес.). Уровень ЛДГ в первой группе снизился до 487,5 ± 9,2 и/Ь, во второй - до 628,3 ± 10,9 и/Ь. Столь значительное снижение уровня ЛДГ у животных второй группы можно считать хорошим диагностическим показателем, указывающим на ослабление воспалительных явлений в кишечнике. Содержание общего белка в крови животных первой группы повысилось до 53,6 ± 0,5 г/л, во второй - до 50,2 ± 0,6 г/л. Однако, следует отметить, что клинически начало выздоровления к этому сроку не наблюдали. Более того, через 5 суток терапии констатировали отсутствие рвоты у собак опытной (первой) группы и ослабление этих же симптомов у животных контрольной (второй). По-прежнему у животных отсутствовали аппетит и жажда.

$ сделочнаяфосфоггш (опыт)

* щелочная фосфата (.коягроль)

ш АЛТ (опыт)

»АЯТ (юттроль)

* ДСГ (опыт)

ш АСТ (ктгродь)

■ общий белок ( опыт)

8 общий белок (контроль') лечения лечения леченая лечения лечения

Рис. 7, Динамика некоторых биохимических показателей крови при лечении больных парвовирусным энтеритом собак (и = 60)

Биохимические исследования крови к этому сроку лечения (5-е сутки) показали, что у собак первой группы нормализовалось содержание кальция и фосфора (2,6 ± 0,3 ммоль/л и 1,6 ± 0,1 ммоль/л в первой и 2,8 ± 0,4ммоль/л и 3,2 ±1,2 ммоль/л во второй группах соответственно). В первой (опытной) группе пришло в соответствие кальций-фосфорное отношение, снизился уровень ЩФ (167,7 ± 5,3 U/L), тогда как в контрольной группе ее уровень составлял 418,3 ± 6,4 U/L. Незначительно уменьшился уровень а-амилазы (1313,8 ± 8,5U/L в первой группе). Остальные показатели (ACT, АЛТ, ЛДГ, липаза) находились в пределах физиологической нормы у собак первой (опытной) группы.

У собак контрольной группы также отмечали тенденцию к нормализации содержания основных биохимических показателей. Однако возросший уровень а-амилазы (1853,2 ± 7,9 1Т/Ь) потребовал значительного увеличения дозы ингабитора протеаз, блокатора Н2 гистаминовых рецепторов, а также блокатора протонной помпы. Остальные показатели находились либо около, либо в пределах физиологической нормы.

Через 7 суток терапии в первой группе животных отмечали появление аппетита, приема воды, исчезновение диареи; во второй группе - только отсутствие рвоты и ослабление диареи.

При биохимическом анализе крови животных опытной группы отмечали нормализацию содержания основных биохимических показателей.

У собак второй группы по-прежнему отмечался значительно повышенный уровень ЩФ - 306,8 ± 6,7 и/Ь, АСТ - 66,2 ± 0,7 и/Ц АЛТ - 70,5 ± ±1,1 и/Ь. Содержание а-амилазы находилось на верхнем уровне нормы 1518,8 ± 4,3 и/Ь, что свидетельствует о сохраняющихся воспалительных процессах и интоксикации организма.

Динамика иммунологических показателей организма собак Динамика иммунологических показателей при лечении больных бабезиозом собак

Состояние иммунной системы также оценивали на третьи сутки болезни (до лечения) через 1, 3, 5 и 7 суток терапии (табл. 1). Гипсрпротеинемия (83,4 ± 0,2г/л) на 3-й сутки болезни у больных бабезиозом собак, очевидно развилась вследствие отчасти дегидратации при потере некоторого количества внутрисосудистой жидкости, активации иммунологического ответа, развития гепатита, спровоцированного бабезиями и продуктами распада эритроцитов и кровепаразитов. На третьи сутки болезни количество 1§А снизилось (2,0 ± 0,5 г/л), а 1"М и повышалось и продолжало расти (ЫМ -11,9 ± 1,0 г/л и - 22,6 ± 1,3 г/л), что характерно для активации гуморального иммунного ответа на антигены бабезий.

Влияние бабезий вызвало ослабление функций клеточного иммунитета. На третьи сутки болезни количество Т- и В-лимфоцитов было снижено (Т-лимфоциты - 38,3 ± 1,2 %, В-лимфоциты - 11,3 ± 1,2 %), рис. 8.

На 5-е сутки лечения показатели 1§М и ТцО оставались еще высокими (1оМ - 15,6 ± 1,6 г/л, - 19,4 ± 0,9 г/л в опытной группе, 1§М - 13,2 ± 1,8 г/л,

- 18,3 ± 1,3 г/л в контрольной).

Показатель 1§А продолжал увеличиваться, что говорит об активизации защитных функций слизистых оболочек (3,4 ± 0,8 г/л в опытной и 3,0 ± 0,5 г/л в контрольной группах).

У животных опытной группы, которьм вводили гамавитфорге, к 7-м суткам лечения показатели общего белка были близки к нормам (78,2 ± 3,1 г/л), тогда как у животных второй (контрольной) группе он оставался высоким (81,9±1,6г/л).

Таблица 1

Динамика иммунологических показателей крови у больных бабезиозом собак в процессе лечения (и = 68,М±т,'Р< 0,001, "Р <0,005, "><0,05,"" Р< 0,001)

Показатель Референтные величины 1 -е сутки лечения 3-й сутки лечения 5-е сутки лечения 7-е сутки лечения

опыт контроль опыт контроль опыт контроль опыт контроль

Белок общий, г/л 50,877,2 87,3± ±6,4* 88,6± ±0,5* * 82,6± ±4,2* 86,1± ±0,6 *** 80,6± ±2,0* 85,4± ±1,7** 78,2± ±3,1 81,9± ±1,6*

СРБ, мг/л 0,9-1,1 14,2±0,5 *** 17,2± ±1,3 7,4± ±2,0 13,2± ±2,2 **** 7,0± ±1,2 **** 11,0± ±0,8 **** 4,4± ±0,6*** 9,2± ±1,3 ****

Т- лимфоциты, % 40,3 38,6±2,2 38,1± ±1,3 39,1± ±0,9 39,2± ±1,1 39,2± ±2,0 39,6± ±3,1 40,1± ±1,0 39,0± ±1,3

В- лимфоциты, % 12,6 11,2±0,8 11,0± ±1,3 12,6± ±2,6 11,3± ±3,4 12,8± ±1,8 11,9± ±0,9 12,2± ±1,0 11,9± ±0,8

^ А, г/л 2,7 2,0± 0,09 ** 2,0± ±1,4 ** 2,8± ±0,5 2,3± ±0,3** 3,4±0,8 3,0± ±0,5** 3,8±0,4 * 3,3± ±1,7**

М, г/л 11,1 12,6±0,4 * 12,1± ±0,8* 14,3± ±0,9 12,0± ±0,9* 15,6± ±1,6 13,2± ±1,8* 15,0± ±3,2 **** 14,5± ±1,7

^О, г/л 13,5 21,8±0,2 25,4± ±1,2 20,1± ±1,2 **** 22,0t ±0,3 •f* *fs Я« *f* 19,4± ±0,9 18,3± ±1,3 18,7± ±0,8 17,4± ±3,1 ****

Альбумины, г/л 23-34 25,1 ±0,8 27,2± ±1,4 24,8± ±0,9 26,1± ±1,8 22,3± ±1,6 28,2± ±0,8 29,6± ±1,4 32,3± ±1,6

Глобулины, г/л 27-44 48,0± ±2,6* 44,2± ±0,5 50,4± ±1,8 *** 46,8± ±3,3* 51,3± ±2,1*** 46,2± ±3,4* 44,2± ±0,5 40,4± ±0,8

Соотношение Ал ./Гл. 0,7-1,9 0,5 0,6 0,5 0,5 0,4 0,6 0,7 0,8

С-реактивный белок (СРБ) на 3-й сутки болезни присутствовал в сыворотке крови в значительном количестве (10,8 ± 1,5 мг/л) (рис. 9). Но к 7-му дню лечения у собак опытной группы его количество заметно снизилось (4,4 ± 0,6 мг/л), что указывает на ослабление воспалительных процессов, тогда как у животных контрольной группы, не получавших гамавитфорте, динамика изменения этого показателя была незначительной (9,2 ± 1,3 мг/л).

45 40 ?5 30 25 20

1-е

3-я

начала сутки сутки лечения лечения лечения лечения лечения

Рис. 8. Динамика Т-, В-лимфоцитов и иммуноглобулинов у больных бабезиозом собак в процессе лечения (и = 68)

и ЦАА'-пыт4!

А (контроль) ш 1§М(опыт)

8 (1 (опыт) ш ^ й (контроль) ш Т-лимфоднты (опыт) *Т-явмфо«нш

¡'контроль! « В-шшфоцшы ¡опыт)

В-.шшфодиты (контроль)

до 1-е 3-й 5-е. 7-е начала сутки сутки сутки сутки лечения лечения лечения лечения лечения

ш Белок общин

(опыт) * Белок общий

( контроль! Ш СРБ (опыт)

& СРБ (.контроль)

ш Альбумины

(опыт) ® Альбумины (контроль-) я Глобулины (ОПЫ г)

ШГлобулины (юнтрояь)

Рис. 9. Динамика иммунологических показателей крови у больных бабезиозом собак в процессе, лечения(п = 68)

На фоне лечения положительную динамику отмечали в обеих группах. Однако в опытной группе к концу курса лечения (7-е сутки) наблюдалась нормализация этих показателей (Т-лимфоциты - 40,1 ± 1,0 %, В-лимфоциты -12,2 ± 1,0 %), тогда как в контрольной группе оба показателя к этому времени оставались ниже нормы. Это, на наш взгляд, еще раз показывает положи-

тельную динамику применения гамавитфорте как иммуномодулятора и нормализацию функций гуморального и клеточного звеньев иммунитета.

Динамика иммунологических показателей при лечении больных парвовирусным энтеритом собак

Действие вируса вызвало ослабление функций как клеточного, так и гуморального звеньев иммунитета. В частности, были существенно снижены все показатели работы иммунной системы (количество Т- и В-лимфоцитов, иммуноглобулинов) (табл. 2).

Повышение к 5-м суткам терапии уровня Т-лимфоцитов в первой группе с 31,2 ± 1,3 до 38,7 ± 0,2 %, В-лимфоцитов с 2,4 ± 0,5 до 8,7 ± 0,6 % свидетельствует об активации гамавитфорте Т- и В-клеточных звеньев иммунитета (рис. 10).

45 ,......................-......................................................................................... « ig А (ошлт)

1...................................................................................ж.............. 1 " ss Ig А ( контроль)

I йй is II 11 BSJg Ivi (ОПЫТ)

?.<> - j............щ..................'||...................щ...................1|..................¡в.....

i............Ш...................1|...................Щ..................Щ..................Щ..... !ss Xg ivi (K\-3trpOЯ): )

: Щ Щ Ц| Н Щ

:......li................||........ Ц;.................fg.............f! s Xj: О ¡'оаыг'г

Si Ig О (контроль' * T-лимфоциты («И i

Si 1' 1 I 111 1 Ш1 .

Зй Т-янмфодгпы до 1-е 3-я 5-е 7-е (коя i p«!ii:.)

начала сутки сутки сутки сутки М В-лимфоииты <вИМТ>

y.c.'.ic Kii'j: лечения лечения лечения псченгос

й В- ян ыфоцщы

Рис. 10. Динамика Т-, В-лимфоцитов и иммуног- 1'Ь<!Н',",Л1*-> добулинов у больных парвовирусным энтеритом собак в процессе лечения (и = 60)

В крови животных исследуемых групп до лечения С-реактивный белок присутствовал в сыворотке крови в значительных количествах (11,3 ± 0,5 мг/л) и на начало терапии продолжал увеличиваться (на первые сутки терапии 12,0 ± 0,3мг/л в опытной группе и 14,9 ± 0,2 мг/л в контрольной). К 7-м суткам лечения у собак первой группы его содержание снизилось (9,0 ±0,1 мг/л), что указывает на ослабление воспалительных процессов, тогда как у животных второй группы динамика снижения была незначительной (до 10,6 ± ± 0,9 мг/л).

У животных первой 1руппы к 7-м суткам лечения показатели общего белка (68,3 ± 0,8 г/л), альбуминов (29,6 ± 0,8 г/л), глобулинов (29,7 ± 0,4 г/л) нормализовались; у животных 2-й группы они были заметно снижены (белок - 61,3 ± 0,6 г/л, альбумины 21,9 ± 0,6 г/л) (рис. 11).

is ю

Динамика иммунологических показателей крови больных парвовирусным энтеритом собак в процессе лечения (п = 60, М± т, ><0,001, "Р< 0,005, "><0,05)

Показатель Ре-фе-рен тны е вели-чины 1 -е сутки лечения 3-й сутки лечения 5-е сутки лечения 7-е сутки лечения

3 в о л к о о, ь X о к н 2 В о ►о с; о о. н В о и н 3 в о л ч о & § н 13 в о л п о & S и

Белок общий, г/л 50,8 77,2 49,0± ±1,6*** 49,6± ±0,5* * 53,6± ±4,2 50,2± ±0,6 59,6± ±0,9** 58,6± ±0,6 68,3± ±0,8 61,з± ±0,6*

СРБ, мг/л 0,91,1 12,0± ±0,3 14,9± ±0,2 13,3± ±0,9 13,0± ±0,9 11,6± ±0,8 13,1± ±1,1 9,0± ±0,1 10,6± ±0,9

Т-лим-фоци-ты, % 40,3 31,8± ±0,9 31,1± ±1,6 34,6± ±0,8 33,0± ±1,9 38,7± ±0,2 34,2± ±0,6** 40,1± ±1,1 37,1± ±0,9

В-лим-фоци-ты, % 12,6 2,6±0,2 3,2± ±0,9* 6,4± ±0,7 4,7±0,1 8,7± ±0,6** 7,1± ±0,9** 12,3± ±0,1 9,0± ±0,5 **

Г8А, г/л 2,7 1,0± ±0,09 ±0,05 1,9± ±0,05* 1,5± ±0,01 2,6± ±0,7 *** 1,7± ±0,1 2,6± ±0,3 2,3± ±0,3

18М, г/л 1,11 0,9± ±0,06 0,7± ±0,05 0,9± ±0,01 ** 0,9± ±0,05 *** 1,2± ±0,05 1,0± ±0,01* 1,6± т 1,1±

180, г/л 13,5 9,7± ±0,4** 8,3± ±0,2 9,7± ±0,4 8,7±0,3 9,8± ±0,2* 8,8± ±0,1* 11,3± ±0,4* 9,6± ±1,3

Альбумины, г/л 2334 16,2± ±0,9 15,3± ±1,3* 16,8± ±0,9 16,0± ±1,2 21,9± ±0,5 19,9± ±0,3 29,6± ±0,8 21,9± ±0,6

Глобулины, г/л 2744 20,8± ±0,7 19,4± ±0,2 22,9± ±0,6* 21,2± ±0,5 26,1± ±0,2 25,6± ±0,8** 29,7± ±0,4* 28,8± ±0,9

Соотношение Ал./Гл. 0,71,9 0,8 0,8 0,7 0,7 0,8 0,8 1,0 0,8

К конну курса лечения (7-е сутки) отмечали нормализацию большинства показателей естественной резистентности у собак опытной группы (Т-лимфоциты - 40,1 ± 1,1 %, В-лимфоциты - 12,3 ± 0,1 %, 1оА - 2,6 ± 0,3 г/л, ^М - 1,6 ± 0,1 г/л), тогда как в контрольной (руппе к указанному времени они оставались ниже нормы (Т-лимфоциты - 37,1 ±0,9 %, В-лимфоциты -9,0 ± 0,5 %, - 2,3 ± 0,3 г/л, 1§М - 1,1 ± 0,1 г/л). Таким образом, можно сделать вывод, что в организме собак сохраняются признаки иммунодепрес-сии или вторичного иммунодефицита.

60 50 40 30 20 10 О

ДО

начала лечения

I -е 3-й сутки сутки чече 1п):'л: лечения

сутки сутки лечения яечешм:

« Веяок общий (опыт )

ж Белок общий

('контроль) ш СРВ (.опыт)

* СРВ (хошрояь)

ш Аяьбу минм (опыт)

* Альбумины (хонтро.иь)

ш Глооуппны (опыт)

® Х""лобу::шны

<,КС>ИТрОШ:1>

Рис. 11. Динамика иммунологических показателей крови у больных парвовирусным энтеритом собак в процессе лечения (п = 60)

Экономическая эффективность применения гамавитфорте при лечении больных бабезиозом и парвовирусным энтеритом собак

Оценивая экономическую эффективность предложенного способа лечения, подсчитывали его себестоимость, в которую включили стоимость препаратов и материалов, но без учета стоимости работы ветеринарного персонала.

Сумма за лекарства на весь курс лечения при бабезиозе собаке массой 10 кг в опытной группе составила 2666 руб., в контрольной - 4410 руб.

Экономическая эффективность при лечении данной болезни составляет 4410 - 2666 = 1744 руб., или 1,65 раза.

При терапии больных парвовирусным энтеритом собаке массой 10 кг сумма за лекарства на весь период лечения в опытной группе составляет 4286 руб., тогда как в контрольной - 5236 руб. Экономическая эффективность при лечении больных парвовирусным энтеритом собак составила 5236 - 4286 = 950 руб., или 1,2 раза.

Таким образом, можно заключить, что данное лекарственное средство отечественного производства вполне конкурентоспособно.

ВЫВОДЫ

1. Снижение уровня гемоглобина при бабезиозе до 74,7 ± 0,2 г/л, а при парвовирусном энтерите до 79,3 ±1,6 г/л, количества эритроцитов до 3,3 ± ± 0,1 хЮ12/л при бабезиозе и до 3,3 ± 0,6х1012/л при парвовирусном энтерите,

гематокрита до 28,6 ± 0,2 % при бабезиозе и до 62,3 ± 1,1 % при парвовирус-ном энтерите, сдвиг ядра лейкограммы влево, эозинофилия (11,2 ± 0,2 и

10.2 ± 0,3 % соответственно), снижение сегментоядерных клеток (39,1 ± 0,2 и 54,5 ± 0,6 %), лимфоцитоз (31,6 ± 0,2 %) и моноцитоз (13,6 ± 0,2 %) при бабезиозе свидетельствуют об угнетении гемопоэза и нарушении лейкопоэза.

2. Падение уровня Т-лимфоцитов при бабезиозе до 38,3 ± 1,2 %, а при парвовирусном энтерите собак до 31,2 ± 1,3 %, В-лимфоцитов до 11,3 ± 1,2 % и 2,4 ± 0,5 %, IgA до 2,0 ± 0,5 и 1,1 ± 0,05 г/л соответственно, IgM - до 0,9 ± 0,01 г/л и IgG до 9,6 ± 0,5г/л при парвовирусном энтерите доказывает наличие иммунодепрессии.

3. Снижение уровня билирубина на 5-е сутки терапии при бабезиозе до 9,8 ± 0,6 мкмоль/л в опытной группе по сравнению с 14,1 ± 0,8 мкмоль/л в контрольной, ACT - 47,4 ± 0,8 и 51,0 ± 1,4 U/L, АЛТ - 64,8 ± 1,6 и 71,0 ± ± 1,3 U/L, холестерола 6,0 ± 1,4 и 7,3 ± 1,1 ммоль/л соответственно свидетельствует о высоких детоксикационных свойствах гамавитфорте.

4. Снижение на 7-е сутки терапии при парвовирусном энтерите уровня ACT до 45,3 ± 2,9 U/L в опытной группе по сравнению с 66,2 ± 0,7 U/L в контрольной, АЛТ - 52,4 ± 1,8 и 70,5 ±1,1 U/L соответственно подтверждает высокие детоксикационные свойства гамавитфорте.

5. Повышение концентрации в опытной группе Т-лимфоцитов с

38.3 ± 1,2 % перед лечением до 40,1 ± 1,0 % на 7-е сутки терапии в опытной группе, падение СРБ с 10,8 ± 1,5 до 4,4 ± 0,6 мг/л при бабезиозе свидетельствует об активации гамавитфорте клеточного звена иммунитета.

6. Повышение концентрации в опытной группе Т-лимфоцитов с 31,2 ± 1,3 % до 40,1 ± 1,1 % на 7-е сутки терапии в опытной группе, падение СРБ с 11,3 ± 0,5 до 9,0 ± 0,1 мг/л при парвовирусном энтерите доказывает активацию гамавитфорте клеточного звена иммунитета.

7. Повышение содержания В-лимфоцитов в опытной группе на 7-е сутки терапии при бабезиозе с 11,3 ± 1,2 до 12,2 ± 1,0 %, IgA - с 2,0 ± 0,5 до 3,8 ± ±0,4 г/л, IgM - с 11,9 ± 1,0 до 15,0 ± 3,2 г/л свидетельствуют об активации гамавитфорте гуморального звена иммунитета.

8. Повышение содержания В-лимфоцитов в опытной группе на 7-е терапии при парвовирусном энтерите собак с 2,4 ± 0,5 до 12,3 ±0,1 %, IgA - с 1,1 ± 0,05 до 2,6 ± 0,3 г/л, IgM - с 0,9 ± 0,01 до 1,6 ± 0,1 г/л, IgG - с 9,6 ± 0,5 до 11,3 ± 0,4 г/л также говорит об активации гамавитфорте гуморального звена иммунитета.

9. Экономическая эффективность применения гамавитфорте в сравнении с гамавитом на весь курс лечения собаки массой 10 кг составляет: при бабезиозе собак 1744 руб., или 1,65 раза, при парвовирусном энтерите -950 руб., или 1,2 раза соответственно.

Практические предложения

1. В состав комплексной терапии при лечении больных бабезиозом собак для скорейшей нормализации гемопоэза и устранения иммунодепрессии

рекомендуется вводить гамавитфорте в дозе 0,5 мл/1 кг живой массы 2 раза в сутки.

2. При терапии больных парвовирусным энтеритом собак в состав схемы лечения рекомендуется с целью устранения развивающегося вторичного иммунодефицита включать гамавитфорте в аналогичной дозировке.

Список работ, опубликованных по теме диссертации В изданиях, рекомендованных ВАК РФ

1. Чермошенцева, Г. В. Юшнико-биохимическое обоснование эффективности применения гамавитфорте при бабезиозе собак с гепатопривным синдромом / Г. В. Чермошенцева, В. В. Анников // Вестник Саратовского гос-агроуниверситета им. Н.И. Вавилова. - 2011. - № 1. - С. 19-24 (0,4/0,2 печ. л ).

2. Чермошенцева, Г. В. Клинико-биохимическая и иммунологическая оценка эффективности применения гамавитфорте при лечении больных парвовирусным энтеритом собак / Г. В. Чермошенцева, В. В. Анников // Вестник Саратовского госагроуниверситета им. Н.И. Вавилова. - 2012. - № 1. - С. 6467 (0,27/0,13 печ. л.).

В других изданиях

3. Чермошенцева, Г. В. Перспективы применения гамавита форте при лечении больных парвовирусным энтеритом собак / Г. В. Чермошенцева,

B. В. Анников // Вавиловские чтения-2010 : материалы Междунар. науч,-практ. конф. - Саратов, 2010. - Т. 2. - С. 123-125 (0,2/0,1 печ. л.).

4. Чермошенцева, Г. В. Клинико-биохимическая оценка эффективности применения гамавита форте при лечении больных бабезиозом собак с гепатопривным синдромом / Г. В. Чермошенцева, В. В. Анников, И. Г. Мануйлова // Вавиловские чтения-2010 : материалы Междунар. науч.-практ. конф. - Саратов, 2010. - Т. 2. - С. 126-128 (0,2/0,07 печ. л).

5. Чермошенцева, Г. В. Иммунологическая оценка эффективности применения гамавита форте при лечении больных бабезиозом собак с гепатопривным синдромом / Г. В. Чермошенцева, В. В. Анников // Ветеринарная медицина : материалы Междунар. науч.-практ. симпозиума. - Саратов, 2010. -

C. 285-290 (0,33/0,17 печ. л.).

6. Чермошенцева, Г. В. Иммунологические показатели эффективности применения гамавита форте при лечении больных бебезиозом собак с гепатопривным синдромом / Г. В. Чермошенцева, В. В. Анников, Л. В. Анникова // Vedecky pokrok па prelomu tysyachalety - 2011 : Materialy VII mezinarodni ve-decko-prakticka conference. - Praha, 2011. - P. 55-59 (0,33/0,1 печ. л.).

7. Чермошенцева, Г. В. Иммунологическая оценка эффективности применения гамавита форте при лечении больных парвовирусным энтеритом собак / Г. В. Чермошенцева, В. В. Анников // Современные тенденции развития медицины, ветеринарии и фармакологии: V Междунар. науч. конф.; сб. науч. работ. - Украина; Великобритания, заочно-интерактивная форма, 2011 (0,13/0,07 печ. л.).

8. Чермошенцева, Г. В. Клинико-биохимическая оценка эффективности применения гамавита форте при лечении больных бабезиозом собак с гепа-топривным синдромом / Г. В. Чермошенцева, В. В. Анников // Актуальные проблемы ветеринарии и животноводства : материалы Межрегион, науч.-пракг. конф. - Самара, 2010. - С. 7-12 (0,4/0,2 печ. л.).

9. Чермошенцева, Г. В. Иммунологическое обоснование эффективности применения гамавита форте при бабезиозе собак / Г. В. Чермошенцева, В. В. Анников // Современные проблемы устойчивого развития агропромышленного комплекса России : материалы восьмой Всерос. дистанционной на-уч.-практ. конф. студентов, аспирантов и молодых ученых. - Поселок Пер-сиановский, 2011. - С. 72-75 (0,27/0,13 печ. л.).

10. Чермошенцева, Г. В. Методические положения по комплексному лечению больных бабезиозом и парвовирусным энтеритом собак с использованием современных иммуномодулирующих препаратов / Г. В. Чермошенцева, В. В. Анников // ОВМ РАСХН. - Саратов, 2012. - С. II (0,73/0,37 печ. л.).

Формат 60x84 1/16. Бумага офсетная. Подписано в печать 17.02.2012

Гаршпура Times. Печать Riso. _Усл. печ. л. 1,00. Тираж 100 экз. Заказ 0102

Отпечатано с готового оригинал-макета в типографии ИП «Экспресс тиражирование» 410005, Саратов, Пугачёвская, 161, офис 320 » 27-26-93

Текст научной работыДиссертация по сельскому хозяйству, кандидата ветеринарных наук, Чермошенцева, Галина Владимировна, Саратов

61 12-16/оЭ

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования Саратовский государственный аграрный университет имени Н.И. Вавилова

На првах рукописи

ЧЕРМОШЕНЦЕВА Галина Владимировна

КЛИНИКО-МОРФОЛОГИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ ПРИМЕНЕНИЯ ГАМАВИТФОРТЕ ПРИ ЛЕЧЕНИИ БОЛЬНЫХ БАБЕЗИОЗОМ И ПАРВОВИРУСНЫМ

ЭНТЕРИТОМ СОБАК

06.02.01. - Диагностика болезней и терапия животных, патология, онкология и морфология животных

Диссертация на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Научный руководитель:

доктор ветеринарных наук, профессор

Анников Вячеслав Васильевич

Саратов -2012

Содержание

стр.

ВВЕДЕНИЕ..................................................................................5

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ..................................................13

1.1. Клинико - морфологические и иммунологические характеристики организма больных бабезиозом собак и методы лечения

...........................................................................................13

1.1.1. Клинико-морфологические изменения в организме больных бабезиозом собак................................................................................13

1.1.2. Иммунологические изменения в организме больных бабезиозом собак.....................................................................................20

1.1.3. Методы лечения больных бабезиозом собак.....................24

1.2. Клинико - морфологические и иммунологические характеристики организма больных парвовирусным энтеритом собак и тактика лечения.................................................................................32

1.2.1. Клинико-морфологические изменения в организме больных парвовирусным энтеритом собак.................................................32

1.2.2. Иммунологические изменения в организме собак, больных парвовирусным энтеритом........................................................37

1.2.3. Методы лечения больных парвовирусным энетеритом собак.......................................................................................40

1.3. Теоретические основы для использования гамавитфорте при

бабезиозе и парвовирусном энтерите собак......................................44

Глава 2. ОБЪЕКТ, МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

ИССЛЕДОВАНИЙ..................................................................49

2.1. Структура опыта................................................................49

2.2. Методы исследования...........................................................51

2.2.1. Клинический....................................................................51

2.2.2. Визуально -диагностический (УЗИ)....................................51

2.2.3. Гематологический...........................................................52

2.2.4. Иммунохроматографический.............................................53

2.2.5. Биохимический.................................................................54

2.2.6. Иммунологический.........................................................54

2.2.7. Серологический..............................................................55

2.2.8. Статистический..................................................................56

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ..............57

3.1.Динамика гематологических и биохимических показателей при лечении больных бабезиозом и парвовирусным энтеритом собак.......................................................................................57

3.1.1. Клинико-гематологические и биохимические показатели организма больных бабезиозом собак..........................................57

3.1.2. Динамика гематологических и биохимических показателей при лечении больных бабезиозом собак.................................................61

3.1.3. Клинико-гематологические и биохимические показатели организма больных парвовирусным энтеритом собак......................68

3.1.4. Динамика гематологических и биохимических показателей организма при лечении больных парвовирусным энтеритом собак.......................................................................................71

3.2. Динамика иммунологических показателей организма собак...........78

3.2.1. Динамика иммунологических показателей при лечении больных бабезиозом собак...........................................................................78

3.2.2. Динамика иммунологических показателей при лечении больных парвовирусным энтеритом собак......................................82

3.3. Экономическая эффективность применения гамавитфорте при

лечении больных бабезиозом и парвовирусным энтеритом

собак.......................................................................................86

Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ СОБСТВЕННЫХ

ИССЛЕДОВАНИЙ..................................................................88

ВЫВОДЫ.................................................................................97

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ........................................................99

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ.........................................................100

ПРИЛОЖЕНА.....................................................................122

Введение

На распространение болезней собак оказывают влияние социально-экономические факторы (расширение деловых и международных связей, туризм, торговля продуктами питания и животными), близость мегаполисов с многомиллионным населением и процессами активной миграции (внешней, маятниковой, сезонной).

В настоящее время парвовирусный энтерит входит в группу пяти самых распространённых инфекционных болезней собак России [113]. Болезнь сопровождается сильной лейкопенией, что ведет к иммунному дисбалансу и, как следствие, развитию вторичных патологий, нередко приводящих к летальному исходу [106].

Бабезиоз собак в последнее время также приобретает массовый характер и наносит существенный ущерб здоровью животных, а развивающиеся при этом вторичные иммунодефицитные состояния также обуславливают повышенную восприимчивость организма к бактериальным и вирусным инфекциям [41,43, 161, 174, 179, 190].

Анализ обобщенных литературных данных свидетельствует о ведущей роли иммунологических нарушений в механизмах возникновения и развития многих патологий у животных [16, 32, 51, 111, 158, 186].

С учетом роста численности собак, значительного увеличения доли породистых животных, являющихся ценностью для владельцев, возникает острая необходимость в повышении эффективности лечения больных с развивающимися вторичными иммунодефицитными состояниями собак с помощью современных отечественных иммуномоделирующих средств [15].

Предлагаемый компанией ЗАО «ГамаВетФарм» комплексный препарат Гамавитфорте, который содержит в качестве действующих веществ: интерферон альфа-2Ь человеческий рекомбинантный, среду 199 и воду для

инъекций, призваный решить проблему вторичного иммунодефицита. Гамавитфорте содержит физиологически сбалансированную смесь 20 аминокислот, 17 витаминов, фрагментов нуклеиновых кислот, важнейшие минералы и микроэлементы, а также экстракт плаценты и иммуностимулятор (нуклеинат натрия). In vitro установлено, что благодаря этому составу, гамавит форте оказывает мощное общеукрепляющее и трофическое действие на организм, стимулирует неспецифический иммунитет и кроветворение, способствует снятию интоксикации, нормализует кислотно-щелочной баланс, биохимические показатели и формулу крови, снимает последствия стресс-реакции и окислительного стресса.

Иммуномодулирующее действие интерферона альфа-2Ь человеческого рекомбинантного в составе гамавитфорте включает воздействие на различные элементы иммунной системы, стимуляция литической активности клеток - естественных киллеров, специфических цитотоксичных Т-лимфоцитов и макрофагов в отношении чужеродных клеток, модифицикация синтеза антител В-лимфоцитами.

Нуклеинат натрия стимулирует лейкопоэз, повышает миграцию Т-лимфоцитов и их кооперацию с В-лимфоцитами, усиливает фагоцитарную активность макрофагов.

Пируват натрия связывает взаимопревращения углеводов, белков и липидов, активирует распад жиров, улучшает поступление глюкозы из крови в мышечные ткани. L-глютаминовая кислота, входящая в состав препарата, обезвреживает токсичные азотистые шлаки. Глютаминовая кислота также обладает способностью связывать эндогенный аммиак, накапливающийся в избыточных (токсических) концентрациях при нарушении детоксикационной функции печени. Это позволяет предупредить развитие печеночной комы, а также интоксикацию аммиаком головного мозга. Лизин оказывает терапевтическое воздействие на печень при нарушениях ее функций. Глицин

нормализует состояние нервной системы при стрессах и интоксикациях, а также проявляет свойства детоксиканта при различных интоксикациях. Аргинин способен нормализовать перекисное окисление липидов и активировать репаративные процессы в клетках печени, что приводит к устранению цитолитического синдрома, снижению уровня билирубина, нормализации метаболизма и повышению адаптационных способностей организма. Нуклеинат натрия способствует устранению токсических эффектов лекарственных препаратов [22, 24, 57,75, 79, 88].

По-видимому, сочетанным синергетическим действием этих и других компонентов объясняется исключительно высокая антитоксическая эффективность гамавитфорте - явное снижение признаков интоксикации у больных животных.

Важным показанием для применения гамавитфорте является его антиоксидантная активность (обусловленная, прежде всего, витаминами А, Е и С), способствующая выведению свободных радикалов, предупреждению окислительного стресса и также защищающая организм от поражения токсическими веществами внутреннего и внешнего происхождения [15, 23, 24,75,79,94,113].

Важен гамавитфорте и для восстановления нарушенной при бабезиозе кроветворной функции. Препарат стимулирует эритропоэз, способствует быстрому восстановлению популяции эритроцитов. Цианокобаламин (витамин В12) наряду с фолиевой кислотой (витамин В9) и Ь-глютаминовой кислотой участвует в поддержании гемопоэза, восстановлении деятельности головного мозга, что важно при терапии неврологических осложнений у животных, переболевших бабезиозом и другими инвазивными болезнями. Восстановлению и нормализации метаболизма способствуют, помимо витаминов, экстракт плаценты, нуклеинат натрия. Известна также способность забуференных витаминно-аминокислотных смесей

нормализовать обменные процессы, что также нами было установлено в эксперименте.

При этом в литературе нами не обнаружено данных, подтверждающих вышесказанное предположение. Известны лишь ряд доклинических испытаний этой новой лекарственной формы.

Приведенные выше рассуждения обозначили актуальность и направления настоящей работы.

Цель исследования

На основании клинико-морфологических и биохимических исследований обосновать эффективность применения гамавитфорте при бабезиозе и парвовирусном энтерите собак.

Задачи исследования

1. Выявить клинико - морфологические изменения при бабезиозе и парвовирусном энтерите собак как факторы, способствующие развитию вторичного иммунодефицита.

2. На основании динамики биохимических изменений оценить детоксикационные свойства гамавитфорте.

3. Оценить состояние и динамику клеточного звена иммунитета при использовании гамавитфорте.

4. Оценить состояние и динамику гуморального звена иммунитета при лечении больных бабезиозом и парвовирусным энтеритом собак.

5. На основании клинико - гематологических, биохимических и иммунологических изменений дать рекомендации по применению гамавитфорте.

6. Оценить экономическую эффективность включения в схему терапии

гамавитфорте.

Научная новизна

Впервые:

- определено с помощью исследований количества Т-лифоцитов и С-реактивного белка, что гамавитфорте активизирует клеточное звено иммунитета больных парвовирусным энтеритом и бабезиозом собак;

-установлено на основании исследований количества В-лимфоцитов и иммуноглобулинов А, М, в, что гамавитфорте активизирует гуморальное звено иммунитета больных парвовирусным энтеритом и бабезиозом собак;

- доказано, на основании клинико-гематологических исследований, что гамавитфорте способствует ранней нормализации гемопоэза;

- установлено, на основании биохимических исследований, что гамавитфорте способствует ускорению детоксикации организма больных бабезиозом и парвовирусным энтеритом собак.

Теоретическая значимость

Полученные данные расширяют представление о клинико-морфобиохимических изменениях при парвовирусном энтерите и бабезиозе собак, особенностях развивающегося иммунного дисбаланса и механизме коррекции возникающих осложнений, открывают новые возможности для научно-обоснованного подхода к коррекции и профилактики возникающих вследствие снижения резистентности осложнений. Разработанная технология лечения предусматривает наряду с коррекцией водно-солевого баланса быстрое устранение развивающегося иммунного дисбаланса путем включения в схему терапии комплексного полиаминокислотного препарата.

Практическая значимость

Результаты гематологических, биохимических и иммунологических исследований легли в основу положения о возможности устранения и профилактики иммунного дисбаланса, развивающегося вследствие парвовирусного энтерита и бабезиоза собак.

Результаты исследований используются при чтении лекций и проведении лабораторно-практических занятий на кафедре «Эпизоотология», «Паразитология и инвазионные болезни» для студентов специальности 111801 - Ветеринария ГОУ ВПО «Российский Университет Дружбы Народов»; «Эпизоотология», «Анатомия», «Терапия и клиническая диагностика с рентгенологией» ФГБОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины» им. Н. Э. Баумана для студентов факультета ветеринарной медицины; «Терапия, клиническая диагностика, фармакология и радиобиология» ФГБОУ ВПО «Саратовский государственный аграрный университет» им. Н. И. Вавилова; а также в практической работе ветеринарных врачей г. Москвы, г. Пензы, г. Волгограда, г. Саратова, Саратовской области.

Разработаны «Методические положения по комплексному лечению больных бабезиозом и парвовирусным энтеритом собак с использованием современных иммуномодулирующих препаратов», рассмотренные и одобренные 20 октября 2011 года на секции "Ветеринарная биотехнология" ОВМРАСХН.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Особенности динамики клинико-морфо-биохимических изменений при лечении собак, больных бабезиозом и парвовирусным энтеритом.

2. Состояние клеточного звена иммунитета при использовании гамавитфорте.

3. Состояние гуморального звена иммунитета при использовании гамавитфорте.

4. Терапевтическая эффективность применения гамавитфорте.

Связь исследования с научной программой

Диссертация выполнена в рамках научно-исследовательской работы в соответствии с планом НИР ФГБОУ ВПО «Саратовский ГАУ им. Н. И. Вавилова», регистрационный номер 313-С от 09.03.2010 г.

Апробация работы и публикации результатов исследований

Основные положения диссертационной работы отражены в итоговых отчетах кафедры паразитологии, эпизоотологии и ВСЭ Саратовского государственного аграрного университета им. Н. И. Вавилова за 2009-2011г.г. Материалы диссертации доложены и обсуждены на конференциях профессорско - преподавательского состава и аспирантов Саратовского государственного аграрного университета им. Н. И. Вавилова (2010-2011гг). А также на 7-ой и 8-ой Всероссийских научно-практических конференциях «Современные проблемы устойчивого развития агропромышленного комплекса России» (г. Ростов-на-Дону, 2010 г.); межрегиональной научно -практической конференции «Актуальные проблемы ветеринарии и животноводства» (г. Самара, 2010г.); международном научно - практическом симпозиуме, (г. Саратов, март 2011 г); У-ой международной научно-практической конференции «Современные тенденции развития медицины» (Одесса (Украина) и Лондон (Великобритания) 2011г.); заседании секции «Ветеринарная биотехнология» ОВМ РАСХН (п. Биокомбинат, Щелковский р-н, Московская обл. октябрь 2011 г.).

По материалам диссертации опубликовано 10 печатных работ, в том числе 2 - в журналах, рекомендованных ВАК РФ. Общий объем работ составляет 3,26 п.л., из них 1,54 п.л. принадлежат лично автору.

Объем и структура работы

Рукопись диссертации состоит из введения, четырех глав, выводов, практических предложений, списка литературы и приложений. Изложена на 122 страницах машинописного текста. Приложения содержат сведения о проделанной работе. Иллюстрирована - 20 рисунками, 14 - таблицами. Список литературы включает - 205 источников, из них отечественных - 123, зарубежных - 82.

Глава 1. Обзор литературы 1.1. Клинико - морфологические и иммунологические характеристики организма больных бабезиозом собак и методы лечения 1.1.1. Клинико-морфологические изменения в организме больных бабезиозом собак

Бабезиоз (пироплазмоз) - это протозойное заболевание, протекающее как остро, так и хронически, характеризующееся лихорадкой, явлениями анемии, желтухи и гемоглобинурии [66]. Болезнь распространена повсеместно.

Возбудитель данного заболевания - Babesia canis, реже B.gibsoni, относящиеся к семейству Babesiidae Poche [20, 34, 48,125, 137].

Часто инвазия В. gibsoni по клиническому течению напоминает аутоиммунную гемолитическую анемию или тромбоцитопению. По клиническому течению инвазия, вызванная B.gibsoni, может протекать как сверхострое, острое и хроническое заболевание [11, 13, 41, 48, 91, 133]. Сверхострое течение заболевания встречается редко и в основном развивается у щенков, при этом наступает быстрая смерть без каких-либо клинических проявлений. Предполагается, что в таких случаях ще