Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Изучение роста, морфогенеза культуры клеток полыни гладкой и синтеза в ней биологически активного сесквитерпеноида арглабина

ВАК РФ 03.00.23, Биотехнология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Аманов, Сержан Бахытулы

Страницы

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МЕТОДОВ КУЛЬТУРЫ КЛЕТОК И ТКАНЕЙ РАСТЕНИЙ В БИОТЕХНОЛОГИИ.

1.1. Каллусообразование, морфогенез и регенерация растений в культуре клеток.

1.2. Синтез вторичных соединений в культуре клеток и тканей растений.

1.2.1. Системы культивирования клеток.

1.2.2. Факторы, влияющие на накопление веществ вторичного метаболизма в культуре клеток растений.

1.3. Биосинтез и биотрансформация терпеноидов в культуре клеток растений.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1. Получение асептических проростков.

2.2. Получение и культивирование каллусной ткани.

2.3. Выделение и культивирование протопластов.

2.4. Оптимизация состава сред.

2.5. Качественное и количественное определение содержания арглабина.

2.6. Определение действия грибкового элиситора на уровень синтеза арглабина.

2.7. Статистическая обработка результатов.

Глава 3. ПРОЦЕССЫ КАЛЛУСОГЕНЕЗА, РОСТА МОРФОГЕНЕЗА И НАКОПЛЕНИЯ АРГЛАБИНА В КУЛЬТУРЕ ТКАНЕЙ ПОЛЫНИ ГЛАДКОЙ.

3.1. Выбор донорных растений и отбор тканевых линий полыни гладкой с повышенным синтезом арглабина.

3.1.1. Определение всхожести семян.

3.1.2. Выбор основных питательных сред для индукции каллусогенеза и дальнейшего роста культуры тканей полыни гладкой.

3.1.3. Зависимость синтеза арглабина культурой каллусной ткани полыни гладкой от продуктивности донорных растений.

3.2. Влияние фитогормонов на индукцию каллусогенеза из эксплантов полыни гладкой различного происхождения.

3.3. Влияние фитогормонов на морфогенез в культуре каллусных тканей полыни гладкой.

3.4. Выделение протопластов полыни гладкой.

3.5. Влияние химических мутагенов на каллусные линии полыни гладкой.

3.6. Получение продуктивных тканевых линий полыни гладкой.

3.7. Морфогенетический потенциал культуры тканей полыни гладкой и его взаимосвязь с биосинтезом арглабина.

3.7.1 .Способность к морфогенезу каллусов из различных эксплантов

3.7.2. Синтез арглабина в каллусных тканях различного происхождения.

Глава 4. ОПТИМИЗАЦИЯ СОСТАВА ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД И УСЛОВИЙ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ДЛЯ РОСТА КАЛЛУСНОЙ ТКАНИ И НАКОПЛЕНИЯ АРГЛАБИНА.

4.1. Влияние состава питательной среды на рост каллусной ткани полыни гладкой и накопление арглабина.

4.1.1. Влияние макроэлементов на прирост биомассы и синтез арглабина.

4.1.2. Влияние витаминов и глицина на прирост биомассы и синтез арглабина.

4.1.3. Влияние углеводного питания на рост каллусов и синтез арглабина.

4.2. Оптимизация внешних условий культивирования каллусов полыни гладкой.

4.2.1. Влияния освещенности на рост и содержание арглабина в каллусах полыни гладкой.

4.2.2. Влияние температуры культивирования на рост и содержание арглабина в каллусной массе.

4.2.3. Влияние рН на ростовой индекс и синтез арглабина в каллу сных культурах полыни гладкой.

4.2.4. Действие грибкового элиситора на уровень синтеза арглабина.

Глава 5. ЛАБОРАТОРНАЯ СХЕМА ПОЛУЧЕНИЯ ТКАНЕВОЙ

БИОМАССЫ ПОЛЫНИ ГЛАДКОЙ.

5.1. Описание технологической схемы.

Технологический процесс 1. Стерилизация поверхности семян.

Технологический процесс 2 Получение асептических проростков.

Технологический процесс 3 Получение эмбриогенного каллуса.

Технологический процесс 4 Наращивание каллусной биомассы.

Технологический процесс 5 Индукция эмбриоидогенеза.

Технологический процесс 6 Сушка биомассы.

Технологический процесс 7 Анализ на содержание арглабина.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Изучение роста, морфогенеза культуры клеток полыни гладкой и синтеза в ней биологически активного сесквитерпеноида арглабина"

Актуальность проблемы. Растения являются ценным источником многих биологически активных веществ, составляющих основу отдельных жизненно важных лекарственных препаратов. В последнее десятилетие в промышленно развитых странах наблюдается тенденция к использованию естественных биологически активных веществ вместо синтетических. Это служит важным стимулом для более широкого изучения лекарственных растений и с точки зрения биотехнологии.

Возросший интерес к фармакологически значимым свойствам растений и их использование для профилактики и лечения ряда заболеваний обусловлены, прежде всего, научным подтверждением их эффективности и безвредности. Заметное влияние на развитие фитофармакологии оказали также установление химического состава действующих начал, содержащихся в растениях, и выделение их в чистом виде с целью всестороннего изучения фармакологических свойств и стандартизации основных показателей качества готовых лекарственных форм.

Несмотря на высокие темпы развития производства лекарственных средств, получаемых с использованием одного или нескольких биологически активных веществ растительного происхождения, потребность в некоторых из них удовлетворяется не полностью. Это вызвано, главным образом постоянным увеличением спроса на фитопрепараты как в нашей стране, так и за рубежом, а также недостатком сырья или отсутствием отдельных видов лекарственных растений во флоре тех или иных регионов [1].

Дефицит лекарственного растительного сырья объясняется, в числе прочих причин, снижением природных запасов ряда видов, что является следствием интенсивной урбанизации и освоения новых пахотных земель. В силу этих обстоятельств некоторые лекарственные растения взяты под охрану государства и занесены в Красную книгу [2].

В то же время нельзя не отметить, что исходным сырьем для производства некоторых, особенно высокоэффективных сердечно- сосудистых, противоопухолевых, гормональных и других важных препаратов являются тропические или редкие лекарственные растения, не произрастающие по климатическим условиям во многих странах мира, в том числе и в странах СНГ. Эти виды сырья в большинстве своем импортируются, и стоимость их постоянно растет.

Изыскание путей компенсации дефицита лекарственных растений привело к разработке принципиально новых биотехнологических методов получения отдельных биологически активных соединений растительного происхождения, на основе использования культуры изолированных тканей и клеток, растущих на искусственных питательных средах в асептических условиях. Интерес к этому методу непрерывно растет, так как в настоящее время доказано, что клеточные технологии имеют неоспоримые преимущества для производства, создания новых форм, селекции и получения сверхпродуцентов экономически важных веществ. Помимо способности клеток синтезировать биологически активные вещества самого различного типа действия - антивирусного, противоопухолевого, антибиотического, культивируемые клетки и ткани могут быть использованы для биотрансформации ряда соединений, как источник получения совершенно новых веществ [3-6].

Как показал почти полувековой опыт исследования синтеза вторичных соединений в клеточных культурах растений, необходимо решение многих фундаментальных проблем биологии культивируемых клеток. Одним из таких аспектов является создание клеточных модельных систем, для чего необходимо изучение механизмов морфогенеза и регенерации растений в культуре клеток и протопластов.

Создание банка гермоплазмы на основе культуры клеток и тканей поможет сохранить генофонд многих важнейших лекарственных, а также редких и исчезающих видов растений. Ткани и клетки, растущие на искусственных питательных средах являются, кроме того, прекрасным модельным объектом для изучения метаболизма различных биологически активных веществ в растениях [3-10].

Большой интерес вызывают биологически активные терпеноиды и, в частности, природные сесквитерпеновые лактоны. Одним из богатых и мало изученных источников этих соединений являются растения рода Artemisia [1 1].

Особый интерес в этом отношении представляет полынь гладкая (Artemisia glabella Kar. et Kir.), которая является единственным источником сесквитерпенового лактона аргла-бина, обладающего ярко выраженной избирательной онко-статической активностью. Препарат «Арглабин» прошел трехстадийные клинические испытания и показал эффективность в лечении гепатоцеллюлярного рака, опухолей легких, молочной железы и яичников. Испытания проводились на базе Карагандинского областного онкологического центра и клиники КазНИИ онкологии и радиологии МЗ РК. Утверждены фармакопейные статьи на субстанцию и лекарственную форму препарата «Арглабин» (ФС РК 42-244-99 и ФС РК 42245-99), а также на траву полыни гладкой (ВФС РК 42-21899). Препарат «Арглабин - лиофилизированный» зарегистрирован Министерством здравоохранения РК (регистрационное удостоверение PK-JIC-5 №003950) и разрешен к применению в медицинской практике на территории Республики Казахстан. Результаты исследования получили положительную оценку Онкологического центра М.Д. Андерсона (Хьюстон, США) и препарат рекомендован для клинических испытаний в соответствии с международными стандартами (FDA) [12].

Получение биологически активных веществ из растительного материала имеет свои трудности из-за обеднения дикорастущих ресурсов и сложности создания культурных плантаций для заготовки сырья. К тому же полынь гладкая, объект исследования данной работы, является редким и эндемичным растением, из-за чего заготовки его в больших количествах запрещены. В связи с этим, особую актуальность приобретает изучение возможности производства арглабина из биомассы культивируемых клеток и тканей полыни гладкой.

Целью исследований является - разработка регламента культивирования изолированных тканей полыни гладкой на основе изучения процесса каллусогенеза, особенностей роста и морфогенеза каллусных тканей, путей оптимизации условий их культиварования, закономерностей биосинтеза арглабина для использования тканевой биомассы в качестве продуцента этого биологически активного сесквитерпенового лактона.

Для достижения поставленной цели необходимо решить следующие задачи:

- Изучить зависимость между содержанием арглабина в отобранных из природных популяций биотипах интактных растений и полученных из них каллусных тканях.

- Выбрать донорные растения и получить тканевые линии с повышенным синтезом арглабина.

- Выявить экспланты, обладающие высокой каллусообразую-щей способностью.

- Изучить интенсивность роста каллусов, их морфогенетиче-ский потенциал и способность к биосинтезу арглабина.

- Получить высокопродуктивные тканевые линии.

- Оптимизировать условия культивирования каллусных тканей для повышения выхода биомассы и усиления накопления арглабина.

Научная новизна и практическая ценность. Впервые доказана возможность получения сесквитерпенового лактона арглабина, обладающего противоопухолевой активностью, из биомассы культивируемых тканей полыни гладкой. Разработан лабораторный регламент культивирования изолированных тканей полыни гладкой, обладающих способностью синтезировать арглабин на уровне интактных растений. Регламент имеет существенные элементы новизны такие как, выбор донорных растений и получение фотоавтотрофных каллусов.

Установлено наличие внутривидового полиморфизма у полыни гладкой по способности к биосинтезу арглабина. Выделенные из природных популяций различные биотипы заметно различаются между собой по содержанию арглабина. Впервые показано, что высокий биосинтетический потенциал, характерный для интактных растений выбранных в качестве доноров, может сохраняться в полученных из них кал-лусных тканях. Выяснение данного научного факта позволяет рекомендовать проводить целенаправленный поиск выдающихся доноров для получения из них тканевых и клеточных культур, как первого и обязательного этапа при разработке биотехнологии производства экономически важных веществ растительного происхождения.

Выяснено, что уровень накопления арглабина культивируемыми тканями полыни гладкой зависит от степени дифференциации клеток. Различным образом дифференцированные морфологические типы каллусов отличаются между собой по уровню накопления арглабина. Высокое содержание арглабина характерно для специализированных фотоавтотрофных каллусов способных к эмбриоидогенезу. Установление этого научного факта может иметь существенное значение для повышения эффективности клеточных технологий разрабатываемых для производства биологически активных веществ растительного происхождения.

Результаты данной работы рекомендуется использовать при чтении курса лекций по биотехнологии в высших учебных заведениях.

Получено положительное решение по заявке на патент РК от 1.03. 2000г.: «Способ получения каллусной культуры полыни гладкой» Аманов С.Б., Шаушеков З.К., Ли К.Г., Аде-кенов С.М.-№ 980860. Кот 14.09.98.

Лабораторный регламент культивирования изолированных тканей полыни гладкой может служить основой для разработки промышленной биотехнологии производства арглабина. 9

Положения выносимые на защиту:

- Культивируемые ткани полыни гладкой являются перспективным источником для производства нового противоопухолевого препарата «Арглабин»;

- Фотоавтотрофные эмбриогенные каллусы из высокопродуктивных донорных растений наиболее пригодны для использования их в качестве продуцентов се-сквитерпенового лактона арглабина;

- На арглабинпродуцирующую способность каллусных тканей в значительной мере влияют генетические и эпигенетические факторы (донорные растения, мор-фогенетический потенциал);

- Разработанный в результате проведенных исследований лабораторный регламент (отбор донорных растений, получение асептических проростков, каллусоге-нез, наращивание биомассы, эмбриоидогенез, сушка биомассы, химический анализ) может служить основой для разработки промышленной биотехнологии получения арглабина.

Заключение Диссертация по теме "Биотехнология", Аманов, Сержан Бахытулы

ВЫВОДЫ

1. Установлено, что популяции полыни гладкой являются гетерогенными и состоят из различных форм, различающихся между собой по уровню биосинтеза сесквитерпенового лактона арглабина. Из популяции полыни гладкой отобрана форма № 95, характеризующаяся высоким содержанием арглабина и пригодная для использования в качестве донорного растения. Показано наличие тесной зависимости между уровнем накопления арглабина в интактных растениях и полученных из них каллусных тканях.

2. Высокой каллусообразующей способностью обладают сегменты семядольного листа и гипокотиля, которые целесообразно использовать в качестве эксплантов для индукции каллусогенеза на питательной среде МС, дополненной 2,4-Д 4 мг/л и кинетин- 0.2 мг/л.

3. Интенсивный рост каллусных тканей полыни гладкой обеспечивается на оптимизированной среде МС с добавлением ИУК 2 мг/л и БАЛ 0,5 мг/л. Оптимальная для культивирования температура 27±1°С, при интенсивности освещения более 4500 люкс и значении рН среды 5,7-5,9.

4. Выявлена зависимость между морфогенетическим потенциалом каллусных тканей и их способностью к синтезу арглабина. Высоким уровнем накопления арглабина характеризуются фото-автотрофные эмбриогенные каллусы, формирующиеся на МС-среде с добавлением ИУК- 2 мг/л и БАП- 2 мг/л. Получена фото-автотрофная тканевая линия 95С(а) с высоким эмбриогенным потенциалом продуцирующая арглабин на уровне растительного сырья.

5. Составлен лабораторный регламент культивирования каллусных тканей полыни гладкой, который может служить основой для разработки промышленного способа получения арглабина биотехнологическими методами.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В последнее время интерес к промышленному использованию клеточных технологий в медицине, сельском хозяйстве, химической, пищевой, парфюмерно-косметической промышленности значительно возрос. Биотехнология не может решить всех проблем стоящих перед классическими методами современной технологии возделывания растений, но, бесспорно, уже сегодня клеточные технологии уверенно выходят на приоритетные позиции.

Исследования в области культуры клеток и тканей позволили создать технологии по эффективному получению оздоровленного посадочного материала с использованием культуры изолированных меристем. Создание гаплоидных технологий, на основе индукции андрогенеза при культивировании изолированных пыльников, открывает широкие возможности для решения ряда фундаментальных и прикладных задач селекции растений. Идет период глубокого изучения биологии культивируемых клеток, и на этой основе происходит быстрое развитие техники культивирования. Использование новых методических разработок, таких как: электрослияние протопластов, мутагенез, клеточная селекция, позволяет создавать новые формы и сорта экономически важных растений.

Биотехнология является наукой стоящей на стыке дисциплин. Применение знаний в области физиологии, биохимии и молекулярной генетики в сочетании с классическими методами является мощным средством в создании высоких клеточных технологий. Клеточные технологии позволяют создавать генетическое разнообразие вне полового размножения, получать экономически важные продукты методами, неприсущими для классической агрокультуры.

Исследования в области биологии изолированных клеток, тканей и органов определили круг проблем, возникающих при культивировании в условиях in vitro:

1. Процесс дедифференциации высокоспециализированных клеток растений и само культивирование в условиях механического и химического стресса приводят к различным хромосомным нарушениям, что в свою очередь отражается на стабильности клеточной популяции.

2. К системам культивирования предъявляются более высокие требования ввиду некоторых особенностей растительных клеток, таких как большой размер, восприимчивость к механическому и осмотическому стрессу, высокая плотность культивирования.

3. Для эффективного использования биосинтетических возможностей необходима пространственная организация клеток с формированием определенных дифференцированных зон и структур. Клетки, растущие изолированно друг от друга и в виде агрегатов, имеют совершенно различные условия окружения, и, вследствие этого, могут иметь различные метаболические пути.

Недостаток фундаментальных знаний в области биохимических и молекулярно-генетических механизмов вторичного метаболизма тормозит создание высокорентабельных технологий получения экономически важных продуктов. Тем не менее, широкомасштабные исследования вторичного метаболизма растений позволили получить клеточные культуры многих видов растений, способных синтезировать различные вещества вторичного метаболизма: алкалоиды, терпеноиды, гликозиды, полифенолы, эфирные масла и т.п.

Создание собственных клеточных технологий получения биологически активных веществ растительного происхождения является актуальной проблемой для стран СНГ, в том числе и Республики Казахстан. В этом направлении интенсивные исследования проводятся в Институте фитохимии с 1996 г в рамках Республиканской целевой научно-технической программы «Разработка и внедрение в промышленное производство фитопрепаратов для обеспечения отечественными лекарственными средствами медицинских учреждений и населения Республики». Данная диссертационная работа является разделом ее основного задания (03. Разработка биотехнологических методов получения и модификации биологически активных веществ растительного происхождения).

Целью работы явилась разработка технологии культивирования изолированных тканей полыни гладкой - продуцента сесквитерпенового лактона арглабина.

Результаты исследований показали, что культура кал-лусной ткани полыни гладкой способна продуцировать сеск-витерпеновый лактон арглабин на уровне, сравнимом с ин-тактным растением. Это дает возможность рекомендовать использование биотехнологических методов для получения фармакологически ценного продукта арглабина из культивируемых тканей полыни гладкой.

В результате проведенных исследований установлено, что максимальное накопление арглабина наблюдается при высокой степени клеточной дифференцировки, на стадии формирования эмбриоподобных структур. Биосинтез арглабина происходит также и в активно пролифирирующей клеточной массе. Это объясняется тем, что в интактном растении арглабин накапливается преимущественно в межклеточниках и простых хранилищах типа железистых волосках. Для существенного увеличения биосинтетических возможностей культуры тканей полыни гладкой необходимо наличие более сложной структурной организации клеток, чем колония клеток или клеточные агрегаты.

Изучение влияния фитогормонального баланса на кал-лусогенез и морфогенез позволили определить условия получения высокоэмбриогенных тканей. Было определено, что для этого наиболее оптимальными эксплантами являются протопласты и семядольные листья. Однако применение протопластов в качестве источника культуры тканей неоправданно с точки зрения высокой трудоемкости и затратности. Показана цитокининовая независимость процессов индукции каллусогенеза и роста каллусной ткани. Тем не менее добавление кинетина в питательную среду необходимо для получения морфогенных тканевых линий. Существенными элементами разработанного регламента является:

1)получение каллусной ткани на МС-среде с добавлением 2,4-Д 2 мг/л и кинетина 0,2 мг/л;

2) обеспечение интенсивного роста каллусов на среде с добавлением ИУК 2 мг/л и БАП 0,5 мг/л;

3) индукция процесса эмбриоидогенеза на среде с добавлением ИУК- 2 мг/л и БАП- 2 мг/л.

Высокий внутривидовой полиморфизм полыни гладкой, как по фенотипическим признакам, так и по способности к биосинтезу арглабина, позволил отобрать из популяции до-норные растения для изолирования и культивирования тканей in vitro. Показано, наличие тесной зависимости между продуктивностью донорных растений и полученных из них тканевых культур. Удалось получить тканевые линии способные длительное время сохранять арглабина.

Разработка регламента получения продуктов вторичного метаболизма требует тщательной оптимизации состава культивационных сред и условий культивирования. Для облегчения процесса оптимизации многокомпонентной среды был использован способ планирования эксперимента, основанный на методе латинских пирамид и компьютерном анализе полученных данных. При этом исследование влияния макроэлеменотов входящих в состав среды Мурасиге-Скуга показало, что увеличение уровня накопления арглабина наблюдается при снижении концентрации основных минеральных компонентов среды. Выявленные особенности минерального питания каллусной ткани полыни гладкой показывают, что активный прирост биомассы, в основном, зависит от соотношения нитратного и аммонийного азота. Существенное значение имеет также преобладание нитрата и увеличение концентрации фосфатов и ионов калия.

Показано, что максимальный ростовой индекс достигается при содержании KN03 - 3800 мг\л, NH4N03 - 1600 мг\л и КН2Р04 - 340 мг\л, MgS04 -370мг/л и СаС12 - 440 мг/л.

Выяснено влияние глицина на увеличение синтеза арглабина. Вероятно, необходимо детальное изучение путей ассимиляции глицина на предмет включения его в состав сесквитерпенового лактона арглабина.

При исследовании влияния углеводного питания выявлено, что в качестве источника углерода наиболее приемлема сахароза, и ее оптимальной концентрацией в среде для максимального роста можно считать 3 %, а снижение уровня сахарозы до 0.75 % приводит к увеличению содержания арглабина.

Изучено влияние температуры, освещенности и рН среды. В качестве стрессового фактора было избрано воздействие на растительные клетки экстракта вегетативного мицелия гриба Pleurotos florida, обладающего целлюлозоразрушающей способностью. Для роста кал-лусных культур оптимальной температурой является 27±1°С. Степень освещенности влияет на окрашенность культур, при 3000 люкс и выше они были интенсивного зеленого цвета и уровень накопления арглабина в таких тканях увеличивается. Характерный для интактного растения уровень синтеза наблюдается при интенсивности освещения более 4500 люкс. Оптимальное значение рН среды как для роста, так и для накопления арглабина в пределах 5,7-5,9.

Применение элиситоров для повышения уровня содержания арглабина целесообразно на фазе активного роста каллусной культуры, однако, это ведет к ухудшению ростовых показателей, что приводит к уменьшению общего выхода арглабина.

Таким образом, результаты исследований свидетельствуют о том, что культура каллусной ткани полыни гладкой может быть использована как источник для получения нового противоопухолевого препарата «Арглабин». Разработанный лабораторный регламент культивирования каллусной биомассы полыни гладкой может стать основой для разработки промышленной технологии получения арглабина.

95

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Аманов, Сержан Бахытулы, Караганда

1. Шретер А.И. Поиск и изучение новых лекарственных растений. М.: Наука, -1 994., -35 с.

2. Камелин Р.В. Биологическое разнообразие и интродукция растений. // Рас ти гельные ресурсы , -1997., -Т.33., Вып.З., -С.1-10.

3. Бутенко Р.Г. Клеточные технологии для получения экономически важных веществ растительного происхождения.// В кн. «Культура клеток растений и биотехнология». М.:Наука, -1 986, -С.3-20.

4. Калинин Ф.Л., Сарнацкая В.В., Полищук В.Е. Метод культуры изолированных тканей в физиологии и биохимии растений. Киев: Наука, -1980, -С.488.

5. Носов А.М. Регуляция синтеза вторичных соединений в культуре клеток растений.// Биология культивируемых клеток и биотехнология растений. М: Наука, -1991., -С. 5-18.

6. Запрометов М.Н. Вторичный метаболизм в культурах клеток и тканей растений.// В кн. «Культура тканей растений». -М.: Паука,-1 98 1., -С.37-51.

7. Смирнов А.М. Рост и метаболизм изолированных корней в стерильной культуре . -М.:Наука, -1970, -455 с.

8. Бутенко Р.Г., Гусев М.В., Киркин А.Ф., Корженевская Т.Т., Маркова Е.Н. Клеточная инженерия. -М.: Высшая школа, -1987, -1 27 с.

9. Бутенко Р.Г. Культура изолированных тканей и физиология морфогенеза растений,-М.:Наука, -1964, -272 с.

10. Валиханова Г.Ж. Биотехнология растений. -Алматы : Конжык -1996, -264 с.

11. Адекенов С.М., Куприянов А.Н., Кагарлицкий А.Д. Структурные особенности сесквитерпеновых лактонов и систематика рода Artemisia L.// Вестник АН Каз.ССР, -1986, -С.52-62.

12. Arglabin. Its structure, properties and usage. // Virginia Beach, Virginia, USA, 1997, 38 p.

13. Муромцев Г.С., Бутенко Р.Г., Тихоненко Т.И. Основы сельскохозяйствен ной био технологии. -М: Агропром-издат, -1990, -384 с.

14. Murashige I., Skoog F. A revised médium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue cultures. // Physiol. Plant. -1 962', -.M'15. -P. 473-497.

15. Cooking E.C. A method for the isolation of plant protoplasts and vacuoles // Nature (London) -1960, -V.187, -P.927-929.

16. Kao K.N., Michayluk M.K. Nutritional requirements for growth of Vinca hajastana cells and protoplasts at a very low population density in liquid media // Planta -1975, -V. 126, -P.105-1 10.

17. Niedz R.P., Rutter S.M., Ilandley L.W., Sink K.C. Plant regeneration from leaf protoplasts of six tomato cultivators. // Plant Sci. -1985, -V.39, -P.199-204.

18. Bellincampi D., Morpugo G. Conditioning factor affecting growth in plant cells in culture// Plant Sci., -1987, -V.5 1, -P.83-91.

19. Kyozuka J., Hayashi Y., Shinomoto K. High frequency plant regeneration from rice protoplasts by novel nurse culture methods// Mol. Gen. Genet. -1987, -V.206, -P.408-413.

20. Lee L., Schroll R.E., Grimes H.D., Hodges T.K. Plant regeneration from indica rice (Oryza sativa L.) protoplasts // Planta, -1990, -V.178, -P.325-333.

21. Shahin E.A. Totipotency of tomato protoplasts// Theor. Appl. Genet. -1985, -V.69, -P.235-240.

22. D'Utra Vaz F.B., Slamet 1.11., Khatum A., Cocking E.C., Power J.B. Protoplast culture in high molecular oxygen atmosphere// Plant Cell Rep.-1992, -V.l 1, -P.4 16-41 8.

23. Maheshwari S.C., Gill R., Maheshwari N., Gharyal O.K. The isolation and culture of protoplasts: in Differentiation of protoplasts and transformed plant cell. // J. Reinert and Binding (New York: Springer-Verlag) -1986, -P.20-48.

24. Rao K.S., Prakash A.II. A simple method for the isolation of plant protoplasts // India J.Biosci. -1995, -V.20, №5, -P. 645 655.

25. Kei-ichiro U., Yutaka F., kenichi A. Genetic transformation of Rhododendron by Agrobacterium tumefaciens. // Plant Cell Repts. -1996, -№216, -P.38-41.

26. Jansen B-J, Gardner R.C. Localized transient expression of GUS in leaf discs following co-cultivation with Agro-bacterium. // Plant Molecular Biology -1989, -№14, -P.l-72.

27. May G.D., Afza R., Mason H.S., Wiecko A., Novak F.J., Arntzen J. Generation of transgenic banana (Musa acuminata) plants via Agrobacterium-mediated transformation. // Biotechnol. -1995, -V.13, №5, -P.486-492.

28. Burou M.D., Chlan C.A., Sen P., Lisca A., Murai N. High-frequency generation of transgenic tobacco plants after modified leaf disk co-cultivation with Agrobacte-rium tumefaciens. // Plant Mol. Bio. Report -1992, -V.8 (2), -P.124-139.

29. Bommineni V.R., Chibbar R.N., Datla R.S.S., Tsung E.W.T. Transformation of white spruce (Piecea glauca) somatic embryos by microprojectile bombardment.// Plant Cell Repts. -1993, -N13, -P.17-23.

30. James D.J., Passey A.J., Baker S.A., Wilson P.M. Transgenes display stab patterns of expression in apple fruit and mendelian segregation in the progeny.// Biotechnol. -1996, -V.14, -№ 1, -P.56-60.

31. Bevan M. Binary Agrobacterium vectors for plant transformation.// Nucleic Acids Research -1984, -V.12, -№ 22, -P.871 1-8721.

32. Atkinson R.G., Gardner R.C. Agrobacterium mediated transformation of pepino and regeneration of transgenic plants.// Plant Cell Repts. -1991, -№10, -P.208-212.

33. Uemashu C., Murase M., Ichikawa H., Imamura J. Agrobacterium mediated transformation and regeneration of kiwi fruit. // Plant Cell Repts. -1991, -№ 10, -P.286-290.

34. Yao J-L., Wu J-H, Gleave A.P., Morris B.A.M. Transformation of citrus embriogenic cells using particle bombardment and production of transgenic embryos. // Plant Sci. -1996, -Лг2113, -P.175- 1 83.

35. Guerineau F., Brooks L., Meadows J., Lucy A., Robinson C., Mullineaux P. Sulphonamide resistance gene for plant transformation.// Plant Mol. Biol.-l 990,-№ 1 5,-P. 1 27-1 36.

36. ITowe G.T., Goldfarb В., Strauss S.IL Agrobacterium-mediated transformation of hybrid poplar suspension cultures and regeneration of transformed plants. // Plant Cell Tissue and Organ Cult. -1994, -№36, -P.59-71.

37. Бутенко P.Г. Тотипотентность растительной клетки и культура ткани//В кн. «Культура изолированных органов, тканей и клеток растений». М. "Наука" -1970, -С.84-92.

38. Шамина З.Б. Генетика и цитология культуры ткани и растений регенерантов.// Культура изолированных органов, тканей и клеток растений. М.: "Наука" -1970, -С.129-136.

39. Агафодрова М.Н., Иващуга С.И., Андрианов В.М., Прямой органогенез трансформированных эксплантов люцерны Medicago meyen. // Новые направления биотехнологии растений. Тез. Докл. 11 Всерос. симп. -Пущино -1993, -С.44.

40. Аманов С.Б., Конысбекова Г.М., Шаушеков З.К., Аде-кенов С.М., Ли К.Г. Первичный отбор клеточных линий полыни гладкой продуцента сесквитерпенового лактона арглабина. // Биотехнология. Теория и практика -1997, -№ з, -с. 70.

41. Гостимский С.А. Генетическая изменчивость клеток растений при культивировании // Успехи соврем. Генетики. -1987, -Вып.14, -С.48-63.

42. Кунах В.А. Цитогенетическая изменчивость клеточных популяций в культуре изолированных тканей растений.// Тканевые и клеточные культуры в селекции растений. М: Колос, -1979, -С.38-51.

43. Мазин В.В., Иващуга С.И., Агафодорова М.Н. Система разобщенных доминирующих центров для генетической трансформации люцерны и клевера // Физиология Раст. -1994, -№6, -С.617-620.

44. Reisch В. Genetic variability in regenerated plants // Handbook of plant cell culture. -1 983, -P. 159-178.

45. Herry Y., De Buyser J., Snape J.M. Intendance of callus formation abity in anther cultures of wheat. // Genet. And Breed. -1993, -V.47, -№4, -P.347-352.

46. Бутенко P.Г. Дифференцировка и морфогенез в культуре тканей, клеток и протопластов// В кн. «Биология развития растений» М: Наука -1985, -С.48-66.

47. Nabors M.W., Heyser J.W., Dykes Т.A., De Mot K.J. Long-duration high-frequency plant regeneration from cc-real tissue cultures//Planta.-l 983,-V. 1 57,-№5,-P.385-39 1.

48. Старостенко H.B. Некоторые особенности органогенеза в культуре тканей злаковых// Проблемы современной биологии // 17 научн. конф. мол. ученых Труды МГУ -1986, -С.224-246.

49. Maeda.E., Thorpe Т.A. Shoot histogenesis in tobacco callus cultures // In vitro 1979,-V.15, №6,-P.4 1 5-424.

50. Murashige I. Plant propagation through tissue cultures // Ann. Rev. Plant. Physiol. -1974, -V.25, -P.135-166.

51. Исаева Н.А., Першина А.А., Шумный В.К. Образование побегов и корнеобразных структур в каллусной ткани межвидовых гибридов ячменя и исходных видов и сортов // В кн. «Культура клеток растений и биотехнология». -М: Наука, -1986, -С. 1 78-181.

52. Vasil I.K. Somatic embryogenesis and plant regeneration cereals and grass // Plant Tissue Culture 1982,-V.5,-P.101-104.

53. Бутенко P.Г. Индукция морфогенеза в культуре ткани растений // В кн. «Гормональная регуляция онтогенеза растений». -М. Наука -1 985,-С.42-52.

54. Bomman С.Н. Regeneration in vitro of economically important crop plants in the Nordic countries.// Hereditas. Suppl.-1983,-V.3,-P.7-13.

55. Dunwell J.M. Influence of genotype and environment on growth of barley embryos in vitro// Ann. Bot. -1981, -V.48,-P.535-542.

56. Kister P.В., Kavi G.M. Callus initiation and plant regeneration from different explants and genotypes of Oryza sativa L.// Indian J. Plant Physiol. -1987, -V.30, -№1, -P. 66-70.

57. Pienk R.T.M. In vitro culture of higher plants. Dordrecht etc: Martinus nijhoff publ. -1987, -344 p.

58. Асанова Д.К. Культура кормовых злаков in vitro Aji-маты, -1997, -96 с.

59. Исаева Н.А., Бородько А.В., Шумный В.К. Регенерация растений в каллусной культуре, полученной из незрелых зародышей мутантных линий ячменя сорта Бонус // Физиология растений,-1 988, № 4, -С.756-762.

60. Kazar M.D., Schaeffer G.W., Beanziger P.S. The physical environment in relation to high frequency callus and plantlet development in anther cultures if wheat (Triticum aestivum L.)// J. Plant Physiol.-1985, -V.121, -№2, -P.103-109.

61. Папазян Н.Д. Культура зародышей и стеблевых узлов некоторых сортов ячменя // Апомиксис и цитоэмбрио-логия растений: Мат. конф. Саратов -1983, -С. 142151.

62. Хмара К.А., Катаева Н.В. Влияние генотипа материнского растения и веществ цитокининового типа на способность тканей зародыша ели обыкновенной к органогенезу in vitro // Физиология растений. -1993,-Т.40, -№5, -С.802-805.

63. Чернышева И.Г. Влияние генетических характеристик исходных растений на морфогенетический потенциал каллусных клеток кукурузы.//Доклады AM СССР.-1988.-Т.300, N 1 ,-С. 48-52.

64. Asay К.Н., Johnson D.A. Genetic variances in crested wheatgrass alfalfa mixtures // XV Inter. Grass Congr. Proceeding. -Nice.France. -1989. -P.5 19-523.

65. Fedac G. Propagation of intergenetic hybrids of triticale through callus culture of immature inflorescence // Z. Pflanzenzucht. -1985. -V.94, -№1, -P.1-7.

66. Скауфорд У.P. Сомаклональная изменчивость: миф о клональном единообразии//В кн. «Мобильность генома растений». М: Агропромиздат-1990, -С.228-260.

67. Bouhormont J. Cytology of microsrores and calls after culture in H. vulgare// Cytology -1997, -V36, -№4, -P.351-360.

68. Novak F.J., Ohnoutkova L., Kubalakova M. Cytogenetic studies of callus tissues of wheat (Triticum aestivum) // Cereal Res. Commun. 1978, -V.6, -P.135-147.

69. Sin gh R. Improving grain protein quality by genetic engineering some biochemical consideration //Trends in Biotechnology. -1986 -V.4, -№5, -P.108-109.

70. Bayliss M.V. Chromosomal variation in plant tissue in culture. // Intern.Rev.Cytol.Suppl. -1980, -P.l 13-144.

71. Mohanty V.D., Chosh P.D., Maity S. Chromosome behavior in long-term callus culture in M.vulgare // Chromosome information Service -1986, -№41, -P. 10-1 1.

72. Larkin P.J., Scowcroft V.R. Somaclonal variety on a new option for plant improvement. // Plant improvement and Sovftok cell genetics -1983, -P.159-178.

73. Nayak S., Sen S. Karyological and cytophotometric study of explant derived clones of non-polysomatic and polyso-matic species of Kniphloia // Biol.Plant -1992, -V.34, -№1-2, -P. 135-141.

74. Tawakly M., Sudhavari A.K., Reddu G.M. Chromosomal instability in callus cultures of wide and cultivated genotypes of Cicero // Indian G.Exp.Biol. -1992, -V.30, -N 7, -P.628-631.

75. Косулина JI.Г. Особенности процесса регенерации в каллусной культуре зрелых зародышей пшеницы (Triticum ае5Пуит)//Сельскохозяйственная биология -1995,-№1, -С.78-84.

76. Shimada Т., Otani М., Natanaka Н. Gene transfer to cereal cells mediated by protoplast transformation. // Bull. Res. Inst. Agron. Resour. -1993, -№3, -P.l-9.

77. Kott L.S., Flack.S. Kasha K.J. Acomparative study of initiation and development of embryogenesis callus from haploid embryos of several barley cultivates. Cytopho-tometry of embryos and callus. // Can. J. Bot. -1986, -V.64, -P.2107-2112.

78. Ovesna L., Lhotova M. Study of callus growth and plant regeneration in wheat. (T. Aestivum L.) tissue cultures // Sci. Agr. Bohemosl. 1 987, -V.19, -№4, -P.243-252.

79. McHungen A. Rapid regeneration of wheat in vitro // Ann.Bot. -1983, -V.51, -№6, -P.85 1-853.

80. Mnocha S.C. Regulation of organogenesis and embryogenesis in cell culture // Plant Tissue and Cell Cult. Appl. Crop. Inter. Symp. -Olomoic, -1984, -P.33-41.

81. Rao K.S. Embryogenesis in flowering plants: Recent approaches and prospects // India J. Biosci. -1996, -V.21, -№6, -P.827-841.

82. Knoop В., Beiderbeck R., Beiderbeck Z. Adsorbenskultur-ein Weg zur Steigerung der Sekundarstoffproduktion in pflazlichen suspensionskulturen // Naturforsch 1983, -№5-6, -S.484-486.

83. McDonnel R.E, Conger B.V. Callus induction and plantlet formation from mature embryo explant of Kentucky blue-grass.// Grop. Sci. -1984, -V.24, -№3, -P.537-678.

84. Ouyang J., He D.G., Feng G.H., Ja S.E. The response of anther culture to culture temperature varies with growth conditions of anther donors plants// lant Sci .-1 987,-V.49, -№2, -P.145-148.

85. Tsolova V., Atanasov A. The effect of temperature on the extension growth of wheat callus culture// Vitis.-1 994 V.33, -№ 1. -P 55-58.

86. Данилина A.FI. Особенности соматического эмбриогенеза в культуре ткани моркови// В кн. «Культура изолированных органов, тканей и клеток растений». М: Наука. -1970, -С.1 12-1 17.

87. Аманов С.Б., Андреева А.П., Конысбекова Г.М., Ли К.Г., Адекенов С.М. Влияние фитогормонов на морфогенез в культуре клеток полыни гладкой (Artemisia glabella Kar. et Kir.) // Биотехнология. Теория и практика. -1998, -N 3(7), -С.44-47.

88. Torello W.A., Symingtor A.G. Regeneration from perennial ryegrass callus tissue// Hort Sci. -1984, -V.19, -№1, -P.56-57.

89. Ogura N., Shimada Т., Preliminary report on shoot ^differentiation from wheat callus // Wheat informs. Pervice. -1978. -№45-46. -P.26-28.

90. Dale P.J., Daembrogio E. A comparison of callus induction and plant regeneration from different explants of Hordeum vulgare.//Z.Pflanzenzucht.-l 979,-V.94,-P.65-77.

91. Викторова H.B., Белицер H.B. Влияние 2,4-Д на рост, репродукцию и ультраструктуру клеток гаплопаппуса в суспензионной культуре // В кн. «Культура клеток растений». -М: Наука, -1 983, -С.144-147.

92. Hilton M.G., Jay A., Rhodes M.J.С., Wilson P.D.G. Growth and monoterpene production by transformed shoot cultures of Mentha eitrota and Mentha piperita in flasks and fermenters // Appl. Microbiol. And Biotechnol. -1995, -№3, -P.452-459.

93. Mizutari H., Plashimoto O., Nakashima R., Nadai J. An-thraquinone production by cell suspension cultures of Rubia akin Nakai.// Biosci. Biotechnol. And Biochem.-l 997, -№10, -P.1743-1744.

94. Scragg A.PL, Allan E.I. Production of the triterpenoid quassin in callus and cell suspension cultures of Picrasma guassioides Bennett. // Plant. Cell. Repts. -1986, -№5, -P. 356-359.

95. Berlin J., Forehe E., Wray V., Hammer J., Plosel W. Formation of benzophenanthridine alkaloids by suspension cultures of Eschscholzia californica. // Z. Naturforsch. -1983, -№5-6,-P.346-352.

96. Berlin J., Witte L., Schubert W., Wray V. Determination and Quantification of monoterpenoids secreted into the medium of cell cultures of Thuja occidenalis. // Phyto-chemistry. -1984, -№6, -P. 1277-1 279.

97. Watson D.G., Rycreft D.S., Freer I.M., Brooks C.J.W. Sesquiterpenoid phytoalexins from suspended callus cultures of Nicotina tabacum. // Phytochemistry. -1 985, №10, -P.2195-2200.

98. Liu C.Z., Wang Y.C., Guo C., Ouyang F., Ye H.C., Li G.F. Production artemisinin by shoot cultures of Artemisia annua L. In a modified inner-loop mist bio reactor // Plant Sсi.-1 998, -№2, -P.21 1-217.

99. Барвина Т.В., Воробьёв А.С., Константинова Т.Н., Сергеева Л.И., Зальцман О.О. Морфогенез и образование эфирных масел у полыни лимонной // Молекул, ге-нет. микробиол. и вирусол. -1994, -№4, -С.18.

100. Andreeva А.P., Amanov S.B. Phytohormones ratio for Artemisia glabella in vitro cultivation.// В сб. "Medicinal raw material and phytopreparations for medicine and agriculture" Karaganda, -1999, -P. 190.

101. Nair M.S.R., Acton N., Klayman D.L., Kendrick K., Basile D.V. Production of artemisinin in tissue cultures of Artemisia annua. // J. Natur. Prod. -1986, -№3, -P.504-507.

102. Malpathak N.P., David S.B. Stimulation of solasodine production by combining fungal elicitors and immobilized cell suspension cultures of Solanum surattene Burm. // Biotechnol. Lett -1992. -№10. -P.965-968.

103. Curtis W.R., Wang P., Humphrey A. Role of calcium and differentiation in enhanced sesquiterpene elicitation from calcium alginate-immobilized plant tissue // Enzyme and Microbiol. Technol. -1995, -№6, -P.554-557.

104. Lindsey K., Yeoman M.M. The viability and biosynthetic activity of cells of Capsicum frulenscens Mill. Cv. Annul immobilized in reticulate polyurethane // J. Exp. Bot. -1984, -№160, -P. 1684-1696.

105. Medina-Bolivar F., Ir 1 or es ILL. Metabolic engineering ol the sesquiterpene pathway in hairy roots of IT. Muticus // Plant Physiol.-1997 -V.l 14. -№3. Suppl. -P.l 50.

106. Medina-Bolivar F., Flores II.E. Regulation of tropane alkaloids vs. Sesquiterpene biosynthesis in hairy roots of H. Muticus// Plant Physiol.-1997, -V.l 14, -№3 Suppl, -P.232.

107. Булгаков В.П., Журавлев Ю.Н. Культуры трансформированных клеток растений как новый источник получения продуктов вторичного метаболизма.//Успехи соврем. биол. -1992, -N2, -С.342-349.

108. Green K.D., Thomas N.H., Callow J.A. Product enhancement and recovery from transformed root cultures of Nicotina glauca // Biotechnol. And Bioeng. -1992, -N2, -P.195-202.

109. Subroto M., Ahkam, Doran P.M. Production of steroid alkaloids by hairy roots of Solanum aviculare and the effect of gibberelic acid // Plant Cell, Tissue and Organ Cult. -1994, -№2-3, -P. 93-102.

110. Banejee S., Rahman L., Uniyal G.C., Aguia P.S. Enhanced production of valepotriates by Agrobacterium rhizogenes induced hairy root cultures of Valeriana wallichii Dc.// Plant Sei. -1998, -№2, -P.203-208.

111. Pestchanker L.J., Kurina M., Genlichte A.M. et al. Production of dihydroleucodin from callus lines of Artemisia douglassiana Besser. // Biotechnology Letters, 1989, V.ll, -№11, -P.803-806.

112. Шамина З.Б. Методические указания по клеточной селекции. М., -1 984, -3 6 с.

113. Banthorpe D.V., Branch S.A., Njar V.C., Osborne M.G., Watson D.G. Ability of plant callus cultures to synthesize and accumulate lower terpenoids. // Phytochemistry 1986, -№3, -P.629-636.

114. Banthorpe D.V., Brown J.Т., Morris G.S. Accumulation of the Anti fungal diterpene sclareol by cell cultures of Salvia sclarea and Nictiana glutinosa //Phytochemistry. -1990, -№7, -P.2145-2148.

115. Facchini P.J., Chappel J. Gene family for an elicitor-induced sesquiterpene cyclase in tobacco. // Proc. Nat. Acad. Sei. USA, -1992.-V.89, -№22, -P. 1 1 08 1 -1 1 092.

116. Bravdo В., Shoseyov 0., Lkan R., Altman A. Monoter-pene glycoside biosynthesis in detached grape berries grown in vitro. // Physiol. Plant-1990, -№ 1 , -P. 93-99.

117. Böhm H. Die Bildung sekundärer Naturstoffe durch pflanzliche Zellkulturen// Biol. Rasch., -1981, -№13, -S.138-154.

118. Xu-Hong-Xi, Zong-Fu-Quau, Wan Min, Sim-Keng-Yeou. Anti-HIV triterpene acids from Geum japonicum. // J.Natur.Prod. -1996, -V.59, -№7, -P.640-645.

119. Sonia P., Cosimo P., Ninzinina D.T., Naheed M. Constituents of Ardisia japonica and their in vitro anti-HIV activity.// J. Nature or Prod., -1 996,-V.59, -№6, -P.565-569.

120. Cappelletti E., Caniato R., Appendino G. Localization of the cytotoxic hydroperoxyeudesmanolides in Artemisia umbelliformis. //Biochem. System, and Ecol.,-1 986,-V. 1 4, -№2, -P.1 83-190.

121. Rozkrulova В., Dohnal В., Supniewska J.H. Terpenoids in tissue culture of Strophanthus intrmedius Pax. // Actabio. Cracov. Ser. Bot., -1 982, -P.37-42.

122. Weathers P.J., Cheethman R.D., Folamsbee E. Teoh K. Artemisin production by transformed roots of Artemisia annua // Biotechnol. Lett., -1994, -№12, -P. 128 1 -1 286.

123. Odnevall A., Bjock L. Effect of light on growth, morphogenesis and ginsenosidc formation in tissue cultures of Panax ginseng. // Biochem. und Physiol. Pflanz. -1989, №3-4, -P.253-259.

124. Soragg A.M., Aghton S., Steward R.D., Allan E.J. Growth and quassin accumulation by cultures of Quassia amara. // Plant Cell, Tissue and Organ Cult. -1990, -№3, -P. 165169.

125. Weathers P.J., Fabzillab N.A.M., Cheethman R.D. Light inhibition the formation of capsaicin from Capsicum callus. // Planta Med. -1992, -№3, -P.278-279.

126. Lamer-Zarawska E., Krolicki Z.A., Rymkiewicz A., Ma-jgier В., Krzytanowska J. Ergot alkoloids production in cell cultures of Clavires purpurea (Fr.) Tul. // Bull. Pol. Acad. Sci. Biol. Sci. -1991, -№4, -P.395-401.

127. Fernandes F.M., Pais М., Solome S., Navais J.M.The effects of medium composition on biomass, sterols and triterpenols production by in vitro cultures of Euphorbia characias. // Bioresour. Technol. -1992, -№1, -P.67-73.

128. Абдыкалыков М.А., Адекенов С.М., Сванбаев Е.С., Ра-химбаев И.Р. Изопреноиды из культуры тканей Inula caspica В1ите.//Тез. докл. II Международ, конф. "Биология культивируемых клеток растений и биотехнология" -КазНИИЗ. -Алматы. -1993,-С. 166.

129. Fernandes F.M., Navais J.M., Pais М., Solome S. Hormonal control of triterpenols synthesis in Euphorbia chara-cias callus. // Bioresour. Technol. -1992, -№1, -P.31-37.

130. Ivieva M.P., Kovatcheva E.G., Shabanov D., Michneva M.D. Study of tobaco cell cultures for the biosynthesis of biomass and ubiquinone-1 0. // Biotechnol.and Biotechnol. Equip., -1994, -№4, -P.13-22.

131. Banthorpe D.V., White S.J. Novel anthraquinones from undifferentiated cell cultures of Galium verum. // Phyto-chemistry. -1995, -№1, -P.107-1 11.

132. Purina В., Soresh C. Anthocyanin accumulation in Hyo-scyamus mutieus L. cultures.// J.Biotechnol. -1997, -№2, -P.151-159.

133. Boohlmann J., Gobraltarskaya E., Eilert U. Elicitor induction of furanocumarin biosynthesis pathway in cell culture of Ruta graveolens. // Plant Cell, Tissue and Organ Cult. -1995, -№2, -P. 155-1 61.

134. Барвина Т.В., Воробьёв А.С., Константинова Т.Н., Сергеева Л.И., Зальцман О.О. Рост и образование эфирного масла у полыни лимонной in vitro. //Физиол. раст. -1994, -№6, -С.903-906.

135. Elsawi S.A., Flores Н.Е. In vitro production and corn formation in colchicine alkaloid-producing plant. // Plant Physiol. -1994, -№1 Suppl., -P.121.

136. Hayashi Т., Gotoh K., Kasahara K. Production of scopaduliciol by cultured tissues of Scoparia dulcis. // Phytochemistry. -1996, -№1, -P. 193-196.

137. Волосовин А.Г., Бутенко P.Г. Культура ткани рауволь-фии змеиной как продуцент алкалоидов // В кн. «Культура изолированных органов, тканей и клеток растений». М: Наука. -1970, -С.257-261.

138. Derosa S., de Giolio A., Tommpnaro G., Bellisario M.A. Acylglucosil isofucosterol from cell cultures of Lycoper-sicon esculentum. // Phytochemistry -1998, -№ 1, -P.103-105.

139. Tazaki H., Nabeta K., Becker H. Clerodane-type diterpe-noids from axenic cultures of the liverwort Jamesoniella autumnalis.//Phytochemistry, -1998, -№4. -P.68 1-685.

140. Губарь С.И., Гулько Т.П., Кунах В.А. Рост и накопление гликозидов в каллусной культуре женьшеня при длительном воздействии экзогенных фитогормонов. // Физиол. раст. -1997. -№1, -С. 97-103.

141. Urmantseva W., Goevskaya О.A., Popov Yu.G., Yakimov S.A., Kozmin А.В., Miroshnikov A.I. Protoberbcrine alkaloids in cell culture of Thalietrum minus L. // Annu. Symp. "Phys.-Chem. Basis Plant Physiol. Penza 1996. : Abstr. -Pushchino -1996. -P.150.

142. Missaleva N., Petri G. Growth and alkoloid content characteristics of iolated roots of Datura innoxia Mill. // Acta. Bot. Hung. -1992, -№1-4, -P.3 5 1-358.

143. Филатова Л.Г., Малышева Л.В., Грахов В.П., Блюм Я.Б. Особенности регуляции каллусогенеза и биосинтез таксола in vitro у тисса ягодного. // Биотехнол. —1996, -№8, -С.38-44.

144. Мардамшина А.Г., Ильгулова Д.Ф., Валиева Р.Д. Фла-воноиды каллусной ткани солодки голой и возможности регуляции их образования. // Изв. РАН Сер. биол.1997, -№6, -С.735-738.

145. Rao P.S. Biotechnological approaches for improving plant productiviti // BARC New Lett. -1993, -№107, -P.1-7.

146. Mirjalili N., Linden J.C. Methyl josmonate induced production of taxon in suspension cultures of Taxus cuspi-data: Ethylene interaction and induction models. // Bio-technol. Progr. -1996, -№1, -P. 1 10-1 18.

147. Hayashi H., Fukui H., Tabata M. Biotransformation of 18-3-glycurrhetinic acid by cell suspension cultures of Gly-cyrrhiza g labra. // Phytochemistry. -1990, -№7, -P.2149-2152.

148. Gbolade A.A., Leckwood G.B. Selective biotransformation of monoterpenoids by cell suspensions of Pelroseli-num crispum.//Naturforsch.-1989,-№1 1-12, -P. 1 066-1 068.

149. Suga Т., Hirata Т., Hamada H., Futatsugi M. Enantiose-lectivity in the biotransformation of bicyclic monoterpene alcohols with the cultured suspension cells of Nicotina ta-bacum.// Plant Cell Repts. -1983. -N4. -РЛ86-1 88.

150. Gbolade A.A., Leckwood G.B. Biotrensformation on monoterpen.es by polyuretane foom immobilized cells of Pelroselinum crispum (Mill) Nutan. // Naturforsch. -1990, -№3-4, -P.245-248.

151. Nabeta K., Ara Y., Aoki Y., Miyake M. Biosynthesis of monoterpenes and sesquiterpenes in Larix leptolepis callus from deuterated mevolonates. // J. Natur. Prod. -1990, -№5, -P.1241-1248.

152. Anastosis P., Treer I., Gilmore C., Mackie H., Overton K. Cyclisation of farnesylphosphate to bisabolene in tissue cultures of Andrographus paniculata.// Chem. Communication, -1982, -P.267-269.

153. Falk K.J., Gershenson J., Croteau R. Metabolism of monoterpenes in cell cultures of common sage (Salvia officinales). Biochemical rationale for the lack of monoter-pene accumulation // Plant Physiol. -1990, -№4,-P.1559-1567.

154. Overton K.H. The role of leicine in terpenoid metabolism: Incorporation of leicine into sesquiterpenoids and phy-tosterols by andrographis tissue cultures. // Primary and Secondary Metab. Plant Cell Cult.-Berlin,-1985,-P.224-234.

155. Nabeta K., Kawakita K., Yada Y., Okuyama H. Biosynthesis of sesquiterpenes from deuterated mevalonates in Perilla callus. // Biosci. Biotechnol. and Biochem. -1993. -№5. -P.792-798.

156. Багдасарова P.M., Асланянц Jl.К., Узунян Л.В. Биоконверсия терпеноидов культурой клеток ириса (iris sibirica). // Прикл. биохимия и микробиол. -1988, -N6, -С.774-778.

157. Ayabe S., Takano H., Fujita T., Hirota H., Takahashi T. Tritepenoid biosynthesis in tissue cultures of Glycyrrhiza glabra vaz. glandulifera. // Plant Cell Repts. -1990,-№4, -P.181-184.

158. Alfermann A.W., Seiz U., Reinhard E. Stability of biotransformation capacity in Digitalis lanata cell cultures after cryogenic storage. // Plant Cell Repts. -1983, -№5, -P.273-276.

159. Nabetta K., Aoki Y., Sugisawa H., Miuyake M. Biosynthesis study of volatile terpens by plant tissue culture. // Front. Flavor: Proc. Sth. int. Flavor Conf., Porto Kar-rus, Chalkidiki, 1-3 July, 1987,-Amsterdam etc.-1988, -P.603-621.

160. Knoop В., Beiderbeck R. Adsorbenskultur ein Weg zur Steigerung der Sekudarstoffproduktion in pflanzlichen Suspensionskulturen. // Z. Naturforsch. -1983, -№5-6, -P.484-486.

161. Патент США. № 5552307. Метод использования элиси-торов для увеличения продуктивности биологических клеток. Опубл. 03. 09. 96

162. Армитидж Ф., Уолден Р., Дрейпер Дж. Агробактери-альные транс формирующие векторы растений.// Генная инженерия растений. M : Мир, -1991, -С. 1 1 -35.

163. Пирузян Э.С. Основы генетической инженерии растений.// М: Наука, -1988, -301 с.

164. Saurwein М., Vamazaki Т., Shimomura К. Hernendulcin in hairy root cultures of Lippia dultis // Plant Cell Repts. -1991, -№10, -P. 579-581.

165. Spenser A., Hamill J.D., Rhodes M.J.C. Production of terpens by differentiated shoot cultures of Mentha citrata transformed with Agrobacterium tumefaciens T37.// Plant Cell Repts. -1990, -№10, -P.601-604.

166. Харасов P.M. Терпеноидные соединения в культуре тканей полыни и хартолеписа.// Авто.реф.дисс.кан. биол.наук -Алматы, -1993, 22 с.

167. Ермеков М.А., Махов А.А. Методические указания "Нетрадиционный метод построения многомерных моделей на ПЭВМ по программе «ANETR-98».//-Караганда: КарПТИ, -1998, -20 с.

168. Аманов С.Б., Шаушеков З.К., Ли К.Г., Адекенов С.М. Способ получения каллусной культуры полыни гладкой Artemisia glabella Kar. et Kir.// Заявка на получение патента РК N 980800.1 от 14 сентября 1998. Положительное решение от 1.03.2000.

169. Amanov S.B., Adekenov S.M., К Shancar Rao. Isolation of protoplasts of Artemisia glabella Kar.et Kir.// Доклады HAH PK -1999, -№ 5, -C. 80-85.

170. Андреева А.П., Аманов С.Б., Ли К.Г., Адекенов С.М. Получение растений-регенерантов из каллусов Artemisia glabella Kar et Kir.// Вестник КазГУ. Серия-биология -2000, -№ 3(11), -С. 20.

171. Додонова А.Ш., Аманов С.Б., Рахимбаев И.Р., Адекенов С.М. Зависимость биосинтеза арглабина от морфо-генетического потенциала каллусной ткани полыни гладкой.// Вестник КазГУ. Серия-биология -2000, -№ 3(11), -С.46-47.