Изучение особенностей пространственной организации хромосом трофоцитов яичников некоторых видов подгруппы "melanogaster" рода Drosophila

Митренина, Елизавета Юрьевна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Изучение особенностей пространственной организации хромосом трофоцитов яичников некоторых видов подгруппы "melanogaster" рода Drosophila
ВАК РФ 03.00.15, Генетика

Автореферат диссертации по теме "Изучение особенностей пространственной организации хромосом трофоцитов яичников некоторых видов подгруппы "melanogaster" рода Drosophila"

На правах рукописи

Митренина Елизавета Юрьевна

ИЗУЧЕНИЕ ОСОБЕННОСТЕЙ ПРОСТРАНСТВЕННОЙ ОРГАНИЗАЦИИ ХРОМОСОМ ТРОФОЦИТОВ ЯИЧНИКОВ НЕКОТОРЫХ ВИДОВ ПОДГРУППЫ «melanogaster» РОДА Drosoph.Ua

03.00.15 - генетика

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Томск-2006

Работа выполнена в НИИ биологии и биофизики при Томском государственном университете

Научный руководитель:

доктор биологических наук, профессор

Стегний Владимир Николаевич

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук Кучер Аксана Николаевна, кандидат биологических наук Перевозкин Валерий Петрович

Ведущая организация:

Институт цитологии и генетики СО РАН (г. Новосибирск)

Зашита состоится «18» мая 2006 г. в 10.00 часов на заседании диссертационного совета Д 212.267.10 в Томском государственном университете по адресу: 634050, г. Томск, пр. Ленина, 36

С диссертацией можно ознакомиться в Научной библиотеке Томского государственного университета

Автореферат разослан «/-У» апреля 2006 г.

Ученый секретарь диссертационного совета,

кандидат биологических наук

/Е. Ю. Просекина/

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы

Изучение пространственной организации ядер клеток генеративной сферы и причин ее изменения в процессе видообразования является актуальным. Не менее важно исследование роли пространственных взаимоотношений хромосом в регуляции активности генов. Дрозофила является удобным модельным объектом для различных исследований в области эволюционной [Ьетеишег, АзЬЬигпег, 1976; Стегний, 1993; Андрианов и др., 2003], популяционной генетики [Вайсман, Захаров, 2003], генетики клеточного цикла [Лебедева, Трунова, Омельянчук, 2005], генетики поведения [Субочева, Ромашова, Ким, 2004], регуляции активности генов [Корочкин, 1983; Мельник и др., 2004; Карпова, Грунтенко, Раушенбах, 2005], пространственной организации ядра [Ваь ЬогосНп ег а1., 1993; Стегний, Вассерлауф, 1994; Шарахов и др., 1997; Чубы-кин, 2001] и многих других. Известно, что эволюция двукрылых насекомых (малярийных комаров, дрозофил) связана с преобразованиями архитектуры ядер генеративных клеток (системными мутациями). Взаимное расположение хромосом в трофоцитах (питающих клетках) яичников является видоспеци-фичным [Стегний, 1979; 1993]. Изучение особенностей архитектуры ядер трофоцитов у ВгозоркИа БаШотеа позволит уточнить систематическое положение и филогенетические отношения этого вида с другими видами подгруппы «melanogaster» рода ИгозорИНа.

Выяснение факторов, лежащих в основе системной реорганизации генома, важно для понимания процесса видообразования. Предполагается, что возникновение системных мутаций связано с наличием определенных условий, таких как особая структурная организация генома, инбредное размножение, а также воздействие неблагоприятных абиотических и биотических факторов среды обитания в условиях экологической периферии [Стегний, 1993]. Согласно гипотезе Сведа, изолированное существование лабораторных и природных популяций дрозофилы может привести к возникновению различий в пространственной ориентации хромосом в ядрах половых клеток. При скрещивании особей из разных популяций у гибридов могут возникать несоответствия в ко-ориентации гомологичных хромосом в зиготе, которые приводят к гибридному дисгенезу - комплексу нарушений, возникающих в генеративной сфере [Буеё, 1976]. Изучение взаимосвязи явления гибридного дисгенеза с системным мутагенезом может способствовать лучшему пониманию микроэволюционных процессов.

В настоящее время интенсивно проводится секвенирование геномов различных организмов. Установлена первичная последовательность нуклеотидов ДНК дрозофилы, человека и ряда других биологических объектов. Однако до сих пор наши знания о регуляции работы генов недостаточно глубоки. Предполагается, что одним из важных факторов в регуляции активности генов является взаимодействие различных локусов в пространстве ядра [Гвоздев,

| РОС НАЦИОНАЛЬНАV, 3 I БИБЛИОТЕК/ I

! »»""ТО/;

2001; Marshall, 2003]. Экспрессия гена может зависеть от его положения в системе генотипа (эффект положения) [Бирштейн, 1976; Жимулев, 1993] и от физического спаривания (конъюгации) гомологов (трансвекция) [Lewis, 1954]. Исследование влияния перестановки генетического материала на проявление генов дрозофилы является актуальным, поскольку может приблизить нас к пониманию того, как осуществляется контроль экспрессии.

Цель и задачи исследования

Цель работы: изучить особенности пространственной организации хромосом трофоцитов (питающих клеток) яичников дрозофил различных видов и линий.

Задачи:

1. Установить пространственное расположение хромосом в ядрах трофоцитов яичников у Drosophila santomea.

2. Исследовать особенности архитектуры ядер питающих клеток яичников у межвидовых гибридов D. santomea с другими видами комплекса «уакиЬа»: D. уакиЪа, D. teissieri, D. erecta.

3. Изучить пространственное расположение гомологичных хромосом у межлинейных гибридов Drosophila melanogaster (Cantonas х Berlin; Canton'S x Oregon R; Berlin x Canton'S; Berlin x Oregon R; Oregon R x Berlin; Oregon R x Canton 'S).

4. Установить особенности взаимного расположения гомологичных хромосом у межлинейных гибридов D. melanogaster в Р-М (Oregon R x п2\ Canton'S х ж2) и I-R (Cha x Lu; Cha x W"8; Cha x Cha RC+; JA x Lu; JA x W"w; JA x Cha RC+) системах гибридного дисгенеза и реципрокных гибридов ( W",S\JA; Lu х Cha).

5. Исследовать влияние хромосомных перестроек {Т(Х; 2L) IE, 23CD; In(l) 7В-С, 12E-F; In(l)lE, 20B-C; In(l) 4B-C, 20C; ln(2LR)Cy\ In(2LR)Pm; In(3LR)D) на проявление летальности факультативных доминантных летальных мутаций у D. melanogaster.

6. Провести цитогенетический анализ трофоцитов яичников самок Drosophila melanogaster с хромосомными перестройками (инверсиями и транслокацией) в гетерозиготном состоянии.

Научная новизна

В настоящей работе впервые изучено пространственное расположение хромосом в ядрах питающих клеток яичников у Drosophila santomea Lachaise and Harry и его межвидовых гибридов с D. уакиЪа. Показано, что для политен-ных хромосом трофоцитов яичников D. santomea характерно отсутствие локального хромоцентра, объединение плеч второй и третьей аутосом в цен-тромерной области, отсутствие видимых контактов хромосом с ядерной оболочкой и между собой. Анализ межвидовых гибридов D. santomea с D. yakuba показал видоспецифичность архитектуры ядер пи-

тающих клеток дрозофилы. Впервые проведен анализ взаимного расположения хромосом трофоцитов у межлинейных гибридов D. melanogaster. Показаны некоторые отличия в ко-ориентации гомологов различных линий в гибридных ядрах. Впервые проведек детальный цитогенетический анализ трофоцитов яичников у гетерозигот D. melanogaster по инверсиям и транслока-пиям. Показано неоднозначное влияние хромосомных перестроек на конъюгацию политенных хромосом питающих клеток.

Практическая ценность

Полученная коллекция факультативных доминантных летальных мутаций может быть использована для дальнейших исследований. Результаты работы включены в курсы лекций «Теория мутагенеза», «Эволюционная генетика» для студентов Томского госуниверситета.

Апробация результатов

Результаты проведенных исследований были представлены на I, II, Ш Международных конференциях «Проблема вида и видообразования» (2000, 2001, 2004 гг., г. Томск), на 2-й Международной конференции «Retrotrans-posons: their impact on organisms, genomes, and biodiversity» (Хельсинки, Финляндия, 2002 г.), на Первом съезде Общества клеточной биологии (Санкт-Петербург, 2003г.), на Третьем Съезде ВОГиС (Генетика в 21 веке: современное состояние и перспективы развития, Москва, 6-12 июня 2004 г.).

Публикации

По теме диссертации опубликовано 9 работ.

Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, материала и методов, результатов и обсуждения, заключения, выводов, списка использованных источников и литературы. Работа изложена на 126 страницах, включает 10 рисунков, 7 таблиц.

Вклад автора

Основные результаты получены автором самостоятельно. Факультативные доминантные летальные мутации выделены совместно с д.б.н. Б. Ф. Чадовым, к.б.н. Е. В. Чадовой, Н. Б. Фёдоровой (ИЦиГ СО РАН, г. Новосибирск). Картирование хромосомных перестроек проводилось совместно с к.б.н. Т. А. Колесниковой (ИЦиГ СО РАН, г. Новосибирск).

Автор выражает признательность научному руководителю д.б.н., проф. В. Н. Стегнию за постановку интересной темы исследования и обсуждение диссертации. Автор признателен д.б.н. Б. Ф. Чадову за предоставленную возможность работать в лаборатории деления клетки (ИЦиГ СО РАН, г. Новоси-

í»

бирск), помощь в выполнении экспериментов, обсуждение работы и предоставление фотографий дрозофил, к.б.н. Е. В. Чадовой, Н. Б. Фёдоровой, к.б.н. Т. А. Колесниковой за помощь в выполнении отдельных этапов работы, к.б.н. И. Э. Вассерлауф за обсуждение работы и содействие в получении фотографий. Автор благодарит Р. В. Анненкова за помощь в оформлении диссертации и моральную поддержку, к.х.н. Ю. В. Митренина за моральную и материальную поддержку, а также всех сотрудников кафедры цитологии и генетики ТомГУ, лаборатории эволюционной цитогенетики (НИИ ББ, г. Томск), лаборатории деления клетки (ИЦиГ СО РАН, г. Новосибирск) за поддержку и понимание.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ

Объекты исследования. В работе использовались следующие виды мух: Drosophila melanogaster, D. santomea, D. yakuba, D. erecta, D. teissieri. D. santomea любезно предоставлена Ф. Лемениер (F. Lemeunier, Франция). Виды D. yakuba, D. erecta, D. teissieri взяты из сток-центра (США). Использовали следующие линии D. melanogaster: Berlin Wild; Canton 'S\ Oregon R (линии дикого типа); ж2 ( C(l) DX; у; J)\ Cha-, JA (у, w); Lumeny, W"18; Cha RC+; Muller-5 (wa; B); C(1)DX, y2, w, f; у, ec, cv, et, v, f; In(2LR)Cy/ In(2LR)Pm, In(3LR)D/Sb. Линии любезно предоставлены К. Бьемоном (С. Biemont, Франция), Б. Ф. Чадовым (ИЦиГ СО РАН, г. Новосибирск). Линии с перестройками в Х-хромосоме получены на основе линии yellow Е. А. Артёмовой в 1999 г. (ИЦиГ СО РАН, г. Новосибирск). Использовали четыре линии с перестройками: 1) Т(Х; 2L) IE, 23C-D; 2) ln(l) 7В-С, 12E-F; 3) In(l)lE, 20В-С; 4) 1п(1) 4В-С, 20С.

Постановка скрещиваний. Использовали виргинных самок 1-2 суточного возраста. В зависимости от поставленной задачи в пробирки помещали 1-10 пар мух. Культивирование осуществляли на стандартной дрожжевой среде при оптимальной для развития температуре (24-25°С), либо при повышенной (29°С).

Приготовление и анализ цитологических препаратов. Для получения цитологических препаратов трофоцитов яичников брали 1-1,5 суточных самок дрозофилы. Яичники выделяли в растворе 0, 7 % NaCl и фиксировали в этанол-уксусном фиксаторе (соотношение 3:1). Окраску производили лакто-ацетоорсеиновым красителем в течение 10-20 минут. Яичники отмывали в 45% растворе уксусной кислоты и слегка давили на предметном стекле. Препараты хромосом слюнных желез готовили аналогичным способом без предварительной фиксации из личинок третьего возраста. Для анализа пространственного расположения хромосом в ядре у D. santomea и ее гибридов с D. yakuba готовили недавленые препараты. Окрашенные яичники накрывали покровным стеклом без надавливания для сохранения целостности ядер. Цитологический анализ трофоцитов яичников проводили при помощи микро-

скопа Laboval - 4 при увеличении 10 х 100 с использованием масляной иммерсии. Фотографии сделаны при помощи фотонасадки Olympus.

Получение хромосомных перестроек. Для получения хромосомных перестроек в Х-хромосоме брали самцов и облучали гамма-лучами в дозе 3000 Gr (установка «Игур-1»), Затем их скрещивали с виргинными самками линии у ее cvctvf. Полученных самок F1 сажали индивидуально с самцами ее evetv f. Среди самок F1 отбирали тех, в потомстве которых не было кроссоверных сыновей, или их было мало. Этих потомков мужского пола, которые не несли цепочку маркеров, вводили в культуру, скрещивая с самками линии C(1)DX, у2 wf. Полученные культуры проверяли на наличие перестроек цитологически. Линии с хромосомными перестройками поддерживали в культуре путем скрещивания самцов yellow с перестройкой в Х-хромосоме с самками со сцепленными Х-хромосомами C(1)DX, у2 wf. Чтобы исключить влияние аутосом в тестах по действию перестроек на проявление деталей, самок исходной линии C(1)DX, у2 w/в течение десяти поколений скрещивали с самцами линии yellow. Такая процедура обеспечивает замену аутосом исходной линии C(1)DX, у2 wf на аутосомы линии yellow. Далее самцов с перестройкой скрещивали с этими самками. Таким образом, самцы с хромосомными перестройками отличались от фондовых самцов yellow только наличием перестройки. Для получения самок-гетерозигот по инверсиям и транслокации самок фондовой линии yellow скрещивали с самцами, несущими перестройки. Виргин-ных самок F1 использовали для тестирования мутаций.

Для изучения действия перестроек в аутосомах на проявление летальности мутаций получали самок с генотипами: 1) у/у; +/+; +/+; 2) у/у; Су/+; +/+; 3) у/у; Рт/+; +/+; 4)у/у;+/+; D/; 5) у/у; Су/+; D/+; 6) у/у; Рт/+; D/+. Для этого самцов линии In(2LR)Cy/In(2LR)Pm; In(3LR)D/Sb скрещивали с самками линии yellow. В F1 отбирали самцов с генотипами у/у; Су/+; D/+ и у/у; Рт/+; D/+, которых также скрещивали с виргинными самками линии yellow. В F2 получили самок всех необходимых генотипов. Данная процедура позволила изучить действие хромосомных перестроек, исключая влияние генного состава других хромосом. В качестве контроля использовали самок у/у; +/+; +/+.

Получение летальных мутаций в Х-хромосоме. Самцов линии Berlin Wild облучали гамма-лучами (доза 3000 Gr, установка «Игур-1») и через 3 часа скрещивали с самками C(1)DX, у2 wf. Каждый из самцов F1 был индивидуально скрещен с двумя виргинными самками yellow. Проанализировано потомство 2074 самцов. Отбор мутаций проводился на стадии куколки, непосредственно перед началом вылета потомства. В качестве «перспективных» отбирали пробирки, в которых все куколки были желтого цвета (самцы). Самца-отца скрещивали по очереди с самками C(1)DX, у2 wf и Muller-5 для введения мутации в культуру. Самок-матерей переносили на новую среду, чтобы увеличить количество анализируемого потомства.

Статистическая обработка данных. Достоверность различий между контролем и опытами вычисляли с помощью U-теста Манн-Уитни (сравнение

долей ядер с асинасисами у межлинейных гибридов D. melanogaster), фи-критерия Фишера (изменение летального действия мутаций хромосомными перестройками), критерия Хи-квадрат (влияние хромосомных перестроек в гетерозиготе на синапсис хромосом). При заданной вероятности Р = 0,95.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Пространственное расположение хромосом в ядрах трофоцитов яичников у Drosophila santomea Архитектура ядер трофоцитов яичников двукрылых насекомых (дрозофила, малярийный комар) является видоспецифичным показателем. Анализ пространственного расположения хромосом в этих ядрах позволяет идентифицировать близкие виды, в том числе и гомосеквентные, а также установить филогенетические отношения в видовых комплексах. Видоспецифичность архитектуры ядер проявляется в наличии или отсутствии хромоцентра, связей хромосом с ядерной оболочкой, локализации сайтов связывания на хромосомах, морфологии хромосомных участков прикрепления и в межвидовой разобщенности мест прикрепления гомеологичных хромосом к ядерной оболочке [Стегний, 1979; 1987; Стегний, Вассерлауф, 1994; Стегний, Вассерла-уф, Ананьина, 1996].

Вид D. santomea Lachaise and Harry обнаружен несколько лет назад на острове Sao Tome западной Экваториальной Африки французскими исследователями. Он отнесен к годроду Sophophora, группе «melanogaster», подгруппе «melanogaster», комплексу видов «yakuba», который включает еще четыре близких вида: D. arena, D. erecta, D. teis-sieri, D. yakuba. D. santomea хорошо отличима от других видов подгруппы по желтой окраске тела, отсутствию пигментации на брюшке, а также по деталям строения наружных половых органов самцов. Сравнение полигенных и миготических хромосом, последовательности гена period и аллозимов показало, что д анный вид является близким с видом D. yakuba [Lachaise et al, 2000; Llopart A. et al., 2002]. Близость D. santomea и D. yakuba с одной стороны, а также их самостоятельный видовой статус - с другой, подтверждается результатами их гибридизации. Эта виды гибрвдизуются в лабораторных и естественных условиях обитания. В первом поколении в обоих направлениях скрещивания возникают фертильные самки и стерильные самцы. Причем у потомков мужского пола иногда наблюдаются серьезные нарушения развития [Lachaise et al., 2000; Coyne et al., 2002].

В настоящей работе изучена архитектура ядер трофоцитов яичников 23 самок D. santomea, всего проанализировано 549 ядер на разных стадиях ком-пактизации первичных политенных хромосом. Показано, что для хромосом трофоцитов яичников D. santomea характерно отсутствие хромоцентра, объединение плеч второй и третьей аутосом в центромерной области, отсутствие явных контактов с ядерной оболочкой и друг с другом (Рисунок 1 а, б). В целом, данное расположение хромосом в ядре у D. santomea в значительной

степени напоминает таковое у D. уакиЬа (Рисунок 1 в, г) и у D. teissiery, существенно отличается от ориентации хромосом в ядре у D. огепа и D. erecta [Вассерлауф, Стегний, 1992].

Одним из главных показателей видоспецифичности архитектуры является сохранение индивидуального положения гомеологичных хромосом в гибридном ядре. Это проявляется в разобщенности мест прикрепления гомеологов к ядерной оболочке, а также в нарушении спаривания гомеологичных хромосом (асинапсисах) [Стегний, 1993]. Поскольку пространственное расположение хромосом трофоцитов яичников D. santomea визуально сходно с таковым у D. уакиЬа, мы провели гибридизацию этих двух видов дрозофил для сравнения относительных позиций гомеологов в ядре. Проведенный в настоящей работе анализ препаратов трофоцитов яичников гибридных самок D. santomea х D. уакиЬа и D. yakuba х D. santomea выявил наличие нарушений спаривания гомеологичных хромосом (Рисунок 1 д, е). Подсчитано количество ядер с аси-напсисами у гибридов $ D. yakuba х с? D. santomea. Проанализировано 10 препаратов яичников гибридных самок, 164 ядра трофоцитов. Единообразия по характеру асинаптирования хромосом не наблюдалось. Выявлено наличие ядер с нормально спаренными гомеологами (27,4 ± 3,5 %), ядер с нарушением си-напсиса только в Х-хромосоме (6,7 ± 2,0 %), только в одной аутосоме (34,8 ± 3,7 %) или в двух аутосомах (12,2 ± 2,6 %). Встречались ядра с асинаптированным и Х-хромосомой и одной аутосомой (9,8 ± 2,3%) и ядра с асинапсисами во всех хромосомах (9,1 ± 2,2 %). D. yakuba и D. santomea являются гомосеквент-ными видами [Lachaise et al., 2000], то есть имеющими одинаковый рисунок политенных хромосом. Наличие высокой доли ядер с нарушением спаривания гомеологичных хромосом у гибридов (72,6 ± 3,5 %) говорит о том, что в гибридных ядрах сохраняются видоспецифичные позиции гомеологов. Гибридизация между другими видами комплекса «yakuba» не удалась.

Таким образом, проведенное нами исследование взаимного расположения первичных политенных хромосом трофоцитов яичников D. santomea показало, что этот вид является очень близким виду D. yakuba не только по структуре политенных и морфологии митотических хромосом, гену period и аллози-мам [Lachaise et al., 2000], но и по архитектуре ядер генеративных клеток (трофоцитов). Сходство архитектуры ядер трофоцитов может быть связано с наличием у этих видов общего предка, либо с происхождением D. santomea от D. yakuba, что ранее предположено другими исследователями [Lachaise et al., 2000]. Тем не менее, пространственное расположение хромосом трофоцитов у этих видов не является идентичным. В гибридных ядрах D. yakuba х D. santomea выявлены различия по ориентации гомеологов, что свидетельствует о самостоятельном статусе этих видов. Эти данные согласуются с теорией системных мутаций В. Н. Стегния, постулирующей, что видообразование происходит на базе системной реорганизации генома, связанной с изменением ядерной архитектуры [Стегний, 1979; 1987 а].

10 мкм

Рисунок 1 - Расположение хромосом в ядре: а, б - ОгозорИПа ъаЫотеа, в, г - О. уакиЬа, д, е - гибрид £>. уакиЬа х Г>. ъаЫотеа. ХЬ - левое плечо X-хромосомы, С - центромерный район, стрелками указаны участки асинапти-рования гомологов

Взаимное расположение первичных политенных хромосом в ядрах трофоцитов различных линий и межлинейных гибридов

D. melanogaster

Выяснение факторов, лежащих в основе системной реорганизации генома важно для понимания процесса видообразования. Предполагается, что одним из таких факторов является инбридинг. Известно, что инбредное размножение приводит к гомозиготизации генома и инбредной депрессии [Lints, Lints, 1965; Wallace, Madden, 1965]. С другой стороны, показано, что близкородственное разведение и в крайней степени - изогенизация - способствует активации мобильных генетических элементов [Гвоздев, Кайданов, 1986; Ратнер, Васильева, 2000]. Траспозиции МДГ повышают частоты возникновения хромосомных и генных мутаций [Engels, Preston, 1981; 1984]. Мобильные элементы способны перемещать на новое место фрагменты генома [Корочкин, 1983], в том числе и гетерохроматиновые. Диффузный бета-гетерохроматин участвует в поддержании определенной архитектуры ядра [Стегний, Шарахо-ва, 1991], его перемещение может привести к изменению хромосомно-мембранных отношений. Таким образом, мобильные элементы могут играть роль в системном мутагенезе.

Лабораторные линии дрозофилы, как правило, ведут свое начало от ограниченного числа особей и разводятся в условиях, способствующих близкородственному скрещиванию. Таким образом, они могут служить моделью для изучения действия инбридинга на пространственное расположение хромосом в ядре трофоцитов. Анализ ядер межлинейных гибридов позволяет произвести сравнение позиций гомологов относительно друг друга.

В настоящей работе исследовано расположение хромосом ядер трофоцитов яичников 8 линий D. melanogaster (Canton 'S; Berlin-, Oregon R; жу, Cha; JA; Lu; W"'8; Cha RC+) и межлинейных гибридов (1) Canton S х Berlin; 2) Canton "S X Oregon R; 3) Berlin x Canton 'S; 4) Berlin x Oregon R; 5) Oregon R x Berlin; 6) Oregon R x Canton 7) Oregon R x ж2; 8) Canton 'S x x2; 9) Cha x Lu; 10) Cha x W"18; 11) Cha x Cha RC+; 12) JA x Lu; 13) JA x W1"8; 14) JA x Cha RC+; 15) W1"8 x JA; 16) Lu x Cha). Гибриды 7-го и 8-го типов являются дис-генными в Р-М системе, гибриды 9-14-го типов - в I-R системе гибридного дисгенеза, 15-16-го - реципрокные. Показано, что для всех линий D. melanogaster характерна сходная архитектура ядер трофоцитов яичников: локальный хромоцентр отсутствует, хромосомные плечи разобщены в пространстве ядра и связаны с ядерной оболочкой центромерными участками хромосом, а XL-плечо и теломерным, хромосома 4 очень компактная, находится в зоне прикрепления центромерных районов хромосомы 3. Выявленные в данном исследовании особенности ко-ориентации хромосомных плеч согласуются с ранее полученными результатами [Стегний, Вассерлауф, 1991а].

Для политенных хромосом дрозофилы характерен соматический синапсис. В результате, число политенных хромосом в ядре уменьшается до гаплоидного

[Painter, 1933, цит. по Жимулеву, 1992]. Более детальное исследование показало, что гомологи политенных хромосом могут находиться, по крайней мере, в трех состояниях: 1) полный синапсис (оба гомолога тесно ассоциированы); 2) неполный синапсис (частичный асинапсис, гомологичные хромосомы частично рас-коньюгированы); 3) отсутствие синапсиса - полный асинапсис (гомологичные хромосомы неспарены по всей длине плеча) [Жимулев, 1992]. Показано, что частота нарушения синапсиса, размер и локализация участков асинапсиса в хромосомах слюнных желез не зависят от температуры выращивания личинок и методики приготовления препаратов [Куличков, Беляева, 1975].

В данном исследовании показано, что для хромосом трофоцитов самок всех изученных линий наиболее характерно состояние полного синапсиса (Рисунок 2 д, е). Выявлено незначительное количество ядер с расхождениями гомологов. Случаи полного асинапсиса плеч хромосом были редки. У гибридных самок всех типов были обнаружены ядра как с полностью синаптиро-ванными, так и асинаптированными гомологами (Рисунок 2, а-г). Характер и протяженность асинаптических сегментов варьировал в широких пределах. Были выявлены случаи как полного, так и частичного асинапсиса по разным плечам хромосом. Частичный асинапсис хромосомных плеч, как правило, проявлялся в околоцентромерных районах, хотя изредка встречались случаи незначительного расхождения гомологов в теломерных областях. Полный асинапсис гомологичных хромосом в ядре наблюдался как по одному плечу, так и по нескольким одновременно, вплоть до полного расхождения всех гомологов, как это наблюдается у межвидовых гибридов дрозофилы [Стегний, Вассерлауф, 1994]. Следует отметить, что, как правило, для хромосом трофоцитов, расположенных в одном фолликуле, было характерно наличие или отсутствие синапсиса.

Количественный анализ частоты встречаемости ядер с нарушениями спаривания гомологичных хромосом у гибридов Cantonas х Berlin, Oregon R х щ, JA х W"'8 показал индивидуальные различия по данному показателю (Таблица 1). Попарное сравнение выборок при помощи U-теста Манн-Уитни показало наличие достоверных различий по числу асинапсисов (при заданном уровне значимости р = 5% ) между выборками самок, полученными при скрещиваниях Canton'Sх Berlin и JA х W'" ( р= 0.002%), Oregon Rxn^vi JÂ х W1"8 (р = 4.14%). Достоверных различий между выборками самок FI Canton '5 х Berlin и Oregon Rx ж2 выявлено не было (р = 12.98%).

Согласно литературным данным, доли ядер с нарушениями конъюгации в политенных хромосомах слюнных желез у нормальных линий D. melanogaster составляют: 6,5-12,5 % [Лапта, Шахбазов, 1976], 9,63-16,57 % [Хасан, 1979], 35,5-43,1 % [Полянская, 1975 б]. В линии с нестабильными мутациями, вызванными мобильными элементами, - 45,45 % [Вагапова, 1991 цит. по Жимулеву, 1993].

Рисунок 2 - Первичные политенные хромосомы трофоцитов яичников D. melanogaster. Гибриды в Р-М системе гибридного дисгенеза: а, б - Cantoné х ж2\ в - Berlín х ад г - 7г2 х Berlín. Линии: д - Canton*S\ е - ж2. XL, 2R, 2L, 3R, 3L, 4 - хромосомные плечи, С - центромерный район, стрелками указаны участки асинаптирования гомологов

Таблица 1 - Нарушение синапсиса гомологичных хромосом в трофоцитах яичников у межлинейных гибридов D. melanogaster

Схема скрещивания (9*<?) Доли ядер с нарушениями синапсиса на кросс, %

минимальная максимальная средняя

Cantonas х Berlin 40,0 80,0 60,4 ±0,3

Oregon Rxk¡ 45,0 80,0 66,3 ± 0,3

JA x Wu* 60,0 84,0 76,0 ±0,1

Весьма интересным и до сих пор открытым остается вопрос, каковы причины, лежащие в основе нарушений синаптического спаривания гомологов у • межлинейных гибридов? Ряд гипотез предполагает, что асинапсис связан с разнокачественностью гомологов: накоплением точковых мутаций или малых хромосомных перестроек, например, инверсий в пределах одного диска [Ев- ' геньев, Гаузе, 1975], обогащенностью повторами [Евгеньев, 1975], накоплением мобильных элементов генома [Reide, Renz, 1983]. Мы предполагаем, что нарушения синапсиса гомологов в ядрах трофоцитов яичников у межлинейных гибридов D. melanogaster связаны с некоторыми различиями в их пространственной ориентации внутри гибридного ядра. Вероятно, эти отличия могут возникать вследствие долгой изоляции и инбредного культивированием мух в лабораторных условиях [Вассерлауф, Митренина, Стегний, 2003].

Несмотря на то, что одним из важнейших критериев вида является скрещиваемость его представителей и производство плодовитого потомства, среди природных популяции и лабораторных линий D. melanogaster встречаются такие, при гибридизации которых наблюдается комплекс различных аномалий у гибридов первого и второго поколения, в том числе и стерильности. Это приводит к частичной репродуктивной изоляции некоторых популяций [Kidwell, Kidwell, 1976; Sved, 1976]. Одним из объяснений данного синдрома, является гипотеза, предложенная австралийским исследователем Дж. Сведом [Sved, 1976]. Автор объясняет этот феномен различиями линий в пространственном расположении хромосом, которые возникают из-за длительной изоляции мух различных природных и лабораторных *

популяций. Вследствие этого хромосомам самца одной линии не хватает информации, чтобы правильно ориентироваться в ядре зиготы при гибридизации с самками другой линии. В модели С веда отсутствуют представления о транспозиции подвижных элементов. Вероятно, пространственные различия в ориентации гомологичных хромосом приведут к дисгенезу только в случае наличия мобильных элементов у самцов [Picard, 1976; Pelisson, Picard, 1979; Bucheton et al., 1984].

В нашей работе показано, что у дисгенных гибридов дрозофилы наблюдаются несоответствия в ко-ориентации гомологов в трофоцитах яичников, проявляющиеся в асинапсисах. Существуют данные о параллелизме между конъюгацией поли-тенных хромосом и синапсисом гомологичных хромосом в мейозе [Евгеньев, 1970]. Поскольку трофоцигы одного фолликула имеют общее происхождение с ооцитом (от одного цистобласта), т.е. являются сестринскими с ним, можно пред-

положить, что нарушение конъюгации гомологов в политенных хромосомах свидетельствует о нарушении мейотического спаривания хромосом ооцита. Было установлено, что у самок, гетерозиготных по инверсии, нарушается спаривание гомологов как в ооците, так и в трофоцитах [Чубыкин, 2001 а]. У мейотического мутанта C(3)G с почти полным отсутствием кроссинговера также наблюдается нарушение конъюгации хромосом ооцитов и трофоцитов [Чубыкин, 2001 б]. Исследования пространственной организации хромосом в ооцитах и трофоцитах у межвидовых гибридов малярийных комаров [Стегний, 1987; Стегний, Вассерлауф, 1995] показали отсутствие конъюгации гомеологов в обоих типах клеток. Однако надо учитывать определенные различия между конъюгацией гигантских хромосом и спариванием хромосом в мейозе.

С целью выяснения функциональных последствий нарушений синапсиса хромосом трофоцитов яичников была выполнена следующая часть работы.

Влияние пространственных взаимоотношений хромосом на проявление факультативных доминантных летальных мутаций дрозофилы

Работы последних десятилетий показали, что интерфазное ядро имеет определенную внутреннюю архитектуру [Стегний, 1993; Marshall et al., 1996]. Экспрессия генов зависит от их положения в системе генотипа (эффект положения) [Дубинин, Сидоров, 1934; Бирштейн, 1976; Жимулев, 1993], а также от физического спаривания гомологов (трансвекция) [Lewis, 1954]. Трансвек-ция - это такие транс-взаимодействия генов, которые могут сопровождаться как их активацией, так и инактивацией [Гвоздев, 2001]. У дрозофилы известно большое количество генов, экспрессия которых зависит от физического спаривания гомологичных хромосом вблизи этого гена [Marshall, Sedat, 1999].

Для решения поставленной задачи нами было выделено 6 мутаций. При их отборе и ведении были отмечены низкая плодовитость мутантных самцов и появление грубых нарушений развития, а также проявление летальности только в определенных условиях. Эти свойства позволили отнести полученные мутации к факультативным доминантным деталям [Чадов и др, 2000; Чадов, 2002]. Условные летальные мутации известны у дрозофилы и некоторых других организмов, однако «условиями» являются внешние факторы [Ashbumer, 1989]. В данном случае на проявление летальности влияют генетические факторы: 1) происхождение хромосомы, несущей мутацию (матро- и патроклинность); 2) пол особи; 3) наличие хромосомной перестройки (инверсии, транслокации); 4) генотип партнера в скрещивании [Чадов и др., 2004].

В данном исследовании отбор мутаций проводили по признаку отсутствия или пониженного количества дочерей у мутантных самцов в скрещивании с самками yellow (Таблица 2). Низкая плодовитость наблюдалась не только за счет гибели самок в F1, но и самцов без мутации. В потомстве мутантов возникали особи с грубыми нарушениями развития. Аномалии, как правило, являлись асимметричными. Наблюдали особей с отсутствием ноги, крыла, по-

ловины груди, с уменьшенным в полтора раза глазом (второй был нормальным), с дополнительным глазом. Были обнаружены мухи с нарушенной формой тергитов, стернитов, с различными нарушениями в развитии крыльев. В основном, эти особи отличались пониженной жизнеспособностью.

Легальное действие мутаций модифицировалось присутствием у самок yellow хромосомных перестроек (инверсий и транслокаций) в половой хромосоме и ауто-сомах. Исследовали действие трех инверсий и одной транслокации, находящихся в Х-хромосоме в гетерозиготном состоянии. Снятие летальности хромосомными перестройками индивидуально для каждой мутации (Таблица 2). Транслокация Т(Х; 2L) IE, 23CD и инверсия In(l) 7ВС, 12EF достоверно снижали летальный эффект мутаций №№ 12, 13, 16, 28, а инверсия In(l) 4ВС, 20С - мутаций №№ 3, 12, 13,16,28. Инверсия 1п(1)1Е, 20ВС оказывала действие на все шесть мутаций. Эти результаты согласуются с ранее полученными данными [Чадов, 2001]. Самки с перестройками, как и контрольные самки без перестроек, имели маркер yellow. Это означает, что отсутствие в потомстве мутантных самцов дочерей не является результатом присутствия у тестерных самок аллеля yellow.

Таблица 2 - Потомство мутантных самцов с самками с перестройкам в Х-хромосоме

Номер мутации у самца Самки yellow (контроль) Самки yellow, Т(Х; 2L) 1Е, 23C-D Самки yellow, In(l) 7В-С, 12E-F Самки yellow, 1п(1)1Е, 20В-С Самки yellow, 1п(1) 4В-С, 20С

общее число потомков доля самок, % общее число потомков доля самок, % общее число потомков доля самок, % общее число потомков доля самок, % общее число потомков доля самок, %

3 489 0,0 98 0,0 111 0,9 325 7,7 376 5,1

12 550 7,1 333 14,1 518 29,2 596 38,3 726 29,5

13 403 5,7 273 10,3 352 26,7 518 31,7 771 34,5

16 860 11,7 402 20,9 1146 33,2 1017 43,4 1203 34,4

19 129 3,1 50 2,0 100 3,0 186 13,4 170 53

28 830 26,1 761 33,9 946 34,7 1003 47,2 783 45,7

На проявление мутантных генов изучено влияние перестроек Curly, Plum, Di-chaete в аутосомах (Таблицы 3,4). Инверсия Curly достоверно увеличивала количество выживших дочерей по сравнению с контролем у всех мутантных культур, кроме № 19. Инверсия Plum увеличивала долю дочерей у всех мутантов, кроме № 3. Инверсия Dichaete оказывала влияние на мутантные культуры №№ 3, 13, 16, достоверно увеличивая количество самок Fly линии № 13 и уменьшая у двух других линий. Присутствие в генотипе матери двух инверсий Curly и Dichaete оказывало влияние на все культуры, кроме № 28. При скрещивании самок этого геноти-

па с самцами культуры № 13 доля самок F1 достоверно меньше, чем в контроле. Тогда как при скрещивании с самцами остальных культур - достоверно выше. Наличие у самки двух инверсий Plum и Dichete достоверно повышало долю дочерей по сравнению с контролем при скре дивании с самцами линий №№ 12, 13, 16, 28. Данные по изменению летальности согласуются с ранее полученными результатами для других мутаций [Чадов, 2001; Чадов и др., 2004 б].

Таблица 3 - Потомство мутантных самцов с самками с одной перестройкой в аутосомах

Номер мутации у самца Самка у/у;+/+;+/+ (контроль) Самка у/у;+/Су;+/+ Самка у/у;+/Рт;+/+ Самка y/y;+/+;+/D

всего потомков доля самок всего потомков доля самок всего потомков доля самок всего потомков доля самок

Су+ Су Рт+ Рт D+ D

3 607 0,02 296 0,02 0,04 157 0,03 0,01 67 0,00 0,00

12 1265 0,13 418 ОДО 0,19 331 0,25 0,18 198 0,10 0,07

13 1276 0,13 501 0,17 0,21 282 0,30 0,13 243 0,15 0,05

16 1547 0,19 554 0,22 0,19 568 0,27 0,19 163 0,07 0,04

19 300 0,04 221 0,02 0,04 188 0,08 0,04 69 0,03 0,03

28 1039 0,33 520 0,23 0,26 442 0,26 0,22 78 0,18 0,10

Таблица 4 - Потомство мутантных самцов с самками с двумя перестройкам в аутосомах

Номер мутации у самца Самка y/y;+/Cy;+/D Самка y/y;+/Pm;+/D

всего потомков доля самок всего потомков доля самок

Су+ D+ Cy+D Су D+ CyD Рш+ D+ PmD Рш+ D+ PmD

3 177 0,08 0,04 0,08 0,04 26 0,04 0,00 0,00 0,04

12 206 0,07 0,11 0,10 0,11 89 0,11 0,13 0,07 0,03

13 1497 0,02 0,01 0,02 0,01 189 0,14 0,14 0,10 0,08

16 345 0,11 0,09 0,12 0,10 94 0,18 0,12 0,12 0,04

19 109 0,05 0,01 0,02 0,06 7 0,00 0,00 0,14 0,00

28 198 0,11 0,11 0,01 0,13 16 0,06 0,19 0,19 0,19

Проведено сравнение эффекта присутствия в генотипе самки единственной инверсии {Curly, Plum или Dichaete) и пары инверсий (Curly с Dichaete или Plum с Dichete). Показано, что нахождение в генотипе самки двух инверсий по сравнению с одной достоверно повышает долю самок F1 в потомстве му-тантных самцов следующих культур: № 3 (пары сравниваемых генотипов самок: 1)>>; Су и у; Су; D; 2) у; D и у; Су; D; 3) у; D и у; Рт; D), № 12 (пары: D и у; Су; D; 2) у; D и у; Рт; D), № 13 (пара .у; D и у; Рт; D), № 16 (пары: \)у; D и у; Су; D; 2 )y;D и у; Рт; D), № 19 (пара у; Супу; Су; D), № 28 (парад?; D и у; Рт; D). Наличие двух инверсий по сравнению с одной понижало долю самок в потомстве мутантных самцов № 13 (сравниваемые генотипы самок: 1 )у; Су и у; Су; D; 2) у; D и у; Су; D), № 28 (у; Су и у; Су; D). Полученные данные показывают, что все три перицентрические инверсии оказывают влияние на проявление мутаций. Однако их влияние неоднозначно. Инверсии Curly и Plum, находясь в генотипе самки в одиночку или совместно с инверсией Dichaete, как правило, повышают долю самок F1 в скрещиваниях с самцами большинства мутантных культур. Инверсия Dichaete может повышать, понижать или оказывать нейтральное действие на проявление мутаций. При наличии инверсии у матери в F1 возникают самки, как с перестройками (Curly, Plum, Dichaete), так и самки без них (Таблица 3). Появление последних означает, что снятие летальности не связано с наличием инверсии у выживших потомков. Для снятия летального действия мутаций необходимо присутствие перестройки в геноме материнской особи (материнский эффект перестройки). Этот вывод подтверждают данные о том, что присутствие инверсий Curly, Plum, Dichaete у мутантного самца не снижает действие летали [Чадов, 2001].

Для выяснения роли пространственного расположения хромосом трофоци-тов яичников в проявлении летальности мутаций провели цитогенетический анализ ядер трофоцитов яичников самок линии yellow, а также самок, гетерозиготных по хромосомным перестройкам. Подсчитывали количество ядер с нарушениями конъюгации гомологичных хромосом (асинапсисами). Выделяли три класса ядер: 1) ядра без видимого нарушения спаривания гомологов (полный синапсис); 2) ядра с небольшими участками асинаптирования; 3) ядра со значительными нарушениями конъюгации гомологичных хромосом. Для контрольной линии yellow ко второму классу ядер относили ядра с асинапсисами в одном из пяти плеч. Для линий, несущих инверсии, затрагивающие одно плечо (№№ 5, 6, 8), - с асинапсисами в двух плечах. Для линий с инверсиями Су, Рт - в трех и менее плечах, поскольку нарушение спаривания гомологов в плече, содержащем перестройку, является типичным явлением. Встречаемость ядер различных классов у гетерозигот по перестройкам указана в таблице 5.

Таблица 5 - Нарушение синапсиса гомологичных хромосом в трофоцитах яичников £>. melanogaster у гетерозигот по хромосомным перестройкам

Линия Всего ядер Доли ядер различных классов

1 2 3

yellow (контроль) 374 80,8 ± 2,0 16,3 ± 1,9 2,9 ±0,9

yellow/Т(1;2) IE; 23C-D 95 67,4 ± 4,8 24,2 ± 4,4 8,4 ±2,8

yellow/1п(1) 7В-С; 12E-F 561 47,6 ±2,1 38,5 ± 2,0 13,9 ±1,5

yellow /1п(1) IE; 20В-С 530 47,7 ± 2,2 32,5 ± 2,0 19,8 ± 1,7

yellow /1п(1) 4В-С; 20С 504 22,8 ± 1,9 43,1 ±2Д 34,1 ± 2,1

yellow* (контроль) 473 79,2 ± 1,9 15,9 ± 1,7 4,9 ±1,0

yellow* / In(2LR) СуО 464 0 81,9 ± 1,8 18,1 ± 1,8

yellow* / In(2LR) Pm 525 0 87,8 ± 1,4 12,2 ± 1,4

Анализ трофоцитов яичников показал, что состояние асинапсиса хромосомных плеч наблюдаются как в геномах, содержащих хромосомную перестройку, так и в геномах, не содержащих её. Это означает, что нарушение синапсиса не является специфичным для линий, несущих перестройки. Интересно, что в линиях с инверсиями в XL-плече не было постоянного асинапсиса Х-хромосомы. В 22,8 - 47,7 % ядер Х-хромосомы были синаптированы. Сравнение контрольных выборок и выборок самок с хромосомными перестройками показало достоверные различия по частоте встречаемости ядер различных классов. Полученные нами данные свидетельствуют о том, что хромосомные перестройки (инверсии и транслокации), находящиеся в гетерозиготном состоянии способны значительно влиять на конъюгацию гомологичных хромосом. Причем они способствуют нарушению синапсиса не только тех плеч, которые затронуты перестройкой, но и других. Так, например, парацентрическая инверсия In(l)4B-C; 20С вызывает нарушения синапсиса трех-пяти хромосомных плеч в 34,1 ± 2,1 % ядер питающих клеток яичников, перицентрическая инверсия In(2LR) СуО приводит к асинаптированию четырех-пяти плеч в 18,1 ± 1,8 % ядер. Мы предполагаем, что изменение характера конъюгации гомологичных хромосом перестройкой влияет на активность генов.

Питающие клетки яичников двукрылых насекомых играют важную роль в развитии ооцита. Они являются источником большинства необходимых белков, РНК, участвуют в становлении полярных градиентов. Накопленные ооцитом в период оогенеза питательные вещества используются на начальных этапах развития эмбриона. Полярные градиенты различных молекул определяют план строения [Айзенштадт и др., 1977; King, Buning, 1985; Короч-

кин, 1999]. В связи с этим, правильная работа генома трофоцитов необходима на ранних стадиях развития. Любые, не предусмотренные изменения экспрессии генов, негативно скажутся на этом процессе.

Мы предполагаем, что нарушения синапсиса хромосом трофоцитов яичников дрозофилы могут влиять на работу мутантных генов. Это явление родственно трансвекции. Предположение согласуется с нашими данными по изменению летальности под действием инверсий и транслокаций. Перестройки оказывают материнский эффект на проявление мутаций. При скрещивании мутантного самца с самкой, несущей перестройку в Х-хромосоме или в ауто-сомах, летальное действие мутации снижается. Причем выживают самки, как несущие, так и не несущие перестройку. Логично предположить, что материнский эффект может обеспечиваться работой генов в трофоцитах. Таким образом, в настоящей работе показано, что нарушение спаривания гомологов хромосом в питающих клетках яичников дрозофилы может приводить к изменению режимов функционирования генов.

ВЫВОДЫ

1. Установлено пространственное расположение первичных политенных хромосом трофоцитов яичников у D. santomea. Показано отсутствие локального хромоцентра, объединение плеч второй и третьей аутосом в центромерной области. В целом, архитектура ядер трофоцитов у D. santomea сходна с расположением хромосом в ядре у видов D. yakuba и D. teissiery, отличается от архитектуры ядер у D. огепа и D. erecta.

2. Анализ трофоцитов яичников у межвидовых гибридов D. santomea и D. yakuba выявил различия по ориентации гомеологов в гибридных ядрах. Показано, что у них наблюдаются нарушения конъюгации гомеологич-ных хромосом преимущественно в прицентромерных областях. Гибридизация D. santomea с другими видами комплекса «yakuba» не удалась.

3. Изучено взаимное расположение хромосом у межлинейных гибридов Drosophila melanogaster (Cantonas х Berlin; Cantonas x Oregon R; Berlin x Cantoné, Berlin x Oregon R; Oregon R x Berlin; Oregon R x Canton'S). Показаны некоторые отличия во взаимной ориентации гомологов разных линий.

4. Исследовано пространственное расположение хромосом у дисгенных и реципрокных им гибридов дрозофилы в Р-М и I-R системах гибридного дисгенеза (Oregon R х Canton'S х ж2\ ChaxLu; Cha х W",8\ Chax Cha RC+; JA x Lu; JA x W"'8; JA x Cha RC+; W"18xJA; Lu x Cha). Показано, что значительное количество гибридных ядер имеет нарушения конъюгации хромосом: у гибридов Oregon R х ж2 в среднем 66,3 ± 0,3%, JA х W'"8- 76,0 ± 0,1%.

Исследовано действие трех парацентрических инверсий (1п(1) 7В-С, 12Е-1п(1)1Е, 20В-С, 1п(1) 4В-С, 20С) и одной транслокации {Т(Х; 2Ь) 1Е, 23СП) в Х-хромосоме, двух перицентрических инверсий во второй (.1п(2Ш)Су; 1п(2ЬК)Рт) и одной инверсии в третьей {1п(ЗЬЯ)П) аутосомах на проявление летальности мутаций. Показан материнский эффект хромосомных перестроек. Перестройка способна как снижать, так и повышать летальное действие мутаций.

Анализ ядер питающих клеток яичников линий, гетерозиготных по хромосомным перестройкам показал, что присутствие инверсии или транслокации изменяет характер конъюгации всех хромосом набора.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Вассерлауф И. Э., Митренина Е. Ю., Стегний В. Н. Изучение механизмов системной мутации при видообразовании // I Международная конференция «Проблема вида и видообразования»: Тез. докл. - Томск: Изд-во Томского университета, 2000. С. 23-24.

2. Mitrenina Е. Y., Wasserlauf I. А. Influence of Drosophila melanogaster Inbreeding on Spatial Interrelation of Primary Polytene Chromosomes of Ovarian Nurse Cells // Second meeting "Retrotransposons: Their impact on organisms, genomes, and biodiversity"(Helsinki, Finland). P. 45-46.

3. Митренина E. Ю., Вассерлауф И. Э. Изучение механизмов реорганизации архитектуры ядра при видообразовании // Эволюционная биология. Том 2. Материалы II Международной конференции «Проблема вида и видообразования». - Томск: Изд-во Томского университета, 2002. С. 375-376.

4. Вассерлауф И. Э., Митренина Е. Ю., Стегний В. Н. Изменение структуры хромосом трофоцитов яичников Drosophila melanogaster при гибридном дис-генезе // Генетика. - Т. 38. - 2003. - №5. - С. 687-693.

5. Вассерлауф И. Э., Митренина Е. Ю., Белоногова Н. М., Стегний В. Н. Изменение структуры хромосом в интерфазных ядрах трофоцитов яичников Drosophila melanogaster при гибридном дисгенезе и инбридинге // Цитология. - Т. 45. - 2003. - № 9. - С. 855-856.

6. Вассерлауф И. Э., Митренина Е. Ю., Белоногова Н. М., Стегний В. Н. Инбридинг как возможный механизм пространственной реорганизации архитектуры ядер трофоцитов яичников у Drosophila // Генетика в 21 веке: современное состояние и перспективы развития: Материалы Зго Съезда ВОГиС, 2004. С. 249.

7. Фёдорова Н. Б., Хоцкина Е. А., Митренина Е. Ю., Чадов Б. Ф. Хромосомная перестройка и видообразование: объяснение связи между событиями // Вестник томского государственного университета (приложение). - 2004. - № 10.-С. 122-127.

8. Вассерлауф И. Э., Шелковникова Т. А., Митренина Е. Ю., Стегний В. Н. Нарушения спаривания гомологичных хромосом в ядрах трофоцитов яичников Drosophila melanogaster при инбридинге и низкой температуре // Цитология. - Т. 47. - 2005. - № 9. - С. 798-799.

9. Фёдорова Н. Б., Хоцкина Е. А., Митренина Е. Ю., Чадов Б.Ф. Хромосомная перестройка и видообразование: объяснение связи между событиями // Эволюционная биология. Том 3. Материалы III Международной конференции «Проблема вида и видообразования». - Томск. - Томский государственный университет, 2005. С. 107-121.

Отпечатано на участке оперативной полиграфии Редакциовгно-издательского отдела ТГУ Лицензия ПД №00208 от 20 декабря 1999 г.

Заказ № от "-¿2" 04 200$ г. Тираж -410 экз.

сРеебА №=h

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Митренина, Елизавета Юрьевна

Список сокращений.

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Систематика, географическое распространение и филогения подгруппы melanogaster рода ОгоБорНИа.

1.2. Гибридизация в подгруппе melanogaster.

1.3. Особенности оогенеза и раннего развития дрозофилы.

1.4. Основные принципы организации интерфазного ядра.

1.5. Ткане- и видоспецифичность архитектуры ядер с политенными хромосомами у двукрылых насекомых.

1.6. Системная реорганизация генома при видообразовании.

1.7. Явление гибридного дисгенеза.

1.7.1. Р-М система гибридного дисгенеза.

1.7.2.1-Я система гибридного дисгенеза.

1.8. Факультативные доминантные летальные мутации.

1.8.1. Предпосылки для выделения мутаций.

1.8.2. Свойства факультативных доминантных летальных мутаций.

1.8.3. Модель регуляторного гена.

1.9. Роль хромосомных перестроек в видообразовании.

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ.

2.1. Виды и линии дрозофил.

2.2. Постановка скрещиваний.

2.3. Приготовление и анализ цитологических препаратов.

2.4. Получение хромосомных перестроек.

2.5. Получение летальных мутаций в Х-хромосоме.

2.6. Статистическая обработка данных.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.

3.1. Пространственное расположение хромосом в ядрах трофоцитов яичников у ОгоБоркИа яаМотеа.

3.2. Взаимное расположение первичных политенных хромосом в ядрах трофоцитов различных линий и межлинейных гибридов £>. melanogaster.

3.3. Влияние пространственных взаимоотношений хромосом на проявление факультативных доминантных летальных мутаций у дрозофилы.

3.3.1. Выделение факультативных доминантных леталей и их основные свойства.

3.3.2. Модификация летального эффекта мутаций хромосомными перестройками.

3.3.3. Цитогенетический анализ гетерозигот по перестройкам.

3.3.4. Влияние хромосомных перестроек на функционирование генов у дрозофилы.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Изучение особенностей пространственной организации хромосом трофоцитов яичников некоторых видов подгруппы "melanogaster" рода Drosophila"

Известно, что эволюция двукрылых насекомых (малярийных комаров, дрозофилы) связана с преобразованиями архитектуры ядер генеративных клеток (системными мутациями). Показано, что взаимное расположение хромосом в питающих клетках яичников является характерным для вида показателем. Видоспецифичность проявляется в наличии локального хромоцентра, связей хромосомных плеч друг с другом и ядерной оболочкой [Стегний, 1979; Стегний, Вассерлауф, 1994; Стегний и др., 1996]. Изучение особенностей архитектуры ядер трофоцитов у ИгоБорЬПа заШотеа позволит уточнить систематическое положение и филогенетические отношения этого вида с другими видами подгруппы «melanogaster» рода ОгояоркИа.

Выяснение факторов, лежащих в основе системной реорганизации генома, важно для понимания процесса видообразования. Предполагается, что возникновение системных мутаций связано с наличием определенных условий, таких как особая структурная организация генома, инбредное размножение, а также воздействие неблагоприятных абиотических и биотических факторов среды обитания в условиях экологической периферии [Стегний, 1993]. Согласно гипотезе Сведа, изолированное существование лабораторных и природных популяций дрозофилы может привести к возникновению различий в пространственной ориентации хромосом в ядрах половых клеток. При скрещивании особей из разных популяций у гибридов могут возникать несоответствия в ко-ориентации гомологичных хромосом в зиготе, которые приводят к гибридному дисгенезу — комплексу нарушений, возникающих в генеративной сфере [Sved, 1976]. Изучение взаимосвязи явления гибридного дисгенеза с системным мутагенезом может способствовать лучшему пониманию микроэволюционных процессов.

Интерфазное ядро - упорядоченная система. Отдельные хромосомы занимают определенные территории в объеме ядра. В соответствии со своим положением, локусы могут взаимодействовать друг с другом. Эти возможности несколько расширяются вследствие их ограниченной подвижности [Marshall et al., 1997; Marshall, 2002; Parada, Misteli, 2002]. Экспрессия гена может зависеть от его положения в системе генотипа (эффект положения) [Бирштейн, 1976; Жимулев, 1993] и от физического спаривания (конъюгации) гомологов (трансвекция) [Lewis, 1954].

Проведенные на D. melanogaster исследования показали, что летальное действие факультативных доминантных мутаций модифицируется присутствием у родительской самки хромосомных перестроек (инверсий и транслокаций) [Чадов и др., 2000; Чадов, 2001; 2002]. Материнский эффект у дрозофилы может быть связан с функционированием геномов фолликулярных или питающих клеток (трофоцитов) яичников. Эти клетки участвуют в созревании ооцита, их продукты используются на ранних стадиях эмбриогенеза. Следовательно, пространственное расположение хромосом в ядрах этих клеток может влиять на развитие будущей особи. Изучение влияния перестановки генетического материала на проявление генов дрозофилы является актуальным, поскольку может приблизить нас к пониманию того, как осуществляется контроль экспрессии.

Цель и задачи исследования

Задачи:

1. Установить пространственное расположение хромосом в ядрах трофоцитов яичников у Drosophila santomea.

2. Исследовать особенности архитектуры ядер питающих клеток яичников у межвидовых гибридов D. santomea с другими видами комплекса «yakuba»: D. уакиЪа, D. teissieri, D. erecta.

3. Изучить пространственное расположение гомологичных хромосом у межлинейных гибридов Drosophila melanogaster (Cantonas х Berlin; Cantonas x Oregon R; Berlin x Cantoné; Berlin x Oregon R; Oregon R x Berlin; Oregon R x Canton

4. Установить особенности взаимного расположения гомологичных хромосом у межлинейных гибридов D. melanogaster в Р-М {Oregon R х лг2; CantonS х ж2) и I-R {Cha x Lu; Cha x W1118; Cha x Cha RC+; JA x Lu; JA x W1118; JA x Cha RC+) системах гибридного дисгенеза и реципрокных гибридов {W1118 xJA; Lux. Cha).

5. Исследовать влияние хромосомных перестроек (Т(Х; 2L) IE, 23CD; In(l) 7В-С, 12E-F; In(l)lE, 20В-С; In(l) 4В-С, 20С; In(2LR)Cy; In(2LR)Pm; In(3LR)D) на проявление летальности факультативных доминантных летальных мутаций у Z). melanogaster.

Научная новизна

В данной работе впервые изучено пространственное расположение хромосом в ядрах питающих клеток яичников вида Drosophila santomea Lachaise and Harry и его реципрокных межвидовых гибридов с D. уакиЪа. Показано, что для политенных хромосом трофоцитов яичников D. santomea характерно отсутствие локального хромоцентра, плечи второй и третьей аутосом объединены в центромерной области. Явных контактов этих хромосом с ядерной оболочкой не выявлено. Левое плечо Х-хромосомы не связано с аутосомами. Наблюдается связь этого плеча с ядерной оболочкой в центромерной и/или теломерной области. Анализ межвидовых гибридов D. santomea с D. yakuba показал видоспецифичность архитектуры ядер питающих клеток яичников дрозофилы.

Впервые проведен анализ взаимного расположения хромосом трофоцитов у межлинейных гибридов D. melanogaster, в том числе и у дисгенных в Р-М и I-R система гибридного дисгенеза. Показаны некоторые отличия в ко-ориентации гомологов различных линий в гибридных ядрах.

Получена новая коллекция линий D. melanogaster с факультативными доминантными летальными мутациями. Изучено действие семи хромосомных перестроек (инверсий и транслокации) на проявление летальности этих мутаций. Впервые проведен детальный цитогенетический анализ трофоцитов яичников у гетерозигот D. melanogaster по инверсиям и транслокациям. Показано неоднозначное влияние хромосомных перестроек на конъюгацию политенных хромосом питающих клеток.

Практическая ценность

Полученная коллекция линий D. melanogaster с факультативными доминантными летальными мутациями может быть использована для дальнейших исследований. Результаты настоящих исследований включены в курсы лекций «Теория мутагенеза», «Эволюционная генетика» для студентов Томского госуниверситета.

Апробация результатов

Результаты исследований были представлены на I, II, III Международных конференциях «Проблема вида и видообразования» (2000, 2001, 2004 гг., г. Томск), на Международной конференции «Retrotransposons: their impact on organisms, genomes, and biodiversity» (Хельсинки, Финляндия,

2002 г.), на Первом съезде Общества клеточной биологии (Санкт-Петербург,

2003 г.), на Третьем Съезде ВОГиС (Генетика в 21 веке: современное состояние и перспективы развития, Москва, 6-12 июня 2004 г.).

Публикации

По теме диссертации опубликовано 9 работ.

Благодарности

Автор выражает признательность научному руководителю д.б.н., проф. В. Н. Стегнию за постановку интересной темы исследования и обсуждение диссертации, к.б.н. И. Э. Вассерлауф за обсуждение работы и содействие в получении научных фотографий. Автор благодарит Р. В. Анненкова за помощь в оформлении диссертации и моральную поддержку, к.х.н. Ю. В. Митренина за моральную и материальную поддержку, а также всех сотрудников кафедры цитологии и генетики Томского госуниверситета и лаборатории эволюционной цитогенетики (НИИ ББ, г. Томск) за поддержку и понимание.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение Диссертация по теме "Генетика", Митренина, Елизавета Юрьевна

ВЫВОДЫ

2. Анализ трофоцитов яичников у межвидовых гибридов D. santomea и D. уакиЬа выявил различия по ориентации гомеологов в гибридных ядрах. Показано, что у них наблюдаются нарушения конъюгации гомеологичных хромосом преимущественно в прицентромерных областях. Гибридизация D. santomea с другими видами комплекса «yakuba» не удалась.

3. Изучено взаимное расположение хромосом у межлинейных гибридов Drosophila melanogaster (Canton x Berlin; Canton x Oregon R; Berlin x Canton S\ Berlin x Oregon R; Oregon R x Berlin; Oregon R x Canton ^S). Показаны некоторые отличия во взаимной ориентации гомологов разных линий.

4. Исследовано пространственное расположение хромосом у дисгенных и реципрокных им гибридов дрозофилы в Р-М и I-R системах гибридного / I о дисгенеза (Oregon R x п2\ Canton yS x ж2\ Cha x Lu\ Cha x W ; Cha x Cha RC+\ JA x Lu; JA x Wll¡8\ JA x Cha RC+; W1118 x JA; Lu x Cha). Показано, что значительное количество гибридных ядер имеет нарушения конъюгации хромосом: у гибридов Oregon R х в среднем 66,3 ± 0,3%, JA x W1118- 76,0 ± 0,1%.

5. Исследовано действие трех парацентрических инверсий (In(l) 7В-С, 12Е-F; In(l)lE, 20В-С; In(l) 4В-С, 20С) и одной транслокации (Т(Х; 2L) 1Е, 23CD) в Х-хромосоме, двух перицентрических инверсий во второй (In(2LR)Cy; In(2LR)Pm) и одной инверсии в третьей (In(3LR)D) аутосомах на проявление летальности мутаций. Показан материнский эффект хромосомных перестроек. Перестройка способна как снижать, так и повышать летальное действие мутаций. 6. Анализ ядер питающих клеток яичников линий, гетерозиготных по хромосомным перестройкам показал, что присутствие инверсии или транслокации изменяет характер конъюгации всех хромосом набора.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В ходе настоящего исследования было изучено пространственное расположение хромосом трофоцитов яичников у D. santomea. Установлено, что этот вид является близким с видом D. yakuba не только по структуре политенных и митотических хромосом, последовательностям некоторых генов, но и по архитектуре ядер питающих клеток яичников. С другой стороны, изучение межвидовых гибридов показало, что существуют некоторые различия по пространственной ориентации гомеологичных хромосом у этих видов. Различия выявляются при анализе гибридных ядер трофоцитов яичников. Сравнение архитектуры хромосом D. santomea и других видов подгруппы melanogaster выявило некоторое сходство этого вида по пространственному расположению хромосом с D. teissieri и D. mauritiana, существенные различия с D. erecta, D. orena, D. simulans, D. sechellia и D. melanogaster. Полученные данные подтверждают видоспецифичность архитектуры клеток генеративной сферы.

Проведенное в настоящей работе изучение взаимного расположения хромосом в ядрах у некоторых линий D. melanogaster выявило их сходство по данному показателю. Тем не менее, при скрещивании мух разных линий наблюдаются некоторые отличия в ориентации гомологичных хромосом. Предположено, что различия в пространственном расположении хромосом возникают благодаря изолированному существованию мух разных линий и их инбредному разведению. Возможно, отличия в ко-ориентации гомологов у гибридов могут способствовать развитию нарушений в половых клетках (гибридному дисгенезу) при условии наличия активных копий мобильных элементов в геноме самца. Установленные факты согласуются с гипотезой Сведа, предполагающей, что в основе гибридного дисгенеза находится пространственное несоответствие гомологов родительских линий у гибридов.

Выполненные нами эксперименты позволили сделать заключение о том, что хромосомные перестройки (инверсии и транслокации) способны оказывать материнский эффект на проявление факультативных доминантных летальных мутаций. Перестановка генетического материала способна усиливать или ослаблять летальное действие мутаций. Мы предполагаем, что материнский эффект хромосомных перестроек связан с измененим характера синапсиса гомологов в трофоцитах яичников у самок, гетерозиготных по инверсиям и транслокациям. Установленные в настоящей работе факты подтверждают то, что пространственные взаимоотношения хромосом в ядре играют важную роль в регуляции функционирования генов.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Митренина, Елизавета Юрьевна, Томск

1. Айзенштадт Т. Б. Цитология оогенеза. М.: Наука, 1984. -348с.

2. Айзенштадт Т. Б. и др. Современные проблемы оогенеза. М.: Наука, 1977.-314с.

3. Алтухов Ю. П. О соотношении мономорфизма и полиморфизма гемоглобинов в микроэволюции рыб // Доклады АН СССР. 1969. - Т. 189. -№5.-С. 1115-1117.

4. Алтухов Ю. П. Популяционная генетика рыб. — М.: Пищевая промышленность, 1974. 248 с.

5. Алтухов Ю. П. Вид и видообразование // Соросовский образовательный журнал. 1997. - № 4.-С. 2-10.

6. Алтухов Ю. П., Абрамова А. Б. Мономорфная видоспецифичная ДНК, выявляемая в полимеразной цепной реакции со случайными праймерами // Генетика. -2000.-Т. 36.-№ 12.-С. 1674-1681.

7. Алтухов Ю. П., Рычков Ю. Г. Генетический мономорфизм видов и его возможное биологическое значение // Журнал общей биологии. 1972. -Т. 33.-№ 3. -С. 281-300.

8. Андрианов Б. В. И др. Полиморфизм митохондриальной ДНК природных популяций дрозофил группы virilis II Генетика. 2003. - Т. 39. -№6.-С. 762-768.

9. Беннетт М. Д. Нуклеотипическая основа пространственной упорядоченности хромосом эукариот и ее значение для эволюции генома и фенотипической изменчивости / Эволюция генома. М.: Мир, 1986. - С. 234256.

10. Бирштейн В. Я. Гетерохроматин, мозаичный эффект положения у Drosophila и проблема гетерохроматинизации хромосом // Успехи современной биологии. 1976. - Т. 81. - Вып. 2. - С. 225-243.

11. Бурлак В. А. Чувствительность личинок малярийного комара Anopheles messae с разными инверсионными генотипами к энтомопатогенной бактерии

12. Bacillus thuringiensis israelensis в зависимости от дозы II Генетика. 1997. — Т. 33.-№ 9.-С. 1229-1235.

13. Вайсман Н. JL, Захаров И. К. Множественный аллелизм по гену net у D. melanogaster и D. simulans II Генетика. 2003. - Т. 39. - N 12. - С. 16251629.

14. Васильева J1. А. и др. Стрессовая индукция транспозиций ретротранспозонов дрозофилы: реальность явления, характерные особенности и возможная роль в быстрой эволюции // Генетика. 1997. -Т. 33. - N8.- С. 1083-1093.

15. Вассерлауф И. Э., Митренина Е. Ю., Стегний В. Н. Изменение структуры хромосом трофоцитов яичников Drosophila melanogaster при гибридном дисгенезе // Генетика. Т. 38. - 2003. - №5. - С. 687-693.

16. Вассерлауф И. Э., Стегний В. Н. Видоспецифичные особенности архитектоники первично политенных хромосом трофоцитов у Drosophila orena, D. yakuba, D. erecta, D. teissiery II Генетика. 1992. — Т. 28. - № 2. -С. 198-201.

17. Гвоздев В. А. Регуляция активности генов, обусловленная химической модификацией (метилированием) ДНК // Соросовский образовательный журнал.- 1999. № 10. - С. 11-17.

18. Гвоздев В. А Пространственное расположение хромосом в клеточном ядре определяет активность генов // Соросовский образовательный журнал. -2001.-Т. 7.- №2.-С. 4-10.

19. Гвоздев В. А., Кайданов JI. 3. Геномная изменчивость, обусловленная транспозициями мобильных элементов, и приспособленность особей Drosophila melanogaster II Журн. общ. биол. 1986. - Т. 47. - № 1. - С. 53-63.

20. Гилева Э. А. Хромосомная изменчивость и эволюция. М: Наука, 1990.-140 с.

21. Глазков М. В. Ассоциация хромосом с ядерной оболочкой и упорядоченность пространственной организации генетического материала в интерфазном ядре // Цитология и генетика. 1999. - Т. 33. - № 2. - С. 79-88.

22. Гордеев М. И., Сибатаев А. К. Возрастной отбор и способность к каннибализму у личинок малярийных комаров с разными кариотипами // Генетика. 1995. - Т. 31. - № 7. - С. 939-946

23. Грант В. Эволюция геномов. М.: Мир, 1991. - 467 с.

24. Гришаева Т. М., Иващенко Н. И. Проблемы структурно -функционального взаимодействия в системах гибридного дисгенеза // Успехи современной биологии. 1997. - Т. 117. - Вып. 1. - С. 52-67.

25. Дубинин Н. П., Сидоров Б. Н. Зависимость действия гена от его положения в системе // Биологический журнал. 1934. - Т. 3. - № 2. -С. 307-330.

26. Дубинин Н. П., Соколов Н. Н. Хромосомные мутации и система вида // Журнал общей биологии. 1940. - Т. 1 - № 4. - С. 543-564.

27. Евгеньев М. Б. Конъюгация политенных хромосом и кроссинговер в межвидовых гибридах Drosophila II Генетика. 1970. - Т. 6. - № 1. - С. 96101.

28. Евгеньев М. Б. Изучение конъюгации политенных хромосом у межвидовых гибридов Drosophila группы virilis. Равнозначность участков хромосомы в отношении конъюгации // Цитология. — 1975. — Т. 17. № 10. — С. 1128-1131.

29. Евгеньев М. Б. и др. Мобильные элементы и видообразование // Молекулярная биология. 1998.-Т. 32.- № 1.- С. 184-192.

30. Евгеньев М. Б., Гаузе Г. Г. Изучение конъюгации политенных хромосом у межвидовых гибридов Drosophila группы virilis. Гибридизация комплементарной РНК с политенными хромосомами на препаратах // Цитология. 1975. - Т. 17. - № 2. - С. 206-207.

31. Евгеньев М. Б., Шилов А. А. Повторяющиеся нуклеотидные последовательности ДНК и проблема гомологичной конъюгации хромосом // Молекулярная биология. 1977. - Т. 11.- № 1. - С. 139-147.

32. Жимулёв И. Ф. Политенные хромосомы: морфология и структура. -Новосибирск: Наука, 1992. 480 с.

33. Жимулев И. Ф. Гетерохроматин и эффект положения гена. Новосибирск: Наука, 1993.-491 с.

34. Жимулев И. Ф. Действие генов в раннем развитии дрозофилы // Соросовский образовательный журнал. 1998. -№ 7. — С. 30-34.

35. Кабанова В. М. и др. Кариологическое исследование природных популяций малярийного комара в Среднем Приобье. I. Характеристика кариотипа Anopheles messae II Цитология. 1972. - Т. 14. - № 5. - С. 630636.

36. Карпова Е. К., Грунтенко Н. Е., Раушенбах И. Ю. Ген ecdysonless регулирует метаболизм ювенильного гормона и дофамина у D. melanogaster //Генетика.-2005. -Т.41.-№ 11.-С. 1480.

37. Кикнадзе И. И. Политенные хромосомы как модель интерфазной хромосомы // Цитология. 1971. - Т. 13. - № 6. - С. 261.

38. Кикнадзе И. И. и др. Хромосомный полиморфизм в природных сибирских популяциях Chironomus plumosus II Зоол. журн. 1987 а. - Т. 66. -№6.-С. 877-882.

39. Кикнадзе И. И. и др. Хромосомный полиморфизм сибирских популяций Chironomus nudiventris Н Цитология. 1987 б. - Т. 28. - № 10. -С. 1161-1168.

40. Кикнадзе И. И. и др. Хромосомный полиморфизм в лабораторных и природных популяциях Chironomus thummi II Генетика. 1988. - Т. 24. -№ 10.-С. 1795-1805.

41. Кожемякина Т. А., Фурман Д. П. Детерминанты гибридного дисгенеза в природной популяции дрозофил Алтая // Генетика. 1995. - Т. 31. - № 9. -С. 1225-1232.

42. Колчанов Н. А. и др. Моделирование биологической эволюции: регуляторные генетические системы и кодирование сложности биологической организации // Вестник ВОГиС. 2004. - Т. 8. - № 2. - С. 8699.

43. Корочкин JL И. Регуляция активности генов у эукариот. Сообщение III. Экспрессия органоспецифической эстеразы у двух линий Drosophila virilis, несущих хромосомные перестройки // Генетика. — 1983. Т. 19. - № 3. — С. 460-465.

44. Корочкин JI. И. Введение в генетику развития. М.: Наука, 1999.254 с.

45. Куличков В. А., Беляева Е. С. Распределение участков асинапсиса гомологов в Х-хромосомах слюнных желез Drosophila melanogaster II Докл. АН СССР. 1975. - Т. 221. - С. 463-467.

46. Лапта Г. Е. Локализация асинаптенных сегментов в 2R- и 2L-хромосомах при нарушении конъюгации политенных хромосом Drosophila melanogasterIIГенетика. -1977.- Т. 13.-№ 6.-С. 1064-1071.

47. Лапта Г. Е. Анализ распределения асинаптических сегментов в хромосомах Drosophila melanogaster II Генетика. 1980. - Т. 16. - № 4. -С. 609-613.

48. Лапта Г. Е., Шахбазов В. Г. Нарушение конъюгации политенных хромосом инбредных линий и межлинейных гибридов ОгояорИНа melanogaster II Генетика. — 1976. Т. 12. — № 2.

49. Лебедева Л. И., Трунова С. А., Омельянчук Л. В. Генетика клеточного цикла. Адаптивная модификация проявления мутации СусВ2ё в делящихся клетках ВгоэоркИа melanogaster II Генетика. 2005. - Т. 41. - № 3. - С. 312319.

50. Льюин Б. Гены. М.: Мир, 1987. - 647 с.

51. Малиновский А. А. Роль хромосомных инверсий в эволюции вида // Журнал общей биологии. 1940. - Т. 1. - № 4. - С. 565-596.

52. Мельник Е. С. И др. Поиск новых регуляторных элементов ЪЫкогах комплекса ВгозоркИа melanogaster II Генетика. 2004. - Т. 40. - № 12. -С. 1609-1617.

53. Митрофанов В. Г. Краткий очерк по биологии и систематике рода ВгоБоркИа II Проблемы генетики в исследованиях на дрозофиле. Новосибирск: Наука, 1977. С. 7-18.

54. Орлов В. Н., Булатова Н. Ш. Сравнительная цитогенетика и кариосистематика млекопитающих. М.: Наука, 1983. - 404 с.

55. Петрухина Т. Е., Кайданов Л. 3. Исследование нарушений соматической конъюгации хромосом в высокоинбредных селектируемых линиях ВгояоркПа melanogaster и у гибридов // Материалы ВОГиС II генетического съезда. 1972.

56. Полянская Г. Г. Локализация терминальных точек асинапсиса политенных хромосом ВгоБоркИа melanogaster II Цитология. 1974. - Т. 16. - № П. - С. 1411-1414.

57. Полянская Г. Г. Сравнительное изучение асинапсиса политенных хромосом слюнных желез личинок в разных линиях ВгоБоркИа melanogaster II Вестник ЛГУ. 1975 а. - № 3. - С. 122-131.

58. Полянская Г. Г. Сравнительное изучение асинапсиса политенных хромосом слюнных желез личинок Drosophila melanogaster, Drosophila simulans и их гибридов // Генетика. 1975 б - Т. 11. - № 9. - С. 46-53.

59. Полянская Г. Г. Цитологическая карта терминальных точек асинапсиса в политенных хромосомах слюнных желез Drosophila melanogaster II Цитология. 1976. - Т. 18. -№ 6. - С. 693-701.

60. Полянская Г. Г., Самокиш В. А. Асинапсис политенных хромосом слюнных желез дрозофилы при гомозиготных инверсиях // Цитология. -1978.-Т. 20.-№ 12.-С. 1368-1378.

61. Провиз В. И. Хромосомный полиморфизм уникальной байкальской глубоководной популяции Sergentia flavodentata (Diptera, Chironomidae) из района выхода термальных вод // Генетика. 2005. - Т. 41. - № 3. - С. 366373.

62. Рапопорт И. А. Специфические морфозы у Drosophila melanogaster, вызванные химическими соединениями // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1939. - № 7. - С. 415-417.

63. Ратнер В. А., Васильева JI. А. Индукция транспозиций мобильных генетических элементов стрессовыми воздействиями // Соросовский образовательный журнал. 2000. - Т. 6. - № 6. - С. 14-20.

64. Редина О. Е. Геномный импринтинг как универсальный механизм функции генов в развитии // Генетика. 1996. - Т. 32. - № 5. - С. 609-613.

65. Сидоров Б. Н. Исследование характера изменений, обусловленных структурными мутациями хромосом // Доклады АН СССР. 1941.-Т. 31. -№4.-С. 389-391.

66. Стегний В. Н. Реорганизация структуры интерфазных ядер в онто- и филогенезе малярийных комаров // Докл. АН СССР. 1979. - Т. 249. - № 5. -С. 1231-1234.

67. Стегний В. Н. Генетические основы эволюции малярийных комаров Anopheles комплекса maculipennis {Diptera, Culicidae). 1. Хромосомныефилогенетические связи // Зоологический журнал. 1981. - Т. LX. - Вып. 1. 1. C. 69-77.

68. Стегний В. Н. Инверсионный полиморфизм малярийного комара Anopheles messae. Сообщение IV. Стационарность частотного распределения инверсий по ареалу вида // Генетика. 1983. - Т. 19. - № 3. - С. 466-473

69. Стегний В. Н. Системная реорганизация архитектоники политенных хромосом в онто- и филогенезе малярийных комаров. Различия структуры ядер соматических и генеративных тканей // Генетика. 1987 а. - Т. 23. -№5.-С. 821-827.

70. Стегний В. Н. Популяционная генетика и эволюция малярийных комаров. Томск: Изд-во Томского университета, 1991. - 136 с.

71. Стегний В. Н. Архитектоника генома, системные мутации и эволюция. Новосибирск: Изд-во Новосиб. ун-та, 1993. 111с.

72. Стегний В. Н. Сальтационное видообразование: средовые механизмы / Эволюционная биология: Материалы конференции «Проблема вида и видообразование». Под ред. В.Н. Стегния. Томск: Томский государственный университет, 2002. - Т. 2.-С. 109-117.

73. Стегний В.Н., Вассерлауф И.Э. Особенности взаимного расположения хромосом в генеративной ткани у Drosophila melanogaster II Генетика. — 1991а. Т. 27. -№ 7. - С. 1163-1167.

74. Стегний В. Н., Вассерлауф И. Э. Межвидовые отличия коориентации первично политенных хромосом трофоцитов у Drosophila melanogaster,

75. D. simulans, D. mauritiana II Генетика. 1991 6. - Т. 27. - № 7. - С. 11691173.

76. Стегний В. Н., Вассерлауф И. Э. Видовая архитектоника хромосом генеративной ткани и проблемы филогенетических отношений в подгруппеmelanogaster рода Drosoph.Ua (Боркоркога) II Генетика. 1994. - Т. 30. -№4.-С. 478-483.

77. Стегний В. Н., Вассерлауф И. Э. Пространственная организация хромосом в ооцитах и сперматоцитах у малярийных комаров // Генетика. -1995. Т. 31. - № 2. - С. 278-280.

78. Стегний В.Н., Вассерлауф И. Э., Ананьина Т.В. Взаиморасположение первичных политенных хромосом яичников у 12 видов группы «уш/ш> рода ВгоБорЬПа {Боркоркога) II Генетика. 1996. - Т. 32. -№2. - С. 278-280.

79. Стегний В. Н., Шарахова М. В. Системная реорганизация архитектоники политенных хромосом в онто- и филогенезе малярийных комаров. Структурные особенности зон прикрепления хромосом к ядерной мембране // Генетика. 1991. - Т. 27. - № 5. - С. 828.

80. Стегний В. Н. и др. Кариотипическое исследование малярийного комара // Цитология. 1976. - Т. 18. - № 6. - С. 760-766.

81. Субочева Е. А., Ромашова Н. И., Ким А. И. Изучение ритуала ухаживания самцов некоторых линий О. melanogaster в экспериментах с оплодотворенными самками // Генетика. 2004. - Т. 40. - № 7. - С. 903-908.

82. Трофимов И. Е., Постникова Е. Д. Взаимодействие негомологичных хромосом в мейозисе у D. melanogaster II Биологический журнал. 1935. — Т. 4.-№4. С. 731-733.

83. Фризен Г. Рентгеноморфозы у ОгоБоркИа // Биологический журнал. 1935. Т. 4. - № 4. - С. 687-704.

84. Фролова С. Л. Развитие ядер типа слюнных желез в различных органах личинок Ого5орЫ1а и их сравнение с «метаболическими» ядрами личинок и имаго // Биологический журнал. 1938. - Т. 7. - № 4. - С. 703-736.

85. Фурман Д. П., Бухарина Т. А. Р-М гибридный дисгенез в природной популяции дрозофил Алтая // Генетика. 1996. - Т. 32. - № 8. - С. 10741079.

86. Хасан А. М. Проявления асинапсиса политенных хромосом линий и межлинейных гибридов БгоБоркПа melanogaster // Генетика. 1979. - Т. 15. -№ 1.-С. 171-17

87. Хвостова В. В. Эндомитоз в питающих клетках насекомых в связи с ролью материнского генотипа в организации яйца / Проблемы генетики в исследованиях В. В. Хвостовой. Новосибирск: Наука, 1980. - С. 23-36.

88. Чадов Б. Ф. Модель регуляции кроссинговера // Генетика. 1997. - Т. 33.-№7. -С. 883-890.

89. Чадов Б. Ф. Мутации, способные инициировать видообразование / / Эволюционная биология: Материалы конференции «Проблема вида и видообразование». Под ред. В.Н. Стегния. Томск: Томский государственный университет, 2001. - Т. 1. - С. 138-162.

90. Чадов Б. Ф. Образ регуляторного гена в опытах на дрозофиле // Генетика. 2002 б. - Т. 38. - № 7. - С.725-734.

91. Чадов Б. Ф. Признаки внутривидового сходства и особенности менделевского подхода к изучению наследственности // Философия науки. -2005. Т. 26. - № 3.-С. 94-114.

92. Чадов Б. Ф. и др. Новый класс мутаций у ОгоБоркИа melanogaster // Доклады РАН. -2000. -Т. 373. -№ 5.-С.714-717.

93. Чадов Б. Ф. и др. Гены, управляющие онтогенезом: морфозы, фенокопии, диморфы и другие видимые проявления мутантных генов // Генетика. 2004 а. - Т. 40. - № з. С.353-365.

94. Чадов Б. Ф. и др. Главное действие хромосомной перестройки -изменение работы регуляторных генов // Генетика. 2004 б. - Т. 40. - № 7. - С. 723-731.

95. Чадов Б. Ф. и др. От генетики внутривидовых отличий к генетике внутривидового сходства // Генетика. 2004 в. - Т.40. - № 9. - С. 11571172.

96. Чадов Б. Ф. и др. Мутация в онтогене дестабилизация генома -формообразование / Эволюционная биология: Материалы конференции «Проблема вида и видообразование». Под ред. В.Н. Стегния. - Томск: Томский государственный университет, 2005. - Т.З. - С. 92-106.

97. Чадов Б. Ф, Фёдорова Н. Б. Элементарное событие онтогенеза // Докл. РАН.-2003.-Т. 389.-№ 3. С. 408-412.

98. Чубыкин В. JI. Роль хромоцентра в неслучайном расхождении негомологичных хромосом // Генетика. 2001 а. - Т. 37. - № 3. - С. 277-285.

99. Чубыкин В. JI. Особенности структуры хромоцентра в клетках яичников Drosophila melanogaster, мутантных по генам C(3)G и NOD // Генетика. 2001 б. - Т. 37.- №9.- С. 1233-1242.

100. Чубыкин В. JL, Чадов Б.Ф. Хромоцентр в мейотических клетках самок дрозофилы Drosophila melanogaster, содержащих XY-компаунды // Цитология.- 1987.-Т. 29.-№2.-С. 168-173.

101. Шарахов И. В. и др. Особенности прикрепления политенных хромосом к ядерной оболочке в псевдопитающих клетках яичников Drosophila melanogaster II Генетика. 1997. - Т. 33. - № 2. - С. 189-195.

102. Щербаков Е. С. Строение политенных хромосом слюнных желез Simulium nollery II Цитология. 1966. - Т. 8. - № 6. - С. 703.

103. Andre С., Bregliano J. С. Evidence for a multistep control in transposition of I factor in the Drosophila melanogaster II Genetics. 1998. - V. 148. - P. 18751884.

104. Arnoldus E. P. et al. Somatic pairing of chromosome 1 centromeres in interphase nuclei of human cerebellum // Hum. Genet. 1989. - V. 83. - № 3. -P. 231-234.

105. Ashburner M. Drosophila. A laboratory handbook. N.Y.: Cold Spring Harbor Lab. Press, 1989. - 1330 p.

106. Ashburner M., Lemeunier F. Relationships within the melanogaster subgroup species of the genus Drosophila (Sophophora). I. Inversion polymorphism in Drosophila melanogaster and Drosophila simulans II Proc. R. Soc. Lond. B. -1976.- V. 193.-P. 137-157.

107. Ashburner M. et al. On the evolutionary relationships of Drosophila melanogaster II Dev. Genet. 1984. - Vol. 4. - Issue 4. - P. 295-312.

108. Baiborodin S. I. et al. A molecular and cytogenetic analysis of lambda 20p7 fragment DNA from the proximal beta-heterochromatin of Drosophila melanogaster II Gene. 1993. - V. 134. - № 2. - P. 175-81.

109. Barbash D. A., Ashburner M. A novel system of fertility rescue in Drosophila hybrids reveals a link between hybrid lethality and female sterility // Genetics. -2003. V. 163. - № 1. -P. 217-226.

110. Barker D. D. et al. Pumilio is essential for function but not for distribution of the Drosophila abdominal determinant Nanos II Genes Dev. 1992. - V. 6. — № 12.- P. 2312-2326.

111. Berezney R. et al. The nuclear matrix: a structural milieu for genomic function //Int Rev Cytol.- 1995.-V. 162A.-P. 1-65.

112. Berleth T. et al. The role of localization of bicoid RNA in organizing the anterior pattern of the Drosophila embryo // The EMBO Journal. 1988. - V. 7. - Issue 6. - P. 1749-1756.

113. Boyle S. et al. The spatial organization of human chromosomes within the nuclei of normal and emerin-mutant cells // Hum. Mol. Genet. 2001. - V. 10. -№3.- P. 211-219.

114. Brennan M. D. et al. The follicle cells are a major site of vitellogenin synthesis in Drosophila melanogaster // Developmental biology. 1982. - V. 89. -Issue 1.-P. 225-236.

115. Bronner G., Jackie H. Control and function of terminal gap gene activity in the posterior pole region of the Drosophila embryo // Mech. Dev. 1991. - V. 35. - №3.- P. 205-211.

116. Bucheton A. et al. Non-mendelian female sterility in Drosophila melanogaster: quantitative variations in the efficiency of inducer and reactive strains // Heredity. 1976. - V. 36. - P. 305-314.

117. Bucheton A. et al. The molecular basis of I-R hybrid dysgenesis in Drosophila melanogaster: identification, cloning and properties of the I-factor // Cell. 1984. - V. 38. - P. 153-163.

118. Bucheton A. et al. I elements and the Drosophila genome // Genetica. -1992.-V. 86.-P. 175-190.

119. Butlin R. K. Recombination and speciation // Mol. Ecol. 2005. - V. 14. -№9.-P. 2621-2635.

120. Caccone A. et al. A molecular phylogeny for the Drosophila melanogaster subgroup and the problem of polymorphism data // Mol. Biol. Evol. 1996. -V. 13.-№9.-P. 1224-1232.

121. Cansian R. A. et al. The Drosophila serido speciation puzzle: putting new pieces together // Genetica. 2000. - V. 108. - № 3. - P. 217-227

122. Cariou M. L. Biochemical phylogeny of the eight species in the Drosophila melanogaster subgroup, including D. sechellia and D. orena II Genet. Res. 1987. -V. 50.-P. 181-185.

123. Carson H. et al. Karyotipic stability and speciation in Hawaiian Drosophila II Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1967. - V. 57. - P. 1280.

124. Cha B.-J. et al. In vivo analysis of bicoid mRNA localization: implications for microtubule function in embryonic axis formation // Cell. 2001. - V. 106. -№ 1.-P. 35-46.

125. Citri Y. et al. A family of unusually spliced biologically active transcripts encoded by a Drosophila clock gene // Nature. 1987. - V. 326. - P. 42-47.

126. Clark J. B. et al. Molecular evolution of P transposable elements in the genus Drosophila. The melanogaster species group // Molecular Biology and Evolution. 1998. -V. 15. - Issue 6. - P. 746-755.

127. Coluzzi M. Sibling species in Anopheles and their importance in malariology // Miscellaneous Publ. Entomol. Soc. Amer. 1970. - V. 7. - № 1. - P. 62-77.

128. Coluzzi M. et al. Chromosomal differentiation and adaptation to human environments in the Anopheles gambiae complex // Transactions of the Royal Society of Tropical Medicine and Hygiene. 1979. - V. 73. - Issue 5. - P. 483497.

129. Coluzzi M. et al. A polytene chromosome analysis of the Anopheles gambiae species complex // Science. 2002. - V. 298. - P. 1415-1418

130. Comings D. E., Riggs A. D. Molecular mechanisms of chromosome pairing, folding and function // Nature. 1971. - V. 233. - № 5314. - P. 48-50.

131. Coyne J. A. et al. Sexual isolation between two sibling species with overlappingranges: Drosophila santomea and Drosophila yakuba II Evolution. -2002. V. 56. - № 12. - P. 2424-2434.

132. Cremer T. et al. Rabl's model of the interphase chromosome arrangement tested in Chinese hamster cells by premature chromosome condensation and laser-UV-microbeam experiments // Hum. Genet. 1982. - V. 60. - № 1. - P. 46-56.

133. Cremer M. et al. Non-random radial higher-order chromatin arrangements in nuclei of diploid human cells // Chromosome Res. 2001. - V. 9. - № 7. - P. 541567.

134. Croft J. A. et al. Differences in the localization and morphology of chromosomes in the human nucleus // Cell Biology. 1999. - V. 145. - № 6. -P. 1119-1131.

135. Csink A. K., Henikoff S. Large-scale chromosomal movements during interphase progression in Drosophila II J. Cell Biol. 1998. - V. 143. - № 1. -P. 13-22.

136. De Cuevas M, Spradling A. C. Morphogenesis of the Drosophila fusome and its implications for oocyte specification // Development. 1998. - V. 125. -№ 15.-P. 2781-2789.

137. Dernburg A. F., Sedat J. W. Mapping three-dimensional chromosome architecture in situ // Cell biology. 1998. - V. 53. - P. 187-222.

138. Dobzhansky Th. Genetics of evolutionary process. N.Y.; Lond.: Columbia Univ. Press. - 1971. - 520 p.

139. Driever W, Nusslein-Volhard C. A gradient of bicoid protein in Drosophila embryos // Cell. 1988. - V. 54. - Issue 1. - P. 83-93.

140. Dutrillaux B. et al. Inversions in evolution of man and closely related species // Ann. Genet. 1986. - V. 29. - № 3. - P. 125-202.

141. Eils R. et al. Three-dimensional reconstruction of painted human interphase chromosomes: active and inactive X chromosome territories have similar volumes but differ in shape and surface structure // J. Cell Biol. 1996. - V. 135. - № 6. -P. 1427-1440.

142. Eisses K. T. et al. Genetic differentiation within the melanogaster species subgroup of the genus Drosophila (Sophophora) II Evolution. -1979. V. 33. -№ 4.-P.1063-1068.

143. Engels W. R. Germline aberrations assotiated with a case of hybrid dysgenesis in D. melanogaster males // Genet. Research. 1979. - V. 33. - P. 137146.

144. Engels W.R. The P family of transposable elements in Drosophila //Annu Rev Genet. 1983. -V. 17. - P. 315-344.

145. Engels W. R., Preston C. R. Hybrid dysgenesis in Drosophila melanogaster: the biology of female and male sterility // Genetics. 1979. - V. 92. - № 1. -P. 161-174.

146. Engels W. R., Preston C. R. Identifying P factors in Drosophila by means of chromosome breakage hotspots // Cell. 1981. - V. 26. - № 3. - P. 421-428.

147. Engels W. R., Preston C. R. Formation of chromosome rearrangements by P factors in Drosophila II Genetics. 1984. - V. 107. - № 4. - P. 657-678.

148. Engels W. R. et al. Somatic effects of P element activity in Drosophila melanogaster: pupal lethality // Genetics. 1987. - V. 117. - № 4. - P. 745-757.

149. Ephrussi A. et al. Oskar organizes the germ plasm and directs localization of the posterior determinant nanos II Cell. 1991. - V. 66. - № 1. - P. 37-50.

150. Fawcett D. H. et al. Transposable elements controlling I-R hybrid dysgenesis in D. melanogaster are similar to mammalian LINEs // Cell. 1986. - V. 47. - P. 1007-1015.

151. Foe V. F., Alberts B. M. Reversible chromosome condensation induced in Drosophila embryos by anoxia: visualization of interphase nuclear organization // J. Cell Biol.- 1985.-V. 100.-№5.-P. 1623-1636.

152. Forrest K. M., Gavis E. R. Live imaging of endogenous RNA reveals a diffusion and entrapment mechanism for nanos mRNA localization in Drosophila II Current Biology. 2003. - V. 13. - Issue 14. - P. 1159-1168.

153. Funabiki H. et al. Cell cycle-dependent specific positioning and clustering of centromeres and telomeres in fission yeast // J. Cell Biol. 1993. - V. 121. -№5.-P. 961-976.

154. Gavis E. R., Lehmann R. Localization of nanos RNA controls embryonic polarity II Cell. -1992. V. 71. - Issue 2. - P. 301-313.

155. Gonzales-Reyes A. et al. Polarization of both major body axes in Drosophila by gurken-torpedo signaling // Nature. 1995. - V. 375. - Issue 6533. - P. 654-658.

156. Gonzales-Reyes A., St. Johnston D. Patterning of the follicle cell epithelium along the anterior-posterior axis during Drosophila oogenesis // Development. -1998.-V. 125.-Issue 15.-P. 2837-2846.

157. Haaf T., Ward D. C. Rabl orientation of CENP-B box sequences in Tupaia belangeri fibroblasts // Cytogenet. Cell Genet. 1995. - V. 70. - № 3-4. - P. 258-262.

158. Hey J. Speciation and inversions: chimps and humans // Bioessays. 2003. V. 25.-№9. p. 825-828.

159. Hiraoka Y. et al. The onset of homologous chromosome pairing during Drosophila melanogaster embryogenesis // J. Cell Biol. 1993. - V. 120. - № 3. -P. 591-600.

160. Hochstrasser M. et al. Spatial organization of chromosomes in the salivary gland nuclei of Drosophila melanogaster II The Journal of Cell Biology. 1986. -V. 102.-P. 112-123.

161. Kastanis P. et al. Macroevolutionary relationships of species of Drosophila melanogaster group based on mtDNA sequences // Molecular Phylogenetics and Evolution.-2003.- V. 28.-P. 518-528.

162. Kennison J. A., Southworth J. W. Transvection in Drosophila // Advances in Genetics. 2002. - V. 46. - P. 399-420.

163. Kidwell M. G., Kidwell J. F. Cytoplasm-chromosome interactions in prosophila melanogaster II Nature. 1975. - V. 253. - № 5494. - P. 755-756.

164. Kidwell M. G., Kidwell J. F. Hybrid dysgenesis in Drosophila melanogaster. the relationship between the P-M and I-R interaction system // Genet. Res. 1976. -V. 33. - P. 105-115.

165. Kidwell M. G. et al. Hybrid dysgenesis in Drosophila melanogaster. a syndrom of abberant traits including mutation sterility and male recombination // Genetics. 1977. - V. 86. - P. 913-833.

166. Kidwell M.G., Lisch D. Transposable elements as sources of variation in animals and plants // Proc. Natl. Acad. Sci. 1997. - V. 94. - P. 7704-7711.

167. Kidwell M. G., Peterson K. R. Evolution of transposable elements in Drosophila I I New perspectives on evolution. 1991. - P. 139-154.

168. King R. C. Oogenesis in adult Drosophila melanogaster. IX. Studies on the cytochemistry and ultrastructure of developing oocytes // Growth. 1960. - V. 24. -P. 265.

169. King R. C. Ovarian development in Drosophila melanogaster. New York, London: Acad. Press, 1970. - 227 p.

170. King R. C., Burnett R. G. Autoradiographic study of uptake of tritiated glycine, thymidine, and uridine by fruit fly ovaries // Science. 1959. - V. 129. № 3364.-P. 1674-1675.

171. King R. C., Vanoucek E .G. Oogenesis in adult Drosophila melanogaster. X. Studies on the behavior of the follicle cells // Growth. 1960. - V. 24. - P. 333-338.

172. King R. C. et al. Some of the properties of the components of Drosophila ooplasm // The American Naturalist. 1966. - V. 100. - № 913. - P. 365-372.

173. King R. C. et al. The development of the female Drosophila reproductive system//J. Morphol. 1968. - V. 124.-№2.-P. 143-166.

174. Kirkpatrick M., Barton N. H. Chromosome inversions, local adaptation, and speciation // Genetics. 2005. - № 10.

175. Ko W.-Y. et al. Molecular phylogeny of the Drosophila melanogaster species subgroup // J. Mol. Evol. 2003. - V. 57. - P. 562-573.

176. Koch E. A., King R. C. The origin and early differentiation of the egg chamber of Drosophila II Journal of morphology. 1966. - V. 119. - I. 3. -P. 283-303.

177. Koch E. A., King R. C. Further studies on the ring canal system of the ovarian cystocytes of Drosophila melanogaster II Zellforsch Mikrosk Anat. -1969.-V. 102.-№ l.-P. 129-152.

178. Koch E. A. et al. The division and differentiation of Drosophila cystocytes // Journal of morphology. 1967. - V. 121. -1. 1. - P. 55-70.

179. Mahy N. L. et al. Spatial organization of active and inactive genes and noncoding DNA within chromosome territories // Cell Biology. 2002. - V. 157. - № 4. - V. 579-589.

180. Manuelidis L. A view of interphase chromosomes // Science. 1990. -V. 250.-№4987.-P. 1533-1540.

181. Marshall W. F. Order and disorder in the nucleus // Current biology. 2002. -V. 12. — P. 185-192.

182. Marshall W. F. Gene expression and nuclear architecture during development and differentiation // Mechanisms of development. 2003. - V. 120. -P. 1217-1230.

183. Marshall W. F. et al. Specific interaction of chromatin with the nuclear envelope: positional determination within the nucleus in Drosophila melanogaster I I Molecular Biology of the cell. 1996. - V. 7. - № 5. - P. 825-842.

184. Marshall W. F. et al. Interphase chromosomes undergo constrained diffusional motion in living cells // Current biology. 1997. - № 4. - P. 930-939.

185. Marshall W. F., Sedat J. W. Nuclear architecture // Results Probl. Cell Differ. 1999. -V. 25. - P. 283-301.

186. Montell D. J. Border-cell migration: the race is on // Nat. Rev. Mol. Cell Biol.-2003.-V. 4.-№ l.-P. 13-24.

187. Morisato D., Anderson K. V. The spatzle gene encodes a component of the extracellular signaling pathway establishing the dorsal-ventral pattern of the Drosophila embiyo // Cell. 1994. - V. 76. - Issue 4. - P. 677-688.

188. Murata Y., Wharton R. P. Binding ofpumilio to maternal hunchback mRNA is required for posterior patterning in Drosophila embryo // Cell. 1995. - V. 80. -Issue 5. - P. 747-756.

189. Navarro A., Barton N. H. Chromosomal speciation and molecular divergence accelerated evolution in rearranged chromosomes // Science. - 2003. - V. 300. - № 5617. - P. 321 -324.

190. Neuman-Silberberg F. S., Schupbach T. The Drosophila dorsoventral patterning gene gurken produces a dorsally localized RNA and encodes a TGF alike protein // Cell. 1993. - V. 75. - Issue 1. - P. 165-174,

191. Noor M. A. et al. Chromosomal inversions and the reproductive isolation of species //Proc. Natl. acad. Sci. USA. -2001. -V. 98. -№ 21. P. 12084-12088.

192. O'Grady P. M. et al. Polytene chromosomes as indicators of phylogeny in several species groups of Drosophila II BMC Evolutionary Biology. 2001. - V. 1. -№6.

193. O'Hare K, Rubin G. M. Structures of P transposable elements and their sites of insertion and excision in the Drosophila melanogaster genome // Cell. 1983. - V. 34. - № 1. - P. 25-35.

194. Orr H. A., Irving S. Genetic analysis of the hybrid male rescue locus of Drosophila II Genetics. 2000. - V. 155. - № 1. - P. 225-231.

195. Paddy M. R. et al. Interphase nuclear envelope lamins form a discontinuous network that interacts with only a fraction of the chromatin in the nuclear periphery II Cell. 1990. - V. 62. - № 1. - p. 89-106.

196. Painter T. S. A new method for the study of chromosome aberrations and the plotting of chromosome maps // Science. 1933. - V. 78. - P. 585-586.

197. Parada L., Misteli T. Chromosome positioning in the interphase nucleus // Trends Cell Biol. 2002. - V. 12. - P. 425-432.

198. Pelisson A., Picard G. Non-mendelian female sterility in Drosophila melanogaster: I-factor mapping on inducer chromosomes // Genetica. 1979. -V. 50.-P. 141-148.

199. Picard G. Non-mendelian female sterility in Drosophila melanogaster. hereditary transmission of the I-factor// Genetics. 1976. - V. 83. - P. 107-123.

200. Picard G. et al. Non-mendelian female sterility and hybrid dysgenesis in Drosophila melanogaster II Genet. Res. 1978. - V. 32. - P. 275-287.

201. Picard G., L'Heritier P. A maternally inherited factor inducing sterility in Drosophila melanogaster II Dros. Inf. Serv. 1971. - V. 46. - P. 54.

202. Pimpinelli S. et al. Transposable elements are stable structural components of Drosophila melanogaster heterochromatin // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1995. V. 92. - № 9. - P. 3804-3808.

203. Pontbriant A. et al. Synteny comparison between apes and human using fine-mapping of the genome // Genomics. 2002. - V. 80. - Issue 4. - P. 395-401.

204. Proust J. et al. I-R hybrid dysgenesis in Drosophila melanogaster. Use of in situ hybridization to show the association of I factor DNA with induced sex-linked resessive lethals // Mutat. Res. 1992. - V.268. - № 2. - P. 265-285.

205. Qumsiyeh M. B. Evolution of number and morphology of mammalian chromosomes // J. Hered. 1994. - V. 85. - № 6. - P. 455-465.

206. Raff J. W., Glover D. M. Centrosomes, and not nuclei, initiate pole cell formation in Drosophila embryos // Cell. 1989. - V. 57. - P. 611-619.

207. Riechmann V., Ephrussi A. Axis formation during Drosophila oogenesis // Curr Opin Genet Dev. 2001. - V. 11. - № 4. - P. 374-383.

208. Ronsseray S. et al. Repression of hybrid dysgenesis in Drosophila melanogaster by combinations of telomeric P-element reporters and naturally occurring P elements // Genetics. 1998. -V. 149. - P. 1857-1866.

209. Rubin G. M. et al. The molecular basis of P-M hybrid dysgenesis: the nature of induced mutations // Cell. 1982. - V. 29. - № 3. - P. 987-994.

210. Sawamura K. et al. Hybrid lethal systems in the Drosophila melanogaster species complex. I. The maternal hybrid rescue (mhr) gene of Drosophila simulans II Genetics. 1993 a. - V. 133. - № 2. - P. 299-305.

211. Sawamura K. et al. Hybrid lethal systems in the Drosophila melanogaster species complex. II. The Zygotic hybrid rescue (Zhr) gene of D. melanogaste II Genetics. 1993 6. - V. 133. - P. 307-313

212. Sawamura K., Yamamoto M. Cytogenetical localization of Zygotic hybrid rescue (Zhr), a Drosophila melanogaster gene that rescues interspecific hybrids from embryonic lethality // Molec. Gen. Genet. 1993. - V. 239. - № 3. -p. 441-449.

213. Sawamura K. et al. Molecular and genetic dissection of a reproductive isolation gene, zygotic hybrid rescue, of Drosophila melanogaster II Jpn. J. Genet. 1995.-V. 70. -№2.-P. 223-232.

214. Schardin M. et al, Specific staining of human chromosomes in Chinese hamster x man hybrid cell lines demonstrates interphase chromosome territories // Hum. Genet. 1985. - V. 71. - № 4. - P. 281-287.

215. Schawaroch V. Phylogeny of a paradigm lineage: the Drosophila melanogaster species group (Diptera: Drosophilidae) II Biol. J. Linn. Soc. 2002. - V. 76.-№ 1. - P. 21-37.

216. Schlotterer C. et al. Comparative evolutionary analysis of rDNA ITS regions in Drosophila I I Mol Biol Evol. — 1994. -V. 11.-№3.-P. 513-522.

217. Schnorrer F. et al. The molecular motor Dynein is involved in targeting Swallow and bicoid RNA to the anterior pole of Drosophila oocytes // Nat. Cell Biol.-2000.-V. 2.-P. 185-190.

218. Schultz J., Redfield H. Interchromosomal effects on crossingover in Drosophila II Cold Spring Harbor Symp. Quant. Biol. 1951. - V. 16. - P. 175-197.

219. Seleme M.C. et al. High-frequency retrotransposition of a marked I factor in Drosophila melanogaster correlates with a dynamic expression pattern of the ORF1 protein in the cytoplasm of oocytes // Genetics. 1999. - V. 151. - P. 761-771.

220. Sezutsu H., Nitasaka E., Yamazaki T. Evolution of the LINE-like I element in the Drosophila melanogaster species subgroup // Genetics. 1995. - V. 249. -P. 168-178.

221. Siebel C. W., Rio D. C., 1990 Regulated splicing of the Drosophila P transposable element third intron in vitro: somatic repression //Science. 1990. -V. 248. - № 4960. - P. 1200-1208.

222. Simmons M. J. et al. Repression of P element-mediated hybrid dysgenesis in Drosophila melanogaster II Genetics. 1990. - V. 124. - № 3. - P. 663-676.

223. Skaer R. J. et al. Intranuclear electrophoresis of the chromatin of living cells // J. Cell Sci. 1976. - V. 21. - № 3. - P. 479-496.

224. Sprenger F. et al. Determination of acron and telson in Drosophila requires the torso gene, a putative receptor tyrosine kinase // Cell Differentiation and Development. 1989. - V. 27. - P. 189.

225. Stevens L. M. et al. The Drosophila embryonic patterning determinant Torsolike is a component of the eggshell // Current Biology. 2003. - V. 13. -Issue 12.-P. 1058-1063.

226. Stone W. S. et al. The evolutionary implications of the virilis group of Drosophila II Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1960. - Vol. 46. - P. 350.

227. Storto P. D., King R. C. The role of polyfusomes in generating branched chains of cystocytes during Drosophila oogenesis // Dev Genet. 1989. - V. 10. -№2.-P. 70-86.

228. Sturtevant A. H. Genetic studies on Drosophila simulans. I. Introduction. Hybrids with Drosophila melanogaster II Genetics. 1920. - 5. - P. 480-500.

229. Sved J. A. Hybrid dysgenesis in Drosophila melanogaster. a possible explanation in terms of spatial organization of chromosomes // Austr. J. Biol. Sci. 1976.-V. 29.-P. 375-388.

230. Thackeray J. R., Kyriacou C. P. Molecular evolution in the Drosophila yakuba period locus I I J. Mol. Evol. 1990. -V. 31. -№ 5. - P. 389-401.

231. Treus V. V. Heterochromatin and euchromatin regions in the chromosomes of various representatives of the subfamily Bovinae II Genetica. 1997. - V. 33. -№9.-P. 1273-1280

232. Trickett A. J., Butlin U. K. Recombination suppressors and the evolution of new species // Heredity. 1994. - V. 73. - № 4. - P. 339-345.

233. Vajime C. G., Dunbar R. W. Chromosomal identification of eight species of the subgenus Edwardsellum near and including Simulium (.Edwardsellum) damnosum Theobald {Diptera: Simuliidae) II Tropenmed. Parasitol. 1975. -V. 26. - № l.-P. 111-138

234. Van Driel R. Nuclear domains and the nuclear matrix // Int. Rev. Cytol. -1995.-V. 162A.-P. 151-189.

235. Vaury C. et al. The (3- heterochromatic sequences flanking the I element are themselves defective transposable elements // Chromosoma. 1989. - V. 98. -P. 215-224.

236. Vaury C. et al. Molecular characteristics of the heterochromatic I elements from a reactive strain of Drosophila melanogaster II J. Mol. Biol. 1990. - V. 31. -P. 424-431.

237. Vazquez J. et al. Multiple regimes of constrained chromosome motion are regulated in the interphase Drosophila nucleus // Current Biology. 2001. - V. 11. - P. 1227-1239.

238. Wallace B., Madden C. Studies on inbred strains of Drosophila melanogaster I I The American naturalist. V. 99. - P. 495-510.

239. Wang C. et al. Genetics of nanos localization in Drosophila II Developmental Dynamics. 1994. - V. 199. - Issue 2. - P. 103-115.

240. Wasserman M. Cytology and phylogeny of Drosophila II Amer. Nat. 1963. -Vol. 97. -№896. -P. 333.

241. White M. J. Animal cytology and evolution / Cambridge: Cambridge Univ. Press, 1954.-454 p.

242. Woodruff R. I., Telfer W. H. Polarized intercellular bridges in ovarian follicles of the cecropia moth//J. Cell Biol. 1973.-V. 58.-№ i.p. 172-188.

243. Yang Y. et al. Phylogenetic relationships of Drosophila melanogaster species group deduced from spacer regions of histone gene H2A-H2B // Molecular Phylogenetics and Evolution. 2004. - V. 30. - P. 336-343.

244. Yoon J. S. Richardson R. H. Evolution in Hawiian Drosophilidae. III. The microchromosome and heterochromatin of Drosophila II Evolution. 1978. -V. 32. -№3. - P. 475.

245. Younge I., Coleman A. W. The advantages of the ITS2 region of the nuclear rDNA cistron for analysis of phylogenetic relationships of insects: a Drosophila example // Molecular Phylogenetics and Evolution. V. 30. - 2004. - P. 236-242

246. Yue L., Spradling A. C. Hu-li tai shao, a gene required for ring canal formation during Drosophila oogenesis, encodes a homolog of adducing // Genes and Development. 1992. - V. 6. - Issue 12 В - P. 2443-2454.

247. Zhdanov M. I. et al. The role of inversions in adaptation and speciation // Ontogenez. 1994. - V. 25. - № 2. - P. 20-23.1. Ресурсы Internet

248. Bohrmann J. Intercellular communication and transport processes during development: lessons from insect oogenesis and embryogenesis // http://www.bio2.rwth-aachen.de/humanbio/bohrmannresearchengl.htm

249. Staveley В. E. Development of the Drosophila Body Plan // http://www.mun.ca/biology/desmid/brian/BIOL3530/DBCh05/DBNDros.html

250. The Inttractive Fly // http://sdb.bio.purdue.edu/fly/aimain/laahome.htm

Информация о работе

Митренина, Елизавета Юрьевна
кандидата биологических наук
Томск, 2006
ВАК 03.00.15

Диссертация

Изучение особенностей пространственной организации хромосом трофоцитов яичников некоторых видов подгруппы "melanogaster" рода Drosophila - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы