Исследование влияния экзотоксикантов на некоторые ткани и органы черноморского лосося (Salmo trutta L.P.) в раннем онтогенезе

Третьяк, Людмила Павловна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Исследование влияния экзотоксикантов на некоторые ткани и органы черноморского лосося (Salmo trutta L.P.) в раннем онтогенезе
ВАК РФ 03.00.16, Экология

Автореферат диссертации по теме "Исследование влияния экзотоксикантов на некоторые ткани и органы черноморского лосося (Salmo trutta L.P.) в раннем онтогенезе"

На правах рукописи

ТРЕТЬЯК ЛЮДМИЛА ПАВЛОВНА

ИССЛЕДОВАНИЕ ВЛИЯНИЯ ЭКЗОТОКСИКАНТОВ

НА НЕКОТОРЫЕ ТКАНИ И ОРГАНЫ ЧЕРНОМОРСКОГО ЛОСОСЯ (SALMO TRUTTA L.P.) В РАННЕМ ОНТОГЕНЕЗЕ

Специальность 03.00.16 - Экология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Астрахань 2005

Работа выполнена в Астраханском государственном университете

Научный руководитель:

доктор биологических наук

Алтуфьев Юрий Владимирович

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук

Журавлева Галина Федоровна

доктор биологических наук

Распопов Вячеслав Михайлович

Ведущая организация:

Астраханская государственная медицинская академия

Защита состоится 29 декабря на заседании диссертационного совета Д 212.009.02 по защите диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук в Астраханском государственном университете по адресу: 414000, г. Астрахань, пл. Шаумяна, 1. ЕИ АГУ.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Астраханского государственного университета

Автореферат разослан 1бря 2005 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат биологических наз

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования. К настоящему времени в литературе имеется достаточно много сведений по влиянию различных токсикантов на позвоночных животных, в частности рыб. Черноморский лосось Salmo trutta labrax является одним из наиболее редких и ценных представителей ихтиофауны Черного моря. Этот вид занесен в Красную Книгу, промысел его запрещен, и вместе с тем именно по нему не достаточна информация о влиянии экзотоксикантов на органы и ткани в процессе онтогенеза. Таким образом, не изучен гистогенез органов и тканей вида и их патология под влиянием среды обитания, отсутствует сопоставление нормы и патологии органов и тканей в раннем онтогенезе черноморского лосося. В качестве токсикантов были выбраны СПАВ, фенол и медь, так как именно эти вещества наиболее часто обнаруживаются в водоемах с превышением ПДК в целом.

Цель работы - провести сравнительный анализ строения органов и тканей молоди черноморского лосося в норме, и после воздействия экзотоксикантов: сульфата меди, фенола, СПАВ и солености 5 %о Определить морфологические особенности влияния токсических веществ на внутренние органы черноморского лосося - жаберный аппарат, печень и почки. Для достижения намеченной цели решались следующие задачи:

1. На основе гистологических методов анализа установить характер и степень патоморфологических нарушений в жаберном аппарате, печени и почках черноморского лосося после воздействия выбранных экзотоксикантов и солености.

2. Вывить морфологические особенности действия сульфата меди, фенола, СПАВ и солености на жаберный аппарат, печень и почки молоди черноморского лосося.

3. Применив общепринятые гематологические методы, охарактеризовать морфологические особенности действия сульфата меди, фенола, СПАВ и солености на систему крови молоди черноморского лосося.

4. Используя полученные данные, выявить особенности действия сульфата меди, фенола, СПАВ и солености на клеточный состав крови молоди черноморского лосося.

5. С помощью теста «Открытое поле» и установки «Челночная камера» провести исследование поведенческих реакций у неполовозрелых особей черноморского лосося при воздействии выбранных токсикантов и выявить основные характерные черты в поведении молоди черноморского лосося после воздействия токсических веществ.

Научная новизна. В работе впервые проведено комплексное исследование черноморского лосося в раннем онтогенезе с применением трех классических методик - гистологической, гематологической и поведенческих реакций после воздействия токсических веществ. В качестве токсине-

ских веществ были выбраны наиболее распространенные в окружающей среде связанные с антропогенной деятельностью человека: тяжелые металлы (сульфат меди), фенол, СПАВ. Впервые предприняты исследования по выявлению особенностей воздействия токсических веществ на органы и ткани молоди черноморского лосося в раннем онтогенезе. В качестве органов-мишеней для исследования были выбраны печень, почки и жабры.

Научно-практическая значимость. Полученные данные могут бьггь использованы на рыбоводных лососевых заводах для предотвращения массового отхода рыб в процессе искусственного воспроизводства. Изучение поведенческих реакций и обучение молоди перед выпуском в реку может способствовать лучшей адаптации в естественных условиях и повысить промвозврат. В результате исследования выявлены основные характерные черты воздействия трех классов токсикантов на внутренние органы черноморского лосося, что дает основание использовать полученные данные на рыбоводных заводах.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Сравнительный анализ строения органов и тканей молоди черноморского лосося в норме и после воздействия экзотоксикантов: сульфата меди, фенола, СПАВ и солености 5 %о и характерные особенности влияния токсических веществ на внутренние органы черноморского лосося - жаберный аппарат, печень и почки.

2. Особенности воздействия выбранных токсикантов на систему крови черноморского лосося.

3. Характерные черты в поведении молоди черноморского лосося при воздействия токсических веществ после тестирования в экспериментальных установках «Открытое поле» и «Челночная камера».

Апробация результатов исследования. Материалы диссертации докладывались на научно-практической конференции «Астраханская область в XXI веке: взгляд молодого поколения» (Астрахань, 2003), на ежегодных конференциях профессорско-преподавательского состава АГТУ (2003) и АГУ (2003,2004).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 8 работ.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, литературного обзора, материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, изложенных в трех главах, заключения и выводов. Работа изложена на 173 страницах компьютерного текста (14 шрифт, 1,5 интервал), содержит 7 таблиц и 39 рисунков, из них 20 микрофотографий. Список литературы состоит их 271 источника, в том числе, 71 зарубежные.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Работа была выполнена: на Адлерском производственно-экспериментальном рыбоводном лососевом заводе (АПЭРЛЗ) в летний период (июль) 2001 года и в аквариальном комплексе АГТУ в период 20012002 года. Обработку экспериментального материала проводили в течение 2003-2005 года в гистологических лабораториях АГУ и АГТУ, а так же в ГУ НИИ по изучению Лепры.

Объектом исследований являлись неполовозрелые особи черноморского лосося (Salmo trutta labrax Pallas) в количестве 75 особей, в экспериментах, без учета контроля и наблюдений на рыбоводном заводе. В качестве токсикантов были использованы фенол, детергент и меди кристаллогидрат CuS04 х 5Н20. Время продолжительности каждого экспериментального воздействия на рыб составляло 30 дней.

Для гистологического анализа использовали ткани жабер, печени и почек черноморского лосося. Для приготовления микропрепаратов использовали классическую гистологическую методику (Ромейс, 1953). Изучение и анализ срезов проводили под бинокулярным микроскопом «Биолам». При помощи окуляр-микрометра измеряли относительные размеры клеток и ядер. Всего было изготовлено и изучено 43 препарата, из них 13 серийных препаратов - жаберный аппарат в пяти вариантах опыта, 16 серийных препаратов - печень, 14 препаратов - почечная ткань. Тяжесть патологии органов оценивали по пяти-бальной системе, предложенной Л.А. Леснико-вым и И.Д. Чинаревой (1987), Г.В. Земковым, Г.Ф. Журавлевой (1987). Микрофотографии были сделаны в ГУ НИИ по изучению Лепры на универсальном микроскопе NU с использованием окуляра - 12,5 и объективов - 10,25 и 40, при помощи цветной телевизионной камеры «PIXERA», производство США.

Лейкоцитарную формулу крови молоди черноморского лосося определяли по методике Ивановой Н.Т. (Иванова, 1983). Окраску препаратов производили по Романовскому стандартным раствором азур-эозина (Иванова, 1983). Всего было приготовлено 90 препаратов (контроль - от 5 особей по 3 дубля - 15 препаратов, соленость 5 %> - 20 препаратов, фенол - 20 препаратов, медь - 15 препаратов, детергент - 20 препаратов). Фотографирование производили с помощью специального микроскопа OLYMPUS ВН-2 с вмонтированным в него фотоаппаратом, применением иммерсионного объектива □ 90 и окуляра П10.

Молодь рыб также тестировали по физиологическим и поведенческим реакциям в тесте «Открытое поле» и осуществляли выработку условного рефлекса предпочитаемой освещенности в челночной камере (Ширяева, 1987; Тихомиров, 1997).

Данные, полученные в ходе экспериментов, были подвергнуты статистической обработке на персональном компьютере в специально составленных для этих целей программах согласно стандартным формулам. Ре-

зультаты обрабатывались статистически, достоверность расхождения средних значений устанавливали по критерию Стьюдента по трем порогам безошибочного прогноза: первый - р < 0,001, второй - р < 0,01, третий - р < 0,05 (Плохинский, 1970).

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

АНАЛИЗ МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНОГО СОСТОЯНИЯ ЖАБЕРНОГО АППАРАТА ПОД ВЛИЯНИЕМ МЕДИ, ФЕНОЛА, ДЕТЕРГЕНТА И СОЛЕНОСТИ

В жаберном аппарате черноморского лосося после воздействия меди (1 мг/л) наблюдались следующие патологические изменения: все капилляры в ламеллах резко и неравномерно были расширены, плотно заполнены эритроцитами, т.е. изменения носили дисциркуляторный характер. Часто наблюдался отек венозных сосудов. Некоторые венозные сосуды филамент были переполнены эритроцитами. В некоторых филаментах сосуды были расширены и не содержали форменных элементов крови.

Анализ состояния жаберного аппарата черноморского лосося после воздействия фенола (10 мг/л) показал, что разрастание многослойного плоского неороговевающего эпителия превратили жаберные филаменты в сплошные эпителиальные пластинки. В большинстве случаев наблюдалось срастание филамент между собой верхушечными частями. На концах ла-мелл наблюдался застой крови. Венозные сосуды филамент также были переполнены эритроцитами.

Воздействие детергента (10 мг/л) на жаберный аппарат черноморского лосося, пожалуй, было самым разрушительным. Филаменты представляли собой сплошной пласт эпителиальных клеток из-за разрастания многослойного неороговевающего эпителия между ламеллами. Там, где разрастания не произошло, наблюдались дегенеративные изменения: слущи-вание эпителиальных клеток на концах ламелл. Наблюдался обширный отек венозных сосудов, а так же их закупорка.

Соленость 5%о была выбрана не случайно, так как для молоди лососевых рыб именно этот раствор является лечебным от эктопаразитов в летний период времени, и вместе с тем, градиентом перехода как к пресной, так и соленой среде обитания гидробионтов (Хлебович, 1974). Воздействие солености 5%о оказало на жаберный аппарат черноморского лосося, в целом, благотворный эффект. Жаберные пластинки имели вид, близкий к норме. В некоторых случаях на концах ламелл наблюдалось расслоение эпителиальных клеток, но кровоизлияния при этом не отмечено. Признаков разрастания межпластинчатого эпителия практически не наблюдалось.

В контроле в жаберном аппарате черноморского лосося наблюдались патологические изменения дегенеративного характера и нарушение кровообращения.

Проведенный морфологический анализ жаберного аппарата черноморского лосося не позволил в полной мере выявить характерные различия в действии исследуемых токсических веществ. Для выявления морфологических различий дополнительно были проведены цитометрические исследования эпителиальных клеток и их ядер жаберного аппарата черноморского лосося.

Проведенное цитометрическое исследование показало, что после воздействия всех трех классов токсикантов произошло достоверное уменьшение объемов всех структурных элементов жаберного аппарата (табл. 1).

В опыте с соленостью 5%о объем эпителиальных клеток жабр и их ядер увеличен по сравнению с контрольными клетками. Ядерно-цитоплазматическое соотношение после воздействия солености 5%о незначительно меньше контрольного (табл. 1.)

Таблица 1

Цитометрические исследования клеток жаберного аппарата _ черноморского лосося __

Объем Контроль Фенол Медь Детергент Соленость

Клетка 66,21±9,45 32,42±5,97** 58,01±8,16 42,99±9,22* 70,35±10,04

Ядро 11,98±2,84 5,4±1,42* 10,2±1,05 10,9ШЗ,5 12,76±2,43

Ядерно-цитоплазматическое соотношение

Ук/Уя 7,18±иЗ I 8,17±1,36 I 5,73±0,7 6,43±1,67 7,08±1,15

Звездочками отмечены величины двигательной активности, достоверно отличающиеся от соответствующих значений в контроле: * - р<0,05; **-р<0,01.

Таким образом, можно заключить, что жабры, являясь органом, непосредственно контактирующим с окружающей средой, первыми подвергаются губительному воздействию токсических веществ, в результате чего степень поражения этого органа бывает достаточно высока. Патоморфоло-гические нарушения жаберного аппарата после воздействия фенола, меди и детергента настолько значительны, что действие каждого из токсикантов практически теряет специфичность.

АНАЛИЗ МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНОГО СОСТОЯНИЯ ПЕЧЕНИ ПОД ВЛИЯНИЕМ МЕДИ, ФЕНОЛА, ДЕТЕРГЕНТА И СОЛЕНОСТИ

Нарушения функций печени проявляются при далеко зашедших морфологических изменениях органа, которые могут служить критерием степени развития патологических процессов. При этом весьма важным для решения поставленных задач было выявление особенностей проявлений действия различных токсикантов на печень черноморского лосося.

После воздействия меди (1 мг/л) ткань органа рыхлая, балочная структура нарушена, сосуды печени расширены, гиперемированы, и отечны. Пигмента мало. Гепаггоциты мелкие и темные, находятся в неактивном состоянии. Ядра гепатоцитов, в основном, пикноморфны, содержат 3-4 ядрышка. Отмечена интенсивная окраска форменных элементов крови. Часто встречаются разрушенные эритроциты и голые ядра. Нарушения в целом, носят сосудистый характер. Оценка степени патологии составляет 3-3,5 балла.

Фенольная интоксикация (10 мг/л) вызвала в структуре печени ярко выраженные изменения. Ткань органа очень рыхлая, наблюдалось дисперсное распределение пигмента. Сосуды в большинстве случаев гиперемированы и хорошо видны повсеместные лакунарные кровоизлияния. В гепатоцитах встречается вакуольная дистрофия, размеры клеток увеличены. Ядра имеют средние и мелкие размеры, содержат 2-3 ядрышка. В целом, морфологические изменения можно оценить в 3,5-4 балла.

После воздействия детергента (10 мг/л) снизилась устойчивость рыб к внешним факторам. Основная часть паренхиматозной ткани рыхлая. Отмечено повсеместное нарушение балочной структуры, сосуды расширены, отечны. Количество пигмента невелико. Гепатоциты имели очень крупные размеры и содержали в большинстве случаев 1 ядрышко. Наблюдалась вакуольная и жировая дистрофия. Степень патологии весьма значительна и составляет 4-4,5 балла.

После воздействия на организм рыб солености 5%о, ткань печени характеризуется средней плотностью, гепатоциты крупные, цитоплазма светлоокрашенная, ядра содержат 2-3 ядрышка. Это указывает на активное функциональное состояние органа, близкое к норме. Морфологические изменения оцениваются в 1,5-2 балла.

Для печени контрольных рыб характерна начальная стадия функциональных нарушений, связанная с интоксикацией природного происхождения. Эти отклонения можно объяснить далеко не оптимальными условиями окружающей среды и достаточно сильным загрязнением естественных вод различными поллютантами.

Исходя из результатов анализа морфофункционального состояния печени в контроле и опыте, можно заключить, что характерные черты действия токсических веществ весьма заметны и наибольший патологический эффект наблюдается от воздействия фенола и детергента.

Были также проведены дополнительные цитометрические исследования клеток и ядер печени для выявления различий в действии меди, фенола и детергента.

печень

Рис. 1. Объем гепатоцитов в различных вариантах опытов

Рис. 2. Объем ядер гепатоцитов в различных вариантах опытов

Рис. 3. Ядерно-цитоплазматическое соотношение объемов гепатоцитов в различных вариантах опытов

Исходя из рисунков 1,2,3 можно с уверенностью говорить, что фенол в концентрации 10 мг/л приводит к уменьшению объемов основных структурных элементов печени, что неизбежно ведет к дисфункции органа.

После воздействия меди в концентрации 1 мг/л, объем гепатоцитов и их ядер (141,37) уменьшился примерно вдвое по сравнению с контролем (рис. 1, рис. 2). Дцерно-цитоплазматическое соотношение в опыте с медью также почти вдвое меньше контрольного (рис. 3). Все это в очередной раз доказывает, что медь, являясь тяжелым металлом, с избытком накаплива-

ясь в печени, приводит ко многим функциональным и структурным нарушениям органа

В опыте с детергентом в концентрации 10 мг/л наблюдалась совершенно другая картина. Объем гепатоцитов увеличился, что вероятно связано с наличием большего числа вакуолей (вакуольная дистрофия), но при этом объем ядер меньше, чем в контроле (Рис. 1,2).

Ядерно-цитоплазматическое соотношение в опыте с детергентом больше контрольного за счет увеличившегося объема цитоплазмы (Рис. 3). Учитывая степень патологии 4-4,5 балла, можно предположить, что влияние детергента на печень черноморского лосося является наиболее тяжелым по степени токсического воздействия.

После воздействия солености 5%о на черноморского лосося, отмечалось значительное увеличение объемов основных структурных элементов печени, поэтому можно полагать, что соленость 5%о оказывает биостиму-лирующий эффект на общее морфофункциональное состояние печени.

На основе проведенных цитометрических исследований, удалось выявить некоторые особенности в действии токсических веществ на печень черноморского лосося.

Таким образом, можно заключить, что для выявления характерных различий в действии токсических веществ порой недостаточно одной или двух методик, так как, являясь токсикантами различной природы, фенол, медь и детергент воздействуют на структуру и функции органа каждый со своей стороны.

АНАЛИЗ МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНОГО СОСТОЯНИЯ ПОЧЕК ПОД ВЛИЯНИЕМ МЕДИ, ФЕНОЛА, ДЕТЕРГЕНТА И СОЛЕНОСТИ

Исследования по влиянию хронической интоксикации на почки черноморского лосося показали, что морфологические изменения в ткани органа носят патологический характер.

У рыб, подвергшихся влиянию меди (1 мг/л), большая часть почечных телец была деформирована и имела признаки воспаления. В боумено-вых капсулах наблюдались патологические изменения висцерального (внутреннего слоя прилегающего к кровеносным капиллярам) и париетального слоя (эпителий капсулы) с образованием широкого просвета. В капиллярах клубочка хорошо заметен застой крови. Было отмечено скопление оксифильных гранул внутри клеток проксимальных и дистальных канальцев Просветы многих проксимальных и дистальных канальцев были сужены, заполнены пенистым содержанием. В просветах канальцев были хорошо видны эритроциты. Наблюдался отек почечной ткани.

Под влиянием фенола (10 мг/л) у молоди черноморского лосося отмечена деформация и очень интенсивная окраска почечных телец. Просветы многих проксимальных и дистальных канальцев были заполнены пенистым содержанием, иногда встречались эритроциты. Цитоплазма боль-

шинства клеток была светлоокрашенная, ядра имели разные размеры и разную интенсивность окраски. В ретикуло-лимфоидной ткани наблюдалось расширение венозных сосудов.

Действие детергента (10 мг/л) на почки черноморского лосося проявилось следующим образом. Почечные тельца были сильно уплотненные, темно-окрашенные, в большинстве случаев, деформированные. В боуме-новых капсулах встречалось повреждение внутренней и наружной стенок. Почти 80% клеток проксимальных и дистальных канальцев были заполнены оксифильными гранулами. Наблюдалась деформация ядер (сплющены и сильно вытянуты); в клетках, заполненных оксифильными гранулами, ядра вообще отсутствовали. Венозные сосуды и капилляры сильно расширены, внутри хорошо заметны эритроциты.

После воздействия солености 5%о у черноморского лосося большая часть почечных телец находилась в норме, иногда встречались достаточно крупные с признаками воспаления. Клетки проксимальных и дистальных канальцев были достаточно крупные, ядра примерно одного размера. Просветы проксимальных и дистальных канальцев в основном чистые. На основе имеющихся данных можно предположить, что соленость 5%о оказывает биостимулирующее действие и способствует восстановлению нормальных функций почечной ткани.

В проведенных нами исследованиях почки заводской молоди черноморского лосося изначально имели отклонения от нормы по морфофизио-логическим показателям. В почечных тельцах контрольных рыб наблюдалось воспаление, а в некоторых случаях были видны следы разрушения почечных телец. В боуменовых капсулах, в большинстве случаев, наблюдалось аномальное разрастание эпителиальных клеток. В ретикуло-лимфоидной ткани, окружающей почечные канальца и клубочки, в некоторых случаях был обнаружен темно-окрашенный пигмент.

Морфологический анализ почечной ткани не позволил в полной мере выявить особенности действия токсических веществ, однако наибольший патологический эффект отмечен после воздействия детергента.

Для выявления особых различий в действии меди, фенола и детергента на почечную ткань, дополнительно были проведены цитометриче-ские исследования клеток и ядер проксимальных и дистальных канальцев. Полученные результаты приведены в таблице 2.

Характерным действием фенола, по сравнению с другими токсикантами, на почки черноморского лосося, является достоверное и значительное уменьшение размеров всех структурных элементов почечной ткани.

Таблица 2

Цитометрические исследования клеток и ядер проксимальных

и дистальных канальцев почек черноморского лосося

Объем Контроль Фенол | Медь Детергент Соленость 5%о

ПРОКСИМАЛЬНЫЕ КАНАЛЬЦА

Клетка 234,6*34,05 131,84*18,85* 112,76*15,9** 97,5*19.11** 228,76*21,3

Ядро 38,12*5,83 37±5,87 38,7*3,55*** 38,73*12,72*** 39,2*4,97

Ядерно-цитоплазмотическое соотношение

Ук/Уя 7,73*1,83 3,76*0,43* 1 3.62*0.5* 5,12*2,5 5,07*0,52

ДИСТАЛЬНЫЕ КАНАЛЬЦА

Клетка 178,33*25,9 113,1*10,5* 176,98*20,8*** 104,52*12,44* 171,72*19,33

Ядро 49,21 ±7,25 35,35*5,72 40.43*4.76 26,75*10,6 51,3*8,62

Ядерно-цитоплазмотическое соотношение

Ук/Уя 3,95*0,54 3,54*0,54 1 4,6*0,5 5,8*1,36 3,05*0,4

БОУМЕНОВА КАПСУЛА (1<Г3)

Объем 24,51*3,6 15,52*2,62* | 31,16*5,6 19,7*1,93 27,23*2,97

ПОЧЕЧНОЕ ТЕЛЬЦЕ (1 (Г3)

Объем 14.4*2,35 10,4*1,07 | 15,96*3,27 12,71*2.47 15.37*2.1

Соотношение объемов боуменовой капсулы и почечного тельца

Убк/Упт 1,9*0,24 1,47*0,14 | 2,2*0,3 1,92*0,57 1,38*0,13

Звездочками отмечены величины, достоверно отличающиеся по критерию Стьюдента от соответствующих значений в контроле: * - р <0,05; ** -р<0,01; *** -р<0,001.

Основное влияние меди на почки черноморского лосося проявилось в достоверном уменьшении просвета проксимальных канальцев практически в 2 раза по сравнению с контролем, а также фенолом и детергентом. Ядерно-цитоплазматическое соотношение в клетках проксимальных канальцев также достоверно меньше, чем в контроле и при воздействии других токсикантов, на фоне увеличения этих параметров в дистальных канальцах. При этом отмечается увеличение объемов боуменовой капсулы и почечного тельца не характерное для других токсикантов.

Особенности в действии детергента выявить было достаточно сложно. Объемы клеток проксимальных и дистальных канальцев меньше по сравнению с другими токсикантами и контролем. Объем ядер клеток дистальных канальцев минимален, тогда как объем ядер проксимальных канальцев больше чем в контроле и в опыте с фенолом и медью.

Ядерно-цитоплазматическое соотношение в клетках дистальных канальцев больше по сравнению с контролем и другими опытными группами (фенол, медь, соленость 5%о). В проксимальных канальцах это соотношение меньше, чем в контрольной группе, но больше, чем в опыте с соленостью 5%о, фенолом и медью. Объемы боуменовой капсулы и почечного тельца в опыте с детергентом меньше, чем в контроле, после воздействия солености 5%а и меди, но больше, чем после воздействия фенола.

Таким образом, можно заключить, что токсические вещества приводят к патоморфологическим изменениям в структуре почечной ткани. Особенности в действии каждого из токсикантов на почечную ткань наблюдаются в значительных колебаниях объемов клеток и ядер проксимальных и дистальных канальцев, их ядерно-цитоплазматическом соотношении, объемов боуменовой капсулы и почечного тельца.

СОСТОЯНИЕ КЛЕТОК КРОВИ РЫБ ПОСЛЕ ОПЫТНЫХ ВОЗДЕЙСТВИЙ

Изменения, произошедшие в крови черноморского лосося под влиянием группы токсикантов, носят выраженный патологический характер, что в частности, отмечено в морфологической характеристике эритроцитов.

Влияние солености 5 %а как лечащего раствора на состояние кровеносной системы рыб, оказалось двояким. Соотношение молодых и зрелых эритроцитов примерно 1:1, часто встречаются нормобласты, что указывает на активность кроветворной системы. Клетки по всему полю мазка расположены неравномерно, группами, встречаются случаи агглютинации эритроцитов.

В крови рыб, подвергшихся токсическому воздействию сульфата меди, наблюдается повсеместная агглютинация эритроцитов, которая проявлялась в виде цепочек из нескольких эритроцитов различной длины - от 35 до десятка клеток. Наряду с этим встречался анизоцитоз и голоядерные нормобласты в различной степени деструкции.

У рыб, подвергшихся влиянию фенола, эритроциты в основном представлены зрелыми формами с базофильной цитоплазмой и пикнотечными ядрами. Достаточно часто встречался кариорексис и пойкилоцитоз, причем пойкилоцитоз носил локальный характер. На отдельных участках мазка наблюдалась деструкция агглютинирующих эритроцитов.

В крови рыб, испытавших влияние детергента, все клетки были разрушены в различной степени и представлены в основном группами. Практически для всех эритроцитов была характерна мелкая вакуолизация цитоплазмы. Встречался анизоцитоз, пойкилоцитоз и агглютинация эритроцитов.

У рыб в контрольной группе наблюдались небольшие изменения в виде гипобазофильной ретикуляции зрелых эритроцитов, строматолиза, пойкилоцитоза, которые носили локальный характер на отдельных участках мазка, с равномерным распределением клеток.

Изменения процентного соотношения форменных элементов крови черноморского лосося под влиянием различных факторов среды и в норме приведены в таблице 3.

Проведенный цитопатологический анализ клеток крови черноморского лосося позволил выявить характерные черты действия токсических веществ.

Характерным признаком действия меди по сравнению с другими токсикантами является достоверное увеличения числа промиелоцитов (р <

0,001), миелоцитов (р < 0,05), базофилов (р < 0,01) и нейтрофилов (р < 0,001), а так же значительное, хоть и не достоверное увеличения эозино-филов (см. табл. 3). Значительное увеличение процента эозинофилов (8,8%) по сравнению с контролем (0,1%) нередко сигнализирует о развивающемся процессе аллергии (Житинева и др., 1997). Отмечено достоверное снижение количества тромбоцитов в 2 раза (р < 0,05) (см. табл. 3). Для эритроцитов отмечены такие патологические изменения как повсеместная агглютинация в виде большого скопления клеток вплоть до их разрушения.

Характерные черты воздействия детергента проявились в снижении количества тромбоцитов - 1,2 (р < 0,01) - по сравнению с кошролем их количество меньше в 5 раз; увеличение количества базофилов, пожалуй, самое значительное - 3,2 (р < 0,01), по сравнению с контролем и другими вариантами опыта; отсутствие эозинофилов (см. табл. 3). Большая часть эритроцитов находится в различной стадии деструкции, встречается ани-зоцитоз и мелкая вакуолизация цитоплазмы эритроцитов.

Таблица 3

Содержание форменных элементов (%)

в периферической крови молоди черномо рского лосося

КЛЕТКИ КРОВИ Контроль Соленость (5%,, Фенол Детергент Сульфат меди (СивО«)

Лимфоциты 89,3±1,5 81±1,08** 71,6±16Д5 90±0,95 77,87±3,1**

Тромбоциты б±0,9б 12,5±0,89*** 3,7±1,52 1Д±0,4»* 3±0,65*

Моноциты 1±0,4 0,7±0,12 1.4*0.4 1,5±0.3 1,87±0,77

Проииелопиты 1,6*0,6 1,6±0,29 2,6±0,7 1,&Ю,48 7,13±0,6***

Мнелоцнты 0,8±0,4б 0,9±0,37 0,8±0,41 1,9*0.3 2.5 ±0,6*

Нейти офилы 0,7±0,12 1,3±0,34 - 0,8±0,44 0,4±0,18 4,63*0,7*»*

Базофнлы 0,5±0,39 1,6±0,1* 2,8±0,9* 3,2*0,5" 2,13*0,31**

Эозияофнлы 0,1±0,1 0,3±0,12 1,2±0,9б 0 8,8±0,72

Особенность действия фенола проявилась в снижении количества лимфоцитов почти на 20%, достоверном увеличении базофилов в крови подопытных рыб - 2,8 % (р < 0,05) по сравнению с контролем - 0,5 % (см. табл. 3). Кроме того, для эритроцитов характерны такие патологические явления как кариорексис и пойкилоцитоз, которые носят локальный характер. Наблюдается деструкция агглютинирующих эритроцитов.

Таким образом, можно сделать вывод, что методика исследования крови рыб является достаточно информативной и позволяет не только оценивать общее состояния организма рыб, но и выявлять характерные черты действия некоторых токсических веществ.

ОЦЕНКА ПОВЕДЕНЧЕСКИХ РЕАКЦИЙ РЫБ НА ФОНЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ВОЗДЕЙСТВИЙ

Смысл теста «открытое поле» состоит в том, чтобы охарактеризовать адекватность поведения молоди рыб в новой для нее ситуации и оценить ее реактивность на внешние раздражители, как неспецифические для природных условий, так и характерные, близко отражающие ситуации, возникающие в естественных условиях жизни молоди.

ращивания на заводе на фоне воздействия токсических факторов среды, в условиях эксперимента, а так же основные отличительные черты в поведе-^ нии черноморского лосося после воздействия токсических веществ и соле-

ности 5%о.

Поведенческие методики в целом позволяют выявить особенности действия токсических веществ и совместно с данными гистологических, гематологических и морфометрических исследований помогают более точно определить степень влияния справляющего воздействия на организм.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Анализ полученных экспериментальным путем данных показал, что для жаберного аппарата контрольных рыб характерны патологические изменения дегенеративного характера и нарушение кровообращения. Эти отклонения можно объяснить отсутствием оптимальных условий среды для лососевых рыб в процессе искусственного выращивания и достаточно сильным загрязнением вод различными поллютантами. Анализ морфо-функционального состояния жаберного аппарата черноморского лосося показал, что наибольший патологический эффект наблюдался от воздействия детергента.

Для выявления различий в действии меди, фенола и детергента дополнительно были проведены цитометрические исследования клеток и ядер жаберного аппарата черноморского лосося, при этом было отмечено значительное и достоверное уменьшение объемов всех структурных элементов жаберного аппарата. Исходя из результатов анализа морфофунк-ционального состояния печени в контроле и опыте, можно заключить, что различия в действии токсических веществ весьма заметны и наибольший патологический эффект наблюдался от воздействия фенола и детергента. Делая вывод о результатах проведенных цитометрических исследованиях, удалось выявить некоторую особенность в действии токсических веществ на печень черноморского лосося. Таким образом, можно заключить, что для выявления различий в действии токсических веществ порой недоста-

точно одной или двух методик, так как, являясь токсикантами различной природы, фенол, медь и детергент воздействуют на структуру и функции органа по-разному.

Исследования по влиянию хронической интоксикации на почки черноморского лосося показали, что морфологические изменения в ткани органа носят патологический характер. Морфологический анализ почечной ткани не позволил в полной мере выявить особенности действия токсических вешеств, однако наибольший патологический эффект отмечен после воздействия детергента.

Для выявления характерных различий в действии меди, фенола и детергента на почечную ткань, дополнительно были проведены цитометри-ческие исследования клеток и ядер проксимальных и дистальных канальцев. Проведенные измерения позволили сделать вывод о наличии существенных различий в действии токсических веществ на почечную ткань черноморского лосося.

Морфологический анализ клеток крови позволяет оценить состояние кроветворной системы организма в норме и под воздействием различных факторов среды. Проведенный цитопатологический анализ клеток крови черноморского лосося позволил выявить достоверные различия в действии токсических веществ. Поведенческие методики в целом позволяют выявить особенности действия токсических веществ и совместно с данными гематологических, гистологических и морфометрических исследований помогают более точно определить степень отравляющего воздействия на организм.

Была доказана возможность купирования негативных факторов с помощью солености 5%о. Наблюдался биостимулирующий эффект на органном и клеточном уровне - состояние жаберного аппарата, печени и почек и клеток крови было близко к норме, по сравнению с контролем. В органах наблюдались наименьшие патологические изменения, которые оценивались в 1-1,5 балла. Таким образом, показана достоверная возможность репарации органов и тканей молоди черноморского лосося под влиянием критической солености.

выводы

1. После экспериментального хронического воздействия экзотоксикантов в структуре жабр, печени и почек были отмечены патоморфологические изменения. Наибольший патологический эффект наблюдался после воздействия детергента.

• вия токсических веществ. В печени - уменьшение размеров гепатоцитов и

их ядер после воздействия меди и фенола, в опыте с детергентом произошло увеличение объемов гепатоцитов, что объясняется наличием такой патологии как вакуольная дистрофия печени. В почках так же произошло уменьшение объемов клеток и ядер проксимальных и дистальных канальцев, причем большая часть данных достоверно подтверждена. После воздействия солености наблюдалось повышение функциональной активности исследуемых тканей органов, что проявлялось в увеличении объемов ядер и цитоплазмы.

3. Подсчет лейкоцитарной формулы показал, что после опытного токсического воздействия произошло увеличение гранулярных форм клеток крови молоди черноморского лосося. Цитопатологический анализ клеток крови молоди черноморского лосося позволил выявить основные отличительные черты в действии токсических веществ на клетки крови черноморского лосося.

4. Проведенное исследование поведенческих реакций у неполовозрелых особей черноморского лосося в тесте «Открытое поле» позволило выявить некоторые видовые и возрастные особенности поведения тестируемой молоди, а так же отличительные черты после воздействия токсических веществ. Было показано, что соленость 5%о способствует снижению двигательной активности тестируемой молоди на непродолжительное время.

5. Применение трех классических методик (поведенческой, гематологической и гистологической) в сочетании с цитометрическими исследованиями позволяет выделить особенности патоморфогенеза внутренних органов молоди черноморского лосося при воздействии токсикантов органической и неорганической природы.

Список опубликованных работ по теме диссертации

' 1. Гематологические исследования молоди рыб при воздействии фенола и

биологически активного вещества эпибрассинолида [Текст] / Егоров М.А., Михайлова Л.П. // IV Всероссийская конференция «Эколого-

► биологические проблемы Волжского региона и Северного Прикаспия»:

АГПУ - Астрахань - 2001 - С. 71-72.

2. Изучение изменений клеточного состава крови молоди рыб и амфибий под влиянием эпибрассинолвда и токсикантов различной природы [Текст] / Михайлова Л.П., Егоров М.А. // Материалы межрегиональной научно-практической конференции «Научные разарботки ученых - решению социально-экономических задач Астраханской области» - Астрахань - 2001 -С. 217-218.

3. Основные результаты исследования клеток крови Salmo trutta L.P. на фоне токсических воздействий [Текст] / Михайлова Л.П. // Южнороссийский вестник геологии, географии и глобальной энергии - № 1(6-7) - Астрахань: Издательский дом «Астраханский государственный университет» -2004 - С. 90.

4. Патоморфологические исследования состояния клеток крови и печени черноморского лосося под влиянием хронической интоксикации [Текст] / Михайлова Л.П. // Материалы научно-практической конференции «Астраханская область в XXI веке: взгляд молодого поколения» 24 июня 2003 -Астрахань: Издательский дом «Астраханский университет» - Астрахань -2004-С. 137.

5. Патоморфологическое исследование печени молоди Salmo trutta L.P. под влиянием хронической интоксикации [Текст] / Михайлова Л.П., Егоров М.А. // Естественные науки - №8 - 2004 - С.83.

6. Патологические изменения в почках Salmo trutta L.P. под влиянием хронической интоксикации [Текст] / Михайлова Л.П. // Южнороссийский вестник геологии, географии и глобальной энергии - № 2(8) - Астрахань: Издательский дом «Астраханский государственный университет» - 2004 -С. 68.

7. Основные результаты исследования состояния клеток крови Salmo trutta LР. на фоне токсического воздействия [Текст] / Михайлова Л.П. // Ученые записки. Материалы докладов итоговой научной конференции АГУ 29 апреля 2004. География, Физика. Математика. Информатика. Т.1. - Астрахань - 2005 - С.29-32.

8. Патоморфологические исследования печени и почек молоди Salmo trutta L.P. под влиянием хронической интоксикации [Текст] / Михайлова Л.П. // Ученые записки. Материалы докладов итоговой научной конференции АГУ 29 апреля 2004. География. Физика. Математика. Информатика. Т.1. -Астрахань - 2005 - С.33-37.

Подписано в печать 22.11.2005. Уч.-изд. л. 1,1. Усл. печ. л. 1,0. Заказ № 814. Тираж 100 экз.

Оттиражировано в Издательском доме «Астраханский университет» 414056, г. Астрахань, ул. Татищева, 20 Тел. (8512) 54-01-89, 54-01-87, факс (8512) 25-17-18, E-mail: asupress@vandex.ru

Р25 334

РНБ Русский фонд

2006-4 29828

г*

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Третьяк, Людмила Павловна

Введение 5

Глава 1. Обзор литературы

1.1 Биология вида 9

1.2. Состояние запасов и воспроизводства 13

1.3. Влияние некоторых токсических веществ на физиологиче- 16-17 ское состояние рыб

1.3.1 Действие фенола и его производных на физиологическое 17-18 состояние рыб

1.3.2. Влияние тяжелых металлов на физиологическое состояние 18-21 рыб

1.3.3. Влияние синтетических поверхностно-активных веществ 21-22 (СПАВ) на физиологическое состояние рыб

1.4. Особенности поведенческих реакций рыб в онтогенезе 22

1.5. Применение гематологических исследований для оценки 25-29 физиологического состояния рыб в экологических исследованиях

1.6. Морфофункциональное состояние некоторых органов и 29-32 тканей рыб под влиянием токсикантов и применение гистологических методов в рыбохозяйственных исследованиях

1.7. Условия искусственного выращивания лососевых рыб на 32-39 рыбоводных заводах, состояние их органов и тканей

1.7.1. Условия искусственного выращивания лососевых рыб на 39-45 АПЭРЛЗ (Адлерском производственно-экспериментальном рыбоводном лососевом заводе)

Глава 2. Материал и методы

2.1. Структура и объем исследованного материала 45

2.2 Гистологические методы 47-48 2.3. Методики исследования клеточного состава крови 48-49 2.4 Методики проведения опытов по исследованию 49поведенческих реакций молоди рыб

2.5. Морфометрические и статистические методы исследования 53-

Глава 3. Сравнительный анализ состояния жаберного аппарата, печени, почек черноморского лосося в норме и под влиянием токсикантов и солености 5%о

3.1. Анализ морфофункционального состояния жаберного аппа- 55-65 рата под влиянием меди, фенола, детергента и солености

3.2. Анализ морфофункционального состояния печени под влия- 65-74 нием меди, фенола, детергента и солености 5%о

3.3 Анализ морфофункционального состояния почек под влия- 74-87 нием меди, фенола, детергента и солености 5%о

Глава 4. Состояние клеток крови рыб после опытных воздействий

4.1. Морфологический анализ клеток крови молоди черномор- 88-95 ского лосося

Глава 5. Оценка поведенческих реакций рыб на фоне экспериментальных воздействий

5.1. Анализ поведения черноморского лосося

5.1.1. Оценка поведения черноморского лосося в тесте «открытое 96-103 поле»

5.1.2. Выработка простых условных рефлексов двухстороннего 103-107 избегания предпочитаемой освещенности у молоди черноморского лосося на фоне токсических воздействий

Введение Диссертация по биологии, на тему "Исследование влияния экзотоксикантов на некоторые ткани и органы черноморского лосося (Salmo trutta L.P.) в раннем онтогенезе"

К настоящему времени в литературе имеется достаточно много сведений по влиянию различных токсикантов на позвоночных животных, в частности рыб. Черноморский лосось Salmo trutta labrax является одним из наиболее редких и ценных представителей ихтиофауны Черного моря. Этот вид занесен в Красную Книгу, промысел его запрещен, и вместе с тем именно по нему не достаточна информация о влиянии экзотоксикантов на органы и ткани в процессе онтогенеза, таким образом, не изучен гистогенез органов и тканей вида и их патология под влиянием среды обитания, отсутствует сопоставление нормы и патологии органов и тканей в раннем онтогенезе черноморского лосося.

Водоемы наиболее часто загрязнены токсикантами органического происхождения (фенолы и их соединения), тяжелыми металлами и СПАВ. Причем, еще в 1970 году (Лукьяненко, 1970) было показано, что тяжелые металлы наиболее остро и быстро воздействуют на молодь рыб, в то время как действие токсикантов органической природы (нефтепродукты, фенолы) усиливается по мере развития организма.

Любое изменение факторов внешней среды вызывает изменение в поведении животных. По этой причине нарушение поведенческих реакций после какого либо воздействия на животных совместно с данными гистологических, морфобиологических и других исследований помогают более точно выявить механизмы этого воздействия на организм (Лазарева, Алехин, 1985).

Система крови - одна из самых подвижных систем, быстро реагирующих на изменения гомеостаза организма вследствие химического повреждения. Список ядов, повреждающих систему крови, достаточно велик. К их числу относят соединения, вызывающие изменения гемопоэза (бензол, хлорбензол, ДДТ, пестициды, многие лекарственные препараты), нарушения синтеза порфирина и тема (ряд тяжелых металлов, среди которых особое место занимает свинец), изменения свойств гемоглобина и гемолиз. Тем не менее5 избирательность действия яда в условиях хронического опыта подчас трудно доказать, поскольку изменения в крови протекают одновременно с нарушениями других функций и систем организма (Трахтенберг, 1987).

В случае воздействия токсических веществ, либо стрессорных реакций организм рыб обладает значительными компенсаторными возможностями. Эти возможности складываются из механизмов, осуществляющих адаптации и компенсаторные реакции на уровне целого организма, его органов, тканей, а так же на уровне отдельных клеток. В адаптационных процессах, возникающих в организме при воздействии неблагоприятных факторов среды, особо важную роль играет печень. В свою очередь функциональные свойства печени определяются метаболическими процессами, происходящими в гепа-тоцитах. Значение печени как центрального органа в обменных процессах, обусловливает особый интерес к структуре и функции этого органа в норме и патологии, о чем свидетельствует большое количество публикаций (Беспро-званный, 198; Вишневская, 1993; Иванова, 1983; Павлов, 1990; Трахтенберг, 1987).

Нарушение функции печени, как правило, проявляется при далеко зашедших морфологических изменениях органа, которые могут служить критерием в оценке степени развития патологических процессов (Корниенко, Кожин, Воловик, Макаров, 1998).

Жабры, являясь органом, непосредственно контактирующим с окружающей средой, первыми подвергаются губительному воздействию токсических веществ, в результате чего степень поражения этого органа бывает достаточно высока.

Почки костистых рыб в отличие от высших позвоночных состоят из . паренхиматозной и интерстициальной (лимфоидной) ткани. Знать последствия влияния токсических веществ на почки рыб чрезвычайно важно, вследствие того, что именно этот жизненно-важный орган несет ответственность за выведение токсикантов из организма. При этом наибольшую значимость имеют специфические проявления действия токсикантов на организм черноморского лосося.

В качестве токсикантов были выбраны СПАВ, фенол и медь, так как именно эти вещества наиболее часто обнаруживаются в водоемах с превышением ПДК в целом.

Цель работы - провести сравнительный анализ строения органов и тканей молоди черноморского лосося в норме, и после воздействия экзоток-сикантов: сульфата меди, фенола, СПАВ и солености 5 %о. Определить морфологические особенности влияния токсических веществ на внутренние органы черноморского лосося - жаберный аппарат, печень и почки. Показать возможности купирования негативных воздействий (соленость 5 %о).

Для достижения намеченной цели были поставлены следующие задачи:

1. На основе'гистологических методов анализа установить характер и степень патоморфологических нарушений в жаберном аппарате, печени и почках черноморского лосося после воздействия выбранных экзотокси-кантов и солености.

3. Применив общепринятые гематологические методы, охарактеризовать морфологические особенности действия сульфата меди, фенола, СПАВ и солености "на систему крови молоди черноморского лосося.

Научная новизна. В работе впервые проведено комплексное исследование некоторых органов и тканей черноморского лосося в раннем онтогенезе с применением трех классических методик - гистологической, гематологической и поведенческих реакций после воздействия токсических веществ. В качестве токсических веществ были выбраны наиболее распространенные в окружающей среде связанные с антропогенной деятельностью человека: тяжелые металлы (сульфат меди), фенол, СПАВ. Впервые предприняты исследования по выявлению особенностей воздействия токсических веществ на органы и ткани молоди черноморского лосося в раннем онтогенезе. В качестве органов-мишеней для исследования были выбраны жабры, печень и почки.

Научно-практическая значимость. Полученные данные могут быть использованы на рыбоводных лососевых заводах для предотвращения массового отхода рыб в процессе искусственного воспроизводства. Изучение поведенческих реакций и обучение молоди перед выпуском в реку может способствовать лучшей адаптации в естественных условиях и повысить про-мвозврат. В результате исследования выявлены основные характерные черты воздействия трех классов токсикантов на внутренние органы черноморского лосося, что дает основание использовать полученные данные на рыбоводных заводах.

Заключение Диссертация по теме "Экология", Третьяк, Людмила Павловна

выводы

2. С помощью цитометрических исследований были выявлены некоторые морфологические различия в действии сульфата меди, фенола и СПАВ на жаберный аппарат, печень и почки черноморского лосося. В жабрах произошло достоверное уменьшение размеров клеток и ядер после воздействия токсических веществ. В печени - уменьшение размеров гепатоцитов и их ядер после воздействия меди и фенола, в опыте с детергентом произошло увеличение объемов гепатоцитов, что объясняется наличием такой патологии как вакуольная дистрофия печени. В почках так же произошло уменьшение объемов клеток и ядер проксимальных и дистальных канальцев, причем большая часть данных достоверно подтверждена. После воздействия солености наблюдалось повышение функциональной активности исследуемых тканей органов, что проявлялось в увеличении объемов ядер и цитоплазмы.

5. Применение трех классических методик (гистологической, гематологической и физиологической) в сочетании с цитометрическими исследованиями позволяет выделить особенности патоморфогенеза внутренних органов молоди черноморского лосося при воздействии токсикантов органической и неорганической природы.

заключение

В представленной работе на основе имеющихся в литературе и полученных экспериментальным путем собственных данных исследована динамика основных гистологических, гематологических и поведенческих показателей в раннем постнатальном онтогенезе черноморского лосося под влиянием типичных токсикантов органического и неорганического происхождения, а также выявлена особенность действия токсических веществ, имеющих широкое распространение в природе, связанных с антропогенной деятельностью человека.

Принятые в нашей работе за контроль особи черноморского лосося изначально несколько отличаются по ряду функциональных особенностей от особей из природных популяций. Однако, именно эта рыба является на сегодняшний день основой для формирования популяций в природе после ее выпуска с завода в естественные водоемы, и в связи с этим наши исследования представляются весьма актуальными.

При решении поставленных в работе задач были проведены гистологические, гистопатологические и морфофизиологические исследования влияния сульфата меди, фенола и СПАВ на внутренние органы - печень, почки и жаберный аппарат молоди черноморского лосося в раннем постнатальном онтогенезе.

Как известно, основными путями проникновения токсических веществ являются: дыхательная система, кожа и пищеварительная система. Токсические вещества способны проникать в организм рыб осмотическим путем через жабры, а в другие органы и ткани путем перераспределения.

Анализ полученных экспериментальным путем данных показал, что для жаберного аппарата контрольных рыб характерны патологические изменения деструктивного характера и нарушение кровообращения. Эти отклонения можно объяснить отсутствием оптимальных условий среды для лососевых рыб в процессе искусственного выращивания и достаточно сильным загрязнением вод различными поллютантами. Исходя из результатов анализа морфофункционального состояния жаберного аппарата черноморского лосося в контроле и опыте, можно заключить, что наибольший патологический эффект наблюдался от воздействия детергента.

Для выявления различий в действии меди, фенола и детергента дополнительно были проведены цитометрические исследования клеток и ядер жаберного аппарата черноморского лосося. После воздействия всех трех классов токсикантов было отмечено значительное и достоверное уменьшение объемов всех структурных элементов жаберного аппарата.

Анализ особенностей действия фенола по морфологическим признакам на органном уровне (жабры черноморского лосося) показал, что разрастание многослойного плоского неогроговевающего эпителия под воздействием фенола превратило жаберные филаменты в сплошные эпителиальные пластик ки. В большинстве случаев, наблюдалось срастание филаментов между собой верхушечными частями (глава 3.1, фото 2,3,4,5).

Воздействие меди на жабры черноморского лосося, по сравнению с другими токсикантами, проявилось выраженным расширением капилляров ламелл, что характерно для гипоксии (глава З.1., фото 1).

Действие детергента характерно в том, что степень разрастания многослойного эпителия такова, что затрагивает сразу несколько филамент подряд, отчего жаберные пластинки сильно видоизменяются и представляют собой сплошной ровный пласт, а так же присутствуют жаберные пластины в форме булавы (глава З.1., фото 6,7,8).

Вышеизложенные результаты указывают на то, что жабры, являясь органом, непосредственно контактирующим с окружающей средой, в большей степени подвергаются губительному воздействию токсических веществ. Па-томорфологические нарушения жаберного аппарата после воздействия фенола в концентрации 10 мг/л, меди - 1мг/л и детергента - 10 мг/л настолько значительны, что действие каждого из токсикантов практически однозначно.

В адаптационных процессах, возникающих в организме при воздействии неблагоприятных факторов среды, особо важную роль играет печень. Функциональные свойства печени определяются метаболическими процессами, происходящими в гепатоцитах. Исходя из результатов анализа морфо-функционального состояния печени в контроле и опыте, можно заключить, что специфические черты действия токсических веществ весьма заметны и наибольший патологический эффект наблюдается от воздействия фенола и детергента.

На основе проведенных цитометрических исследований, удалось выявить некоторую особенность в действии токсических веществ на печень черноморского лосося.

Действие детергента проявилось в увеличении объемов гепатоцитов по сравнению с контролем и другими опытными группами, кроме солености 5%о. Объем ядер гепатоцитов меньше, чем в контроле, но больше, чем в опыте с фенолом и медью. Ядерно-цитоплазматическое соотношение в числовом выражении, больше, чем в других вариантах. Кроме того, по степени пато-морфологических изменений в печени, детергент можно поставить на 1 место, так как степень тяжести патологических нарушений наибольшая (4-4,5 балла).

Особенности действия меди и фенола в данном случае выявить достаточно сложно, так как действие обоих этих поллютантов привело к уменьшению объемов гепатоцитов и их ядер по сравнению с контролем. Разница состоит лишь в том, что после воздействия меди объемы гепатоцитов и их ядер меньше, чем объемы ядер и гепатоцитов после воздействия фенола.

Фенольная интоксикация вызвала в структуре печени ярко выраженные изменения. Ткань органа очень рыхлая, наблюдалось дисперсное распределение пигмента. В сосудах в большинстве случаев хорошо видны повсеместные лакунарные кровоизлияния. В гепатоцитах встречается вакуолярная дистрофия. Ядра имеют средние и мелкие размеры, содержат 2-3 ядрышка. Морфологические изменения оцениваются в 3,5-4 балла (глава 3.2., фото 15, 16).

После воздействия меди ткань органа рыхлая, балочная структура нарушена, сосуды печени расширены, гиперемированы, в некоторых местах хорошо заметна их отечность. Ядра гепатоцитов, в основном, пикноморфны, содержат 3-4 ядрышка. Оценка степени тяжести патологических изменений составляет 3-3,5 балла (глава 3.2., фото 13, 14).

Таким образом, можно заключить, что для выявления особенностей действия токсического вещества порой недостаточно одной или двух методик, так как, являясь токсикантами различной природы, фенол, медь и детергент воздействуют на структуру и функции органа каждый индивидуально, что затрудняет выявление специфичности действия этих токсических веществ.

Исследования по влиянию хронической интоксикации на почки черноморского лосося показали, что морфологические изменения в ткани органа носят патологический характер. Знать последствия влияния токсических веществ на почки рыб чрезвычайно важно, вследствие того, что именно этот жизненно-важный орган несет ответственность за выведение токсикантов из организма.

Морфологический анализ почечной ткани не позволил в полной мере выявить специфику действия токсических веществ, однако наибольший патологический эффект отмечен после воздействия детергента.

Для выявления различий в действии меди, фенола и детергента на почечную ткань, дополнительно были проведены цитометрические исследования клеток и ядер проксимальных и дистальных канальцев. Проведенные измерения позволили сделать вывод о наличии существенных различий в действии токсических веществ на почечную ткань черноморского лосося.

Отличительным действием фенола, по сравнению с другими токсикантами, на почки черноморского лосося, является достоверное и значительное уменьшение размеров всех структурных элементов почечной ткани (глава 3.3., рис. 8,9,10,11,14,15).

Характерное влияние меди на почки черноморского лосося проявилось в достоверном уменьшении проксимальных канальцев практически в 2 раза по сравнению с контролем, фенолом и детергентом (глава 3.3., рис. 8). Ядерно-цитоплазматическое соотношение в клетках проксимальных канальцев также достоверно меньше, чем в контроле и опыте с фенолом и детергентом, на фоне увеличения этого соотношения в дистальных канальцах (глава 3.3., рис.12,13). Отмечается увеличение объемов боуменовой капсулы и почечного тельца, не характерное для других токсикантов (глава 3.3., рис. 14,15).

Особенность действия детергента выявить было достаточно сложно. Объемы клеток проксимальных и дистальных канальцев меньше по сравнению с другими токсикантами и контролем. Объем ядер клеток дистальных канальцев минимален, тогда как объем ядер проксимальных канальцев больше, чем в контроле и в опыте. Ядерно-цитоплазматическое соотношение в клетках дистальных канальцев больше по сравнению с контролем и другими опытными группами (фенол, медь, соленость 5%о). Объемы боуменовой капсулы и почечного тельца меньше, чем в контроле, и после воздействия солености 5%о и меди, но больше, чем после воздействия фенола (глава 3.3, рис. 8-15).

Таким образом, можно заключить, что токсические вещества приводят к патоморфологическим изменениям в структуре почечной ткани. Особенность действия каждого из токсикантов на почечную ткань наблюдается в значительных колебаниях объемов клеток и ядер проксимальных и дистальных канальцев, их ядерно-цитоплазматическом соотношении, объемов боуменовой капсулы и почечного тельца.

Морфологический анализ крови позволяет оценить состояние кроветворной системы организма в норме и под воздействием различных факторов среды.

Проведенный цитопатологический анализ клеток крови черноморского лосося показал характерные черты действия токсических веществ на клетки крови черноморского лосося.

После опытного воздействия меди были выявлены следующие отличительные черты - достоверное увеличение числа промиелоцитов (р < 0,001), миелоцитов (р < 0,05), базофилов (р < 0,01) и нейтрофилов (р < 0,001), а так же значительного, хоть и не достоверного увеличения эозинофилов (глава 4, табл. 6). Значительное увеличение процента эозинофилов (8,8%) по сравнению с контролем (0,1%>) нередко сигнализирует о развивающемся процессе аллергии (Житинева и др., 1997). Отмечено достоверное снижение количества тромбоцитов в 2 раза (р < 0,05) (глава 4, табл. 6). Для эритроцитов отмечена такая патология как повсеместная агглютинация в виде большого скопления клеток вплоть до их разрушения (глава 4, фото 32).

Характерные черты воздействия детергента проявились в снижении количества тромбоцитов - 1,2 (р < 0,01) - по сравнению с контролем их количество меньше в 5 раз, увеличение количества базофилов, пожалуй самое значительное - 3,2 (р < 0,01), по сравнению с контролем и другими вариантами опыта. Было отмечено отсутствие эозинофилов (глава 4, табл. 6). Факт отсутствия эозинофилов как следствие токсического воздействия среды у осетровых пород рыб был отмечен так же Л.Д. Житеневой с сотрудниками (1997). Согласно полученным нами данных, большая часть эритроцитов находилась в различной стадии деструкции, встречался анизоцитоз и мелкая вакуолизация цитоплазмы эритроцитов (глава 4, фото 34).

4, таб. 6). Кроме того, для эритроцитов характерны такие патологические явления как кариорексис и пойкилоцитоз, которые носят локальный характер. Наблюдалась деструкция агглютинирующих эритроцитов (глава 4, фото 33).

Таким образом, методика исследования крови рыб является достаточно информативной и позволяет не только оценивать общее состояния организма рыб, но и выявлять отличительные черты действия некоторых токсических веществ.

Проведенный анализ основных показателей реактивности молоди черноморского лосося в тесте «Открытое поле» позволил выявить некоторые видовые и возрастные особенности поведения тестируемой молоди черноморского лосося, а также их зависимость от условий выращивания на заводе на фоне воздействия токсических факторов среды в условиях эксперимента. С помощью данного теста можно видеть зависимость поведения черноморского лосося от воздействия того или иного токсиканта, причем большинство данных достоверно подтверждены и имеют свои отличия.

Медь приводила к нарушению адаптационных возможностей нервной системы рыб и отрицательно влияла на адекватность поведения в естественных условиях среды. После воздействия меди, наблюдалось увеличение общей двигательной активности по сравнению с контрольными значениями (см. глава 5, табл. 7). Однако реореакция РАЗ (12,8 ед./мин.) оказалась ниже контрольного значения почти вдвое, хотя этот показатель является жизненно важными для рыб в естественных условиях обитания. После воздействия макета хищника наблюдалась реакция затаивания, хотя двигательная активность при этом была достаточно низкая.

Воздействие фенола, в отличие от других токсических веществ и солености, привело к увеличению показателей по реореакции РАЗ (32 ед./мин.) по сравнению с контролем (см. глава 5, таб. 7). Реакция на яркий свет РА5 (42,4 ед./мин,) после воздействия фенола выше контрольного значения (4,3 ед./мин.) почти в 10 раз (р<0,01) (глава 5, таб. 7). Воздействие фенола на организм черноморского лосося характеризует неспособность нервной системы адекватно реагировать на предъявляемые стимулы.

Особенность действия детергента состоит в том, что фоновая активность близка к нулю (1,1 ед./мин.) (р<0,05) по сравнению с контрольным значением (16,9 ед./мин.). Реакция на макет хищника (5,1 ед./мин.) ниже контрольного значения (54,7 ед./мин.) более чем в 10 раз (р<0,05) (глава 5, таб. 7). Вместо характерного затаивания, рыбы при появлении макета хищника просто замирали на месте, демонстрируя почти нулевую двигательную активность, что является нехарактерным поведением для молоди рыб, живущих в естественных условиях обитания. После воздействия детергента, в общем, отмечено снижение двигательной активности по всем показателям. Действие детергента на организм черноморского лосося характеризуется «заторможенным» неадекватным поведением в новой для него ситуации и значительным снижением реактивности на специфические раздражители, близко отражающие ситуации, возникающие в естественных условиях жизни молоди.

Таким образом, в результате исследований было показано, что поведенческие методики в целом позволяют выявить особенности действия токсических веществ и совместно с данными гематологических, гистологических и морфометрических исследований позволяют определить степень влияния отравляющих веществ на организм.

Было доказана возможность купирования негативных факторов с помощью солености 5%о. После обработки молоди черноморского лосося в течение суток солоноватой водой, наблюдался биостимулирующий эффект на органном и клеточном уровне. Состояние жаберного аппарата, печени и почек было близко к норме, по сравнению с контролем. В органах определялась наименьшая степень патологических изменений, которая оценивалась в 1-1,5 балла. Все это позволяет нам предположить, что соленость 5%о способствует восстановлению нормального функционирования тканей и органов.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Третьяк, Людмила Павловна, Астрахань

1. Алтуфьев Ю.В. О возрастных изменениях в структуре нейрогипофиза стерляди (Acipenser ruthenus L.) Текст. / Ю.В.Алтуфьев // Журнал «Онтогенез». 1977. - №1. - Т. 8. - С. 9-12.

2. Алтуфьев Ю.В. Морфофункциональное состояние мышечной ткани и печени молоди осетра и белуги в экспериментах по хронической интоксикации. Текст. / Ю.В.Алтуфьев // Вопросы ихтиологии. 1994. - №1. -Т. 34.- С. 135-138.

3. Алтуфьев Ю.В. О возможной оценке степени миопатии русского осетра Текст. / Ю.В.Алтуфьев // Тез. докл. Всесоюзн. межведомств, конф. «Экологические проблемы р.Урал и пути их решения». Гурьев. - 1989. -Ч.1.- С. 3-4.

4. Алтуфьев Ю.В. Переход лимитирующих факторов среды в повреждающие на примере осетровых рыб (Acipenseridae) Каспийского моря Текст. / Ю.В.Алтуфьев // Материалы докл. итоговой науч. конф. Естественные науки. Астрахань. - 1996. - С. 3-14.

5. Алтуфьев Ю.В. Гистофизиологический и токсикологический аспекты проявления миопатии Волго-Каспийского осетра Текст. / Ю.В. Алтуфьев, ГШ. Гераскин, В.А. Мумжу // Тез. Всесоюз. конф. по физиологии и биохимии рыб. Ярославль. - 1989. - С. 16-18.

6. Алтуфьев Ю.В. Гистопатология поперечно-полосатой мышечной ткани и печени каспийских осетровых Текст./ Ю.В. Алтуфьев, А.А. Романов, Н.Н. Шевелева // Вопросы ихтиологии. Т.32. - Вып. 2. - 1992. - С. 157-171.

7. Алтуфьев Ю.В. О гистопатологии мышечной ткани некоторых рыб Каспийского бассейна Текст./ Ю.В. Алтуфьев, А.А. Романов, Н.Н. Шевелева // Сб. «Осетровое хозяйство водоемов СССР». Астрахань. - • 1999.- 4.1.-С. 4-5.

8. Андрияшева М.А. Концепция сохранения генофонда природных популяций рыб. Текст./ М.А. Андрияшева // 1-й конгресс ихтиологов России: Тез. докл. ВНИРО. Астрахань. - 1997. - С. 346.

9. Афанасьева Н.А. Экологическое состояние Каспийского и Балтийского морей у берегов Российской Федерации Текст. / Н.А. Афанасьева, Г.К. Ильинская, А.Н. Коршенко // Метеорология и гидрологии. 1993. - №5. -С. 105-115.

10. Бабаджанов С.Н. Текст. / С.Н. Бабаджанов // Вопросы гинетики, патогенеза и клиники атеросклероза и гипертонической болезни. JI. — 1974. - С.77-79.

11. Бакштанский Э.Л. Формирование стайного поведения молоди атлантического лосося Salmo salar L. в период покатной миграции Текст. / Э.Л. Бакштанский, В.Д. Нестеров, М.Н. Неклюдов // Вопр. ихтиологии. -1987. Т.27: вып. 6. - С. 1000-1009.

12. Бакштанский Э.Л. Поведение молоди атлантического лосося в период ската Текст. / Э.Л. Бакштанский, В.Д. Нестеров, М.Н. Неклюдов // Вопр. ихтиол. 1980. - Т.20: вып. 4(123). - С.694-701.

13. Бакштанский Э.Л. Система различий в поведении заводской и "дикой" молоди атлантического лосося Текст. / Э.Л. Бакштанский, В.Д. Нестеров, Н.В. Сафонов //Вопр. Ихтиологии. 1992. - № 26. - С.19-23.

14. Барач Ю.Л. Фауна Грузии: Ч. 1. Текст. / Ю.Л.Барач // Рыбы пресных вод.-М.- 1941.-250 С.

15. Берг Л.С. Рыбы пресных вод и сопредельных стран: 4.1. Текст. / Берг Л.С.; Изд. 4-е, испр. и доп., Акад. Наук СССР. М. - 1948. - 466 с.

16. Беспрозванный Б.К. Купферовские клетки печени и некоторые морфологические варианты их системных реакций Текст. / Б.К. Беспрозванный // Успехи гепатологии: вып. 8. 1980. - С. 21-31.

17. Бехтерева Т.В. Эколого-физиологические исследования. Текст. / Т.В. Бехтерева. -М. 1998. - 121 с.

18. Билько В.П. Влияние рН водной среды на воспроизводство рыб. Текст. / В.П. Билько, Н.Н. Макиевский // Гидробиол. ж. Киев. - 1987. - 41 с.

19. Богданов Г.А. Эффективность работы лососевых рыбоводных заводов за рубежом: Вып. 4. Текст. / Г.А. Богданов, Э.Е. Шевцова // Обзор, ин-форм. ЦНИИТЭИРХ.: Сер. "Рыбохоз. использование внутр. водоемов. -1978.-С. 1-38.

20. Будников Г.К. Тяжелые металлы в экологическом мониторинге водных систем Текст. / Г.К. Будников // Соросовский образовательный журнал. 1998.- №5. - С.23-29.

21. Буреш Я.Н. Значение аномальных данных для современной нейробиоло-гии обучения и памяти Текст. / Я.Н. Буреш, О.В. Бурешова // Сб. Мозг и поведение. М, - 1990. - С.250.

22. Буреш Я.Н. Физиология поведения. Текст. / Я.Н. Буреш; Практические вопросы. М. - 1991. - С.356.

23. Варзиева Г.В. Вопросы гигиены труда и профессиональной патологии на некоторых предприятиях Северо-Осетинской АССР: Сб.6. Текст. / Г.В. Варзиева, Г.Ф. Океанова. Краснодар. - 1978. - С.31-35.

24. Васильев В.Г. Болезни рыб. Текст. / В.Г. Васильев, Г.В. Грищенко. М. - 1980.-С. 46-50.

25. Васильков А.И. Экология. Текст. / А.И. Васильков. М. - 1989. С - 306.

26. Венчиков А.И. Основные критерии статистической обработки результатов наблюдений в области физиологии. Текст. / А.И. Венчиков, В.А. Венчиков.: Медицина. М. - 1982. - С.65-78.

27. Вернадский В.И. Химический состав животного вещества в связи с химией земной коры. Текст. / В.И. Вернадский. Петроград. - 1922. -С.48-71.

28. Веруашвили Г.Г. Некоторые черты биологии черноморской кумжи в реке Бзыбь: Т. 13. Текст. / Г.Г. Веруашвили, Н.Г. Гогиберидзе, Н.П. Замбахидзе // Тр. научноисслед. рыбохоз. станции Грузии. 1968. - С. 51-61.

29. Вишневская Е.К. Клетки синусоидных сосудов печени: Т. 104. Текст. / Е.К. Вишневская; Морфология. 1993. - № 3-4. - С. 135-143.

30. Воложин А.Н. Адаптация и компенсация универсальный биологический механизм приспособления. Текст. / А.Н. Воложин, Д.К. Субботин. -М.- 1987.-С. 100-112.

31. Воробьев А.И. Руководство по гематологии: Т.2. Текст. /А.И. Воробьев; Медицина. -М. 1985. - С. 160-177.

32. Воронин JI.JI. Условные рефлексы рыб. Текст. / JI.JI. Воронин //Ж. Рыбоводство и рыболовство. 1962. - №2 . - С.42.

33. Воронин JI.JI. О клеточных механизмах условно-рефлекторной деятельности Текст. / JI.JI. Воронин // Журнал ВНД им. Павлова. Вып. 4. -1976.

34. Газета «В поисках восьмой няньки» № 548 за 15.05.2002., автор Алексей Хорошилов (собственный корреспондент) Электронный ресурс. / рубрика: Бесправная рыба // Хабаровский край / http://www.yarmarka.net/news/news.asp?id=3585

35. Гераскин П.П. Нарушение обмена веществ у русского осетра в современных условиях Волго-Каспия. Текст. / П.П. Гераскин // Сб.: «Осетровое хозяйство водоемов СССР». Астрахань. - 1989. - С. 60-62.

36. Глазова М.В. Влияние тиролиберина на нонапептидергические клетки в срезах гипоталамуса крыс: Т. 127. Текст. / М.В. Глазова, И.А. Краснов-ская // Бюлл. экспер. биол. мед. 1999. - №5. - С. 526-528.

37. Гриневич В.В. Дополнительные группы нонапептидергических клеток промежуточного мозга у интактных и гипофизэктомированных крыс: Т. 106. Текст. / В.В. Гриневич, JI.C. Воропанова, И.А. Красновская // Морфология; 1994. - № 4-6. - С. 38-46.

38. Грищенко Л.И. Структурные изменения в жабрах рыб под воздействием токсических веществ: Т.1 Текст. / Л.И. Грищенко // Вторая всесоюзная конференция по рыбохозяйственной токсикологии. СПб., - 1991. - С. 138-140.

39. Грушко Я.М. Ядовитые металлы и их неорганические соединения в промышленных сточных водах. Текст. / Я.М. Грушко. Медицина. — М. -1972.-С. 175.

40. Гусева С.Е. Реакция карпа (Cyprimus carpio L.) в различные периоды онтогенеза на действие фосфорорганических соединений: Т.31 Текст. / С.Е. Гусева// Биологические науки. 1988. - С. 53-58.

41. Данилова О.А. Морфологическая характеристика развития нейросекре-торных клеток некоторых гипоталамических центров у крыс в ходе по-стнатального онтогенеза: Т.ЗО Текст. /О.А. Данилова, М. Христич, Е.В. Черниговская // Арх. Анат. 1982. - С. 5-10.

42. Данильченко О.Р. Чувствительность эмбрионов рыб к действию токсических веществ: Т. 17.Текст. / О.Р. Данильченко // Вопросы ихтиологии. 1977.-№3.-С.518-527.

43. Детлаф Т.А. Развитие осетровых рыб Текст. / Т.А. Детлаф, А.С. Гинзбург, О.И. Шмальгаузен. М. - 1981. - С.224.

44. Дохалян А.В. Влияние некоторых СПАВ на гидробионтов Текст. / А.В. Дохалян, Д.П. Ахматова // Тез. докл. Рига. - 1988.

45. Душкин В.А. Лабораторное животноводство. Текст. / В.А. Душкин. -М.: Россельхозиздат. 1980. - С.481.

46. Евлашко Ю.П. Тезисы. Текст. / Ю.П. Евлашко, А.С. Соркина, Л.С. Семенова // Симпозиум «Медико-биологические аспекты изучения и применения порфиринов». Таллинн. - 1989. - С. 90-91.

47. Егорова М.Н. Экологические особенности крови ряда черноморских рыб. Текст. / М.Н.Егорова // В сб.: «Биологические исследования Черного моря и его промысловых ресурсов». М.: Наука. - 1968. - С.223-227.

48. Ермолаев Г.И. Выживаемость заводской молоди семги в речной период жизниТекст. / Г.И. Ермолаев // Сб. науч. тр. ГосНИОРХ. 1982. - Вып. 190. - С. 70-76.

49. Ершов Ю.А. Механизмы токсического действия неорганических соединений. Текст. / Ю.А. Ершов, Т.В. Плетнева. М. - 1989. - С. 381.

50. Жабрева С.Б. Влияние солей тяжелых металлов на ультраструктуру жаберного эпителия Ленского осетра: Т.1. Текст. / С.Б. Жабрева // Вторая всесоюзная конференция по рыбохозяйственной токсикологии. СПб. -1991.-С. 190-191.

51. Житинева Л.Д. Эколого-гематологические характеристики некоторых видов рыб. Текст. / Л.Д. Житинева, О.А. Рудницкая, Т.И. Калюжная // Справочник. Ростов-на-Дону. - 1997.-С. 135.

52. Житинева Л.Д. Атлас нормальных и патологических измененнных клеток крови рыб. Текст. / Л.Д. Житинева, Т.Г. Полтавцева, О.А. Рудницкая. -Ростов-на-Дону: Кн. изд-во. 1989. - С.112.

53. Жуйков Л.Ю. Связь обучаемости молоди радужной форели в челночной камере и выживаемости ее в присутствии незнакомого хищника: Т. 35. Текст. / Л.Ю. Жуйков // Ж. ВНД. 1985(a). - № 4. - С. 718-723.

54. Жуйков Л.Ю. Связь обучаемости молоди атлантического лосося в челночной камере и выживаемости ее в присутствии незнакомого хищни-каТекст. / Л.Ю. Жуйков // ВНИРО. М. - 1985.(6). - С.8.

55. Жуйков Л.Ю. Оценка выживаемости заводской молоди атлантического лосося в реке в первые дни после выпуска Текст. / Л.Ю. Жуйков // Рыб. хоз-во. 1995. - №8. - С.ЗО.

56. Задорина В.М. Суточная динамика дрифта и суточная ритмика питания молоди семги в реках Кольского полуострова Текст. / В.М. Задорина //

57. Проблемы биологии и экологии атлантического лосося. Л.: Наука. -1985.-С. 120-129.

58. Западнюк М.П. Лабораторное животноводство. Содержание, разведение, использование в эксперименте. Текст. / М.П. Западнюк, В.И. Западнюк, Е.А. Западнюк, Е.А. Захарин. Киев: Высшая школа. - 1983. - С. 383.

59. Иванов В.П. Состояние и перспективы сырьевой базы и промысла рыб на Каспии Текст. / В.П. Иванов //1 конгресс ихтиологов России / Тезисы докладов. Москва.: Изд-во ВНИРО. - 1997. - С. 421.

60. Иванов Ф.Э. Токсичное влияние меди на молодь крыс Текст. / Ф.Э. Иванов // Токсикология. М. - 1998. - №9. - С.35-39.

61. Иванова Н.Т. Атлас клеток крови рыб. Текст. / Н.Т. Иванова М.: Легкая и пищевая промышленность. - 1983. - С. 78. ^ 83. Казаков Р.В. Биологические основы разведения атлантического лосося.

62. Текст. / Р.В. Казаков // М.: Лег. и пищ. пром-сть. 1982. - С. 144.

63. Казаков Р.В. Морфологическая характеристика заводской и природной молоди семги Salmo salar L.: Т. 154. Текст. / Р.В. Казаков, О.В. Семенова // Тр. Зоол.ин-та АН СССР. 1986. - С. 75-86.

64. Казаков Р.В. Количественная оценка степени серебрения молоди атлантического лосося Salmo salar природного и заводского происхождения. Текст. / Р.В. Казаков, В.В. Козлов // Морфология и систематика лососе-видных рыб. Л. - 1985. - С. 119-129.

65. Калашников А.А. Необротимые изменения энергетических процессов в ф митохондриях под влиянием хронического воздействия детергент

66. Текст. / А.А. Калашников, Н.В. Животникова // РЖ: Токсикология. -' №4.- 1990.-С. 57.

67. Калинина М.В. Динамика гематологических показателей молоди симы Oncorhynchus masu из южного Приморья Текст. / Калинина М.В. // Биол. моря. №5. - 1997. - С.314-318.

68. Канидьев А.Н. Биологические основы искусственного разведения лосо-Ф севых рыб. Текст. / А.Н. Канидьев. М.: Легкая и пищевая пром-сть.1984.-С. 16-25.

69. Карнаухов А.В. К вопросу об устойчивости химического состава атмосферы и теплового баланса Земли: Т.39. Текст. / А.В. Карнаухов // Биофизика. Пущино. - 1994а. - С. 148-152.

70. Карнаухов А.В. Роль биоразнообразия в сохранении климата Земли: Т.6 Текст. / А.В. Карнаухов // Биофизика живой клетки. Пущино. - 19946. - С.14-17.

71. Карпевич А.Ф. О биологической стоимости рыб разного трофического уровня: Т.76 Текст. / А.Ф. Карпевич Труды ВНИРО. - 1970. - С. 7-55.

72. Кенунен О.Г. «Структура двигательного поведения» лабораторных животных новые возможности методики «открытое поле» Текст. / О.Г. Кенунен, B.JI. Козловский // РЖ: Физиология человека и животных. -№11,- 1992.-C.40.

73. Кирьянов С.В. Влияние стока Волги на состояние загрязнения Северного Каспия Текст. / С.В. Кирьянов, Н.А. Афанасьева // Метеорология и гидрология. 1992.- №6.-С. 114-117.

74. Клаучек С.В. Актуальные вопросы профессианальной патологии: Т.2. Текст. / С.В. Клаучек, В.В. Деларю, В.П. Бурденко // В сб: Вып. 42.- М.- 1990. С.195-196.

75. Клуша В.Е. Пептиды регуляторы функций мозга. Текст. / В.Е. Клуша.- Рига.: «Зикатне» 1984.-С. 181.

76. Кобакова Е.М. Развитие головного мозга животных. Текст. / Е.М. Коба-кова Л.: «Наука». - 1969. - С. 62.

77. Коваленко В.Ф. особенности обмена у рыб при адаптации к пороговым концентрациям тяжелых металлов в воде Текст. / В.Ф. Коваленко // 1-й симпозиум по экологической биохимии рыб. Ярославль. - 1987. - С.87-89.

78. Кокоза А.А. Динамика устойчивости осетровых рыб к фенолу на ранних этапах онтогенеза Текст. / А.А. Кокоза // Вопросы водной токсикологии. М.: Наука. - 1970.-С.168-171.

79. Корниенко Г.Г. Экологические аспекты биологии репродукции. Текст. / Г.Г. Корниенко, А.А. Кожин, С.П. Воловик, Э.В. Макаров. Ростов-на-Дону. - 1998.-С.238.

80. Костевецкий Я.И. Текст. / Я.И. Костевецкий, З.И. Жолдакова // Ж. Гигиена и санитария. №7. - 1971. - С 7-10.

81. Костров Б.П. Применение цитогенетических методов для оценки степени адаптации рыб к новым экологическим факторам среды Текст. / Б.П. Костров // Тез. докл. всесоюзн. конф. по физиологии и биохимии рыб. -Астрахань. 1979. - С.9-11.

82. Котов A.M. Изменение некоторых морфобиохимических показателей крови у черноморской мариды при отравлении малыми концентрациями диспергентов Текст. / A.M. Котов, Н.Д. Мазманиди // Экологическая физиология и биохимия рыб. Астрахань. - 1997. - С. 25.

83. Костылев Ю.В. К вопросу об эффективности искусственного воспроизводства лосося и путях ее повышения Текст. /Ю.В. Костылев, В.И. Поляков // Лососевидные рыбы. Л.: Наука. - 1980. - С. 207-210.

84. Красновская И.А. Реакция некоторых нейросекреторных центров гипоталамуса крыс при охлаждении и введении тиролиберина: Т.30 Текст. / И.А. Красновская //Проблемы эндокринологии. 1984. - №2. - С. 52-55.

85. Краюшкина Л.С. Развитие осморегуляторной функции в раннем онтогенезе лососевых. Текст. / Л.С. Краюшкина // Биол. основы развития лосос. х-ва в водоемах СССР. М. - 1983. - С. 56-73.

86. Краюшкина JI.C. Адаптация молоди лосося различного морфофункцио-нального состояния к гипертонической среде. Текст. / Л.С. Краюшкина // Лососевидные рыбы. Л. - 1976. - С. 60-65.

87. Крохин В.В. О липидном и жирнокислотном составе речной и заводской молоди лосося, отловленной в зимнее время. Текст. /В.В. Крохин, О.М. Болгова, И.Л. Щуров // Сравнит, биохимия вод. животных. Петрозаводск. - 1983.- С. 61-66.

88. Кудрявцев А.А. Гематология животных и рыб. Текст. / А.А. Кудрявцев, Л.А. Кудрявцева, Т.И. Привольнев. М.: Колос. - 1969. - С.319.

89. Кулян С.А. Черноморский лосось не исчезнет. Текст. / С.А. Кулян // Рыбоводство и рыболовство. М. - 1999. - №1. - С. 17-18.

90. Лазарев И.В. Вредные вещества в промышленности. Т.З Текст. / И.В. Лазарев, Э.П. Левина. Справочник для химиков, инспекторов и врачей в 3 т. Л.: Химия. - 1977. - С.608.

91. Лазарева Д.Н. Стимуляторы иммунитета. Текст. / Д.Н. Лазарева, Е.К. Алехин. М. - 1985. - С.352.

92. Лесников Л.А. Патолого-гистологический анализ состояния рыб при полевых и экспериментальных токсикологических исследованиях Текст. / Л.А. Лесников, И.Д. Чинарева // Методы ихтиологических исследований Л. - 1987. - С. 80-81.

93. Линдберг Г.У. Словарь названий морских промысловых рыб мировой фауны. Текст. / Г.У. Линдберг, А.С. Герд, Т.С. Расс // Под редакцией Л.С. Бердичевского. Л.:Наука. - 1980. - С. 563.

94. Лукьяненко В.И. Водная токсикология. Текст. / В.И. Лукьяненко. М.: Агропромиздат. - 1968.

95. Лукьяненко В.И. Общая ихтиотоксикология. Текст. / В.И. Лукьяненко. -М.: Легкая и пищевая пром-сть. 1983. - С. 320.

96. Мазур И.И. Инженерная экология. Текст. / И.И. Мазур. М.: ВШ. -1996.

97. Маслова М.Н. Динамика сезонных изменений в системе красной крови низших позвоночных: сезонная динамика эритропоэза у форели S.gaidneri Текст. / М.Н. Маслова, Т.В. Тавровская // Ж. Биохимия и физиология. 1990. - № 6. - С. 796-798.

98. Матей В.Е. Функциональная морфология жаберного эпителия пресноводных костистых рыб Текст. / Матей В.Е. // Физиология, биохимия и токсикология пресноводных животных. Л.: Наука. - 1990. - С. 104-136.

99. Матей В.Е. Сравнительный анализ изменений структуры жабр тиляпии Oreohromis mossambicus при хроническом действии нафталина и дихло-фоса Текст. / В.Е. Матей, Г.М. Чуйко, Д.Ф. Павлов // Цитология. М. -1994.- №9-10.-С. 938-945.

100. Митанс А.Р. Поведение, питание и рост заводской молоди после выпуска в реку. Текст. / А.Р. Митанс // Рыбохозяйственные исследования в бассейне Балтийского моря. Рига. - 1970. - Вып. 7. - С. 108-111.

101. Моисеев В.А. Сравнительная чувствительность Coregonidae к веществам фенольного ряда Текст. / В.А. Моисеев // I конгр. ихтиологов России; Астрахань, сент., 1997; Тез. докл. Астрахань. - 1997. - С.161.

102. Мурза И.Г. Темп полового созревания кумжи бассейна Балтийского моря. Текст. / И.Г. Мурза // Сб. науч. трудов ГосНИОРХ. 1985. - С. 136162.

103. Мурза И.Г. Некоторые закономерности экологии и гаметогенеза кумжи в водоемах разных широт. Текст. / И.Г. Мурза, O.JI. Христофоров // Тез. докл. координац. совещ. по лососевым рыбам. JI. - 1983. - С. 138-139.

104. Никитин В.Н. Атлас клеток крови сельскохозяйственных и лкаборатор-ных животных Текст. / В.Н. Никитин. М.: Изд.сельхоз.литературы. -1949.

105. Никитина Н.В. Влияние азотосодержащих детергентов на гормональный статус белых крыс Текст. / Н.В. Никитина, А.А. Харанский, И.В. Чеховский // РЖ: Токсикология. -№11.

106. Никоноров С.И. Передний мозг и поведение рыб. Текст. / С.И. Никоно-ров.-М.: Наука. 1982.-С. 242.

107. Никоноров С.И. Эколого-генетические проблемы искусственного воспроизводства осетровых и лососевых рыб. Текст. / С.И. Никоноров,, Л.В. Витвицкая М.: Наука. - 1993. - С. 254.

108. Ноздрачев А.Д. Физиология нервной, мышечной и сенсорной систем. Текст. / А.Д. Ноздрачев. М. - 1991. - С. 512.

109. Осипов А.Г. "Атлантическая" и "дунайская" филогенетические группы кумжы S. trutta: генетическая дивергенция, эволюция, охрана. Текст. / А.Г. Осипов, Л. Берначе // Вопр. ихтиологии. 1996. - № 6. -С. 762-786.

110. Охонская И.А. Функциональная морфология нейросекреторных клеток и задней доли гипофиза белых мышей в условиях длительной стимуляции: Т.14. Текст. / И.А. Охонская // Цитология. 1972. - №8. - С. 925-932.

111. Павлов Д.С. Подходы к охране редких и исчезающих видов рыб Текст. / Д.С. Павлов // Материалы к 38 Пленуму Ихтиологической комиссии. -М.: Препринт. 1990. - С.12-13.

112. Павлов Д.С. Атлантический лосось: биология, охрана и воспроизводство. Текст. / Д.С. Павлов, А.И. Лукандин, М.А. Скоробогатов. Петрозаводск. - 2000. - С. 110.

113. Павлов Д.С. Охрана рыб и "Красная Книга СССР" Текст. / Д.С. Павлов, Ю.С. Решетников, М.И. Шатуновский // Природа. №11. - 1983. - С.З-10.

114. Патин С.А. Токсикология некоторых видов каспийской и атлантической фауны: Т.34 Текст. / С.А. Патин, В.К. Дохалян, А.З. Чернышев // Труды ВНИРО. 1978. - С.63-74.

115. Пестова И.М. Морфофункциональная организация системы гемопоэза в

116. Ф эволюции: Т.99. Текст. / И.М. Пестова, В.А. Четверных // Архив анатомии, гистологии и эмбриологии. 1990. - № 11. - С. 90-99.

117. Плющев А.К. Совершенствование метода изучения свободного поведения животных в открытом поле Текст. / А.К. Плющев, А.А. Гоев // Ж. ВИД. Вып.4. 1986. - С.54-56.

118. Поленов А.Л. Гипоталамическая нейросекреция. Текст. / А.Л. Поленов. Л.: Наука. - 1971.-С.159.

119. Ф 149.Праздникова Н.В. Некоторые данные по изучению высшей нервной деятельности рыб методом пищевых двигательных условных рефлексов Текст. / Н.В. Праздникова // В кн. : Тр. Совещ. по физиологии рыб. М.: Изд-во АН СССР. - 1958.-С. 31.

120. Рауба И. Исследование ихтиофауны загрязненной ртутью Текст. / И. Рауба // Сб. «Основы биопродуктивности водоемов Прибалтики».- Вильнюс. 1975.-С. 438-440.

121. Роберте Дж. Основы органической химии. Текст. / Дж. Роберте, М. Ка-черио М.: Мир. - 1978. - С. 655.

122. Романов А.А. Новообразования в половых железах и печени осетровых рыб (Acipenseridae) Каспийского моря Текст. / А.А. Романов, Ю.В. Ал-туфьев //'Вопросы ихтиологии. Вып. 6. - 1990. - С. 1040-1044.

123. Романов А.А. Перспективы воспроизводства осетровых в связи с нарушениями воспроизводительной системы Текст. / А.А. Романов, Ю.В. Алтуфьев // Тез. «Перспективы воспроизводства и сохранения рыбных запасов Волго-Каспия». Астрахань. - 1989. - С. 42-44.

124. Романов А.А. Экстрарегиональный гистогенез половых клеток осетровых рыб Каспийского моря: Т.32. Текст. / А.А. Романов, Ю.В. Алтуфьев // Вопросы ихтиологии. Вып. 5. - 1992. - С. 145-154.

125. Ромейс Б. Микроскопическая техника. Текст. / Б. Ромейс М.: Ино-странная'литература. - 1953. - С. 720.

126. Рылина О.Н. Гистологическое исследование рыб Шекснинского водохранилища Текст. / О.Н. Рылина // Сб.науч.трудов / ГосНИОРХ. 1995. -№314.-С. 354-356.

127. Сахаров П.П. Лабораторные животные. Текст. / П.П. Сахаров. М.: Медгиз. - 1952.

128. Световидов А.Н. Рыбы Черного моря. Текст. / А.Н. Световидов. -Москва-Ленинград.: Наука. 1964. - С.502.

129. Селье Г. Очерки об адаптационном синдроме. Текст. / Г. Селье. М.: Медгиз.-1972.-С. 260.

130. Сентаготаи Я. Гипоталамическая регуляция передней части гипофиза. Текст. / Я. Сентаготаи, Б. Флерко, Б. Меш, Б. Халас. Будапешт.: Изд-во АН Венгрии. - 1965.-С. 354.

131. Серпунин Г.Г. Использование гематологических анализов в ихтиотокси-кологическом мониторинге водоемов: Т.2. Текст. / Г.Г. Серпунин // Вторая Всес. конф. по рыбохозяйственной токсикологии / Тез. докл. -СПб. 1991. - С. 169-170.

132. Симонов П. В. Формирование и торможение условных рефлексов. Текст. / П.В. Симонов, М.И. Лимшак. М.: Наука. - 1980. - С. 312.

133. Смирнов Ю.А. Условия обитания дикой и заводской молоди семги в р.Коле (Кольский полуостров). Текст. / Ю.А. Смирнов, Ю.А. Шустов, И.Л. Щуров // Проблемы биологии и экологии атлантического лосося. -Л. 1985.-С. 130-148.

134. Степаненко Б.Н. Органическая химия. Текст. / Б.Н. Степаненко. -М.Медицина. 1980.-С. 320.

135. Стишковская Л.Л. Вечные странники: Жизнь амфибий, как она есть. Текст. / Л.Л. Стишковская. М. 1988.

136. Сторожук Н.Г. Влияние накопление ртути на ранних стадиях онтогенеза дальневостчных лососей. Текст. / Н.Г. Сторожук // Тез. докл. Всес. со-вещ. по проблемам охраны морской среды. Калининград. - 1977. -С.101-102.

137. Сясина И.Г. Оценка состояния камбал из бухты Сивучья залива Петра Великого Японского моря по гистопатологическим показателям: Т.27.

138. Текст. / И.Г. Сясина, А.С. Соколовский // Биология моря. №2. - 2001. -С. 102-109.

139. Тагиев Ш.К. Сложные двигательные условные рефлексы на цепи раздражителей у рыб. Текст. / Ш.К. Тагиев // В кн.: Тр. Совещ. по физиологии рыб. Вып.8. - 1958. - С.38.

140. Тихомиров A.M. Перспективы модернизации биотехнологии искусственного воспроизводства черноморского лосося на Адлерском ПЭЛРЗ. Текст. / A.M. Тихомиров, С.А. Кулян // Тезисы докл. конф. проф.-преп. состава АГТУ. Астрахань. - 1999. - С. 181. (а).

141. Тихомиров A.M. Устройство "Ихтиотест" для оценки адаптивных возможностей молоди осетровых рыб. Текст. / A.M. Тихомиров // Тез.ХХХ1Х науч. тех. конф.проф. преп.сост. - АГТУ. - Астрахань. -1998.-С.96.

142. Трахтенберг И.М. Методы изучения хронического действия химических и биологических загрязнителей. Текст. / И.М. Трахтенберг. -Риж.мед.ин-т. Рига: Зинантне. - 1987. - С.170.

143. Трахтенберг И.М. Проблема нормы в токсикологии (современные представления и методические подходы, основные параметры и константы). Текст. / И.М. Трахтенберг, Р.Е. Сова, В.О. Шефтель. М. - 1991. - С. 216.

144. Трошихин В.А. Становление и развитие безусловных рефлексов в раннем онтогенезе. Текст. / В.А. Трошихин, Л.Н. Козлова. Киев.: Наукова думка. - 1968.

145. Угарова Т.Ю. Семейное овощеводство на узких грядах. Текст. / Т.Ю. Угарова. Самара. - 1994.-С.160.

146. Узунова Елиза, Промени в еритроцитната устойчивост при риби в усло-вията на замъреяване с някои тежки метали: Т.ЗЗ Текст. / Елиза Узунова, Мариета Димитрова // Почвозн., агрохим. и екол. №1. - С.32-36. Болг.

147. Усенко Е.В. Влияние меди и инсулина на синтез нуклеиновых кислот и белка в клетках tetr.p Текст. / Е.В. Усенко // Физиология. М. - №1.1999. -С.2-10.

148. Федорова Н.Н. Патологические изменения крови карпа под влиянием солей ртути и меди Текст. / Н.Н. Федорова, М.А. Егоров // Вестник Астраханского гос. техн. университета. 1996. - № 2. - С.87-89.

149. Федорова Н.Н. Морфологическая характеристика печени рыб в современных экологических условиях Текст. / Н.Н. Федорова, В.Н. Крючков,

150. B.Ф. Зайцев // Российские морфологические ведомости. № 3-4. - 1999.1. C. 174-180.

151. Флеров Б.А. Эколого-физиологические аспекты токсикологии пресноводных животных. Текст. / Б.А. Флеров. JI. - 1989. - С. 144.

152. Хайнд Р. Поведение животных. Синтез этологии и сравнительной психологии. Текст. / Р. Хайнд М.: Мир. - 1975. - С. 855.

153. Харольд Б. Аверсивные свойства. Цели при обучении навыку избегания с короткими и длинными интервалами между тренировками. Текст. / Б. Харольд // РЖ: Физиология человека и животных. № 10. - 1992. - С.52.

154. Хесин Я.Е. Размеры ядер и функциональное состояние клеток Текст. / Я.Е. Хесин. М.: Медицина.

155. Ходоревская Р.П. Оценка запасов осетровых в Каспийском море Текст. /Р.П. Ходоревская // Рыбн. хоз-во. №5. - 1997. - С.39.

156. Хлебович В.В. Критическая соленость биологических процессов. Текст. / В.В. Хлебович. Л.: Изд-во «Наука». 1974. - С. 235.

157. Чигиринский А.И. Культивирование тихоокеанских лососей. Текст. /

158. A.И. Чигиринский. -Владивосток. 1985. - С. 231.

159. Чуйков Ю.С. Гидролого-гидробиологический режим Нижней Волги Текст. / Ю.С. Чуйков, П.И. Бухарицин, Л.А. Киселева, В.А. Фильчаков,

160. B.Н. Сапрыкин, Е.Н. Лабунская // Экология астраханской области. Вып.4. Астрахань. - 1996. - С. 256.

161. Чуйков Ю.С. Методики экспериментальных исследований позвоночных животных. Текст. / Ю.С. Чуйков, Л.Ю. Чуйкова Астрахань. - 1998.1. C. 383.

162. Чумак В.И. Условные рефлексы рыб на отношение раздражителей Текст. / В.И. Чумак // В кн.: Тр. Совещ. по физиологии рыб. Вып. 8. -М.: Изд-во АН СССР. - 1958. - С.45.

163. Шевцова Э.Е. Биологические основы и биотехника искуственного разведения черноморского лосося Текст. / Э.Е. Шевцова // Автореф. канд. дисс. 1969.-С.28.

164. Ширяева Н.В. Поведение крыс с разными уровнями возбудимости нервной системы в тесте «Открытое поле»: Т.37 Текст. / Н.В. Ширяева // Журнал ВНД им. И.П. Павлова. Вып.6. - 1987.

165. Шмальгаузен И.И. Факторы эволюции (теория стабилизирующего отбора). Текст. / И.И. Шмальгаузен М.: Наука. - 1968. - С.451.

166. Шустов Ю.А. О сроках адаптации заводской молоди семги к речным условиям. Т.20 Текст. / Ю.А. Шустов, И.Л. Щуров, Ю.А. Смирнова // Вопр. ихтиологии. 1980. - Вып. 4(123). - С. 758-761.

167. Яндовская Н.И. Инструкция по разведению атлантического лосося. Текст. / Н.И. Яндовская, Р.В. Казаков, Х.А. Лейзерович .Л. - 1979. -С.96.

168. Яржомбек А.А. Поведение рыб. Текст. / Яржомбек А.А. М.: Изд-во ВНИРО. - 1994. - С.55.203. www.salch.com/news. Новости Сахалина и Курил. Электронный ресурс. 2003 г.

169. Abbasi A.R. Effects of copper on the ultrastmcture of brain cells of Atlantic herring, Clupea harengus L. Text. / A.R. Abbasi, S.E. Shackley, P.E. King // Pakistan I.Zool. 1995. - №3. - P.203-206.

170. Alam Hohammed K. Eugene Acute toxicity of heary metals to common carp (Cyprinus carpio) Text. / Alam Hohammed К., O. Maughan //1. Erviron Sci and Health A. 1995. - №8. - P. 1807-1816.

171. Bakstansky E.L. Studies of same charakteristics and destiny of hatchery young atlantik salmon Text. / E.L. Bakstansky, N.V. Safonov, V.L. Rozhdestvenskaya // ICES C.M. 1979 F. - Vol. 13. - P. 1-24.

172. Barreau J J. Dynamigue de la dispersion dalevins de saumon atlantigue a leemergence en relation avec la photoperiode. Text. / J.J. Barreau, E. Beal, C. Marty // Actes Collog. biol. populat.- Lion, 4-6 sept. 1986.; Lion. - 1987. - C. 669-670.

173. Barrett B.A. Sustained exercise uncreases plasms growth homone concentrations in two anadromous salmonids Text. / B.A. Barrett, B.A. McKeon // Can. J. Fish, and Aguat. Sci. 1988. - N 4. - C.747-749.

174. Bieniarzet Krysztol, Goldfish (Carassius auratus gibelia Bloch) treading in different concentration of sine Text. / Krysztol Bieniarzet, Piotr Epler, Miko-lajczyk Sokolomska, Miroslawa, // Pol.arch, hidrobiol. 1996. - №3. - P.365-371.

175. Blaxter I.H.S. The effect of copper on the eggs and larvae of place and hearing Text. / I.H.S. Blaxter // J. Marin Biol. Assoc. U.K. 1977. - V. 57. - N 3. - P.849-858.

176. Chang L.W., Reuhl, Dudley A.W. Effects of methylmercury chloride on Rana pipiens tadpoles. Text. / L.W. Chang, K.R. Reuhl, A.W. Dudley. Environ. Res. - 1974. - 8. - P. 82-91.

177. Clearwater S.J. Gastro-intestinal uptake and distribution of copper in rainbow trout Text. / SJ. Clearwater, S.J. Baskin, C.M. Wood, D.G. Mc Donald // U.I. Exp. Biol. 2000. - 203. - №16. - P. 2455-2566.

178. Crawford R.B. Effects of environmental toxicants on development of a teleost embryo Text. / R.B. Crawford, A.M. Guarino // J. Environ. Pathol. Toxicol, and Oncol. 1985. - V. 6. - N 2. - P. 185-194.

179. Da P.E. Sublethal responses to pesticides of several species of Australian freshwater fish and crustaceans and rainbow trout Text. / P.E. Da, S .J. Coox. //Environ. Toxicol, and Chem. 1994. - 13. - № 8. -P.1341 - 1354.

180. De Parseval L. Salmons sauvages et salmons delevage au S.R.T.T. (Salmon research trnst of Ireland incorporated) Text. / De Parseval L. // Salmons. -1984.-N49.-P.28-32.

181. Dempson J.B. Status of the Atlantic salmon (Salmo salar L.) population of Conne River, Newfoundlend, in 1993. Text. / J.B. Dempson, G. Fyrei, C. Pennell // DFO Atlant. Fish. Res. Doc. 1994a. - P. 1-35.

182. Dempson J.B. Analysis of Atlantic Salmon (Salmo salar), smolt condition and marine survival; information from two south coast Newfoundlend river. Text. / J.B. Dempson, M.F. 0"Connell, D.E. Stansbury // DFO Atlant. Fish. Res. Doc. 1994b. - P. 1-23.

183. Dethloff Gail M. Effects of copper on immune system parameters of rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) Text. / Gail M. Dethloff, Bailey Howard C. // Environ. Toxicol, and Chem. 1998. - 17. - №9. - С .1807-1814.

184. Dial N.A. Methyl mercury: Teratogenic and lethal effects in freg embryos. Text. / N.A. Dial // Teratologi. 1976. - 13. - P. 327-334.

185. Dixon D.G. Effects of available dietary carbohydrate and water temperature on the chronic toxicity of waterborne copper to rainbow trout (Salmo gaird-neri) Text. / D.G. Dixon, J.W. Hilton // Can. J.Fish and Aqua. Sci. 1985. -V.42. - P.1007-1042.

186. Drewa G. Morphological changes of liver cells of Gasterosteus aculeatus L. exposed to pollutants Text. / G. Drewa, M. Chesy, A. Brukwiska, A. Grzanka, R. Sujkowska // Pol. arch, hydrobiol. 1994.-41. - No. 4. - P. 507-515.

187. Elliott J. M. Fecundity and egg density in the redd for sea trout. Text. / J. M. Elliott // J. Fish Biol. 1995. - 47. - N 5. - P. 893-901.

188. Escaffre A.M. Morphology quantitative du foile des alevins de trutte arc-en-ciel (Salmo gairdneri) issus de gros ou de retits oeufs incidence de la date premier repas. Text. / A.M. Escaffre, P. Bergot // Arch. Hydrobiol. 1986. -N3.-C. 331-348.

189. Fowler G.L. Growth and mortality of fingerling Chinook salmon as affected by tgg size. Text. / G.L. Fowler // Ibid. 1972. - Vol. 34. - N 2. - P. 66-70.

190. Freudt Hlaus Y. Рост крыс при субхроническом потреблении меди Text. / Freudt Hlaus Y., Hosny Ibrahim // Токсикология. №10. - M. - 1992. - C.2-18.

191. Galina, Mariy S. Evaluation of the seawater challenge test as an index of marine survival. Text. / Galina, Mariy S. // Aquaculture. 1997. - Vol. 28.-N1/2.- P. 177-183.

192. Gerdeaux S.V. Transport of juvenile trout in sealed containers. Text. / S.V. Gerdeaux, A. Globus, E.L. Bennet // Progr. Fish-Cult. 1990. - Vol. 27.-P. 31-36.

193. Gibson R.J. Water velociti as a factor in the change from aggressive of atlantic salmon smolt (Salmo salar) Text. / R.J. Gibson // Natur. cfii. 110. - N 2. - 1983. -P.143-148.

194. Goncharov B.F. Stress affects the physiological state of sturgeon ovarian follicles and female reproduction potential. Text. / B.F. Goncharov, I. S. Polu-pan // 3 ISS/ 1997.-A3-0.

195. Harris R. S. Mercury compounds reduce photosynthesis by plankton Text. / R. S. Harris, D. V. White, R. B. Macfarline // Science. 1970. - V. 170. - No. 3959.

196. Jezierska Barbara. The effect of copper on common carp (Cyprinus carpio L.) during embnionic and postembryonic development. Text. / Barbara Jezierska, Iwona Slominslca. 1997. - 44. - №1-2. - P.261-272.

197. Josse M. Aspects du developpement de la musculature de la truite arc-en-ciel (Salmo gairdneri Richardson) en fonction de la dinamigue de leau Text. / M. Josse, C. Remacle, E. Dupont // Ann. Soc. roy. Zool. Belg. 1986. - 116. -N27.-P.191-210.

198. Karan V. Functional enzymes activity and gill histology of carp after copper sulfate exposure and recovery Text. / V. Karan, S. Vitorevic, V. Tutundzic, V. Polelcsic // Ecotoxicol. and environ Safety. 1998. - 40. N 1-2. - P. 4955.

199. Kazuko A. Dobucugasu dzaesi, dobucugasuText. / A. Kazuko // Zool. Mag. 1978. -V. 87. - N 2. - P.91-97.

200. Lugowska Katarzyna. Effect of copper and lead on common carp embryos and larvae at two temperatures Text. / Katarzyna Lugowska, Barbara Iezier-ska // Folia Univ. agr. Stetin. Pise. 2000. -26. - C.29-38.

201. Maria S. The difference in brown trout (Salmo trutta) blood composition from acidic and limed sites of two rivers in Western Norway. Text. / S. Maria. // Water, Air and Soil Pollut. 1997. - 96. - N 1-4. - P. 203-210.

202. Mc Geer James C, Text. / Mc Geer James C, Cheril Szebedinszky, Mc Donald, D.Gordon, Wood Chris M. // Auat. Toxicol. 2000. - 50. - №3. -C.245-256.

203. Mc Neil W. Potential for salmon aquaculture in Alaska Text. / Mc Neil W. // Salmon aquaculture and the Alasken fish community. 1976. - P. 25-36.

204. Mis Jersy. Incubation of fertilized common carp eggs in different concentrations of copper Text. / Mis Jersy, Bieniarz, Knzysztof, Epler Piotr, Soko-lowska-Mikolajezyk Miroslawa, Cyb Jaroslaw. // Pol. Arch. Hydrobiol. -1995. 42. - №3. - P.269-276.

205. Mis Jersy. Incubation of fertilized common carp eggs in different concentrations of copper Text. / Bieniarz, Knzysztof, Epler Piotr, Sokolowska-MikolajezykMiroslawa, Cyb Jaroslaw. //Pol. Arch. Hydrobiol. 1996. - 43. -№1. -P.79-86.

206. Metcalfe N.B. Determinants of geographical variation in the age of first fading date, dominance and seaward migration in Atlantic Salmon. Text. / N.B. Metcalfe, I.E. Thorpe // J. Fish Biol. 1990. - Vol. 41. - P. 93-99.

207. Montanes C. Feding ecology of a population of brown trout (Salmo trutta L.) in an aguifer-fed stream of old castile, spain. Text. / C. Montanes, Lo-bon-Cervia J. // Ecol. pol. 1986. - Vol. 34. - N 2. - P. 203-213.

208. Moore A. Observations of recently emerged sea trout, Salmo trutta L., fry in a chalk stream, using a low-light underwater camera. Text. / A. Moore, A. Scott // J. Fiah. Biol. 1988. - Vol. 33. - N 6. - P. 959-960.

209. Nikson Sir. D. Atlante Salmon Trust. Text. / Sir. D. Nikson // Prog. Rept. 1991. - N 12. - P.1049.

210. Norris D. O. Stress responses in Colorado brown trout: Correlations with metal pollution. Text. / D. O. Norris, J. Woodling, E. Ckarlc, S. Donahoe, R. Dores, E. Felt, E. Larson, T. Maldanado American Zool.- 1995. - No. 5. -P.45.

211. Pickering A.D. Crowding causes prolonged leucopenia in salmonid fish, despite interrenal acclimation. Text. / A.D. Pickering, T.G. Pottinger // J. Fish Biol. 1987. - Vol.30. - N 6. - P. 701-712.

212. Рорре Т.Т. Nutritional aspect of Hemorrhagic Syndrome in farmed Atlantic Salmo salar Text. / Т.Т. Poppe, T. Hasten, A. Froslie // Diseases Aquat., org., 1986. - Vol.1. - N 3. - P. 155-162.

213. Poppe T.T. Hjerlelidelser hos laksefisk Text. / T.T. Poppe // Nor. Veterinaer-lidsskr. 1989. - P. 531-536.

214. PottingerT.G. The effects of stress on broodstoclc quality. Text. / T.G. Pot-tinger // Trout News. 1995. - Vol. 20. - P. 121-126.

215. Richards V.L. Reciprocal influences of temperature and copper on survival of fathead minnows, Pimephals promelas Text. / V.L. Richards, T.L. Beitinger. // Bull. Environ. Contam and Toxical. 1995. - №2. - P.230-236.

216. Rinington C. Text. / C. Rinington // Lab. Carlsberg.: Ser. Lhin. 1983. -Vol.22. - P.454-464.

217. Saha N.C. Toxicity of phenol to fish and aquatic ecosystems Text. / N.C. Saha, F. Bhunia, A. Kaviraj // Bull. Environ. Contam. and Toxicol. 1999. -№2.-P. 195-202.

218. Stradmeyer L. Feding behaviour of wild Atlantic salmon, Salmo salar L., pan-in mid- to late summer in a Scottish river Text. / L. Stradmeyer, J.E. Thorpe // Aguacult. and Fish. Manad. 1987. - N 1. - P. 33-49.

219. Sudith W.S. Effects of heavy metals on development of the killifish, Fundulus heteroctilus Text. / W.S. Sudith, W. Peddrick // J. Fish Biol. 1977. - V.l 1. -Nl.-P. 49-54.

220. Suruhi Kazio Т. Различия захвата меди печенью и его связь с индукцией металлотионеина Text. / Kazio Т. Suruhi // Физиология. М. - 1996. -№4. - С.88 - 134.

221. Thome J. Incidence dune contamination chronic par les PCBs sur la morphologies et l'ultrastrukture du foir shez le barbeau fluviatile (Barbus barbus) Text. / J. Thome, C. Adam, L. Goffmet // Can. ethol. 1993. - N. 2. - P. 151-154.

222. Van Vuren J.The effect of copper on the blood chemistry of Clarias garie-pinus Text. / Van Vuren J., Van der Merwe M., Du Preez H. // Exotoxikol. and Environ. Safety. 1994. -N. 2. - P. 187-199.

223. Wilson K.W. Acute toxity of oil dispersanta to marine fish larvaeText. / K.W. Wilson //Mar. Biol. 1977. - V.40. - N 1. - P.65-74.

Информация о работе

Третьяк, Людмила Павловна
кандидата биологических наук
Астрахань, 2005
ВАК 03.00.16

Диссертация

Исследование влияния экзотоксикантов на некоторые ткани и органы черноморского лосося (Salmo trutta L.P.) в раннем онтогенезе - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Исследование влияния экзотоксикантов на некоторые ткани и органы черноморского лосося (Salmo trutta L.P.) в раннем онтогенезе - тема автореферата по биологии, скачайте бесплатно автореферат диссертации

Похожие работы