Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Исследование состава запасных и вторичных метаболитов картофеля в связи с устойчивостью к колорадскому жуку

ВАК РФ 03.00.12, Физиология и биохимия растений

Автореферат диссертации по теме "Исследование состава запасных и вторичных метаболитов картофеля в связи с устойчивостью к колорадскому жуку"

003473814

На правах рукописи

Воронкова Марина Владимировна

ИССЛЕДОВАНИЕ СОСТАВА ЗАПАСНЫХ И ВТОРИЧНЫХ МЕТАБОЛИТОВ КАРТОФЕЛЯ В СВЯЗИ С УСТОЙЧИВОСТЬЮ К КОЛОРАДСКОМУ ЖУКУ сLEPT1NOTARSA DECEMLINEATA SAY)

03.00.12 - Физиология и биохимия растений

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук

Орел-2009

003473814

Работа выполнена в ФГОУ ВПО «Орловский государственный аграрный Университет»

Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор

Павловская Нинэль Ефимовна

Официальные оппоненты: доктор сельскохозяйственных наук,

профессор

Зотиков Владимир Иванович

кандидат биологических наук Голышки н Леонид Викторович

Ведущая организация:

ГНУ Брянская опытная станция по картофелю ГНУ ВНИИКХ им. А.Г.Лорха Россельхозакадемии

Защита состоится «3° »1истоС009 г. в Ш часов на заседании диссертационного совета в ФГОУ ВПО «Орловский государственный аграрный Университет» по адресу: 302019, г. Орел, ул. Генерала Родина, 69.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Орловского государственного аграрного университета.

Автореферат разослан <4- 9 » 2009 г.

,,аси*\

Ученый секретарь доктор с.-х. наук, профессор диссертационного совета

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Картофель в нашей стране по праву называют «вторым хлебом». Такое значение картофеля определяется высокой продуктивностью и уникальными питательными свойствами этой культуры. Ценность картофеля обуславливается многообразием минеральных и органических веществ клубня, соответствующих потребностям человеческого организма.

Однако, картофель подвержен многочисленным болезням и нападению насекомых-вредителей, среди которых наибольшую опасность представляет колорадский жук (Leptinotarsa decemleneata Say), занимающий особое положение среди вредителей сельскохозяйственных культур.

В системе защиты картофеля до последнего времени предпочтение отдавалось истребительным мероприятиям, которые позволяют снизить численность жука до экологически неощутимого уровня. Однако, одним из эффективных методов защиты картофеля от вредителей без применения химических средств или с минимальным их использованием, является создание и возделывание сортов с различными механизмами устойчивости к колорадскому жуку (Антощенко, 2008).

В связи с выше отмеченным, факторы, обуславливающие устойчивость растений картофеля к колорадскому жуку, многообразны: механическая защита листовой пластинки, иммунохимические реакции, накопление в тканях листа защитных белков (ингибиторы протеиназ, растительные токсины) и фитотоксинов небелковой природы (гликоалкалонды и другие аллелохимические вещества), существенно снижающих питательную ценность зеленой массы для насекомых-листоедов (Цветкова, 2001). Тем не менее, главным биохимическим фактором устойчивости растений считают гликоалкалонды, обладающие токсическими свойствами по отношению к насекомым-вредителям. Содержание гликоалкалои-дов в картофеле варьирует в зависимости от сортовых особенностей.

В настоящее время практически не изучен механизм действия эндогенных соединений - вторичных продуктов метаболизма (гликоалкалонды) на формирование устойчивости растений картофеля при повреждении колорадским жуком. Поэтому, изучение содержания гликоалка-лоидов картофеля и их влияния на колорадского жука позволит наметить пути отбора устойчивых сортов, а также создания экологически безопасных препаратов на их основе, что будет способствовать дальнейшему повышению эффективности и рентабельности сельскохозяйственного производства.

Цель и задачи исследований. Цель работы - дать физиолого-биохимическую характеристику различных по устойчивости к колорадскому жуку сортов картофеля и испытать новые средства защиты.

Задачи:

1. Исследовать белковый комплекс клубней картофеля. 2. Провести идентификацию и паспортизацию сортов картофеля

по белковым маркерам.

3. Исследовать состав углеводов в клубнях и листьях в норме и при повреждении колорадским жуком.

4. Определить соотношение крахмала и протеина в клубнях.

5. Исследовать вторичные вещества (гликоалкалоиды) картофеля в клубнях и листьях в норме и при повреждении колорадским жуком.

6. Исследовать участие ингибиторов протеиназ клубней и листьев картофеля в формировании устойчивости к колорадскому жуку.

7. Изучить влияние биологически активных веществ, выделенных из растений, на антиоксидантную систему при формировании устойчивости картофеля к колорадскому жуку.

Научная новизна работы. Расширены сведения о биохимических факторах, обусловливающих формирование устойчивости картофеля новых и районированных сортов к колорадскому жуку. Установлено, что устойчивость сортов картофеля обусловлена содержанием гликоалкалои-дов в листьях и клубнях. Соотношение крахмала и белка в клубнях мало влияет на формирование устойчивости. Устойчивость картофеля к колорадскому жуку можно индуцировать с помощью новых препаратов, созданных на основе фенольных соединений папоротника (Dryopteris carthu-siana) и экзогенных гликоалкалоидов томата {Solatium lycopersicum) и картофеля (Solatium tuberosum). Данные соединения оказали инсектицидное действие на колорадского жука.

Практическая значимость работы. Установленные закономерности действия гликоалкалоидов картофеля на колорадского жука создают основу для использования этих соединений в практике картофелеводства. Полученные данные могут быть использованы селекционерами при создании сортов картофеля, устойчивых к колорадскому жуку, а также в создании препаратов на основе гликоалкалоидов для борьбы с жесткокрылыми.

Апробация работы. Материалы диссертации были доложены: на конференции Орловского регионального отделения общества физиологов растений РФ (Орел, 2006), на Всероссийской научно-практической конференции «Наука в современных условиях: от идеи до внедрения» (Ди-митровоград, 2007), на XI международной научно-производственной конференции «Проблемы сельскохозяйственного производства на совре-

менном этапе и пути их решения» (Белгород, 2007), на региональной научно-практической конференции «Вклад молодых ученых в реализацию приоритетных направлений развития АПК» (Орел, 2007), на региональной научно-практической конференции «Вклад молодых ученых в реализацию приоритетных направлений развития АПК» (Орел, 2008), на I международной Интернет-конференции «Фундаментальные и прикладные исследования в АПК на современном этапе развития химии» (Орел, 2008), на международной конференции молодых ученых «Фундаментальные и прикладные аспекты современной биотехнологии» (Брянск, 2008), на II международной Интернет-конференции «Фундаментальные и прикладные исследования в АПК на современном этапе развития химии» (Орел, 2009).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 13 печатных работ.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 146 листах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследований, результатов собственных исследований и их обсуждения, выводов, предложений для производства, приложения, списка литературы, включающего 135 отечественных, 28 иностранных источников и 11 источников интернет-порталов. Работа иллюстрирована 5 таблицами и 60 рисунками.

Положения, выдвигаемые на защиту.

1. Устойчивость сортов картофеля (Solamtm tuberosum) обусловлена содержанием гликоалкалоидов в листьях и клубнях.

2. Соотношение крахмала и белка в клубнях мало влияет на формирование устойчивости.

3. Устойчивость картофеля к колорадскому жуку можно индуцировать с помощью новых препаратов, созданных на основе фенольных соединений папоротника и экзогенных гликоалкалоидов томатов и картофеля, оказывающих инсектицидное действие на фитофага.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Диссертационная работа выполнена в Орловском региональном центре биотехнологии Орел ГАУ (2004-2007г.г.) в рамках программы РАСХН 04.02.01. по теме: «Разработать новые эффективные методы оценки мирового разнообразия культурных растений по признакам качества, устойчивости к неблагоприятным абиотическим факторам среды, болезням и вредителям».

Для изучения биохимической характеристики сортов картофеля использован материал, полученный на Брянской опытной станции ВНИ-

ИКХ и различающийся устойчивостью к колорадскому жуку: Алый брянский (У), Слава Брянщины (У), Дитта (СУ), Жуковский ранний (СУ), Аноста (ОУ), Невский (НУ) (стандарт), и 2 районированные в Орловской области сорта картофеля Снегирь (СУ) и Удача (СУ). Схема опыта представлена на рис. 1.

I Углеводы Ц.

Сорта картофеля, всего 8

Белки j—^ Электрофо-

-' рС8

Вторичные и антипитательные вещества картофеля

Ингибиторы протеина)

Гликоалкалоиды

Испытания биологической активности компонентов растений

Рис. 1. Схема опыта.

Идентификацию и регистрацию сортов картофеля определяли по стандартной методике ВИР методом SDS-ПААГ электрофореза белков по Х.Р. Мауеру (1971); содержание белка в клубне картофеля - по Лоури; крахмала - объемньм методом по Х.Н. Починку (1965); сахарозы, фруктозы - спектрофотометрически с использованием резорцинового реактива (Туркина, Соколова, 1971); глюкозы - колориметрическим методом с использованием 3,5-дшштросалициловой кислоты (Рихтер и др.,1960); активность ингибиторов протеиназ - казеинолитическим методом М.Л.Какейда (Бенкен, 1982); содержание гликоалкалоидов в клубнях - по Маху и Ледерлею весовым методом (Ермаков, 1987) с использованием кремневольфрамовой кислоты. Содержание гликоалкалоидов в листьях определяли фотометрически с проведением красочной реакции на двойную связь в положении Д 5,6 (Гусева, Пасешниченко и др., 1975); активность каталазы - перманганатометрически; супероксиддисмутазы - с использованием модифицированной методики (Giannopolities and Ries,

1977); активность пероксидазы - по Бояркину, 1998. Выделение биологически активных компонентов папоротника, томатов, картофеля и гречихи проводили по методу Романович, 1999; приготовление рабочей жидкости инсектицида Актара согласно аннотации производителя инсектицида (Сингента Кроп Протекши Аг, Австрия; 3/1; 01-20-53-0497-1, 31.12.2013).

Статистическую обработку результатов проводили методом дисперсионного анализа (Доспехов, 1985) с использованием компьютерных программ «Ехе1» и «В101езг — О».

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Идентификация сортов картофеля по белковым маркерам.

Главным критерием использования запасных белков клубней в селекции и семеноводстве является то, что каждый сорт имеет определенный, присущий только ему белковый спектр, независимый от условий выращивания и хранения. Установлено, что все исследованные сорта по уровню и характеру изменчивости полипептидных спектров не идентичны, что отражает характер их внутрисортового полиморфизма. На основании визуальной оценки гелей были составлены электрофоретические формулы запасных белков картофеля для данных сортов (рис. 2).

65кДа

я

1 2 3 4 5 6 7 8

Рис. 2. Электрофореграммы запасных белков клубней картофеля: 1- Невский (стандарт); 2- Алый брянский; 3- Слава Брянщины; 4- Дитта;

5- Жуковский ранний; 6- Удача; 7- Снегирь; 8- Аноста.

Для количественного выражения и сравнения сортов со стандартом (сорт Невский) проведен компьютерный анализ белковых спектров с помощью программы «Biotest - D». Показателем выраженности полипептидных зон является «светимость», в процентах. Выявлены отличия спектров полипептидного состава в клубнях сортов, различающихся ус-

тойчивостью к колорадскому жуку. У сорта Слава Брянщины (67,7%), Аноста (98,4%), Дитта (89,6%) от сорта Невский, который характеризуется отсутствием устойчивости к данному вредителю (рис.3).

ш -г -- ю ^вв-о-.-чстлвг-.« „Номер позиции

V № N И> ц —

Рис. 3. Отличия спектров полипептидного состава в клубнях сортов картофеля, различающихся устойчивостью к колорадскому жуку.

Содержание общего белка в клубнях картофеля. Исследования 2004-2007г.г. показали, что содержание белка по годам выращивания в зависимости от сортовых особенностей изменяется в пределах от 1,16 до 1,65% (рис. 4).

2 п

Рис. 4. Содержание общего белка в клубнях сортов картофеля

(среднее по годам). *У - устойчивый; СУ - средне устойчивый; ОУ - относительно устойчивый; НУ - неустойчивый.

Сорта с наиболее высоким содержанием белка: Жуковский, Невский (1,60... 1,65%), низким - сорт Слава Брянщины (1,16%), и мало изменяется по годам выращивания. У районированных в Орловской области сортов показатель белка у сортов Снегирь и Удача варьирует от 1,21 до 1,27%.

Таким образом, сорта, характеризующиеся повышенной устойчивостью к колорадскому жуку: Слава Брянщины и Алый брянский накапливают меньше белка в клубнях, чем средне- (Жуковский), относительно (Аноста) и неустойчивый (Невский).

Особенности углеводного комплекса клубней картофеля.

Основную массу клубня картофеля составляют углеводы. Они являются главным продуктом фотосинтеза, служат основным дыхательным субстратом, формой запасания и транспорта углерода, обуславливают устойчивость растений к низким температурам, другим неблагоприятным условиям среды и являются основными производственными показателями. В клубне картофеля углеводы, в основном, представлены крахмалом. За годы исследований показано, что содержание крахмала в клубне варьирует в пределах (11,0... 18,3%), что в среднем составляет 14,3% (рис.5).

%

Рис. 5. Содержание крахмала в клубнях сортов картофеля (среднее по годам).

Количество крахмала оказалось высоким в клубнях среднеустой-чивого сорта Дитта и в клубнях устойчивых сортов: Алый брянский и Слава Брянщины (16,7...18,3%), низким - в клубнях сортов Невский, Жуковский (11,0... 11,3%). Содержание крахмала у сортов картофеля, районированных в Орловской области, варьирует от 13,4% (Удача) до 16,5% (Снегирь).

Кроме крахмала в клубне картофеля, выявлены простые сахара. Хроматографическое исследование углеводного состава клубня картофеля с использованием стандартных метчиков показало наличие в нем глюкозы, фруктозы, сахарозы. Наиболее высокая концентрация Сахаров отмечена в клубнях устойчивых сортов: Алый брянский и Слава Брянщины (0,58...0,78%), наименьшее - у неустойчивого сорта Невский (0,26%) (рис. 6).

сорт

Невский НУ Аноста ОУ Удача СУ Снегирь СУ Жуковский ранний СУ Дитга СУ Слава Брянщины У Алый брянский У

ТТЛ

I I I

ТТЛ

т~т

1-г

0,5

1,5

¡глюкоза [^Фруктоза Црахароза

2,5 %

Рис. 6. Содержание Сахаров в клубнях сортов картофеля, различающихся устойчивостью к колорадскому жуку (среднее по годам).

У районированных сортов более низкие показатели количества определяемых Сахаров в клубнях сорта Удача (0,29%), наиболее высокие у сорта Снегирь (0,47%).

Содержание углеводов может меняться как в процессе онтогенеза, так и под влиянием условий внешней среды. Исследование содержания углеводов в листьях показало, что устойчивые сорта Алый брянский и Слава Брянщины характеризуются повышенным содержанием данных соединений в разных стадиях онтогенеза картофельного растения (1,62...3,00). Ниже концентрация Сахаров в листьях среднеустойчивых (Жуковский, Дитта) и относительно устойчивого сортов (Аноста) (1,13...2,18). Листья неустойчивого сорта Невский накопили минимальное количество углеводов в разных стадиях развития картофельного растения (0,14... 0,26) (табл.1).

Таблица 1

Содержание Сахаров в листьях картофеля в разных стадиях онтогенеза (среднее по годам)

Сорт Сумма Сахаров, (%)

в стадию прорастания надземных органов в стадию цветения в стадию увядания

Слава Брянщины 3,0 2,89 2,31

Алый брянский 2,21 2,04 1,62

Дитта 2,18 2,02 1,74

Жуковский ранний 1,71 1,62 1,29

Аноста 1,43 1,34 1,13

Невский 1,12 1,04 0,84

Снегирь 1,47 1,45 1,19

Удача 1,34 1,32 1,21

НСРоз 0,26 0,24 0,14

Данный факт связан, по-видимому, с тем, что Невский характеризуется как низкоурожайный сорт с мелкими клубнями, в которых накапливается меньшее количество Сахаров в разных стадиях развития картофеля.

Содержание Сахаров в листьях картофеля районированных в Орловской области сортов в периоды исследований варьирует от 1,21% у сорта Удача в стадию увядания, до 1,47% у сорта Снегирь в стадию прорастания надземных побегов.

Исследование динамики содержания общих углеводов в зеленых листьях в норме и при повреждении образцов картофеля колорадским жуком позволило получить экспериментальное подтверждение об участии этих соединений в формировании устойчивости картофеля.

Повреждение листьев картофеля колорадским жуком приводит к некоторому возрастанию содержания простых углеводов, связанное, видимо, с процессами гидролиза полисахаридов, прежде всего крахмала.

В клубнях картофеля, в зависимости от принадлежности к определенным видам и сортам, накапливается различное соотношение азот- и углеродсодержащих запасных веществ. Так, в клубнях картофеля, процент углеводов составляет 14-24%, а белка всего-2%. В процессе созре-

вания пасленовых, отношение углерода к азоту остается почти постоянной величиной, причем у различных сортов отклонение от этой величины может быть значительным (Архипова, 2000; 2003: 2005).

По нашим данным, соотношение С : N в клубнях мало влияет на формирование устойчивости сортов картофеля к колорадскому жуку.

Исследование токсичных веществ картофеля.

Одними из токсичных компонентов белков клубней картофеля являются ингибиторы гидролитических ферментов, не только снижающие питательную ценность клубня картофеля, но и принимающие, как известно, участие в защитных механизмах растений.

Клубни устойчивых сортов картофеля имеют более высокий показатель активности ингибиторов протеиназ, чем стандартный и районированные сорта, что определяет их высокие адаптационные свойства (рис.7).

Рис. 7. Активность ингибиторов протеиназ в клубнях картофеля, (мг/г, среднее по годам).

Активность ингибиторов протеиназ в клубнях в годы исследований варьировала от 0,70 до 2,50 мг/. Трипсин ингибирующая активность (ТИА) у сортов картофеля изменяется в среднем от 0,70 до 2,20 мг/г, химотрипсин ингибирующая активность (ХИА) несколько выше и варьирует в пределах от 0,75 до 2,50 мг/г. Наибольшей активностью ингибиторов выделяются сорта Алый брянский, Слава Брянщины (ТИА-1,47...2,20мг/г; ХИА- 2,11 ...2,50). Активность ингибиторов протеиназ у районированных сортов варьирует не столь значительно (ТИА 1,27-1,34; ХИА 1,86-1,91 мг/г).

Связь между устойчивостью сортов к колорадскому жуку и показателем активности ингибиторов протеиназ обнаруживается при исследовании листьев картофеля (табл.2).

Таблица 2

Показатель активности игибиторов протеиназ в листьях картофеля в норме и при повреждении колорадским жуком, мг/г (среднее по годам)

Сорт Характеристика сорта В норме При повреждении

ХИА ТИА ХИА ТИА

Слава Брянщины У 2,03 2,07 2,04 2,09

Алый брянский У 1,68 1,71 1,72 1,74

Дитта СУ 1,44 1,60 1,47 1,63

Жуковский ранний СУ 1,36 1,42 1,39 1,45

Снегирь СУ 1,29 1,35 1,30 1,37

Удача СУ 1,22 1,31 1,25 1,34

Аноста ОУ 0,73 0,88 0,76 0,92

Невский (стандарт) НУ 0,60 0,77 0,62 0,78

НСР05 0,15 0,6 0,9 0,1

В норме устойчивые сорта Алый брянский и Слава Брянщины характеризуются высокой активностью ингибиторов протеиназ, которая составляет от 1,71 до 2,07 мг/г ТИА и от 1,68 до 2,03 мг/г ХИА. Самым низким показателем активности ингибиторов отличался неустойчивый сорт Невский - 0,77 мг/г ТИА и 0,60 мг/г ХИА.

При повреждении растений колорадским жуком наблюдается незначительное повышение активности ингибиторов в листьях всех сортов картофеля. У устойчивых сортов - Алый брянский и Слава Брянщины при повреждении активность ингибиторов составила от 1,74 до 2,09 мг/г ТИА и от 1,72 до 2,04 мг/г ХИА. Сорт Невский отличался минимальной активностью трипсина и химотрилсина в поврежденных листьях. Активность составила 0,78 мг/т ТИА и 0,62 мг/г ХИА.

Таким образом, уровень активности ингибиторов протеиназ в клубнях и листьях исследованных сортов коррелирует с показателем их

устойчивости к колорадскому жуку. Сорта с высокой устойчивостью характеризуются повышенным уровнем активности ингибиторов. Сорта с низкой устойчивостью обладают невысокими показателями антипротео-литической активности.

Исследование гликоалкалоидов картофеля.

Большой интерес и практическое значение для растениеводства представляет направленность селекции на поиск и отбор видов растений, обладающих устойчивостью к насекомым-вредителям. Согласно многочисленным данным последнего времени, высокая концентрация гликоалкалоидов в растениях, а также отсутствие или блокирование стероидов, недостаток необходимых для развития колорадского жука аминокислот, каратиноидов и витаминов, является главным фактором в устойчивости растений к вредителю (Яшина, 1994; Фасулати, 2006). Поэтому наличие в растениях вторичных метаболитов (гликоалкалоиды) в связи с их токсичным действием на колорадского жука, привлекают внимание селекционеров-картофелеводов. Гликоалкалоиды в небольшом количестве рассматриваются как возможные компоненты клубней картофеля. При более высоком количестве ухудшаются вкусовые качества картофеля. Накопление гликоалкалоидов в листьях картофеля обеспечивает защиту растений от повреждения колорадским жуком (Цветкова, 2004).

Исследования показали, что содержание гликоалкалоидов в мякоти клубней картофеля в среднем составило 0,144% на сухое вещество, что является предельно допустимой концентрацией для человека (рис.8).

Наиболее высокими показателями содержания гликоалкалоидов характеризовались сорта: Алый брянский и Слава Брянщины, клубни которых накопили от 0,174 до 0,194 % на сухое вещество. Клубни относительно устойчивого сорта Аноста и среднеустойчивых сортов: Жуковский и Дитта, накопили от 0,134 до 0,142% на сухое вещество гликоалкалоидов. Наиболее низким показателем содержания изученных гликоалкалоидов в мякоти клубней (0,096% на сухое вещество) был отмечен неустойчивый сорт Невский.

Содержание гликоалкалоидов в клубнях среднеустойчивых, районированных в Орловской области, сортов картофеля составило 0,131% на сухое вещество у сорта Удача и 0,146% на сухое вещество у сорта Снегирь.

Рис. 8. Содержание гликоалкалоидов в клубнях картофеля, (% на сухое вещество, среднее по годам).

Исследование содержания гликоалкалоидов в листьях показало, что накопление данных веществ зависит от сортовых особенностей и варьирует от 162,3 до 312,2 мг/100 г сырой массы.

Максимальная концентрация гликоалкалоидов в листьях была отмечена в стадию прорастания надземных органов растения (169,4...312,5 мг/100 г сырой массы). В стадию цветения наблюдался некоторый спад концентрации данных веществ в листьях (162,3...304,5 мг/100г сырой массы). Стадия увядания характеризовался наименьшим накоплением гликоалкалоидов (153,4...303,2 мг/100г сырой массы) (табл.3).

Наибольшей концентрацией вторичных метаболитов во всех стадиях онтогенеза картофельного растения характеризовались сорта: Алый брянский и Слава Бряншины (300,0...312,5 мг/100г сырой массы). Наименьшее, почти в 2 раза, количество гликоалкалоидов накопили листья сорта Невский (153,4... 169,4 мг/100г сырой массы).

Таблица 3

Содержание гликоалкалоидов в листьях в разных стадиях онтогенеза картофеля (мг/100г сырой массы, среднее по годам)

мг/100 г сырой массы

Сорт в стадию прорастания надземных органов в стадию в стадию

цветения увядания

Слава 312,5 304,5 303,2

Брянщины У

Алый 310,3 300,1 300,0

Брянский У

Дитта СУ 234,2 225,9 221,0

Жуковский ранний СУ 205,9 200,0 198,7

Аноста ОУ 206,6 200,6 200,0

Невский НУ 169,4 162,3 153,4

Снегирь СУ 207,3 198,9 192,1

Удача СУ 204,2 198,1 191,3

НСР05 0,19 0,18 0,2

В листьях сортов, районированных в Орловской области, наибольшее количество гликоалкалоидов накопилось в стадию прорастания картофельного растения -207,3 мг/100 г сырой массы, а наименьшее количество в стадию увядания ботвы картофеля - 191,3 мг/100 г.

Повреждение картофельного растения колорадским жуком приводит к незначительному возрастанию количества гликоалкалоидов в листьях. Сорта Алый брянский и Слава Брянщины отличались повышенной концентрацией данных веществ. Наименьшей концентрацией гликоалкалоидов характеризовались листья сорта Невский.

Районированные сорта не отличались повышенным количеством гликоалкалоидов в листьях при повреждении колорадским жуком.

Обобщив полученные данные, следует полагать, что изменение концентрации гликоалкалоидов в листьях в разных стадиях онтогенеза, является одним из факторов формирования иммунитета картофельного растения к колорадскому жуку. Наиболее устойчивые к колорадскому жуку сорта картофеля: Слава Брянщины и Алый брянский, листья которых накапливают максимальное количество гликоалкалоидов. Другие сорта незначительно отличаются друг от друга, за исключением неустой-

чивого сорта Невский, листья которого по неизученной причине содержат минимальное количество гликоалкалоидов.

Испытание биологической активности новых средств защиты картофеля.

Большое практическое значение представляет создание препаратов, стимулирующих защитные механизмы растений к действию патогенов и насекомых-вредителей. В этом плане актуально исследование выживаемости насекомых-вредителей на картофеле, обработанном биологически активными препаратами.

Установлено, что биологически активные компоненты папоротника (фенольные соединения), гликоалкалоиды томата (томатин) и картофеля (соланин) в концентрации 1(ГМ повышают активность антиокси-дантных ферментов, как индикаторов устойчивости к насекомым-вредителям, обладают инсектицидным действием на жизненную активность личинок Leptinotarsa decemlineata Say (до 60% гибели личинок), тем самым, способствуя увеличению урожая.

На протяжении роста картофеля отмечалось увеличение активности пероксидазы до 4-х суток и супероксиддисмутазы до 3-х суток (рис.9-10).

1 Q контроль (вода) 2 Е1дктара

3 О фенольные соединения 10"2% 4 в соланин КГ2®/«

5 0 томатин 10"*% 6 Обиофлавоноидь! 10"г%

сутки

л

1600

1400 1200 1000 800 600 400 200 О

1 2 3 4 5

Рис. 9. Активность пероксидазы в листьях картофеля, обработанных биологически активными веществами растений.

При этом наиболее высокая активность пероксидазы и супероксиддисмутазы по сравнению с контролем (вода) в листьях картофеля отмечена у растений, обработанных экстрактами папоротника, гликоалкалоидов томата и картофеля, по сравнению с контрольными растениями, обработанными водой.

г

1.5

о

X й

£ £

0.5

) Вкотроть (г. од,! 2 адктлрл 3 □ фено/п-ны**оедненда КГ-1* ^ЩотттИСг'Ч 5 От»1ГПИ _б □ Диоф.ч-тюнгади ИГ=* г

Рис.10. Активность СОД в листьях картофеля, обработанных биологически активными веществами растений.

Каталазная активность, напротив, по мере роста ботвы картофеля существенно снижалась в зеленых листьях. При этом в листьях картофеля уменьшение активности каталазы происходило более резко, скачкообразно. Наиболее плавно и незначительно отмечалось уменьшение ката-лазной активности в листьях картофеля, обработанных экстрактом био-флавоноидов гречихи (рис.11).

Результаты проведенных опытов показали, что препараты, созданные на основе фенольных соединений папоротника, гликоалкалоидов томата и картофеля повышают активность антиоксидантных ферментов, ответственных за развитие иммунитета. Применение препаратов растительного происхождения способствует повышению активности ферментов антиоксидантной системы, что может служить диагностическим признаком устойчивости к насекомым-вредителям. При обработке картофеля разработанными нами препаратами на основе биологически активных компонентов растений индукционный эффект на картофеле был несколько ниже, чем в вариантах с обработкой промышленным пестицидом «Ак-тара».

сутки

1 2 3 4 5

1 Е>Х0НТ['С"1Ь 11-С'Д|,1 2 ШАЖТйрЯ

3 □ фшо льны? t оадияяиКг'11 4 а г. оганпн 1СГ=»» 5 O-rofcirnM IV* t_>< о ¿НОфИР ОНР1ИЫ ЦТ5* t

4000

2000 ^ 1500 1000 500

1 1 2345<> 1

Рис. 12. Влияние обработки инсектицидом «Актара» (1) и водой-контроль (2).

При обработке промышленным инсектицидом «Актара» отмечается 100% гибель колорадских жуков по сравнению с контролем (вода).

Рис. 11. Активность каталазы в листьях картофеля, обработанных биологически активными веществами растений.

Изучение влияния препаратов, создаваемых на основе биологически активных компонентов папоротника (фенольные соединения), глико-алкалоидов томата (томатин) и картофеля (соланин) в концентрации 10"' М, на устойчивость к взрослым особям Leptinotarsa clecemlineata Say показало их положительное воздействие (рис.12-14).

Рис. 13. Влияние обработки экстрактом папоротника (фенольные соединения) (3) и гликоалкалоидами томата (томатин) (4).

Под влиянием биологически активного вещества папоротника и гликоалкалоидов томата (томатин) отмечается 80% гибели взрослых особей.

Рис. 14. Влияние обработки гликоалкалоидами картофеля (соланин) (5) и биофлавоноидами гречихи (6).

Обработка взрослых особей Leptinotarsa decemlineata Say гликоал-каолидами картофеля (соланин) привела к 80% гибели, а обработка биофлавоноидами гречихи к 10% гибели жуков.

Анализируя инсектицидное действие биологически активных веществ, можно сказать, что эффективность выше у фенольных соединений папоротника, гликоалкалоидов томата и картофеля — томатина и соланина. анные биологически активные вещества, являясь экологически безопасными, могут служить основой для создания средств защиты картофеля от вредителя.

ВЫВОДЫ

1. Проведена идентификация 8 сортов картофеля и установлен их полиморфизм по белковым маркерам.

2. Устойчивые сорта картофеля: Слава Брянщины и Алый брянский накапливают меньшее количество белка, но характеризуются повышенным содержанием крахмала в клубнях, по сравнению с неустойчивым сортом Невский.

3. В клубнях устойчивых сортов во все годы исследований накапливается меньше простых Сахаров, чем у средне- и относительно устойчивых сортов. В листьях наблюдается обратная закономерность. Устойчивые сорта характеризуются наибольшим содержанием углеводов. Исключением является сорт Невский с меньшим содержанием Сахаров в клубнях и листьях.

4. Соотношение белка и углеводов в клубнях не оказывает существенного влияния на формирование устойчивости сортов картофеля к колорадскому жуку.

5. Уровень активности ингибиторов протеиназ в клубнях и листьях исследованных сортов прямо коррелирует с показателем их устойчивости к колорадскому жуку. Сорта с высокой устойчивостью характеризуются повышенным уровнем активности ингибиторов. Сорта с низкой устойчивостью обладают невысокими показателями антипротеолитической активности.

6. Повреждение растений картофеля колорадским жуком приводит к незначительному повышению концентрации простых Сахаров и возрастанию концентрации гликоалкалоидов в листьях, и практически не сказывается на увеличении активности ТИА и ХИА.

7. Установлено, что биологически активные компоненты папоротника, томата и картофеля повышают активность антиоксидантных ферментов и оказывают инсектицидное действие на взрослых особей Leptino-tarsa decemlineata Say, снижая поражаемость картофеля.

ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПРОИЗВОДСТВУ

1. Рекомендуется проводить идентификацию сортов картофеля по белковым маркерам методом электрофореза для определения сортовой чистоты, семенного контроля, установления авторства и решения арбитражных споров.

2. Сорта картофеля: Слава Брянщины и Алый брянский рекомендуется использовать в качестве исходного материала для селекции картофеля, устойчивого к колорадскому жуку.

3. Выделенные биологически активные вещества папоротника (фенольные соединения), гликоалкалоиды томата (томатин) и картофеля (соланин) могут быть использованы как средства защиты картофеля от колорадского жука.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ

1. Воронкова М.В. Общее содержание алкалоидов, крахмала, углеводов в клубнях и зеленых листьях картофеля / М.В. Воронкова, Н.Е.Павловская //Регуляция продукционного процесса сельскохозяйственных растений: матер, конф. Орловского регионального отделения общества физиологов растений РФ. - Орел, 2006 - Ч. 1. -С. 110-112.

2. Воронкова М.В. К вопросу об устойчивости картофеля Solanum tuberosum к колорадскому жуку Leptinotarsa decemlineata / Н.Е. Павловская, М.В. Воронкова //Наука в современных условиях: от идеи до внедрения: материалы Всероссийской научно-практической конференции (13 марта, 2007г., Димитровоград). - Димитровоград., 2007. -С.265-267.

3. Воронкова М.В. Содержание белка и крахмала в клубнях картофеля //Вклад молодых ученых в реализацию приоритетных направлений развития АПК: по материалам региональной науч.-практ. конф. (1923 марта, 2007г., Орел).- Орел, 2007.- С. 18-20.

4. Воронкова М.В. Основные питательные вещества картофеля разных сортов /М.В. Воронкова, Н.Е. Павловская //Проблемы сельскохозяйственного производства на современном этапе и пути их решения: материалы XI международной науч.-произв. конф. (14-18 мая, 2007г., Белгород).- Белгород, 2007. -С.16.

5. Воронкова М.В. К вопросу о биохимических исследованиях сортов картофеля, различающихся устойчивостью к колорадскому /М.В. Воронкова, Н.Е. Павловская, Н.И. Ботуз //Фундаментальные и прикладные исследования в АПК на современном этапе развития химии: материалы I международной Интернет-конференции (10 марта, 2008г.).- Орел, 2008.-С.52-59.

6. Воронкова М.В. Жизненная сила картофеля // Фундаментальные и прикладные исследования в АПК на современном этапе развития химии: материалы I международной Интернет-конференции (10 марта, 2008г.).-Орел, 2008.-С.8-10.

7. Воронкова М.В. Роль алкалоидов в устойчивости картофеля Solarium tuberosum L к колорадскому жуку Leptinotarsa decemlineata/ М.В. Воронкова, Н.Е. Павловская // Фундаментальные и прикладные исследования в АПК на современном этапе развития химии: материалы I международной Интернет-конференции (10 марта, 2008г.).- Орел, 2008.-С.62-65.

8. Воронкова М.В. Некоторые аспекты устойчивости картофеля Solanum tuberosum L к колорадскому жуку Leptinotarsa decemlineata /М.В. Воронкова, Н.Е. Павловская // Вклад молодых ученых в реализацию приоритетных направлений развития АПК: по материалам региональной науч.-практ. конф. (19-23 марта, 2008г., Орел).- Орел, 2008,-С.19-21.

9. Воронкова М.В., Павловская Н.Е. Диагностика устойчивости сортов картофеля к колорадскому жуку /М.В. Воронкова, Н.Е. Павловская //Защита и карантин растений. - 2008. - №6. -С.39-40.

10. Воронкова М.В. Содержание сырого протеина в клубнях картофеля //Молодой ученый,- 2008. -№1. -С.67-68.

11. Воронкова М.В. Содержание гликоалкалоидов в листьях картофеля в норме и при повреждении колорадским жуком. / М.В. Воронкова, Н.Е. Павловская // Фундаментальные и прикладные аспекты современной биотехнологии: материалы международной конференции молодых ученых,- Брянск, 2008.-С. 110-114.

12. Воронкова М.В. Идентификация и регистрация сортов картофеля по белковым маркерам/ М.В. Воронкова, Н.Е. Павловская И Фундаментальные и прикладные исследования в АПК на современном этапе развития химии: материалы II международной Интернет-конференции (29 апреля, 2009г.).- Орел, 2009.-С.11-14.

13. Воронкова М.В. Активность ингибиторов иротеиназ в листьях картофеля в норме и при повреждении колорадским жуком/ М.В. Воронкова, Н.Е. Павловская // Фундаментальные и прикладные исследования в АПК на современном этапе развития химии: материалы II международной Интернет-конференции (29 апреля, 2009г.).- Орел, 2009.-С.14-16.

Журнал «Защита и карантин растений» является изданием, рецензируемым ВАК.

Выражаю искреннюю благодарность доктору с.-х.н., директору ГНУ Брянской опытной станции по картофелю ГНУ ВНИИКХ им. А.Г.Лорха Россельхозакадемии А.А. Молявко и ведущему сотруднику, К.С.-Х.Н., Ф.Е. Антощенко за предоставленные для исследований сорта картофеля и постоянную помощь на всех этапах выполнения работы.

Подписано в печать 28.05.2009 г. Формат 60x90/16. Бумага офсетная. Гарнитура Тайме. Усл. печ. л. 1,3. Заказ 75. Тираж 100 экз.

Отпечатано в издательстве Орел ГА У, 2009, Орел, Бульвар Победы, 19

Содержание диссертации, кандидата сельскохозяйственных наук, Воронкова, Марина Владимировна

Введение

Глава 1 .Обзор литературы

1.1. Происхождение культурных сортов картофеля, их генетические и экологические особенности

1.2. Питательная ценность и народнохозяйственное значение картофеля

1.3. Заболевания картофеля и поражение фитофагами

1.4. Защитные вещества картофеля

1.5. Селекция картофеля на устойчивость

Глава 2. Объект и методы исследований

2.1. Материал исследований

2.2. Место и условия выращивания

2.3. Биохимические методы исследований 44 Результаты исследований

Глава 3. Исследование белкового комплекса клубней сортов картофеля, различающихся устойчивостью к колорадскому жуку

3.1. Идентификация и регистрация сортов картофеля по белковым маркерам

3.2. Содержание общего белка в клубнях картофеля

Глава 4. Углеводный комплекс клубней картофеля

4.1. Содержание крахмала в клубнях картофеля

4.2. Содержание низкомолекулярных Сахаров в клубнях картофеля

4.3. Содержание низкомолекулярных Сахаров в листьях в разных стадиях развития картофельного растения

4.4.Содержание низкомолекулярных Сахаров в листьях в норме и при повреждении колорадским жуком

4.5. Соотношение углеводов и белка в клубне картофеля

Глава 5. Токсичные вещества картофеля

5.1. Ингибиторы протеиназ в клубнях картофеля

5.2. Активность ингибиторов протеиназ в листьях картофеля в норме и при повреждении колорадским жуком

Глава 6. Вторичные вещества картофеля

6.1. Гликоалкалоиды картофеля

6.2. Содержание гликоалкалоидов в мякоти клубней картофеля

6.3. Содержание гликоалкалоидов в листьях в разных стадиях развития картофельного растения

6.4. Содержание гликоалкалоидов в листьях в норме и при повреждении колорадским жуком

Глава 7. Антиоксидантная система, как тест-диагностика устойчивости растений к насекомым-вредителям

7.1. Испытание биологической активности новых средств защиты картофеля

7.2. Действие биологически активных веществ растений на жизненную активность взрослых особей Leptinotarsa decemlineata Say

Выводы

Предложения производству

Экономическая эффективность

Введение Диссертация по биологии, на тему "Исследование состава запасных и вторичных метаболитов картофеля в связи с устойчивостью к колорадскому жуку"

Картофель в нашей стране по праву называют «вторым хлебом». Такое значение картофеля определяется высокой продуктивностью и уникальными питательными свойствами этой культуры. Ценность картофеля обуславливается многообразием минеральных и органических веществ клубня, соответ-свующих потребностям человеческого организма. ч

К сожалению, картофель подвержен многочисленным болезням и нападению насекомых-вредителей, среди которых наибольшую опасность представляет колорадский жук {Leptinotarsa decemleneata Say), занимающий особое положение среди вредителей сельскохозяйственных культур. В настоящее время колорадский жук заселяет в России около 205 млн. га посадок картофеля (Мордкович, 2000), что при общей площади картофельного поля России около 3,2 млн. га составляет почти 80%.

Опасным этого вредителя делает экологическая пластичность, которая обусловлена эколого-физиологическим полиморфизмом на основе генетической гетерогенности любой природной популяции (Фасулати, 1986; Вилкова и др., 2002).

В системе защиты картофеля до последнего времени предпочтение отдавалось истребительным мероприятиям, которые позволяют снизить численность жука до экологически неощутимого уровня.

Одним из эффективных методов защиты картофеля от вредителей без применения химических средств или с минимальным их использованием, является создание и возделывание сортов с различными механизмами устойчивости к колорадскому жуку (Антощенко, 2008). По мнению многих авторов, это позволит в 2-3 раза сократить нормы расхода препаратов и уменьшить кратность обработок, тем самым снизить опасность загрязнения окружающей среды и готовой продукции инсектицидами. При этом в каждом регионе нужно подбирать районированные сорта, обладающие в конкретных почвен-но-климатических условиях максимальной потенциальной продуктивностью.

Факторы, обуславливающие устойчивость растений картофеля к колорадскому жуку, многообразны: механическая защита листовой пластинки, иммунохимические реакции, накопление в тканях листа защитных белков (ингибиторы протеиназ, растительные токсины) и фитотоксинов небелковой природы (гликоалкалоиды. и другие аллелохимические вещества), существенно снижающих питательную ценность зеленой массы для насекомых-листоедов (Цветкова, 2001). Однако главным биохимическим фактором- устойчивости растений считают гликоалкалоиды, обладающие токсическими свойствами по отношению-к насекомым-вредителям. Содержание гликоалка-лоидов в картофеле варьирует в зависимости от сортовых особенностей.

В настоящее время практически не изучен механизм действия эндогенных соединений - вторичных продуктов ^метаболизма (гликоалкалоиды) на формирование устойчивости растений картофеля при повреждении колорадским жуком. Поэтому, изучение содержания гликоалкалоидов картофеля и их влияния на колорадского жука позволит наметить пути селекционирования устойчивых сортов, а также создание экологически безопасного препарата на их основе, что будет способствовать дальнейшему повышению рентабельности сельскохозяйственного производства.

Цель исследований: Дать физиолого-биохимическую характеристику различных по устойчивости к колорадскому жуку сортов картофеля и испытать новые средства защиты.

Для выполнения поставленной цели предусматривалось решить следующие задачи:

1. Исследовать белковый комплекс клубней картофеля.

2. Провести идентификацию и паспортизацию сортов картофеля по белковым маркерам.

3. Исследовать состав* углеводов в клубнях и листьях в норме и при повреждении колорадским жуком.

4. Определить соотношение крахмала и протеина в клубнях.

5. Исследовать токсичные вещества (гликоалкалоиды) картофеля в клубнях и листьях в норме и при повреждении колорадским жуком.

6. Исследовать участие ингибиторов протеиназ клубней и листьев картофеля в формировании устойчивости к колорадскому жуку.

7. Изучить влияние биологически активных веществ, выделенных из растений, на формирование устойчивости картофеля к колорадскому жуку.

Научная новизна работы. Впервые проведены сравнительные биохимические исследования факторов, способствующих формированию устойчивости картофеля к колорадскому жуку. Установлено влияние биологически активных компонентов папоротника, гречихи, томата и картофеля на выживаемость колорадского жука.

Практическая значимость работы. Установленные закономерности действия гликоалкалоидов картофеля на колорадского жука создают основу для использования этих соединений в практике картофелеводства. Полученные данные могут быть использованы селекционерами для создания сортов картофеля, устойчивых к колорадскому жуку, а также в создании препаратов на основе гликоалкалоидов для борьбы с жесткокрылыми.

Заключение Диссертация по теме "Физиология и биохимия растений", Воронкова, Марина Владимировна

102 Выводы

1. Проведена идентификация 8 сортов картофеля и установлен их полиморфизм по белковым маркерам.

2. Устойчивые сорта картофеля: Слава Брянщины и Алый брянский накапливают меньшее количество белка, но характеризуются повышенным содержанием крахмала в клубнях, по сравнению с неустойчивым сортом Невский.

3. В клубнях устойчивых сортов во все годы исследований накапливается меньше простых Сахаров, чем у средне- и относительно устойчивых сортов. В листьях наблюдается обратная закономерность. Устойчивые сорта характеризуются наибольшим содержанием углеводов. Исключением является сорт Невский с меньшим содержанием Сахаров в клубнях и листьях.

4. Соотношение белка и углеводов в клубнях не оказывает существенного влияния на формирование устойчивости сортов картофеля к колорадскому жуку.

5. Уровень активности ингибиторов протеиназ в клубнях и листьях исследованных сортов прямо коррелирует с показателем их устойчивости к колорадскому жуку. Сорта с высокой устойчивостью характеризуются повышенным уровнем активности ингибиторов. Сорта с низкой устойчивостью обладают невысокими показателями антипротеолитической активности.

6. Повреждение растений картофеля колорадским жуком приводит к незначительному повышению концентрации простых Сахаров и возрастанию концентрации гликоалкалоидов в листьях, и практически не сказывается на увеличении активности ТИА и ХИА.

7. Установлено, что биологически активные компоненты папоротника, томата и картофеля повышают активность антиоксидантных ферментов и оказывают инсектицидное действие на взрослых особей Leptinotarsa decem-lineata Say, снижая поражаемость картофеля.

Предложения к производству

1. Рекомендуется проводить идентификацию сортов картофеля по белковым маркерам методом электрофореза для определения сортовой чистоты, семенного контроля, установления авторства и решения арбитражных споров.

2. Сорта картофеля: Слава Брянщины и Алый брянский рекомендуется использовать в качестве исходного материала для селекции картофеля, устойчивого к колорадскому жуку.

3. Выделенные биологически активные вещества папоротника (фенольные соединения), гликоалкалоиды томата (томатин) и картофеля (соланин) могут быть использованы как средства защиты картофеля от колорадского жука.

Экономическая эффективность использования комплексных фитопрепаратов на основе гликоалкалоидов картофеля

Загрязнения культурных растений, применяемых в сельском хозяйстве, веществами различной природы напрямую зависит от состояния окружающей среды. Неконтролируемое применение средств защиты растений наносит ощутимый, реальный вред здоровью человека и грозит перерасти в экологическую катастрофу. Споры специалистов о снижении применения или же полном запрете химических пестицидов, сводятся к мысли о замене их на безопасные экологически чистые фитопрепараты.

Предварительный экономический анализ показал, что стоимость средства защиты на основе гликоалкалоидов картофеля в концентрации не превышает 70,05 рублей за грамм. Например, для однократной обработки 1 га картофеля необходимо 300 литров раствора фитопрепарата с концентрацией 10"2%. В данном объеме содержится 0,03г действующего вещества, его стоимость составляет 7,98 рублей из расчета рыночной стоимости 1 т картофеля и соответствующего выхода биологически активных компонентов (прил. 17-18). Это значительно ниже стоимости используемых в сельском хозяйстве химических пестицидов (затраты на которые составляют 150-300 рублей).

Для максимального повышения эффективности применения биопрепарата и увеличения устойчивости к биоте необходимо проводить предпосевную обработку клубней, а также 2-х кратное опрыскивание растений в течение вегетации.

Прибыль от внедрения подобных разработок в сельскохозяйственное производство может составить 210,15 рубля рублей на 100 гектар картофеля.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата сельскохозяйственных наук, Воронкова, Марина Владимировна, Орел

1. Андреева, Т.Ф. Фотосинтез и азотный обмен листьев / Т.Ф.Андреева.-М.: Наука.-1969.-163с.

2. Антощенко, Ф.Е. Оценка и подбор исходных форм при селекции сортов картофеля универсального назначения в комплексной устойчивости к болезням и вредителям: дис. . канд. с.-х. наук / Ф.Е. Антощенко.-Брянск, 2006.- 133 с.

3. Антощенко, Ф.Е. Сорта картофеля, созданные на Брянщине / Ф.Е. Антощенко, JI.A. Еренкова, A.A. Молявко: каталог. Брянск, 2008.-14с.

4. Архипова, Н.П. Белково-углеводный комплекс картофеля. М.: Наука и жизнь, 2005.- С. 13-14.

5. Бенкен, И.И. Антипитательные вещества белковой природы в семенах сои / И.И.Бенкен, Т.Б.Томилина // Бюллетень ВИР.-1982.- Вып. 121.-С.65-70.

6. Биологическая защита растений / М.В. Штерншис и др.-М.: Колос, 2005.- 264 с.

7. Бойко, Н.Г. Селекция сортов картофеля, устойчивых к колорадскому жуку/ Н.Г. Бойко // VII Всесоюзное совещание по иммунитету с.-х. растений к болезням и вредителям: тез. докл. Рига, 1986.- С.5-8.

8. Будин, К.З. Акклиматизация колорадского жука. / К.З. Будин // Картофель и овощи. 2002. -№8. - С.29-30.

9. Будин, К.З. Генетический потенциал селекции Tuberararium (Дип.) Buk рода Solanum L и его значение для селекции / Будин К.З.// Сборник науч. тр. по прикл. ботанике, генетике селекции. Вып. 100.- Л.: ВИР, 1987. -С. 104-113.

10. Будин, К.З. Дикие виды картофеля как доноры устойчивости к патогенам / К.З. Будин, Т.И. Соболева// Науч. тр. / ВИР.-1987.- Т.115.- С. 7-18.

11. Будин, К.З. Каталог мировой коллекции ВИР / К.З. Будин, Л.Е. Горба-тенко, Л.М. Турулева. Л.: Типография ВИР, 1989.- 88 с.

12. Букасов, С.М. Дикие виды картофеля / С.М.Букасов//Культурная флора СССР. Картофель. Л.: Колос, 1971.- T.IX. - С.5-40.

13. Букасов, С.М. Морфология картофеля / С.М.Букасов // Культурная флора России, 1997. Т.6.- С.6-42.

14. Букасов, С.М. Основы селекции картофеля / С.М. Букасов, А.Я.Камераз. М.: ОГИЗ, 1954.- 525с.

15. Букасов, С.М. Принципы систематики картофеля / С.М.Букасов // Тр. по пр. ботанике, генетике, селекции.- 1997.- Т. 62., вып.З.- С.3-35.

16. Букасов, С.М. Селекция и семеноводство картофеля / С.М.Букасов Л., 1979.-С.259-352.

17. Бульба: энциклопедический словарь по выращиванию, хранению, переработке и использованию картофеля.- Минск, 2003.- 850с.

18. Бульба: энциклопедический словарь по выращиванию, хранению, переработке и использованию картофеля.- Минск, 2000.- 830с.

19. Бульба: энциклопедический словарь по выращиванию, хранению, переработке и использованию картофеля.- Минск, 1999.- 830с.

20. Вавилов, Н.И. Проблемы иммунитета культурных растений / Н.И. Вавилов. // Избранные труды. -М., Л.: Наука, 1964,- Т. 4.-516с.

21. Валуева, Т.А. Белки ингибиторы протеолитических ферментов у растений / Т.А.Валуева, В.В.Мосолов // Прикладная биохимия и микробиология.- 1995.-Т.31.- №6.-С.579-589.vf I J

22. Валуева ,Т.А. Растительные белковые ингибиторы протеолитических ферментов/ Т.А.Валуева, В.В.Мосолов // ВИНИТИ.-М.:Наука, 2005.-С.1-107.

23. Виды рода Solanum L. секции Petota Dumort как источники обогащения генофонда Электронный ресурс. — Режим доступа: http: // www. bank-rabot.com.2008.

24. Вилкова, H.A. Биоэкологический фактор экспансии колорадского жука / Н.А.Вилкова, С.Р.Фасулати, Н.В.Кандыбин // Защита и карантин расте-ний.-2001. №1.- с. 19-23.

25. Вилкова, H.A. Изменчивость и адаптивная микроэволюция насекомых-фитофагов в агробиоценозах в связи с иммуногенетическими свойствами кормовых растений / Н.А.Вилкова, С.Р.Фасулати // Труды РЭО. -Вып.27.- Спб.: Наука, 2001.- С. 107-128.

26. Вилкова, H.A. Иммунологическая защита растений от вредителей / H.A. Вилкова, И.Д. Шапиро // Научные основы защиты растений: сб.- М.: 1984.-С.116-138.

27. Вилкова, H.A. Методические рекомендации по оценке устойчивости картофеля к колорадскому жуку / H.A. Вилкова, И.Д. Шапиро, М.М. Шустер.-М.: ВАСХНИИЛ, ВИЗР, 1987.-31 с.

28. Вилкова, H.A. Научно обоснованные параметры конструирования устойчивых к вредителям сортов сельскохозяйственных культур / Н.И. Вилкова, Л.И. Нефедова, Б.П. Асякин.- СПб,: РАСХН, ВИЗР, 2004.- 76с.

29. Вилкова, H.A. Устойчивые сорта и средства защиты растений как индукторы микроэволюционных процессов у насекомых-фитофагов / H.A. Вилкова, Г.И. Сухорученко, С.Р. Фасулати // Информ. бюлл. ВПРС МОББ.-2002.-Вып. 32.-С.192-204.

30. Власенко, М.Ю. Ф1зюлопя та 6íoxímíh картошн / М.Ю.Власенко, В.М. Мицко, A.A. Кучко. Киев: Дов1ра, 1998.-335с.

31. Воловик, A.C. Защита картофеля от болезней, вредителей и сорняков./ А.С.Воловик, В.М.Глез, А.И.Замотаев. М.: Агропрмиздат.-1989.-205 с.

32. Воловик, A.C. Система защиты картофеля от болезней и вредителей/ A.C. Воловик. В.М. Глез // Картофель России. В 3 т. / под. ред. A.B. Ко-шунова. М.: ООО Редакция журнала «Достижения науки и техники».-2003.-Т.2.- С. 10-24.

33. Глез, В.М. Колорадский жук / В.М. Глез, В.И. Черкашин //Защита и карантин растений.-2002.-№5.- С.67(3) 90(26).

34. Гончарик, М.Н. Влияние экологических условий на физиологию культурных растений / М.Н.Гончарик.- Минск.: Изд Ан БССР, 1962.- С.25-32.

35. Гончарик, М.Н. Световой режим картофеля в широкорядных посадках / М.Н.Гончарик, С.С.Кручинина // С.-х. биология. 1979.- T. XI, №1.-С.34-37.

36. Горленко, C.B. Рак картофеля: сборник / С.В.Горленко, H.A. Дорожкин.-Киев: Ан УССР, 1957.- 50с.

37. Гудвин, Т. Введение в биохимию растений / Т.Гудвин, Э.Мерсер. М.: Мир, 2001.- Т.З.- С.203-205.

38. Гуляев, Г.В. Справочник агронома нечерноземной зоны / Г.В.Гуляев. -М.: Агропромиздат, 1990,- 220 с.

39. Гусев, К.В. Хищные клопы этномофаги колорадского жука / К.В. Гусев, А.Г. Коваль // Защита растений.-1983.- №5.- С. 64-65.

40. Гусева, Л.Г. Методы современной биохимии: учебник / Л.Г. Гусева, В.А. Пасешниченко,- М.: Наука, 1975.- С. 100-106.

41. Дарвин, Ч. Происхождение видов / Ч. Дарвин. М.-Л.: Огиз: Сель-хозгиз, 1937.-112 с.

42. Дорожкин, Б.Н. Селекция картофеля в Западной Сибири / Б.Н. Дорож-кин: монография.- Омск: РАСХН. Сибирское отделение, СибНИИСХ-2004.- 272с.

43. Доспехов, Б.Ф. Методика полевого опыта / Б.Ф.Доспехов. М.: Агро-промиздат, 1995.-352с.

44. Ермаков, А.И. Методы биохимического исследования растений / А.И.Ермаков и др. 3-е изд., перераб. и доп.- Л.: Агропромиздат, 1987.-430с.

45. Ефремов, С.И. Агротехника картофеля // Ученые записи ОГПИ.- Т. 10. Серия естествознания, 1979. С. 97-99.

46. Загорулько, О. Бкшм1я трансгеншн картопл1 в умовах Украш1 О.Загорулько: дипломная работа.- Суми, 2001.-.85с.

47. Зайко, М.П. Из истории селекции картофеля / М.П. Зайко// Уральский вестник.-№5.-С.12-14.

48. Замотаев, А.И. Интенсивная технология производства картофеля / А.И.Замотаев//М.: Росагропромиздат, 1993.- С.58-62.

49. Золотов, В.И. Урожайность, качество, семенная продуктивность сортов картофеля различных групп спелости в зависимости от фонов минерального питания в условиях Среднего Поволжья: дисс. на соиск. уч. ст. канд.с.х. наук/В.И. Золотов.- Пенза, 2003.- 123 с.

50. Иванцов, С.М. Система защиты картофеля от вредителей / С.М.Иванцов // Картофель и овощи.-2006.-№9.- с. 29-31.

51. Иммунитет растений: учебник/ под. ред. В.А. Шкаликова.- М.: Колос, 2005.-189с.

52. Калинина, К.В. Биологическое обоснование защиты картофеля от колорадского жука Leptinotarsa decemlineata Say в условиях южной части северо-западного региона России: дис. . канд. биол. наук / К.В.Калинина.- Псков, 2007.- 125с.

53. Камераз, А.Я. Современное состояние и перспективы селекции картофеля на устойчивость к важнейшим болезням и вредителям / А.Я. Камераз.-М.: Колос, 1975.- с.76-85.

54. Картофель / под. ред. B.C. Виноградова.- М.: Книга. 2002.- С.35.

55. Картофель России: Селекция, семеноводство, сертификация /под ред. чл. корр. РАСХН А.В.Коршунова.- М.: ООО «Редакция журнала «Достижения науки и техники».- 2003.- T.I. 410с.

56. Кваснюк, Н.Я. Интегрированная система защиты картофеля от фитофто-роза и других болезней / Н.Я.Кваснюк.- М.: Информагротск, 1999.-52с.

57. Кефели, В.И. Морфогенез, фотосинтез и рост как основа продуктивности растений / В.И.Кефели,- Пущино: ОНТИ ПНЦ АН СССР, 1991 .-187с.

58. Кравец, А.Ф. Участие фенолов и пероксидаз в проявлении защитных реакций к возбудителю бурой ржавчины: автореф. дис. канд. биол. наук /

59. A.Ф.Кравец. Киев: КГУ, 1999.- 20с.

60. Ковалёв, В.М. Методологические принципы и способы применения рос-торегулирующих препаратов нового поколения в растениеводстве /

61. B.М.Ковалёв, М.М.Янина // Аграрная Россия.- 1999.-№1(2). С.9-12.

62. Конарев, В.Г. Молекулярно-биологические аспекты прикладной ботаники, генетики и селекции / В.Г.Конарев, И.П.Гаврилюк, Н.К.Губарева; под ред. В.Г. Конарева.-М.,1993.- Т.1.- 447с.

63. Конарев, В.Г. Молекулярно-биологические исследования генофонда культурных растений в ВИРе (1967-1997) / В.Г.Конарев.- СПб.: ВИР, 1998-97с.

64. Краткая медицинская энциклопедия / под. ред. В.В. Петровского.- М.: Энциклопедия, 2004.- Т 1.-С.-65-67.

65. Курилов, В.И. Исследования по защите картофеля от колорадского жука / В.И.Курилов // Защита растений.- 1984.-№7.- С.30-31.

66. JIopx, А.Г. О картофеле / А.Г.Лорх. М.: Сельхозизд, I960.- С.27-39.

67. Машьянова, Г.К. Все о картофеле / Г.К.Машьянова, Г.П.Шушукова, А.Е.Аферина. Новосибирск: Новосибирское книжное издательство, 1991.-С.29-35.

68. Молявко, A.A. Возделывание картофеля в фермерских и крестьянских хозяйствах / А.А.Молявко.- Брянск, 1999.-52с.

69. Молявко, A.A. Для борьбы с колорадским жуком / A.A. Молявко, Ф.Е. Антощенко // Защита и карантин растений.-2004.- №12.- С.26-27.

70. Молявко, A.A. Оценка сортов на устойчивость к колорадскому жуку / А.А.Молявко A.A., Ф.Е.Антощенко // Картофель и овощи.- 2005. -№4.1. C. 26-28.

71. Мордкович, Я.Б. Обсуждаются проблемы борьбы с колорадским жуком/ Я.Б. Мордкович // Защита и карантин растений.- 2000.-№7.- С.45-46.

72. Мосолов, B.B. Белковые ингибиторы как регуляторы процессов протео-лиза / В.В.Мосолов // XXXVI Баховские чтения.- М.,1983.- С.27-29.

73. Моськин, K.J1. Развитие селекции картофеля / К.Л.Моськин. Витебск, 2002.- 110с.

74. Ничипорович, A.A. Продукты фотосинтеза и физиологическая роль фотосинтетического аппарата растений / А.А.Ничипорович // Труды Института физиологии растений им. К.А.Тимирязева АН СССР. 1953. -№8, вып.1.-С.З.

75. Оверчук, В.И. Гликоалкалоиды картофеля / В.И.Оверчук, В.Н.Мицко. -М.: ВНИИТЭИСХ, 1975.- 40с.

76. Озерецковская, О.Л. Индуцирование устойчивости растений / О.Л. Озе-рецковская // Аграрная Россия.-1999.-№ 1(2). С.4-9.

77. Озерецковская, О.Л. Как растения защищаются от болезней / О.Л.Озерецковская, Л.В.Метлицкий. М.: Наука, 1985.-188с.

78. Павлова, H.A. Экологические особенности клубненосных видов рода Solanum L, перспективных для селекции: дис. канд. биол. наук. / Н.А.Павлова.- М, 2005.- 150с.

79. Павловская, Н.Е. Введение в сельскохозяйственную биотехнологию: учеб. пособие / Н.Е.Павловская, Н.В. Парахин, Л.В. Голышкин, Л.В. Го-лышкина Орел: ОГСХА, 1998.- 204с.

80. Пайтнер, Р. Устойчивость растений к насекомым./ Р. Пайтнер; пер. с англ. Ю.И.Лашкевича, П.М.Рафеса, В.В.Хвостовой; под ред. E.H. Павловского.- М.: Изд-во иностр. лит-ры, 1953.- С.359-367.

81. Пасешниченко, В.А. Регуляция терпеноидного биосинтеза в растениях и его связь с биосинтезом фенольных соединений / В.А.Пасешниченко // Физиология растений. 1995.- Т.42, вып. 5.- С.787-804.

82. Писарев, Б.А. Книга о картофеле / Б.А.Писарев. М.:Моск. раб., 1985.-264с.

83. Писарев, Б.А. Сортовая агротехника картофеля / Б.А.Писарев.- М.: Аг~ ропромиздат, 2000.- С.5-32.

84. Писарев, Р.Н. Все о картофеле / Р.Н.Писарев // Картофель и овощи.- №7. -2004.-С.12.

85. Писарев, Р.Н. Химический состав клубня / Р.Н.Писарев // Защита растений.- 1985. №5.- С.29-30.

86. Посыпанова, С.Г. Картофелеводство / С.Г. Посыпанова // М.: Агропром-издат, 1999.- 28с.

87. Прокшев, С.М. Биохимия картофеля / С.М.Прокшев. М.: Изд-во Ан СССР, 1977.- 226с.

88. Прянишников, Д.А. Азот в жизни растений и земледелии СССР / Д.А.Прянишников.- М.: АН СССР, 1945.- 45с.

89. Робинович, И.Х. Лекарственные растения / И.Х.Робинович. М.: Росиз-дат, 2006.- 207с.

90. Роговин, В.В. Пероксидасомы растительных клеток / В.В.Роговин, Р.А.Муравьёва, Б.С.Акимов// Физиология растений.- 1987.- Т.34, вып.6. -С.1181-1185.

91. Росс, X. Селекция картофеля. Проблемы и перспективы / Х.Росс; пер. с англ. В.А. Лебедева; под. ред. И.М.Яшиной. М.: Агропрмиздат, 1989. -183с.

92. Российские сорта картофеля: каталог / Российская академия с.-х. наук,-М., 2008,- 55с.

93. Савич, И.М. Пероксидазы стрессовые белки растений / И.М.Савич // Успехи современной биологии.- 1997.-Т.107, вып. 3.- С.406-415.

94. Свидерский, В.А. Основы нейрофизиологии насекомых / В.А.Свидерский. М., 1986.- 325с.

95. Седова, В.И. Защита картофеля от болезней и вредителей / В.И. Седова, М.И. Деревягина, С.В. Васильева // Защита и карантин растений.-2000,-№11.-С.17-18.

96. Сикилинда, В. А. Исследование гликоалкалоидов картофеля / В.А.Сикилинда, В.П.Кирюхин // Селекция и семеноводство картофеля.-1975. №21.- С.5-11.

97. Ю2.Скоркин, A.B. Огород- круглый год / A.B. Скоркин.- Екатеринбург: Литур., 2007.- С. 90-92.

98. ЮЗ.Созинов, A.A. Полиморфизм белков и его значение в генетике и селекции / А.А.Созинов М.: Наука, 1985.-385с.

99. Соломина, И.П. Современные тенденции в селекции картофеля / И.П.Соломина, П.П.Макаров. М.: ВНИИТЭИагропром, 1986.- 60с.

100. Список пестицидов и агрохимикатов, разрешенных к применению на территории РФ.-2008.- 629с.

101. Справочник картофелевода. 2-е изд., доп. / под. ред. В.Н.Воронина.-М., 2008.- 250с.

102. Справочник лекарственных растений / под. ред. С.К.Петрова.- М.: Аст-рель, 2008.-180с.

103. Тимашов, И.А. Картофель. Рекомендации и практический опыт возделывания (на примере фермерских хозяйств Орловской области) / И.А.Тимашов, Н.Н.Лысенко, Г.И.Дурнев.- Орел, 2002.- С.28.

104. Туколо, Е.А. Ускоренный метод количественного определения гликоалкалоидов / Е.А.Туколо, Г.Н.Царик // Науч. докл. Высшей школы (сер. Биологические науки).- 1971.-№ 13.-С. 115-117.

105. Туркина, М.В. Методы определения моносахаридов и олигосахаридов / М.В.Туркина, С.В.Соколова // Биохимические методы в физиологии растений / под ред. И. Павлиновой.- М.: Наука, 1971.- СЛ.

106. Ушатинская, P.C. Экология и физиология колорадского жука / P.C. Уша-тинская, Г.Г. Ийрковский.- М.: Наука, 1981.-132с.

107. Фасулати, С.Р. Вредители баклажана и томата и устойчивость к ним сортов растений /С.Р.Фасулати, Л.Н.Оборнева // XI съезд РЭО: сб. науч. тр. Т.2. СПб.: РАН, 1998.- С. 179-180.

108. Фасулати, С.Р. Колорадский жук (Leptinotarsa decemlineata Say) / С.Р.Фасулати // Ареалы и зоны вредоносности основных сорных растений, вредителей и болезней с.-х. культур. СПб., 2005.- С.62-65.

109. Фасулати, С.Р. Микроэволюция и видовая структура колорадского жука Leptinotarsa decemlineata Say {Coleóptera, Chysomelidaé) / С.Р. Фасулати //XI съезд РЭО: сб. науч. тр. Т.2.- СПб: РАН, 1998.- С.178-179.

110. Фасулати, С.Р. Популяционные аспекты устойчивости картофеля к колорадскому жуку / С.Р.Фасулати // VIII Всесоюзное совещание по иммунитету с.-х. растений к болезням и вредителям: тез. докл. Ч.2.- Рига, 1986.-С.61-62.

111. Фасулати, С.Р. Распространение колорадского жука и экологические вопросы защиты картофеля в северных областях России /С.Р. Фасулати // 3-й Кирилло-Мефодиевские чтения: материалы междунар. науч. конфе-ренции.-Калуга: КГУ, 2003.- С. 165-171.

112. Фасулати, С.Р. Экологические факторы микроэволюции в агроценозах (на примере колорадского жука) / С.Р.Фасулати // Всерос. съезд по защите растений: тез. докл. СПб.: ВИЗР, 1995.- С.261-262.

113. Федотова, Е.А. оценка сортов на устойчивость к колорадскому жуку / Е.А.Федотова // Вестник Российского госуд. аграр. заоч. ун-та.- М., 2006.- №1 (6).- С.84-85.

114. Физиология растений / под. ред. И.П. Сенютина. Т.55. №4.- С.485-490.

115. Филиппов, H.A. Вредоносность колорадского жука в Молдавии / Н.А.Филиппов // Труды Молдавского НИИ овощеводства.- Кишинев, 1999.- Т.6.№5.-С.64-75.

116. Филиппов, H.A. Основные направления исследований по биологической борьбе с колорадским жуком на раннем картофеле и баклажанах / H.A. Филиппов// Информ. бюллетень ВПС МОББ.-Л.Д987.-С.67-71.

117. Харборн, Д.И. Введение в экологическую биохимию / Д.И.Харборн.-М.: Мир, 1985.-312с.

118. Цветкова, М.А. Биохимия стресса и формирования устойчивости у картофеля при повреждении колорадским жуком: автореф. дис.,„ канд. биол. наук / М.А. Цветкова.- М.: Моск. пед. гос. ун-т, 2001.- 37с.

119. Цветкова, М.А. Содержание гликоалкалоидов и состав белков в листьях картофеля в норме и при повреждении колорадским жуком / М.А. Цветкова, И.Л. Цветков, A.C. Коничев // Сельскохозяйственная биология.-2004.- №1.- С.97-104.

120. Черкашин, В.И. Фитосанитарное оздоровление экосистем / В.И.Черкашин // Материалы 2-го съезда по защите растений.- СПб.: 2005.-С.10.

121. Шапиро, И.Д. Методические рекомендации по изучению и оценке форм картофеля на устойчивость к колорадскому жуку // И.Д.Шапиро, Н.А.Вилкова, С.Р.Фасулати.- М.: РАСХН, 1993.- 47с.

122. Шмонин, С.А. Выделение исходного материала, гибридов и сортов картофеля по устойчивости к колорадскому жуку: автореф. дис. канд. с,-х. наук / С.А.Шмонин. Л., 1968.- 25с.

123. Шпаков, Л.Т. Подбор и оценка гибридов- беккроссов межвидового происхождения для селекции картофеля на устойчивость к колорадскому жуку: автореф. дис. канд. с.-х. наук /Л.Т.Шпаков М.: ВНИИКХ, 1993.-23с.

124. Яшина, И.М. Многолетняя работа по селекции картофеля и перспективы ее дальнейшего развития / И. М. Яшина // Картофель и овощи.- 2007.-№ 4.- С.2-4.

125. Allen, E.N. Steroid alkaloids it the disease resistance of white potato tubers / E.N.Allen, I. Kuc // Phytopathology.- 1998.- №54.- P.886-889.

126. Barlett, P.W. Colorado beetles reprted in England, Wales and Scotland, 1980 / P.W. Barlett // Plant Pathology.-1981 .-№30. P.41-46.

127. Barlett, P.W. Interception and eradication of Colorado beete in England and Wales, 1958-1977 / P.W. Barlett //Bulletin.-1980.-№10.- P.481-489.

128. Barlett, P.W. Interception of Colorado beete in England and Wales, 19781982/ P.W. Barlett // Bulletin.-1983.-№13.- P.559-562.

129. Barta, J. Study of biochemical variability of potato cultivars by soluble protein, isoesterase, and isoperoxidase electrophoretic patterns/ J.Barta, V.Curn, J.Divis // Plant Soil. Environ. 2003 (5). - V.49.- P.230-236.

130. Bushway, R.G. Etudes physiologiques sur le Leptinotarsa decemlineata Say / R.G.Bushway. le Francois, Paris, 1987.- P. 1-27.

131. Bowles, D.J. Distribution of lektuns in membranes of soubean in root, shood and leaftissues at different stades of growth / D.J.Bowles, H.I.Lis, H.A.Sharon // Planta.- 1997. V.145. - P.193.

132. Dimok, M.B. Mechanical intraction between larvae of the Colorado potato beetle and glandular trichomes of Solanum berthaultii Hawkes / M.B.Dimok, V.M. Tingey // Am. Potato J.-1987.- V. 64. №9.- P.507-515.

133. Grizon, P. Thigmotactisme et localization sencorielle du contact dans lenfiiis-sement du doryphore adulte / P.Grizon //C.r. Acad. Sei.- 1946.-V.222.- №3.-P.306-308.

134. Higher, R.J. The study of alkaloid structures by spectral methods / RJ.Higher, J.M.Wheeler // The alkaloids.-V.24.- Ed. A.Brossi.-N.Y.: Acad. Press., 1985.- P.287-348.

135. Highet, R.J. The stady of alkaloid structures by spectral metods / R.J.Highet, J.M.Wheeler //Phytopathology.- 1964.-№54.- P.886-889.

136. Hosaka, K. Evolution of several wild buberbearing Solanum species for scab resistance / K.Hosaka, H.Matsunoga, K.Senda // Am. J. of Potato Res.-2000.-V.77.-№l.- P.41-45.

137. Howkes, J. The ecological background of plant domestication. In Ucko, P.J. and Animals. Duckworth / J. Howkes. London, 1969.-208p.

138. Jacob, F.H. Colorado beetle / F.H.Jacob, H.W. Janson // Agriculture.-1958.-№65.- P.393-397.

139. Jermy, T. Untersuchungen über Auffinden und wähl der Nahrung beim Kartoffelafter (jLeptinotarsa decemlineata Say) / T.Jermy // Etnomol. exp. et. appl.- 1958.-№1.- P. 197-208.

140. Konarev, A.V. Inhibitors of amylases and proteinases and resistance of cereals and potatoes / A.V.Konarev, S.R. Fasulati // XIII Intern. Plant Protect. Congr. Haque: Abstr.- Netherlands, 1995.- P. 169.

141. Konarev, A.V. Proteinases of Colorado potato beetle and their plant protein inhibitors/A.V.Konarev, S.R. Fasulati // XX Intern. Congr. Etnomol. Proc. Firenze, Italy, 1996.- Firenze, 1996.- P. 182.

142. Krzywanski, Z. Phytopathol / Z.Krzywanski, M.Boiys. 1995. - P.262-266.

143. Lamp, W.Z. Soc. ehem. Ind. / W.Z.Lamp, F.W.Bakenbush, H.Rooke.- 1943.-P.48-62.

144. McKee R.K. Ann. Appl. Biol. 1954. - V. 41.- P.417.

145. Muller, K. Olygosacchoride synthesis by the alimentary conal invertase of the larna of Corcyca cephalonica Station (Lepidoptera: Pyralidae) / Muller et al P.N. Srivastava // Enzymologia.- 1955. V.30.- P.127-130.

146. Muller, K. Das Erscheinen der uberwinterten Kartoffelkäfer im Frühjahr in seinen Beziehungen zur Bodentenperatur / Muller K. // Zschr.Pflanzenkraunkn.-1981.- V.29.- P.32-41.

147. Paquin, R. Amery potato / R.Paquin, R.A.Lachace.- 1966.- V.43.- №10,- P.47.

148. Paquin, R. Microbiol / R.Paquin, R.A.Lachace, J.Canad. 2000.- V.10.- P.41-45.

149. Roddick, G.J. Synergistic interaction between potato glycoalcaloids a-chaconine in relation to destabilization of cell membrans: ecological implications / G.J.Roddick, A.L.Rijnenberg, S.F. Osman // J. Chem. Ecol.- 1998.-V.14.- P. 889-902.

150. Roddick, J.G. Steroidal glikoalkaloid content of potato, tomato and their somatic hybrids / J.G. Roddick // Theor. Appl. Genet.-1999.-V.62.- P.235-241.

151. Ross, A.T. Sistemic acquired resistance induced by localized virus infections of plants / A.T. Ross // Virology. 1999. - V.14. - P.340-358.

152. Thiery, D. Misleading the Colorado potato beetle with an odor blend / D.Thiery, J.H.Visser // Journal of Chemical Ecology.- 1987.- V.13, №5.- P. 1139-1145.