Исследование роли биотических и абиотических факторов в приживаемости интродуцируемых бактерий на первых этапах онтогенеза растений

Тимофеева, Светлана Владимировна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Исследование роли биотических и абиотических факторов в приживаемости интродуцируемых бактерий на первых этапах онтогенеза растений
ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Автореферат диссертации по теме "Исследование роли биотических и абиотических факторов в приживаемости интродуцируемых бактерий на первых этапах онтогенеза растений"

•

РТь од

1 8 ДЕК ?ПМ

На правах рукописи

ТИМОФЕЕВА Светлана Владимировна

ИССЛЕДОВАНИЕ РОЛИ БИОТИЧЕСКИХ И АБИОТИЧСКИХ ФАКТОРОВ В ПРИЖИВАЕМОСТИ ИНТРОДУЦИРУЕМЫХ БАКТЕРИЙ НА ПЕРВЫХ ЭТАПАХ ОНТОГЕНЕЗА РАСТЕНИЙ.

Микробиология - 03.00.07

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Санкт-Петербург 2000

•Л '

Работа выполнена во Всероссийском научно-исследовательском институте сельскохозяйственной микробиологии

Научный руководитель кандидат биологических наук А.П.Кожемяков

Официальные оппоненты

доктор сельскохозяйственных наук Г.А.Воробейков кандидат биологических наук О.Н.Курчак

Ведущее учреждение Ботанический Институт Российской Академии Наук им. Комарова

Защита диссертации состоится 26 декабря 2000 г. в 143и часов на заседании диссертационного совета (К 020.26.01) при Всероссийском научно-исследовательском институте сельскохозяйственной микробиологии по адресу: 196608, Санкт-Петербург, Пушкин, ш.Подбельского,

С содержанием диссертации можно ознакомиться в библиотеке Всероссийского научно-исследовательского института сельскохозяйственной микробиологии.

Д.З.

Автореферат разослан 2000 г.

Ученый секретарь диссертационного совета кандидат биологических науи

УсУУ^ А.Н.Зарецкая

п С $ Я-

> »■

Общая характеристика работы Актуальность темы.

Одним из путей восстановления и повышения плодородия почв., увеличения урожайности культурных растений и получения экологически чистой продукции является направленное регулирование микробиологических процессов в почве. В этом плане чрезвычайно перспективна интродукция микроорганизмов, обладающих полезными свойствами, особенно на первых этапах развития растения. Микробы-интродуценгы способны осуществлять целый ряд функций: улучшать минеральное питание растений, фиксировать атмосферный азот, стимулировать рост растений, подавлять фитопатогенную микрофлору, повышать устойчивость растений к стрессам (ТШюпоукЬ, К^епиа-коу, 1997; ВаБЙап, Ьеуапопу. 1990; ВосИеу, ОоЬегетег, 1982). При этом большое значение для эффективного взаимодействия растений и микроорганизмов имеет формирование фигобакгериалъных ассоциаций, способных к взаимовыгодному массо-энергообмену (Умаров, 1986).

Особый интерес представляет использование ассоциативных ризобак-терий, способных осуществлять взаимосвязь практически с любым растением. Об эффективности возникновения ассоциации между растением и интро-дуцированными азотфиксирутощими ризосферными бактериями свидетельствует их выживание в почве до момента образования корневой системы растений и заселение растущих корней. Для контролирования этих процессов очень важно располагать информацией о влиянии агроэкологических факторов на микробов-интродуцентов в почве и в зоне корней растений. Однако сведений о поведении бактерий-шггродуцентов в ранние сроки их пребывания в почве явно недостаточно, что объясняется методическими трудностями наблюдения за микроорганизмами в природных условиях (Садьпсов, 1980; Ро-дынюк, 1991; Белимов и др., 1994).

Одним из методов, позволяющих наблюдать за поведением микроорганизмов в почве, является метод мембранных фильтров. Он с успехом применяется для изучения экологии почвообитающих микроорганизмов (Лагутина, 1985; Струннякова, 1987; Лабутова, 1990; Вишневская, 1999; Шахназарова, 2000). С помощью этого метода можно проследить за динамикой численности микроорганизмов, интродуцируемых в почву, а также за их реакцией на изменение ряда агроэколопгческих факторов, важных для роста растений. Использование метода перспективно и для изучения выживания эффективных штаммов ризобактерий на ранних этапах онтогенеза растеши!. Это позволяет научно-обоснованно подойти к испытанию и отбору интродуцентов биопрепаратов в естественных экологических условиях.

Цель и задачи исследований.

Цель работы - изучение динамики численности ризобакгерий-интродуцентов в почве и заселение ими корней на ранних этапах онтогенеза

▼ т

' 1

растений в условиях воздействия различных биотических и абиотических факторов.

Для осуществления цели были решены следующие задачи;

• разработка новой модификации метода мембранных фильтров применительно к изучению заселения ризобактериями ризосферы и ризопланы растений на первых этапах онтогенеза;

• анализ выживания ассоциативных ризобактерий, интродуцированных в почву, под влиянием ряда агроэкологических факторов (кислотность, влажность. окультуренность почв);

• сравнительное изучение динамики численности ассоциативных ризобак-терий в почве и зоне корней растении;

• оценка взаимовлияния симбиотических и ассоциативных ризобактерий в ризосфере и ризоплане растений;

в поиск эффективного сочетания биопрепаратов на основе ассоциативных ризобактерий и микробов-антагонистов с целью их совместного применения.

Научная новизна. Предложена модификация метода мембранных фильтров, позволяющая в виде экспресс-анализа оценивать выживание ризобактерий с момента интродукции в почву до образования корневой системы растений и заселение ими корней.

С помощью предложенной модификации метода мембранных фильтров исследована динамика численности ризобактерий в почве, ризосфере и ризоплане на ранних этапах онтогенеза сельскохозяйственных растений: овощных, злаков, кормовых.

Впервые с помощью экспресс-анализа на мембранных фильтрах проведена сравнительная количественная оценка влияния рада агроэкологических факторов на динамику численности микроорганизмов-интродуцеитов.

Предложена методика быстрого отбора интродуценга для эффективного применения биопрепаратов для ряда сельскохозяйственных культур.

Впервые проведено изучение взаимоотношений ризобактерий, микробов-антагонистов и фитопатогенного гриба Fusarium oxysporum в зоне корней огурца. Показана эффективность совместного использования микроорганизмов для улучшения развития растений.

Практическая значимость. Установлена определяющая роль растений в выживании ризобактерий в ризосфере и заселении ими ризопланы в начале онтогенеза растений.

Изучение поведения интродуцируемых бактерий методом мембранных фильтров в сочетании с кластерным анализом и математическим моделированием позволило уточнить влияние различных агроэкологических факторов на приживаемость ризобактерий в зоне корней растений и может использоваться как экспресс-метод для прогнозирования выживания интродуцентов

(вид. форма выпуска и титр препарата) в конкретных экологических условиях.

Подтверждено наличие антагонистического действия ризобактерий по отношению к возбудителю фузариозного увядания (Fusarium oxysporum).

Выявлены сочетания биопрепаратов, содержащих азотфиксирующие ризобактерии, с биопрепаратами защитного действия, которые обеспечивают максимальный протекторный эффект. При их использовании наблюдается одновременное снижение заболеваемости и улучшение роста растений.

Апробация работы.

Материалы диссертации представлены на конференции "Интродукция микроорганизмов в окружающую среду" (Москва, 1994), на международной конференции "Biotechnology - St.Petersburg 94" (Санкт-Петербург, 1994), на X междз'народном конгрессе по азотфиксации (Санкт-Петербург, 1995), на П съезде Докучаевского общества почвоведов, (Санкт-Петербург, 1996), на международной конференции "Ecological Effects of Microorganism Action", (Вильнюс, 1997).

Публикации.

По материалам диссертации опубликовано б работ.

Структура и объем диссертации.

Диссертация состоит из введения, обзора литературы и трёх экспериментальных глав с изложением полученных результатов, их обсуждения, выводов и списка литературы. Работа изложена на 134 страницах, иллюстрирована 23 рисунками и содержит 19 таблиц. Список использованных литературных источников включает 246 наименований, в том числе 124 зарубежных.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ.

Обзор литературы посвящен проблемам изучения экологии и физиологии микроорганизмов-шпроду центов. Рассмотрены проблемы использования микробных препаратов для повышения продуктивности сельскохозяйственных культур. Дан краткий обзор существующих сведений об экологических особенностях микроорганизмов-интродуцентов в почве и ризосфере растешш. Описаны методы изучения динамики численности микроорганизмов, интро-дуцируемых в зону корней растений. Особое внимание уделено совершенствованию метода мембранных фильтров, его положительным сторонам и недостаткам. Рассмотрены проблемы и перспективы использования математического моделирования для выявления и анализа основных механизмов, рейдирующих поведение микроорганизмов при их интродукции.

Объекты и методы исследований.

Объектами исследований служили коллекционные штаммы ВНИИСХМ, па основе которых созданы биопрепараты группы "Экстрасол": Agrobacierium radiobacter 10 (агрофил), Flavobacterium sp L-30 (флавобакте-рин), Arthrobacter mysorens 1 (мизорин), Azospirillum lipoferum 137 (азори-

зин), а также группы "Ризоторфин" - Sinerhizobium meliloti 1760 (ризотор-фин), Sinerhizobium meliloti 1723 (нитрагин). Перспективные штаммы S.meliloti TI 18 иТ482, полученные методом генной инженерии (предоставлены лабораторией генетики и селекции микроорганизмов ВНИИСХМ). Использовали также биопрепарат Агрофор (на основе Agrobacterium radiobacter 57/136), ускоряющий деградацию пестицидов. В исследованиях использовали штаммы микробов-антагонистов: Bacillus subtilis-10 (препарат алирин Б) и Streptomyces felleus-Ъ (препарат алирин С). Эти штаммы предоставлены лабораторией микологии и фитопатологии ВИЗР.

Использовали фитопатогенный гриб Fusarium oxysporum (Schicht.), выделенный из пораженных проростков огурца.

Опыты проводили на яровом ячмене (сорта "Темп", "Дина", "Белгородский", "Первенец"), томатах (сорт "Верлиока"), огурцах (сорта "Феникс" и "ТСХА-77"), а также люцерне посевной сортов "Вега" и "Пастбищная 88".

Для интродукции исследуемых бактерий в почву использовали метод мембранных фильтров (Лагутина и др., 1990). После извлечения фильтров проведена серологическая идентификация реизолятов ассоциативных диазо-трофов (Schmidt, 1976; Ladha,et al.. 1982: Belimov et al., 1996).B опытах использовали штаммы S.meliloti, маркированные по устойчивости к антибиотикам рифампшцшу и конамицину.

Модельные опыты проводили в лабораторных условиях в сосудах объемом 1.5-2,5 л. Вегетационные опыты проводили в вегетационных домиках с естественным освещением в летний период. Растения выращивали в сосудах, содержащих 4,5 кг почвы. В опытах использовали следующие субстраты: дерново-подзолистую хорошо и слабо окультуренную почвы, кварцевый песок перлит и тепличный торфогрунт.

Для питания растешш использовали смесь элементов Прянишникова. Полная доза азота вносилась дробно. Повторность опытов четырехкратная.

Для характеристики эффективности действия интродуцентов биопрепаратов учитывали длину и вес наземной и подземной части растений, количество листьев и развитие болезни у инфицированных растений (Хохряков и др., 1984).

Статистическую обработку проводили с использованием методов дисперсионного анализа (Доспехов, 1985). С помощью кластерного анализа получали группировки вариантов опытов в пространстве значений численности бактерий на каждый срок наблюдений (программа "STATYSTICA"). Использовали математические модели (Кирцидели, 1993).

Результаты исследований 1. Влияние абиотических факторов на приживаемость интроОуцируемых бактерий в почве.

Изучение влияния различного водного режима почв и их окультурен-ности на динамику7 численности интродуцированных ассоциативных ризобак-

терий проводили в краткосрочных модельных опытах. Используемый метод мембранных фильтров позволил провести количественный учет численности бактерий в почве. Оценивали влияние влажности почвы - 30. 60 и 80% от полной полевой влагоемкости (ППВ) на динамик}" численности Agr.radюbacter 10. ЛгЛро/егит 137, Псп'оЬшепит ¿р.Ь-ЗО \iArth.mysorens 7.

Оптимальная влажность для приживаемости рпзобактернй в почве составила 60% от ППВ (рис. 1).

•е- 6

АпН.ту$огет 7

2 Сутки 8 Па\.'оЬос1епит вр.Ь- 30

г1§

2 I

Сутки

Аг.Иро/егшп 137

2 Сутки 8

—х—\¥=30%

\у=60%

- -о- -У/=80%

Рисунок 1. Влияние влажности на динамику численности ризобактерий в почве.

При изменешш влажности почвы от 30% до 80% ППВ отмечено снижите численности на 1-4 порядка. В.то^же время, А г?/?.. тухогеп.ч 7 и Пспю-ЪаШпит 5р.Ь-30 поддерживали высокую численность при 30% влажности

почв. Аю.чртИит Нро/егит 137 в переувлажненной почве к концу наблюдений вернулся к исходной численности - 103 кл./мм" мембранного фильтра (м.ф.).

Результаты проведенных исследований показали, что при низкой окультуренности почв возрастало негативное влияние экстремальной влажности на приживаемость интродуцируемых бактерий. В условиях лее недостаточного увлажнения численность популяции Агохр'ччИит Нро/егит 137 в слабо окультуренной почве была значительно выше по сравнению с хорошо окультуренной на вторые сутки после интродукции бактерий (рис.2).

А 2. Про/ егит 137

8 В

о й

ьо

О 2

• песок

- ■■ - почва слабоокультуренная

— -X— почва хорошоокультуренная

Рисунок 2. Влияние окультуренности почвы на приживаемость Аг.Нро/егит при влажности 30% от ППВ.

Группировка кластеров позволяет выявить наиболее значимый фактор для приживаемости интродуцированных ризобактерий в почве. Дендрограм-ма на рисунке 3 демонстрирует группировку вариантов в опыте по оценке влияния комплекса факторов: окулыуренности, влажности и генотипа ризобактерий, - на динамику численности А%г.гасИоЪас1ег 10, Аг.Нро/егит 137, АгИт.птогет- 1 и 14акюЪМегхит $р. 30. Главным фактором, объединяющим варианты, является влажность субстратов, то есть динамика численности бактерий существенно меняется при изменении влажности почвы. Не обнаружено группировки кластеров по окультуренности субстратов (рис.3). Вторым фактором, определяющим группировку вариантов внутри кластеров, был генотип бактерий-интродуцентов.

0.2

0.4

Уровень схоАства 0.6 0.8 1.0

I I

(А-10)п-60% (А-10)1-60% (А-7)п-60%_

(Р-30)1-60%

1 (А-137)п-60% - р! (А-10)1У-30%

(А-10)п-30% (А-10)1У-60%

,-,(Р-30)1-30%

"1—!(К-зо)1-бо% (А-7)гУ-бо% (А-137)1-60% (Л-137)1 У-60% (А-7)1-60% (Р-30)п-60%

-о

W=60%

(Р-30)1-30% (Р-30)п-30% (Л-137)1-30%

(Р-30)1-80%

(А-7)1У-30%

(А-7)п-30%

(А-10)1-80%

(А-10)1У-80%

(Р-30)п-80%

(А-137)п-30%

(А-10)п-80%

(Р-30)1У-30%

(А-7)1-30%

(А-137)1-80% (А-137)1У-80%

--(А-7)п-80%

—(А-7)1-80%

-¡(А-7)1У-80%

-!(Р-30)1-80%

-;(А-137)п-80%

W=80%

Рисунок 3. Денлрограмма группировки вариантов опыта по оценке влияния комплекса агроэкологических факторов на динамику численности ршобакте-

рии в почве

Исходная нагрузка исследу емых бактерий задавалась в диапазоне от 10ч до Ю кл./мм" м.ф. Корреляционный анализ показал высокий уровень сходства в поведении большинства ризобактерий независимо от внесенного количества. В то же время, коэффициент корреляции между исходной численностью и количеством Р1а\>оЪас1еПит ар.30 на 2-ые и 8-ые сутки составил 0.58 и 0.63 соответственно.

Установлено, что исследуемые ассоциативные ризобакгерии обладали различной чувствительностью к рН среды. Наиболее устойчивой была культура АгЛ.ту.югепа 7: изменение кислотности почв в диапазоне 5.4-7.1 не оказало существенного влияния на динамику ее численности.

Влияние формы биопрепарата (торфяной и жидкой) на выживание шпродуцента в ряде субстратов было изучено примере агрофора. Результаты опыта показали существенное влияние формы биопрепарата на динамику численности шпродуцента (рис.4).

о о к а и

5 5

ев >-)

11 10 9

-перлит - торфогрунг

... о- - - почва

Сутки

10 -Г

•е-

к 6 -

ж 4-

в- ? -

со

0 4

Сутки

Рисунок 4. Влияние формы препарата агрофор на приживаемость Лgг.гайюЬаМег 57/136. а - торфяной препарат, б - суспензия клеток.

Численность Л^г. гасИоЬас1ег 57/136. внесенных с торфяной формой препарата, через 5 суток увеличилась в перлите на 4 порядка, а в торфогрунге - на 3 порядка. При использовании жидкой формы агрофора количество бактерий за это же время снизилось на 2-4 порядка. Обнаружено, что перлит способствовал сохранению высокой численности бактерий-галродуцентов. Только в перлите штамм Ацг.гасИоЬасгег 57/136 (жидкая форма препарата) сохранил достаточно высокую численность (1.5Т04кл/мм2 м.ф.).

Для оценки и прогнозирования приживаемости А^г.гас1'юЬас1ег 57/136 в различных субстратах при внесении препарата агрофор в жидкой форме использовали математическую модель, характеризующую динамику-численности микроорганизма. Полученные данные показали, что при внесе-Н1 т Agr.radiobacter 57/136 в виде жидкой формы препарата во всех испытанных субстратах преобладали процессы, связанные с табелью микроорганизма. Однако в перлите эти процессы протекают менее интенсивно. Тагам образом, данный субстрат может иметь хорошие перспективы в качестве носителя для приготовления биопрепарата.

2.Приживаемость ассоциативных ризобактерий и их ассоциаций с клубеньковыми бактериями в золе корней растений.

Модификация метода мембранных фильтров позволила провести количественный учет популяций ризобактерий в ризосфере и ризоплане растений отдельно, а также сопоставить степень изменения численности интродуцентов с фазами развития растеши"!.

Согласно предложенной нами модификации метода на мембранный фильтр, содержащий инокулюм изучаемых микроорганизмов, помещали семя растения, предварительно простернлизовав его. Фильтр с инокулюмом и семенем оборачивали нейлоном и вводили в почву. Ткань не препятствовала доступу почвенного раствора, прорастанию семени, росту растеши и контакту с почвенной микрофлорой, предохраняя их в то же время от механических повреждений. На разных фазах развития растения фильтры извлекали и учитывали численность интродуцентов.

Установлены различия в приживаемости (сохранении и увеличении начальной численности) интродуцентов в ризосфере различных растений. На изменение количества клеток шпродуцента по-видимому, оказывали влияние экссудаты семени и корней. Вероятно, они принимают участие в отборе интродуцентов, способных создать активные ассоциации "бактсрия-растение'1. Так. Аг/И.ту^огепх 7 выживат в ризосфере ячменя сорта «Темп» лучше других интродуцентов. Его численность практически не менялась до конца наблюдений. Слабее других бактерий выживал штамм АхЛро/егит 137 на 14 сутки его количество снизилось на 4 порядка (рис.5). Промежуточное положение между ними по выживаемости занимали Р'/а\'оЬас1ег!ит 5р. Ь-ЗО и

.4gr.rad¡obacter 10. Таким образом, интродуцнруемыс ризобактерии по-разному вели себя в ризосфере растения, в данном слу чае ячменя.

5- 6 Н

«г

§ 3

as а

о í

J 1 1

-о—Agr.radiobacter 10 ■X - Az.lipoferum 137 ■A" Flavobacterium sp.L-30 -Ж — Artli.mysorens 7

14 Сутки

Рисунок 5. Динамика численности ассоциативных ризобактерий в ризосфере ячменя сорта «Темп».

Эксперименты показали, что ризобактерии по-разному вели себя в ризосфере не только ячменя, но и других культур: огурца, томата и люцерны. Так, при исходной численности - 106 кл/мм2 м.ф., на 5-е сутки наблюдений количество 1-1а\>оЬас(епит ¿р.Ъ-30 в ризосфере томатов составило 8Т0' кл/мм* м.ф., а ячменя - 1Т05 кл/мм2 м.ф. Выживание ризобактерий-интродуцентов было различным в ризосфере и ризоплане разных сортов растений: ячменя, огурца и люцерны. Количество Р1а\'оЪас1епит яр Ь-30 и Аг-¡НгоЬас1ег ту<50геп$ 7 в ризосфере огурца сорта "Феникс" было выше на 3-4 порядка, чем сорта ТСХА-77 (рис.6). Ризобактерия АпИ.пщогет 7 хорошо приживалась в ризосфере ячменя сорта "БелогорскшТ", хуже - в ризосфере сортов '"Темп" и "Первенец'. КультураР1а\~оЬас!ег1шп хр.Ь-30 также проявила высокую избирательность по отношению к различным генотипам ярового ячменя. В ризосфере сортов "'Первенец'" и "БелогорскшТ' численность флаво-бактерий возрастала, а в ризосфере сорта "Темп" - существенно уменьшилась. на 3 порядка (рис. 6).

Оценка фенотипических признаков 3-х суточных растений ячменя показата прибавку веса корней в вариантах с Л§г.гасИоЬааег 10 (на 136%), с .\rth.mysorcns 7 (на 124%) и с ЫалюЪастпшп .чр.!.-30 (на 380%) по отношению к контролю.

5 7 3 6

Р 5

* 4

Лпк.тувогет 7

О 5 12 20

—х—сорт" Фешпсс" Опш

— Ж— сорт ТСХА-77

9 п 8 7

6 ■■;

5 -)

4 ••

3 п о

Р1а\оЬас1егшт ър.Ь- 30

12 20 Сутки

Апк..птогеп$ 1

8 - Р!ауоЬа!епит $р. 1.-30

0 3 6 14

—х— сорт Белогорский -о- - сорт Темп

20 0 3 б 14 20

—X— сорт Беломорский Сутки —+"" сорт Первенец Сутки - -о - сорт Темп

Рисунок 6. Приживаемость ЛпИ.туъога^ 7 и Р1а\'оЬас1епит хр.Ь-М) в ризосфере огурца (а.б) и ячменя (в,г) у разных сортов растений.

Таким образом, установлены различия в сортовой отзывчивости по приживаемости ассоциативных ризобактерий в ризосфере и ризоплане огурца и ячменя.

Данные по динамике численности бактерий-интродупентов в почве и зоне корней различных растений были обработаны с помощью кластерного анализа. Все варианты сгруппировались по принципу принадлежности либо к почве, либо к зоне корней растений (рис.7).

0.0

0.2

0.4

Уровень сходства 0.6 '_0.8 1.0

(А-7)п2-о (А 7)л1-о

;(Р-30)п1-о (Р-30)п2-о

(А-7)п1-Т

р-тСА 137)1.1.1 ;А-7)112 т [А-7)111 -¡(А 137)12-

-Р

:А 137>1 А-137)п2 ¡(А 137)п1 _

-1(А-7)п1 -¡СА-1»)«2

Ч(А-1®)п1

-1(ГЗ«)п1

Г-1Г 30)п3 ~ЦА-7)»3 _ ¿р-з0)п3-г

Гир.3»)п2 I—ао)а1 о г-^'-М^-Т I—|(Р-30)п1-Т Г-4А-7)»2

_ _] '-|(А 7)ПЗ-2

I-(А-10)п1-Т

—!(А-10)о2-Т

,-(А1»)п2-о

А-137)п2-.

I-?

1—ПА

ЧА

—|СА-1»)п2 -<А-1»)пЗ -«А-19)пЗ-;

О П

1« 18 Я О

"(А 137)п2 ] а

-(А-137)пЗ-1

о <0

Рисунок 7. Дендрограмма группировки вариантов опыта по оценке влияния растений и комплекса агроэкологических факторов на динамику численности ризобактерий в почве

Следовательно, главным среди комплекса абиотических и биотических факторов, объединяющим варианты опыта в кластер является растение. Поведение бактерий внутри кластера определялось генотипом шлродуцента.

В вегетационных опытах изучалось влияние биинокуляции ассоциативными ризобактериями (Аг.Иро/егит 137, Ап/иттогеп.ч 7) и ЗтегЫюЫит теШои семян люцерны посевной. Бшшокуляция по-разному влияла на динамику численности 8.теШоП (рис.8).

S.meliloti TI 18

S.meliloti 1760

о Í?

—о—Монопнокуляция (К) Сутки - -х- - K+Arth.my "sorens7 - -Ж' -K+Az.lipo'feruml37

Cvncii

0 4 10

—о— Моноинокуляция (К)

- -х - - K+Arth.mvsorens 7

- -ж- - K+Az.lipoferam 137

Рисунок 8. Влияние Árth.mysorens 7 и Az.lipoferum 137 на приживаемость S.meliloti в ризосфере люцерны.

Установлено, что интродукция Arth.mysorens 7 и Az.lipoferum 137 стимулировала увеличение численности S.meliloti TI 18, S.meliloti 1760 (сорт "Бега"') и S.meliloti TI 18, S.meliloti 1760 (сорт "Пастбищная 88"') в ризосфере люцерны. Кластерный анализ выявил, что фактором, группирующим варианты опыта по влиянию биинокуляции на приживаемость ¡«продуцентов в ризосфере люцерны, является штамм S.meliloti. Следовательно, динамика численности S.meliloti и Arth.mysorens 7 (или Az.lipoferum 137) при биинокуляции существенно менялась при изменении штамма клубеньковых бактерий. Гр\ттировка кластеров при изучении динамики численности бактерий в ри-зоплане люцерны выявила объединение вариантов по Arth.mysorens 7 (или Az.lipoferum 137). Таким образом, при биинокуляции люцерны динамика численности бактерий в ризоплане менялась существенно при изменении ге-нотииа ассоциативных ризобактерий. Результаты опытов, проводимых на двух сортах люцерны, оказатась идентичными.

Для определения типа взаимоотношений между двумя микроорганизмами использовали математическую модель. Расчеты математической модели показали эффективность совместной интродукции клубеньковых бак-

тсрий с Arth.mysorens 7 и Az.lipoferum 137. Полученный коэффициент В, отражает интенсивность снижения (или роста) численности клу беньковых бактерий в присутствии ассоциативной ризобакгерии (табл.1). Так. Arth.mysorens 7 стимулировал заселение S.meliloti Т482 и S.meliloti 1760 ризопланы люцерны.

Таблица 1. Влияние АгЛ.туяогепя 7 \\Az.lipoferum 137 на поведение Б.теШоИ в ризоплане люцерны при совместной интродукции в почву (расчет по математической модели).

Варианты Коэффициент В). сутки'1 Характер воздействия

S.meliloti Т482 -0.024±0,090

S.meliloti Т482 + A.mysorens 1 0,268±0,089 стимуляция

S.meliloti T482 + Az.lipoferum 137 -0,182±0,042 ингибирование

S.meliloti TI 18 0,320±0,220

S.meliloti TI 18 + A.mysorens 7 0,280±0,132 нейтральный

S.meliloti TI 18 + Az.lipoferum 137 0,350±0,049 нейтральный

S.meliloti 1760 0,132±0.088

S.meliloti 1760 + A.mysorens 1 0,268±0,021 стимуляция

S.meliloti 1760 +Az.lipoferum 137 3,716±0,564 стимуляция

Определяли фенотипические признаки растений: высоту и массу надземной части, вес корней. Отмечено значительное увеличение массы корней при бшшокуляции. Прибавка веса в вариантах с Arth.mysorens 7 и Az.lipoferum 137 варьировала от 83 до 240% в то время, как длина корней не увеличилась. На рисунке 9 представлены данные по росту люцерны сорта «Пастбищная 88» при бшшокуляции на 20-е сутки. Биинокуляция люцерны разными штаммами S.meliloti и Az.lipoferum 137 (или Arth.mysorens 7) оказала положительное влияние на рост растешш. Наиболее удачным было сочетание Az.lipoferum 137 с S.meliloti (иггаммы 1760, 1723 и Т118) (рис.9). Кроме того, количество, цвет и топография образовавшихся клубеньков подтвердили эффективность бшшокуляции люцерны ризобакгериями.

Таким образом, показана возможность использования смешанных культур микроорганизмов, обладающих повышенной активностью и устойчивостью к факторам внешней среды, что расширяет спектр их действия и эффективность приготовленных на их основе биопрепаратов.

а О О.

н о

Ш контроль □K+Artli.mysorens 7 □ K+Az. lipo fem ir

Рисунок 9. Влияние бшшокуляции S.meliloti, Arth.mysorens 7 и Az.lipoferum 137 на рост назешюй части люцерны посевной.

З.Из\'чет<е протекторных свойств ассоциативных ризобактерий и микробов-антагонистов при контроле фитопатогенного гриба Fusarium oxvsporum

В модельных и всгеташгогагых опытах проведено изучение возможности использования ассоциативных ризобактерий в качестве агентов биоконтроля фитопатогенного гриба Р. охуярогит.

Установлено проявление антагонизма у Agr.radiobacter 57/136 по отношению к фитоштогеиному грибу охуярогшп. К концу наблюдений большая часть культуры Р.оху^ропт находилась в состоянии разветвленного мицелия (82% шлей зрения) (табл.2).

А%г.габ'юЪасгег 57/136 проявил высокую литическую активность по отношению к фузариуму. Лнзирующийся мицелий и его фрагменты доминировали на 26.3% и 26.2% полей зрения соответственно. После суточной инкубации Agr.radiobacter 57! 136 со спорами /'".охухрогшп в почве проведенная оценка доминирующего состояши фитопатогена показала задержку развития фитопатогенного гриба. Так, около 40% полей зрения были заняты непро-росшими спорами К охухротт, а на 36.2% полей зрения фитопатогенный микроорганизм находился на стадии ростовых трубок.

Таблица 2. Влияние бактерий на выживание мицелия Г. охуярогит в почве.

Доминирующее состояние Р-охуярогит

Варианты на мембранных фильтрах. % полей зрения

Мицелий и Лизирующийся Фрагменты

гифы мицелии мицелия

Внесение в почву

I'". охухрогшп (К) 100.0 0.0 0.0

После 5-суточной инкубации

К.охухрогит (К) 82,0 16.3 1.7

К+ ВасШия 5/7. 87/36-123 67.9 24.1 8.0

К+ВасШиз ярМ (ЪП6) 71.4 17.6 11.0

К+ ВасШи.ч 5р. 1/323 25.0 53.5 21.5

К+ ,^гоЪас1епит 47.5 26.3 26.2

гасИоЬааег 57/136

НСРо.95 9.5 5,6 4.8

В экспериментах с огурцом установлено снижение количества фито-патогенного гриба в ризосфере (в два раза) в присутствии культур микробов-антагонистов уже к первому сроку7 наблюдений (рис. 10).

•в*

О «

ё о

Сутки

■Е.охузрогшп - о - -К+В.зиЫШв

—-Ж — К+£г ГеНеич

Рисунок 10. Влияние бактершьантогонистов на приживаемость Р. охучрогит в ризосфере опрца.

Достоверное снижение численности гриба к концу- наблюдений отмечено в присутствии сметанной культуры St.felleus и Bac.subtilis (рис.9). При интродукции ассоциаций Arth.mysorens 7, Agr.radiobacter 10 и Bac.subtilis и St.felleus отмечено подавление численности F.oxyspontm в ризосфере огурца с 2,3-Ю3 до 1.0 КОЕ/см2 м.ф.. Это свидетельствует о проявлении синергизма ризобактерий микробами-антагонистами. В ризоплане огурца интродукция ассоциативных ризобактерий снизила количество F.oxysporum на 2 порядка.

В результате проведенных исследований установлено фунгистатиче-ское влияние Az.lipofentm 137 и Fla\'obacterium sp.L-30 на фузариум в ризоплане oiypua Интродукция микробов-антагонистов не влияла на заселение корней фитопатогенным микроорганизмом однако, в варианте с ассоциацией B.subtilis и St.felleus не зарегистрировано растений, пораженных фузариозом (табл.3). Обнаружено проявление синергизма при взаимодействии Az.lipofervtn 137 с мзифобами-антагонистами по отношению к Fusarium ох-ysporwn в ризоплане огурца.

Таблица 3. Влияние ризобактерий на массу растений и поражаемость огурца фузариозом, выращенного на инфекционном фоне.

Варианты Bcc растений, г Поражегше вегетирующих растений

Период инкубации, сутки

5 13 20 27

F.oxysporum (К) 1,92 - + + +

К +Agr.radiobacter 10 1,84 - - + +

К + Arth.mysorens 1 1.50* — - + +

К + Az.lipofentm 137 2.38* - - + +

К + Flavobalerium .y?.L-30 2,42* — - + +

К + B.subtilis+St.felleus 1,80 — — — —

+ Agr. radiobacter 10 2.04 + + + +

+ Arth.mysorens 7 4,60* — - - -

+ Az.lipoferum 137 2,88* — - - -

+ Flm'obaterium .v^.L-30 2.10 — - + +

HCP 0.9 5 0.36

+ - наличие перетяжек на корнях или потемнение корневой шейки - - отсутствие поражения; * - различия между вариантами достоверны.

Присутствие микробов-антагонистов не оказало ростостиму.тирующего влияния на расташя. В вариантах с ассоциативными ризобактериями, отмечен значительный прирост наземной части (табл.3). В вариантах с Agr.radiobac.ter 10 и . \rih.mysorens 1 наблюдалось снижение зеленой массы инфицированных растений. Максимальный прирост зеленой массы и отсутствие поражения Р. оху.чрогит во время эксперимента отмечены в вариантах

'*B.sitbtilis + St.felleus + Az.lipoferum 137" u "B.subtilis + St.felleus + Arth.mysorens 7". Это свидетельствует о положительном эффекте совместной инокуляции растений этими микроорганизмами.

Таким образом, установлено, что исследуемые ризобактерии оказывают фунгистатическое влияние на фитопатогенный гриб F.oxvsporum в почве и на корнях растений. Выявлена возможность совместного применения препаратов на основе Az.lipoferum 137, Flavobacterium sp.L-30, St.felleus и B.subtilis для стимуляции развития растений и эффективной защиты от фи-топатогенов.

ВЫВОДЫ

1. Выявлены закономерности в динамике численности и взаимоотношениях микроорганизмов, входящих в состав различных биопрепаратов: агрофил, флавобактерин. азоризин, мизорин, ризоторфин, алирин Б, алирин С, - и фи-топатогенного гриба Fusarium oxysporum в почве и зоне корней растений с момента интродукции в почву.

2. Разработана модификация метода мембранных фильтров для моделирования поведения микробов-интродуцентов в зоне корней растений на начальных этапах онтогенеза при интродукции различных микроорганизмов.

3. Изучена динамика численности диазотрофов в зависимости от ряда экологических факторов (влажность, pH, окультурсшюсть почвы). Сравнительный'анализ показал преобладающую роль влажности почвы в приживаемости интродуцируемых бактерий. Оптимальной влажностью является 60% от ППВ. Наряду с этим Flcn'obacterium sp. L-30 способны сохранять высокую численность при пониженной влажности, а Az. lipoferum 137 - в условиях переувлажнения почв. Установлено, что исследуемые экологические факторы оказывают наибольшее воздействие на приживаемость бактерий-ингродуцентов в почве, чем в зоне корней растений.

4. Показана существенная роль формы биопрепарата на приживаемость интродуцируемых микроорганизмов. Так, Ägrobacterium radiobacter 57/136 сохранял высокую численность при использовании торфяной формы агрофо-ра по сравнению с жидкой. Установлено, что Agr. radiobacter способен поддерживать высокую численность в перлите, который может иметь хорошие перспективы в качестве носителя в биопрепаратах.

5. Выявлены различия в поведении диазотрофов и ризобий в ризосфере и ризоплане люцерны посевной при совместной интродукции. Показана возможность регулирования численности клубеньковых бактерий в ризосфере макросимбнонгга путём подбора коинокулянта.

6. Установлено, что исследованные штаммы ризобактернй оказывают фунгистатическое воздействие на фитопатогенный гриб Fusarium oxysporum в почве и на корнях растений.

7. Показана возможность сочетания биопрепаратов различного действия для повышения их эффективности. При совместном внесении ризобактеркй Flmobacterium sp. L-30 и Az. lipoferitm 137 с микробами-антагонистами проявили синергизм с Bacillus subtilis, Streptomyces felleus в фунгистатическом действии на Fusarium oxvsporum в ризосфере огурца.

Список работ, опубликованных по теме диссертации.

1. Лагутина Т.М., Тимофеева С.В., Нуйкина И.Р. Моделирование поведения микробов-интодуцентов в почве и на корнях растений.// Тезисы докладов конф. «Интродукция микроорганизмов в окружающую среду»,- М,- 1994,-С.62.

2. Lagutina Т., Vorobvov N., Timofeeva S.; Kulal Т. Modeling of behaviour of microorganisms introduced into soil and plant roots for forecasting their survival.// Matlierials of Intern, conf. ''Biotechnology - St.Petersburg'94".-St. Petersburg.- 1994.-P.138.

3.Lagutina T.M., Timofeeva S.V., Vorobyov N.I. New approach to modeling the initialstage of a legume-rhizobial symbiosis formation.// 10-th In-tern.Congress of N-fixation.- St.Peterburg.- 1995.-P.243.

4.Лагутина T.M., Тимофеева C.B. Моделирование поведения микро-бов-интродуцентов в почве и на корнях растений.// Тезисы докладов 2-го съезда Докучаевсого общества почвоведов (27-30 июля).- Санкт-Петербург. -1996,- С.269-270.

5. Timofeeva S.V., Kalko G.V.. Lagutina Т.М., Ivanova I.A., Novikova I.I. The modeling of interaction between associative diazotrophs, the antagonistic microbe and the Eusarium oxysporum in tlie root zone of cucumber.// materials of Intern. Conf. "Ecological Effects of Microorganism Action", (October 1-4), Vilnius, Lithuania.- 1997,-P.312-316.

6. Тимофеева C.B., Лагутина T.M., Кожемяков А.П. Моделирование воздействия агроэкологических факторов на приживаемость интродуцируе-мых бактерий в почве и зоне корней растений.// Доклады РАСХН,- М,- 1999.-№6,- С. 19-22.

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Тимофеева, Светлана Владимировна

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1.Использование микробных препаратов для повышения продуктивности сельскохозяйственных культур.

1.2.Развитие микроорганизмов-интродуцентов в почве и ризосфере растений.

1.3. Методы изучения экофизиологии интродуцируемых в ризосферу микроорганизмов.

1.4. Математический анализ динамики численности микроорганизмов-интродуцентов для оценки и прогнозирования эффективности их интродукции.

2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

2.1. Микроорганизмы.

2.2. Среды, условия культивирования микроорганизмов.

2.3. Сельскохозяйственные растения.

2.4.Модельные опыты.

2.5. Вегетационные опыты.

2.4. Статистическая обработка.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.

3. Влияние абиотических факторов на приживаемость интродуцируемых бактерий в почве.

3.1. Влияние влажности и окультуренности почвы на динамику численности ассоциативных ризобактерий.

3.2. Влияние кислотности почв на приживаемость ассоциативных ризобактерий.

3.3. Динамика численности А^.гасИоЬаМег 57/136 в зависимости от формы и способа внесения биопрепарата агрофор.

4. Влияние генотипа растений и клубеньковых бактерий на динамику численности ассоциативных ризобактерий.

4.1. Динамика численности ассоциативных ризобактерий в зоне корней различных растений.

4.2. Приживаемость ризобактерий (Az.lipoferum 137 и Arth.mysorens 7)при коинокуляции с клубеньковыми бактериями в зоне корней люцерны.

5. Изучение протекторных свойств ассоциативных ризобактерий и микробов-антагонистов при контроле фитопатогенного гриба Fusarium oxysporum.

5.1. Влияние Agr. radiobacter 57/136 на морфо-физиологическое развитие F.oxysporum в почве.

5.2. Изучение контроля Fusarium oxysporum в зоне корней огурца ассоциативными ризобактериями и микробами-антагонистами.

5.3. Влияние Fusarium oxysporum и микробов-антагонистов на динамику численности ассоциативных ризобактерий в ризосфере огурца.

ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Исследование роли биотических и абиотических факторов в приживаемости интродуцируемых бактерий на первых этапах онтогенеза растений"

Актуальность темы. Восстановление и повышение плодородия почвы, рост продуктивности культурных растений - одна из задач сельскохозяйственного производства. Однако ее осуществление в основном за счет развития технических ресурсов ограничено. Это связано с увеличением материальных и энергетических затрат на производство экологически чистой продукции (Дудкин и др., 1998). Негативные для растений результаты снижения уровня химизации сельского хозяйства могут быть компенсированы за счет мобилизации биологических факторов, которые также оптимальны для окружающей среды. Наиболее реальным и перспективным способом для направленного регулирования микробиологических процессов в почве является интродукция отселектированных микроорганизмов, обладающих полезными свойствами. Они способны осуществлять целый ряд функций: улучшение минерального питания растений, фиксация атмосферного азота, стимуляция роста растений, подавление фитопатоген-ной микрофлоры, повышение устойчивости растений к стрессам (Кожемяков, Тихонович, 1999; Т1к1юпоУ1сЬ, Кхуегшакоу, 1997; ВазЬап, Ьеуапопу, 1990; Вос1-с1еу, ОоЬегетег, 1982). При этом важным моментом является формирование фи-тобактериальных ассоциаций, способных к взаимовыгодному массо-энергообмену (Умаров, 1986). Примером может служить ризоторфин, применяемый для повышения урожайности бобовых культур. Они изготавливаются на основе клубеньковых бактерий, которые являются эндосимбионтами бобовых растений (Петербургский, 1979). Бобовые культуры составляют около 10% от общего количества выращиваемых сельскохозяйственных растений и их доля и ассортимент постепенно возрастают. Ассоциативные азотфиксирующие ризо-бактерии способны осуществлять взаимосвязь с практически любым растением.

Важным вопросом эффективности возникновения ассоциации между растениями и интродуцированными азотфиксирующими ризосферными бактериями является приживаемость их в почве до момента образования корневой системы растений и заселение растущих корней. Для обеспечения контроля этих процессов необходимо иметь научно-обоснованную информацию о влиянии агроэко-логических факторов на микроорганизмы в естественных условиях с момента их интродукции в почву. Сведений такого рода крайне мало (Родынкж, 1991; Са-дыков, 1980; Белимов и др., 1994). Отчасти это объясняется методическими трудностями, связанными с наблюдением за бактериями-интродуцентами на ранних сроках пребывания их в почве. С другой стороны, значение этих данных недооценивается исследователями, особенно, если проводятся длительные наблюдения за приживаемостью азотфиксирующих ассоциативных ризосферных бактерий на корнях сельскохозяйственных культур.

Одним из перспективных методов, позволяющих наблюдать за поведением микроорганизмов в почве, является метод мембранных фильтров. Он с успехом применяется для изучения экологии почвообитающих микроорганизмов (Лагутина, 1992; Лабутова, 1990; Шахназарова, 2000). С помощью этого метода можно проследить за динамикой численности микроорганизмов, интродуцируе-мых в почву, а также за их реакцией на изменение ряда агроэкологических факторов, важных для рода растений. Использование метода перспективно и для изучения выживания эффективных штаммов ризобактерий на ранних этапах онтогенеза растений. Это позволяет научно обоснованно подойти к испытанию и отбору интродуцентов биопрепаратов в естественных экологических условиях.

Цель и задачи исследований. Цель работы - изучение динамики численности ризобактерий-интродуцентов в почве и заселение ими корней на ранних этапах онтогенеза растений в условиях воздействия различных биотических и абиотических факторов;

В связи с этим были определены следующие задачи: - разработка новой модификации метода мембранных фильтров применительно к изучению заселения ризобактериями ризосферы и ризопланы растений на первых этапах онтогенеза;

- анализ выживания ассоциативных ризобактерий, интродуцированных в почву, под влиянием ряда агроэкологических факторов (кислотность, влажность, окультуренность почв);

- сравнительное изучение динамики численности ассоциативных ризобактерий в почве и зоне корней растений;

- оценка взаимовлияния симбиотических и ассоциативных ризобактерий в ризосфере и ризоплане;

- поиск эффективного сочетания биопрепаратов на основе ассоциативных ризобактерий и микробов-антагонистов с целью их совместного применения.

Впервые с помощью экспресс-анализа на мембранных фильтрах проведена сравнительная количественная оценка влияния ряда агроэкологических факторов на динамику численности микроорганизмов-интродуцентов.

Предложена методика быстрого отбора интродуцента для эффективного применения биопрепаратов для ряда сельскохозяйственных культур.

Подтверждено наличие антагонистического действия ризобактерий по отношению возбудителю фузариозного увядания - Fusarium oxysporum.

Выявлены сочетания биопрепаратов, содержащих азотфиксирующие ри-зобактерии, с биопрепаратами защитного действия, которые обеспечивают максимальный протекторный эффект. При их использовании наблюдается одновременное снижение заболеваемости и улучшение роста растений.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение Диссертация по теме "Микробиология", Тимофеева, Светлана Владимировна

110 выводы

1. Выявлены закономерности в динамике численности и взаимоотношениях микроорганизмов, входящих в состав различных биопрепаратов: агрофил, флавобактерин, азоризин, мизорин, ризоторфин, алирин Б, алирин С, - и фитопатогенного гриба Fusarium oxysporum в почве и зоне корней растений с момента интродукции в почву.

3. Изучена динамика численности диазотрофов в зависимости от ряда экологических факторов (влажность, pH, окультуренность почвы). Сравнительный анализ показал преобладающую роль влажности почвы в приживаемости интродуцируемых бактерий. Оптимальной влажностью является 60% от 1111В. Наряду с этим Flavobacterium sp. L-30 способны сохранять высокую численность при пониженной влажности, а Az. lipoferum 137 - в условиях переувлажнения почв. Установлено, что исследуемые экологические факторы оказывают наибольшее воздействие на приживаемость бактерий-интродуцентов в почве, чем в зоне корней растений.

4. Показана существенная роль формы биопрепарата на приживаемость интродуцируемых микроорганизмов. Так, Agrobacterium radiobacter 57/136 сохранял высокую численность при использовании торфяной формы агрофора по сравнению с жидкой. Установлено, что Agr. radiobacter способен поддерживать высокую численность в перлите, который может иметь хорошие перспективы в качестве носителя в биопрепаратах.

5. Выявлены различия в поведении диазотрофов и ризобий в ризосфере и ри-зоплане люцерны посевной при совместной интродукции. Показана возможность регулирования численности клубеньковых бактерий в ризосфере макросимбионта путём подбора коинокулянта.

Ill

6. Установлено, что исследованные штаммы ризобактерий оказывают фунги-статическое воздействие на фитопатогенный гриб Fusarium oxysporum в почве и на корнях растений.

7. Показана возможность сочетания биопрепаратов различного действия для повышения их эффективности. При совместном внесении ризобактерий Flavobac-terium sp. L-30 и Az. lipoferum 137 с микробами-антагонистами проявили синергизм с Bacillus subtilis, Streptomyces felleus в фунгистатическом действии на Fusarium oxysporum в ризосфере огурца.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Тимофеева, Светлана Владимировна, Санкт-Петербург

1. Азарова Т.С. Корневые выделения злаковых и бобовых культур и их влияние на состав модельного микробоценоза ризосферы.// Автореф. дис.к.б.н.-Л.-1986.- 17 С.

2. Алексеева Е.Г., Алисова С.М. Отзывчивость различных сортов яровых пшениц на инокуляцию корневыми диазотрофами.// Конф. Микроорганизмы в сельском хозяйстве (29-30 июня 1988 г.), Кишинев.- 1988 .- С.108-109

3. Арзуманян В.П., Сахарова З.В. Влияние способа культивирования интроду-цента на азотфиксирующую активность в прикорневой зоне овса.// Конф. Интродукция микроорганизмов в окружающую среду (17-19 мая).- М.- 1994-С.11.

4. Аристовская Т.В. Микробиология процессов почвообразования.// Л., Наука.-1980.- 187 С.

5. Аристовская Т.В., Тен Хак Мун, Ефремова Т.Н. О методических подходах к изучению количественных изменений микрофлоры почвы.// Почвоведение 1977.-№4.- С.99-107

6. Аристовская Т.В., Худякова Ю.А. Методы изучения микрофлоры почв и ее жизнедеятельность.// "Методы стационарного изучения почв".- М.: Наука.-1997.- С.241-286

7. Аронштам А.А. Генетические основы вирулентности бактерий рода Agro-bacterium.// Труды ВНИИСХМ.- Л.- 1981.- т. 51.- С. 109-120

8. Бабьева И.П., Зенова Г.М. Биология почв.// Из-во МГУ.- М.- 1983.- С.149

9. Бабьева И.П., Моавад Э., Марченко А.И. Азотфиксация в совместных культурах липомицетов с бактериями.// Микробиология 1977.- т. 46.- вып. 2.-С.270

10. Ю.Базилинская М.В. Биоудобрения.// М.- 1983.- 128 С.

11. П.Баландро Х.П., Доммерг И.Р., Умаров М.М. Определение несимбиотической азотфиксации в ризосфере риса ацетиленовым методом.// В кн.: Повышение плодородия почв рисовых полей.- М.: Наука.- 1976.- С. 107

12. Белимов A.A. Эффективность инокуляции ячменя смешанными культурами диазотрофов.// Автореф. дис. к.б.н.- JL- 1990.- 19 С.

13. И.Белимов A.A., Кожемяков А.П. Смешанные культуры азотфиксирующих бактерий и перспективы их использования в земледелии.// Сельскохозяйственная биология.- сер. биол. растений М.: Колос.- 1992.-№5.- С.77-87

14. Белимов A.A., Кунакова A.M., Груздева Е.В., Хамова О.Ф. и др. Повышение устойчивости растений к засухе при инокуляции ассоциативными азотфик-саторами.// 9 Бах. Коллоквиум по азотфиксации (24-26 января 1995), М.-1995.- С. 23-25

15. Белимов A.A., Поставская С.М., Хамова О.Ф и др. Приживаемость и эффективность корневых диазотрофов при инокуляции ячменя в зависимости от температуры и влажности почвы.// Микробиология 1994.- вып. 5.-. 900-908

16. Берестецкий O.A., Васюк Л.Ф., Элисашвили Т.А., Плющ А.Е. Азотфикси-рующая активность и эффективность спирилл, обитающих на корнях растений.//Микробиология 1985.- т. 54.- №6.- С.1002-1007.

17. Берестецкий O.A., Швытов И.А., Кравченко JI.B. Имитационное моделирование ассоциативной азотфиксации в ризосфере небобовых культур.// Доклады ВАСХНИЛ.- 1986.- №7.- С. 6-7.

18. Бобров A.A. Биологическая активность дерново-подзолистых почв разной степени окультуренности.// Микроорганизмы как компонент биогеоценоза, Алма-Ата.- 1982.- С.97-98

19. Борисова Г.А. Влияние регуляторов роста и бактериальных препаратов на морфофизиологические особенности и продуктивность проса.// Автореф. дис.к.б.н.- М.- 1999.- 23 С.

20. Брук М.Х., Цвирко Э.А. Влияние различных приемов основной обработки на микрофлору и азотфиксирующую активность почвы.// Микроорганизмы, их роль в плодородии почвы и охране окружающей среды, М.- 1984.- С.21-26

21. Васецкая М.Н., Жук О.М., Кратенко В.П. Экологическая защита зерновых культур от болезней в Черноземье.// Мат. ВПП совещ., Краснодар.- 1994.-С.23-25

22. Вердичева Г.К., Соколов М.С., Галиулин Р.В. Экологически опасные последствия применения пестицидов и пути их снижения.// Экспериментальная экология.- М.: Наука 1991.- С. 166-200

23. Верниченко А.Ю., Слышкина Е.Г., Паников Н.С. Эффективность бактеризации люцерны в зависимости от способа культивирования инокулята.// Конф. Микроорганизмы в сельском хозяйстве (29-30 июня 1988 г.), Кишинев.- 1988

24. Веселов С.Ю., Иванова Т.Н., Саминян М.В., Мелентьев А.И. Исследования цитокининов, продуцируемых ризосферными микроорганизмами.// Прикл. Биохимия и микробиология.- 1998.- т.34.- №2,- С. 175-179

25. Витковская С.Е., Дричко В.Ф., Воробейков Г.А., Мирюгина Т.А. Влияние инокуляции семян гороха и ячменя клубеньковыми бактериями в комплексе с ассоциативными диазотрофами на поступление в растения фосфора-33 и сурьмы-125.//Агрохимия 1996.- №3.- С.49-52

26. Волкогон В.В., Лемешко C.B., Мамгур А.Е., Волкогон Е.И. Особенности формирования ассоциаций «злаковые травы диазотрофы».// Тез. докл. Бах. Коллоквиума (24-27 января 1995).- М.-Пущино.- 1995.- 125 С.

27. Волкогон В.В., Хальчицкий А.Е., Миняйло В.Г., Онищенко Л.И., Лемешко C.B. Азотфиксирующие микроорганизмы корневой зоны райграса и костреца.// Микробиол. Журнал.-1991.- т.53.- №6.- .3-10

28. Волоскова М.М., Сабельникова В.И. Влияние бактеризации на синтез веществ цитокининовой природы в клубеньках люцерны и сои.// Конф. Микроорганизмы в сельском хозяйстве (29-30 июня 1988 г.), Кишинев.- 1988.-С.71

29. Галкин М.А., Харитонов A.B., Гибель И.Б., Жулин И.Б., Соколов О.И. Возможная сигнальная роль белков корней пшеницы в процессах взаимодействия пшеницы с микроорганизмами рода Azospirillum.// Микробиология 1989.- С.34-36

30. Гвоздяк Р.И. Микроорганизмы, вредители сельскохозяйственных растений.// Киев, Наукова Думка.- 1989.- С. 168-170

31. Гельцер Ю.Г. Свободноживущие Protozoa как компонент почвенной биоты.// Почвоведение 1991.- №8.- С. 66-79

32. Гордеева Т.Х. Экологическая оценка влияния агротехнических мероприятий на микробоценоз ризосферы озимой ржи.// Автореф. диск.б.н.- С.Петербург,- 1998.- 16 С.

33. Громов Б.В., Павленко Г.В. Экология бактерий.// Л.- 1989.- 246 С.

34. Джалилов Ф.С., Корсак И.В., Перебитюк А.Н. Влияние биопрепарата ризо-план на рост и развитие капусты и ее пораженность бактериальными болезнями.// Конф. Интродукция микроорганизмов в окружающую среду (17-19 мая).- М.- 1994.- С.31-32

35. Дмитриев Е.А. Об использовании дисперсионного анализа при изучении пространственной вариабельности свойств почв.// Закономерности пространственного варьирования свойств почв и информационно-статистические методы их изучения, М.- 1970.- С.81-95

36. Дорофеев А.Г., Паников Н.С. Динамика отмирания голодающих микроорганизмов в зависимости от предшествующей скорости роста.// Микробиология 1991.- т. 60.- вып. 5.- С.814-821

37. Дорофеев А.Г., Паников Н.С. Эндогенное дыхание и оборот клеточных компонентов в растущей и не растущей культуре Pseudomonas fluorescents.// Микробиология 1995.- т.64.- вып. 5.- С.601-609

38. Доспехов Б.А. Методика полевого опыта с основами статистической обработки результатов исследований.// М. Агропромиздат.- 1985.- 351 С.

39. Дроздов-Тихомиров JI.H., Рахимова Н.Т. Математическая модель переходных процессов в хемостатной культуре микроорганизмов.// Молекулярн. биология.- 1985.- №3.- С. 751-759

40. Дубенская Г.И. Минеральное питание, рост и продуктивность эфиромаслич-ных растений семейства Губоцветных при обработке бактериальными штаммами.// Автореф. дис.к.б.н.- С.-Петербург.- 1999.- 16 С.

41. Дудкин В.М., Акименко А.С., Дудкин И.В., Брежнев К.Е. Эффективность факторов биологизации земледелия в лесостепи центрального Черноземья.// Доклады РАСХН.- №1.- 1998.- С.25-27

42. Емцев В.Т. О симбиотических взаимоотношениях Clostridium pasterianum с Bac.closteroides.//Микробиология.- 1986.- №4.- С.529-535

43. Ефимов В.Н., Воробейков Г.А., Патил А.Б., Мирюгина Т.А. Азотное питание и продуктивность гороха и кормовых бобов при обработке семян комплексом бактериальных препаратов.// Агрохимия 1996.- №1.- С.10-15

44. Захарова Н.Г., Алимова Ф.К., Егоров С.Ю. Скрининг микроорганизмов, перспективных для биотехнологии.// Конф. Интродукция микроорганизмов в окружающую среду (17-19 мая).- М.- 1994.- С.36-37

45. Иерусалимский Н.Д. Основы физиологии микробов.// М.- 1963.- 244 С.51 .Иерусалимский Н.Д. Принципы регулирования роста микроорганизмов.// Управляемый биосинтез.- М.: Наука.- 1966.- С 5-18

46. Кадыров P.M., Хайлова Г.Ф. Бактериальный азотфиксирующий комплекс Bacillus macerans-Rhizobium meliloti: Биологическая фиксация молекулярного азота.// Мат. Все. Баховского коллоквиума.- Чернигов (сентябрь-октябрь 1980).- Киев.- 1983.- С.112-113

47. Калмыкова H.A. Особенности формирования микробных ценозов почв в условиях интенсивного земледелия.// Микробиология в с/х, 2-я респ. Конф. (45 июня), Кишинев.-1991.- С. 22

48. Калько Г.В. Биологическое обоснование создания биопрепаратов эффективных в отношении фузариозных заболеваний сельскохозяйственных культур.//Автореф. дисс.к.б.н.- С.Петербург.- 1996.- 16 С.

49. Кларксон Д. Транспорт ионов и структура растительной клетки.// М., Мир.-1978.-386 С.

50. Кожевин П.А. Микробные популяции в природе.// М., Из-во МГУ.- 1989.174 С.

51. Кожемяков А.П. Возможность повышения продуктивности растений за счет использования биопрепаратов азотфиксирующих микроорганизмов.// «Микробиология в сельском хозяйстве» (2 Републик. Конф. 4-5 июля 1991 г), Кишинев.- 1991.- С.25

52. Кожемяков А.П. Продуктивность азотфиксации в агроценозах.// Микробиол. Журнал.- 1997.- т. 59.- №4.- С.22-28

53. Кожемяков А.П., Афанасьева JI.M. Влияние производственных штаммов клубеньковых бактерий на белковую продуктивность бобовых культур.// Бюлл. ВНИИСХМ.- 1986.- т.43.- С. 15-18

54. Кожемяков А.П., Белимов A.A. Динамика НГА и продуктивность ячменя, инокулированного корневыми диазотрофами.// Бюлл. ВНИИСХМ.- №5.-С.26-30

55. Кожемяков А.П., Белимов A.A. Эффективность препаратов корневых диазо-трофов при бактеризации ярового рапса.// Агрохимия.- 1994.- №7-8.- С.62-67

56. Кожемяков А.П., Тихонович И.А. Использование инокулянтов бобовых и биопрепаратов комплексного действия в сельском хозяйстве.// Доклады РАСХН.- 1999.- №6.- С.7-10

57. Кожемяков А.П., Хоанг Хай Изучение эффективности и основных механизмов действия землеудобряющих биопрепаратов на растения в длительных опытах географической сети.// В сб. «Современные проблемы опытного дела», С.-Пб.- 2000.- и. 2.- С. 180-185

58. Кононков Ф.П., Умаров М.М., Мирчинк Т.Г. Азотфиксирующие ассоциации грибов с бактериями.// Микробиология 1979.- №4.- С.734-737

59. Кравченко JI.B. Роль корневых экзометаболитов в интеграции микроорганизмов с растениями.// Автореф. дисс. .д.б.н.- М.- 2000.- 51 С.

60. Кравченко JI.B. Энергетические затраты на ассоциативную азотфиксацию и их обеспечение в ризосфере небобовых растений.// В сб.: Биологический азот в с/х СССР.- М.- 1989.- С.99-109

61. Кравченко JI.B., Боровков A.B., Пишкрил 3. Возможность биосинтеза ауксинов ассоциативными азотфиксаторами в ризосфере пшеницы.// Микробиология 1991.- т. 60.- №5.- С. 927-931

62. Красильников Н.Ф. Микроорганизмы почвы и высшие растения.// Из-во АН СССР, М.- 1958.- 463 С.

63. Кретович B.JI. Биохимия усвоения азота воздуха растениями.// М.: 1994.-168 С.

64. Круглов Ю.В. Микрофлора почвы и пестициды.// М.- Агропромиздат.- 1991.128 С.

65. Кунакова A.M. Взаимодействие ассоциативных ризобактерий с растениями при различных агроэкологических условиях.// Автореф. дисс.к.б.н.-С.Петербург.- 1998.- 18 С.

66. Лабутова Н.М. Метод скрининга бактерий-антагонистов к почвообитающим фитопатогенным грибам (на примере Verticillium dahlae Kleb.).// Автореф. дисс. к.б.н.- Л.- 1990.- 18 С.

67. Лагутина Т.М., Воробьев Н.И., Камардин Н.И. Методические указания по применению мембранных фильтров для изучения экологии микромицетов в почве (на примере фитопатогенного гриба Verticillum dahlae kleb).// С.Петербург.- 1992.- 37 С.

68. Лагутина Т.М., Кирцидели И.Ю., Воробьев Н.И. Особенности взаимоотношений фитопатогена Fusarium oxysporum (Schleht.) snyd. et Hans. С микро-мицетами в почве.// Труды ВНИИСХМ, Л.- 1990.- С. 111-120

69. Леонтьев А.К. Определение пестроты почвенного плодородия опытной делянки и участка и ее использование в агрохимических исследованиях.// Почвоведение.- 1974.- №2.- С.45-51

70. Лиепа И.Я. Математические методы в биологических исследованиях. Факторный и компонентный анализы.// Рига.- 1980.- 103 С.

71. Лихолат Т.В. Обработка семян ризосферными диазотрофами способна снизить стресс у проростков пшеницы.// Тез. докл. III Съезда Всерос. общества физиологов растений, С.-Петербург.- 1993.- №4.- С. 654

72. Мамитко A.B., Мамитко В.Р. Возбужденные микробные ассоциации как один из показателей антропогенного воздействия.// "Стационарные исследования природных процессов и качества среды".- Иркутск.- 1983.- С.42-52

73. Меленьтьев А.И., Кузьмина Л.Ю.// Тез. докл. Всесоюз. конф. «Микроорганизмы в с/х», Пущино.- 1992.- С. 132

74. Методические указания по идентификации неспоровых бактерий.// ВИЗР.-СЛетербург Пушкин.- 1985.- С.16-23

75. Миронов О.Г. К вопросу об интродукции микроорганизмов во внешнюю среду.// Конф. Интродукция микроорганизмов в окружающую среду (17-19 мая).- М.- 1994.- С.69

76. Мирюгина Т.А. Повышение продуктивности горохово-злаковых смесей путем инокуляции семян клубеньковыми бактериями в комплексе с ассоциативными и свободноживущими диазотрофами.// Автореф. дис. кан. с-х н.-С.-Пб., 1997.-21 С.

77. Мишустин E.H., Емцев В.Г. //Микробиология 1970.- 271 С.

78. Мишустин E.H., Шильникова В.К. Клубеньковые бактерии и инокуляцион-ный процесс.// М.: Наука.- 1973.- 288 С.

79. Мордухова Е.А., Кочетков В.В., Поликарпова Ф.Я., Воронин A.M. синтез ин-долил-3-уксусной кислоты ризосферными псевдомонадами: влияние плазмид биодеградации нафталина.// Прикл. Биохимия и микробиология, 1998.- т. 34.-№3.- С.287-292

80. Мошкова М.В., Умаров М.М. Влияние растений на активность азотфиксации в ризосфере.// Почвоведение 1979.- №6.- С.110

81. Музыченко JI.A. Принципы синтеза математических моделей.// Микробиол. Промышленность.- 1974.- №2.- С. 3-6

82. Муромцев Г.С., Чкаников Д.И., Кулаева О.Н., Гамбург К.З. Основы химической регуляции роста и продуктивности растений.// Агропромиздат, М.-1987.- С.230-232

83. Муронец Е.М., Белавина Н.В., Митронова Т.Н., Каменева C.B. Продукция ИУК у мутантов сапрофитной агробактерии Agrobacterium radiobacter с изменениями в азотном метаболизме.// 9 Бах. Коллоквиум по азотфиксации (24-26 января, 1995), М.- 1995.- С. 125

84. Нерпин C.B., Чудновский А.Ф. Физика почвы.// М., Наука.- 1967.- 583 С.

85. Нетис И.Т. Влияние азотфиксирующей бактерии Flavobacterium L. На урожай и качество зерна озимой пшеницы.// Агрохимия 1989.- №3.- С. 56-60

86. Никитина З.И. Микробиологический мониторинг наземных экосистем.// Новосибирск.- Наука.- 1991,- С.3-169

87. Никитина З.И., Мамитко A.B., Мамитко В.Р. Мониторинг загрязнения наземных экосистем по микробиологическим показателям.// География и природные ресурсы 1980.- №4.- С.52-60

88. Новикова Н.С. Бактериальная флора надземных органов растений.// Киев.-1963.- 88 С.

89. Основные микробиологические и биохимические методы исследования почвы (методические рекомендации).// Под ред. Возняковской Ю.М., Л.- 1987.- 46 С.

90. Паников Н.С. Кинетика роста микроорганизмов.// М.- 1992.- 311 С.

91. Паников Н.С., Горбатенко А.Ю., Звягинцев Д.Г. Пульсационный характер роста микроорганизмов в почве и его природа.// Вестник МГУ.- сер. 17.- почвоведение 1988.-№1.- С. 34-39.

92. Парийская А.Н., Кливенская И.П. Распространение в природе и возможные пути эволюции азотфиксирующего симбиоза.// Успехи микробиологии 1979.- вып. 14.- С.124

93. Патил А.Б. Влияние комплексной инокуляции семян бактериальными препаратами на минеральное питание и продуктивность зернобобовых культур.//Автореф. дис. кан. с-хн.- С.-Пб., 1992.- 15 С.

94. Перт С.Д. Основы культивирования микроорганизмов и клеток.- М.: Мир.- 1978.- 331 С.

95. Петербургский A.B. Круговорот и баланс питательных веществ в земледелии.// М., Наука 1979.- С.47

96. Печуркин Н.С. Популяционная микробиология.// Новосибирск.- 1978.227 С.

97. Печуркин Н., Брильков A.B., Марченкова Г.В. Популяционные аспекты биотехнологии.// Новосибирск, Наука.- 1990.- С. 7

98. Печуркин Н.С., Терсков И.А. Анализ кинетики роста и эволюции микробных популяций.//Новосибирск.- 1975.- 215 С.

99. Полупанов B.C., Былинский А.Ф. Динамика выщелачивания штаммом Corynebacterium sp. К-С7 кремния, доступного для растений.// «Микробиология в сельском хозяйстве» (2 Републик. Конф. 4-5 июля 1991 г), Кишинев.-1991.- С. 34

100. Проворов H.A. Происхождение и эволюция бобово-ризобиального симбиоза.// Генетика.- сер. Биологич.- 1991.- №1.- С.77-87

101. Проворов H.A., Симаров Б.В. Генетический контроль хозяйской специфичности клубеньковых бактерий.// Успехи соврем, генетики.- М.- 1987.-№14.- С. 90-115

102. Родынюк Н.С.// Биологическая фиксация азота.- Новосибирск, Наука.-1991.- С.142

103. Садыков Б.Ф.// Микробиология 1980.- т.49.- вып. 3.- С.554

104. Садыков Б.Ф., Умаров М.М. Обнаружение азотфиксирующей активности в филлосфере растений.// Микробиология 1980.- т.49.- вып.1.- С. 146

105. Симаров Б.В., Аронштамм A.A., Новикова Н.И. Генетические основы селекции клубеньковых бактерий.// JL- 1990.- 192 С.

106. Соколова Г.К., Каламтур О.В., Чумаков М.И. Анализ прикрепления аг-робактерий к корням пшеницы и риса.// Микробиология 1999.- т. 68.- №1.- С. 76-82

107. Спивак С.И. Информативность кинетического эксперимента и обратной задачи химической и биологической кинетики.// Современные проблемы биокинетики. М.: МГУ.- 1987.- С. 150-197

108. Стригуль Н.С. Математическое моделирование динамики популяций микроорганизмов в ризосфере растений.// Автореф. дис. кан. б.н., С.-Пб., 1992.- 22 С.

109. Тихонович И.А. Эффективность почвенных микробиологических препаратов и проблема их введения в агрофитоценоз.// Конф. Интродукция микроорганизмов в окружающую среду (17-19 мая).- М.- 1994.- С. 104

110. Тихонович И.А., Проворов H.A. Пути использования адаптивного потенциала систем «растение-микроорганизм» для конструирования высокопродуктивных агрофитоценозов.// С-х биология.- 1995.- №5.-. 36-43

111. Угодчиков Г.А. Методология системного анализа физиологических процессов в микробных популяциях и ее применение для построения математических моделей.// Микробиология 1980.- №1.- С. 30-35

112. Умаров М.М. Ассоциативная азотфиксация.// Из-во МГУ, М.- 1986.156 С.

113. Хмелевская И.А. Рост, минеральное питание и продуктивность льна-долгунца при обработке семян бактериальными препаратами.// Автореф. дис. кан. с-х н.- С.-Пб., 1997.- 17 С.

114. Хохряков М.К., Потлайчук В.И., Семенов А.Я., Злбанян М.А. Определитель болезней сельскохозяйственных культур.// Л.: Колос.- 1984.- 304 С.

115. Чернавский Д.С., Иерусалимский H.Д. К вопросу об определяющем звене в системе ферментативных реакций.// Изв. АН СССР, сер. биол.-1965.- №5.- С. 666-676

116. Чернядьев И.И. Фотосинтез растений в условиях водного стресса и протекторное влияние цитокининов.// Прикл. биохимия и микробиология 1997.- т. 33.-№1.- С. 5-17

117. Шабаев В.П., Смолин В.Ю., Олюнина JI.H. Роль микроорганизмов -стимуляторов роста растений в повышении урожайности.// Конф. Интродукция микроорганизмов в окружающую среду (17-19 мая).- М.- 1994.- С.115-116

118. Шахназарова В.Ю. Развитие интродуцированной популяции Fusarium culmorum (W. G. Sm.) Sacc в различных почвенных условиях.// Автореф. дисс.к.б.н.- С.-Петербург.- 2000.- 19 С.

119. Шенин Ю.Д., Кругликова JI.M., Васюк Л.Ф. и др. Новый метаболит с фунгистатической активностью, продуцируемый штаммом Л-30 Flavobacte-rium sp.J/ Антибиотики и хемотерапия.- 1996.- т. 41.- №5.- С. 6-12

120. Шлегель Г. Общая микробиология.// M.: Мир,- 1987.- С.94-97

121. Якимова М.Ф., Волоскова М.М. Синтез биологически активных веществ ассоциацией ризосферных и клубеньковых бактерий.// Изв. АН. Молд. ССР.- 1987.-№4.- С.65-66

122. Якуткин В.И. Мизорин и флавобактерин ингибиторы склеротинии подсолнечника.// Конф. Интродукция микроорганизмов в окружающую среду (17-19 мая).- М.- 1994.- С.117

123. Alazard D. Stem and root nodulation in Aeshynomene spp.// Appl. Environ. Microbiol.- 1985.- vol. 50.- P. 732-734

124. Allen O.N., Allen E.K. The Leguminosae. A source book of characteristics, uses and nodulation.// Madison: Univ. Wisconsin. Press,- 1981.- 800 P.

125. Bagnasco P., De la Fuente L., Gualtieri G., Noya F., Arias A. Fluoresccent Pseudomonas spp. As biocontrol agents against forage legume root pathogenic fugi.// Soil Biol. Biochem.- 1998.-30 (10-11).-P.1317-1322

126. Bashan Y., Levanony H. Current status of Azospirillum inoculation technology: Azospirillum as a challenge for agriculture.// Can. J. Microbial.-1990.- v.36.-N9.-P.591-608

127. Bazin M.J., Markham P., Scott E.M., Lynch J.M. Population dynamics and rhizosphere interactions.// The Rhizosphere (ed. Lynch J.M.) , West Sussex: John Wiley & Sons.- 1990.- P. 99-128

128. Belimov A.A., Kunakova A.M., Vasilijeva N.D., Kojemiakov A.P. Relationship between survival rates of associative nitrogen-fixers on roots and yield response of plants to inoculation.// Feems Microbiology Ecology.- 1996.- vol. 17.-P. 187-196

129. Bergman H. Effect natural, amides and lipid components on yield and stress resistance of crops/// Internationship Between Microorganisms and Plants in Soil: Proc. Intern. Symp. Liblice, Chechoslovakia, June 22-27.- 1989,- P. 475-480

130. Biodini M., Klein D.A., Redente E.F. Carbon and nitrogen losses through root exudation by Agropyron cristatum, A.smithii, and Bouteloua gracilis.// Soil Biol. Biochem.- 1988.- 20.- P. 477-482

131. Blondeau R. Production of substances of type cytokinini by Arthrobacter from natural rhizosphere.// C.r. Acad. Sci. Ser.D.- 1970.- vol. 270.- P. 3158-3161

132. Boddey R.M., Dobereiner J/ Non-Symbotic Nitrogen Fixation and Organic Matter in the Tropics.// XX intern. Congress of Soil Science, India, New Dehli,.-1982

133. Boddey R.M., Reis V.M., Dobereiner J. Nitrogen fixation sugar cane: the role of Azotobacter diazotrophicus.il In: Nitrogen fixation: Fundamentals and Applications (Proc. 10-th Int. Congr. On Nitrogen Fixation) St.-Petersburg.- 1995.- P. 641-646

134. Bowen C.D., Kennedy M.M. Effect of high soil temperatures on Rhizobium spp.// Queensland J. Agr. Sci.- 1959.- v. 16.- P. 177-197

135. Bromfield E.S.P., Thurman N.P., Whitwill S.T and Berran L.R. Plasmids and symbiotic effectiveness of representative phage types from two indigenous populations of Rhizobium meliloti.ll J. Gen. Microbiol.- 1988.- v. 133.- PP. 34573466

136. Brown M.E., Walker N. Indolil-3-acetic acid formation by Azotobacter chroococcum.// Plant Soil.- 1970.- vol.32.- P.250-253

137. Brussaard L. Soil fauna, guilds, functional groups and ecosystem processes.// Appl. Soil Ecol.- 1998.- v. 91.- N1-3.- P. 123-135

138. Buchenauer H. Biological control of soil-borne diseases by rhizobacteria.// Z.Pflanzent, Pflanzens.-J. Plant Dis. Prot.- 1998.- 105 (4).- P.329-348

139. Cacciari I., Del Callo M., Ippoliti S. Growth and survival of Azospirillum brasilense and Arthrobacter giacumelloi in benary continuos culture.// Plant and Soil.- 1986.- 90.- 1-3.-P. 107-116

140. Cacciari I., Lippi D., Pietrozanti I. Phytohormon-like substances produced by singl and mixed diazotrophics cultures of Azospirillum and Arthrobacter.// Plant and Soil.- 1989.- V.115.-N1.-P.151-153

141. Carrier W.N., Strobel G.A.- Science.- 1977tli

142. Cook J.R.// Perspect Microbiol. Ecol.: Peoc. 4 Intern. Symp.Ljubliana.-1986.-P.401

143. Cha Yiu-Kwok.// Canad. J. Microbiol.- 1991.- vol. 37.- P. 715

144. Chanway C.P. Inoculation of tree roots with plant growth promoting soil bacteria an emerging technology for reforestation.// Forest Science.- 1997.- 43 (1).- P.99-112

145. Chen W.X., Li G.S., Qi Y.L., Wang E.T., Yuan H.L., Li J.L. Rhizobium huakuii sp. Nov. isolated from the root nodules of Astragalus sinicus.ll Int. J. Syst. Bacteriol.-1991.-V.41.-P.275-280

146. Curl E.A., Harper J.D. Fauna-microflora interactions.// "The rhizosphere" (ed. J.M.Lynch), Wiley-Intercience, New York.- 1990.- P. 369-388

147. Davis R.J. Resistance of rhizobe to antimicrobial agents.// J. Bacteriol.-1962.- v.84.- P. 187-188

148. Dazzo F.B. Bacterial attachment as related to cellular recognition in the rhizobium-legume symbiosis.// J. of supramolecular structure and cellular biochemistry.- 1981.-vol. 16.-N1.-P.29-41

149. Deoliveira R.D., Wolton A.C., Vanelsas J.D. Effects of antibiotics in soil on the population dynamics of transposon tn 5 carrying Pseudomonas fluorescens.il Plant Soil.- 1995.- 175 (2).- P.323-333

150. Diaz C.L., Melchers L.S., Hooykaas P.I.I., Lugthienberg B.I.I., Kijne I.W. Root lectin as a determinant of host-plant specificity in the rhizobium-legume symbiosis.- Nature.- 1989.- vol. 338.- N.6216.- P. 579-581

151. Dobereiner J., Baldani V.L.D., Reis V.M. Endophytic occurrence of diazo-trophic bacteria in non-leguminous crops.// NATO ASI Series.- Azospirillum VI and Related Microorganisms (ed. By Fendrik I.).- 1995.- vol. G37.- P.3-14

152. Dobereiner J., Day J.M. Associative symbiosis in tropical grasses: characterization of microorganisms and dinitrogen fixing sites.// Proc. 1-st Int. Symp. Nitrogen Fixation.- Washington State Univ. Press.- 1975.- P. 518-538

153. Donegan K., Matyac C. Evaluation of methods for sampling, recovery and enumeration of bacteria applied to the phylloplane.// Appl. and Environ. Micro-biol- 1991.-vol. 57.-N1.-P. 51-56

154. Downie I.A., Iohnston A.W. Nodulation of legumes by Rhizobium the recognized root.// CSIRO Division of Plant Industry.- 1986.- vol.74.-N.2.- P.153-154

155. Dreyfus B., Dommergues I. Nitrogen fixing nodules induced by Rhizobium on the stem of the tropical legume Sesbania rostrata.ll FEMS Microbial. Lett.-1981.- vol. 10.- P. 313-317

156. Dudman W.F. Capsulation Rhizobium species.// J. Bacterid.- 1968.- v.95.-P. 1200-1201

157. Fravel D. Role of antibiosis in the biocontrol of plant diseases.// Annu. Rev. Phytopathol.- 1988.- 27.- P. 75-95

158. Giller K.E., Day M., Dart P.J., Wani S.P. A method for measuring the transfer of fixed nitrogen from free-living bacteria to higher plants using 15N2.// J. Microbiol. Methods.- 1984.- v.2.- N6.- P.307-314

159. Gracioli L.A., Ruschel A.P. Atividade da nitrogenase de Azospirillum sp. Em cultivares puras e em imisturas com microorganismos nao fixadores de nitro-genio.// Rev. bras. Cienc. Solo.- 1978.- v. 2.- P. 215-216

160. Grayston S.J., Vaughan D., Jones D Rhizosphere carbon flow in trees, in comparison with annual plants the importance of root exudation and its impact on microbial activity and nutrient availability.// Appl. Soil Ecol.- 1997.- 5 (1).- P. 29-56

161. Handelsman J., Stabb E.V. Biocontrol of soilborne Plant Pathogen/// The Plant Cell.- vol. 8.- 1996.- P. 1855-1869

162. Harper S.H.T., Lynch J.M. Dinitrogerfixation by obligate and facultative anaerobic bacteria in association with cellylolytic fungi/// Curr. Microbiol.- 1986.-V.14.- P. 127-131

163. Hirano S.S., Upper C.D. Ecology and physiology of Pseudomonas syryn-gae.// Biotechnol.- 1985.-N3.- P. 1073-1077

164. Hodge A., Stewart J., Robinson D., Griffiths B.S., Fitter A.H. Root proliferation, soil fauna and plant nitrogen capture from nutrient-rich patches in soil.// New Phytol.- 1998.- v. 199.- N3.- P.479-494

165. Howard B.R., Max E.T.- Appl. Environ.Microbiol.-1980.-v.l62.-P.190-195

166. Hultberg M., Waechter-Kristensen B. Colonization of germinating tomato seeds with the plant growth-promoting rhizobacteria, Pseudomonas fluorescens 5.014 and its mutant 5-2/4.// Microbiol. Res.- 1998.- 153 (2).- P. 105-111

167. Hynes M.F., O'Connel M.P. Host plant effect on competition among strains of Rhizobium leguminosarum.// Can. J. Microbiol.- 1990.-vol.36.-N12.-P.864-869

168. Jagnow G. Inoculation of cereal crops and forage grasses with regard to yield response a review.// Z. Pflanzenernahr. Bodenk.- 1987.-150.-P.361-368

169. Jain D. K., Beyer D., Rennie R.J.// Plant and Soil.- 1987.-vol.103.-P. 233

170. Joner E.J., Magid J., Gahoonia T.S., Jakobsen I.P. Depletion and ativity of phosphatases in the rhizosphere of mycorhizal and non-mycoehizal cucumber 0Cucumis sativus L.).// Soil Biol. Biochem.- 1995.- 27 (9).- P. 1145-1151

171. Jordan D.S. Family // Rhizobiaceae Conn . 1938. In: Bergy's manual of systematic bacteriology, Krieg, Holt (eds)., The Williams and Wilkins Co, Baltimore, London.- 1984.- v.l.- P.234-224

172. Ikeda K., Toyota K., Kimura M. Role of extracellular pectinases in the rhizoplane competence of a rhizobacterium Burkholdeiria pickettii MSP3Rif.// Soil Biol. Biochem.- 1998.- 30 (3).- P. 323-329

173. Ingham E.R., Massicotte H.B. Protozoan communities around conifer roots colonized by ectomycorrhizal fungi.// Micorrhiza.- 1994.- 5(1).- P. 53-61

174. Kirk G.D., Bajita J.B. Root-induced iron oxidation, pH hanges and zine-solobilization in the rhizosphere of lowland rice.// New Phytol.- 1995.- 13 (1).- P. 129-137

175. Kloepper J.M. Plant Grouth-Promoting Rhizobacteria as Biological Control Agent.// Soil Microbial Ecology, eds. By Blaine F., Metting Jr., Marcel Dekker. Inc., New York, USA.- 1993.- P. 255-274

176. Kaponen M., Funke B., Galitz D. Enumeration of acetylene reducing bacteria in stripmined reclamation sites in a temperate grassland.// Plant and soil.-1980.- vol. 57.- N. 2-3.- P.399

177. Kravchenko L.V., Leonova E., Tikhonovich I. Effect of root exudates of non-legume plant on the response of auxin production by associated diazotrophs.// Microb. Releases.- 1994.- v.2.- P.267-271

178. Ladha J.K., Barraguio W.L., Watanabe I. Immunological techniques to identify Azospirillum associated with wetland rice.// Can. J. Microbiol.- 1982.-vol. 28.- P. 478-485

179. Lawton J.H. Ecological experiments with model systems.// Science.- 269 (5222).- 1995.-P. 328-331

180. Lee M., Brecckenridge ., Knowles R/ Effect of some culture conditions on the production of indole-3-acetic and gibberellin-like substances by Azotobater vinelandii.// Canad.J. Microbiol.- 1970.- vol. 16.- P. 1323-1330

181. Levin S.A., Grenfell B., Hastings A., Perelson A.S. Mathematical and computational challenges in population biology and ecosystems science.// Science.-1997.- 275 (5298).- P. 334-343

182. Liljeroth E., Kuikman P., van Veen J.A. Carbon translocation to the rhizosphere of maize and wheat and influence on the turnover of native soil organic matter at different soil nitrogen levels.// Plant Soil.-1994.- v. 161.- P.233-240

183. Lynch M.J. Development and Interaction between microbial communities on the root surface.// Int. Symp. "Interrelationships between microorganisms and plants in soil".- Lublice (june 22-27, 1987).- Praha.- 1989.- P.5-13

184. Lynch M.J. Interrelations between bacteria and plants in the root environment.// In.: Bacteria and Plants, Rhodes-Roberts M.E., Skinner F.A. (eds.).- Academic Press.- London.- 1982.- P. 1-23

185. Martin J.K. Factors influencing the loss of carbon from wheat roots.// Soil Biol. Biochem.- 1977.-N9.- P. 1-7

186. Monod J Recherches sur la croissance des cultures bactériennes.// Paris.-Hermann and lie.- 1942.- 219 P.

187. Murray W.D. Symbiotic relationship of Bacteroides cellulosolvens and Clostridium saccharolyticum in cellulose fermentation.// Appl. and Environ. Microbiol.- 1986.- v.54.- N4.- P. 710-714

188. Nehl D.B., Allen S.J., Brown J.F. Deleterious rhizosphere bacteria an integrating perspective.// Appl. Soil Eccol.- 1997.- v.5.- N1.- P. 1-20

189. Newman E.I., Watson A. Microbial abundance in the rhizosphere a computer model.// Plant Soil/- 1977/- vol. 48.- P. 17-56

190. Norris D.O. A red strain of Rhizobium from Lotononis bainesii Baker.// Australian J. Agr. Res.- 1958.- v.9.- PP.629.

191. Okon Y. Itrigsohn R. The development of Azospirillum as a commercial inoculant for improving crop yields.// Biotechnol. Adv.- 13(3).- 1995.- P. 424

192. Olubayi O., Ford T.M., Nevra-estens S.A. Growth response of several grass species to inoculation with A.brasilense strain Cd.// In.: 9-th Int. Congr. On Nitrogen Fixation (6-11 Dec., 1992, Mexico), -1992.- P. 72

193. Pacovsky R.S. Diazotroph establishment and maintenance in the Sorghum-Glomus-Azospirillum association.// Can. J. Microbiol.- 1989.- vol. 35.- N6.-P.977-981

194. Patten G.L., Glick B.R. Bacterial biosynthesis on indole-3 acetic acid.// an. J. Microbiol.- 1996.- 42 (3).- P.207-220

195. Pattison A.C., Skinner F.A. The effects of antimicrobial substanas on Rhizobium spp. And their use in selective media.// J. Appl. Bacteriol.- 1974.-v.37.- P.239-250.

196. Penalver R., Vicedo B., Salcedo C.I., Lopez M.M.// Bioc., And Tecchnol.-1994.- v. 4.-N3.- P. 259-267

197. Phililips D.A., Sreit W.R. Modifying rhizosphere microbial communities to enchance nutrient availability in cropping systems.// Field Crop. Res.- 1998.- 56 (1-2).-P. 217-221

198. Phililips D.A., Torrey J.G. Cytokinin production by Rhizobium japonicum.il Physiol. Plant.- 1970.- vol. 23.- P. 1057-1063

199. Phililips D.A., Torrey J.G Studies on cytokinin production by Rhizobium.// Plant Physiol.- 1972.- vol.- 49.- P. 11-15

200. Pierson E.A., Wood D.M., Cannon J.A., Blachere F.M., Pierson L.S. Interpopulation signaling via N-acyl-homoserine lactones among bacteria in the wheat rhizosphere.// Mol. Plant-Microbe Interact.- 1998.- 11 (11).- P. 1078-1084

201. Pierson E.A., Wood D.M., Pierson E.A. Homoserine lactone-mediated gene regulation in plant-associated bacteria.// Annu. Rev. Phytopathol.- 1998.- v. 36.- P. 207-225

202. Plazinski I., Rolf B.G. Influence of Azospirillum strains on the nodulation of clovers by Rhizobium strains.// Appl. environ. Microbiol.- 1985.- v.49.- N4.- P. 984-989

203. Plazinski I., Rolf B.G Interaction of Azospirillum and Rhizobacterium strains leading to inhibition of nodulation.// Appl. environ. Microbiol.- 1985.-v.49.- N4.- P. 990-993

204. Rattray E.A., Prosser L., Glover L.A., Killham K. Characterization of rhizosphere colonization by luminescent Enterobater cloacae at the population and single levels.// Appl. Environ. Microbiol.- 1995.- v. 61.- N8.- P. 2950-2957

205. Redkina T.V. Fungistatic activity of bacteria of the genus Azospirillum.// Agrokem. Es talajt.- 1990.- vol. 39.- P. 465-468

206. Remacle J. Microbial transformation of nitrogeninforests.// Ecol. Plan-tarum.- 1978.-N1.- PP.256

207. Rovira I.D., Davey C.B. Biology of the rhizosphere.// The Plant Root and its Environment, E.W. Carson (ed.), University of Virginia.- 1974.- P.153-204

208. Sawicka A. Biological nitrogen fixation 4-day and 6-day seeding of cereals.// Acta Microbiol.- Polonia.- 1986.- vol. 35.- N34.- P.325-330

209. Schmidt E.L. Fluorescent antibody technique for the study of microbial ecology.// Bull. Ecol. Res. Comm. NFR.- 1976.- v. 17.- P. 67-76

210. Scott E.M., Rattray E.A.S., Prosser J.K., Killham K., Glover L.A., Lynch J.M., Bazin M.J. A mathematical model for dispersal of bacterial inoculants colonizing the wheat rhizosphere.// Soil Biol. Biochem.- vol. 27.- N10.- 1995.-PP.1307-1318

211. Seifert J. New approach to dynamic soil microbiology.// Dyn. Processes Soil and Plant Nutrition: Proc. Symp. Prague/- 1989.- P. 7

212. Slininger P.J., Sheawilbur M.A. Liquid culture pH, temperature and carbon (not nitrogen) source regulate phenazine productivity of the take-all biocontrol agent Pseudomonas fluoresce™ 2-19.1 I Appl. Microbiol. Biotechnol.- 1999.- 43 (5).- P. 794-800

213. Stotzky G. Activity, ecology and population dynamics of microorganisms in soil.// CRC Grit. Rev. Microbiol.- 1972.- v.2.- P. 59-137

214. Tiedje T., Colwell R., Grossman Y., Hodson R., Lenski R., Mach R., Regal R. The planned introduction of genetically engineered organisms.// Ecology.-1989.- vol. 70.- N2.- P. 295-315

215. Tien T.M., Gaskin M.H., Hubbell D.H. Plant Growth Substances Produced by Azospirillum brasilense and they effect on the Growth of pearl Millet (Pen-nisetum amaricanum L.).// Appl. fnd Environ.Microbiol.- 1979.- vol.37.- P. 10161024

216. Tickonovich I.A., Kojemyakov A.P. Boilogical Nitrogen fixation for the 21th Century.// ed. C.Elmerich et al.- Klumer Acad. Publ., Netherlands.- 1997.-P.613-614

217. Tyler M., Milam J., Smith R. Isolation of Azospirillum from divers geographic regions.// Can. J. Microbiol.- 1979.- v. 25.- N6.- P. 693

218. Trinick M.J/ Symbiosis between Rhizobium and the non-legume, Trema as-pera.//Nature.- 1973,.- v.244.- P.459-460.

219. Vassyuk L.F. Fungistatic action of bacterial preparation Flavobacterin on the cereal potato, and veneyards.// Europ. J. of Plant Pathology.- 1995.- P. 1310

220. Venkaraman G.S. Non-symbiotic nitrogen fixation.// Trans. 12-th Intern. Congr. Soil. Science.- India.- New Delhi.- 1982.- part.l.- P. 225

221. Vlassak K., Reynders L. Associative dinitrogen fixation in temperate regions.// Isotopes boil.dinitrogen fixat. Proceed Vienna.- 1978.- P. 71

222. Vincent J.M. The identification and classification of Rhizobium.// In: Identification methods for microbiologists. 2-nd edition. Skinner (ed.), Rothamsted Experimental Station, Harpenden, Hertfordshire, UK.- 1979.- P.49-69

223. Volpon A.G., De-Polli H., Dobereiner J. Physiology of nitrogen fixation in Azospirillum lipoferum Br 17(ATCC 29709).// Arch. Microbiol.- 1981.- v. 128.-N.4.- P.371-375

224. Vorobeikov G.A. Stimulation of the physiological processes of plants by means of bacterial strains.// Absracts of annual symposium "Physical-chemial basis of plants physiology", (5-8 February, 1996, Penza), Pushchino, 1996.- P. 144

225. Watanabe I. Biological nitrogen fixation associated with wethand// Proc. Symp. Paddy Soil. Berlinc.a.: Beijing (ed.).-1981.-P.438

226. Weller D.M. Biological control of soilborne plant pathogens in the rhizos-phere with bacteria.// Annu. Rev. Phytopathol.- vol. 26.- 1988.- P. 379-407

227. Wipps J.M., Lynch J.M. Substrate flow and utilization in the rhizosphere of cereals.//New Phytol.- 1983.- v. 95.- P. 605-623

Информация о работе

Тимофеева, Светлана Владимировна
кандидата биологических наук
Санкт-Петербург, 2000
ВАК 03.00.07

Диссертация

Исследование роли биотических и абиотических факторов в приживаемости интродуцируемых бактерий на первых этапах онтогенеза растений - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы