Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Исследование молекулярно-генетической природы фенилкетонурии в выборках российских больных

ВАК РФ 03.00.15, Генетика

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Степанова, Анна Александровна

Список сокращений.

Введение.

Актуальность темы.

Цель исследования.

Задачи исследования.

Научная новизна.

Практическая значимость.

Положение выносимые на защиту.

Обзор литературы.

История изучения Фенилкетонурии.

Распространенность заболевания.

Клинико-биохимическая характеристика гиперфенилаланинемии.

Общая характеристика аминокислоты фенилаланин.

Варианты гиперфенилаланинемии.

Клиническая характеристика больных ФКУ.

Биохимическая дифференциальная диагностика ГФА.

Фено-генотипичсская корреляция при классической ФКУ.

Фено-генотипическая корреляция при мутациях в гене РТБ.

Молекулярные основы ФКУ.

Белок ФАГ.

Ген РАН.

Мутации гена РАН.

Полиморфные маркеры гена РАН.

Белок РТР Б.

Ген РТ8.

Мутации в гене РТв.

Белок БИРЯ.'.

Ген (ЗОРЛ.

Мутации в гене <ЗОР11.

Материалы и методы исследования

Материалы.

Методы.

Выделение геномной ДНК.

Метод полимеразной цепной реакции.

Анализ полиморфизма длины рестрикционных фрагментов (ПДРФ-анализ).

Электрофорез в ПААГ.

Метод SSCP-анализа.

Определение нуклеотидной последовательности ДНК.

Статистическая обработка результатов.

Результаты и обсуждение.

Разработка системы регистрации наиболее частых мутаций в гене РАН с помощью 4 реакций амплификации/рестрикции.

Распределение наиболее частых мутаций в выборках больных.

Поиск мутаций в гене РАН методом SSCP-анализа с последующим секвенированием.

Анализ внутригенных полиморфизмов VNTR и STR аллелей.

Фено-генотипическая корреляция.

Молекулярно-генетическое исследование генов PTS и QDPR.

Практическое применение.

Заключение Диссертация по теме "Генетика", Степанова, Анна Александровна

Выводы

1. Разработана экономичная система анализа 11 мутаций в гене РАН в 4 реакциях, позволяющая диагностировать 79,8% мутаций у больных ФКУ из России. Показано существование межпопуляционных различий по частоте встречаемости отдельных мутаций между российскими и европейскими пациентами при наличии единого спектра наиболее частых мутаций.

2. Обнаружено, что наиболее частой в России является мутация р.А^408Тгр (61,4%), с частотой более 1% встретились мутации ГУ810-1^>а (4,1%), р.А^26Ю1п (3,3%); 1У812+1в>а (2,3%), р.А^252Тгр (1,82%), р.А^158С1п (1,65%), р.Рго281Ьеи(4,95%). Мутация р.11е65Т11г, частая в Европе, выявлена у 1 из 302 российских пациентов, что позволяет исключить эту мутацию из числа частых в России, а также свидетельствует о популяционных различиях.

3. Обнаружены четыре новые мутации в гене РАН (с1е1875-882п1;, р.А1а132Уа1, р.01у256Азр, р.11е421Азп), ранее не описанные в базе данных РАШЬ. Частота встречаемости каждой составила 0,2%

4. Выявлена частая в российской популяции мутация ГУ84+5§->1 (1,49%), не являющаяся частой пи в одной из стран Европы. Включение данной мутации в разработанную диагностическую систему увеличит ее информативность до 81,1%.

5. Среди больных ФКУ, не имеющих мутаций в гене РАН, в гене Р751 выявлены повторяющиеся описанные ранее мутации р.Азп72Ьуз и р.ТЬгЮбМе^ частота которых составила по 9,1% для каждой. Новые не описанные в базе данных мутации р.8ег3201у, р.Уа159в1у, 1У85-1§>а, & 7068С>А обнаружены с частотой

4,6%. В гене QDPR выявлена новая мутация - р.А1а135Азр, частота которой составила 7,6%.

6. Обнаружено преобладание гаплотипа 240/380 (ЭТЫ/УНТЯ) на хромосомах с р.А^408Тгр, что свидетельствует о наибольшем распространении в российской популяции мутации Балтославянского происхождения. В тоже время обнаружено еще два других гаплотипа на хромосомах с той же мутацией, что может быть связано с повторным независимым происхождением этой мутации.

Заклю чение

С целью установления молекулярно-генетического природы ФКУ у больных из различных регионов России было проведено исследование наиболее частых, по анализу мировой литературы, мутаций. Для больных, у которых мы не смогли определить обе мутации, приводящие к ФКУ, было проведено исследование всей кодирующей последовательности и ингрон-экзонных соединений гена РАН. Также было проведено исследование всей кодирующей последовательности и интрон-экзонных соединений генов РТ8 и 0,ВРЯ, для больных, у которых не было обнаружено ни одной мутации в гене РАН.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Степанова, Анна Александровна,

1. Аничкина (Степанова) A.A., Гаврилюк А.П., Тверская С.М., Поляков A.B. Анализ наиболее часто встречающихся мутаций в гене ФАГ у больных фенилкетонурией в ряде регионов бывшего Советского Союза // Медицинская генетика, 2003, том2, №4, -с.175-181

2. Амелина С.С., Кривенцова Н.В., Поляков A.B., Зинчеико P.A. Молекулярно-генетическое типированис больных с фенилкетонурией в Ростовской области. //Медицинская генетика, 2004,- том 3, -№3, -с. 139-144.

3. Барановская С.С., Шевцов С.П., Максимова С.П. с соав. Спектр мутационных повреждений гена фенилаланингидроксилазы у больных фенилкетонурией г. Санкт-Петербурга // Докл. Акад. Наук. 1995. - Т. 340. -№5.-С. 709-711

4. Барановская С.С. Молекулярно-генетический анализ фенилкетонурии в Санкт

5. Петербурге. //Автореф. дисс.канд. биол. наук. Санкт-Петербург. -1996.

6. Иващенко Т.Э., Белова Е.Г., Баранов B.C. Простой метод идентификации мутации R408W 12-го экзона гена фенилаланингидроксилазы.//3-я конференция «Геном человека-93», 10-12 марта, 1993 г., Черниголовка.-М. -1993.-С.77

7. Животовский JI.A. Популяционная биометрия. М. Москва, 1991, 272с.

8. Зинченко JI.B., Матулевич С.А. Молекулярная генетика фенилкетонурии в Краснодарском крае.//У съезд Российского общества медицинских генетиков: Тезисы докладов.- Уфа 2005 - С. 189

9. Лебедев Б.В., Блюмина М.Г. Фенилкетонурия у детей. М.: Медицина , 1972. с.-152

10. Максимова С.П. Выявление и лечение ФКУ у детей в условиях работы городского медико-генетического отделения // Автореф. дисс. канд. мед. наук. -Москва.- 1974.- с. 16

11. Маслеников А.Б., Смагулова Ф.О., Китайник Г.П., Оробей A.M. Эффективности рестрикционного анализа при типировании гена фенилаланингидроксилазы // Генетика человека и патологияю -2000. вып. 5.-е. 152-157

12. П.Марри Р., Грепнер Д., Мейес П., Родуэлл В. Биохимия человека.Т.1 М.:МИР, 1993.-c.384

13. Скрябин Б.В., Хальчицкий С.Е., Кузьмин А.И., Шварц Е.И. Определение мутационных повреждений в гене ФАГ среди больных в Латвии. // 2 Всесоюз. съезд мед. ген.: Тез. докл. Алма-Ата. - 1990. - С. 401.

14. Смагулова Ф., Масленников А., Морозов И., Китайник Г. Мутации в структуре экзона 7 гена фенилаланингидроксилазы у больных фенилкетонурией Новосибирской области //Генетика человека. 2000. - т. 36. - №6. - с. 849-852.

15. Смагулова Ф., Бреннер Е.В, Котова Л.Ю., Корень О.Л., Нагайцев В.М., Жабин С.Г., Морозов И., Идентификация мутаций в гене фенилаланингидроксилазы с использованием автоматического сиквенатора ДНК// Генетика. 2004 - Фев, -40(2) - 272-6

16. Страйер Л. Биохимия./Пер. с англ. -М.:Мир, 1985., Т.2 - с. 177

17. Чарикова Е.В. Изучение спектра точечных мутаций в гене ФАГ у больных фенилкетонурией в Москве и Московской области. // Автореф. дисс. канд. биол. наук. 1995. - Москва.

18. Якубке Х.Д., Ешкайте Т.Х. Аминокислоты, пептиды, белки./Пер. с немец.-М.:Мир, 1985., с.-16, 17,46, 51.

19. Abadie V, Lyonnet S, Maurin N, Berthelon M, Caillaud C,Giraud F, Mattei JF, Rey J, Rey F, Munnich A. CpG dinucleotides are mutation hot spots in phenylketonuria.//Genomics 1989 - .5 - 936-939.

20. Aoki K, Wada Y. Outcome of the patients detected by newborn screening in Japan // Acta Paediatr Jpn. 1988.-V. 30 - P.429-34

21. Aulehla-Scholz C, Heilbronner H. Mutational spectrum in German patients with phenylalanine hydroxylase deficiency. // Hum Mutat. 2003 - Apr - 21(4) - 399-400.

22. Baric I., Mardesic D., Sarnavoka V. et. al. Haplotype distribution and mutations at the PAH locus in Croatia. // Hum. Genet. 1992. - V. 49. - P. 393-399

23. Berman PW, Waisman HA, Graham FK. Intelligence in treated phenylketonuric children: a developmental study. //Child Dev 1966 - 37 - 731-747.

24. Berry H., Umbarger В., Livingston B. Excretion of phenylalanine by normal children and by patients with phenylketonuria. /Л Pediatr.- 1963 Nov - V. 63-P.954-60

25. Bickel H, Gerrard J, Hickmans EM. Influence of phenylalanine intake on phenylketonuria. //Lancet 1953 - II - 812-823.

26. Blau N, Barnes I, Dhondt JL () International database of tetrahydrobiopterin deficiencies. //J Inherit Metab Dis 1996 - 19 - P. 8-14.

27. Brown, R. M.; Dahl, H.-H. M. :Localization of the human dihydropteridine reductase gene to band pl5.3 of chromosome 4 by in situ hybridization. //Genomics 1987. -1. -67-70.

28. Chakraborty R., Lidsky A.S., Daiger S.P., Guttler F., Sullivan S., DiLella A.G., Woo S.L.C. Polymorphic DNA haplotypes at the human phenylalanine hydroxylase locus and their relationship with phenylketonuria. // Hum.Genet., 1987. v. 76. - p. 40-46.

29. Curtius HC, Heintel D, Ghisla S, Kuster T, Leimbacher W, Niederwieser A. Biosynthesis of tetrahydrobiopterin in man. //J. Inherit. Metab. Dis. 1985. - 28.-33.

30. DiLella A.G., Kwok S.C.M., Ledley F.D., Marvit J., Woo S.L.C. Molecular structure and polymorphic map of the human phenylalanin hydroxylase gene //Biochemistry. -1986.- Vol.25. -P.743-749.

31. DiLella A.G., Marvit J., Brayton K., Woo S.L.C. An amino- acid substitution involved in phenylketonuria is in linkage dise- quilibrium with DNA haplotype 2.// Nature. -1987. v. 327. - p. 333-338.

32. DiLella AG, Huang WM, Woo SL. Screening for phenylketonuria mutations by DNA amplification with the polymerase chain reaction. // Lancet. 1988 Mar 5. - 1(8584). -497-9.

33. Doherty LB, Rohr PJ, Levy HL. Detection of phenylketonuria in the very early newborn blood specimen.// Pediatrics. 1991. - 87. - 240-44.

34. Doskeland AP, Flatmark T Recombinant human phenylalanine hydroxylase is a substrate for the ubiquitin-conjugating enzyme system. // Biochem J. 1996 - Nov 1- 319 (Pt 3) 941-5.

35. Dougherty FE, Levy HL. Present newborn screening for phenylketonuria.// M.R.D.D.- 1999. Res. Rev. 5. - 144-9.

36. Dworniczak B, Aulehla-Scholz C, Kalaydjieva L, Bartholome K, Grudda K, Horst J. Aberrant splicing of phenylalanine hydroxylase mRNA: the major cause for phenylketonuria in parts of southern Europe.//Genomics. 1991. Oct;l l(2).-242-6.

37. Dworniczak B., Wedemeyer N. Horst J. PCR detection of the Bgl 11 RFLP at the human phenylalanine hydroxylase (PAH) locus.// Nucleic Acid Res.- 1991. v. 19. -p. 1958.

38. Dworniczak B, Kalaydjieva L, Pankoke S, Aulehla-Scholz C, Allen G, Horst J. Analysis of exon 7 of the human phenylalanine hydroxylase gene: a mutation hot spot? // Hum Mutat. 1992. - 1(2). - 138-46.

39. Eisensmith R.C., Okano Y, Dasovich M, Wang T, et al. Multiple origins for phenylketonuria in Europe. //Am J Hum Genet. 1992. - 51. - 1355-1365.

40. Erlandsen H, Martinez A, Knappskog PM, Haavik J, Hough E, Fiatmark T. Crystallization and preliminary diffraction analysis of a truncated homodimer of human phenylalanine hydroxylase. //FEBS Lett. 1997. - Apr 7;406(l-2).-171-4.

41. Erlandsen H, Stevens RC. The structural basis of phenylketonuria.// Mol Genet Metab. 1999 - Oct;68(2) - 103-25. Review.

42. Erlandsen H, Bjorgo E, Fiatmark T, Stevens RC. Crystal structure and site-specific mutagenesis of pterin-bound human phenylalanine hydroxylase.// Biochemistry. 2000 Mar -7;39(9).-2208-17.

43. Foiling A. Über Ausscheidung von Phenylbrenztraubensäure im Harn als Stoffwechselanomalie in Verbindung mit Imbezillität. // Hoppe Seylers ZPhysiol Chem. 1934. - 227. - 169-176.

44. Fusetti F., Erlandsen H., Fiatmark T., Stevens R. Structure of tetrameric human phenylalanine hydroxylase and its implications for phenylketonuria // J. Biol. Chem. -1998.-V. 273.-P. 16962-16967.

45. Gamez A., B. Perez, M. Ugarte, L.R. Desviat. Expression analysis of phenylketonuria mutations. Effect on folding and stability of the phenylalanine hydroxylase protein. // J. Biol. Chem. 2000. - 275. - 29737-29742.

46. Giannattasio S, Jurgelevicius V, Lattanzio P, Cimbalistiene L, Marra E, Kucinskas V. Phenylketonuria mutations and linked haplotypes in the Lithuanian population: origin of the most common R408W mutation.// Hum Hered. 1997. - May-Jun; 47(3).-155-60.

47. Giannattasio S, Dianzani I, Lattanzio P, Spada M, Romano V, Cali F, Andria G, Ponzone A, Marra E, Piazza A. Genetic heterogeneity in five Italian regions: analysis of PAH mutations and minihaplotypes. //Hum Hered. 2001. - 52. - 154-159.

48. Goltsov A.A., Eisensmith R.C., Woo S.L.C. Detection of the Xmn 1 RFLP at the human PAH locus by PCR. // Nucleic Acid Res.- 1992. v. 20. - p. 927.

49. Goltsov A.A.,Eisensmith R.C., Konecki D.S., Lichter-Konecki U., Woo S.L.C. Association between mutations and a VNTR in the hu- man phenylalanine hydroxylase gene. //Am.J.Hum.Genet. 1992. - v. 51.- p.627-636.

50. Guldberg P, Henriksen KF, Guttler F. Molecular analysisof phenylketonuria in Denmark: 99% of the mutations detected by denaturing gradient gel electrophoresis. // Genomics 1993a. - 17. - 141-146.

51. Guldberg P., Lou H. C., Henriksen K. F. et al. A novel missense mutation in the phenylalanine hydroxylase gene of a homozygous Pakistani patient with non-PKU hyperphenylalaninemia. //Hum. Molec. Genet. 1993. - V. 2. - P. 1061-1062.

52. Guldberg P, Mallmann R, Henriksen KF, Guttler F. Phenylalanine Hydroxylase Deficiency in a Population in Germany: Mutational Profile and nine Novel Mutations. // Human Mutation. 1996. - 8. - 276-279.

53. Guthrie R, Susie A. A simple phenylalanine method for detecting phenylketonuria in large populations of newborn infants // Pediatrics 1963. - V. 32. - P. 338-343.

54. Hashem N, Bosco P, Chiavetta V, Cali F, Ceratto N, Romano V. Preliminary studies on the molecular basis of hyperphenylalaninemia in Egypt.// Hum Genet. 1996. -Jul. - 98(l):3-6

55. Holtzman NA, Mellits ED, Kallman CH. Neonatal screening for phenyike-tonuria. II. Age dependence of initial phenylalanine in infants with PKU. // Pediatrics. 1974. -53. - 353-57.

56. Hufton SE, Jennings IG, Cotton RGH () Structure and function of the aromatic amino acid hydroxylases. // Biochem J. 1995. - 311. - 353-366.

57. Jennings I., Kemp B., Cotton R. Localization of cofactor binding sites whit monoclonal anti-idiotype antibodes: phenylalanine hydroxylase. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-1991.-V.88,- P.5734-5738

58. Jervis, G. A. Studies on phenylpyruvic oligophrenia: the position of the metabolic error. //J. Biol. Chem. 1947. - 169. - 651-656.

59. Jervis, G. A. Phenylpyruvic oligophrenia deficiency of phenylalanine-oxidizing system. Proc. Soc. Exper. Biol. Med. 82: 514-515, 1953.

60. Jervis G.A. Phenylpyruvic oligophrenia (phenylketonuria). // Res Publ Assoc Res Nerv Ment Dis.- 1953.-33. -259-282

61. John SW, Scriver CR, Laframboise R, Rozen R.,In vitro and in vivo correlations for I65T and Ml V mutations at the phenylalanine hydroxylase locus. // Hum Mutat 1992. 1(2). - 147-153

62. Kayaalp E, Treacy E, Waters PJ, Byck S, Nowacki P, Scriver CR () Human phenylalanine hydroxylase mutations and hyperphenylalaninemia phenotypes: a metanalysis of genotype-phenotype correlations// Am J Hum Genet 1997 - V. 61 -P.1309-17

63. Kalaydjieva L., Dworniczak B., Kucinskas V. et. al. Geographical distribution gradients of the major PKU mutation and the linked Haplotypes.// Hum. Genet. -1991. V.86. - P.411-413.

64. Kaufman S, Berlow S, Summer GK, Milstien S, Schulman JD, Orloff S, Spielberg S, Pueschel S. Hyperphenylalaninemia due to a deficiency of biopterin. A variant form of phenylketonuria. // N Engl J Med. 1978.- Sep. - 28. - 299(13). - 673-9

65. Kobe B., Jennings I.G., House C.M. Structural basis of autoregulation of phenylalanine hydroxylase // Nature Struct. Biol. 1999. - V. 6. - P. 422-448.

66. Koch R, Yusin M, Fishier K. Successful adjustment to society by adults with phenylketonuria. //J Inherit Metab Dis. 1985. - 8. - 209-211.

67. Krause W, Epstein C, Averbook A, Dembure P, Elsas L () Phenylalanine alters the mean power frequency of electroencephalograms and plasma L-dopa in treated patients with phenylketonuria.// Pediatr Res. 1986. - 20. - 1112-6.

68. Levy HL, Shih VE, Karolkewicz V, French WA, Carr JR, Cass V, Kennedy JL Jr, MacCready RA Persistent mild hyperphenylalaninemia in the untreated state. A prospective study. //N Engl J Med. 1971. - 285. - 424-9.

69. Lockyer, J.; Cook, R. G.; Milstien, S.; Kaufman, S.; Woo, S. L. C.; Ledley, F. D. : Structure and expression of human dihydropteridine reductase. //Proc. Nat. Acad. Sci. 1987.-84. - 3329-3333.

70. MacCready R. Phenylketonuria screening programs. //N. Engl. J. Med. 1963. - 269. -52.

71. Martinez A., Knappskog P. M., Olafdottir S. et al. Expression of recombinant human phenylalanine hydroxylase as fusion protein in Escherichia coli circumvents proteolytic degradation by host cell proteases // Biochem. J. 1995. -V. 306. - P. 589597.

72. MARVIT J, DILELLA AG, BRAYTON K, LEDLEY FD, ROBSON KJH, WOO SLC: GT to AT transition at a splice donor site causes skipping of the preceding exon in phenylketonuria. //Nucl Acids Res 1987. - 15. - 5613-5628.

73. Pietz J, Dunckelmann R, Rupp A, Rating D, Meinck HM, Schmidt H, Bremer HJ Neurological outcome in adult patients with early-treated phenylketonuria. // Eur J Pediatr 1998.- 157.-824-30

74. Perez B., Desviat LR., Ugarte M., Analysis of the Phenylalanine Hydroxylase Gene in the Spanish Population: Mutation Profile and Association with Intragenic Polymorphic Markers. //Am J Flum Genet 1997. - 60. - 95-102.

75. Rebelo J, Auerbach G, Bader G, Bracher A, Nar H, Hosl C, Schramek N, Kaiser J, Bacher A, Huber R, Fischer M. Biosynthesis of pteridines. Reaction mechanism of GTP cyclohydrolase I. //J Mol Biol. 2003 Feb 14. - 326(2). -503-16.

76. Romano V, Cali F, Guldberg P, Guttler F, Indelicato A, Bosco P, Ceratto N. Association between haplotypes, Hindlll-VNTR alleles and mutations at the PAH locus in Sicily. // Acta Pediatr Suppl. 1994. - 407. - 39-40.

77. Sanger, F., Nicklen, S. & Coulson, A. R. DNA sequencing with chain-terminating inhibitors. //Proc Natl Acad Sci U S A 1977.-74. - 5463-7.

78. Scriver CR, Eisensmith RC, Woo SLC, Kaufman S. The hyperphenylalaninemias of man and mouse. //Annu Rev Genet. 1994 - 28.- 141-165.

79. Scriver CR and Waters PJ Monogenic traits are not simple: lessons from phenylketonuria.// Trends Genet 1999. - 15. - 267-72.

80. Shintaku H, Niederwieser A, Leimbacher W, Curtius HC Tetrahydrobiopterin deficiency: assay for 6-pyruvoyltetrahydropterin synthase activity in erythrocytes, and detection of patients and heterozygous carriers. // Eur J Pediatr 1988- 147 - 15-19.

81. Smith I, Lloyd J.Proceedings: Atypical phenylketonuria accompanied by a severe progressive neurological illness unresponsive to dietary treatment. //Arch Dis Child. 1974 Mar.-49(3) -245.

82. Smooker PM, Cotton RG, Lipson A. Prenatal diagnosis of DHPR deficiency by direct detection of mutation. //Prenat Diagn. 1993 Sep. - 13(9) - 881-4.

83. Svensson E, von Dobeln U, Eisensmith RC, Hagenfeldt L, Woo SL. Relation between genotype and phenotype in Swedish phenylketonuria and hyperphenylalaninemia patients. //Eur J Pediatr 1993. - 152. - 132-139.

84. Takikawa S, Curtius HC, Redweik U, Leimbacher W, Ghisla Biosynthesis of tetrahydrobiopterin. Purification and characterization of 6-pyruvoyl-tetrahydropterin synthase from human liver.// Eur J Biochem. 1986 Dec 1. 161(2). - 295-302.

85. Thony B, Auerbach G, Blau N.Tetrahydrobiopterin biosynthesis, regeneration and functions. //Biochem J. 2000 Apr 1.-347 Pt 1:1-16. Review

86. Teigen K., Froystefn N., Martinez A. The structural basis of the recognition of phenylalanine and pterin cofactors by phenylalanine hydroxylase: implications for the catalytic mechanism //J. Mol. Biol. 1999. - V. 294 (3). - P. 807-823.

87. Tyfleld LA. Phenylketonuria in Britain: genetic analysis gives a historical perspective of the disorder but will it predict the future for affected individuals? // Mol Pathol. 1995. - 50. - 169-174.

88. Tyfield L. A., Stephenson A., Cockburn F. et al. Sequence variation at the phenylalanine hydroxylase gene in the British Isles. //Am. J. Hum. Genet.- 1997. -V. 60.-P. 388-396.

89. Wang Z., Moult J. SNPs, protein structure and disease // Hum. Mutat.- 2001 Apr.-17(4). p. 263-70

90. Weinstein M, EISENSMITH RC, ABADIE V, AVIGAD S, LYONNET S,

91. SCHWARTZ G, MUNNICH A, WOO SLC, SHILOH Y: A missence mutation, S349P, completely inactivates phenylalanine hydroxylase in North African Jews with phenylketonuria. //Hum Genet. 1993. - 90. - 645-649 ,

92. Williams K Benefits of normalizing plasma phenylalanine: impact on behaviour and health. A case report.// J Inherit Metab Dis. 1998. - 21. - 785-90

93. Williamson ML, Koch R, Azen C, et al. Correlates of intelligence test results in treated phenylketonuric children. //Pediatrics 1981-68- 161-167.

94. Wedemeyer N., Dworniczak B., Horst J. PCR detection of the Msp 1 (Aa) RFLP at the human phenylalanine hydroxylase (PAH) locus. //Nucleic Acid Res. 1991. - v. 19. - p. 1959.

95. Zschocke J. and Hoffmann G. F. Phenylketonuria mutations in Germany.//Hum Genet. 1999. - 104. - 390-398.

96. Zschocke J. Phenylketonuria Mutations in Europe//HUMAN MUTATION -2003. -21.-345-356.123. http://data.mch.mcgill.ca/pahdbnew/images/reportedpahmutations/jpg124. http://www.bh4.org/