Исследование гликопротеинов сыворотки крови у больных негоспитальной пневмонией

Толстолуцкая, Татьяна Олеговна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Исследование гликопротеинов сыворотки крови у больных негоспитальной пневмонией
ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Исследование гликопротеинов сыворотки крови у больных негоспитальной пневмонией"

На правах рукописи

ТОЛСТОЛУЦКАЯ ТАТЬЯНА ОЛЕГОВНА

ИССЛЕДОВАНИЕ ГЛИКОПРОТЕИНОВ

СЫВОРОТКИ КРОВИ У БОЛЬНЫХ НЕГОСПИТАЛЬНОЙ ПНЕВМОНИЕЙ

03.00.04. - Биохимия

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Уфа 2004

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Ижевская государственная медицинская академия Министерства здравоохранения Российской Федерации»

Научный руководитель:

доктор медицинских наук, профессор Шараев Петр Низамиевич

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Гильманов Александр

Жанович

доктор медицинских наук, профессор Саломатин Вениамин

Владимирович

Ведущая организация:

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Тюменская государственная медицинская академия Министерства здравоохранения Российской Федерации»

Защита диссертации состоится «2» июля 2004 г. в 1000 часов на заседании диссертационного совета Д 208.006.03 при Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Башкирский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации (450 000, г. Уфа, ул. Ленина, 3)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Государственного образовательного учреждения Высшего профессионального образования «Башкирский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации (450 000, г. Уфа, ул. Ленина, 3)

Автореферат разослан «1» июня 2004 г.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор медицинских наук, профессор

Г.Х. Мирсаева

Актуальность работы. В структуре общей заболеваемости негоспитальная пневмония занимает одно из ведущих мест (Воробьев П.А. и др., 2003). Частота этого заболевания имеет тенденцию к росту, и в целом по Российской Федерации составляет 5-8 человек на 1000 населения (Чучалин А.Г. и др., 2003). В Удмуртской Республике общая заболеваемость пневмонией составляет 4,9-5,1 человек на 1000 населения, и в последние годы неуклонно увеличивается количество больных, умерших от пневмонии (Шадрин С.Г.,. 2003). Ошибки в диагностике пневмоний достигают 20%, а по мнению некоторых зарубежных авторов даже 30% (Мартынова А.В. и др., 2002). Диагноз пневмонии в первые три дня болезни ставится лишь у 35% заболевших (Чучалин А.Г., 2003). У 30-40% больных пневмония приобретает затяжное течение, что связано с запоздалой диагностикой, а, следовательно, несвоевременным началом лечения (Сильвестров В.П., 1986). Диагностика пневмонии в настоящее время затруднена у 1/3 больных ввиду стертой клинико-рентгенологической симптоматики и из-за отсутствия характерных прежде для ее течения гематологических изменений (Провоторов В.М., Семенкова Г.Г., 1991), что приводит к необходимости поиска новых объективных методов исследования при этом заболевании.

Вместе с тем, при пневмонии, как и при многих других патологических процессах, в организме формируется неспецифическая воспалительная реакция, функцией которой является обезвреживание, связывание и удаление из организма инфекционных агентов, их токсинов и восстановление поврежденных тканей. Совокупность системных и местных реакций организма на повреждение была названа острофазовым ответом (Алешкин В. А. и др., 1988). Одним из ведущих признаков острофазовой реакции организма является изменение белков плазмы крови, названных соответственно белками острой фазы. Концентрация многих БОФ повышается уже через несколько часов от начала альтерации, что может быть использовано в ранней диагностике пневмонии и для характеристики состояния больного в динамике (Шевченко О.П., 1996). Большинство БОФ по структуре являются гликопро-теинами (Новикова Л.И., Алешкин В.А., 1991; Koolman J., 1998).

В литературе имеются данные по определению как суммарных гликоп-ротеинов сыворотки крови, так и отдельных их представителей при негоспитальной пневмонии (Анасашвили А.Ц. и др., 1968; Шелег В.А., Мизин И.И., 1980; Новинская Л.А., 1982; Комар СИ., Коробейникова Э.Н., 1986; Арсентьев Ф.В. и др., 1990; Лутошкин С.Ф., Резников Ю.П., 1991; Провоторов В.М., Семенкова Г.Г., 1991; Камышников B.C., 2000). Общее количество гли-копротеинов авторами оценивается по углеводному (гексозы, сиаловые кис-

лоты, гексозамины, фукоза) или белковому компонентам (Хъюз Р., 1985). При этом не обращается внимание на комплексную оценку гликопротеинов и изменение соотношения их углеводных составляющих. Кроме того, известные методы определения гликопротеинов не всегда доступны для клини-ко - диагностических лабораторий из-за трудоемкости, длительности их выполнения, а так же необходимости использования при этом токсичных реактивов и специального оборудования. Таким образом, оправданным является так же поиск новых методов определения гликопротеинов в сыворотке крови.

В литературе имеются исследования по дифференцировке гликопротеинов с использованием лектинов (Королев Н.П., 1984; ЛуцикМ.Д., 1984; Лах-тин В.М., 1987; Кильдибекова А.Р. и др., 2003). Определенный интерес представляет лектин, выделенный из канавалии мечевидной - конканавалин А, который в сыворотке крови в различном процентном соотношении специфически связывает значительное количество белков, гликопротеинов по структуре, большинство из которых относятся к белкам острой фазы воспаления. Это a1-антитрипсин, a1-антихимотрипсин, церулоплазмин, гаптоглобин, а2-макроглобулин, гемопексин, трансферрин, С-3 компонент комплемента, иммуноглобулины G, А, М и некоторые другие (Луцик М.Д. и др., 1981).

Таким образом, комплексная оценка содержания и состава гликопротеи-нов у больных пневмонией может быть полезна для понимания патогенетических особенностей заболевания, а также использоваться в качестве дополнительного критерия для диагностики, оценки степени тяжести и раннего прогнозирования затяжного течения негоспитальной пневмонии, что позволяет сформулировать цели и задачи исследования.

Цель исследования: оценить изменения показателей обмена гликопроте-инов в сыворотке крови больных негоспитальной пневмонией в зависимости от формы, степени тяжести и характера течения заболевания и сопоставить их с общепринятыми лабораторными данными.

Задачи исследования:

1. Выделить суммарные препараты гликопротеинов сыворотки крови у практически здоровых лиц и больных внебольничной пневмонией, определить в них количество и соотношение углеводных компонентов (гексоз, гек-созаминов, фукозы и сиаловых кислот).

2. Выделить суммарные препараты гликопротеинов сыворотки крови у практически здоровых лиц и больных внебольничной пневмонией с использованием лектина конканавалина А и определить в них количество углеводных компонентов.

3. Изучить динамику изменения гликопротеинов сыворотки крови по соотношению их углеводных компонентов у практически здоровых лиц и больных внебольничной пневмонией в зависимости от формы, степени тяжести и характера течения заболевания.

4. Исследовать изменение активности лизосомальных ферментов сиали-дазы (КФ 3.2.1.18) и сс^-фукозидазы ( КФ 3.2.1.51) у больных с различной степенью тяжести негоспитальной пневмонии..

5. Провести корреляционный анализ результатов исследования гликопротеинов сыворотки крови с использованием лектина конканавалина А с известными методами определения гликопротеинов и общепринятыми для пневмонии лабораторными тестами.

Научная новизна. Впервые получены комплексные данные об изменениях количественного и качественного состава сывороточных гликопротеинов у практически здоровых лиц и больных внебольничной пневмонией с определением содержания свободных, олигосвязанных и белоксвязанных сиало-вых кислот, олигомер- и белоксвязанной фукозы, белоксвязанных гексоз, гексозаминов, активности сиалидазы и фукозидазы в сыворотке крови.

При анализе соотношений: белоксвязанные сиаловые кислоты/свободные сиаловые кислоты, олигосвязанные сиаловые кислоты/олигосвязанная фукоза, белоксвязанные сиаловые кислоты/белоксвязанная фукоза, бело-ксвязанные гексозы/белоксвязанные сиаловые кислоты и гексозамины/бе-локсвязанные сиаловые кислоты установлен относительный рост остатков сиаловых кислот в выделенных препаратах гликопротеинов сыворотки крови больных негоспитальной пневмонией и преобладание свободных сиало-вых кислот при тяжелой степени тяжести заболевания, что свидетельствует об увеличении катаболических процессов по мере утяжеления пневмонии.

Впервые разработан экспресс — метод количественного определения гликопротеинов сыворотки крови у здоровых и больных негоспитальной пневмонией с использованием лектина конканавалина А, доказана возможность использования данного метода для оценки общего количества сывороточных, гликопротеинов, а следовательно, и степени острофазового ответа организма. при пневмонии. Установлена зависимость исследуемых показателей от степени тяжести, площади поражения легочной ткани, формы и характера течения негоспитальной пневмонии, доказана возможность использования данных исследований для раннего прогнозирования затяжного течения заболевания.

менение диагностической значимости некоторых общепринятых методов лабораторной диагностики пневмоний.

Практическая значимость. Результаты проведенных исследований расширяют имеющиеся представления о патохимии гликопротеинов при негоспитальной пневмонии, позволяют обосновать анализ компонентов гликоп-ротеинов сыворотки крови в ходе клинического наблюдения за больными.

Установлено, что показатели обмена гликопротеинов являются маркерами нарастания тяжести патологического процесса и позволяют прогнозировать затяжное течение пневмонии на ранних этапах диагностики с целью своевременной коррекции схемы лечения.

В целях экономии времени на исследование и уменьшения расходования реактивов модифицированы существующие методы анализа гликопротеинов сыворотки крови. Разработан новый метод выделения и характеристики гликопротеинов сыворотки крови с использованием лектина конканавалина А, обосновано его использование для оценки степени тяжести, площади поражения легочной ткани и раннего прогнозирования затяжного течения пневмонии.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. В сыворотке крови больных негоспитальной пневмонией обнаруживаются изменения количественного и качественного состава гликопротеинов. Повышение общего количества гликопротеинов проявляется статистически достоверным увеличением уровня белоксвязанных гексоз, белоксвязанных сиаловых кислот, белоксвязанной фукозы и гексозаминов в сыворотке крови больных. Изменения качественного состава гликопротеинов происходят вследствие отщепления терминально расположенных остатков сиаловых кислот и фукозы под действием ферментов сиалидазы и фукозидазы, активность которых увеличивается в сыворотке крови больных, что сопровождается нарастанием концентрации продуктов катаболизма гликопротеинов - свободных и олигосвязанных сиаловых кислот, олигомерсвязанной фукозы.

2. В результате анализа корреляционных связей между исследуемыми показателями, обнаружено наличие прямых сильных связей между содержанием в сыворотке крови белоксвязанных гексоз, белоксвязанных сиало-вых кислот, белоксвязанной фукозы и гексозаминов с одной стороны, и оптической плотностью раствора конканавалин А - гликопротеины с другой, что позволяет предложить турбидиметрический метод исследования гли-копротеинов с использованием лектина конканавалина А для оценки общего количества гликопротеинов в сыворотке крови здоровых и больных негоспитальной пневмонией.

3. Содержание отдельных компонентов обмена гликопротеинов закономерно изменяется в зависимости от степени тяжести, площади поражения легочной ткани, формы и характера течения заболевания, что может быть использовано в качестве дополнительного биохимического критерия при лабораторном мониторинге негоспитальной пневмонии.

Внедрение результатов в практику. В клинико-диагностических лабораториях ГУЗ РКБ № 1 и МУЗ МСЧ № 3 г. Ижевска Удмуртской Республики внедрено информационное письмо «Методы исследования показателей обмена сиаловых кислот в биологических жидкостях» (Ижевск, 2001).

Модифицированные лабораторные методы исследования гликопротеи-нов сыворотки крови используются в качестве дополнительного теста в оценке состояния больных, а также в учебном процессе на кафедре клинической биохимии и лабораторной диагностики ФПК и ПП Ижевской государственной медицинской академии.

На основании полученных результатов в лечебно-профилактических учреждениях Удмуртской Республики рекомендовано к внедрению рационализаторское предложение «Экспресс-метод определения гликопротеинов сыворотки крови» (2002,'№ 09.02).

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены на научно - практической конференции «Молодые ученые на рубеже веков (Ижевск, 2000), конференции биохимиков Урала, Поволжья и Западной Сибири (Ижевск, 2001), на научно-практических конференциях «Национальные дни лабораторной медицины России» (Москва, 2000, 2001, 2002, 2003), на межкафедральном заседании Ижевской государственной медицинской академии (Ижевск, 2004).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 8 научных работ.

Структура и объем работы. Диссертация изложена на 138 страницах

машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, главы результатов собственных исследований и их обсуждения, выводов, практических рекомендаций, списка литературы, включающего 167 отечественных и 110 зарубежных источников. Работа иллюстрирована 22 таблицами, 10 диаграммами и 1 рисунком.

Материалы и методы исследования. Для достижения поставленной цели было обследовано 107 больных внебольничной пневмонией, в зависимости от тяжести течения получающих амбулаторное или стационарное лечение соответственно в поликлинике или в 1 и 2 терапевтических отделениях МСЧ № 3 г. Ижевска в период с 2000 по 2002 год.

Согласно современной классификации негоспитальной пневмонии (Чу-чалин А.Г. и др., 2003), все обследованные больные были разделены на группы в зависимости от степени тяжести, формы и характера течения заболевания. При оценке степени тяжести пользовались критериями, предложенными В.П.Сильвестровым (1987). Больных с легкой степенью тяжести было всего 13 человек (12,2%), со средней степенью - 82 (76,6%), с тяжелой степенью -12 человек (11,2%). Согласно классификации В.П.Силь-вестрова (1987), пневмонии по клинико-рентгенологическим признакам были разделены на крупозные и очаговые. Группу больных с очаговой формой пневмонии составили 83 человека (77,6%), а с крупозной - 24 (22,4%). По особенностям течения пневмонии выделяли остро текущую форму и затяжную форму, при которой остро возникший пневмонический очаг разрешается в течение 4 недель и более, и заканчивается выздоровлением (Сильвестров В.П., 1987). Острое течение пневмонии наблюдалось у 79 больных (73,8%), а затяжное - у 28 больных (26,2%). Контрольную группу составили 25 практически здоровых посетителей поликлиники, проходящих плановый медицинский осмотр.

Оценка состава гликопротеинов проводилась по содержанию входящих в их состав углеводных компонентов. Для исследования использовалась венозная кровь, забор осуществлялся в утренние часы натощак в течение 1-2 суток с момента поступления на стационарное лечение.

Для определения общего количества БСГ использовали цветную реакцию с орцином после кислого гидролиза белков, осажденных этанолом (Кар-пищенко А.И., 1999). Концентрацию БССК определяли с помощью тиобар-битурового метода, считающегося наиболее чувствительным и специфичным (Камышников B.C., 2000), в модификации П.Н.Шараева (1993), которая позволяет оценить не только суммарное содержание сиаловых кислот, но и их фракционный состав: БССК и продукты их гидролиза - ОССК и ССК. Количество БСФ определяли по методу П.Н.Шараева с соавт. (1997), основанному на образовании цветной реакции метилпентоз с сульфгидрильны-ми соединениями при нагревании с серной кислотой, который позволяет выделить две фракции: БСФ и ОСФ. Содержание гексозаминов определяли методом Эльсона-Моргана, основанном на реакции аминосахара с ацетила-цетоном в горячем слабощелочном растворе (Слуцкий Л.И., 1969).

Ввиду большой трудоемкости и длительности выполнения вышеперечисленных методов исследования, нами был разработан метод определения гли-копротеинов сыворотки крови с использованием конканавалина А, основанный на способности этого лектина в различных процентных соотношениях

специфически связывает часть белков, гликопротеинов по структуре, большинство из которых относятся к белкам острой фазы воспаления (Луцик М.Д.,1981; Лахтин В.М., 1995). При добавлении конканавалина А к сыворотке крови, в результате его взаимодействия с гликопротеинами, образуются крупные комплексы с высокой молекулярной массой и низкой растворимостью (P.Rouge, C.Chatelain, 1978), что приводит к помутнению раствора конканавалин А - гликопротеины, интенсивность которого можно зарегистрировать с помощью турбидиметрического анализа.

Активность сиалидазы (КФ 3.2.1.18) оценивали по приросту в пробе сиа-ловых кислот после добавления в качестве субстрата нейраминлактозы (Цвет-кова И.В., Козина А.Б., 1968, Шараев П.Н., 1993). Активность a-L-фукози-дазы (КФ 3.2.1.51) оценивалась по образованию N-нитрофенола при ферментативном расщеплении Ы-нитрофенил-сс-Ь-фукозы (Колибаба Л.Г. и др., 1975).

Биохимические показатели в сыворотке крови определяли с использованием реагентов Human (Германия), по методикам, рекомендованным Международной Федерацией по клинической химии (IFCC) на многоканальном программируемом фотометре FP-901 (Labsystems, Финляндия). Белковые фракции сыворотки крови исследовали на приборе для электрофореза ЭФ-1 (Минск) на ацетатцеллюлозных пленках с использованием анализатора фореграмм АФ-1 (Минск). Концентрацию фибриногена определяли известным унифицированным гравиметрическим методом (Карпищенко А.И., 1999).

Для количественной оценки клеточного состава периферической крови использовалась капиллярная кровь, стабилизированная калиевой солью ЭДТА. Подсчет клеток крови осуществлялся импедансно - кондуктометри-ческим методом на гематологическом анализаторе Cobas Micros ОТ 18 (Франция). На этом же приборе проводилось определение гемоглобина цианмет-гемоглобиновым методом. Скорость оседания эритроцитов определялась унифицированным методом Панченкова (1972). Для подсчета лейкоцитарной формулы использовали унифицированный метод морфологического исследования форменных элементов крови (1979) с окраской по методу Романовского (Меньшиков В.В., 1987).

Статистическую обработку результатов исследования проводили с использованием программы Microsoft Excel 97. Для каждого ряда однородных чисел (вариационного ряда) были вычислены средняя арифметическая (М), среднее квадратическое отклонение (о), средняя ошибка средней арифметической (т). Определяли показатель существенности разницы (коэффи-

циент достоверности) Ч. Затем по критериям Стьюдента находили показатель вероятности (степень вероятности) - р. Достоверными считали различия при степени вероятности безошибочного прогноза не менее 95% (р<0,05). Для получения информации о тесноте (силе) связи между двумя количественными признаками проводился расчет коэффициента корреляции Пирсона (Славин М.Б., 1989).

Результаты исследования и их обсуждение. У обследованных больных к началу заболевания из общепринятых для пневмонии лабораторных тестов чаще всего было отмечено увеличение СОЭ (у 77 человек или в 72% случаев). Причем, наблюдалась прямая корреляция уровня СОЭ со степенью тяжести заболевания. Так, при легкой, средней и тяжелой степени тяжести пневмонии средние значения СОЭ составили 18,2±2,8; ЗГ,3±3,0 и 43,5±4,6 мм/ч соответственно. При остром и затяжном течении пневмонии величина СОЭ составила в среднем 26,0±2,1 и 44,5±5,4 мм/ч, причем при затяжном течении этот показатель превысил норму на 456,3% и на 71,5% был выше, чем при остром течении (р<0,001). Величина СОЭ была повышена у больных как с очаговой, так и с крупозной формой пневмонии и составила в среднем 29,3±1,7 и 36,2±5,3 мм/ч, что превышает норму на 266,3 и 352,0% соответственно, причем при крупозной форме уровень СОЭ на 23,5% выше, чем при очаговой, хотя различие статистически недостоверно.

Различия средних значений достоверно превышают контрольные показатели во всех группах больных (р<0,001), но в то же время широкий диапазон значений не позволяет использовать уровень СОЭ в качестве одного из основных лабораторных показателей при диагностике негоспитальной пневмонии и для определения степени тяжести заболевания. Так, при легкой степени тяжести пневмонии уровень СОЭ оставался в пределах нормы у 46,2% больных, при средней степени - у 26,8%, а при тяжелой - у 16,7% обследованных. Кроме того, показатель СОЭ зависит от некоторых факторов (свойства и количество эритроцитов, уровень липидов, желчных кислот, возраст больного и т.д.) (Карпищенко А.И., 1999), что иногда затрудняет интерпретацию результатов.

При исследовании количества лейкоцитов периферической крови у больных негоспитальной пневмонией обращает на себя внимание то, что в начальный период заболевания лейкоцитоз наблюдался лишь у 38 больных (35,5%), тогда как у 69 человек (64,5%) уровень лейкоцитов оставался в пределах нормы (от 4,0х109/л до 9,0х109/л, по данным Меньшикова В.В, 1982; Чиркина А.А. и др., 1993). Причем, значительное увеличение количества лейкоцитов у небольшого числа обследованных привело к статистически достоверному

увеличению средних значений относительно контрольных показателей во всех группах больных. Так, количество лейкоцитов в начальный период заболевания при легкой, средней и тяжелой степени тяжести пневмонии составило в среднем 8,72±0,56; 7,88±0,27 и 11,3±1,03х109/л соответственно.

Отсутствие лейкоцитоза при негоспитальной пневмонии у большинства больных можно отчасти объяснить снижением общей реактивности организма на фоне тенденции к иммунодефицитному состоянию, что характерно для экологически неблагополучных промышленных городов, к которым можно отнести и город Ижевск (Барвинко Н.Г., 1995; Чигирева Э.И. и др., 2000; Пинигин М.А., 2001; Биличенко Т.Н. и др., 2003).

Относительное количество нейтрофильных лейкоцитов достоверно превышало контрольные показатели только при легкой и тяжелой степени тяжести пневмонии, у больных с крупозной формой и с затяжным течением заболевания (на 15,3, 16,4,17,8 и 17,9% соответственно). При средней степени тяжести негоспитальной пневмонии, у больных с очаговой формой и с острым течением заболевания относительное количество нейтрофилов статистически не отличалось от контрольных показателей. Абсолютное количество нейтрофильных лейкоцитов, в отличие от относительного, в начальный период заболевания увеличено по сравнению с контролем во всех группах больных, причем наибольшее увеличение наблюдается при тяжелой степени тяжести пневмонии (на 77,2%), при крупозной форме (на 58,6%) ишри затяжном течении заболевания (на 61,1%).

Как видно из диаграммы 1, увеличение по сравнению с контролем абсолютного количества нейтрофильных лейкоцитов в зависимости от степени тяжести негоспитальной пневмонии выражено значительнее, чем увеличение относительного количества нейтрофилов. Это приводит к тому, что в группах больных негоспитальной пневмонией со средней степенью тяжести, с очаговой формой и с острым течением заболевания относительное количество нейтрофильных лейкоцитов статистически не отличается от контрольных показателей, тогда как абсолютное количество достоверно превышает контроль и помогает в диагностике.

Все вышеперечисленное позволяет рекомендовать оценку не только относительного количества нейтрофильных лейкоцитов, как это принято в повседневной практике терапевтического стационара в настоящее время, но, в первую очередь, оценку абсолютного количества нейтрофилов при диагностике и оценке степени тяжести негоспитальной пневмонии.

Относительное количество палочкоядерных нейтрофилов в начале заболевания превышало контрольные показатели только у 14 больных (13,1%) и

Относительное количество - Абсолютное количество

1В Норма Ш Легкая степень ЕЗСредняяя степень РТяжелая степень I

Диаграмма 1. Сравнительное увеличение (в %) абсолютного и относительного количества нейтрофильных лейкоцитов в зависимости от степени -тяжести негоспитальной пневмонии -

ни в одной группе обследуемых достоверно не отличалось от контрольных показателей. Абсолютное количество палочкоядерных нейтрофилов достоверно превышало контрольные показатели во всех группах больных за исключением легкой степени тяжести пневмонии, причем, наблюдалась положительная прямая корреляция со степенью тяжести заболевания. Так, при средней и тяжелой степени тяжести пневмонии количество палочкоядер-ных нейтрофилов превышало контрольные показатели в 2,2 и 2,9 раз соответственно, а при крупозной форме и затяжном течении пневмонии было выше контроля в 3,4 и 2,9 раз.

Учитывая вышеизложенное, можно рекомендовать при постановке диагноза негоспитальной пневмонии учитывать не только относительное количество палочкоядерных нейтрофилов, но и в большей степени их абсолютное количество, особенно в условиях лейкоцитоза.

Токсикогенная зернистость в нейтрофильных лейкоцитах обнаружена при легком, среднетяжелом и тяжелом течении пневмонии у 16,7; 18,9 и 66,7% больных соответственно, причем степень реакции (+, + + , + ++) увеличивается с утяжелением заболевания.

В отличие от нейтрофильных лейкоцитов и палочкоядерных нейтрофи-лов, у больных негоспитальной пневмонией происходит уменьшение как относительного, так и абсолютного количества лимфоцитов. Так, при легкой, средней и тяжелой степени тяжести пневмонии относительное и абсолютное количество лимфоцитов снижается на 41,9; 28,5; 50,7% и 29,6; 33,2; 22,8% соответственно.

Таким образом, статистический анализ общепринятых для негоспитальной пневмонии лабораторных исследований показал, что полученные показатели в целом не противоречат известным данным (Сильвестров В.П., 1987; Чиркин А.А., 1992; Синопальников А.И., 2001). Тем не менее, подтверждается и мнение некоторых авторов об отсутствии у части больных характерных прежде для течения негоспитальной пневмонии гематологических изменений (Провоторов В.М., Семенкова Г.Г., 1991). Это особенно важно в условиях снижения общей реактивности организма на фоне тенденции к иммунодефи-цитному состоянию у жителей экологически неблагополучных промышленных городов, к которым можно отнести и город Ижевск (Барвинко Н.Г., 1995; ЧигиреваЭ.И. и др., 2000; ПинигинМ.А., 2001; Биличенко Т.Н. и др., 2003).

Количество отдельных углеводных компонентов гликопротеинов изменяется не всегда параллельно, что зависит от различной концентрации конкретных белков плазмы крови, которые по-разному реагируют на острофазовый процесс в организме (Меньшиков В.В., 1987). В связи с тем, что в состав гликопротеинов входят гексозы (глюкоза, манноза, галактоза), производные нейраминовой кислоты (сиаловые кислоты), дезоксисахара (фукоза, рам-ноза), гексозамины (глюкозамин, галактозамин, маннозамин) (Готтшалк А., 1969; Серов В.В., Шехтер А.Б., 1981), сначала была поставлена задача определить количество БСГ, БССК, БСФ и гексозаминов в сыворотке крови здоровых и больных негоспитальной пневмонией в динамике заболевания.

Содержание БСГ, гексозаминов, БССК и БСФ в сыворотке крови здоровых и больных негоспитальной пневмонией в зависимости от степени тяжести, формы и характера течения заболевания представлено в таблице 1.

На диаграмме 2 показано процентное увеличение количества БСГ, БССК, БСФ и гексозаминов у больных негоспитальной пневмонией по сравнению с контрольной группой при различной степени тяжести негоспитальной пневмонии.

Как видно из диаграммы 2, все исследуемые показатели увеличиваются по мере утяжеления негоспитальной пневмонии. Однако, наиболее стабильным показателем, который увеличивается в меньшей степени, является БСФ. В наибольшей степени на увеличение тяжести воспалительного процесса реагируют БССК, в меньшей степени БСГ и гексозамины.

Таблица 1. Содержание БСГ, гексозаминов, БССК и БСФ в сыворотке крови у здоровых и больных негоспи-тальной пневмонией в зависимости от степени тяжести, формы и характера течения заболевания, мг/л

Показатели БСГ (М*м) Гексозамины (М*м) БССК (М*м) БСФ (М±м)

Контрольная группа (п-25) 1120,0*29,7 956,0*57,0 501,3*7,3 71,3*3,4

По степени тяжести: Легкая степень (п=13) 1328,8*52,2*** 1154,2*43,8 1139.0*95.3 1054,5*63,0 559,0*15,2*** 521,3*18,6 75,8*4,5 73,4*2,5

Средняя степень (п=82) 1443,8*32,9*** 1292,3*25,5*** 1242,8*57,5* 1110,0*65,0 620,3*9,2*** 542,9*8,4** 79.2*1,9* 75,7*1,8

Тяжелая степень (п=12) 1781.0*93,0*** 1563,0*75,1*** 1434,0*115,0*** 1347,5*97,8*** 866,0*20,0*** 742,3*18,8*** 92.6*5,3*** 86,1*4,1*

По форме: Очаговая форма (п=83) 1393,7±29,0*** 1191,5*23,5 1241,6*62,5* 1125,0*61,0 629,0*10,3*** 539,7*8,6* 89.3*1.6*** 78,4*1,78

Крупозная форма (п=24) 1791,0±94,9*** 1462,8*92,3*** 1287,3*95,6*** 1153,8*79,6* 625,3*9.7*** 558,3*10,2*** 81,3*3,0* 77,2*3,8

По течению: Острое течение (п=79) 1344.1*23,5*** 1236,9*26,5* 1187,6*58,4* 1084,0*65,2 599,4*9,9*** 538,0*7,8* 90,5*2,0*** 74,9*1,9

Затяжное течение (п=28) 1831,0*80,5*** 1621,3±75|3*** 1356.7*110.3** 1245,3*78,1** 732,0*13.0*** 688,5*12,5*** 91.6*3.1*** 86,7*4,1**

Примечание: п - количество больных, М±м - средние величины; достоверность разницы с контролем: * - (р<0,05); ** - (р<0,01); *** - (р<0,001); над чертой - данные в начальный период заболевания, под чертой -данные на 10-12-й день лечения

БСГ- БССК : БСФ • Гмсоымины

|И_Норма В Легкая степень • Средняя степень Р Тяжелая степень I

Диаграмма 2. Отношение (в % ) к контрольной группе концентрации БСГ, БССК, БСФ и гексозаминов в зависимости от степени тяжести пневмонии

Увеличение концентрации в сыворотке крови БСГ, БССК, БСФ и гексозаминов указывает на повышение количества гликопротеинов сыворотки крови, большинство из которых относятся к белкам острой фазы воспаления (ctj-антитрипсин, a1-антихимотрипсин, церулоплазмин, гаптоглобин, a2-макроглобулин, гемопексин, трансферрин, С-3 компонент комплемента, иммуноглобулины G, А, М и некоторые другие) (Алешкин В.А. и др., 1988).

Следует отметить, что диагностическая значимость определения индивидуальных БОФ для мониторинга течения заболевания и контроля эффективности лечения несомненно велика, в то же время, использование только одного из маркеров воспаления рискованно из-за возможного дисгармоничного острофазового ответа у некоторых больных (Шевченко О.П., 1996). Вместе с тем, исследование нескольких БОФ у одного больного ограничено достаточно высокой стоимостью количественных методов определения этих белков (нефелометрии, иммунотурбидиметрии), особенно в условиях мониторинга. Латекс-агглютинация может использоваться как полуколичественный скрининговый метод выявления повышенных концентраций, после чего необходимо перейти к мониторингу с использованием количественных методов (Шевченко О.П., 1996).

В связи с вышеизложенным, была предпринята попытка разработать новый метод для скрининга повышенного количества гликопротеинов сыворотки крови с использованием лектина конканавалина А. Метод основан на способности конканавалина А избирательно связывать гликопротеины сыво-

ротки крови, имеющие определенную структуру олигосахаридных остатков. При добавлении конканавалина А к сыворотке крови, в результате его взаимодействия с гликопротеинами, образуются крупные комплексы с высокой молекулярной массой и низкой растворимостью (Rouge P., Chatelain С, 1978). Это приводит к помутнению раствора, интенсивность которого можно зарегистрировать с помощью турбидиметрического анализа на стандартном фотометре.

Так, у практически здоровых людей контрольной группы оптическая плотность взвеси комплексов конканавалин А—гликопротеины составила в среднем 0,098+0,0025 ед. опт. пл. У больных негоспитальной пневмонией наблюдалось статистически достоверное увеличение оптической плотности раствора конканавалин А - гликопротеины во всех группах обследованных (табл. 2).

Таблица 2. Оптическая плотность взвеси комплексов конканавалин А — гликопротеины в ед.опт.пл. у здоровых и больных негоспитальной пневмонией в зависимости от степени тяжести, формы и характера течения заболевания

Показатель М*м Разница с контролем,%

Контрольная группа (п—25) 0,098*0,0025 -

По степени тяжести: Легкая степень (п-13) 0,134*0,0028 0,101+0,0020 +36.7*** +3,1

Средняя степень (п=82) 0.148*0.0024 0,109*0,0023 +51.4*** +11,2*

Тяжелая степень (п-12) 0,201*0,0081 0,178*0,0076 +105.1*** +81,6***

По форме: Очаговая форма (п=83) ■ 0,145*0,0034 0,099*0,0032 +48,0*** +1,0

Крупозная форма (п=24) 0.194*0.0020 0,129*0,0027 +98,0*** +31,6***

По характеру течения: Острое течение (п-79) 0.141*0.0040 0,105*0,0033 +43.9*** +7,1

Затяжное течение (п=28) 0,179*0,0072 0,161*0,0081 +82,7*** +64,3***

Примечание: п - количество больных, М±м - средние величины, р - достоверность разницы с контролем достоверность разницы с контролем: * - (р<0,05); ** • (р<0»01); *** • (р<0,001); над чертой - данные в начальный период заболевания, под чертой - данные на 10-12-й день лечения

Увеличение оптической плотности взвеси комплексов конканавалин А -гликопротеины у больных негоспитальной пневмонией связано с тем, что этот лектин преципитирует из сыворотки крови a1-антитрипсин, а1-анти-химотрипсин, церулоплазмин, гаптоглобин, а^макроглобулин, СЗ-компо-нент комплемента, Ig А, M, G, концентрация которых увеличивается в рамках острофазового процесса при негоспитальной пневмонии. Что касается взаимодействия конканавалина А с серомукоидом, то существуют связанные и несвязанные с ним фракции этого гликопротеина. Причем, в сыворотке крови больных с острым воспалением увеличивается доля связанных с конканавалином А фракций серомукоида (Новикова Л.И., Алешкин В.А., 1991), что также может приводить к увеличению оптической плотности взвеси комплексов конканавалин А - гликопротеины.

После центрифугирования (4000 об/мин - 10 мин) образовавшегося раствора конканавалин А - гликопротеины визуально определяется осадок, тогда как надосадочная жидкость становится прозрачной (оптической плотности практически не отличается от контроля). Кроме того, при определении в надосадочной жидкости компонентов гликопротеинов (БСГ, БССК, БСФ), они были обнаружены лишь в следовых количествах. Это позволило предположить, что практически все гликопротеины сыворотки были связаны конканавалином А и после центрифугирования образовали осадок. Для подтверждения этого предположения в осадке с лектином было исследовано количество гексоз, сиаловых кислот и фукозы.

В осадке с лектином у обследуемых контрольной группы количество БСГ, БССК и БСФ составило 17,5+0,65 мкг, 12,2±0Д мкг и 1,7+0,044 мкг соответственно. При негоспитальной пневмонии количество БСГ, БССК и БСФ достоверно увеличивалось во всех группах больных, причем, наблюдалась сильная прямая корреляционная связь между оптической плотностью раствора конканавалин А - гликопротеины, с одной стороны, и количеством гексоз (г=0,78; р<0,05), сиаловых кислот (г=0,7; р<0,05) и фукозы (г=0,8; р<0,05) в осадке с лектином, что позволяет подтвердить факт связывания гликопротеинов конканавалином А и возможность использования данного метода для количественного определения концентрации гликопротеинов в сыворотке крови.

Кроме того, прямые сильные корреляционные связи были обнаружены между оптической плотностью раствора конканавалин А - гликопротеины и уровнем БСГ (г=0,76; р<0,05), БССК (г=0,71; р<0,05), БСФ (г=0,79; р<0,05) и гексозаминов (г=0,7; р<0,05), что также подтверждает возможность использования предложенного метода для определения уровня суммарных гли-копротеинов в сыворотке крови.

Для характеристики не только количественного, но и качественного состава гликопротеинов сыворотки крови, были проанализированы соотношения различных углеводных компонентов гликопротеинов у здоровых и больных негоспитальной пневмонией. Так, отношение БССК/БСФ в контрольной группе составило 7,03+0,26. У больных негоспитальной пневмонией отношение БССК/БСФ составило в среднем 7,7+0,39, а при тяжелой степени тяжести пневмонии - 9,35+0,43 (р<0,001), что свидетельствует об относительном снижении количества фукозы в составе гликопротеинов. Это можно объяснить, с одной стороны, изменением соотношения между отдельными гликопротеинами сыворотки крови при негоспитальной пневмонии, а с другой стороны, отщеплением остатков фукозы от фукозогликопротеинов в кислой среде в условиях ацидоза, которые возникают в тканях при инфекцион-но - воспалительном генезе заболевания (Дуков Л.Г., Ворохов А.И., 1996). Известно, что сиаловые кислоты, особенно расположенные в молекулах терминально, предохраняют гликопротеины от действия гидролитических ферментов клеток воспаленной ткани, в частности нейтрофильных лейкоцитов, вирусов и бактерий (Видершайн Г.Я., 1980). В связи с этим, можно предположить, что фукозогликопротеины, содержащие относительно меньшее количество сиаловых кислот в молекулах, в большей степени подвергаются гидролитическому расщеплению и элиминации из организма по сравнению с сиалогликопротеинами.

Достоверно увеличены по сравнению с контролем у больных негоспитальной пневмонией и продукты катаболизма гликопротенов (табл. 3).

Увеличение продуктов деградации гликопротеинов при негоспитальной пневмонии связано в частности с активацией фермента сиалидазы, которая расщепляет а-гликозидные связи сиаловых кислот в составе гликопротеинов, протеогликанов и ганглиозидов (Покровский А.А., 1976). Активность сиалидазы в сыворотке крови практически здоровых людей контрольной группы определялась лишь в следовых количествах, что не противоречит данным других авторов (Цветкова И.В., Козина А.Б., 1968; Шараев П.Н., 1993). При негоспитальной пневмонии активность сиалидазы определялась во всех группах больных и при легкой, средней и тяжелой степени тяжести пневмонии составила 2,08+0,28, 3,54+0,21 и 4,69+0,47 мкг/мл/ч. Источником повышения активности этого фермента могут быть эпителиальные клетки, макрофаги, нейтроф ильные лейкоциты поврежденных тканей, атак же сиалидаза вирусного и бактериального происхождения (Готтшалк А., 1969).

Таблица 3. Содержание ОСФ, ОССК и ССК в сыворотке крови у здоровых и больных негоспитальной пневмонией в зависимости от степени тяжести, формы и характера течения заболевания, в мг/л

Показатель ОСФ (М±м) ОССК (М*м) ССК (М*м)

Контрольная группа (п-25) 11,8*0,57 65,3*1,50 - 26,6*2,2

По степени тяжести: Легкая степень (п=13) 12,3*0.81 12,1*0,76 90.6*5,24* 71,5*5,71 33,2*1.7* 28,5*2,3

Средняя степень (п=82) 13,6*0,43* 12,2*0,35 90,2*2,61* 73,1*2,12 36,1*1,6** 31,3*1,8

Тяжелая степень (п=12) 14,7*1,01** 13,2*0,97 137,0*4,13* 105,6*3,71* 53.8*3.3*** 43,5*2,8***

По форме: Очаговая форма (п«=83) 13,8*0,51* 12,0±0,49 91,5*2,58* 75,3*2,51* 37,6*2,3* 27,9*2,2

Крупозная форма (п=24) 14,0*0,91* 12,5*0,78 86,2*1,78* 74,5*1,31* 39.5*2.5*** 33,2*2,5*

По течению: Острое течение (п=79) 13,6*0,44* 11,9*0,39 91,9*2,51* 75,6*2,75* 36.8*1,8** 31,7*2,1

Затяжное течение (п=28) 13,9±0,78* 12,1*0,73 101,1*3,78* 92,3*2,64* 48,1*3.1*** 43,1*2,9***

Примечание: п - количество больных, М±м - средние величины; достоверность разницы с контролем: * - (р<0,05); ** - (р<0,01); *** - (р<0,001); над чертой — данные в начальный период заболевания, под чертой - данные на 10-12-й день лечения

Сиаловые кислоты, расположенные в молекулах гликопротеинов терминально, предохраняют эти белки от более глубокого расщепления под действием протеолитических ферментов (Видершайн Г.Я., 1980). В очаге воспаления увеличивается активность сиалидазы, которая отщепляет терминально расположенные остатки сиаловых кислот, в результате происходит более глубокое разрушение гликопротеинов гидролитическими и про-теолитическими ферментами поврежденной ткани, результатом чего может быть увеличение в крови содержания ОССК. Повышение активности фукозидазы, выявленное нами при тяжелой степени тяжести негоспитальной пневмонии, способствует отщеплению остатков фукозы от молекул гли-копротеинов и увеличению в крови уровня ОСФ.

В связи с вышесказанным, определенный интерес представляет анализ отношения БССК/ССК у здоровых и больных негоспитальной пневмонией. Так, у практически здоровых людей отношение содержания БССК/ССК составляет 18,84*0,8 и отражает значительное преобладание концентрации БССК по сравнению со ССК. У больных негоспитальной пневмонией при легкой , средней и тяжелой степени тяжести заболевания отношение БССК/ССК составило в среднем 16,82+1,4; 17,18+0,9 и 16,1± 1,0 соответственно. При-

чем, при тяжелой степени это отношение достоверно меньше контроля, что говорит об относительном увеличении ССК, то есть процессов катаболизма сиалогликопротеинов. Интересно, что при затяжном течении пневмонии отношение БССК/ССК значительно меньше контрольных показателей как при поступлении больных, так и на 10-12-й день лечения, что говорит о преобладании процессов катаболизма гликопротеинов. Это может быть связано с повреждением легочной ткани протеолитическими ферментами в условиях ингибирования или недостаточного синтеза основных ингибиторов протеи-наз (Локшина Л.А. и др., 1987; Шарышев Ю.С., 1987; Gadek JJY, Pacht E.R., 1990). Все это приводит к медленному разрешению в очаге воспаления и способствует затяжному течению пневмонии.

Таким образом, изучение показателей обмена гликопротеинов позволило уточнить роль этих веществ в развитии патохимических сдвигов при негоспитальной пневмонии. Доказано, что при этом заболевании отмечается не только количественное увеличение гликопротеинов сыворотки крови, но и изменяется соотношение между отдельными компонентами этих соединений..

ВЫВОДЫ.

1. При негоспитальной пневмонии развитие патологического процесса сопровождается резким ростом содержания сывороточных гликопротеинов (по уровню белоксвязанных гексоз, белоксвязанных сиаловых кислот, бело-ксвязанной фукозы и гексозаминов), одновременно в их составе наблюдается относительное преобладание уровня сиалогликопротеинов и снижение доли фукозогликопротеинов.

2. У больных негоспитальной пневмонией в начальном периоде отмечается достоверное увеличение концентрации продуктов катаболизма гликоп-ротеинов (олигосвязанных и свободных сиаловых кислот, олигомерсвязан-ной фукозы) в сыворотке крови. Концентрации олигосвязанных сиаловых кислот, свободных сиаловых кислот и олигомерсвязанной фукозы нарастают по мере утяжеления этого заболевания и при содержании 137,0+4,13; 53,8±3,3; 14,7+1,01 мг/л и более соответственно являются маркерами тяжелого течения негоспитальной пневмонии.

3. При негоспитальной пневмонии в сыворотке крови больных происходит активация лизосомальных ферментов сиалидазы (КФ 3.2.1.18) и a-L-фукозидазы (3.2.1.51), что указывает на повышение в обмене гликопротеи-нов катаболических процессов. Степень активности этих ферментов прямо коррелирует со степенью тяжести негоспитальной пневмонии.

4. При исследовании гликопротеинов сыворотки крови больных негоспитальной пневмонией с использованием лектина конканавалина А обнаруже-

но статистически достоверное увеличение количества связанных с лекти-ном гликопротеинов у обследованных больных по сравнению с контрольной группой, что обусловлено, с одной стороны, увеличением общего содержания гликопротеинов сыворотки крови у больных пневмонией, а с другой стороны, изменением их качественного состава.

5. Количество гликопротеинов сыворотки крови, определяемых с использованием лектина конканавалина А, изменяется в зависимости от степени тяжести, формы и характера течения негоспитальной пневмонии, что позволяет рекомендовать данное исследование для комплексной оценки степени тяжести, формы заболевания, и прогнозирования затяжного течения пневмонии в начальном периоде болезни.

6. У практически здоровых лиц и больных негоспитальной пневмонией определено наличие прямых сильных корреляционных связей между содержанием в сыворотке крови гексозаминов, белоксвязанных гексоз, белоксвязанных сиаловых кислот и белоксвязанной фукозы с одной стороны, и оптической плотностью взвеси комплексов конканавалин А - гликопротеины с другой, что позволяет использовать турбидиметрический метод исследования гликопротеинов сыворотки крови с применением лектина конканавали-на А для оценки общего количества гликопротеинов в сыворотке крови здоровых и больных негоспитальной пневмонией.

Практические рекомендации. Исследования фракционного состава сиа-ло- и фукозосодержащих соединений сыворотки крови могут быть рекомендованы для использования в качестве дополнительного биохимического критерия при диагностике негоспитальной пневмонии, для оценки степени тяжести заболевания и прогнозирования затяжного течения пневмонии.

Повышение активности сиалидазы с параллельным ростом количества ОССК, ССК и уменьшением соотношения БССК/ССК является маркером обширного поражения легочной ткани с высокой вероятностью тяжелого течения заболевания и замедленным разрешением в очаге воспаления, что приводит к затяжному течению пневмонии.

Целесообразным является включение этих исследований в схемы лабораторного мониторинга негоспитальной пневмонии. В качестве скрининга может быть рекомендован метод определения гликопротеинов сыворотки крови с применением лектина конканавалина А, с последующим (при необходимости) проведением развернутых методов исследования.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. О диагностическом значении показателей обмена коллагена и гликопротеинов при эндогенных интоксикациях /П.Н.Шараев, Н.С.Стрелков,

И.А.Зворыгин, А.Я.Мальчиков, Е.П.Сахабутдинова, Н.Н.Меньшикова, М.Н.Осипова, Т.О.Толстолуцкая// Клин. лаб. диагн. - 2000. - № 9. - С. 9-10.

2. О диагностическом значении исследования гликопротеинов и оксип-ролинсодержащих белков сыворотки крови и мочи с использованием лекти-нов. /Т.О.Толстолуцкая, И.А.Зворыгин, Я.В.Васильева, Н.К.Габдрахмано-ва, М.Н.Осипова, Н.Г.Чернышева// Материалы конф. биохимиков Урала, Поволжья и Западной Сибири «Актуальные проблемы теоретической и прикладной биохимии». - Ижевск: Экспертиза. - 2001. - С. 130-131.

3. Толстолуцкая Т.О. Исследование гликопротеинов сыворотки крови с использованием лектинов. /Т.О.Толстолуцкая// Труды Ижевской государственной медицинской академии, т. 39. - Ижевск: Экспертиза. - 2001. - С. 34-35.

4. Исследование гликопротеинов сыворотки крови больных острой пневмонией и клещевым энцефалитом. /Т.О.Толстолуцкая, Я.В.Васильева,. П.Н.Шараев, Ж.В.Афсари// Клин. лаб. диагн. - 2001. - №11. - С. 11.

5. Выделение гликопротеинов сыворотки крови с использованием лекти-нов. /П.Н.Шараев, И.А.Зворыгин, Т.О.Толстолуцкая, Я.В.Васильева// Сборник трудов Ижевской государственной медицинской академии «Достижения и перспективы научных исследований». - Ижевск. - 2001. - С. 274-275.

6.. Методы исследования показателей обмена сиаловых кислот в биологических жидкостях (Информационное письмо для врачей клинической лабораторной диагностики). /П.Н.Шараев, И.А.Зворыгин, О.Е.Овечкина, О.И.Лекомцева, Е.П.Сахабутдинова, Н.К.Габдрахманова, М.Н.Осипова, Т.Н.Стрелкова, Н.Г.Чернышова, Я.В.Васильева, Т.О.Толстолуцкая// Ижевск. - 2001: - 8 с.

7. Толстолуцкая Т.О. Анализ взаимодействия сыворотки крови здоровых и больных негоспитальной пневмонией с лектином конканавалином А. / Т.О.Толстолуцкая// Клин. лаб. диагн. - 2002. - № 10. - С. 29-30.

8. О внедрении новых биохимических исследований, используемых при эндогенных интоксикациях /П.Н.Шараев, Н.С.Стрелков, Т.О. Толстолуцкая, П.Н.Максимов, М.Н.Прокопьева// Клин. лаб. диагн. - 2003. - № 9. - С. 48-49.

Список сокращений

БССК - белоксвязанные сиаловые кислоты ОССК - олигомерсвязанные сиаловые кислоты ССК - свободные сиаловые кислоты БСФ - связанная с белками фукоза ОСФ - связанная с олигомерами фукоза БСГ - связанные с белками гексозы БОФ - белки острой фазы воспаления СОЭ - скорость оседания эритроцитов

»15314

Подписано в печать 26.05.2004. Формат 60x84/16. Уч.-изд. л. 1,2. Усл.печ. л. 1,4. Тираж 120 экз. Заказ № 2447.

Отпечатано в МП «Сарапульская городская типография». 427900, г. Сарапул, ул. Раскольникова, 152

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Толстолуцкая, Татьяна Олеговна

Список принятых сокращений.

Введение.

Глава 1. Обзор литературы.

1.1. Гликопротеины сыворотки крови.

1.1.1. Современные представления.

1.1.2. Роль белков острой фазы при воспалении и повреждении тканей.

1.2. Лектины: современные представления, характеристика, использование для определения гликопротеинов сыворотки крови.

1.3. Негоспитальная пневмония.

1.3.1. Современный взгляд на проблему.

1.3.2. Изменения гликопротеинов сыворотки крови при пневмониях.

Глава 2. Материалы и методы исследования.

2.1. Общая характеристика наблюдаемых больных.

2.2. Основные методы лабораторной диагностики при негоспитальной пневмонии.

2.3. Методы определения показателей обмена гликопротеинов.

2.4. Методы статистического анализа.

Глава 3. Анализ показателей лабораторных исследований у больных негоспитальной пневмонией.

Глава 4. Изучение показателей обмена гликопротеинов сыворотки крови у здоровых и больных негоспитальной пневмонией. 4.1. Исследование содержания белоксвязанных гексоз, белок-, олиго-мерсвязанных и свободных сиаловых кислот, белок- и олигомерсвязанной фукозы, гексозаминов, активности сиалидазы и фукозидазы в сыворотке крови здоровых и больных негоспитальной пневмонией.

4.2. Исследование гликопротеинов сыворотки крови у практически здоровых и больных негоспитальной пневмонией с применением лектина конканавалина А.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Исследование гликопротеинов сыворотки крови у больных негоспитальной пневмонией"

В структуре заболеваемости негоспитальная пневмония занимает одно из ведущих мест, частота этого заболевания в последние годы имеет тенденцию к росту, несмотря на большие достижения в разработке и применении новых методов лечения (Мартынова А.В. с соавт., 2002; Воробьев П.А. с соавт., 2003; Bartlett J.G., 2000). Заболеваемость негоспитальной пневмонией по Российской Федерации в настоящее время составляет 5-8 человек на 1000 населения (Чуча-лин А.Г. с соавт., 2003). В последние годы выросла также летальность от пневмонии: при крупозной форме до 4-5%, а при очаговой до 0,9-1% (Чучалин А .Г. с соавт., 2003). В Удмуртской Республике общая заболеваемость негоспитальной пневмонией составляет 4,9 - 5,1 человек на 1000 населения, и в последние годы неуклонно увеличивается количество больных, умерших от пневмонии. Так, в 2000 году в Удмуртской Республике от пневмоний умерло 339 человек, в 2001 -459, а в 2002 - 554 человека (Шадрин С.Г., 2003).

Диагностика пневмонии складывается из совокупности клинических критериев (лихорадка, температура выше 38°С, интоксикация, кашель сухой или с мокротой, кровохарканье, боль в грудной клетке), физикальных данных (притупление перкуторного звука, усиление голосового дрожания, ограничение подвижности легочного края, изменение дыхания - ослабленное, жесткое, бронхиальное, крепитация, мелкопузырчатые хрипы), объективных критериев (появление новых очагово-инфильтративных изменений в легких при рентгенографии грудной клетки в 2-х проекциях, микробиологическое исследование с окраской мазка мокроты по Граму и посевом, клинический анализ крови — лейкоцитоз >10х109/л и/или палочкоядерный сдвиг >10%) (Чучалин А.Г., 2003). Типичными лабораторными признаками являются также токсигенная зернистость нейтро-филов, анэозинофилия, гиперфибриногенемия, протеинурия, уробилинурия, ци-линдрурия (Сильвестров В.П., 1987; Чиркин А.А., 1992; Синопальников А.И., 2003).

Ошибки в диагностике пневмоний достигают 20%, диагноз пневмонии в первые три дня болезни ставится у 35% заболевших (Чучалин А.Г., 2003). У 30 -40% больных острая пневмония приобретает затяжное течение (Сильвестров В.П., 1987), что связано с запоздалой диагностикой, а, следовательно, несвоевременным началом лечения.

В последнее время в пульмонологии все чаще описываются случаи так называемой атипичной пневмонии. Это пневмонии у ослабленных и пожилых людей на фоне снижения общей резистентности организма, характеризующиеся вялым малосимптомным течением без повышения температуры и изменений гемограммы (Сильвестров В.П., Федотов П.И., 1987).

Атипично протекают пневмонии редкой локализации (верхнедолевая, прикорневая), а так же микоплазменные, хламидиозные, легионеллезные пневмонии (Синопальников А.И., 2001; Турьянов М.Х., Чернакова Г.М., 2003).

Необходимо отметить, что стето-акустические признаки поражения органов дыхания, которым раньше отводилось одно из ведущих мест в диагностике заболеваний легких, в настоящее время несколько утратили свою клиническую ценность (Синопальников А.И., 2001).

Одним из основных методов диагностики пневмонии является рентгенологический, но в последнее время появился термин «рентгенонегативная пневмония» (Чучалин А.Г., 2003). Некоторые авторы считают, что рентгенологические изменения отсутствуют у 26,5% больных пневмонией (Палеев P.M. с соавт., 1985), другие же утверждают, что рентгенонегативная пневмония является следствием ограниченных технических возможностей традиционных методов исследования (Федченко Г.Г., 2002).

Диагностика пневмонии в настоящее время затруднена у 1/3 больных ввиду стертой клинико-рентгенологической симптоматики и из-за отсутствия характерных прежде для ее течения гематологических изменений (Провоторов В.М., Семенкова Г.Г., 1991). Все это приводит к необходимости поиска новых объективных методов исследования при этом заболевании.

Вместе с тем, при пневмонии, как и при многих других патологических состояниях, в организме формируется неспецифическая воспалительная реакция. функцией которой является обезвреживание, связывание и удаление из организма инфекционных агентов, их токсинов и восстановление поврежденных тканей. Совокупность системных и местных реакций организма на повреждение была названа острофазовым ответом (Алешкин В.А. с соавт., 1988).

Одним из ведущих признаков острофазовой реакции организма, в том числе и при пневмонии, является изменение белков плазмы крови, названных соответственно белками острой фазы.

Концентрация многих БОФ повышается уже через несколько часов от начала альтерации, что может быть использовано в ранней диагностике пневмонии и для характеристики состояния больного в динамике (Алешкин В.А. с соавт., 1988; Шевченко О.П., 1996).

Важнейшей особенностью БОФ является принадлежность большинства из них к классу гликопротеинов, а именно к N-гликопротеинам, так как их углеводная цепочка присоединена к N Но-группам аспарагиновых остатков полипептидной цепи (Новикова Л.И., Алешкин В.А., 1991; Koolman J., 1998).

В литературе имеются данные по определению как суммарных гликопротеинов сыворотки крови, так и отдельных их представителей при негоспитальной пневмонии (Анасашвили А.Ц. с соавт., 1968; Шелег В.А., Мизин И.И., 1980; Лутошкин С.Ф., 1983; Комар С.И., Коробейникова Э.Н., 1987; Арсентьев Ф.В. с соавт., 1990; Комар С.И., Провоторов В.М., Семенкова Г.Г., 1991; Камышников B.C., 2000).

Предложено много методов для определения гликопротеинов сыворотки крови. Так, можно оценивать их количество по углеводному (гексозы, сиаловые кислоты, гексозамины, фукоза) или белковому компоненту. Существуют методы определения гликопротеинов сыворотки крови с помощью электрофореза с последующей специфической окраской и денситометрией, взвешиванием или элюцией электрофореграмм (Хъюз Р., 1985). Однако, перечисленные методы определения гликопротеинов сыворотки крови не всегда доступны для клин и ко — диагностических лабораторий из-за большой трудоемкости, длительности выполнения, необходимости использования высокотоксичных реактивов и специального оборудования.

Таким образом, с научной и практической точки зрения оправданным является поиск новых методов определения гликопротеинов сыворотки крови.

В литературе много исследований по дифференцировке гликопротеинов с использованием лектинов (Королев Н.П., 1984; Луцик М.Д., 1984; Лахтин В.М., 1987; Кильдибекова А.Р. с соавт., 2003), которых в чистом виде было получено более 600.

Определенный интерес представляет лектин, выделенный из канавалии мечевидной - конканавалин А. Это простой белок, одна молекула которого имеет 4 центра связывания углеводов. Он обладает сродством к а-аномерам маннозы, глюкозы, Ы-ацетил-О-глюкозамина в соотношении 100:22:1. В сыворотке крови конканавалин А в различном процентном соотношении связывает значительное количество белков, гликопротеинов по структуре, большинство из которых относятся к белкам острой фазы воспаления. Это oti-антитрипсин, а,]-антихимотрипсин, церулоплазмин, гаптоглобин, а^-макроглобулин, гемопексин, трансферрин, С-3 компонент комплемента, иммуноглобулины G, А, М и некоторые другие (Луцик М.Д. с соавт., 1981).

Комплексная оценка содержания и состава гликопротеинов у больных пневмонией может быть полезна для понимания патогенетических особенностей заболевания, а также использоваться в качестве дополнительного критерия для диагностики, оценки степени тяжести и раннего прогнозирования затяжного течения негоспитальной пневмонии.

Цель исследования: оценить изменения показателей обмена гликопротеинов в сыворотке крови больных негоспитальной пневмонией в зависимости от формы, степени тяжести и характера течения заболевания и сопоставить их с общепринятыми лабораторными данными.

Задачи исследования:

1. Выделить суммарные препараты гликопротеинов сыворотки крови у практически здоровых лиц и больных внебольничной пневмонией, определить в них количество и соотношение углеводных компонентов (гексоз, гексозаминов, фукозы и сиаловых кислот).

4. Исследовать изменение активности лизосомальных ферментов сиалидазы (КФ 3.2.1.18) и a-L-фукозидазы (КФ 3.2.1.51) у больных с различной степенью тяжести негоспитальной пневмонии.

Научная новизна.

Впервые получены комплексные данные об изменениях количественного и качественного состава сывороточных гликопротеинов у практически здоровых лиц и больных внебольничной пневмонией с определением содержания ССК, ОССК, БССК, ОСФ, БСФ, БСГ, гексозаминов, активности сиалидазы и фукози-дазы сыворотки крови.

При анализе соотношений БССК/ССК, ОССК/ОСФ, БССК/БСФ, БСГ/БССК и гексозамины/БССК, установлен относительный рост остатков сиаловых кислот в выделенных препаратах гликопротеинов сыворотки крови больных негоспитальной пневмонией и преобладание ССК при тяжелой степени тяжести заболевания, что свидетельствует об увеличении катаболических процессов по мере утяжеления пневмонии.

Впервые разработан экспресс - метод количественного определения гликопротеинов сыворотки крови у здоровых и больных негоспитальной пневмонией с использованием лектина конканавалина А, доказана возможность использования данного метода для оценки общего количества сывороточных гликопротеинов, а следовательно, и степени острофазового ответа организма при пневмонии.

Установлена зависимость исследуемых показателей от степени тяжести, площади поражения легочной ткани, формы и характера течения негоспитальной пневмонии, доказана возможность использования данных исследований для раннего прогнозирования затяжного течения заболевания.

Представлены результаты корреляционного анализа исследуемых показателей и основных гематологических и биохимических тестов, широко используемых для диагностики негоспитальной пневмонии, выявлено изменение диагностической значимости некоторых общепринятых методов лабораторной диагностики пневмоний.

Практическая значимость.

Результаты проведенных исследований расширяют имеющиеся представления о патохимии гликопротеинов при негоспитальной пневмонии, позволяют обосновать анализ компонентов гликопротеинов сыворотки крови в ходе клинического наблюдения за больными.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. В сыворотке крови больных негоспитальной пневмонией обнаруживаются изменения количественного и качественного состава гликопротеинов. Повышение общего количества гликопротеинов проявляется статистически достоверным увеличением уровня БСГ, БССК, БСФ и гексозаминов в сыворотке крови больных. Изменения качественного состава гликопротеинов происходят вследствие отщепления терминально расположенных остатков сиаловых кислот и фу-козы под действием ферментов сиалидазы и фукозидазы, активность которых увеличивается в сыворотке крови больных, что сопровождается нарастанием концентрации продуктов катаболизма гликопротеинов — ССК, ОССК, ОСФ.

2. В результате анализа корреляционных связей между исследуемыми показателями, обнаружено наличие прямых сильных связей между содержанием в сыворотке крови БСГ, БССК, БСФ и гексозаминов с одной стороны, и оптической плотностью раствора конканавалин А — гликопротеины, что позволяет предложить турбидиметрический метод исследования гликопротеинов с использованием лектина конканавалина А для оценки общего количества гликопротеинов в сыворотке крови здоровых и больных негоспитальной пневмонией.

Внедрение результатов в практику.

В клинико - диагностических лабораториях ГУЗ РКБ № 1 и МУЗ МСЧ № 3 г. Ижевска Удмуртской Республики внедрено информационное письмо «Методы исследования показателей обмена сиаловых кислот в биологических жидкостях» (Ижевск, 2001).

Модифицированные лабораторные методы исследования гликопротеинов сыворотки крови используются в качестве дополнительного теста в оценке состояния больных, а также в учебном процессе на кафедре клинической биохимии и лабораторной диагностики ФПК и 1111 Ижевской государственной медицинской академии.

На основании полученных результатов в лечебно - профилактических учреждениях Удмуртской Республики рекомендовано к внедрению рационализаторское предложение «Экспресс - метод определения гликопротеинов сыворотки крови» (2002, № 09.02).

Апробация работы.

Основные положения диссертационной работы доложены на научно — практической конференции «Молодые ученые на рубеже веков (Ижевск, 2000), конференции биохимиков Урала, Поволжья и Западной Сибири (Ижевск, 2001), на научно - практических конференциях «Национальные дни лабораторной медицины России» (Москва, 2000, 2001, 2002, 2003).

Окончательный вариант работы обсужден на межкафедральном заседании Ижевской государственной медицинской академии. (Ижевск, 2004).

Публикации.

По материалам диссертации опубликовано 8 научных работ.

Структура и объем работы.

Диссертация изложена на 138 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, главы результатов собственных исследований и их обсуждения, выводов, практических рекомендаций, списка литературы, включающего 167 отечественных и 110 зарубежных источников. Работа иллюстрирована 22 таблицами, 10 диаграммами и 1 рисунком.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Толстолуцкая, Татьяна Олеговна

ВЫВОДЫ.

1. При негоспитальной пневмонии развитие патологического процесса сопровождается резким ростом содержания сывороточных гликопротеинов (по уровню БСГ, БССК, БСФ и гексозаминов), одновременно в их составе наблюдается относительное преобладание уровня сиалогликопротеинов и снижение доли фукозогликопротеинов.

2. У больных негоспитальной пневмонией в начальном периоде отмечается достоверное увеличение концентрации продуктов катаболизма гликопротеинов (ОССК, ССК и ОСФ) в сыворотке крови. Концентрации ОССК, ССК и ОСФ нарастают по мере утяжеления этого заболевания и при содержании 137,0+4,13; 53,8±3,3; 14,7+1,01 мг/л и более соответственно являются маркерами тяжелого течения негоспитальной пневмонии.

3. При негоспитальной пневмонии в сыворотке крови больных происходит активация лизосомальных ферментов сиалидазы (КФ 3.2.1.18) и a-L-фукозидазы (3.2.1.51), что указывает на повышение в обмене гликопротеинов катаболиче-ских процессов. Степень активности этих ферментов прямо коррелирует со степенью тяжести негоспитальной пневмонии.

4. При исследовании гликопротеинов сыворотки крови больных негоспитальной пневмонией с использованием лектина конканавалина А обнаружено статистически достоверное увеличение количества связанных с лектином гликопротеинов у обследованных больных по сравнению с контрольной группой, что обусловлено, с одной стороны, увеличением общего содержания гликопротеинов сыворотки крови у больных пневмонией, а с другой стороны, изменением их качественного состава.

6. У практически здоровых лиц и больных негоспитальной пневмонией определено наличие прямых сильных корреляционных связей между содержанием в сыворотке крови гексозаминов, БСГ, БССК и БСФ с одной стороны, и оптической плотностью взвеси комплексов конканавалин А - гликопротеины с другой, что позволяет использовать турбидиметрический метод исследования гликопротеинов сыворотки крови с применением лектина конканавалина А для оценки общего количества гликопротеинов в сыворотке крови здоровых и больных негоспитальной пневмонией.

Практические рекомендации.

Исследования фракционного состава сиало- и фукозосодержащих соединений сыворотки крови могут быть рекомендованы для использования в качестве дополнительного биохимического критерия при диагностике негоспитальной пневмонии, для оценки степени тяжести заболевания и прогнозирования затяжного течения пневмонии.

Целесообразным является включение этих исследований в схемы лабораторного мониторинга негоспитальной пневмонии. В качестве скрининга может быть использован метод определения гликопротеинов сыворотки крови с использованием лектина конканавалина А, с последующим (при необходимости) применением развернутых методов исследования.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Толстолуцкая, Татьяна Олеговна, Уфа

1. Алешкин В.А. Белки острой фазы и их клиническое значение. /В.А.Алешкин, Л.И.Новикова, А.Г.Лютов// Клин, медицина. - 1988. - № 8. -С. 39-48.

2. Анасашвили А.Ц. Гликопротеиды сыворотки крови и мочи. /А.Ц.Анасашвили// М.: «Медицина», 1968. 228 с.

3. Арсентьев В.Ф. Некоторые показатели ранней диагностики затяжных форм острой пневмонии. /В.Ф.Арсентьев, С.С.Шустов, В.А.Барков, В .В.Наместников// Клин, медицина. 1990. - Т. 68. - № 2. - С. 74-78.

4. Барвинко Н.Г. Проблема экологически обусловленных заболеваний органов дыхания. /Н.Г.Барвинко// Научно-практическая конференция «Болезни органов дыхания, профилактика, раннее выявление и лечение». — Ижевск. -1995.-С. 5-7.

5. Бакулин М.П. Кислоторастворимые фракции сыворотки крови у больных с неспецифическими заболеваниями органов дыхания. /М.П.Бакулин, Е.С.Пыжева, Ю.М.Азизов// Лаб. дело. 1991. - № 8. - С. 24-27.

6. Биологические механизмы воспалительных и деструктивных заболеваний легких. // Пульмонология: прилож. тез. докл. 4-го национ. конгр. по болезням органов дыхан. 1994. - С. 21-32.

7. Биохимия человека. /Р.К.Марр и, Д.К.Греннер, П.А.Мейес, В.Х.Родуэлл// М.: Мир, 1993.-Т. 1.-384 с.

8. Болезни органов дыхания. Руководство для врачей в 4-х томах. /Под общей редакцией академика АМН СССР Н.Р.Палеева// М.: Медицина, 1989.

9. Борохов А.И. Острая интерстициальная пневмония (к клинико-рентгенологическому обоснованию самостоятельности болезни). /Острыепневмонии: Сб. статей под ред. А.Г.Чучалина. —М., 1980. С. 11-18.

10. Быкова А.В. Иммунологическая реактивность больных острой пневмонией. /А.В.Быкова// Этиология и патогенез инфекционного процесса при острых и хронических воспалительных заболеваниях легких. Д., 1982. - С. 17-18.

11. Варбанец Л.Д. Гликопротеины мембран бактерий: их структура и функции. /Л.Д.Варбанец// Усп. сов. Биологии. 1981. - Т. 91. - № 2. - С. 154-161.

12. Варбанец Л.Д. Лектины и аспекты их изучения. /Л.Д.Варбанец// Микро-биол. журн. 1990. - № 1. - С. 84-90.

13. Веремеенко К.Н. a i — ингибитор протеиназ и его исследование в клинике. / Клин, медицина, 1985. — Т. 63. № 12. — С. 21-27.

14. Видершайн Г.Я. Углеводсодержащие соединения, их биосинтез, роль в живой клетке. /ГЛ.Видершайн// Мол.биол.-1976. Т. 10. - № 5. - С. 957-980.

15. Видершайн Г.Я. Углеводсодержащие биополимеры в процессах узнавания молекул и клеток. /Г.Я.Видершайн// Усп.биол.химии. — 1979. Т.20 - С. 4671.

16. Видершайн Г .Я. Биохимические основы гликозидозов. /Г.Я.Видершайн// -М., «Медицина», 1980. 320 с.

17. Вишнякова Л.А. Этиология острой пневмонии. /Л.А.Вишнякова, Н.В.Путов// Тер. архив. 1990. - Т. 62. - № 3. - С. 15-18.

18. Внебольничная пневмония у взрослых: практические рекомендации по диагностике, лечению и профилактике. Пособие для врачей. /А.Г.Чучалин,

19. А.И.Синопальников, С.ВЛковлев, Л.С.Страгунский, Р.С.Козлов// Инфекции и антимикробная терапия. 2003. - Т. 5. - № 4. - 24 с.

20. Вольхина И.В. Состояние обмена сиалосодержащих соединений в тканях желудка и тонкой кишки при иммобилизации и голоданииУИ.В.Вольхина// Дис. .канд. мед. наук, Уфа, 1995. - 139 с.

21. Воробьев П.А. Клинико экономический анализ эффективности применения левофлоксацина (таваник) у больных внебольничной пневмонией. /П.А.Воробьев, И.Б.Горбунова, М.В.Авксентьева// Пульмонология. - 2003. -№ 1.-С. 67-71.

22. Выделение и характеристика галактозосвязывающих лектинов из сыворотки крови человека. /Е.М.Рапопорт, Л.С.Жигис, Е.Ю.Корчагина, Т.В.Овчинникова, В.П.Зубов, Н.В.Бовин// Биоорг. хим. 1996. - № 5. - С. 353-357.

23. Гельцер Б.И. Клиническая оценка эффективности применения прогностических правил у пациентов с внебольничной пневмонией. /Б.И.Гельцер, Л.В.Куколь// Клиническая медицина. 2003. - № 11. - С. 62-66.

24. Гембицкий Е.В. Принципы и методы современной патогенетической терапии острой пневмонии. /Е.В.Гембицкий, В.Г.Новоженов// Клин. мед. -1994. -№5.-С. 7-12.

25. Государственный доклад о состоянии здоровья населения Удмуртской Республики. / Под ред. Шадрина С.Г.// Ижевск, 2003. 250 с.

26. Готтшалк А. Гликопротеины. /А.Готтшалк// М.:Мир, 1969. - Т.1. - 304 е., Т.2-300 с.

27. Гуляев Г.К. Количественное определение белков так называемой «острой фазы воспаления» в сыворотке крови здоровых детей. /Г.К.Гуляев,

28. B.В.Васильева, А.М.Тукина// Труды Крымского мед. института. 1983. - Т. 97. - С. 20-22.

29. Дементьева Г.М. Система протеиназы ингибиторы протеиназ и ее роль в респираторной патологии новорожденных. /Т.М.Дементьева, М.В.Кушкарева, Л.В.Грачева, О.А.Малашина// Педиатрия. - 1994. - № 4.1. C. 105-109.

30. Демин А.А. Поражения легких при инфекционном эндокардите. /А.А.Демин, В.П.Дробышева// Клин, медицина. 2004. - № 2. - С. 32-35.

31. Домникова Н.П. Внутрибольничные (нозокомиальные) пневмонии: патоморфогенез, особенности клиники и терапии, критерии прогноза: Автореф. дис. .д-ра мед. наук. /Н.П. Домникова// Новосибирск, 1999. 48 с.

32. Домникова Н.П. Клиническая характеристика инфекций дыхательных путей у пациентов с гемобластозами и нейтропенией. /Н.П.Домникова, Е.В.Брякотина// Клин, медицина. 2004. - № 1. - С. 42-44.

33. Дуков Л.Г. Диагностика и лечение болезней органов дыхания. /Л.Г.Дуков, А.И.Борохов // Смоленск, 1996. - 544 с.

34. Дятлов В.А. Использование лектинов для исследований углеводных детерминант холинорецепторов разных подтипов в нейронах моллюска. /В.А.Дятлов// Нейрофизиол. 1992. - № 2. - С. 161-169.

35. Егоршина Е.В. Лабораторно-диагностические критерии эндотоксикоза при острых пневмониях и абсцессах легких, хроническом необструктивном бронхите: Автореф. дис. .канд. мед. наук. /Е.В. Егоршина// Чита, 2000. -22 с.

36. Загрязнение атмосферного воздуха и болезни органов дыхания у населения.

37. Т.Н.Биличенко, Э.И.Чигирева, Н.В.Ефименко, Л.Г.Минаева, Ю.С.Осипов// Пульмонология. 2003. - № 1. - С. 9-21.

38. Замотаев И.П. Особенности течения острых верхнедолевых пневмоний и тактика их лечения. /И.П.Замотаев, В.И.Соколова, В.К.Петухова// Всесоюзный симпозиум «Современные аспекты применения новых антибиотиков в клинике. М., 1984. - С. 66-68.

39. Замотаев И.П. Острые пневмонии. /И.П.Замотаев// Болезни органов дыхания. Руководство для врачей в 4-х томах. Под ред. Н.Р.Палеева. М.: Медицина, 1989. - Т. 2. - С. 17-102.

40. Зубаиров Д.М. Взаимодействие лектинов с тканевым тромбопластином. /Д.М.Зубаиров, Г.Ш.Ченборисова// Гемат. и трансфуз. 1990. - № 9. - С. 68.

41. Ивлев-Дунтау А.П. Острофазные показатели сыворотки крови при туберкулезе легких и в сочетании с сахарным диабетом: Автореф. дис. .канд. мед. наук /А.П.Ивлев-Дунтау// Новосиб., 1997. 17 с.

42. Изучение и применение лектинов: Материалы 1 респ. конф., посвящ. открытию первых лектинов. /Сборник трудов под ред. К.Кизанда и соавт., -Тарту, 1989.-211 с.

43. Исследование механизма действия фитогемагглютинина. /Т.И.Сашкина, Л.В.Собалевская, В.Е.Кондратов, Г.В.Максимов// М., 1993. - 13 с.

44. Камышников B.C. Справочник по клинико биохимической лабораторной диагностике. /В.С.Камышников// Минск, 2000. - Т. 1. - 496 е., Т. 2. - 464 с.

45. Катюхин В.Н. Пневмонии у престарелых, клиническая картина и лечение. /В.Н.Катюхин// Тер. архив. 1992. - Т. 64. - № 3. - С. 131-134.

46. Кетлинский С.А. Эндогенные иммуномодуляторы. /С.А.Кетлинский, А.С.Симбирцев, А.А.Воробьев// Л.: Гиппократ, 1992. 256 с.

47. Кильдиярова P.P. О состоянии сиало- и фукозосодержащих соединений при хроническом гастродуодените у детей. /Р.Р.Кильдиярова, П.Н.Шараев// Пат. физиол. и эксп. терапия. 1997. - № 4. - С. 13-15.

48. Климова С.В. Оценка уровня связывания меченных лектинов с углеводным компонентом человеческого IgG. /С.В.Климова, Б.В.Пинегин// Современные проблемы аллергологии, клинической иммунологии и иммунофарма-кологии: Сб. тр., М., 1998. 369 с.

49. Клиническая диагностика: справочное пособие для семейного врача. /Под редакцией ГЛМатвейкова и Н.Ф.Сороки // Минск, 1999. 896 с.

50. Кноринг Б.Е. Значение различных сочетаний иммунологических признаков для дифференциальной диагностики заболеваний легких. /Б.Е.Кноринг, Е.П.Сабуренкова, М.И.Фейгин// Пробл. туберкул. 1991. - № 7. - С. 53-56.

51. Кнышова С.А. Динамика клинико-иммунологических показателей у больных острой пневмонией на фоне базисной антибактериальной терапии и пути ее коррекции: Автореф. дис. .канд. мед. наук. /С.А. Кнышова// -Ставрополь, 2000. 20 с.

52. Козинец Г.И. Интерпретация анализов крови и мочи и их клиническое значение. /Г.И.Козинец // Москва, 1998. - 106 с.

53. Кокряков В.Н. О степени структурной гомологии лактоферринов молока и нейтрофильных гранулоцитов. /В.Н.Кокряков, Г.М.Алешина, С .В. С лепенков// Биохимия. 1988. - Т. 53. - № 11. - С. 1837-1873.

54. Кольман Я. Наглядная биохимия. /Я.Кольман, К.Г.Рем// М: «Мир», 2000. -470 с.

55. Колб В.Г. Клиническая биохимия. /В.Г.Колб, В.С.Камышников// Минск, 1976.-311 с.

56. Комар С.И. Динамика aj-антитрипсина и а,2-макроглобулина у больных остротекущей и затяжной пневмонией. /С.И.Комар, Э.Н.Коробейникова// Вопр. мед. химии. 1987. - Т. 33. - № 4. - С. 46-49.

57. Комар С.И. Первичный и вторичный дефицит альфа-1-ингибитора протеи-наз больных пневмонией. /С.И.Комар// Материалы научно практической конференции, посвященной памяти проф. Х.И.Вайнпггейна. - Челябинск, 1993.-С. 47-50.

58. Комар С.И. Прогнозирование затяжного течения пневмонии и ее патогенеза как основа для превентивной коррекции лечения с оптимизацией исходов болезни: Дис. .д-рамед. наук. /С.И. Комар// -Челябинск., 1995. 396 с.

59. Королев Н.П. Функции лектинов в клетках. /Н.П.Королев// Москва, ВИНИТИ, серия «Общие проблемы физико — химической биологии». — 1984.-Т. 1.-С. 1-352.

60. Крылов А.А. Анализ летальных исходов и пути улучшения диагностики и лечения острых пневмоний. /А.А.Крылов, Е.Г.Шацкая// Клин. мед. 1995. -№ 2. - С. 26-29.

61. Кубышкин А.В. Изменение балланса протеиназы ингибиторе протеиназ бронхоальвеолярного смыва при экспериментальном воспалении легких. /А.В.Кубышкин// Пробл. туберкулеза. - 1988. - № 1. - С. 61-65.

62. Кульберг А.Я. Сывороточный IgG как ингибитор лектинов: новый подход кизучению функционального взаимодействия факторов естественного и приобретенного иммунитета. /А.Я.Кульберг, Ю.Б.Беркун// Иммунол. 1998 -№ 1.-С. 7-12.

63. Кульберг А .Я. Конкурентное взаимодействие конканавалина А и гамма-глобулина человека за сайт ARG-GLY-ASP адгезирующих белков микроокружения клеток. /А.Я.Кульберг, Ю.Б.Беркун// Иммунол. 1998. - № 2. - С. 26-29.

64. Ларский Э.Г. Белки острой фазы, современное состояние вопроса (обзор). /Э.Г.Ларский, Л .В .Комелькова// Лаб. дело. 1988. - № 12. - С. 34-37.

65. Лахтин В.М. Лектины регуляторы метаболизма. /В.М.Лахтин// Биотехнология. - 1986. - № 6. - С. 66-78.

66. Лахтин В.М. Лектины в исследовании белков и углеводов. /В.М.Лахтин// Итоги науки и техники. Сер. Биотехнология. 1987. — Т. 2. - С. 1-28.

67. Лахтин В.М. 12-я Международная конференция по лектинам. /В.М.Лахтин// Биотехнол. 1991. - № 5. - С. 94-96.

68. Лахтин В.М. Очистка и некоторые свойства внеклеточного сиалоспецифич-ного лектина Bacillus subtilis 316М. /В.М.Лахтин, И.А.Симоненко, М.В.Буданов// Прикл. биохим. и микробиол. 1993. - № 3. - С. 389-397.

69. Лахтин В.М. Молекулярная организация лектинов./В.М.Лахтин// Молеку-ляр. биол. 1994. - № 2. - С. 245-273.

70. Лахтин В.М. Лектины в исследовании углеводной части гликопротеинов и других природных гликоконъюгатов. /В.М.Лахтин// Биохимия. 1995. Т. 60.-С. 187-217.

71. Лекомцева О.И. Показатели обмена сиалосодержащих соединений при рецидивирующем стенозирующем ларинготрахеите у детей./О.И.Лекомцева, И.Г.Гришкин, П.Н.Шараев// Тр. ИГМА, Ижевск, 1998. С. 260-263.

72. Лепехин Е.А. Лектины мозга: характеристика, функции, рецепто-ры./Е.А.Лепехин, М.И.Долженко, В.А.Березин// Нейрохим. 1990. - № 4. -С. 488-501.

73. Локшина Л.А. Роль лизосомальных протеиназ в деструкции ткани.

74. Л.А.Локшина, Н.И.Соловьева// Вопр. мед. химии. 1987. - Т. 33. - № 5. -С. 38-43.

75. Лутошкин С.Ф. Определение титра пепсинового агглютинатора (гемореак-танта) для оценки течения острой пневмонии. /С.Ф.Лутошкин, В.П.Сильвестров, Л.М.Бартова// Терапевт, архив. 1982. - № 9. - С. 50-52.

76. Лутошкин С.Ф. Система гуморального иммунитета и ее изменение в процессе лечения у больных затяжной пневмонией: Автореф. дис. .канд. мед. наук.-М., 1983.-23 с.

77. Лутошкин С.Ф. Изменение системы комплемента при острой и затяжной пневмонии. /С.Ф.Лутошкин, Ю.П.Резников// Современные методы диагностики и лечения заболеваний органов дыхания. М., 1983. - С. 24-27.

78. Лутошкин С.Ф. Некоторые показатели гуморального иммунитета при острой и затяжной пневмонии. / С.Ф.Лутошкин, В.П.Сильвестров// Актуальные вопросы клинической и экспериментальной аллергологии и иммунологии: Тез. докл. Каунас, 1986. - С. 93-94.

79. Луцик А.Д. Лектины в гистохимии. /А.Д.Луцик, Е.С.Детюк, М.Д.Луцик// Львов, 1989. 144 с.

80. Луцик М.Д. Лектины. / М.Д.Луцик, Е.Н.Панасюк, А.Д.Луцик// Львов, высшая школа, 1981. С. 13-156.

81. Луцик М.Д. Новый аффинный сорбент для очистки лектинов и его применение для очистки агглютинина из зародышей пшеницы. /М.Д.Луцик// Укр. биохим. журнал. 1984. - Т. 56. - № 4.- С. 432-436.

82. Луцик М.Д. Лектины: Биологические свойства и применение в иммунологии. /М.Д.Луцик// Биохимия человека и животных. 1985. - Т. 9. - С. 69-76.

83. Луцик М.Д. Лектиногистохимия микроглии головного мозга человека при бактериальных менингоэнцефалитах. /М.Д.Луцик, И.В.Стехнович, А.Д.Луцик// Журн. невропатор. и психиатрии им. С.С.Корсакова. 1991. -№ 2. - С. 41-44.

84. Луцик М.Д. Получение и частичная характеристика водорастворимых мембранных гликопротеинов-рецепторов лектинов. /М.Д.Луцик, П.С.Олешко,

85. А.А.Цегельский// Биол. мембраны. 1992. - № 10-11. - С. 1025-1027.

86. Лютов А.Г. Возможность регуляции иммунного ответа орозомукоидом (альфа-1-кислым гликопротеином) человека. /А.Г.Лютов, В.А.Алешкин, С.А.Еникеева// Тез. докл. 1 съезда иммунологов России. Новосибирск, 1992.-С. 283.

87. Лютов А.Г. Иммунотропная активность альфа-1-кислого гликопротеина человека. /А.Г.Лютов, Р.Ф.Садыков, С.В.Сибиряк// Патол. физиология. -1992. -№ 1.-С. 37-39.

88. Мартынов А.И. Оценка риска развития иммунодефицитных состояний при динамическом обследовании сотрудников, работающих в условиях профессиональной вредности. /А.И.Мартынов, З.В.Зеленова// Иммунология. — 2002. Т.24. - № 4. - С. 249-253.

89. Медицинские лабораторные технологии /Справочник под редакцией А.И.Карпшценко // Санкт-Петербург, 1998. - Т 1. - 408 с.

90. Медицинские лабораторные технологии /Справочник под редакцией

91. A.И.Карпшценко // Санкт-Петербург, 1999. - Т 2. - 656 с.

92. Меньшиков В.В. Лабораторные методы исследования в клинике./

93. B.В.Меньшиков, И.С.Балаховский // М.: Медицина, 1987. - 368 с.

94. Меркурьева Р.В. Сравнительная оценка методов определения гликозами-ногликанов мочи. /Р.В.Меркурьева, М.Г.Гусева// Лаб. дело. 1974. - № 3.1. C. 162-167.

95. Метод определения фукозы, не связанной с белками. /П.Н.Шараев, Н.С.Стрелков, Р.Р.Кильдиярова, Е.П.Сахабутдинова, И.А.Зворыгин// Клин, лаб. диагностика. 1997. - № 4. - С. 17-18.

96. Метод определения белок- и олигомерсвязанной фукозы в сыворотке крови. /П.Н.Шараев, Г.И.Ермаков, М.К.Ермакова, Л.В.Кочурова, С.Н.Найденкина, Н.К.Габдрахманова, М.Н.Осипова// Клин. лаб. диагностика. 2003. - № 10. -С. 14-16.

97. Меченные лектины в изучении клеточной поверхности. /Я.Л.Караганов, М.Д.Луцик, В.А.Миронов, А.А.Миронов// Архив анатомии, гистологии иэмбриологии. 1986. - Т. 90. - С. 83-94.

98. НеуСтроева Е.П. Иммунохимический анализ взаимодействия фибронектина с белками иммуноглобулиновой фракции сыворотки крови: Автореф. дис. .канд. мед. наук / Е.П.Неустроева// М., 1990. - 24 с.

99. Никулин К.Г. Классификация острых пневмоний. /К.Г.Никулин// Тер. архив. 1977. - № 1. - С. 70-74.

100. Новикова Л.И. Перекрестный аффинный иммуноэлектрофорез с лектинами для исследования белков острой фазы плазмы крови человека. /Л.И.Новикова, В.А.Алешкин// Лаб. дело. 1991. - № 6. - С. 3-10.

101. ЮЗ.Новоженов В.Г. К патогенезу острой пневмонии. /В.Г.Новоженов, П.О.Вязицкий, Е.В.Ермаков// Тер. архив. 1989. - Т. 61. - № 3. - С. 84-87.

102. Об этиологии и патогенезе инфекцмонно-воспалительного процесса в бронхах при хроническом бронхите. / Н.В. Путов, Н.И.Александрова, Л.А.Вишнякова, Н.В .Яковлева// Тер. архив. 1991. - № 3. - С. 41-48.

103. Определение активности сиалидазы в сыворотке крови и слюне. /П.Н.Шараев, Г.Х.Гумярова, Ф.Г.Кузьмин, И.В.Вольхина, Л.Л.Сосулина, Л.А.Сорокина// Клин.лаб.диагн. 1993. - № 6. - С. 15-16.

104. Определение свободной и связанных форм сиаловых кислот в биологических объектах./ П.Н.Шараев, В.И.Рябов, Г.Х.Гумярова, Ф.Г.Козьмин, О.В.Малинин, О.Н.Зубарев, И.В.Вольхина, Л.Л.Сосулина, Л.А.Сорокина // Клин.лаб.диагн. 1993. - № 4. - С. 44-46.

105. Особенности течения внебольничной пневмонии у больных с хронической инфантильной спинальной амиотрофией. /И.Г.Фомина, В.Ф.Маринин, Ф.Е.Горбачева, Г.К.Махнач, А.А.Абрамова, Н.В.Соловьева, И.В.Медведева// Тер. архив. 2004. - Т. 76. - № 1. - С. 28-30.

106. Острые заболевания органов дыхания у населения. /Э.И.Чигирева, Т.Н.Биличенко, Н.А.Чернышова, Е.И.Аблицова// В кн.: Социально гигиенический мониторинг — практика применения и научное обеспечение: Сборник научных трудов. - М., 2000. - С. 450-455.

107. Палеев Н.Р. Хронические неспецифические заболевания легких.

108. Н.Р.Палеев, Л.Н.Царькова, А.И.Борохов// М., 1985. 688 с.

109. Петров Р.В. Оценка иммунного статуса человека при массовых обследованиях. /Р.В.Петров, Р.М.Хаитов, Б.В.Пинегин// Иммунология. 1992. - № 6. -С. 51-62.

110. Ш.Пилипчук В.Н. Предпосылки к применению ингибиторов протеиназ при заболеваниях легких: Обзор литературы. /В.Н.Пилипчук, С.Н.Бутейн// Пробл. туберкулеза. 1987. - № 9. - С. 64-69.

111. Пинигин М.А. Теория и практика оценки комбинированного действия химического загрязнения атмосферного воздуха./М.А.Пинигин// Гигиена и санитария. 2001. - № 1. — 13-23.

112. Покровский В.И. Этиологическая диагностика и этиотропная терапия острых пневмоний. /В.И.Покровский// М:Медицина, 1995. 272 с.

113. Полевщиков А.В. С-реактивный белок и сывороточный амилоид Р в системе иммунорегуляции. /А.В.Полевщиков, П.Г.Назаров// Иммунол. 1998 -№4.-С. 4-11.

114. Попов В.И. Острые инфекцмонные деструкции легких: Автореф. дис. .д-ра мед. наук /В.И. Попов// СПб., 1997. 44 с.

115. Причины летальных исходов у лиц пожилого и старческого возраста в условиях пульмонологического стационара. /И.А.Зарембо, А.Н.Кокосов, Е.А.Киселева, Л.Н.Карлова// Клиническая медицина. 2003. - № 7.- С. 2022.

116. Провоторов В.М. Прогнозирование и дифференциальная диагностика затяжной пневмонии с помощью показателей ингибирования протеолитиче-ской активности. /В.М.Провоторов, Г.Г.Семенкова// Клин. мед. 1991. - Т. 69. -№ 1.-С. 91-94.

117. Протоколы диагностики и лечения больных с неспецифическими заболеваниями легких в Удмуртской Республике. / Ижевск, 2001, 42 с.

118. Пузырев В.П. Молекулярные основы и клинические аспекты недостаточности альфа-1-антитрипсина. /В.П.Пузырев, В.Я.Савюк// Пульмонология. -2003. -№ 1.-С. 89-95.

119. Путов Н.В. Руководство по пульмонологии. /Н.В.Путов, Г.Б.Федосеев// Л.: Медицина, 1984. 455 с.

120. Рентгеноэндоскопическое исследование в диагностике и лечении пневмонии у больных хроническим обструктивным бронхитом. /Г.Г.Федченко, Н.Е.Чернеховская, В.Г.Андреев, И.Б.Раннев// Пульмонология. 2002. - № 3.- С. 64-68.

121. Саенко Е.Л. Взаимодействие церулоплазмина человека с иммобилизиро-ванными растительными лектинами. /Е.Л.Саенко, В.В.Басевич, А.И.Ярополов// Биополим. и клетка. 1989. - № 1. - С. 51-57.

122. Себякин Г.Л. Гликоконъюгаты. Углеводные цепи гликопротеинов: структура, биосинтез и функция в тканях животных. /Г.Л. Себякин, Р.П.Евстигнеев// В кн.: Успехи биологической химии.- М.: Наука, 1988. -Т.28. С. 213-222.

123. Серов В.В. Соединительная ткань. /В.В.Серов, А.Б.Шехтер // М.: «Медицина», 1981.-280 с.

124. Сидоренко С.В. Антибактериальная терапия пневмоний у взрослых. /С.В.Сидоренко, А.И.Синопальников, С.В.Яковлев// Москва, 2000, - 32 с.

125. Сильвестров В.П. Инфекционно-токсический (септический) шок при острой пневмонии. /В.П.Сильвестров, В.Ю.Марциновский// Тер. архив. 1986. - Т. 58. -№ 10.-С. 20-23.

126. Сильвестров В.П. Пневмония. / В.П.Сильвестров, П.И.Федотов// М., 1987. -468 с.

127. Сильвестров В.П. Пневмония. /В.П.Сильвестров// Клин. мед. 1990. - Т. 68.- № 10.-С. 111-118.

128. Сильвестров В.П. Пневмония: исторические аспекты и современность. /В.П.Сильвестров// Тер. архив. 2003. - № 9. - С. 63-64.

129. Синопальников А.И. Внебольничная пневмония: эпидемиология, диагностика, антибактериальная терапия. /А.И. Синопальников// Ижевск, 2001. 24 с.

130. Славин М.Б. Методы системного анализа в медицинских исследованиях. /М.Б.Славин// М.; Мед., 1989. 304 с.

131. Слуцкий Л.И. Биохимия нормальной и патологически измененной соединительной ткани. /Л.И.Слуцкий// Л.: Медицина, 1969. 375 с.

132. Специфичность лектина из Butea frondosa. /О.Е.Галанина, С. Падманабхан, Е.Ю.Корчагина, Т.В.Землянухина, В.В.Демин, Н.В.Бовин// Биоорг. хим. — 1992.-№3.-С. 346-356.

133. Стандарты (протоколы) диагностики и лечения больных с неспецифическими заболеваниями легких (Приложение к приказу № 300 Минздрава России)/ М., Универсум Паблишинг, 1999. 18 с.

134. Степаненко Б.Н. Химия и биохимия углеводов (полисахариды). /Б.Н.Степаненко// М.: Высш.школа, 1978. 256 с.

135. Стефани Д.В. Острофазовый ответ организма (теоретические аспекты, кли-ническре значение). /Д.В.Стефани, С.Ж.Токсамбаева, Б.П.Штеренгарц// Педиатрия, журнал имени Сперанского Г.Н. 1987. - № 3. - С. 62-68.

136. Терещенко И.В. О рациональной антибиотикотерапии пневмоний. /И.В.Терещенко, Е.Е.Каюшева// Клиническая медицина. 2003. - № 9. - С. 65-68.

137. Турьянов М.Х. Современные представления об атипичной пневмонии. /М.Х.Турьянов, Г.М.Чернакова// Инфекции и антимикробная терапия. -2003.-Т. 5.-№2.-С. 2-5.

138. Вудлин М. Терапевтический справочник Вашингтонского Университета. /М.Вудлин, А.Уэлан// М., 1995. 832 с.

139. Федянин Ю.П. Динамика содержания в сыворотке крови гексоз, фукозы и сиаловых кислот у реконвалесцентов вирусного гепатита В. /Ю.П.Федянин// М., 1992. 8 с.

140. Феклисова Л.В. Легионеллезная пневмония. /Л.В.Феклисова,

141. В.И.Васильева, Е.В.Русакова// Сов. мед. 1990. - № 1. - С. 63-67.

142. Франц X. Лектины: свойства, функции и возможности применения. /Х.Франц// Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1980. -№ 1 .-с. 3-10.

143. Хадарцев А.А. Диагностическая ценность сывороточных маркеров при раке легких. /А.А.Хадарцев, В.Г.Наумов, Е.Ю.Румянцева// Нижегор. мед. журн. -1994.-№ 1.-С. 91-93.

144. Хаитов P.M. Экологическая иммунология. /Р.М.Хаитов, Б.В.Пинегин, Х.И.Истамов// М., 1992. 58 с.

145. Христолюбова Е.И. Анализ смертельных исходов внебольничной пневмонии. /Е.И.Христолюбова// Пульмонология. 2002. - № 3. - С. 64-65.

146. Хъюз Р. Гликопротеины. / Р.Хъюз//М.: «Мир», 1985. 140 с.

147. Цветкова И. В. Нейраминовая кислота и ее значение в организме. /И.В.Цветкова// Вопр. мед. химии. 1961. - № 1. - С. 3-16.

148. Цветкова И. В. Обмен нейраминовой кислоты в организме животных (обзор). /И.В.Цветкова// Вопр. мед. химии. 1963. - № 2. - С. 115-124.

149. Цветкова И. В. Альдолаза нейраминовой кислоты и нейраминидаза в тканях животных. /И.В.Цветкова// Биохимия. 1965. - № 2. - С. 407-413.

150. Цветкова И. В. Определение активности нейраминидазы в тканях животных. /И.В.Цветкова, А.В.Козина// В кн.: Совр. методы в биохимии. М.: Медицина, 1968. - С. 177-182.

151. Цветкова И. В. О нейраминидазе тканей животных. /'И.В.Цветкова, Е.Л.Розенфельд// Вопр. мед. химии. 1984 - № 6. - С. 633-635.

152. Чиркин А. А. Диагностический справочник терапевта. /А.А.Чиркин, А.Н.Окороков, И.И.Гончарик// Минск, 1992. 688 с.

153. Чумак Г.Е. Некоторые аспекты патогенеза острых пневмоний у лицмолодого возраста: Автореф. дис. .д-ра мед. наук. /Т.Е. Чумак// СПб.,1994. -45 с.

154. Чучалин А.Г. Основные научные направления в изучении патологии органов дыхания. /А.Г.Чучалин// Тер. архив. 1987. - № 3. - С. 3-9.

155. Чучалин А.Г. Пневмония актуальная проблема медицины. /А.Г.Чучалин// Тер. архив. - 1995. - № 3. - С. 3-7.

156. Чучалин А.Г. Болезни органов дыхания. /А.Г.Чучалин// Мед. газета. — 2000. № 43. - С. 8-9.

157. Чучалин А.Г. Актуальные вопросы диагноза в пульмонологии. /А.Г.Чучалин// Пульмонология. 2001. - № 1. - С. 6-7.

158. Чучалин А.Г. Рентгенография и компьютерная томография в диагностике различных видов идиопатических интерстициальных пневмоний. /А.Г.Чучалин, П.М.Котляров, С.Г.Георгиади// Пульмонология. 2003. - № 1.-С. 89-95.

159. Чучалин А.Г. Гиперэозинофилия при заболеваниях органов дыхания. /А.Г.Чучалин// Тер. архив. 2003. - №3.- С. 5-7.

160. Шарышев Ю.С. Состояние системы трипсин ингибиторы трипсина при пневмоническом токсикозе у детей. /Ю.С.Шарышев// Педиатрия. - 1987. -№ Ю.-С. 18-21.

161. Шевченко О.П. Белки острой фазы воспаления. /О.П.Шевченко// Лаболато-рия.- 1996. -№ 1.-е. 3-6.

162. Шелег В.А. Диагностическая ценность некоторых показателей крови при определении активности воспалительного процесса в легких. /В.А.Шелег, И.И.Мизин// Труды Крымского мед. института. 1980. - Т. 85. - С. 96-98.

163. Ямалеева А.А. Функциональная роль лектинов картофеля. /А.А.Ямалеева//

164. Материалы конференции биохимиков Урала, Поволжья и Западной Сибири «Актуальные проблемы теоретической и прикладной биохимии». — Челябинск, 1999. С. 295-297.

165. Яцковский А.Н. Метод селективного гистохимического выявления сиалог-ликанов с использованием лектина бузины черной. /А.Н.Яцковский, А.Д.Луцик// Бюл. эксперим. биол. и медиц. 1991. - № 1. - С. 71-74.

166. Arndt Т. Asialotransferrin An Alternative to Carbohydrate-deficient Transferrin?/ T. Arndt// Clin. Chem. - 2003. - V.49. - P.1022-1023.

167. Assay of urinary free fucose by fluorescence labeling and high- performance liquid chromatography./ J. Suzuki, A. Kondo, I. Kato, S. Hase, T. Ikenaka// Clin. Chem. 1992. - V.38. - P. 752-755.

168. Automated Multicapillary Electrophoresis for Analysis of Human Serum Proteins./ C. Gay-Bellile, D. Bengoufa, P. Houze, D. Le Carrer, M. Benlakehal, B. Bousquet, B. Gourmel, T. Le Bricon // Clin. Chem. 2003. - V.49. - P. 19091915.

169. Baenziger J.U. // Amer. J. Path. 1985. - Vol. 121. - N 3. - P. 382-391.

170. Barnett J.E.G. Studies on N-Acetylneuraminic acid aldolase./ J.E.G. Barnett, D.L. Corina, G. Rasool//Biochem. J.- 1971. N 125. - P.275-285.

171. Bartlett J.G. Practic quidelines for the management of communiti-acquied pneumonia in adults. / J.G. Bantlett, S.F.Dowell, L.A.Mandell// Infectious Diseases Society of America Ibid. 2000. - № 31. - P. 347-382.

172. Bartolomew B.A. Trasfer of sialic acid to glycoproteins by a sialyltransferase from colostrums./ B.A. Bartolomew, G.W. Jourdian, S. Roseman //The Journal of Biological Chemistry 1973. - V.248. - N 16. - P. 5751-5762.

173. Baumann H. Regulation of hepatic acute phase plasma protein genes by hepatocyte stimulating factors and other mediators of inflammation. /H.Baumann, J. Gauldie// Mol. Biol. Med. 1990. - Vol. 7. - P. 147-159.

174. Baumann H. The acut phase response. /H.Baumann, J. Gauldie// Immunologie Today. 1994. - № 2. - P. 74-80.

175. Bennett M., Schmid K. // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1980. - Vol. 77. - N. 10. -P. 6109-6113.

176. Bentley D.W. Bacterial pneumonia in the elderly: clinical features, diagnosis, etiology and treatment. /D.W.Bentley// Gerontology. 1984. - Vol. 30. - P. 297

177. Bleasby A.J. Marker Proteins in inflammation. /A.J. Bleasby, J.C.Knowles, N.J.Cooke// Clin. Chim. Acta. 1985. - Vol. 150. - N 3. - P. 231-235.

178. Bories P.N., Guenounou M., Feger J. et al. // Biochem. Biophys. Res. Commun. — 1987. Vol. 147. - N 2. - P. 710-715.

179. Boyd W.C. Specific precipitating activity of plant agglutinins (lectins). /W.C.Boyd, E. Shapleigh// Science. 1954. - Vol. 119. - N. 3091. - P. 419.

180. Brown J. Lectins. /J.Brown, R.Hunt// Int. Rev. Cytol. 1978. - Vol. 52. - N. 7. -P. 277-349.

181. Burger M.M. Isolation of a receptor complex for a tumor specific agglutinin from the neoplastic cell surface. /M.M.Burger// Natur. 1968. - Vol. 219. - P. 499500.

182. Cardin A. Quantitative analyses of Ca-induced spectral changes in extrinsic Cotton effects of Co-substituted concanavalin A. /A.Cardin, W.Behnke, F.Mandel// Biochemistry. 1980. - v. 19. - N 23. - P. 5439-5445.

183. Castell J.V. Interleukin-6 the major regulator of acute phase protein synthesis in adult human hepatocytes. /J.V.Castell, M.J.Gomez-Lechon, M.David// FEBS Lett. 1989. - Vol. 242. - P. 237-239.

184. Catley B. Glycoproteins, glycopeptides and animal polysaccarides./ B. Catley //Carbohydr. Chem. London. 1979. - V.l 1. - P.309-370.

185. Characterization of a brain lysosomal sialidase active on ganglioside./ A. Fio-relli, B. Venerando, C. Siniscalo, E. Monti //J. Neurochem.- 1989. V.52. - P.34.

186. Charlwood P.A. On the physicochemical and chemical properties a -glycoproteins from mammalian and avian plasmas./ P.A. Charlwood, M.H.C. Hatton, E. Regoeczi //Biochim. et biophys. acta 1976. - V.453. - N 1. - P.81-92.

187. Chu Shu-Heh W. Developmental changes in the activites of sialyl- and fiicosyl-transferases in rat sialyl intestine./ W. Chu Shu-Heh, W.A. Walker //Biochem. et biophys. acta: Gen. Subj.- 1986. V.883. - N 3. - P.496-500.

188. Comparison of sulphation of glycosaminoglycans and glycopeptides from control and virus transformed hamster kidney cells./ Y. Ohkulo, Sh. Fukui, S. Mu-toh, J. Yamagliha // Cancer res. 1983. - Vol. 43. - P. 2712-2717.

189. Corfield A.P. Mucin sialidase in the rat large intestine./ A.P. Corfield, J.R. Clamp //Biochem. Soc. Trans.- 1984. V.12. - N 4. - P.605-607.

190. Costello M.J. Inhibitions of neutrophil activation by alpha-1-acid glycoprotein. /M.J.Costello, H. Gewurtz, J.N.Siegel// Clin. Exp. Immun. 1984. - Vol. 55. -P. 465-472.

191. Debray H. Advances in Lectin Research. /H.Debray, J.Montreuil// Springer-Verlag, Berlin. 1991. - Vol. 4. - P. 51-96.

192. Durand G. Protein Glycosylation and Diseases: Blood and Urinary Oligosaccharides as Markers for Diagnosis and Therapeutic Monitoring./ G. Durand, N. Seta// Clin. Chem. 2000. - V.46. - P.795 - 805.

193. Etzler M.E. Plant lektins: molecular and biological aspects. /M.E.Etzler// Ann. Rev. Plant Physiol. 1985. - Vol. 36. - P. 209-234.

194. Franz H. Combination of immunological and lectin reactions in affinity histochemistry: proposition of the term affinitin. /H.Franz, P.Bergmann, P.Ziska// Histochemistry. 1979. - Vol. 59. - N. 4. - P. 335-342.

195. Franz H. Lectins definition and classification. / H.Franz, P.Ziska, Mohr J.// Acta histochem. - 1982. - V. 71. - P. 19-21.

196. Gadek J.F. Antielastases of the human alveolar structures. Implications for the protease antiprotease theory of emphysema. /J.F.Gadek, G.A.Felles, R.L.Zzimmerman// S. Clin. Invest. - 1981. - Vol. 68. - N 4. - P. 889-898.

197. Gadek J.F. The protease antiprotease balance within the human lung: Implications for the pathogenesis of emphysema. /J.F.Gadek, E.R.Pacht// Lung. - 1990. - Vol. 168. Suppl.- P. 552-564.

198. Gallagher J.T. Proteoglycans in cellular differentiation and neoplasia./ J.T. Gallagher, I.N. Hampson //Biochem. Рос. Trans. 1984. - V.12. - P.541-543.

199. Gavella M. Erythrocyte sialic acid alterations in experimental diabetes./ M. Gav-ella, V. Lipovac, V. Sverko //Cell and Mol. Biol.-1985. V.31. - N 2. - P.75-80.

200. Gavella M. Lipid-bound sialic acid in diabetes./ M. Gavella, V. Lipovac, V. Mrzljak //Hormone and Metab. Res.- 1989. V.21. - N 5. - P.280-281.

201. Goldstein I.J. The lectins: carbohydrate binding proteins of plants and animals. /I.J.Goldstein, C.E.Hayes// Adv. Carbohydr. Chem. Bioch. 1978. - v. 35. - P. 127-340.

202. Goldstein I.J. The lectins: Properties, Functions and Applications in Biology and Medicine. / I.J.Goldstein, Poretz R.D.// Academic Press, Orlando. 1986. P. 35-247.

203. Hanover J.A. Transmembrane assembly of membrane and secretory glycoproteins./ J.A. Hanover, W.J. Lennarz //Arch. Biochem. and Bio-phys.- 1981. -V.211. N 1. - P.1-19.11 о JJ

204. Hansen J.-E.S. Marker Proteins in inflammation. / J.-E.S. Hansen, V.A.Larsen// Clin. Chim. Acta. 1984. - Vol. 138. - N 1. - P. 41-47.

205. Hibbert J.M. Plasma concentrations of N-acetylneuraminic acid on severe malnutrition. /J.M. Hibbert, A.A. Jackson, S.M. Grantham-McGregor// Brit. J. Nutr.- 1985.-V.53.-N l.-P.l 1-16.

206. Horejsi V. Studies on phytohemagglutinins. XXI. The covalent oligomers of ly-sozyme the first case of semisynthetic hemagglutinins. /V.Horejsi, J.Kocourek// Experientia. - 1974. - v. 80. - N 11. - 1348-1349.

207. Hughes R.S. Role of surface carbohydrates in cell adhesion./ R.S. Hughes //Bioehem. Soc. Trans.- 1981. V.9. - N 2. - P. 12.

208. Human acid glycoprotein: purification from serum proteins and immunological estimation of its serum concentration./ K. Schibata, H. Okubo, H. Ishibashi, K, Kawamura//Bioehem. Med.- 1975. V.13. - N 3. - P.251-260.

209. Human placental sialidase: further purification and characterization / M. Hi-raiwa, M. Nishizawa, Y. Uda, T. Nakajima, T. Miyatake //3. Bioehem.- 1988. -V.103. N 1. - P.86-90.

210. Inhibition of mouse liver sialidase by plant flavonoids./ T. Nagai, Y. Miyaichi, T. Tomimori, H. Yamada //Bioehem, and Biophys. Res. Commun.- 1989. -V.163. N 1. - P.25-31.

211. Ip C., Dao T.L. // Cancer Res. 1977. - Vol. 37. - N 9. - P. 3442-3447.

212. Jaswal V.M.S. Changes in sialic acid and fucose contents of enterocytes across the crypt-villus axis in developing rat intestine./ V.M.S. Jaswal, H.S. Babber, A. Mahmood //Bioehem. Med. and Me-tab. Biol.- 1988. T.39. - N 1. - P. 105-110.

213. Jezequel M., Seta N.S., Corbie M.M. //Clin. Chim. Acta. 1988. - Vol. 176. - N l.-P. 49-57.

214. Katopodis N. Spectrophotometry assay of total lipid bound sialic acid in blood plasma of cancer patients and asymptomatic healthy individuals./ N. Katopodis,

215. H. Yashar, C.C. Stock //Proc. Amer. as-soc. for cancer research.- 1980. T.2L -P.182.

216. Kelly M.S. Stadies of the silylation and microheterogeneity of human serum alpha-1-acid glycoprotein in health and disease. /M.S.Kelly// Clin. Chem. Acta. -1987.-Vol. 166.-P. 177-185.

217. Kishore G.S. Some biochemical properties of human breast tumor sialyltransfer-ase./ G.S. Kishore, R.M. Budnick, T.L. Dao //Bioehem. Med.- 1985. V.33. - N1. P.1-7.

218. Koch H.U. Glucosamine itself mediates reversible inhibition of protein glyco-sylation./ H.U. Koch, R.T. Schwarz, Ch. Scholtissek //Eur. J. Bioehem.- 1979. -V.94. N 2. - P.515-522.

219. Kohn J. The use of lectins to measure acute phase proteins in the serum or plasma of man and animals during inflamation and tissue breakdown. /J.Kohn, J.Whicher, C.Warren// FEBS Lett. 1980. - v. 109. - N 2. - P. 257-260.

220. Koj A. Metabolic stadies of acute- phase proteins. /А. Koj// Pathophysiology of plasma protein metabolism. N.-Y.; London. - 1984. - P. 221-248.

221. Koj A. Liver response to inflammation and synthesis of acute-phase proteins. /A.Koj// The acute-phase response to injury and infection. — Amsterdam: Elsevier, 1985.-P. 173-178.

222. Koolman J. Taschenatlas der Biochemie./ J. Koolman, K.-H. Rohm// New York, Georg Thieme Verlag Stuttgart, 1998. 469 p.

223. Lebreton J.P. Effects of age on the serum concentration of alpha-1-acid glycoprotein and the binding of lidocaine in pediatric patients. /J.P.Lebreton, M.Hiron, D.Biou// Inflammation. 1988. - Vol. 12. - P. 413-424.

224. Mandal D.K. Stadies of the binding specifity of Concanavalin A. Natur of the binding site for asparagine-linced carbohydrates. /D.K.Mandal, L.Bhattacharya, S.N.Koenig// Biochemistry. 1994. - V. 33. - P. 1157-1162.

225. Mandell L.A. Canadian quidelines for the initial management of communiti-acqured pneumonia. / L.A. Mandell, TJ.Marrie, R.F.Grossman// Clin. Infect. Dis. 2000. - № 31. - P. 383-421.

226. Miyagi T. Purification and characterization of cytosolic sialidase from rat liver./ T. Miyagi, S. Tsuiki //J. Biol. Chem,- 1985. V.260. - N.l 1. - P.6710-6716.

227. Montreuil J. Protein Metabolism. /J.Montreuil// Amsterdam: New York, 1982. -188 p.

228. Moran E. Use of sialic acid estimation in the diagnosis of disease and monitoring response to therapy./ E. Moran, R. Kennedy, R. Thornes //Bioehem. Soc. Trans.-1985. V.13. - N 5. - P.937-938.

229. Moran N.M. Characterization and cellular localization of a developientably regulated ret neural sialidase./ N.M. Moran, K.C. Breen, C.M. Regan //J. Neuro-chem.- 1986. V.47. - N 1. - P. 18-22.

230. Morell A.G., Gregoriadis G., Scheinberg I.H. et al. // J. biol. Chem. 1971. -Vol. 246. - N 5. - P. 1461-1467.

231. Mortimore G.E. Mechanism and control of deprivation-induced protein degradation in liver: role of glucogenic amino acids. /G.E. Mortimore, A.R. Poso// Geluamine Metabolism Mammalian Tissues Berlin, 1984. - P.138-157.

232. Nagai T. Characterization of mouse liver sialidase and partial purification of the lysosomal sialidase./ T. Nagai, H. Yamada //Chem. and Pharm. Bull.- 1988. -V.36. N 10.-P.4008-4018.

233. Nicollet I. Marker Proteins in inflammation. / Nicollet I., Lebreton J.P., Fontaine M.// Berlin; New York. 1982. - P. 520-523.

234. Osawa T. Phytohemagglutinins. /T.Osawa// Proteins, nucleic acids, enzymes. 1971. v. 16. - N 5. - P. 335-349.

235. Partial purification and characterization of sialate-O-acetylesterase from bovine brain./ R. Schauer, S. Reuter, S. Stoll, A.K. Shukla//J. Biochem.- 1989. V.106. -N L-P. 143-150.

236. Pepys M.B. Acute phase proteins with special reference to C-reactive protein and related proteins and serum amyloid A protein. /M.B.Pepys, M.L.Balts// Adv. Immunol. 1983. - v. 34. - P. 141-212.

237. Pereira M.E.A. Neuraminidase activity in Trypanosoia rangeli./ M.E.A. Pereira, D. Moss //Mol. and Biochem. Parasitol. 1985. - V. 15. - N I. - P.95-103.

238. Peters T. Plasma protein made by the liver. // Plasma protein secretion by liver. /Ed. By H. Glaumann, T. Peters, C.Redmann. London, N.-Y., 1983. - P. 1-5.

239. Plasma sialidase activity in acute myocardial infarction. /U.A. Hanson, R. Udipi, M.D. Shettigar, R. Raiesh //American Heart J.- 1987. V. 114. - N 1. - part 1. -P.59-63.

240. Prasad S.B. Studies on the sialic acid in tumor and normal cells using cisplatin as a probe./ S.B. Prasad//Curr. Sci.- 1986. V.55. - N 14. - P.651-654.

241. Ramachi G. Intracellular calcium mobilization is triggered by clustering of membrane glycoproteins in Concanavalin A —stimulated platelets. /G.Ramachi, M.Torti, F.Sinigaglia// J. Cell. Biochem. 1993. - V. 11. - P. 241-249.

242. Rapid, simple enzymatic assay of free L-fucose in serum and urine, and its use as a marker for cancer, cirrhosis, and gastric ulcers./ T. Sakai, 1С. Yamamoto, H. Yokota, K. Hakozaki-Usui, F. Hino, I. Kato// Clin. Chem. 1990. V.36. - P. 474-476.

243. Raynes J. // Biomedicine. 1982. - Vol. 36. - N 2. - P. 77-86.

244. Reeck G. The covalent and threedimentional structure of concanavalin A. /G.Reeck, J.Becker, G.Edelmann// J. Biol. Chem. 1975. - v. 250. - N 4. - P. 1525-1547.

245. Reeke G. Changes in the three-dimentional structure of concanavalin A upon demetallisation. /G.Reeke, J. Becker, G.Edelmann// Proc. Natl. Acad. Sci. US. -1978. v. 75. - N 5. - P. 2286-2290.

246. Romppanen J. Age-related reference values for urinary excretion of sialic acid and deoxysialic acid: application to diagnosis of storage disorders of free sialic acid.// J. Romppanen, I. Mononen// Clin. Chem. 1995. - V.41. - P.544-547.

247. Rouge P. Interaction les proteins du serum humain normal et les hemagglutinins les grains be pois. /P.Rouge// C. R Acad. Sci. 1976. - v. 283. - N 16. - P. 1823-1825.

248. Rouge P. Comparation des reaction de precipitation entre les hemagglutinines de trois especes du genre Vicia et les glycoproteines de serum humain normale. /Р. Rouge, C.Chatelain, D.Pere// Planta med. 1977. - v. 31. - P. 141-145.

249. Ryden I. Lectin ELISA for Analysis of a 1-Acid Glycoprotein Fucosylation in the Acute Phase Response./ I. Ryden, A. Lundblad, P. Pahlsson// Clin. Chem. -1999. V.45. - P. 2010-2012.

250. Sagawa J. Characterization of the major sialidases of various types of rat blood cells their comparison with rat liver sialidases./ J. Sagawa, T. Miyagi, S. Tsuiki // Biochem.- 1990. V. 107. - N 3. - P.452-456.

251. Saito M. Further characterization of a myelin-associated neuraminidase: properties and substrate specificity./ M. Saito, R.K. Yu//J. Neurochem.- 1986. V.47. -N 2. - P.631-641.

252. Sakellaris G. Presence of sialic acids in Lactobacillus plantarum./ G. Sakellaris, F.N. Kolisis, A.E. Evangelopoulos //Biochem. and Biophys. Res. Commun.-1988. V.155. - N 3. - P.l 126-1132.

253. Salahuddin A. Advances in Lectin Research. /А. Salahuddin// Ind. J. Biochem Biophis. 1992. - N 29. - P. 388-393.

254. Samollow P.B. Analysis of neuraminidase isozyme phenotypes in mammalian tissues: an electrophoretic approach./ P.B. Samollow, J.L. UandeBerg, H.W. Kunz //Biochem. and Biophys. Res. Commun.- 1985. v.126. - N 3. - P.l 1821188.

255. Sauerbrei В. Novel enzymatic synthesis of sialigosacacharides./B. Sauerbrei, J. Thiem// 6th Eur. Symp. Carbohydrate Chem. Edinburgh., 8-13 Sept., 1991: Abstr.- Letchworth, 1991, P.245.

256. Schauer R. Sialate-O-acetylesterases: key enzymes in sialic acid catabolism./ R. Schauer, G. Reuter, S. Stoll //Biochimie 1988. - V.70. - N 11. - P. 1511-1519.

257. Schreiber A.D. Interrelationship of clotting fibrinolysis, kinin generation and complement. /A.D. Schreiber, K.F.Austen// Microvasc. Res. -1973. Vol. 6. -P. 251-263.

258. Schreiber G. Synthesis and secretion of acute phase proteins. /G. Schreiber, G. Howlett// Plasma proteins secretion by the liver. Ed. By H. Glaumann, T. Peters, C. Redmann. London: N.-Y., 1983. - P. 423-449.

259. Serum Sialic Acid in a Random Sample of the General Population./ M. Ponnio, H. Alho, S.T. Nikkari, U. Olsson, U. Rydberg, P. Sillanaukee// Clin. Chem. 1999. V.45. - P. 1842-1849.

260. Silbert J.E. Advances in the biochemistry of proteoglycans./ J.E. Silbert //Coonect. Tissue disease: Mol. Pathol. Extracell. Matrix,-New York. Basel.-1987. P.83-98.

261. Spaltro J. Cellular localization and substrate specificity of isoelectric forms of human lixer neuraminidase activity./ J. Spaltro, J.A. Alhadeff //Biochem. J.-1987. V.241.-N 1. - P.137-143.

262. Stockley RE. Proteolytic enzymes, their inhibitiors and lung diseases. / R.E. Stockley// Clin. Sci. 1983. - Vol. 64. - N 2. - P. 119-126.

263. Strecker G. Glycoproteins et glycoproteinoses./ G. Strecker, J. Montreuh //Biochimie 1979. - T.61. - N 11-12. - P.l 199-1246.

264. Studies on kidney sialidase in normal and diabetic rats./ L. Cohen-Forterre, G. Mozere, J. Andre, M. Sternberg //Biochii. et biophys. acta: Gen. Subj.- 1984. -V.801 (G 113). N 1. - P.138-145.

265. Sturgeon R.J. Glycolipids and gangliosides./ RJ. Sturgeon //Carbohydr. Chem.-1978. V. 10. -P.411-425.

266. Tandt W.R. Methylumbelliferyl-N-acetylneuraminic acid sialidase in human liver./ W.R. Tandt, S. Scharpe //Biochem. med.- 1984. V.31. - N 3. - P.287-293.

267. Thiele O.W. Makromolekulare glykolipide mit ABH-Blut-gruppenaktivitat./ O.W. Thiele //Z.Allgemeinmed.- 1980. Bd.56. - N 13. - S.921-922.

268. Thiem J. Chemoenzymatische Synthesen von sialyloligossacchariden mit immo-bilisierter sialidase./ J. Thiem, B. Sauerbrei //Angew. Chem.- 1991. V. 103. - N 11. - P.1521-1523.

269. Use of sialic acid analogues to define functional groups involved in binding to the influenza virus hemagglutinin./ S. Kelm, J.C. Paulson, U. Rose, R. Brossmer //Eur. J. Bioehem.-1992. V.205. - N 1. - P.147-153.

270. Warren C. The use of concanavalin A to measure acute phase proteins by laser nephelometry. /C.Warren, J.Whicher, J.Kohn// J. Immunol. Methoda. 1980. — v. 32,-N2.-P. 141-150.

271. Watanabe M. Purification and characterization of mouse alpha-1-acid glycoprotein and its possible role in the antitumor activity of some lichen polysaccharides. /М.Watanabe, K.Imai, S.Shibate// Chem. Pharm. Bull. 1986. - Vol. 34. -P. 2532-2541.

272. Wu A.M. The covalent and threedimentional structure of concanavalin A. /A.M.Wu, S.Sugii, A.Herp// Adv. Exper. Med. Biol. 1988. - N 228. - 819847.

273. Zeigler M. The identification of lysosomal ganglioside sialidase in human cells. /М. Zeigler, V. Sury, G. Bach// Eur. J. Biochem.- 1989. V.183. - N 2. - P.455-458.

Информация о работе

Толстолуцкая, Татьяна Олеговна
кандидата медицинских наук
Уфа, 2004
ВАК 03.00.04

Диссертация

Исследование гликопротеинов сыворотки крови у больных негоспитальной пневмонией - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы