Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Использование совместимых форм соединений меди и и йода для профилактики анемии поросят

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Использование совместимых форм соединений меди и и йода для профилактики анемии поросят"

ВСЕРОССИЙСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ВЕТЕРИНАРНЫЙ ИНСТИТУТ ПАТОЛОГИИ, ФАРМАКОЛОГИИ И ТЕРАПИИ

ЛИПАТОВА Ольга Александровна

619:616 • 155 * 194 : 636.4.087.7

ИСПМЬЗОВАНИЕ СОВМЕСП/ШХ НОРМ СОЕДИНЕНИЯ МШ И ПОЛА ДЛЯ ПРСШЛАКТИХИ АНЕМИИ ПОРОСЯТ

03.00.04 ■ ■ биохимия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени канлйдата биологическим наук

На правая рукописи

Воронеж - 1994

Работа выполнена в лабораториях кафедры общей химии и патаиатомии Ульяновского сельскохозяйственного института

кучный руководитель - доктор биологических наук.

профессор Тен Эрион Владимирович

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор Бузлама B.C. кандидат биологических наук Шушлебин В. И.

Ведущая организация:

Казанский ветеринарный институт им. Н. 3. Баумана

Защита состоится

1994 г. в

часов

на заседании специализированного совета Л 020.65.01 при Всероссийском научно-исследовательском ветеринарном институте патологии, (¿армакологии и терапии по адресу: 394087. г. Еоронеж, ул. Ломоносова, 114-6.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института

Автореферат разослан

1994 г.

Ученый секретарь спацсовета

Слободяних В.И.

I. Общая характеристика работы

Ак-туа.пьнпгггь трмы. Алиментарная анемия - одно из массовых заболеваний поросят, приносящее значительный экономический ущерб свиноводству СКучинский М.П.. Иванов Д.П. 1990.)

Возникает заболевание от дефицита железа. По современным данным, железодеФицитная анецад может быть следствием недостаточности меди, йода и другим микрозлемектовСКарелин А.И. 1972,Войнар А. И. 1960, Баренштейн Ф. Я. 1966, Икольник М. Я. ).

Входя в структуру биологически активных веществ С гормоны, ферменты, вита>,;'лны}микроэдементы влияют на процессы кроветворения. роста, размножения и т. д. С Ковальский В. В. 19 . . Самохин В. Т. 1972.1S81. Судаков Н. А. 1979.1981, Тен Э.В.1987).

Медь способствует перекалу неорганического железа в его органическое соединение и гемоглобин.

Кроме того, установлено, что медь оказывает влияние на синтез иодированных соединений , участвующих в синтезе гор-ионов щитовидной железы С Маллер Г. 1962. Шустов В. Я. 1967. Ковальский В. В. 1972 ).

Гормоны щитовидной калезы оказывают стимулирующее влияние на превращение гемоцитобластов в клетки эритроцитарного ряда, ускоряют рост молодого организма, регулируют сопротивляемость организма к инфекциям и др. С Замарин Л. Г. 19G8, Пушкарев Г.П., Смирнова Е.А. 1972, Черемисинов Г.А. 1976. Самохин В. Т. 1978

Важное значение в повышении биологической доступности минеральных веществ и обеспеченности животных микроэлементами придается халатным соединениям С Хазипов Н.3., 1962, Казаков X. Ш., 1972, Ершова Е. А., 1882, Тен Э. В. 1087 '). В составе органических соединений активность микроэлементов возрастает в сотни тысячи раз по сравнении с ионным их состоянием в организме животных. С Опарин А. И. 1965, Кузнецов С. Г. 1989 ) В насто.шее время для прфильктикм железодс>4ицитной дна--

мии применяются Ферродекстрановые препараты, недостатком которых является то,что они на содержат многих необходимых для процессов кроветворения макроэлементов, в том числе медь и йод С Кудрявцев А.П. 1966. Демко Е.Б. 1972,- /¡акимова A.M.и др. 1979).

Несмотря на значительное количество исследований, посвященных выяснению биохимической роли микроэлементов вопрос 1 об участии железа, меди и йода в составе хелатных комплексов в кроветворении остается мало изученным .

Данная работа посвящена изучению метаболизма железа, меди и йода в связи с гемопоэзом растущих свиней на £оне жа-лезодийицитной анемии.

1.2. Цель работы Целью настоящей работы явилось изучение биохимических показателей крови, органов и тканей животных при железодефицит-лой анемии, под влиянием Ферродекса и совместимых соединений меди и йода. Для выполнения поставленной цо.т.! po™";i слс-дукщие задачи:

1. Исследование биологической активности тирозината меди в сочетании с иолидом калия при экспериментальной постгеморрагической анемии белых крыс.

2. Исследование биологической.активности халатной меди в комплексе с йодом при клинической железодефишгной анемии поросят-сосунов.

3. Влияние тирозината меди в сочетании с иошдом калия на йизиолого-биохиммческ&е состояние щитовидной железы поросят.

4. Влияние тирозината меди а сочетании с иодидаш калия на продуктивность лоросят.

1.3 Научная новизна

Впервые применена совместимая форма соединений меди и

йода для пароч1г^ал*.кого введения.

Установлена эффективность применения гироэината ^еяи а сочетании с иояигом калия при профилактике анемии. По результатам исследований получено положительное реикэннэ ьа выдачу патента на тему: "Способ про^лактики иикроцит^рной гипок-ромноя анэкии поросят"Ы 4947767/15-- 041744 от 17.09.93.

Впервьы проведен анализ биохимической активности тиро-эината «еди а сочетании с иояидом калия. Показеко. что профилактическое антианамичоское действие препарата .обусловлено стимуляцией гемопоээа. активизацией церулоплазмина, усилением Функциональной активности щитовидной железы, пгоцэс-сов накопления меди и железа в органах кроветворения и депонирования.

1.4 Практическая значимость

Впервые применен совмвстикгый комплекс органического соединения меди в сочетании с поднаем калия ' и йэрродекеоы цля профилактики анемии у поросят-сосунов.; \

1.5 Апробация работы

Материалы диссертации доложены на стчетких конфактцияк и Ученом совете Ульяновского СХИ С 1989 - 1992 г. Г. ). Всесоюзной научной конференции "Экологические проблемы бэрмзколо гии и токсикологии" С Казань 1930 г. ). Всесоюзной совещании "Новыа аспекты участия биологически активных' вещесть а регуляции метаболизма и продуктивности сельскохозяйственных ливотчых" С Боровск, 3.391г. ). на 4-й мехгосударо-гае иной мэ*--' вузовской научно-практической конференции " Новые Фармакологические срэастза в ветеринарии" С Саяхт-Петербург, 1992 ).

1.6 Публикации '

По цатериалам диссертации опубликована 5 работ. На эациту выносятся сладуицие осяоьные положения: • ,

1. О биохимических механизмах антианемической активности тирозината меди в сочетании с иодидои калия.

2. О влиянии медного халата и неорганического йода на физиолиго-биохимическое состояние щитовидной железы.

3. О комплексной профилактика анемии у поросят тирози-нагом меди в сочетании с иодидои калия и Ферродексом.

Объем и структура диссертации

Диссертация изломана на 115 страницах машинописного текста и состоит из введения,обзора литературы, материала и методики исследования, результатов • собственных исследований, обсуждения результатов исследований, выводов, списка использованной литературы, приложения.

Список литературы включает 281 источник, из них 214 отечественных и переводных, 67 иностранных авторов. Работа иллюстрирована 22 таблицами,

2. Материал и методы исследования

Для решения поставленных задач за период с мая 1889 года по июнь 1992' года были исследованы 32 образца халат-комплексных и неорганических соединений совместно с иодидом калия. • 1

1

Синтез комплексов меди с аминокислотами проведен по мэ-тоду Abderhalden Е., Schnitzler £ (19273.

Синтез проводили согласно требованиям техники лабораторных работ по органической химии. Структура -полученных комплексов изучалась методом спектроскопии, а содержание метал-лаСкомплексосоразоватвляЗ - весовым методом Гитис С.С..Глаз A.A.. Иванов А. В.С19Э1).

Экспериментальные исследования выполнены по плану научной рсйоты кафедры биохимии с/х животных Ульяновского

сельскохозяйственного института С тема 2,5 "Комплексное использование биогенных элементов для профилактики анемии поросят" номер государственной регистрации 01.92.0007326. Исследования проведены в лабораториях кяоодры химии и пат-анатомии Ульяновского сельскохозяйственного института, биохимии Казанского иаучно-исследоватэльексгс ветеринарного института, спектрального анализа НИИ атомных реакторов г. Ли-ммтровграда Ульяновской Области.

Еиохимические, гематологические и химические исследовлния выполнены в ходе научно-производственных опытов на базо вивария и 4-го отделения учхоза Ульяновского сельскохозяйственного института.

. При изучении биохимических и Физиологических процессов было взято 15 голов белых крыс С излинейные ) и 70 голов новорожденных поросят.

Опыты по изучению антианемического действия проведены на модели постгемморагическоа анемии Белых крыс. С это« целью 15 половозрелых самиов 180-днявного возраста с средней массой 200 г., двухкратно С в течение 2-х.дней обескровливали на 403! от общего объема крови, через хвостовую вену. Крыс содержали в теплом помещении, лазали обильное питье, кормили раз в сутки молотым комбикормом, свеклой, ¡юрковьо, хлебом. Схема опыта приведена в таблице 1.

В течение 3-н дней после второго кровопускания были сделаны двухкратные инъекции, обозначенные в схеме. Испытуемый раствор для ичьекция животами готовили как указано ниже. В химическую колбу налавали 400-500 мл! физраствора, вносили 0.8 г тирозината меди и нагревши до кипения. После растворения препарата добавляли 0.04 г иодида калия, доводили водой до 500 ил. Разливали в стерильные флаконы по 50 мл и стерилизовали в автоклаве при 1- 11Ь-120*в течение минут.

Таблица 1

Схема опыта на крысах

Группа Кол-во ЖИВОТНЫХ С голов) 1-я инъекция 2-я инъекция

■ I контроле ■ « 0.&Z р-р натрия хлорида-0. 5 мл в/и O.S%p-p натрия клоридэ-0,5 мл в/и

и : Фврродако^-Серродекс 5 ферродекс-О,5мл в/и, Fe-37,5мг 4сррсдекс-0.5мл в/м,Fe-37.5мг

ш верродекс T/rCu+KJ 5 ". Серсодекс-О.5мл в/и, Fe - 37.5мг тирозинат меди 0,5 мл, 0,16ïf>-p в/м,+KJ-0.04 мг

. ' ' î

В течение экспериментального пеЫода наблюдали динамику со-1 «аркания в крови гемоглобина.. эритроцитов и величину гема-токоите спустя 3 дня после обескровливания. на 7-й» 14-й и 30-й дни после праве ценных инъекций.

Гематологические показатели определяли по общепринятым ми тоникам: количество гемоглобина - гемометром Сели С ГС - 2 ), число эритроцитов - в камере Горя&ва, величину гемагокрита определяли в к&лиллярах, обработать« гепарином, в центрифуге Tyoe MFV-310 С Польша j при 3000 об/мин. В сьаорочкь крови определяли активность церулоплазмина по методу Ravin С1361..) в модификации Тана Э.В. (13373.

Обший белок определяли рефрактометрическим методом.

На зовершактаем этапе эксперимента животные были убиты и при ескрытии взяты почки, печень, сердце, селезенка.головной мозг, длиннейшая мышца спины и проанализированы ча содержание меди и железа спектрографическим методом. Исследования проведены совместно со специалистами лаборатории спяк- • трального анализа НИИ атомных реакторов г. Димитровграда.

Производственная апробация проводилась на 1599 головах новорожденных поросят на. свиноферма учхоза Ульяновского сельскохозяйственного института и в совхозе им. Крупской И. К. Мелекесского района Ульяновской области. Для опытов использовали 7 пометов новорожден«« поросят, 70 голов, крупной белой породы с признаками железодефииитной анемии от рождения до отъема. Отбор животных для экспериментов проводился комиссионно с участием сотрудников кафедры терапии УСХИ. Схема опыта на поросятах представлена в таблице 2.

Таблица 2 Схема-опыта на поросятах ~ сосунах

' Группа Кол-во животных С голов} 1-я иньекшя 12-я инъекция

Контрольная Ферродакс-»- Фарродекс 35 йлрродекс (1.5мл-112,5мг-£е), а/и ферродекс С1,5мл-112,5мг Ге), в/м

Опытная Ферродекс+ Тирозинат меди с мода-дом калия 35 Ферродекс 1,5млС112. 5мг-Ре), в/м Тар Си+Ю-- 1.5 мл 0.16% р-р-ЮДЯмг Ю ■

- £ -

Содержание поросят было гнездовое, по 10 голов в станка в двухрядных свинарниках. Животные имели свободный доступ к воле, с недельного возраста получали подкормку. Животные всех половозрастных групп содержались безвыгулъно. На ферма в период опытов было благополучно по инфекционным звдолева-» ниям. Научно производственный опыт проходил на Фоне рационов. •соответствующих требованиям ВИЖ.

Эксперимент длился 60 дней от рождения до отъема. Кровь исследовали на1-й. 3-й, 15-й. 60-й Лни жизни по вышеуказанным методикам.В возрасте 18 и 60 дней проводили анализ белковый фракций сыворотки крови методом электрофореза в полиа-крилашдном геле. На 18-й день брали кровь для анализа активности церулоплазмина. Для изучения влияния тироэината меди в сочетании с иодидом 1салия на обмен и депонирование меди и железа в печени проводили убой 18 дневных животных (по 5 голов из каждой группы), определяли биоэлементы в 10 образцах спектра пмйачсским ^зтсдом.

Содержание йода в щитовидной железе определяли методом Гроа-ка С Государственная Фарыаконея. ■ 1968).МорФомэтрические исследования проводили после вскрытия 18-дневных поросят СЮ голов). Щитозидныа жалеэы Фиксировали в 12% растворе Формалина. Срезы готовили .с парафиновых блоков и непосредственно с замороженного материала. Окраску срезов проводили гематок-силон-эозином, по Ван-Гизоиу. Лилейные измерения проводили с помошыо микрометра. Функциональную активность определяли по ее гистологической структуре путем измерения размеров фолли-нул (50 измерений для каждого препарата) высоты, ишрчна и количества клеток Фолликулярного зпителия. Площадь Фолликул опродгляли ш формуле:

Я Ш «ищулв. __

Объем Фолликул: А- Гда

- малая ось Фолликула $ - большая ось фолликула $ - 3.14

О состоянии коллоида судили по цвету и наличию в нем реэор-биионных вакуолей. Статистическую обработку экспериментальных данных проводили по таблицам Стыодента (Асатиани В. С. .1865). Достоверной считали разницу при Р 0,05-0.001.

3. Результаты исследований

3.1 Исследования совместимости различных соединений меди с иодидом калия

Результаты смашвашя равных объемов растворов соединений меди с раствором иодида калия и учет их взаимодействия показаны в таблице 3.

Из приведенных экспериментальных данных С таблица 33 видно, что органические соединения меди в основной все не. вступают в реакцию с иодидом калия, за исключением' ацетата■ меди. Смешанные растворы длительное время оставались неизмененными. Неорганические соединения с иодидом калия вступали в реакцию, при этом изменяя окраску с выпадами' в осадок. Испытуемый нами препарат тирозинат меди с иодидом калия сохраняли в течение- 2-х лет.

По данным Денисовой О.Ф. С 1392 X 0,162 раствор тиро-зината меди малотоксичен для животннх при парентеральном введении: •

Ююо - для крыс составило 425 мг/кг массы чела:

И):,о - ЗС6. 7 мг/кг: МТД - 325 мг/кг.

Таблица 3

Данные о взаимодействии водорастворимых

соединений ыедм с иодидом калия ---------1

Препарат Эффект взаимодействия

осадок изменение цвета окраска с крахмалом

Сульфат Си +

Ацетат Си + + +

Гли Си - - - -

Ала Си - •

Зал Си - - -

Apr Си - - -

Лиз Си ■ - - -

Мет Си - -

Глу Си - - -

Асп Си -

Тир Си - - -

Оен Си - - -

Цитрат Си - г " -

Тре.Си - t i -

Три Си - • - -

.Пей Си ■ . - -

Изольй Си - ' - • -

Сер Си - - -

Хлорид Си + + •ь

Бромид Си + + +

Меди акмог •

ьия хлорид : +

;и«р. меди . 4 ■ + +

Наличие реакдаи : - Отсутствие реакции

3.2. Моделирование постгеморрагической анемии на белых крысах

В таблицах 4, 5 приведены результаты исследований содержания гемоглобина, эритроцитов к показателя гематокрита.

В результате кровопускания (402 от общей массы крови.3 гематологические показатели понизились во всех трах экспери-мэнтальных группах: уровень гемоглобина на 24 число эритроцитов а 1,3 раза, гематокритная величина на 10,2%.

Как видно из приведенных таблиц 4,5 анемия продолжалась после проведанных кровопусканий до 7 дня исследований. С этого срока гематологические показатели стали восстанавливаться .

Таким образом, полученные данные свидетельствуют о вызванной псзстгеморрагнчйской анемии у крыс.

3.3. Влияние тирозината меди в сочетании с иодидом калия на белый крыс при постгеморрагическоя акоши

3.3.1 Результаты исследований влияния тирозиньта меди в сочетании с иодидом калия на гематологические показатели.

Полученные данные свидетельствуют о стимулируш.ей способности тарозината меди с иодом калия восстанавливать гематологические показатели при экспериментальной постгемороаги-ческой анемии крыс. Количество гемоглобина к 7 дню после введения препаратоз в опиг-ной грулле (3 гр. > возрастает г,о сравнении со 2-й группой на 11,0%,а с первой группой на 2.0%. К 14 дню концентрация гемоглобина продолжала возрастать и была выше в третьей ( опытной 5 группе, чем во второй на 10»." а в первой на 4.0%.

Число эритроцитов на 14 лень увеличилось в опытной группе по сравнений с первой группой - на 3.47,. а со второй группой на 20%. Гематокрь-.тный показатель не 7-л день был

Гематологические г»сжввате/»и крыс на ♦сне применения различны?: г»^епарато&

Группы гемоглобин Г I . Эритроцит« Генатсноит X

Вое мл иеелод. Немало 3-Я день 7-й день 14-Л день 50-й день Начало 3-й 7-й день 1Л-Й день 30-й день Немало 3-й яен^ 7-й Д0НЬ 14-й день 30-й день

' 1 г-р. »4.63 ♦ 11.2 ♦ 13-36 »а-Зб! ♦ 16.1 4 7.6 ♦ 4.93 * 6.44 4 6.40 7.67 4 4-5.2 4 33.0 4 46.6 51.2 4 50.0 4

Э.9Ю«С1 0.17 0.43 0.64 0.19 0.60 0.13 0.19 0.21 0.20 0.53 1.93 2.10 1.9 1.89 1.27

III гр Туг Си +КЗ 14.63 * 0. »7 11.2 ♦ О. 45 13.61 4 0.26 16.00 4 2.36 13.2 ♦ О. 35 7.06 ■ + 0.13 4.93 * О. 19 5.84 + 2.22 7.00 4 О. 59 7.12 4 О. 14 43.2 4 1.93 33.0 4 2. Ю 47:6 4 0. 46 47.8 4 1.40 48.4 4 2.07

.. „и...-,..------------Таблица 3

Гематологические показатели крыс на Фоне применения различных препаратов

Группы Гемоглобин, р X ЭВИТООЦИТЫ. НЛН/МЛ1 3 Гематокрмт *

Воем» меелвд. Нач&ло 3-й день 7-й день 14-й день 30-й день Начало 3-й день 7-й день 14-й день 30-й день Начало 3-й •день 7-й день 14-й денс 30-й день

Игр. Феовод. 14.65 И.2 4 12.2 4 15.6 4 15.6 4 7.06 4 4.93 1 4 5.24 4 5. & 4 7.01 4 43.2 4 33.0 4 46.2 4 51.21 45.4 4

•ероод. 0. 17 0.45 1.27 0.74 0.74 0. 13 0.19 0.24 1.8 0.21 1.93 2. 1 0.01 0.01 2.1

Шгр. ®»овод. Туг Си 4 КЗ 14.65 4 0. 17 11.2 4 0.45 13.6 4 0.26 16.0 4 2.36 15.2 4 0.28 7.Об 4 0. 13 4.93 4 0. 19 5.84 4 2.22 7.0 4 1.Б6 7. 12 4 0. 14 43.2 4 1.93 33.0 4 2. 1 47.6 4 0.46 47.3 4 1. 40 48.4 2.07 ;

насколько еыша з контрольной группе.

Восстановительная активность организма крыс по гематологическим показателям С иньвцированных медник» халатом совместно с иодидом калия ), превышает в среднем таковую контрольных животных.СII гр.) - в 2 саза.

Полученные результаты свидетельствуют о положительном стикулирукщем влиянии соединений железа, меди и йода на эритро-и гемопозз и согласуется с литературными данными (. Ген Э. В., 1380, Батгева А.. 1938, Денисова 0. Ф., 1932. Кальни-шсмй Б. Д., Кузнецов С. Г. ).

3.3.2. Данные анализов белка и белковых Фракций в сыворотке крови

Количество общего белка в сьвороткя крови жпотмых ь опытной группе, которым вводили Ферродекс и гирозинат меди с иодидом калия было приблизительно одинаковым с контрольной группой С 8,247+/- 0,01г2 и'8,256+/- 0,01г% соответственно).

Достоверность разницы в содержании альбуминатоа статноти-. чески не установлена.

Альбуминовая Фракция опытной группы С111) превосходила контрольную на 7,2%. По содержанию L-глобулинов отмечапась достоверная разница ( Р 0,01 ) в пользу животных опытной группы: 2.81+/- 0.65 г% про тип 2,66+/-0.12г2. Кониан грешя бета-глобулинов сыворотки крови крыс контрольной группы ире- > Еосходила опытнув на 11, и%. Более высокий уровень гамма-глобулинов отмечен* у животных опьлгной группы С 2.10<-/'-0.67гХ ) . против 1.48+/-С. 33 - контрольной.

Альбуминово-глобулиновый коэСЕФишант имрл пряиопропор- " ционадьную зависимость от гамма-глобулинов и составил ь первой группе - 0.28, а во второй группе - О. 30. Эти показа гели СЕидб^льствуют. что комплекс тирозината моли с иодидом калия усиливает пьспецифическую резистентность организма.

- lü -

3.3.3/ Результаты исследования тирозината меди в сочетании с иодидом калия на активность церулоплаэ-мина сыворотки крови Концентрация медьоксидазы в сыворотке крови в течение экспериментального периода под влиянием тирозиьата меди с йодидсм калия в опытной была выше к 10-му дню после проведенных инъекций. Содержание его в сыворотке крови крыс третьей группы, было выше, чем во второй группе на 13,0% и примерно на таком же уроане. как в первой группе.

К концу наблюдения, на 30-й день, содержание церулоп-лазмина в сыворотке крови соответственно по группам было следующем: в первой группе - 48.12+/-13.0 мг%:во второй -50.3+/-20.7игХ: в третьей - 64,8+/-3.4мг%. Достоверной разницы при сразнении показателей иерулоплазми-на во всех трех группах не было,но наблюдалась тенденция к активизации биосинтеза Фермента.Полученные данные согласуются с результатами исследований ШустоваВ.Я.(1967),Ковальского В.В. и др.С13703.Денисовой 0.Ф.С1992).указывающими на то, что введение в животный организм меди, яселеза и йода способствует к ак-швизации церулоплазмина (Фриден Е. 1964. Linder M.C.atal 1984)..

3.3.4. Данные количественного распределения железа и меди а органах и тканях подопытных животных Данные о содержании железа -в организме крыс второй и третьей группы свидетельствуют» что тирозинат меди в сочетачии с иодидом калия способствовал увеличению содержания этогр элемента у крыс Ш группы в селезенке в 1,6 разаС р < 0,001 в попках - е 1,39 раза t к 0.001 ). В других органах также ьи^лшдалось некоторое увеличение хелеза. кроме печени. В печени животных опытной группы железа меньше по сравнению с контролем г. 2.1 разл £ р < 0.01

Результата исследования по обмену шли показали, что

содержание данного биогенного элемента незначительно повышается в органах, а в некоторых случаях было ниже, чем в контроле. В печени содержание меди снизилось в 1,4 раза С р < 0.05 ) в пользу животных второй группы. В остальных случаях разница была не достоверной.

Сравнивая получеьные данные содержания железа и меди в органах крыс первой и третьей групп, следует отметить, что наибольшее содержание железа в органах и тканях *:ивотнь:х спыт-ной группа было в селезенке и превосходило контроль в 2.3 раза С р < 0.001 ). в печени - в' 2,1 раза ( р < 0,001 ), в сердце - в 2 раза, в почках - в 4,6 раза, но достоверное:о результатов статистически не доказана. Концентрация меди в печени животных опытной группы возросла в 1,3,разаСр < 0,05 J, в селезенка -а 3,4 раза, при этом достоверность разницы не высокая. В остальных органах произошло незначительное увеличение меди.

Таким образом, полученные данные о распределении железа и мэди в органах и тканях согласуются с результатами исследований других авторов. Печень выполняет роль функционального тканевого депо всех микроэлементов в организме С Верболович П. А. .1967. .Мусабаев U.K., Мецкач Т. И. .1968). Дополнительно введенные медь и йод в организм, способствуют быстрому всасыванию и усвоению железа. (Ольгина Ф. П. .1965; Кузнецов С. Н. и др. .1973, Linder Maria C..Munro H. V. 1973, Ten Э. В., 1986).

Хелат-комплекс меди с иодидом калия способствовал повышению статуса меди в органах и тканях белых крыс, увеличивая отложение металла з тканевых депо. Наблюдаемый уровень накопления меди в органах и тканях зависит как от степени участия последних в обмене этого микроэлемента, так и от участя самол меди и Р.оца в <£изиологс-биохимических процессах протекавших в органах и ткаплх.

3. <1. Исследование биологической активности типо-. зината меди в сочетании с иодияом калия при лечении железодефицитной анемии поросят

3.4.1. Динамика содержания в крови эритроцитов, гемоглобина и гематокрита

Из, гематологических показателей наиболее объективно характеризует состояние организма в отношении анемии .гемоглобин. Данные приводятся в таблице 6.

К 15-му дню у поросят инъецированных тирозинатом меди с ио-дидом калия, содержание гемоглобина достоверно повысилось с 8,4 +/- 0,02 гХ до 10,7+/- 0,6 гХ СР < 0,05 ).а в контроле с 8.8 +/- 0,11 г% до 9.4 +/- О.з'гХ.

Таким образом, в опытной группе концентрация гемоглобина была выше, чем в контроле в 1.1 раза.

Изменение числа эритроцитов в крови новорожденных поросят повторяет в некоторой степени динамику содержания гемоглобина, но введение тирозината меди с иодидом'калия вызвало достоверное повышение этого показателя на 26,6%. Величина ге-иатокрита была бьию на 2.9%.

К 60-му дню наблюдений достоверных различий по данным показателям между группами не отмечалось.Таким образом,при -веденные данные анализа картины красной крови свидетельствуют о стимулирующем влиянии тирозината меди с йо.цидом калия на гемопоэз. в организме поросят, что подтверждается увеличением количества гемоглобина, числа эритроцитов, гематокрмт-ной величины. Полученные результаты согласуются с литературными .Введение животным железа, меди и йодэ способствует улучшении процесса кроветворения (Олль Ю. К. .1967, Арнаутовс-¡Шй IIД.. Глотов B.W.,. Лопатин Н.Г., 1372. Тен Э.В. 1987.Beate Виш&г, 1990). - ' ' , - ■

Таблица 6

Гематологические показатели д пооосат под влиянием различны« препаратов

Гемоглобин 1 Количество эритроцитое | Величина гематокрита */ , ЛЛАЧ Тмм-> 1 '

1-й день 3-й Дейк 15-й день бО—й день 1-й день 3-й день 15-й день 60-й 1 1-й день 1 день 3-й день 15-й день 60-й день

Аерродекс — Л е р р о д е к с

0.3 &.В + 0. 11 9.4 - + 0.3 11.0 0.3 3.64 0. 13 3.46 + 0.07 3. 71? + 0.23 4.7 , + 0.52 40.0 + 1.а 35.2 + о.оз 33.0 30.3 О. ь

Ферродекс — Тирозинат — меди с иодилом калия

9.41 + 0.23 а.4 4 О. 02 10.7 + 0.6 10.3 + о.з 3.87 -4 0. 14 3.27 + о.з 4.а + 0. 12 4.08 + 0. 1? 35. & + ! 33.0 + 0.01 «9. 1 1.74 *-* 29.4 + 2. 2

. ♦ - Р < О.05 ■** - р < о,01 *»* — Р < 0,001

3.4.2. Данный исследований белковых фракций и и.шунных

белков ь сыворотке крови поросят Результаты исследований общего белка и белковых фракций в сыворотке крови поросят в 18-ти дневном возрасте показывают, что концентрация общего белка в опытной группе была дос-товйрна выше, чем в контрольной.

Основную часть белка в сыворотка крови трехнедельных поросят составляют альФ=нглобулиНы. Количество альфа - 2 глобулинов сывороточного белке, поросят опытной группы составило 8,75 +/- 1.06 мкг, против 7.22 +/- 4,3 мкг, что на 21% выше, чем в контрольной С Р < 0,05 ). Достоверная разница доказана е пользу животных, инъецированных тирозикатом меди.с иодидом калия. Данная фракция включает в себя церулоплазмин. Из наиболее важных составных частей сывороточного белка характеризующего резистентность организма, являются гамма-глобулины . Содержание гамма-глобулинов в опытной группе составило 31, 39'+/- 1,89 ькг и з контроле 30.20 +/- 1,19 мкг. но полученные данные мало достоверны.

К. 60-му дню Сна время отъема) концентрация общего белка е опытной группе стала на 5,2% выше, чем в контрольной. Количество ачьбухпадов к этому сроку в опытной и к онтрольной группе составило 19,05 +/- 1.55 мкг и 17,09 +/- 1,90 мкг при Р < 0,05.

Уювеиь гамма-глобулинов в этом возрасте у животных 2-ой группы под влиянием испытуемого препарата бьм достоверно вы~-ше, чем в контроле и разница составила 14,3% С Р <0,01 ). В большинстве случаев увеличение гамма-глобулинов в сыворотке крови служит прогностически благоприятным признаком, указывающем на еысокую сопротивляемость организма С Степашки-на К. И. 197о X

Уровень гамма-глобулинов характеризует в определенной степени и>.здунологическое состояние организма.

Альбумино-глсбулинозый показатель сыворотки крзви рс

ерэмя опыта повысился. У поросят опытной группы он составил 0. 27. а в контроле - О.24.

Среднее содержание иммунных белков в сыворотке крови 18-ти днеЕных поросят по группам составило в контроле 17.70 +/- 1,64 мкг. в опытной 24,04 +/- 2,54 мкг.

Таким образом, под влиянием тирозината меди с иодидом калия у анемичны« поросят наблюдаются характерные изменения распределения белкоЕых Фракций в сыворотке крови в пользу иммуннын белков, что свидетельствует об усилении неспециФи--чэской резистентности организма жиеотнкх.

3.4.3. Влияние хелат-кдмплекса меди в сочетании с коди-дом калия на активность церулоплазмина в крови

Таблица 7

Содержание церулсщлазмина в сыворотке крови поросят. _мг%

Группа Возраст

18 дней.• 60 дней

Ферродекс* Ферродекс 58.10 + 2.42 60.77 + 1.9

ОСергхздекс+ Тироэинат мади с иодадом калия МИМ 54.19 + 3.64 * * 48.40 + 1.3

«Р< 0,01-Р < 0.001

Анализируя результаты исследований, зидно.чго у кивотчьы первой группы содержание царулоплазмина в течение рсегс перила наблюдений было васоким. ría 18-Я день когшентреция не руло пла.э мина в. сыворотке крови контрольное групьы 5ша вы-

ше на 7,8% С Р < 0,001 )

Указанный эффект можно оценить нижеследугацим образом: согласно литературным данным С- Ковальский В. В.) при анемин уровень церулоплазмина в крови поросят и других животных повышен.

Введение препаратов Ферродекса и Ферродекса + калий ио-дид + Тир Си способствовало нормализации церулоплазмина. Причем к 60-му дню это стало более заметным 48,4 + 1,37 при С Р < 0.01 ). -

У белых крыс церулоплазмин, наоборот, был повышен, что можно объяснить характером проявления анемии, которая была вызвана не дефицитом ,г«елеза в кроветворных органах, а потерей крови. Поэтому эффект биосинтеза церулоплазмина в этом случае можно рассматривать как ответную реакцию на болевые, строссовые явления.

Б частности, у' разных видоз -животных эта реакция неадекватно отргаазтсл на биосинтеза медьсодержащего Фермента.

3.4. 4. Данные' с влиянии комплекса тирозината меди + ио-дид калия на количественное распределение железа и мзди в печени животных Под влиянием тирозината меди в сочетании с иодидом калия на 18-Я день жизни поросят содержание железа в печени опытных жлботньм снизилось в 3,7 раза.- Испытуемый препарат способствовал значительной мобилизации железа из депо. Содержание меди в печени порссят опытной группы составило С С. 87 +-/- 0.40 )' 105. масс. По-видимому, мадь и йод в комплексной Форме вызвали мобилизацию запасов железа с Функциональным назначением. !.'а возможность существования такого механизма реализации запасов железа указывают другие авторы. С Тен Э. Б., 1976, Ершова 6. А.. 1983, Богданова К. С., Алиев А. и др. 1986 ).

3.5. Влияние комплекса тирозинат меди + йодид калия на функциональное состояние щитовидной железы у поросят

3.5.1. Данные о морфологии щитовидных желез у поросят опытной и контрольной групп Наглядными показателями эс&ектизности антизобогенного действия испытуемого препарата служат площадь и объем Фолликул, а также количество их в поле зрения микроскопа. Как видно, из таблицы 8. количество средних и больших фолликулов в щитовидных железах контрольных поросят было заметно повышенным.

В срезах щитовидных келез, полученных от животных первой группы, преобладали мелкие Фолликулы, количество которых достигло 88 %, а в среднем по группе - 70.8 X. Одновременно встречались очень крупные фолликулы, размеры их в десятки раз превышали окружающие,

В прямой зависимости от выше изложенного находятся от- ■ ношения диаметра фолликулов к числу оаток Фолликулярного эпителия С Д/П Вычисленный Д/П .Фактор по опытной группе животных составляет 2,29 0,02.Многие авторы считают,что чзм никщ этот показатель, тем активнее функционирует щитовидная железа. С Подъячев В. И., Степанов В. И., • МаксимоваВ. М., 1970). При изучении гистологических препаратов щитовидной железы у животных контрольной группы большинство фолликулов окрашено в красный цвет, а у опытной - в розовый.

Таким образом,под влиянием комплекса тирозинат меди т иодид калия щитовидная железа у животных Функционально более активна, а ней преобладала паренхиматозная ткачь и,судя по парафолликулярным клет к,ам, имелась резервная возможность для образования новых фолликул.

В зтим стюшекии полученные нами данные согласуются ■ с работами Селиверсткиной М.М. 1975: Мельник Н. Г.. 1975: Воло-щик П. Д.. 1075 >.

Таблица 8

Средние микрометрические показатели структурных элементов щитовидной железы

Группы животных 1 группа 2 группа

Показатели Ферродекс Ферродекс Ферродекс Туг Си + К]

Площадь Фолликул С мкм2 ) 2982 - 101.97 4061,69 + 82.79 — мкм

Объем Фолликул С мкм3 5 131428 > 20851 165482 + 8638

Кол-во Фолликул (20 больших средних . малых 14.0 15,2 70.8 ' 22,0 25.6 51,6

Отношение диаметра фолликул к клеткам эпителия, Д/п 2,03 + 0.04 2,29 0,02 •И

Кол-бо Фолликул в 1 поле зрения 31,36 + 8.3 29.16 + 2,42

«** Р < 0,001 - Р < 0.05

3.5.2. Данные о содержании йода в щитовидных железах

поросят "

Определение содержания общего йода в ткани•китовидной железы поросят было проведено на 18-й день их жизни.

Полученные данные показывают, чтп среднее абсолютное количество йода в первой группа составите 73,0 +/- 10.88 мг%, во второй 154.53 +/- £2.5 мгХ, т.е. в 2.1 раза больше чем в контроле. Разница достоверна в пользу «инотнь'и опытной группы С р < 0,05 ).

Таким образом.введение препарата сопровождалось повышенным содержанием йода в шитоаидной железе не менео 18-ти дней, что свидетельствует об усилении активности щитовидных желез поросят.

Я. X. Туракулов С 1972 ) считает, что убыток иодидов нэ останавливает лроиесеа захвата йода, железо», но значительно задерживает превращение йода в органически связанную фог>-му.возможно из-за частичного угнетения энзиматических систем. вызываниях окисление и способствует усиленному депонированию его железой. :

Кузнецов С. Г.. Аухатова С.Н. С 1593 ) в своих исследования я отметили снижение функциональной активности щитовидной железы поросят, из тех групп, которые испытывали недостаток йода в рационе.

Тен Э.В. С 1969 ) установил значительное повышение гор-монообразоватвльной функции щитовидный желез при введении валухамхелат-комплексов содержащих медь и йод.

3.6. Результаты исследований влияний комплекса тирозинат меди + иодад калия на продуктивность поросят

Установлено,что антианемическая эффективность тирозина-та меди с иодидом кадия сопровождается усилением роста поросят.

К 15 -му дню масса животных а опытной группе была вьш на 0,1 кг, чем в контрольной. К 40-иу дно исследований масса животных з контрольной группе возросла с 2.72 -»/- о, 15 кг до

11.46 V/- 0.27 кг. а в ппьггноа группе с 2,82 +/- 0,5 до 13.23 +/- 0.5 кг С Р < 0,05

Прирост живой массы под влиянием тирозината мэди с иодидом калия составил 1,76'к.г или 15%, по сравнение с контролем.

Таблица 9

Динамика живол массы поросят

Группа Число порос. С гол.) Сроки исследований

1-день С кг) . 15- день С кг} • 40- ДЕНЬ С кг)

Ферродекс+ Серродекс 35 1.0 2.72 + 0.15 11.46 +■ 0,2?

Ферсод екс Тирозинат меди+ио-диа калия 35 1.0 2,82 + 0.5 13.23 + 0.5

« Р < 0 .05

выводы

1. Разработан способ получения и внедрен комплекс тирезината' меяи с иодидом калия в качестве эффективного антиана-мического средства, усиливание го действие жэлезодекспэано-вых препаратов. Содержание в препарата меди - О,162. иода - 0,062.

2. Разработана методика моделирования анемии Спостге-• моррагическоп) на белых крысах для изучения биохимического и

антианемического действия различных препарата.

3. Под влиянием комплекса тироэинага меди и иодида калия в сочетании с Ферродексом в организме анемичных животных отмечаются сдвиги биохимических параметров:

- повышение уровня гемоглобина начинается с 7-го дня после иньекиий:

- улучшение состава крови о.' увеличением содержания гамма-глобулинов на 26.5%, альфа-глобулинов на 9. ОХ и иммунных белков - на 26,4%:

- повышение уровня содержания меди в печени в 1.2 раза,в селезенке в 2.8 раза.в длиннейшей мышца спины в 2 раза:

- мобилизация железа из печени в организм для поддержания высокого уровня кроветворения в 3.7 раза:

- усиление активности церулоплазыина у белых крыс на 12.22. а у поросят снижается на 7.2 X - на 18-й день и 20.4% - к 60-му дню.

4. Под влиянием комплекса тирозината меди с иодидом калия и Ферродексом прирост живой массы поросят к йоменту отъема повышается на 15%.

ПРЕДЛ01г;-1йЕ ПРОИЗВОДСТВУ

, Для усилени • ачтмйнашческой эффективности ферродек-сп^ановых прг.',4ратов рекомендуется применять раствор тирози-ната мэди <1.6 иг/мл) с иэдидои калия (0.Б мг/мл) внутримышечно в доза 1.5 мл на голову.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ:

1. Тен З.В.. Липатова O.A., Денисова О.О.

Профилактика анемии поросят хелат - комплексом меди с тирозином в сочетании с иодилом калия. //Информационный листок Ульяновского Центра научно-технической информации 1991. - N 36-91.. - 3 с.

2. Тен Э.В. .Липатова O.A.. Денисова 0. 0.

Стимуляция роста анемичных поросят хелат- комплексом мели с тирозином в сочетании с йодом. // Информационный листок Ульяновского центра научно-технической информации - 1591, - N 35-91. -3 с.

3. Тен Э. В., Денисова 0. Ф.,Липатова O.A.

Стимуляция роста анемичных поросят тирозинагом меди. //Информационный листок Ульяновского центра научно-технической информации - 1991. - N 37-S1. с.З.

4. Тен Э. В., Денисова 0.Ф.. Липатова O.A.

- Синтез и применение хелат - комплексного препарата ангиа-немической направленности // Тезисы докладов Всесоюзного совеванил.- Боровск. 1991. - с. 72 - 73.

5. Липатова O.A. .Салимов 3. А.. Денисова О.Ф. Использование совместного препарата меди и йоде прочиг. анемии поросят.//Тезисы докладов 4-ой межгосударственной конференции. "Нозые Фярмакологические средства в ветеринарии." - 1992. - с.9