Использование хотынецких цеолитов для коррекции морфофункционального состояния яичников у свиней при хронической интоксикации соединениями свинца

Шуклин, Сергей Иванович

Автореферат диссертации по теме "Использование хотынецких цеолитов для коррекции морфофункционального состояния яичников у свиней при хронической интоксикации соединениями свинца"

ШУКЛИН Сергей Иванович

На правах рукописи

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ХОТЫНЕЦКИХ ЦЕОЛИТОВ ДЛЯ КОРРЕКЦИИ МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНОГО СОСТОЯНИЯ ЯИЧНИКОВ У СВИНЕЙ ПРИ ХРОНИЧЕСКОЙ ИНТОКСИКАЦИИ СОЕДИНЕНИЯМИ СВИНЦА

03.00.13 - физиология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Курск-2006

Работа выполнена на кафедре терапии и акушерства ФГОУ ВПО "Курская государственная сельскохозяйственная академия имени профессора И.И. Иванова"

Научный руководитель: заслуженный ветеринарный врач РФ, доктор биологических наук, профессор Сеин Олег Борисович

Официальные оппоненты: заслуженный деятель науки РФ доктор ветеринарных наук, профессор Белкин Борис Леонидович

доктор биологических наук, профессор Еременко Виктор Иванович

Ведущая организация: ФГОУ ВПО «Белгородская государственная сельскохозяйственная академия»

Защита состоится « /X. » илс^^А_2006 г. в « часов на

заседании диссертационного совета Д 220.040.03 при ФГОУ ВПО "Курская государственная сельскохозяйственная академия имени профессора И.И. Иванова" по адресу: 305021, г. Курск, ул. К. Маркса, 70, КГСХА

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Курской Государственной сельскохозяйственной академии имени профессора И.И. Иванова.

Автореферат разослан « //» ¡.¿¿¿СсХ_2006 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор биологических наук

__Г.Ф.Рыжкова

-И 0 3

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Тяжелые металлы являются основными антропогенными загрязнителями, так как с развитием промышленных объектов и увеличением автотранспорта их техногенное накопление в окружающей среде идет особенно высокими темпами. Особенностью тяжелых металлов является то, что многие из них обладают сродством с физиологически важными органическими соединениями и способны подавлять наиболее значимые процессы метаболизма, задерживать рост и развитие животных, что приводит к снижению продуктивности и качества продукции.

Основная опасность тяжелых металлов для организма животных заключается не столько в проявлении острого отравления, сколько в постоянной их кумуляции. При этом в органах и системах возникают патологические процессы разной тяжести, которые сопровождаются развитием заболеваний и гибелью животных.

Данные о критическом уровне тяжелых металлов, при котором происходят физиологические, морфологические и другие изменения в организме, противоречивы. Обобщать их практически невозможно, поскольку реакция организма на определенную концентрацию какого-либо токсиканта неоднозначна и зависит от возраста, вида, физиологических особенностей животного. Кроме того, одна и та же концентрация элемента способна вызывать необратимые морфологические и другие изменения определенных органов и не влиять на другие системы организма.

В последние годы для выведения из организма различных токсикантов, в том числе и тяжелых металлов, используют природные цеолиты, обладающие сорбционными и ионообменными свойствами.

Цеолиты обладают уникальными физико-химическими свойствами. Они являются эффективными регуляторами водно-солевого режима, дополнительными источниками макро- и микроэлементов. Включение в рацион животных цеолитов приводит к улучшению деятельности пищеварительного тракта, повышению переваримости компонентов кормов, что способствует росту продуктивности, снижению затрат кормов на единицу продукции, повышению ее качества (Г.И. Калачнюк, 1989; Г.В. Кирюткин и др., 1991; М.К. Колосов, 1991; Г.А. Романов, 2000; Б.Л. Белкин, 2003,2004; Т.С. Кирсанова, 2005 и др.).

В нашей стране открыто и разработано много месторождений, где находятся огромные запасы природных цеолитов. Одним из таких месторождений является Хотынецкое, расположенное в Орловской области. Хотынецкие цеолиты наиболее близки по своим агрохимическим и водно-физическим свойствам к природным цеолитам широко известного Шивыртуйского месторождения. Они имеют щелочную реакцию, невысокую концентрацию водорастворимых солей, содержат незначительное количество азота и фосфора и большое количество обменных форм магния, калия и кальция.

Природные цеолиты Хотынецкого месторождения обладают хозяйственными свойствами не только в качестве составной части субстрата в защищенном грунте, они оказались эффективным средством по снижению фитотоксич-ного действия на растения кадмия, свинца и меди.

НОС. НАЦИОНАЛЬНАЯ БИБЛИОТЕКА С.-Петербург ОЭ 200

В настоящее время проводятся широкие производственные испытания хотынецких цеолитов в животноводстве и ветеринарной медицине. Их исполь • зуют как в чистом виде, так и в сочетании с биологически активными добавками для кормления крупного рогатого скота и птицы, при выращивании ремонтных свинок и откорме молодняка свиней (Л.Н. Гамко и др., 2000; Б.Л. Белкин и др., 2002, 2003, 2004; A.A. Гревцев, 2002; А.Н. Дьяконов, 2002, 2004; Т.В. Сма-гина, 2003, 2004, 2005). Однако, несмотря на выполненные работы, требуются дальнейшие исследования по выяснению влияния хотынецких цеолитов на организм сельскохозяйственных животных, в частности их использования в качестве сорбентов при интоксикации организма животных тяжелыми металлами.

Цель и задачи исследований. Учитывая актуальность и научно - практическую значимость указанной проблемы, целью настоящей работы являлось изучение морфологических и функциональных особенностей яичников у свиней крупной белой породы при хронической интоксикации солями свинца и использовании хотынецких природных цеолитов.

Реализация данной цели осуществлялась путем решения следующих задач:

1. Определить общие гематологические показатели и биохимический статус у лабораторных животных после экспериментальной хронической интоксикации соединениями свинца.

2. Изучить гистологическую структуру яичников и других внутренних органов у лабораторных животных после экспериментальной интоксикации соединениями свинца.

3. Установить общие гематологические показатели и биохимический статус у свиней после интоксикации соединениями свинца.

4. Изучить морфофункциональные особенности яичников у ремонтных свинок после интоксикации соединениями свинца.

5. Провести производственные испытания хотынецких цеолитов при выращивании ремонтных свинок.

Научная новизна работы. Впервые на основании комплексных клинических, гистологических и биохимических исследований получены данные о морфофункциональном состоянии яичников у свиней при хронической интоксикации соединениями свинца и после скармливания природных хотынецких цеолитов.

Основные положения, выносимые на защиту:

- общие гематологические, биохимические и морфологические показатели у лабораторных животных при хронической интоксикации соединениями свинца;

- клинические, общие гематологические и биохимические показатели у свиней при хронической интоксикации соединениями свинца и после применения хотынецких цеолитов;

- результаты морфологических исследований яичников и других внутренних органов у свиней при хронической интоксикации соединениями свинца и после применения хотынецких цеолитов;

- результаты научно-производственных опытов по использованию хоты-нецких цеолитов с целью повышения у свиней воспроизводительной функции.

Практическая значимость и реализация результатов исследований.

Экспериментально подтверждено, что включение в рацион ремонтных свинок хотынецких природных цеолитов при хронической интоксикации соединениями свинца повышает элиминацию свинца из организма животных, оказывает нормализующее действие на обмен веществ и морфофункциональное состояние яичников.

Цеолиты внедрены в АО имени Кирова Октябрьского района Курской области.

Апробация работы и публикации. Основные материалы диссертации доложены и обсуждены на:

-международной научной конференции «Естествознание и гуманизм» (Томск, 2005г.);

-всероссийской научно-практической конференции, посвященной 120-летию ветеринарной службы Курской области (Курск, 2005 г.);

-научных конференциях профессорско-преподавательского состава Курской государственной сельскохозяйственной академии (Курск, 2003-2005 гг.)

Публикации результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано 5 работ.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 151 с границах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов исследований, выводов, практических предложений, списка литературы и приложений. Текст иллюстрирован 15 таблицами и 40 рисунками. Список литературы включает 163 источника, в юм числе 81 иностранных авторов.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ *

Работа выполнялась в период 2002-2005 гт. в условиях научно-исследовательской лаборатории кафедры терапии и акушерства, вивария Курской ГСХА и АО имени Кирова Октябрьского района Курской области.

Объектом исследований являлись клинически здоровые и хорошо развитые беспородные морские свинки в возрасте 4-5 месяцев, а также свиньи крупной белой породы. Животных в группы подбирали по принципу аналогов с учетом происхождения, массы тела, возраста и развития. Кормление и содержание опытных и контрольных животных было одинаковым.

Во время исследований постоянно осуществляли контроль за состоянием здоровья животных, наблюдали за приемом и поеданием корма, учитывали их реакцию на различные внешние раздражители.

*- особенности методик отдельных исследований изложены в соответствующих разделах диссертации

Материалом для исследований служили кровь, печень, почки с надпочечниками, щитовидные железы, селезенка, семенники, яичники, гипофизы, которые отбирали по стандартным методикам.

Экспериментальная часть работы состояла из трех этапов.

Первый этап работы был посвящен изучению влияния хронической интоксикации соединениями свинца на организм лабораторных животных. Данный этап работы состоял из двух опытов.

В первом опыте изучали влияние различных доз ацетата свинца на поведенческие реакции и общее состояние морских свинок. С этой целью было отобрано четыре группы морских свинок-аналогов. Животным первой, второй и третьей групп с использованием шприца спаивали воду контаминированную ацетатом свинца в дозах соответственно 5,0, 10,0 и 15,0 мг/100 г массы тела. Морским свинкам четвертой группы ацетат свинца не давали, им спаивали дистиллированную воду в гом же объеме, что и свинкам опытных групп. На 60 сутки опыта у свинок всех групп брали кровь, в которой определяли морфологические и биохимические компоненты.

Во втором опыте изучали антитоксические свойства хотынецких цеолитов при хронической интоксикации морских свинок соединениями свинца. Для этого было отобрано две группы морских свинок-аналогов. Животным первой группы ежедневно в течение 60 суток спаивали индивидуально раствор ацетата свинца в дозе 5,0 мг/100 г массы тела, а также цеолиты в дозе 3% от сухого вещества рациона. Второй (контрольной) группе свинок спаивали только ацетат свинца. При этом ацетат свинца и цеолиты вводили подопытным животным раздельно, после чего скармливали основной рацион. В конце опыта у подопытных животных брали кровь, после чего их убивали и проводили отбор внутренних органов (печени, почек, надпочечников, щитовидной железы и половых желез) для гистологических исследований.

Второй этап работы был посвящен изучению антитоксических свойств хотынецких цеолитов при интоксикации свиней соединениями свинца. С этой целью было отобрано три группы поросят-аналогов 60-суточного возраста крупной белой породы. Условия содержания животных были одинаковыми и соответствовали общепринятым зоотехническим нормам. Кормление свиней было двукратным, групповым. Животные первой группы получали основной рацион с добавлением ацетата свинца в дозе 50 мг/кг массы тела. Поросятам второй группы скармливали ацетаг свинца и цеолиты (3% к сухой массе корма). Третья группа (контрольная) поросят получала только цеолиты. В период проведения опыта у всех подопытных свиней брали кровь на 90 и 120 сутки, затем их убивали и проводили отбор внутренних органов (печени, почек, надпочечников, гипофизов и половых органов).

Третий этап работы был посвящен испытаниям хотынецких цеолитов в производственных условиях.

Полученный материал во время всех опытов (кровь, ткани внутренних органов) подвергался исследованиям с использованием комплекса методов.

Общие гематологические методы. Скорость оседания эритроцитов, ге-матокрит, содержание эритроцитов, лейкоцитов, гемоглобина определяли с

использованием общепринятых методик (Клиническая лабораторная диагностика в ветеринарии. - М., 1985).

Биохимические методы. Содержание общего белка в крови определяли на рефрактометре РЛУ-1. Белковые фракции исследовали методом электрофореза на мембранах «Владипор» МФАС-ОС-1. Сканирование электрофоре-грамм проводили на денситометре при длине волны 540 им.

Содержание общего кальция, неорганического фосфора определяли с использованием наборов «Био-Ла-Тест» фирмы «Лахема». Уровень витаминов А, С и Е в крови устанавливали с применением унифицированных методик (Методические указания по применению унифицированных биохимических методов исследований крови, мочи и молока в ветеринарных лабораториях - М., 1981). Ферментативную активность АлАт и АсАт исследовали кинетическим методом с использованием наборов фирмы «Хуман». Активность в крови щелочной фосфатазы определяли по гидролизу бета-глицерофосфата. Концентрацию эстрадиола 17(3 и прогестерона в плазме крови устанавливали иммуноферментным методом. Содержание свинца в тканях определяли с применением инверсионновольтамперометрического метода в испытательной химико-технологической лаборатории Курского центра стандартизации, метрологии и сертификации.

Гистологические методы. Изготовление гистологических препаратов из отобранных органов проводили по следующей схеме: фиксация материала, обезвоживание в спиртах возрастающей концентрации (50-100°) и ксилоле, заливка в парафин, приготовление и окрашивание срезов (Г.А. Меркулов, 1969; Д.С. Саркисов и др., 1996).

Морфометрические измерения гистологических объектов осуществляли с использованием окуляр-микрометра. При необходимости с гистопрепаратов делали микрофотографии с применением микроскопа МБИ-15 и цифровой видеокамеры.

Гистологические исследования проводили на кафедре гистологии Курского государственного медицинского университета и кафедре терапии и акушерства Курской ГСХА.

Биометрические методы. Полученные в ходе проведения экспериментов данные подвергались биометрической обработке (П.Ф. Рокицкий, 1973) с использованием ПЭВМ.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 3.1. Интерьерные показатели и морфологическая структура внутренних органов у морских свинок при интоксикации соединениями свинца и применении цеолитов

Результаты проведенных экспериментов показали, что длительное скармливание морским свинкам ацетата свинца в дозе 5,0 мг/100 г вызывало у них хроническую интоксикацию, которая сопровождалась определенными интерь-ерными "сдвигами" в организме подопытных животных.

При исследовании крови было установлено, что до 30 суток существенных различий между гематологическими показателями у опытных и контрольных животных нами выявлено не было. На 60 сутки опыта в крови животных опытной группы содержание эритроцитов (4,6±0,21012/л) и гемоглобина (134,5±2,3 г/л) было достоверно (Р<0,05) больше, чем у морских свинок контрольной группы (3,3±0,210 2/л и 112,7±4,3 г/л). Что касается лейкоцитов, то существенных различий (Р>0,05) в их содержании в опыте (9,0±0,1109/л) и контроле (9,2±0,1109/л) не отмечалось.

Рефрактометрическое определение общего бежа в крови морских свинок показало, что на 30 сутки эксперимента его содержание у животных опытной группы было несколько больше (58,0±3,7 г/л), чем в контроле (56,6±4,0 г/л). Однако это увеличение являлось статистически недостоверным (Р>0,05). На 60 сутки эксперимента содержание общего белка в крови свинок опытной группы также было выше (60,5±2,2 г/л) по сравнению с контрольными животными (52,8±2,0 г/л), но в этом случае разница была статистически достоверной (Р<0,05).

Содержание альбуминов в крови морских свинок опытной группы как на 30 сутки (50,7±4,0 %), так и на 60 сутки (60,5±2,2 %) было больше, чем у животных, которым не скармливали цеолиты (48,5+3,7 и 52,8±2,0 %).

Уровень альфа-глобулинов в крови свинок обеих групп на 30 сутки эксперимента был практически одинаковым и находился в пределах 28,2±2,0-28,8±2,6 %. На 60 сутки содержание этой фракции белка у морских свинок опытной группы (24,7±2,0 %) было достоверно (Р<0,05) меньше по сравнению с контролем (31,3± 1Д %).

Содержание бета-глобулинов на 30 сутки эксперимента в крови свинок, получавших ацетат свинца вместе с цеолитами, было меньше (11,0±1,2 %), чем у контрольных животных (14,5±1,5 %). При этом данное увеличение являлось статистически достоверным (Р<0,05). В то же время на 60 сутки существенных различий (Р>0,05) в содержании этой фракции белка у опытных (14,0±1,5 %) и контрольных (14,5±2,0 %) животных нами выявлено не было.

Что касается гамма-глобулинов, то их уровень в крови морских свинок опытной 1руппы как на 30 сутки (9,5±1,4 %), так и на 60 сутки (10,1±1,0 %) был выше по сравнению с контролем (8,8±1,6 % и 7,0±1Д %).

При исследовании ферментативной активности аминотрансфераз крови подопытных животных было выявлено, что на 30 сутки активность АсАт в опыте составляла 0,48±0,09 ммоль/л/ч и в контроле - 0,59±0,06 ммоль/л/ч, а АлАт соответственно - 0,41 ±0,07 и 0,48±0,05 ммоль/л/ч. Однако в обоих случаях различия являлись не достоверными (Р>0,05). На 60 сутки эксперимента ферментативная активность АлАт и АсАт в крови морских свинок, получавших ацетат свинца вместе с цеолитами, была достоверно (Р<0,05) ниже (АлАт-0,46±0,03; АсАт-0,40±0,02 ммоль/л/ч), чем у животных, которым скармливали только один ацетат свинца (АлАт-0,60±0,04; АсАт-0,51±0,03 ммоль/л/ч).

По окончании эксперимента был проведен убой подопытных морских свинок с целью отбора печени, почек с надпочечниками, щитовидной железы, семенников и яичников.

Проведенные гистологические исследования свидетельствуют о том, что у морских свинок контрольной группы, которые получали ацетат свинца без цеолитов, во внутренних органах наблюдались характерные изменения. Так, в печени морских свинок, встречались клеточные нарушения обменных процессов, некробиоз. У некоторых свинок наблюдались единичные круглоклеточные инфильтраты в почечных дольках. В почках встречались дистрофические изменения и зернистая дистрофия в канальцах. В пучковой зоне надпочечников выявлялось большое количество вакуолей разного диаметра. В щитовидной железе секреторные процессы были слабо выражены, фолликулы построены преимущественно из плоского или кубического эпителия, много междольковой и внутридольковой соединительной ткани. В яичниках многих морских свинок обнаруживались фолликулярные кисты. При этом у некоторых животных количество кист в одном яичнике доходило до 5-7. Очень часто встречался распад гранулезы, обнаруживалось много атретических желтых тел в состоянии инволюции. При исследовании семенников самцов морских свинок в их извитых канальцах отмечалась зернистая дистрофия сперматогенного эпителия. В некоторых канальцах обнаруживаался цитолиз сперматид и формирующихся сперматозоидов.

У морских свинок, получавших ацетат свинца с цеолитами, существенных изменений в исследуемых органах выявлено не было, за исключением некоторых индивидуальных случаев.

3.2. Общее состояние подопытных свиней при хронической

интоксикации соединениями свинца и скармливании цеолитов

Для выяснения влияния хронической интоксикации соединениями свинца на организм свиней и определения антитоксичных свойств хотынецких цеолитов, нами были проведены опыты на поросятах крупной белой породы.

Наблюдения за подопытными животными показали, что в период первой половины эксперимента существенных различий в поведенческих реакциях у опытных и контрольных свиней выявлено не было. Животные были активными, хорошо поедали корм. Общие клинические показатели у них находились в пределах физиологических норм.

Однако в последующие сутки эксперимента (50-60 сутки) у поросят первой опытной группы, которые получали ацетат свинца, отмечались характерные изменения в поведении. Так, у некоторых животных наблюдалась повышенная двигательная активность, которая протекала на грани возбуждения и сопровождалась агрессивностью по отношению к другим животным, находившимся в станке. При этом возбуждение проявлялось в виде приступов, после которых животные успокаивались.

Что касается поросят второй и контрольной групп, то они развивались хороню и существенных изменений в их поведении выявлено не было.

Анализ данных, полученных при определении живой массы и ее среднесуточных приростов, свидетельс! вует о том, что у поросят первой группы они были ниже по сравнению с животными второй и третьей групп. При этом, у животных, не получавших ацетат свинца, приросты живой массы были наиболее высокими.

3.3. Гематологические показатели у свиней при интоксикации соединениями свинца и использовании цеолитов

В комплекс наших исследований также входило определение у подопытных животных ряда биохимических компонентов крови.

Содержание эритроцитов у подопытных животных на 90 сутки было практически одинаковым и находилось в границах 6,5±0,7-6,7±0,6-1012/л. На 120 сутки эксперимента количество эритроцитов в крови контрольных животных оставалось прежним (6,7±0,51012/л), а у подопытных свиней снизилось: в первой группе до 5,8±0,6- 1012/л, а во второй - до 6,2±0,5-10|2/л.

Концентрация гемоглобина в крови подопытных свиней на 90 сутки эксперимента была практически равной (92,0±5,7-98,0±6,3 г/л), а в контроле она была выше и составляла 99,5±4,8 г/л, однако эта разница являлась не достоверной (Р>0,05). На 120 сутки содержание гемоглобина у животных первой и второй групп было меньше (89,5±5,6-98,5±6,3 г/л), чем в контроле (104,0±4,2 г/л). При этом минимальный показатель гемоглобина регистрировался у свиней, которые получали только ацетат свинца.

В содержании общего количества лейкоцитов в крови подопытных животных на 90 сутки эксперимента изменений выявлено не было (8,0±0,3-8,3±0,4-109/л). На 120 сутки у свиней первой группы количество лейкоцитов повысилось до 10,2±0,6-109/л, а у животных второй и третьей группы оно было почти одинаковым и соответственно составляло 8,7±0,7 и 8,5±0,8-109/л.

Что касается отдельных форм лейкоцитов, то они у опытных и контрольных животных находились в пределах физиологических норм.

Содержание общего белка в крови опытных и контрольных свиней на 90 сутки эксперимента достоверных различий не имело (Р>0,05) и находилось в пределах 62,5±3,7-69,5±4,8 г/л. На 120 сутки уровень белка в крови свиней первой опытной группы понизился до 60,5±2,8 г/л, а у животных второй и третьей группы он находился почти в тех же границах, что и на 90 сутки эксперимента (69,0±3,0-69,8±2,1 г/л).

Динамика содержания альбуминов в крови подопытных животных была аналогичной изменениям содержания общего белка. На 90 сутки уровень альбуминов в крови свиней первой опытной группы находился на относительно низком уровне (44,0±3,7 %). У животных второй и контрольной групп он был выше (4б,8±2,9 и 47,0±3,б %), однако это увеличение являлось статистически недостоверным (Р>0,05). На 120 сутки существенных изменений в содержании альбуминов в крови подопытных животных выявлено не было. У свиней первой опытной группы их уровень составлял 43,5±3,0 % и 47,4±2,2 %.

Содержание в крови альфа-глобулинов на 90 сутки эксперимента у свиней опытных (17,7±3,4-18,3±2,8%) и контрольной (17,5±2,7) групп было практически одинаковым. Однако на 120 сутки у свиней первой группы отмечалось значительное увеличение (21,0±2,0%) этой фракции белка, а у контрольных животных, наоборот - уменьшение (13,8±2,0%).

Уровень в крови бета-глобулинов на 90 сутки эксперимента у опытных и контрольных свиней имел существенные различия. Так, у животных первой и второй группы содержание бета-глобулинов соответственно составляло 20,1 ±2,0% и 17,7±2,7%, а в контроле - 16,3±1,8%. На 120 сугки в содержании этой фракции белка достоверных различий не наблюдалось. У свиней опытных групп уровень бета-глобулинов находился в пределах 17,6±2,3-18,5±1,7%, а у животных контрольной группы - 17,8±1,8%.

Содержание гамма-глобулинов у свиней контрольной группы было более высоким (19,2±2,0-18,5±1,7%), чем у свиней опытных групп (17,6±2,0-18,5±1,7%). При этом данное увеличение регистрировалось как на 90, так и на 120 сутки эксперимента.

Содержание общего кальция в крови у подопытных свиней, не получавших цеолиты, было достоверно меньше (Р<0,05) по сравнению с животными второй и третьей групп. На 90 сутки эксперимента у свиней первой группы уровень общего кальция в крови составлял 2,60±0,04 ммоль/л, а у животных второй и контрольной групп он был одинаковым и в среднем достигал 2,80 ммоль/л. На 120 сутки содержание общего кальция в крови подопытных свиней соответственно составляло - 2,70±0,04; 3,00±0,05 и 2,98±0,04 ммоль/л.

Динамика содержания неорганического фосфора в крови подопытных животных была аналогичной изменениям содержания общего кальция. У свиней первой опытной группы уровень фосфора на 90 и 120 сутки составлял соответственно 1,33±0,05 и 1,38±0,06 ммоль/л, что было достоверно меньше (Р<0,05), чем у животных второй (1,68±0,04 и 1,65±0,03 ммоль/л) и контрольной (1,60±0,03 и 1,70±0,05 ммоль/л) групп.

При определении общих липидов в крови было установлено, что у свиней первой опытной группы их содержание было меньше по сравнению с животными второй и третьей групп. На 90 сутки эксперимента содержание липидов у свиней, не получавших цеолиты, составляло 3,30±0,04 г/л, а на 120 сутки -3,50±0,04 г/л. У животных второй группы содержание липидов в эти периоды эксперимента достигало 3,55±0,06 и 3,65±0,05 г/л, а у контрольных свиней -3,68±0,04 и 3,80±0,05 г/л.

Исследования показали, что у свиней получавших ацетат свинца, ферментативная активность аминотрансфераз была выше по сравнению с контрольными животными. При этом наиболее существенные различия отмечались в активности АлАт. Так, ферментативная активность этого фермента у свиней первой опытной группы в период эксперимента колебалась в границах 0,65±0,05-0,76±0,09 ммоль/л/ч, у свиней второй опытной группы эти колебания составля-

ли - 0,46±0,07-0,5СШ),08 ммоль/л/ч, а у контрольных животных - 0,37±0,07-0,50±0,08 ммоль/л/ч. Ферментативная активность АсАт также не оставалась постоянной: у свиней, не получавших цеолиты, она была выше (0,53±0,07-0,64±0,05 ммоль/л/ч), чем у животных второй (0,48±0,09-0,52±0,07 ммоль/л/ч) и контрольной (0,40±0,06-0,42±0,06 ммоль/л/ч) групп.

Ферментативная активность щелочной фосфотазы у свинок первой опытной группы была относительно высокой и составляла на 90 сутки опыта -0,60±0,07 млмоль/л/ч, а на 120 сутки 0,70±0,09млмоль/л/ч. У свинок второй опытной группы активность этого фермента была несколько ниже (0,50±0,09 и 0,65±0,11 млмоль/л/ч), по сравнению с первой опытной группой, но выше, чем у свинок контрольной группы (0,46±0,08 и 0,44±0,07 млмоль/л/ч).

При исследовании содержания витаминов А, С и Е в крови подопытных свиней было установлено, что у животных первой опытной группы их содержание было меньше по сравнению с животными второй и третьей групп. Однако выявленная разница во всех случаях была статистически недостоверной (Р>0,05).

3.4. Содержание свинца в тканях свиней после скармливания ацетата свинца и цеолитов

Результаты исследований содержания свинца в организме свиней представлены на рисунке 1, из которого следует, что наиболее высокое содержание этого микроэлемента обнаруживалось в тканях животных первой опытной группы. Так, его уровень выше в крови в 2, в костях 1,4 и мышцах 1,2 раза, чем у контрольных животных. У свиней второй опытной группы содержание свинца в тканях также было больше по сравнению с контролем, однако эта разница являлась статистически недостоверной (Р>0,05).

Сравнительный анализ показал, что наибольшее количество свинца у всех подопытных животных адсорбировалось в костной ткани (0,36±0,03-0,54±0,05 мг/кг), несколько меньше в мышцах (0,28±0,04-0,47±0,03 мг/кг) и крови (0,11±0,04-0,23±0,03 мг/кг).

0,60 & 0,40 2 0,20 0,00

кровь костная ткань мышцы

■ 1 опытная группа; □ 2 опытная группа;

И 3 контрольная группа Рис. 1. Содержание свинца в тканях свиней 120-суточного возраста

ЁМ

3.5. Морфологическая структура внутренпих органов у свинок при хронической интоксикации соединениями свинца и скармливании

цеолитов

Из всех исследуемых иами внутренних органов наиболее существенные изменения были выявлены в морфологической структуре печени. Так, у свинок, первой опытной группы на срезах печени отмечается повсеместная декомпенсация паренхимы органа и изменение тинкториальных свойств гепатоцитов. Дольки теряют балочное строение. Синусоидные капилляры широкие, бескровные. Обнаруживается умеренно выраженный отек и утолщение портальных кровеносных сосудов и разволокнение окружающей их соединительной ткани. Большинство гепатоцитов располагаются изолированно друг от друга, имеют округлую и каплевидную форму. Цитоплазма таких клеток гомогенная, окси-фильная, а в некоторых из них она светлосетчатая, возможно за счет жирового перерождения. В относительно уцелевших балках гепатоциты были, как правило, с признаками стереотипной балочной дегенерации. Многие из них находились в состоянии крупнокапельной жировой инфильтрации. Редко выявлялись двухъядерные клетки. Часто встречались участки паренхимы, характерные для микроочагов некроза с расплавляющимися гепатоцитами. Некоторые из них были в состоянии энуклеации, пикноза и рексиса ядер.

У некоторых свинок второй опытной группы, которые получали ацетат свинца вместе с цеолитами, в тканях печени также наблюдались изменения, которые проявлялись в виде утолщения портальных сосудов и выраженности печеночных балок. В остальном гистологическая структура печени не имела существенных отличий от гистоструктуры печени контрольных свинок.

У свинок первой опытной группы выявлялись определенные изменения и в структуре селезенки. Так, лимфоидная ткань селезенки у животных, подвергавшихся интоксикации, была развита примерно так же, как и у контрольных животных. Однако в клеточном составе белой пульпы выявлялись значительные изменения. Большинство селезеночных телец имеют реактивные центры, среди которых встречаются макрофагальные и митотически активные элементы. Для лимфоидных скоплений вокруг центральных артерий органа характерна диффузность и рыхлость. Зональность слабовыраженных селезеночных телец отсутствовала. На первом плане были ретикулярные клетки и макрофаги. Лишь изредка встречались бластные формы клеток. Красная пульпа, как правило, переполнена кровью.

У свинок второй опытной группы существенных изменений в морфологической структуре селезенки не обнаруживалось, она практически не отличалась от таковой у животных контрольной группы.

При исследовании почек у свиней, получавших только ацетат свинца, отмечалось истончение эндотелия капилляров. Ядерная часть клеток утолщена и часто контактирует с мезанглиальными клетками клубочка. Последние имеют звездчатую форму. Во многих участках почек встречаются дистрофические из-

менения и некробиоз эпителия, канальцев нефрона. В цитоплазме эпителия проксимальных канальцев содержится большое количество включений, просвет канальцев сужен. Во многих канальцах встречается кариолизис, некроз и деск-вамация эпителия.

У свинок, которым скармливали ацетат свинца вместе с цеолитами, изменения в почках встречались лишь в некоторых случаях. В основном гистологическая структура почек была аналогичной гистоструктуре свинок контрольной группы.

При гистологическом исследовании аденогипофиза существенных изменений у опытных и контрольных животных нами выявлено не было, за исключением различий в площади ядер тиреотропоцитов (28,0±1,0 мкм2) и гонадо-тропоцитов (28,8±1,1 мкм2), которая была достоверно меньше по сравнению с контролем (30,5±1,0 мкм2).

3.6. Влияние хронической интоксикации соединениями свинца на состояние репродуктивных органов у подопытных свинок

а) Яичники. Масса яичников, объем и линейные параметры у опытных и контрольных животных достоверных различий не имели (РХ),05). Однако количество фолликулов диаметром более 0,3 см у свинок первой (7,0±0,08) и второй (9,2±0,08) группы было меньше (Р<0,05) по сравнению с контрольными животными (10,5±0,07).

Сравнительный анализ морфометрических данных показал, что у свинок, получавших ацетат свинца, было достоверно (Р<0,05) меньше первичных (39,6±2,4) и зрелых (8,8±1,0) фолликулов, чем у контрольных животных. Толщина внутренней теки зрелых фолликулов у свинок первой группы (20,2±2,3 мкм) также была существенно (Р<0,05) тоньше по сравнению с контролем (29,8±2,5 мкм). Нередко в фолликулах встречалось отторжение и распад грану-лезы, атрофия теки.

Часть полостных фолликулов в яичниках свинок всех групп находились на различной стадии атрезии. Атретические тела имели, как правило, неправильно округлую форму, окрашивались в бледно-фиолетовый цвет, клетки фолликулярного эпителия рассеяны, яйцеклетка не изменена. Однако у свиней первой группы количество атретических тел было (76,5±б,5) достоверно (Р<0,05) больше, чем у контрольных животных (48,7±5,3). Часто встречались фолликулы с десквамацией эпителия, а также яйцеклетки с измененной формой или после разрушения, их остатки в виде розоватых тел неправильной формы располагались в центре фолликула.

У свинок второй опытной группы существенных изменений в яичниках выявлено не было. Количество атретических тел было меньше, чем у свинок, получавших ацетат свинца. Значительно реже встречались измененные фолликулы с десквамацией эпителия. В основном в яичниках преобладали полноценные фолликулы с сохранением всех структурных элементов.

б) Матка Масса извлеченных нами половых органов (без влагалища и широких маточных связок) у свинок всех групп была примерно одинаковой и находилась в пределах 24,9±3,0-28,9±3,5г. Не было выявлено достоверных различий и при определении линейных параметров у опытных и контрольных животных.

В то же время у свинок первой опытной группы количество маточных желез (в поле зрения микроскопа) было достоверно (Р<0,05) меньше, чем у свинок контрольной группы. Что касается других морфометрических показателей, то существенных различий у опытных и контрольных животных нами выявлено не было.

В слизистой оболочке матки свинок первой опытной группы наблюдались характерные изменения, проявляющиеся в виде истончения местами покровного эпителия. В некоторых участках отмечалась частичная железистая гиперплазия эпителия и его отслоение.

В слизистой оболочке матки свинок, получавших ацетат свинца вместе с цеолитом, изменения встречались в единичных случаях, в основном структура слизистой была близкой к таковой у контрольных животных.

3.7. Функциональная активность яичников у свинок при хронической

интоксикации соединениями свинца и скармливании цеолитов

С целью выяснения гормональной активности яичников у подопытных свинок была исследована кровь в 90- и 120-суточном возрасте. В крови определяли содержание эстрадиола-170 и прогестерона с использованием иммуно-ферментного метода.

Результаты иммуноферментного анализа показали, что содержание эст-радиола 17р у подопытных свинок в 90-суточном возрасте существенных различий не имело (Р>0,05) и находилось в пределах 10,7±1,9-11,8±2,0 пмоль/л. В 120 суток уровень эсградиола 17(3 и крови свинок первой опытной группы был меньше (27,8±3,3 пмоль/л), чем в контроле (40,5±4,8 пмоль/л). У свинок второй группы содержание эсградиола 17Р также было меньше (38,8±3,4 пмоль/л), чем у контрольных животных, однако эта разница являлась статистически недостоверной (Р>0,05).

Содержание прогестерона в крови свинок всех групп 90-сугочного возраста находилось на относительно низком уровне (4,3±0,61-5,0±0,42 нмоль/л). У 120-суточных свинок его концентрация в крови возрастала (10,0±1,08-11,6±1,15 нмоль/л). При этом достоверных различий между полученными показателями у опытных и контрольных свинок выявлено не было.

Таким образом, результаты исследований овариальных гормонов свидетельствуют о том, что хроническая интоксикация организма соединениями свинца оказывает отрицательное влияние на эстрогенсинтезирующую функцию яичников.

90 120

возраст, сут.

■ 1 опытная группа; □ 2 опытная группа; ЕЗ 3 контрольная группа

Рис. 2. Содержание эстрадио-ла 17р в крови опытных и контрольных свинок

14,0 -5 12,0

90 120

возраст, сут.

■ 1 опытная группа; □ 2 опытная группа; И 3 контрольная группа

Рис. 3. Содержание прогестерона в крови опытных и контрольных свинок

3.8. Производственные испытания хотынецких природных цеолитов при выращивании ремонтных свинок

Научно-производственные испытания хотынецких цеолитов проводили на ремонтных свинках. С этой целью было отобрано две группы свинок-аналогов крупной белой породы, которым с периода отъема (60 суток) и до проявления первой половой охоты добавляли к основному рациону цеолиты (3% к сухой массе корма). В период проведения опьпа проводили наблюдение за свинками и определяли половую охоту с использованием хряка-пробника.

Результаты исследований представлены в таблице 1. Из таблицы следует, что у свинок, получавших природные цеолиты, половое созревание насгупало в среднем на 18 суток раньше, чем у контрольных животных. При этом продолжительность половой охоты и полового цикла у свинок обеих групп существенных различий не имела. Также отмечено, что за период проведения экспериментов у свинок опытной группы были более высокие среднесуточные приросты массы тела, не наблюдалось заболеваний органов пищеварения, не было падежа.

Расчеты экономической эффективности использования хотынецких природных цеолитов в рационах свиней с учетом прироста живой массы, заболс-

!

ваемости и сохранности, стоимости цеолитов и других затрат показал, что в среднем она составила 88,5 руб. на одну голову и 3,55 руб. на 1 руб. затрат.

Таблица 1

Сроки наступления полового созревания и показатели общего состояния _ремонтных свинок, получавших природные цеолиты_

Показатели Группа

1 (контрольная) п=30 2 (опытная) п=30

Возраст при наступлении полового созревания, сут 194,0±8,9 176,0*5,5

Масса тела при наступлении полового созревания, кг 93,0±5,7 76,5±3,5

Масса тела в 6-месячном возрасте, кг 75,0±1,7 80,5±1,0

Продолжительность половой охоты, ч 18,0±4,0 20,0±3,7

Продолжительность полового цикла, сут 21,0±6,0 18,4±5,8

Заболело, гол. (болезни органов пищеварения) 7 -

Пало за период эксперимента, гол. 2 -

4. ВЫВОДЫ

1. Скармливание морским свинкам ацетата свинца в дозе 5,0 мг/100 г живой массы тела в течение 60 суток приводит к изменению интерьерных показателей и морфологической структуры внутренних органов:

- в крови понижается содержание эритроцитов, гемоглобина, общего белка, альбуминов и повышается ферментативная активность аминотрансфераз (АсАт, АлАт);

- в печени, надпочечниках, почках, щитовидной железе, семенниках и яичниках выявляются морфологические изменения тканей, протекающие с различной интенсивностью и зависящие от индивидуальных особенностей животных.

2. При скармливании морским свинкам ацетата свинца одновременно с хотынецкими природными цеолитами изменения в крови и морфологической структуре внутренних органов носят спарадический характер и зависят в большей степени от индивидуальных особенностей животных.

3. Скармливание ремонгным свинкам ацетата свинца в дозе 50мг/кг живой массы тела в течение 60 суток вызывает хроническую интоксикацию, которая сопровождается понижением в крови содержания эритроцитов, гемоглобина, общего белка, альбуминов, гамма-глобулинов, общих липидов и повышени-

ем ферментативной активности АсАт, АлАт, щелочной фосфатазы, содержания свинца в крови, костной ткани и мышцах.

4. При хронической интоксикации соединениями свинца наиболее существенные изменения выявляются в морфологической структуре печени, где отмечается дискомпенсация паренхимы органа и изменение тинкториальных свойств гепатоцитов, из которых многие находятся в состоянии жировой инфильтрации, встречаются микроочаги некроза с расплавляющимися гепатоци-тами.

5. Интоксикация организма соединениями свинца оказывает отрицательное влияние на морфофункциональное состояние яичников и эндометрия ремонтных свинок:

- по сравнению с контрольными животными у свинок в яичниках достоверно уменьшается количество первичных и созревающих фолликулов, увеличивается число атретических фолликулов, встречаются фолликулы с отторжением и распадом гранулезы, атрофией теки и десквамацией эпителия, в крови понижается содержание эстрадиола -170;

- в слизистой оболочке матки наблюдаются характерные изменения, проявляющиеся в виде истончения и отслоения покровного эпителия, уменьшается количество маточных желез, обнаруживаются участки сужения и закупорки просвета устья желез скоплением инфильтрата.

6. Хотынецкие природные цеолиты обладают антитоксическим действием, при их скармливании ремонтным свинкам одновременно с ацетатом свинца повышается элиминация из организма свинца, общие гематологические и биохимические показатели находятся в пределах физиологических границ, нормализуется морфофункциональное состояние яичников.

7. При включении хотынецких природных цеолитов в рационы ремонтных свинок из расчета 3% к сухой массе рациона, у них повышаются среднесуточные привесы, на 16-18 суток сокращается наступление полового созревания, профилактируются кормовые токсикозы и заболевания органов пищеварения.

5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. В свиноводческих хозяйствах, расположенных в зонах техногенного загрязнения, рекомендуется включать в рационы свиней с 60-суточного возраста хотынецкие природные цеолиты из расчета 3% от сухой массы рациона.

2. Для нормализации физиологических процессов, а также половой функции у ремонтных свинок рекомендуется использовать в качестве добавки к рационам хотынецкие природные цеолиты на протяжении всего периода их выращивания.

3. Данные, полученные при изучении влияния соединений свинца на организм лабораторных животных и свиней, а также сведения о антитоксических свойствах хотынецких природных цеолитов при контаминации животных тяжелыми металлами, могут быть использованы в учебном процессе при преподавании физиологии животных и токсикологии.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Шуклин С.И. Морфологическая картина крови морских свинок при хроническом отравлении свинцом / О.Б. Сеин, С.И. Шуклин, Н.В. Лебедева // Естествознание и гуманизм: Сборник научных работ том 2, № 2. - Томск, 2005.- С. 49.

2. Шуклин С.И. Гематологическая характеристика антидотной эффективности хотынецких цеолитов при хроническом отравлении свинцом / О.Б. Сеин, С.И. Шуклин, Н.В. Лебедева // Естествознание и гуманизм: Сборник научных работ том 2, № 2. - Томск, 2005.- С. 50.

3. Шуклин С.И. Влияние хронической интоксикации свинцом на организм лабораторных животных и антидотная эффективность цеолитов! С.И. Шуклин // Материалы всероссийской научно-практической конференции, посвященной 120-летию ветеринарной службы Курской области. - Курск, 2005.- С. 353-359.

4. Шуклин С.И. Характеристика гематологической структуры у лабораторных животных / О.Б. Сеин, С.И. Шуклин, Н.В. Лебедева // Повышение продуктивных качеств, улучшение профилактики и лечения животных (материалы всероссийской научно-практической конференции, 21-25 марта 2005г.). - Курск: Издательство КГСХА, 2005. - С. 70-72.

5. Шуклин С.И. Влияние различных доз ацетата свинца на лабораторных животных / С.И. Шуклин, Н.В. Лебедева // Современные проблемы ветеринарной медицины и животноводства: Сборник научных трудов. - Курск, 2006.- С. 8688.

Сдано в набор 20.04 2006 г. Подписано в печать 20.04 2006 г. Формат 60x84 1/16. Бумага Айсберг Объем 1,0 усл. печ. л Гарнитура Тайме. Тираж 100 экз. Заказ № 168. Издательство КГСХА им. проф. И.И. Иванова 305021, г Курск, ул. К. Маркса, 70 Отпечатано в множительном центре ВНИИЗиЗПЭ 305021, г. Курск, ул К. Маркса, 70-6

ЦМО

Ш1 1 3 4 О

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Шуклин, Сергей Иванович

Общая характеристика работы

1. Обзор литературы

1.1. Морфофункциональные особенности половых желез у свиней и их нейроэндокринная регуляция

1.2. Нейроэндокринная регуляция половой функции у животных

1.3. Влияние антропогенных загрязнений на организм животных

1.4. Использование природных цеолитов с целью коррекции функционального состояния организма животных

2. Собственные исследования

2.1. Материал и методы исследований

2.2. Результаты исследований

2.2.1. Состояние природной среды города Курска и Курской области

2.2.2. Поведенческие реакции и клинический статус у лабораторных животных, при интоксикации различными дозами ацетата свинца

2.2.3. Интерьерные показатели и морфологическая структура внутренних органов у морских свинок при интоксикации соединениями свинца и использовании цеолитов

2.2.4. Общее состояние подопытных свиней при хронической интоксикации соединениями свинца и скармливании цеолитов

2.2.5. Общие гематологические показатели у подопытных свиней

2.2.6. Биохимические показатели крови у свиней при интоксикации соединениями свинца и использовании цеолитов

2.2.7. Содержание свинца в тканях свиней после скармливания ацетата свинца и цеолитов

2.2.8. Морфологическая структура внутренних органов у свинок при хронической интоксикации соединениями свинца и скармливании цеолитов

2.2.9. Влияние хронической интоксикации соединениями свинца на состояние репродуктивных органов у подопытных свинок

2.2.10. Функциональная активность яичников у свинок при хронической интоксикации соединениями свинца и скармливании цеолитов

2.2.11. Производственные испытания хотынецких природных цеолитов при выращивании ремонтных свинок

3. Обсуждение результатов исследований

Выводы

Практические предложения

Введение Диссертация по биологии, на тему "Использование хотынецких цеолитов для коррекции морфофункционального состояния яичников у свиней при хронической интоксикации соединениями свинца"

Актуальность темы. Тяжелые металлы являются основными антропогенными загрязнителями, так как с развитием промышленных объектов и увеличением автотранспорта их техногенное накопление в окружающей среде идет особенно высокими темпами. Особенностью тяжелых металлов является то, что многие из них обладают сродством с физиологически важными органическими соединениями и способны подавлять наиболее значимые процессы метаболизма, задерживать рост и развитие животных, что приводит к снижению продуктивности и качества продукции.

Основная опасность тяжелых металлов для организма животных заключается не столько в проявлении острого отравления, сколько в постоянной их кумуляции. При этом в органах и системах возникают патологические процессы разной тяжести, которые сопровождаются развитием заболеваний и гибелью животных.

Данные о критическом уровне тяжелых металлов, при котором происходят физиологические, морфологические и другие изменения в организме, противоречивы. Обобщать их практически невозможно, поскольку реакция организма на определенную концентрацию какого-либо токсиканта неоднозначна и зависит от возраста, вида, физиологических особенностей животного. Кроме того, одна и та же концентрация элемента способна вызывать необратимые морфологические и другие изменения определенных органов и не влиять на другие системы организма.

В последние годы для выведения из организма различных токсикантов, в том числе и тяжелых металлов, используют природные цеолиты, обладающие сорбционными и ионообменными свойствами.

Цеолиты обладают уникальными физико-химическими свойствами. Они являются эффективными регуляторами водно-солевого режима, дополнительными источниками макро- и микроэлементов. Включение в рацион животных цеолитов приводит к улучшению деятельности пищеварительного тракта, повышению переваримости компонентов кормов, что способствует росту продуктивности, снижению затрат кормов на единицу продукции, повышению ее качества (Г.И. Калачнюк, 1989; Г.В. Кирюткин и др., 1991; М.К. Колосов, 1991; Г.А. Романов, 2000; Б.Л. Белкин, 2003, 2004; Т.С. Кирсанова, 2005 и др.).

В нашей стране открыто и разработано много месторождений, где находятся огромные запасы природных цеолитов. Одним из таких месторождений является Хотынецкое, расположенное в Орловской области. Хотынецкие цеолиты наиболее близки по своим агрохимическим и водно-физическим свойствам к природным цеолитам широко известного Шивыртуйского месторождения. Они имеют щелочную реакцию, невысокую концентрацию водорастворимых солей, содержат незначительное количество азота и фосфора и большое количество обменных форм магния, калия и кальция.

Природные цеолиты Хотынецкого месторождения обладают хозяйственными свойствами не только в качестве составной части субстрата в защищенном грунте, они оказались эффективным средством по снижению фи-тотоксичного действия на растения кадмия, свинца и меди.

В настоящее время проводятся широкие производственные испытания хотынецких цеолитов в животноводстве и ветеринарной медицине. Их используют как в чистом виде, так и в сочетании с биологически активными добавками для кормления крупного рогатого скота и птицы, при выращивании ремонтных свиноматок и откорме молодняка свиней (JI.H. Гамко и др., 2000; Б.Л. Белкин и др., 2002, 2003, 2004; A.A. Гревцев, 2002; А.Н. Дьяконов, 2002, 2004; Т.В. Смагина, 2003, 2004, 2005). Несмотря на выполненные работы, требуются дальнейшие исследования по выяснению влияния хотынецких цеолитов на организм сельскохозяйственных животных, в частности их использования в качестве сорбентов при интоксикации организма животных тяжелыми металлами.

Цель и задачи исследований. Учитывая актуальность и научно - практическую значимость указанной проблемы, целью настоящей работы являлось изучение морфологических и функциональных особенностей яичников у свиней крупной белой породы при хронической интоксикации солями свинца и использовании хотынецких природных цеолитов.

Реализация данной цели осуществлялась путем решения следующих задач:

1. Определить общие гематологические показатели и биохимический статус у лабораторных животных после экспериментальной хронической интоксикации соединениями свинца.

2. Изучить гистологическую структуру яичников и других внутренних органов у лабораторных животных после экспериментального отравления соединениями свинца.

3. Установить общие гематологические показатели и биохимический статус у свиней после экспериментальной интоксикации соединениями свинца.

4. Изучить морфофункциональные особенности яичников у ремонтных свинок после экспериментальной интоксикации соединениями свинца.

5. Провести производственные испытания хотынецких цеолитов при выращивании ремонтных свинок.

Научная новизна работы. Впервые на основании комплексных клинических, гистологических и биохимических исследований получены данные о морфофункциональном состоянии яичников у свиней при хронической интоксикации соединениями свинца и после скармливания природных хотынецких цеолитов.

Основные положения, выносимые на защиту:

- общие гематологические, биохимические и морфологические показатели у лабораторных животных при хронической интоксикации соединениями свинца;

- клинические, общие гематологические и биохимические показатели у свиней при хронической интоксикации соединениями свинца и после применения хотынецких цеолитов;

- результаты морфологических исследований яичников и других внутренних органов у свиней при хронической интоксикации и после применения хотынецких цеолитов;

- результаты научно-производственных опытов по использованию хотынецких цеолитов с целью повышения у свиней воспроизводительной функции.

Практическая значимость и реализация результатов исследований.

Экспериментально подтверждено, что включение в рацион ремонтных свинок хотынецких природных цеолитов при хронической интоксикации соединениями свинца повышает элиминацию свинца из организма животных, оказывает нормализующее действие на обмен веществ и морфофункцио-нальное состояние яичников.

Цеолиты внедрены в АО имени Кирова и АО имени Тельмана Октябрьского района Курской области.

Апробация работы и публикации. Основные материалы диссертации доложены и обсуждены на:

-международной научной конференции "Естествознание и гуманизм" (Томск, 2005г.);

-всероссийской научно-практической конференции, посвященной 120-летию ветеринарной службы Курской области (Курск, 2005г.);

-научно-практических конференциях профессорско-преподавательского состава Курской государственной сельскохозяйственной академии (Курск, 2003-2005 гг.)

Публикации результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано 5 работ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Шуклин, Сергей Иванович

126 Выводы

1. Скармливание морским свинкам ацетата свинца в дозе 5,0 мг/100 г живой массы тела в течение 60 суток приводит к изменению интерьерных показателей и морфологической структуры внутренних органов:

- в крови понижается содержание эритроцитов, гемоглобина, общего белка, альбуминов и повышается ферментативная активность аминотрансфе-раз (АсАт, АлАт);

- в печени, надпочечниках, почках, щитовидной железе, семенниках и яичниках выявляются морфологические изменения тканей, протекающие с различной интенсивностью и зависящие от индивидуальных особенностей животных.

2. При скармливании морским свинкам ацетата свинца одновременно с хотынецкими природными цеолитами изменения в крови и морфологической структуре внутренних органов носят спарадический характер и зависят в большей степени от индивидуальных особенностей животных.

3. Скармливание ремонтным свинкам ацетата свинца в дозе 50мг/кг живой массы тела в течение 60 суток вызывает хроническую интоксикацию, которая сопровождается понижением в крови содержания эритроцитов, гемоглобина, общего белка, альбуминов, гамма-глобулинов, общих липидов и повышением ферментативной активности АсАт, АлАт, щелочной фосфатазы, содержания свинца в крови, костной ткани и мышцах.

4. При хронической интоксикации соединениями свинца наиболее существенные изменения выявляются в морфологической структуре печени, где отмечается дискомпенсация паренхимы органа и изменение тинктори-альных свойств гепатоцитов, из которых многие находятся в состоянии жировой инфильтрации, встречаются микроочаги некроза с расплавляющимися гепатоцитами.

5. Интоксикация организма соединениями свинца оказывает отрицательное влияние на морфофункцианальное состояние яичников и эндометрия ремонтных свинок:

- по сравнению с контрольными животными у свинок в яичниках достоверно уменьшается количество первичных и созревающих фолликулов, увеличивается число атретических фолликулов, встречаются фолликулы с отторжением и распадом гранулезы, атрофией теки и десквамацией эпителия, в крови понижается содержание эстрадиола - 17Р;

- в слизистой оболочке матки наблюдаются характерные изменения, проявляющиеся в виде истончения и отслоения покровного эпителия, уменьшается количество маточных желез, обнаруживаются участки сужения и закупорки просвета устья желез скоплением инфильтрата.

6. Хотынецкие природные цеолиты обладают антитоксическим действием, при их скармливании ремонтным свинкам одновременно с ацетатом свинца повышается элиминация из организма свинца, общие гематологические и биохимические показатели находятся в пределах физиологических границ, нормализуется морфофункциональное состояние яичников.

7. При включении хотынецких природных цеолитов в рационы ремонтных свинок из расчета 3% к сухой массе рациона, у них повышаются среднесуточные привесы, на 16-18 суток сокращается наступление полового созревания, профилактируются кормовые токсикозы и заболевания органов пищеварения.

Практические предложения

1. В свиноводческих хозяйствах, расположенных в зонах техногенного загрязнения, рекомендуется включать в рационы свиней с 60-суточного возраста хотынецкие природные цеолиты из расчета 3% от сухой массы корма.

2. Для нормализации физиологических процессов, а также половой функции у ремонтных свинок рекомендуется использовать в качестве добавки к рационам хотынецкие природные цеолиты на протяжении всего периода их выращивания.

3. Данные, полученные при изучении влияния соединений свинца на организм лабораторных животных и свиней, а также сведения о антитоксических свойствах хотынецких природных цеолитов при контаминации животных тяжелыми металлами, могут быть использованы в учебном процессе при преподавании физиологии животных и токсикологии.

129

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Шуклин, Сергей Иванович, Курск

1. Адамская Е.И. Роль норадреналина в секреции лютеинизирующего гормона / Е.И. Адамская, В.Н. Бабичев // Бюллетень экспериментальной биологии. 1981. -№ 6. - С. 730-733.

2. Алешин Б.В. Гистофизиология гипоталамо-гипофизарной системы / Б.В. Алешин. М.: Медицина, 1971. - 440 с.

3. Алешин Б.В. Регуляция гипофизарных функций. Гипоталамо-гипофизарный комплекс / Б.В. Алешин // Руководство по эндокринологии.-М., 1973.-С. 27-31.

4. Арушанян Э.Б. Модуляторные свойства эпифизарного мелатонина / Э.Б. Арушанян, Л.Г. Арушанян // Проблемы эндокринологии. 1991. - Т. 37. -С. 65-68.

5. Бабичев В.Н. Нейрогормональная регуляция овариального цикла / В.Н. Бабичев. М.: Медицина, 1984. - 278 с.

6. Бабичев В.Н. Нейроэндокринный контроль процессов пубертации у человека и приматов / В.Н. Бабичев // Проблемы эндокринологии. 1994. -Т. 40.-С. 51-56.

7. Бабичев B.Ii. Нейроэндокринология пола / В.Н. Бабичев. М.: Наука, 1981.-224 с.

8. Бабичев В.Н. Состояние и перспективы нейроэндокринных исследований в физиологии репродуктивной системы / В.Н. Бабичев // Проблемы эндокринологии. 1992. - Т. 38. - № 6. - С. 6-12.

9. Балакирев H.A. Природные адсорбенты в рационах пушных зверей / H.A. Балакирев, B.C. Снытко // Зоотехния. 1995. - № 2. - С. 22-23.

10. Баранов В.Г. Значение катехоламинов и серотонина в регуляции циклической и топической секреции гонадотропных гормонов / В.Г. Баранов, A.JI. Поленов, М.В. Пропп и др. // Физиол. журнал СССР. 1976. - № 9. -С. 1378-1385.

11. Баранов В.Г. ЛГ-рилизинг активность различных отделов гипоталамуса у крыс по стадиям эстрального цикла и после овариэктомии / В.Г. Баранов, А.Л. Поленов, М.В. Пропп и др. // Физиол. журнал СССР. 1971. -№11.-С. 1626-1630.

12. Бауман В.К. Всасывание двухвалентных катионов / В.К. Бауман // Физиология всасывания. Л.: Наука, 1977. - С. 191-201.

13. Борисов И.II. Филогенетические основы тканевой организации животных / И.Н. Борисов, П.В. Дунаев, А.Н. Бажанов. Новосибирск: Наука, 1986.-237 с.

14. Венедиктов A.M. Кормовые добавки: Справочник / A.M. Венедиктов. -М.: Агропромиздат, 1992. 192 с.

15. Вишняков С. I I. Микроэлементы в животноводстве / С.И. Вишняков. -Воронеж, 1971.-81 с.

16. Вишняков С.И. Обмен макроэлементов у сельскохозяйственных животных / С.И. Вишняков. М.: Колос, 1968. - 255 с.

17. Вяйзенен Т.Н. Ускорение выведения тяжелых металлов из организма коров / Т.Н. Вяйзенен, В.А. Савин, A.A. Стручков // Зоотехния. 1995. - № 9.-С. 9-13.

18. Горбунов А. Природные цеолиты / А. Горбунов // Животноводство России. 2003.-№ 2. - С. 21.

19. Грабовенский И.И. Цеолиты и бентониты в животноводстве / И.И. Гра-бовенский, Г.И. Калачнюк. Ужгород, 1984. - 187 с.

20. Дистанов У.Г. Природные сорбенты и охрана окружающей среды / У.Г. Дистанов, Т.П. Конюхова // Химизация сельского хозяйства. 1996. - № 9.

21. Дыбан А.П. Раннее развитие млекопитающихся / А.П. Дыбан. JL: Наука, 1988.-228 с.

22. Ершов Ю.А. Механизмы токсического действия неорганических соединений Ю.Л. Ершов, Т.В. Плетнева М.: Медицина, 1989. - 272 с.

23. Западнюк В.И. Лабораторные животные / В.И. Западнюк. Киев, 1974.

24. Иванов А.Е. Применение цеолитов для профилактики расстройства пищеварения у новорожденных телят / А.Е. Иванов // Ветеринария. 2000. - № 4. - С. 45-46.

25. Иванов Г.И. Результаты испытания цеолитсодержащего трепела на поросятах / Г.И. Иванов, Т.Е. Григорьева // Ветеринария. 1997. - №2.

26. Исаченков В.П. Эпифиз и гонадотпропная функция гипофиза / В.П. Иса-ченков, Ю.М. Селезнева, Г.В. Живодерова и др. // Актуальные проблемы физиологии, биохимии и патологии эндокринной системы. М., 1972. -С. 35-39.

27. Кальницкий Б.Д. Минеральные вещества в кормлении животных / Б.Д. Кальницкий. Л.: Агропромиздат, 1985. - 207 с.

28. Каминский Б.М. О релаксине гормоне беременности / Б.М. Каминский // Акушерство и гинекология. - 1963. - № 6. - С. 74-76.

29. Карш Ф.Д. Гипоталамус и передняя доля гипофиза / Ф.Д Карш. // Гормональная регуляция размножения у млекопитающих. М., 1987. - С. 8-32.

30. Кирсанова Т.С. Изучение антиоксидантных качеств глауконита / Ю.Г. Камскова, Т.С. Кирсанова, В.И. Павлова // Материалы научно-практической конференции ЧГПУ по дистанционному образованию. -Челябинск, 2005. С. 39-40.

31. Клиценко Г.Т. Минеральное питание сельскохозяйственных животных / Г.Т. Клиценко. Киев, Урожай, 1980. - 167 с.

32. Кожухарь В.Г. Дифференцировка целомического эпителия зачатков гонад млекопитающих и птиц / В.Г. Кожухарь // Арх. анатомии, гистологии и эмбриологии. 1979. - Т. 76, вып. 1. - С. 69-80.

33. Кокорев В.А Биологическое обоснование потребности молодняка свиней в цинке в разные возрастные периоды / В.А. Кокорев, A.M. Гурьянов,

34. И.А. Тихомиров // С.-х. биология. 1991. - № 4. - С. 80-87.

35. Кокорев В.А Кремнийсодержащие добавки в рационах свиней / В.А. Кокорев, A.C. Федин, Н.Ф. Буянкин // Зоотехния. 1994. - № 10. - С. 19-21.

36. Кокорев В.А. Биологическое обоснование потребности супоросных свиноматок в макроэлементах / В.А. Кокорев. Саранск. 1990. - 171 с.

37. Кокорев В.А. Обмен микроэлементов и потребность в них у супоросных свиноматок / В.А. Кокорев: Дисс. д-ра с.-х. наук. Саранск, 1984. - 390 с.

38. Кочан Т.Н. Влияние цеолитсодержащей подкормки на углеводный обмен у овец / Т.Н. Кочан // Научн. доклад РАН.- УрО Коми научн. центр, 1993. № 323.-С. 1-11.

39. Крохина В.А. Цеолиты в комбикормах для поросят / В.А. Крохина, П.А. Михайлов, В.В. Антошин // Зоотехния. 1997. - №5. - С. 11-13.

40. Кузнецов С.Г. Изучение минерального обмена у сельскохозяйственных животных: Метод, указания / С.Г. Кузнецов, Б.Д. Калышцкий. Боровск. ВНИИФБиП, 1993. - 83 с.

41. Кураков Л.П. Изучение и использование кремнистых пород Чувашии / Сб. ст. / Чуваш, гос. ун-т; Ред. Кураков Л.П.; Чебоксары: Изд-во Чуваш, ун-та, 1998. 100 с.

42. Матюшевский JI.A. Влияние бентонита на продуктивность и физиологический статус организма поросят / JI.A. Матюшевский, Е.Т. Молчанова. -Краснодар, 1996.

43. Минеев В.Г. Химизация земледелия и природная среда / В.Г. Минеев. -М.: Агропромиздат, 1990. 287 с.

44. Николаев В.Н. Биологические проблемы воздействия природных цеолитов на сельскохозяйственных животных / В.Н. Николаев // Использование цеолитов Сибири и Дальнего Востока в сельском хозяйстве. Новосибирск: СО ВАСХНИЛ, 1991. - С. 8-15.

45. Носенко Н. Премиксы на основе цеолитов для откармливаемого молодняка / Н. Носенко, С. Подъяблонский // Свиноводство. 1996. - №5. - С. 4-5.

46. Носенко Н. Цеолиты в кормлении хряков-производителей / Н.Носенко // Свиноводство. 1998. - №3.

47. Петрухин И.В. Корма и кормовые добавки: Справочник / И.В. Петрухин. М.: Росагропромиздат, 1989. - 526 с.

48. Плехова Е.И. Новые данные об участии серотонина в моноаминоэргиче-ском контроле гонадотропных функций гипофиза / Е.И. Плехова // Материалы 1 Всесоюзной конференции по нейроэндокринологии. Л.: 1974. - С. 122-123.

49. Серебров В.Ю. Эндокринная функция тимуса / В.Ю. Серебров, С.Л. Стуканов. Томск: Изд-во Томского университета, 1993. - С. 77-78.

50. Смагина Т.В. Коррекция иммунного статуса свиней цеолитами и прополисом / Т.В. Смагина // Актуальные проблемы ветеринарной медицины и биологии: материалы международной научно-практической конференции. Оренбург, 2003. - С. 141-142.

51. Таланов Г.А. Санитария кормов: Справочник / Г.А. Таланов, Б.Н. Хме-левский. М.: Агропромиздат, 1991. - 303 с.

52. Тимофеев Б.А. Токсичность и безопасность цеолитов / Б.А. Тимофеев, Г.В. Кирюткин // Вестн. Рос. акад. с.-х. наук. 2000 - № 2. - С. 66-68.

53. Ткачев Е.З. Пищеварительные и обменные функции желудочно-кишечного тракта подсвинков при введении в комбикорм природного цеолита / Е.З. Ткачев, В.В. Устин // Доклады ВАСХНИЛ. 1985. - № 3. -С. 33-35.

54. Ткачев Е.З. Физиология питания свиней / Е.З. Ткачев. М.: Колос, 1981.240 с.

55. Уайт А. Основы биохимии / А.Уайт. Т. 3. - М.: Мир, 1981. - 726 с.

56. Удрис Г.А. Биологическая роль меди / Г.А. Удрис, Я.А. Нейланд. Рига. 1990. - 188 с.

57. Фелленберг Г. Загрязнение природной среды / Г. Фелленберг. М.: Мир, 1997.-232 с.

58. Хантер Р.Х.Ф. Физиология и технология воспроизводства домашних животных / Р.Х.Ф. Хантер. М.: Колос, 1984. - 319 с.

59. Хмельницкий Г.А. Ветеринарная токсикология / Г.А. Хмельницкий, В.Н. Локтионов, Д.Д. Полоз. М.: Агропромиздат, 1987. - 319 с.

60. Штоль И.Р. Влияние цеолита на супоросных свиноматок / И.Р. Штоль, А.Д. Гамалеев, И.Ф. Радчук и др. // Пробл. вет. Примор. края / Примор. гос. с.-х. акад. Уссурийск, 1996. - С. 74-75.

61. Эйхлер В. Яды в нашей пище / В. Эйхлер. М.: Мир, 1993. - 189 с.

62. Юданова JI.A. Пестициды в окружающей среде / JI.A. Юданова Новосибирск, 1989. - 141 с.

63. Amoss M.S. Purification, amino acid composition and N-terminus of the hypothalamic luteinizing hormone releasing factor (LRF) of ovine origin /M.S. Amoss, R. Burgus, W. Vale // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1971. - V. 44.-P. 205-210.

64. Arai Y. Inhibition of ovarian compensatory hypertropy by hypothalamic implantation of gonadotropin in androgen-steririlized rats. Evidence for internal feedback / Y. Arai, R.A. Gorski // Endocrinology. 1968. - V. 82. - P. 871873.

65. Baird D.T. Relationship between the secretion of the corpus luteum and the length of the follicular phase of the ovarian cycle / D.T. Baird, T.G. Baker, K.P. McNatty et al.// J. Reprod. Fertil. 1975. - V. 45. - P. 611-619.

66. Balasch J. Los nuevos conceptos sobre el ciclo ovarico / J. Balasch, J.A. Van-rell // Clin, e invest, ginecol. у obstef. 1992. - № 10. - P. 429-438.

67. Barraclough C.A. Inhibition of the release of pituitary ovulation hormones in the rat by morphine / C.A. Barraclough, C.H. Sawyer // Endocrinology.1955.-V. 57.-P. 329-337.

68. Bhanot R. Opiatergic control of gonadotropin secretion during puberty in the rat: a neurochemical basis for the hypothalamic gonadostat / R. Bhanot, M. Wilkinson // Endocrin. 1983. - V. 113. - № 2. - P. 596-603.

69. Bogdanow E.M. Direct gonad-pituitary feedback: an analysis of effect of intracranial estrogenic depots on gonadotropin secretion / E.M. Bogdanow // Endocrinology. 1963. - V. 73. - P. 696-701.

70. Bourdel G. Effect of rabbit antiserum to sheep pituitary interstitial cell stimulating hormone in adult female rats / G. Bourdel, H. Li Ch // Acta endocrinol. 1963. - V. 42.-P. 473-479.

71. Braselton W.E. Purification and propreties of follicle stimulating and luteinizing hormones from horse pituitary glands / W.E. Braselton, W.H. McShan // Arch. Biochem. Biophys. 1970. - V. 139. - P. 45-53.

72. Burgus R. Primary structure of the ovine hypothalamic luteinizing hormone releasing factor (LRF) / R. Burgus, M. Butcher, M. Amoss et al. // Proc. Nat. Acad. Sci./Washington. 1972. - V. 69. - P.278-282.

73. Byskov A. Differentiation of mammalian embryonic gonad / A. Byskov // Physiol. Rev. 1986. Vol. 66. № 1. P. 71-117.

74. BysKov A. Regulation of meiosis in mammals / A. Byskov // Ann. Biol. Anim. Biochem. Biophys. 1979. V. 19. №4. P. 151-1261.

75. Catchpole H.R. Physiology of the gonadotropic hormones. / In: Gonadotropins, their chemical and biological propeties and secretory control. / Eds. H.H. Cole, W.H. Freeman a. Company. San Fransisco; London. - 1964. - P. 4081.

76. Chen C.L. Effects of transplanted pituitary tumors on host pituitary prolactin secretion / C.L. Chen, H. Minaguchi, J. Meites // Proc. Soc. Expr. Biol, and Medicine. 1967. - V. 126. - P. 317-320.

77. Convey E.M. Physiology of the estrous cycle / E.M. Convey // J. Anim. Sei. -1983. V. 57. - N 2. - P. 404-424.

78. Coy D.H. A peptide inhibitor of luteinizing hormone (LH-RH) / D.H. Coy, J.A. Vilchez-Martinez, E.J. Coy et al. // J. Clin. Endocrinol. Metabol. 1973. -V. 37.-P. 331-333.

79. David A.M. Control of LH secretion: role of a "schort" feedback mechanism / A.M. David, F. Fraschini, L. Martini // Endocrinology. 1966. - V. 78. - P.55-60.

80. Dobrzanski Z. Kopalne surowce ilaste zrodlem biopierwiastkow dla zwierzat gospodarskich / Z. Dobrzanski, H. Gorecka, R. Kolacz et al // Folia Univ. Agr. Stetin. Zootechn. 2001. - № 42. - P. 39-46.

81. Ellendorff H.E. Endocrinologie des Sexualzuklus der Sau / H.E. Ellendorff, O. Shmidt // Tierarztl. Umsch. 1984. - V. 39. - N 6. - P. 429-432.

82. Evans A. Characteristic of ovarian follicle development in domestic animals / A. Evans // Reprod. Dornest. Anim. 2003. - V. 38. - N 4. - P.240-246.

83. Evans E.D. Development of the circadian rhythm of cjrtisol in the gift from weaning until puberty / E.D. Evans, R.I. Christopherson, F.X. Aherne // Ca-nad. J.Anim.Sc. 1988. - V. 68. - N 4. - P. 1105-1 111.

84. Fischel A. Uber die Entwicklung der Keimdrüsen des Menschen / A. Fischel // Ztschr. Anat. Entwickl. 1930. - V. 92. S. 34-72.

85. Flerko B. The LHRH neuron system of the rat and rabbit and a new insight into the hypophysiotrophic area of the hypothalamus / B. Flerko // Folia endo-crinol. jap. 1981. - V. 57. - P. 292-297.

86. Fortune J.E. Bovine theca and granulosa cells interact to promote androgen production / J.E. Fortune // Biol. Reprod. 1986. - V. 35. - P. 292-299.

87. Glesemann M.A. Effect of exogenoys thyroxine on the interval from weaning to estrus of the primiparous sow / M.A. Glesemann, E.R. Peo, A.I. Lewis et al. // J. Anim. Sc. 1989. - V. 67. - N 1. - P. 157-167.

88. Guillemin R. The expanding significance of hypothalamic peptides or is endocrinology a branch of neuroendocrinology / R. Guillemin // Res. Prog. Horm. Res. 1977. - V. 33. - P. 1-20.

89. Harris G. W. Neural control of the pituitari gland / G. W. Harris // London Arnold. 1955. - 164 p.

90. Harris G.W. Neural control of the pituitari gland / G.W. Harris // London Arnold. 1961. - 164 p.

91. Kanematsu S. Effects of hypothalamic and hypophysial estrogen implants on pituitary gonadotrophic cells in ovariectomized rabbits / S. Kanematsu, C.H. Sawyer // Endocrinology. 1963. - V. 73. - P. 687-695.

92. Kawakami M. Data on the sites of stimulatory feedback action of gonadal steroids indispensable for luteinizing hormone release in the rat / M. Kawa-kami, E. Yoshioka, N. Konda et al. // Endocrinology. 1978. - V. 102. - P. 791-798.

93. Keck G. Las «substances déchets» dans 1' environnement: Impacts sur les animaux et les chaines alimentaires / G. Keck // Rev. med. vef. (Fr.). 1991. -142.-№7.-P. 553-556.

94. Kirchgebner M. Trace element metabolism in animals/ M. Kirchgebner, E. Grassmann. Edinburg: London. - 1970. - P. 277.

95. Knobil E. On the control of gonadotropin secretion in the rhesus monkey / E. Knobil //Rec.Prog.Horm.Res. 1974. - V. 30. - P. 1-46.

96. Korenekova B. Concentration of some heavy metals in cattle reared in the vicinity of a metallurgic industry / B. Korenekova, M. Skaliska, P. Nad // Vet. arh. 2002. - 72, № 5. - P. 259-267.

97. Kotwicza J., Rekawiecki R., Duras M. Stimulatory influence of progesterone on its own syntesis in bovine Corpus luteum / J. Kotwicza, R. Rekawiecki, M. Duras // Bull. Vet. Inst. Pulawy. 2004. - V. 48. - N2. - P. 139-145.

98. Kruip Th. A.M. Steroid hormone concentrations in the fluid of bovine follicles relative to size, quality and stage of the oestrus cycle / Th. A.M. Kruip, S.J. Dieleman // Theriogenology. 1985. - V. 24. - N 4. - P. 395-408.

99. Lackova D. Morfologicka analyza smien endometria v pohlavnom cykle pras-niciek / D. Lackova, P. Slastny // Zivoc. vyroba. 1987. - V. 32. - N 9. - P. 811-822.

100. Lawton Y.E. Timing of gonadotropin and ovarian steroid secretion at diestrus in the rat / Y.E. Lawton, C.H. Sawyer // Endocrinology. 1968. - V. 82. - P. 831-836.

101. Li C.H. Studies in pituitary lactogenic hormone. XYI Molekular weight of the ovine hormone / C.H. Li, D. Cole, M. Coval // J. Biol. Chem. 1957. - V. 229. -P. 153-156.

102. Li P.S. Catecholamine inhibition of luteinizing hormone secretion in isolated pig pituitary cells / P.S. Li // Biol. Reprod. 1989. - V. 40. - N 5. - P. 914-919.

103. Li P.S., Wagner W.C. In vivo and in vitro studies on the adrenocorticotropic hormone or Cortisol on the pituitary response to gonadotropin releasing hormone / P.S. Li // Biol. Reprod. 1983. - V. 29. - N 1. - P. 25-37.

104. Lindner H. R. Intraovarian factors in ovulation: Determinats of follicular response to gonadotrophins / H. R. Lindner, A. Amsterdam, Y. Salomon et al. // J. Reprod.Fert. 1977. - V. 51. - P. 215-235.

105. Liptrap D.O. Sex influence on the zinc requarement of developing swine /

106. O.D. Liptrap // J. Anim. Sei. 1970. - 30. - P. 736.

107. Maghin-Rogister O. Luteinizing hormone. The primary structure of the subunit from bovine and porcine picies / O. Maghin-Rogister, G. Hennen // Eur. Biochem. 1973. - V. 39. - P. 235-253.

108. Massanyi P. Concentration of cadmium, lead, nickel, copper and zinc in various muscles of sheep / P. Massanyi, P. Nad, R. Toman et al // Bodenkultur. -2001. 52, №3.-P. 255-258.

109. Matsuo H. Structure of the porcine LH- and FSH-releasing hormone. 1. The proposed amino acid sequence / H. Matsuo, Y. Baba, R. Nair et al. // Biochem. Biophys. Res. Commun. -1971. V. 43. - P. 1334-1339.

110. McCann S.M. Control of anterior pituitary hormone release by brain peptides / S.M. McCann // Neuroendocrinology. 1980. - V. 31. - P. 353-363.

111. McNatty K.P. Relationship between the endocrine environment within the Graafian follicle and the subsequent rate of progesterone secretion by human granulosa cells in vitro / K.P. McNatty, R.S. Sawers // J. Endocrinology. -1975.-V. 66.-P. 391-400.

112. Meinecke B. Zur Dynamik der präovulatorischen intrafollikulären Steroid-hormonikretion beim Schwein / B. Meinecke, H. Gips, S. Meinecke-Tillmann // Zuchthygience. 1984. - V. 19. - N 5. - P. 193-204.

113. Mills T.M. Stimulation of oest rogen synthesis in rabbit follicles by luteinizing hormone / T.M. Mills, J.A. Davies, K. Savard // Endocrinology. 1971. -V. 88. - P. 857-862.

114. Moore R.W. The effect of meletonin on the onset of first oestrus in Romaney ewe lambs / R.W. Moore, C.M. Miller, P.R. Linch et al. // Proc. N. Z. Soc. Anim. Prod. 1984. - V. 44. - P. 21-23.

115. Motta M. Involvement of cholinergic system in the control of gonadotropin secretion / M. Motta, F. Piva, L. Martini // Neurosci. Lett. 1978. - V. 7. - P. 426.

116. Muneta Paul. The problem and hazards of matallic ion contamination in food/ Paul Muneta // Mater Perform. 1975. - V. 14. - P. 30-32.

117. Neathery M.W. Metabolism and toxicity of cadmium, mercury and lead in animals / M.W. Neathery // J.Dairy Science. 1975. - V. 12. - P. 1767.

118. Negro-Vilar A. Peptide-amine-steroid interactions in brain regulation of gonadal function / A. Negro-Vilar // J. Steroid Biochem. 1985. - V. 23. -Suppl. 4.

119. Ojeda S.R. Automatic control of LH and FSH secretion by short feedback circuits in immature rats / S.R. Ojeda, V.D. Ramirez // Endocrinology. 1969. -V. 84.-P. 786-797.

120. Perrin D.J. Chronic copper toxicity in a dairyherd / D.J. Perrin // Canad. Vet. J. 1990. -31.-№9. -P. 629-632.

121. Prasad A.S. Clinical, biochemical and pharmacological role of zinc / A.S. Prasad //Ann. Rew. Pharm. Toxicol. 1979. - Vol. 19. - P. 241-269.

122. Purves H.D. The site of thyrotrophin and gonadotropin production in the rat pituitary studies by McManus-Hotchkiss staining for glucoprotein / H.D. Purves, W.E. Griesbach // Endocrinology. 1951. - V. 49. - P. 244-264.

123. Ramirez V.D. Differential dynamic responses of plasma LH and FSH to ovariectomy and to a single injecti on of estrogen in the rat / V.D. Ramirez, C.H. Sawyer // Endocrinology. 1974. - V. 94. - P. 987-993.

124. Reeves J.J. Pituitary responsiveveness to purified luteinizing hormone-releasing hormone (LH-RH) at various stages of the estrous cycle in sheep / J.J. Reeves, A. Arimura, A.V. Schally // J. Anim. Sci. 1971. - V. 32. - P. 123-126.

125. Reeves J.J. Studies on doese response relationship of luteinizing hormone-releasing hormone (LH-RH) in sheep / J.J. Reeves, A. Arimura, A.V. Schally //J. Anim Sci. 1970. - V. 31. - P. 933-936.

126. Rosas P. Sex differences in the weight of the thimus in adult mice / P. Rosas, R. De Paz, V. Hernander-Ehlers et al. // Med. Sci. Res. 1992. - V.20. - N 14. -P. 509-510.

127. Ruhling A. Ecology of heavy metals: regional and histoncal stydy / A. Ruh-ling, G. Tyler // Bot Not. 1969. - P. 122-248.

128. Sandmann G. Cooper-mediated lipid peroxidation process in photosynthetic membranes / G. Sandmann, O. Boder // Plant Physiol. 1980. - P. 66-797.

129. Schally A.V. Isolation and properties of the FSH and LH-releasing hormone / A.V. Schally, A. Arimura, I. Baba et al. // Biochem. Biophys. Res., Com. -1971.-V. 43.-P. 393-399.

130. Schwartz N.B. Effect of antiovine LH serum on estrogen secretion pituitary LH discharge and ovulation / N.B. Schwartz, C.A. Ely // Fed. Proc. 1969. -V. 28.-P. 381-385.

131. Smith Michael F. Recent advances in corpus luteum physiology / F. Smith Michael // J. Dairy Sei. 1986. - V. 69. - N 3. - P. 911-926.

132. Snook R.B. The effect of antisera to bovine LH in hysterectomized and intact heifers / R.B. Snook, M.K. Brunner, R.R. Squatman et al. // Biol. Reprod. -1969 V. 1.-P. 49-59.

133. Stroband H.W.J. The ultrastructure of the uterine epithelium od the pig during the estrous cycle and early pregnancy / H.W.J. Stroband, N. Taverne, K. Langenfeld et al. // Cell and Tissue Res. 1986. - V. 246. - N 1. - P. 81-89.

134. Swerdloff W.D. Serum LH and FSH during sexual maturayion in the male rat: effect of castration and cryptorchodism W.D. Swerdloff, P.C. Walsh, H.S. Jacobs et al. // Endocrinology. 1971. - V. 88. - P. 120-128.

135. Wartenberg H. Origin of gonadal blastemal cells in mammalian gonadogene-sis / H. Wartenberg // Arch. Anat. Microsc. et Morphol. Exp. 1985. V. 74. N l.-P. 60-63.

136. Wartenberg H. Origin of gonadal blastemal cells in mammalian gonadogene-sis / H. Wartenberg // Arch. Anat. Microsc. et Morphol. Exp. 1985. V. 74. N l.-P. 60-63.

137. Whitely J. Plasma relaxin levels during suckling and oxytocin stimulation in the lactating sow / J. Whitely, D.L. Willcox D.L., P.E. Hartmann et al. // Biol. Reprod. 1985. - V. 33. - N 3. - P. 705-714.

138. Wolfe M.W. Characterization of thymic hormones, thymosin alpha 1 and thymosin beta 4 duringprepuberity, estrus and pregnancy in the bovine female / M.W. Wolfe, D.D. Vakharia, T.H. Wise et al. // Domest. anim. Endocrinol. -1989.-V. 6.-N1.-P. 71-78.

139. Zamojska D. Histomorfologia naszyn krwionosnych sciany rogow macicy swini w okresie fazy pecherzykowej cyklu plciowego / D. Zamojska // Zesz. nauk. ART Olsztynie. Wet. 1983. - N 14. - P. 25-33.

140. Zolman J. Relationship between the luteinizing hormone response to gonadotropin releasing hormone and endogenous steroids / J. Zolman, E.M. Convey, J.H. Britt //J. Anim. Sci. V. 39. - P. 355-359.