Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ГОРМОНАЛЬНЫХ РЕГУЛЯТОРОВ ДЛЯ ПОВЫШЕНИЯ РЕЗУЛЬТАТИВНОСТИ ИСКУССТВЕННОГО ОСЕМЕНИЯ

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ГОРМОНАЛЬНЫХ РЕГУЛЯТОРОВ ДЛЯ ПОВЫШЕНИЯ РЕЗУЛЬТАТИВНОСТИ ИСКУССТВЕННОГО ОСЕМЕНИЯ"

-иш

На правах рукописи

Харламов Юрий Евгеньевич

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ГОРМОНАЛЬНЫХ РЕГУЛЯТОРОВ ДЛЯ ПОВЫШЕНИЯ РЕЗУЛЬТАТИВНОСТИ ИСКУССТВЕННОГО ОСЕ1ЧЕННЯ

03,00.13 - фниюлошя

Автореферат диссертации на еоткмм ученой «шнн кандидата био логически а наук

п. Дуброинцы, Московской облает», 2002г.

Работа выполнена в отделе биологии воспроизведения н эндокринологии с.-х. животных Всероссийского Государственного научно-исследовательского института животноводства

Научный руко*однт&ни

доктор биологических наук А, М. Чомяс» ОфацыАячм* лпИспепты:

доктор ((»алогических наук А.И. Авилов кандидат биологических наук Т.Д. Мороз

Ведущее учреждение: ФГОУ Российская академия менеджменте о животноводстве > ) !

' ! •';

Защита состоится .....»_2002 года в 10 чш(о&

диссертационного совета Д 006.CI3.0i. во Псероссмйско • О, : научно-исследовательском институте животноводства 1

( :; ";

Адрес; 142132, п. Дубровины Подольского района Мое ков ;» м с ' 'с-. ч С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ВИЖа

А.: префератразослан «_»

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат биологических ид/

2002г.

Губанова

з.

ГОбшпл характеристика работы

Актуальность темы. За пернач 1991-1999 "-одев на фоне Heraiüuiiux структурных изменении с с соку п но го стаяв njvw иллдст ао молока в стране сократилось на а гон я дины - fkwiee чем в 2 раза, что и расчете на душу населения ниже медцшшскнх нор^ нофеблення этих продукт m Pikt импорта не.решает проблему, з лишь создает угрозу продовольственной безопасности государства. Сложившееся положение шшшш решало необходимость ■ разработки институтами ГАС XII Kontier пин программы развития.животноводства России на'период до 2010 года, одобренной Президиумом Рос сел ьх m академии.

Согласно ncoHuetiiiïi», требуется уиедичщь lipo«ччс.лстчо молока »<■ 24 .млн. тонн (с 32 млн. т. до 56 м;т т >. При стайн/нпацян имеющеюся поголовья ■ и» уровне 13 млн кор^в с удоем 2500 кг молока (ixe категории хозяйств) ич продукпшжлсть должна быть повышена до 43GÜ кг. Параллельно планируют направленную агннкиаш'М процесса структурных изменении численного к пород пою состава поголовья, удовлстзоряюших требованиям экономики каждого региона

В силу того, чш о этих условиях традиционные мгтоды воспроизводства не позволяют на должнем уровне н И сжатые сроки преодолеть .негативное положение о скотоводстве, особую значимость придают мероприятиям, направленным на улучшение организации воспроизводства с применением современных гибких тех оологии, базирующихся па методах гормонального управления рен|юду ктилной функаеи. Применение биотехнических приемов, таких как регулирование воспроизводительной функции с гюмощью гормональных препаратов Н других биологически активных веществ, а i акже искусственное оесменемне, СПасоЗс.иует ннтеншфнкашш воспроизводства а скотоводстве » условичх традиционней и промышленной тек и од о гни.

13 последние годы это становится ьакнейшнм фактором повышения эффективности селекции сельскохомйственных животных, а следовательно H факгором повышений продуктивности Ш.И. Стрекози в к лр, 2001; A.D. Черекаев и др., 2001; Д.Л. Лсаантин, 2001, В.Г, Пгжданов, В.П. Соловьев, 1999; Л. К*. Эрнст, :W;l Ko<Hg, 1994; R. Fooie, 1997).

• Начатые в нашей стране разработки гормональных методов управления половыми процессами у сельскохозяйственных животных (H.H. Нааьов, 1910; М.М. Заиаловекий, 1939; Д.И, Лопырнк, 1937; D.K. Миловано в. 1962; И.И. Соколовская, 1957; А.П. Студенцоа, 1953; Ю.Д. Кл и некий, 1977; М.Н. Прокофьев, 198Э; Г.А. Черемисинов,1975; А.Г Иеждшюз, Î990 » др.) способствовали детальному выл с не и ню закономерностей неПро-гуморальных механизмов регуляции репродуктивной функции и жнволшх, ниучеииз которых получило плодотворное развитие во многих странах. В настоящее время на этой основе у нас и за рубежом ингсжи^юпроводят нее;)ия 1 но биотехнологии воспроизводства крупного р^гадцго .¿кота, ' евр-у^у^д

IMcc . . * ч "VÎ^cmnm

и

Hpc<Kji¡; всего, с реализацией результатов на практике, что в ряде случаев встречает затруднения не только в условиях производства, »о н на предприятиях сферы н ау ч но-исс л едовате л ьс кн х институтов ( Л.К. Эрнст, 1998).

В настоящее время отечественная промышленность производит и кынускаег гонадотропнны, лрогестагены и ряд других препаратов, не уступающих tío качеству зарубежным. Однако, исследований по 1>П)ч\н.>:кчтк) их эффективности и разносторонних свойств в достаточной мере nu пропела lo, Пип ом у остается необходимым их испытание и coucpi ненство ванне методов применения (Г. А. Мин г азов, (994; Н.И. Полянне», 1997,1998). Следует учитывать, чю большинство рекомендации по и с пользованию биорегуляторов было разработано в условиях технологий эксплуатации жнногшх, которые к настоящему времени п новых социально* экономических условиях претерпели, либо претерпевают значительные изменения, что безусловно требует корректнровки методик проведения биотехнических мероприятий (Стрекоюв 1Ш. и др., 2001)-

Tíikhm обра юм, для отечественною скотоводства являются актуальными исследования по совершенствованию воздействий гормональными препаратам» (при учете влияния факторов внешней среды) с uc.Ti.io регуляции репродуктивных iipoueccoB, что, в конечном счете, прогнозирует получение с высокой степенью вероятности экономически приемлемых показателей плодовитости.

Цс.чь il 1и.п1'ш нсел словам и н. Изложенное послужило аргументацией пронесения раблы, целью которой являлось исследование по использованию гормональных ре^ляторо» для повышения результативности искусственного осеменения корок.

Жukt4» исмединаншк изучить возможности корректировки полового цикла, в т.ч. в нослеотельный иерно.1;

оценить влияние сурфагона и хориогоничйского гоиздотропина на оплолотиоряемость;

исследовать роль лютеостабила, ' как средства повышения результативности искусственного осеменения в спонтанную и индуцированную охоту за счет снижения эмбриональной смертности; испытать в сравнительном аспекте эффективность применения различных про геста генов при проведении биотехнических мероприятий; выяснить возможности унифицированных методов индуцирования охоты; , .

определить степень влияния сезонных факторов на показатели воспроизводительного статуса коров;

проанализировать полученный в ходе экспериментов Mai ер и ад, сформулировать выводы н предложения для производства.

Ниучмая новизна. Исследованы эндокринные предпосылки к теоретически о(кь..ованы методы применения биорегуляторов с целью

индуцирования охоты у здоровых и «проблемных» коров и» фоне предварительном гестзгешшшш, в т.ч. в рашшн послеродовой период, На основе изучения динамики изменений содержания прогестерона н кроии корив а ранний критический период эмбриогенеза било установлено оптимальное вроде инъекшш лютсоетабида, позволяющей спилась число случаев эмбриональной смертности Iк'следонаио влияние климатических факторов, на тюкачател» плен рощ но дета и скотоиодстпе. t 1ред.чожен механизм отрицательного влияния контрастных изменений тсмнературы окружающей среды а пастбищный период на показатели плодовитости.

При ктц ческа» значимость. Наученные методы ытействня гормональными препаратами позволяют планировать и зффеюиипо проводить индуцирование охоты у »проблем ни к» и здоровых корой, повышая при этом эффективность искусственного осеменения за счет снижения эмбриональной смутности. В целом, повышение эффективности биотехнических мероприятий реализуется, прежде всего, за счет роста производительности труда, благодаря проведению унифицированных обработок отечественными биорегуляторами, в т.ч. нро(есш¥нами и лютеостабнлом.

Данные о влиянии сезонных факторов на плодовитость могут служит ь методической основой для организации мероприятий С целью повышения оплодотворяемое™ коров с учетом копире! ных факторов внешней среды. Установлена возможности путем применения про геста генов и лютеостабнла повышать результативность осеменения в пастбищный период к, таким образом, выравнивать сезонные показатели плодовитости.

Реализация pt »улыятов исследовании н я проба им а работы. Материалы днссергашш доложены и одобрены на заседаниях ученых сонетов ВИЖ, НГСХА, БашИИИСХ, на Всероссийской, зональной и международной конференциях (! 997-2000 гг.). Основные научные результаты, включенные в диссертацию, опублнкоканы в трех научных работах.

Объем н структура. Диссертация изложена на 130 страницах машинописною текста, содержит 20 таблиц, 8 рисунков и приложения. Обзор литературы включает 1 ВО источников, в т.ч. 65 иностранных.

Положение, выносимые ни laiimiy: •повышение эффективности искусственного осеменения в спонтанную к индуцированную охоту посредством возлействия лютеостабнлом в раннии период эмбриогенеза;

-выравнивание сезонных показателен плодовитости проведением биотехнических мероприятий с использованием геста re тшцни и лютеостабила.

Г'л'ва -im д»»иы* № счес tue и пой и л1|>\Г«жи«й .тит грату ры j

1. Общая смма исследопаккй

^.СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 1.1, Материал и методы исследований

Экспериментальный исследования (рис.1 > проведены в 1994*2001 гг. па базе АОЗТ «Оэеры» Московской области на коровах и первотелках черно-% пестрой породы,

Кормление животных соответствовало нормам, разработанным ВИЖ.

ИпдуцнроваНне половых циклов, определение эффективности ратных препаратов, осеменение коров и первотелок осуществляли по методикам и инструкциям ВИЖа.

Концентрацию гормонов в крови корон определяли рад ной мм)пологически м методом.

Стимуляцию активности яичников у «проблемных» корон при нарушениях фолликул ore неза пропели на более чем 350 коровах с использованием различных биорегуляторов отечественного проиюодства: ФСГ-cyncp, ГСЖК в комплексе с прогестагепами, аналогами гонэдолнбернна, Хорно тонического гонадотроимна человека, синтетическими л роста гланд! ¡нами s различных сочетаниях и дозировках. Эффективность использования лютеостабнла в качестве средства, снижающего эмбриональную смертность, испытан) на 180 коровах.

Для диагностики нарушения фол лику логсиеза и эндометрита у коров использовали комплексный метод в соответствии с Методическими указаниями по диагностике, лечению н профилактике вкушерско^гннекологнческих болезней н ветеринарному контролю за воспроизводительной функцией коров (1985).

Коров в контрольных группах обрабатывали по рекомендациям областных аетлабораторнй, Ректакьно определяли величину, консистенцию, болезненность, тонус, реакцию матки отвечать сократимостью в otdci на ректальную пальпацию.

Способность коров к оплодотворяемости, продолжительность бесплодия устанавливали но данным зоотехнического учета. Контроль за общим состоянием поголовья до и во время опыта проводили по. методам, принятым в современной клинической диагностике.

Эффективность воздействия и время реабилитации определяли по показателям выздоровления и восстановления воспроизводительной способности коров.

В ряде случаев описание методики экспериментов сочли целесообразным давать по ходу текста.

В работе применены зоотехнические методы исследований, племенные записи, материалы зоотехнического учета по воспроизводству стада хозяйства, а также материалы ветеринарного учета. Статистическую обработку проводили по Е.К. Меркурьеаой (1983).

3.1.Ср»и» прояалениц индуцированной простяглянднцамп ахоггц и* фоне предварительной гясгягеииншин.

Особую роль в осуществлении биотехнически« мероприятий гр -регуляции половой функцией отводят синтетическим аналогам проста гландина, Несмотря на То, что относительно применения препаратов простаглакдша с литературе накоплен большой объем сведений, остается много нерешенных вопросов. Анализ аспектов прнигенения нростогландииов, как лютеолитнческчх средств, показывает, что. их эффективность определяется оптнм&чьиой продолжится ьностьГО периода, равной 48 часам, между сроком введения препарата и сроком жм оленин признаков индуцированной охоты. Отклонения от этого интервала привод*! к снижению показателя оплодотворяецости при осеменения. .

: Ти&гнн** |

Сроки иячод нрлицлечий Ррншаков о»оты

ИСКАН ГЬ7И Дштгнътюческий фея* 8 среднем

к.нтрвлрячпип ! Эещфлнм 1 Лниял'-гт

flpttdn.TjttuKtf.iMM-m* mimept&ia, ч {MJrn)

СПннннвшшУ ним

. 1-И» 5l.43i2.l3 | -W.l7il.S0 | 51,1011,5} (n-iij (n-Ht (B=J7)

)Пра.чпт*{*ш j -Ig.Otil.OO j yiwptHtiiifn-tm ] (rt" 17) 49,3 Iii ,CW 47.wil.i6 [ -11,42*1.19 fn-tT) | fn»9) [ (n»4J)

ifUKt

¿¿Г - . 55,0511,6t | 16,3611,93 j 5.1,6 t ±1,55 <n-9> («=f» i SJ,i7±l,7t

' 1 ytth.>p0t/ftfPyiHM 41,9 Ii 1,90 ! 49,00*2,60 j 41,9)11,35 (п-1Э) 1 (ft-U) 1 i(i»H) 3141,61 fn-lSJ

Р<0,01

В наших опытах у коров после обработки испытуемыми проста пошлинами сроки проявления эструса имели определенную степень вариабельности (табл. 1 >. Отчасти, это явление можно обусловить галнчием большого или меньшего числа атретических фолликулов в зависимости от характера цикла, приходящегося на момент введения ирогестагенз и проста гланд н на.

Разницу сравниваемых задержек проявления охоты при синхронизации, проводимой в спонтанный (I il -2 группы) и индуцированный цикл (3 и А группа) можно объяснить присутствием различного числа растущих фолликулов предшествующей волны популяции, т.е. как последействие динамики фолликулярного роста.

Хотя средине интервалы тачала стимулированной охоты после инъекции простагл а иди на в индуцированный ■ цикл различались по группам незначительно, при обработке эетуфаланом проявлялась тенденция задержки и проявления охоты у определенною числа коров. Утеромифузня нодосолом и

гестагвнезация оказывали влияние на выравнивание этих показателей. Это можно объяснить нормализацией структурно-функциональных нарушений в кнчнкках к эндоыетрдльных слоях. Такие нарушения неизбежно присутствуют у определенной части обрабатываемых живогиык, причем бе! каких либо клинических проявлений. В то же время, эпизодически отмечаемая высокая частота случаев в условиях практики замедленного лютеолтиса как о спои гянный, так н индунироиаиный цикл трудно объяснима.

Таким образом, констатируя практически равную и приемлемую эффективность применённых лютеолитических сред, следует отметить тенденцию улучшения показателей па фоне предварительно проведенной гестагеннэацпи и утероинфутни.

и.Клнмнне сурфагона и ХГЧ ыа косиршш^итьныб статус Целью наших исследований явилось изучение действия сурфагона н ХГЧ на фоне гестанегеэацнн нрн дисфункции яичников у первотелок. Из числа первотелок, у которых в течение 39-40 дней после отела не было зафиксировано признаков охоты, сформировали контрольную и 2 опытных группы животных по 33 голов в каждой. В контроле вводил» физраствор, в I опытной группе - прогестерон 0%-5.0) и из посьмой день - 10 мл сурфагона. во 2 опытной - прогестерон (1%-5,С ■ ХГЧ (1000 ИЕ).

Оценку эффективности воздействия проводили С учетом степени инволюции матки в течение 30 дней после начала опыта, срока появления охоты, оплодотооряемости после первого осеменения, сервис-периода н индексу осеменений (табл.2).

Таблиц«!

Воспроизводительный статус после корректировки репродуктивной

функции '

Показатель Перштшки с незавершенной инволюцией матки Сроки промв' лен ид первой охоты, дней ММп Оплодотвори-емоапъ после перво~. го осеменения, % Сервис-период, дней М±т Индекс осеменения Оплодот- есрепо за опытный период, %

гол. | %

Контроль ' 11 1 34Д ио.о±1г,б* 26,7 137,й± |М* 2,5 80

¡крупно 7 | 30,0 66,6±2,Й" "60,0 97,0±10,6*' 1.1 100

Н,-рупии 1 | г,9 Й1.0 1,6 100

* — Р>0,1; ** — р<0,01; — Р>0,1

Анализ показателей свидетельствует, что эффект ребоунда прогестерон« потенцирует позитивные свойства и гонадолибсрнна, и ХГЧ в Отношен тГболе« быстрого восстановления эндокринной регуляции после отела/ обеспечивающей готовность репродуктивной системы к воспроизводитсяыюму циклу.

Нами проведены исследования с целью изучения влияния сурфагона и ХГЧ На оплодотворяемость коров с гипофункционольиым состоянием яичников в индуцированную эстуфаланом - ГСЖК на фоне предварительной гестагекншиш охоту, " , .

Учитывая, что применение биорегуляторов при функциональной недостаточности яичников будет более эффективным при одновременном терапевтическом воздействии на матку, т.к. патология иччннкоа часто сопровождается «крытым эндометритом (В.Мадиеон, 2001), в опытных группах трансцервикалЫта вводили Гюлосол.

Таблиц»5

Влняни*сурфитин* и ХГЧ на оплолотвориемоп ь

. Группы п. Пргпар^ты ИрякгЬ,гп признака вмни ' Ся*.1Ч1Нх яоеяе Ом*.? ими *г»лг мМ'. ' Л>!гй наАЛ'Мепнг!

N л V я Г

1 ГСЖК . 17 »,3 . « : 36,-1 13 '

// <»'20) 1 (рогестсроп, ГСЖК, Эст)ф*лак, Сурфагш ■ !в ■мл Н . в" ■■ (7 13.0

т <п-22) Прогестерон, ГСЖК, Эстуфшаи, -ХГЧ 19 и,* 12 54.$ ; (? . М,4

Оплодотворяемость от первого осеменения в контрольной фулпе была ниже, чем во второй на 18,6% и на 18,14, чем в третьей группе: Показатель числе стельных коров за весь период наблюдений был в пользу опытных групп, > В целом, улучшение показателей в опытных группах происходило, по* видимому, эа счет'позитивного, последействия испытываемых композиций: Преимущество полученных показателей в опытных группах можно объяснить и тем,.что Яодосол проявил выраженное, санирующее полость матки, действие./: Блсгодарл этому происходит структурная нормализация эндометрия и, в определенной' степени, оптимизация гормонального фона, создающие благоприятные условия для оплодотворения яйцеклетки и нормального развитая зародыша.

2.4. Применен«« люткгкбялн для (нмжштня эмбриональной смертности

При осеменен«« млекопитающих, как правило, «рои сходит оплодотворение 86-95% яйцеклеток, тогда как до родов доживает лишь 65-80% зародышей (И.И .Соколовская, 1%4), Причины прснатальних потерь, т.е. эмбриональной смертности, сводятся, в основном, К нарушениям генетических , иммунных и эндокринных рзаимоотпошений в системе «самка-зародыш», а также влиянию негативных факторов внешней среды, в т.ч. инфекционных называющих функциональные и структурные (вменения в репродуктивной системе.

D процессе оплодотворения яйцеклетки и нормального развития зародыша большую роль играет прогестерон, обеспечивающий нормальный эмбриогенез. О критическую фазу начала беременности отрицательную роль мэжет сыграть нецелесообразное выделение эндометрием простзглапдниа, который вызывает л я тис жолтого тела, продуцирующего прогестерон, что приводит к неизбежной гибели эмбрионов вследствие отсутстзии необходимой для его Юрмалыiörö развития (еетагеннои поддержки. Негативным фактором в подобных случаях может являться сам эмбрион, выделяющий специфические белки, обладающие косвенным лютеолнтическим свойством в силу способности блокировать внутриклеточный синтез ингибиторов образования простагландинов, что обусловливает физиологически нецелесообразную его выработку, транспортировку по локальным гематологическим связям к желтому тел}', инициируя его функциональное угасание.

Данный механизм ешс окгхмателмю не изучен, однако установлено, что предотвратить нежелательный лютсолнзис в подобных случаях возможно путем введения в организм рнлнзннг-факторз, протеста геноо пли а нти п роста гланд и к ов (Л.М- Чомаев и др., 1997; Ю.Е. Харламов и др., 2000).

В собственных исследованиях по ' повышению результативности искусственного осеменения путем снижения пренатальной гибели эмбрионов в качестве ан ти проста гданлм на нами, был испытан лютеостабнл, синтезированный в лаборатории химии и технологии соединений НПО «Витамины». Препарат является ¡-формой синтетического простатандина F/t с отсутствием лютелитнчсской активности.

С целью подтверждения свойств лготсостабила оказывать поддержку функциональной активности желтого тела и также блокировать д(01солнтнческое действие простагланднна I;jtx было сформировано 4 группы коров по 10 голов. Функциональное состояние репродуктивной системы еоотйетствовало 7-10 дню полового цикла, 'животные были с выраженным желтым телом в одном из яичников. Первая труп та служила контролем. Коровам 2 группы для лютеолиэиса вводили 500 мкг эстуфалана. D 3 группе вводили 1,0 мг кютеостабнла и а 4-500 мкг эстуфалпна н 1,0 мг лютеостабида, У всех жне»р,н.1Ч проводили пятикратный забор кропи с интервалом 24 часа дли

определения динамики изменений уровня концентрация прогестерона, которую проиллюстрировали графиками среднестатистических значений (рне.2).

Р-ис. 3. Влияние биорегуляторов и« цзыеидомв седерясання ирвгестсрон» в кроен впрок

&

\<

1 Э

I*

О Ы 49 П М ДО

Врем* lnOept прев КрСМ, 4ttu j——tftant 4tygnm j

Bo 2 спытпсГ; группе инъекция эстуфадакв' вызвала быстрый лизис жёнтаго тела и проявление признаков охоты у всех обработанных коров, сс^ролоадаемых физиологически нормальным падением уровня прогестерона до базальной величины и последу ющим лоск пенным уаег.нчением к 72- i 20 часу с момента инъекции простагланднна. В го же вречя л контроле игми Знг;о Зафиксировано постепенно лишение концентрации прогестерона, свидетельствующие с том, что пик расцвета функциональной активности жёлтого тела у большинства коров пройден и начзд^я постепенный npousei tio регрессии, чго отражает нс>рмо циклическое функционирование ин'шькоа.

В 3 группе динамика концентрации лрогест?р{жа свидетельствует г: row, что после инъекции лютеостабила к 48-му часу было заблокировано нр.чало спонтанной регрессии жёлтого тела, и, более того, произошло усиление его циторецепторкой чувствительности к ЛТГ. ^следствие этого, к 96-! 20 "асу произошло восстановление, эгпшгацпе и,. н определенной степени, стабилизация функциональной деятельности желтого теле на более высоком уровне, о чём свидетельствуют повышения значений концентрации прогестерона на 0,5 нг/ш выше исходного (3,8 нг/мл) уревмк.

Характер динамики начала изменений концентрации прогестерона в 4 группе аналогичен характеру диком и ¿и начальных изменений во 2 группе, но к 2-J-My часу зкюгенно стимулированный лизис жйлгого. тела бил заблокирован лютеостабилом. Однако полного восстановления эндокринной активности не произошло., что, по-видимому, обусловлено необратимыми структурными изменениями, успевшими к этому времени произойти у определённой части

гистологически* элзментор желтого тела в результате действии синтетического аналога продтаглэкдчна. Тем не менее, можно констатировать, что л це.чом падения инкреторной актишосш не произошло ниже значений критическою уровня, который мог бы обусловить эмбриональную смертность на начальных стадиях развития зародыша.

Таким образом, отмеченные свомствг, дали основание для проведения научно-производственных испытаний по применению лютесетабилз в целях повышенна результативности искусственного осеменения. ¡1 первую очередь Провели исследования с целью определение оптимального срока виедеиия дютеостабила после пров<дйнкого искусственного осеменения. При этом принимали во внимание, что из яйцепровода в матку »юру л а проникает на 5-? день, косл^ чего срокскодит нмплднтаиия зародыша, опосредованная механизмом •емексричского распознавания начала стельности», благодаря которому происходит функциональна» трансформации жёлтого гела цикла в состоя««« жслзоги тела беременности. Данная ситуация обусловливает критическую фазу в эмбриогенезе, т.к. нарушение регул ягорти-э Механизма неизбежно припадёт к эмбриональной гибели. Для компенсации возможной негашеной ситуации мы испытал» зффектныюсти ¡лед л им дютеостабила в периол из 4-10 день ппел^ .зееменення коров в спонтанную охоту. Результаты испытаний подтвердили свойство лютеостабила позитивно влиять па результативность искусственного осеменения в спонтанную охоту за счёт снижения эмбриональной смертности, причем, положительный эффект лютеостабнла следует ожидать при его выедании на 6 или 7 день после осеменения.

Последующие опыты по определению сравнительной эффективности инъекций лютеостабнла коровам, осеменЬшым в снопганную (опыт !) и нндуин[юианную (онит 2) охоту продемонстрировали а слитных группах приблизительно равнозначные показатели, выгодно отличающиеся от показателей, полученных в контроле (табл. 4),

Таблица I

Эффективность применении дютеост абнда восде осеменений кероя к спонгяннум и и иду и и ро в а и и у ш о* ату

Гпуг.пи •'«сто кори* ь Синий аи^'шш.цч от 1 осемепепин Ссрнхс- Индекс ос^мкчстт

■группе п /И \l.itn

Контроль 25 ¡2 120,0±10,1 2,7

Опыт 1 Г 26 15 57.7 89.(Ш.7 2,2 '

О.тыт 2 25 15 60,0 2,1

Р<0,05

Результаты опытов на «проблемных)! коровах, осеменённых «осле восстановления половой цикличности, показали, что применение предварительной гсстагешпашш и инициирование как сурфагоном, гак и ХГЧ опуланни экчогенно стнмулирощшного к росту н созреванию фолликула приводи г кулучшению процента оплодотоорнемостн и сокращению ссраис-лсриода. Однако комплекс пронсл&шмх обработок и .-(»платочной степени не может лрадмлрагнть эмбриональной смертности на ранних этапах развития зародышей. Падение дютеостаонла на седьмой день после осеменения компенсирует зтот недостаток (табл,5). Следует отметить практически равную эффекта пность лрепприта на фоне инициированной оьуляцнн К гонядолнберином, и ХГЧ. .

Таб.шии

Результаты ои.зодотйориемост« «проблемны«)» коров после проведении биотехнических мероприятий

1 к'ачнмекс еирибомшк Числа mtpat Оияидатворй s c _ гмнеты „осе , ^^ I MV.M«wm«* i r- - Hathuc осеменения - Otuudomtopeiie w отнтш utpuoá

« % ! Д/±т И %

I (КО»!-Tf&tl-) Е Iporecvcpoit гежк ''Ь.туфс™« 22 | 10 ? 45.5 |l2ftf9 2,9 (8 81,8

11 Нроич-тсрон гсжк Эстуфолаи Сурфяган 25 1 13 1 52.0 2,3 22

ш Прогестерон ГСЖК Эетуфаяон ХГЧ 25 tí 2.3 22 «8,0

IV Прогестерон ГСЖК Эстуфман Сурфагон Люп-остайнд 35 29 57,! J^' 31 88,6

V ' Прогестерон ГСЖК Эстуфадаи ХГЧ Люгеостабнл 30 Ifi ío,o j 1 2,0 30 100

2.5. Эффективность прогеетя генных препаратов

В процессе нроизаодстаенноокспернментчльной работы по рефляции половой функции мы использовали с приблизительно равной долей успеха различные типы протес та генов, Для более объективного oreen на вопрос об

эффективности разных прогсстагенных препаратов мы испытали 4 схемы обработок:

схема I (контроль). На 10 лень полового цикла при налипни у корок » одцом из яичников жёлтого тела внутримышечно инъецировали 500 мкг эсту фалиня;

схема 2. Коровам независимо от дня цикла плодили внутримышечно 10,0 мл 1% масляного раствора прогестерона м на восьмой дет.—300 од ГСЖК и 500 мкг эстуфалана;

схема 3. Независимо от дин цикла вводили 10,0 мл 1% масляного раствори днамола н на восьмой день—300 ед ГСЖК и 500 мкг эстуфалана;

схема 4. Коровам под кожу основания уха «водили имплантанты, содержащие 6 мг норгсстамста. На восьмой день имплантанты иш л окали и проводили внутримышечно инъекции 300 ед ГСЖК и 500 мкг эст> фадана.

Таблица 6

Эффективность прогсстягг нии нрн еннхроитяшш окогм

flOKUHimt-tb ГРУППЫ

I 2 J 1 4

Обработано коров, га? 13 4 . 16 21 ¡

» 1 % Н % и К « % i

Пришли « охоту 8 | 61,5 '■ ■■ 1 ■ ■ 94,1 16 100,0 20 95,2 1 !

- в мим числе: ! .

- чергз 24 чаев 1 ¡ 7,7 ! - - ■ • . -

-через 48 часов 5 i 38,4 14 82,3 14 87,5 17 80,9

- чс/м!э 72 чеса 2 15,4 2 11,7 2 12,5 3 14,3

Отсутствие oxoaibi 5 38,5 1 5,* - - 1 4,8

Оплодотворяе-мость от 1 осеменения 4 50,0 10 62,5 9 56»3 12 60,0

Индекс осеменения 2,5 1,8 1,9

Самые низкие показатели по синхронизации охоты и оплодотворяемоети получены в ((контрольной) группе. Не более 61,5% животных проявили признаки охоты и ошюдотворяемостъ их не превысила 50,0% при достаточно высоком индексе осеменения - 2,5 (табл. 6),

Следует отметить, что аналогичные схемы синхронизации, применяемые нами в практической работе давали и более высокие результаты, однако, учитывая довольно широкие пределы вариабельности показателен, показатели

настоящего опыта lie эыхолят (ризвестием смысле) за пределы допустимой нормы границ. Анализ показателей опытных групп не выявил достоверной разницы. В к» же время обнаружили существенное преимущество показателей опытных фупц относHiejihно контроля: коров, проявивших признали охоты, было иа 32,f»-38,5iii больше, Оплодотворяем ость от первого осеменения и индексы осеменения были также п пользу опытных групп,

Таким сбраюм, в проведенных испытаниях положительный эффект протест am нпзш» и перед введением комплекса нростагландин -ГСЖК с целью с них рои I нации охоты получали пеэаннсимо от вида протеста генного препарата. Вывод имеет определеннее практическое значение, так как позволяет приобретать более дешевые препараты не уступающие по эффективности дорогостоящим аналога«.

2,5. Укифшщронянный метод корректировки пиловоги цикля Нами была испытана возможность унифицированных методов обработок кориз с «елью фронтального стимулирования охоты. Для зтего сформировали 3 групп:.; здоровых коров черно-neeipofl породы но 3-4 лактации с уде?*: 3-5 тыс. кг молока за лактацию, Предполагая расширить положительные свойства комплекса препаратоа про'«таген-rot;адотропи11 проегатан дин-гона до Либерии и, одновременно, достижение унификации, то есть пригодности режима введет« композиции препаратов для индуцирования охоты у коров с более широким спектром разнообразного исходного функционального состояния яичников it матки, мы испытали эффективность введения в схему дополнительной обработки ршшзинг-факюром и санацию матки Йодосолом пергд илчалом гестдгетпацип.

П I группе {контроль) коровам с пальпируемым жёлтым телом в яичника* инъенировалн масляный раствор прогестерона о дозе 10,0 mi, на восьмой день ГСЖК и эстуфадан я дозах 1000ИК и 2,0 мл. соответственно, и ¡1 еред осеменением 10.0 мл сурфягте*.

Вторую и 1ретыо группу сорлбл швали фронтально но той же схеме, но за 24 часа до введения прогестерона н перед оссмеиеннем инъецировали по 10,0 мл сурфэгонй; яри этом коровам 3 группы перед началом обработок биорегуляторами проведи сснашио магкч йод ос о л ом.

Более высокие показатели в опытных группах относительно контроля подтвердили правильность пашет предположении (Табл. 7),

Учитывая, что обработки ч группах пронощди фронтально, то есть без определения исходного морфи-фун;;циона,зьного состояния яичников, эффект первой сур^агсна можно объяснить овуляцией или л:оте:и;изанией

фог.лнкуг.а, который неизбежно ирисутстиоаи у какого-то числа животных, а вторая инъекция сурфагока, проведенная перед осемененнем, опосредованно стимулировала огуляцшо в оптимальные сроки. Как следстииз, среда репродуктивной системы максимально соответствовала условия:/..

обеспечивающим нормальный процесс оплодотворения и развития эмбриона, что и обусловило более лучшие показатели я опытных группах.

Таблица7

Эффективность рял'иинг-фактора н утерей и фут», меленных » начале обработок с целью н яду к и роак нн я ихотЫ

ПОКАЗА Tt'JJH ГРУПП и

1 // Ш

t* % « % п %

Обработано 20 100,0 20 100,0 36 (00,0

Пришли в охоту: 16 80,0 20 100,0 36 100,0

а том числе через: - 48 част 15 73,0 16 80.0 32 88,9

- 72 часа t 5.0 4 20,0 Г 3 .....8(3.

- 96 часов - - • - 1

Ш примчи а охоту 4 20,0 • • •

Омод&мюрме' моешь от верного 1 осеменъшя, % 10 5С, j- П 55,0 22' 01,1

Преимущество показателей испытанной схемы обработок т 3 группе коров е включением утероннфузии позволяет гаран'шроадшго получать позитивные результаты оплодотаорчемосги мрн технологии искусственного осеменения. Предлагаемый метод снижает трудоемкость проведении мероприятий, т.к. унифицирует и упрощает систему гормональных воздействий no cpaeiteHHKt с рекомендуемыми в инструкциях.

Схему обработок, аналогичную проведенной на 3 группе коров, мы при мел «ли дня стимулирования воспроизводительной активности у короо в послеродовой период, начиная с 8-10 дня после отела. Было установлено, что испытанная скема .регуляции воспроизводительной функции повышала долю Коров, оплодотворившихся а течение первых 35 дней после отела - 50 против 23%,' Использование схемы способствовало восстановлению половой активности у визстральных л актирующих коров, что достоверно уменьшало интервал от отела до оплодотворения на 15-40% по сравнен ню с контролем.

2.S. Влияние сезонных факторов из репродуктивную фуничшм Полученные нами данные подтверждают зависимость показателей репродуктивной функция жнчотнык от сезона шла. Анализ показателей оплодотворяемое™ 840 коров показал, что стельность от первого осеменения составила весной 52,4; летом — 35,5; осенью — 65,8; зимой' — 56,6%, Динамика показателен оплодот&оряемостк соответствует динамике значений

индексов осеменений, которые веской, летом, осенью н зимой составили 2,4; 2.8; 1,7 и 1,8 соответственно (рис. 3).

Опыт но изучению влияния сезона гола на оплодогиоряемость после искусственного осеменения а индуцированную охоту проводили на коровах по прошествии 60-ти и более дней после отела без клинически выраженных признаков нарушения половой функции. В трех сериях экспериментов анализировали степень положительного влияния биорегуляторов полового цикла К утерощ«фузий на онлодотшряемость.

Р«М5. а. Эффективность осеменения в разны» сезоны года

СЗ Оплодотворвемость, % -*- Индекс оемшния j

В i серии опытов коровам вводили сурфагон перед осеменением в индуцированную ГСЖК и эстуфаланом охоту.

2 серия опытов отличалась тем, что охоту индуцировали введением комплекса прогестерон-ГСЖК-зстуфалан.

В 3 серии опытов охоту индуцировали также, а я дополнение перед началом обработок, коронам санировали матку йодосолом.

tío 2 серии опытов были получены результаты, сравнимые с данными, полученными в 1 серии опытов (табл. 8). Однако, введение в схему обработок про геста гена дало тенденцию к выравниванию сезонной эффективности испытываемых композиций биорегуляторов,

Полученные г 3 серии опытов более высокие показатели оплодотворяем ости могут быть обусловлены положительным влиянием утеронифузпи, которая, согласно данным литературы, нивелирует возможные нарушения структуры эндометрия. Детальный учет динамики показателей опдодотворяе мости, проведенный по месяцам года, прослеживал устойчивую склонность к снижению показателей оплодотворяем ости до минимальных значений в жаркие периоды пастбищного содержания. В противоположность этой тенденции и Г'М характерной вариабельности, начиная с первых осенних

мвсяцсри до середины весны, покв»т*ли оилодотвориямости яоэрвстипи, * достигая наибольших значений в осенне-знмиий и тимнсмсенний периоды.

^ Таблиц»!

Результаты оклодотяоркемогги коров с эюогякт стимулированной и«л«мв «гпнимтн ■ ртшчци« ш»

ММ(ММ Ыч* - 1 Амчя ! Лете ". . Оггя»

ОЫм- МН0 КоргЩ и (МиьУа | iAv.ni.'-тт/же |мно мость ¡' карт, п % тччрие нош лнкччь 1 корив, п % /МчоОг! Мжуиг Ликтт» * ■" кчрчв, а { Младо творя е .Меть %

Первая . 48 58.3 1 33 63,6 52 42,3 29 72,4

Вторая 36 61Д | 34 - 64,7 5 44 , 49.3 36 72,2

Тренья 53 62,3 ' 43 ' 65,» 67 ьг,у 31 71,0

Йтогог 137 60,6 :1 110 64,5 ! (63 47,9 96 71,9

На группе коров(п=11) в сравнительном аспекте про веч и исследование динамики изменений концентраций прогестерона м эстраднола в кропи, а также изменения внутрнматочной температуры » нормальных условиях, то есть в условиях климатического комфорта, и в условных стрессовых повышений температуры.окружающей среды (выше 32вС). Для проведения анализа строили графики среднестатистических показателей концентраций исследуемых гормонов и внутри маточной температуры а пред- йпостовулггориую н середину прогсстативиой фазы полового цикла.

I

Проведеиные эндокринные исследования в определенной степени углубляют понимание причин снижения показателей оплодотворяемости и эффективности применения биорегуляторов в условиях стрессовых повышений температур: центральным явлением , периодичности половых процессов в яичниках является овуляция, вторая разделяет фолликулярную и

та

'. •* < ч ■» I I

• 1» К 11 I*

прогестатнвную фазы эндокринных н морфологических изменений, обеспечивающих оплодотворите и нормальное развитие зиготы. Эта изменения находя* отражение в определенных временных и количественных изменениях концентраций стероидных гормонов. При гормональных нарушениях, которые мы зафиксировали (рис. 4), происходят отклонения от нормы1 овуляторного процесса, что исключает возможность оллодотворяемостк.

Рис, 4-Б. Условия сг/хссолиго иеаыциния 1<ммг|1«т>|»ы

I

1.»

^ ^ и

•1.1 (I 1 (I

—I- —г— I—> - Г —I

» 1« И 11 41 и

Акммчи

Кроме этого были зафиксированы следующие особенности: в условиях высокой температуры окружающей среды охота у коров плохо выражена, со стертыми признаками; функциональные образования в яичниках по размерам и консистенции не соответствуют норме; у ж квотных происходит повышение внутриматочиой температуры на 0,5-1,0 С выше средне-нормальной (Э8,5°С) (рис. 5).

Скс, 3-А. Условии кл<»чтич«кого комфорт

'•г

3 »м

| М'4Т {«{

I ИТ

* 1М-1

2

та

1 2 Оврличи*

М 41 11 Дни Ц«Л«

11

Учитывая тенденцию к повышению оллодотворяемости в летний период после осеменения коров в синхронизированную ни фоне предварительной гестагенизацин охоту, мы испытали возможность добиться дополнительного

повышения результативности осеменения путем введения при той же схеме синхроннэвцнон^ык юбработо* на Тд*нь после осеменения лютеостабила.

hi*. If.!»*** ГТР«ИО»вГи цввымения T«wnr|MT)f»W

■ В результат« бн«о получено улучшение локажгеяей (тебл, 7), свидетельствующее о принципиальной возможнее тн ий основе применения биорегуляторов нивелировать сезонные факторы, отрт»*т«лм(о влияющие № г&квзятсли плодовитости.

Таблицп7

Эффективность крямемецн« лмгеостябилв р летний период

Кемыекс препарпепгн 4*cw карр9в стенными от t »(еменгмщы Cepiuc-Hepuvd Индекс

И i « Hit»

Контроль »9 1 ! 36,» 121,0±13,0 2.4

fX>Ш ocm\tfxiitm 21 П | 52,3 I00,£t8,7 . 2.2;

Нрол'спи'рон, ГСЖ& Эсяпфшш, лютеостабш 25 14 56,0 89,3±3,1

Р<0,01

Негативную роль а возникновении сезонкой депрессии половой функции играют и другие факторы, например, резкая смена рационов кормления, б летний период при пастбищном содержании возможно появление у коров гиперзстрогеииэма. Растения, содержащие фитоэстрогены являются предрасполагающими факторами репродуктивных нарушений (Л.М. Чомэев и др., 2000). Однако, фитозетрогены кормов нельзя рассматривать только как негативный фактор. Найдено, что в ранний послеродовой период повышений содержания эстрогенов в крови после скармливания коровам зеленых кормов

способствует нормализации образования маточного проста^паидина, течению инволюции натки, элиминации инкроорган из мое в маточной среде. Клинически установлено усиление интенсивности фагоцитоза бактерий лейкоцитами из крови илохнй при потреблении животицми кормов даже с небольшими дозами эстрогенов. Поэтому эффект экзогенных эстрогенов, стимулирующих созревание фолликулов, а следовательно м наступление эструса, в некоторых случаях можно рассматривать как существенный фактор восстало влей «я звдоме тральных нарушений и интенсификации ннволюиии Метки после отела (Л. Kcîndorf е( «(., 1988; M. Vanderptasche м ai,, 1991)-

Выводы

1. Предварительная гестагенизацнв позволяет повысить эффективное» проведения биотехнических мероприятий по воспроизводству по сравнению с известными методами на 10-15%, в т.ч. и в послеотЗльныА период.

2. С целью повышения оплодотворясмостн с одинаковой эффективностью можно проводить перед осеменением в индуцированную охоту инъекции как су рфагона, так и ХГЧ в общепринятых дозировках.

Лютеостабнл оказывает поддерживающее влияние на функциональную активность желтого тела в ранний период эмбриогенеза; введение лютеостабнла на 6-7 день после оплодотворения повышает, при прочих равных условиях, результативность осеменения на 10-15% за счёт снижения эмбриональной смертности.

4. При проведении биотехничесхих мероприятий для предварительной гестагеиизации с равной долей эффективности можно использовать прогестагенные препараты предназначенные как для инъекций, гак и для введения в виде подкожных силиконовых имплантантов.

5. Введение в схему обработок по синхронизации охоты предварительной санации матки, инъекции гонадолибернна и гестагеиизации унифицирует овариальные процессы, что даёт возможность проведения фронтальных обработок.

6. Комплексное применение биорегуляторов на фоне предварительной 'гестагеиизации в пастбищный период позволяет выравнивать сезонные

показатели плодовитости, в т.ч. за счет снижения эмбриональной смертности при включении s схему обработок лютеостабнла.

Практически* предложен ни

1. При проведении биотехнических мероприятий по воспроизводству следует использовать предварительную гествгениэацню.

2. Для снижения эмбриональной смертности рекомендуем вводить лютеостабнл .в дозе 0,5-1,0 мг на 6-7 день после искусственного осеменения, что предполагает повышение его эффективности (к т.ч. и в неблагоприятные для воспроизводства сезоны года).

Список работ* опубликовании* но те«« диссертации:

1. Чомагв A.M., Кл и некий Ю.Д., Харламов 10. Е. Влияние лютесстабкла на эмбриональную смертность у коров И Закономерности и пути регулирования воспроизведения животных: Сб.науч.тр. / ВИЖ, — Лубровицы. - 1907. - Вып. 5S. - С, 45-46.

2. Харламов Ю.Е., Чомаев A.M., Сану си М Роль биологически активных црепаратеэ в с ниже tut и пренатальных потерь у коров II Актуальные проблемы биологии в животноводстве: Мат. 3-й Между нар. конф., Боровск, 6-8 сентября 2000. - борове к. - 2000. - С. 363-364.

3. Санусн М., Афанасьев Б.А., Чомаев A.M., Харламов Ю.Е. Эффективность применения Гн-РГ для нормализации половой функции коров-первоч ело к после отела; Мат. 3-Й Междунар, конф. Боровск, 6*8 сентября 2000. -Боровск,-2000. - С. 336-337.

Иак.;?У.¿с Tup. ICO якз. I.С У.И.Л. Tiin.i-m imc луч" г.п^'ммк м.о.