Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

Исходный материал для селекции томата на устойчивость к фитофторозу и другим листовым пятнистостям в условиях Нечерноземной зоны России

ВАК РФ 06.01.05, Селекция и семеноводство

Автореферат диссертации по теме "Исходный материал для селекции томата на устойчивость к фитофторозу и другим листовым пятнистостям в условиях Нечерноземной зоны России"

УДК 635.64 : 631.52 : 632.4

На правах рукописи

ГУРКИНА Любовь Кирилловна

ИСХОДНЫЙ МАТЕРИАЛ ДЛЯ СЕЛЕКЦИИ ТОМАТА НА УСТОЙЧИВОСТЬ К ФИТОФТОРОЗУII ДРУГИМ ЛИСТОВЫМ ПЯТНИСТОСТЯМ В УСЛОВИЯХ НЕЧЕРНОЗЕМНОЙ ЗОНЫ РОССИИ

(специальность 06.01.05 - селекция и семеноводство)

Диссертация

в виде научного доклада па соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук

Москва - 1998 г.

Работа выполнена во ВНИИ селекции и семеноводства овощных культур i 1977... 1997 гг.

Научные руководители: доктор сельскохозяйственных наук, профессор,

академик РАСХН Голышин Н.М., кандидат сельскохозяйственных наук Скворцова Р.В.

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор,

действительный член РАЕН Дьяков Ю.Т., кандидат сельскохозяйственных наук Кондратьева И.Ю.

Ведущее учреждение: Московское отделение ВНИИ растениеводства им. Н.И. Вавилова

Защита диссертации в виде научного доклада состоится "ут" иичиШ'у 1998 г. в У(Р часов на заседании диссертационноп совета К 120. 89. 01 при Всероссийском научно-исследовательском институт селекции и семеноводства овощных культур по адресу: 143080, Московская область, Одинцовский район, п/о Лесной городок, п. ВНИИССОК.

С диссертацией в виде научного доклада можно ознакомиться в библиотек института.

Диссертация в виде научного доклада разослана

Ученый секретарь диссертационного совета К 120.89.01 доктор сельскохозяйственных наук

В.А, Епихов

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы. За последнее время селекционеры добились значительных успехов в выведении высокоурожайных сортов томата. Однако, немногие из них имеют достаточный уровень устойчивости к наиболее вредоносному возбудителю - Phytophlhora infestans (Mont.) D. By. Выведение устойчивых сортов осложняется большой пластичностью возбудителя, повышением агрессивности и отсутствием среди рода Lycopersicon Tourn. иммунных форм (Жученко, 1973; Алпатьев, 1976; Балашова, 1977; Дьяков, 1977).

В процессе паразитизма происходят качественные и количественные изменения патогена и растения-хозяина. Следовательно, селекция томата на устойчивость к фитофторозу должна учитывать уровень изменчивости в структуре популяции Ph.infestans и новые источники устойчивости.

Актуальность проведенных исследований обусловлена их направленностью на создание нового исходного материала для селекции томата на фнтофторо-устойчивость.

Работа выполнена в соответствие с планом государственной отраслевой программы, шифр 0.51.18.

Цель и задачи исследований. Цель данной работ ы - создание исходного материала в селекции m Mai а на устойчивость к фтофторозу и другим листовым пятнистостям для Нечерноземной зоны России, северной границы южной культуры в открытом грунте.

Для ее достижения решались следующие задачи: -анализ местной популяции Ph.infestans по расовому составу, -усовершенствование элементов методики оценки томата на устойчивость к фтофторозу;

-скрининг исходного материала, выделение и создание источников устойчивости к фитофторозу и другим листовым пятнистостям;

-изучение закономерностей наследования фитофтороустойчивости у полученных форм томата;

- разработка приемов интегрированной системы сохранения горизонтальной устойчивости к фитофторозу.

Научная новизна. Наблюдения за изменчивостью расового состава Ph. infestans в условиях Нечерноземной зоны РФ на большом (около 5000) наборе сортообразцов томата показали, что исследуемая популяция содержит две расы То и Т1. Возникновение новых "томатных" рас не отмечено за 20- летний период наблюдений. Разработай сокращенный набор растений-дифференциаторов и экспресс-метод с их использованием для изучения состава и динамики "томатных" рас в популяции Ph.infestans. Разработан метод создания инфекционного фона для

оценки селекционного материала на фитофтороустойчивость, который включаеп обязательный раздельный контроль устойчивости расами То и Т1 при искусственной инокуляции, а не их смесью. Экспериментально показана возможность образования ооспор у расы Т1 фитофторы при искусственной инокуляции отдаленны? частей растений томата в лабораторных условиях. Впервые показано влияние природного фактора северных регионов, в частности, промерзания почвы в зимний период, как фактора, влияющего на интенсивность развития фитофтороза ш томате. Предложены фунгицидные смеси (а.с. №№ 946031, 1111275, 1112599. 1113920) и биологически активные вещества (сок физалиса), контролирующие уровень горизонтальной устойчивости растений томата к Р11.шГс!&ш8.

Практическая значимость и реализации результатов исследований.

Разработан метод создания инфекционного фона для оценки селекционного материала на фитофтороустойчивость, который включает: обязательный раздельный контроль устойчивости расами То и Т1 при искусственной инокуляции использование пленочных теплиц на изолированном участке для эффективное™ искусственной инокуляции и во избежание распространения инфекции; контролирование фитофтороустойчивости при естественном развитии болезни; контроль расового состава РЬ.т1е81ап8 экспресс-методом на сокращенном наборе тест-сортов. На основе разработанного метода выделены и зарегистрированы вс ВНИИРе 5 генетических источников фитофтороустойчивости, с использованием которых в соавторство созданы оригинальные сорта для открытого грунта Нечерноземной зоны: Арго, р.1993г.; Грот, р.1994г.; Дубрава, р,1997г.; Челнок, р. 1997г.; Гном, р. 1997г.; Гранд - проходит испытание в ГСИ с 1993г.; Патрис , Гея - в ГСИ с 1996 г. Созданные генетические источники фитофтороустойчивости: линия 897-91, линия 899-91, сорта: Грот, Сага 1, Сага 2 зарегистрированы вс ВНИИРе и используются с 1994 года научно-исследовательскими центрами республик Украины , Беларуси, Молдовы, Западной и Восточной Сибири, Дальнего Востока, а также ь ГДР, Китае, Корее, Израиле, Индии . Выделены константные образцы с нормой реакции "толерантность" к группе патогенов , вызывающих листовые пятнистости, обладающих рядом хозяйственно-цсннных признаков: 1067-94, 1078-94, 1079-94, 1144-94. Результаты исследований по фитофторозу вошли в "Методические указания по селекции сортов и гибридов томата для открытого и защищенного грунта"(1986). Подготовлены к печати "Рекомендации по селекции сортов и гибридов томата с повышенной устойчивостью к листовым пят-ниетостям для открытого грунта".

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены на Всесоюзных совещаниях по иммунитету (1986 ,1987); на научно-координационном совещании "Физические факторы мутагенеза в селекцин растений на продуктов-

ность" (Москва, 1983); на Всесоюзном совещании по применению химического мутагенеза в селекции (Москва, 1985), на региональных конференциях, методических совещаниях по иммунитегу (1984, 1987, 1991,1996); на заседаниях Ученого Сове i а ВПИИССОК.

Публикации. Результаты исследования изложены в печатных работах, опубликованных в Российских изданиях конференций, съездов, совещаний, трудах ВНИИССОК, научно-производственных журналах, методиках общим объемом 40 работ, в том числе 2 Методических указания, 1 Рекомендация, 9 Авторских свидетельств.

Условия, материалы и методика проведения исследований. Экспериментальные исследования проведены во ВНИИ селекции и семеноводства овощных культур, и. ВНИИССОК Московской области, в 1977... 1997г.г.

В работе использованы районированные copra, виды и разновидности рода Lycopersicon, сорта и гибриды отечественной и зарубежной селекции из коллекции ВПИИР им. Н.И.Вавилова; в основном, селекционный материал лаборатории селекции пасленовых культур (селекционер Скворцова Р.В) всего - около 5 тыс. образцов. В качестве инфекционного материала использовали расы То и Т1 Ph.infestans, выделяемые нами из пораженных растений томата, а также любезно предоставленные Козловской И.Н. и Ь'арлкм Т.И.(ВНИИФ). Изоляты Ph.infestans культивировали на овсяной агаризованной среде и на ломтиках картофеля без R-гена. Идентификацию томатных рас проводили на канадском наборе сортоа-дифференциагоров и на сокращенном наборе, разработанном во ВНИИССОК.

Фитопатологическую оценку и отбор устойчивых к болезням форм томата проводили на стационарном инфекционном участке, в лабораторных условиях на фоне искусственной инокуляции расами То и Т1 фитофторы и при естественном развитии патогенов (с учетом структуры популяции) в соответствие с имеющимися методическими указаниями и проведенными нами методическими разработками (Ширко, Кузубова, 1971; Власова, Суханова, Псарева, Балашова, Жученко, Иванюк и др.,1976; Алнатьев, Скворцова, Гуркина и др.,1986). Для оценки интенсивности разни i ия болезней на посевах вычисляли средневзвешенный процент по методике ВИ'ЗР (Чумаков и др., 1974). Частоту расположения устьиц определяли по методу Молот конского (1973). При создании форм томата с устойчивостью к фигофторозу и друшм листовым пяшисгостям применяли гибридизацию, бек-кроссы; линейный и индивидуальный направленный отбор; генетико-физиологический, химический мутагенез; метод несовпадения циклов развития рас1ения-хозяина и паразита'. CierieHb доминантности признака рассчитана по Д. Брюбейкеру(196б). Типы изменчивое!и устойчивости растений томата к фитофго-

розу определяли но II.Ф. Рокицкому (1974, 1976). Статистическая обработк, опытных данных проводилась по общепринятым методикам (Стрелков, 1966 Доспехов, 1979) и с использованием пакета статистических програм»

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

ИЗУ ЧЕНИЕ НАИБОЛЕЕ РАСПРОСТРАНЕННЫХ И ВРЕДОНОСНЫХ БОЛЕЗНЕЙ ТОМАТА ОТКРЫТОГО Г РУНТА В НЕЧЕРНОЗЕМНОЙ ЗОНЕ За годы проведения исследований наблюдались контрастные метеоуслови! (рис. 1) для роста и развития культуры томата и возбудителей болезней, которь* хорошо отражали нестабильность климатических факторов зоны и позволили но лучить объективные выводы по всем разделам исследований.

□ Температура □ Влажность В Осад«

Рис.1.Среднегодовые метеоусловия в годы проведения исследования. В селекции томата на устойчивость к болезням необходимо учитывать мест ную фитопатологическую ситуацию (рис. 2).

| о »»и офт уроз вСапториоз о Альтернариоз

Рис.. ? Степень развития грибных патогенов, вызывающих листовые пятнистости томата в открытом грунте &пифитотийной зоны Нечерноземной полосы России.

Основными иатогенами, вызывающими листовые пятнистости томата в открытом грунте и способные мри благоприятных для развития условиях нанести большой ущерб урожаю - это фитофтороз, септориоз и альтернариоз. По нашим наблюдениям наиболее вредоносным заболеванием является фитофтороз; септориоз и альтернариоз проявляются ежегодно, но с меньшей степенью развития.

Фитофтороз.

Производству томата во всех странах их возделывания большой ущерб наносит фитофтороз, возбудшелем которою является гриб РЬ. шГеь1аш. При эпифито-гийном развитии снижает урожайность на 60-100%. Усиление агрессивности популяции накиена при увеличении доли расы Т1 в годы с эпифитотийным развитием фитофтороза приводит к резкому снижению количества относительно устойчивых образцов и нарастанию процента растений с более высокой степенью развития болезни (рис. 3).

□ о

Вда 10

□ до 20

□ до SO Ядо 75 Q>75 ВТо

ат1

1 И III учеты

№с.3.Динамика нарастания поражения образцов томата при эпифитотий-ном развитии фитофтсрсаа. По оси абсцисс - процент развития 6ол=ени ( О-ЮОЧ) , по оси ординат - процент порауенннх образцов и процентное содержание- рас в популяции;

Расовый состав популяции возбудителя фитофтороза. У сортов томата обнаружено 3 гена устойчивости Phi (Gallegly,Marvel,1955); Phß (Балашова, 1976) и Ph2 (Goodwin et al., 1995). Как и в случае с картофельными расами взаимодействие между томатами и Ph.infestans происходит но принципу "ген на ген". Раса То заражает сорта томата без Pill гена, раса Т1 заражает сорта с геном Phi. По литературным данным существует и раса Т2 . поражает сорт Câline с геном Ph2. Система обозначения тома(пых рас была предложена в 1955 году Gallegly, Marvel, а гест-сортимент для идешификации рас То и Т1 - (Wilson, Gallegly, 1955).

Па расы То и Т1 дифференциально реагируют только листья. Плоды не обнаруживаю! такой реакции и не используются для идентификации рас. Это относится ко всем существующим ныне шкалам дифференциаторов. В нашей стране наиболее широко используется, так называемый, канадский набор тест - растений. Существуют и другие наборы (Эгерт, 1969; Суханова, 1971; Балашова, 1979).

Нами разработан сокращенный набор дифференциаторов, на основе которого был разработан экс пресс-moi од определения cocí ana, динамики рас популяции фитофторы. Базой для его создания послужил метод Л.Ф.Михайловой и К.В.Квитко(1970) с модификациями Ю.Т.Дьякова и Л.М.Суирун (1984). Суть метода заключав 1ся в нанесении с помощью пульверизатора на "газон" из листьев сортов -дифференциаторов (Талалихин18б и ОттаваЗО), находящихся во влажной камере , суспензии зооспор изоляшн (пораженные фитофторозом листья, плоды томата собирали накануне дня дифференциации и выдерживали в условиях влажной камеры при температуре до 18...20° С не менее 12 часов) из расчета 1 спора на 1 кв.см площади газона. Учет проводят при нервом появлении пятен на "газоне" листьев восприимчивого сорта: здесь проявятся расы То и Т1 (100%), на газоне с листьев устойчивого copra - только раса Т1 (% расы Т1). Разница между количеством пятен на восприимчивом и устойчивом сортах — это процент расы То в популяции Pli. infestans. Корреляция между данными, полученными при изучении популяции по признаку вирулентности стандартным и данным методами составил г=0,695 (табл. 1).

Таблица 1

Схема иденшфикации томатных рас фитофторы

Дифференциатор Генотии Реакция на расы

дифференциатора То TI

Огтава 30 Ph 1 Phf3 R т

Талалихин 186 Ph S ■ s

В России на картофеле обнаруживали почги исключительно расу То , на томате - в начале сезона преобладала То, а позднее - Т1 (Дьяков и др. 1975, 1994). В США на картофеле встречаются штаммы ноиатотенные к томатам, а также расы То, Т1 и Т2, а на томате преобладают Т1 и Т2 (Vartanian, Endo ,1985; Goodwin et al., 1995).

Систематическое изучение расового состава на томате проводилось нами в течение 1977... 1997 годов. За этот период но признаку вирулентности было проанализировано более 1000 моноконидиальных изолятов. Выявлено, что исследуемая популяция Pli. infestans содержит две расы, дифференциально реагирующие

с сортами томата: То и Т1. А но годам раса Т1 составляет ог 0 до 98 % природной популяции (10, 35) (табл. 2).

Таблица 2

Час юга вс тречаемост и рас в тома тной популяции

Годы Интенсивность развития болезни Количество штаммов Томатные расы (%) Сроки первого попвлешш болезни

То Т1 картофель томат

1977 Эиифитотия 70 3 97 5.07.

1978 Эпифитотия 36 42 58 22.07

1979 Эпифитотня 56 2 98 26.07

1980 Умеренное 25 69 31 15.07

1981 Умеренное 32 82 18 28.07

1982 Эпифи готия 72 33 67 11.07

1983 Умеренное 44 95 5 20.07

1986 Эиифитотия 41 44 56 24.07

1987 Умеренное 45 97 3 26.07

1988 Умеренное 118 65 35 19.07

1989 Умеренное 78 72 28 20.07

1990 Умеренное 80 52 48 12.07

1991 Умеренное 75 62 38 5.07

1992 Депрессивное 0 0 0 - -

1993 Умеренное 91 82 18 1.07

1994 Депрессивное 13 100 0 20.08

1995 Умеренное 85 96 4 15.08

1996 Эиифитотия 100 25 75 15.07

1997 Эпифитотия 80 15 85 1.07

Всего 1071

Фитофтороз на томате появлялся ежегодно и степень его вредоносности за-

висела от иогодно-климатических условий, расового состава популяции, наличия восприимчивых сортов и близости картофеля. Так, в 1992, 1994 годах наблюдалось депрессивное развитие болезни, вызванное сухим, жарким летом; популяция фитофторы представлена расой То. Эпифитотии повторяются периодически : 1977... 1979,1982, 1986, 1996, 1997 с преобладанием в составе популяции расы Т1 (табл. 2).

Замечено, что в годы с зпифитотийным развитием фитофтороза, сроки первого появления отмечаются на томате, что может говорить о существовании собственных источников возобновления томатной популяции, независимых от картофеля (табл. 2). Дьяков и др., (1993) предполагают, что источниками могут быть :■■ 1) тепличные подмосковные томаты; 2) томаты из южных районов; 3) ооспоры комбинации Т1 тои. -Т1 гарт. Вопросу возможности перезимовки РИ. тИ^ш посвящено много исследований, результаты которых весьма противоречивы (Никифорова, 1958; ТиткаЫееп, 1973; УшТашап, Воус1,1980; Епс1о,1985Ь и др.)

Возможность перезимовки возбудители фитифтороза томата. При перезимовке в зараженных листьях картофеля, в воздушном мицелии фитофторы были обнаружены ооегюры (Бордукова,1940). Эти ооспоры, как предполагают, имели партеногенетическое происхояедение. Дьяков (1992, 1994) писал, что ооспоры, как от скрещиваний между Al и А2, так и от самофсртилизации штаммов генерирует дополнительное разнообразие признаков Ph. iníestans , благодаря постмейогиче-ской рекомбинации генетическою материала, а также поддерживает это разнообразие в популяциях Ph .infesfaitó. Это особенно существенно для патогенности. Círoth и Roelfs (1987) показали, что большее разнообразие "пшеничных" рас Puccinia recóndita f.sp.lritici выявляется в половых популяциях, чем бесполых. Появление ооспор означает эволюционные изменения Ph. infestans, заключающееся в смещении гриба от r-стратегии к К-стратегии, вызванным увеличением сопротивления среды из-за селекции и/или системными фунгицидами.

Обнаружение в 1996 году в популяции фитофторы (выделенных с инфекционного участка ВНИИССОК) 3 самофертильных штаммов, способных образовывать in vitro ооспоры как с тестером Al, так и с тестером А2, а также и в монокультуре, обнаружение ооспор в гниющих плодах томат (Смирнов, 1996) побудило нас выяснить возможност ь образования покоящихся форм гриба in vivo в лабораторных условиях при искусственной инокуляции (в литературе таких данных мы не встречали). Для чюго в условиях пониженных температур (+10... 13° С) были инокулированы пасынки томата сорта ОттаваЗО путем погружения их в суспензию мицелия и конидий расы Т1, выделенной из плодов томата в конце вегетации (среднесуточная 1емпература воздуха последних двух декад сентября была т6° С). На 13 сутки пасынки начали увядать, незаряженный контроль был в нормальном состоянии. Визуальный осмотр показал наличие конидиального сноро-ношения на стеблях и нижних листьях пасынков. Микроскопироваиие соскобов с поверхности стеблей подтвердило наличие конидий и ооспор слабо желтоватого цвета. На срезах стеблей также были обнаружены ооспоры, причем, практически в каждом поле зрения. Они различались по диаметру: от 22 до 44 мкм. Поверхность оогоыня - неравномерно утолщена, оболочка - от Здо 5,5 мкм.

Изучение растительных остатков растений томата, перезимовавших на разной глубине (1986... 1988гг.), не выявило наличие в них жизнеспособного мицелия фитофторы, а были обнаружены только единичные ооспоры, которые после перезимовки в естественных условиях были более окрашены и , в основном, крупные, что, вероятнее всего, связано с ее i ест венным oí бором наиболее жизнеспособных. Такие ооспоры, вероятно, могут служить для возобновления инфекционного процесса.

Рис. 4 Зависимость частоты встречаемости расы Т1 фитофторы от глубины промерзания почвы.По оси ординат — частота встречаемости расы Т1 (%) и глубина промерзания почвы (см).

Анализ связи интенсивности развития болезни с глубиной промерзания ггочвы показал, что годам с депрессивным и умеренным развитием фитофтороза предшествовала большая глубина промерзания почвы, что естественно отрицательно сказывалось на запасах инфекции (рис. 4). А так как в популяции РЬ.Ы^апз в конце вегетации, как правило, преобладает раса 'П, то нам кажется лопрпплм, что именно для нее фактор промерзания является лимитирующим. Поэтому по годам, несмотря на более высокую конкурентоспособность расы Т1 фитофторы на томате по сравнению с расой То, в среднем за 20 лет, содержание обеих рас в популяции примерло одинаково: 57 и 43% соответственно (29).

Коэффициент корреляции между частотой встречаемости изолятов расы Т1 и глубиной промерзания почвы составляет г=-0,562+0,293. Обнаружение ооспор свидетельствует о том, чгго п популяции 141. ¡пГе.чтапБ идут сложные формообразовательные процессы, направленные на сохранение и совершенствование вида, его патогейных свойств, что согласуется с данными других авторов (Вягноуа е( а1. 1995, йЬаПоск РМзЛУ'М, БгепА е!а1.,1995).

Патогенные спойстпа "томатных" рас. Степень агрессивности изучали по продолжительности инкубационного периода, величине некроза, интенсивности споруляцни и инфекционной способности 10 штаммов гриба (по 5 из каждой расы). При одинаковой продолжительности инкубационного периода (3 дня) раса Т1 после внедрения в растение-хозяин активнее его колонизирует и формирует на листьях в-3-4 раза, а на плодах в 18 раз больше конидий по сравнению с расой То. Поскольку период развития у этой расы короче, она образует больше генераций, что согласуется с литературными данными (Суханова, 1971, Псарева, 1976).

Показателем высоких паразишческнх свойств расы Т1 служи! и тог факт, что ее мицелий распространяется далеко за пределы инфекционного пятна, количественное выражение разницы зависит 01 степени восприимчивости растения. По нашим наблюдениям раса Т1 не вызывает отмирание тканей на листьях восприимчивых сорIон на начальной сидии развития болезни и пораженные листья можно отличить от здоровых только по интенсивному налету спороношения как на нижней, так и на верхней поверхности листа. По данным Попковой (1974) клетки устойчивых клубней картофеля отмирают через 1-2 дня после заражения фитофторой, тогда как клетки восприимчивых клубней могут оставаться живыми до 3 недель. Способность образовывать спороношение на зеленой ткани растения - хозяина, видимо, может свидетельствовать о наличии некоторой степени облита тност и у расы Т1.

Нами показано, что при пассаже расы Т1 фитофторы на ломтиках картофеля паразитические свойства ее ослабевают, но она не элиминирует даже после 20 пассажей (речь идет о моноконидиальных, а не монозооспоровых изолятах). Так, раса То после 5 пассажей на ломтиках картофеля на 1 кв.см дает спороношение 2106 конидий, а раса Т1 - 410° .Таким образом, вирулентная раса характеризуется и более высокой агрессивностью на сортах без РЫена. Инокуляция томатными расами листьев сорта Талалихин 186 при различном количестве конидий в инфекционной капле показала более высокую инфекционную способность расы Т1 (34).

Измерение параметров конидий на отделенных листьях, различающихся по фитофто]юустойчивосги сортов томата, показало наличие тенденции к образованию более крупных конидий на всех сортах при инокуляции вирулентной расой Т1 и на восприимчивых — в пределах расы То (табл. 3).

Таблица 3

Морфомсгрия конидий "томатных " рас РИ. Ы^апас различающихся по

устойчивости сортов томата

Сорта Степень развития болезни, % Размеры конидии, мкм

Ши шна Длина

То Т1 То Т1 То Т1

18,5 19,25 26,4 31,4

Линия 31 37 49 (17,05*19,25) (18,7+20,35) (24,2+28,6) (29,2+33,55

19,8 21,45 30,25 36,9

№ 1498 48 70 (18,7-20,35) (20,6+22,3) (28,1+32,5) (34,2+37,1

1 'рунтовьш 17,6 20,35 36,3 36,3

Грибовошй 1180 50 72 (17,5+18,7) (19,25+20,09) (34,1+37,9) (34,7+38,5

22 5 22,6 32,5 ,, 32,45

Талалалихнн 186 78 95 (22,0:23,1) (22,0+23,1) (31,2+33,6) (31,35+33,5

НСР09, 0,8 1,1 3,2 3,8

При этом коэффициенты корреляции между степенью развития болезни и шириной конидии равен т=0,863, тогда как с длиной г^0,396 в пределах расы То фигофшры и т-0,951, г-0,126 — в пределах расы T?, соответственно. Эю явля-В1ся показателем усиления паразитических свойств патогена на чувствительных сортах и как следствие — образование большего количества крупных конидий. Г1о Новотельновой (1974) у Ph. infeslans конидии- разновозрастные. То есть зрелость конидий на восприимчивых copiax дос!игается раньше и, но видимому, связана с увеличением ширины конидий.

Лльтернариоч.

Возбудитель -Alternaría solani Yokes et. Grout(Sor.). Потери урожая прямо связаны с отмиранием листьев и поражением плодов. Обладая высокими адаптив-дыми свойствами: широкий температурный и влажностный диапазоны, , наличие гпороношения, способность поражать, кроме томата, картофель и другие пасленовые культуры, патоген представляет потенциальную опасность.

Возбудитель проявлялся почти ежегодно с различной степенью вредоносности (рис.2). В годы с сильным поражением пподов(1988, 1989, 1991, 1992) в популяции альтернариоза доминировали спороносящие изоляты. При слабом развитии Золезни (1986,1993,1994.1997гг.) в нолевых условиях на листьях наблюдали не-:гюроносящие пятна, а в культуре in vitro при хранении гриб образовывал различного рода покоящиеся структуры.

Наблюдения за развитием альтернариоза на томате показали, что форма проявления болезни в значительной степени зависит от гидротермических особенностей вегетационного периода. В годы, когда в течении вегетационного периода чередуются дождливые и сухие ( 1991, 1996), но теплые дни, наблюдается раннее поражение ботвы, положительная динамика развития болезни , пятна крупные, часто сливающиеся , вредоносность высокая. В пленочных теплицах первые признаки появляются в период выращивания рассады на семядольных листьях. В готы с сухим, жарким летом (1980 , 1987, 1994) развитие болезни шло медленно. Лльтернариозные пятна на листьях в такие годы - незначительные по общей площади и диаметру, сухие, коричневые с выраженной плотной концентрической зональностью.

Сенториоз.

Возбудитель - гриб Septoria lycopersici Speg., также как и в других регионах, юражаег листья, стебли, черешки, н в отдельные годы плоды, образуя пятна с се->ым центром и бурой каймой, в начале мелкие, округлые, потом сливающиеся, >езко ограниченные, с многочисленными темными точечными пикиидами на обе-(X сторонах листьев.

В наших условиях эта болезнь особенно вредоносна в годы с достаточно высокими легкими температурами и обильными осадками (1989, 1990, 1991,1993, 1994, 1995), вызывает преждевременное опадание листьев (34). Па рис. 2 видно, что степень развития септориоза на томате в открытом грунте колеблется по годам от 0 до 50% и в годы энифигогий может приводить к значительным потерям урожая.

СКРИНИНГ ИСХОДНОГО МАТЕРИАЛА И ВЫДЕЛЕНИЕ ИСТОЧНИКОВ УСТОЙЧИВОСТИ К ФИТОФТОРОЗУ

Иммунологические основы изучении исходного материала на

устойчивость к фитофторозу.

На основании результатов изучения расового состава Ph.infestans на томате и тенденции его изменения п течение вегетационного периода и по годам можно заключить, что для нашей зоны необходимы сорта с высоким уровнем горизонтальной устойчивости к фитофторозу, еще ценнее сочетание в сорте вертикальной и горизонтальной. Для достижения этой цели необходима детальная оценка имеющегося исходного и создаваемого материала на оба типа устойчивости, что и было положено нами в основу разработки методики создания инфекционного фона.

В настоящее время известны различные методы оценки и отбора томата на фитофтороустойчивость. Метод оценки и отбора путем инокуляции сеянцев томата эффективен для выявления вертикальной устойчивости (Ширко, Кузубова,1971; Алпагьев , Власова, Балашова, Скворцов«, Псарева, Гуркина, 1986). Сеянцы контрастных по устойчивости образцов при искусственной инокуляции расой Т1 фитофторы поражаются практически в одинаковой степени, что говорит о высокой восприимчивости растений на данном этане онтогенеза. Метод оценки фитофто-роустойчивости по отделенным листьям и плодам мы использовали как вспомогательный, дополняющий. В своей работе мы чаще всего ориентировались на результаты, полученные при использовании метода оценки и отбора в фазу 4-5 настоящих лист ьев, в фазу массового плодоношения, в конце вегетационного периода и на фоне естественного развития болезни.

Метод оценки по рассаде позволяет выявить вертикальную и определить уровень горизонтальной устойчивости при использовании константного материала и анализе расщепляющихся популяций, одновременно просмотреть большой объем селекционного материала и отбраковать восприимчивые генотипы или целые комбинации скрещивания до высадки в грунт, что значительно сокращает объем работы. Для этого нами создавался искусственный инфекционный фон в двух пленочных теплицах площадью по 150 кв.м и на специальном участке площадью 0,02 га, максимально удаленном от полей севооборота. При использова-

нии в качестве инфекционного материала смеси рас То и Т1 фитофторы создавался жесткий фон, в результате чего выбраковываются образцы с феногинической нормой реакции "устойчивость - толерантность" к расе То, которые мо1ут эффективно использоваться в годы с поздним появлением фигофтороза, а также в регионах, где эта болезнь не является лимитирующим фактором (табл. 4). Сохранение образцов с частичной устойчивостью к расе То необходимо и в связи с тем, что создание продуктивных сортов томата с вертикальной устойчивостью к фи-тофюрозу практически невозможно. Исходя из этого, для оценки и отбора фенотипов с нормой реакции '"устойчивость - толерантность" в расе То и "толерантность к расе Т1 мы применяли раздельную инокуляцию расами То и Т1 фитофторы.

Таблица 4

Влияние искусственного инфекционного фона (пленочные теплицы) на проявление признака устойчивости томата к фитофторозу (1990...1996)

Степень Смесь рас Раса Раса

развития То + г 1 То Т1

болезни, Кол 11 честно расте!иш, Количество растений, Количество растении,

% шт % шт % шт %

0,1-25,0 105 0,3 2554 37,2 1675 28,7

25,1-37,5 1545 3,8 1596 23,3 1070 18,4

37,6-50,0 9590 23,8 1537 22,4 1344 23,0

50,1-75,0 14120 35,0 1008 14,7 1275 21,9

75,1-100,0 14953 37,1 155 2,4 463 8,0

Всего 40313 100,0 6850 100,0 5827 100,0

Вторую инокуляцию и оценку проводили в фазу плодообразования; последний учет - в конце вегетации. В дополнение к искусстветгой инокуляции проводили оценку в условиях естественного развития болезней - возбудителей листовых пятпнсгостей. Отмечали сроки появления на сортах и учитывали степень нарастания болезни через 8-10 дней до конца вегетационного периода..

Проведение параллельной оценки на искусственном и естественном инфекционном фонах при соблюдении всех агротехнических приемов выращивания томата позволяет выявить потенциальные возможности настоящих и будущих сортов. учитывать сочетание основных форм проявления устойчивости и ее изменение в онтогенезе. При изучении наследования признака устойчивости к фитофторозу в качестве материнских компонентов использовали образцы, обладающие эпш признаком. Изучение гибридов Р1, 172, Р1ВС1 осуществляли в тепличных условиях на фойе искусственной инокуляции расами То и Т1 фитофторы. При анализе брали 100 и более растений; 1*2 и 1;1ВС1 - 200-500 растений.

Известно, что устойчивость растений к биотическим факторам зависит в определенной мере от особенностей анатомического строения органов . При изуче-

нии частот ы расположения устьиц на нижнем эпидермисе у различающихся но устойчивости к фигофторозу образцов томата мы, в основном, получили результаты, подтверждающие данные других авшров ( Козак и др., 1984) о том, что устойчивые copra характеризуются меньшим числом устьиц на нижнем эпидермисе, чем восприимчивые ( габл.5).

Таблица 5

Частота расположения устьиц на нижнем эпидермисе листа у различающихся

по устойчивости к фитофторозу сортов томата, 1984 год

Наименование Балл поражения Ср. количество Количество

образца устьиц устьиц

в поле зрения па 1 кв. мм

(ув.40х7х2.5)

1186 2,0 4,8 115,9

StY1343 0,9 6,6 157,4

1200 2,5 6,8 162,7

1234 1,5 4,9 118,8

1330 "> 0 6,1 145,4

S1B1191 3.0 7,7 184,1

1205 2,5 6,4 152,9

1209 . ... 1,0 4,4 104,9

1208 1,0 4,7 113,0

1319 1.0 4,5 106,8

1221 1,5 4,6 110,2

1315 1,0 4,9 119,7

НСРои 1,7 21,1

Из данных таблицы 5 видно, что у №№ 1234 (Сага 2), 1208,1209 (Грот), 1319 (Линия 899-91), 1221 (Резерв), 1315 (Линия 897-91) частота расположения устьиц на нижнем эпидермисе листа достоверно меньше по сравнению с таковой у восприимчивого сорта (1191). У смородиновидного мутанта Линия 2 (1330) наблюдается более выраженная связь степени поражаемости фитофторозом и частотой расположения устьиц, чем у вишневидного томата Оттава 30 (1343); возможно, сказывается воздействие у-облучения, в результате чего появляются новые свойства, в том числе, и анатомо-морфологические ,более близкие с культурными томатами. Коэффициент корреляции между степенью поражения образцов и количеством устьиц г= - 0,69710,216.

13 годы с поздним развитием фитофтороза наиболее скороспелые формы томата на поражаются. Мы, как и другие исследователи, считаем перспективным использование явления "ухода" скороспелых сортов от поражения фитофторозом. Показана зависимость между степенью развития болезни и показателями: индексом раннеспелости, содержанием сухого вещества, витамина С, сахарокислотным коэффициентом (табл. 6). Мы считаем, что эти взаимосвязи необходимо учиты-

вать при проведении предварительных комплексных оценок исходных и селекционных форм томата.

Таблица 6

Коэффициенты корреляции между степенью поражения фитофторозом и хозяйственно-ценными признаками томата

Индекс ришн'спелостн, % Содержание сухого н-ва, % Витамин С, мг% Сахарно- кислотный коэффициент

Степень развития болезни ,'Jó -0,516 ±0,247 - 0,345 ± ОД 20 - 0,850 ± 0,236 - 0,794 ± 0,272

Открываются значительные перспективы использования гаметной селекции для получения устойчивых сортов томата к грибным патогенам. Как показали исследования, проведенные под руководством А.В.Алнатьева (1972... 1974гг.) на примере системы томат - Ph.infestans , в F1 образуется большее количество растений с признаками устойчивости к фитофторозу того родительского компонента, гаметофит которого в момент скрещивания находится в более жизнеспособном состоянии (1982). Группа авторов (Мелиян и др., 1984) предложили метод пыльцевой селекции растений на устойчивость к фитопатогенам на примере системы томат - Alternaría solani. Разработана методика технологии пыльцевой селекции картофеля на устойчивость к фитофторозу (Чумакова, Балашова, Бочарникова и др., 1997). Нами при изучении действия на срезанные соцветия томата культу-рального фильтрата возбудителя фитофтороза было показано влияние метаболитов патогена на жизнеспособность пыльцы на различных этапах органогенеза томата, начиная с пятого (фаза 4-5 настоящих листьев — этап формирования покровных генеративных органов цветка, но Полумордвиновой И.В., 1964).

Изучение исходного материала на устойчивость к фитофторозу.

За годы исследований по признаку фитофтороустойчивости изучен обширный материал, включающий свыше 4800 образцов томата различного генетико-географического происхождения: из коллекции ВНИИР им, Н.И.Вавилова, у- мутанты смородииовидного томата из МоВИР, образцы селекционных учреждений Молдавии, Белоруссии, Украины. Основные исследования проводились на селекционном материале лаборатории селекции и семеноводства пасленовых культур ВНИИССОК (селекционер Скворцова Р.В.).

Из данных таблицы 7 видно, что высоким уровнем горизонтальной устойчивости обладают около 14 % от числа изученных. В эту группу вошли мелкоплодные (масса плодов 5-30 г) мутантные линии смородииовидного томата, полученные при хроническом облучении на у- поле МоВИР: 2, 31, 30, 29, 24, 28, 37 из 17 изученных; т 201 образца селекции БелНИИКПО: СК-105, 102, 107, 612 , 615;

из 27 маркерных мутантов и copra Ннегру (МолдНИИСХ): Мо-46 "Ph" и Нистру (8, 12, 13,). Дикий томат смородиновидный Lycopersicon Subsp. pimpinellifolium Brezh.; кистевидный - var.racemigerum; полукультурный: нишненидный, грушевидный и сливовидный поражались на жестком естественном фоне и при искусственной инокуляции. Сильно поражался паслен птичий. Высоким уровнем горизонтальной устойчивости обладали волосистый томат (L.hirsutum Humb.Bonp.-вр.кат.2021), L.pimp¡nell¡fol¡uin(Bp.6366), а также образцы вишневидного томата Оттава 30 и ОпаваЗ 1 (8).

Таблица 7

Фитонатшогическая характеристика исходного материала но признаку устойчивости к фиюфгорозу (искусственный инфекционный фон,1976... 1997 гг.)

Степень устойчивости

Относительно устойчивые Слабовоспршшчивые Сред не восприимчивые Восприимчивые Всего

Степень развитии _5оле>нн,(%)

0,1-25,0 25,1-37,5 37,6-50,0 50,1-100

Количество образцов, шт

672 207 1346 2621 4846

Процент от числа тучепных

13,8 4,3 27,8 54,1 100

Сочетание методов гибридизации и индуцированного мутагенеза увеличивает формообразовательные возможности растений. Так, семена гибридов F5 (ОггаваЗО х Патриот2170), F5 (ОттаваЗО х ВкусныйЗ) и сорта томата Патриог 2170 были обработаны 0,05% мутагеном нитрозоэтилмочевиной в течение 18-20 часов. Спектр рекомбинаций у гибридов гораздо шире но сравнению с сортом. Под влиянием мутагенеза произошли количественные и качественные изменения признаков у гибридов: повышение уровня горизонтальной устойчивости среди ре-комбишштов гибрида М4 -5 (F50naBa30 х Патриот 2170) и других хозяйственно-цепных признаков. Непрерывный направленный отбор по линиям от индивидуальных растений до поздних поколений на искусственном и естественном инфекционным фонах способствовал закреплению признаки фитофтороустойчиво-сти(13).

Сочетание горизонтальной устойчивости со скороспелостью, крупноплодно-стью, отличными вкусовыми качествами позволило выделить оригинальную константную форму томата. По результатам конкурсного сортоиспытания в открытом грунте рекомбинашная линия M8(F50rraüa30 х Патриот2170) под названием Дубрава превзошла Sl-Грунтовый Грибовский 1180 по устойчивости и комплексу хозяйственно-ценных признаков. С 1997 года сорт включен в реестр селекционных достижений (15, 19). У мутанта Патриот 2170 также наблюдалось увеличение количества устойчивых генотипов по сравнению с исходными формами(13).

Применяя тенетико-физиологический метод гибридизации, основанный на использовании разновозрастноеги генеративных органов родительских компонентов Оттава 30 х Грунтовый Грибовский 1180, в момент скрещивания (Алнатьев, Чоладзе,1974) в сочетании с непрерывным направленным отбором в каждой последующей генерации в разные фазы роста и развития растений по признаку фи-тофтороустойчивости на искусственном и естественном инфекционных фонах, был создан сорт томата Грот(2, 22).

Ежегодная выбраковка восприимчивых фенотипов на жестком инфекционном фоне позволила поддерживать определенный уровень горизонтальной устойчивости. Так, при учете пораженное™ сортов на искусственном инфекционном фоне было отмечено, что у сорта Грот на конец вегетации было 76,8% здоровых плодов, тогда как у Талалихина 186 осталось всего 15,3%(10).

Наблюдение за распространением фитофтороза в модельных полевых опытах, где источником инфекции ( искусственная инокуляция одинаковым количеством инфекционного материала) были:1) восприимчивый сорт томата Талалихин 186, 2) восприимчивый сорт картофеля и 3) сорт Грот, показали , что наибольшая начальная скорость распространения инфекции была в варианте 1, наибольшая окончательная скорость - в вариант« 2 (подтверждение литературных данных о значении картофеля, как мощного источника инфекции для томага, и наоборот); в варианте 3 - обе скорости были низкими (рис. 5).

рис. 'з Скорость распространения фитофтороза на различающихся по устойчивости сортах томата. По оси ординат - количество инфекционные пя-•ген.

Это подтверждает наличие высокого уровня горизонтальной устойчивости у сорта Грот. В данном сорте достигнуто сочетание высокой устойчивости к расе То фитофторы и толерантности к расе Т1.

Сорт томата Грот превосходит по устойчивости 81 Грунтовый Грибовский 1180 в 1,9 раза, а 81 В Талалихин 186 -в 2,7(22) и -зарегистрирован в Генколлекции ВИРа, а с 1994 года включен в реестр селекционных достижений, допущенных к использованию и служит генетическим источником устойчивости для получения гибридов с данным признаком (18, 30) (табл.8).

Таблица 8

Иммунологическая оценка источников устойчивости к расам фитофторы (искуссттенный инфекционный фон, 1992 ... 1995 гг.)

Наименование

Степень развитии болезни , %

■Пига.и

То

II

Плоды

То

П

St В - Талалихин 186 St У - Оттава - 30 1'рог

Лшшя 897-91 Линия 899-91 Сага 1 Сага 2

НСР0«

50,0 0 25,0 20,0 25,0 12,5 7,5 7,4

95,0 12,5 45,0 37,5 45,0 47,5 25,0 12,7

50,0 12,5 30,0 25,0 25,0 37,5 25,0 8,9

95,0 37,5 45,0 25,0 37,5. 37,5 37,5 10,2

Методом гибридизации с привлечением полукультурных и вишневидных форм томата с последующими индивидуальными отборами на фоне искусственной инокуляции расами То и Т1 фитофторы были получены линии 897-91 и 89991, которые в дальнейшем были зарегистрированы в ВИРе как источники фитоф-тороустошшвости (20, 21). Линии 897-91, 899-91 обладают удовлетворительным уровнем горизонтальной устойчивости (табл. 8). На их основе с привлечением сортов различного пколого-географического происхождения получены гибриды и линии, характеризующиеся высокой выносливостью к фитофторозу (32, 36).

На рисунке 6 представлено распределение биотипов растений гибридов по устойчивости к расе Т1 фитофторы с одинаковым средним баллом поражения до 1,5 (небольшие пятна со слабым спороношением) и восприимчивого сорта (средний балл поражения 3,5). Наглядно видно, что у гибридов 1020, 1023 и 1079 варьирование признака фитофтороустойчивости выражено сильнее, чем у восприимчивого стандарта. Поэтому, анализ распределения биотипов селекционных образцов и гибридов томата с одинаковым средним баллом поражения дает, возможность более направленно вести селекционный процесс. Используя в качестве источников признака фитофтороустойчивости сорта Грот, Мутант УФ, Mini rose, Оттава 50, Оттава 46, Линий 897-91, 899-91 были созданы сорта Сага 1 и Сага 2, внесенные в книгу "Паспорта доноров хозяйственно-ценных признаков с.-х. культур, созданных в 1993 году" (24, 25).

Рис. 6 Распределение биотипов гибридов томата и сорта Талалихин 106 по устойчивости к расе Т1 фитофторы. По оси абсцисс - балл поражения; по оси ординат - частота встречаемости (%) .

ХАРАКТЕР НАСЛЕДОВАНИЯ УСТОЙЧИВОСТИ К ФИТОФТОРОЗУ Знание закономерностей изменчивости и наследования качественных и количественных признаков в первом поколении гибридов- непременное условие обоснованной селекционной программы. Высокая изменчивость характерная для образцов с полевой устойчивостью, определяет меньшую поражаемость растений в условиях инфекционного фона (Жучспко, 1973).

Генетическую изменчивость в общей вариабельности признака определяли по коэффициенту регрессии между фенотипами родственных групп с помощью дисперсионного анализа. Для характеристики наследования признака в первом поколении гибридов наиболее широко используемым показателем служит степень доминантности (Гриффинг,1956;Фи1иер,1963; Брюйбейкер,1966; Жученко,1973).

Для выяснения наследования устойчивости к расам То и Т1 фитофторы у выделенных нами образцов было изучено 20 гибридов Р1. Показано, что при па-следовании устойчивости к фнтофгорозу в созданных формах томата преобладающими были явления гетерозиса, доминирование устойчивости и промежуточное наследование, что указывает на зависимость характера генетического контроля признака в К1 ог родительских компонентов(табл.9, 10) (29). В гибридах от скрещивания Линий 899-91(1134, 1135), 897-91(1136, 1137) с Сибирским скороспелым' 1450 и Барнаульским консервным наблюдалась различная степень доминирования признака фитофтороустойчпвости к обеим расам по листьям и плодам (табл. 10).

Таблица 9

Иммунологическая характеристика устойчивости листьев и плодов к расам фи шфторы у гибридов !•' 1 томата (лабораторная оценка, 1992... 1993 г г.)

Номер гибриде F1 Масса плода, г Балл поражении

листья плоды

раса То раса Т1 раса То раса Т1

- 1.1 ' Р1 1*2 1<1 Р Г2 Р1 1*2 и Р1 Р2

1134 50-80 0,1 1,0 2,7 1,8 2,0 3,0 1,0 0,8 2,8 1,5 1,5 3,1

1135 60 1,4 1,0 2,5 1,7 2,0 3,3 0,8 0,8 1,1 1,0 1,5 1,9

1136 80-100 1Д 1,0 2,7 М 1,5 3,0 1,3 0,5 2,5 1,0 1,4 3,1

1137 60 1,2 1,0 2,0 1,5 1,5 3,3 1,0 0,5 1,1 1,0 1,4 1,9

St 2,4 3,0 2,0 2,5

St В 3,2 3,7 2,5 3,5

sty 0 1,5 1,3 3,4

У - Оттава 30; PI, Р2 - родительские ком-

- Гр. Грибовскнй 1180; 81В - Талатпшш 186; 81 нонситы скрещивания. , ,

Большое число комбинаций скрещивания (13 из 20), проявивших гетерозис, указывает так же, по нашему мнению, на то, что наследование устойчивости к фи-тофторозу в данной группе сорт ообразцов идет по типу горизонтальной устойчивости, обусловленной комбинированным действием многих генов(29).

Таблица 10

Наследование признака устойчивости к расам То и Т1 у гибридов Р1 томата (1992... 1993гг.)

Номер гибрида Степень доминантностн hp

листья плоды

То Т1 То Т1

1134 2,0 I,4 0,8 1,1

1135 0,2 1,5 1,0 3,5

1136 0,9 1,2 0,2 1,5 !

1137 0,6 1,0 1,0 2,6

При скрещивании Линии 899-91 с восприимчивым к фитофторозу сортом Сибирский скороспелый 1450 (980...984) в F1 наблюдалось преобладание устойчивых и толерантных фенотипов (в среднем 1 : 1,5) в пределах расы То (табл. 11). В F1 (Линия 899-91 х Барнаульский консервный) (985... 1003), в основном, кроме 991, наблюдалось увеличение доли толерантных фенотипов (в среднем 1:7,9:1,1). В пределах расы Т1 в нервом варианте скрещивания частота встречаемости устойчивых, толерантных, восприимчивых - в соотношении 3,6:15,4:1 ; во втором варианте скрещивания - соотношение 1,5:22,5:1, что говорит о наличии в этой комбинации высокого уровня генетически обусловленной устойчивости к расе То и толерантности к расе Т1 фитофторы (табл.11).

Таблица 11

Частот встречаемости феношпои растений но признаку устойчивости в Р1 к расам фитофторы (искусственный инфекционный фон, 1993... 1994гг.)

Номер гибрида_

Среднее (980...984) Среднее (985...1003)

Частота встречаемости фенотипов

^Устойчив. 0.40 0,10

1,0

1 олерант. 0,60 0,79

Воснршшч.

0,11 1,0

УСТОЙЧИВ

0.18 0,06

0,40

Т1

Толераш

0,77 0,90

0,60

Восиршмч.

0,05 0,04 1,0

81 В- сорт 'Галалихнн 186 81У - сорт Оттава 30

При беккроссировании гибридов Р1, полученных от скрещивания Линии 89791 х Ирис материнской формой , взятой в качестве источника фигофтороустой-чивости, наблюдалось увеличение доли устойчивых фенотипов у 930,931,933 к расе То (3:5:1) и у 928, 929, 930- к расе Т1 (5:2:1) (табл.12).

Таблица 12

Частота встречаемости фенотипов растений по признаку устойчивости в Пцс1 к расам То и Т1 фитофторы (искусственный инфекционный фон, 1993... 1994 гг.)

Номер гибрида

Среднее (928...93: Среднее (934...93' Среднее (941...943) Среднее (944...951)

У 81 В

Частота встречаемости фенотипов

То Т1

Устойчив Толеран II . Вг>С1фШ1МЧ. Устойчив Толераш. Воспршшч.

0.35 0.54 0.11 0.63 0.25 0.12

0.36 0.42 0.22 - 0.75 0.25

0.58 0.36 0.05 0.62 0.29 0.09

0.67 0.29 0.04 - 0.63 0.37

1.0 _ _ 0.40 0.60 _

- - 1.0 - - 1.0

8113- сорт Талалихин 186 81 У - сорт Оггава 30

Скрещивание этого же гибрида с отцовским компонентом (934...939) привело к изменению соотношения фенотипов в популяции беккросса по отношению к расе Т1(0:3:1): наблюдалась тенденция перехода фенотипов в труппу толерантных и восприимчивых (ЗЗ).На основании анализа гибридных популяций 928...939 выявлено, что линия 897-91, взятая в качестве источника устойчивости, положи-

тельно влияет на увеличение доли устойчивых и толерантных фенотипов к обеим расам фи тофторы (20).

При беккроссировании г ибридов F1 ( Грот х Mini rose) (оба компонента скрещивания обладают относительной устойчивостью к фигофторозу) материнским компонентом (941...943), у преобладающего количества особей наблюдалась генетически обусловленная норма реакции "устойчивость и толерантность" по отношению к обеим расам фитофторы. Под влиянием отцовской формы (944...951) произошел сдвиг генешчески обусловленной нормы реакции в сторону признака "толерантность - восприимчивость" к расе Т1. Из данных таблицы 14 следует, что при скрещивании сортов с нормой реакции "устойчивость-толерантность" происходит усиление признака устойчивости и оба родителя эффективно передают признак устойчивости к расе То, а к расе Т1 - лучшими генетическими источниками признака горизонтальной устойчивости являются линия 897-91 и сорт Грот, как более адаптированные формы в наших природно-климатических условиях по сравнению с иностранными сортами Ирис и Мини роуз(31).

Расщепление гибридов томата в F2 и FIBcl на устойчивые, толерантные, средневосприимчивые при инокуляции расой То фитофторы в большинстве случаев не соответствовало признаку, контролирующему одним доминантным геном. В данных комбинациях скрещивания наблюдается наследование нормы реакции "устойчивост ь - толерантность".

В системе "F2, FIBcl- pacaTl" получены другое количество классов: устойчивые, толерантные, средневоснриимчивые, восприимчивые. При этом отчетливо обозначилась зависимость результатов гибридологического анализа от патогенных свойств расы Т1. Устойчивость к расе Т1 является сложным и колеблющимся в своем проявлении признаком. Появление в F2 рас тений, проявляющих устойчивость сходную с родительскими формами и растений промежуточного типа устойчивости, указывает на сложную генетическую обусловленность признака (29).

Беккроссирование гибрида компонентом с признаком фитофтороустойчиво-сти способст вует повышению количества толерантных особей в образце. Из данных таблицы 13 следует, что толерантность к расе То на уровне Оттавы 30 (St У) отмечена у гибридов 1010,1017,1018; высокий процент (83-97%) толерантных растений наблюдался во всех комбинациях скрещивания - к расе То; довольно высокий Процент (60-70%) выносливых к расе Т1 - у гибридов FIBcl 1010, 1013 (31).

Таблица 13

Процент толерашных растений в популяции i ибридов F1BC1 при искусственной инокуляции расами То и Т1 фитофторы (1993...1994 гг.)

Помер гибрида Сорт, гни гибрида Процент толерантных раст ений

раса То раса Т1

St У 100,0 80.0

St в 20,0 0

St 81,0 36,0

1010 F1BC1 100,0 68,4

1013 1-1ВС1 95,0 60,0

1014 F11JC1 97,0 31,5

1017 F1BC1 100,0 42,8

1018 F1BC1 100,0 36,0

Таким образом, генетически обусловленная устойчивость к расам То и Т1 фитофторы выявлена у гибридов F1, полученных от скрещивания выделенных источников устойчивости с сортами Грот, Ранница, Mini rose, Ирис, Сибирский Скороспелый 1450, Барнаульский Консервный, Грунтовый Г'рибовский 1180, Оттава 45, Оттава 50. В общей вариабельности признака устойчивости более 50% приходится на долю генетически обусловленной изменчивости у каждого из изученных гибридов F1, и это дает основание считать, что выделены генисточники фитофтороустой'гавости. Однако, наличие довольно высокого значения модифи-кационной изменчивости (в среднем около 30%) указанного признака говорит о необходимости постоянного иммунологического контроля уровня горизонтальной устойчивости расами То и Т1 фитофторы при селекции, а в производственных условиях повышать управляемыми факторами среды ( фунгициды, минеральное питание п т.д.).

Селекция томатя на групповую устойчивость.

Проблемы групповой и тем более комплексной устойчивости растений исследованы недостаточно. У возбудителя септориоза известны 2 расы гриба в Канаде и 3 - в США, установлен доминантный характер наследования устойчивости к ним ( F.Y.Ferrandino, W.N.Klmer,1992). Иммунных сортов к септориозу пока не обнаружено. Высокий уровень горизонтальной устойчивости выявлен у различных видов рода Lycopersicon ( Балашова Н.Н.,1979; Фарбер В.В., Власова З.А.,1988; J.C.Tn,1993). Среди культурных форм к септориозу выделены относительно устойчивые образцы (Авдеев К).И., 1982; Фарбер В.В., Власова Э.А.,1988; Демидов, 1986; Козак,1994).

Степень развития альтернариоза варьирует от 20 до 45% (26). Устойчивость к альтернариозу контролируется рецессивным геном, обнаруженным у сорта Devon surprise(C.M.Rick, L.Bntler, 1987 ), у сорта Campbell 33 и вшпневидньгх

форм (Авдеев Ю.И., 19Н2). В зависимости от источников устойчивости исследователи находят различную степень доминирования устойчивости к альтернариозу: от снерхдоминирования у гибридов L.racemigenmi , L.humboldtii ( Stancheva, Milanova, Sümiova,1990) до промежуточною наследования (Nach, Gardner, 1988). Среди культурных видов зарубежной и отечественной селекции имеются сорта с повышенной устойчивостью к альтернариозу (Жученко,1973; Балашова, 1979; Власова, 1980; Иванюк, 1981; Козак,1994 и др.).

.В связи с тем, что в зоне Нечерноземья наиболее вредоносным и часто повторяющимся заболеванием томата открытого грунта является фитофтороз, а сеп-гориоз и алыернариоз вредоносны в отдельные годы мы использовали селекционный материал с устойчивостью к фитофторозу. Для придания устойчивости к септориозу и альтернариозу были проведены скрещивания с сортами : Solymari -устойчивость к септориозу; Slava, Ермак, Fiesta, Pometa - устойчивость к альтернариозу и септориозу; Mini rose - устойчивость к фитофторозу и альтернариозу, рекомендуемые ВИР. Сорта и гибриды оценивали на естественном инфекционном фоне (34).

При селекции на групповую устойчивость необходимо учитывать характер взаимодействия патогенов in vitro и in vivo. Для выяснения взаимоотношений грибов in vitro пользовались методом агаровых блоков (Егоров Н.С., 1957). Возбудители фитофтороза, альтернариоза и септориоза выращивали на картофельно-глюкозном агаре. Взаимоотношение культур in vitro было оценено как индифферентное.

Для выяснения взаимоотношений между возбудителями фитофтороза и альтернариоза in vivo была проведена инокуляция сортов томата Грот и Slava ( сорта должны обладать относительной устойчивостью к испытуемым патогенам: Грот - с горизонтальной устойчивостью к фитофторозу, Slava - к альтернариозу) по вариантам: а)только инокулюмом Al.solani ; б) только инокулюмом Ph.infestans; в) одновременно инокулюмом Ph.infestans и Al.solani. Как показали результаты, при одновременном развитии на рассаде двух болезней -фитофтороза и альтернариоза - растения поражаются практически в той же степени, что и при инокуляции отдельными патогенами, но возникает трудность в симптоматике признаков болезни , особенно, при использовании расы Т1 фитофторы. Таким образом, заметного угнетения развития патогенов при одновременной инокуляции не было выявлено, но для практической селекции мы рекомендуем раздельную или ступенчатую инокуляцию (35). По данным Ьарткайте(1985) при совместном заражении томата альтернариозом, фитофторозом и кладоснориозом последний не проявляется.

По нашим наблюдениям ta развитием 'них патогеном в естественных условиях возбудители Moiyr поселяться на одном растении одновременно при наличии живой ткани, а алыерннрия - даже на фшофюрозных ня|нах плодов томаш. Ва-лашовой(1979) для большой труппы нолукультурных форм томата ( 104) был определен коэффициент корреляции между поражаемостыо образцов фитофгорозом и мозаикой, фиюфторозом и сенториозом, мозаикой и альтернариозом при естественном развитии болезней. Между поражаемое! ью фшофторочом и сенториозом наблюдается отрицательная корреляция (г^ -0,47+0,08). Одновременная инокуляция сои возбудителями сенгориоза, церкосиороза и иероноспороза признана нецелесообразной из-за снижения степени разви тия болезней по сравнению с от-дельными(Ващенко, 1996).

Следует отметить, что весь исходный и селекционный материал лаборатории селекции пасленовых культур ежегодно оценивался но устойчивости ко всем, имеющимся в течение вегетационного периода, патогенам, независимо от степени вредоносности, на естественном фоне. Эю позволяет контролировать фитопато-логическую обстановку, фенотипическое проявление макро- и микроэволюции, происходящей в системе патоген - растение-хозяин, а также своевременно и правильно выбирать тактику борьбы с болезнями в настоящее время и на перспективу.

При оценке на жестком естественном фоне по устойчивости к возбудителям листовых нятнистостей выделены 6 линий сорта Резерв, 10 линий сорта Грог, 3 линии сорта Гранд, 2 линии сорта Дубок, из коллекционных образцов : Solymari, Ottawa 30, Mini rose, L.peruvianum, L.esc.var.pimpinelliíblium, West Virginia 36, West Virginia 63. У 11 из 18 изученных гибридов F1, полученных от скрещивания фи-тофтороустойчивых образцов с образцами, обладающими устойчивостью к аль-тернариозу и сенториозу, в основном , преобладала норма реакции толерантность к трем иатогенам: 1031(Mini rose к Грот), 1032(Грот х Mini rose), 1033(Резерв х Сап» -1), 1034(Грот х Solymari), 1040(Кобзарь х Грот), 1041( WV 139-1-2-1-1-1 х Грот), 1042(WV 181-1-6-21 х Грот), 1043(Ермак х Грот), 1044(Слава х Грот). 1045( Слава х Mini rose), 1055( Solymari х Сага 1). Образцы, входящие в комбинации скрещивания , не уводили данные гибриды F1 в направлении ухудшения показателей устойчивост и к отдельным патогенам. Коэффициент корреляции между ио-ражаемостью гибридов фитофгорозом и сенториозом г-0.222, фитофторозом и альтернариозом г^0.353, сенториозом и альтернариозом г-0.99. У остальных гибридов F1 норма реакции "толерантность" к фиюфюрозу и альгернариозу сохранялась, а к сешории - варьировала oí толерашности до восприимчивости.

За период с 1989 по 1997 годы выделены константные образцы с нормо{ реакции "толерантность" к ipynne патогенов: фитофторозу, септориозу, альтер нариозу, обладающие, кроме того, рядом хозяйственно-ценных признаков : 1067 94, 1078-94, 1079-94, 1144-94 (Подготовлено к печати).

Факторы поддержании уровни горизонтальной устойчивости.

Химические средства. При использовании сортов с горизонтальной устой чивостью степени устойчивости часто недостаточно, чтобы удержать популяции паразита ниже экономического порога вредоносности. В этом случае необходим; химическая борьба. Стратегия применения химических средств защиты растенш должна быть ориентирована на максимальное использование селективно действующих препаратов и базироваться на трех основных критериях: своевре менности проведения мероприятий, экономической и экологической их целесо образности и степени избирательности действия препаратов. Поэтому в последнее время повышается интерес к комбинированным препаратам, составленным н основе синергизма, в связи с появлением резистентных штаммов патоген (Голышин, Маслова, 1996).

Целью изобретения являлось усиление фунгицидной активности состава борьбе с болезнями растений. Для первичного скрининга в лабораторных услови ях использовали метод "контактного проращивания" конидий Ph.infestans в сус пензии фунгицидов (Голышин, 1962). Для определения характера совместное действия использовали методику, предложенную Ворснуи и Пассом и разрабс танную далее Кулом с соавторами(Ки11 et.al.,1961; Голышин и др.,1964). Были пс добраны дозы фунгицидов при которых смесь вызывала полное подавление кони дий. Показано, что изученные компоненты смеси усиливают активность дру друга, проявляя высокий уровень с и н о р тети чети чес ко то эффекта. Далее следовал испытания in vivo (табл. 14). Растения roMaia сортов Талалихин 186, Штамбовы Алнатьева 905а (восприимчивые к фитофторозу) и Резерв (с уровнем горизот тальной устойчивости) и фазе рассады, в пленочной теплице опрыскивали вод ными суспензиями предложенных смесей и отдельными компонентами, после ч* го инокулировали водной суспензией конидий Ph.infestans (2,7 104 шт/ мл). Уче проводили при появлении первых признаков заболевания на необработанных ра< тений по 4-балльной шкале. Характер действия фунгицидов в смеси выражали к( эффициентом совместного действия (КСД), в соответствии с принятой методико (Попов, 1965). Значения КСД больше единицы означает наличие синергизма в см< си. Испу ганные составы обладают высоким фунгицидным действием в отнош* нии фитоф гороза томата на восприимчивых сортах и более высоким эффектом и сорте с горизонтальной'устойчивостью Резерв но сравнению с действием отдел]

ных препаратом, основанном на зннчтельном синерге1ическом эффекте компонентов. Уменьшение расхода нрепараюв на единицу площади при использовании их в смесях обеспечивает знпчиюльно меньшее накопление однотипных препаратов в урожае и во внешней среде, способствует улучшению санитарно-гигиенических условий труда. Предполагаемый суммарный экономический эффект составляет свыше 50 млн. руб. в год в ценах 1982 года.

Таблица 14

Фунгицидные свойства, коэффициешы совместного действия (КСД) полихо-ма и ридомила для фитофтороза томата на сорте Талалихин 186, Резерв, Штамбо-

вый Алиатьева 905а.

Препарат Концепт рация иод.в., % Развитие болезни, %

5 сутки 7 сутки 9 сутки

Эксп Расч КСД Эксп Расч КСД Эксп Расч КСД

Контроль, вода 0 004 0.004 0.001 0.001 _95.8_ 41.5 0.0 30.0 38.5 >100 98.5 80.0 0.0 62.5 100

Талалихин 186 Полнхом 80% Смесь; Полнхом 80% + Ридомил 25% (4:1) Рндомил 25% 75.5 >100

Резерв Полнхом 80% Смесь: Полнхом 80% + Рндомил 25% (4:1) Ридомил 25% 0 004 0.004 0.001 0 004 0.0 0.0 0.0 13 0 0.0 7.13 11.3 >100 56.0 0.0 10.0 28.3 >100

Штамбовый Ллншиьела905а

Полихом 80% 0.002 20.0 54.1

Смесь:

Полихом 80% i 0.002 0.0 12.5 >100 5.8 18.0 3.1

Рндомил 25% (1:1) 0.002

Рндомил 25% 0.002 9.1 10.8

Полихом 80% U.002 20.0 54.1

Смесь:

Полнхом 80% + 0 (.к 12 0.0 1.2 400 1.8 3.7 2.0

Рндомил 25% (1:2) 0 004

Ридомил 25% 0.004 0.8 2.5

Аналогичным образом были получены другие фунгицидные составы для

борьбы с грибными заболеваниями: фитофтороз томата, картофеля, нероноснороз лука, капусты, огурца, милдью винограда (а.с. 946031); (а.с.1111875); (а.с. 1112599); (а.с.1113920).

В последние годы созданы химические препараты с новыми свойствами на основе природных веществ. Использование иитастероидов физалиса в этом каче-

стве изучались рядом иоследоваюлей (Acsher,1980, 1981, 1987; Elliger, Waiss,1989 ) для возможной борьбы с вредителями с.-х. кулыур . Нами был апробирован э1 от подход для борьбы с фитофторозом. Проверка влияния сока физалиса, томата (восприимчивый и устойчивый к фитофторозу сорт) на прорастание конидий, используя метод "контактного проращивания" (таблица 15) показала, то сок физалиса достоверно подавлял прорастание конидий Pli.infestans in vitro.

Таблица 15

Влияние сока физалиса на прорастание конидий l'h.infestans .

Вариан i' Соотношение Средний процент

сок: вода прорастания конидии

1 контроль(вода) 86,2

2 физалис(1 : 1) 6,7

3 фнзалис(1 :2) 7,1

4 томат (Оттава 30; 1:1) 61,1

5 томат(Талалпх1Ш 186; 1: 1) 76,4

НСР 8,72 F факт. 133.57 F тсор. 2.7

Для оценки фунгицидного действия in vivo в лабораторных условиях на отделенные листья сорта Талалихин 186, разложенные нижней стороной вверх в кюветы, сплошным "газоном", наносили из пульверизатора отфильтрованный сок физалиса. Затем путем опрыскивания шюкулировали их водной суспензией конидий (около 20 тыс. в 1 мл) и помещали в камеры для сохранения высокой влажности воздуха (табл.16). Сок физалиса достоверно подавлял развитие болезни, т.е. обладал фунгицидной активностью по отношению к возбудителю фигофтороза.

Таблица 16

Влияние сока физалиса на развитие фитофтороза.

Соотношение (сок: вода)

физалис (1:1) Полшсарбацип 0,01% по д-в. + ОП Котроль(вода)

Средний процент развития болезни

10,4 5,3

76,8

_8,72 Г' факт. 115,4

Гтеор. 2,59

Таким образом, как созданные нами различные фунгяцидные составы, так и природные растительные вещества (фитопрепараты) могут с успехом использоваться для сохранения горизонтальной устойчивоеш у томата.

30

Выводы

1. Среди изученных образцов томата иммунных к фитофторозу не выявлено. Высоким уровнем горизонтальной устойчивости среди коллекционных образцов обладали: L.liirsulum ( 2021), L.esc.var.pinipinellifolium, L.esc.var.racemigeriim (5555), Ottawa 30, Ottawa 31, Оттава 50, Оттава 46, West Virginia acession 700, West Virginia 63, Red cherry ms/32, Red cherry 25/7, Mini rose; Мутант УФ (ВНИИССОК), Нистру(Молдова), радиомутанты смородиновидного томата Мо-ВИР -2, 31; CK-105, СК-102 (Беларусь); КУ-20, КУ-22.

2. В результате длительного наблюдения за изменчивостью расового состава возбудителя Ph. inlestans в условиях Подмосковья установлено, что исследуемая популяция содержит' дне расы То и 'П. Возникновение новых "томатных" рас не огмечено. Знифиштийное развитие наблюдается периодически , с преобладанием в популяции расы Т1.

3. Эсперимептально показана возможность образования ооспор у расы Т1 фитофторы в лабораторных условиях при искусственной инокуляции отделенных частей томата изолягами, выделенными в экстремальных для развития ]риба по температурному фактору условиях (низкие температуры).

4. Показано влияние промерзания почвы в зимний период, как природного фактора северных регионов, снижающего интенсивность развития фитофтороза.

5. Разработан метод создания ипфскцпонного фона для оценки фитофторо-устойчивости образцов томата, который включает: раздельный контроль устойчивости расами То и Т1 фитофторы; применение пленочных теплиц па изолированном участке для эффективной искусственной инокуляции и во избежание разноса инфекции; контролирование фитофтороустойчивости при естественном развитии болезни; контроль расового состава Ph.infestans с помощью разработанного нами экспресс-метода на сокращенном тест-наборе сортов - дифференциаторов.

6. На основе разработанных методов созданы генетические источники фитофтороустойчивости: copia Грот, Сага 1 и Сага 2; Линии 897-91 и 899-91, которые используются в селекционной работе. На основе Линии 899-91 получен сорт томата Гранд ( в ГСИ с 1993г.); на основе Саги 2 создан сорт томата Патрис (в ГСИ с 1996г.); линия 897-91 - родоначальник сорта Гея (в ГСИ с 1996г.)

7. При изучении характера наследования к фитофторозу у гибридов первого поколения преобладающими были явления гетерозиса, доминирование устойчивости и промежуточное наследование, что указывает' на зависимость характера генетического контроля признака от родительских компонентов, используемых в скрещиваниях.

8. При изучении характера взаимоотношений возбудителей фитофтороза, альтернариоза, септориоза in vitro и in vivo не было обнаружено заметного угнетения развития патогенов, но для практической селекции мы рекомендуем раздельную или ступенчатую инокуляцию. Групповой устойчивостью к возбудителям, вызывающим лнетовые пятнистости обладают линии томата 1064/94, 1078/94; 1079/94, 1144/94.

9. С целью сохранения горизонтальной устойчивости к фитофторозу в популяциях фитофтороустойчпвых сортов необходимо проводить оценку устойчивости

при искусственной инокуляции, а в производственных условиях повышать управляемыми факторами среды (фунгициды, минеральное питание и т.д.).

10. Ph.infestans является удобной моделью для получения фуигицидных смесей, выявления веществ растительного происхождения, обладающих выраженным фунгицидным действием. Полученные фунгицидные смеси обладают высокой активностью против фитофтороза томата и были успешно использованы в интегрированной системе защиты лука и огурца от иероноспороза.

Практические рекомендации

1. Селекция томата для открытого грунта в Нечерноземной зоне должна строиться с учетом генетически контролируемой устойчивости к фитофторозу.

2. При селекции томата на фитофтороустойчивость рекомендуем использовать разработанную нами методику создания инфекционного фона.

3. В качестве генисточников фитофтороустойчивости рекомендуем использовать созданный нами селекционный материал : сорта Грот, Сага-1, Сага-2. линии 897-91, 899-91.

4. При селекции на групповую устойчивость к листовым пятнистостям рекомендуем раздельную или ступенчатую инокуляцию; в качестве исходного материала использовать образцы с уровнем горизонтальной устойчивости к фитофторозу и насыщать их источниками устойчивости к альтернариозу и септориозу.

5. Уровень горизонтальной устойчивости в популяциях фитофтороусгой чивых сортов необходимо поддерживать управляемым» факторами среды (смест фунгицидов: а.с. №№ 946031, 1111275, 1112599, 1113920).

Список печатных работ

1. Результаты рабаш по селекции томата на устойчивость к фитофторозу (соавт Алпатьев A.B., Скворцова Р.В.)// Тез. Докладов У11 Всес. Совещания по иммунитет; с.-х. растений к болезням и вредителям. -Новосибирск, 1981. -с.430,

2. Селекция томата на устойчивость к фитофторозу (соавт. Алпатьев A.B., Сквор цова Р.В.)// Проблемы и пуги повышения устойчивости растений к экстремальны» условиям среды в связи с задачами селекции. -М., 1981. -Ч. 4. -С.90-91.

3. Авторское свидетельств 946031 от 23.03,82г. на "Фунгицидный состав дл! борт,бы с пероноспорозом лука и фитофторозом томатов" по заявке 3236292 а 8.01.81г-(соавт. Голышин ILM., Мошенцев Н.И.,Матвеев A.A., Ревенко Т.В., Ожига нова Л.Ю.)

4. Результаты работы по селекции сомата на устойчивость к фитофторозу (соавт Скворцова Р.В.// В сб.:Селекция на устойчивость к основным заболеваниям овощиы: культур. -М, 1984. -С.72-79.

5. Авторское свидетельство 1111275 от 03.05.84г. на "Фунгицидный состав" по за явке3414400 от 05.04.82г.(соавт. Голышин Н.М.)

6. Авторское свидетельство 1112599 ог 08.05.84г. па "Фунгицидный состав" по за явке 3424354 от 2.04.82г.(соавт. Голышин U.M.)

7. Авторское свидетельство 1113920 от 15.05.84г. на "Фунгицидный состав" и заявке 3.414434 от 05.04.82г.(соавт. Голышни Н.М.)

8. Оценка мугантных линий смородиновидного томата, диких видов и полукул! гурных разновидностей (соавт. Скворцова Р.В.) //Сб. Селекция овощных культур. -М 1984. В. 18. -с.49...54.

9. Оценка образцов томат но устойчивости к фитофторозу и хозяйственно-ценным признакам(соавт. Апнатьев A.B., Скворцона Р.II)// Типы устойчивости сортов с.-х. растений к болезням. -Догнува Лит.ССР,1984. -С.83.

Ю.Заключителынлй отчет "Создать и внедрить скороспелый сорт томата с урожайностью 35 т/га относительно устойчивый к фитофторозу". -N Госрегистрации 01820083052. -М., 1985. 40 c.(eoaur. Скворцова Р.В., Aianoa A.C., Ашатьев A.B.).

11.Методические указания по селекции томата на устойчивость к фитофторозу (соавт. Ашшьев A.B., Скворцова P.D.)// В сб. :Методические указания но селекции сорн>в и гибридов томата для открытого и защищенного грунта. -М., 1986.-c.36...45.

12.Селекция томата на устойчивость к фитофторозу (соавт. Алнатьев A.B., Скворцова Р.В.у/ VI 11 Всесоюзное совещание по иммунитету с.-х. растений к болезням п вредителям. -Рига , 1986. -С.75...76.

13.Индуцированный мутагенез и устойчивость к фитофторозу (соавт. Алнатьев A.B., Скворцова Р.В.)// В кн.:У1П Всесоюзное совещание но иммунитету с.-х. растений к болезням и вредителям. -Рига, 1986. -С.

14.Заключительный отчет "Создание высокоурожайного, высококачественного, устойчивого к болезням сорта физалиса для Нечерноземной зоны РСФСР. -N Госрегн-етрации 01820083053. -М., 1986. -С.27.(Соавт. Скворцова Р.В., Агапов АС., Алнатьев AB.)

15.Использование химического мутагенеза при создании сортов с повышенной устойчивостью к фитофторозу (соавт-. Ашатьев A.B., Скворцова Р.В.)//В кн.: Новые сорта, созданные методом химического мутагенеза. -М.,1988.-С. 79.. .81.

16.Болезни и вредители томата// Рекомендации но защите семеноводческих посевов овощных культур от болезней и вредителей. -М.,1989. -С.44... 52.

17.Ьолезни томата//Ж. Защита растений. -М., 1990, 3. -с.54...55.

18.Источник раннеспелости, дружности созревания и устойчивости к фитофторозу - сорт томата Грот, вр.к. 13793. 1991.(соавт. Скворцова Р.В., Агапов АС., Алпагьев AB.)

19.Источник раннеспелости, дружности созревания и устойчивости к фитофторозу-сорт томата Дубок, вр.к.13702. 1991.( соавт. Скворцова Р.В., Агапов АС., Алпатьев AB.)

20.Источник устойчивости к фитофторозу - линия томата 897-91, вр.к.,1992(соавт. Скворцова Р.В., Агапов A.C.).

21.Источник устойчивости к фито(])торозу - линия томата 899-91, вр.к.,1992.(соавт. Скворцова Р.В., Агапов АС.).

22.Эффективность создания скороспелых форм томата, обладающих устойчивостью к фитофторозу (соавт. Скворцова Р.В., Агапов АС.)// Селекция овощных культур. -М.Д993.-Т.32. -С.44...48.

23. Авторское евидетелье! во №6083 от 07.12.93г. на сорт Арго по заявке №8901902 от 14.11.88г.(соавт. Ашатьев AB., Агапов A.C., Скворцова Р.В., Юрьева Н.А, Ушаков ПЛ., Рубен Г.М.).

24.Источник устойчивости томата к фитофторозу Сага 1 (соавт. Скворцова Р.В., Агапов A.C.)// В кн. Паспорта доноров хоз.-цен. признаков с.-х. культур, созданных в 1993 г. »Санкт-Петербург, 1994.-С.18.

25.Источник устойчивости томата к фитофторозу Сага 2 (соавт. Скворцова Р.В., Агапов A.C., Федорова М.И.)//В кн. Паспорта доноров хоз.-цен. Признаков с.-х. культур, созданных в 1993 г. -Санкт-Петербург, 1994. -С. 19.

26. Подбор исходных форм томата дли oikpi.noio фунта с устойчивостью к альтер-нариозу (соавт. Пивоваров В.Ф., Мусаев Ф.Б., Скворцова Р.В.)//Сб.: Селекция овощных культур. -М., 1994. В.34. -С.78...80.

27.Методаческие указания но экологической селекции на устойчивость к болезням (соавт. Пивоваров В.Ф., Добруцкая E.V. , Мусаев Ф.Б. и Др.)// В сб. Методические указания по экологической селекции. -М.,1994. -С.

28.Авторское свидетельство №6474 от 11.04.94г. на сорт томата Мудрец по заявке №91022590 от 18.10.89г. (соавг. Агапов A.C., Щеглова Ю.Н.).

29.Наследование признака фитофгороустойчивости гибридами гомата(соавт Скворцова Р.В., Агапов АС.) //Сб.: Селекция овощных культур . -М.,1994.-Вып.34,-С.55...65

30.Авторское свидетельство №6473 от 11.04.94г. по заявке №9104577 от 27.11.90г. на сорттомага Гро1(еоав г. Скворцова Р.В., Алнатьев A.B., Агапов A.C.).

31. Генетическое разнообразие в популяции гибридов томата по устойчивости t расам То и Т1 фитофторы ( соавт. Скворцова Р.В.)// Сб.:Селекция овощных культур. ■ М.,1995. -Т.2.-С.110-121.

32.Особенности селекции томата на устойчивость к патогенам в средней полоа России (соавт. Скворцова Р.В.)//В сб.:"3ащига овогцебахчевых культур и картофеля о вредителей и боле шей".-Тирасполь, 1996. -С.

33.Изучение закономерностей наследования признака устойчивости к расам То г Т1 фитофторы у гибридов томага(еоавт. Скворцова Р.В.)// В сб.:3ащита растений i условиях формирования агропромышленного комплекса: экономика, эффективность экологичность. -Сашсг-Потсрбург, 1У95.-С.249.

34.Создание сортов томата с групповой устойчивостью к листовым пятнисто стям(еоавт. Скворцова Р.В.)// Защита растений в условиях формирования агропро мыпгленного комплекса: экономика, эффективность, экологичность. -С.-П., 1995.

35.Метода ческие основы создания исходного материала овощных культур и; групповую устойчивость к болезпям(соавт. Самохвалов АН., Тимипа Л.Т., Шкля] С.Н., Першипа Г.Ф., Рогачев Ю.Б., Ильюшенко И.А)//В сб.: Защит растений в уело виях формирования агропромышленного комплекса: экономика, эффективность, эко логичность.-С.-П.,1995.-С.245.

36.Фитофгороуегойчивые сорта и гибриды для открытого грунта (соавт. Скворцов; Р.В.)//Ж. Картофель и овощи. -М. 1997. №5. -С.

37.0еобенносгн проявления гетерозиса у гибридов томата первого поколения п раннеспелости и устойчивости к расам фитофторы(соавт. Скворцова Р.Ф.)//Кн. Гете розис с.-х. растений. -М.,1997. -С.144-150.

38. Авторское свидетельство №27742 от 15.04.97г. на сорт томата Дубрава, по за явке №9401288.

39. Авторское свидетельство №27744 от 15.04.97г. на сорт томата Челнок, по заявк №9401288.

40. Авторское свидетельство №27745 от 15.04.97г. на сорт томата Гном, по заявк №9401318.

С.249.