Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

Исходный материал для селекции и семеноводства репы японской в условиях Центрального Нечерноземья

ВАК РФ 06.01.05, Селекция и семеноводство

Автореферат диссертации по теме "Исходный материал для селекции и семеноводства репы японской в условиях Центрального Нечерноземья"

2 1 АПР 1588

На правах рукописи

СТЕПАНОВ Виктор Алексеевич

ИСХОДНЫЙ МАТЕРИАЛ ДЛЯ СЕЛЕКЦИИ И СЕМЕНОВОДСТВА РЕПЫ ЯПОНСКОЙ В УСЛОВИЯХ ЦЕНТРАЛЬНОГО НЕЧЕРНОЗЕМЬЯ

Специальность 06.01.05 — селекция и семеноводство

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук

МОСКВА — 1998

На правах рукописи

Степанов Енктор Алексеевич

ИСХОДНЫЙ МАТЕРИАЛ ДЛЯ СЕЛЕКЦИИ И СЕМЕНОЕОДСТЕА РЕПЫ ЯПОНСКОЙ В УСЛОВИЯХ ЦЕНТРАЛЬНОГО НЕЧЕРНОЗЕМЬЯ

Специальность 05.01.05 - селекция и семеноводство

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук

ШСКЕА-1998

гзбота выполнена в 1995-1995 гг.. во ВНИИ селекиип и свиж-воз?-

ТВа СВПП1ЯЧХ '' "Ь Т'

НаУЧНЫе ГУКОЕОДИТелН: ДОКТОр СеЛЬСКС'ХС'ЗЯЙСТЕеНЫХ НЭУК, ПрОфёООО'р,

чл.-корр. АН FM. Н. Н. Балашова, кандидат сельскохозяйственны:-: наук, с. н. с. М.С. Бунин.

Официальные оппоненты: доктор сельскохозяйственных наук, профессор, академик FACXH, Г. И. Тараканов, кандидат бнологшеских наук. с. н. с. H.A. Шшковз.

Ведущее учреждение - Всероссийский научно-исследовательский институт овощеводства.

Защита диссертации состоится . .1998г. в

в/.......час. на заседании диссертационного совета при ВНИИ селекции

и семеноводства овощных культур по адресу: 143080, Московская обл., Одинцовский р-он, п/о Лесной Городок, пос. ЕНИИССОК.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института.

Автореферат разослан. .А?.. ............1998 г.

Ученый секретарь диссертационного совета К 120.89.01-

доктор сельскохозяйственных наук В. А. Епихов

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность темы. Р'?пз японская является ценным и питательным овощем. содержащим в корнеплоде большее количество физиологически ак-гзны:: веществ и минеральны:: солей. Отличительной особенностью этой :-г/л1г:ры является то, что з пишу человека используются как корнеплоды, 751*: и галатные листья, богатые витамином "С" и каротином.

изной иг основных проблем при интродукции репы японской с целью ранневесеннего получения высококачественней продукции в открытом грунте является ее повышенная теплотребовательность и недостаточная адап-гированность к возделыванию в условиях Центрального Нечерноземья. Это вызывает необходимость разработки ускоренных методов и технологий по-аученга исходного материала для селекции.

При традиционных метода:'', селекции получение сорта или гибрида Р^., ,'стоичпесто к абиотическим фактора,? среды, достаточно длительный процесс, связанный с необходимостью оценки и отбора терморезистентных -'ОГ!! на'¡многочисленных фонах. Гаплоидная селекция значительно облегчает отбор нужных генов, позволяет существенно ускорить селекционный !роцесс. Бремя создания ноеых сортов и гомозиготных линий сокращается ? £-3 раза.

Важное место в ускорении селекционно-семеноводческого процесса вводится разработке наиболее эффективных технологий производства селенного материала, а также подбору благоприятной для каждого сорта 'конипи возделывания.

Цель и задачи исследований. Целью нашей работы являлись выделение 'еноисточников высокой продуктивности и качества из японской коллекции :ля создания устойчивого к пониженным температурам исходного материала ■епы японской и разработка способов семеноводства этой культуры. Для

достижения поставленной цели были оудеинуты следующие задачи.

1. изучить ГеНеТИЧеСКИе геО'.ТСЫ СеПЫ японской для селекции на продуктивность и качество.

2. Модифицировать методику определения жизнеспособности пыльце применительно к особенностям культуры.

5. Подобрать низкотемпературный режим для просаливания пыльны, позволяющий четко дифференцировать образцы и генотипы по степени относительной холодостойкости.

4. Провести оценку устойчивости к низкотемпературному стрессу генотипов по реакции пыльны и прорастающих семян.

5. Последовать влияние отбора устойчивых к пониженным температурам гаплогенотипов в гетерогенных популяциях пыльцы на качество образующегося спорофитного поколения.

5. Определить наиболее благоприятную акониту возделывания для получения высокого п стабильного урожая семян репы японской.

7. Изучить возможность применения рассадного способа получения семян на культуре репы японской.

Научная новизна исследований. В условиях Центрального Нечерноземья РФ впервые выполнены следующие научные исследования:

- выделены геноисточники важных селекционных и хозяйственно ценных признаков для создания исходного материала в целях селекции репы на высокую потенциальную продуктивность и качество;

- разработан оптимальный состав среды для .проращивания пыльцы репы японского подЕида, включающий 15' сахарозы, 0.5 агар-агара и остаточные количества борной кислоты;

- установлена тесная положительная корреляционная зависимость между признаками относительной холодостойкости по жизнеспособности пыльны и длине пыльцеЕых трубок при прорастании в стрессовых низкотем-

пературных условиях ;

- ОПОелелена геЗКШШ функционирующего м\'*ск~то гачетсфитз ВИДа Erassica гзрз L. на действие низких температур п разработаны параметры для отбора растении по показателям прорастания и роста пыльцевых тру-

■ показана возможность селекшщ репы японской по ыпкоогаметофиг/ гппг,'~'+т1Т'"

доказана эффективность отбора селекционно-пенных Форм пои воздействии на мужской гаметоФит низкотемпературного отоессз;

- установлены помологические и биологические особенности семенников репы японского подвида: увеличение числа побегов 2-5 порядков ветвления и замедленное развитие в условиях открытого грунта, повышение жизнеспособности пыльцы в теплице, ускорение онтогенетического развития при рассадном способе получения семян.

Практическая значимость работы. В результате изучения генетической коллекции репы японской Еыделены ценные геноисточники селекционных и хозяйственно-ценных признаков,, в т.ч. продуктивности и качества: N13, Hakuyou Fi, Гейша, Снегурочка, Tokyo Market,Nagasaki kokabu. (образцы мелкокорнеплодного типа - кокабу); Kornatsuna Sèisen, Tohoky Gurí in Debu, Tohoky Harurrii, N45, Kuromaru Komatsuna, Komatsuna Seisen,

На основе оценки устойчивости к низким температурам мужского га-метофита из сортопопуляцпи Гейша выделена форма 55 '94, которая стала исходным материалом для создания нового сорта Снегурочка.

Выделены геноисточники устойчивости к пониженным температурам: Петровская -l,lHakuycu Fi, Komatsuna Seisen, Kuromaru Komatsuna, Toho-ku Guriin Debu (по спорофиту); N13, Nagasaki kokabu, 55 94, 43/94 (no гаметофиту'i ; устойчивые как на гаметофитнсм, так и на спорофитном уровне, - Hakurei, Hakuetsu, Tohoku Harurni, Tohoku Eenitomi.

Е предела:-: листоеой разновидности Kornatsuna выделен образец Toho-ку Harumi, сочетающий в одно» генотипе гены продуктивности, скороспелости. качества и высокой экологической устойчиЕОсти.

Получен исходный материал, с высокой частотой встречаемости ус-тойчиеых к низкотемпературному стрессу генотипов методом отбора в сортовых популяциях по гаметофиту и методом гаметной селекции: номера 140, 158, 149, 151, 142, комбинации - Г2Х174, 15йл15Ш54л171.

Для ускорения семеноводства новых сортов репы японской разработан способ яровизации рассады, с помощью которого размножена часть селекционного и сортового материала.

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены на отчетных сессиях ЕНИИССОК (1993-1996 гг.), на юбилейной научной конференции, посвященной 75-летию ЕНИИССОК (1995г.), Международном симпозиуме " Гетерозис сельскохозяйственных растений" ( 1-5 декабря 1997г.),1-м Международном симпозиуме" НоЕые и нетрадиционные растения и перспективы их практического использования (1995г.}.

Публикации результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано 9 статьи и 2 методических указания (одно из них находится е печати:.

Обьем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на J.^.P. страницах машинописного текста, включает^йаблицы, .»^рисунков. Состоит из введения,.4.глав, выводов, рекомендаций селекционной практике, /.приложений. Список использованной литературы включае/^4наиме-ноЕанпй, е том числ^.4иностранных.

УСЛОВИЯ, МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Экспериментальные исследования проведены в 1993...1996гг., в лабораториях селекции и семеноводства столовач корнеплодов и -гаметной селекшш, на опытных полях и в теплица-: экспериментального хозяйства

ВНИИССОК.

В качестве объектов исследования использовалось более 130 образцов представителе!! вида Brassica rapa L., двух подводов!" rapa, japónica), 5 разновидностей( japónica, intermedia, alborosea, rossica, ko-rnatsuna). Лабораторные и полеЕые опыты проводили с учетом " Методических требований к закладке опытов, документации и отчетности в научно-исследовательской работе " (1987г.), изданной во ЕНИНСООК. Методологической основой для разработки методики определения жизнеспособности пыльиы явились работы Паушевой (1980), Голубинского (1974г.), а для методики оценки устойчивости растений к стрессовым температурам по мужскому гаметофпту и отбора холодостойких микроопор - Института Генетики АН РМ ( Кравченко, Лях, Тодераш и др., 1988; Кравченко, Лях, То-дераш и др.,■1990).

Жизнеспособность пыльцы определяли на модифицированной нами питательной среде, содержащей 15% сахарозы, 0.5'= агар-агара и остаточных количеств борной кислоты. Воздействие на мужской гаметофит низкими температура!,«и осуществляли на различных стадиях функционирования пыльцевого зерна сстадии зрелого пыльцевого зерна, прорастания пыльцы и роста пыльцевых трубок). Показатель холодостойкости пыльцы репы определяли, пользуясь формулой Кравченко ( 1990 г.),длину пыльцевой трубки - в единица:-', диаметра пыльцевого зерна, а холодостойкость образующегося спорофптного поколения в контрольны:-: и опытных вариантах - по методике, разработанной в ЕИР (1988г.) Биологическая повторнооть семенных растений по каждому варианту составила 10-15 растений.

Учет завязыЕаемости цветков проводили методом подсчета количества завязавшихся цветков от числа сформировавшихся. Семенную продуктивность плода определяли путем подсчета количества семян в исследуемых' стручках и вычисления среднего числа семян в стручке, а растения - ве-

"ггьз: MiT-r :-м.

"чет -Tv-ai репы японской проЕолплл весовым методом: учитывали тсЕ=рнке. недоразвитые. уродливые, треснувшие и больные растения. Е качестве контроля были приняты районированные сорта репы - Гейша к Петровская-1.

Биохимический анализ растений проводили общепринятыми методами: содержание аскорбиновой кислоты - по Liyppn, моно- и дпсанаров - по Ъг-ерп, сухое Еещество - по Ермакову, содержание нитратов определяли количественны:.! ионометрическпм методом (Ермаков, 1S55).

Статистические показатели, коэффициенты корреляции, дисперсион-кнй анализ вычисляли на 1Г-ЗЕМ с использованием пакета программ STATS-EAFHIC3 5.и.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ Изучение генетической коллекции репы японской

В процессе экспериментальной работы всего было изучено более 130 образцов репы японской. Морфологическое изучение японского подвида в условиях Центрального Нечерноземья Pi позволило не только установить большое генотипическое разнообразие форм, но и выделить присуще подвиду отличительные особенности. Он характеризуется прямостоячей листовой розеткой, преимущественно цельными листья»!.'! салатного типа, Малой погруженность?? корнеплода в почву, преобладающей белой окраской корнеплода и сочной нежной мякоть», отсутствием острого привкуса.

Е результате оценки продуктивности о-бразцов генетической коллекции репы японской в условиях зимних остекленных теплиц были выделены генотипы, превышающие контроль (Гейша): по урожайности - HIS1, Hakuyou Fi, товарности - Hakuyou Fi, ШЗ, средней массе товарного растения -Hakurei. -eivrvoio kokabo. Hakuyou F-:, Tokyo Market, N13, Tohoky aenito-pi, H'/nona kat'j; средней массе корнеплода - Hakuhok kokabu, Hakuyou

¿аблицз 1

Биохимический состав корнеплодов и листьев репы японского подвида в условиях гащикннс-го грунта. 1995-1997 гг

1 ! Наименование 1 I |Органы Сухое ве- i |Общий i ! питании i Нптра- i

| образца 1 |растения | i i дествоД | сахар Л 1С., МГУ i ! ТЫ МГ ' кг i

| Образцы ЛИСТОЕОГ о типа

i Kuromaru Komatsuna лист 5.99 0.24 53.44 4104 !

| Komatsuna Seisen лист 6.90 0.79 88.55 2590 i

i Tohoky Guriin Debu лист 7.29 1.19 64.24 3260 |

i Tohoky Harumi лист 6.68 0.92 ' 91.52 3260 |

i U45 лист 9.44 - 0.98 61.60 4104 |

! ' ¡146 лист 8.42 1.57 80.96 4104 • 1

| ивощная хризантема лист 4.85 0.55 26.40 2205 i

| Пекинская капуста

| • сорта Хибинская лист 3.67 0.55 33.09 3205 |

| Салат Московский

i парниковый лист 4.80 0.37 28.16 2906 !

Образцы корнеплодного типа

| Гейша лист 7.92 1.51 75.68 4527 i

| Гейша корнеплод 6.34 3.42 17.92 1802 1

| Снегурочка лист 9.01 1.19 79.20 4527 !

| Снегурочка корнеплод .6.56 3.34 18.80 1432 |

| Hakurei лист 10.95 1.44 93.28 3205 |

| Hakurei корнеплод 7.68 3.84 19.15 1606 |

! Петровская-1 корнеплод* 4.28 следы 28.17 8189 !

| Manchester Market о 5! 48 2.46 33.68 r,5u !

| Tokyo White Cross M 5.25 2.70 31.15 1295 i

| Tohoky Hakuun п 4.48 2.30 29.56 3260 |

| Haku'nok kokabu и 5.20 2.23 21.65 2592 |

j Hakuyou Ft It 6.37 3.68 24.99 2590 |

| Tokyo Market M 6.32 3.12 17.60 2057 |

1 Hakuetsu II 5.46 3.08 16.20 2308 i

! Nagasaki kokabu II 7.89 4.06 9.58 1246 |

1 Ml 3 M 6.31 3 22 15.84 2310 |

Примечание:, * товарные корнеплоды массой 8-1иг.

Характеристика образцов репы японской по комплексу хозяйственно-ценных признаков (1993-1996гг.).

Номера образцов

Признаки

1|2|3|4|Б16|7|819|101 111 12113114|15116|17|18|19120121

| Прямостоячая розетка листьев + + + + + |

| Рассеченность листа + + +

| Неглубокое погружение корнеплода в почву + + + + + + + + + + + + +

| Урожайность + + + + + + + + +

I Средняя масса товарного растения ( свыше 100 г для

| образцов корнеплодного и 35 г листового типов) + + + + + + + + + + + + + +|

| Товарность ( более 70 %) + + + + + + + + + + + +

I Средняя масса корнеплода (40 г и более) + + + + + + + |

| Отношение массы корнеплода к массе целого растения

| ( 0.40 и более) + + + + +

I Сухое вещество, более 6% в листьях + + + + + + + +

| более 6% в корнеплодах + + + + + + +

I Общий сахар, более 3% в корнеплодах + + + + + + +

| Витамин "С", более 60Х_в листьях + + + + + + + +

| более ЗОХ'в корнеплодах + +

| Низкое содержание нитратов, менее 3000 мг/кг

| в листьях +

| в корнеплодах I + + + + + + + + + + +

Примечание: I. жирным шрифтом выделены образцы листового типа, + - хозяйственно-ценные признаки,

II. наименование образцов: l.Kuromaru Komatsuna, 2.Komatsuna Seisen, 3.Tohoku Guriin Debu, 4.To-hoku Harum, 5.N45, 6.N45, 7.Гейша, 8.Снегурочка, 9.Hakurei, 10.Петровская-1, 11.Manchester Market, 12. Tokyo White Cross, 13. Tohoku Hakuuy, 14.Hakuhok kokabu, 15.Hakuyou Fi, 16. Tokio Market, 17.Hakuetsu, 18.Nagasaki kokabu, 19.N13, 2Q.Hynona kabu, 21.Tohoku Benitcmi. \

Fi, ¡US. üä?as3ki .kokebu, Hynona ksbu: соотношению когнеплола и листвы - Msncr.sster Merket. His, Hajssaki kokabu. Hynona kafcy.

Среди листовал Форм репы японской по урожайности, средней массе товарного растения и товарности были выделены сС-рагш: Ic-hoKy Harum. Tohoky Curl in Debu, П45.

Биохимический знзлив показал высокую питательную ценность интро-дуцированных образпсе репы японской. Установлено, что содержание 'основных компонентов - сухого вещества, Сахаров, аскорбиновой кислоты, нитратов зависит не'Только от генотипа, но и продуктовой части растения (листья, корнеплод). В листьях преобладает содержание аскорбиновой кислоты и нитратов, в корнеплодах - Сахаров (табл.1).

По содержанию сухого вещества в листьях выделились образцы Tohoky Guriin Debu, Н45, Гейша, Снегурочка, Hakurei, з в корнеплода:-: - Haku-rei, Nagasaki kokabu. Повышенное содержание Сахаров в корнеплода-: имели: Nagasaki kokabu, Hakuyou Fi, Hakurei, Гейша, Снегурочка; аскорбиновой кислоты в листьях - Kornatsuna Seisen, Tohoky Harurni, ¡'46, Гейша, Снегурочка, Hakurei, а в корнеплодах - Петровская-1, Manchester Market, Tokyo White Cross, Tohoky Hakuun.'

Пониженным накоплением нитратов в листьях отличились образцы: Kornatsuna Seisen, в корнеплодах - Гейша, Снегурочка, Hakurei, Manchester Market, Tokyo V'hite Cross, Mopsaki kokabu.

При оценке по комплексу хозяйственно-ценных признаков выделены ценны- комбинации признаков урожайности с рядом положительных признаков: Гейша, Снегурочка, HIS, Hakuyou Fi, Tokio Market, Kornatsuna Seisen, Tohoky ßuriin Debu, Tohoky Harurni, H45 (табл.2). Элементы технологии определения жизнеспособности пыльцы репы японской Изучение вида Er. гара L. показало, что значительное влияние на этот показатель оказывает, кроме экологических условий возделывания

CrменникоЕ. степень раскрытия генеративных органов цветка: пыльна, :'.'бранная п? раскрытых цветков и пыльников пеоед высыпание;.! ее имеет "амые высокие показатели жизнеспособности на питательной среде,

j становлено. что пыльца япг'НгК0'Г0' подвила наиболее ч'/вствительна к изменения1 концентрации' сяхзрозы имеет максимальную жизнеспособность только на "геле с 15'. концентрацией сахарозы, в то время как мужской гемеюсит европейского подвида хорсио прорастает на средах с 15-20' концентрацией сахарозы.

Предложены способы повышения однородности пыльцы и равномерности ее посева на среду путем смешивания мягкой кисточкой на предметном стекле в целях повышения достоверности результатов экспериментов; хранения препаратов е условиях отрицательных температур (-3-4иС).

Устойчивость мужского гамето$ита Brassica тара L. к пониженным температурам на стадии прорастания и роста пыльцевых трубок Полученные нами данные показывают, что мужской гаметофит вида Erassica rapa L. на стадии прорастания и роста пыльцевых трубок у ге-нотипое различной устойчивости характеризуется неоднозначной реакцией на действие низкотемпературного стресса. Определен дифференцирующий температурный фактор (+6иС), позволяющий четко различать образцы и генотипы по степени устойчивости мужского гаметофита к низким температурам.

Селекция холодостойких форм репы по мужскому гамето$иту в сортовых популяциях

Действие температурного фактора на прорастающую in vitro пыльцу показало/ что у большинства растений наблюдается снижение жизнеспособности пыльцы е опытных вариантах (табл.3).

Был; отмечено значимое превышение значении, опытных вариантов над контрольными v изучаемых F43. pf>5 'Гейша'1 F11S. Pl'ZO. Fl21, Р125 (На-

k':etsuj. г 156 -'Hakurei'. Подобные результаты наблюдались в опытах с пыльцой кукурузы •.Eardíni, Peder, 1975) и томата Кравченко, Лях, То-дераш и лр., 1958'. Авторы этих исследований.связывают увеличение жизнеспособности пыльцы при воздействии низких температур на мужской мпк-рогаметофит с ее дозариванием.

7 известного своей холодостойкостью на спорофитном уровне ссрто-образца Петровская-1 выявлена неадекватная реакция микрогаметофита на действие низких положительных температур.

Мы предполагаем, что действие стрессовой температуры на увеличение жизнеспособности пыльцы в опыте у вида Erassica rapa L. связано не только с дозариванием пыльцевых зерен, ■ но и стимуляцией холодом прорастания устойчивых микроспор, которое в последующих экспериментах подтверждается.

Из популяции образцов по признаку относительной холодостойкости по жизнеспособности пыльны выделены наиболее устойчивые формы: Р35, Р55, Р43, Р17, F77 (Гейша); Р189 (Петровская-!>; F1Ü5, Р105, Р115 (На-gasaki kokabu), а так же сортопопуляции Hakuetsu, Hakurei. Полученное семенное потомство у выделенных образцов было проанализировано на устойчивость к пониженным температурам методом холодного проращивания семян. Из них только у Р17 и F77 отмечен низкий показатель этого параметра, у остальных же она находилась в пределах 50-70i.

Статистический анализ показал, что средняя скорость пыльцевой трубки по сравнению с жизнеспособностью наиболее информативный показатель , который точнее определяет устойчивость мужского гаметофита к стрессовым пониженным температурам. ."Стимулирующий эффект" у этого признака в результате действия селективного фактора проявляется в меньшей степени.

Методом корреляционного анализа доказана достоверная тесная поло-

- iV -

жительная свягь' между признаками относительной холодостойкости по жизнеспособности пыльцы и по длине пыльцевой трубки. Степень сопряженнос-

Таблица 3.

Действие температуры на прорастаемость пыльцы in vitro различных образцов репы, 1994-1995Г.

1 Номер i растения Жизнеспособность in vitro Холодостойкость,,I

при 2u°C (контроль) при 6°C

Петровская-1

j Fl 88 24.0 + 3. В 9.4 ± 2 .1 39.2

¡ Р'189 15.1 ± 0.8 14.4 + 1 .9 89.4

1 Fl 90 58.8 + 5.7 17.2 ± 1 .9 29.3

Гейша

1 Р58 34.7 + 0.8 12.8 ± 2 .0. 36.8

1 Fl? 46.9 + 8.0 33.3 + 2 .1 71.0

1 P35 38.7 + 1.7 40.4 + 1 .9 104.3

i P78 39.8 + 1.6 1.5 ± С .62 3.8

1 P75 20.4 + 1.5 9.6 + 2 . 7 47.1

1 F52 59.8 + 2.9 20.2 +4.0 53.8

1 P43 62.1 + 1.7 56.4 ± 2 .-5 106.9

1 F56 4.2 + 1.0 5.3 + 0.2 126.2

Í рРЯ 35.2 + 7.1 6.5 + 0.1 18.4

1 FBI 60.5 + 1.8 16.8 + 1.3 27.8

Nagasaki kokabu

j P10Ü 43.3 + 2.04 18.6 + 6.5 61.9

! F103 54.8 + 4.4 38.8 ± 1.7 51.7

1 F105 43.4 + 2.3 41.2 ±,5.8 95.0

1 - F106 '55.0 + 3.0 55.9 + 3.4 102.0

Hakuetsu

1 PUS 22.6 + 1.9 22.4 + 1.5 99.1

j PI 19 20.0 + 1.3 24.4 ± 3.2 122.0

1 Fl 20 26.9 + 2.6 31.2 + 0.7 116.0

¡ P'12'1 25.0 + 2.6 29.9 + 3.1 116.0

j Fl 22 OO П «wK. , Í + 2.9 20.5 + 3.2 89.9

I F122 23.1 + 1.5 33.5 + 3.9 144.9

1 P'124 39.4 2.7 ;30.6 ± 1.0 77.7 ,

Hakurei

i P155 10.5 + 1.0 21.0 + 1.4 92.6

j PI 56 i 20.9 + 0.85 37.0 + 2.2 176.0

Таблица 4.

Влияние температуры на рост пыльцевых трубок in vitro у растений различных сортов репы, 1994-1995гг.

Номер растения Средняя длина пыльцевой трубки в единицах диаметра пыльцевого зерна Холодостой-_?:ость по ' длине пыльцевой труб ки, /о

при 20°С (контроль) при 6°С

Петровская -1

F187 4.(30 + 0.3 1.84 ± 0.04 40.0

P19Q 2.11 + 0.17 1.73 + 0.09 82.0

Гейша

F58 1.38 ±0.13 0.85 + 0.03 61.6

Р17 1.54 ± 0.15 1.50 + 0.04 97.4

' F35 1.55 ± 0.02 1.32 + 0.26 84.6

Р78 1.83 + 0.1 0.50 + 0.04 27 р

Р52 2.04 + 0.07 1.30 +0.05 49.0 |

Р75 1.26 + 0.02 0.97 + 0.22 77 8 1

F42 2.68 ± 0.09 2.21 + 0.02 82.4 |

F56 1.12 + 0.19 0.96 + 0.23 85.7 |

Р83 "1.45 + 0.13 1.29 + 0.17 89.0 I

F81 1.60 + 0.12 0.99 + 0.01 61.9 |

Nagasaki kokabu

Р100 2.87 + 0.22 0.96 + 0.28 33.1 |

Р103 2.47+ 0.23 2.15 + 0.25 84.0 |

Р105 3.39 + 0.15 2.82 + 0.22 81.0 |

' Р106 2.87 + 0.32 1.92 + 0.19 83.0 |

Hakuetsu

Р118 1.81 + 0.15 1.71 + 0.08 94.4 |

F119 1.96 ± 0.06 1.49 + 0.14 76.0 |

Р120 "1.87 Л 0.03 1.64 + 0.17 , 86.5 |

Р'121 1.86+ 0.11 1.64 ± 0.16 86.5 |

Р122 2.11 + 0.11 1.65 + 0.04 81.0 |

Р123 1.93 + 0.14 2.03 + 0.30 105.0 |

Р124 1.97 + 0.06 1.54 + 0.03 76.8 |

Hakurei

Р155 2.05 + 0.15 1.87 + 0.15 89.0 !

Р156 1.77 + 0.01 1.87 + 0.04 106.0 |

i i

тп эти:: показаталей у разных генотипов находилась в пределах от 0.6 до 0.9£. что- позволяет вести отбор, используя показатель холодостойкости по длине пыльцевой трубки.

■ Наиболее высоким уровнем устойчивости к холодовому стрессу по средней длине пыльцевой трубки обладают растения Р190 (ПетроЕо-кал-1), F52, F17, Р35, Р75, Р43, Р83, F56 (Гейша), большинство растений сортообразцоЕ Hakuetsu, Hakurei, Nagasaki kokabu (табл.4).

Следует отметить, что отбор устойчивых форм по пыльце лучше проводить, оценивая их по этим двум показателям, что'гораздо результативнее, чем по одному из них. Кроме того, можно глазомерно провести оценку устойчивости растения по препарату и быстро сделать отбор устойчивых форм.

К высокоустойчивым по этим двум показателям можно отнести формы. F35, F56, Р43 (Гейша), большинство растений популяций Hakuetsu, Hakurei, Nagasaki kokabu.

Выделение форм репы с селекционно- ценными признаками в результате отбора по гамето|иту

Методом отбора по пыльце из сортопопуляции Гейша была выделена форма (Р35), отличающаяся от исходной более высоким уровнем устойчивости к низкотемпературному стрессу как по гаметофиту, так и по спорофиту, которая послужила исходным материалом для выведения .нового сорта. Растения этого селекционного образца характеризовались более крупными листьями,темно-зеленой окраски. Селекционный образец существенно превосходил районированный сорт салатной репы как по средней массе растения, так и по массе корнеплода. Образец выравнен по большинству морфологических признаков.

Оценка урожайности показала, что различия по этому показателю-у опытного и контрольного образцов не выходили за пределы HCPos- Это го-

еоГ'Пт о сохранен;:!' уровня продуктивности у селектируемого оСрагпа при повышении адаптивности,

Отбор растений по гамето$иту с использованием внутриеортового перекрестного опмления

Ранее представленный способ отбора по мужскому микрогаметсфиту частично привел - -определенному сдвигу в структуре сортопопуляции Гейша, повысив частоту встречаемости холодостойких Форм. Однако полученное потомство е результате такого отбора либо расщепляется, либо имеет значительную долю неустойчивых генотипов. Сорта-популяшш. имея в своей структуре большую долю теплотребовательных растений, как правило, неЕыравнены по морфологическим и биологическим признакам при возделывании их в стрессовых условиях.

Таблица 5.

Влияние переопыления растений, сходных по устойчивости пыльцы к низкотемпературному стрессу на проявление этого показателя е потомстве, 1995-1595гг.

!-1-1

| Популяция, генотип | Холодостойкость по энергии |

! ] прорастания семян, % |

|-1-1

| Устойчивые |

| 1. 172 X 174 91 |

| 2. 160 X '163 л '164 л 171 - 78* |

I Неустойчивые |

! 3. 161 X 162 X 170 X 173 24 ! .

| Исходная ''Гейша) 5.5 I

I_I

* Примечание: семенное потомство получено в '1596 году.

Анализ результатов исследований, в которых было применено Енутри-

сортоЕое переопыление холодостойких по пыльце генотипов, свидетельствует о возможности повышения частоты встречаемости адаптивных спорофи-

тов в потомстве iтабл.5). На основании этого метода рагработана схема 'проведения отбора в сортовых популяциях с использованием мужского га-метофита.

Характеристика сортообразцов репы японской по реакции гаметофита и спорофита на действие низких положительных температур

Е результате оценки £2 образцов репы японской выявлены различия в реакции мужского гаметофита и спорофита на действие поименных температур. Только у 8 сортообразцов имелся высокий уровень устойчивости к холоду на спорофитном уровне. К ним относятся сортообразцы японского подвида: Tohoky Benitomi, Hakurei, Hakuetsu, Kuromaru Kornatsuna. Ko-matsuna Giesen, Tohoku Suriin Debu, Tohoku Harum. Последние 4 из них принадлежат к разновидности репы-кабуна. Высокая устойчивость к низким температурам по энергии прорастания семян была отмечена также у районированного сорта Петровская-1. При оценке относительной холодостойкости по гаметофиту из них только у Hakurei, Hakuetsu, Tohoky Benitomi, Tohoky Harumi наблюдался высокий процент прорастания микроспор на среде е стрессовых условиях, у 6 образцов: Петровская -1, Hakurei, На-kuyou Fi, Tohoky Benitomi, Kornatsuna Seisen, Tohoku Harumi, холодостойкость по длине'пыльцевой трубки соответствовала устойчивости спорофита, что говорит о возможности более точной оценки устойчивости сортообразцов по более информативному признаку длине пыльцевой'трубки.

Полученные результаты позволяют сделать вывод о том. что гамето-Фит и спорофит проявляют не всегда однотипную реакцию на действие низких положительных температур на стадии прорастания микроспор и роста пыльцевых трубок, -в большинстве случаев такая оценка холодостойкости по критерию "длина пыльцевой трубки" дает более надежные результаты.

Следует отметить, что некоторые менее холодостойкие на спорофитном ¿/ровне образцы характеризовались высоким уровнем устойчивости мик-

рог§метофнта. Можно предположить, что неоднотипность реакции гаметофита' и спорофита на действие используемых в опытах температур обусловлена гетерогенностью селекционного и сортового материала. По видимому, у гомозиготных по признаку устойчивости образцов однотипность реакции гаметофита и спорофита выращена сильнее.

У большинства образцов корнеплодного типа высокая урожайность не всегда сочетается с высокой холодостойкостью гаметофита и спорофита. Среди коллекционных образцов разновидности Kornatsuna выделен образец, Tohoky Harumi высокая холодостойкость спорофита и гаметофита у которого сочетается с друпши хозяйственно-ценными признаками: продуктивностью. скороспелостью, высоким содержанием аскорбиновой кислоты. Отбор устойчивых к низкотемпературному стрессу гаплогенотипов (пыльцы) и влияние его на устойчивость образующегося споро$итного поколения

Первоначатьно нами изучалась реакция зрелой пылы#! на действие стрессовых температур. Актенпирование внимания именно на зрелой пыльце обусловлено тем, что микроспоры на этой стации в наилучшей степени могут быть подвержены манипуляции, а методы и подходы, основанные на манипулировании зрелой пыльцой, легче всего могут быть вовлечены в селекционный процесс.

В исследованиях стремились подобрать такие низкотемпературный фон и экспозицию, которые обеспечили бы резкое снижение процента прорастания пыльцеЕых зерен в опыте по сравнению с контролем, хотя бы на 80%, Установлено, что низкотемпературная предобработка пыльцы в некоторых случаях повышает ее жизнеспособность in vitro. Однако, по нашему мнении, следует различать дозаривание пыльны и симуляцию температурным стрессом ее фертильности. В первом случае жизнеспособность растет как в контрольных, так п в опытных вариантах, во втором - только в опытных. Об этом наглядно демонстрируют данные таблиц 5 и 7. Темпера-

Таблица 6.

Влияние температурных режимов и экспозиции на прорастаемость пыльцы in vitro у двух сортообрагцов (Гейша и Hakuetsu), 1995г.

,-,-!-:-!

i I Гейша | ■ Hakuetsu |

I Еариант 1— ! 21 I J°C 1 1 1 1 pop | о°с | ! ! 1 11 -3°0 | 20°С 1 1 I 1 5°С I | 1 I 0°С 1 1 -1 -3°С 1

| Контроль 1

(свежая 20 0 - 28,9 - - I

| пыльца) j

| 4 часа 25 9* 18,2 18,7 14,4 19,7 35,8* 24,0 18,4*1

| 6 часов 31 0* 35,7* 34,1* 41,3* 28,5 - 34,5 43,5*|

| 8 часов 1 34 3* 38,9* 44,8* 39,1* 42,5* - 57,7* 49,3*| 1

* - отличия от контроля значимы при Р<0.05.

Таблица 7,

Зависимость жизнеспособности пыльцу от времени её экспонирования низкотемпературным стрессом.

-1-г--;-1-1

|Гейша (устойч.)|Гейша (неустойч.)|Накие1аи Вариант |-1-1-,-1-,-

|20 С С | 20 С' | -3 С | 20 С |-3 С

j_С_I_I_I_I_

Контроль (свежесобранная) 14,2 - 21,3 - 30,3 24 часа 2,7* 23,2* 7,1*' 16.7 11,7* 39,7* 48 часов 0,3 18,0 5,0* 10,0 1,3* 25,8 ! 72 часа 0 11,8* 5,9* 0,8* 0,2* 1,7*

I_:_I

* - различия от контроля значимы при Р<0. турную предобработку пыльцы ними предлагается использовать в целях повышения фертильности пыльцы. Переход на более жесткий температурный режим обработки (-3°С) и увеличение времени экспозиции микроспор до 3 суток позволили резко снизить процент проросшей пыльны, т.е. отобрать

устойчивые гзпл-ггенсткпы. Можно предположить, что у тгкт: генотипов 'устойчивсто генотипа сортодопуллции Гейша и На-: jetau > мужской гамето-фит лаже спустя ? суток после обработки менее подвержен элпминзшш см. табл.") У ни:-: наблюдается некоторое повышение Фертпльностп пыльш.

Таблица 3.

Влияние отбора зрелой пыльцы на устойчивость к низким температурам слорс-фитнсго потомства растений сортопопуляшш Гейша. 1995г.

Номер растения Число -плоде гемян в шт. Холодостойкость по прорастания се анергии млн, \

контроль опыт контроль опыт

PI 37 21 13а 22,7 44. 7*

F135 18 '13* 59,2 45,7

F'13'1 12 7* 6,5 -

F139 - - - -

F141 19 10* 7,3 2.9

P143 - 8 3,4 8,4

P140 - 10 58,9 81.5*

P144 - н 1 - 28,3

P'145 15 10* 71.9 20,9

PI 46 19 19 0 0

PI 38 '15 9* 28,1 70.8**

P'147 - 12 0 2,5

P148 - 4 '17,3 25.5*

P'149 '13 11 26,4 92.0**

PI 50 10 5* 18,2 52.8*

F151 - 9 0 68.5**

F15 2 £1 18* ПЪ i üc. 4 55.1*

' Fl 42 - - 39,3 55. 0*

Примечание: контроль - опыление кастрированных цветков свежесобранной пыльцой, опыт - опыление кастрированных ЦЕетков обработанной холодом пыльной. *, ** - различия между контролем и опытом достоверны при Р<0.и5; 0.01 соответственно, предобработку стрессовыми температурами пыльцы можно предложить в ка-

честве метода оценки холодостойкости образцов салатной репы.

Анализ подученных результатов показывает ( табл.8), что действие низких температур на стадии зрелой пыльцы приводит к элиминации большой части гаплоидных генотипов, в результате чего в опытных вариантах почти у всех номеров наблюдалось снижение числа семян в плоде (стручка) .

Для доказательства эффективности гаметного отбора определяли устойчивость к холоду полученного потомства методом холодного проращивания семян при температурном режиме (+3°С).

Результаты проведенного эксперимента доказали, что у большинства номеров значительно возросла устойчивость образующегося спорофитного поколения. Наиболее резкое повышение устойчивости поколения спорофитов наблюдалось у теплотребовательных форм: Р149, Р151, PI38, что свидетельствует об эффективности гаметного отбора: В ряде случаев отбор холодостойких гаплогенотипов не привел к улучшению качества спорофитного поколения у PI35, Р141, Р145. Возможно, это связано с тем, что рыльца пестиков таких растений не воспринимают холодостойкую пыльцу в дилу гаметофитной самонесовместимос-ти или по другим причинам. f

Влияние различных экологических условий на фенотипическое проявление морфологических и биологических признаков

Наблюдение за морфологией семенника представителей различных подвидов позволило выявить увеличение числа побегов 2-5 порядков ветвления в условиях открытого грунта у японского подвида по сравнению с пленочными необогреваемыми теплицами.

Отмечена различная реакция мужского гаметофита на условия возделывания у сортов репы различных подвидов. Так показатель жизнеспособности пыльцы у Гейши (японский подвид) был выше в условиях зыкрытого грунта, у Петровской-1 (европейский подвид) - в поле. Условия открыто-

го грунта существенно повышают устойчивость к низким температурам высыпавшихся па пыльников микроспор у обоих сортов.

Нами обнаружено, что амплитуда фенотипическои изменчивости морфологических признаков семенного растения сорта Гейша не .адекватна условиям возделывания: отмечены значительные колебания по высоте растения, числу цветков и стручков в теплице, ветвистости, среднему числу семян в плоде и семенной продуктивности - в поле. Б открытом грунте холодостойкие сорта северного происхождения характеризуются ускоренным развитием,, менее устойчивые - замедленным.

Показатель урожайности семян у репы европейского подвида более стабилен в зависимости от экониши возделывания, чем у японского. При улучшении условии у последнего урожайность семян возрастает, что свидетельствует о его повышенной теплотребовательности. Разработка рассадного способа получения семян салатной репы-кокабу

Известно, что на культуре репы (сорт Петровская-1) разработан способ вырзщиЕания семян через рассаду ( Тареев. 1995). Мы модифицировали эту технологию для сорта Гейша. Посаженные после 30 дневной яровизации молодые растения в фазе 3-5 настоящих листьев дружно переходили к 100-процентному стеблевании:, лучше развивались. Отмечено также дружное их цветение и созревание семян.

При рассадном способе получения семян нарушается последовательность прохождения фенофаз - Закладка зачаточного соцветия (8 фаза) происходит е холодильных камерах на стадии 3-5 настоящих листьев, а после посадки рассады листья продолжаит интенсивно отрастать одновременно с ростом центрального побега и корнеплода. Сокращается продолжительность периода онтогенеза.

Выживаемость растений при рассадном способе увеличилась на 27,8%. Установлено, что способ получения семян не оказывал существенного вли-

лнил на семенную продуктивность. Однако имеется значимое превышение урожайности семян при рассадном способе возделывания семенников. Это связано с сохранением оптимальной густоты стояния из-за лучшей приживаемости растений и в результате чего повысилась урожайность семян в рассадном варианте. Не было существенных различий между значениями показателей. определяющих посевные качества семян. Б опытном варианте они сохранились .на том же уровне, что и в контроле (маточники).

Провезенный методом грунтконтроля анализ урожайных и сортовых качеств семян, полученных способом яровизации рассады,.показал, что резких изменений в уровне урожайности как общей, так и товарной нами не обнаружено. -Однако в опытном варианте (рассада) наблюдалось некоторое снижение числа типичных растений, средней массы товарного растения, что дало основание сделать еыеод о нецелесообразности использования рассадного способа в первичном семеноводстве.

ВЫВОДЫ

1. -Изучение коллекции сортообразцов репы японской показало, что возделывание этой культуры в условиях Нечерноземья является перспективным. Этот ценный и питательный оеощ обладает целым рядом селекционных и хозяйственно ценных признаков: высокой продуктивностью, скороспелостью, содержанием в корнеплодах и листьях большого набора физиологически активных веществ, апаптированностью к условиям открытого и защищенного грунта.

2. Еылелены ценные геноисточники для селекции на: продуктивность и качество.- N13, Hakuyou F-i, Гейша, Снегурочка, Tokyo Market, Haku-rei, Hakuhok kokabu, Tohoky Benitomi, Hynona kabu, Nagasaki kokabu (образны корнеплодного типа); Tohoky Harumi, Tohoky Gariin Debu, N45 (образцы листового типа); низкое содержание нитратов в листьях(Komat-suna 3eisen) н в корнеплодах,- Гейша, Снегурочка, Hakurei, Mancheste

..!зг7:куо '¿тт- Сгоээ, Узгазак! кокам.

2. Разработаны отдельные элементы технолог:::: телеки:!:: репы японской на уотсйчнроон к низким температура:.: : ::сп?льс02=нп*м пуского г=м~тс£итз: а определены экологические условия и степень развития цветка для отбора проб пыльны; б' подобрана питательная :села составом : концентрацией сахарозы, агар-агара и остаточных количеств борной кислоты для проралптания ишш; в- нипйтшрсЕавы способы смешивания и равномерного посева пыльны на среду для репы,как насекомоо-пыляеыой культуры с использованием мягкой кисточки, хранения препаратов в условиях отрицательных температур (-3-41'С); г,- определены температурные параметры оценки устойчивости генотипов по пыльце к пожженным температурам и отбора холодостойких микроспор в целях повышения устойчивости спорофптного поколения.

4. Установлена тесная достоверная корреляция между параметрами холодостойкости пыльцы репы - относительной жизнеспособностью п относительной длиной пыльцевой трубки и Еыделен более информативный для оцени-! устойчивости генотипов параметр - длина пыльцевой трубки.

5. Установлено, что повышение фертильности пыльны в результате действия низкотемпературного стресса присуще, по Епдимому, более устойчивым генотипа:'! вила Ега£а1са гара I. Данное явление мо*но использовать для выведения устойчивых сортов и стимуляции жизнеспособности пыльны.

6. Метолом Ьтбора по пыльце из сортопопуляшш Гейша была отобрана форма Ф25 •, мос^олспяески отличающаяся от исходной, имеющая более высокий уровень устойчивости к низкотемпературному стрессу по гамето-фиту I! спорофиту. Урожайность селекционного образца сохранилась на уровне контроля. На основе ее был создан сорт Снегурочка.

7. На основании оценки холодостойкости по спорофиту и гаметофиту

выделено 18 геноиоточникс-в устойчивости - Петровская -1. Накигех. На-кие1зи, ТоЬоку Вепйопи, Конфета 5е15еп. Кигогпаги Ког/Мгипа, Толоку Бигпп БеЬи, ТоЬоку Нагши (по спорофиту); Н13, Наевгак! кокаЬи. Наки-

Р35, Р55, Р43 (по гаметофпту); Накиге!, Накие^.зи. ТоЬоки Напта. ТоЬоки Ееп11ош1 (по гаметофпту и спорофиту).

8. Разработаны ускоренные методы повышения холодостойкости потомства: на основе ввутрисортового переопыления устойчивых по пыльне форм, отбора холодостойких микрогаметофитов и с их использованием получен селекционно-ценный исходный материал.

10. Выявлены морфологические и биологические особенности репн японского подвида: увеличение числа побегов 2 - 5 порядков ветвления, замедленное развитие семенников, снижение жизнеспособности пыльцы и вместе с тем повышение ее холодостойкости, увеличение числа семян в плоде в открытом грунте. Подобрана благоприятная экониша (необоггевае-мые пленочные теплицы) для получения стабильно высокого урожая семян в условиях Нечерноземья.

И. Применение способа яровизации рассады на культуре салатной репы ускоряет развитие семенных растений, повышает их приживаемость на 27.8% по сравнению с семеноводством через маточные корнеплоды, обеспечивает повышение урожайности семян, сохраняя при этом их посевные и урожайные качества, позволяет сократить время и затраты на производство семенного материала и может использоваться для производства разовой репродукции товарных сортовых семян.

Рекомендации для селекции и семеноводства

1. Рекомендовать перспективный сорт Снегурочка, превышающий стандарт (Гейша) по устойчивости к пониженным температурам для государственного сортоиспытания и размножения в семеноводческим хозяйствах.

2. Включить в селекционные программы в качестве геноисточников

высокой продуктивности. качества и других селе-чоионно хозяйственно-пенных признаков образцы: Mi3. Hakuyou F-i, Гейо;5. Снегур:чка, Tokyo Market, Tonoky Her и™, Tohoky '3uriin Oebu, Г45, Hav."-:, Наковок кска-cu, Тс г.оку Eenioon. Hynona kaou, Nagasaki кокаги, Xo^ats'jna .Teisen, Manchester î'arkec, Tokyo Khite Cross.

E. Рекомендовать образец листоесй разновидности Kcmtsuna Tohoky Наг'лгг1!, обладающий рядом хозяйственно-пенных признаков: высокой продуктивностью г4.Скг !!'-'' л! экологической устойчивостью. скороспелостью

s

25-50 -дней'•, лл? включения е конкурсное и экологическое сортспспыта-нпя.

4. Е селекционных пелях для повышения устойчивости к нпгккм температурам рекомендуется использовать созданный в лас ораториях ст. кор-неплсдоЕ и гаметной селекции ЕШШССОК исходный материал на основе образцов : Hakuyou Fi, Komatsuna Seisen, Kuromaru Kornatsuna, Tohoku Guri-in Debu, N13, Nagasaki kokabu, Hakuetsu P35, P56, F43,. Hakurei, Tohoku Harumi, Tohoku Eenitorii, ПетроЕская-1.

5. Использовать в процессе селекции исходный материал материал, полученный методом гзметной селекции с высоким уровне»,'! холодостойкости спорофитного поколения: NN 140, 133, 149, 151, 142, Fi(172 X 174),

Fi ( 150 X 153 X 164 X 171).

5. Для гарантированного получения семян теплотребовательных Форм репы японской рекомендуем применять пленочные необогреваемые теплины,

7. Рекомендовать для производства семян первой репродукции репы сорта Гейша модифицированный нами рассадный способ с целью снижения себестоимости и ускоренного внедрения в производство нового сорта.

Список работ, опубликованных по материалам диссертации

1. Методические указания по технологиям производства семян дайко-на и салатной репы-кокабу в условиях- нечерноземной зоны РФ, в ссав-

Q

торстве с Буниным М. С., Старцевым В. И. и др.- Москез. 1955.- 50 с.

2. Степанов В. А., Бунин М. С., Балашова H.H. Отдельные элементы технологии селекции культивируемых форм репы по мужскому гаметофиту на устойчивость к холоду.//Науч. тр. по селекции и семеноводству- М.: 1995.- Т.1.- С. 86-96.

3.Бунин М.С., Демидова A.A., Степанов В.А., СычеЕ С.П. Селекция и семеноводство интродуцированных восточно-азиатских овощных растений в России. // В сб. тезисов докладов 1-го Междунар. симпоз. " Новые нетрадиционные растения и перспективы их практического использования." -Пущино, 1995. - С 432-434.

4. Бунин М.С., Степанов В.А., Балашова H.H. Разработка методики повышения холодостойкости репы японской с использованием мужского га-метофита. //Матер, докл., сообщ. Междунар. симпоз. " Гетерозис сельскохозяйственных растений."- М. 1997.- С. 96-97.

5.Бунин М.С., Степанов В.А., Балашова H.H. Методика селекшш репы на холодостойкость в условиях Нечерноземья. - М.: МОЛ РФ, 1958. - 30с (в печати).