Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Иммуно-биологические аспекты ларазитохозяинных взаимоотношений при эстрозе овец и новые технологические приемы борьбы о ним

ВАК РФ 03.00.19, Паразитология

Автореферат диссертации по теме "Иммуно-биологические аспекты ларазитохозяинных взаимоотношений при эстрозе овец и новые технологические приемы борьбы о ним"

РГб од 2 в ноя да

СТАВРОПОЛЬСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННАЯ АКАДЕМИЯ

На правах рукописи

МОЗУЛЯКА НИНА СЕМЕНОВНА

Иммуно-биологические аспекты ларазитохозяинных взаимоотношений при эстрозе овец и новые технологические приемы борьбы о ним

03. 00.19 - паразитология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученей степени кандидата ветеринарных наук

Ставрополь 1394

Рчбота выполнена в Ставропольской Государственной Сельско хозяйственной Академии.

Научный руководитель: доктор ветеринарных наук,

профессор А. А. Водя нов

Официальнке оппоненты: доктор биологических наук,

профессор А. Ф. Дмитриев

доктор ветеринарных наук, профессор Н.Ф. Щербань

Ведущая организация - * Ставропольская краевая научно-исследовательская ветеринарная станция

г/ л ,/je2ty

Защита состоится " //■; " ß СМ.19Q4 г. в ! ^

чапов на заседании специализированного ¿овета К-120.53.01

Ставропольской государственной сельскохозяйственной академии..

Адрес: 355014, г. Ставрополь, пер. Зоотехнический, 10.

С диссертацией можно ойнакомиться в библиотеке Ставропольской Государственной Сельскохозяйственной Академии.

Автореферат разослан "/V" /МЛО^ 1994 г.

4'

Ученый секретарь ^ООЮ^ д, ц Боголюбова

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

1.1. Актуальность работы. Овцеводство - одна из важнейших отраслей сельского хозяйства Ставропольского края, центра племенного тонкорунного овцепоголовья России.

Важным условием в решении задач по увеличен™ .овцеводческой продукции является дальнейшая интенсификация этой отрасли сельскохозяйственного производстпа. Значительным сдерживающим фактором на пути дальнейшего развития овцеводства и повышения его продуктивности являются заболевания животных различной этиологии, в том числе и паразитарные.

Анализируя эпизоотическое состояние овцеводства, следует отметить, что значительно сократилась гибель овец от инфекционных и инвазионных заболеваний,, а некоторые из них полностью ликвидированы. Однако, по острозу овец положение остается напряженным. Ранее, на фоне большого распространения других болезней, оводовая инвазия овец была мало заметной, а в последние годы ¿строз по аначению стал занимать одно из первых мест.

Полостной овод (Oestrus ovis L.), личинки которого являются возбудителями эстроза у овец, имеет широкое распространение. По данным различных.авторов (Щербаяь, 1971; Пономарев, 1971; Терновой, 1586) пораженность овец эстрозом на Северном Кавказе в различные годы составляет от 70 до 100%, что наносит огромный экономический ущерб. Если учесть, что-от каждой овцы, пораженной эстрозом, хозяйства недополучают в среднем 23Ц г шерсти и 1530 г мяса (Марченко, 1983), то в денежном выражении это составит сотни миллионов рублей. Сюда же следует отнести вынужденный убой животных в некондиционной массе и падеж взрослых овец и молодняка.

Исследованиями отечественных и зарубежных ученых достигнуты

определенные успехи в изучении распространения эстроза, биолот оводов, разработок средств и методов диагностики, профилактики и а рапии. Но, несмотря на это, поражнность овец эстрозом остается высоком уровне. Основными причинами этого являются отсутствие пр паратов, которые бы отв-эчали предъявляемым к ним экологическим тр бованиям, были бы нетоксичны для теплокровных и выеокоэффектш для членистоногих, обладали бы широким спектром действия Недоет точная изученность вопросов иммунологии, знание которых являет необходимой предпосылкой для разработки высокочувствительных и об ективных матодов прижизненной диагностики и правильная трактов развивающихся процессов, выделение адаптивных, компенсаторных, п тологических, Илшункых изменений, выявление преобладающих иа них определенном этапе хозяино-паразитарных отношений позволят выраР тать более' целесообразную и экономически оправданную тактику в о ганизации противоэстроэных мероприятий.

Исходя из вышеизложенного, следует, что попроси патоген за, диагностики и разработки эффективных мер борьбы и профилакти эстроза являются актуальными и требуют дальнейшего изучении.

1.2. Цель и задачи исследований. Целью исследований я вши изучение отдельных вопросов эпизоотического процесса, иммуно- биол» гических аспектов паразито-хозяинных отношений при эстрозе овец и разработка эффективных средств и методов борьбы с ним.

Для достижения поставленной цели были определены следуют

задачи:

- изучить распространение оводовой инвазии у овец при пр( мышленной технологии содержания в сравнении с пастбищ?»

- изучить антигенные, аллергенные и иммуногенные свойств: личинок полостного овода;

- изучить отдельные биохимические показатели сыворотки крови овец в патогенезе заболевания;

- изучить гистоморфологические изменения слизистой оболочки носа и придаточдых пазух при эетрозе овец в период отсутствия клинической картины заболевания;

- испытать новые средства для борьбы с эстрозом овец;

- разработать устройство для более рационального и эффективного интраназального введения инсектицидов при эстрозе;

- дать токсикологическую оценку препаратов, рекомендуемых нами в практику борьбы с эстрозом овец.

1.3. Научная новизна. Приводятся данные о распространении оводовой инвазии у овец при промышленном и пастбищной типах содержания. На основе иммунологических, аллергических, биохимических и гистологических исследований изучены отдельные аспекты патогенеза Испытана сравнительная эффективность различных препаратов при эстрозе овец, изучено влияние осенних противопсороптозных обработок- овец на интэнсивность и экстенсивность оводовой инвазии. Дана токсикологическая оценка препаратов, рекомендуемых нами в практику борьбы с эстрозом овдц. Разработано и внедрено в производство устройство для интраназальной аппликации инсектицидов.

1.4. фактическая ценность. Основные положения результатов проведенных исследований отражены в следующих нормативно-технических документах:

- Наставление по применению ивомека для борьбы с возбудителями арахнознтомоаов и гельминтозов. Утзерждено Главным управлением ветеринарии 1СХ РФ 04.01.90г;

- Назальный ороситель. Авт. сайд. N 1683736 от 11.11.891

1.5. Апробация работы. Материалы исследований доложены, с суждены и одобрены на научных конференциях Ставропольского сельск хозяйственного института (1989 - 199А ir), Международной научно практической конференции "Актуальные проблемы медицинской и ветер: нарной паразитологии" (Витебск,1993).

1.6. Публикации. По теме диссертации опубликовано 6 работ

1.7. Объем работы. Диссертация изложена на 118 страницах и шинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, собст венных исследований, выводов, списка литературы и приложений. Спис литературы содержит 151 источник, из которых 26 иностранных автора. Работа шшэстриронана 20 таблицами и 11 рисунками.

г. СОБСТЕЕЙШЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материал к методика исследований.

Работа выполнялась в 1S87 - 1993 ?г. в проблемной научно-исследовательской паразитологической лаборатории Ставропольского сельскохозяйственного института, НПО "Аллерген", противочумном научно-исследовательском институте (г. Ставрополь), Ставропольском мясокомбинате и овцеводческих хозяйствах Кочубеевского, Грачевско-

, Иовоалександровского, Красногвардейского районов Ставропольского края.

С целью изучения эпизоотической ситуации по зстрозу овец осуществляли экспедиционные и стационарные наблюдения в овцеводческих хозяйствах края. Степень пораженности овец личинками по-

лостного овода определяли при вскрытии голов от павших и вынужденно убитых животных по методике Н. Ф. Щербань (1971). Возраст личинок определяли по К. Я. Грунину (1953).

Антигенную активность личинок овечьего овода изучали в реакциях преципитации по Оухтерлони, ЕИЗФ (Фркмель,1987) и РИГА (Калинина, Сивков, 1077).

Аллергическое тестирование проводили метолом Енутрикожного введения антигена спонтанно инвг^зированным личинками О. оу 1 з животным.

Для получения соматических антигенов использовали личинки О. второй и третьей стадий развитие, которые отбирали на мясокомбинате, промывали дистиллированной водой до удаления слизи, затем в стерильном физиологическом растворе и высушивали на фильтровальной бумаге. Личинки помешали р морозильную камеру на 48 -гасов. Затем и:: размораживали, взвешивали и измельчали ножницами на льду, разбавляя физиологическим раствором в соотношении 1: 3. Измельченные личинки помешали в холодильник на магнитную мешалку на 24 часа. Экстракт центрифугировали 30 минут при 5000 об/мин. Надосадочную жидкость фильтровали под вакуумом в стерильной камере. Консервантом служил мертиолат в соотношении 1:10000. Готовый антиген разливали в ампулы по 1 мл, ¡высушивали по режиму кроличьей плазмы с последующим запаиванием под азотом. В таком состоянии антиген сохранял свою активность в течение 6 месяцев (срок наблюдений).

Иммуногенную активное .ъ полученного антигена изучали путем иммунизации животных, с последующим определением титров антител в РИГА.

Биохимические показатели крови овец в процессе паразити-рования личинок полостного овода изучали у искусственно рараженных животных. Заражение проводили по методике КФ. Щэрбань (1971).

Определяли активность лактатдегидрогеназа /ДЦГ/ (Tietz, 1976), ас партатаминотрансфгразы /АСТ/ (Пегушеуег et ol, 197Б), аланинамино трансферазы /АЛГ/ (Young, Pestaner, 1978), щзлочной фосфатааы /ЩФ. (Bovers et ol, 1966), ¿'-глютамилтранспептидазы / -ГТ/ (Whit,field et ol, 1973), холинэстеразы /ХЭ/ (Хестрин, 1949) протеинограмму oi ределяли методом электрофореза в полиакриламидном геле. Исследования проводили на комплексе для биохимических исследований Копе Ultra.

Изучение гистоморфологических изменений в местах локализа цми личинок полостного овода проводили на материале, взятом от вынужденно убитых спонтанно инвази}юва::аых овец. Материал фиксировали в жидкости Карнуз с последушэй заливкой в парафиновые блоки. Срезы окрашивали гематоксилин-эозином, по Браше й шифф-йодной кислотой (шик-реакция).

Изучение эффективности инсектицидов при эстрозе овец проводили в соответствии с "Методическими рекомендациями по изучению активности реппелентов и инсектицидов в ветеринарии" (Н. , ВАСХНИЛ, 1982). Овец обрабатывали интраназально с помощью двухрожкавого ирригатора, назального оросителя и методом купания ь стационарной проплывной ванне.

С целью изучения токсикологических свойств ивомека, цидек-тина и 12.-ной эмульсии неоцидола был проведен комплекс гематологических исследований, 'включающий морфологические и биохимические методы, учитывался клинический статус обработанных животных.

Количество эритроцитов и гемоглобина определяли на эритро-гемометре, лейкоциты - на электронном счетчике "Пикоскел" по обще-' принятым методикам. Лейкоформулу выводили по мазкам крови, окрашенным по Романовскому - Гимза

Статистическую обработку материалов экспериментальных т-

следований выполняли на компьютере IBM - 38о по методике Ойвнна с использованием критериев Стьюдента хи-квадрат.

2.2. Зпизоотологическое обследование

В промышленном овцеводстве животных содержат на откормочных площадках и овцекомплексах, что ведет к значительной концентрации поголовья на ограниченной территории. Нами было изучено распространение оводовой инвазии у овец пои промышленной технологии содержания в сравнении с пастбищной.

В результате проведенных исследований установлено, что экстенсивность оводовой инвазии (Э И) у овец на овцекомплексах составляет в среднем 91,5%, на овцеплоавдках - 86,5%, а при отарном содержании - 79%, то есть на овцекомплексах пораикается на 16,5%, а на откормочных площадках на 7% поголовья овец больше, чем при отарном содержании. Такая же закономерность прослеживается и в отношении 'интенсивности поражения животных. По усредненным данным, за три года наблюдений, интенсивность оводовой инвазии на овцекомплексах составила 22,9, на овпепловдках - 20,3, при старном содержании -15,9 личинок на голову. Количество личинок на одно животное на овцекомплексах превышает аналогичные показатели у овец при пастбищном содержании на 7,5, а нз овцеплощадках - на 4,4 личинки.

Проведенные исследов-шия по изучению 'зависимости интенсивности и экстенсивности оводовой инвазии в зависимости от возраста животных позволяют считать, что. ягнята текущего, года рождения с не-сформированной иммунной системой поражаются эстрозом в большей степени, чем взрослое овцепоголовье. Интенсивность оводовой инвазии у ягнят до года в среднем составляла 49,6, взрослого поголовья -13,12 личинок на голову. Экстенсивность порамэния молодняка дости-

гала 98%, тогда как взрослые овцы были поражены на 85,2%.

2.3. Иаучение антигенной, аллергенной и иммуногенной активности личинок полостного овода

В результате исследований установлено, что приготовленный нами соматический антиген из личинок полостного овода второй и третьей стадий развития обладает свойствами полного антигена. Оч способен вступать в реакции преципитации и гемагглютинации с сыворотками от спонтанно зараженных овец. Интенсивность линий преципитации зависела от количественного содержания личинок и, прежде все го', второй и третьей стадий развития.

Установлена несколько более высокая информативность ВИЭФ по сравнению с РП по Оухтерлони. Так, коэффициент общей парной кор реляции между активностью оывороток, выявленных в ВИЭФ и количеством личинок второй и третьей стадий достигал соответственно 0,533 (Р < 0,01) и 0,390 (Р < 0,05), а при использовании РП по Оухтерлони был достоверным только для второй стадии (г = 0,455, Р < 0,05). При этом определяли довольно высокую корреляцию между интенсивностью линий преципитации, обнаруженные обоими методами (г « 0,723, Р < 0,01).

Сенсибилизирующее воздействие личинок овечьего овода на организм овец изучали' методом постановки кожшк проб с приготовленным антигеном на спонтанно инвааированных животных в радичные периоды времени - в сентябре, феврале, марте и апреле. Антиген вводили внутрикокио, в подхвостовую складку, в дозе 0,2 мл на голову. Учет реакции проводили через 30 минут, 4 - а", 12, 24 и 48 часов. Всего било поставлено 158 проб.

Установлено, что у 76,1% обследованных животных наблюда-

лась положительная кожная реакция, которая развивалась по немедленному (15,8%), замедленному (54%) и смешанному (6,3%)'типу. В весенние месяцы (март - апрель-? отмечали больший процент положительно реагирующих животных. Мы связываем это с тем, что в этот период происходит мощное развитие личинок овода второй и третьей стадии, увеличивается их биомасса и объем выделяемых антигенов, что ведет, видимо, к-возрастанию уровня сенсибилизации и количества сенсибилизированных животных.

В марте и апреле, при внутрикожном введении АГ наблюдалась гибель 4 овец вследствие развития анафилактического шока.

Иммунизацию животных проводили внутримышечным введением полученного антигена в дозе 1,5 мл, что составляет 3,3 мг азота белка Средний геометрический титр агглютинирующих антител до иммунизации составлял 1:165. На 15-е сутки после инъекций антигена он составил 1:3936, на 35-е сутки - 1:3508. Прослеживается четкая закономерность, свидетельствующая о достаточно высокой иммуногенности приготовленного антигена.

2.4. Биохимические показатели в патогенезе зстроза овец.

Инвазионные заболевания, в частности зстроз, начинаются с функциональных нарушений, которые является следствием нарушения обменных процессов. Некоторые показатели белкового и углеводного обмена определяли у пяти ягнят текущего года рождения, искусственно зараженных 120 личинками 0. ovis первой стадии .развития, ранее не имевши контакта с возбудителем и содержавшихся в условиях, исклю-. чающих дополнительное инвазирование. Контролем служили пять интакт-ных животных. Исследования проводили до заражения и через 60, 90 и 120 суток.

Активность ACT в крови овец опытной группы возрастала к 60-м сутк:

после заражения на 94% (Р < 0,001) и находилась в таком состоянии «

почти баз изменений до кснца опыта. АЛТ к 60-м суткам увеличивалас на 42%, к 90-м суткам - на 58% (Р < 0,05), а к 120-м суткам снижалась почти до исходного уровня. ^ -ГТ повышалась к 60-м суткам не 75% (Р < 0,05)* находилась на таком уровне в течение месяца и несколько снижалась (до 45,8 ед/л) к i20-м суткам опыта. Активность ЩФ увеличивалась в течение всего опыта, достигая 170% (Р<. 0,001) к 120-м суткам.

Активность общей ДЦГ увеличивалась в течение всего периода наблюдений, достигая 119% (Р<0,01) к 120-м суткам. Это происходи ло в результате увеличения процентного содержания печеночных фракций ЛДГ^г и ДЦГ^- , на фоне незначительного перераспределения изофер-ментных фракций ДЦГ-?, ДЦГг и ДЦГд. ЛДГ^ увеличилась на 89% (Р<0,0!) и ЛДГf увеличилась на 112%. (Р<0,01).

Увеличение активности тргнсамиказ в сыворотке крови мы рассматриваем как ранний показатель печеночного цитолитического синдрома, свидетельствующего о нарушении белково-еинтезируюцей функции печени. Возрастание активности -ГТ и Освидетельствует о нарушении оттока желчи и накоплении «¡е составных частей в печени и крови. Повышение активности общей ДЦГ в сывороткь крови больных зстроаом животных свидетельствует об активации процессов гликолиза, а изменение активности изоферментов ЛЩ, и ДЩу тесно связано с функциональным состоянием клеток печени.

Количество обшего белка к 90-м суткам снизилось на 19% (Р<0,01) от исходного уровня и не изменялось до конца опыта. Снижение общего белка осуществлялось главным образом за счет альбуминовых фракций, количество которых снизилось к 60-му дню опыта до 39,56 г/л и продолжало снижаться до 120 дня, достигая 28,54 г/л,

что составляло 62% от уроь.та исходных данных (Р<0,01).

К 90-м суткам, опыта на 130% возрастало содержание сЛ-гло-булиновой фракции, которая оставалась на таком уровне до конца опыта (Р< 0, 01). В то же время с4-глобулинк снижались на 44% ( Р< 0,001) к практически т изменялись к 120-м суткам. Имела тенденция к снижению и фракция ^-глобулинов, которая постепенно снижалась в течение всего опыта и к 120-му дню достигала 50% уровня исходных данных (Р<0,05). Уровень ^-глобулинов повышался к 60-иу дню опыта на 33%, сохранялся па таком уровне в течение месяца, а к 120 суткам превышал исходные данные на 60% (Р<0,05). Изменение соотношения альбуминов и глобулинов в сыворотке кровй больных озец нашло отражение в изменении алъбумино-глобулинового коэффициента, который с единицы снизился к 120-м суткам до 0,6.

В контрольной группе достоверных изменений изучаемых показателей не отмечено.

Исследования многих авторов показали, что нарушение функции белков ведет к различным типам диспротеинемии. Динамика изменений общего белка и белковых фракций, альбумино-глобулинового коэффициента в сыворотке крови, в основном, отражает состояние белкового обмана при патологических изменениях печени и указывает на состояние организма, его иммунологическую перестройку, образование антител. Таким образом, на основании полученных данных считаем, что па-разитирование личинок полостного овода оказывает воздействие на весь организм хозяина, что проявляется в фазовом изменении уровня ферментов в процессе интоксикации метаболитами личинок по постного овода 'и, прежде всего, печени, вызывая нарушения углеводного и белкового обмена.

2.5. Гистоморфологические изменения слизистой оболочки носовой и придаточных полостей у овец, ^Базированных личинками полостного овода

В клинической картине эстроза существует период, когда си птомы заболевания отсутствуют. Он продолжается примерно с ноября февраль и носит название латентного. Считается, что личинки нахо* дятся в этот период в состоянии олигопзузы, а слизистая оболочка восстанавливает свои функции. В ходе исследований нами установлен что не все личинки первой стадии находятся в это время в состояни олигопаузы, часть из них, хотя и незначительная, все же продолжав свое развитие до второй и первой фазы третьей стадии. Что подтвер дает исследования ЕА. Марченко, НЕ Семенова, (1981), установив ших, что часть популяции личинок 0.0У13 развивается в биологическ нецелесообразные сроки. При гистологическом исследовании слиаисто; оболочки, взятой у спонтанно инвазированных овец в период с ноябр: по февраль из мест, где в это время находится основное количество личинок (носовая перегородка, вентральные раковины), обнаружены и; менения, затрагивающие в различной степени все структуры слизисто! оболочки, которые носили очаговый характер и зависели от интенсивности инвазии.

В эпителиальном слое обнаруживались участки с разнотипно разрушенным эпителием. Он мог быть сл/щен на 1/3 - 1/2 всей толщины, Тогда оставшаяся часть была представлена неорганизованным ског лением клеток. Обнаруживались обширные участки и с более глубоким* изменениями, где разрушение эпителия наблюдалось на всю ег.о толщину, вплоть до базальной мембраны и даже с захватом прилегающего к нему слоя собственной пластинки. В отдельных участках эпителия (зо нах наибольшей деструкции) обнаруживались множественные вакуоли ил

микрокиеты, заполненные слизью .или ядрами разрушенных клеток. В части срезов эпителий почти на всем протяжении не имел четких границ клеток, был набухшим, рыхлым. В зонах, где эпителиоциты сохранили свою целостность, они вакуолизированы, обнаруживались участки, где эпителий предсталлрч пичти одними бокаловидными клетками.

Если интенсивность оводовой инвазии била невысокой -4-5 личинок, и часть которых уже перешла во вторую стадию развития и находилась в лабиринтах решетчатой кости или в лобных пааухах, то о слизистой оболочке носовой полости обнаруживались лишь единичные участки гомогенизации и дистрофии, причем эти процессы протекают в несколько раз (условно) легче, наблюдались процессы восстановления, большие участки были Представлены неизмененной нормально секретиру-юшей слизистой.

Поверхность слизистой оболочки в большей или меньшей степени, в зависимости от степени деструкции, покрыта слоем оксифильной слизи с наличием клеточного детрита, иногда с примесью единичных лейкоцитов или эритроцитов. На нескольких срезах мы обнаруживали на поверхности слизистой оболочки останки погибших паразитов, которые были покрыты значительным количеством нейтрофилъных лейкоцитов - в виде очагов.

Основное вещество подслизистого слоя разрыхлено, в отдельных учалтках волокна фрагментированы, набухшие. Обнаруживаются застойные явления в лимфатических сосудах и накопление серозного экссудата в ткани и по ходу кровеносных сосудов. За счет отека подслизистого слоя толшина слизистой оболочки увеличивается в несколько раз по 'сравнению с нормой. Наблюдается острая венозная гиперемия, просветы вен, а иногда и артерий, расшрены, заполнены лизирован-ными эритроцитами и единичными, иногда множественными лейкоцитами. Встречаются микрогеморрагш. Сосуды, особенно венозные, содержат

десквамированные клетки эндотелия.

Железы подслизистогс слоя расширены, просвет их заполнен густым глыбчатым секретом. Эндотелий также переполнен слабоокси-фильним секретом, часто разрушен до вакуолизации и лизиса ядра. Есть железы, где эндотелий почти полностью отсутствует.

По ходу мелких кровечоеных сосудов,, чашэ венозных, отмечалось очаговое и в виде полосок скопление мелких клеток пролифератг типа лимфоидных. Такое же скопление круглоядерных клеток пролиферг та наблюдалось и около сильно измененных ¡шлез собственного слои \ в подслизистом слое, прилегающем к участкам с выраженной слизисто{ дистрофией клеток мерцательного эпителия. Обширные участки подзпи-телиального слоя слизистой оболочки расширены за счет кассовой инфильтрации, представленной лимфоидными клетками с наличием эпктел» оидных и тучных клеток, фибробгастов и, иногда, сегментоядерных нейтрофилов.

Несмотря на то, что в исследованный наш период зрзмени кс личество дичинок, находя>цихся в лобных пазухах, было минимальным, причем это были личинки в основном перкой и второй стадий развития изменения слизистой оболочки были аналогичны изменениям в носовой полости, но более выражены по интенсивности. Такое "несоответствие количества хичинок и вызываемых ими изменений, на наш взгляд, може быть объяснено тем, что проходы, с помощью которых лобные пазухи с общаются с носовой полостью у овец достаточна узкие, а в результат отека'слизистой оболочки они могут частично или полностью закрыват ся,'создавая тем самым довольно замкнутое пространство в лобных па зухах, где находятся личинки. В таком состоянии экскреторно-секреторные метабоаиты личинок и продукты "деструкции ткане 1 хозяина не удаляется из полости, проникают в подэпителиальный слой слизистой ободочки, всасывается в кровь, вызывая изменения эндотелия крове-

носных сосудов и являются мощными антигенными агентами, вызывающими местные тканевые реакции и оказывающие воздействие на изменение реактивности всего организма хозяина в целом.

В настоящее время насыщение стромы клеточными элементами рассматривается как морфологическое проявление иммунологических реакций, возникающих в ответ на действие различных экзогенных агентов, в данном'случае экскреторно-секреторных метаболитов личинок полостного овода. Реакция клеточного иммунитета связана с элементами лимфоидной ткани. Морфологическую картину воспаления слизистой оболочки у овец в этот период следует отнести к иммунопатологическому механизму, который развивается-1 на основе гиперчувствительности замедленного типа Проявление его неспецифической фазы расценивается как позднее иммунное воспаление, которое сменяет раннее.

2.6. Средства и методы борьбы с зстрозом овец.

Основным методом борьбы с зстрозом овец, применяемым в нашей стране и за рубежом, является ранняя химиотерапия. Предложен ряд препаратов и методов их введения с целью уничтожения личинок, в основном первой стадии развития, в организме хозяина Однако, изыскание препаратов, обладающих ларвицидным действием на все стадии личинок овечьего овода и разработка эффективных методов их введения, не теряют актуальности. В связи с этим проведено сравнительное изучение препаратов цимбуца (25% э. к.), дециса (2,5% э. к.) (синтетические пиретроиды) и неоцидола (60% э. к.) (ЗОС). Обработку овец проводили методом интраназальной аппликации с использованием широко применяемого в овцеводстве двухрожкового ирригатора и назального оросителя, позволяющего проводить аппликации пестицидов не травмируя слизистую оболочку носовой полости у животных и обеепечивахще-

го возможность подачи рабочего раствора (эмульсии) :з дисперсном состояении, способствующего сокращению непроизводительных расходов инсектицидов и воды.

В процессе исследований было установлено, что препараты да цис и цимуш обладают низкой эффективностью при эстрозе овец. Ин-тенсэффектлвность обработок составила 41.. .77%, 1%-ная (по д. в.) водная эмульсия неоцидола обеспечивала 100%-ную гибель паразитирующих личинок полостного оводе. Расход рабочей эмульсии на одно животное составлял 2 - 4 мл. Считаем, чго применение назального оросителя более оправдано как с экономических, так и с экологических позиций.

Сроки применения препаратов, рекомендуемых для борьбы с личинками полостного овода на ранних стадиях развития, во многом совпадают со сроками проведения противоклещевых обработок, направленных на уничтожение возбудителей псороптоэа овкц. В свяги с этим мы иэучлли влияние противоклещевых осенних обработок овец на возбудителей эстроза.

Установили, что обработка овец 0,023%-ной (по д. в.) эмульсией неоцидола методом купания в проплывной ванке оказывает достаточно высокую эффективность на личинок овечьего овода. Экстенеэф-фективность составила 82,2%, а интенсэффективность - 94,7%. Считаем возможным отметить, что проведение Противопсьроптозных обработок овец методом купания в проплывной ванне после окончания лета оводов с использованием 0,025%-ной эмульсии неоцидола исключает необходимость проведения дополнительных противозстроаных мероприятий. В то же время, применение 0,005%-ной (по д. в.) эмульсии бутоцса с этой целью менее оправдано. Экстенсэффективность таких обработок на личинок овечьего овода составляла 62,8%, интексаффективн >сть - 59,5%.

Несмотря на то, что химичесггий метод контроля за численно-

1У

стью насекомых является ведущим, все большее место в борьбе с различными паразитарными заболеваниями приобретают биологические препараты. Наиболее перспективными являются препараты на основе авер-мектинов - антипаразитарных агентов с исключительно высокой биологической активностью.

Нами испытана эффетивность ивомека (д, в. авермектин) и ци-дектина (д. в. моксидектин) на личинок О. оу!Б. Установлено, что иво-мек и цидектин, введенные овцам подкожно в дозе 200 мкг/кг вызывают 100%-ную "ибель паразитирующих личинок полостного овода всех возрастов.

2.7. Морфологические и биохимические показатели

крови овец, обработанных ивомеком, цидектинсм и 1%-ной эмульсией неоцидола

Опыты проводили на 12 овцематках трехлетнего возраста Ставропольской породы, которые были разделены на 4 группы, по три головы в каждой.

Животным первой группы вводили ивомек, подкожно, в дозе 200 мг.г/кг живой массы. Сразу после обработки у животных наблюдалась незначительная болевая реакция.

Животных второй группы обрабатывали цидектином, подкожно, ь дозе 200 мкг/кг. При введении цидектина изменений в стереотипе поведения животных отмечено не было.

Животных третьей группы обработали интраназалыю 1%-ной (по д. в.) эмульсией неоцидола, в дозе 2 - 4 мл на голову. Аппликацию препарата проводили с использованием назального оросителя. Сразу после обработки, в течение нескольких минут, овцы чихали, отфыркивались, некоторые кашляли.

(Г- '

Животных четвертой группы Не обрабатывали, они служили кои тролем. •-

Клинических проявлений интоксикации у обработанных животнь отмечено не было. Количество сердечных сокращений, дыхательных дви жений, температура тела у животных всех опытных групп находились i пределах физиологической нормы и соответствовали аналогичным показателям у животных контрольной группы.

Известно, что объективную оценку воздействия изучаемых пре

паратов на организм животного можно дать на основании комплексных

• .с

гематологических исследований, включающих морфологические и биохимические методы. '

Исследования проводили до введения препаратоь, через 1,3 к 14 суток. В результате установили, что на третьи сутки после введения ивомека и цидектина у животных обеих групп количество зритрс цитов увеличилось на 25% (Р<0,001) и 23% (Р<0,001), соответственно Однако к 14-м сутках; опыта эти показатели, не превышали уровня исходных данных. У овец, обработанных неоцидолом, череа 24 часа былс

г~ .

отмечено недостоверное увеличение количества эритроцитов.

Количество гемоглобина в крови у овец, обработанных ивоме-ком на третьи сутки увеличилось на 11% (Р<0,05), у обработанных щ дект:>ном - увеличилось на 12% (Р<0,01) Через 24 часа Содержание гемоглобина у всех подопытных животных к 14-м суткам наблюдений не превышало границ физиологической нормы.

' Достоверного изменения числа лейкоцитов и их качественное состава выявлено не было.

Из биохимических показателей были исследованы: активность АЛТ, ACT, ДЦГ, ЩФ, ХЭ и содержание общего белка В хоче исследований достоверных изменений указанных показателей у обработанных животных не наблюдалось.

Анализируя результаты геммологических исследований, считаем, что препараты квомек, цидектин и неоцидол, променяемые в указанных дозах и методах не оказывает токсического воздействия на организм животных.

1 шводы

1. В степной зоне Ставропольского края зстроз овец имеет широкое распространение. Экстенсивность и: интенсивность оводовой инвазии при промышленной технологии содержания выше, чем при пастбищной и составляет на овцекомплексах 91,5% и 22,9 лич/гол, на откормочных площадках - 86,5% и 20,3 лич/гол, на пастбипщ -79% и 15,9лич/гол.

2. Ягнята в возрасти до одного года поражается астрозом в большей степени, чем взрослое овцепоголовье. Экстенсивность поражения молодняка в среднем составляет 98%, взрослых - 85,2 % с интенсивностью инзааии 49,6 и 13,12 личинок на голову, соответственно.

3. Уровень содержания преципитирующих антител в крови у больных зстрозом овец находится я прямой зависимости от количественного содержания личинок и, прежде всего, второй и третьей стадий развития. Реакция встречного иммуноэлегсгрофореза является более информативным методом обнаружения преципитируюцих противоличиноч-ных антител, чем реакция преципитации по Оухтерлони.

4. Соматические антигены из личинок О. оу1з второй и третьей стадий раавития обладают свойствами полных антигенов, способны индуцировать антитела и вступать в реакции как с преципитирующими, так и с гемагглвтинирувдими антителами.

5. Внутрикожное введение соматического антигена индуцирует у инва-

-....... л

зированных овец кожно-аллергические реакции немедленного, аамед ленного и смешанного типов.

6. При паразитироЕании личинок овечлего овода в крови инвааирован-ных »ивотных повышается активность ферментов пере актирования (ACT, АЛТ) ,^-глютамилтранспептидазы, щелочной фосфатааы, лактат-дегидрогеначы и ее изоэнзимного спектра, наблюдается снижение уровня общего белка и перераспределение процентного содержания белковых фракций в сторону снижения альбуминов и увеличения глобулинов, что свидетельствует об изменениях углеводного и белкового обмена и участии в патогенезе заболевания иммуно-аллерги-ческих реакций.

7. Паразитирование личинок овечьего овода в латентный период заболевания вызывает z местах докалшзахда развитие иммунного воспаления, которое затрагивает все функциональные структуры слизистой оболочки и характеризуется как реакция гиперчувствительности замедленного типа.

8. Интенсэффективносп интраназальных противоэстрозных обработок препаратами цимбуш, децис составляет 41 - 77%.

Ь. Интраназальная аппликация 1%-ной эмульсии неоцидола (2-4мл), подкожное введение ивомека шш цидекгина (200 мкг/кг) вызывают 100%-ную гибель личинок полостного овода всех стадий развития.

10. Обработка овец против псороптоза методом купания в проплывной ванне с использованием 0,025% (по д. в.) эмульсии неоцидола сни- • жает экстенсивность оводовой инвазии на 82,2%, интенсивность -на 94,7%, что исключает необходимость проведения дополнительных прстигозстрозных мероприятий.

11. Купание овец в 0,005% (по д. в.) эмульсии бутокса в проплывной ванне не обеспечивает достаточной экстенс- (62.8%) и интенеэф-фективности (59,5%) на личинок полостного оъода.

12. Интраназальная обработка овец 1%-ной (по д. в.) эмульсией неоци-■ дола, подкожное введение ивомека или"' цидектина (£00 мкг/кг) не вызывают' морфологических и биохимических изменений крови у обрабатываемых животных.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Толоконников В, П., Золотухина Л. 3 , Мозуляка Н. С. эффективность новых препаратов при вольфартиозе и эстроэе овец // Диагностика, лечение, профилактика инфекционных и паразитарных заболеваний сельскохозяйственных животных: Сб. науч. тр/Ставроп. СХИ. - Стчк-рополь, 1289. - С. 40 - 43.

2. Назальный ороситель//Авт. свид. N 1426520, 1988. - Зс.

3. Наставление по применению ивомека для борьбы с возбудителями арахноэнтомозов и гельминтозов. Утверждено Главным.управлением ветеринарии М2Х РФ 04.01.90 г;

4. Толоконников Е П., Мозуляка Е С. Сравнительная эффективность ран-личных средств и методов борьбы с астрозом овец//Диагностика. лечение, профилактика инфекционных и паразитарных заболеваний сельскохозяйственных животных: Сб. науч. тр/Ставроп. СХИ. Стаи-рополь, 1993.- С. 21 - 23.

5. Мозуляка ЕС.. Толоконников В. П. Гистоморфологические изменения слизистой оболочки носовой полости овец, инвазированных личинка ми полостного овода/УДиагностика, лечение, профилактика ин^кци онных и паразитарных заболеваний сельскохозяйственных животных: Сб. науч. тр/Ставроп. СХИ. -Ставрополь, 1993. -С. 19 - "П.

6. Толоконников ЕЕ, Мззуляка ЕС. Оценка эффективности отдельны* инсектицидов при эстрозе овец // Мат. междунар. научно-ицактич. конф. / Акт. пробл. мед. и вет. паразитологии, - Витгбск, 1991». С 24

3. 1 т, 100 0« ъ. Пе ч. л. С ГС Ж