Бесплатный автореферат и диссертация по геологии на тему

Химическая характеристика и биологическая активность гумусовых кислот некоторых лечебных грязей

ВАК РФ 04.00.03, Биогеохимия

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Косьянова, Зинаида Федоровна

свойствах

1.1. Генетическая классификация лечебных грязей

1.2. Современные методы исследования гумусовых кислот и их свойства

1.3. Биологическая активность гуминовых кислот

Глава 2. Объекты и методы исследования

2.1. Выбор и характеристика объектов исследования

2.2. Методы исследования

2.2.1. Методы выделения, очистки и количественного определения

2.2.2. Методы химического исследования гумусовых кислот

2.2.3. Физические методы

2.2.4. Методы изучения биологической активности

Глава 3. Химический состав и свойства гумусовых кислот

3.1. Элементный состав

3.2. Молекулярно-массовое распределение

3.3. Функциональные группы и пороги агрегации

3.4. Кислотный гидролиз

3.5. Щелочное окисление перманганатом калия

Глава 4. Результаты изучения гумусовых кислот физическими методами

4.1. Электронные спектры поглощения

4.2. Инфракрасные спектры поглощения

4.3. Рентген-дифрактограммы

4.4. Электронная растровая микроскопия

4.5. Термограммы гуминовых кислот

4.6. ЭПР-спектры и концентрация парамагнитных центров

Глава 5. Изучение биологической активности гуминовых кислот Тамбуканской лечебной грязи

5.1. Противовоспалительная активность

5.2. Влияние гуминовых кислот на гематологические показатели у животных при экспериментальной лейкопении

Выводы

Введение Диссертация по геологии, на тему "Химическая характеристика и биологическая активность гумусовых кислот некоторых лечебных грязей"

фундаментальные исследования органического вещества почв, современных и ископаемых осадков показали единство и глобальный характер процесса гумификации на Земле. Использование ранее разработанных Д.С.Орловым теоретических представлений и экспериментальных приёмов анализа позволили нам впервые изучить гумусовые кислоты различных типов лечебных грязей (пелоидов), широко применяющихся в лечебных целях и являющихся ценным источником получения различных лекарственных средств.

Актуальность темы. Одной из важнейших задач Советского здравоохранения является поиск, всестороннее изучение биологически активных природных соединений и разработка на их основе высокоэффективных лекарственных препаратов.

Среди биогеохимических объектов пелоиды относятся к наиболее древним и эффективным природным средствам лечения различных заболеваний, приобретающим в настоящее время всё большее применение.

В научной проблеме использования природных факторов в лечебных и профилактических целях важным является вопрос о возможности получения биологически активных препаратов из объектов биогеохимического происхождения (лечебных грязей, рапы и др.), которые не уступали бы им по эффективности, могли быть использованы в комплексном лечении с различными физическими факторами, были бы удобны для транспортировки и хранения, экономически недорогостоящими 108.

В настоящее время известно около 15 наименований различных грязевых препаратов: отгоны, отжимы, фильтраты, центрифугаты, возгоны, экстракты и т.д. Кроме того, существует несколько фармакопейных форм: пелоидодистиллят, гумизоль, пелоидин, торфот,"2?иБС", "грязевой препарат". В Румынии широко используется экстракт сапройелей - пелобиоль; в Австрии - водный экстракт торфа "^АгбшШт", хг41оох\Исог- ¿и^епь/оп -ба/ем"; в Польше разработана тех

7|=> Т7 нология приготовления грязевой пасты из верховых торфов

В пользу грязевых препаратов свидетельствуют их преимущества по сравнению с природной лечебной грязью: их применение почти не имеет противопоказаний, что обусловлено лёгкой их переносимоство из-за отсутствия нагрузочного влияния на сердечно-сосудистую сис

74 тему; грязевые препараты экономически значительно выгоднее .

С точки зрения биогеохимии применение грязевых препаратов позволит рационально использовать природные ресурсы и в меньшей степени нарушать природное равновесие, т.к. для получения грязевых препаратов потребуется в сотни - тысячи раз меньше лечебной грязи, чем при использовании её в здравницах для аппликаций. Например, из тонны Тамбуканской лечебной грязи можно получить около двух тонн фармакопейной формы грязевого препарата в то время как ежегодно на нужды грязелечения расходуется местными здравницами и вывозится в другие города нашей страны свыше 14-ти тысяч 72 тонн грязи .

Вопросам изучения механизма действия лечебных грязей в целом, а также грязевых препаратов, посвящено немало исследований, но следует отметить, что механизм действия в настоящее время до конца не изучен.

В последнее время многие исследователи высказывают мнение о том, что эффект грязелечения определяется в основном химическим

7Р> действием органических веществ, содержащихся в лечебных грязях

74,76^ преобладающим компонентом органических веществ лечебных

Т24. грязей являются гумусовые кислоты , однако они недостаточно изучены в физико-химическом аспекте и с точки зрения биологического действия на организм, несмотря на имеющиеся литературные данные о высокой биологической активности гуминовых кислот (ПС), выделенных преимущественно из почв и торфов. Химический состав гумусовых кислот иловых минеральных сульфидных и сопочных лечебных грязей современными методами исследования никем не изучался.

Широкое использование лечебных грязей для лечения больных с различными заболеваниями и недостаточный уровень знания о химическом составе и механизме действия лечебных грязей в целом, и особенно, органических веществ, в том числе гумусовых кислот, выдвигают необходимость изучения на современном уровне химического состава, физико-химических свойств и биологического действия лечебных грязей и составляющих компонентов органических веществ.

Это и явилось главной предпосылкой для проведения экспериментальных исследований в области изучения структуры и свойств гумусовых кислот пелоидов.

Цель и основные задачи исследования. Наши исследования имели целью дать научное обоснование к расширению терапевтического применения ГК на основе физико-химических и биологических исследований. Для осуществления этой цели были поставлены следующие основные задачи:

1. Изучить в физико-химическом аспекте гумусовые кислоты иловых минеральных сульфидных и сопочной лечебных грязей современными методами исследования.

2. Оценить биологическую активность ГК одной из лечебных грязей.

Решению поставленных задач посвящены исследования, составившие содержание настоящей диссертационной работы.

Научная новизна. Впервые изучены гумусовые кислоты иловых минеральных сульфидных и сопочной лечебных грязей с применением современных методов исследования и установлена принадлежность гумусовых кислот пелоидов к типичным гумусовым кислотам, аналогичным гумусовым кислотам почв, современны};: и ископаемых осадков. Разработана спектрофотометрическая методика определения содержания ПС в лечебных грязях с использованием дифференцированных коэффициентов экстинкции. Изучена зависимость структуры и свойств гумусовых кислот иловой минеральной сульфидной лечебной грязи (Тамбуканс-кой) от глубины залежи лечебной грязи и сезона года.

Впервые установлено, что ГК 'Гамбуканекой лечебной грязи обладают противовоспалительным действием и способностью нормализовать содержание лейкоцитов и лейкоцитарную формулу крови у животных при экспериментальной лейкопении.

Практическая значимость. Предложен новый лекарственный препарат для лечения заболевания крови - лейкопении, обладающий также противовоспалительной активностью. Установлено классификационное положение гумусовых кислот пелоидов в системе гумусовых кислот почв, современных и ископаемых осадков. Предложена методика определения содержания ГК в лечебных грязях с использованием дифференцированных коэффициентов экстинкции (внедрена в практику физико-химической лаборатории минеральных вод и лечебных грязей Пятигорского НИИ курортологии и физиотерапии, рационализаторское предложение № 12 от 15 июня 1982 года).

Апробация работы и публикации. Основные результаты проведённых исследований доложены на конференциях молодых учёных Пятигорского НИИ курортологии и физиотерапии (1980, 1984 гг.), Пятигорского фармацевтического института (1981, 1982 гг.), на 3-ей республиканской научной конференции "Проблемы использования сап-ропелей в народном хозяйстве" (Минск, 1981 г.), на расширенном заседании кафедры органической химии Пятигорского фармацевтического института (1983 г.), на заседании кафедры химии почв факультета почвоведения Московского государственного университета им. М. В. Ломоносова (1984 г.); опубликованы в материалах: а) зональной научно-технической конференции "Химия гумусовых кислот, их роль в природе и перспективы использования в народном хозяйстве" (Тюмень, 1981 г.) ; б) 3-ей республиканской научной конференции "Проблемы использования сапропелей в народном хозяйстве" (Минск, 1981 г.); в) УП-го Всесоюзного семинара "Органическое вещество в современных и ископаемых осадках" (Ташкент, 1982 г.) ; г) УШ-го Всесоюзного съезда физиотерапевтов и курортологов (Сочи, 1983 г); д) 11-го Международного совещания по химии и биотехнологии биологически активных природных веществ (Будапешт, 1983 г.) ; 14-го Международного симпозиума по химии природных веществ (Познань, 1984 г., Гданьск, 1984 г.); одна статья депонирована во ВНИИМЙ (март, 1983 г.); одна заявка на изобретение (получено положительное решение из Гос.Комитета по делам изобретений и открытий на новый лекарственный препарат,).

Номер Государственной регистрации проблемы во ВНИИМИ центре - 81050246. УЖ 615.32:547.992.2/015.11.

ШВА I. СОВРЕМЕННЫЕ ПРЕДСТАВЛЕНИЯ О КЛАССШИКАЦИЙ ЛЕЧЕБНЫХ ГРЯЗЕЙ, МЕТОДАХ ИССЛЕДОВАНИЯ ГУМУСОВЫХ КИСЛОТ И ИХ СВОЙСТВАХ

Заключение Диссертация по теме "Биогеохимия", Косьянова, Зинаида Федоровна

ВЫВОДЕ

1. Установлено сходство и различие структуры и свойств гумусовых кислот различных типов лечебных грязей и их классификационное положение в системе гумусовых кислот почв, современных и ископаемых осадков. При общем подобии показана специфичность состава и свойств гумусовых кислот в зависимости от конкретной биогеохимической ситуации условий их формирования (грязеобразующие породы, геоботанический фактор, микробиологический фактор, сезонность, глубина залегания и др.) .

2. Впервые получены комплексные физико-химические структурные параметры выделенного класса соединений - гумусовых кислот пе-лоидов (степень полидисперсности, молекулярные массы, парамагнитные свойства, характер рентген-дифрактограмм и термограмм, спекоры поглощения в УФ-, видимой и ИК-областях, значения коэффициентов экстинкции, порога агрегации, функциональные группы, выход бензол-поликарбоновых кислот, определённый аминокислотный и углеводный состав легкогидролизуемых частей гумусовых кислот).

3. Гумусовые кислоты пелоидов являются высокомолекулярными и полидисперсными соединениями. Диапазон средних молекулярных масс ГК составляет 40-65 тысяч. ГК пелоидов более полидисперсны (2-8 фракций), чем Ж (2 фракции).

4. Молекулярная структура ГК пелоидов характеризуется присутствием ароматических и алифатических компонентов. Высокие атомные отношения Н:С, низкие коэффициенты экстинкции, слабовыражен-ные полосы С=С связей ароматических колец в ИК-спектрах, характер рентген-дифрактограмм и термограмм, содержание функциональных групп, результаты кислотного гидролиза и щелочного окисления позволяют считать, что в структуре ГО пелоидов, особенно, в ГК Там-буканской грязи, преобладают алифатические цепочечные фрагменты, несущие углевод-белковые комплексы, а ароматические фрагменты выражены слабо.

5. Графостатистический анализ гумусовых кислот по Ван-Креве-лену показывает, что гумусовые кислоты пелоидов более гидрогени-зированы и метилированы, чем гумусовые кислоты почв; ПС пелоидов относятся к подгруппе восстановленных ПС.

6. В гумусовых кислотах пелоидов присутствуют ПМЦ (свободные радикалы) в концентрациях: в ПС - от 1,8 х 10* ^ до 6,1 х 10*7спин£, в Ж - от 0,10 х Ю17 до 0,36 х Ю17 спин/г.

7. ПС сопочной грязи отличаются от ПС иловых минеральных сульфидных грязей меньшим содержанием азота и большим содержанием углерода. Для ПС сопочной грязи характерна большая устойчивость к кислотному гидролизу как по общему содержанию веществ в гидроли-зате, так и по содержанию аминного азота, что может быть связано ч. с более высокой степенью гумификации органического вещества сопочной грязи, с большей степенью ароматичности и меньшим содержанием алифатических фрагментов в структуре ПС, с наличием в молекулах ПС преимущественно циклических форм азота, что подтверждается результатами рентген-дифрактометрии, термографии, элементного анализа, порогов агрегации, определения степени ароматичности.

8. Общий принцип строения гумусовых кислот Тамбуканской грязи не является функцией глубины залежи лечебной грязи и сезона года, но в деталях строения выявлена определённая зависимость:

- в весеннее и осеннее время ПС более полидисперсны и имеют более высокую степень гидролизуемости, чем в летнее время;

- ПС чёрного слоя залежи лечебной грязи в летнее время приобретают черты наиболее химически "зрелых" ПС по сравнению с ПС илового и тёмно-серого слоёв лечебной грязи;

- по содержанию функциональных групп и концентрации ПМЦ (свободных радикалов) ПС илового слоя лечебной грязи должны быть наиболее химически, возможно, и биологически активны.

9. ГК Тамбуканской грязи обладают высокой противовоспалительной активностью: снижают процессы экссудации на 44% в дозе Юмг/кг и на 42% в дозе 20 мг/кг по сравнению с контролем, а процессы пролиферации - на 55% и 50%, соответственно.

10. ГК Тамбуканской грязи обладают выраженной способностью нормализовать содержание лейкоцитов и лейкоцитарную формулу у животных с экспериментальной лейкопенией, которая предположительно может быть обусловлена наличием ПМЦ (свободных радикалов), карбоксильных групп, хинонных групп, фенольных и спиртовых гидроксилов.

11. По содержанию функциональных групп и концентрации ШЦ (свободных радикалов) ГК Тамбуканской грязи должны быть наиболее химически, возможно, и биологически активны среди изученных ГК пелоидов.

Библиография Диссертация по геологии, кандидата биологических наук, Косьянова, Зинаида Федоровна, Пятигорск

1. А. с. 404479 (СССР). Способ получения лекарственного средства из иловых грязей материковых озёр /А.Л.Шинкаренко - 22/Х-73 гУ.

2. А. с. 197870 (СССР). Способ получения препарата "Гумизоль" /Э.И.Кеель 9/У1-67 г./.

3. Адилов В.Б. и др. К вопросу о систематизации лечебных грязей.- В кн.: Вопросы изучения лечебных минеральных вод, грязей и климата: Труды ЦНИИКиШ. М., 1980, т. XI III, с. 90-105.

4. Александров В.А. Пелоиды (лечебные грязи) СССР. М., 1940.- 48 с.

5. Александрова Л.Н. Процессы гумусообразования в почве. В кн.: Гумусовые вещества почвы: Записки Ленингр. сельхоз. ин-та. Л., 1970, т. 142. - 233 с.

6. Александрова Л.Н. Органическое вещество почвы и процессы его трансформации. Л.: Наука, 1980. - 287 с.

7. Александрова Л.Н., Назарова A.B. Гетерогенность гуминовых кислот и её происхождение. В кн.: Проблемы почвоведения. - М.: Наука, 1978, с. 48-52.

8. Алёшинская Э.Е. и др. К фармакологии препарата солодки гладкой. Фармакол. и токсикол., 1964, т. 27, вып. 2, с. 217.

9. Алиев С.А. Парамагнитные свойства и физиологическая активность гумусовых кислот. В сб.: Теория действия физиологически активных веществ. Днепропетровск, т. У111, 1983, с. 78-80.

10. Алиев С.А. Парамагнитные свойства и физиологическая активность гуминовых кислот почв. " Mud. Mot Нитиб d Pronta0/. Ошпб. íump. Вгпо" 1979, 3. I, p. 373-378.

11. Алиев С.А., Касимов P.M. Парамагнитные свойства гуминовых кислот почв Азербайджанской ССР. Почвоведение, 1971, № I, с. 77-83.

12. Алиев С.А. и др. Органическое вещество сопочных грязей Азербайджанской ССР. Вопр. курортол., М., 1981, № 2, с. 22-24.

13. Бабанин В.Ф. и др. О природе линий в спектрах ЭПР гумусовых кислот. Почвоведение, 1977, Р I, с. 65-72.

14. Баталкин Г.Г. О природе действующего начала физиологически активных гуминовых кислот. В кн.: Труды Международного симпозиума 1У и II Комиссии МТО "Торф, его свойства и перспективы применения". Минск, 1982, с. 115-119.

15. Бахман В.И. и др. Методика анализа лечебных грязей (пелоидов). М., 1965. - 142 с.

16. Берлин А.А. и др. Химия полисопряжённых систем. М.; Химия, 1972, с. 238-263.

17. Богданова И.В., Лютова О.В. Сравнительная характеристика химического состава жидких и сухих препаратов на основе лечебной грязи и рапы озера Карачи. В сб.: Препараты из лечебной грязи и рапы. Томск, 1983, с. 7-11.

18. Бунакова Г.В. О химической природе органических веществ, растворённых в минеральной воде. В кн.: Питьевые минеральные воды. Пятигорск, 1969, с. 162-165.

19. Вериго А.А. Исследование Одесских целебных лиманов и грязей. Отчёты о деятельности Одесского бальнеологического общества с 1877 по 1881 гг. Одесса, 1881, с. 29.

20. Возбуцкая А.Е. Химия почвы. М.: Высшая школа, 1968. - 427 с.

21. Воларович Н.П., Ельницкая Н.К. Исследование высокодисперсной фракции торфа. В сб.: Комплексное использование торфа. М.-Л.: Недра, 1965, с. 274.

22. Глебова Г.И. Гиматомелановые кислоты почв и их место в системе гумусовых веществ. Дис. . канд. биол. наук. М., 1980. - 171 с.

23. Глебова Г.И. Определение размеров и формы частиц гумусовых кислот с помощью электронной микроскопии. Почвоведение, 1972, № 7, с. II5-II8.

24. Грачёв А.Д. и др. Гуминат из торфа активный стимулятор организма животных . - В кн.: Торф, его свойства и перспективы применения: Труды Международного симпозиума 1У и II Комиссии МТО. Минск, 1982, с. 548-550.

25. Дёмина М.А., Вульф Л.Н. Опыт применения физиологически активных гумусовых веществ в птицеводстве. В кн.: Гуминовые удобрения. Теория и практика их применения. Днепропетровск, 1977, т. БГ, с. II9-I25.

26. ДетерманГ. Гель-хроматография. М.: Мир, 1970. - 252 с.

27. Драгунов С.С. Строение гуминовых кислот и приготовление гу-миновых удобрений. В кн.: Труды Московского торфяного ин-та. М., 1958, вып. 8, с. 244-256.

28. Драгунов С.С. Методы исследования гумусовых веществ. В кн.: Труды почвенного института им. В.В.Докучаева. - М.:Изд-во

29. АН СССР, 1951, т. 38, с. 65-98.

30. Драгунов С.С., Мурзаков Б.Г. Гетерогенность фульвокислот обыкновенного чернозёма. Почвоведение, 1970, Р 3, с. 115121.

31. Драгунова А.Ф. Отношение гуминовых кислот к некоторым растворителям и ускоренные методы определения кислых функциональных групп. В кн.: Гуминовые удобрения. Теория и практика применения. Харьков, 1957, е., 47-55.

32. Екатеринина Л.Н. Сравнительное исследование фракционного состава гуминовых кислот торфов, бурых углей и выветрившихся углей: Автореф. Дис. . канд. хим. наук. М., 1967. - 24 с.

33. Екатеринина Л.Н., Кухаренко Т.А. Исследование производных гуминовых кислот к вопросу о механизме реакции с 2-хлорис-тым оловом . Почвоведение, 1971, Р 3, с. 68-75.

34. Иванов В.В., Малахов A.M. Генетическая классификация лечебных грязей (пелоидов) СССР. В кн.: Материалы по изучению лечебных грязей, грязевых озёр и месторождений. М., 1963, с. 9-26.

35. Иванов В.В., Михеева Л.С. Общие представления о лечебных грязях. В кн.:Лечебные грязи СССР. М., 1978, с. 5-16.

36. Ингрэм Д. Электронный парамагнитный резонанс в биологии. М.: Мир, 1972, с. 13-47.

37. Карпухин А.И. Применение гелевой хроматографии для определения молекулярных масс фульвокислот. Изв. ТСХА, 1970, вып.5, с. I3I-I36.

38. Касаточкин В.И., Зильбербранд О.И. Рентгенография и инфракрасная спектроскопия в применении к исследованию строения гумусовых веществ. Почвоведение, 1956, № 5, с. 80-85.

39. Касаточкин В.И. и др. Спектральное и рентгеновское исследование химического строения гумусовых веществ почвы. В сб.: Физика, химия, биология и минералогия. М., "Наука", 1964,с. 195-205.

40. Касаточкин В.И. и др. Рентгенографическое исследование гуми-новых кислот. ДАН, т. LXXIY, 1950, Р 4, с. 775-778.

41. Касаточкин В.И., Ларина Н.К. Исследование строения гуминовых кислот ископаемых углей. ДАН СССР, 1957, т. 114, № I,с. 139-142.

42. Кеель Э.И. Новый лечебный препарат "Г'умизоль", изготовленный из Эстонской морской грязи. Тезисы докладов совещания по материалам апробации лечебного препарата "Гумизоль", полученного из Эстонской морской грязи. - Таллин, I960, с. 4-5.

43. Колесников М.П., Аммосова Я.М. ЭПР-спектроскопия свободных радикалов почвенных гуминовых кислот. В кн.: Накопление и преобразование седикахитов. М.; Наука, 1979, с. 187-194.

44. Комиссаров И.Д., Логинов Л.Ф. Рентгеноструктурная характеристика гуминовых препаратов, получаемых из окисленного угля и торфа щелочной экстракцией. В кн.: Тр. Тюменского сель-хоз. ин-та, 1971, т. 14, с. 91-98.

45. Комиссаров И.Д., Логинов Л.Ф. Электронный парамагнитный резонанс в гуминовых кислотах. В кн.: Тр. Тюменского сель-хоз. ин-та, 1971, т. 14, с. 99-115.

46. Комиссаров И.Д. и др. Изучение свободно-радикальных состояний органического вещества сапропелей методом ЭПР. В кн.: Тр. Свердловского сельхоз. ин-та, т. 17, 1968, стр.115-122.

47. Комиссаров И.Д., Стрельцов Н.Н. Исследование молекулярной структуры гуминовых препаратов методом окислительной деструкции. В кн.: Тр. Тюменского сельхоз. ин-та, 1971, т. 14, с. 70-74.

48. Комиссаров И.Д., Стрельцов И.Н. Влияние способа извлечения гуминовых кислот из сырья на химический состав получаемых препаратов. В сб.: Гуминовые препараты: Научн. тр. Тюменского сельхоз. ин-та, 1971, т. 14, с. 48-63.

49. Кононова М.М. Органическое вещество почвы. М., 1963. - 292с.

50. Кононова М.М. Проблема почвенного гумуса и современные задачи его изучения. М.: Изд-во АН СССР, 1951. - 390 с.

51. Кононова М.М., Александрова й.В. Применение метода распределительной хроматографии на бумаге при изучении форм азота гумусовых веществ. Почвоведение, 1956, № 5, с. 86-95.

52. Корнилова М.Г. Бактерицидность гуминовых кислот сапропелей озера Малый Татаскуль. В кн.: Тр. Свердловского НИИКиФ, 1970 , т. 27, с. 73-75.

53. Корнилова М.Г. О роли гуминовых кислот в механизме бактерио-статического действия лечебных грязей. В сб.: Сборник вопросов курортологии и физиотерапии на Урале. Свердловск, 1967,с. 57-58.

54. Кост Е.А. Справочник по клиническим и лабораторным методам исследования. М.: Медицина, 1975. - 383 с.

55. Косьянова З.Ф., Шинкаренко А.Л. Спектрофотометрическое определение содержания гуминовых кислот в лечебных грязях.- В кн.: Органическое вещество в современных и ископаемых осадках: Тез. докл. У11 Всесоюзн. семинара. Ташкент, 1982, с. 67-68.

56. Косьянова З.ш. и др. К химической характеристике гумусовых кислот Тамбуканской лечебной грязи. В сб.: Проблемы использования сапропелей в народном хозяйстве: Тез. докл. Минск, 1981, с. 45-46.

57. Крючкова Н.П., Черепанова М.Н. Стимулирующее действие гуминовых и битуминозных веществ на грязевую микрофлору. Материалы Всесоюзн.съезда физиотерапевтов и курортологов. Баку, 1965, с. 187-188.

58. Кузнецов Б.Г. Некоторые наиболее употребительные алгоритмы, используемые в научно-медицинских исследованиях. Пятигорск, 1975. - 14 с.

59. Курбатов И.М. Происхождение и состав органической части торфа: Автореф. Дис. . докт. биол. наук. M., 1949. - 17 с.

60. Кухаренко Т.А. Гуминовые кислоты ископаемых углей. Химия твёрдого топлива. M., 1968, Н°- 4, с. 13-25.

61. Кухаренко Т.А. Химия и генезис ископаемых углей. М.: Гос-гортехиздат, i960. - 328 с.

62. Лиштван И.И., Король Н.Т. Основные свойства торфа и методы их определения. Минск: Наука и техника, 1975. - 319 с.

63. Лях С.П., Рубан Е.Л. Микробные меланины. М.: Наука, 1972, с. 44.

64. Мазина О.И. и др. Изучение гуминовых кислот тростникового торфа методом термического анализа. Изв. АН БССР, серия хим. наук. Минск, 1982, № I, с. 85-89.

65. Международная классификация пелоидов. В кн.: Пелоиды СССР лечебные грязи : Александрова В.А. М., 1940, с. 4-5.

66. Методические указания по применению унифицированных клинических лабораторных методов исследований. М., Мин.здрав. СССР, 1977. - 229 с.

67. Методические указания по применению унифицированных клинических лабораторных методов исследований. М., Мин. здрав. СССР, 1973. - 173 с.

68. Миленина Н.Г. Изучение химического состава и биологических свойств липидов некоторых лечебных грязей: Автореф. Дис. . канд. биол. наук. Фрунзе, 1974. - 24 с.

69. Михеева Л.С. Чокракское озеро и его лечебные ресурсы. В сб, Лечебные грязи СССР. М., 1971, с. 99-109.

70. Навоша Ю.Ю. ;и др. О вкладе семихинонных ион-радикальных состояний в парамагнетизм гуминовых кислот. Химия твёрдого топлива, 1982, № 2, с. 24-26.

71. Неменова Ю.М. Методы лабораторных клинических исследований. М.; Медицина, 1972. - 424.

72. Ойвин И.А. Статистическая обработка результатов экспериментальных исследований. Патологич. физиология и экспериментальная терапия. М.: Медицина, I960, № 4, с. 76-85.

73. Олефиренко В.Т., Бирюкова А.А. Сравнительный анализ и особенности некоторых способов приготовления нефармакопейныхгрязевых препаратов. Вопр. курортол., 1982, № I, с. 35-39.

74. Олефиренко В.Т., Бирюкова А.А. Некоторые вопросы совершенствования лечебного использования грязевых препаратов. Вопр. курортол., 1979, К0- I, с. 11-15.

75. Олефиренко В.Т. и др. О классификации грязевых препаратов.- Вопр. курортол., 1980, № 2, с. 10-14.

76. Орлов Д.С. Гумусовые кислоты почв. М.: Изд-во МГУ, 1974.- 332 с.

77. Орлов Д.С. Кинетическая теория гумификации и схема вероятного строения гуминовых кислот., Биологические науки, 1977,9, с. 5-16.

78. Орлов Д.С. Теоретические и прикладные проблемы химии гумусовых веществ. Итоги науки и техники. Серия: Почвоведение и агрохимия, 1979, т. 2, с. 138-132.

79. Орлов Д.С. и др. Развитие исследований в области химии гумусовых кислот. В сб.: Теория действия физиологически активных веществ. Днепропетровск, 1983, т. 8, с. 3-11.

80. Орлов Д.С. и др. Молекулярные веса, размеры и конфигурация частиц гумусовых кислот. Почвоведение, 1971, № II, с. 43-57.

81. Орлов Д.С., Глебова Г.И. Электронно-микроскопическое исследование гумусовых кислот. .Агрохимия, 1972, Р 7, с.131-136.

82. Орлов Д.С., Горшкова Е.И. Размеры и форма частиц гуминовых кислот из чернозёма и дерново-подзолистой почвы. Научн. докл. высшей школы. Биол. науки, 1965, Р I, с. 207-212.

83. Орлов Д.С., Гришина Л.А. Практикум по химии гумуса. М.: МГУ, 1981. - 271 с.

84. Орлов Д.С. и др. Практикум по биохимии гумуса. М.: МГУ, 1969. - 157 с.

85. Орлов Д.С. и др. Пиролиз и дифференциальный термоанализ гумусовых веществ почвы. Агрохимия, 1968, Р I, с. 68-77.

86. Орлов Д.С., Ерошичева Н.Л. К вопросу о взаимодействии гумино-вых кислот с катионами некоторых металлов. Вестн. МГУ, сер. биол., 1967, Р I, с. 120-125.

87. Орлов Д.С. и др. Инфракрасные спектры поглощения гуминовых кислот. Почвоведение, 1962., Р I, с. 17-25.

88. Осадченко Л.А., Замковая С.С. О режиме и эксплуатации Пятигорского месторождения вод за 1976 год. (Отчёт ГГРЭС).- Кисловодск, 1977. 223 с.

89. Плохинский Н.А. Математические методы в биологии. М.: Изд-во МГУ, 1978. - 265 с.

90. Пунтус Ф.А. Химическая природа гуминовых кислот сапропелей БССР: Автореф. Дис. . канд. хим. наук. Минск, 1976. -18 с.

91. Пунтус Ф.А. Химическая природа гуминовых кислот сапропелей БССР. Дис. . канд. хим. наук. - Минск, 1976. - 149 с.

92. Раковский Б.Е., Батуро В.А. К вопросу об определении порога коагуляции гуминовых кислот. В сб.: Химия и генезис торфа и сапропелей. Минск, 1962, с„ 44-51.

93. Раскатов В.А., Кончиц В.А. Термографическая характеристика фульвокислот с различными молекулярными массами. Докл. ТСХА, вып. 238, 1978, с. 124-130.

94. Раскатов В.А. и др. Аминокислотный состав гидролизатов фульвокислот некоторых типов почв. Почвоведение, 1979, Р 10,с. 52-58.

95. Садовникова Л.К., Щербухин В.Д. Определение углеводов в гидро-лизатах гуминовых кислот. Научн. докл. высшей школы. Биоло-гич. науки, 1975, Р 8, с. 131-134.

96. Седлецкий И.Д. Итоги изучения структуры гуминовых веществ рентгенографическим, электронографическим и термическим методами. В кн.: Зап. Харьковского сельхоз. ин-та, 1946,т. 5, с. 187-197.

97. Седдецкий И.Д. Строение и свойства гуминовой кислоты, структурная и генетическая связь её с лигнинами и углями. В кн.: Изучение проблемы гумуса методом дифракции рентгеновских лучей. - М.: Изд-во АН СССР, 1937. - 99 с.

98. Седлецкий И.Д., Татарникова Л. Электронографическое исследование почвенных коллоидов. Почвоведение, 1941, Р 9, с. 3343.

99. Семёнов А.Д. Химическая природа органических веществ поверхностных вод. Гидрохим. материалы, 1967, т. XI. У, с. 155172.

100. Симаков В.Н., Алябина Г.А. Изучение фракционного состава гуминовых кислот некоторых типов почв методом гель-фильтрации. Почвоведение, 1972, № 7, с. 63-66.

101. Синчук В.П. и др. Холинэстераза и воспалительный процесс. Патологич. физиология и экспериментальная терапия. - М.: Медицина, 1978, № 4, с. 63-65.

102. Сокрут В.И. и др. Влияние физиологически активных веществ, получаемых из торфа, на рост молодняка крупного рогатого скота и свиней. В сб.: Гуминовые удобрения. Теория и практика их применения. Днепропетровск, 1977, т. 6, с.116-119.

103. Соловьёва В.П. и др. Влияние комплекса гуминовых кислот торфа, на фагоцитарную активность лейкоцитов. В сб.: Химия гумусовых кислот, их роль в природе и перспективы использования в народном хозяйстве: Тез. докл. - Тюмень, 1981, с. 79.

104. Соловьёва В.П. и др. Перспективы использования торфа в медицине. В кн.: Торф, его свойства и перспективы применения: Тр. Международного симпозиума 1У и II Комиссии МТО. - Минск, 1982, с. 229-231.

105. Стариков Н.М. и др. Достижения и перспективы развития проблемы грязевых и рапных препаратов. В сб.: Грязевые препараты. Томск, 1981, с. 5-12.

106. Стригуцкий В.П. и др. О природе парамагнетизма торфа. В кн.:

107. Торф, его свойства и перспективы применения: Тр. Международного симпозиума 1У и II Комиссии МТО. Минск, 1982, с. 73-77.

108. Сурков В.М., Перелётов В.М. Грязевые ресурсы Большого и Малого Тамбуканских озёр Ставропольского края. (Отчёт), ЦНЙИКиШ. М., 1967. - 292 с.

109. Тюрин И.В. Органическое вещество почв и его роль в почвообразовании и плодородии. Учение о почвенном гумусе.- М., 1937. - 285 с.

110. Узбеков A.A., Материалы к физиологическому анализу механизма действия лечебной грязи на систему кровообращения: Автореф. Дис. . докт. мед. наук. Алма-Ата, 1958. - 29 с.

111. Узбеков A.A. О механизме действия лечебных грязей на функцию кровообращения. Бюлл. экспер. биол. М., 1953, № 36, вып. 6, с. 14-17.

112. ИЗ. Урбах В.Ю. Биометрические методы в биологии. М.: Изд-во, Наука, 1964. - 415 с.

113. Хайс И.М., Мацек К.С. Хроматография на бумаге. М.: Изд-во ИД, 1962, с. 259-260.

114. Хмельницкий P.A. Современные методы исследования агрономических объектов. M.: Высшая школа, 1981. - 256 с.

115. Хмельницкий Р.А. и др. Использование инструментальных методов при исследовании структуры гумусовых соединений. Изв. ТСХА, 1977, вып. 6, с. 193-202.

116. Христева JI.A. К вопросу о природе воздействия гуминовых кислот на растения. Докл. ВАСХНИЛ, 1948, вып. 7, с. 29.

117. Христева Л.А. Влияние гуминовых кислот на развитие корней у различных сельскохозяйственных растений. Докл. ВАСХНИЛ, 1949, вып. 8, с. 23.

118. Христева Л.А. К природе действия физиологически активных гумусовых веществ на растения в экспериментальных условиях. В кн.: 11уминовые удобрения. Теория и практика их применения. Днепропетровск, сельхоз. ин-т, 1977, т. ХУ, с. 3-15.

119. Христева Л.А. и др. Влияние органического вещества почвы и удобрений на снятие поражений у растений, вызванных пестицидами. В кн.: Гуминовые удобрения. Теория и практика их применения. Днепропетровск, сельхоз. ин-т, 1973, т. 4,с. 58-73.

120. Черепанова М.Н. Групповой состав органического вещества лечебных грязей. Тр. ЦНИИКиФ. М.,1976, т. 31, с. 142-146.

121. Черепанова М.Н. Органическое вещество лечебных грязей и его связь с неорганическими компонентами. В сб.: Лечебные грязи СССР. M., 1971, с. 14-18.

122. Черепанова М.Н., Котова Т.И. Химический состав органического вещества лечебных грязей. В сб.: Грязевые препараты.- Томск, 1981, с. 27-29.

123. Черепанова М.Н., Солдатов В.В. Гуминовые кислоты торфа и их действие на кожу животных:. В сб.: Лечебные грязи СССР. М., 1971, с. 31-32.

124. Черников В.А. Почвенный гумус и его физико-химическая характеристика: Автореф. Дис. . канд. хим. наук. М., 1971,- 19 с.

125. Черников В.А., Касатиков В.А. Исследование природы г&миновых кислот почв солонцового комплекса дериватографическим методом. Химия и агрохимия почв, сер. почвоведение, 1977,3, с. 35-40.

126. Черников В.А., Кончиц В.А. Исследование строения гумусовых кислот почв дериватографическим методом. Биологич. науки, сер. почвоведение, 1979, Р 2, с. 70-75.

127. Шатихина Т.А., Тишкович A.B., Физико-химические свойства и физиологическая активность гуминовых кислот торфа, гуматов аммония и их фракций. В кн.: Торфяные и сапропелевые месторождения. - Калинин, 1982, с. 53-58.

128. Шинкаренко А.Л. Органическое вещество донных отложений. -В кн.: Тамбуканское озеро и его лечебная грязь. Ставроп. книжн. изд-во, 1954, с. 50-68.

129. Шинкаренко А.Л. Органические вещества лечебных грязей и их роль в механизме действия на организм. Методические рекомендации. Пятигорск, 1973. - 21 с.

130. Щукарев С.А. Физика и химия лечебных грязей. В кн.: Основы курортологии. М., 1932, т. I, с. 137-167.

131. Юхнин A.A. Физико-химическое исследование гумусовых кислот и их дериватов: Автореф. Дис. . канд. биол. наук. М.: Изд-во МГУ, 1973. - 22 с.

132. Юхнин A.A. и др. Определение углеводов в почвах и почвенных компонентах. Научн. докл. высшей школы. Биол. науки,1973, № 5, с. 131-134.

133. Юхнин А.А., Орлов Д.С. Фракционирование фульвокислот на угле. Научн. докл. высшей школы. Биол. науки, 1972, № 5,с. I38-141.

134. Л&потеп yotef&SOh b.) fy. meMod^at ^kraieó qf ¿pent frgi/ог pr?d mmIc éuSstü/fcez ¿и dea- (%,'m. tifcfa, ?<S, p. W.140. *flr?ol&l60r? /f.rf., HepSutn <st. iboctiorroi/o/r of fie/sr? te ocid fy ge? petmab'on

135. I # Mentón oM N, f¡rzo/7}2<7¿££ fí 3 tfbüd чИЛ, Я Humicadd I. ¿pecha of fit/mie qc/ck5. - 1ЩеЗ,р.1656.

136. Сс>хЫ P. ztf ¿ШШчт P.M. xflmino acid composition qforgan/eassociated epréonate wd nw Carbonate s?dir??e<7¿5. f/eod?irr7„ Собтос/и'т. Jefa, 1313, 42,, p. 1Z31.

137. FAO/MFA МлШ JUe&fng, РиШМс/¿r/966.148. {¡Ш Vuna^ éefim'hn M. ûfp# wd eétñvfyfeconcentration anjeen rac/icafc ш a-¿p/S¿Ы.bot ému. d9Z0} Щ л,£г p. Q**149 d. ¿и&е/к/г г&роябг ¿o ¿/r/fam/nat/o. A/oeSem. Pharma co¿.> iJ?, . ópet. ¿uppf.

138. QHOL C&e+vueaf ûn^Ucf^éS. JfedA У. , ¿WÇ^J^Z,p. dfs-d?¿:162. ißfinde/iMüHti off. -fen^&ùW ярръ&ясЛ4iiuduie qf Лс/w'e aes'ds: dperfw-f m'd&nee ^rt $ dew'-stftk-blOM -^c/rpt/c ac/cfô. feûnr Pfa/tf ¿cvsrs 3. Ртю-А?

139. S rna-u> ¿pectzû/rietw. oA'etâ. 7. t¿3 p. W-2J3.163. éit'uï&tncL y, ^ SpcL Ziï, c?Â7 iïft Otgan/â /wet/watienand ieûehd -¿twe mtfaf epnürí ш ¿¿ис/яг*. -Зи g M

140. ЫыЩ. Яд. PM<¿. lÜkUt Сопоъ.

141. Mxd¿ tf™. ¿W-Л Cfá-é, p. ¿31-X93. .164. °9H€/l if' tf fiumccô ¿¿/¿/vvfyíafa fr Wdtange геб/иб. 6c?/e Sc/., d9?0, díO, A,ít,p?. ¿só:

142. OUub' Г Mx/nt Auntie ae/d Ut MtaJfrvJ-tev

143. MJ. ïwtiôiùcnat Ммрсб fr -¿¿е of ^^

144. Untie оые/б and uMi'c^/^ ¿¿¿-иш« Jfawe Md W OA* -faará?

145. M. Humic <3//£ita/?c£ó : СЯет/з^у and reaef/ofó. ¿o¿¿ (hgonic Mt&i, ¿9 M, 8, P172. àdndste/i M-, Kodama H. <Jt eée-ito*? ,77/егоЗсо/э/б еха/л/xci-tíon o£ ¿t/fac ос/с/. £eoc/é??#?cL t JÇ^d, *

146. ЖуоЛ/, Mozo. СЯемсае Járatib5nf ío¡e fíum/C Qt¡ di. j//. JéíozSonce p/J cc/r-tfti qf^ií/rj/c.1. Z pfemi. «Mtb- P■

147. Vóutáyát Wtyoiiï/, yu-iATaUn-ka ZfioiO. Ciïemicaf iiua/îpl tf i>oi£ &um¡c ос i di. \¿ji. pff- tyependerí mû/tt ¿/fifai