Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

Геногеография вариантов каппа-казеина и дефицита лейкоцитарной адгезии у различных пород крупного рогатого скота

ВАК РФ 06.02.01, Разведение, селекция, генетика и воспроизводство сельскохозяйственных животных

Автореферат диссертации по теме "Геногеография вариантов каппа-казеина и дефицита лейкоцитарной адгезии у различных пород крупного рогатого скота"

на правах рукописи

Г

ч,

КИЙКО ЕЛЕНА ИЛЬИНИЧНА

ГЕНОГЕОГРАФИЯ ВАРИАНТОВ КАППА-КАЗЕИНА И ДЕФИЦИТА ЛЕЙКОЦИТАРНОЙ АДГЕЗИИ У РАЗЛИЧНЫХ ПОРОД КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

06.02.01 — разведение, селекция, генетика и воспроизводство

сельскохозяйственных животных 03.00.15 - генетика

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

I 0034621ОБ

Дубровицы- 2009

003462186

Работа выполнена в лаборатории генетики сельскохозяйственных животных Государственного научного учреждения «Всероссийский научно-исследовательский институт животноводства Российской академии сельскохозяйственных наук»

Научные руководители: доктор биологических наук, профессор

Марзанов Нурбий Сафарбиевич

доктор сельскохозяйственных наук Кургузкин Владимир Николаевич

Официальные оппоненты: доктор биологических наук

Иолчиев Байлар Садраддин оглы

кандидат биологических наук, доцент Новикова Людмила Федоровна

Ведущая организация: Федеральное государственное образовательное

учреждение высшего профессионального образования «Мичуринский государственный аграрный университет»

/7 .

Защита состоится «3 » « ^лл » 2009 года, в 10 часов, на

заседании совета по защите докторских и кандидатских диссертаций Д 006.013.02 при Государственном научном учреждении «Всероссийский научно-исследовательский институт животноводства Российской академии сельскохозяйственных наук».

Адрес института: 142132 Московская область, Подольский район, пос. Дубровицы, ВНИИЖ, т/факс (4967) 65-11-01.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ВНИИЖ.

Автореферат разослан « У? » « < ^¿-¿л^^А^7 » 2009 года.

Ученый секретарь совета

В.И. Сельцов

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность темы. На протяжении последнего столетия генетическое совершенствование молочных пород скота затронуло такие показатели, как повышение молочной продуктивности, эффективность использования кормов и приспособленность животных к максимальной механизации производственных процессов. Широкое применение искусственного осеменения, других методов биотехнологии позволяют интенсивно использовать лучших производителей для создания животных с ценными и устойчивыми наследственными задатками по основным продуктивным признакам [Черепанов Г.Г. и др., 2001; Марзанов Н.С. и др., 2006]. В связи с этим возникает необходимость более полной оценки производителей по племенным признакам, нарушения которых нередко проявляются в форме уродств и генетических заболеваний. Наиболее известными из них являются ряд болезней вызываемых точковыми мутациями. К ним относятся: дефицит лейкоцитарной адгезии (BLAD), дефицит уридинмонофосфатсинтетазы (DUMS), комплексное уродство позвоночника (CVM) и др. [Амерханов Х.А., Марзанов Н.С., 1999; Яковлев А. и др., 2004]. Широко распространенным заболеванием в молочном скотоводстве развитых стран, в которых разводится голштинская порода и ее помеси, является BLAD-синдром.

Результаты исследований отечественных и зарубежных учёных [Марзанов Н.С., Иолчиев Б.С., 1998; Hodges J., 1998; Kantanen J., 1999; Кузнецов B.M., 2002; Алипанах М. и др., 2004; Иолчиев Б.С., 2006; Марзанов Н.С. и др., 2007] показывают, что особую актуальность приобретает исследование аллельных вариантов генов каппа-казеина у животных молочных пород в связи с низкой частотой встречаемости желательных генотипов и неудовлетворительными технологическими качествами молока. Селекции на бел-ковомолочность, качественный состав и технологические показатели молока до сих пор уделяется мало внимания. Для того, чтобы активно влиять на ситуацию в стаде, популяции и породе в целом селекционерам важно иметь сведения о взаимосвязи различных генотипов по локусу каппа-казеина с показателями молочной продуктивности, воспроизводительными качествами животных и устойчивостью к заболеваниям.

Цель и задачи исследований. Целью работы является изучение сопряженности биологических и продуктивных особенностей у коров черно-пестрого скота. Геногеографический анализ встречаемости BLAD и каппа-казеина у пород животных из различных регионов Российской Федерации. В связи с этим решали следующие задачи: Определить полиморфизм гена каппа-казеина у быков молочных пород Тамбовской области.

• Дать характеристику генетической структуры стада черно-пестрой породы по частотам встречаемости аллелей и генотипов каппа-казеина.

• Изучить встречаемость аллеля BLAD-синдрома у племенных быков ОАО по племенной работе "Тамбовское" и коров черно-пестрого скота в условиях Тамбовской области.

• Дать сравнительный анализ геногеографии BLAD и каппа-казеина у животных из различных регионов Российской Федерации.

• Провести анализ на наличие ассоциаций между аллелями и генотипами каппа-казеина и показателями качества молока и хозяйственно-ценными признаками коров.

Научная новизна. Впервые проведен сравнительный анализ геногеографии BLAD и каппа-казеина у пород крупного рогатого скота из различных регионов Российской Федерации. Проведен популяционно-генетичес-кий анализ частоты встречаемости аллелей и генотипов каппа-казеина и BLAD у быков 8 пород ОАО по племенной работе "Тамбовское" и коров черно-пестрой породы Тамбовской области. Изучено качество молока с учетом аллелей и генотипов каппа-казеина у коров черно-пестрой породы Тамбовской области.

Теоретическая и практическая значимость работы. Определение генотипов по локусу каппа-казеина позволяет прогнозировать молочную продуктивность и получать молоко с лучшими технологическими качествами. Результаты исследований аллельных вариантов каппа-казеина и BLAD будут использованы при составлении программ племенной работы с черно-пестрой породой на уровне хозяйств и в целом по Тамбовской области.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

- Оценка аллелофонда у быков-производителей 7 пород и помесей и геноти-пирование популяции коров черно-пестрой породы по 2-м типам генетических маркеров в условиях Тамбовской области показала преобладание к-СпА аллеля и отсутствие аллеля BLAD.

- Геногеография и сравнительная характеристика аллеля BLAD у животных различных регионов Российской Федерации позволяет купировать мутант-ный аллель в селекционно-племенной работе с молочными породами скота.

- По молочной продуктивности и качественному составу молока с первой по третью лактацию было выявлено преимущество гетерозиготных (к-СпАВ) коров, что необходимо учитывать при селекции молочного скота по белковомолочности, содержанию COMO и сухого вещества.

Публикация материалов. По материалам диссертации опубликовано 6 научных работ, в том числе 1 в рекомендуемом ВАК РФ журнале - "Молочное и мясное скотоводство" (2008, №4).

Апробация работы. Основные результаты диссертационной работы обсуждались при рассмотрении годовых отчетов Тамбовского филиала и лаборатории генетики сельскохозяйственных животных ГНУ ВНИИЖ РАСХН (2004-2006); были представлены на международном научно-практическом семинаре "Генетические маркеры в селекции животных" (Быково, 2005); в материалах научно-практической конференции "Молодежь и наука XXI века" (Ульяновск, 2006).

Объем и структура работы. Диссертационная работа состоит из введения, трех глав, обсуждения, выводов, практических предложений, списка использованной литературы. Материал изложен на 103 страницах компьютерного текста, содержит 15 таблиц, 13 рисунков, 1 схему. Список литературы включает 199 источников, в том числе 89 на иностранных языках.

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ Работу проводили с 2003 по 2007 гг. в Тамбовском филиале и лаборатории генетики сельскохозяйственных животных Всероссийского НИИ животноводства в соответствии с планом НИР. Источником для проведения исследований служили образцы спермы, крови и молока соответственно от 565 быков и коров (рис. 1). Всего исследованиями было охвачено 1068 животных из 7 регионов Российской Федерации. Часть материала приводим в сравнении с литературными данными [Яковлев А.Ф. и др., 2004; Турбина И.С., 2006].

Для исследований кровь брали в пробирки с консервантом в соотношении 4:1. В качестве консерванта для крови был использован следующий состав: натрий лимоннокислый 3-х замещенный - 50 г; натрий хлористый - 9 г; глюкоза -10 г; стрептомицин -1 г; дистиллированная вода - до 1000 мл.

Полиморфизм в локусах каппа-казеина и BLAD-синдрома был определен методом ПЦР-анализа в 2% агарозном геле [Kantanen J., 1999]. Гелевые блоки окрашивали стандартными гистохимическими методами с целью выявления фрагментов ДНК. Генотипы и аллели по локусам каппа-казеина и BLAD-синдрома у быков и коров устанавливали непосредственно по результатам электрофоретических тестов. Частоты аллелей и генотипов определяли путем простого подсчета по формуле выведенной из уравнения Хар-ди-Вайнберга [Машуров А.М. и др., 1998]. Для оценки значимости отклонений наблюдаемых частот генотипов от теоретически ожидаемых, исходя из закона Харди-Ваинберга, был использован критерий

В молоке были определены: содержание белка, жира, COMO, сухого вещества, плотность.

Рис. 1. Схема исследований

Особенности свойств молока изучали в начале, середине и конце лактации [Кугенев П.В., Барабанщиков Н.В., 1988]. Коэффициент постоянства лактации в процентах определяли по формуле Sharma-Bharnagar Е. (1973): КПЛ=(А-В):В, где А-удой за 305 дней, В-удой за 60 дней первой лактации. Статистический анализ полученных данных проводили по компьютерной программе Statistica for Windows, Version 5.5a. 1999.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ 3.1. Характеристика и сравнительный популяциошю-гснетический анализ локуса каппа-казеина у быков различных пород и помесей ОАО по племенной работе "Тамбовское". Из молока коров гомозиготных по к-СпВВ получают более плотную сырную массу, которая удерживает жир и увеличивается общий выход сыра на 10%. Поэтому обосновано ведение селекции на увеличение частоты аллеля к-Спв [Kaminski S., Figiel I., 1993; Калашникова Л.А. и др., 1999; Марзанов Н.С. и др., 2004]. В связи с этим, в задачу исследований входило проведение оценки генетической структуры по локусу каппа-казеина у 97 быков-производителей черно-пестрой (ЧП), голштин-ской черно-пестрой (ЧПГ), голштинской красно-пестрой (КПГ), симментальской, помеси симментал х красно-пестрый голштин (С х КПГ), айрширской, джерсейской и красной степной породам крупного рогатого скота, принадлежащих ОАО по племенной работе "Тамбовское" (табл. 1).

Таблица 1

Полиморфизм гена каппа-казеина у быков различных пород

Порода Кол-во голов 'Распределение Генотипы каппа-казеина Частота аллелей х2

АА АВ ВВ _А п В

Черно-пестрая 14 Н О 12 12,07 2 1,86 0 0,07 0,928 0,072 0,08

Черно-пестрая голштинская 7 Н О 5 3,57 0 2,86 2 0,57 0,714 0,286 7,07*

Красно-пестрая голштинская 16 Н О 10 9,73 5 5,49 1 0,78 0,781 0,219 0,11

Красно-пестрая голштинская х симментальская 10 н О 6 5,62 3 3,75 1 0,63 0,750 0,250 0,39

Симментальская 38 н О 15 16,55 20 17,05 3 4,4 0,658 0,342 1,1

Айрширская 5 н о 4 4,05 1 0,9 0 0,05 0,90 0,10 0,06

Красная степная 4 н о 3 3,02 1 0,9 0 0,08 0,875 0,125 0,09

Джерсейская 3 н о 1 1,34 2 1,33 0 0,34 0,667 0,333 0,76

Примечание: / - здесь и далее в таблицах: Н - наблюдаемое; О - ожидаемое;

* - генетическое равновесие нарушено

Как видно из табл. 1, во всех 7 породах крупного рогатого скота и помесных быков красно-пестрая голштинская х симментальская наблюдается преобладание аллеля к-СпА. Частота аллеля к-Спв колеблется от 0,072 до 0,342. Наиболее высокий результат наблюдается у симментальской и джерсейской пород: соответственно 0,342 и 0,333. Вместе с тем анализ, проведенный с использованием критерия х2, показывает о превалировании у большинства животных гомозигот над гетерозиготами. Исключением являлись симментальская и джерсейская породы, у которых соответственно число гетерозигот превалировало над гомозиготами. Нарушение генетического равновесия по локу-су каппа-казеина отмечали у голштинской черно-пестрой породы за счет дефицита гетерозигот (х2 = 7,07; <1Г = 1; Р >0,99). Исходя из данных табл. 1, у обильно молочных популяций скота частота встречаемости аллеля к-Спв отражает в целом ситуацию проблемы низкой белковомолочности у исследованных пород и ведения однонаправленной селекционно-племенной работы на повышение удоя и получения от них в основном "питьевого" молока.

3.2. Характеристика и сравнительный популяционно-генетический анализ локуса каппа-казеина у коров черно-пестрой породы Тамбовской области. В колхозе им. Ленина Тамбовской области для генотипирования популяции по каппа-казеину были взяты пробы крови у 51 коровы черно-пестрой породы. Распределение животных по генотипам локуса каппа-казеина было следующим: 40 коров имели генотип к-СпАА, 11 коров -к-СпАВ (табл. 2). Коров с к-СпВВ среди исследованных животных не было обнаружено. Частота гомозиготы к-СпАА составляла 78,43%, гетерозиготного генотипа АВ -21,57%. Частота аллеля к-СпА достигала 0,89, аллеля к-Спв - 0,11. В популяции сохраняется генетическое равновесие (х2=0,61; сИМ; Р>0,05).

Таблица 2

Полиморфизм гена каппа-казеина в популяции коров

_ черно-пестрой породы __

Хозяйство Кол- во голов Распределение Генотипы каппа-казеина Частота аллелей х2

АА АВ ВВ А В

Колхоз Им. Ленина 51 Н О 40 40,5 11 10 0 0,5 0,89 0,11 0,61

Полученные данные свидетельствуют об отборе по величине удоя, поскольку имеются литературные данные о том, что при увеличении интенсивности отбора наблюдается снижение частоты встречаемости аллельного варианта к-СпБ [Сулимова Г.Е. и др., 1992; Глазко В.И., 1997]. Этот аллель-ный вариант как бы "вымывается" из генотипа животных. По данным исследователей у животных черно-пестрой породы частота встречаемости аллельного варианта к-Спв имеет широкий размах изменчивости, может находиться на уровне европейских данных 0,10-0,21 [Глазко В.И. и др., 1997; 81г/а1-

kowska N., 2002] или быть несколько выше и составлять от 0,26 до 0,42 [Су-лимова Г.Е., 1998; Тинаев А.Ш., 2005]. В исследованной популяции коров черно-пестрой породы частота встречаемости желательного аллеля к-Спв составляет 0,11. Таким образом, полученные нами данные соответствуют опубликованным ранее результатам и находятся на нижней границе диапазона изменчивости исследуемого показателя.

3.3. Геногеография и сравнительная характеристика вариантов каппа-казеина у животных различных регионов Российской Федерации. Калпа-казеины оказывают значительное влияние на физические, химические свойства и сыропригодность молока [Zadworny D., Kuchnlein U., 1990; Robi-taille G., 1995]. Это побудило животноводов ввести запись генотипа к-Cn быка в племенные каталоги [ПшовНАидр,2004;ШапочкинВ.В, ЕскинГЛ, 2005]. Зная распределение к-Cn вариантов у отдельных пород крупного рогатого скота, можно выбрать генотип, который наиболее благоприятен с точки зрения пригодности к производству сыра. А современные методы репродукции облегчат размножение животных с высокой генетической ценностью.

Повышенный интерес к животным, имеющим к-CnBB, обусловлен прямой связью этого генотипа с признаками сыропригодности молока. Однако имеются литературные данные о том, что частота встречаемости аллеля к-Спв у голштинов низка [Erhardt G., 1996; Глазко В.И., 1997; Турбина И.С., 2006]. В этой связи возникла необходимость выполнения исследований генетической структуры по этому локусу у разных пород Российской Федерации с целью оценки отдельных пород и внутрипородных групп, которые характеризуются повышенной частотой встречаемости к-CnBB и могут быть использованы для решения ряда практических задач в селекционной работе.

Нами были проведены исследования частот встречаемости к-СпА и к-Спв у различных пород крупного рогатого скота. Выполнен анализ 20 групп 11 молочных пород животных, отличающихся по происхождению и находящихся в различных условиях среды из трех областей Российской Федерации (Тамбовской, Московской и Кировской) (табл. 3). Среди всех групп исследованных пород наблюдалось преобладание к-СпА аллеля. По встречаемости аллеля к-Спв все 11 пород крупного рогатого скота можно разделить на три группы. В I группу входит большинство пород, имеющие данный аллель с частотой до 0,3 (черно-псстрая, голштинская черно-пестрая, голштинская красно-пестрая, голштинская красно-пестрая х симментал, айрширская, ис-тобенская), во II, с частотой в пределах от 0,3 до 0,5 - четыре породы (симментальская, красная степная, джерсейская и холмогорская). В III, с частотой от 0,5 и выше - швицкая и джерсейская. Причем в зависимости от расположения пород по областям часть пород можно отнести сразу к двум группам по встречаемости аллеля к-Спв. Полученный нами расклад по к-Спв аллелю подтверждает классификацию, предложенную И.С. Турбиной [2006].

Таблица 3

Сравнительная характ еристика полиморфизма каппа-казеина

Порода Кол-во голов Распределение Генотипы каппа-казеина Частота аллелей х2

АА AB ВВ А 13

Черно-пестрая Ч: - : 14 И О 12 12,07 2 1,86 0 0,07 0,928 0,072 0,08

Черно-тстрая 40 Н О 29 29,8 11 905 0 0,7 0,862 0,138 0,26

Черно-пестрая 85 Н О 61 60,98 22 22,03 2 1,99 0,847 0,153 0,0

Черно-пси рая голштинская 7 Н О 5 3,57 0 2,86 2 0,57 0,714 0,286 7,07

¡р t.l.HIM н О 44 43,9 32 32,2 6 5,9 0,730 0,270 0,0

Черно-песграя голштинская 20 н О 15 15,31 5 4,38 0 0,31 0,875 0,125 0,4

Краепо-нсетрая голштинская 16 н О 10 9,73 5 5,49 1 0,78 0,781 0,219 0,11

Kp.J.M.^.p-ГОЛШ1Ы! 1 15 н О 11 11,3 4 3,5 0 0,2 0,870 0,130 0,36

Красно-пВйтрая голштинская х симмептал ьская 10 н О 6 5,62 3 3,75 1 0,63 0,750 0,250 0,39

Симментальская 38 н О 15 16,55 20 17,05 3 4,4 0,658 0,342 1,1

Ctn!M H"J4 к 6 н О 2 2,7 4 2,7 0 0,6 0,670 0,330 1,5

Айрширская 5 н О 4 4,05 1 0,9 0 0,05 0,90 0,10 0,06

Лйршмрскм 16 н О 13 13.1 3 2,7 0 0,2 0,910 0,090 0,2

Красная степная 4 н О 3 3,02 1 0.9 0 0,08 0,875 0,125 0,09

Красная стегош 7 н О 3 2,89 3 3,21 1 0,89 0,640 0,360 0,03

Джерсейская 3 н О 1 1,34 2 1,33 0 0,33 0,667 0,333 0,76

укерсей 8 н О 4 2 0 4 4 2 0,500 0,500 8

■ХйтотЩсштш: 9 н О 6 6,3 3 2,5 0 0,2 0,830 0,170 0,2

Холмогорская 36 н О 18 16,09 16 19,81 8 6,1 0,619 0,381 1,55

¡ЯР Ш 19 н о 6 4,75 7 9,5 6 4.75 0,500 0,500 1,32

Истобенская ^ н О 4 4,05 1 0,9 0 0,05 0,9 0,1 0,014

■ОАО "Тамбовплем"; Щ - ЦСИО; □ - ОАО "Кировплем"

3.4. Связь генотипов и аллелей локуса каппа-казеина с молочной продуктивностью у коров черно-пестрой породы Тамбовской области.

Ка;; отмечалось рядом авторов - Gonyon D.S. et al.[19°7], Калашникова Л.А.

и др. [1999], гены, кодирующие варианты каппа-казеина молока входят в группу главных генов, контролирующих молочную продуктивность и качество молока, и вносят наибольший вклад в формирование и проявление данного количественного признака.

Нами были выполнены исследования взаимосвязи между генотипами локуса к-Сп и признаками молочной продуктивности у изученной популяции крупного рогатого скота чсрно-пестрой породы (за 1-ю лактацию, а также в среднем за 3 лактации). Результаты исследований по первой лактации представлены в табл. 4.

Таблица 4

Взаимосвязь генотипов каппа-казеина с молочной продуктивностью

коров черно-пестрой породы по 1-й лактации

Генотипы

Показатели по локусу каппа-казеина

АА АВ

Количество животных, гол. 40 И

Продолжительность лактации, дни 324±5,1 327±7,3

Удой за лактацию, кг 4098±99,8 4442± 164,3

Удой за 305 дней лактации, кг 4008±89,96 4218+148,07

Содержание жира, % 3,71+0,014 3,69+0,025

Выход молочного жира, кг 148,7±3,58 155,6±6,3

Содержание белка, % 3,16±0,033* 3,2410,03*

Выход молочного белка, кг 126,6±3,75 136,715,83

Содержание COMO, % 7,94+0,054*** 8,9510,052***

Выход COMO, кг 318,217,87*** 377,5+10,5***

Содержание сухого вещества, % 12,4310,08*** 13,1510,12***

Выход сухого вещества, кг 498,2+11,58* 554,7118,59*

Плотность молока, г/см3 1,0275 1,0305

Примечание: здесь и далее в таблицах: Р>0,95; **Р>0,99;' "f >0,999

При изучении показателей молочной продуктивности анализируемых животных установлено преимущество по удою у животных с генотипом к-СпАВ, которое составило 344 кг. Продолжительность лактации у коров с генотипом к-CnAB была длиннее на 3 дня. Жирномолочность коров носительниц разных генотипов к-Cn оказалась практически одинаковой, разница составила 0,02%. По содержанию белка в молоке коровы ск-CnAB превосходили животных с генотипом к-CnAA на 0,08%. Различия по содержанию COMO и сухого вещества в молоке исследуемых животных составили соответственно 1,01% и 0,72%. По выходу молочного жира, белка, COMO и сухого вещества разница составила соответственно 6,9; 10,1; 59,3 и 56,5 кг. По плотности молока разница между группами исследуемых животных составила 0,003 г/см3.

Анализируя данные по продуктивности у животных черно-пестрой породы по трем первым лактациям, мы пришли к выводу, что удой по третьей лактации коров с генотипом к-СпАВ объективно соответствует средней мо-

ночной продуктивности за три смежные лактации (рис. 2).

Рисунок 2

Влияние генотипа по каппа-казеину и номера лактации на удой

4800 т"' 4700

4600 4500 4400 4300 4 200 4100 4000 3 900 кг

Примечание: 1-1-я лактация, 2 - 2-я лактация, 3 - 3-я лактация, 4 - в среднем по трем лактациям

Хотя от лактации к лактации имеются заметные колебания в пределах этого генотипа. У коров с генотипом к-СпАА также наблюдаются колебания продуктивности.

3.5. Молочная продуктивность коров с различными генотипами по каппа-казеину в зависимости от линейной принадлежности. Для анализа нами были отобраны коровы, принадлежащие к 2-м линиям: Аннас Адема 30587 (п=23) и Рикуса 25415 (п=17), так как на их долю приходится 78,4% от количества исследованных нами коров. Коровы с генотипом к-СпАВ у обеих изученных линий превосходили животных с к-СпАА по всем указанным параметрам (табл. 5).

Таблица 5

Молочная продуктивность коров с различными генотипами

каппа-казеина в зависимости от линейной принадлежности

Генотип каппа-казеина Кол-во голов Показатели продуктивности

Удой, кг | Белок, % | Мол. белок, кг

Линия Аннас Адема 30587

АА 17 4467+103,5 3,16±0,03 141,2±2,87

АВ 6 4670+163,3 3,3±0,04 154,1±3,81

АВ± к АА +203 +0,14* +12.9*

Линия Рикуса 25415

АА 13 4375+123,1 3,17±0,03 138,9±3,17

АВ 4 4517±47,8 3,26+0,06 147,3+4,28

АВ± к АА +142 +0,09 +8,4

Различия между животными с генотипами к-СпАА и к-СпАВ по удою составили 4,32% (линия Аннас Адема 30587) и 3,14% (линия Рикуса 25415). Данные по содержанию белка в молоке - соответственно 4,24 (линия Аннас

Адема 30587) и 2,76% (линия Рикуса 25415). В обеих исследованных линиях коровы с генотипом к-СпАВ имели более высокий выход молочного белка, чем животные с кп-САА. Различие между группами животных с генотипами А А и АВ составило 12,9 кг молочного белка для линии Аннас Адема 30587 и 8,4 кг для линии Рикуса 25415.

3.6. Сравнительный анализ хозяйственно-полезных признаков у коров черно-пестрой породы в зависимости от различных генотипов по каппа-казеину. С целью выявления зависимости хозяйственно-полезных признаков лактирующих животных (типы лактационных кривых, КПЛ, возраст первого отела, продолжительность сервис-периода и МОПа, коэффициент воспроизводительной способности, индекс Дохи) от различных генотипов каппа-казеина было проведено исследование коров черно-пестрой породы.

3.6.1. Тины лактационных кривых и коэффициент постоянства лактации коров с различными генотипами канпа-казеина. При изучении динамики распределения удоев в течение лактационного периода у коров черно-пестрой породы с различными генотипами по к-Сп были построены лактационные кривые и проведен их анализ (рис. 3).

600

* 500

1 400

<и

2 300

ге

п

'I 200 5 100

о

1 23456789 10 11 месяцы лактации

Рис. 3. Типы лактационных кривых у коров с различными генотипами по каппа-казеину

Полученные данные свидетельствуют о том, что у коров обоих генотипов (к-СпАА и к-СпАВ) наблюдается сходный характер лактационных кривых. Они относятся к I типу. О характере лактационной кривой судят по ее устойчивости, одним из способов определения которой является показатель полноценности (ПП), который у исследованных животных равен 81,1 (к-СпАА) и 83,8 (к-СпАВ).

Был также вычислен коэффициент постоянства лактации (КПЛ) как показатель устойчивости лактационной кривой. Показатели КПЛ у исследуемых животных черно-пестрой породы различались между собой на 0,12% и составляли в группах генотипов к-СпАА и к-СпАВ, соответственно, 4,84 и 4,96 %. Незначительные различия по коэффициенту постоянства лактации указы-

вают на выравненность и постоянство лактационных кривых в исследованной популяции животных.

У коров с генотипом по к-СпАА пик наивысшей продуктивности приходится на 2-й месяц лактации. У коров с генотипом к-СпАВ пик наивысшей продуктивности был на 2 и 3 месяце лактации. При распределении коров по типам лактационных кривых учитывалось падение их со 2 по 5 месяц лактации. Полученные данные по коровам разных генотипов по каппа-казеину показывают на то, что у коров обоих генотипов лактационные кривые были плавные и выровненные.

3.6.2. Воспроизводительные способности у коров с различными генотипами по каппа-казеину. Для того, чтобы убедиться в отсутствии отрицательного влияния генотипа коров по локусу каппа-казеина на их репродуктивные показатели, был проведен анализ воспроизводительной способности коров черно-пестрой породы, результаты которого представлены в табл. 6.

Таблица 6

Воспроизводительные способности коров с разными генотипами по каппа-казеину___

Ге- Груп- Признаки плодовитости

но- па Возраст Сервис- МОП, Коэффициент Индекс

тип первого период, дней воспроизводи- Дохи

отела, мес. дней тельной спо-

собности

АА 1 32,9+0,46 98,5±1,67 370,4+4,27 0,99^0,014 40,5±0,52

АВ 2 32,7±0,65 114±2,16 379,7±5,15 0,96+0,018 41,7+0,74

2±1 -0,2 +6,5* +9,3 -0,03 +1,2

Результаты исследований показывают, что по возрасту первого отела коровы обеих групп (к-СпАА и к-СпАВ) имеют практически одинаковые показатели признака (разница составила 0,2 месяца). Высокий возраст первого отела указывает на имеющиеся издержки в выращивании молодняка.

Более коротким сервис-период был у коров первой группы (к-СпАА) -98,5 дней, что меньше показателей сверстниц из второй группы на 6,5 дней. Более короткий межотельный период был характерен для гомозигот по к-СпАА - 370,4 дней. МОП гетерозиготных животных (к-СпАВ) был длиннее на 9,3 дней. Полученные данные по интегральному показателю плодовитости -коэффициенту воспроизводительной способности показывают, что гомозиготные животные имели лучшие показатели (0,99), по сравнению с гетерозиготными (0,96). По индексу Дохи, объединяющему возраст первого отела и межотельный период, обе группы коров отнесены к животным со средней плодовитостью, в том числе по группам: 1 (к-СпАА) - 40,5; 2 (к-СпАВ) - 41,7.

3.7. Геногеография ВЬАБ-синдрома у животных различных регионов Российской Федерации. Аллель В1лШ, являясь "шлейфом" высокой молочности, распространился по всему миру. Его распространение шло по

следующим путям: благодаря покупке животного, через приобретение замороженного семени или эмбриона. Поток аплеля ВЬАО в настоящее время у отечественного скота идет через его перемещение внутри или между популяциями, в процессе приобретения племенного материала-носителя данной мутации из-за рубежа.

В связи с этим была поставлена задача провести геногеографический анализ распространения аллеля ВЬАБ по регионам Российской Федерации. Для этого использовали данные полученные нами, а также литературные источники [Яковлев А. и др., 2004; Турбина И.С., 2006] (табл. 7).

Таблица 7

Геногеография ВЬАР в регионах Российской Федерации

Область, край п Распределение Генотипы ВЬАО Частота Аллелей х2

NN № пп N п

Московская обл., ЦСИО 377 Н 0 367 362,1 10 14,8 0 0,1 0,985 0,014 1,723

Ленинградская обл., ПП "Невское" 127 Н 0 121 120,9 6 5,94 0 0,16 0,976 0,024 0,161

Кировская обл., ОАО "Кировплем" 149 Н 0 148 148,1 1 0,88 0 0,02 0,997 0,003 0,036

Хабаровский край 234 н 0 233 233,1 1 0,91 0 0,01 0,998 0,002 0,02

Воронежская обл. 31 н 0 30 30,02 1 0,97 0 0,01 0,984 0,016 0,011

Вологодская обл. 2 н 0 1 1,125 1 0,75 0 0,125 0,75 0,25 0,222

Тамбовская обл. 98 н 0 98 98 0 0 0 0 1,00 0 0,0

Всего по России 1018 н 0 998 997,7 20 20,16 0 0,14 0,99 0,01 0,141

Примечание: N - нормальный аллель; п - мутантный аллель

Частота встречаемости различных генотипов исследованных нами популяций черно- и красно-пёстрого скота Российской Федерации выглядела следующим образом: 998 животных оказались гомозиготами (0128/0128) по нормальному 0128 аллелю (неносители), а 20 или 1,96% особей - гетерози-готами и имели генотип 0128/01280 (носители). По всем исследованным популяциям черно-пестрого, голштинского и черно- и красно-пестрого гол-штинизированного скота (п=998), частота встречаемости нормального аллеля (Ь!) составила 0,9902, тогда как мутантного аллеля ВЬАО по исследованным популяциям (п) - 0,0098 или 0,98%.

В Российской Федерации аллель ВЬАО оказался отчасти вместе с приобретением быков-производителей, покупкой эмбрионов до разработки метода диагностики. Племенной материал был занесен в Россию из Германии, Канады, США, Голландии, а также от племенных животных, выращенных в

условиях нашей страны.

Пристального внимания отечественных селекционеров заслуживает американский голштинский бык-производитель из родственной группы Ос-борндейл Айвенго Белл 1189870 - бык Карлин М. Айвенго Белл 1667366, носитель аллеля ВЬАБ (схема 1). Использование его сыновей в Российской Федерации способствовало повышению генетического потенциала отечественных стад черно-пестрого скота.

Схема 1

Встречаемость аллеля ВЬАБ в генеалогических линиях на территории Российской Федерации

Осборндейл Пенстейн Карлин М.

Айвенго Белл Айвенго Стар Айвенго Белл

1189870 1441440 1667366

Линия Силинг Трайджун ^^Линия Монтвик\ Линия Уес

Роккит 252803 Чифтейн 95679 \ Идеал 933122

Линия Рефлекшн Родственная группа Сэра

Соверинг 198998 Метчилда Мапливуда 6296 На схеме 1 представлены пути распространения аллеля BLAD в знаменитых генеалогических линиях. Имеющийся в отечественной черно-пестрой популяции мутантный аллель, связан с завозом быков-производителей - носителей, потомков Осборндейл Айвенго Белла 1189870, внук которого Карлин М. Айвенго Белл 1617366 оказался основным распространителем BLAD в мире, в России и в странах СНГ. В Хабаровском крае носителем аллеля BLAD оказалась телка черно-пестрой породы создаваемого дальневосточного типа. Мы предполагаем, что данная телочка получила аллеля BLAD через мать, у которой отцом был Оливер 2170, принадлежавший ЦСИО. Оливер 2170 интенсивно использовался на животных создаваемого дальневосточного типа.

В Вологодской и Воронежской областях были также обнаружены носители аллеля BLAD. Причем, впервые в Воронежской области и Российской Федерации было обнаружено животное-носитель из красно-пестрой породы. В Тамбовской области носители BLAD не были обнаружены. В популяциях животных оцененных нами, как носители аллеля BLAD, в основной своей части оказались потомки Карлин М. Айвенго Белла 1667366.

ВЫВОДЫ

1. Проведен анализ и дана характеристика геногеографии по двум типам генетических маркеров (BLAD и каппа-казеин) у животных 11 пород крупного рогатого скота.

2. Аттестация быков производителей 7 пород и помесей, принадлежащих ОАО по племенной работе "Тамбовское" показала их различие по встречаемости генотипов и аллелей, а также преобладание к-Сп аллеля.

3. Анализ локуса каппа-казеина у быков-производителей, принадлежащих ОАО по племенной работе "Тамбовское", с использованием критерия показал превалирование у большинства пород гомозигот (к-СпАА и к-СпВВ) над гетерозиготами (к-СпАВ). Нарушение генетического равновесия по ло-кусу каппа-казеина отмечено у голштинской черно-пестрой породы за счет дефицита гетерозигот (х2 = 7,07; = -1; Р > 0,99).

4. Анализ животных из 3-х областей Российской Федерации (Тамбовская, Московская и Кировская) показал преобладание аллеля к-СпА. Частота встречаемости аллеля к-Спв отражает в целом ситуацию проблемы низкой белко-вомолочности у исследованных пород и ведения однонаправленной селекционно-племенной работы на повышение удоя и получения от них в основном "питьевого" молока.

5. В популяции исследованных коров черно-пестрой породы выявлено два генотипа по локусу каппа-казеина - к-СпАА и к-СпАВ. Частота аллеля к-СпА достигала 0,89, к-Спв - 0,11. По молочной продуктивности и качественному составу молока в первую лактацию было выявлено преимущество гетерозиготных (к-СпАВ) коров. С первой по третью лактацию преимущество коров с генотипом к-СпАВ сохраняется.

6. Лактационные кривые у животных обоих генотипов по каппа-казеину имеют сходный характер и относятся к I типу. Показатели коэффициента постоянства лактации (КПЛ) составляли в группах животных с генотипами к-СпАА и к-СпАВ, соответственно, 4,84 и 4,96 %.

7. Изучение воспроизводительных качеств коров с разными генотипами по каппа-казеину, по продолжительности межотельного периода, значению коэффициента воспроизводительной способности и индексу Дохи не выявили достоверных различий между опытными группами животных.

8. Анализ тестированных 1018 животных из 7 регионов Российской Федерации черно- и красно-пестрого скота на носительство аллеля ВЬАО-синдрома показал его наличие у 20 животных или у 1,96% от всей исследованной популяции животных.

9. Установлено, что наследование и распространение мутантного аллеля Б128С в Российской Федерации происходило не только по отцовской, но и по материнской лиши.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Для оценки генотипа животного и купирования мутантного аллеля в стадах черно- и красно-пестрого скота и их помесей рекомендуем исследовать на носигельство аллеля ВЬАЭ быков-производителей, ремонтный молодняк, завозимое семя, эмбрионы и быковоспроизводящих коров.

2. Для повышения содержания желательного аллельного варианта к-Спв в генотипе животных молочных пород рекомендуем использовать генетические и селекционные методы разведения. Информацию по каппа-казеину применять при разработке программ по совершенствованию скота молочных пород.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ:

В рецензируемых научных журналах, рекомендуемых ВАК РФ:

1. Марзанов, Н. Геногеография ВЬАГ) в популяциях черно-пестрого скота России и за рубежом / Н. Марзанов, X. Амерханов, Г. Ескин, Г. Турбина, Ю. Саморуков, Е. Кийко, Н. Попов, Е. Шукюрова, Н. Червяков, Д. Деври-шов // Молочное и мясное скотоводство. - 2008. - № 4. - С.2-5.

В материалах международных конференций:

2. Кийко, Е.И. Взаимосвязь молочной продуктивности с локусами каппа-казеина у коров черно-пестрой породы Тамбовской области / Е.И. Кийко. Материалы международного научно-практического семинара по темам: ¡."Повышение конкурентоспособности животноводства и задачи кадрового обеспечения". 2."Генетические маркеры в селекции животных". Быково. - 2005. - Вып.11. - С.100-101.

3. Кийко, Е.И. Генотипирование популяции крупного рогатого скота черно-пестрой породы по локусу каппа-казеина в условиях Тамбовской области / Е.И. Кийко, В.Н. Кургузкин, Н.С. Марзанов. Материалы международной научно-практической конференции "Молодежь и наука XXI века". Ульяновск. - 2006. - Часть II. - С.428-431.

В трудах всероссийских конференций:

4. Кийко, Е.И. Геногеография и сравнительная характеристика каппа-казеина у животных различных регионов Российской Федерации / Е.И. Кийко. "Актуальные проблемы развития АПК". Сборник научных трудов Мичуринского ГАУ. Мичуринск. - 2008. - С. 59-63.

5. Кургузкин, В.Н. Оценка аллелофонда спермобанка ОАО по племенной работе «Тамбовское» по 2-м типам генетических маркеров (каппа-казеин и ВЬАБ-синдром) / В.Н. Кургузкин, Е.И. Кийко. "Актуальные проблемы развития АПК". Сборник научных трудов Мичуринского ГАУ. Мичуринск. - 2008. - С. 63-66.

6. Кийко Е.И. Геногеография ВЬАБ-синдрома у животных различных регионов Российской Федерации / Е.И. Кийко. "Актуальные проблемы развития АПК". Сборник научных трудов Мичуринского ГАУ. Мичуринск.-2008.-С. 73-75.

Издательство РУЦ ЭБТЖ 142132, Московская обл., Подольский р-н, п. Дубровицы Тел. (8 - 4967) 65-14-24, (8 - 4967) 65-14-07

Сдано в набор 23.01.2009. Подписано в печать 27.01.2009 Заказ № 2 . Печ. л. 1,0 Тираж 150 экз.

Отпечатано в типографии РУЭЦ

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Кийко, Елена Ильинична

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Краткая характеристика 4-х генеалогических корней молочного скота: черно-пестрой, палево-пестрой, бурой и красной.

1.2. Принципы маркерной селекции в молочном скотоводстве.

1.3. Полиморфизм генов белков молока у различных пород крупного рогатого скота.

1.3.1. Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

1.3.2. Молекулярно-биохимический полиморфизм каппа-казеина молока

1.4. Локус каппа-казеина и его связь с технологическими свойствами молока у крупного рогатого скота.

1.5. Встречаемость аллеля BLAD-синдрома в мире

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Характеристика и сравнительный популяционно-генетический анализ локуса каппа-казеина у быков различных пород и помесей ОАО по племенной работе "Тамбовское".

3.2. Характеристика и сравнительный популяционно-генетический анализ локуса каппа-казеина у коров черно-пестрой породы Тамбовской области.

3.3. Геногеография и сравнительная характеристика локуса каппа-казеина животных различных регионов Российской Федерации.

3.4. Связь генотипов и аллелей локуса каппа-казеина с молочной продуктивностью у коров черно-пестрой породы Тамбовской области.

3.5. Молочная продуктивность коров с различными генотипами по каппа-казеину в зависимости от линейной принадлежности.

3.6. Сравнительный анализ хозяйственно-полезных признаков у коров черно-пестрой породы в зависимости от различных генотипов каппа-казеина

3.6.1. Типы лактационных кривых и коэффициент постоянства лактации коров с различными генотипами каппа-казеина.

3.6.2. Воспроизводительные способности у коров с различными генотипами по каппа-казеину.

3.7. Геногеография ВЬАО-синдрома у животных из различных регионов Российской Федерации.

ОБСУЖДЕНИЕ.

ВЫВОДЫ.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

Введение Диссертация по сельскому хозяйству, на тему "Геногеография вариантов каппа-казеина и дефицита лейкоцитарной адгезии у различных пород крупного рогатого скота"

Актуальность темы

На протяжении последнего столетия в мире увеличивается интенсив, ность скотоводства на основе повышения уровня кормления, генетического улучшения скота, применения новых, более прогрессивных методов содержания животных. Качественно новой особенностью современного животноводства является реконструкция существующих и создание новых пород скота с высоким генетическим потенциалом продуктивности, пригодностью к промышленной технологии, устойчивосью к заболеваниям. Широкое применение искусственного осеменения, других методов биотехнологий позволяют интенсивно использовать лучших производителей для создания животных с ценными и устойчивыми наследственными задатками по основным продуктивным признакам [Эрнст Л.К., Жигачев А.И., 1990; Данкверт А.Г., Данкверт С.А., 2002; Марзанов Н. С. и др., 2006].

В связи с этим возникает необходимость более полной оценки производителей по племенным признакам, нарушения которых нередко проявляются в форме уродств и генетических заболеваний. Наиболее известными из них являются ряд болезней вызываемых точковыми мутациями. К ним относятся: дефицит лейкоцитарной адгезии (ВЬАБ), дефицит уридинмонофос-фатсинтетазы (БиМЭ), комплексное уродство позвоночника (СУМ) и др. [Амерханов Х.А., Марзанов Н.С., 1999; Яковлев А. и др., 2004]. Широко рас* пространенным заболеванием в молочном скотоводстве развитых стран, в которых разводится голштинская порода и ее помеси, является дефицит лейкоцитарной адгезии или ВЬАБ-синдром.

В настоящее время большое внимание уделяется проблемам зоотехнической иммуногенетики, биохимической генетики, изучению групп крови, полиморфизма белков и ферментов крови и молока сельскохозяйственных животных. Изучение новых биохимических полиморфных систем позволяет глубже понять генетическую структуру популяций, динамику генотипичес-кой изменчивости в популяциях и механизмы поддержания этой изменчивости, проследить за изменением при селекции генетической структуры пород и линий [Марзанов Н.С., Макарова Е.П., 2001; Винничук Д.Т., 2002; Новикова Л.Ф., Карликов Д.В., 2002 и др.].

Диагностика и использование генов количественных признаков или QTL позволяет уже в раннем возрасте независимо от пола делать прогноз о будущей продуктивности и качестве продукции, получаемой от животного, устойчивости к тому или иному заболеванию, определять носительство породоспецифических генов.

Результаты исследований отечественных и зарубежных учёных [Kawasaki E.S., 1990; Яковлев А.Ф., Прохоренко П.Н., 1997; Марзанов Н.С., Иолчиев Б.С., 1998; Kantanen J., 1999; Кузнецов В.М., 2002; Алипанах М. и др., 2004; Юхманова Н., Калашникова Л., 2004; Иолчиев Б.С., 2006; Марзанов Н.С. и др., 2007] показывают, что особую актуальность приобретает исследование аллельных вариантов генов каппа-казеина у животных молочных пород в связи с низкой частотой встречаемости желательных генотипов и неудовлетворительными технологическими качествами молока. Селекция на жирномолочность - это норма отечественного скотоводства, селекции же на белковомолочность, качественный состав и технологические показатели молока до сих пор уделяется мало внимания. Для того, чтобы активно влиять на ситуацию в стаде, популяции и породе в целом селекционерам важно иметь сведения о взаимосвязи различных генотипов по локусу генов каппа-казеина с показателями молочной продуктивности, воспроизводительными качествами животных и устойчивостью к заболеваниям.

Цель и задачи исследований

Целью работы является изучение сопряженности биологических и продуктивных особенностей у коров черно-пестрого скота. Геногеографический анализ встречаемости BLAD и каппа-казеина у пород животных из различных регионов Российской Федерации.

В связи с этим решали следующие задачи:

• Определить полиморфизм гена каппа-казеина у быков молочных пород Тамбовской области.

• Дать характеристику генетической структуры стада черно-пестрой породы по частотам встречаемости аллелей и генотипов каппа-казеин

• Изучить встречаемость гена ВЬАО-синдрома у племенных быков ОАО по племенной работе "Тамбовское" и коров черно-пестрого скота в условиях Тамбовской области.

• Дать сравнительный анализ геногеографии гена ВЬАО и локуса каппа-казеина у животных из различных регионов Российской Федерации

• Провести анализ на наличие ассоциаций между аллелями и генотипами каппа-казеина и показателями качества молока и хозяйственно-ценными признаками коров.

Научная новизна работы

Впервые проведен сравнительный анализ геногеографии ВЬАО и каппа-казеина у пород крупного рогатого скота из различных регионов Российской Федерации. Проведен популяционно-генетический анализ частоты встречаемости аллелей и генотипов каппа-казеина и ВЬАХ) у быков 8 пород ОАО по племенной работе "Тамбовское" и коров черно-пестрой породы Тамбовской области. Изучено качество молока с учетом аллелей и генотипов каппа-казеина у коров черно-пестрой породы Тамбовской области.

Теоретическая и практическая значимость работы

Определение генотипов по локусу гена каппа-казеина позволяет прогнозировать молочную продуктивность и получать молоко с лучшими технологическими качествами. Результаты исследований аллельных вариантов каппа-казеина и ВЬАО-синдрома будут использованы при составлении программ племенной работы с черно-пестрой породой на уровне хозяйств и в целом по Тамбовской области.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

Оценка аллелофонда у быков-производителей 7 пород и помесей и ге-нотипирование популяции коров черно-пестрой породы по 2-м типам генетических маркеров (BLAD и каппа-казеин) показали преобладание к-СпА аллеля и отсутствие BLAD.

- Геногеография и сравнительная характеристика аллеля BLAD у животных различных регионов Российской Федерации позволяет купировать мутантный аллель в селекционно-племенной работе с молочными породами скота.

- По молочной продуктивности и качественному составу молока с первой по третью лактацию было выявлено преимущество гетерозиготных (к-CnAB) коров, что необходимо учитывать при селекции молочного скота по белковомолочности, содержанию COMO и сухого вещества.

Публикация материалов

По материалам диссертации опубликовано 6 научных работ, в том числе 1 в рекомендуемом ВАК РФ журнале - "Молочное и мясное скотоводство" (2008. №4).

Апробация работы

Основные результаты диссертационной работы обсуждались при рассмотрении годовых отчетов на заседаниях Ученого Совета Тамбовского филиала ВИЖа. Часть полученных материалов диссертации были представлены на международном научно-практическом семинаре "Генетические маркеры в селекции животных" (Быково, 2005); в материалах научно-практической конференции "Молодежь и наука XXI века" (Ульяновск, 2006), в журнале "Молочное и мясное скотоводство" (2008).

Объем и структура работы

Диссертационная работа состоит из введения, трех глав, обсуждения, выводов, практических предложений, списка использованной литературы. Материал изложен на 103 страницах компьютерного текста, содержит 15 таблиц, 13 рисунков, 1 схему. Список литературы включает 199 источников, в том числе 89 на иностранных языках.

Заключение Диссертация по теме "Разведение, селекция, генетика и воспроизводство сельскохозяйственных животных", Кийко, Елена Ильинична

ВЫВОДЫ

1. Проведен анализ и дана характеристика геногеографии по двум типам генетических маркеров (ВЬАХ) и каппа-казеин) у животных 11 пород крупного рогатого скота.

2. Аттестация быков-производителей 7 пород и помесей, принадлежащих ОАО по племенной работе "Тамбовское", показала их различие по встречаемости генотипов и аллелей, а также преобладание к-СпЛ аллеля.

3. Анализ локуса каппа-казеина у быков-производителей, принадлежащих ОАО по племенной работе "Тамбовское", с использованием критерия % 3 показал превалирование у большинства пород гомозигот (к-СпАА и к-СпВВ) над гетерозиготами (к-СпАВ). Нарушение генетического равновесия по локусу каппа-казеина отмечали у голштинской черно-пестрой породы за счет дефицита гетерозигот (% = 7,07; 1; Р > 0,99).

4. Анализ животных из 3-х областей Российской Федерации (Тамбовская, Московская и Кировская) показал преобладание к-СпА аллеля. Частота встречаемости аллеля к-Спв отражает в целом ситуацию проблемы низкой белковомолочности у исследованных пород и ведения однонаправленной селекционно-племенной работы на повышение удоя и получения от них в основном "питьевого " молока.

5. В популяции исследованных коров черно-пестрой породы выявлено два генотипа по локусу каппа-казеина - к-СпАА и к-СпАВ. Частота аллеля к-СпА достигала 0,89, а к-Спв - ОД 1. По молочной продуктивности и качественному составу молока в первую лактацию было выявлено преимущество гетерозиготных (к-СпАВ) коров. С первой по третью лактацию преимущество коров с генотипом к-СпАВ сохраняется.

6. Лактационные кривые у животных обоих генотипов по каппа-казеину имеют сходный характер и относятся к I типу. Показатели коэффициента постоянства лактации (КПЛ) составляли в группах животных с генотипами к-СпАА и к-СпАВ по локусу каппа-казеина, соответственно, 4,84 и 4,96%.

7. Изучение воспроизводительных качеств коров с разными генотипами каппа-казеина по продолжительности межотельного периода, значению коэффициента воспроизводительной способности и индексу Дохи не выявили достоверных различий между опытными группами животных.

8. Анализ тестированных 1018 животных из 7 регионов Российской Федерации черно- и красно-пестрого скота на носительство ВЬАЕ)-синдрома показал его наличие у 20 животных или у 1,96% от всей исследованной популяции животных.

9. Установлено, что наследование и распространение мутантного аллеля Б1280 в Российской Федерации происходило не только по отцовской, но и по материнской линии.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Для оценки генотипа животного и купирования мутантного аллеля в стадах черно- и красно- пестрого скота и их помесей рекомендуем исследовать на носительство аллеля ВЬАЭ быков-производителей, ремонтный молодняк, завозимое семя, эмбрионы и быковоспроизводящих коров.

2. Для повышения содержания желательного аллельного варианта к-Спв в генотипе животных молочных пород рекомендуем использовать генетические и селекционные методы разведения. Информацию по каппа-казеину применять при разработке программ по совершенствованию скота молочных пород.

Библиография Диссертация по сельскому хозяйству, кандидата биологических наук, Кийко, Елена Ильинична, Дубровицы

1. Адамец, Л. Общая зоотехния / Л. Адамец.- М.: Сельхозгиз, 1933.

2. Барабанщиков, Н.В. Молочное дело / Н.В. Барабанщиков.- М.: Колос, 1983. -413 с.

3. Баранов, A.B. Генетическое маркирование и его использование при совершенствовании системы разведения молочного скота: автореф. дисс. д-ра биол. наук / A.B. Баранов Лесные Поляны. - 1997. - 34 с.

4. Баранова, B.C. Электрофоретическое разделение белков молока / B.C. Баранова, Л.В. Валова, О.И. Курдуманов. М. - 1987. - 16 с.

5. Богданов, Е.А. Происхождение домашних животных / Е.А. Богданов.- М.: Сельхозгиз. 1937.

6. Боголюбский, С.Н. Происхождение и преобразование домашних животных / С.Н. Боголюбский. М.: Советская наука. - 1959.

7. Бондарев, Ю.Ф. Красный степной скот / Ю.Ф. Бондарев.- М.: Сельхозгиз. -1950.

8. Брем, Г. Экспериментальная генетика в животноводстве / Г. Брем, X. Кройслих, Г. Штранцингер. М.: РАСХН. - 1995. - 326 с.

9. Букаров, Н.Г. Генетический мониторинг — методология повышения эффективности разведения крупного рогатого скота / Н.Г. Букаров, Е.Ю. Лебедев,

10. Канеев А.З., Морозов И.М. // Мат. Межд. Научно-практ. Конф.: "Прошлое, настоящее и будущее зоотехнической науки", 7-10 сент. 2004 г.: в 3 т. — Дубровицы: ВИЖ, 2004. Вып. 62. - Т. 1. - С. 43-46.

11. Булат, С.А. Полимеразная цепная реакция с универсальными праймерами для изучения геномов / С.А. Булат и др. // Генетика. 1992. - Т. 28, № 5. -С. 15-28.

12. Вартапетян, А.Б. Полимеразно-цепная реакция / А.Б. Вартапетян // Молекулярная биология. 1991. - Т. 23, № 4. - С. 926-936.

13. Винничук, Д.Т. Ген "BLAD" в наследственности голштинского скота / Д.Т. Винничук, A.A. Созинов // Вюник аграрной науки. 1994. - № 6. - С. 44-46.

14. Винничук, Д.Т. Маркер вспомогательная селекция (MAS) молочных коров / Д.Т. Винничук // Зоотехния. - 2002. - № 12. - С. 7-8.

15. Всяких, A.C. План селекционно-племенной работы с бурыми породами скота в СССР / A.C. Всяких, JI.H. Красильникова, Г.В. Шестерин, Н.И. Кон-драшева. М.: Колос. - 1972. - 115 с.

16. Георгиевский, В.И. Физиология сельскохозяйственных животных / В.И. Георгиевский. М.: Агропромиздат. - 1990. - 510 с.

17. Гладырь, Е.А. ДНК диагностика вариантов каппа-казеина и бета-лакто-глобулина у крупного рогатого скота / Е.А. Гладырь. Автореф. дисс. канд. биол. наук. Дубровицы. ВИЖ. - 2001 - 30 с.

18. Глазко, В.И. ДНК технологии животных / В.И. Глазко. - Киев. - 1997. -173 с.I

19. Голиков, А.Н. Физиология сельскохозяйственных животных / А.Н. Голиков, Н.У. Баранова, З.К. Кожебеков. М.: Агропромиздат. - 1991. - 432 с.

20. Гроклод, Ф. Полиморфизм белков молока, некоторые биохимические и генетические аспекты / Ф. Гроклод // Материалы XXVI межд. конф. по группам крови и биохимическому полиморфизму животных. Ленинград. -1979.-Т. 1 - С. 55-94.

21. Данкверт, А.Г. История племенного животноводства России / А.Г. Дан-кверт, С.А. Данкверт. Изд-во ВНИИплем. Лесные Поляны. - 2002. - 333 с.

22. Данкверт, С.А. Производство и мировой рынок молока в начале XXI века / С.А. Данкверт, И.М. Дунин. Изд-во ВНИИплем Лесные Поляны. - 2002. -С. 71.

23. Дедов, М.Д. Симментальский скот СССР и перспективы его развития и совершенствования: автореф. докт. дисс. / Дедов М.Д. Дубровицы, - 1975. — 32 с.

24. Дмитриев, Н.Г. Породы скота по странам мира / Н.Г. Дмитриев. Л.: Колос. - 1978. - 288 с. - (Справочная книга).

25. Дюрст, П. Основы разведения крупного рогатого скота / П. Дюрст. М.: Сельхозгиз. - 1936.

26. Елпатьевский, Д.В. Некоторые вопросы систематики животных / Д.В. Ел-патьевский // Тр. Сарат. Зоовет. ин-та. С., 1960. - Т. 9. - С. 95-98.

27. Жебровский, Л.С. Селекционно-генетические основы белкового состава молока коров / Л.С. Жебровский. М.: Колос. - 1973. - 316 с.

28. Жебровский, Л.С. Использование полиморфных белковых систем в селекции/Л.С. Жебровский, В.Е. Митютько. Л.: Колос. - 1979. - 184 с.

29. Животовский, Л.А. Популяционная биометрия / Л.А. Животовский. М.: Мир.- 1991.-271 с.

30. Журавель, Е.В. Распределение аллельных и генотипических частот по локу-су каппа-казеина у различных пород крупного рогатого скота / Е.В. Журавель, В.И. Глазко // Генетика. 1997. - Т. 33, № 12.

31. Завертяев, Б.П. Маркерная селекция в животноводстве: современное состояние и перспективы / Б.П. Завертяев // Практик. 2006. - № 2. - С. 32-37.

32. Игнатьев В.М. Скрининг гена лейкоцитарной адгезии (ВЬАЕ)-синдром) у животных черно-пестрого корня крупного рогатого скота: автореф. дисс. канд. биол. наук: 06.02.01 / В.М. Игнатьев Дубровицы. - 1998.-21 с.

33. Изилов, Ю.С. Молочная продуктивность и технологические свойства молока коров черно-пёстрой и айрширской пород / Ю.С. Изилов, Н.Г. Комарова // Сб. научн. тр.: "Селекция молочного скота и промышленные технологии".- М.: Агропромиздат. 1990.

34. Иолчиев, Б.С. Эффективность использования быков-производителей черно-пёстрой породы разного племенного достоинства: автореф. дисс. канд. с.-х. наук: 06.02.01 / Б.С. Иолчиев. Дубровицы. 1994. - 24 с.

35. Иолчиев, Б.С. Популяционно-генетический анализ белов молокау Различных видов сельскохозяйственых животных / Б.С. Иолчиев, Н.И. Стрекозов, Н.С. Марзанов, H.A. Зиновьева. Дубровицы. - 2001. - 28 с.

36. Иолчиев, Б.С. Оценка генетического потенциала у различных видов и гибридов сельскохозяйственных животных на основе биотехнологических методов: автореф. дисс. докт. биол. наук: 03.00.23 / Иолчиев Байлар Садрад-дин. Дубровицы, 2006. - 35 с.

37. Калашникова, Л.А. ДНК-технологии оценки сельскохозяйствнных животных / Л.А. Калашникова, И.М. Дунин, В.И. Глазко, Н.В. Рыжова, Е.П. Голубина. Лесные Поляны. - 1999. - 148 с.

38. Калашникова, Л.А. Селекция XXI века: использование ДНК-технологий / Л.А. Калашникова, И.М. Дунин, В.И. Глазко.- Лесные Поляны. 2000. - 31с.

39. Карамчакова, О.М. Молекулярно-генетический анализ каппа-казеина у коров красной горбатовской породы / О.М. Карамчакова, Ю.А. Столновский И Вестник РУДН. Сер. с.-х. науки. Жив-во. 2001. - № 6. - С. 22-23.

40. Карликов, Д.В. Полиморфизм белков молока чёрно-пёстрого скота при голштинизации / Д.В. Карликов, Р.Н. Зыскунова // Тр. научн. конф. ТСХА. -1987.-С. 1064-1079.

41. Кириленко, С.Д. Идентификация генотипов по каппа-казеину и ВЬА1)-мутации с использованием цепной полимеразной-реакции у крупного рогатого скота / С.Д. Кириленко, В.И. Глазко // Цитология и генетика. 1995. -Т. 29. - № 6.

42. Кленовицкий, П.М. Генетика и биотехнология в селекции животных / П.М. Кленовицкий, Н.С.Марзанов, В.А. Багиров, М.Р. Насибов. Изд-во "ФГУП ЭКСПЛОР". Москва. 2004. - 285 с.

43. Кугенев; В; Практикум по молочному делу / П.В. Кугенев, Н.В: Барабанщиков М.: Агропромиздат. - 1988. - 223 с.

44. Кузнецов, В.М. Современные методы анализа и планирования селекции В' молочном стаде / В.М. Кузнецов. Киров. - 2001. - 115 с.

45. Кузнецов, В.М. Генетическая изменчивость и взаимосвязь признаков продуктивности животных холмогорской и чёрно-пёстрой пород / В.М: Кузнецов//Доклады РАСХН; 2002.-№ 2.-С. 42-45.

46. Кузнецов, И.М. Молочное скотоводство Голландии / И.М. Кузнецов // Животноводство. 1957. - № 7. - С. 75-82.53; Лебёдев, МЖ Состояние чёрно-пёстрой породы, и мероприятия: по её ' улучшению /М.М. Лебедев, А.И. Бим //Животноводство. 1973: - № 7. -С. 51-57.

47. Лобков, В.Ю. Иммуно- и цитогенетические аспекты использования маркирующих систем крови в скотоводстве: автореф. дисс. д-ра биол. наук / В.Ю. Лобков Лесные Поляны. - 1998. - 34 с.

48. Логинов, Ж. Г. Быки-лидеры голштинской породы в США и Канаде / Ж. Г.

49. Логинов // Зоотехния. 1989. - № 4. - С. 75-78.

50. Макаров, В.Ю. Генетические и селекционные признаки молочного скота в популяциях региона: автореф. дисс. канд. биол. наук: 06.02.01 / В.Ю. Макаров Дубровицы. - 2008. - 18 с.

51. Марзанов, Н.С. Скрининг BLAD-синдрома у животных чёрно-пёстрого корня / Н.С. Марзанов, А.Н. Попов, H.A. Зиновьева, В.А. Полежаева, В.М. Игнатьев, Г. Брем // Вестник РАСХН. 1997. - №4. - С.59-61.

52. Марзанов, Н.С. 27 Международная конференция по генетике животных / Н.С. Марзанов, Е.П. Макарова // Сельскохозяйственная биология. 2001. -№4. - С. 120-123.

53. Марзанов, Н.С. Микросателлиты и их использование для оценки генетического разнообразия животных / Н.С. Марзанов, М.Ю. Озеров, М.Р. Насибов, JI.K. Марзанова // Сельскохозяйственная биология. 2003. - № 2. - С. 104-111.

54. Маркарян, А.Ю. Использование метода полимеразной цепной реакции в технологии генотипирования каппа-казеинов крупного рогатого скота /

55. А.Ю. Маркарян, Г.О. Шайхаев, Г.Е. Сулимова, А.Ф. Яковлев // Бюллетень ВНИИРГЖ. Ленинград. 1991. - Вып. 124. - С. 17-23.

56. Маркин, Ю.В. Физиологическое обоснование методов повышения энергетической и протеиновой обеспеченности лактирующих коров и молодняка крупного рогатого скота / Маркин Ю.В. Автореф. дисс. д-ра биол. наук. — Дубровицы. 1997. - 38 с.

57. Машуров, А.М. Алгоритмы иммунобиохимической генетики / А.М. Машу-ров, Н.О. Сухова, Р.О. Царёв, Х.Х. Тхань.- Новосибирск. 1998. - С. 112.

58. Машуров, А.М. Генетические маркеры в селекции животных. / А.М. Машуров. М.: Наука. - 1980. - 315 с.

59. Меркурьева, Е.К. Генетические основы селекции в скотоводстве / Е.К. Меркурьева. М.: Колос. 1977. - 240 с. (Учеб. пособия для фак. повыш. квалификации).

60. Миносян, Т. Метод ДНК диагностики для маркирования животных по локусу каппа-казеина / Т. Миносян, В. Кондракин, Л. Никольская, Б. Иол-чиев, Г. Левина//Молочное и мясное скотоводство. - 2003. - № 3. - С. 38-40.

61. Новиков, А.А. Иммуногенетические маркеры и их использование в селекции / А.А. Новиков, Н.И. Романенко, Н.С. Семак // Юб. сб. "Современные аспекты селекции, биотехнологии, информатизации в племенном животноводстве". М.: ВНИИплем. - 1997. - С.265-271.

62. Новиков, Е.А. Чистопородное разведение молочного скота. / Е.А. Новиков. -М.: Сельхозгиз. 1962.

63. Овсянников, А.Н. Породы сельскохозяйственных животных и методы их создания / А.Н. Овсянников // Животноводство. 1953. - № 4. - С. 33-36.

64. Попов, Н.А. Каталог быков-производителей ОАО "Кировплем" / Н.А. Попов, H.A. Червяков, H.A. Белявин и др. Киров. 2004. - 74 с.

65. Прохоренко, П.Н. Методы создания высокопродуктивных молочных стад / П.Н. Прохоренко // Зоотехния. 2001. - № 11. - С. 2-7.

66. Прохоренко, П.Н. Потенциал молочного скота / П.Н. Прохоренко // Животноводство России. 2005. - № 1. - С. 29-31.

67. Прохоренко, П.Н. Современные тенденции использования генетики в животноводстве / П.Н. Прохоренко, А.Ф. Яковлев // Вестник РАСХН. 1997. -№ 2. - С. 56-59.

68. Родионов, Г.В. Справочник по молочному скотоводству./ Г.В. Родионов.-М.: Агроконсалит. 2001. - 191 с.

69. Сальвадор, Р.К. Характеристика гибридного стада НЭХ "Снегири" Московской области по полиморфным системам белков крови и молока / Р.К. Сальвадор, Н.С. Марзанов, М.М. Кот, Б.С. Иолчиев // Объединённый научный журнал. 2003. -№9(67).-С. 82-84.

70. Саморуков, Ю.В. Сохранение и рациональное использование генофонда молочного скота Российской Федерации / Ю.В. Саморуков, Н.С. Марзанов. Быково. - 2002. - 49 с.

71. Саморуков, Ю.В. Возможности влияния селекции животных на производство белка в молочном скотоводстве / Ю.В. Саморуков // Материалы международной научно-практической конференции. Быково. - 2003. - С. 29-31.

72. Саморуков, Ю.В. Селекционно-генетические основы повышения белково-молочности коров / Ю.В. Саморуков, Н.С. Марзанов. Быково. - 2004.- 50 с.

73. Сингер, М. Гены и геномы / М. Сингер, П. Берг: в 2-х томах. М.: Мир. -1998.

74. Созинов, A.A. Полиморфизм белков и его значение в генетике и селекции / A.A. Созинов. М.: Наука. - 1985. - 272 с.

75. Соколов, В.И. Опыт естественной классификации полорогих / В.И. Соколов // Тр. Зоол. ин-та АН СССР. 1953. - Т. 14.- 378 с.

76. Солдатов, А.П. Полный каталог пород домашних животных / А.П. Солдате®. М.: ЭКСМО-Пресс, Лик пресс. - 2001. - 128 с.

77. Старцев, Д.И. Методы создания и совершенствования симментализирован-ного скота в СССР: докт. дисс. / Д.И. Старцев Дубровицы: ВИЖ. - 1955.

78. Сулимова, Г.Е. Анализ полиморфизма ДНК кластерных генов у крупного рогатого скота: гены казеинов и гены главного комплекса гистосовмести-мости (BOLA) / Г.Е. Сулимова и др. // Цитология и генетика. 1992. -Т.26. - № 5. - С. 18-26.

79. Сулимова, Г.Е. Молекулярно-генетический анализ генома животных и человека с использованием ДНК-маркеров/ Сулимова Г.Е. Автореф. дис. докт. биол. наук. Москва. - 1998. - 50 с.

80. Тинаев, А.Ш. Хозяйственно-полезные признаки продуктивности первотелок черно-пёстрой породы с различными генотипами по локусу гена каппа-казеина / Тинаев А.Ш. Автореф. дис. канд. с.-х. наук. Лесные Поляны. -2003. - 18 с.

81. Тинаев, А.Ш. Хозяйственно-полезные признаки черно-пёстрого скота с разными генотипами каппа-казеина / А.Ш. Тинаев, A.A. Калашникова, К.К. Аджибеков // Молочное и мясное скотоводство. 2005. - № 5. - С. 30-32.

82. Томме, A.A. Генетический полиморфизм ß-лактоглобулинов и казеинов и возможности его использования в селекции пород крупного рогатого скота в Эстонской ССР/ Томме A.A. Автореф. дис. канд. с.-х. наук. Тарту. 1972. -27 с.

83. Турбина, И.С. Характеристика быков-производителей по различным генетическим маркерам/ И. . Турбина. Автореф. дис. канд. биол. наук. Москва. - 2006. - 24 с.

84. Усенбеков Е.С. Генотипирование крупного рогатого скота по локусам каппа-казеина, бета-лактоглобулина и мутации BLAD/ Е.С. Усенбеков. Автореф. дисс. канд. биол. наук. С.-Петербург. Пушкин. 1995. - 25 с.

85. Фандеев, Б.В. Породы крупного рогатого скота / Б.В. Фандеев // Скотоводство." М.: Колос. 1970. - 380 с.

86. Фисинин, В. Генетический потенциал скота и его использование / В. Фиси-нин // Животноводство России. 2003. - № 2. - С. 2-4.

87. Фолконер, Д.С. Введение в генетику количественных признаков. / Д.С. Фолконер; пер. с англ. А.Г. Креславского и В.Г. Черданского. М.: Агро-промиздат. - 1985. - 486 с.

88. Фомичев, Ю.П. Методический практикум по контролю качества молока и молочных продуктов / Ю.П. Фомичев, Е.И. Хрипякова, Н.Д. Гуденко. -Дубровицы. 2003. - 171 с.

89. Фотиадис, Ф.В. Использование генетических маркеров в селекции молочного скота / Ф.В. Фотиадис, O.K. Смирнов, П.Ф. Сороковой, A.B. Буднико-ва// Животноводство. 1983. - № 12. - С. 37-38.

90. Хаертдинов, P.A. Влияние генотипа коров по казеину на количественное содержание молочных белков / P.A. Хаертдинов // Генетика. 1989. - Т. 25, № 8. - С. 1462-1472.

91. Хаертдинов, Р.А.Селекция на повышение белковомолочности и улучшение технологических свойств молока / P.A. Хаертдинов, A.M. Гатауллин Изд-во "Матбугат йорты". Казань. - 2001. - 123 с.

92. Черепанов, Г.Г. Биологические ресурсы и ограничения в совершенствовании молочного скота / Г.Г. Черепанов, И.К. Медведев, З.Н. Макар, Б.Д. Кальницкий//Сельскохозяйственная биология. 2001.- №4.- С. 3-22.

93. Шапочкин, В.В. Каталог быков-производителей ФГУП "ЦСИО" / В.В. Ша-почкин, Г.В. Ескин. Подольск. - 2002. - 144 с.

94. Ю5.Шибата, Д.К. Полимеразная цепная реакция и молекулярно-генетическийанализ биоптатов / Д.К. Шибата // Методы. Молекулярная клиническая диагностика. М.: Мир. - 1999. - С. 395-528.

95. Энглер, В. Породы крупного рогатого скота в альпийских странах / В. Энг-лер // Руководство по разведению животных. М.: Колос. - 1965. - 367с.

96. Эрнст, JT.K. Профилактика генетических аномалий крупного рогатого скота / JI.K. Эрнст, А.И. Жигачев. Л.: Агропромиздат. - 1990. - 240 с.

97. Юхманова, Н. Влияние каппа-казеина на качество молока и его сыропри-годность / Н. Юхманова, Л. Калашникова // Молочное и мясное скотоводство. 2004. - № 8. - С. 24-25.

98. Яковлев, А.Ф. Современные тенденции использования генетики в животноводстве / А.Ф. Яковлев, П.Н. Прохоренко // Вестник РАСХН. 1997. - № 2. - С. 56-59.

99. Яковлев, А. Определение носителей генетических дефектов среди быков-производителей / А. Яковлев, В. Терлецкий, О. Митрофанова, Н. Дементьева // Молочное и мясное скотоводство. 2004. - № 7. - С. 31-32.

100. Ясуи, В. Анализ ДНК в архивных образцах и его применение для изучения патогенеза опухолей / В. Ясуи, X. Ито, Е. Тахара // Методы. Молекулярная клиническая диагностика. М.:Мир. - 1999. - С. 395-428.

101. Agerholm, J.S. Bovine leukocyte adhesion deficiency in danich Holstein-friesian cattle. II. Patho-anatomical description of affected calves / J.S. Agerholm, H. Houe, C.B. Jordesen, A. Basse // Acta Vet. Scand.- 1993. V. 34. - P. 237-243.

102. Aleanpri, R. The effectes of milk components and cheese producins ability / R. Aleanpri, S.C. Buttazzoni, S.C. Scaneiden // J. Dairy Sc. 1990. - V. 73. - № 3. -P. 241.

103. Aleksander, L.J. Isolation and characterisation of the bovine kappa-casein gene / L.J. Aleksander, A.F. Stewart, A.G. Mackinlay, T.V. Kapelinskaya, T.M. Tkach, S.I. Gorodetsky // Eur. J. Biochem. 1988. - V. 178. - № 2. - P. 395-401.

104. Anon. Erbfehler Was ist Blad? // Hann. Land. Forswirtsch. Ztg. - 1991. -11.5.91.

105. Anon. VDS-Beschlub zu BLAD // Ostfr. Landvolk. 1992. - V. 107. - P. 28.

106. Banyko, J. Detection of kappa-casein genotypes in bulls of cattle breeds by restrction fragment length polymorphism (RFLP) / J. Banyko, Z. Borze // Vet. Med. 1995. - V. 40. - № 6. - P. 165-169.

107. Beckmann, J.S. Restriction fragment length polymorphisms in genetic improvement: Methodologies mapping and costs / J.S. Beckmann, M. Soller // Theor. and Appl. Genet. 1983. - V. 67. - P. 35-43.

108. Boichard, D. Investigation on possible linkage between the BLAD gene and QTL for production or type traits in Holstein cattle / D. Boichard, Y. Amigue // 46th Annual Meeting of the European Association for Animal Production . Pragie. -1995.-P. 4-7.

109. Borze, Z. Improvement of the quality of milk protein by new biotechnological methods / Z. Borze, J. Dony // Hungarian Agricuctural Research. 1993. - V. 2. -№ l.-P. 26-29.

110. Bovenhuis, H. Association between milk protein polymorphisms and milk productions traits / H. Bovenhuis, J.A.M. Van Arendock, S. Korver // J. Dairy Sci. -1992.-V. 75.-P. 2549.

111. Bredbacka, P. Polymorphism of microsatellite loci used in parentage testing in Finnish Aurshire and Holstein populations / P. Bredbacka, M.T. Koskinen // Animal Genetics. 1998. - Vol. 29. - P. 10-11.

112. Chikuni, K. Identification of bovine K-casein genotypes using polymerase chain reaction metod / K. Chikuni, S. Kageyama, T. Koshkawa, S. Kato // J. Zootechn. Sci. -1991. V. 2. - № 7. - P. 654-659.

113. Cox, E. Leukocyt en adhesie deficientie bij rund en hond: een erfelijke stoornis van het immuunstelsel / E. Cox, A. Kuczka, I. Tammen, B. Schwenger // Viaams. Diergeneeskd. Tijdschr. 1993. - V. 62. - P. 71.

114. Crowley, C.A. An inherited abnormality of neutrophil adhesion: its genetic trasmission and its associations with a missing protein / C.A. Crowley, J.T. Curnutte, R.E. Rosin et al. // N. End. J. Med. 1980. - V. 302. - P. 1163-1168.

115. Defilippes, F.M. Decontaminating the polymerase chain reaction / F.M. Defilip-pes // Biotechniques. 1991. - V. 10. - P. 26-30.

116. Denicourt, D. Detection of bovine K-casein genomic variants by the polymerase chain reaction method / D. Denicourt, M.P. Sabour, A.J. Mc Alister // Anim. Genet. 1990. - V. 21. - P. 215-216.

117. Di Stasio, L. Polimorphysmo biochimici del latte nella razza bovina Grigio Alpina / L. Di Stasio, P. Merlin // Rivista Zootechia e Veterinaria. 1979. - V. 2. - P. 64-67.

118. Divyer, D.E. Failure of ultra-violet irradiation and autoclacing to eliminate PCR contamination / D.E. Divyer, N. Saksena // Mol. Cell. Probes. 1992. - V. 6. - P. 87-88.

119. Ehrmann, S. Milchproteine: Mit dem Muster auch die Leistung verbessern? / S. Ehrmann // Der Tierzuchter. 1993. - № 3. - S. 44-47.

120. Eigel, W.N. Nomenclature of proteins of cow's milk: fifth revision / W.N. Eigel, J.E. Butler, C.A. Ernstrom, H.M. Farrell Jr., V.R. Harwalkal, R. Jenness, R. Mc. L. Whitney // J. Dairy Sei. Champaign, III. 1984. - V. 67. - P. 1599-1631.

121. Erlich, H.A. Recent advances in the polymerase chain reaction / H.A. Erlich, D. Gelfand, J.J. Sninsky // Sc. 1989. - P. 1643-1650.

122. Fergüson, L.C. Heritable antigens in the erythrocytes of cattle / L.C. Fergiison //

123. J. Immunol. 1941. - V. 40. - P. 213-242.

124. Flecna, G. A teim and cost effective method for kappa-casein genotyping of breeding bulls / G. Flecna, N. Zinovieva, M. Müller, G. Brem // Reprod. Dom. Anim. 1997. - V. 32. - P. 171-173.

125. Funk, D. BLAD, three years later / D. Funk // Holstein World. 1994. - Marz. -V. 96. - P. 96-106.

126. Gallangher, D. Confirmation that the casein gene cluster resides on cattle chromosome 6 / D. Gallangher, C. Schelling, M. Groenen et al. // Mamm. Genome. -1994.-V. 5.-P. 524.

127. Gilbert, R.O. Clinical manifestations of leucocyte adhesion in cattle: 14 cases (1977-1991) / R.O. Gilbert, W.C. Rebhun, C.A. Kim, M.E. Kehrli, D.E. Shuster, M.R. Ackerman // J. Am. Vet. Med. Assoc. 1993. - V. 202 (3). - P. 445-449.

128. Grobet, L. Diagnostic genomigue de la BLAD (Bovine Leucocyte Adgesion Deficiency) / L. Grobet, C. Charlier, R. Hanset // Ann. Med. Vet. 1992. - V. 137.-P. 27-31.

129. Gustafson, S. Parameters affekting the yield of DNA from human blood / S. Gustafson, J.A. Proper, E.J.W. Bowie, S.S. Sommer // Anal. Biochem. 1987. -V. 165.-P. 294-296.

130. Han, S.K. Biochemical, molecular and physiological characterization of a new beta-casein variant detected in Korean cattle / S.K. Han, Y.C. Shin, H.D. Byun // Animal Genetics. 2000. - V. 31. - № 1. - P. 49-51.

131. Hansen, H. The advantages of using Brown Swiss bloodlines / H. Hansen // The Cow International. 1990. - № 9. - P. 31.

132. Hagemoser, W.A. Granulocytopathy in a Holstein heifer / W.A. Hagemoser, J. A. Roth, J. Lofstedt, J.A. Fagerland // J. Am. Vet. Med. Assoc. 1983. - V. 183. -P. 1093-1094.

133. Healy, PJ. Bovine leucocyte adhesion deficiency (BLAD) another genetic defect of Holsein-Friesians / P.J. Healy // Annu. Yet. J. - 1992. - V. 69. - № 8. - P. 190.

134. Hodges, J. Editorial / J. Hodges // EAAP News. 1998. - P. 163-165.

135. Jeness, R. Inter-species comparison of milk proteins / R. Jeness // Applied Science Publishers. London. 1982. - P. 87-114.

136. Jorgensen, C.B. Bovine leukocyte adhesion deficiency in danich Holtein-friesian cattle / C.B. Jorgensen, J.S. Agerholm, J. Pedrsen, P.D. Thomsen // Acta Yet. Scand. 1993. - V. 34.-P. 231-236.

137. Ikonen, T. Allele frequencies of the major milk proteins in the Finnish Ayrshire and detection of a new kappa-casein variant / T. Ikonen, O. Ruottinen, G. Erhardt, M. Ojala // Animal Genetics. 1996. - № 27. - P. 179-181.

138. Innis, M.A. Optimization of PCRs. In PCR protocols: A guide to methods and applications / M.A. Innis, D.H. Gelfand, J.J. Sninsky, T.J. White // Academic Press. San Diego. - 1990. - P. 3-12.

139. Kahle Kennzeichung des BLAD-Status weiblicher Tiere / Kahle // Rind in Bild. -1994. -№2. -P.20.

140. Kaminski, S. Zastosowanie wynikow badan polimorfismu odcinkow restrycy-jnych DNA do okreslenia genotypu kappa-kazeiny u duhajow / S. Kaminski // Pr. I mater. Zootechn. 1994. - Zesz. Spec. 3. - P. 99-101.

141. Kantanen, J. Genetic diversity of domestic cattle (B. taurus) in North Europe / J. Kantanen. Joensuu. - 1999. - 100 p.

142. Kawamoto, Y. A population genetic study on yaks cattle and their hybrids in Nepal using milk protein variants / Y. Kawamoto, T. Naticava, A. Adachi, et al. // Animal. Sei. Technol. Japan. 1992. - V. 63, № 6. - P. 563-575.

143. Kawasaki, E.S. Sample preparation from blood, cell and other fluids, in M.A. Innis et al. (Hrsg.): PCR protocols, a guide to methods and application / E.S. Kawasaki. Academic Press. - San Diego N.Y. - 1990. - P. 146-152.

144. Kehrli, M.E.Jr. Molecular defenition of the bovine granulocytopathy syndrome: identification of deficiency of the Mac-1 (CDllb/CD18) glycoprotein / M.E.Jr.

145. Kehrli, F.G. Smalsteig, D.C. Andsrson et al. // Am. J. Vet. Res. 1990. - V. 51. -P. 1826-1836.

146. Laude, R. Risk of population extinction from fixation of new deleterions mutations/ R. Laude // Evolution. 1994. - Vol. 48. - P. 1460-1469;

147. Li; H. Direct electrophoretic detection of the allelic state of single DNA molecules in human sperm by using the polymerase chain reaction / H. Li, X. Chui, X. Arnheim // Proc. Natl Acad: Sci. USA. - 1990: - V. 87. - P. 4580i4584.

148. Linz, U. Systemàtic Studies on Parameter the Perfomance of the Polimerase Chain Reaction / U. Linz, U. Delling // J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 1990. -V. 28.-P. 5-13.

149. Lipkin, E. The BovMAS Consorcium: Effects of QTL for milk protein percent on milk somatic cell count / E. Lipkin, R.Tal, M. Soller, A. Friedmann // 29th International Conference on Animal Genetics. Tokyo. Japan. - 2004. - P. 131.

150. Litwenzuk, A; Polymorphism of milk protein in black and white cowes Crosses, with different share of Holstein-Friesian cattle blood / A. Litwenzuk // Anim. Sci. Rep. andRepst. 1991. - № 7. - P. 37-41.

151. Macha, J. Genetika analiza kappa-kazeinu v mlece scouta / J. Macha // Zivoc, vyroba. 1992. - V. 37. - № 8. - C. 645-651.

152. Maleviciüte, J. Domestic cattle breed diversity in Lithuania / J. Maleviciüte, L. Baltrenaite, L. Miceikiene // Veterinary Medicine and Zootechnics. 2002. — Vol.-20.-P.-87-91.

153. Muller, K. BLAD: bovine leucocyte adhesion deficiency / K. Muller, W.E, Ber-nadina, H.C. Kalsbeek et al. // Tijdschr. Diergeeskd. 1993. - V. 118. - P. 183184.

154. Nebola, M. The distribution of kappa-Cn alleles A, Band E in cattle / M. Nebola, J. Dvorak, R. Hradil, Z. Havillek // Anim. Genet. 1994. - V. 25. - Suppl. 2. - P. 15.

155. Ng-Kwai Hang, K.F. Association of genetic variantsof casein and milk, fet and protein production bei dairy cattle / K.F. Ng-Kwai Hang, J.F. Hayes, J.E. Mox-ley, H.G. Monardes // J.Dairy Sci. Champaign. 1984. - V. 67. - № 3. - P. 835840.

156. Ng-Kwai Hang, K.F. Genetic variants of milk proteins and cheese yield / K.F. Ng-Kwai Hang // IDF Seminar Cheese yield and factors affecting its control. -Cork. 1993. -P. 160-166.

157. Owen, R.D. Differences in frequency of cellular antigens in two beeds of dairy cattle / R.D. Owen, C. Stormont, M.R. Irwin // J. Anim. Sci. 1944. - V. 3. - P. 315-321.

158. Owen, R.D. An immunogenetic analysis of racial differences in dairy cattle / R.D. Owen, C. Stormont, M.R. Irwin // Genetics. 1947. - V. 32. - P. 64-74.

159. Pinder, S.J. Analysis of polymorphism in the bovine casein genes by use of the polymerase chain reaction / S.J. Pinder, B.N.Perry, C.J. Skidmore, D. Savva // Anim. Genet. 1991. - V. 22. - № 1. - P. 11-20.

160. Prinzenberg, E.M. SSCP analysis at the bovine CSN3 locus discriminates six alleles corresponding to known protein variants (A, B, C, E, F, G) and three new DNA polymorphisms (H, I, Al) / E.M. Prinzenberg, I. Krause, G. Erhardt //

161. Anim. Biotechnol. 1999. - V. 10. - № 1-2. - P. 49-62.

162. Robitaille, G. Influence of K-casein and ß-lactoglobulin genetic variants on the heat stability of milk / G. Robitaille // J. Dairy Res. 1995. - V. 62. - № 4. - P. 593-600.

163. Ron, M. Determination of effects of milk protein genotype on production traits of Izraeli Holsteins / M. Ron, O. Yoffe, E. Ezra, Medrano, J. Weiler // J. Dairy Sei. -1994.-V. 77.-P. 1106-1113.

164. Rottmann, O. Analyse der Milchproteingene mit PCR/RFLP und PAS A / O. Rottmann, P. Schlee // Arch. Tierz., Dummerstorf. 1992. - V. 35, № 2. - S. 6576.

165. Saiki, R.K. Primer-directed enzymatic amplication of with a thermostable DNA polymerase / R.K. Saiki, D. Gelfand, S. Staffel et al. // Science. 1988. - V. 239. -P. 487-491.

166. Saperstein, D.A. Restriction fragment length polymorphism analysis using PCR coupled tomrestriction digest / D.A. Saperstein, J.M. Nickerson // Bio. Techniques. 1991. - V. 10. - P. 488-489.

167. Sarkar, G. Shedding light on PCR contamination / G. Sarkar, S.S. Sommer // Nature (London). 1990. - V. 343. - P. 27.

168. Schaar, J. Studies K-casein and ß-laktoglobulin genetic polymorphism and on milk plasma. Thesis / J. Schaar // sivedish University of Agricultural Sciences. Uppsala. 1986.-71 p.

169. Schlee, P. Die Milchproteingene des Fleckviehbullen "Haxl" und dessen Einfluss auf die Allelfrequenzen / P. Schlee, O. Rottmann, J. Buchberger, R. Graml, J.Aumann, R. Binser, F. Pirchner // Zuchtungskunde. 1992. - V. 64. - № 5. - S. 312-322.

170. Schmidt, D.C. Fractiostion and some properties of K-Cn variants / D.C. Schmidt, P. Boht, P. J. Koning // Dairy Sei. 1966. - V. 49. - P. 776-779.

171. Schwenger, V. Antogonismus zwisvhen Milchleistung und Fitness beim Rind: Prufung auf genetische Unterschiede in Fitnesskriterien und ihre Beziehungen zur Milchleistung in der ersten Laktation / V. Schwenger, M. Mayer, D. Simon //

172. Zuctungskunde. 1989. - Bd. 61. - V. 1. - S. 14-19.

173. Stober, M. Deficienza di adesione dei leucociti nei bovini (BLAD) un difetto ereditario da porre sotto vigilanza / M. Stober, J. Pohlenz, W. Leibold, D. Simon, A. Kuczka et al. // Praxis Vet. 1992. - V. 8. - № 3. - P. 5-7.

174. Tajima, M. The detection of a mutation of CD 18 gene in bovine leukocyte adge-sion deficiency (BLAD) / M. Tajima, M. Irie, R. Kirisawa et al. // J. Vet. Med. Sei. 1993. -V. 55. -№ l.-P. 145-146.

175. Tammen, I. Weiterent wicklung des DNA-Tests auf BLAD (Bovine Leukozyten Adhasions Defizienz) fur den Einsatz in Rinderzucht und klinischer Diagnostik / I. Tammen. Hannover. - 1994. - 128 s.

176. Thompson, M.P. Casein variants in the milk from individual sows / M.P. Thompson, C.A. Kiddy, L. Pepper, C.A. Zittle // J.Dairy Sei. 1992. - V.45. - P.650 -652.

177. Treviranus, A. Klinische Befunde und Abstammung von Jungrindern mit Bovine Leukozyten-Adhesions-Defizienz (BLAD) / A. Treviranus // Hannover. Tierarzt. Hochsch.- 1993.- 152 s.

178. Vasicek, D. Genotyping of kappa-casein in different cattle breeds in Slovakia / D. Vasicek, P. Ukrin, P. Chtnek et al. // J. Zivocisna Vyroba. 1995(6). - Vol. 40. -P. 241-244.

179. Wu, D.Y. Allele-specific enzymatic amplification of beta-globulin genomic DNA for diagnosis of sickle cell anemia / D.Y. Wu, L. Uggozzoli, B.K. Pal, R.B.

180. Wallace // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1989. - V. 86. - P. 2757-2760.

181. Zadworny, D. The identification of the kappa-casein genotype in the Holstein dairy cattle using the polymerase chain reaction / D. Zadworny, U. Kuhlein // Theor. and Appl. Genet. 1990. - V. 80. - P. 631-634.

182. Zwierzchowski, L. Zastosowanie metody RFLPdo badan nad polimorfizmem genetycznym kazein u bydla / L. Zwierzchowski // Pr. I mater. Zootechn. 1994. -Zest. Spec. 3. - P. 95-97.