Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Функциональные сдвиги биоэнергетических процессов при экспериментальном трихинеллезе и его терапии

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Функциональные сдвиги биоэнергетических процессов при экспериментальном трихинеллезе и его терапии"

л »• *»

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН

СЕМИПАЛАТИНСКИМ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ ИНСТИТУТ

На правах рукописи УДК 616-0О2.8/.9-О8-612.ОШ

АГАФОНОВА Ирина Пет

ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ СДВИГИ БИОЭНЕРГЕТИЧЕСКИХ ПРОЦЕССОВ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ТРИХИНЕЛЛЕЗЕ И ЕГО ТЕРАПИИ

03. 00. 13 - Физиология человека и зшвотньпг 03. 00. 20 - Гельминтология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Семипалатинск -1993

Работа выполнена в Секипалатинском государственном иеди-Цлпскан институте.

Научные руководители:

¿актор биологических наук, профессор Т.К. Раисов; Доктор медицинских наук, профессор С.О. Тапбергенов.

Официальные оппонента:

Член - корр. РЙМН, доктор биологических надк, профессор Й.К. Богоявленский

К.'зндилат биологических наук, доцент Н.К. Гайнанова.

Сздааее учрездение:

й.ла-йтннский государственный медицинский институт кьени С.Д. йсфендиярова.

Зачата диссертации состоится 1993 г. в

час. на ' заседании специализированного совета Семипалатинского государственного медицинского института. (480019, г. Семипалатинск, ул. йбая, 103)

йзтореферат разослан "'±5"_ г 1Э93 г.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Семипалатинского государственного медицинского института.

Зченый секретарь специализированного ученого совета, кандидат биологических

надк, доцент Т.й. ХДЕБУТИНй

j!

ОБЩйЗ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ.

Актуальность проблемы. ВсевозмоЕные - внеиние воздействия, способные порой вызывать самые различные по глубине и по механизму изменения Физиологического статуса организма, приводяние зачастив к формирования патологического процесса и гибели организма. В этой связи во все времена актуальной остается проблема изучения механизмов не только взаимоотноиения, но и взаимодействия микро- и макроорганизмов, изучение которых позволяет глубке постичь биологические и физиологические возможности жиеых систем, наметить пути для ослабления воздействия ненелательннх вневних факторов. Трихинеллез - остроаллергическое заболевание, которое занимает особое кесто среди различных антропозоогельмин-тозов человека и плотоядных кивотных, вызываемое нематодой ТгI — chine 11а spiralis (R.Owen,1835), иироко распространенное во многих регионах мира С ft.С. Бессонов, 1981, 1985; E.Ruttenberg, et.al., 1983) и нашей страны СН.Н. Озерецковская, 1988).

Во многих регионах среди населения встречаются вспышки заболевания трихинеллезом, вызванные употреблением свинины,, зараненной TrIchine 11а spiralis (Н.Н. Озерецковская, 1988). Это связано с интенсивным развитием аивотноводства, в той числе и индивидуального. Не полностью решенной проблемой остается лечение трихинеллеза. За последние годы учеными достигнуты большие успехи в разработке и внедрении в практику трихинеллоцидных препаратов, а также глвкокортикоидных препаратов, которые подавляют побочные реакции аллергической природы при трихинеллезе. По мнению больиинстеа исследователей, наруиение обмена веществ имеет основное значение в развитии аллергии, поэтому до сих пор вопрос о первичных изменениях р клетках под влиянием аллергической реакции антиген-антитело остается нерешенным (А.Д.Адо, 1973; Й.Ф. Суханов, 1974).

Побочные реакции аллергической природа при лечении трихинеллеза определяют необходимость параллельного назначения драгих десенсибилизирующих средств с целью предупреадения ослоянений. В связи с этим, некоторыми авторами были предложены в качестве десенсибилизирующих препаратов ингибиторы простагландинов (О. Ozeretskovskaya, et.al.. 1386,1988; Т.К. Раисов, 1991).

.Несмотря на высокую эффективность этих препаратов, они создают дополнительную сенсибилизации организма, которая снишает эффективность химиотерапии н ведет к прогрессированиа патологи-

ч?ского процесса. '

В связи с этим, для выявления эффективности терапии трихинил--геза принципиально важно выяснение основных механизмов патогене-•.Oi инвазионного процесса. Ведущая роль в патогенезе трихинеллеза .уинадлеаит аллергическим реакциям, возникающим в результате сенсибилизации органиизма продуктами секреции и экскреции гель-.интоз. а такке продуктами распада повреяденных или разрушенных т;<аней хозяина (H.H. Озерецковская, 1978 ). При этом, остаются не ^пененными закономерности изменений анестетического обмена тка-ьзй хозяина пе.огзига до и после применения химиотерапии при гксперинентальном трихинеллезе. Одним из патогенетических подхо-

эффективности терапии трихинеллеза является балее пиракое ;-г';'-еняе функции ферментных систем, обеспечивающих различные :.,е:очнн8 процессы. Точное знание механизмов наруиения процессов .лологического окисления в эксперименте позволит наметить воз-рациональные пяти разработки комбинированной., специфической и патогенетической терапии трихинеллеза.

^ль иссладондния. Цельв настоящей работа sekiu - вкеснение ■- >;.и ;Кностей изменений окислитедьно-зосстановительннх реакций и , «rcr^pux показателей энергетического обнена. в частности, изне-hühhs активности дыхательных феркектов (СДГ, ЦХО Э к обцей ГО-аau б тканях и .органах noiomiTHwx нивотнкх. поставлены следр^ие задачи:

1. Изучить динамика изменений ряда показателей функциональной ий-юьости дыхательных ферментов энергетического обиена у подо-патнак вивоткых при зксп .¡ ¡¡ментальном 'трихинеллезе.

2. "зцчигь влияние ксбендазола на интенсивность инвазии и <ж-TüSHOCTb дыхательных ферментов энергетического обнена в тканях и сугсаах подопытных ечоотнкх в зависимости от срока введения препарата При экспериментальном трихинеллезе.

3. Изучить влияние , комбинированного действия мебендазола и глгжокортикоида - преднизолона на интенсивность инвазии и актив-кость дкхательных ферментов в тканях и органах подапнтнах аивот-нкх в зависимости от срока применения препаратов при экспернкен-тальнок: тридинеллезе.

4. Изучить влияние сочетанного введения аебендазола и десенсибшгезиррщего препарата р^льтарена при экспериментальной трихинеллезе на интенсивность инвазии и активность дыхательных ферментов в сердце, печени, ыьшце и тонком кишечнике морских свиник в зависимости от срока введения препаратов.

Научная новизна рзбсти, Епервне изучено действие антигелышн-

тиков на процессы нарушения обмена вецеств при экспериментально!.' трихинеллезе, вызванных сенсибилизацией организма продуктами секреции и экскреции гельминтов. Трихинеллезная инвазия морских свинок вызывала волнообразные изменения активности дыхательных ферментов ССДГ, ЦХО) и общей АТФ-азн во всех тканях и органах подопытных ¿ивотнах.

Лечение мебендазолои на кишечной фазе трихинедлезной инвазии приводит к активации ферментов дыхательной цепи. Применение препарате на миграционной и мывечных фазах трихинеллеза Еизывает торноаение активности дыхательных Ферментов.

Комбинированное лечение мебендазолом и вольтареном эффективно на ииграциинной и кыиечной стадиях экспериментального трихинеллеза морских свинок. Установлено, что сочетанное действие препаратов вызывает разнонаправленные изменения активности ферментов энергетического обмена в тканях и органах подопитных животных.

Практическая значимость работы. Экспериментальный трихинеллез морских свинок является моделыв разработки химиотерапии и комплексного специфического и патогенетического лечения трихинеллеза, поэтому может быть использован для дальнейшего ее совершенствования. Полдченнке данные показателей активности ферментов энергетического обнена на различных этапах формирования и развития аллергической реакции дают возможность выяснить особенности изменений окислительно-восстановительных процессов при формировании поваиенной чувствительности.

Точное знание механизмов нарушения процессов биологического окисления в эксперименте будет способствовать разработке патогенетических основ химиотерапии аллергических реакций при. трихинеллезе. Изучение активности дыхательных ферментов энергетического обмена (СДГ, ЦХО и общей АТФ-азы) дает всзмоеность разработать методы коррекции различных способов эффективного лечения трихинеллеза.

На основании полученных результатов разработана схема терапии и выпущены в соавторстве методические рекомендации "Рационализация химиотерапии экспериментального трихинеллеза".

Основные полоиения. выносимые на защиту:

1. При трикинелдезной инвазии в результате внедрения в кл&тну антигенов паразита и последующего повреждения иитохондриальных структур происходит торниягние активности ферментов дыхательной цепи (СДГ, ЦХО) и общей ПТФ-азы в органах и тканях подопытных

ЕИВОТНЫХ,

2. Введение интзктным яивотнкм мебендэзола, меСендааола в комбинаций с преднизолоном или вольтареном способствует значительному угнетении активности ферментов иитохондриальной дыхательной цепи (СДГ.ЦХО) и общей ЙТФ-азы в тканях изучаемых органов .

3. Иебендазол оказывает четкий трихинеллоцидный эффект на ки-аечной стадии инвазии, способствует повышении активности ферментов дыхательной цепии (СДГ, ЦХО) и общей ЙТФ-азы в тканях и органах подопытных аивотных..

4. Комбинированное введение мебендэзола и преднизолона на ьиграционной и мыаечных стадиях трихинеллезной инвазии не влияет на трихинеллоцидный эффект мебзндазола и вызывает повышение активности ферментов дыхательной цепи (СДГ.ЦХО) и общей ЙТФ-азы.

5. Сочетание введение мебендазола с вольтареном эффективно ча миграционной и мышечной стадиях экспериментального трихинел-!еза и сопровождается достоверным повышением ферментативной ак-;лености СДГ, ЦХО и общей ЙТФ-азы, что свидетельствует о десенсибилизирующем эффекте терапии.

ЯпроСация работы. Материалы диссертации доловены на республиканской научной конференции патофизиологов Сг. йлма-йта, ,1990), на 'Л научной конференции по проблеме трихинеллеза человека и аивогных (г. Киров, 19921, на совместном межкафедральном заседа-аяя и проблемной комиссии Семипалатинского государственного медицинского института (1802), .а-такяе.на I Мекдународном конг-;гссе стран Азии и Окбг.ши по иммунологии и аллергологии (Тай-лгнд, Бангкок, 1992).

Публикации. По теме диссертации опубликор-5 печатных рев том числе методические рекомендации и 1 информационный ¿¿»¿СТОЙ*

О'ьбы и структура диссертации. Диссертация состоит из следуз-ких разделав: введения, обзора литературы, собственных исследо-заьий, ой'.-радения полученных результатов, выводов и библиографического указателя литературы. Обьем диссертации составляет страниц наиинописнего текста, вклачад___таблиц. ____рисунков. Литературный указатель включает ___ отечественных и ___ иностранных; источников.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДН ИССЛЕДОВШЯ

Экспериментальные исслздования были проведены на 520 беспородных морских свинках, преимущественно самцов, в возрасте 5-6 месяцев, массой тела 300-400 г. Подопытных кивотных заракали личинками Trichinella spiralis (R. Оиеп, 1835) лабораторного штамма Казахского НИИ зоологии ЙН Республики Казахстан. Используемых для зарааения личинок трихинелл декапсудировали в искусственном аелудочном соке, отмывали в физиологическом растворе и подсчитывали под бинокулярн.м микроскопом по методике И.Л. Зимороя (1964). Доза заражения составила в среднем 5-10 личинок на 1 г массы тела яивотного. Морских свинок зараяали введением личинок в пицевод с помощью иприца, снабаенного специальной изогнутой канвлей.

Работа состояла из трех серий опытов:

I серия - изучение влияния специфического препарата мебенда-зола на динамику изменения активности ферментов дыхательной цепи (СДГ, ЦХО) и обцей АТФ-азы при экспериментальном трихинеллезе.

II серия - изучение влияния комбинированного действия глйко-кортикоида преднизолона со специфическим препаратом мебендазолом на динамику изменения активности ферментов при экспериментальном трихинеллезе.

III серия - изучение влияния сочетанного действия противовоспалительного препарата вольтарена со специфическим препаратом мебендазолом на динамику изменения активности ферментов при экспериментальном *рихинеллезе.

В I, II и III сериях по изучении воздействия химиопрепаратоэ мебендазола, комбинированного действия мебендазола с преднизоло-ном и мебендазола с вольтареном на активность ферментов дыхательной цепи и общей АТФ-азы при экспериментальном трихинеллезе, вивотные были разделены на 6 групп: - . '

1 группа - зараяенные личинками трихинелл, но не подвергавшиеся лечении (контроль 1);

2 группа - интактные яивотные (контроль 2):

3 группа - не зараженные, но получавшие препараты (контроль 3);

4 группа - получавшие препараты в период кишечной фазы инвазии (2—4 день после заражения):

5 группа - на миграционной фазе (с 6 по 11 день инвазии) ;

6 группа - на мышечной |рязе (с 22 по 27 день инвазии).

Мебендазол и вольтаре.1 вводили подопытным шнвотнм в пицевод с крахмальным клейстером, преднизолон - внутримниечно. Суточная доза мебендазола составила ?5 мг/кг, вольтарена - 2,5 кг/кг и

<;5зднизолона - '60 «г/кг. Препараты вводили на кишечной стадии (2-4 день после зарааения), миграционной (6-11 день) и мышечной (22-27 дни) стадиях развития трихиниллеза, Контролем слуяили ин-эазированные аивотные, не получавшие препараты (40 яивотных).

Суточную дозу препаратов для лечения подопытных яивотных определяли, исходя из данных литературы (З.В. Переверзева, 1980; АЛ. Бурак, 1982: О.Я.-Л. 5екио, 1985 ).

Эффективность специфической и комбинированной терапии оценивали по количеству зрелых паразитов в тонкой кишке и личинок в мышце диафрагмы аизотных после проведения курса лечения. Интенсивность инразии в мышцах диафрагмы определяли после ее переваривания в искусственном аелудочном соке с пересчетом на 1 г аассы мышечной ткани (Ю.й. Березанцев, 1964; З.В. Переверзева, 1980: И.И. Бурак, 1982),

С помощью бинокулярного микроскопа ИБС-1 (25х) с зеленым светофильтром определяли число зрелых трихинелл. Расчет производили по формуле: х = р * у, где: х - общее количество паразитов во <еза гонком кимечнике; р - среднее число паразитов по данным пя-, ■~л подсчетов в 1 мл гидролизата тонкой кишки; у - весь обгем гадолизата тонкой-килки (в мл).

Интенсивность мышечной инвазии определяли по формуле;.'

п * у

х =--------, где:

Р.

х - кятенсивность мышечной инвазии (количество личинок трихинелл в 1 г мышечной ткани); п - среднее количество личинок в 1 мл лрооы; у - общий объем пробы в мл; Р - навеска мыиц в граммах Cj.il. Бурак. 1982).

¿йяаыику изменений активности ферментов энергетического обмена кззчали по стадиям инвазии. В соответствии с серией опытов, аз ггаадой группа вскрывали по 8-10 животных на 7, 14, 21, 23 и иЭ су/ки после зарааения и проводили исследования биохимических показахезчй в гомогекатах тканей четырех органов (тонкий кишеч-ьал, печень, сердце и мыицы). Переносимость лечения оценивали по ййиаякке биохимических показателя.'

ыиивность ферментов дыхательной цепи (СДГ, 11X0) и. общей нТФ-азы определяли по следующим методикам: активность сукцинат-дггидрогеназн (СДГ) - по. Слейтер ( 1959 ) в модификации С.0. Т.мг-бергеяова (1371), цитохромоксидазы (ЦХ0) - по Р..С. Крывченковой (1374), сбзей ЯТФ-азы - по количеству неорганического фосфора

(РЮ по методу.Фиске - Суббароу (1925) в модификации С.О. Тап-бергвнова (1982). Количественное определение белка - по О.Ьсигу (1951).

Статистическая обработка цифровых данных. Данине экспериментальных исследований подвергались вариационно-статистическому анализу. Использовали микрокалькулятор "Электроника МК-61" по соотвг ствующей программе (А.С.- Голыбеков и соавт., 1989). На основании показателя существенной разницы и числа наблюдений по таблице Стьвдента (+) определяли вероятность различий (Р) в сопоставлении с контрольной группой. Различие считалось статистически значимым, если вероятность его случайного происхождения не превышала 5% (Р < 0,05).

РЕЗЗЯЬТЙТН СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

И мивотных, инвазираванных личинками трихинелл, и не получавших лечение (контроль, I группа), количество зрелых трихинелл в кишечнике на 7 сутки после заранения в среднем составляло 494,3 + 63,5; на 14 сутки их количество уменьиилось в 1,6 раза, на 21 сутки - в 4.1 раза. На 28 сутки трихинеллы в кишечнике подопытных кивоткых не обнаруживались (табл. 1).

В мышцах диафрагмы личинки трихинелл были обнаруяены на 21 сутки после, заражения, их количество составило в среднем 216,2+ 23,7 личинок на 1 г массы диафрагмы. На 23 сутки инвазии количество' личинок в -ганцах составило в среднем 5766,5+308,8, на 60 сутки - 5357,8+387,5.

Трихинеллезная инвазия морских свинок приводила к тормогежг> активности ферментов дыхательна! цепи (СДГ, ЦХО) на 21 и 28 сутки после заражения. Наибольшее сникение активности СДГ наблюдалось в печени (Р < 0,001). Во все изучаемые сроки активность фермента была на 90-95 У. ниве, чем в контроле. Затем в порядке уменьшения - в сердце, тонком кишечнике, мыыцах. Во всех изучаемых тканях активность фермента не возвращалась к исходной и на 28 и 60 сутки инвазии.

Активность ЦХО в изучаемых органах в динамике развития трихинеллезной инвазии была неодинакова. Незначительное повышение активности фермента в первую недели инвазии отмечается в печени, сердце, мышце (Р < 0,05) с. последующим снияением на 21 и 28 сутки после заравения (Р < 0,05). На 28 и 60 сутки исследования уровень активности ЦХО не только возвращался к исходному, но и

Таблица 1

Количество зрелых трихинелл в кишечнике и личинок в мывцах

диафрагмы

Х^ЯЙ опытов Группа аивотных Срок после зараяенияСдни) Число трихинелл

в кишечнике в диафрагме (1 г)

введение преп-в исследования

XэнтрольнйЯ 1 группа __ 7 494,3*63,5 0

14 300.2+31,3 0

21 •115,1+14,5 216,2*23,7

28 0 5766,5±30М

60 0 5357,8*387,5

_ _ _ ____ ¿гоендазол 4 группа 2-4 ? 262,0±27,0 * 0

< { серия) 14 0 0

21 0 0

28 0 0

60 0 0

5 группа 6-11 14 239,41:20,0 0

21 64,7*5,2 * 0

28 0 0

60 0 О

6 группа 22-27 28 0 320,5*76,5

60 0 167.0*62,4

^клэн^азол* 4 группа 2-4 7 258,5*111,2 •0 '

п'^днизо/ :)Н 14 139,8*48,3 * 0

(•; сьриа) 21 130,9*47,8 110,8*16.0 *

. 28 . 0 1936,0*221,8*

5 группа •60 0 1561,0*259,3*

6-11 14 • 296,4±48,5 0

21 189,4*44,3 197,5*26,0

28 119,0*16,1 2164,0*238,2*

60 0 2603,8*220,8*

6 группа 22-2? 28 о - 1258,0*581.9*

•60 0 261,1*96,0 *

сЬЗендазол* 4 группа 2-4 ? 319,-6±3?,0 * 0

■-¡'|;;б гарен 14 . 0 0

(3 серая) 21 0 0

28 0 0

60 0 0

5 группа 6-11 1ч 164,4*24,8 0

21 0 103,6*22,4 *

28 0 0

6 группа 60 0 0

22-27 28 0 451,0*29,5 *

60 0 159,0*41,2

Примечание: *

- достоверность различий по сравнению с нелеченной группой.

увалкчивался (Р < 0,05).

Активность АТО-азы при трихинеллеаной инвазии в изучаем, тканях снижалась~ yse на 7 сутки: Е печени на 19 7,, киокар*» -6 %, кишке - 7 7, и в ишце на 32 X по сравнении с контролем, il.ix-больиее угнетение наблюдалось в выше. Б последувщие недели инвазии (Н, 21, 28 сутки) активность фермента восстанавливалась и к 28 дню исследований резко повышалась в 1,5-2 раза в миокарде, печени и тонком кишечнике. Однако на 60 сутки в изучаемая органах она бнла сниивена на 60-80 X в сравнении с контрольной группой (Р < 0.05).

Результат« исследований показали, что трихинеллезная инвазия сопровоЕдается некоторыми нарушениями уровня тканевого дыхания, которнй является суммарным показателем многочисленных окислительно-восстановительных реакций. Эти данные «окно рассматривать как результат повреждавшего действия трихинелл или их метаболитов , возыовно, деструкцией паренхимы органов и патологических изменений в плазматических неыбранах.

Как показали результаты, введение мебендазола интактнни ки-вотнкм (I серия. 3 группа) во всех изучаемых органах вызывало ингибирование активности СДГ, ЦХО и общей ATФ - азы - ферментов энергетического обмена, по сравнении с контрольной группой, не получавшей препарат (2 группа, биологический контроль).

Введение мебендазола на кишечной стадии (2-4 сутки после заражения) трихинеллеза приводило к освобогдению кишечника от зрелых паразитов на 14 сутки после инвазии и тшлностьа предупреждало инвазирование йншц личинками трихинелл (табл. П.

У животных, получавиих «ебендазол на кишечной стадии (4 группа) инвазии значительно повышалась активность ферментов СДГ и ЦХО во всех тканях изучаемых органов (рис. 1. 2). йктивкость обшей АТФ-азы угнеталась на 7, 14, 21 сутки после зараяения. Одна-' ко, в последующие сроки инвазии (28. 60 сутки) активность ее восстанавливалась в печени, сердце и ыьшцах. Так, на 2В сутки Ш!8я5ии активность ЙТФ-азы в ииицак превкиала на 32,8 X (1.7304+0,5608) значения активности контрольной группы кивйтккх-Лечение мебендазолом подопытных аивотних на кишечной стадии инвазии приводило к нормализации показателей ферментативной актив~ нооти к 28 дйв инвазии.

При назначении мебендазола на миграционной (6-11 сутки после заражения) стадии (5 группа) наблюдалось снижение активности СДГ. UX0 и обвей ,АТФ~азы в печени и сердце во все сроки «сследо-ваки.й. В тонком кивечнике на 21 сутки инвазии отмечалась активация СДГ - в 3,1 раза (Р < 0,05) (рис. 1), ЦХО - в 2,2 раза

рис. 1

Динамика атиВносгаи СДГ - азы В понком кишечнике у подопытным хивопным, излеченных (1) и получаЦиих ме£ендазол 6 кииеиной (2) и миграционной (3) фая»

АкаиОносг.ь ферменгоа

CP < 0,001). Активность общей АТФ-азы при этом была достоверно сннаенной (Р < 0,03). В ьшшцах по сравнении с данными в контроле (1 группа), на 21 сутки исследований активность ферментов СДГ снизилась на 71,8 1, ЦХ0 - на 48,7 У. (рис.2). Активность АТФ-азы имела тенденцию к повыненив, превысив активность фермента в контроле на 14,1

Введение мебендазола на мыиечной стадии (22-27 сутки) значительно уаеньэало количество личинок в мышцах по сравнению с контролем (табл. 1). Высокий гельминтоцидный эффект мебендазола сопровоадается сшиением активности ферментов СДГ, ЦХ0 и общей АТФ-азы в тканях тонкого кишечника и печени на 28 и 60 сутки после зараяения. Однако, терапия мебендазолом на мыиечной стадии вызывала активации общей АТФ-азы в сердечной мышце на 28 сутки в 3,7 раза (Р < 0,05). Результаты исследований показали, что лечение аивотных мебендазолом вызывало угнетение активности ферментов в изучаемых органах и тканях, . особенно в миграционную и мышечную стадии заболевания.

Результаты комбинированной терапии мебендазола с преднизоло-Hoif при трихинеллезе отличаются , от результатов исследований группы аивотных. леченных только мебендазолом (табл. 1). При назначении мебендазола с преднизолоном на кияечной и миграционной стадии инвазии наблюдается удлинение сроков паразитирования зрелых трихинелл в тонком кишечнике до 28 суток исследований. Это связано с тем* что преднизолон, снимая воспалительную реакций, замедляет элиминации зрелых, трихинелл, удлиняет кииечнуш стадию заболевания. Полученные результаты согласуатся с данными других авторов (H.H.Озерецковская, 1978; Э.В, Переверзева, 1931).

Сочетанное введение мебендазола с преднизолоном интактним аи-ьотным (2 серия, .3 группа) во всех изучаемых нами органах вызывало снинение активности ферментов дыхательной цепи (СДГ, ЦХ0) и общей АТФ-азц по сравнению с контрольной группой нивотных, не получавших препарата (2 группа., биологический контроль).

Еведение мебендазола с преднизолоном на кишечной стадии ( 2-1 сутки) инвазии в отличие от тер'апии одним, мебендазолом способствует миграции личинок в скелетные мышцы вследствие снияения трихинеллоцидного эффекта мебендазола. Так, если при введения одного мебендазола зрелые трихинеллы в кишечнике иорскнх свя-нок не обнаруживались уше на 14 сутки, то при комбинированной терапии - на 28 сутки инвазии. Дичинки трихинелл е киоцзх n'->fMii при терапии данными препаратами не исчезали ь па GO cgr>:,i инвазии (табл.' 1).

9 леченных нивотних на мывечиой стадии ипзаэми ('¿"-27 счтмч)

рио. 2

Динамика акпийности 1ДХО - азы В мницах у подонигшг к хиВоЛных, нелеиеннмм <1) и полцч&Виих мейвндазоя б кииечиой <2> и миграционной (3; фазе

Лкпибност» 5ермотча

количество трихинелл в диафрагме было значительно взяв, чеа ;* леченных одним мебендазолом.

Сочетанное введение мебендазола с преднизолоном на киаачиой стадия С 2-4 сутки) инвазии вызывало волнообразные изменения активности СДГ, ЦХО во всех органах по сравнении с контрольной группой, получавшей мебендазол, Б кишечнике я сердце морских свинок наблюдалось снижение активности Ферментов во все сроки исследования, активность ферментов в печени и мышечной ткани в первые две недели после зарааения сниаалась, а на 21 сутки активность ЦХО в печени повышалась в 5,8 раза (Р < 0,001), в кницах - на 56,8 '/.. Активность СДГ в печени увеличивалась на 36,2 %, в мышцах - на 79,3 7.. Изменения в активности общей 6ТФ-ази с группы аивотных, получавших мебендазол с преднизолоном в сравнении с данными аивотных. получавших только мебендазол, в изучаз-ных органах не выявлены, за исключением печени, где активность йТФ-аэы на 28 сутни была .повышена на 47,6 X,

При назначении мебендазола с преднизолоном на миграционной (6-11 сутки) стадии наблюдалась аналогичная закономерность избиений активности СДГ, ЦХО, общей йТФ-азн по сравнении с контрольной группой, леченной одним мебендазолом.

При комбинированном введении мебендазола с преднизолоном ка иыиечной стадии (22-2? сутки) статистически достоверных различай з изменении активности СДГ,ЦХО и общей АТФ-ази на 28 сутки инвазии не выявлено по сравнения г группой животных, получавзих один мебендазол. На §0 сутки активность общей йТФ-азн при этом была цзеличёна- в печени - в 11,6 раза (Р < 0,05), в тонком кииечнкке - в 5,8 раза (Р <0,05), в сердце - зб,7 раза (Р < 0,05) и с мышцах - в 4,7 раза (Р < 0,05).

Таг;им образом, комбинированное введение мебендазола с преднизолоном на кишечной фазе трихинеллеза приводило к сниаанив три-хкнеллоцидного эффекта мебендазола и существенно не алияло на его эффект при введении в более поздний сроки заболевания. Пгл комбинированной терапии отчетливо заметно сниаение активности СДГ, ЦХО и ЙТФ-азы в тканях в первые дни после окончания введения препаратов, что свидетельствует о целесообразности использо-зания данной комбинации препаратов з более поздние сроки инвазии.

Вв?»зиие мебендазола с оольтареаом на-кизечяой стадии кнвазкн (2-4 сутки после заразения) освобоздало тонкий кишечник от зр«--лнх трихинелл 'к 14 дно инвазии в отличие от сочетанного евздйнн'.* мебендазола с преднизолоном. Назначение мебендазола с вольтаре-ном на кишечной стадии трихинеллеза предотвращало ¡»»?алгд нта;

личинкаии тршскнелл, как и при терапии одним мебендазолом (табл.1 К"'.'

Существенных различий в эффективности комбинированного лечения мебендезолок и вольтареном на миграционной (6-11 сутки) и мышечкой (22-27 сутки) стадиях инвазии по сразнениа с действием одного мебендазола не наблюдалось. Низкая активность комбинированной терапии мебендазолом с преднизолоном, в отличие от соче-танного действия мебендазола с вольтареном объясняется нарушением процесса инкапсуляции мышечных личинок преднизолоном и постепенная их гибель под действием гормона (H.H. Озерецковская, 1978).

Сочетанное введение мебендазола с вольтареном интактным ви-воткым (3 серия, 3 группа) во всех органах вызывало снигение активности ферментов энергетического обмена (СДГ. ЦХО, общей" ЙТФ-азы) по сравнении с контрольной группой (2 группа, биологический контроль).

При комбинированной терапии мебендазолом с вольтареном на кишечной стадии (2-4 сутки) статистически достоверных различий б изменении активности СДГ, ЦХО, обней ЙТФ-азы в изучаекых органах не выявлено, по сравнении с контрольной группой еивотных, получавших мебендазол с преднизолоном.

Кспаи опыты показали, что назначение мебендазола на кишечной стадии трихинеллеза приводило к активации СДГ, ЦХО в изучаемых органах, в то же время, подключение к терапии .вольтарена приводило к ингибированив активности данных ферментов на 7, 14 сутки наблюдений. Однако активность ЦХО на 21 сутки инвазии была повышена в тонком кишечнике в 2,1 раза, е сердечной мышце в 1,3 раза. В то же время, активность общей ЙТФ-азы в тонком кииечнике и печени при этом не изменялась. С удлинением сроков инвазии животных трихинеллами от 28 до 60 суток активность общей ЙТФ-азы в тканях данных органов по сравнению с контрольными животными увеличилась. достигнув наибольией величины на 60 сутки инвазии.

Введение мебендазола б комбинации с вольтареном на миграционной стадии (6-1Г сутки) инвазии такие, как и введение одмго мебендазола, способствовало понижении активности ферментоь дыхательной цепи (СДГ, ЦХО) и общей ЙТФ-азы в печени, сердце и мышцах подопытных яивотных в наблюдаемые сроки. И только на 60 сутки исследования активность ферментов в органах существенно повышалась (рис. 3). Аналогичная закономерность ферментативной активности наблюдалась при назначении мебендазола с преднизолоном, мебендазола с Вольтареном на миграционной стадии экспериментального трихинеллеза.

рис. 3

Динамика акпиОноспи о£ией АТ® - азы в сердце и подопвпнык живогшых. нелечешшх и получении препараты в миграционной $азе

Л:...ш&иэсл>Е>

«рармеиаа

2.0000-1 1.еоооч

О. 6000

.0=4000.

6-11 они лечения

Условные обозначении:

1 - нелеиенные:

2 - получабиие меЗендазол +

преднизолон;

3 - получавшие не£ендазол + вольтарен.

парка

—а.

¿иологичсстш вонпроль

'а- /

диалогический конпрол^ _____

14 '

21

28

АЗ

Л 2

—I Дни 60

рис. 4

Динамика акпиВноспи ЦХй - а}И б печени у подопытных жиОопных, непсчрнник и получавших препараты б мыиечной фазе

АкпиОноспь фермента

0.3500-, 0.30000.25000.30000.1500 0,1333 0.1137 0.1000

0.0500 -

норма

Условные обозначения:

1 - нелеченные;

2 - ЬолучаВиие мебендазол +

предйизолом:

3 - получабиие ме5енда}ол +

больпарен.

биологический контроле

22-27 дни лечения

Р 2

биологический контроль о"

Дни

14

21

26

60

со

I

7 13-

Лечение мебендазолом в комбинации с вольтареном на мииечно,} стадии (22-2? сутки) инвазии вызывало повышение активности СДГ. ЦХО I! общей ЙТФ-азы в органах подопытных животных. При этом, активность ферментов увеличивалась на 28 и 60 сутки -исследовании (рис. 4).

Таким образом, снижение активности дыхательных ферментов в тканях инвазированннх аивотннх монет быть связано с нарувениеа соотношения процессов распада и синтеза специфических белков -ферментов в дистрофически измененных тканях, уменьшением количества митохондрий в пораженных клетках. Наблюдаемое нами увеличение активности в тканях срганов при введении препаратов в мышечную фазу трихинеллеза, к концу второго месяца, мояно рассматривать как приспособительную реакция, направленную на восстановление Функций органов.

Кроме того, напи исследования показали, что мебендазол в комбинации с вольтареном при лечении экспериментального трихинеллеза наиболее эффективен на мышечной стадии заболевания, что подт-верядает перспективность использования данной схемы лечения я клинической практике.

ВЫВОДЫ .

1. 3 зараяекных яивотных трихинеллезная инвазия сопровождается значительным торможением активности ферментов дыхательной цепи ( СДГ, ЦХО ) и общей ЙТФ-азы в органах и тканях. Зто свидетельствует о сенсибилизирдлцем влиянии паразита на организм хо-зяина^.

2. При экспериментальном трихинеллезе отмечаются низкие показатели активности ферментов дыхательной цепи ( СДГ, ЦХО ) н ио-щей ЙТФ-азы в органах и тканях интактннх яивотных при введении им мебендазола, мебендазола - с преднизолоном и мебендазола с вольтареном.

3. Экспериментальный трихинеллез л.-рских свинок сопровождаемся повывением активности Фе;кентов .дыхательной цепи ( СДГ. ЦХО ) и снижением активности обцей ЙТФ-азы в органах, и тканях подопытных животннх при введении, мебендазола на кишечной стадии ¡т-сазии. Лечение препаратом способствует быстрой элиминации половозрелых гэльаинтов.

4. Мебендазол, оказывая четкий трихинелдоцидннг) с.-а-собитвует значительному понинениз активности Ферментов ( С.2Г, ЦХО и общей ПТФ-аза ) на миграционной С 13-11 сутки ) и анаечно.ч

С 22-27 сцткк ) стадиях экспериментального трихинеллеза.

5. Экспериментальный трихинелез еопровоядается наиболее выра-ЕВИНКГ.Ш изменениями активности ферментов дыхательной цепи ( СДГ, ЦХО ) и обвей йТС-азк ъ зависимости от специфической и комбинированной терапии. Введение ые&ендазола с преднизолоном на кишечной стадии инвазии приводит к снижению трихинеллоцидного эффекта мебендазола и сопровождаема понивением ферментативной активное-

В. Повышение активности ферментов дыхательной цепи ССДГ, ЦХО) и обцей йТФ-азы при-экспериментальной трихинеллезе морских свинок отмечается при введении мебенаазола с преднизолоном на-миграционной и ныиечной стадиях инвазии.

?. При экспериментальном трихинеллезе показатели активности Ферментов дыхательной цепи ( СДГ, ЦХО ) и общей ВТО-азы в динамике заболевания изменяются волнообразно. Введение мебендазола с вольтареноя на кишечной стадии инвазии ке вызывает задераки элиминации кишечных трихинелл и сопровождается понижением активности ферментов митсхондриальной дыхательной цепи ( СДГ, ЦХО) и общей АТФ-ази.

■ 8. Экспериментальный трихинеллез морских свинок сопровождается достоверный повыиениеи активности ферментов дыхательной цепи ( СДГ, ЦХО ) и общей йТФ-азы при ьведении мебендазола с вольта-реном' на миграционной и мышечной стадиях, что свидетельствует о .десенсибилизирующем действим комбинированного лечения;

СПИСОК РАБОТ, СШШШЙНННХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

f

1. Динамика изменений биохимических и иммунологических показателей после химиотерапии экспериментального трихинеллеза. Катер. респуб. науч. конф. патофизиологов "Актуальные вопоси патофизиологии в современной медицине йлма - Ата. 193С. С. 58. (Соавторы: Раисов Т.К., Текирбеков Д.Й., Уразалина H.Ü.).

2. Рационализация химиотерапии' экспериментального трихинеллеза. Методические рекомендации. Семипалатинск, 1990. !\ 12, (Соавторы: Раисов Т.К., Озероцковскаа H.H., Тукольская К.К., Текирбеков Д.Й., Уразалика U.M.).

3. Способ лечения трихинрл/.^за. Инфори. листок. Семипалатинск , 1991. с. 1, (Соавторы: Раисов Т.К., Темирбеков Д.А., Уразалина К.К.).

4. Уровень кзгнийактивируекой ЙТФ-азы и аденилатдезаминс-зы б тканях органов морских свинок при трихинеллезе. Мат. UI нацч.