Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Функциональное состояние почек в процессе лечения экспериментального пиелонефрита с использованием кранио-церебральной гипотермии

ВАК РФ 03.00.22, Криобиология

Автореферат диссертации по теме "Функциональное состояние почек в процессе лечения экспериментального пиелонефрита с использованием кранио-церебральной гипотермии"

ИНСТИТУТ ПРОЕШ КРИОШОЛОШИ И КРИОМЩИЩШ АН УССР

. На правах докошен УДК 616.61-002.3.615.83-092.9

КРИВОРОТЬКО Игорь Вадимович

Функциональное состояние почек в процессе лечения экспериментального пиелонефрита о использованием краАио-цзребральной гипотермии

03.00.22 - криобиология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Харьков - 1991

Работа выполнена в Институте проблем криобиологии и крио-ыедоцини АН УССР

(директор - академик АН УССР В.И.Гришенко)

Научный руководитель: член-корр.АН УССР

профессор А.М.Белоуо'

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук профессор БЛ.Сандошрский доктор медицинских наук профессор С.Г.Белов

Ведущая организация: Институт физиологии АН БССР, г.Минск

Зашита состоится " ,*--.> " —> 1991г в ^ часов иа

заседании специализированного совета Д 016.60.01 при Институте броблем криобиологии и.криомедацинн АН УССР ( 310015, г.Харьков,ул, Переясловская, 23).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института

Автореферат разослан " ^4 " 1991 г.

Ученый секретарь .специализированного совета доктор медицинских наук

А.Н.Гольцев

A tyrya ль н ост ь теми.

Для т/спешного Применения и внедрения в клиническую практику искусственной гипотермии необходимы дальнейшие фундаментальные исследования, направленные на раскрытие механизма действия охлаждения на организм яивотных и человека.

В настоящее врагля уделяется достаточно внимания изучение патофизиологических и метаболических процоссов,возникающих в организма в отват на действий кранно-церабральноД гипотермии (КЦГ).

В ряда работ установлено, (Г^А.Бабийчук,1988;1989),что дейст-виа КЦГ на организм сопряяено с реакцией снмпато-адрояалозой системы, которая изменяет физиологические маханизин регуляции органных почечных функций,что,в частности,выражается в изменении водного и , электролитного баланса (Гурии B.H,,I939;3eiSen'i>-^-.,I985) в ткани почки (Козлов A.B., 1989Цепьv»!^ Ь.ЛЛ. ,1983).При этом возникают' изменения,характарниа дня так называемого "холодового диуреза",который появляется У адаптированных к холодк ствоткых и людей, прорвавших в северных шротах.Считают,что этот феномен является отображением задатках реакций организма вследствие холодового воздействия (Скулачов Б.П.,1959;К,П.Иванов,1972;В.В.Хаскин,1975;А Л.Шепелев, 35977; Е.Н.Пезалкпп с соавт,I99i;Il.?U/a-iA. ,1983 и дрУ В настоящее время метод КЦГ с успехом применяется в различных • областях медицины: в наркологии (Э.Б.Первомайский, 1934;Г.А.Бэбпй-чук,1985), в акушерства при гипоксии плода и асфиксии новорожден- , них,при крайних степенях токсикоза беременных (эклампсии) (КопиовС.Н.| 1985; Гриаанко В.И. с соавт.,1989),в обвей хирургии и кардиохирургии при проведении операций с аппаратом искусственного кровообращения (Волколаков Я.В.с соавт.,1987),в интенсивной терапия и реаниматологи;' (Г.А.Бабийчук с соавт.,1990).

Имеются сведения о результатах применения КЦГ при воспалительных и раневых процессах (Арпнчин Д.Н.,1972;Кисляков 3.В.,1980). Однако детальные маханизии воздействия КЦГ,морфологические и биохимические проявления в организме аивотннх и там более человека во мнет" но выяснены,в связи с чем в этой проблеме тпм'ется много cncrRW во- ' просов.Поэто:.?/ дальнейшее раскрытие патогенеза действия холодя на

г.

физиологические и патохимические изменения в организма с целью научного обоснования использования КЦГ в клинической практкко на парспек-ткву является актуальной проблемой современной криобиологии.

В научной литература на сагодняшний дань отсутствуют сведения о влиянии КЦГ на структурно-функциональнца свойства поток при пиелонефрита либо других патологичееккх состояниях этой ткани .В частности, остается но ясними закономерности метаболических процессов в патологической ткани под влиянием охлаждения,изменение показателей гомеостаза организма после КЦГ,закономерности синтеза гормонов поело КЦГ,регулирующих работу почек,а также состояние микроциркуляции в почка при различных ре.-шмах КЦГ.

Цоль^Есследования.

Вияснить характер и динамику биохимических и. физиологических из- . менений в тканях почки крыс при экспериментальном пиелонефрите под воздействием различных вариантов фармакологического лечения и кранио-цоребральной гипотермии.

За5ачи_исслеаоааниял

I.Определить состояние водовиделительной и концентрационной функции почок после различиях вариантов лечения и в том числа с приманенном КЦГ*

2.Изучить характер морфологических изменений и состояние микроциркуляции в почке при пиолонефрите после применения указанных внае экспериментальных условий..

3.Изучить изменения интенсивности'процессов окислительного ф о сформирования, тканевого дохакия,биосинтеза белков и нуклииновцх кислот

в ткани почки в условиях экспериментального пиелонефрита после комбинированного воздействия КЦГ и стандартной терапии.

4.Исследовзть характер секреции антидиуретического гормона в различные сроки после КЦГ и разработать способ гипотермии, обсспечивакгшЛ повышение концентрационной функции почек при пиелонефрите.

ЗИЗЗ-ЁйЭиЭУЗ. •

Впорбэо в эксперименте изучено состояние клубочкочэИ фильграцигт, роабсорбции, осмотического концентрирования мочи у .тлтотных после кра-нио-церобральной пшотарши .Разработан способ стимула^:7! концентрационной фунгарга почек с помоиь'о КЦГ,

Изучено состояние окислите тьиого <г>ос$0[швкровшгая, ткпиового дыхания и биосинтеза балков и нуклеиновых глслот в почечной тка''л в на-тпваих условиях п в различные срою: после применения КЦГ прл аксяс-риме.чтальном пиелонефрите.

Доказан стимулирующий эффект кранио-церзбрзльной гипотермии пря экспериментальном пиелонефрита на процессы метаболизма в почечной ткани про-слажена их взаимосвязь с гуморальной регуляцией почечных функций.

. На основании изучения свархмедлекной активности мозга и спектрального анализа электроэнцефалограммы доказано нормализующее влияние холодового воздействия при экспериментальном пиелонефрите на биоэлектрическую активность коры и гипоталамуса.

Впервые определен о, что через 24-48 часов посла КЦГ наблюдается усиление гемодинамики и микроциркуляции в почке у :ягвотных с экспериментальным пполонефритом.Установлано,что КЦГ позволяет увеличить эффективность стандартной терапии данного заболевания за счет усиления экскреции азотистых веществ и повышения устойчивости организма к эндогенной интоксикации,а также усиления процессов регенерации поврежденных канальцевых клеток.

По результатам исследования получено положительное репениз о выдача авторского свидетельства на изобретение "Способ лечения апоста-матозного пиелонефрита" (Заявка 4593464/30-14 (0699ы),пояучеао 3 свидатальства на рационализаторские предложения.

х. КЦГ на фоне различных вариантов медикаментозного лечения вызывает стимуляцию защитно-приспособительных механизмов в организма животных, что способствует активизации репаративных процессов в почке при экспериментальном пиелонефрита.

2. Воздействие КЦГ на организм экспериментальных животных по сравнению со стандартной терапией приводит к усилению концентрационной функции почек,-проявляющееся увеличением осмоляр.чости мочи на экскреции азотнетчх веществ на 50% и реабсорбции.воды на 0,3$,что связано с 6-ти кратным повышением содержания в крови антидпуретического гормона посла КЦГ и улучшением биохимических показателей биоэнергетики и синтеза оелка в ткани почта.

Теоретическое, .ц цтовдичоское значение работа.

На основании проведенных исследований в эксперименте разработан режим кранио-церебральной гипотермии,обеспечивающий стимуляцию концентрационной функции почек. Результаты проведанных комплексных исследований позволяют оценить целесообразность применения КЦГ йря хронической почечной недостаточности и поражении канальцевого аппарата почек.

Это подтворздается тем,что под воздействием КцГ в условиях экспериментального пиелонефрита течение местного воспалительного процесса в органе протекает более благоприятно в связи в чем возникают предпосылки использования гипотермии в комплексном лечении воспалительных заболеваний почек.

Ддсдйаыдя-Шйт.

|.1атерналы диссертационной работы били представлены на конференциях молодик ученых ¡ЩКяк. АН УСиК (Харьков,iSaV;1990); П-fl конференции молодых ученых Харьковского медицинского института (Харьков,1990),П-й Все-союзнои конференции по сепсису (Тбилиси, 1990); научно-практической конференции "Актуальные вопросы санаторно-курортного лечения заболеваний почек и мочевыводяших путай" (Березовские минеральные вода, 1990).

ЗМдакшац.

По результатам исследований опубликовано 5 научных работ,получено положительное решение от 10.07.1990г о выдача авторского свидетельства по заявке 4693464/30-14 (069951),зарегистрировано 3 рационализаторских предложения.

.Оцмм. л ..Q.xTOa.m .mo.or.4.«

Диссертация изложена на 102 страницах машинописного текста и состоит из вводания,5 глав собственных исследований,заключения,выводов и указателя литературы, содержащего 212 работ,пз них 115 - отечественных и 97 - заруоа:щых авторов. Текст иллюстрирован 31 таблицей и 24 рисунками.

МАТЕРИАЛЫ II ¡.¡ЕТОДЫ ИССЛЭД0БАИ1Я.

Исследования проводили на крысах линии Впстар, полученных пз питомника АШ "Столбовая", массой 180-220 г. КЦГ крысам проводили с помоаью гипотерма "Хзлод-22", .усовершенствованного ктаароЯ гая охлаждения мелких лабораторных животных'(А.В.Козлов,Л.И.Вуляк,1986). Использовалась методика умеренной КЦГ со енпяением температуры тола до Е0-32°С с экспозицией 1-1,5 часа. Бактериальный пиелонефрит.моделировали по методика А.Бачулис (1986),сущность которой заключается в введении в мозговое вешество ткани почки 5 млн.микробных тел кишечной палочки серотипа 0-6, вчдаланной из мочи больного острым пиелоиефритом.В качестве традиционной терапии использовали внутримышечное введение антибиотика согласно чувствительности микроорганизмов (гентамицин по 80 mit на ЮОг массы

с интервалом 8 часов).Комбинированная терапия представляла однократное проведение сеанса КЦГ на 10-е сутки заболевания,одновременно с началом антибактериальной терапии в момент наибольшего разгара заболевания.

Морфологические исследования были проведаны на микрэпрвпаратах, окрашенных гематоксилин-эозином при увеличении I х 80 и I х 200. Таете исследовались мазки-отпечатки почек и материал аспирационной биопсии из органа,окрашенные по Романовскому' при увеличении I х 300.

Водовыделнтельпую и концентрационную функцию почек изучали у Ш1-вотних с помощью метаболической камеры,позволявшей собрать суточный диурез.В плазма крови и моча определяли концентрацию калия и натрия на микроанализаторе OP-2S6/I фирма "Раделикс" (Венгрия),определяли та race содержание в крови и моче мочевины л креатшшна,вычисляли минутный диурез..Расчетным путем по формуле Реберга-Тареева (З.С.Карпенко с соавт.,1977) вычисляли клуб очковую фильтрацию, реабсорбцшз воды и электролитов .Изучали осмолярность крови и мочи,на основании полученных результатов расчитывали осмотический клиренс.

Лабораторные методы включали: расчет форменных элементов крови, вычисление процентного соотношения зрелых и юпчзг форм нентро'пильных лейкоцитов, определение СОЭ. Исследования мочи состояли в микроскопии осадка мочи с подсчетом количества лейкоцитов в I мл мочи (по Амбургм) и на одно поле зрения микроскопа.

Состояние микроцпркулятормого русла почки изучали методом приязненной биомикроскотши с помошыо микроскопа "Люмам K-I",снабженного фоторегистрирушим устройством (фотоаппарат "Зоркий") при увеличении I х 200. Исследования проводили в режимах поляризации и люминисценцкн. В качестве люмигшецентной метки применяли 2% раствор уранина,введенного внутривенно в количестве 0,5 мл.

Содержание в крови антидиуретического гормона изучали с помошью

тос

методики специфической иммуноаглютинации с меченными Iх -антителами в счворотко.произвадрнной в институте органической хзшии и биохимии (Прага,4Ci>F).

Состояние окислительного фосфориллпрования в ткани пораженной и контрлатеральнон почта,а так1:« у здоровых ;швотных после КЦГ исследовали но выделенных из почки митохондриях (II.М.Цосолова, 1975),Эффективность окислительного фосфорилирования оценивали по скоростям потребле-а ия кислорода митохондриями, находящимися в различных метаболических состояниях в зависимости о т присутствия в среде их инкубации субстратов окислительного фос.ооршшрован ия. Дыхательную я фос|>орилируюют

активность митохондрий измеряли на полярографе 1Р-7а (ЧСФР).

Процессы биосинтеза белка и РНК в ткани почки изучали по интенсивности включения меченных радиоизотопами предшественников синтеза: для РНК - Н^уридин (СССР),для белка - С14гидролизат белков хлореллы (ЧОФР),являвшийся смесью аминокислот.

Биоэлектрическая активность мозга изучалась с помощью электроэнцефалографии, снятой с помощью предварительно имплантированных электродов в область коры головцого мозга и гипоталамуса по координатам ат-ластереотаксического атласа.Показатели энцефалограммы регистрировали на энцефалографе Б$Т-101 (ЛР) и магнитографа К-067 (СССР).Проводился корреляционный анализ энцефалограш с помошью анализатора спектра СК 4-72 и прибора для исследования корреляционных характеристик Х6-8.

Стзтистическря обработка получанных данных выполнялась методом вариационного и корреляционного анализов на ВЦ ИПКиК АН УССР с помощью ЭВМ по способу Стьвданта-Фи'дера.

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСЩЕНИЕ. '

Проведенные исследования свидетельствуют,что после применения КЦГ функция почек изменяется как в клубочковом,так и в канальцевом аппаратах.

Через 24 часа после гипотермии скорость клубочковой фильтрации снижалась незначительно,а через 48 часов наблюдения и в более поздние сроки практически нормализовалась и колебалась в пределах физиологической нормы.

Более существенные функциональные сдвиги после КЦГ осуществлялись в кянальцевом аппарате почек,который,как известно,участвует в процессах роабсорбции воды,активном транспорта К+ и из просвета канальцев обратно в интерстиций и кровь,т.а. обеспечивает сохранение осмотического и электролитного гомеостаза. Спустя сутки после КЦГ у животных существенно снижалось'выделение с ночей воды и ;ёа+, что сопровождалось увеличением осмолярнОсти плазмы крови и увеличением осмолярности мочи. За счет увеличенной на 60$ по сравнению с нормой экскреции мочевины, возрастал процент ее осмотической силы в моче от 30,4 до 52,3$,о соотношение осмолярности к обшей осмолярности мочи снижалось от 25,1 до 9,3$. В эти сроки незначительно увеличивалась реабсорбция клубочт:о вого фильтрата,что свидетельствовало об активизации функции дкстальш: отделов нефрона с увеличением концентрационной способности почек.

Причиной такого изменения функции почек являлось значительное

увеличение содержания антидиурзтичаского гормона в плазма крови пос- • ла КЦГ.

При исходной концентрации 20,1 i 2,3 пг/мл. чараз 24 часа посла КЦГ содержание гормонов в крови достигало шнимальных значений (120,7 - 4,6 пг/мл), снижалось прогрессивно к 5 суткам до'физиологической нормы.

К 2-3 суткам посла КЦГ, при достаточно высокой концентрации антидиуретического гормона в плазме крови (68,7 - 2,2 пг/мл), наблюдалась реакция диуреза в виде увеличения суточной мочи в 2 раза по сравнению с исходными величинами за счет уменьшения реабсорбции.В этих условиях интенсивный диураз также обеспачивался повышенной экскрецией осмотически активных вашеств, пражда всего мочевиной, о чем свидетельствует увеличение еа суточной' экскреции на 260$? и повышенна осмотического клиренса на 1655 по сравнению с контролем. Осмолярность мочи, как в периода олигурии.так и в периода полиурин сохранялась стабильно высокой (1300-1400 мосм/л).

Через 4-5 суток посла КЦГ отмечено снижение диуреза до нормальных значений,скорость клубочковой фильтрации и рэабсорбцпи клубочко-вого фильтрата также на отличались от контроля.

У животных с экспериментальным пиелонефритом наблюдалось варажев-ноа снижение исследуемых физиологических показателей,особенно на 10 сутки заболевания. Скорость клубочковой фильтрации составляла примерно 5С$ от должной (410 •£ 17 мкл/мин), реабсорбция - 99,2%. Наблюдалась значимая потеря йа+ с мочай (реабсорбция была 95,1% при контроле 98,2$; Р^0,05) и снижение экскреции азотистых вешаств с мочай до 72$ от контрольных значений.

Под влиянием традиционной антибактериальной тарапии к 10 суткам наблюдалось достоверное увеличение скорости клубочковой фильтрации с 410 до 520 мкл/мин., хотя реабсорбция клубочкового фильтрата оставалась стабильно низкой (99,4) и наблюдалась повышенная экскрзция натрия (реабсорбция натрия составляла 96,6$).

Комплексное использование КЦГ и антибиотикотарапии позволило получить хорошие биохимические и физиологические результаты.

К 20-м суткам наблюдения показатели раабсорбции воды.и электролитов нормалиэовивались,чего на было выявлено в других группах животных с пиелонефритом.При этом выявлен эффект избирательной стимуляции канальцавых функций почак,которые в наибольший степени изменяются при бактериальном пиелонефрита.Экскреция азотистых вешаств при использо-

вввии комбинированного воздействия увеличивалась как по сравнению с животными,получавшими традиционную терапию,так и с группой'контрольных животных.

Диаграмма,отражавшая изменение почечных функций в процесса лечения экспериментального пиелонефрита с применением КЦГ, представлена на рис»!.

I

fi»

Контроль Bu ¿еинив Яб-ппрапиЯеКЦГ Традиционная

К et пак меток терапия Юet/mon

Рис.1 Состояниа концентрационной функции почек у животных с экспериментальным пиелонефритом под влиянием различных вариантов лачения.

Исследование микроциркулято'рного русла с помоаью контактной биомикроскопии показывает,что в процесса КЦГ мо«но выделить три фазы сосудистых изменений в деятельности почек. Б первые 20-30 минут КЦГ в почке преобладают процессы ишамизации,которые во второй фазе,спустя 60-120 минут сменяются максимальным увеличением кровотока в почка и усилением гемодинамики нефронов. При этом происходит расширение кагшляров,артв-риол.ванул, увеличивается площадь клубочка и внутренний днамэтр канальцев. Морфологические изменения ткани почки при КЦГ к в сроки до 5 су-

ток посла гипотермии представлены в таблица I.

Таблица I. Морфологические изменения посла КЦГ

Сроки исследования

Морфологическая картина

Гидродинамический эффект

I ч. Клубочок: увеличение плошади,возрас-

тание диаметра приводящей и отводя-шей артериолы

Канальцы: набухание клеточного ядра уменьшение просвета канальцев 1-го порядка

24 а. Клубочек: увеличение плошади,сунение

перигломерулярной шели

Канальцы: увеличение диаметра можка-нальцевнх капилляров,сужение просвета канальцев 1-го и 2-го порядка

48-72 ч Клубочек: уменьшите диаметра отводя-шей артерполы,уменьсениа площади,возрастание паригломоруллярной шели

Каналы?!: увеличение градиента между диаметрами 1-го и 2-го порядка, уплотненна клеточного ядра,увеличение просвета канальцев 2-го порядка

Полнокровна паренхимы, антидиурез

Усиление фильтрации первичной мочи в просвет канальцев, увеличение реабсорб-

ЦЙИ

Усиление фильтрации и реабсороции,возрастание. диуреза

При пролонгировании гипотермии до 4-6 часов,развиваются явления пареза микрососудов,замедление кровотока,феномен "сладлнроваиия" эритроцитов и образованно пристеночных тромбов,Значительная часть микроцпр-куляторного русла отключается от кровотока,что вызывает развитие феномена патологического артерио-вонозного шунтирования.Таким образом,КЦГ продолжительностью 1-2 часа оказывает эффективное воздействие на показатели почечного кровотока и мпкроциркуляцпв в почках.

У животных с нксперимонтальным пиелонефритом выявлены существенные нарушения процессов ыпкроциркуляции в области воспалительных инфильтратов: в большинство случаев наблидался диапедоз эритроцитов,микротромбо-зы,уменьшение числа капилляров на единицу плояади почечной ткани и уменьшение артерпо-венуллярного соотношения.

К 20 суткам заболевания происходила реваскуляризация инфильтратов с последующим замещением части паренхимы соединительной тканью.При этом скорость,интенсивность и распространенность репаратнвных процессов у .•¡азотных после применения комбинированной терапии была значительно вы-

ше.чем у хсивотиых,'получавших традиционное лочсшиа.В этом случаа создаются болоа благоприятные условия для восстановления тканевых структур в почке в связи с улучшением микрогемоциркуляции.

Исследования показателей гемограммы,проведанные чараз 24 часа посла КЦГ у здоровых лсивотных показывают уменьшение в крови количественного соотношения лейкоциты/лимфоциты за счет преобладания лимфоцитов,а также увеличение числа плазматических клаток от 0-1$ до 4-6$. В группа животных с экспериментальным пиелонефритом абсолютное число лейкоцитов и соотношение между юными и зрелыми формами лейкоцитов по-вышалось.При этом отмечался так называемый сдвиг лейкоцитарной формулы влево.

Регенеративный индекс сдвига найтрскйилов чараз 5 суток после начала заболевания увеличивался до 0,2; чараз 10 суток - до 0,27,что характеризовало уморенную степень интоксикации и раздражения белого ростка костного мозга. Об этом такжа свидетельствовало появление токсической зернистости с 25% клеток на 5 сутки и в 47$ - на 10 сутки пиелонефрита.Соответственно этим изменениям,происходило увеличение числа лейкоцитов в осадка мочи в аналогичные сроки в 10 и 20 раз по сравнению с контролем.

В группе животных,получивших традиционную антибактериальную терапию, характер изменений соответствовал менее тяжелому течению воспалительного процесса.Так,число лейкоцитов крови к 10 суткам снижался до 11,9 - 0,8 х 10 , индекс сдвига нейтрофилов - до 0,16,процент обнаружения токсической зерностости в нейтрофилах составлял 33$, а количество лимфоцитов и плазматических клеток как в периферической крови, так и в аспирата из почки соответствовал уровню у животных без лечения.

У животных,получавших комбинированную терапию,включающую КЦГ и антибиотикотарапию,течение воспалительного процесса было более благоприятным. Так,к 10 суткам лечения уровень числа лейкоцитов крови достигал верхней границы нормы (9,0 ± 0,6 х Ю°'л),токсЕческоя зернистость сохранялась у В%, хотя индекс сдвига нейтрофмлов оставался несколько повышенным. Морфологическими исследованиями показано накопление в пораженной почке значительного числа плазматических клеток и функционально активных лейкоцитов.

Проведенные исследования указанных выше показателей у животных с экспериментальным пиелонефритом свидетельствуют,что комбинированная терапия - КЦГ в сочетании с антибиотикотераплей - является благопри- '

ятным вариантом лечения,поскольку способствует усилению неспецифической резистентности организма,это позволяет снизить продолжительность процессов репарации и частоту перехода острого пиелонефрита в уросепсис.'

Общая продолжительность восстановительных процессов, по данным лабораторных исследования,снижается на 8 дней по сравнению с япвотными, получавшими только традиционную терапию, и на 14 дней по сравнению с животными без лечения. Летальность группы лствотных,леченных актибиотя ком на фона КЦГ,обусловленная бактериемией,составила 3$ по сравнению с Ш!о кивотных без лечения и 10$ у иизотнчх,получавших только антибактериальную терапию.

Как известно,под влиянием бактериальных токсинов в клетках нарушается функциональное состояние митохондрий,являхмихся системой гэие-рацил какроэргов (С.И.Рябов с соавт.,1975; В. П, С ку л а ч а в, 12Б9;"]. Ь ) 1987).

Комбинированное действие КЦГ на организм .тавотных приводило к частичному и кратковременному (24 ч) разобпению процессов окислительного фосфориллирования.При этом увеличивалась скорость потребления кислорода митохондриями почек з метаболическом состоянии 2, в связи с чем снижался дыхательный контроль по Ларди на 20$.Биоэнергетические показатели митохондрий,выделенных черев 24 часа после КЦГ,но отличались от контрольных (табл.2)

Таблица 2.- Влияние наркоза,КЦГ и традиционной терапии на параметры

окислительного фосфориллирования митохондрий почки,пораненной бактериальным пиелонефритом.

Условия эксперимента ДК по Ларди

Контроль на действие наркоза 4,80*0,41

Исследования непосредственно после КЦГ 3,85*0,42"

Через 24 часа после КЦГ 4,33*0,41

Пиелонефрит без лачэчия

5 суток 1,88*0,12х

10 суток 1,П±о, 01хх

Традиционная терапия

10 суток 2,46*0,22*

Комбинированная тарап'-ля: . Ю суток_ 3,91*0,26

х-ра з л л чпя до ст о з е рны"Тт^ отнгаеншоТГ контр'олюТГ^ВТСЛ хх-различпя достоверны по отношении к 5 суткам пиелонефрита (Р<0,05) ххх-различпя достоверны по отношении к традиционной терапии (Р< 0,05)

ДК по Чансу АДФ/О

3,83*0,32 1,60*0,20

3,54*0,34 1,74*0,15

3,65*0,41 1,78*0,11

1,42*0,15х 0,74*0,08х-

1,00*0,01х* 0,00*0,00хзг

1,60*0,IIх 1,15*0,12х

1,66*0,12х 1,65*0,14ххх

У животных с экспериментальным пиелонефритом бактериальное воспаление вызвало достоверное ухудшение большинства параматров окислительного фосфорпллирования ужа с 5-х суток заболевания. Скорость потребления кислорода снюхалась в различных метаболических состояниях практически одинаково (на 66-71$)»причем добавление в среду инкубации разобщителя - 2,4-динитрофенола - не изменяло скорости дыхания митохондрий, что позволяет предполагать о повреждении АТФ-синтезируюшего аппарата митохондрий ( АЛ.боо«^, 1977).

Из таблицы 2 видно,что при использовании традиционной антибактериальной терапии происходит достоверное увеличение ДК по Ларди и ко-эфицнент АД5/0 биоэнергетических показателей по сравнению с данными нелеченных отвотных.

Сочетание традиционной терапии с КЦГ вызывает достоверное улучшение показателей окислительного фосфорпллирования как по сравнению с показателями в группе зкивотных,получавших традиционную терапию,так и в группе животных баз лечания.При этом по сравнению с животными,' получавшими традиционную терапию, применение КЦГ приводило к увеличению дыхательных контролей: по Ларди - на 58,9$, по Чансу - на 3,7$, коэфиционт фосфорпллирования увеличивался на 43,4%, что свидетельствует о положительном влиянии КЦГ на функцию митохондрий почек в условиях воспаления '

Таким образом,комбинированная терапия с применением КЦГ при лечении бактериального пиелонефрита оказывает благоприятное воздействие на энергетическое состояние митохондрий изолированных из почек,что существенно влияет на течение восстановительных процессов в клетках поврежденной почечной ткани.

Это,в частности,хорошо проявляется при изучении процессов биосинтеза белков и РНК,являвшихся важными структурами,регулирующими процессы восстановления ткани при любом вида повреждения.

Действительно,у животных после сеанса гипотермии отмечалось циклическое возрастание интенсивности синтеза белков,которое иа 1-е сутки после гипотермии превышало нормальный .уровонь на 150$, на 2-е - а$ 230Í.Аналогичная динамика наблюдается в ткани почки при пиелонефрите, при котором в первые 5 суток усиление белкового синтеза превышало контрольные значания на 100$, через 10 суток - на 15(Й.Уровень интенсивности синтеза РНК при этом не изменялся. Через 15-20 суток,когда воспаление трансформируется из острого в хроническое и преобладают про-

цессы регенерации,происходит значительный прирост интенсивности синтеза белков (на 300;1 по сравнению с контролем),что,вероятно,связано с повышенным расходом белков на процассы репарации клэточных структур.

Использованная нами комбинированная терапия в тачание первых 10 суток наблюдения приводила к прогрессивному снижению уровня синтеза белка. Как видно из рис.2, показатель интенсивности синтеза белка снижался до 220 ДРМ/ыг,хотя и был несколько выше,чем у животных,получавших изолированную антибактериальную терапию (180 ДРМ/мг).

Рис.2. Биосинтез белка и РНК у животных с экспериментальным пиалонаф-ритом под влиянием кранио-церебрапьной гипотермии.

При осуществлении антибактериальной терапии и КЦГ,отмечалось выраженное усиленно синтеза РНК как но сравнению с контролем,так и по сравнению с яивотными остальнвх групп.

Показатель интенсивности синтеза РНК у этих животных (601 ДРМ/мг тквни) провыпол данные у животных баз лаченпя на 150/5 и у .-кивотных с

традиционной тарапиай - на 180$.Можно думать,что активизация синтзза РНК при воспалении в почках является благоприятным фактором,т.к. приводит к восполнению структурного материала,который используется в процессах регенерации тканей.

Исследование биоэлектрической активности отделов мозга,ответственных за осуществление вегетативных реакций и контролирующих состояние водовндалитальной функции почок показало,что комбинированное воздействие с помощью антибактериальной терапии и КЦГ приводит к ликвидации патологических очаговых изменений в коре головного мозга и гипоталамусе,возникавших в ответ на действие воспаления в почка.

Таким образом,проведанные комплексные исследования биохимических и физиологических изменений в организме животных с пиелонефритом под влиянием КЦГ показывают,что гипотермическое воздействие в режиме уморенной гипотермии может оказывать положительное влияние на нарушенный метаболизм воспаленного органа и его регуляцию.Перспективы применения данного метода в комплексном лечении пиелонефрита связаны с усилением концентрационной функции почек,усилением выведения азотистых метаболитов с мочей,восстановлением К+ - Ла+ соотношения,усилением процессов окислительного фосфориллирования и биосинтеза белков и нуклеиновых кислот в пораженном воспалением органе.

выводы.

1.Прл комбинированном прима но ¡ига КЦГ и традиционно;! антибактериальной терапии,течение экспериментального пиелонефрита значитзльно улучшатся, что проявляется в более быстрой нормализации клпнико-лайо-Раторных и биохимических показателей.

2.В диапазона до 30-32°0 КЦГ приводит к олигурии и повышению концентрации азотистых веыаств в моче на 30 В последующие 2-3 суток происходит усиленна водовыделительной функции почек при стабильно высокой концентрации азотистых веаеств в моча,что связано о 6-кратным увеличенном концентрации антидауратического гормона в плазма крови.

3.При комбинированном воздействии КЦГ и антибактериальной терапии,морфологически выявляется положительная динамика точения воспалительного процесса в почке в результата формирования плазмоцитарно-мо-ноцитарной реакция крови и быстрого восстановления мккроциркуляцки в почка.

4.Комбинированное прлманонна антибактериальной тарапии и КЦГ обеспечивает более бистроа восстансвланиа процессов сопряжения окисления и фоарорнлировагшя в митохондригтх клатск почечного эпителия, что проявляется увеличением дыхательного контроля митохондрий по Лар-да - на 58,и коэффициента фосфорллировааия на 43,4?! по сравнению ■ с традиционной терапией.

5.Применение КЦГ в условиях традиционной терапии позволяет в сушествзниой море нормализовать процессы синтеза белка я РНК в пораженной почке за счет увеличения в 2,5 раза интенсивности синтеза РНК, наблюдашегося посла гипотермии.

Слисок научных работ,опубликованных по тома диссертации.

1.Возможности кранло-церебральной гипотермии в комплексном лечении пиелонефрита // Новое в психотерапии и немедикаментозном лачешш больных на курорта.Анаот.программа.-Харьков,1990.-с.89.

2.Влияние кранио-церобральной гипотермии на концентрационную функцию почек // Новоз в психотарашга и немадикамантозном лечении больных на курорте.Ацнот.программа.-Харьков,1990.-с.88.

3.Диагностическая ценность аспирационной тонкоигольной биопсии при гнойном пиелонефрита,осложненном уросопсисом // 2-я Всесоюзная конф.по сепсису.Тез.докл.-Тбилиси,1990.-с.513-515.(в соавт.).

4.Результаты применения крашю-церабральной гипотермии при эксперимента льном пиелонефрита // Препринт ФИНТ АН УССР.-Харьков,1990.-21с.

5.Состояние шкроциркуляторного русла почок посла кранио-церобральной гипотермии // Влияние охлаждения на биологические объекты (Сб.научн, трудов).-Харьков,1990.-с.25-29.(в соавт.).

I.Способ лечения апостематозного пиелонефрита // Положительное раша-ниа о выдача авторского свидетельства по заявка 4593464/30-14 (069951) от 10.07.1990 ( в соавт.).

I.Экспериментальная модель пиелонефрита //Удостоверение на рац.предложение '51898 от 24.09.89 г..выданное Харьковским медицинским институтом.

2.Способ лечани апостематозного пиелонефрита // Удостоверение на рац. продиозкание И 1497 от 27.04.1987 г..выданное Харьковским медицинским институтом.

3.Экспериментальная модель пиелонефрита (сообшенио второе) // Удостоверение на рацпредложение 1899 от 10.10.89 г..выданное Харьков-' ским медицинским институтом.

Авторские свидетельства по тамо диссертации.

Рационализаторские предложения.