Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Функциональная активность яичников спонтанно и рефлекторно овулирующих животных в условиях введения эстрогенов и андрогенов

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Функциональная активность яичников спонтанно и рефлекторно овулирующих животных в условиях введения эстрогенов и андрогенов"

ХАРЬКОВСКИЙ ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ И ОРДЕНА ДРУЕБЫ НАРОДОВ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ им. А.Ы.ГОРЬКОГО

ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ АКТИВНОСТЬ ЯИЧНИКОВ СПОНТАННО И РЕФЛЕКТОРНО ОВУЛИРУЮЩИХ ЖИВОТНЫХ В УСЛОВИЯХ ВВЕДЕНИЯ ЭСТРОГЕНОВ и АНДРОГЕНОВ

03.00.13 - Физиология человека и животных

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

На правах рукописи

ЛИТВИНОВА Лина Борисовна

Харьков - 1990

Работа выполнена в Харьковском НИИ эндокринологии и химии гормонов

Научный руководитель - доктор биологических наук,

профессор А.И.Гладкова . Официальные оппоненты - доктор биологических наук,

профессор Г.И.Горгоюв - доктор ветеринарных наук, профессор Д.Д.Логвинов

Ведущая организация - НИИ эндокринологии и обмена

веществ, г.Киев

Защита диссертации состоится " 1990 г.

" 1$ "час." 15 "мин, на заседании специализированного совета К 063.31.04 в Харьковском государственном университете т. А.М.Горького (310077, Харысоэ-77, пл.Дзержинского, 4, вуд. 3-15).

С диссертацией можно ознакомиться в Центральной научной библиотеке ХГУ.

Автореферат разослан 1990 года.

Ученый секретарь специализированного совета /уАу В.А.Малеев

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальноеть темы. Проблема регуляции репродукции - одна из наиболее ванных в теоретической биологии. Достижения в данной области находят прямой выход в практику.- В частности, лечение больных о женским бесплодием может быть эффективным только при назначении патогенетически обоснованной терапии, что предполагает познание физиологии регуляции репродукции*

Другим важным направлением, в котором находят практическое воплощение достижения экспериментальной репродуктологии, является животноводство, поскольку перевод его на промышленную основу с целью интенсификации производства привел к снижению плодовитости самок в специализированных хозяйствах /О.П.Павлова, 1990/.

Программы активного регулирования процесса воспроизведения у животных и лечения женского бесплодия базируются на знаниях закономерностей эндокринной регуляции естественного полового цикла, для изучения которого первостепенное значение имеет выбор адекватной экспериментальной модели с соответствующим типом размножения. Поэтому изучение особенностей репродукции у криз а кроликов, относящихся к животным о разным типом регуляции овуляции, поиимо чисто биологических задач, преследовало практические цели - обоснование использования данных видов животных для возможности отработки терапевтических гормональных схем.

До настоящего времени оспаривается принадлежность кроликов к животным моно- или полицикличным /А.Ы.Яурбенхо, 1983; В.Б.Роаен, 198Более того, нет единого мнения о продолжительности полового цикла, наличии положительной обратной связи в системе гонады-гипофчз, динамики половых и гонадотропных гормонов, лх влияния на фолликулогенез. Все это препятствует позыасни» воспроизводства у этого вида животных, а, с другой стороны, их использованию в качество эксперименталвной модели.

Методы гормонального воздействия на репродукцию ицроко применяются при лечении бесплодия, для индукции и синхронизации половых циклов ялвотных в точно реглгшеитировашые сроки. Эстрогсин создают в крови уровень гориояов, обеспачлвачщиП все звенья половой триады: течку, охоту, овуляции. Относительно фияаологглоско!» роли авдрогенов в жеяокон организме, а геи более неарсмЗтиЗир.У-емых, к коюрнн относится дягкдротестостеров /дГ1'/, многое остает-

ся неясный, хотя показано, что совместное назначение эстрогенов и андрогенов. ;(препараты овоген, гравигност) может быть более эффективны«. В Харьковском НИЗ. эндокринологии и химии гормонов синтезирован оригинальный эстрогенно-ащрогеииый препарат дигитол, который долаен был пройти углубленною проверку для определения показаний к его применении, а также необходимо было выяснить механизм его действия. В настоящее время препарат дигитол прошел производственные испытания и рекомендован к применении я качестве средства для емшуляции половой охоты у самок сельскохозяйственных животных.

Несиотря на распространенность гормональных методов лечения, результаты их воздействия на. репродукцию часто бывают непредсказуемы, а многообразие половых циклов затрудняет экстраполяцию полученных данных с одних видов на другие.

Цель и задачи работы; Выяснить особенности регуляции половых циклов и реакции -яичников не введение, стероидных гормонов у яи-зотных со спонгаюой и провоцированной овуляцией, а также установить факторы, определяющие .видовые различия.

В задачи исследования входило:.

1. Установить наличие и продолжительность зстрального цикла 3 кроликов, используя ряд корфофуннциональных критериев и гормональных показателей - динамику половых и гонадотропных гормонов, состояние фолликулярного аппарата яичников, размеры и окраску наружных половых органов.

2. Исследовать влияние эстрогениэации самок крыс и кроликов на активность гонад и гонадотропну» функцию гипофиза.

3. Изучить особенности инкреторной и генеративной активности яичников и гонадотропной функции гипофизов половозрелых самок кроликов и крыс при введении ДГТ.

Изучить астральный цикл, динакику половых и гонадотропных гормонов., овариальный фолликулогенез у крыс и кроликов при соче-танком применении ДГТ и зстрадиола (Eg), препарата дигитола и определить оптимальные еррки для осеменения животных после введении дигитола.

Научная новизна. Впервые у санок- кроликов на основании комплексного 'анализа"динаы.чка. половах и .гонадотропных гормонов и ова-риапьного фолликулогенеза установлена 11-12- дневная продоляи-тслькость астрального цикла. Зпервуе показана зависимость состояния ааруашх половых органов кроликов от уровня эндогенных горко-

нов и обосновано визуальное определение стадии астрального цикла. Произведено сопосгавление секреции гонадных стероидов с циркулирующим уровнен, на основании чего установлено, что основным эстрогеном у кроликов является эстрон. Получены новне .данные, подтвер-кдаюцие наличие положительное обратной связи к езду гонадами i гипофизом у салок е провоцированной, овуляцие!!. Вперзие выявлена видовые различия в реакции яичников на введение ДГТ у животных с разным типом регуляции овуляции. Показано ингибируюцее действие масляного растворителя на репродуктивную систему самок. Проведены доклинические испытания препарата дигитол и установлено его стимулирующее влияние на репродукцию самок разных видов.

Теоретическая значимость работы. Результаты исследований расширяют современные представления о роли гормональной регуляции половых циклов и позволяют глубяе понять видовые особенности функционирования репродуктивной системы самок. Выявлены эндокринные механизмы, обусловливающие отсутствие преовуляторного пика высвобождения гонадотропинов у самок с провоцированной овуляцией в условиях наличия астрального цикла и положительной обратной связи в системе гонады-гипофиз.

Практическая значимость работы. Доказана возможность визуального определения фазы эстрального цикла у кроликов. Выявлены наиболее благоприятные периоды для спаривания и получения потомства-у интактних самок кролика. Обосновано применение ДГТ для стимуляции репродуктивной функции у спонтанно овулируюцих самок. Доказана целесообразность совместного применения Е2 и ДГТ у самок и определены показания для назначения препарата дигитол - стимуляция и синхронизация астрального цикла, половой охоты и фоллику-логенеза у животных с разным типои регуляции овуляции, а также индукция овуляции у рефлекторно овулирующих самок. Установлены оптимальные сроки для спаризания или осеменения самок после инъекции дигитола. Материалы могут быть использованы в учебных курсах по об'дей и сравнительной физиологии, читаемых студентам сельскохозяйственных вузов и биологических факультетов университетов, а такае в практике животноводства и звероводства.

Полояс ни я. выносимые на защиту;

I. У самок с провоцированной овуляцией, в частности кроликов, существует астральный и овариальный циклы и положительная обратная осязь в системе яичшжн-гипо^из, но овуляцнонны.: эффект

не реализуется из-за недостаточной гормональной обеспеченности.

2. Андрогены, в том числе неароматизируеыый ДГТ, участвуют

в регуляции астрального и овариального циклов. Последствия андро-гениэации санок зависят от вида животных.

3. Для стимуляции овариального фолликулогевеза, индукции овулягш и повышения плодовитости самок совместное, назначение эстрогена и ДГТ более эффективно, чей одного Е2-

Апробация результатов. Материалы диссертации доложены и о<5-суидены на: конференциях молодых ученых и .итоговых конференциях Харьковского НИИ эндокринологии и хииии гормонов Дарьков, 1984; 19»б; 1987/, заседаниях научных обществ физиологов /1964/ и эндокринологов /1988; 1989/, Республиканской конференции молодых ученых Дарьков, 1966/, ХП съезде Украинского физиологического общества /Львов, 1986/, 1У съезде эндокринологов УССР /Львов, 1987/, I Всесоюзной координационной конференции "Биологически активные вещества в звероводстве и кролиководстве" /Москва, 1988/, Международном совещании "Онтогенетические к генетико-э'волюционные аспекты вейрозндокринной регуляции стресса" /Новосибирск, 1988/.-

Публикадии. По теме диссертации опубликовано 15 работ.

Структура и содержание диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, материалов и иетодов исследований, пяти глав собственных результатов, заключения, выводов я свиска используемой литературы, который содержит 355 источников, из них 79 отечественных и 276 иностранных авторов. Текст диссертации изложен на 248 страницах машинописи и включает 33 таблицы и 14 рисунков.

Материалы и методы исследования. Исследования выполнены на 330 половозрелых сайках крыс и 290 кроликах.

Эстральный цикл у крыс устанавливали на осногании изучения цитологии влагалищных мазков. У кроликов - визуально по окраске и размерам наружных подовых органов (вульвы или петли).

Оценку фертидьностп самок осуществляли по подсчетам плодовитости и беремевноси и пред- и постимплантационной гибели эмбрионов.

Яичники крыс и кроликов фиксировали в растворе Карнуа. Приготовленные серийные срезы окрашивали геиатоксилин-эозином /О.В.Волкова и соавт., 1982/. Подсчет генеративных элементов производили у крыс в кодом .5-м, у кроликов - 10-м срезе гонад с последующий пересчетом средних значений на один срез яичника

/И.В.Саноцкий с соавт., 1979/.

Образцы периферической крови крыс отбирали при декагшта-ции; у кроликов - из уиной вени в хроническом эксперименте. Взятие крови, оттекающей от яичника кролика, осуществляли методом канюлирования овариальной вены.

Концентрацию половых гормонов в плазме крови обоих видов салок определяли радиоиммунологическим методом с помощью наборов отечественного и зарубежного производства. Концентрацию гонрдо-тропинов в крови определяли с помощью реактивов для радиоиммунологического определения крысиных ЛГ и ФСГ, полученных из Национального гипофизарного агенства США. У кроликов суммарную концентрацию гонадотропинов в гипофизах изучали методом биологического тестирования /А.Г.Резников, 1930/.

В качестве эстрогенов применили вмесяе с его дипропионо-вым эфиром. Суммарная доза эстрогена составляла 2,86 мкг/ЮО г массы тела. Дополнительно проведено исследование с введением кроликам меченого Е2 (6,7-3Н-Е2 с удельной активностью 1,8 ТБк/ ыМ, СССР).

В качестве андрогенсв применяли 5-альфа-ДГТ в смеси с его пропионовым эфиром (общая доза ДГТ 7,14- мкг/ЮО г массы тела).

В указанных дозах и ДГТ представлены в препарате дигитол. Гормональные смеси, растворенньа в косточковом масле, вводили однократно внутримышечно в объеме 0,2 ил сайкам, находящимся в межтечковой фазе эстральяого цикла. Контролем служили интактные животные и самки, которым вводили масляный растворитель. Крысы обследованы на протяжении 10 дней, а кролики - 20 дней после введения.

Полученные результаты обработаны общепринятыми методами статистического анализа /В.Ю.Урбах,1975; Н.А.ПлохинскиЙ, 1980/.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЩОЗАНИы И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Видовае особенности функционирования яичников интактных животных. Продолжительность эстральяого-цикла крыс зависит от величины межтечковой фазы (метаэструс+дизструс). У самок с '-З-днеа-ным циклом течковый период (прозетрус +эструс) составлял 1,67+ 0,13 дн. и был короче (Р/0,001) мижтечковой фазы (3,26+0,12 дн.). Предтечковый период (проэструс) у интактных кр^с характеризовался увеличением концентрации ^, тестостерона (X); 4СГ и ЛГ и вязким

уровнем прогестерона ( £ ^Р) в периферической крови. В яичниках достоверно уменьшалось число желтых тел (И) и увеличивалось количество преовуляюрных фолликулов. Снижение числа последних и повышение количества ХТ в гонадах в эструсе свидетельствовало о произошедшей овуляции. Уровень ^ ^Р возрастал, а Е£ и гонадотро-пинов (ГТ) - сникался. Спаривание крыс в разные фазы цикла давало полочитеввый результат только в проазтрусе-аструсе, когда у спонтанно овулирущих самок создавалась ситуация, обеспечивающая реализацию всех звеньев половой триада (твчки, охоты, овуляции), необходимых для размножения.

У интактнкх самок кролика наблюдались изменения в окраске (от светло-розовой до ярко-красной, а затеи - багровой) и размере петель. Периодичность возникновения красной, отечной и 1Ю|сш-той слизью петли составляла 11-12 дн. Установлена зависимость/состояния вульвы, уровней половых и гонадотропных гормонов и овари-альным фолликулогенезом. В предтечкошй период (условно петля 2) у кроликов, как и у крыс, увеличивалось число преовуляторных фолликулов, уровень эстрогенов и 1 в крови и ГТ в гипофизе, но максимальных значений эти показатели достигали в течке (петля 3), в стличие от крыс, у которых в этот период ухе происходила овуляция и начиналась лютеиновап фаза.,У кроликов овариальная секреция эстрогенов представлена равными концентрациями эстрона (£2) и Е£. В периферической крови уровень Е^ преобладал (в 2-3 раза) над Е2* Это позволяет заклпчить, ч*о Е2 - основной эстроген у данного вида самок. В послегечковый период (петля 4) у кроликов преовуля-торные фолликулы подвергались атреэии. Последние пополняли интер-стициальнув строну гонад, которая обладает гормональной активностью /Н.В.Королев, 1%4/ и у данного вида может функционировать как 11 / к.окапо, «1. »а. 1966/. Зто приводило к увеличению уровня ^ V в крови самок в межтечковый период при отсутствии £Г. Повышение содержания ГТ (на 319,4 %) на фоне высоких концентраций эстрогенов в эструсе свидетельствовало о наличии положительной обратной связи в системе яичники-гипофиз у рефлекторно овулирую-щах самок. Однако содержание П в течке не достигало преовуляторных величин, наблюдаемых у кроликов после спаривания, т.е. в г.реовул5.торный период.

Контрольные исследования с введением косточкового масла, йньекцин масляного растворителя зазывала нарушение цикличности у крас, увеличивая иежтечковув фазу цикла. Частота возникновения

зструса после введения масла (1,4 ^ 0,15) была меньше (Р / 0,001), чем у этих же самок до воздействия (3,13 + 0,08) за равный период (16 дн.) исследований. Нарушенный цикл сопровождался монотонный, ацикличный характером динамики содержания гормонов в крови крыс, обработанных коточковым маслом. Отношение Е^/ А ^ било на уровне постовуляторных значений. В гонадах э'мх самок растущие фолликулы подвергались атрезии. После 5 дн. происходило восстановление овариального цикла и у 80 % санок между 5 и 10 дн. регистрировался эструс. Плодовитость крыс в парном цикла снижалась на 80 %, а наступление беременности - на 71,4 %.

У кроликов косточковое масло задерживало эструс яа 5-7 дн. При этом отмечалось угнетение фолликулогенеза и последовательное подавление гонадальной секреции ^ ^Р (через 24 часа) и его уровня в циркуляции (2-3 дя.), а затем^Т ( 3 дн.;. Установленное другими авторами /г.з.иооп, ,1986/ повышение содержания

холестерина в крови при введении масляного растворителя, может быть подтверждением того, что блокировался синтез предшественников £ ^Р из холестерина. Наступившая течка сопровождалась повышением уровня эстрогенов в крови, ГТ в гипофизах к числа преовуля-торных фолликулов в гонадах. Окончание зструса было стертым (отсутствовала багровая окраска петли). Ето связано с атрезией только части полостных фолликулов в яичниках вследствие низкого уровня андрогенов. Плодовитость самок была на 20 % ниже, чек у интактных в течке, а беременность отсутствовала.

Таким образом, масляный растворитель угнетал функциональную активность понад, снижая фертильность самок обоих видов. Неблагоприятное действие косточкового масла мскет быть связано с влиянием ненасыщенных нирных кислот, входящих в его состав. Последние вызывают снижение уровня £ Р в крови псевдобеременных крольчих / J.c.Caz^Uoa, 1978/, ингибируют стероидогенез / н,#аНвап, вг. в1. 1978/ и специфическое связывание рецепторами матки /у.о.С1вгс-ноГГшапп, «X. 1933/, что является важным фактором в период имплантации эмбриона /В.Б.Розен с соавт., 1981/.

Влияние экзогенных эстрогенов на половую функции крыс к кроликов. Введение симулировало наступление преждевременного пролонгированного зструса у крыс. Частота встречаемое)« течка

до (3,27 + 0,09) и после зстрогенизации (3,18+0,09) не отличались, но Е2 "перекрывал" ингибируюдий эффект масляного растворителя. Содержание стероидов и отноиение Е2/ ^ ^Р в крови подопытных самок (1-3 дн.) соответствовали показателя!! в течковом периоде иг тактных крыс. Концентрация Т снижалась, что может быть обусловлено ослаблением ферментативной системы яичников /u.A.u»ggor-fin, ,1982/ и/или подавлением гонадотропнок активнеети гипофиза /р .«.Grosser, etai,i98^. Последнее подтверждается падением уровня ФСГ к 3 дн. Введение Е2 -в перше 3 дн. стимулировало ова-риальнмй фолликул ore нез, особенно усиливался рг^т преантральных фолликулов. Количество прсовуляторных фолликулов было меньше, чем у актактных самок в проэструсе, что, вероятно, может быть следствием снижения уровня ФСГ. Одновременное уменьшение числа полостных фолликулов и К£ к 5 дн. (период окончания течки) свидетельствовали об отсутствии овуляции и я зл ял ось следствием регрессивных процессов в гонадах. Торможение овуляции в первые дни после эстрогеиизгции удлиняло течковую фазу цикла. .При спаривании подопытных крыс отмечена повышенная половая активность, что связано с увеличением уровня Е2в крови. Беременность наступала только в 30 % случаев. Неадекватная стимуляция фолликулoreнеза в условиях введения эстрогенов приводит к перезревании яйцеклеток, появленгш аномальных гамет и снижению оплодотворяющей способности / В.И.Китаев, 1982/.

Зстрогснизация кроликов индуцировала эструс через 24 ч. В этот период увеличивалась концентрация эстрогеноз в овариальной крови, что связано с аккумуляцией экзогенного Е2 в гонадах и подтвержд:но в опытах при введении аН-Е2. В периферической кро- ' ви подопытных само:: увеличивалось содержание андрогенов и, особенно, эстрогенов. Омовение последних к ^ ^Р сдвигалось в сторону преобладания эстрогенов. Соответствующий гормональный фон сопровождался стимуляцией гонадотропной функции гипофиза, что подтверждало наличие положительной обратной связи в системе яич-ники-гипофиз. Кроме того, увеличение уровня эстрогенов индуцировало преждевременный эструс, спаривательную активность и рост овариальннх фолликулов, которые достигали лреовуляторной стадии к 3 дн. Созревание фолликулов по времени совпадало с увеличением уоьцектрации основного эстрогена - Е^ и его нелосредзтзевных предшественников Е2 и андрсстендчона ( £ ^А), а уменьшение числа

преовуляторных фолликулов' (к 5-му дню) сопровождалось падением уровня Ej. Преовуляторные фолликулы в гонадах эстрогенязарованнкх кроликоз частично овулировали к 5 дн., причем у тех самок (20 '.>), у которых раньше (на 2-3 дн.), чем у других повидался уровень £ Р в крови и совпадал по времени с пиком Ej. У остальных кроликов, вследствие увеличения концентрации андрогенов, полостные фолликулы усиленно подвергались атрезик и пополняли кягерстивдаль-ную строму гонад. Основным продуктами биосинтеза последней являются I 4Р, Д kk, Т и Е2 /Д.Телегди, 1969; И.Н.Терехова, IS87/. . Этим объясняется повышение уровня указанных стероидов в кро-.:; кроликов в отдаленные сроки после введения Eg.

Таким образом, нами установлены обпие закономерности влияния эстрогенов на репродукцию спонтанно н рефлекторно езулируюдлх самок: стимуляция эструса, половой рецептизности, фолликулогенеза, которые вызваны увеличением эстрогеннот фона в крови. Наряду с этим, определены видовые особенности в удлинении астрального ци;сла крыс и кроликов. Эстрогены у крыс в первые дни тормозили огулядлю и, тем самым, пролонгировали индуцирозанную течку. У кроликов стимулированный эструс не удлинялся. После течки преовуляторнме фолликулы либо озулировали, либо подвергались атрезии ми лвтеиниза-ции и активировали интерстициальную железу, что тормозило 5садику-логенез и удлиняло иежтечковую фазу цикла. У эстрогенязированных самок обоих видов снижалось число животных с наступившей беременностью.

Видовые различия в действия эстрогенов на гонадотропнуи активность гипофиза, по-видимому, связаны с раэнонапразлгннын эффектом стероида на гипоталамическом уровне - иягибируюэдм секреции люлиберина у крыс /*..vijato et al. 1982/ и стимулирукедш

ее у кроликов / Я.нвааП et 'al. ,1981; A.CJalsley et. al., 1985/.

Влияние экзогенного ДГТ на половую Функцию. Введение ДГТ крысам вызывало укорочение (на I да.) астрального цикла за счет уменьшения межтечковой стадии. Синхронное наступление эструса регистрировалось на 3, 7 и II дн. после инъекции. Содержание Ег и j V в крови и их отношение на 3-й дн. соответствовали посгог.улп-торным значениям. В яичниках увеличивалось число ST и снижалось количество преовуляторных фолликулов. Повышение числа преовуляторных фолликулов и уменьшение количества Щ к 10 дн. соппорождалось увеличением уровня Е^ а 1Г прл низко?! содержании £ ^Р, что

свидетельствовало о готовности к новой овуляции. В вагинальных мазках в это время определялся проэструс. Действие ДГТ на репродукцию обусловлено как прямым эффектом андрогена на гонады, где он аккумулируется /У.Ю.Алесина, 1987/, так и опосредовано через гипофиз, в котором максимальное накопление гормона регистрировалось через 48 ч /Ц.Ю^Алескца в соавт., 1985/. ДГТ, угнетая фер-ь иентатизные системы в яичниках / А.ЯиХеЬа, 1985/, спо-

собствует быстрому лизису ЕЕ /Н.ЗгШагап, ^986/, что укора-

чивает местечковую фазу цикла". С другой стороны, ДГТ, стимулируя ароматазную активность в малых фолликулах /В.С.Зеленецкая,1986/, вызывает их рост /3.к.Ко1лЛ въ.аг,, 1985/. В больших фолликулах ДГТ без гонадотропного стимула тормозит ароматазу Д.Эигша, 1984/, увеличивая фолликулярную атрезию, что наблюдалось и нами в первые дни и приводило к снижению числа беременных самок после спаривания. В более отдаленные сроки после андрогенизации .повышение концентрации ФСГ уменьшало атретические процессы в гонадах и способствовало созреванию полноценных фолликулов, о чем свидетельствовало увеличение числа беременных крыс.

У кроликов инъекция ДГТ на длительное время задерживала.наступление течки. Овариальный стероидогенез сдвигался в сторону преобладания андрогенов. В этих условиях в яичниках повышалось число АТ, что способствовало увеличению объема интерстициальной с громы. Повышение уровня Д ^Р, Д Ни Е2 в циркуляции подопытных "кроликов являлось следствием активации интерстициальной железы /Н.В.Королев, 1984/, что угнетало рост и созревание фолликулов. Отсутствие длительного времени преовуляторных фолликулов способствовало снижению в периферической крови и пролонгированию мек;-гечковой фазы цикла.

Влияние дигитола на репродукцию. Введение дигитола в мектеч-ковую фазу зстрального цикла вызывало у крыс наступление преждевременного пролонгированного эструса. Появление течки сопровождалось увеличением циркулирующих эстрогенов и активацией гонадотроп-кой дункции гипофиза. Изменение гормонального статуса на фоне начавшейся хечки в условиях введения препарата стимулировало рецеп-тивность самок. Спаривание и оплодотворение крыс, обработанных дигктодои, приз од ил о к увеличению числа оплодотворенных животных. Причем индекс беременности зависел от времени оплодотворения и увеличивался от 0 ^ (спаривание в первом цикле) до 60 % (спарива-

ние во втором цикле) и 100 % (спаривание'на 8-13 дн. после инъецирования дигитола), тогда как у контрольных самок он был равен 28,6 %. Повышение числа беременных животных в более псзднпе срока после инъекции препарата зависело от времени созревания фсллику-лов в яичниках подопытных крыс. Дпг'лтол стимулировал овариалыый фолликулогенез на всех его'этапах. Однако в перзые 3 дн. увеличивалось число растущих фолликулов, а к 5 дн. созревали прзозула-торные фолликулы. Поэтому из данных, потученных на крысах, следуя: что наиболее благоприятный для получения потомства срок спаривания или осеменения - не раньше 3-4 дн. после введения препарата, т.е. практически в следующем астральном цикле.

У кроликов дигитол оказывал с тину лир у гай эффект на репродуктивную систему. Начавшаяся раньте на 4-5 дн. течко сопровождалась увеличением уровня зстрогеноз к андрогенов в циркулируйтеЛ" крови и высоким содержанием ГТ в гипофизе. При этом наблюдался низкий уровень ^ ^Р в крови. В этих условиях усиливался фолликулярный рост и созревание преозуляторных фоллнкулоз. Дрепарг.г л первые дни обусловливал гормональный фен, наблюдаемый з естественном эструсе. Кроме того, дигитол стимулировал половую охоту, способствовал зачатию, имплантаций и развитии плодов. Вне спаризаи.тл у подопытных санок на 3-5 дн. после воздействия в крови увеличивался уровень А ^Р при высокой концентрации эстрогенов и ГТ. 3 этих условиях в гонадах 60 % самок происходила овуляция с имевших фолликулов и наступала псевдобеременность, что пролонгировало меятечковую фазу цикла после индуцированного дигитолои эсгруса.

ВЫВОДЫ

1. У самок кролика существует И-12-дзгзный эс тральный и овариальный циклы и положительная обратная езязь в системе гона-ды-гипофиз. .Причинами, обусловливающими отсутствие спонтанной овуляции в естественно» эструсе у .троликоз, я зля я тс я недостойное повывение содержания гилофизарнкх гонадотропинов и несовпадение во времени преовуляторных пиков эстрогенов и прогестерона з крови.

2. Введение эстрадиола у кроликов сопровождается увеличением уровня эстрогенов й, в меньшей степени, андрогеноз с песледу-

вщщ: возрастание!! концентрации прогестерона в крови. В этих условию; основном путь биосинтеза эстрадиола из-андростендиона, происходит" у кроликов черзз эсгрон, переключается на акдростен-да:о:; тестостерон эстрадной, У крыс, з отличие от кроликов, при эстрогенязацня уровень тестостерона в крови снижается.

3. ЬкзогйЕкые эстрогены ингибирувт секрецию ФСГ у крыс, но активируют гонадотропнуг^рункциа у кроликов.

Введение эстрогенов стимулирует овариальный фолликулоге-нез у животных обоих видов, индуцирует (после 3-го дня) овуляцию у 20 % кроликов, но ториозит ее у крыс.

5. Экогенные эстрогены укорачивают межтечковув фазу астрального цикла, индуцируют преждевременный эструс и половую рецеп- . тивноеть у самок крыс и кроликов. Однако у спарившихся эстроге-низ'лрозакнцх животных плодовитость снижается за счет повышения предимплантационной гибели'эмбрионов.

6. Экзогенный дигидротестостеров стимулирует все этапы фол-ликулогенеаа в яичниках крыс, не угнетает созревание фолликулов в гонадах кроликов. Андроген укорачивает эстральный цикл крыс за счет уменьшения иежтечковой стадии. У кроликов, напротив, дигид-ротесгостерон удлиняет меатечковую фазу и задерживает наступление эс труса.

7. Дпгидротестостерон способствует имплантации оплодотворенных яйцеклеток, но увеличивает их постшплантационную гибель. У кроликов-эмбрионы не развиваются. У крыс число беременных салок

с ь;квьши плода:.!» в ватках зависят от времени зачатия после введения андрогена и возрастает от первого (40 %) до второго (88,9 %) индуцированного эструса.

8. Дигитол стимулирует рост фолликулов и предотвращает их атрегяи в яичниках обоих видов животных. Созревание преовулятор-ных фолликулов в гонадах кроликов после введения дигиюлг происходит на 2-3 дня раньше, чем у крыс, обработанных препаратом.

9. Наступление течки у крыс и кроликов под влиянием дигито-ла обусловлено увеличением уровня андрогенов и эстрогенов и изменение-:.: их соотношении в периферической крови. Повышение концентрация прогестерона (на 3-й день) в крови кроликов на фоне активации гонадотропной функции гипофиза провоцирует овуляцию' в гонадах 60 ■% рефлекторво овулируицях санок, у крыс после введения дшлтола'овуляция происходит подзнее, чем у кроликов.

U

10. Дигитол создает гориональннй фон для рецептивзости у крыс и кроликов, не скивает плодовитости крольчих. У крыс, спарившихся в первой цикле, беременность отсутствует, во второй (60 %) - третьем (100 %) - значительно увеличивается за счет снижения постшшлантациоввой гибели эмбрионов. Наиболее благоприятным временем осеменения спонтанно овулируивдх самок для получения потомства после обработки препаратом дигитол являются 3-5 дн.

По теме диссертации опубликованы следующие работы: •

I. Литвинова Д.Б. Ыетодическпе подходы к оценке'препаратов, растворенных в масле//Научно-технический прогресс в медицине. Современные методологические и методические подходы э ыедикс-бяо-логических исследованиях: Аннотированная программа науч.-практич. конф., г.Хзрькоз, 13 сент. 1983.-Харьков, 1983.- С.15.

2. Фармакогошетика экзогенного эстрадиола в организме и его влияние на секреции подовых стероидов/ А. К .Гладкова ,¡í .Ю. Алее таа, Л.Б.Литвинова и др.//Эндокринологая: Респ.межвед.сб.-Ккев: Здоровье, 1985.- Вып.15.- C.II0-II5.

3. Литвинова Л.Б. Влияние препарата дигитол на фуяншгонзль-ное состояние репродуктивной системы самок//Актуальные вопросы современной эндокринологии и иммунологии: Программа и аннотация докл.,Респ.науч.-практич.нежинститутской конф. молодых уч°яых-ые-диков, г.Харьков, май,1986.- Харьков, 1966.- С.26.

4. Литвинова 1.Б. ПерХодичнДсть статевих цикл!в у кролик1в-самок: Тез.доп.ХП з»1зду Укр.ф1з1ол.тов. 1м.I.П.Павлова,м.Льв1в, верес.1986.-Льв1в,198б.-С.228^229.

5. Гладкова А.И., Литвинова Л.Б. Влияние препарата дигитол на функциональнуи активность яичников спонтанно и рефлекторно овулирующих животяых//Проблемы диагностики, терапии и профилактики незаразных болезней животных в промышленном животноводстве:

Теэ.докл.Всесоюзной науч. конф.,г.Воронеж,28-30 окт.198б.- Воронеж, IS86.-T.2.- С.12.

6. Литвинова Л.Б. Влияние экзогенных эстрогенов на уровень эстрадиола в гонадальной и периферической крови//Научно-1ехнп-ческий прогресс в медицине и фундаментальные проблемы биологии:

Те .докл.обл.научн.-практич.конэ.,г.Харьков, сент.1987.-3.256-258.

7. Литвинова Л.Б. Гормональная регуляция астрального здулл зкепериментальрых животных //Научно-технический nporpscc в кедгг-цине и фундаментальные проблемы биологи:?: Тез.докл.науч.-практ.'

кокф..г.Харьков,сенг.1987.-Харьков, 1987.- С.273-274.

8. Лихвиноза Л.Б. Влияние дигидр'отес тосте рона на астральный ц-л:л л уроьень половых стероидов у крыс//Современные проблемы езюпери: читальной и клинической эндокринологии: Тез. докл.ГУ съезда эндокринологов УССР,г.Львов, 29 сент.-I окт.1987,- Киев,1987.-С.223.

9. Ратаров' В.В..Гладкова А.!!., Литвинова Л.Б. Центральные г. периферические механизмы нормализации последствий стресса в рсиродуктологиа//Онтогенетические и генетико-зволюционные аспекты neîipo-эндокринной регуляции стресса: Тез-, докл.Мевдунар.совец.,

г .Новосибирск,11-15 июля 1988.- Новосибирск,1988.- C.I09-III.

10. Литвинова Л.Б. Действие 5-альфа-дигидротестостерона-на функциональную активность репродуктивной системы самок крыс // Зндокрлнология:Респ.мел-вед.сб.- Ккев:9доровье,1988.- Вып.18.-С. 60-62."

11. Литвинова Л.Б. Гормональная стимуляция репродуктивной фукиции дамок/Дез. докл.Ш Всесоюзн.съезда эндокринологов,г.Ташкент, 16-19 мая 1989.- Таыкент:Медицин а,1989.- С.62.

12. Литвинова Л.Б..деыиденко U.C. Фолликулогенез в яичниках снопхакно и рефлекторно рвулируюцих животных в условиях введения днгцдротестостерона //Структурно-функциональные единицы органов: хбсдехлч-.оям и прикладные аспекты: Тез.докл.науч.конф.,г.Харьков, 12-17 и.Ж!. 1989.- Харьков, 1989.- C.I03-IQ5.

13. Литвинова Л.Б., Сидорова И.В. Влияние масляного-растворителя стероидов на репродуктивную функцию мужского и ж некого ор1,гн:1т!а//Зндокринологля: Респ.меавед.сб.-Киев:Здоровье, 1989.-Влп.Т9.-С.26-30.

14. Литвинова Л.Б. Влияние препарата дигиюл на репродуктивную функций у животных с разным типом регуляции овуляции//Гормо-нчльтн регуляция в норме и при патологи:»:, Матер;обл.вбил.науч. коня,.иосвященлой 70-летию основания Харьковского НИИ эндокринологии л хчмии.гормонов,г.Харьков,19-20 дек.1989.-Харьков,1989.-C.4C-4I.

15. Литвинова Л.Б. Функциональная активность яичников в ус-ло.здях введен:», препарата дигитол//Биодогически активные вещества п звероводстве, кролиководстве и пантовом оленеводстзе:Сб.науч.

: г. /;: № ;. К. -!,i., 19о 9. - С.14^-16I.