Формирование и нарушение адаптивных реакций крыс в стрессогенных условиях при комбинированном воздействии диацетата свинца и пирацетама

Карпухина, Ольга Вячеславовна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Формирование и нарушение адаптивных реакций крыс в стрессогенных условиях при комбинированном воздействии диацетата свинца и пирацетама
ВАК РФ 03.00.16, Экология

Автореферат диссертации по теме "Формирование и нарушение адаптивных реакций крыс в стрессогенных условиях при комбинированном воздействии диацетата свинца и пирацетама"

На нравах рукописи

V./

/1 г\/Лм

I I ^ I

Карпухина Ольга Вячеславовна

003488035

ФОРМИРОВАНИЕ И НАРУШЕНИЕ АДАПТИВНЫХ РЕАКЦИИ КРЫС В СТРЕССОГЕННЫХ УСЛОВИЯХ ПРИ КОМБИНИРОВАННОМ ВОЗДЕЙСТВИИ ДИАЦЕТАТА СВИНЦА И

ПИРАЦЕТАМА

03.00.16 - экология 03.00.13 - физиология

1 О ДЕК 2009

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Москва - 2009

003488035

Работа выполнена в Учреждении Российской академии наук Институте химической физики им. H.H. Семёнова (ИХФ РАН)

Научные доктор химических наук Гумаргалиева Клара Зенноновна

руководители: (Лаборатория стабильности и устойчивости органических веществ ИХФ РАН)

доктор биологических наук Иноземцев Анатолий Николаевич (Биологический факультет МГУ им. М.В.Ломоносова, кафедра ВНД)

Официальные доктор биологических наук, профессор Дмитриева Тамара оппоненты: Михайловна (Российский университет дружбы народов,

Экологический факультет)

доктор биологических наук, профессор Ермакова Ирина Владимировна (Институт высшей нервной деятельности и нейрофизиологии РАН)

Ведущая ФГУ «Научно-исследовательский институт физико-химической

организация: медицины Федерального агентства по здравоохранению

и социальному развитию»

Защита состоится «ÂJL. /К- 2009 года в 14 часов на заседании Диссертационного совета Д 212.203.17 при Российском университете дружбы народов по адресу: 115093, г. Москва, Подольское шоссе, д. 8/5, Экологический факультет РУДН.

С диссертацией можно ознакомиться в Учебно-научном информационном библиографическом центре РУДН по адресу: 117198, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, д. 6

Автореферат разослан « А/п. -/S 2009 г.

Ученый секретарь Диссертационного Совета / .........

доктор биологических наук, профессор / ^^-^/^^^риышов В. И.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы. Загрязнение тяжелыми металлами окружающей среды вызывает изменение химического состава всех компонентов экосистемы, отрицательно сказывается на здоровье населения (Ревнч, 1993, 1999; Скурлатов и др., 1994; Остроумов, 2000; Ревич, Сидоренко 2006; Трахтепберг, 1999; 2000). В списке токсических загрязняющих веществ, представляющих серьезную угрозу биосфере, находится повсеместно распространённый в огромных количествах ксенобиотик свинец, который является политропным ядом и обладает высокой биологической активностью, кумулятивными свойствами, мутагенным и канцерогенным эффектами (Ревич, 2002; Чопикашвили и др., 2003; Скальный, 2004; МашеН е1 а1., 2001; К1иШ е1 а1., 2009). Высокий уровень загрязнения среды свинцом и другими тяжелыми металлами - постоянный стрессовый фактор для живых организмов. Формирование стрессорных процессов в организме сопровождается активацией свободнорадикалыюго окисления (Меерсон, 1981; Барабой и др., 1992). Свободные радикалы считаются «вторичными мессенджерами стрессорных реакций» (Селье, 1960; Эе1уе, 1993), а избыточное накопление свободных радикалов ведет к развитию оксидантного стресса (Владимиров, Арчаков, 1972; Козлов, 1974; Осипов и др., 1990; Владимиров, 1998). Применение фармакологических средств, обеспечивающих восстановление оптимального уровня свободнорадикального окисления, является эффективным приемом адаптации.

Среди значительного арсенала нейропсихотропных лекарственных веществ определённый интерес представляет класс ноотропов. Это обусловлено не только их способностью избирательно стимулировать обучение и память в условиях патологии, но и оказывать нейропротекторный эффект, способствовать восстановительным процессам в нервной ткани здоровых лиц, подвергающихся экстремальным воздействиям, в том числе агрессивному воздействию агентов, загрязняющих окружающую среду (Ахапкина, 2005; Воронина, Середенип, 2007). Адаптогенный эффект веществ реализуется через различные структурные механизмы ЦНС. Функциональное состояние ЦНС определяет возможности адаптации организма в воздействию неблагоприятных факторов стресса физической, химической и психоэмоциональной природы. В настоящее время весьма актуален поиск новых экспериментальных моделей адаптивного поведения животных для исследования нейротропных препаратов, коррегирующих функционирование ЦНС (Воронина, 1998, 2000; Воронина, Островская, 2000; Гарибова и др., 2005). Специально для оборонительного поведения крыс были разработаны стрессорпые модели функциональных нарушений условных рефлексов активного избегания (УРАИ), основанные на изменении однозначности причинно-следственных (Иноземцев, Прагина, 1989) и пространственных

отношений (Иноземцев, Прагина, 1992) в экспериментальной среде. Эти модели рекомендованы Министерством здравоохранения РФ в качестве базовых моделей для выявлении стресспротекторныго эффекта психотропных препаратов (Воронина, Островская, 2000; Воронина, Середенин, 2000).

Важным фактором, определяющим лечебный эффект лекарственных веществ и существенно влияющим на параметры их фармакологической активности, является полиморфизм структуры - наличие разных по форме кристаллов этих веществ (Вугп, Stowell, 1995; Shakhtshneider, 1997, 2005; Краснюк и др., 2006). У эталонного ноотропа пирацетама кристаллическая структура может иметь не меньше четырёх полиморфных модификаций (Fabbiani and al., 2005; Newell, Price, 2005). На практике фармакологическая активность полиморфных форм лекарственного вещества зависит от растворителя, его состава, физико-химических особенностей и т.п. (Краснюк и др., 2006). Присутствие солей тяжелых металлов в растворителе (вода и д.р.) даже в минимальных концентрациях может значительно влиять на эффективность лекарственного средства (Соловьев и соавт., 2000). В этой связи актуальны и важны исследования совместного влияния солей тяжелых металлов и ноотропных препаратов на функции ЦНС.

Цель данной работы состояла в изучении особенностей формирования адаптивных реакций крыс в стрессогенных условиях при комбинированном воздействии диацетата свинца и пирацетама. Исходя из этого, были поставлены следующие задачи:

1. Исследовать влияние пирацетама и его комбинации с диацетатом свинца на формирование условного рефлекса активного избегания у крыс в норме и при функциональных нарушениях как формы приспособления человека и животных к окружающей среде.

2. Провести сравнительный анализ ноотропного эффекта эталонного кристаллического пирацетама и его аморфной модификации.

3. Методами ультрафиолетовой спектрофотометрии и жидкостной хроматографии исследовать растворы кристаллического пирацетама с солями тяжелых металлов (диацетата свинца, хлорид кадмия, сульфита кобальта) с целью обнаружения их возможного взаимодействия.

4. Изучить вероятное протекторное антиоксидантное действие аскорбиновой кислоты против негативного влияния диацетата свинца на формирование УРАИ

Научная новнзна работы. В водном растворе структура пирацетама в присутствии солей тяжелых металлов подвергается изменениям с образованием промежуточных продуктов, которые значительно влияют на функциональные свойства ноотропа. Впервые

установлена связь между кинетикой структурных преобразований нейротропного препарата пирацетама, обусловленных каталитическим действием диацстата свинца, и воздействием изучаемых веществ на формирование условных рефлексов в норме и стрессовых условиях. Проведённые эксперименты показали ухудшение выработки условного рефлекса в челночной камере у крыс на фоне совместного влияния пирацетама и диацетата свинца. В опытах установлено, что две полиморфные разновидности пирацетама по-разному влияют на обратимые функциональные нарушения реакций избегания у крыс. Впервые выявлена зависимость формирования УРАИ от длительности воздействия свинца на организм животного. Получены данные об эффективности аскорбиновой кислоты при нарушениях условных рефлексов, обусловленных сочетанным воздействием диацетата свинца и пирацетама.

Научно-практическая значимость. Результаты данной работы свидетельствуют об опасности использования ноотропных препаратов в регионах с повышенным содержанием тяжелых металлов, поскольку оно может усилить нейротоксическое влияние металлов на центральную нервную систему человека. Экспериментальные данные могут быть использованы в теоретической нейрофизиологии и для решения практических задач защиты от токсичности тяжелых металлов и повышения устойчивости человека и животных к негативным воздействиям химических факторов. Выявленные эффекты аскорбиновой кислоты позволяют рекомендовать использование её в качестве профилактического и протекторного средства в комплексной терапии ноотропными препаратами при оксидантном стрессе, нарушениях памяти, дефиците внимания и др. патологиях ЦНС, возникающих при интоксикации тяжёлыми металлами.

Положения, выносимые на защиту.

1. Диацетат свинца изменяет структурные характеристики пирацетама, что приводит к искажению влияния препарата на адаптивные реакции крыс.

2. При совместном действии диацетата свинца и пирацетама на формирование и функциональные нарушения УРАИ вместо характерного ноотропного эффекта пирацетама превалирует влияние диацетата свинца, выражающееся в угнетении условных рефлексов.

3. Различия в фармакологическом действии эталонного пирацетама и его структурно-модифицированной формы.

4. Аскорбиновая кислота оказывает протекторный антиоксидантный эффект при формировании условных реакций крыс в стрессогенных условиях совместного влияния диацетата свинца.

5. В условиях неблагоприятной экологической обстановки (загрязнения окружающей среды тяжелыми металлами и их токсического воздействия на организм человека) применение психотропных препаратов опасно, поскольку оно может усилить нейротоксическое влияние тяжелых металлов на центральную нервную систему.

Апробация диссертации. Материалы диссертации были представлены и обсуждались на XII Международном совещании и V школе по эволюционной физиологии (Санкт-Петербург, 2001); XIII симпозиуме "Современная химическая физика" (Туапсе, 2001), Международном междисциплинарном семинаре «Новые технологии в медицине и экологии, интегративная медицина» (Словакия, 2003); II съезде Российского научного общества фармакологов (Москва, 2003); II съезде токсикологов России (Москва, 2003); IV международной конференции «Биологические основы индивидуальной чувствительности к психотропным средствам» (Москва, 2006); XIV, XV Российском Национальном Конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2007, 2008); II съезде физиологов СНГ (Молдова, 2008); II международной конференции по биодеградации полимеров и биокомпозитов (Испания, 2009) Публикации. Основные результаты исследования по теме диссертации представлены в 19 печатных работах, из них 5 - статей в отечественных и зарубежных журналах, 14 тезисов докладов, 1 патент. Объем и структура диссертации. Работа изложена на /4/ стр., иллюстрирована / ^рисунками и включает_^ таблиц. Диссертация содержит введение, обзор литературы, описание материалов и методов исследования, результаты исследований, обсуждение, выводы, список аббревиатур и библиографический список ^У^источника, из

I. Спектральные методы исследования растворов солей тяжелых металлов и пирацетама. Хроматографический анализ растворов пирацетама в дистиллированной воде проводили с добавлением и без добавления диацетата свинца. Для структурных исследований готовили 2%-пый по массе раствор препарата пирацетама и раствор диацетата свинца (10"7 моль/л) концентрации ниже ПДК, определённой для питьевой воды. Анализировали изменение состояние растворов во времени по изменению хроматограммы. Хроматограммы получены на хроматографе фирмы "Вескшап": носитель - отрицательная фаза ОСД, элюирование - изократическое, 1 мм/мин, элюент метанол-вода (15:85, объемное соотношение), детектирование при длине волны 220 нм. Калориметрические измерения образцов пирацетама осуществляли на дифференциальном сканирующем калориметре (ДСК) системы «Мей1ег-3301» со скоростью нагрева 1 град/мин. Охлаждение образцов после нагрева проводили со скоростью 10 град/мин. Методом УФ - спектроскопии

них

опубликованы в зарубежных изданиях).

Материалы и методы исследования.

(спектрофотометр SP8-100 PYE UNICAM) исследовалась кинетика растворения кристаллического пирацетама (с = 0,5 мг/мл) в физиологическом растворе и в воде, содержащей одну из солей тяжелого металла: ацетат свинца, сульфит кобальта (0,08 мг/мл), или хлорид кадмия (0,08 мг/мл).

Методика получения структурно - модифицированного пирацетама. Кристаллический порошок эталонного пирацетама (т=5г) аморфизировали нагреванием на силиконовой бане до 525 К с последующим закаливанием при 300 К.

II. Методы оценки совместного влияния лиацетата свиица и пирацетама на Формирование адаптивных реакций крыс. Исследование проводили на беспородных белых крысах-самцах массой 200 - 250 г из вивария ГУ НИИ фармакологии им. В.В. Закусова РАМН, которые содержались при нормальном световом режиме и свободном доступе к воде и пище.

В работе использованы следующие вещества: эталонный кристаллический пирацетам (АКРИХИН, Россия; 300 мг/кг), аморфизированный пирацетам (300 от/кг), диацетат свинца (Ю-7 моль/литр), аскорбиновая кислота (ВИФИТЕХ. Россия; 250 мг/кг). Вещества

вводились внутрибрюшинно по соответствующей каждому эксперименту схеме (рис. 2).

Опытная группа

1 инъекция —> ЗОмнн —> Опыт ]р-р эталонного пирацетама "

2 инъекция —> ЗОмнн —» Опыт "р-р диацетата свинца]

3 инъекция —> ЗОмин —> Опыт 1р-р эталонного пирацетама и диацетата свинца|

4 инъекция —> ЗОмнн —► Опыт " р- р аморфиэированного пирацетама '

5 инъекция —» 75мш1 —»Опыт 'р-р эталонного пирацетама и диацетата свинца|

6 инъекция —> 24 часа —» инъекция —► ЗОмин —> Опыт * р-р диацетата свинца] ' р-р диацетата свинца]

7 инъекция —> 24 часа —> инъекция -* ЗОмин —»Опыт ]р~р диацетата свинца] ]р-р эталонного пирацетама и диацетата свинца]

8 инъекция —> 24 часа —> инъекция бОмин —► ]р-р диацетата свинца] ]р-р аскорбиновой кислоты] инъекция —» ЗОмин —> Опыт ]р-р эталонного пирацетама и диацетата свинца]

9 инъекция —> 24 часа —> ииъекция —> бОмин —► ]р-р диацетата свинца] ]р-р эталонного пирацетама и диацетата свинца] инъекция —> ЗОмин —> Опыт ]р-р аскорбиновой кислоты]

10 Контроль (группе внутрибрюшинно вводили физиологический раствор за 30 мин до опыта).

Рис. 2 Схема введения веществ в различных опытах.

Выработку УРАИ проводили в челночной камере, разделенной перегородкой с отверстием на два одинаковых отделения (19x21x22 см), с электрифицированным решетчатым полом. Крысу помещали в камеру за 5 мин до начала опыта. К условному звуковому раздражителю

через 10 секунд изолированного действия подключался электрический ток. При переходе животного через отверстие в другую половину камеры (реакция избавления) звук и ток выключались. Если животное не перегало при действии раздражителей, то через 10 секунд они выключались автоматически. Каждый опыт состоял из 25 предъявлений с 30 секундным межсигнальным периодом. Опыты проводили через день до достижения критерия обученное™ (не менее 80 % реакций избегания от числа предъявлений). Фиксировалось число реакций избегания, избавления и межсигнальных реакций (МСР).

В работе использованы обратимые функциональные нарушения УРАИ, которые вызывались внезапным изменением условий опыта (рис. 1): А. Тестирование

Сбой УРАИ

Тестирование

Перемена расположения отверстия

щр^

Тестирование

Сбой УРАИ Перемена расположения

отверстия

Рис. 1. Последовательность процедур при проведении у крыс функциональных нарушений, вызванных: А. - сбоем; Б. - переменой расположения отверстия в перегородке камеры; В. - сбоем и переменой расположения отверстия в перегородке камеры

Сбой УРАИ. После достижения животными критерия обученности УРАИ в опыт вводили следующие изменения (Иноземцев, Прагина, 1989): перебегание крысы в другую половину камеры переставало приводить к выключению раздражителей, что повторялось при 5 побежках, так что животное подвергалось экстренному воздействию электрическим током.

После последней реакции ток выключался немедленно, а звук - спустя 2 с. Затем в течение 20 предъявлений тестировали воспроизведение УРАИ в стандартных условиях. Перемена расположения отверстия в челночной камере. После достижения животными критерия обученности УРАИ осуществляли перемену месторасположения отверстия (ПМО) (Иноземцев, Прагина, 1992). Для этого отверстие, через которое животное переходило в другую половину камеры при обучении, закрывали и открывали в противоположной стороне перегородки. Сразу после этого в течение 20 предъявлений проводили тестирование УРАИ в измененных условиях. Фиксировалось число условных реакций, MCP и число попыток животного осуществить переход через ранее открытое отверстие.

Сбой УРАИ и перемена расположения отверстия. После обучения животным проводили сбой выработанного навыка, а затем меняли расположение отверстия и проводили тестирование в изменённых условиях эксперимента.

Статистическую обработку исследований проводили, используя параметрический (t-критерий Стьюдента) и непараметрический (критерии Вилкоксона и Манна-Уитни) методы. Достоверными считали различия при Р < 0,05. Расчеты производили с использованием компьютерных программ Microsoft Excel; Origin Pro 6.1 и Statistica for Windows 7,0

Результаты исследования и их обсуждение /. Влияние пирацетама на условный рефлекс активного избегания. Результаты различных сериях исследований показали, что влияние эталонного кристаллического пирацетама на выработку условных рефлексов активного избегания у крыс в челночной камере оказалось неоднозначным (рис.3). Эффект пирацетама либо отсутствует, либо положительное действие

препарата отмечается не во все опытные дни.

Рис.3 Влияние

пирацетама на динамику формирования УРАИ у крыс в различных опытах: есть эффект - А; нет влияния - О

V серия IV серия III серия II серия

| серия С момента появления

ноотропной концепции в основной массе

публикаций описано положительное влияние ноотропов на обучение (Giurgea 1972, 1982;

1 опыт 2 опыт 3 опыт 4 опыт 5 опыт 6 опыт

Hoof, 1980), но к настоящему времени стали известны работы, в которых этот эффект не наблюдался (Рахманкулова и др., 1985; Иноземцев, 1997; Островская и др., 2002; Pohle et al., 1997) или отмечался в зависимости от факторов, не всегда поддающихся экспериментальному контролю (Mondadori et al., 1989; Sansone, Oliverio, 1989). Можно предположить, что такая неоднозначность данных связана с некоторыми неучтёнными физико-химическими факторами: с существованием разных полиморфных форм пирацетама (Louer et al, 1995; Harriott, Price, 2005); физико-химическими характеристиками растворителя. В частности, содержащиеся в воде соли тяжёлых металлов оказывают определённое влияние на структуру пирацетама при его диссоциации (Соловьев и др., 2000).

11. Исследования структуры пирацетама в водном растворе, содержащем соли тяжёлых металлы.

11.1 Исследование структуры пирацетама методами жидкостной хроматографии и дифференциальной сканирующей калориметрии.

На хроматограмме (рис. 4.) свежеприготовленного водного раствора пирацетама идентифицируются два пика, что свидетельствует о наличии двух структурных форм пирацетама (ПА 1 и ПА 11). Время удерживания (т) ПА 1 составило 1,9 мин, ПА II - 4,0 мин.

рис. 4. Хроматограмма видного раствора пирацетама. Ось абсцисс - время удерживания (т, мин) ось ординат - интенсивность поглощения молекулярных модификаций пирацетама в ультрафиолетовой области.

Картина существенно меняется для образцов пирацетама после суток хранения раствора: пик 1 исчезает полностью, в то время как пик 2 не изменяется (табл.2, данные для раствора 1). Отсюда следует, что деструкция полиморфной модификации ПА 1 происходит с образованием фрагментов, как не сорбирующихся на носителе хроматографической колонки, так и неспособных присоединяться к полиморфной модификации ПА II. Это связано с сохранением во фрагментах первой полиморфной модификации ПА I наиболее устойчивого элемента системы водородных связей молекулы пирацетама - димера ацетамида (Gaidecki, Glowka, 1983; Louer et al., 1995). С целью инициирования диссоциации димеров ацетамида мы добавили в водный раствор пирацетама каталитически малые количества диацетата свинца (раствор II). Как для раствора с добавлением диацетата свинца, так и для раствора собственно пирацетама, хотя и с разными скоростями, со временем происходит снижение площади пиков полиморфной модификации ПА I (т =1, 9 мин).

Табл. 2. Зависимость изменения площади пиков хроматограмм от времени с момента приготовления растворов пирацетама I и II.

Время от момента приготовления раствора, мин Площадь пика (относ, ед.) для двух времен выхода, мин

Раствор I Раствор 11 (с диацетатом свинца)

1.9 4.0 1.9 4.0

0 6.52 382.5 6.45 377.7

15 4.12 382.5 0.72 378.1

33 1.05 382.5 0.29 382.27

66 0.41 382.5 0.21 389.99

101 0.22 382.5 0.12 389.99

143 0.22 382.5 0.12 395.13

Уменьшение пика 1 означает разупорядочение исходной структуры. При отсутствии диацетата свинца в растворе, как указано выше, полиморфная модификация ПА I сохраняет структурные элементы - димеры ацетамида, не позволяющие образовывать устойчивые ассоцнаты со структурой ПА II. Диацетат свинца, способный организовывать прочные комплексы с амидными группами пирацетама, разрушает димеры ацетамида, таким образом, обеспечивая переход структуры ПА I в структуру ПА II, причем через образование мономерной формы пирацетама на промежуточном этапе структурных переходов (Louer et al, 1995; Соловьев и др., 2000).Следовательно, при добавлении диацетата свинца некоторое время в растворе присутствует значительное количество мономера пирацетама, что может влиять на фармакологическое действие ноотропа. Для идентификации пиков на хроматограммах водных растворов пирацетама исследовали зависимость теплот фазовых переходов кристаллического пирацетама от вида предварительной термообработки препарата (табл. 3).

Табл.3 Влияние вида термообработки порошка пирацетама на теплоты фазовых переходов препарата и на хроматограммы свежеприготовленных водных растворов препарата.

№№ Вид термообработки Теплота фазового перехода, Дж/г при температуре, К Площади пиков хроматограммы (относительные ед.) при времени выхода, мин

400 420 1,9 4,0

1. Отсутствовала 24,4 182,2 6,52 382,5

2. Нагрев до 475 К с последующим охлаждением до 300 К 0 170,5 0,189 351.0

3. Нагрев до 475 К с последующим охлаждением до 300 К и выдержкой в течении 2-х недель 9,2 172.0 2,98 355,0

4. Нагрев до 525 К с последующим охлаждением до 300 К 13,4 110,0 4,06 240,8

Изменение содержания полиморфных структур в кристаллическом пирацетаме контролировали методом дифференциальной сканирующей калориметрии. Пирацетам характеризуется двумя температурами плавления (400 и 420 К). Это подтверждает положение о его полиморфности структуры (Fabbiani et al, 2005). Изменение теплоты фазового перехода кристаллического пирацетама приводит и к изменению сигнала при хроматографическом анализе водных растворов ноотропа. Причём, изменение теплоты фазового перехода при температуре 400 К коррелирует с изменением сигнала, характеризующего пик 1 на хроматограмме, а изменение теплоты фазового перехода при 420 К - с изменением сигнала второго пика. Применяя различные виды термообработки кристаллического пирацетама, мы определили, что одна из двух кристаллических структур (ПА I) полностью превращается в аморфную (табл.3, строка 2). Но даже в аморфном состоянии пирацетам при отсутствии диацетата свинца сохраняет структурные элементы, не позволяющие образовывать устойчивые ассоциаты со структурой ПА II. В случае, когда одна из кристаллических структур (ПА 1) полностью превратилась в аморфную, соответствующий эндотермический пик на ДСК-грамме исчезает, однако соответствующий сигнал при хроматографическом анализе частично сохраняется (табл.3)

Таким образом, нами установлено, что полиморфная модификация (ПА I), характеризующаяся меньшей температурой плавления относительно ПА II, в растворе в течение времени (сутки) меняется от исходной структуры, основанной на водородных связях в отдельных слоях и межслойных сопряженных связях, до структуры без сопряженных связей, но с сохранением системы водородных связей (т.н. аморфной структуры). В то же время ПА II с большей температурой плавления сохраняет полностью упорядоченную структуру независимо от концентрации препарата и времени хранения раствора. В присутствии соли тяжелого металла (содержание на уровне ПДК) происходит разрушение водородных связей (Г1А I), в результате чего образуется мономер пирацетама, который в последующем обеспечивает увеличение в растворе содержания пирацетама со структурой, получаемой из препарата с большей температурой плавления (ПА II)

II.2. УФ-спектроскопическое исследование растворов пирацетама. На спектрах поглощения растворов кристаллического и аморфизированного пирацетама оптическая плотность растворов увеличивается с течением времени (рис.5), что свидетельствует о разупорядочении структуры ноотропа. Следовательно, в растворе пирацетама присутствуют несколько полиморфных форм, что согласуется с полученными нами результатами хроматографических и ДСК-исследований. Самый значительный максимум поглощения сигнала оптической плотности нами отмечен на спектре раствора аморфизированного пирацетама (время выдержки раствора т =30'). Аморфные структуры, как правило, обладают

большей растворимостью и химически более активны, чем кристаллические вещества.

212 214 216 218 222 224 228 232 нм

Рис. 5 УФ спектры поглощения растворов эталонного и модифицированного пнрацетама при двух временах выдержки раствора: 1 -аморфизированного ПА (время выдержки раствора т =30'); 1*-аморфизированного ПА (время выдержки раствора т - 1 -5-2'); 2 - кристаллического ПА+ диацетат свинца (время выдержки раствора т =30'); 2* - кристаллического ПА+ диацетат свинца (время выдержки раствора т - 1 -г-2'); 3 -кристаллического эталонного ПА (время выдержки раствора т =30'); 3* - кристаллического эталонного ПА (время выдержки раствора т = 1 +2')

45 60 время ,мин

Рис. 6.Динамика растворен»я пнрацетама

1- кристаллический НА в воде; 2~аморфизированный ПА в воде;

3 - кристаллический ПА в водном растворе, содержащем диацетаг свинца: ось абс. - время (мин) от начала растворения пнрацетама, ось орд. -

отношениетекущего УФ-сигнала к начальному, относ, ед.

Интенсивный максимум оптической плотности при длине волны 216 нм присутствует в спектре всех растворов пирацетама. Спектральные данные, определённые для длины волны, на которой происходит максимальное поглощение (216нм), были нами обработаны в относительных единицах (рис. 6). В интервале времени 30-60 мин влияние диацетата свинца на структуру пирацетама было наиболее интенсивным. Соль свинца, действуя на строго упорядоченную кристаллическую структуру пирацетама, разрывает слабые водородные связи, инициируя тем самым, увеличение растворимости ноотропа и последующие структурные перестройки ноотропа с образованием продуктов диссоциации, которые могут влиять на условнорефлекторное поведение крыс в шаттл-боксе.

Поэтому мы изучили формирование УРАИ у крыс через 30 мин и 75 мин после одновременного введения животным раствора пирацетама и диацетата свинца.

III Совместное действие диацетата свинца и пирацетама на формирование условного рефлекса активного избегания. Установлено, что формирование УРАИ при совместном введении пирацетама с диацетатом свинца в опытных группах определённым образом зависит от того, сколько прошло времени от момента введения указанных веществ до постановки опыта (рис. 7). С первого опыта число реакций избегания у крыс, с которыми сессия проводилась через 30 минут после инъекции пирацетама и соли свинца, было больше и относительно контрольной группы, и относительно животных, обучавшихся на фоне эталонного пирацетама.

1 2 3 4 5 6

□ раствор эталонного ПА □ контроль

В раствор эталонного ПА и диацетата свинца( 30') О раствор эталонного ПА и диацетата свинца (75')

□ раствор диацетата свинца

рис. 7 Влияние совместного с диацетатом свинца и отдельного введения пирацетама на выработку УРАИ.

По оси абсцисс - номер опыта; по оси ординат - чисяо реакций избегания, % от числа предъявлений # - р < 0,05 относительно контроля; л - относительно группы с инъекцией эталонного пирацетама

В противоположность этому у животных, с которыми опыт проводили через 75 минут после совместного введения пирацетама и диацетата свинца, отмечалось значительное ухудшение выработки УРАИ. Формирование УРАИ в этой группе на фоне действия пирацетама и диацетата свинца с самого начала обучения было ниже контрольных показателей. Более того, совместное введение ноотропа и соли свинца за 75 мин до опыта оказало больший негативный эффект на выработку реакций избегания, нежели отдельное введение соли свинца во все опытные дни (рис. 7). Нами установлено, что диацетат свинца изменяет характер влияния пирацетама на формирование УРАИ. При этом совместный эффект пирацетама и соли свинца проявляется по- разному, в зависимости от времени введения веществ до начала опыта. Наибольшее влияние соли свинца на эффект пирацетама отмечалось через 30- 60 мин после инъекций.

IV. Влияние кристаллического и структурно-модифицированного пирацетама на Формирование УРАИ.

С целью сравнения функциональных свойств полиморфных разновидностей пирацетама, которые, как отмечено ранее, могут присутствовать в лекарственной субстанции препарата (Louer et al., 1995; Fabbiani et al., 2005; Harriott, Price, 2005), мы изучили влияние эталонного кристаллического и специально нами аморфизированного пирацетама на выработку УРАИ.

пирацетам оказали положительное влияние на выработку условного рефлекса у крыс (рис. 8).

рис. 8 Влияние кристаллического и аморфизированного пирацетама на выработку УРАИ По оси абсцисс - номер опыта; по оси ординат -число реакций избегания, % от числа предъявлений # - р < 0,05 относительно контроля; ## - р < 0,01 относительно контроля

Положительный

эффект двух полиморфных форм пирацетама регистрировался во все опытные дни, кроме четвертого.

V. Обратимые функциональные нарушения реакций избегания па фоне совместного введения пирацетама с диацетатом свинца.

У.1 Влияние структурно - модифицированного и кристаллического пирацетама на функциональные нарушения УРАИ.

Мы предположили, что полиморфные разновидности пирацетама (эталонного и структурно-модифицированного пирацетама) будут иметь различные функциональные свойства но, как показано выше, нами не установлена разница во влияниях кристаллического и аморфизированного пирацетама на формирование УРАИ. В этой связи мы использовали функциональные нарушения выработанных навыков, которые позволяют оценить влияние исследуемых ноотропных препаратов в тех случаях, когда базовые модели неэффективны (Иноземцев, Прагина, 1992; Воронина, Середенин, 2000; Воронина, Островская, 2000). Для детального сравнения функциональных особенностей различных структурных форм пирацетама были проведены серии опытов с применением сбоя УРАИ и перестановкой места отверстия в челночной камере (табл. 4).

Установлено, что в контрольной группе сбой УРАИ вызвал полное угнетение сформированного навыка в первом блоке предъявлений. Глубокие отрицательные последствия сбоя наблюдались также в последующих блоках предъявлений. Эталонный пирацетам предотвратил угнетение рефлекса после сбоя, и в первом блоке предъявлений статистически значимого уменьшения числа реакций избегания не произошло, а в последних 10 предъявлениях реакций избегания стало больше, чем до «сбоя». Уровень реакций избегания под влиянием пирацетама был выше контрольных показателей на протяжении всего опыта. Структурно-модифицированный пирацетам на воспроизведение УРАИ после сбоя не оказал такого положительного влияния, как при формировании реакции избегания. На протяжении всего тестирования величины реакций избегания в этой группе были меньше, чем до сбоя, что резко отличает эффект аморфизированного пирацетама от эффекта кристаллического. Таким образом, свойство оптимизации условнорефлекторной памяти в стрессогенной ситуации проявилось только у эталонного пирацетама.

После перемены месторасположения отверстия также отмечалось нарушение условного рефлекса. В контрольной группе сразу после внесённых изменений число реакций избегания уменьшилось в 4,5 раза и оставалось ниже исходного уровня в последующих предъявлениях. Число УРАИ на фоне эталонного кристаллического пирацетама было выше, чем у контрольных животных в два раза и больше числа реакций избегания в других опытных группах. Аморфизированный пирацетам так же, как при «сбое» УРАИ оказался неэффективен: уровень избегания не восстановился до исходной величины.

Комбинированное применение «сбоя» с переменой месторасположения отверстия

вызвало у животных более серьезное нарушение выработанного навыка, чем каждое из этих функциональных нарушений в отдельности. В контрольной группе в первом предъявлении исчезли даже реакции избавления, во 2-5 предъявлениях отсутствовали реакции избегания. Только в следующем блоке предъявлений появилось 5,8 ± 1,3 % реакций избегания. Под влиянием эталонного кристаллического пирацетама у животных после 10 предъявлений рефлекс полностью восстановился. Аморфизированный пирацетам на восстановление числа УРАН в этой серии положительного действия не оказал.

Табл. 4. Влияние отдельного введения пирацетама и совместного с анацетатом свинца на

обратимые функциональные нарушения НИ.

Сбои

Блоки по 5 предъявлений

Ввод/шые вещества До «сбоя» После«сбоя»

1-5 6-10 11-15 16-20

Пирацетам кристаллический ПА кр 78,1±6,9 55,2±2,2 # 71,7±7,4# 90,3±9,6 # 95,5±4,2#

Пирацетам кристаллический + диацетат свинца (опыт через 30 мин) ПАкр+РьЗО 100 20,9±9,8 *Л 50,8±8,4 30,9±7,3* 39,5±9,2 •#

Пирацетам аморфизированный ПА ам 98,5±1,5 12,2±2,2*л 8,1 ±2,1 *л 32,0±3,9* л 42,2±2,2 «л

Физ. раствор 97,5±1,5 0 20,9±9,8 *л 43,1±8,9Л 13,7±3,7» л

Перемена месторасположения отверстия

Вводимые вещества ДоПМО После ПМО

1-5 6-10 11-15 16-20

Пирацетам кристаллический ПА гр 100 40,0±8,9 70,2±5,8 »# 70,2±5,8 80,0±7,0 *«

Пирацетам кристаллический + диацетат свинца (опыт через 30 мин) ПАкр+РьЗО 98,8±|,2 12,2±7,5«я 16,8*7,5 *д 4И,9±6,7 ФЛ 52,0±7,6Л

Пирацетам кристаллический + диацетата свинца (опыт через 75 мин) ПАкр+Рь75 71,0±4,7 0 0 3,3±1,3*л 0

Пирацетам аморфизированный ПА им 96,4±2,4 16,1±7,5 »л 20,0±1,9Л 31,1±7,2 • 36,0±7,5 ,А

Физ. раствор 97,8±1,5 21,7±7,6 21,9± 10,3 ,л 33,8±10,2 * 48,1±4,3 ,л

Сбой+ Перемена месторасположения отверстия

Вводимые вещества До После

1 -5 6- 10 11-15 16-20

Пирацетам кристаллический ПА кр 100 52,0±7,6 • 81,7±6.0'# 100 100

Пирацетам кристаллический + диацетата свинца (опыт через 30 мин) ПАкр+РьЗО 97,1±2,9 0 0 0 16,5±9,5

Пирацетам кристаллический + диацетата свинца (опыт через 75 мин) ПА кр^Рь 75 73,3±6,6 0 0 0 0

Пирацетам аморфизированный ПА а.« 90,7±4,3 9,7±3,5 *л 18,0±8,0*л 14,0±5,1л# 22,0±8,4 »л

Физ. раствор 90,8±9,1 0 5,8±1,3 • 40,0±6,8 12,9±3,5 »

* - р< 0,05 сравнение до и после функционального нарушения; # - р< 0,05 относительно контроля; Л - р< 0,05 относительно животных, получавших кристаллический пирацетам

Полученные данные позволяют сделать вывод о различном характере влияния аморфизированного и кристаллического пирацетама в стрессогенных условиях. Таким образом, нами установлено, что две полиморфных формы пирацетама могут отличаться определёнными функциональными свойствами.

У.2 Совместное влияние диаиетата свинца и пираиетама на реакции избегания при обратимых функциональных нарушениях УРАН.

Число реакции избегания крыс на фоне сочетанного действия и диацетата свинца и пирацетама в первом блоке предъявлений после сбоя (табл. 4) было вдвое меньше, чем в группе животных, получавших эталонный пирацетам, а возрастание реакций избегания в последующих предъявлениях не было статистически значимым относительно группы, получавшей ноотроп. Таким образом, было установлено, что диацетат свинца меняет функциональные характеристики ноотропа, в частности, у пирацетама не отмечается стресспротекторное действие.

Анализируя результаты опыта с переносом месторасположения отверстия, мы установили, что у крыс, с которыми опыт проводился через 30 мин после инъекции раствора пирацетама и соли тяжелого металла наблюдалось глубокое угнетение УРАИ: число реакций избегания сразу после перемены месторасположения отверстия было значительно меньше контрольных данных, а на следующих этапах тестирования незначительно отличались от контроля.

По сравнению с уровнем избегания, который продемонстрировали крысы сразу после функционального нарушения под влиянием эталонного пирацетама, уровень избегания у крыс, получивших инъекцию пирацетама и диацетата свинца (30 мин до опыта), после ПМП был ниже в 3,3 раза. Затем на протяжении всего тестирования реакции избегания в этой группе были статистически меньше, чем у крыс на фоне одного пирацетама. Следовательно, при этом функциональном нарушении так же, как при сбое отмечалась неспособность пирацетама в присутствии соли тяжелого металла оказывать свойственный ему в условиях этих моделей положительный эффект. Проведённое функциональное нарушение существенно повлияло и на выработанный навык у крыс, с которыми опыт проводили через 75 мин после совместного введения пирацетама и диацетата свинца. После переноса отверстия у крыс данной группы в первых двух блоках предъявлений реакции избегания отсутствовали, затем было зарегистрировано незначительное число реакций избегания только в третьем блоке предъявлений (3,3 ± 1,3 %).

Таким образом, перенос месторасположения отверстия в челночной камере оказался более сильным стрессирующим фактором для животных, чем сбой, что согласуется с полученными ранее данными (Иноземцев, 1997). В двух анализируемых группах на фоне

сочетанного действия пирацетама и диацетата свинца уровень реакций избегания при пространственной переделке существенным образом отличался от показателей, которые отмечены у животных под влиянием одного пирацетама. Диацетат свинца в данных условиях ухудшил функциональные свойства пирацетама.

Тестирование крыс после сочетания сбоя и перемены места отверстия па фоне совместного действия ноотропа и диацетата свинца показало полное отсутствие реакций избегания у крыс, с которыми опыт проводился через 75 мин после инъекций раствора пирацетама и соли свинца. Глубокие нарушения выработанного навыка имели место также в группе, с которой опыт проводили через 30 мин после совместного введения ноотропа и соли свинца. Это свидетельствует о полном устранении положительного эффекта отмеченного выше пирацетама в присутствии диацетата свинца в условиях двух стрессирующих факторов - сбоя и пространственной переделке выработанного навыка. Проведенные обратимые функциональные нарушения УРАИ указали, что пирацетам на фоне действия диацетата свинца либо имеет малый эффект, либо не проявляет свойственное ему в этих моделях положительное влияние на воспроизведение УРАИ.

VI Изучение комбинированного действия диацетата свинца■ пирацетама и аскорбиновой кислоты на выработку условных рефлексов активного избегания.

VI. 1 Влияние диацетата свинца на выработку УРАИ.

Как описано выше, формирование реакций избегания у животных через 30 мин после инъекции раствора пирацетама с диацетатом свинца происходило быстрее, чем через 75 минут (рис.7). Уровень избегания крыс, с которыми выработка УРАИ осуществлялась через 30 мин после инъекции раствора пирацетама и соли свинца, был выше контрольных показателей и даже показателей крыс на фоне пирацетама во все опытные дни. В другой группе, с которой опыт проводился через 75 мин на фоне действия пирацетама и соли свинца, реакции избегания не превысили 20% от числа предъявлений. Такую разницу в обучении мы объясняем тем, что соль свинца является катализатором структурных перестроек кристаллического пирацетама, которые приводят к образованию полиморфных модификаций пирацетама с различными функциональными свойствами. Вследствие этого сначала через 30 мин после совместного введения ноотропа и соли свинца формирование УРАИ под влиянием определённой полиморфной формы пирацетама происходило быстрее. Затем примерно через 75 мин после инъекции определяющим становилось негативное влияние диацетата свинца, устраняющее ноотропный эффект пирацетама. В данном разделе работы установлено, что влияние свинца может быть различным в зависимости от длительности его экспозиции на организм. Мы установили, что дополнительное введение крысам диацетата свинца за 24 часа до опыта существенным образом меняло картину обучения (рис. 9).

tt -л

Р —

/ У

А А

ja #л ж

г' #л л... - ^ * ♦

1день 2день Здень 4 день 5 день 6 день

—Q " контроль -"■Э ПАкр+диацетат свинцаЗО - А - Рв+ПАкр+диацетат Рв75*

♦ Рв+ПА кр+ диацетат РвЗО* * Диацетат свинца —.........ПАкр

Рис. 9 Формирование УРАИ при воздействии ПИРАЦЕТАМА на фоне инъекций диацетата свинца

По оси абсцисс - номер опыты; по оси ординат - число реакций избегания, % от числа предъявлений # - р < 0,05 относительно контроля; Л - относительно группы с инъекцией эталонного пирацетама

Формирование УРАИ в двух опытных группах на фоне совместного влияния диацетата свинца и пирацетама при условии дополнительного введения за сутки соли свинца проходило одинаково. И у крыс, которым делалась инъекция за 30 мин до опыта, и у животных, у которых выработка УРАИ проводилась через 75 мин после инъекции пирацетама и диацетата свинца, уровень избегания был ниже контрольных показателей и показателей крыс на фоне действия собственно соли свинца. Таким образом, диацетат свинца уменьшил активность пирацетама так, что число реакций избегания при введении ноотропа на фоне металла было меньше, чем при его отдельном введении. Более того, совместное введение пирацетама и соли свинца привело к дополнительному угнетению формирования УРАИ, по-видимому, дополнительные инъекции диацетата свинца привели к «эффекту накопления» тяжелого металла в организме крыс. В специальной литературе по этому вопросу исследователями подчёркивается способность накопления свинца в организме и, как следствие, усиление его токсического влияния, в особенности на клетки ЦНС (Трахтенберг, 2000; Горобец и др., 2005; Khalil et al., 2009). Из полученных нами результатов следует, что широкое использование нейропсихотропных препаратов в экологически неблагополучных

регионах с большим содержанием ксенобиотика свинца в окружающей среде может увеличить вредоносное влияние тяжелого металла на здоровье человека.

VI. 2. Влияние аскорбиновой кислоты на формирование УРАН на фоне комбинированного действия диацетата свинца и пирацетама. Данные о кумулятивном свойстве диацетата свинца, негативно влияющего на исследуемые формы адаптивного поведения, с одной стороны, и на функциональные свойства эталонного ноотропа, с другой стороны, стали обоснованием для постановки опытов с использованием аскорбиновой кислоты. Проведя УФ-спектроскопическое исследование структуры пирацетама в водном растворе диацетата свинца и аскорбиновой кислоты, мы установили, что аскорбиновая кислота, вступая в реакцию с диацетатом свинца, способна устранять каталитическое действие соли свинца на структуру ноотропа, тем самым, предотвращая появление в растворе мономерных форм пирацетама. Мы предположили, что аскорбиновая кислота, которая влияет на взаимодействия ноотропа и соли свинца in vitro, изменит характер совместного влияния диацетата свинца и пирацетама на выработку у крыс условных рефлексов активного избегания в челночной камере. В ходе опытов установлено,что аскорбиновая кислота оказывает заметное положительное влияние на процесс формирования рефлекса активного избегания (рис.10).

100 90 80 70 60 50 -4030 20 10 -| 0

♦ ГА

- -—р-р пирацетама (ПА)

— р-р ПА и диацетата свинца

-Л—р-р ПА,диацетата свинца и аскорбиновой кислоты

контроль

1 опыт 2 опыт 3 опыт 4 опыт 5 опыт

Рис. 10 Формирование УРАН под влиянием аскорбиновой кислоты, введенной через 30мин после инъекции ПИРАЦЕТАМА и диацетата свинца.

ГГо оси абсцисс - номер опыты; по оси ординат- число реакций избегания, % от числа предъявлений

# - р < 0,05 относительно контроля; * - р < 0,05 относительно опытной группы животных, которым вводили раствор эталонный пирацетама;Л - р < 0,05 относительно опытной группы животных, которым вводили раствор пирацетама и диацетата свинца, а затем раствор аскорбиновой кислоты.

С первого опыта показатели обучения животных в этой группе были выше контроля и статистически достоверно превышали показатели крыс, не получавших раствор витамина. В четвёртом и пятом опытах число реакции избегания под влиянием трёх веществ превысило показатели животных, получавших только инъекции эталонного пирацетама, следовательно, аскорбиновая кислота устранила искаженный эффект пирацетама, который отмечался при дополнительной «свинцовой» нагрузке. Таким образом, полученные нами данные in vitro и in vivo свидетельствуют об эффективности аскорбиновой кислоты при нарушениях адаптивных реакций крыс, вызванных совместным влиянием диацетата свинца и эталонного ноотропного препарата.

Выводы

1. Установлено, что тяжелые металлы изменяют функциональные и структурные свойства пирацетама.

2. Методами жидкостной хроматографии и ультрафиолетовой спектроскопии исследованы структурные изменения пирацетама при растворении в водном растворе солей тяжелых металлов. Определено, что каталитическое действие солей тяжелых металлов инициируют появление в растворе биологически активных форм пирацетама.

3. При совместном действии диацетата свинца и пирацетама на формирование и функциональные нарушения УРАИ вместо характерного ноотропного эффекта пирацетама превалирует влияние диацетата свинца, выражающееся в угнетении условных рефлексов.

4. Обнаружена разница в эффективности действия полиморфных модификаций пирацетама. Аморфизированная форма пирацетама ускоряла формирование условных рефлексов, но оказалась малоэффективной при функциональных нарушениях выработанного навыка.

5. In vitro показано, что аскорбиновая кислота предотвращает взаимодействие диацетата свинца со структурой пирацетама.

6. Установлено, что аскорбиновая кислота уменьшает или устраняет когнитивные нарушения, вызванные совместным введением пирацетама и диацетата свинца.

7. Полученные данные выявили теоретическую и практическую необходимость дальнейшего изучения совместного влияния нейропсихотропных препаратов и солей тяжелых металлов на ЦНС. Широкое использование нейропсихотропных препаратов в экологически неблагополучных регионах с большим содержанием тяжелых металлов в окружающей среде может увеличить вредоносное влияние тяжелых металлов на здоровье человека.

Список работ, опубликованных по теме диссертации.

1. Буров Ю.В., Иноземцев А.Н., Прагина Л.Л., Литвинова C.B., Карпухина О.В., Тушмалова H.A. Влияние амиридипа и пирацетама на память, нарушенную экспериментальными стрессовыми воздействиями // Бюлл. Эксп. Биол. и Мед.-1993. №2. С. 155-157.

2. Бурлакова Е. Б., Гумаргалиева К. 3., Иноземцев А. Н., Карпухина О.В., Соловьев А.Г. и др. Патент на изобретение "Способ улучшения процессов памяти" №2071319. 1995.

3. Карпухина О.В. Катализ полиморфных превращений психотропного лекарственного препарата (пирацетама). Стендовый доклад. Тезисы XIII симпозиума "Современная химическая физика 2001 г., Туапсе с.144

4. Карпухина О.В., Бокиева С.Б., Гумаргалиева К.З., Соловьев А.Г., Иноземцев А.Н. Использование ноотропов и солей тяжелых металлов для изучения обучения и памяти у животных // XII Международное совещание и V школа по эволюционной физиологии. Санкт-Петербург, 2001, С. 57-58

5. Иноземцев А. Н., Гумаргалиева К. 3., Соловьев А. Г., Карпухина О. В., Бокиева С. Б., Бобылева Л. А., Чопикашвили Л. В. Формирование и нарушение адаптивных реакций крыс в стрессогенных условиях при комбинированном воздействии пирацетама и тяжелых металлов //Международный междисциплинарный семинар «Новые технологии в медицине и экологии, интегративная медицина». Словакия. 2003 г. С. 42-44.

6. Иноземцев А.Н., Воронина Т.А., Гарибова Т.Л., ГумаргалиеваК.З., Соловьев А.Г., Карпухина О.В., Бокиева С.Б., Капица И.Г., Чопикашвили Л.В. Изучение влияния совместного применения тяжелых металлов и пейропсихотропных препаратов на обучение и память. // Фундаментальные проблемы фармакологии. Сборник тезисов 2-го съезда Российского научного общества фармакологов. Часть I. Москва. 2003 г. С. 214.

7. Karpukhina O.V., Gumargalieva K.Z., Soloviev A.G, Inozemtsev A.N. Effects of lead diacetate on structure transformation in solution. // Chemical reactions: Quantitative level of liquid and solid phase. Eds. Zaikovand Jimenez. Nova Science Publishers. 2004. P. 139-144.

8. Иноземцев A. H., Бокиева С. Б., Карпухина О. В., Гумаргалиева К. 3., Соловьев А. Г., Чопикашвили Л. В. Поведенческие и цитогенетические последствия совместного воздействия тяжелых металлов и нейропсихотропных препаратов // II съезд токсикологов России. 2003. Москва. С. 122.

9. Гумаргалиева К.З., Карпухина О.В., Соловьев А.Г., Иноземцев А.Н. Структурно-функциональная организация пирацетама // Рос. физиол. жури. им. И. М. Сеченова. Т.90. № 8. 4.2. 2004. С. 314.

10. Karpukhina O.V., Gumargalieva K.Z., Soloviev A.G, Inozemtsev A.N. Effects of lead

diacetate on structure transformation and functional properties of piracetam // Journal of environmental protection and ecology. 2004. V. 5. № 3. P. 577-582

11. Карпухина O.B., Гумаргалиева K.3., Соловьев А.Г, Иноземцев А.Н., Бокиева С.Б. Влияние диацетата свинца на фармакологические характеристики нейротропного препарата пирацетама: структурный аспект./ Актуальные проблемы экологии и природопользования. 2005. М., изд-во РУДН, вып. 7 (1). С. 68-71

12. А.Н. Иноземцев, С.Б. Бокиева, О.В. Карпухина, А.Г. Соловьев, К.З. Гумаргалиева. Влияние тяжелых металлов, пирацетама и аскорбиновой кислоты на обучение и память у крыс // 4-я международная конференция «Биологические основы индивидуальной чувствительности к психотропным средствам» М. 2006. С. 34.

13. Карпухина О.В., Соловьев Г.А., Гумаргалиева К.З., Иноземцев А.Н., Структурно-функциональная организация пирацетама в водном растворе: структурный аспект // Химическая физика. 2006. Т. 25. № 5. С. 77-80.

14. Карпухина О.В., Гумаргалиева К.З., Соловьев А.Г., Иноземцев А.Н. Бокиева С.Б. Особенности условнорефлекторной памяти крыс при совместном введении ноотропного препарата и диацетата свинца. / Актуальные проблемы экологии и природопользования. М.,РУДН, 2006, вып. 8,ч.1, с. 61-64.

15. Карпухина О.В., Бокиева С.Б., Иноземцев А.Н., Костикова Н.П., Соловьев А.Г. Роль аскорбиновой кислоты при изменении фармакологических характеристик пирацетама в присутствии соли свинца // XIV Росс. Национальный Конгресс «Человек и лекарство». Сборник материалов конгресса (тезисы докладов). Москва, 2007,. С. 827.

16. Карпухина О.В., Бокиева С.Б., Гумаргалиева К.З., Иноземцев А.Н. Совместное влияние солей тяжелых металлов и психотропного препарата на процессы обучения. // Актуальные проблемы экологии и природопользования. М.: «Энергия», 2007, вып. 9,ч.1, с. 44-47.

17. Карпухина О.В., Гумаргалиева К.З., Бокиева С.Б., Иноземцев А.Н., Костикова Н.П Влияние кристаллического и структурно-модифицированного пирацетама на память, нарушенную экспериментальными стрессовыми воздействиями. И Тезисы, XV Росс. Национальный Конгресс «Человек и лекарство», Москва, 2008, с.542.

18. А.Н. Иноземцев, С.Б. Бокиева, О.В. Карпухина, К.З. Гумаргалиева. Влияние сочетанного воздействия тяжелых металлов и пирацетама на обучение и память крыс //Доклады РАН. 2008. т.422. №5. с. 700-703.

19. Карпухина О.В., Гумаргалиева К.З., Бокиева С. Б., Иноземцев А.Н. Изменение фармакологических свойств пирацетама в присутствии диацетата свинца.//Научные труды II съезд физиологов СНГ. Молдова, 2008, с. 43

20. O.V. Karpukhina, K.Z. Gumargalieva, M.I Artsis, A. N. Inozemtsev. Effects of lead diacetate on structure of neurotropic drug (Piracetam): conformational polymorphism.// 2nd International Conference on Biodegradable Polymers and Sustainable Composites BIOPOL-2009, Spain, P.2-32

Подписано в печать 19 ноября 2009 г. Объем 1,0 п. л. Тираж 100 экз. Заказ №1100 Отпечатано в Центре оперативной полиграфии ООО «Ол Би Принт» Москва, Ленинский пр-т, д.37

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Карпухина, Ольга Вячеславовна

Список используемых сокращений.

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Влияние тяжелых металлов на биологические системы.

1.1.1 Тяжелые металлы - приоритетные вещества, загрязняющие биосферу.

1.1.2 Основные механизмы токсического действия свинца и других тяжелых металлов.

1.1.3. Оксидантный стресс как один из факторов патогенеза нейродегеративных заболеваний.

1.1.4. Антиоксидантные свойства аскорбиновой кислоты.

1.2. Использование фармакологических веществ для изучения высшей нервной деятельности.

1.2.1 Ноотропные препараты.

1.2.2 Пирацегам - эталонный ноотропный препарат.

1.2.3 Основные механизмы действия рацетамов.

1.2.4. Методы для оценки влияния ноотропных веществ на процессы обучения и памяти.

1.3. Полиморфизм лекарственных веществ.

1.3.1 Явление изомерии и полиморфизма.

1.3.2 Полиморфизм структуры вещества - фактор, определяющий лечебный эффект фармакологических препаратов.

1.3.3. Методы исследования лекарственного вещества.

1.3.4. Полиморфизм структуры пирацетама.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Формирование и нарушение адаптивных реакций крыс в стрессогенных условиях при комбинированном воздействии диацетата свинца и пирацетама"

В связи с тем, что в последние десятилетия антропогенная нагрузка на окружающую среду достигла угрожающих масштабов, вопрос влияния тяжелых металлов на здоровье человека приобрел особую остроту (Мур, Рамамурти, 1984; Трахтенберг и др., 1994, 1999; Давыдова, Тагасов, 2002, Ревич и др. 2004, Скурлатов и др., 1994). В списке приоритетных токсических загрязняющих веществ, представляющих серьезную угрозу биосфере, находится повсеместно распространённый в огромных количествах ксенобиотик свинец, который является политропным ядом и обладает высокой биологической активностью, кумулятивными свойствами, мутагенным и канцерогенным эффектами (Авцын и др., 1991; Ревич, 1999, 2002; Скальный, Есенин, 1996; Бокиева, 1998, Пурмаль, 1999; Корбакова и др., 2001; Lanphear et al., 1998; Banks et al., 1997; MameJi et al., 2001). Современные исследования последних десятилетий, проведенные более чем в 60 странах мира, показывают, что влияние свинца на состояние здоровья человека выходит за чисто профессиональные рамки. Всё чаще у людей, проживающих в непосредственной близости к промышленным предприятиям, выявляются различные нейродегенеративные расстройства, включая болезни Альцгеймера и Паркинсона (Александровский и др., 1990; Худолей, Мизгирёв, 1996; Ревич, 1993, 1997; Ревич, Сидоренко, 2006; Трахтенберг, 1994, 1999; 2000; Агаджанян, 2002). Воздействие тяжелых металлов вызывает у детей, проживающих в промышленных городах, задержки нервно-психического развития: памяти, обученности, моторики, речи, снижение IQ и т. п. (Розанов, 1999; Ревич, 1999).

Одним из важных путей решения задач с целью изучения причин возникновения, механизмов, а также лечения и профилактики возрастающих случаев нервных заболеваний, вызванных негативным влиянием тяжелых металлов, является создание экспериментальных моделей неврозов человека на животных с использованием фармакологических инструментов. Фармакологический подход в изучении фундаментальных основ деятельности мозга дает ряд преимуществ, поскольку дополнительно к исследованию собственно механизмов высшей нервной деятельности изучается, например, механизм коррекции ряда устойчивых патологических состояний мозга, в частности нарушения памяти. Из большого числа моделей обучения и памяти фармакологами широко используется методика выработки условного рефлекса активного избегания (УРАИ) (Буреш и соавт., 1991). Активное избегание удара электрического тока в челночной камере — это четкий тест на обучаемость у лабораторных грызунов,' показатели которого легко измерить. Он достаточно унифицирован и его результаты, полученные в разных лабораториях, легко сопоставить друг с другом. Экспериментальные схемы обучения, которые используются для тестирования запоминания у лабораторных мышей и крыс, позволяют с большой надежностью проанализировать влияние какого-либо фактора на краткосрочную или долгосрочную память и на процесс собственно усвоения навыка. Использование психотропных веществ в моделях обучения позволяет выявить ключевые биохимические изменения, характерные для конкретных форм памяти. Эти вещества вызывают однозначные изменения и допускают моделирование in vitro.

Среди значительного арсенала нейропсихотропных лекарственных веществ, используемых для исследования механизмов ВНД, а также построения соответствующих моделей обучения и памяти, определённый интерес представляет класс ноотропов.

Ноотропные лекарственные средства относятся к одной из перспективных групп нейротропных фармакопрепаратов. О чрезвычайной важности препаратов с ноотропным действием свидетельствуют данные о широком их применении: по статистике ВОЗ треть взрослого населения Европы и Японии принимает ноотропы, и их с полным основанием можно отнести к группе жизненно важных препаратов (Воронина, Середенин, 1998; Аведисова и соавт., 2000; Громова, 2000; Windisch, 1996).

Это обусловлено не только их способностью избирательно стимулировать обучение и память в условиях патологии, но и оказывать нейропротекторный эффект и способствовать восстановительным процессам в нервной ткани здоровых лиц, подвергающихся экстремальным воздействиям, в том числе агрессивному воздействию агентов, загрязняющих окружающую среду. Механизм действия ряда ноотропов определяется антиоксидантным и мембрано-протекторным действием. Примером служит эпифизарный гормон мелатонин, относимый к ноотропам, который уменьшает вызываемое свинцом свободнорадикальное повреждение нейронов.

В последнее время публикуются данные о том, что тяжелые металлы инициируют перекисное окисление липидов, изменяя активность мембранных ферментов, при этом наиболее уязвимы для свободнорадикальных процессов клетки ЦНС (Болдырев, Куклей, 1996; Cebollos-Picot, 1997; Румянцева и др., 2007; Суслина и др., 2007). Следовательно, важным субстратом для совместного воздействия тяжелых металлов и ноотропов может служить антиоксидантная система организма, играющая большую роль в реакциях ЦНС на стрессовые нагрузки за счет предупреждения чрезмерной активации процессов свободнорадикального окисления, вызывающих повреждение клеточных мембран и развитие патологических процессов, захватывающих многие функции.

Важным фактором, определяющим лечебный эффект лекарственных веществ, в частности нейротропных средств, и, существенно влияющим на параметры их фармакологической активности, является полиморфизм структуры вещества - наличие разных по форме кристаллов (Ажгихин, 1980; Byrn, Stowell, 1995; Shakhtshneider, 1997; Fabbiani and al., 2005; Краснюк и соавт. 2006). Полиморфные формы выявлены у более 70 % лекарственных веществ практически всех фармакологических групп. У эталонного ноотропа пирацетама кристаллическая структура может иметь не меньше четырёх полиморфных модификаций (Galdecki, Glowka, 1983; Ьоиёг and al., 1995; Nowell, Price, 2005). Фармакологическая активность таких полиморфных форм зависит от растворителя (Краснюк и соавт. 2006). Поскольку в качестве растворителя лекарственных средств часто используется питьевая вода, следует учитывать её физико- химические параметры. Техногенное загрязнение водной среды тяжелыми металлами обычно приводит к их многократному повышению в объектах окружающей среды, что часто обуславливает повышение их содержания в питьевой воде. Загрязнение питьевой воды связано не просто с присутствием в ней токсичных веществ, но и с изменением ряда физико-химических показателей воды: содержание взвешенных веществ, растворенного кислорода, минеральный состав, температура, рН и др. (Скурлатов и др. 1994).

Цели и задачи исследования. Цель данной работы состояла в изучении особенностей формирования адаптивных реакций крыс в стрессогенных условиях при комбинированном воздействии диацетата свинца и пирацетама.

Исходя из этого, были поставлены следующие задачи:

1. Исследовать влияние пирацетама и его комбинации с диацетатом свинца на формирование, условного рефлекса активного избегания у крыс в норме и при функциональных нарушениях как формы приспособления животных к окружающей среде.

2. Методами ультрафиолетовой спектрофотометрии и жидкостной хроматографии исследовать растворы кристаллического пирацетама с солями тяжелых металлов (диацетата свинца, хлорид кадмия, сульфита кобальта).

3. Провести сравнительный анализ ноотропного эффекта эталонного кристаллического пирацетама и его аморфной модификации.

4. Изучить возможное протекторное действие аскорбиновой кислоты против негативного влияния диацетата свинца на формирование УРАИ Положения, выносимые на защиту.

3. Различия в фармакологическом действии эталонного пирацетама и его структурно-модифицированной формы.

Научная новнзна работы. Проведённые эксперименты показали ухудшение выработки условного рефлекса в челночной камере у крыс на фоне совместного влияния пирацетама и диацетата свинца. Впервые выявлена зависимость формирования УРАИ от длительности воздействия свинца на организм животного. Впервые установлена связь между кинетикой структурных преобразований нейротропного препарата пирацетама, обусловленных каталитическим действием диадетата свинца, и воздействием изучаемых веществ на формирование условных рефлексов в норме и стрессовых условиях. В водном растворе структура пирацетама в присутствии солей тяжелых металлов подвергается изменениям с образованием промежуточных продуктов, которые значительно влияют на функциональные свойства ноотропа. Впервые установлено, что две полиморфные разновидности пирацетама по-разному влияют на обратимые функциональные нарушения реакций избегания у крыс. Получены данные об эффективности аскорбиновой кислоты при нарушениях условных рефлексов, обусловленных сочетанным воздействием диацетата свинца и пирацетама.

Научно-нрактическая значимость. Результаты данного исследования свидетельствуют об опасности использования ноотропных препаратов в регионах с повышенным содержанием тяжелых металлов, поскольку оно может усилить нейротоксическое влияние металлов на центральную нервную систему человека. Экспериментальные данные могут быть использованы в теоретической нейрофизиологии и для решения практических задач защиты от токсичности тяжелых металлов; повышения устойчивости человека и животных к негативным воздействиям химических факторов. Выявленные эффекты аскорбиновой кислоты позволяют рекомендовать использование её в качестве профилактического и протекторного средства в комплексной терапии ноотропными препаратами при оксидантном стрессе, нарушениях памяти, дефиците внимания и др. патологиях ЦНС, возникающих при интоксикации тяжёлыми металлами.

2008); II съезде физиологов СНГ (Молдова, 2008), на II международной конференции по биодеградации полимеров и биокомпозитов (Испания,

2009).

Заключение Диссертация по теме "Экология", Карпухина, Ольга Вячеславовна

Выводы

1. Установлено, что диацетат свинца изменяет функциональные и структурные свойства пирацетама.

3. При совместном действии диацетата свинца и пирацетама на формирование и функциональные нарушения УРАИ вместо характерного ноотропного эффекта пирацетама превалирует влт^3яние диацетата свинца, выражающееся в угнетении условных рефлексо^

4. Обнаружена разница в эффективности действия полиморфных модификаций пирацетама. Аморфизированная форма пиРа1Д;етама ускоряла обучение условным рефлексам, но ока::^алась малоэффективной при функциональных нарушениях выработ^.^^^^ навыка.

5. In vitro показано, что аскорбиновая кислота пРеДотвР>ащает взаимодействие диацетата свинца со структурой пирацетама.

6. Установлено, что аскорбиновая кислота уменьшает или устраняет когнитивные нарушения, вызванные совместным ввеЛ,ением пирацетама и диацетата свинца.

7. Полученные данные выявили теоретическую и практик есКуЮ необходимость дальнейшего изучения совместного в-ИИяния нейропсихотропных препаратов и солей тяжелых металлов на ЦНС Широкое использование нейропсихотропных препаратов в экологически неблагополучных регионах с большим содерхсанием тяжелых металлов в окружающей среде может увеличить вредоносное влияние на здоровье человека.

107

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Карпухина, Ольга Вячеславовна, Москва

1. Абрамец И.И., Комиссаров И.В., Самайлович И.М. Синоптическиеэффекты ноотропов: механизмы вовлечения глутаматных рецепторов II Арх. клинической и эксперим. медицины 1996. - Т. 5, № 1. - С. 73-79

2. Аведисова А.С., Александровский Ю.А., Ильина Н.А. и др. Психиатр, ипсихофармакотер. 2000 - 2 (4): 111-113.

3. Аведисова А. С., Ахапкин Р. В., Ахапкина В. И., Вериго Н. Н "Анализзарубежных исследований ноотропных препаратов (на примере пирацетама)".//Ж. Российский психиатрический. 2001. N1. -С.46-53.

4. Авруцкий Г. Я., Гурович И. Я., Громова В. В. Фармакотерапияпсихических заболеваний. М.: Медицина. 1974. 471 с.

5. Авруцкий Г. Я., Недува А. А. Лечение психических больных. М.:1. Медицина. 1988. 528 с.

6. Авцын А. П., Жаворонков А. А., Риш М.А., Строчкова J1.C.

7. Микроэлементозы человека, М., Медицина, 1991, 496 с.

8. Агаджанян Н. А. // Вестник РАМН.— 2002. — N 9 . — С. 50-53.

9. Агаджанян Н.А., Торшин В.И., Северин А.Е., Ермакова Н.В., Радыш И.В.,

10. Власова И.Г., Елфимов А.И., Шастун С.А. и др. Резервы организма и здоровье студентов из различных климатогеографических регионов //Вестник РУДН. Сер.: Медицина. 2006. № 2. С. 37-41.

11. Ажгихин И.С. Технология лекарств. "Медицина" - 1980, - 441с.

12. Айрапетянц М.Г. Участие церебральной гипоксии в патогенезе неврозов.

13. Новая концепция //Ж. ВНД.- 1997.- Т. 47. № 2.- С. 412.

14. Айрапетянц М.Г., Вейн A.M. Неврозы в эксперименте и клинике. М.:1. Наука, 1982. 272 с.

15. Айрапетянц М.Г., Левшина И.П., Ноздрачева Л.В., Шуйкин Н.Н.

16. Коррекция поведенческих и физиологических показателей неврозоподобного состояния белых крыс введением янтарной кислоты // Ж. ВНД.- 2001. -Т. 51. № 3.- С. 360-366.

17. Александровский Ю.А. Пограничные психические расстройства. М.:1. Медицина, 2000. 492 с.

18. Александровский Ю.А., Поюровский М.В., Незнамов Г.Г. Неврозы иперекисное окисление липидов Под ред. JT.C. Евсеенко - М.: Наука -1990 - 144 с.

19. Аликберова JI.IO. Савинкина Е.В., Давыдова М.Н. Основы строениявещества. М. МИТХТ, 2004, с.

20. Альберт, А. Избирательная токсичность : физ.-хим.основы терапии: В 2 т.

21. Пер.с англ.М.А.Думпис,М.Б.Ганиной; Под ред.В.А.Филова. М. : Медицина, 1989 - .Т.1. - 398 с.

22. Анохин П.К. Биология и нейрофизиология условного рефлекса. М.: Медицина, 1968, 369 с.

23. Артамонова В.Г., Шаталов Н.Н. Профессиональные болезни. 2-е изд.,перераб. и доп. Москва : Медицина, 1988. - 414 с.

24. Арушанян Э.Б. В кн.: Современные аспекты хронофизиологии ихронофармакологии. Ставрополь: СтГМА, 2004. С. 9-36.

25. Асратян Э.А. К вопросу о локализации центральной части рефлекторнойдуги двигательного оборонительного условного рефлекса // Физиологический журнал. СССР. 1934. Т. 17. Вып.6. С. 12-16.

26. Ахапкина В. И. Адаптогенное действие ноотропных препаратов.

27. Российский медицинский журнал 2005; 3: 40-43

28. Ашмарин И.П., Левицкая Н.Г., Каменский А.А., Мясоедов Н.А. Семакс -новое лекарственное средство для коррекции кровообращения мозга,гипоксических состояний и повышения умственной трудоспособности.-Фарматека- 1997 №4. - 32-33с.

29. Бабенко О.В. Экстремальное химическое воздействие соединениямитяжелых металлов/ Мед. помощь. -2000. -№ 6. -С. 35-39

30. Бабков Jl. М., Г.А. Пучковская, C.JI. Макаренко, Г.А. Гаврилко, "ИКспектроскопия молекулярных кристаллов с водородными связями", Киев, Наукова Думка, 1989 г.

31. Бакстон Ш., Роберте С. Введение в стереохимию органическихсоединений. // М.: Изд.: Мир, 2005 г. 312 с.

32. Барабой В.А. Механизмы стресса и перекисное окисление липидов Усп.соврем, биол. -1991. -Т. 11Вып. 6.- С. 923-931.

33. Барабой В.А., Брехман И.И., Голотин В.Г., Кудряшов Ю.П. Перекисноеокисление и стресс.- СПб. 1992 - 152 с.

34. Барам Г.И., Рейхарт Д.В., Гольдберг Е.Д., Изотов Б.Н., Родинко. М.О.,

35. Хазанов В.А. Высокоэффективная жидкостная хроматография в контроле качества лекарственных средств.// Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2003, т. 135, №1, с.75-79.

36. Беккельман И., Пфистер Э. Нейротоксические эффекты многолетнейэкспозиции свинцом. // Мед. труда. —2001, №5. —С. 22—25.

37. Белл Р. Протон в химии. //М.: Мир. 1977 383 с.

38. Беликов В.Г. Общая фармацевтическая химия //-М.:Высш.шк.,1993.-432 с

39. Белоусов Ю.Б., Мухина М.А.// ж. К. Клин. Практика, 2005, №3

40. Березина О.В., Гоев А.А. Оценка токсичности некоторых тяжелыхметаллов методом поведенческой токсикологии // Гигиена и санитария 1982, №1:42-46.

41. Березовский В.М. Химия витаминов - М.: Пищевая промышленность.

42. Изд.2, перераб. и доп.- 1973 г.- 626 с.

43. Бернстейн Дж. В сб.: Молекулярные структуры. М. Мир., 1997, с.560-574.

44. Бобырев В.Н., Почернява В.Ф., Стародубцев С.Г. и др. Специфичностьсистем антиоксидантной защиты органов и тканей — основа дифференцированной фармакотерапии антиоксидантами //Эксперим. и клин, фармакология. 1994. — 57(1) — с.47-54.

45. Боев В.М., Красиков С.И., Свистунова Н.В., Неплохое А.А., Боев М.В., Шарапова Н.В., Тимошинова С.В. Свободнорадикальное окисление в оценке риска здоровья населения //Гигиена и санитария. 2006.- №- 5. с. 19-20.

46. Бокий Г.Б. Кристаллохимия М. Наука. -1971. - с.218-226

47. Болдырев А.А., Куклей M.JI. Свободные радикалы в нормальном иишемическом мозге // Нейрохимия. 1996. № 13. С. 271—278.

48. Болдырева Е. В., Дребущак В. А., Дребущак Т. Н., Пауков И. Е.,

49. Ковалевская Ю. А., Шутова Е. С. Полиморфизм глицина — термодинамические и структурные аспекты / Тез. докл. XVII Менделеевский съезд по общей и прикладной химии, Казань 2003а. Т.1. ,с.141.

50. Болдырева Е. В., Шахтшнейдер Т. П., Ахсбахс Г., Бургина Е. Б.,

51. Балтахинов В. П. Влияние давления на полиморфные модификации парацетамола /20036.- Там же. — Т. 4. — С. 204.

52. Буреш Я., Бурешова О., Хьюстон П. Методики и основныеэксперименты по изучению мозга и поведения. Москва. «Высшая школа». 1991- 399 с.

53. Буров Ю.В., Иноземцев А.Н., Прагина J1.JL, Литвинова С.В., и д^э.

54. Влияние амипиридина и пирацетама на память, нарушенного экспериментальными стрессовыми воздействиями // Бюлл. Эксщ. Биол. и Мед. 1993. № 2. С. 155-157.

55. Вальдман А. В. Значение идей И. П. Павлова для психофармакологией

56. Журн. высш. нервн. деят. 1979. Т. 29. № 1. С. 11-22.

57. Вальдман А.В., Козловская М.М., Медведев О.С. Фармакологическаярегуляция эмоционального стресса. М.: Медицина. 1979. 360 с.

58. Вальдман А. В. Методологические основы экспериментальнойпсихофармакологии // Методологические вопросы современной фармакологии. М.- 1985.- С. 13-32.

59. Вальдман А.В., Александровский ЮА. Психофармакотерапияневротических расстройств. М. 1987.

60. Вельтищев Ю.Е. Экологически детерминированные нарушения состоянияздоровья детей // Рос. педиатр, журн. 1999. - №3. -С.7-8.

61. Вилков Л.В., Пентин Ю.А.Физические методы исследования в химии

62. Структурные методы и оптическая спектроскопия. М.: Высшая школа, 1987.

63. Виленский Д.А., Левицкая Н.Г., Андреева Л.А., Алфеева. Л.Ю.,

64. Каменский А.А., Мясоедов Н.Ф. Влияние хронического введения семакса на исследовательскую активность и эмоциональное состояние белых крыс. Российский физиологический журнал им. И.М. Сеченова. 2007, т. 93 (6), с. 661-669.

65. Владимиров Ю.А., Арчаков А.И. Перекисное окисление липидов вбиомембранах.- М.: Наука. -1972 — 252 с.

66. Владимиров Ю.А. Роль нарушений свойств липидного слоя мембран вразвитии патологических процессов. Патологическая физиология и экспериментальная терапия. — 1989.- №4. — С. 7—19.

67. Владимиров Ю.А., Азизова О.А., Деев А.И.Свободные радикалы в живыхсистемах. Итоги науки и техники//Биофизика. 1991. Т. 29. С. 252.

68. Владимиров Ю.А. Свободные радикалы и антиоксиданты // Вестник

69. РАМН.- М., 1998.- №7.- с.43-51.

70. Владимиров Ю.А. Нарушение барьерных свойств внутренней и наружноймембран митохондрий, некроз и апоптоз. // Биол. мембраны. 2002. Т. 19. № 5. С. 356-377.

71. Воронина Т.А// Фармакология ноотропов. М., 1989. - С. 8-19

72. Воронина Т.А. Новые направления поиска ноотропных препаратовпроблемная статья) // Вестник РАМН. 1998. № 1. С. 16-21.

73. Воронина Т.А. Гипоксия и память. Специфические эффекты ноотропныхпрепаратов и их использование // Вестник российской академии мед. наук. 2000. № 9. С. 27-34.

74. Воронина Т.А. Антиоксидант мексидол. Основные нейропсихотропныеэффекты и механизм действия // Психофармакол. и Биол. Наркол. 2001. Т. 1. № 1.С. 2-12.

75. Воронина Т.А., Островская Р.У. Методические указания по изучениюноотропной активности фармакологических веществ // Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ Минздрав РФ. ЗАО ИИА Ремедиум, 2000.

76. Воронина Т.А., Середенин С.Б. Нотропные препараты, достижения иновые проблемы (проблемная статья) // Эксперим. и клин, фармакол. 1998. Т. 61. №4. С. 3-9.

77. Воронина Т.А. Середенин С.Б. Ноотропные и нейропротекторныесредства// Экспер. и клин, фармак. 2007.-№70 (4) -с.44-58.

78. Вредные химические вещества. 1988 Неорганические соединения I-IVгрупп: Справ, изд./ Под ред. В.А. Филова и др. — JL: "Химия"

79. Вульфсон Н.С. Препаративная органическая химия. 1959.- 888 с.

80. Гарибова Т.Д., Рожанец В.В., Рахманкулова И.Х., Воронин К.Э.,

81. Тимофеева С.Э., Цонева-Тютюлкова Н., Вальдман А.В., Стефанова Д. Поведенческие и радиорецепторные исследования пирацетама. Болгария, МБИ. 1985. № 4. С. 42-46.

82. Гарибова T.JL, Сопыева Ж.А. // Фармакология ноотропов. М.: НИИ фармакологии. - 1989. - С.44-52.

83. Гарибова Т.Д., Иноземцев А.Н., Капица И.Г., Воронина Т.А.

84. Возможности использования повторных функциональных нарушений УРАИ для исследования эффектов нейропсихотропных веществ. -Психофармакол. и биол. наркол. 2005.- Т. 5. - № 1.- С. 801-809

85. Грандберг И.И. Органическая химия.// Изд.: Высшая школа. 1987.- 480 с.

86. Громова Е.А. Эмоциональный стресс и его роль в механизмах памяти //

87. Актуальные проблемы стресса. Кишинев, 1976. С. 29-87.

88. Громова О.А. Нейрометаболическая фармакотерапия. Под ред. чл-корр.

89. РАМН Е.М.Бурцева- М., 2000- 85с.

90. Губарева Л.И. Экологический стресс.- СПб: Лань, Ставрополь: Ставропольсервисшкола- 2001. 448 с

91. Губская А.В. Диссертация соиск. уч. степени к.ф.-м.н., Физ.-тех^а.институт низких температур, НАН Украины, Харьков, 1993

92. Гудашева Т.А. Островская Р.У., Трофимов С. С., Косой М.Ю. и соавт. У/ Хим.-фарм. ж., 1985, № 11, с. 1322-1328

93. Гуляева Л.Ф. Ферменты биотрансформации ксенобиотиков в химическому! канцерогенезе /Л.Ф. Гуляева, В.А. Вавилин, В.В. Ляхович. — Новосибирск, 2000. 84 с.

94. Давыдова С.Л., Тагасов В. И. Тяжёлые металлы Супертоксиканты XIXвека.-2002 РУДН-140 с.

95. Дашевский В.Г. Конформации органических молекул. // М. Химия, 1974. -с. 14

96. Дашевский В. Г. Конформационньгй анализ органических молекул. //VI., Химия. 1982.- 272 с.

97. Днепровский А.С., Темникова Т.И. Теоретические основы органическойхимии. Л.: Химия, 1991.

98. Доклад о свинцовом загрязнении окружающей среды Российской

99. Федерации и его влиянии на здоровье населения / Гос. ком. РФ по охране окружающей среды. — М., 1997. — 232 с.

100. Дубенко Е.Г. Нейропротекция и метаболическая терапия при церебральной ишемии // Здоров я УкраГни.- 2005- №9 -с.30-34

101. Дюмаев К.М., Воронина Т.А., Смирнов Л.Д. Антиоксиданты в профилактике и терапии патологий ЦНС. М. Наука.- 1995.- 271 с.

102. Жуков Д.А. Психогенетика стресса: поведенческие и эндокринныекорреляты генетических детерминант стресс-реактивности при неконтролируемой ситуации. Спб., 1997.

103. Жуков Д.А. Биология поведения. Гуморальные механизмы. //Санкт

104. Петербург, "Речь", 2007, 443 с.

105. МАИК Наука Интерпериодика - 2001- 343 с. 94.3ефирова О. Н., Зефиров Н. С. // Вестн. Моск. ун-та. Сер. 2. Химия. 2000. 41(2). С.103-108

106. Зигель X. Некоторые вопросы токсичности ионов металлов: Пер. с англ. /

107. Под ред. X. Зигеля, А. Зигеля. — М.: Мир, 1993. — 368 с. 96.3озуля Ю.А., Барабой В.А., Сутковой Д.А. Свободнорадикальноеокисление и антиоксидантная защита при патологии мозга. М.: Знание, 2000. 344 с.

108. Измеров Н.Ф., Монаенкова A.M., Артамонова В.Г. и др.

109. Профессиональные заболевания. //Под ред. Измерова Н.Ф.-М.:Медицина, 1996. Т.2. - 480 с.

110. Ильченко И.Н., Ляпунов С.М., Матвеева С.В. и др. Методы диагностикиэкологически зависимых отклонений в нервно-психическом развитиидетей (пособие для врачей). М 2004.

111. Илиел Э., Аллинжер Н., Энжиал С., Моррисон Г. Конформационныйанализ.// Пер. с англ. Под ред. А.А.Ахрема. М.: Мир, 1969, 592 е.;

112. Иноземцев А. Н., Прагина Jl. J1. Обратимое нарушение реакции избегания как методическое средство для изучения действия психотропных препаратов на высшую нервную деятельность// Журн. высш. нервн. деят. 1989. Т. 39. № 4. С. 764-766.

113. Иноземцев А. Н. Некоторые актуальные проблемы исследования оборонительной реакции / В кн.: Сравнительная физиология высшей нервной деятельности человека и животных. М.: Наука, 1990. С. 36-39.

114. Иноземцев А.Н. Исследование закономерностей нарушения и коррекции различных форм поведения животных с помощью нейропсихотропных средств. Автореф. дисс. . докт. биол. наук. 1997. 44 с.

115. Иноземцев А.Н. Кокаева Ф.Ф. Особенности функционального обратимого «сбоя» реакции избегания у крыс // Журнал Высшей Нервной Деятельности. 1990. Т. 40. Вып.2. С.З86-388.

116. Иноземцев А.Н., Литвинова С.В., Калюжный Л.В. Сравнительная характеристика стрессоустойчивости крыс линии Вистар и беспородных к «сбою» реакции избегания // Журнал Высшей Нервной Деятельности. 1992. Т. 42. Вып. 4. С. 803-805.

117. Иноземцев А.Н., Прагина Л.Л. Методические приемы стрессогенных воздействия для исследования ноотропных влияний на обучение и память // Вестн. Моск. Ун-та. Сер. 16. Биология. 1992. № 4. С. 23-31.

118. Иноземцев А.Н. Биологические предпосылки защитных механизмов при срывах высшей нервной деятельности. // Вестн. Моск. Ун-та. Сер. 16. Биология -2009. -№ 2 -С. 3-8

119. Иоффе Б. В., Костиков Р. Р.,. Разин В. В. Физические методы определения строения органических молекул. Л., 1976. - 344 с.

120. Калюжный J1.B., Литвинова С.В., Иноземцев А.Н., Калюжный А.Л., Аристова В.В. Действие нейротропина на процессы условного рефлекса избегания у крыс // Журн. высш. нерв, деятельности. 1993. Т. 43. Вып. 2. С. 371-376.

121. Казимирко В.К., Мальцев В.И. Бутылин В.Ю. и др. Свободнорадикальное окисление и антиоксидантная терапия. Киев: Морион, 2004. 160 с.

122. Калюжный Л.В., Литвинова С.В., Иноземцев А.Н., Шульговский В.В., 2000.

123. Ш.Клайн Г. Аналитическая химия полимеров: Пер. с англ. Т.2: Анализ молекулярной структуры и химических групп. Т.2 1966. 472 Ковалев Г.В. Ноотропные средства. Волгоград: Ниж.-Волж. кн.изд-во, 1990; 368 с.

124. Ковалев Г.И. Изучение роли межмедиаторных взаимодействий в механизме формирования эффектов ноотропных средств: Автореф. дис. . докт. мед. наук. М., 1993

125. Ковалев Г.И., Ахапкина В.И., Абаимов Д.А., Фирстова Ю.Ю. Фенотропил как рецепторный модулятор синаптической нейропередачи. «Атмостфера. Нервные болезни», 2007, №4, с. 1-4

126. Кожевников Ю.Н. О перекисном окислении липидов в норме и патологии / Ю.Н. Кожевников // Вопр.мед. химии. — 1985. № 5. С. 2— 7.

127. Козлов Ю.П. Свободные радикалы и их роль в нормальных и патологических процессах. М.: МГУ, 1973. -264 с.

128. Козлов Ю. П. Свободнорадикальное окисление липидов в биомембранах в норме и патологии // Биоантиокислители. М., 1975. - С. 5- 15.

129. Корбакова А.И., Сорокина Н.С., Молодкина Н.Н. и др. Свинец и его действие на организм (обзор литературы). // Мед. труда. —2001. —№ 5. —С. 29-34.

130. Краснюк И.И., С.А. Валевко, Г.В. Михайлова. Фармацевтическая технология: Технология лекарственных форм.// Изд. Центр «Академия»,-592 с. (с.41-42).

131. Крылов Ю.Ф., Бобырев В.М. Фармакология. М.: ВХНМЦ МЗ РФ, 1999.- 352 с.

132. Кульман А.Г. Общая химия и неорганическая химия. // М., 5-е изд. 1952.- 424 с.

133. Ливанов Г. А., Соболев М.Б., Худолей В.В. Диагностика и лечения отравлений свинцом у детей.- Минздрав, Институт токсикологии, С-Пб: -1997,- 25 с.

134. Ливанов Г.А., Соболев М.Б., Ревич Б.А. Свинцовая опасность и здоровье населения: клиника, диагностика, и лечение токсического действия. Амбулаторная токсикология «Свинец и здоровье детей». Ст-Петербург.- 1999 с. 18-26.

135. Лисицина Т.А., Васильева И.М., Дурнев А.Д. и др. //Докл. РАН. -1999. Т.365- №2. -С. 263-266.

136. Левицкий Д.О. Кальций и биологические мембраны. -М.: Высшая школа, 1990.- 124 с.

137. Левшина И.П., Гуляева И.В. Зависимость влияния острого стресса на латерализацию продуктов перекисного окисления липидов в мозге от типологических особенностей поведения крыс //Бюл.экспер.биол.и мед.-1991. Т.61. - N6 . - С.568-572

138. Леонидов Н. Б. //ж. Физ.хим., 1985. т.59. №5. с. 1292-1293

139. Леонидов Н.Б., Зоркий П.М., Масунов А. Ж. физ химии 1993, т.67, №12, с.2464-2468

140. Леонидов Н.Б. Успенская С.И., Княжев В.А.// Фармация. 1996, т.45, №2, с.26-39

141. Логинова Н.В., Полозов Г.И. "Введение в фармацевтичекую химию" Минск: БГУ.- 2004.-252 с.

142. Лопатина Н.Г., Пономаренко В.В. Исследование генетических основ высшей нервной // Физиология поведения. Нейробиологические закономерности. Руководство по физиологии. Л.: Наука, 1987 С. 9—59.

143. Майстренко В.Н., Хамитов Р.З., Будников Г.К. Экологический мониторинг супертоксикантов.- М:Химия,- 1996 320 с.

144. Мак -Кроун У. в сб.: Проблемы физики и химии твердого состояния органических соединений.- М.Мир.- 1968.- с.424-428

145. Матевосян P.O., Панкратов Б.В., Алямовский С.И. ДАН СССР ,1971, т. 196, №2, с.356

146. Меньшикова Е.Б., Зенков Н.К. Антиоксиданты и ингибиторы радикальных окислительных процессов //Успехи совр. биологии — 1993. Т. 113, вып. 4. - С. 442-455.

147. Меньшикова Е.Б, Ланкин В.З., Зенков Н.К. Окислительнвй стресс. Прооксиданты и антиоксиданты. — М., 2006. 553 с.

148. Механизмы патогенеза неврозов, их патогенетическая профилактика и терапия / М. Г. Айрапетянц, Н. В. Гуляева, Л. М. Ливанова, Н. Б. Хаспекова // Стресс и экстремальные состояния: Материалы 1-го Международного симпозиума ,Феодосия, 2002. С. 19—20.

149. Машковский М.Д. Ноотропы новый класс современных препаратов. Достижения современной нейрофармакологии. Л., Медицина. 1982. стр. 107-111

150. Машковский М.Д. Вклад фармакологии в познание механизмов процессов жизнедеятельности// Методологические вопросы современной фармакологии. М., 1985, С.7-12.

151. Машковский М.Д. Лекарственный средства — М., «Медицина», 1993, 1 том-с. 132 -135.

152. Машковский М. Д. К сорокалетию современной психофармакологии // Нейропсихотропные препараты. М. 1995. С. 15-21.

153. Машковский М.Д., Глушков Р.Г., Лекарственные средства, применяемые при болезни Альцгеймера // Химико-фармацевтический журнал. Т. 35. №4. 2001.С. 3-6.

154. Меерсон Ф.З. и др. Активация перекисного окисления липидов при эмоционально болевом стрессе // Бюлл. эксп. биол. и мед. —1979. №10. -С. 404-406

155. Меерсон Ф.З. Патогенез и предупреждение стрессорных и ишемических повреждений сердца. М.: Медицина, 1984. - 272 с.

156. Меерсон Ф.З., Пшенникова М.Г. Адаптация к стрессорным ситуациям и физическим нагрузкам.- М.: Медицина, 1988.- 256 с.

157. Меерсон Ф.З. Защитные эффекты адаптации и некоторые перспективы развития адаптационной медицины // Успехи физиол. наук. 1991. -Т.22. - N2 . - С.52-90.

158. Меерсон Ф.З., Малышев И.Ю., Заморинский А.В. Генерализованное накопление стресс-белков при адаптации организма к стрессорным воздействиям // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1993. Т. 116. № 9. С. 231-233.

159. Моисеенко Т.И., Кудрявцева Л.П., Гашкина Н.А. Рассеянные элементы в поверхностных водах суши: технофилыюсть, биоаккумуляция и экотоксикология.// М.: Наука 2006 г. - 261 с.

160. Мур Дж., Рамамурти С. Тяжелые металлы в природных водах М. Мир, 1987, 286 с.

161. Незнамов Г.Г., Сюняков С.А., Давыдова И.А., Телешова Е.С. "Быстрые" и "медленные" компоненты психотропного действия препаратов с ноотропными свойствами. //Журн. неврол. и психиатр. 2000.- 100 (6)- с. 33-37.

162. Никаноров A.M., Жулидов А.В. Биомониторинг металлов в пресноводных экосистемах. СПб.: Гидрометеоиздат. - 1991 - 312с.

163. Никифоровский П. М. Фармакология условных рефлексов как метод для их изучения. Диссертация. Спб. 1910.

164. Нисс А. И. Место нейрометаболических стимуляторов (церебропротекторов) в современной систематике психотропных средств и основные виды их клинической активности // Ж. невропатологии и психиатрии им. С. С. Корсакова. 1984. № 5. С. 750-756.

165. Ничепоренко С.П. Амбулаторная токсикология. «Свинец и здоровье детей: лабораторная диагностика (дидактические материалы)». Под ред. С.П. Ничепоренко. Ст-Петербург 1999.

166. Орбели J1. А. Вопросы высшей нервной деятельности: Лекции и доклады.- М., Л.: Изд-во АН СССР, 1949.- 803с.

167. Осипов А.Н., Азизова О.А., Владимиров Ю.В. Активные формы кислорода и их роль в организме Успехи биологической химии. 1990. Т. 31. № 2. С. 180

168. Островская Р. У., Гудашева Т. А., Трофимов С.С., Сколдинов А.П. Пептидные аналоги пирацетама новая группа ноотропов. // В книге «Фармакология ноотропов» С.26-35

169. Островская Р. У., Гудашева Т. А. Выявление активности ноотропов по показателю острого угашения ориентировочной реакции // Бюлл. экспер. биол. и мед., 1991. Т. 103. № 5. С. 644-647.

170. Островская Р.У., Гудашева Т.А., Воронина Т.А., Середенин С.Б. Оригинальный ноотропный и нейропротективный дипептид Ноопепт (ГВС-111). Экспер. и клин, фармакол. -2002 65 (5)- с. 66-72

171. Остроумов С. А. Принципы анализа экологической опасности антропогенных воздействий, в том числе химического загрязнения: концепция и новые данные. // Вестник Моск. ун-та. Сер. 16. Биол. 2000. №4. С. 27-33

172. Павлов И.П. Полное собрание сочинений. М.: Издательство АН СССР, 1951. т. 2-3. кн. 2. 280 с.

173. Паранько Н.М-. Тяжелые металлы внешней среды и их влияние на иммунный статус населения /Паранько Н.М., Белицкая Э.Н., Карнаух Н.Г., Рублевская Н.И. —Днепропетровск: Полиграфист, 2002. —143 с.

174. Пахомов В.П., Чеча О.А. Стереоспецифичность лекарственных препаратов // Фармацевтическая промышленность. М., 2007, №5-6. С. 104-106

175. Петров В.И., Сажин В.А., Дейко Л.И. Изучение роли различных типов глутаматных рецепторов в пространственной памяти у крыс Бюлл. эксп. биол. и мед. - 1992.- N 6. - С. 617-619

176. Петрова М. К. Лечение экспериментальных неврозов у собак // Архив биол. наук. 1925. Т. 25. № 1-3. С. 3.

177. Потапов В. М. Стереохимия. М.,- 1988. - 700 с.

178. Прагина Л.Л., Иноземцев А.Н., Воронина Т.А., Кокаева Ф.Ф., Тушмалова Н.А. Влияние пирацетама и ницерголина на условнорефлекторную память в условиях экстремального воздействия Фармакология и токсикология. 1990. Т. 53. -№ 3 - С. 8-10.

179. Привалова Л. И. Кацнельсон Б. А, Гурвич В. Б., Малых О. Л., Воронин С. А и др. Свинец в среде обитания как фактор риска для здоровья населения. Российский Химический Журнал. -2004.- Том XLVII1 № 2-с.89-93

180. Привалова Л.И., Кацнельсон Б.А., Кузьмин С.В. и др. «Экологическая эпидемиология: принципы, методы, применение». Екатеринбург, 2003. - 276 с.

181. Прихожан А.В., Ковалев Г.И. // Бюлл. эксперим. биологии и медицины. 1986. Т. 102. № ю. С. 440.

182. Пурмаль А.П. Физико-химические основы процессов в водных средах // Экологическая химия водной среды. -1988.-Т.1. С. 23-37.

183. Пурмаль А.П. Техногенные токсиканты. 1999 - Энергия: экономика, техника, экология. - 1999. - N 2. - С. 33-39.

184. Пшенникова М. Г. В кн.: Актуальные проблемы патофизиологии (избранные лекции). М.: Медицина, 2001. С. 220-353.

185. Раевский К.С., Георгиев В.П. Медиаторные аминокислоты: нейрофармакологические и нейрохимические аспекты. М., 1986; 240 с.

186. Рахманкулова Ч. X., Гарибова Т. Д., Воронин К. Э. и др. Эффекты пирацетама при длительном применении в эксперименте // Фармакол. и токсикол.- 1985. № 4.- С. 42-46.

187. Реймерс Н. Ф. Экология (теории, законы, правила принципы и гипотезы) — М.: Журнал «Россия Молодая» , 1994 — 367 с.

188. Ревич Б.А. Здоровье населения в контексте загрязнения окружающей среды. // Экологический вестник, 1993, 2: 11-15.

189. Ревич Б.А. Биомониторинг свинца как показатель свинцовой экспозиции // Свинец и здоровье детей: дианостка, лечение, профилактика. С.Петербург, 1999: 76-85.

190. Ревич Б.А. Об особенностях эколого-эпидемиологического изучения специфических экологически обусловленных изменений состояния здоровья человека. Гигиена и санитария: - 2001. - N5.- С.49-53.

191. Ревич Б.А. К определению перечня приоритетных загрязняющихвеществ в окружающей среде городов России. Токе. Вест. - 2002 - 35 — с. 6-12.

192. Ревич Б.А., Авалиани, С.А., Тихонова Г.И.Экологическая эпидемиология (под ред. Ревича Б.А.).- М.: Центр «Академия»-2004 -384 с.

193. Ревич Б.А., Сидоренко В.Н. Методика оценки экономического ущерба здоровью населения от загрязнения атмосферного воздуха. М.: Акрополь, ЦЭПР, 2006. - 96 с.

194. Румянцева С. А. Федин А. И., Болевич С. Б., Силина Е. В. Свободнорадикальные процессы и их коррекция при геморрагическом инсульте // Неврологический журнал. 2007. - N 5. - С. 51-56

195. Сакодынский К.И., Бражников В.В., Волков С.А. Зельвенский В.Ю., Ганкина Э.С. Шатц В.Д. Аналитическая хроматография.// Под ред. К.И. Сакодынского, В.В.Бражникова, С.А.Волкова и др. М.: Химия.- 1993,464 с.

196. Сажин В.А., Яницкая А.В., Кулешова И.Л., Озеров А.А. // Изучение процессов ВАК в процессах памяти. Волгоград. 1992. Вып. 1. Т. 42. С. 44-50.

197. Саприн А.Н., Калинина Е.В. Окислительный стресс и его роль в механизмах апоптоза и развития патологических процессов // Успехи биол. химии. 1999. - Т.39. - С. 289-326.

198. Селиванова А.Т., Голикова С.Н. Холинергические механизмы высшей нервной деятельности. Л.: Медицина. 1975

199. Селье Г. Очерки об адаптационном синдроме. М.: Медицина. - 1960 г. -254 с.

200. Сидоренко С.Н. Черных Н.А. Экологический мониторинг токсикантов в биосфере.- Изд-во РУДН.- 2003.- 430стр.

201. Симонов П.В. Эмоциональный мозг. М. Изд.-во: Наука, 1981. 215 с.

202. Симонов П.В. Мотивированный мозг. М. Изд.-во: Наука, 1987. 269 с.

203. Симонов П.В. Мозговые механизмы эмоций// Журн. высш. нервн. деят. 1997. Т.47. № 2. С. 320-328.

204. Скальный А.В., Есенин А.В. Мониторинг и оценка риска воздействия свинца на человека и окружающую среду с использованием биосубстратов человека//Токсикол. вестн. 1996. №6. С. 16—23.

205. Скальный А.В., Быков А.Т., Скальная М.Г. и др. Выявление коррекции нарушений обмена макро- и микроэлементов. Методические рекомендации #41. Правительство Москвы. М. 2000.

206. Скальный А.В. Химические элементы в физиологии и экологии человека. М.: ОНИКС XXI век - Мир, 2004. - 215 с.

207. Скурлатов Ю.И., Дука Г.Г., Эрнестова J1.C. Процессы токсикации и механизмы самоочищения природной воды в условиях антропогенноых воздействий // Изв. АН МССР, сер. биол. и хим. наук. 1983.- №5. С. 3 -20.

208. Скурлатов Ю.И. Основы управления качеством природных вод // Экологическая химия водной среды. -1988. -М. -Т.1 С.230 - 255

209. Скурлатов Ю.И., Дука Г.Г., Мизити А. Введение в экологическую химию. М.: Высшая школа. 1994. 400 с.

210. Сланина 3., Теоретические аспекты явления изомерии в химии. // пер. с чеш., М.: «Мир», 1984, 166 с.

211. Сливкин А.И. Физико-химические и биологические методы оценки качества лекарственных средств, 1999, 368 стр.

212. Снакин В. В. Свинец в биосфере //ВестникРАН. 1998- том 68, № 3 - с. 214224

213. Соколов В. И., Введение в теоретическую стереохимию, М.: "НАУКА".-1979. 243 с.

214. Солдатенков А.Т. Основы органической химии лекарственных веществ. —М.: Химия, 2001. — С. 11. — 192 с.

215. Соловьев Г.А., Гумаргалиева К.З., Иноземцев А.Н., Бокиева С.Б., Чопикашвили J1.B. // Химическая физика. 2000. Т. 19. № 10. С. 112-115.

216. Стандарты и целевые показатели качества воды // Обз.инф. Экол. экспертиза / М.: ВИНИТИ, 1999. №4. -С. 42-72.

217. Стыскин Е.Л., Ициксон Л.Б., Брауде Е.В. Практическая высокоэффективная жидкостная хроматография. М.: Химия, 1986. 288 с.

218. Судаков К.В. Новые акценты классической концепции стресса. // Бюл. Экспер. Биол. и Мед. 1997. Т. 23. № 2. С. 124-130.

219. Суслина 3. А., Максимова М. Ю, Федорова Т. Н. Оксидантный стресс и основные направления нейропротекции при нарушениях мозгового кровообращения, // Неврологический журнал. 2007. - N 4. - С. 4-8

220. Татаринова Л.И. Структура твердых аморфных и жидких веществ.// М.: Наука, 1983. 152 с.

221. Трахтенберг И.М., Колесников B.C., Луковенко В.П. Тяжелые металлы во внешней среде (современные гигиенические и токсилогические аспекты) Минск.: «Наука и техника» - 1994 - 285с.

222. Трахтенберг И.М., Тычинин В.А., Талакин Ю.Н., Лампека Е.Г., Остроухова В.А., Покровская Т.Н., Юречко Е.И. К проблеме носительства тяжелых металлов //Журнал АМН Украши. 1999, 5, № 1, С. 87-95

223. Трахтенберг, И.М. Тяжелые металлы и клеточные мембраны: обзор литературы. // Мед. труда и промыш. Экология 1999-№11 — с.28-32

224. Трахтенберг И.М. Книга о ядах и отравлениях. Очерки токсикологии. Киев, "Наукова думка". -2000. 366 с.

225. Трахтенберг И.М., Короленко Т.К., Утко Н.А. Свинец и окислительный стресс // Совр. пробл. токсикол. —2001. —№4. —С. 50—54.

226. Трахтенберг И.М., Коршун М.Н., Коршун М.М., Козлов К.П. // Токсикологический вестник. 2008. № 6. С. 24-30.

227. Уразовский С.С. Молекулярный полиморфизм. Киев, 1956, с.336

228. Уразовский С.С. Доклады Ан СССР-1959 - т. 127, №2 - с.389

229. Ушкалова В. Н. Изучение качества основ фармацевтических препаратов. III. Применение УФ спектрофотометрии.// Хим. фарм. журн. - 1982. - № 8. - С. 103-106.

230. Физер Д., Физер М. Органическая химия: пер. с англ., в 2-х томах. М.: Химия, 1969.

231. Форощук В.П. Водоохранная деятельность и/ экологическое нормирование качества водной среды. //Гидробиол. журн.- 1989 -25, № 1 -с. 36-41.

232. Фрумин Г.Т. Оценка состояния водных объектов и экологическое нормирование. //СПб.: Изд-во Синтез, 1998 96 с.

233. Фрумин Г.Т. Экологически допустимые уровни воздействия металлами на водные экосистемы // Биол. внутр. вод. 2000. N 1. С. 125-131.

234. Хананашвили М.М. Саморегуляция поведения в норме и патологии // Современные проблемы нейробиологии. Тбилиси: Мецниеба. 1986. С. 371-372.

235. Хананашвили М.М. Информационные неврозы. М.: Медицина, 1986. С. 290.

236. Харгиттаи И., Харгиттаи М. Симметрия глазами химика. // Пер. с англ. Издательство: М., «Мир».- 1989.- 494 с.

237. Харкевич Д. А. Фармакология. М.: Медицина. 1993. 543 с.

238. Худолей В.В., Мизгирев И.В. Экологически опасные факторы. СПб.: Банк Петровский, 1996.- 186с.;

239. Чистяков В.А., Водолажский Д.И., Тимошкина Н.Н., Войнова Н.В. Экология. 2002, № 4, с. 314-316.)

240. Чопикашвили JI.B., Бобылева Л.А., Пухаева Е.Г., Руруа Ф. К. . Генетическая оценка демографической ситуации в РСО-А. //Вестн. Северо-Осетинск. гос. ун-та им. К. Хетагурова- Сер. Естеств. Науки.-Владикавказ, 2003. №2. - с. 165-169

241. Эйхлер В. 1993. Яды в нашей пище. Пер.с нем. 2-е доп. изд - М.: "Мир"- 189 с.

242. Эмануэль Н.М. Экспериментальные методы химической кинетики. 1980 (с.5-12), Под редакцией акад. Н. М. ЭМАНУЭЛЯ и проф. Г. Б. СЕРГЕЕВА Москва, «Высшая школа». 376 с.

243. Allen F. Н. The Cambridge Structural Database: a quarter of a million crystal structures and rising. // Acta Cryst. 2002. B58. pp. 380-388.

244. Altomare, C., Cellamare, S., Carotti, A., Casini, G. & Ferappi, M. X-ray crystal structure, partitioning behavior, and molecular modeling study of piracetam-type nootropics: insights into the pharmacophore 1995. // J. Med. Chem. 38, p.170-179.

245. Banks EC; Ferretti LE; Shucard DW Effects of low level lead exposure on cognitive function in children: a review of behavioral, neuropsychological and biological evidence. //Neurotoxicology 1997;18(1): p237-81

246. Barja G. Free radicals and ageing. -Trends in Neurosciences- 2004- 27- pp. 3602-3607

247. Barton D. H. R. The Principles of Conformational Analysis.//Science. 1970. -Vol. 169. №. 3945. - pp. 539 - 544

248. Bering В., Muller W.E., Arzneim-Forsh /Drug Res., 1985. V. 35. P. 13501352.

249. Bernstein J., // in Polymorphism in Molecular Crystals, IUCr Monographs on Crystallography, Clarendon Press, Oxford, 2002.

250. Bogden J.D., Oleske J.M., Louria D.V. Lead poisoning one approach to a problem that won't away .//Environ. Health Perspect.-1997.-105(12).- P. 12841287

251. Briancon, S.; Fessi, H. Polymorphism and bioavailability: solubility and bioavailability study according to active ingredients and elaborated forms or formulated products polymorphism and morphology. Fr. STP Pharma Pratiques (2003), 13(4), 215-226.

252. Brittain H. G. Polymorphism in pharmaceutical solids: Edited by Harry G. Brittain, Marcel Dekker, New York, 1999, 427 pp.

253. Brown M.J. Health effects of blood lead levels lower than 10 mg/dl in children // Am. J. Public Health. — 2004. — V. 94, № 1. — P. 8- 9.

254. Budd P., Montgomery J., Evans J., Barreiro B. Human tooth enamel as a record of the comparative lead exposure of prehistoric and modern people. // Sci. Total Environ. —2000. —V. 263. —P. 1-10.

255. Buettner G.R., Jurkiewicz B.A. Catalytic metals, ascorbate, and free radicals: combinations to avoid.// Radiat. Res.- 1996.- 145(5).- pp. 532 541

256. Byrn S. R, Stowell J. G . Drug targeting using conjugates: the importance of pharmaceutical chemistry.- Journal of drug targeting 1995 - 3(4) - p. 239241.

257. Byrn S; Pfeiffer R; Ganey M; Hoiberg C; Poochikian G Pharmaceutical solids: a strategic approach to regulatory considerations.// Pharmaceutical research 1995.- 12(7).- pp. 945-954.

258. Cannon W. The wisdom of the body. 11 Norton, New York, 1932.

259. Cavoy A., Ennaceur A., Delacour J. Effects of Piracetam on learned helplessness in rats // Physiol, and Behav. 1988. Vol. 42. P. 545-549.

260. Cebollos-Picot I. The role ofoxidative stress in Neuronal Death. 1997. Springer. 203 P.

261. Ceolin R., Agafonov, V., Ьоиёг, D., Dzyabchenko, V. A., Toscani, S. & Cense, J. M. Phenomenology of polymorphism III. The p,T diagram and stability of piracetam polymorphs. //J. Solid State Chem. 1996. -122. pp. 186194.

262. Chia S.E., Chia H.P., Ong C.N., Jeyaratnam J. Cumulative blood lead levels and nerve conduction parameters.//Occup.Med.Oxf.- 1996.-46(1).- P. 59-64.

263. Collingridge G.L, Kehl S.J, McLennan H. Excitatory amino acids in synaptic transmission in the Schaffer collateral-commissural pathway of the rat hippocampus.// J Physiol. 1983. 334. - pp. 33-^46.

264. Collindridge G. L, Watkins J.C. The NMDA Receptor.// Oxford University Press. Oxford. 1994. 455 p.

265. Copani et al. "Nootropic Drugs Positively Modulate .alpha.-Amino-3-Hydroxy-5-Methyl-4-Isoxazolepropionic Acid-Sensitive Glutamate Receptors in Neuronal Cultures" Press // J. Neurochem. 1992. V. 58. P. 1199-1204

266. Danysz, W., Zajaczkowski, W. and Parsons, C.G. Modulation of learning processes by ionotropic glutamate receptor ligands. Behav. Pharmacal. 1995.,-6.- pp. 455-74.

267. Dauber P. Hagler A.T. Acc. Chev. Res. 1980, v.13 , #4, p. 105-112

268. Dhawan M., Kachru D.N., Tandon S.K. Influence of thiamin and ascorbic acid supplementation on the antidotal efficacy of thiol chelators in experimental lead intoxication/ Arch .Toxicol., 1988; 62(4): 301-304

269. Doble A. New insights into the mechanism of action of hypnotics //J.Psychopharmacol. 1999. - V.13, 4(Suppl.l). - P. 11-20.

270. Dwoskin L.P., Crooks P.A. // JPET. 2001.V. 298. P. 395

271. Dawson E.B., Evans D.R., Harris W.A., Teter M.C., McGanity W.J. The effect of ascorbic acid supplementation on the blood lead levels of smokers. // J. Am. Coll. Nutr. —1999. —V. 18. —P. 166-170.

272. Deng W., Poretz R.D. Protein kinasa С activation is required for the lead induced inhibition of proliferation and differentiation of cultured obligodendro progenitor cells // Brain Res. — 2002. —V. 929. — P. 87-95.

273. DeMatos LL, Williams AC, Booth SW, Petts CR, Taylor DJ, Blagden N. Solvent influences on metastable polymorph lifetimes: Real-time interconversions using energy dispersive X-Ray diffractometry // J. Pharm. Sci., 2007.- 96(5).-pp. 1069-1078.

274. Devis M. В., Austin J., Partridge D. A. Vitamins C. Its Chemisrty and Biochemisrty, Royal Society of Chemisrty, Cambridge, 1998,168 p.

275. Dubinskaya A.M. Mechanochemical transformations in organic substances. Chemistry Reviews, 1998, V.23, p. 201-261

276. Dwoskin L.P., Crooks P.A. Competitive neuronal nicotinic receptor antagonists: a new direction for drug discovery. // J Pharmacol. Exp. Ther. 2001.V. 298. P. 395-402

277. El-Missiry M.A. Prophylactic effect of melatonin on lead-induced inhibition of heme biosynthesis and deterioration of antioxidant systems in male rats. // J. Biochem. Mol. Toxicol. —2000. —V. 14.-P.57-62.

278. Enviromental Health Criteria 134. Cadmium. World Health Organization. -Geneva; 1992. -280 p.

279. Fabbiani, D. R. Allan, A. D. Dawson, W. I. F. David, P. A. McGregor, I. D: H. Oswald, S. Parsons and C. R. Pulham. Pressure-induced formation of a solvate of paracetamol // Chem. Commun., 2003, pp. 3004-3005

280. Fabbiani, D. R. Allan, W. I. F. David, S. A. Moggach, S. Parsons and C. R. Pulham, High-pressure recrystallisation—a route to new polymorphs and solvates// CrystEngComm, 2004, pp. 504-511.

281. Fabbiani, F. P. A., Allan, D. R., Marshall, W. G., Parsons, S., Pulham, C. R. Smith, R. I. An exploration of the polymorphism of piracetam using high pressure //CrystEngComm, 2005. 7 - pp. 179 -186

282. Fernandez-Teruel A. , Escorihuela, R.M., Driscoll, P., Tobena, A., Battig, K., Infantile (handling) stimulation and behaviour in young roman high- and low-avoidance rats.// Physiol. Behav. 1991. -50.- pp. 563-565

283. Fernandez-Teruel A., Escorihuela, R.M., Driscoll, P., Tobena, A., Battig, K., Differential effects of early stimulation and/or perinatal flumazenil treatment in young Roman low- and high-avoidance rats. Phychopharmacology. 1992. 108.-pp. 170-176

284. Finkelstein Yoram, Markowitz Morri E, Rosen Yohn F. Low —level leadinduced neurotoxicity in children. An update on central nervous system effects // Brain Res. Rev. —1998. —27, №2. —P. 168—176.

285. Finch C.C., Cohen, D. M., Aging, Metabolism, and Alzheimer's Disease: Review and Hypothesis. Exp. Neurol 1997-143- pp.82-102.

286. Francis P.T. et al. // J. Neurol. Neurosurg. Psychiatry. 1999. V. 66. P. 13

287. Flora G.J., Seth P.K. // Cytobios. 2000. V. 103. P. 103-109.;

288. Forst L., Persky V., Freels S., Williams R., Conroy. Lead exposure in ironworkers.-Am.J.Ind.Med.- 1997 Nov.- 32(5).- P.540-543.

289. Frei В., Stocker R., Ames B.N. (1988) Antioxidant defenses and lipid peroxidation in human blood plasma // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1988. 85. P. 9748-9752.

290. Frei В., Gaziano J.M. Content of antioxidants, preformed lipid hydroperoxides and cholesterol as predictors of the susceptibility of human LDL to metal ion-dependent and independent oxidation // J. Lipid Res. 1993. 34. P. 2135-2145

291. Fred W.J., Cannon-Spoor H.E. // Psychopharmacology. 1990. Vol.101. P. 454-464.

292. Galdecki Z., Glowka M.L. Crystal-structure of nootropic agent, piracetam-2-oxopyrrolidin-l-yla- cetamide. Pol J Chem. 1983. 57: 1307-1312.

293. Gallagher M. Robinson et al. // Psychobiol. 1990. V. 18. N 3. P. 258-260.

294. Giurgea C.E. Vers une pharmacology de 1'active entegrative du cerveau. Tentative du concept nootrope en psychopharmacologie // Actual. Pharmacol. 1972. Vol. 25. P. 115-156.

295. Giurgea C., Mouravieff-Lessuisse F. // J. Pharmacol. 1972. Vol.3. P. 17-30.

296. Giurgea C.E. The nootropic concept and its prospective implications // Drugs Develop. Res. 1982. V. 2. P. 441-446.

297. Giron, D. Characterization of salts of drug substances. Journal of Thermal Analysis and Calorimetry (2003), 73(2), 441-457.

298. Glickstein S. Hof PR, Schmauss С et al. Mice lacking dopamine D2 and D3 receptors have spatial working memory deficits. // J. Neurosci. 2002. V. 22. № 13. P. 5619-29.

299. Gouliaev A., Sennind A. Piracetam and other structurally related nootropics // Brain Res. Rev. 1994. V. 19. P. 180-222.

300. Grigg J. Environmental toxins: their impact on children'shealth // Arch. Dis. Child. —2004. — V. 89. — P. 244- 250.

301. Guilarte T.R., Toscano C.D., McGlothan J.L., Weaver S.A. Environmental enrichment reverses cognitive and molecular deficits induced by developmental lead exposure // Ann. Neurol. —2003.— V. 53. — P. 5056.

302. Gupta A., Gupta Ai., Shukla G.S. Development of brain free radical scavenging system and lipid peroxidation under the influence of gestational and lactational cadmium exposure // Hum. Exp. Toxicol. —1995. —V. 14, N5.—P. 428—433.

303. Haleblian J., Mc.Crone W. Pharmaceutical applications of polymorphism.// J. Pharm.Sci. 1969.- v.58.- #8 - p.911-929

304. Haleblian, J. К. Characterization of habits and crystalline modification of solids and their pharmaceutical applications.// J. Pharm. Sci. (1975). 64. -pp. 1269-1288

305. Halliwell B. The antioxidant paradox //Lancet.- 2000- 355(9210),pp. 1179 1180

306. Hansch C., Leo A. // Exploring QSAR. Fundamentals and Applications in Chemistry and Biology. / American Chemical Society. Washington, 1995.

307. Hartwig A. Role of DNA Repair inhibition in lead and cadmium-induced genotoxicity: a review // Environ. Health Perspect. —1994.- V. 102, Suppl.

308. Наппап A.W., Maxwell M.J. An evalution of the role of calcium in cell injury. Ann. Rev. Pharmacol. Toxicol., 1995; 35; 129-144

309. Harriott N. , Price S. Validation of a search technique for crystal structure prediction of flexible molecules by application to piracetam// Acta Cryst.-(2005). B61, 558-568

310. Harvey J.A. Role of the Serotonin 5-HT2A Receptor in Learning Learn. Mem., // Learn. Mem.- 2003. V. 10(5).- P. 355. - 362

311. Havelaar I., De Gast S., Snijders B. Characterization of a heavy metal ion transporter in the lysosomal membrane // FEBS Letters. —1998. —V. 436. — P. 223—227.

312. H. Van Hoof, Nootropil: Basic Scientific and Chemical Data.- Medical Profession Prepared Pharmaceutical Division, Brussels -1980.

313. Ito Y., Niiya Y., Kurita H:, Shima S., Sarai S. Serum lipid peroxide level and blood superoxide dismutase activity in workers with occupational exposure to lead. // Int. Arch. Occup. Environ. Health. —1985. —V. 56 P. 119-127.

314. Ito I, Tanabe S, Kohda A, Sugiyama H Allosteric potentiation of quisqualate receptors by a nootropic drug aniracetam. //J Physiol.1990,- 424.-pp. 533543

315. Kern M., Audsirk G. Stimulatory and inhibitory effects of inorganic lead on calcineurin // Toxicology. — 2000. — V. 150. — P. 171-178.

316. Khalil N., Morrow L. A., Needleman H. et al. Association of cumulative lead and neurocognitive function in an occupational Cohort //Neuropsychology.-2009. Vol. 23. -No. 1. -pp. 10-19

317. Krinsky N.L. Membrane antioxidants // Ann. NY. Acad. Sci. 1988. 551. P. 17-33.

318. Krop J.J. Clinical ecology and its role in diagnosis of chronic diseases caused by environmental pollution. Indoor air pollution as a major factor. J.Folia Med Cracov. 1993. V.34. N1-4. P.105-119

319. Kuhnert-Brandstatter, M. Polymorphie von Arzneistoffen und ihre Bedeutung in der pharmazeutischen Technologie. Informationsdienst A.P.V. 1973.- № 19, pp . 73-90 Kuhnert-Brandstatter M., A. Burger and R. Vollenkee, Sci. Pharm., 1994.- 62, pp. 307-316.

320. Lan W.K., Yeung C.W., Lui P.W. Different trends in modulation of NMDAR1 and NMDAR2 gene expression in cultured cortical and hippcampal neurons after lead exposure // Brain Res. —2002. — V. 932. — P. 10-24.

321. Land H.M. Life stress and ecological status:predictors of symptoms in schizophrenic veterans. //Health Soc Work. 1998. V.ll. N4. P.254-264.

322. Lanphear В., Burgoon D., Rust S. et al. Environmental exposures to lead and urban children's blood lead levels . // Environ. Res. A. 1998. Vol. 76, № 2 , P. 120—130. (

323. Legare M.E., Barhomi R., Burghardt R.S. Low-level lead exposure in cultured astroglia: identification of cellular targets with vital fluorescent process. Neurotoxicol.,1993; 14(2-3); 267-72.

324. Leusen F.J. In: AAPS FDA Workshop on Polimorphism of Drug

325. Substances, Arlington, 1996/

326. JLidsky T.L., Schneider J.S. Lead neurotoxicity in children basic mechanisms and clinical correlates // Brain. — 2003. —V. 126. — P. 5-19.

327. Ьоиёг D., Louer, M., Dzyabchenko, V. A., Agafonov, V. & Ceolin. Structure of a metastable phase of piracetami from X-ray powder diffraction using the atom-atom potential method Acta Crystallogr., Sect. В - 1995, 51, 182-187

328. Lockitch G. Perspectives on lead toxicity. Clin.Biochem., 1993; vol.26; 371381.

329. Mameli O., M.A.Caria, F.Metis, A.Solinas, C.Tavera, A.Ibba, M.Tocco, C.Flore, F. Sanna Randaccio. Neurotoxic effect of lead at low concentrations // Brain Research Bulletin. 2001. - Vol. 55, № 2. - P. 269-275.),.

330. Malis C.D., Bonventre J. Susceptibility of mitochondrial membrans to calcium and reactive oxygen species: implication for ishemic and toxic tissue damage. Pros.Clin.Biol.Res., 1988; 282; 235-259.

331. Markowska A., Buresova O., Bures J. // Behav. Neural. Biol. 1983. Vol. 38. P. 97-112.

332. Markowitz M.E., Clemente I., Rosen J.F. Children with moderately elevated blood lead levels: a role for other diagnostic tests?// Environ. Health Perspect.-1997.-105(10).- P. 1084-1088

333. Marchi M., Besana E., Raiteri M. // Europ. J. Pharmacol. 1990. V. 185. P. 247-249.

334. Martel J., Marion M., Denizenu F. Effect of cadmium on membrane potential in isolated rat hepatocyles. Toxicol., 1990; 60; 161-172.

335. Means LW, Franklin RD, Cliett CE. 1980. Failure of piracetam to facilitate acquisition or retention in younger or older rats. // Exp Aging Res. V.6. № 2. P.175-180.

336. Mesulam M The Cholinergic Lesion of Alzheimer's Disease: Pivotal Factor or Side Show? // Learn. Mem. 2004. V. 11. P. 43.

337. Mezzetti A., Guglielmi M. D., Pierdomenico S. D. et al., Increased syntematic oxidative stress after elective endarterectomy: relation to vascular healing and remodelling // Arterioscler Thromb Vase Biol 1999 - Vol. 19 - P. 26592665

338. Minnema D.G., Michelson I.A., Cooper G.P. Calcium efflux and neurotransmitter release from rat hippocampal synaptosomes exposed to lead. Toxicol.Appl.Pharmacol., 1988; 92; 351-357.

339. Monaghan DT, Cotman CW. Distribution of N-methyl-D-aspartate-sensitive L-3H.glutamate-binding sites in rat brain.// J Neurosci. 1985.- 5(11 -pp. 2909-2919.

340. Mondadori C, Ducret T, Borkowski J. 1989. The memory-enhancing effects of the piracetam-like nootropics are dependent on experimental parameters. // Behav Brain Res. V.33. № 1. P. 79-82.

341. Mondadori C., Weiskrantz L., Buerki H. et al. NMDA receptor antagonists can enhance or impair learning performance in animals./- Exp. Brain Res.-1989. -Vol. 75.- P. 449-456;

342. Morrow Naila Khalil Lisa A., Needleman Herbert, Evelyn O. Talbott, John W. Wilson, and Jane A. Cauley. Association of Cumulative Lead and Neurocognitive Function in an Occupational Cohort//Neuropsychology 2009, Vol. 23, No. 1,10-19

343. Miiller, W.E., Eckert, G.P. and Eckert, A., Piracetam: novelty in a unique mode of action. Pharmacopsychiatry.-1999. 32.- pp. 2-9.

344. Naarala, J.T., Lovikkanen, J.J., Ruotsalainen, M.H., and Savolainen, K.M., Lead amplifies glutamate-induced oxidative stressio// Free Radic. Biol. Med.-1995.- 19(5)- pp. 689-693.

345. Nakagawa K., Asami M. Lack of correlation between lysosomal enzyme activity and ascorbic acid content in brain of lead-treated animals // Toxicol. Lett. —1986. —V. 30, N3. —P. 219—222.

346. Needle S., Kuhbrand W, Achari // J. Acta. Cryst. 1976, v.B32 p.1850

347. Nowell Harriott, Price Sarah L. Validation of a search technique for crystal structure prediction of flexible molecules by application to piracetam.-Acta crystallographica.- Section B, Structural science -2005- 61(5)- pp.55868.

348. Oberto A., Marks N., Evans H.L., Guidotti A. Lead (Pb2+) promotes apoptosis in newborn rat cerebellar neurons: pathological implications // J. Pharm. And Exp. Therapeutics. —1996, —V. 279, № 1. —P. 435-442.

349. Orrenius S., McCoukey D.J., Bellomo G. Role of Ca2+ in toxic cell killing. Trends Pharmacol.Sci., 1989- 10- pp. 281-285.

350. Orrenius S; McConkey DJ; Nicotera P. Role of calcium in toxic and programmed cell death. Advances in experimental medicine and biology 1991- 283- pp. 419-25.

351. Packer L., Fuchs J. Vitamin С in Health and Disease. // NY: Health & Fit., 1997. 538 p.

352. Parent M.B., Baxter M.G M Septohippocampal Acetylcholine: Involved in but not Necessary for Learning and Memory? // Learn. Mem. 2004. V. 11. P. 9.

353. Parsons, C.G., Danysz, W. and Quack, G. Glutamate in CNS disorder as a target for drug development. An update. //Drug News Perspect. 1998. 11.-pp. 523-69.

354. Pepeu J., Giovannini M.L. Processes Changes in Acetylcholine Extracellular Levels During Cognitive.// Learn. Mem. 2004. V. 11. P. 21 -27.

355. Personclle J., Bolivar de Souza Pinto E., Ruiz R. O., Injection of vitamin A acid, vitamin E., and vitamin С for treatment of tissue necrosis // Aesthetic Plast Surg 1998 - Vol, 22 - P. 58-64

356. Pohle W., Becker A., Grecksch G. et al. Piracetam prevents pentilenetetrazol kindling-induced neuronal loss and learning deficits // Seizure. -1997.-V.6.-№ 6. -P. 467-474.

357. Pounds J.G., Long G.J., Rosen J.F. Cellular and molecular toxicity of lead in bone. Environ.Health.Perspect., 1991; 91; 17-32.

358. Rice D. C. Developmental lead exposure: neurobehavioral consequences. In: Handbook of Developmental Neurotoxicology (Slikker W, Chang LW, eds). San Diego, CA:Academic Press- 1998. pp. 275-284.

359. Renberg 1., Person M.W., Emteryd O. Pre-industrial atmospheric lead contamination detected in Swedish lake sediments.//Nature.—1994.— V.368.—P.323-326.

360. Retsky K.L., Freeman M.W., Frei B. Ascorbic acid oxidation product(s) protect human low density lipoprotein against atherogenic modification // J. Biol. Chem. 1993. —268. P. 1304-1309.

361. Sansone, M. Oliverio A. Avoidance facilitation by nootropics. Prog. Neuropsychopharmacol. Biol. Psychiatry. 1989. - 13 Suppl. - P. 89-97.

362. Sandhir, R., Julka, D., and Gill, K.D. Lipoperoxidative damage on lead exposure in rat brain and its implication on membrane bound enzymes. -Pharmacol. & Toxicol.- 1994- 74(2)-pp. 66-71.

363. Sandhir R., Gill K.D. Effect of lead on lipid peroxidation in liver of rats // Biol. Trace Elem. Res. — 1995. — Vol. 48. — № 1. — P. 91-97.

364. Schaich K.M. Metals and lipid oxidation. Contemporary issues. Lipids, 1992; 27(3): 209-18.

365. Schwartz, B. S., Lee, В. K., Bandeen-Roche, K., Stewart, W., Bolla, K., Links, J., et al. Occupational lead exposure and longitudinal decline in neurobehavioral test scores. Epidemiology. 2005. - 16, 106-113.

366. Selye H. A syndrome produced by diverse nocuous agents // Nature. 1936.138: №3479. p. 32

367. Selye H., The Evaluation of the Stress Concept.// New Sci., 1993: 61:652-99.

368. Shargel L, Wu-Pong S, Yu Y, eds. Biopharmaceutic Considerations in drug product design. Applied Biopharmaceutics and Pharmacokinetics. 5th ed. New York: McGraw-Hill.- 2005. pp. 342-343.

369. Sharma A.C., Kulkarmi S.K. // Prog. Neuropsychopharmacol. Biol. Psychiatry. 1992. V. 16. P. 117-125.

370. Shih, R. A., Ни, H., Weisskopf, M. G., Schwartz, B. S. Cumulative lead dose and cognitive function in adults: A review of studies that measured both blood lead and bone lead. Environmental Health Perspectives. -2007. -115, pp. 483492.

371. Shiotani, Т., Yoshii, M. Evidence for DNA protection by the nootropic nefiracetam observed in. //Behav Brain Res. 2000- 115(1): 65

372. Smith M.A., Grant L.D., Sors A.I. (Eds). Lead Exposure and Child Development. USA 1989; 129-147, 475-476.

373. Sohn Y. Т., Effect of crystal form on bioavailability. J. Kor. Pharm. Sci. 2004. 34, pp. 443-452

374. Soldin O.P. Blood lead concentrations in children: new ranges // Clin. Chim.

375. Acta. — 2003.— V. 327, № 1-2. — P. 109-113. 374. Staduli U., Kessler M., Lynch G. // Psychobiology. 1990. V. 18. N 4. P. 377381

376. Stewart, W. F., & Schwartz, B. S. Effects of lead on the adult brain:A 15-year exploration.// American J. of Industrial Medicine. 2007. - 50- pp. 729-739.

377. Streek, J., Motherwell, S. Searching the Cambridge Structural Database for polymorphs. //Acta Cryst. 2005.- B61. pp. 504-510

378. Tinsley MR, Quinn JJ, Fanselow MS. The role.of muscarinic and nicotinic cholinergic neurotransmission in aversive conditioning: comparing Pavlovian fear conditioning and inhibitory avoidance.:35-42 // Learn. Mem. 2004. V. 11. P. 35-42

379. Tissot M., Sarfati G., Roch Arveiller M., et al. //. Biochem. Pharmacol. 1999. Vol.57. N2. P. 163-170

380. Veselovsky A.V., Ivanov A.S. Strategy of computer-aided drug design. Current Drug Targets -Infectious Disorders. 2003. № 3, pp. 33-40.

381. Viarengo A., Nicotera P. Possible role of Ca2+ in heavy metals cytotoxicity. Comp.Biochem.Physiol., 1991; 100C(l/2): 81-84.

382. Windisch M. Cognition-Enhancing (Nootropic) Drugs: Brain mechanisms and psychotropic drugs.— New York London Tokyo, 1996. : CRC Press — P. 239-257.

383. Zetterstrom R. Child health and environmental pollution in the Aral Sea region in Kazakhstan//Acta Paediatr Suppl. 1999. V.88. N429. P.49-54.

Информация о работе

Карпухина, Ольга Вячеславовна
кандидата биологических наук
Москва, 2009
ВАК 03.00.16

Диссертация

Формирование и нарушение адаптивных реакций крыс в стрессогенных условиях при комбинированном воздействии диацетата свинца и пирацетама - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы