Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Флавонидные соединения листьев и плодов фейхоа

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Флавонидные соединения листьев и плодов фейхоа"

¡27 и А

• • .. > АКАДЕМИЯ НАУК РЕСПУБЛИКИ.ГРУЗИЯ

ИНСТИТУТ БИОХИМИИ'РАСТЕНИЙ им.С.В'.ДУРМШВДЗЕ,

На правах рукописи

ВАЩДЗЕ Майя Резоевна

УДК 581.577.124.4:634.424.«

ФЛАВОНОВДНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ ЛИСТЬЕВ И ПЛОДОВ ФЕЙХОА

Специальность 03.00.04 - Биохимия

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

кандидата биологических наук

*

Тбилиси, 1992

Раоота вшолдаца в Института биохимии ¿астений им. C.B. JÜ мишедзё All ресиублики Грузия и в научно-иссяедоватеьском Инстш те чая, субтропических культур и чайной ироишшзшюсти

Научный руководитель - доктор-биологических наук,

Шапашшш Л.Г.

0|.ицйалыше оппоиентц -. доктор биологических наук- ,

профессор Г.Н.Прувдзе

кандидат химических наук, БАРБАКАДЗЕ В.В.

Ведущая организация - Грузинский институт субтропическс

хозяйства

Защита состоится —мая--2992 года в — ч.

на заседании Специализированного совета К 007.04.01 в Институте онои» растений All Республики Грузия.

380Ü5J, Тбилиси, Аллея Давида Агмашенебели, Ю_й км.

С диссертацией ыохно ознакомиться в библиотеке. Института биохимии растений АН Республики Грузия.

автореферат разослан 7 апреля 19 У 2 г.

Ученый секретарь

Специализированного совета

KaiuiuaT биологических наук

М.В.ЕЩЩШМИВШ

! - з -

i Актуальность проблемы. Среди субтропических растений, культивируемых в Грузии-весьма ценной является фейхоа (peijoa sellawi-

- - - 4

ana Bars ). Фейхоа представляет собой важное сырье для консервной промышленности. Из ее, плодов готовят варенья, компоты, мармелад, желе, джем и тонизирующие напитки. Плоды широко используются в медицине при лечении сердечно-сосудистых заболеваний.

За последнее время во многих странах мира, ведутся исследования по выведению новых высокоурожайных и высококачественных сортов фейхоа. Биохимическая характеристика плодов фейхоа определяется содержанием Сахаров, органических кислот, пектиновых веществ, йода, летучего комплекса, витамина С и т.д. В то же время,' флавоноидные соединения, обладающие лечебно-диетическими свойствами, а также участвующие в формировании вкусовых качеств плодов, оставались малоизученными.

Изучение флавоноидного состава плодов и листьев фейхоа, даст возможность рационально использовать в качестве сырья для консервной промышленности. Флавоноицный состав также можно использовать в качестве биохимических маркеров в селекционно-генетических исследованиях при выведении новых сортов фейхоа.

Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы явилось изучение флавонидного состава листьев и плодов фейхоа. В связи с этим предусматривалось решение следующих поставленных задач:

- выделение и идентификация флавоноидных соединений из листьев и плодов фейхоа;

- изучение содержания и количественных изменений флавоно-лов, катехинов и лейкоантоцианидинов в листьях фейхоа в течение вегетации и при технологической переработке плодов;

- исследование качественного состава флавоноидных соединений разных сортов фейхоа;

- использование метода жидкостной хроматографии высокого

давления (НХВД) для разделений флавонолов, катехинов и фене боновых кислот фейхоа.

Научная новизна. Исследован флавоноиднь'й состав листье плодов 4-х сортов фейхоа. Из этих растений выделено и идент цировано II соединений, которге представлены флавонолами, к хинами и лейкоантоцианидинами. Показано, что при изучении д мики накопления флавонолов, катехинов и лейкоантоцианидинов 4-х сортах фейхоа наблюдаются два максимума. При этом, перв них приходится на конец цветения (июль), а второй на фазу с вания плодов (октябрь). Показана возможность применения мет жидкостной хроматографии высокого давления для разделения ф. нолов, катехинов и фенолкарбоновых кислот фейхоа.

Практическая ценность работы. Изучение химического сосг. флавоноидных соединений листьев и плодов фейхоа даст возмото усовершенствовать технологические схемы их переработки, соз,1 условия для максимального сохранения в- продуктах переработм логически активных соединений.

Апробация работы. Материалы диссертации докладывались и сужцались на втором съезде Всесоюзного общества физиологов р тений (Минск, 1990), на республиканской конференции по эколо ческим вопросам (Цхалтубо, 1989), на семинаре лаборатории фе нта соединений Института биохимии растений АН Республики Гру (Тбилиси, 1991), на ученом совете НПО по чаю и субтропически культурам и ЧП (Оэургети, Анасеули, 1991).

Публикации. Основные научные результаты диссертации изл< кены в б публикациях.

Структура и объем работы. Диссертация состоит из введен! обзора литературы, экспериментальной части (включающей описа! методов исследования, результаты и их обсуждение1, выводов и списка цитируемой литературы. Работа содержит 37 рисунков и I

таблиц. Список литературы включает 207 источника, в том числе 100 иностранных.

ОБЪЕКТЫ И МЕТОД! ИССЛЕДОВАНИЯ

Объектами исследования служили листья и плоды 4-х сортов фейхоа (ре^оа ае11<ж1апа Веге 1 Чойсеана, Аллегро, Арго и Ча-нури. Образцы растительного материала собирали на опытном участке НПОЧСКиЧП.

Для инактивации ферментов растительный материал обрабатывали водяным паром в течение I минут и затем высушивали при комнатной температуре и измельчали. Экстракцию флавонолов осуществляли 80^-ным метанолом, а катехины и лейкоантоцианидины извлекали зтилацетатом. Экстракцию проводили на кипящей водяной 5ане с обратным холодильником. Экстракты упаривали в вакууме. Зоцный раствор,4полученный после упаривания 80^-ного метаноль-юго экстракта с целью удаления хлорофилла, каротиноидов и других липофильных веществ, многократно промывали хлороформом, фракционирование и выделение флавоноицных соединений проводили ¡а колонках полиамида, силикагеля и на пластинках микрокристал-гической целлюлозы (Тюкавкина и др., 1978; ¿¡аг^ат , 19751. Для юнтроля за ходом ялюции флавоноидов с колонок применяли реак-[ию с метанольным раствором КОН. Качественный состав фракции нализировали методом хроматографии на бумаге (БХ\ тонкослой-:ой хроматографией (ТСХ) на пластинках силикагеля Силуфол УФ 254 ЧСФР) и целлюлозы. С целью обнаружения флавоноидов хроматограм-ы просматривали в У^-свете. ^лавонолы проявляли Г£-ным раство-ом А1С1з в метаноле, катехины и лейкоантоцианидины - Й-ным аствором ванилина в соляной кислоте.

Наличие свободной гицроксильной группы у С-3 молекулы фла-эноида определяли по развивающейся желтой окраске с нитратом

цирконила и лимонной кислотой (Horhaamer t ..'agner , 1962 \ ДJ идентификации флавоноидов применяли кислотный гидролиз (2 н I (ИаЬгу и др., I970-1. Анализ Сахаров проводили методом БХ. Са> ра проявляли анилинфгалатным реактивом (partridge , 1949\ Температуру плавления выделенных соединений определяли на при боре "Бозтиус".

Для обнаружения лейкоантоцианидинов использовали метод и превращения в антоцианидикы (Bate-Smith , 1958). Исследуемый препарат нагревали с 3 н HCI на водяной бане. Полученную реак ционную смесь темно-розового цвета охлаждали и в ней определи антоцианидины методом ТСХ на целлюлозе.

УФ-спектры флавоноидов снимали в метаноле, в кюветах с т щиной поглощающего слоя I см на самопищущем спектрофотометре i дели EPS- ЗТ (Hictachi , Япония). Концентрация иссле.дуемьтх ве ществ Ь-1С мкг в I мл. В качестве ионизирующих и комплексообр! ■чующих реагентов применяли насыщенный раствор плавленного аце-■"а^а натрия в метаноле, 5^-ный раствор хлористого алюминия в t таноле и разбавленный раствор соляной кислоты (Jurd , 1962;,Mi и др., 1970 \ Спектры поглощения антоцианидинов в видимой облг ти спектра снимали в 0,1^-ном растворе солянокислого метанола, ИК-спектры флавоноидов и аутентичных образцов получены не спектрофотометре моделизресога -U0 (ГДР) (Беллами, 1963; Мак-сютана, Литвиненко, 1968).

ЙЛ1Р ^С-спектры (¡iiarkham ,Mohan Chari , 1982) снимали в республиканском центре спектроскопии ядерно-магнитного резонаь. са при Институте фармакохимии АН Республики Грузия в растворах ДМСО - с^ при температуре 80°, на спектрофотометре БС-567 (тее ЧС5Р1 с резонансной частотой 25.14 МГц. В качестве внутреннего стандарта использовали ДМСО -dg, химический сдвиг которого бы принят равным 39.56 м.д. относительно тетраметилсилана.

Для разделения флавоноидных соединений также применили жидкостные хроматографы высокого давления "ЬаЪога1;ог1 ргАа^в" (ЧСФР) и "'^агг*' (США) (колонкиЭвХ -С18 иучБоп1орак С18) (К.Хос-темман, М.Хостемман,- 1988).

Количественное содержание катехинов и лейкоантоцианидинов определяли методом Swai.ii и Н1111а (1959), а количество флавоно-лов - методом (Ермаков, 1987). Калибровочные кривые были составлены по (+)-катехину, выделенному из листьев рододендрона кавказского (Шалашвили, 1967), гиперину, выделенному из листьев фейхоа и аутентичному цианидину.

С целью изучения изменения количественного содержания флаво-ноидов в процессе переработки плодов фейхоа были приготовлены: компот, варенье, джем, сушеные плоды и тонизирующий напиток в соответствии с действующими технологическими инструкциями.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Выделение и идентификация флавоноидных соединений из листьев и плодов фейхоа

Схемы фракционирования и выделения флавоноидных соединений из листьев фейхоа сортов Чойсеана и Арго приводятся на рис. I и 2.

В результате многократного хроматографирования на колонках различных сорбентов, а также в ряде случаен использования препаративной ТСХ на целлюлозе, иг* листьев фейхоа было выделено II соединений, которые на основании качественных реакций и У'5-спект-роскопии отнесены к флавонолам (вещества Т-1У), катехинам (вещества У-УШ) и лейкоантоцианицинам (вещества 1Х-Х1).

Вещество I. Кристаллы вещества I с т.пл. 248-249°, хорошо растворимы в метаноле, отаноле, гэтилацетате, воде; нерастворимы в бензоле и хлороформе. В продуктах кислотного гидролиза обнару-

Листья

| экстракция

djS-Hb'tt метанольннй як-тракт

выпаривание

водный раствор

колонка полиамида

Г~-7Т~.--71

фракция фенолкарбснов™ фракция А фракция Б фракция С 1

кислот I I 0

колонка I колонка 1

__силинагеля веще'ств0 ш (силикагеля

* I i ? . J р : ]

подфракция Ат подфракция А? подфракция Ст подфракция Со

! J I I

вещество I вещество 1У вещество II вещеттЕО III

Рис.1. Схема выделения флавонолов из листьев фейхоа сорта Чойсеана.

Листья

экстракция этилацетатный экстракт

выпаривание водный раствор

колонка полиамида

фракция Д

Фракция В

фракция Р

фракция С

препаративная

тех..

препаративная

тех

препаративная ТСХ '

нагревание с 2н НС1

I

ю

I

вещества У,УГ

вещество УИ

вещество УШ

вещества 1Х,Х,Х1

рис.2.

Схема выделения катехинов и лейкоантоцианидинов из листьев фейхоа сорта Арго.

жили флавоноловый агликон кверцетин и сахар X, -арабиноэу (табл.1

Таблица I

Хроматографическая характеристика флавонолов и катехинов, выделенных из листьев фейхоа

Наименование ЗначениеRf хЮО в системах Качественная реакция

А Б В Г Д Е ч Ж 3 А1С1о+ ванили- ани-

БХ ГУ +УФ d новый лин-

свет реактив фтала

Вещество I 84 .17 56 75 желтая

Вещество II 77 13 31 68 _н _

Вещество III 85 40 72

Вещество 1У 80

агликон I 66 39

агликон II 68 39

агликон III 68 39 _ И _

агликон 1У 66 39 _тг __

вещество У 75 37 за .красная

вещество У1 68 32 36

вещество УП 60 25 32

вещество УIII 58 23 30 _" —

кверцетин 66 39

(+)-катехин 75'37 38 .

(-)-япикате-

. хин 68 32 36

(-)-япигалло- 30

катехин 58 23 —и_

D-галактоза 25 17 корич

невая

L-арабиноза 34 25 краен

ь-ксилоза 44 46

А - н-бутанол-уксусная кислота - вода (4:1:5) Б - 2^-няя уксусная кислота В - н-бутанол-пиридин-вода (6:4:3) Г - н-бутанол-бенэол-пирицин-воца (5:1:3:3) Д - фенол насыщенный водой Е - з ти лаце тат-метанол (9:1) К - хлорофэрм-метанол-метилэтилкетон (12:2:1) 3 - хлороформ-метанол-вода (26:14:3).

- II -

Реакция вещества I с азотнокислым.цирконилом и лимонной кислотой отрицательна, а это указывает на то, что молекула ара-

бинозн присоединена к агликону и положении С-3. По данкьм У'З-

спектроскопии (табл.2) вещество I имеет свободные гидроксильные

группы в положениях С-5, С-7, С-31 и С-41. Агликон вещества I

свободные гидроксильные группы содержит в положениях С-3, С-5,

С-7, С—3"^" и С-4^. В ИК-спектре имеются полосы поглощения при

3340 (ОН-группа) и 1640 (СО & -пирона).

В ЯМР -^С-спектре (СС1^, <$,м,д.) вещества I (рис.За) наблюдаются 20 линий. Наиболее слабопольный сигнал ¿"177,8 принадлежит к резонансу углерода (С-4) карбонильной группы. Его химический сдвиг в совокупности с таковыми для С-2 (¿156,4) и С-3 (¿133,6) свидетельствует.о наличии в третьем положении вещества Г кислородсодержащего заместителя. Сравнение химических сдвигов остальных линий слабопольной части спектра с литературными данными ( НагЪогае > ЫаЬгу ) 1982) позволяет утверждать, что в качестве агликона в веществе I выступает кверцетин. В сильнополь-чой части спектра (60-90) присутствуют 4 линии, принадлежащие к резонансу ядер атомов сахарного остатка (пятый сигнал аномер--юго атома углерода наблюдается при о 108,1). Число резонансных 1иний и их химические сдвиги свидетельствуют о наличии в молекуле исследуемого вещества альдопентозы арабинозы. Два сигнала

и п

з области ¿80-87 (С-4 <5 86,2 и С-2 ¿82,1) указывают на ее зуранозную форму. Для установления конфигурации гликозидной :вязи была измерена константа спин-спинового взаимодействия 7~с"_н"> которая оказалась равной 179 Гц. Химический сдвиг шомерного атома углерода и константа спин-спинового взаимо-[ействия характерны для сл-ь -арабофуранозы.

На основании полученных данных вещество I идентифицировали ак кверцетин-3-<* - ь-арабофуранозид (авикулярин).

- Г2 - V/.";-'-'

"• Таблица 2

У^-спектральная характеристика'-флавонолов,. выделенных из листьев фейхоа

Наименование Полос,ы погло-!- щеняя метанол ацетат натрия хлористый алюминий ■ хлорис алюмин соляна кислот

Вещество I I 354 355 4Ш(+62) 382(+2

259. 274(+15) 276 271 '

Вещество II I 352 360 418(+6б)' 388(+3l

II 258 275(+17) 276 272

Вещество III I 358 378 , 440( +82) 404(+4(

II 258 275(+17) 278 272

Вещество 1У I 358 370 442(+84) 406(+4t

II 257 269(+12) 277 271

Агликон I I 372 386 456(+84) 428(+56

II 257 274(+17) 274 267

Агликон II I 372 366 45б(+84) 430(+58

II 258 274(+17) 273 268

Агликон III I 372 382 458(+86) 432(+60

II 256 278(+22) 272 267

Агликон 1У I 374 446 458(+84) 432(+58

II 257 290(+33) 250' ' 270

• Вещество II, Кристаллы вещества II с т.пл. 231-234°, хорошо растворимы в метаноле, этаноле, зтилацетате, нерастворимы в бензоле и хлороформе. В продуктах кислотного гидролиза обнаружили флавоноловый агликон кверцетин и сахар I)-галактозу (табл. I). Реакция вещества II с азотнокислым цирконилом и лимонной кислотой отрицательная, а это указывает на то, что молекула га-

,г »

г 8

____ / __

„ "

„ в 2 «о о

«г 3

и 3

ООО ии О

■„V "Л V. 2 VVIV)

Л £ о о о06 о

М! 1

-'Л—

I

I— Т Л. ^ **" "*> "о "-с" 1 С— *■)'? "Г

« О ООО и О »1* ¿¿ии ¿уии О

X о

Рис.3. ЯМР х С-спектрн ре^ества I (А) и II (Б).

I

лактозы присоединена к агликону в положении С-3. По данным У-¿-спектроскоп!'.!: (табл.2) вещество II имеет свободные гидро-

ксильные группы в положениях С-5, С-7, С-3^ и С-4^. Агликои

вещества II содержит свободные гидроксильные группы в положе! ях С-3, С-5, G-7, С-3^ и С-4^. В IK-спектре имеются полосы ш лощения при 3390 (ОН-группа"1 и 1640 (СО ¿f-пирона).

В ЙМР 13С-спектре (CCI4,<5 ,м.д. • вещества II (рис.3 б) t блюдается 21 линия. Химические сдвиги атомов углерода агликон вой части вещества II мало отличается от таковых агликона вещ тва I и следовательно агликонам вещества II также является кв цетин. В области S 60-80 наблюдаются 5 резонансных линий саха ного остатка (сигнал аномерного атома углерода имеет химичесю сдвиг ¿102,3). Совокупность химических сдвигов этих атомов yi зывает на наличие в молекуле исследуемого вещества галактопирг нозы. Константа спин-спинового взаимодействия -7~с»_н»5 измере ния в спектре, полученном по методике "Gated ", оказалась равной 161 Гц. Величина г>той константы и химический сдвиг аномерного атома углерода свидетельствуют о присутствии /3-D-галак топиранозы.

На основании полученных данных вещество II идентифицирова^ ли как кверцетин-3-fi- D-галактопиранозид (гиперин).

Вещество III. Кристаллы вещества III с т.пл. 175-177°, хорошо растворимы в метаноле, ятаноле, этилацетате, нерастворимы с бензоле к хлор-форме. В продуктах кислотного гидролиза обнаружили флавоноловый агликон кверцетин и сахар D-ксилозу (табл. I). По данным УФ-спектроскопии (табл.2) вещество III имеет свободные гидроксильные группы в положениях С-5, С-7, С-З^ и С-4*. Агликон вещества III содержит свободные гидроксильные группы в положениях С-3, С-5, С-7, С-31 и С-41.

На основании полученных данных зещество III идентифицировали как кверцетин-3-D-ксилозид (реиноутрин).

Вещество 1У, с т.пл. 234° хорошо растворяется в метаноле,

зтаноле, ятиляцетате, нераствооимо в бензоле и хлороформе. 3 продуктах кислотного гидролиза обнаружили флавоноловкй агликон кьерцетин и сахар Ь -арабиноз^, который вероятно присутствует в пиранозной форме. На это указывает то, что вещество 1У отличается от кверцетин-З-ы-ь -арабинозида (вещество I) значением температуры плавления (соответственно 234° и 246-249°) и значением ИГ в трех системах растворителей (табл.1). Реакция вещества 1У с азотнокислым цирконилом и лимонной кислотой отрицательная, а зто указывает на то, что молекула арабинезк присоединена к агликону в положении С-3. По данным УФ-спектроекопии (табл.2) вещество 1У имеет свободные гицроксильные группы в положениях С-5, С-7, С-3 и С-4. Агликон вещества 1У свободные гид-роксильные группы содержит в положениях С-3, С-5, С-7, С-3 и С-4.

На основании полученных данных вещества 1У идентифицировали как кверцетин-3-о< - Ь-арабопиранозид (гуаицжаверин). В литературе имеются данные относительно совместного присутствия квер-цзтинарабофуранозида и кверцетинарабопиранозида в некоторых видах растений. Так например, в листьях Рз1а.хигл guaijaua обнаружены авикулярин и гуаиджаверин (з. Ка^ог!, 1962).

Азикулярин (и = «*- Ь-арабофураноза'* Гиперин (й =/3- С-галяктопираноза) Реиноутрин (й =0 -ксилоза) Гуаиджаверин (к = «•- ь-арабопирансза). Вещество У. Белые игольчатые кристаллы с т.пл. 175-276°, растворимы в воде, этаноле, метаноле, ацетате, птилацетате, нерастворимы в хлороформе и бензоле. В У£-спектре имеется мак-

симум поглощения при 280 нм. В ИК-спектре имеются полосы поглощения 3400 (ОН- группа) и 1648 cm~J (ароматические С=С связи) "Значение rt вещества У и аутентичного (+ —катехина в трех систе

мах растворителей идентичны (табл.I).

На основании полученных данных вещество У идентифицирова-■ ли как (+)-катехин.

Вещество У1. с т.пл. 235-237°, растворяется в воде, метаноле, ацетоне, этилацетате, не растворяется в хлороформе и бензоле. В УФ-спектре имеется максимум поглощения г:.и 278. нм. В ИК-спектре имеются полосы поглощения при 3360 (ОН-группа) и. 1648 см~* (ароматические С=С связи). Значения Rf вещества У1 и аутентичного (-)-зпикатехина в трех системах растворителей идентичны (табл.I).

На основании полученных данных вещество У1 идентифицировали как (-)-эпикатехин.

Вещество УН представляет собой аморфный порошок. В УФ-спектре имеется максимум поглощения при 231 НМ. В ИК-спектре имеются полосы поглощения при 3380 (0Н-группа) и 1648 см~^ (ароматические С=С связи). Значения Rf вещества УП в трех системах растворителей приводятся в табл.1. С целью окончательной идентификации вещества УП, двумерную хроматограмму фракции Е (рис.2» сравнивали с двумерной хроматогр&ммэй аутентичных ка-техинов и галлокатехинов (Roberta , 19?6).

На основании полученных данных вещество УП идентифицировали как (+)-галлокатехнн.

Вещество УТП с т.пл. 220° имеет максимум поглощения в УФ-области спектра при 27Ö нм.' В ИК-спектре имеются полосу поглощения при 33d0 (0Н-группа) и 1648 (ароматические С=С связи). ЗначенияНГ вещества УШ и аутентичного (+)-эпигалло-катехпна в трех системах растворителей идентичны (табл.1).

\ ; - 17 - • .__

;_•.■""■ На.основании полученных данных вещество УШ идентифицировали как (+)-зпигалдикатехин.

(+)-галлокатехин ( ОН) (-)-эпигаллокатехин ( К= ОН)

фракция Б (рис.2) при нагревании с Зн НС1 образует'3 анто-цианида, которые были обозначены как вещества 1Х,Х,Х1.

Вещество IX на хроматограмме при дневном освещении имеет розовую окраску и располагается выше аутентичного цианидина (табл.1). Максимум поглощения в видимой области спектра 534 н.ч. При добавлении 5Й-ного раствора А1С1д в 0,1 н солянокислом метаноле батохромный сдвиг максимума поглощения не наблюдается (д/-=0), что указывает на замещение гидроксильной группы в положениях С-3* или С-4*.

На основании полученных данных вещество IX идентифицировали как пеоницин.

Вещество X на хроматограмме при дневном свете имеет розовую окраску и располагается на уровне аутентичного цианидина (табл.1). Максимум поглощения в видимой области спектра 535нм. При добавлении 5%-ного раствора А1С1д в 0,1н солянокислом метаноле наблюдается батохромный сдвиг максимума поглощения (д/-= 18 нм), что указывает на наличие незамещенных гидроксильных групп в положениях С-3^ и С-4*.

На основании полученных данных вещество X идентифицировали как цианидин.

Вещество XI на хроматограмме при дневном свете имеет фио-

летовую окраску и располагается ниже аутентичного цианидина (табл.I). Максимум поглощения в видимой области спектра - 541нм. При добавлении 5%-ного раствора А1С1д в ОДн солянокислом метаноле батохро'мный сдвиг максимума поглощения не наблюдается

0), что указывает на замещение гидроксильных групп в положениях С-3* или С-Л*.'

На основании полученных .данных вещество XI идентифицировали как петунидин.

Исходя из полученных результатов можно считать, что фракция Б содержит следующие лейкоантоцианидины: лейкопеонидин, лейкоци-анидин и лейкопетунидин.

лейкопеоидин (к^ ОСН^»н2= Н) лейкоцианидин (Н-]= ОН, ^2= Н) Н лейкопетунидин Ц'=0СНд, 1^= ОН)

Содержание и количественное изменение • катехинов, лейкоантоцианидинов и флавонолов в листьях разных сортов фейхоа при вегетации

По полученным данным (табл.3) флавоноидные соединения (ка-техины, лейкоантоцианидины'и флавонолы) в значительном количестве содержатся в листьях исследованных сортов фейхоа, при этом у отдельных групп флавоноидов преобладают лейкоантоцианидины. Среди разных сортов фейхоа по содержанию флавоноидов выделяются сорта Чойсеана и Аллегро. Как известно, в Западной Грузии цветение фейхоа начинается в начале июня, тогда как созревание плодов наступает в октябре-ноябре. При изучении динамики накопления катехинов, лейкоантоцианидинов и флавонолов в листьях фейхоа сортов Чойсеана, Аллегро, Арго и Чанури наблюдается два

Таблица 3

Изменение содержания катехинов, лейкоантоциа-нидинов и флавонолов в листьях разных сортов фейхоа при вегетации

(в мг на 1г воздушно-сухого веса)

) 0 р т Время сбора Катехины Лейкоанто-цианидины Флавонолы Сумма

1ойсеана июнь 1,5 45,5 12,5 59,5

июль 9,5 69 27,5 96

август 5,7 36 16,2 58,9

октябрь 2,1 . '61 18,7 100,6

Аллегро июнь 4 14 25 43

июль 10,5 33 27,1 70,6

август 9 13 16,2 38,2

октябрь 10,5 во 22,5 ИЗ

1рго июнь 3,2 45,5 13,7 40,2

июль 9,2 46,5 16,2 72,9

август 6,7 29,5 11,2 47,4

октябрь 15,7 56 23,7 95,4

1анури июнь 2,7 25 12,5 40,2

июль 2,6 27 17,5 47,1

август 2,2 20 4,6 26,8

октябрь■ 2,5 21,5 27,5 51,5

¿аксимуыа, первый из них приходится на конец цветения (июль), 1 второй - на фазу созревания плодов С октябрь \

Качественный .состав и количественное содержание .флавоноидов плодов фейхоа и продуктов их переработки

При исследовании качественного состава флазоноидов плодов

г-

[¡айхоа методом двумерной хроматографии было показано, что они содержат около 20 соединений. Среди них имеются катехнны, лей-[гоантоцианидины и флавонолы. По данным, приведенным в табл.4

• Таблица 4

Катехкны, лейкоантоцианидины и фдавонолы спелых плодоэ фейхоа, и продуктов^ их перзрабо.тки-г ' (в мг на 1г сырого'веса) .

Сорта Отдельные части плодов Катехины Лейкоантоцианидины Флавонол-гликозиды Су»

Чойсеана кожура 0,473 2,92 0,038-

■ мякоть 0,228 . 2,04 .0,032 2.1

сердцевина 0,208 1,375 . 0,028 'и

Аллегро конура 0,33 4,375 О;045 4.'

мякоть 0,26 2,640 0,087 Ы

сердцевина 0,143 1,282 0,038 г;<

Арго конура 0,302 3,467 1,56 б-,г

мякоть 0,038 0,734 .0,023 0,]

сердцевина 0,069 0,199 0,012 о,г

Чанури конура 0,553 2,572 0,037 3,]

мякоть 0,30 1,733 0,236 V 2,<

сердцевина 0,228 0,684 0,223 0^

Продукты переработки

напиток фейхоа 0,1 1,070 0,008 1.3

варенье 0,004 ■ 0,02 0,005 о.(

джем 0,005 0,159 . 0,006 0,]

компот 0,01 0,078 0,002 о.с

плоды после сублимационной сушки 0,9 0,636 0,7' 2,<

видно, что флавонои.ды содержатся во всех частях.плодов фейхоа кожуре, мякоти и сердцевине. Среди отдельных групп флавоноидс в спелых плодах, как и в случае листьев, преобладают лейкоана цианидины'. Среди разных сортов фейхоа максимальное количество флавоноидов накапливается в спелых плодах сорта Адлегро (9,2* и минимальное количество в спелых плодах сорта Арго (5,8 мг>.

Из отдельна частгй плодов соизр^анием флавоноидов выделяется кочура.

При исследовании количественного содержания флаконоидов в продуктах переработки плодов (табл.4) показано, что напиток фейхоа, варенье, джем, компот и плоды, полученные после сублимационной сушки содержат катехины, лейкоантсцианицннн и флавоно-лы, которые обладают Р-витаминной активностью.

Применение высокоэффективной жидкостной хроматографии высокого давления (ЭДШД1 для разделения фенольннх соединений фейхоа

Для разделения флавоноидов и фенолкарбоновых кислот листьев и плодов разных сортов фейхоа применили метод ЖХВД Wast ,Sagol , 1976; Court , 1977; Berriadi , 1984). Флавонолы и фенолкарбоно-вые кислоты разделяли на колонках BondapaicCjy в системах растворителей изопропанол-воца-уксусная кислота (25:74:1) и уксусная кислота-вода (5:95), катехины - на колонке SGX-Cjy в системе растворителей метанол-вода (1:1).

Идентификацию соединений проводили по времени удерживания аутентичных образцов и исследуемых соединений. По полученным данным (рис.4) в листьях 4-х сортов фейхоа - Чойсеана, Аллегро, Арго и Чанури обнаружили кверцетин - L-арабофуранолид (авику-лярин), кверцетин -/5 - D-галактопиранизиц (гиперин), кнерцптин-3- D-ксилозид (реиноутрин), кверцетин-3-<* - ь-арабописанозид (гуаидяаверин\ (+)-катехин, (-)-^пикатехин, (-)-г>пигаллокатс-хии, галловую кислоту, п-гицроксифенилуксусную кислоту и п-ку-маровую кислоту. В плодах сорта Чойсеана найдены галловая кислота, п-гидрсксифенилуксусная и п-кумаровая кислоты.

Риз.4. Хроматограммьт ЖХВД экстрактов листьев фейхоа сорта Чойсеана (А - флавонолы, Б - катехины, В - фенилкарбоновые кислоты4.

- 23 -5 Ы 3 о д ы

1. Из листьев Ьейхоа пып,е/ >но II соединений, представленных три подгруппы флавоноидов - флавонолы, катехины и лейкоан-тоцианидины.

2. Флавоноицннс соединения листьев фейхоа, идентифицированные с помощью химических и физико-химических методов, представлены: кверцетин-3-Ь-арабофуранозидом (авикулярином), кверцетин-/3 - Ю-галактопиранозидом (гиперином^, кверцетин-3- в-ксилозидом (реиноутрином'1, кверцетин-3 -о< - ь-арабопиранозидом (гуаиджаверином), (+)-катехином, (-)-зпикатехином, ( + '|-галлока-техином, (-)-зпигаллокатехином, лейкопеонидином, лейкоцианиди-ном и лейкопетуницином.

Методом ЖХВД в листьях фейхоа идентифицированы: галловая, п-гидроксифенилуксусная и п-кумаровая кислоты.

3. Содержание флавоноидов в листьях фейхоа определяется периодом вегетации. Динамика накопления катехинов, лейкоантоциа-нидинов и флавонолов в листьях разных сортов фейхоа имеет два максимума, первый из них приходится на конец цветения (июль),

а второй - на фазу созревания плодов (октябрь).

4. В плодах фейхоа катехины, лейкоантоцианидины и флавонолы содержатся во всех частях. Среди отдельных флавоноидов в спелых плодах преобладают лейкоантоцианидины.

5. В продуктах переработки плодов фейхоа (напиток, варенье, джем, компот и др.) содержатся катехины, лейкоантоцианидины и флавонолы.

6. Показана возможность разделения флавонолов, катехинов и фенолкарбоновых кислот листьев фейхоа методом ЖХВД.

Основное содержание диссертации опубликовано в следующих работах

1. Ванидзе М.Р. Фейхоа новый источник биофлавоноидов /Тез.респ.

научн.конф. Цхалтубо. 1989.

2. Чхиквишвили И.Д., Ванидзе М.Р., Шалашвили А.Г., Николадзе В.С

Выделение и идентификация флавоноидных гликозидов - гипе-рина и авикулярина из листьев фейхоа //Субтропические кул1 туры. 1989. № 6(224). С.65-70.

3. Ванидзе М.Р., Чхиквишвили И.Д. Флавонол-гликозиды листьев

фейхоа /Тез.второго съезда Всес.общества физиологов растений. Минск. 1990.

4. Ванидзе М.Р. Содержание и количественное изменение катехинов,

проантоцианидинов и флавонолов в листьях разных сортов фейхоа при вегетации //Субтропические культуры. 1§91. № 3.

5. Стародубцева В.П., Харебава Л.Г., Ванидзе М.Р. Исследование

влияния сублимационной сушки на состав летучего комплекса плодов фейхоа //Субтропические культуры. 1991. № 5. С.73-75.

6. Ванидзе М.Р., Шалашвили А.Г., Чхиквишвили И.Д., Квеситадзе

Э.Г. Катехины листьев фейхоа //Субтропические культуры. 1991. № 6. С.80-84.

С.81-83.