Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Физиологические маркеры крови овец и коз : теоретические и прикладные аспекты их применения

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Физиологические маркеры крови овец и коз : теоретические и прикладные аспекты их применения"

А-ЗозбВ

всероссийский научно - исследовательский

ИНСТИТУТ ЖИВОТНОВОДСТВА .

■ , ( ЕЙ» )

на прарах рукописи

МАРЭАНф НУРЕИЙ САФАРВИЕВИЧ ! , /

, Физиологические маркеры крови овец и нов: теоретические и прикладные аспекты их- применения

, ■ 03.00.13 -Физиология человека и животных : 03.'00.15 - Генетика ' \ ^

: ,-АВЮРЕ «Е Р А Т ■

, диосертаЦйи на соискание ученой■степени: ' доктора биологических .наук * '■'. .

ДуСровицу, 1604;

' * > * - ■ ■■ ■ г I * 1 * * ^ ' - ^ '

■ *_'• V ..Работа виоолпеиа в отде.ие;т«иодогии производства продуктов ; овцеводства Всероссийского научно"- " исследовательского института

• '■/.. ■.' ■. .. животноводства . ''''.' " ■ л .

Научные консультанты : доктор с.-х. наук,профессор . ' Яиряков А.М. ' • ! .. . ,

: *"." "■ ,' . ■ •• .. д<жтор с.~ 'х. наук • ' ,.

Хамицаев Р.С,

Официальнуе оппоненты : /. заслуженный деятель науки Российс- -/\кой Федерации;-доктор биологических, наук, профессор Алиев"А* А.;. - '■'■ ■ ' 'доктор биологических наук,: профессор Баскеее Е.Д., ■ доктор биологических. наук, профессор Асланян М.М. . -

: Ведущее учреждение - Всероссийский. НЙИ племенного дела

Защита диссертации состоится ..Л' ; ' ■■■ 1994 г. ■ в /О* часов на заседании'Специализированного Совета ' ■ ... : д.020.16.02 по защите диссертаций при - Всероссийском научно ^ исследовательском институте животноводства по адресу Ч О; Л ? '. .142012,' Московская область, Подольский район,- п. Дубровида ■ . '

..'■ С 'диссертацией можно ознакомиться в' библиотеке института, '

. -. Автореферат разослан'" ;' Ю.. : 1В94 г.'^С"."' Л '-■

Ученый секретарь "'- V. ""■

Специализированного .Совета ■;.; ' ; кандидат биологических наук - . V. Юмыгин И. И.'

А.ОВаАЯ ХАРАКТЕРКСПКА РАБОТЫ '

1.¿.Актуальность теми./История интенсивного изучения групп кро-ьи, полиморфных банков » ферментов крови, полиморфизма ДНК в популяци-: ях животных насчитывает более 30. лет.' Успехи данных исследований обусловим.в последнее время развитие особого направления с животноводстве ' ■ .г- мэркерзависиыой селекции - оценке потенциальных возможностей '(продуктивных и шеметшх)животных.по их внутренним морфофизиологическим ■'* особенностям, .,заложив в свою очередь, новое направление в биологичес-, ■ кой науке сельскохозяйственных' животных - физиологической генетики.. у-'^У'..' / К физиологическим маркирующим системам ИоусЬбисЗЬигу А.К., Ые1 М. ^ (1983) относят семь близких'типов биохимического -полиморфизма крови: . 1)внутривидовые серологические . различия., по. антигенам эритроцитов;

■ 2)полиморфные локусы белков,и ферментов; .3)антигены главного коыяекса ; ■ гистосовместкмости; 4) полиморфные системы ДНК; 5) антигены тромбоцитов; . и 6 )адлотшщ. белков '.сыворотки крови;'' 7) биохимически активные образования . ; .. (комплексы) между продуктами отмеченных выше систем. V

; Система крови является важнейшим механизмом адаптации организма и

. мощдыы фактором,: направленным на сохранение его .'антигенного гомеоста-; • ;. • ва.. ЭтасяосоСаость обеспечивает - структурную. и. функциональную целост-• ность организма, охраняющую. его "генетическую индивидуальность в онтогенезе.' Следует отметить; . что роль отмеченных 'аллс&нтигенов плазмы и .клеточных структур крови до последнего времени окончательно не ¡^■'Р: ясна,- однако их огромное количество и разнообразие ваставляет предпо-латать, о той важной фунедии, которую они выполняют в организме. V - В настоящее вреия эти субстанции, используют для. маркирования тех иди кных генотипов, а поэтому их часто называют "генетическими марке-"■^ч' ;,что ке соответствует - полностью. их 'генетической и фенотипической

. " ФУЕКЦШ! (БОРОЗДИН Э.К.,1691). • .

л>:'р • Виесте-с тец открытие и '' изучение генетических систем' в крови ^ :. колкого рогатого скота,:^ свиней, , лси^ и одним

ив.важнейших направлений в иммунобиологии (Матоушек /И. ,1964; Тихонов '}'■1990; .иапуров*Ж1Л.»1^; Дубровская Р.М. Д983), Группы крои полиморфные систбъы'белков ^'ферментов - и ДНК успешно применяются в ■"; '/>;: сёлекдия в / качестве маркеров количественных признаков, объективного контроля родословных жлвотных, . маркирования пород, линий, повышения V -хизнеспособности молодняка при отборе стрессоустойчивых и резистентных

.особей. сри изучении микроэволюционных процессов. • В овцеводстве : и козоводстве использование• физиологических марке-

ров необходимо как для акспертквы достоверности происхождения, так и .изучения генетической структуры популяций овец и коз разл№?ногл проис-

.V"«;-: '.-У- '•'■*; •• •('■ ■ ' ' ' . !

• - ЦЕНТРАЛЬНАЯ - .

НАУЧНАЯ БИБЛИОТЕКА Моск. сольгкохоз. академии

им. К. А, Тим,иВЗ Инв. N

хождения,. что позволит в конечном счете разработать концепция генетического мониторинга,- совершенствования продуктивных качеств у мелкого рогатого скота,, оказания содействия в сохранении сокращающихся.и исчезающих пород. Учитывая большое разнообразие пород овец (более 600) и коз (Солее 150),- научный поиск и разработка методов и специальных пу- : тей применения физиологических маркеров для повышения эффективности селекционной работы в обеих отраслях приобретает особую актуальность. Препятствием -внедрению применения генетических систем в овцеводстве и . козоводстве является слабая изученность физиологических маркеров и от4-' сутствие организационных форм по т использованию. V

1- Цель и задачи исследований. Цель» настоящей работы является изучение физиологических маркеров (полиморфизм белков, ферментов. ДНК; лимфоцитарных антигенов и групп крови) у овец и коз/ установление внутри- . и межпородной теистической изменчивости и на этой основв'разработка ряда прикладных'аспектов но использованию: маркирующих систем крови в овцеводстве и козоводстве. 'Для достижения указанной цели были поставлены следующие конкретные задачи: 1.Обобщить имеющуюся информа-" щго по физиологическим маркерный системам крови у овец-и коз. 2.Изучить особенности антителооСразоэания уразличных пород овец .и; коз- в зависимости от влияния различных'факторов; создание и'стандартизация в Международных сравнительных испытанияхБанка сывороток-реагентов для определения, групп 1фови у овец и коз., : з.Проследитъ характер'изменени!} частоты аллелей ,во времени у различных генераций и некоторых „ пород овец. 4.Провести описание адлелсфонда на основании .анализа частот антигенов, аллелей, генотипов'групп крови, типов белков и-ДНК и.выявить ; генетические причины' эуой гетерозиготкости. - 5. Оценить уровень, средней гомо- и гетерозиготности генома у различных пород .овец.-.Дать. интегральную генетическую характеристику изменчивостиизученных нами пород и помесей в сравнении с данными по другим группам животных;' б.Ксполь-. зовать. группы крови и другие полиморфные системы воцекке генеалоги- : ческих связей и доли влияния овец одних пород на формирование - других.' 7.Разработать теоретические и прикладные .аспекты совершенствования методов - отбора и оценки баранов-производителей с использованием маркирующих систем крови.1. * i ■ V .'■' V". :

1.3.Научная новизна. В результате полевых' и лабораторных исследований, а также теоретических обобщений в настоящей работе ^впервые:

- разработан комплекс методов по изготовлению сывороток-реаген--тов, создан Банк реагентов для определения групп крови овец по 7'сис-темам крови и у коз соответственно выявляющие 28 зритроцитарных .антигенов. организовано их'изготовление для научных'; и производственных делай, их хранение в условиях ультранизких температур подобно , методике хранения кроличьего комплемента; " ^'г':''--','

... - з

- предложена совершенно , новая классификация эритроцитарных антигенов у овец, применение которой облегчает получение сывороток-реагентов, Проведены исследования и получены новые данные по общности эритроцитарных: и лимфоцитарных антигенов овец, коз, крупного рогатого скота. Описан онтогенез и специфичность экспрессии антигенных факторов 7 систем групп крови овец;

изучен полиморфизм. . характер наследования физиологических маркеров у овец;получены сведения о распространении антигенов,генотипов и аллельных вариантов ряда систем групп.крови и полиморфных белков среди чистопородных . овец и коз.; Установлены данные об уровне генетической изменчивости исследованных групп животных,оценены генетические расстояния между ними. 'Полученные данные -использованы как источник информации при контроле достоверности,происхождения ягнят; '

. - разработаны алгоритмы и составлены программы "Генетические рас-,стояния" на 1БМ РС для выбора оптимальных параметров оценки генетичео-iaix дистанций.между различными породами и помесями овец по маркерным генам с испольвованием S-ти статистических методов. Данная программа имеет важное вначецие. для изучения теоретических и прикладных вопросов прогнозирования гетерозиса при скрещивании разных пород животных.

. 1.<1.Теоретическая "и практическая значимость. Проведенные исследования - позволили 'подучить .данные, об адлелофонде овец и коз различных пород; . которые имеют теоретическое значение при систематике пород,

• служат. источником информации , об "их генетической структуре и составляют материалы учета аллелофонда основных популяций овец в СНГ.

Разработанный метод контроля достоверности' происхождения ягнят показал", .'что для раскрытия .полной ситуации о состоянии племенных записей достаточно анализа крови у 20-302 молодняка в. больших отарах . (600-800 овцематок),от 30 до 50%Ч в небольших стадах (200-500 голов)..

* Установлено,' что количество недостоверных записей приходится на ложное -отцовство,, вскрыты причины ошибок,определено оптимальное время выявления достоверности происхождения ягнят.с.учетом становления в онтогенезе антигенов; групп крови.Разработаны принципы использования^групп кро-.ви" для оданки.баранов-производителей.по качеству потомства, что сделало воемшашм сокращение.срока оценки и уменьшение, аначительных затрат на испытание баранов неплеменного назначения.

Полученные и исследованные'реагенты, выявляют 22 антигенов 7 сис-,теы групп крови овец и 28 факторов коз,-Как показачи результаты Международных 'сравнительных тестов (1980 и 1S85 г.г.), ,мы обладаем диагнос-. 'тирг-маии к и известным маркерам/ 5 алтисывороток выявляют новые анти-^ гены-подтипы (Ааг.,Bd¿; Вег,Db, Ма), приготовлено 3 новые с номернши -обозначениями,сыворотки:(Midi,z ,з). Все эти реагенты могут эффективно

"-л" - 4 ■-. >■..' ■ .■;'■ v"r" ■ ':■'■'. ■■

использоваться в решении научных и практических вопросов. '."-- - -* ■ На основе проведенных исследований разработаны ТУ-46-12-39-В4"Сы-воротки моноспецифические для определения трупп крови,овец","Временная инструкция по изготовлению и контролю сывороток моноспецифических■ для определения груш; крози у. овец" и "Временное наставление по применении моноспецифических сывороток", которые.введены в действие с 05.09.84 г. it являются основным документом для приготовления,хранения и реализации реагентов. С целью внедрения методов по использованию физиологических, маркеров в практике овцеводства разработаны и изданы , три методические рекомендации, информационный листок и монография.. :■' .. , ;->

1.5:Апробация работы.Результаты настоящего исследования были представлены на ЗЗД ежегодной конференции в Европейской Ассоциации по животноводству (Ленинград,1б82);в Трудах Головного Селекционно-генетического центра(196$) ;19 и21 й международных конференциях по группам крови и биохимическому .полиморфизму животных {Финляндия, 19SS; Италия, 1S69) Зм Всесоюз.школе-семинаре по генетике и седекциизшвотных(Бийск,1в89); 6-7м съездах генетиков и селекционеров Республики Молдова (1990-1991); Трудах КП0"Тевит"(1991-1992); на 1-ой Международной конференции по частной генетике сельскохозяйственных животных.(Аскания-Нова,1993). - , :

1.6. Публикация. Материалы диссертационной работы опубликованы в монографии "Иммунология и иммуногенетика овец и коз",в научных журналах: "Доклады ВДСХНИЛ", "Цитология и генетика",' "Известия АН Молдавс-

. кой ССР", научно-производственных журналах "Сельское хозяйство Манда-' вии", "Зоотехния",в сборниках научных трудов, ыездунароаиого общества по генетике животных.. По теме диссертации опубликовано 44 работы.Наиболее полно отражает содержание'диссертации 11 научных работ.цитируе-; мые в автореферате. \ "V- 'V'-:-''I- ' ' . '.' .■*

1.7.Структура работа. Диссертация . изложена ш страницах, содержит таблицы,, S рисунков, состоит из введения;'глав, . выводов, практических предложений- и списка литературы (30/наэвания ^в том числе /52 налностранном языке). Основная часть, результатов получена самостсг; ятельно, а также .при участии аспирантов П.И.Доцканова, С.М.Иыбаева, работавших под руководством автора.Вклад других авторов,отраженвпубли-: нациях по теме диссертации. . Всем коллегам автор приносит благодарность; за участке' в совместных работах, ''-'.*' - ' .. . V ■ гг

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЙ : . .

. Материалы для исследования 18 различных;пород'и помесей/ овец й двух пород коз собраны в течение 1S76-1993 годов. "Всего проанализировано крови у 8034 овец, 339 коз, 61. коровы и 1' яка, полученной из хозяйств республик России, Молдовы,.Казахстана и Украины.

За период проведения работы было иммунизировано.554 и реиммунизи-ровано 262 головы овец. В каждой сери» иммунизации разрабатывали.опре-деленные - методические подходы, обеспечивающие рациональное исполъвова-; ние овец-продуцентов. Проверку получешгых. "сырыхисывороток проводили на '40-100 овцах.аттестованных в Польсе и Сраншш.а затем собственными ди-' агностикумаыи.проаедаими : . международный -сверки 4'в ®РГ(1900),Ита--лии (1085). ^^U'^-fi-^v ^ ^ л-

Иссхедовакьг сыворотки крови от 1031 гоювы овец, ; 196 коз,: 57 ко-

• ' ров и 1 яка на наличие естественных антител анти-R и анти-0, выявляю-' • шив антигены R системы.. Кровь 95 ягнят. была исследована при изучении

: становления аитигенности у овечьих эритроцитов(40 ягият) а у остаяь-них т становления титра анти-R антисыворотки..У 5 триад коз изучали : - становление и наследовааие';шти-0 ■ реагента.'- N С : пгаошью' ингибиционного теста у этих же яивотныхчопределялся титр антигенов R и 0. ' ' .. ^ ':'.'•••'••. С целью установления времени фенотипотеской.экспрессии остальных : эритроцитарных:. антигенов овеЦ в течение посткатального онтогенеза животных исследовали в возрасте 1, :3» S»1Ô» 20» 30," 60; 90 дней. / " г :, Подаэюрфные типы траноферрина,-4 карбоангидразы, • э.стеразы;: преаль-г бумина, " Gc-белка, • амилазы, ..гемоглобин1в' устанавливали методом электро.. фореза в подиакриламшшоы и крахмальном гелях (Глазко В.И.,1935; Пере-лыгю! A;À/»1Ô91; Анфгагагенова T.À.и i' ., ; -

■;0пр0дедеки9 -7,.;.''лгафэ1штар1шх^антигенов и 13 сплитов А локуса BoLa

■ '-'.у скотам овец и.коэи читку серологических реакций проводи-ч по Слеп-

У . Проверь/ баранов .по качеству ,'г.отомства проводили методом сверс-. - тниц в соответствии с ^Инструкцией по проверке баранов ' ' тонкорунных ' и

;„• полутонкорунных' пород по качеству потомства", (М.,'1979),-.на основе трй-

■ ■

у Аллели и генотипы эшвот^ по. группам; крови ^ . семей-

• *:анадизо»4 ,;а:1тигенных Факторов, .выявленных у .родителей.и их'потом-

У »шв^ а Упо пол&орфщм белкам и ферментам - непосредственно по резуль-. V, TaÎTfw электрофоретических; тестов." ; ;; • ' У' ;•••/;у. ' : '.... ■ ; V > :>> ! При' анализе систем групп чюви частоту i ¿лйгеиних Факторов вычис-;>: ляли ^Ж^ - Машурову А;М.<1974), а частоты .'генов и re- ;

.лУнотип6в"^';э^ и диаллельных. систем D,: M, R,

ч ? I групп; крови определяли, путем простого*подсчета аддслёй'. и. генотипов

• : по формул©;выведенной из уравнена; хардигвай115ерга, а> саатных-ха, в, ' ' с).- -по формулам бернатейна-0..(1936)* ;andefsson.l.'(1935).-. для оценки у'значимости ; отклонений ' наблюдаемых -. частот •генотипов от теоретически ;' .ожидаемых из г^на*харди-ва^1серга''йспси1'ьзовали - критерий : , х2у при ; . . этом -: :применяли в некотор^. ' случаях методику айяла <5. (1984)'"предосте--^'. режения по испа^эовашда ^ . ' . - - ' ' ; , '

\\У У Показатель: степени'гомозиготности в исследованных популяциях : овец ,

определяли по Матоушеку- И.(1964), число эффективных аллелей -по . Robertion А.(1656). Уровень генетического сходства при сравнен™ пород . определяли по формуле MaiJala к., Lindstran Q.(1966), уточненной Rendel J.(1967), а также no Животовскому Л,A,(1970).

Для анализа структуры и степени подразделенности популяций кара* •кульской породы использовали F-статистики Райта и статистики . ,HeH:Fis, Fjt» Fst» Gst. а также величину генного потока (Кет). Эти oar ' раметры вначале расчитывали для каждого локуса, а затем усредняли.

Генетические расстояния (D) между изученными породами и помесями овец рассчитывали по шести формулам:' Серебровского A.C.(1970); Nel м. (1975); Rogers J.S.(1972); Hedrlck P.W.(1975); Cavalll-Sforza L.L., ; Edwards W.F.(1967); Prevo3tl A. et al.(1975). Поскольку все уравнения .! давали идентичные дендрограммы, б работе приводятся данные только по Серебровскому A.C.(1Ь70). Вычисление показателей дистанции (D) проводили на'персональном компьютере IBM PC, по -программам "Генетические расстояния", рьзрабоганные с приоритетным участием автора диссертации.,

Для анализа ДНК методом геномной дактилоскопии были взяты образцы . крови у следующих пород: финский ландрас, линкольн,, тексель, ромнимарш и романовская. Основными методами исследования являлись рестриктный анализ, блот-гибридизация по Саузерну, клонирование в фаге М13, секве-нирование (Маниатис т.и др., 1934).

Цифровые, натериаш ■ обрабатывали общелринятыми 'методами (Меркурьева Е.К.,1977,1083; Плохинский H.A..1980; Носов В.Н.,1990) с примене-. нием персонального компьютера IBM PC, ■ ■ ■ • ' 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Совершенствование существу ищи* и разработка ноша методов" получения сывороток-реагентов к эритроцитам крови овец н коз. Традиционные приемы получения "сырых" сывороток-полуфабрикатов для изготовления мощспецифических реагентов предусматривают отбор доноров и, реципиентов из числа тестированных по труппам крови животных донорского стада.

Обычно донорские стада (100-200 гол.) формировали из Iiб-летних и стари» животных разных пород скачала.в Ставрополе, а затем совместно.с МНИИЖлВом, ИВ1Ш0ВС101М СХИ» СибШИИЖем, КазНИИКом, УНИИЖем"Аскания-Но-ва". 1ак как некотоше антигенные факторы у изученных пород. встречаются в а.' - 100Х (Bb, Bf, СЬ и lb - у кавказской породы; Ма - у кара-'кульских и гомановских овец), на данных породах не уд&галось. получать реагенты i. э?и антигены.-

Оогльл. накопленному опыту лучше,, если антигенный состав эритроцитов крови oieu донорского стада подтвержден в одном из научно-иссле-• . довательских цен";юв Международной организации по генетике животных. s (МОГЖ). Такая i rTeci-ация овец с нашим участием.была проведена в 1978

году во Франции, а в 1979.году во время стажировки в Псин ской Республике (Краков,- Институт Зоотехники). Одновременно были проверены и сравнены с польскими реагентами наши моноспецифические сыворотки. /

За период с 1676 по 1992 г.г. было проведено 25 иммунизаций и ре-иммунизаций, из них 2 на 186 оренбургских и таджикских козах, а оста-( льные.как внутри, так и межпородные на овцах с обадм числом аоб голов.

Первым этапом' определения групп крови и полиморфных систем белков является отбор образцов крови и ее. консервирование. Для этого использовали различные консерванты и антикоагулянты. Наибольший эффект был получен .при использований консерванта по прописи Яковлева B.C. и др. (1992 г.): натрий лимоннокислый трехзамещенный-100 г; глюкоза-20-40 г; трицшшш в ете ринарный-1 флакон; дистиллированная вояа-2000 мл.

Предложен микрометод постановки серологических реакций, который позволил производить 500 тестов в день вместо 150,, экономия расходов дорогостоящих сывороток составила в 2-4 раза меньше, уменьшилось соответственно на столько же и количество расходуемого комплемента. Еыло показано, что активность выработавшихся антител при введении 20 мл ан. тигека имела некоторые преимущества по сравнению с 10 мл цельной крози. / При внутрикожной и внутримышечной иммунизации, как наиболее простых и безопасных.способов,, заметного'Преимущества какого-либо иа этих методов не было установлено. У. овец и коз-реципиентов без ущерба для . их едсровья брали 0.5-0,6 л, а у более крупных- 0.6-1 л крови. При необходимости через 10-14 дней проводили повторный забор крови.. ... При иммунизации титры антител в сыворотке крови нарастали постепенно, ; а при реиммунизации -. скачкообразно. Реинмуьлзация оказалась эффективной . при получении сывороток крови против средних и слабых антигенов, которые в первом цикле иммунизации вызывали образование иммунных антител со слабым титром. Одновременно повышалась реактивность у животных: большинство особей из группы продуцентов с низким титром антител (Н-1:16) после реиммунизации переходили в группу высокотитрад-ных41:32-1:1024).

,- Болттое значение при прочих равных условиях проведения иммунизации имеет способ введения анткгена, Одним из таких способов является инъекции его с неспецкфическими иммуностимуляторами. ' В качестве иммуностимуляторов изучали действие адыованта Фрейнда, сульфозина и стабилизированной лимфы (табл.1К

Анализ табл.1 показывает, что процессе иммунизации .; наибольший удельный вес реактивных животных (85Х, Р<0,05) был получен в первой группе,' 'где использовался адъювант Фрейнда, затем идут группы с суль-фозином (75Ж,Р<0,05), комбинированный способ (55%) и стабилизированной лимфой (502).лратив 35Х в контроле.При сопоставлении всех методов вве-'дения анти**;нз оказалось: при первом из них больше животных с титром

1.Иммунологическая реактивность овец в у зависимости. от . введения. ' ■ иммуностимуляторов ■'; "■'■ '

—--:—:—;-————г-—•—р -—т—у".1 )у'1' ' :

'"*.'- |Крат- |Кол-во|Код-во ж-х|Хреа-^реактив-Методы ; . |кость ; 1ж-х :■'■ |образовав. Iктив-1нь-х к-х с .у. у \ ■ ■ |введе~ .-¡обра-' ¡антитела с}ных ¡титром 1: > /'.-' > |ния 1 |вовав.|титром 1: .¡ж-х ¡33 и вше иммунизации ¡иммуно- |анти- 132 и выше | г |к общему,

|стимуля-|тела } • ■ Т ■ ' ¡кол-ву им-1-л л -(тора,:. Л . |«униз. ж-х

. 1 Внутримышечный метод с - • • ¿V' 'Су..' • 4 ;.•

■■ адгювантом Фрейида 1 • 17: : 14 ...'у' - 85* 70**

2 '■ Внутримышечный метод с - - ": . ' v •; л'.'" , " ' ".- сульфозином 'у • V'-'* " -'15 • 11 75* '.■ ■ 55*

3 Внутримышечный метод со " V ■ / '■ .::'л"л ■; стабилизированной лимфой :10 10 ' У 50 . 50*

.4 ; Комбинированный метод ;'.; \ 11' '.-> 8 ; 55 40 ;

Б Внутримывечный метод ■:!'.У-; у, ■'.О- Л-" ^ ' '" л ■''.■' •«'. . ;'

' икмуииаации (контроль) . ': 7 \ . 4:'.. ' 35 ' 20 '

*)Р<0,05 по сравнений с контролем;**)Р<0,001 со сравнению с контролем -

антител 1:32 и вше (70Х,Р<0,001), чем при втором (Б5Х,Р<0,03) и.треть ем (50Х,Р<0,05), в четвертом,оно составило 40CS, а в пятой - у у/ Адгювант. Фрейнда,1 суль'фозин и стгйидизированвая ' лимфа являются ' наиболее - аффективными средствами для стимуляции иммуногенеза при изо-иммунизациях овец зритроцитарными "антигенами. '^КоЮшшрованшй- иетод А дал ' такке' 'неплохой, результат со сравненюос выяеупсшнутыи'способом,: но оказалсяхуяе, чем метод/ где ^теяя^шсу кммуностш^шторц.

- с увеличением , возраста животного-реципиента возрастала-как общая численность реактивных особей, /так, и продуцентов с высоким »отрез ан-: титед:'в 4-х мес^ возрасте реципиентов с.высоким титром: окяаалось 58Х, в 8-ми'мес:- 632, : и 12-ти мес.- 75Х. При анализе значения пола по ре- активности "установлено наиболее целесооОраеньы использование равнопо-. лых животных при подборе пар ■ донор-реципиент. - Иммунологически более активными оказались женские особи (94,41) против 87,El уыужскихосо--Оей; к тому же взрослые .животные легче переносят к^ююащш й ,от них ' можно' получить больае "сырой" сыворотки. . '""^.^■v^'V*'''-^¿V'

Иммунизация овец (22 гол;;) в разшле cpowi беременнсмгги яе Baiioc«-.; ла вреда здоровью матери и ягненка. Более интенсивный иммунный.ответ . • (> на 5-ю.Х) у суягных-овцематок ^чужеродаше актиге!М при .иммуниза-.

щи свидетельствовал о повышенной их сенсибилизации и реактивности в период беременности.'' ■ " .

При внутри-: и межпородной, изоиммунизациях. содержание, гормонов Тз. Т4 у решшиентов по отношению к контролю достоверно уменьшалось (соответственно Р<0,01 .и Р<С,001), причем при втором снижение отмечалось более значительночем при первом (соответствено Р<0,01 и Р<0,05). Однако' у овец-реципиентов'группы "кавказская - романовская" был значительно' выше уровень адренокортикотрошюго гормсна (АКТГ) и ■ кортизола, чем у группы "романовская - романовская" . Ссоответствённо P<o,ooi и 0,01) и (Р<0,001), что, по-видимому.' связано со стрессовой реакцией, испытываемой животными в ответ на введение эритроцитов чужеродной крови..Отсюда и наиболее выраженная реакция со стороны тиреощщой и адре-наловой- систем при межпородной иммунизации овец, '

■ ; У доноров обеих групп обнаруживалось достоверно низкое содержание гормонов тиреоидного ряда.'инсулина.и.более высокий (в 3 раза) уровень АКТГ, что; по-вкдимсму, явилось результатом значительной потери крови.: Нами изучена : ёнтигенность 17 кровяных факторов, по которым имелась возможность.подобрать нужные сочетания лад донор-реципиент ' для получениясоответствующих; антител. В результате проведенных исследований (табл.2) выявлено 4 эритроцитарных фактора (Аа,АЬ,ВЬ.Са) с высокой -.активность», вызвавших синтез соответствующих антител от общего числа ожидаемых в 80-100?. случаев (I группа),4 фактора (Bd.Be2.Bl.Cb) со средней активностью^проявиваих действие в 30-79Х Случаев (II группа), S факторов (Bc;8s,Bei,Ma,Dà) с.низкой активность» (III группа). Эффективность антигенных факторов 3 группы составила 0-292. Два антигена R и О (R-система), выявляемые с поиоэд.» естественных антител были отнесены к'IV группе. В V Группу были отнесены антигены I-системы (I и 1), против которых не найдены соответствующие антитела как у нас в стране, так и ее рубежом. На 14 антигенов (Bf. Bh, Mb, PLB-15, -17, -25/1, 25/2i Fs, Fe. fie. Plis. Fze, Fso. F41), несмотря на разнообразный и многократный ' подбор , необходимых животных, получить антитела w удалось ; Результаты по клаосвфикашш : антигенных структур получены экспериментальным путем на основе направленной иммунизации животных. Так, если для получения антисывороток против антигенов I группы достаточно 3-4 инъекций» то для получения сывороток против антигенов II и Ш rpynn-5-8, а иногда и 10 инъекций.» v .. ■

Неспособность "слабых" :: антител вырабатываться одновременно с "сильными" при воздействии на организм продуцента соответствующими антигенами по-видимому связана с их конкуренцией между собой. У ot-ц она зависит; в некоторой степени и ; от гетерогенности полиморфных систем ■ (Tf, Aes, Hb), ■ У коз оренбургской породы такая корреляция отсутствует из-ва низкой! гетерогенности белковых систем (Am. Tf и Alb). получение

: .■ ; y v /.Л,': v УУ''У:'';УУ."' У''y¡ - ю - -у:у., :У '.У ' У; 'Уул' 2.Различная кммуногенность эритрошстарних антигенов при ;..".-;,■'■ УУ у ■ У - - У"-■' ".У 'У-: ; У иммунизации'.овец .. -У-- ' ;; * У У

I группа, -t УII группа, | ■ III, группа,) . IV группа [ ' V группа- V высокая . | : средняя.''(низкая(0,2€Х)| ,. . ■ . ••.• i '• *•; ' „(80-100*) I Í30-79X) • I - " ' • I • - ' ■

I антител j .'у, 1 антител | У I антител j . | антител ) - | антител у

. симН——I—|сим( % i (сим!V •■rr'.lcHMl i ■ Y - (симНг--г—У

' вол|о|вы- IX |вол1о|вы- ¡X 1вол|о|вы- |Х |вол|о|иы-|Х|1юл|о|Еи- |Х-ан-|*|ра-; |об|ан-|ж|ра- |об|ан-|»1ра- loOlaH^jslpa- |об|ав-|я|ра- (об ти-1и|бо-у|ра|ти-|и|со- (ра1ти-|и|бо- |ра|«Н,и10о- |ра[ти-|и(0о-. (ра ■ _ге-|д|та- |зо1ге-|д|та- |во|гет|д|та- |8о|ге-|д|та-'|ео|ге-|д|та-|зо . ' 'на |а|лось|ва|на |а1лось|ва|на |а|лось|ва1иа |а|гось|ва|па |а|лось|ва !л| |вш| |л! V |вш| у |л1 |вш|. : |л| ■".; Ído| У |л| jen |о| Iих| |о| . |их| toi. . 1их| |о|. IИХ| fol . (их ; |сJ |ся| |cj Iся| Iс] , |ся| fс| (ся| Ici |ся У: |ь| | ; | Ы I Г |Ь| | | 1Ы I I 1Ы ; I

_L_l_I_1 ■ ' ' ' » ■ ♦ ■ 11 ' ' ' ' ■ 1 .

'. 'У "■'i;- ■"■■ от овец: " '"У

Аа 32 32 100 Bd 10 3. 30 ВС 5 1 20 R 1031 100 9,7 Í 16 .00 АЬ 21 21 100 В«2 27 20 74,1 Bff.25 2 в СП КРУПНОГО 1. 7 О О . ВЬ 18 15 83,3 В1-. 17 41,2 Bet31 3 "9,7 рогатого скота: Са 22 £0 00,9 СЬ 21 11 52,4 Ma 21 О 28,0 Б7 3 б.З 4 ■--''■■" ; ■■ У/' Da 15 3 £0 . от яка:

У-■ У, . " 1 1 . ДОО -У У;,УУ У" "У '

'■"' ■ '■■'■■-■. ■.''■• .'.'■ '■'У '- ОТ КОЗ: У ■■-■■"'У

у /■ v-;yy: уУУУ' ; ; : г ;■■■■*:■ -.у юе б г,е у.уу ■'■'i У У У .':..;■.' ';. .■:."■ от коз: 'У ' У.'У У ; ' ' /

". у '-'у'УуУ;У--.УV ' УУ. ..■ -".У: о 10Ô го ю;2 -;у ,■■ У-'.у

; материалы исследований констатируют гипотезу о том, что 1г-гены, коте-. ; . ролирующие силу ишунаого ответа, оказались ае ецгпленнша с генам по-' ' лиморфных систем. • . ' ' .у \У- У"' -У '.у-.' ...У/

Для идентификации гомологии аятигеикь« структур овец, ноэ и круп-.У увого рогатого скота, Оылл испытаяы БЗ 1юноспец1ф«ческк9 cuscpcmc« крупного .рогатого скота, 42 тест-сивороток коз; 12 реагентов овец а ; одна сыворотка яка,! Проведение сравнительного анализа сцвороток- ре а- ■ гентов 4-х видов жвачных яа донорских стадах обоих видов «елкого рога-, того скота поэводидоУ уетшовить эквивалентжсть еятот R и Са овец ий и.0г-20 у коз, а также й овец, коа h J скота и яка. Большинство из 12 овещ>их ' реагентов. перекрестно ; реагировали с еритроцитами к», У нос-, лючекие составляли. ареактквмыз ант^АЬ, - акти-[)а в анти-О. Проведенные

. абсорбции козьими эритрощ1тзми..подтвердили, что анти-1г. - Р'. Е'г, -крупного- рогатого скота содержали антитела одного типа, 'д

: ; По' дхыфовдтарным факторам I класса не установлена общность антигенов у коз, свец и крупного рогатого скота". Всего в опыте било ис-пользоааю 7 сьшороток-резгектов и 13 сгиитоо А-систеш Во1А, соответствуя®!« ¿гздуиарЬдн1М стандартам. ' .. • :.'*••"• '

- Кама доказало,: что сигоротки для изучения 1?-систекы трудно получается в условглх ■ Молдовы, Северного Кавказа и Таджикистана и не представляют особой трудности в условиях Сибири* . средней полосы Россия. 11аи5апее высокие титры анти-Я и анти-О отмечались на конец лета и

. начало осени." а иакмепызие - «а зимние месяца. ..-.-/. : . •

Реакция агглотгазц;и1 ' у 55 агнят разумных пор'од.с/анти-К.выявля- -:■ лась .только через 12 чзссо после приема молозива, лучзе она • проявлялась о 3-х месячном возрасте. Начюшл с момента первых родов . отмечает- . ся проврадэшге части а:л,и-П йггтаганаюа в" гемолизи»гу, а другая часть п^датазт сстасатьса и в более старшем возрасте в вкде агглютининов-; . Причина ванного. явления пока «е .известна,!/ .'хотя гдерь: возможно влияние' как . внегнкх услссйй (гктауелыегз гегества в кормах к на пастбеде) так к фазиадогкчеозгго состояния :кследуемой особа (беременность,роды, 'изменение7 горыопглыюго статуса) при; соотзетствуюхей генетической пред-ргсполохешюсти. V ч ,' г ;' ;••*' .'Я-'--^

•• / '.Методом ^«^¿({ру^го -скре^1вак!гя. подтверздёно предположение о ^ налички.генетической оскоеи в образоэаник анти-О-антител' . у: - Что касается еда коэ, то антиген О. выявляемый у овец, отсутствует у дан--ч.кого' вида." Это позволяет говорить о наличии й системы у коз», идентич-

- ной ^ »фупного рогатого скота'и яка,..; при. которой I? и у доминируют над нулевыми аллелями и наоборот,:'.контрастен Я системе овец, . где генетика более;сложная"по;отноаекй» к.д^п« в^аи лвачшх.- .Все это. показывает обкность антигенов и ^ антисывороток данной систем у коз,/овец, крупно: г6 рогатого С1»таэи яка,' хотя у последних двух видов анти-Л реагент

' требует более тсдтельной очистки/от . гетер^илькых антител при • соот: ' ветствуюяеи их испсйьзовакии «а ови^;-. ; ^ ; •'.••.•••••••. : . '

•. ¡ Анти-О;сыворотка-реагент нами не была выявлена' -ни разу в . виде ' ¿гглотининов, тогда как К-антисыворутка встречается в виде данных ан^. 'тител в 2-3 раза чаое; качестве гемсдизинов. .;Как установлено,

^.-ЪывЬрот'й',--"ф ан^н-К- выя^яЬгеь^У

/антигена и ни разу ре" были выявлены у особей с Л антигеном^ .

. • ;: .Б^ерии 1иига,. как и ряд других бактерий обладают парщ'-альшм 'антигеном ,г;входявкм :в состав"; групповой- субстанции Н антигена крови'человека. .ВозмояШо овечий" антиген. О является "парциальным антигеном у коз поскольку 'спонтаднад адтисыворотка анти^О обнаруживается только в их «¿ови. Подобная картина была'ранее уста;10Элеи^^с^еп Т.;с.'(1079) от^'.

■ ' - 12 - :'у. ■

ношении антигенов и Го В-системы овец. 1

" Для изучения систем А,В,С,0,М групп крови овец обычно использовали 22 изопммунных антитела учетом требований Международного общества по генетике домашних животных (МОГЖ).(Нгиуеп Т.с:.1973). Международная сверка полученных нами моноспецифических сывороток с реагентами веду-'.', ВДх лабораторий мира в 1980 и 1985 годах, а также во время поездки' на стажировку в Польшу (1979)подтвердила наличие;в нашем.наборе следующих диагностикумов: анти-Аа, -АЬ, -ВЬ,-Вй,-Вс;-Вг.-Ве/-В1;-Са,-СЬ,-Ма,-С1а.

Кроме описанных сывороток, к известным антигенам крови были получены новые антисыворотки, выявляющие подтипы Аа, Ве, Вй, 0а и Ма, а тага» экспериментальные реагенты к новым факторам,^условно обозначенные ММ^, МЫг, МЫз (ММ-Молдова): Моноспецифичность этих сывороток-реагентов доказана на основе. абсорбциЛ и семейного анализа/ они будут представлены на ближайшей Международной сверке реагентов. ,

На основе проведенных исследований разработаны ТУ-46-12-39-84 . "Сыворотки моноспецифические для определения ■ групп крови овец", иВре-. ыенная инструкция по изготовлению;и контролю сывороток моноспецифических- для определения групп крови у овец** и "Временное наставление'по применению моиоспецифических"сывороток", которые' введены в действие с 05.09.84 г. и являются основкыми докумектамн для приготовления.храяе- \ ния и реализации реагентов. /^ ^'АгчЛЙ^^^'С^^^^С?^-^^^

3.2. Применение физиологически* марквроштеореемчвоавэп щясилад- ;

'" им» аспекты : 3.2.1. Становление шггкгенного статуса в онтогедюэо и ого зизчекхэ ' при определении происхождения ягнят. !: исследование возрастной динамики становления антигенного статуса было проведено на 40 ягнятах,'.: по пять ; ягнят 1-, 3-, 5-, 10-, 20-ти дн. и 1-, 2-, 3-х мес; возраста, путем: сопоставления их антигенного состава эритроцитов с таковыми отца и ма- V тери, а тагосе путем определения ингибиционных титров сывороток, полу-чениых в первый день рождения на растворимые антигены. ' * •• -Антигены Аа.АЬ (А-система), ВЬ,Ве, Вг, В1 (В-систёма),'Са,СЬ {с-'.'\ система) , Оа (О-систеыа) можно определять - практически сразу;после роя-р дегтя. В среднем К антиген выявлялся на 20-й, О антиген. - на 31-й день/ (й-система). а Ма антиген (М^система) на.45-й день жизни ягнят. .Титры', растворимых фкторов К и О не оказывали определенного влияния на.' сте-пепь реакции после их оседания на эритроциты. Полученные ревультаты по\ формированию зритроцитарных антигенов,- типов гемоглобина, трансферрина,! V альбумина и преадьбумина' ягнят говорят.об оптимальном времени для .оп* : рэделения полиморфных систем возраст' 2: месяца и более.';; после рождения.

' При „проведение: генетического ^ контроля проистождения животных в племенных стадах стран СНГ типы белков и групп крови аттестованных баг..; ранов-производителей, овцематок.и молодняка заносили'.1 а;.индивидуальные.:

■■■: : 13 --Л. ■■ _............\

•карточки. ^ Л1отоы -были составлены "карты сеыейно-генетического анализа, определены алдельно-фенотшпиеские сочетания.групп крови'й 'полиморфных систем,' а аатем по ним проведен: анализ происхождения. Всего проанализировано '1233 семейные группы,' из которых 1208 триад и 25 диад, т.е.происхождение 982' животных проверяли на основе полного семейного анализа. Часть результатов экспертизы происхождения - показаны в табл.3. Приведенные данные свидетельствуют о возрастании, процента ошибок- с увеличением числа овец в стаде. ./:;•'-.' -

^3. Контроль достоверности происхождения ягнят из различных хозяйств

Состав !:..■■! триад в : ^Т.Ч, ■ потомки .

хозяйств | • баранов .•' гол.- овцематок • гол. .потом". ков ' гол. ; достов'ерн. недостоверн.

гол. X гол. . X

ГШ'ТЮбада" I ;5 175 175 127 72,7 48 27,3

к-зТигант" с, j ■■■ 3 . 38 ■V 76 " ■ ■ 66 ' 86,8 10 13,2

нпвн \ ■■■■■:■ ■71:.1'г 232- 287 , 225 78,4 62 21,6

ГГО"Вольшевик" ; i ".''- 4 ' 308 308 242 68,6 66 31,Б

с-з^Волгодоновский" |: 3 ' : 114 150 / 145 96,7 5 3,3

ШХ"Эаря" 20 366 - 442 ■'. 414 93,7 28 8,3

Итого: ••'• j 42 1233 . '1438 . . 1219 82,8 219 17,2

.' : С учетом всех полученных данных, определение достоверности происхождения ягнят показало, что отЗ,Э до 60% ягнят рождалось не от назна-;ченных баранов-проивводителей. В связи с этим предложено делить исследуемые отары ва три группы в-зависимости от процента недостоверности: .1)не превышает!ОХг 2)от10 доЗОХ; 3)более ЗОХ для тонкорунных порол. Считается достаточным. * для полного раскрытия ситуации исследование £0-30Х-;Ыолодняка в:отаре'с Сольиям поголовьем (600-800 овцематок), а там,77 где стада небольшие (200-500 голов) ' (Молдова, средняя полоса России, Прибалтика) - 30-60Х. . " ': •. .. " ■■.■■

В условиях структуры и ведения овцеводства Республики Молдова рекомендуется: баранов для опыта надо брать таких, у которых потомство не менее 10 ягнят/ При установлении недостоверности происхождения ниже 10Х все исключенные животные бракуются, остальных используют в качестве 'племенных■'•' '-,-' •■.

"'. Если недостоверность выше 10Х,- то необходимо проводить следующие мероприятия: а)при исключении происхождения в пределах 10,1-20Х вс? недостоверные ягнята не используются:в селекционной работе, а тех, которые. соответствурт-племзаписям, пускают в'оборот как племчнкых кли на

■ племпродатсу; ' б)при исключении недостоверного потомства выше SO®,-всех . исследованных животных выводят из племенного стада»" V

Стада, в которых недостоверность больше 10Х,' . "на следующий гея ' •снова исследуют. При повторном превышении недостоверности происхоаде-. н'ия стадо переводится в товарное на один год, если а процент недостоверности составляет:10,1-20Z ' исследуемых животных,йтри" года,,если про-; цент исключенных животных выше 20Х. "'■'.■ ■':;"' ■;■■'■' ■

Разрешающая способность генетического метода зависит не только от количества исследуемых полиморфных систем, но и от степени внутреннего разнообразия популяций. Чем больше подобное разнообразие популяций,тем:, меньше . вероятность встречи в ней особей, имеющих одинаковые варианты ■'групп крови и белков, и тем выше,- эффективность, генетшеского контроля. :

' 3.2.2. Эффективность использования йгажшличвехих иаркеров при экспертизе происхождения овед.\ Расчеты эффективности применения каждой из 7 локусов групп крови и ряда белковых систем при контроле достовер- '■;; . кости происхождения'овец приведены в табл.4. '

Данные табл.4 по полиморфизму белков крови получены совместно о. Глазко В.И.(УААН), Перелыгиным A.A.(ШИТ РАН), а также взяты из работ ' Вонецкой М.Д. , Гафарова P.C. (1988,1990), Иовевко В.Н. (1007). Амбрось-евой Е.д. (1993), Nguyen т.е. et al. (1992).. .' ;••;•'•.•':.

Из данных табл.4 видно, с увеличением ' числа используемых при контроле происхождения систем и контролнруадих их .-'аллелей. . возрастает; вероятность исключения.стибочных'.ваписей,' прй этом заметный эффект, дат '; ет сочетание многоадледьшдс локусов. в локусах групп крови и полиморфных белков; где имеют рецессивные аллели (Д. M, I, R, Es), разрегсзгяая способность вь^е, 'чем в "закрытых"'диаллельных системах; где оба алле- . ля фенотипически проявляются одновременно.Она же была .вше всистемах групп крови, где число гетерозигот значительно превышало гомозигот. '. .; -

; В системе А групп крови. . включающей 4 аллеля. .в II породах овец эффективность,:контроля достоверности происхождения колебалась от 2,IX ^ ; (у тексельской), до 46,ЗХ (кавказской). Исключение составила по данной ' системе романовская • порода, ; у которой она была "пустой". '• Разницув. 44,22t. медду двумя отмеченными популяциями можно объяснить'¿нализируя ;' частоты генов полиморфных систем крови.. Частоты аллелей A-системы у кавказской породы представлены их макс)1мальным чк<аом,,; тогда: как у. тексельской породы только двумя аллелями. Поэтому естественно у кавказской, а Tatöse киргизской и асканийской пород вероятность исключения ошибочных, записей довольно высока. ' Невысокийпроценту рамбулье, связан j* с тем, что ота порода разводится уже 32 поколения в себе и имеет только два аллеля как и тексельская.";: Подобные показатели частот* аллелей у ¡ этих овец н по с-системе групп крови, минимальные данные отмечались у'

■ у/4. •Эффективность'. (X) контроля достоверности записей происхождения . * различных пород овец по комплексу- маркирующих систем крови

I 1 Породы овец ' ■■

л \ ' '■•,... \ 1 .. -, • . .; '' ' --■

о |Кав-|Испая|Раыбу-|Киргиз|Аска-|Тек-|Ци- |Ост- |Севере-|Рома-|Кара-к'1каз-|мери-1дье/; (екая1ний-; ]сель|гай-1фриз-1казахе. 1 нов- |калпак. у |ская|нос | • \. |■;'■: |скзя | : |ская|ская ¡кросс- {екая (сур ' с | (п- | | (п- ; |(п- 1 (п-1 (П-, |(п- ¡бредная](п- )(п-1205)1200) 181) |144) |104) |265)|195)|323) |(п-284)|32) (150)

. А "46,3 21,7 9.3 33,4 33,4 2.1 28,2 18,3 20.8 О 18,5

В 54,3 . 57,2 17.3 66,2 38,5 56,5. 24,8 38,2 23,7 19,5 16,2

С < 35,0 28,7 28,6 21,5 36,2 28,5 25,г . 32,7 25,2 17,8 34,3

М 6,8 8,"2 О "11,8 16,8 48.6 18,1 17,4 18,1 17,6 15,7

0 28,7 14,8 18,6 11,8' 14,0 12.2: 17.0 7,7 13,4 1Ь,7 8,3 > 18,7 18,4 17.6 17.2' 16,6. 17.3' 18,4 16,5 13.9 16,4 17.2

1 18,4 - О , О : 4.1 18,7 10,4 1&.6 13,4 18,7 О ,8,2 Гзо1в,5 13,4 , 0 - .. . " ■-:.■ " -Число аллелей:'.. -* -* ■." -■■ '' '■'

' 25 ;. 21 '14 .'. 34 ¿0 . 27 . 20 . 23 20 25 16 " Общая эффективность: ■'':;*.■ ' 94..1 '. 86.8 64,1 89,1 , 87,3 86,9 61,3 61,3 77,5 62,9 73,6 ТГ 34,1 50.4- 36,7 34,2 41,5 40,5 51,6 26.5 , 50.4 30,4 32,1 НЬ 10,4 .17,4 16.6 18,5 .7,7 10.8 12.7 - - - . 16,5 6,9 Аег18,7 > - 10,1. 17,0 - • 17,7 - - . - 15,5 Са 1,3 1,8 7,7 - . - - ' ' -. Ее - -V- -"' . - 11,4 - 10,0 12.1 17,2 'V Рг: - - - - 32,0 -.'л; - 23.6 -6с . - ' ' - . • - . .'-.г' •' " ' ^ 8,9 - " - ' Ар/:.-,".;".- - '. ..-.■; - 6,0 - -■■■ Число.аллелей: - Д'^ ■'■■■■...;Д'1>. "-V '."■ V 11' - 9 V 7 • 8 : 10 .11 . 10 11 7 12 8 Общая эффективность:7" .•'•'..52,6 59,8 51,3 50,6 55,2^68,0 65.2 43.4 56,4 63,2 46,6 . Суммарное - число аллелей:: .

'. . 36 30' 21 42 \.;-.Э0 38 1 30 34 27 27 24 Суммарная эффективность: ' '•'.• .

96,9 94,7, 82,5 94,6 94,3 94,8 93.5 89,4 90,2 86,4 85,9 ,

. романовской-17,8Ж. а' ышссимальнш.\ у'аскакийской породы-36,22.Ео систе-ме.Вгрупп-«реви; :'екаочзкгей: от 4 до 18 аллелей.'- вероятность искяоче-

- ■'■.■,. ■/■'г-: ..л:.;;. ;'■■"■.. .,■'.■ .,.;'■■'

ния ложного отцовства достигала от 17,3! . у рамбулье до 66,22 у овец -киргизской породы. ' . ■ ; '.■ ■* ....:.'..■■ / •'. ■ •;.• •■

Кз полиморфных систем максимальные данные отмечали по трансферри- -ну. Наиболее эффективными оказались аллели А, В, С, Б, Е, и Р. В процентном отношении максимальные результаты получены у испанского мери- : носа (50.52) и цигайской породы ■-(51,62), минимальные - у остфри-308(26,52). •"' \ ; '..V ,;г. -> Л;■■-■'''";;■.'■

■ Эффективность контроля' достоверности 'происхождения овец по двух-' ., аллельным системам М, й, 1?, 1,с рецессивным аллелём была невысокой и у отдельных пород составляла всего 0,0-18,62; Однако,при .соответствующем", распределении частот как группкрови,-так и полиморфных белков, в этих . системах эффективность контроля достоверности может повышаться. Так, в кавказской.породе овец, имеющей распределение.частот аллелей в системе:, О групп крови О® '-. 0,238, 0"- 0,762, величина этого показателя водрас-,; тает до 28,71.Как только величина, вероятности исключения ошибочных ват;-'' лисей 'возрастает до ВОЛ и Солее, увеличить ее становится труднее." На-.' пример, хотя сама по себесистема-трансферрина ;и эффе|стивна(51,б2),; общую вероятность исключения у овец цигайской, породы с 66,2Х она уве- • личивает,вместе с гемоглобином и арилэстераэой только до 93,52. .' '

..^Эффективность контроля достоверности;происхождения у овец при од-' • повременном использовании всех 7 систем групп крови, а также наиболее полиморфных систем ', белков и ферментов крови достаточно -высокая и.колеблется от 82,5 до 26,92. ^ ;;':

3.2.3. Определение типа знготиостн у ягнят близнецов. Для определения виготности и эритроцитарного мозаициэма нами были установлены группы »фови ч белки у 209 ягнят двойневого происхождения из них 93 однополых и 116 разнополых, а также у 22 ягнят тройневого происхождения. Всего исследовано 231 головы или 93'однополых и Л38 разнополых ягнят (табл.5)'. ■ ..■'; '^у-;.;?..

5. Показатели виготности у овец из различных пород '.••''../'; . ^ -л.;

■ Исследовано ) . .из них .'. ;."'..•. ;

■ ■ ягнят ' ' [дизиготных монозиготных; .

Однополых ■'' 63 ; 85'.'.' .: .. • 8.. •'.'•'.'••'.",

Разнополых.. ;.. ."■':.';. • '. • 13Э 138.• - •',..• •'/.-..'.• - •:'• ••'. ;• \

в т.ч. двоен однополых • '/■ 03 . 85 •.. • •* л' 8 .' ••;.'•'• •;"•••'•

; разнополых 116 . --116: '.'

■ троен однополых ; . '

. ' разнополых' 22 ". Г.;^-22..'>'.';;1';.-; -

----Т—--—--'-'""■ .. . ... ^ —ТТТ':"! с'-;;: и;:-4

Исследование этих животных тестом на мозаичность с помошыэ : групп \

/.;-.■ V - 17 -

Йровй 'и . пагшэрфных систем не показало ни в одном случае частичного гемолиза и смешанных типов белковых систем, что говорит об-отсутствии ягнят-йоэаиков. ' Вмеотэ о тем у . четырех пар я^нят было установлено на-"личие м0но8кготиости (0,04%).

■'' *. Определенно' кэетотериости 1фЬвскщдаша» пгкят; получении!

путом трансплантации эмбрионов. 8 овцеводстве пересадка эмбрионов применяется для быстрого распространения животных экзотических пород, импорт которьк аатруднен и максимального использования' высокопродуктив-вых овцематок в качестве, матерей-доноров. . .

, Дая внесения в племенную книгу ягнят, полученных путем пересадки зигот, требуется знать достоверность их происхождения, кроме того, доследование физиологических, маркеров крови овцы-донора необходимо ло следующим причинам: 1. Вследствие большого числа ожидаемого потомства. .2.Чтобы исключить путаницу'на предприятии искусственного осеменения во время временного хранения, транспортировки или глубокого замораживания эмбрионов. 3.Чтобы иметь дашше по происхождению, и в тех случаях, когда невозможно с уверенностью исключить овцу-реципиента (Рлс.1).. 1. О Донор: Аа,. ДЬ, Cb, НЬ8, CaS, <f 1. Ab. 0, HbB, CaS.TfBD : 4 TfBD ' 2. Be, HbB, CaS, TfBD

--v^-V-v^1.:;3 л':' '.^' ■

II. Реципиенты: 1- Ab, Cb, o;. HbB, 'Cas, ■ TfBD \

• ' "v,\ 2. Aa, Ab, Be, Cb, Da, HbB, CaS, TfBD

• ^ .. 3. Aa, Ab. Cb, О, НЬВ, CaS, TfDD .

; :: . ^ 4. Aa, Ab, Cb, HbB. CaS, TfBD

III. Потомки: 1.. Cb. О,- НЬВ, CaS, TfBB V • ' 2. Aa, ' Ab, 0, HbB, CaS, TfBD

' . э: Aa, Ab, Cb, О,' HbB, CaS, TfBD

.....; ' : - 4. Aa, Ab, ; Cb, R. HbB, CaS. TfBB

; • S. Aa.;Be. R, KbB, CaS, TfBD . . Рис.1.1^имененЕе :41И8иодогических: маркеров при трансплантации эмбрионов Согласно предложенной схеме подбора пар донор-реципиент с использованием групп крови и полкморфкых б0лкоз (рисл.), к высокопродуктивному доноруподбирают, барана-производителя ;с иным генотипом крори. Гетерозиготные по физиологическим маркерам ;потЬмки более жизнеспособны, процент плодотворного осемененияпри этом вше : и..'позволяет гга-'чать животных различной кровности.

1Контроль достоверности происхождения.34 ягнят, ! полученных м«?сдсм

. ■ .* ' . - 18 - ■ .■'■•■ ■■ трансплантации подтвердил кодоминавтный тип наследования антигенов групп крови и вариантов полиморфных белков от матерей-доноров и истин*

-ных отцов,

'3.2.5. Проворна барамов-проязводседзй по качостзу поггокства о использованном групп кредо. Проверка Саранов- производителей по качеству потомства по настригу чистого волокна-(табл., 6) проводилась по но-. 6. Оценка баранов-производителей по качеству' потомства и*настригу мытой шерсти (кг) в совхозе "Победа" Вулкзнештского района .

| , . Индивидуальные номера саранов .

Показатель I ■ ■ " ---1—:————:---:-1-—

I 5714 | 5908 : | 54054. | 5972 | 35117

I---—---——■—;-" , ■——. .

|доче|сверст|доче|сверст|доче|сверст!доче|сверст]лоче1сверст |ря ¡ницы |ри ¡вицы • |ри |ницы 1ри |ницы- |ри ¡вицы

-!-1-;-:—;—-—;--—I. • / -;—;-—:——--

■■ ■ По всему потомству Htm 2,lß± 2,32i 2,S0± 2,23± 2.204.2,32* 2,20± 2,314 2,35±'2,2Bt . 0,08 0,04 0,10 0,04 0,08 0,04 0,03 0,03 0,05 O.OS к M сверст. -0,14 ' +0,27 т0,12 -0,11 +0,09

- td. -1,57 ' +2,51• -1,34 -0,97 +1,27

Достоверн. ■ Ж0,05 ,- -'■/:. v '■"■.•

Кач-во Нейтральный Улучоатель Нейтральный Улучшатель .Нейтральный' ведана ..'■■■■■ '; ■"'■'■' '■ ^.'.Н :

.*■■ :■ По истинному потсмству.

Mttn г, 14* 2,35± 2,50* 2.28* 2,09± 2.34* 2,03±2.Э7± 2,54± г,20± 0,07 0,04 0,10 0,04 0,07 0,04 0,07 0,04 0,С5 0,05 К М сверст. -0,21 +0,23 ; -0,25 1 -0,34 '. +0,34

W -2,61 +2,41 -3,10 -4,20 +4,81 .

Достоверн. " R0.05 : Р<0,05 Р<0,01 Р<0,001 ;' Р<0,001 Кач-во . .Ухудшатвдъ Удучшатель Ухудшатель Высоко дост.Высоко дост." барана ' ;; . • ;•' • , / ухудшатель : улучаатель.

минальному потомству и потомству/ отцовство которого подтверждено генетическим методом. Из пяти бараноэ:при оценке.по номинальном/ потомок 1 тву только один проиавохптедь окаеался улучтателем (Н 5908), остальные нейтральные. Пооле ' соответствующей коррекции, оценка. Ячества Седанов изменилась. Так, Сарая 6714 по всему потомству был"нейтральным, а по подтвержденному-ухудштем? (Р<0,05),'. баран 35117. по номинальным потомкам оценен как нейтральный, а с учетом подтвержденного по группам крови потомства он оценен как высокодостовериый улучшатель;; Два: барана t из нейтральных стали.ухудшатедями.По инструкции.рекомендуется исполь- ■

.■ — Y-. ' 19 - .Г-

зовать нейтральных баранов для вольного докрытия маток по окончании искусственного осеменения. Фактически же ; докрытие будет проведено ухудшателями.а высокодостоверниЯ улучшатель 35117 не использовался бы в дальнейшем размножении. • •

3.3. Аллелофощ и ' гоиоппеская . структура различных пород овец. Характеристики пород проводились с учетом производственной классификации по Ы.Ф.Иванову, отражающей. главное" направление продуктивности овец: ■ тонкорунные, полутонкорунные и,грубошерстные. Используя данные групп крови, аллельных форм белков и ферментов у ряда пород овец, объединенных родственными .связями в то или иное направление, мы стремились выяснить в какой мере они сохранили особенности своей генетической структуры. ■ .■/-'■ '..., л ■

3.3.1. Аллшю$оид тояяорунша пород.У овец кавказской породы с ■помопью реагентов 7-9 -систем групп; крови были.,определены частоты встречаемости различных антигенов,:;адлелейи:гевотипов(п-395).Исследования показали, ; что наибольшее распространение у породных овец хмели Фенотипы.антигенов:-.Аа. ВЬ, ВС,;F2& V RB-17. Bf, B1,F3.,PLD-2S/1, PLB-25/2, Са, Cb. Fs » Fe ,. Mb, Da, R, F30 . F41 . Частота их варьировала от 38,2 до 98Х. 'У'"- '^у V "■

А-система была представлена в основном антигеном Аа (52,7%). Другие антигены, этой же системы АЬ и Fig имели более низкую частоту (21,5 и 26,01). совсем отсутствовал антиген Ftô . В целом встречаемость фактора Аа во всей исследуемой группе была в два раза выше, 4iJ фактора АЬ. , Обычно*антиген АЬ относительно равномерно распределялся среди популяций родительского, поголовья и потомков. .. .- /:..".; • ЧПо.В-системе наибольшую частоту;встречаемости имели антигены Bf (91,ОХ), ВЬ (84.72), PLB-17 (74,02). PLB-25/1 И PLB-25/2 (68.6Х),Тгв (60,ОХ). . В ^системе антигены Cb (97,12),Гз2(94,0Х), F& (68,01), Са (44,42);в М-системе - антиген Mb (98,0Х). По D-системе - Da антиген (42,02), ' '.по R-сдстеме - антиген. R(44,4X) системе Fao - антиген Fao (91,02), F41 т антиген F41 (60,02). ; ; •

::С\-;-^стема.трансферрина.бШ1а:представлена^14'фенотипами, ; 4 из которых гомогенные (АА, DO, ВВ,' СС) и 10 гетерогенные (АВ, АС.. AD, АЕ,' ВС, BD, BE, /CD,.CE,DE), контролируемые 5 кодсминантными'аллелями (А, В, С, D, Е).При этом в локусе трансферрина преобладали аллели TfA(0,380) и TfP(0,479)', ■ а частоты аллелей.Tfc иТГ® были незначительными и состав или соответственно 0,039 и 0 / 094, частота-TfE только 0,008.

В системе'гемоглобияа преобладает, тип НЬВВ,. в ' системе карбоангид-разы,--'тип CaSS,- частота аллеля НЬ® составила 0,864, НЬА - 0,136. Частота адделя Cas. - 0,S87, a CaF - 0,013^ . • ' ; •

Полиморфизм .арилэстеразы .суворотки . крови был-представлен тремя фенотипами AesEB, AesBH, AesHH,': контролируемые двумя аутосомныыи алле-

- 20 --.." ■ ляыи AesB и Aes1* с частотой AesB -0,531 и Aes^ -0,469. Наиболее распространенным оказался гетерогенный тш сывороточной арилэстеразы (AesK3-49,6Z), ' тогда как гомогенные типы составили соответственно 21% (AesKH) и 29,4S(AesBB). : , '

У овец кавказской породу наиболее полиморфными.системами оказались А-, В-, С*, Tf-локусы, высокий уровень полиморфное«! отмечали а локусах R, F30 . t. Aes, а низкий в М-, 0-, Са-,НЬ-системги. Редко, встречались особи с аллелями В*1 (0.001), CaF -0,013, отсутствовал гомозиготный генотип Саг7Саг. что,возможно, связано, с нежизнеспособностью таких животных. ■■

Популяциониый анализ ; систем групп крови иполиморфных белков во временной диашике. т.е/ промежутком 10 лет показал наличие существенной разницы по.некоторым антигенам и аллелям А-, В-, С-, D-, R-.I-, Tf-докусов (тайл.7). Ш частоте таких антигенов как Аа, Bd, 0,1 нал-, лед» Tfc овца 1338 года несколько отличались от особей 1978 года и наоборот, у последних 'широко были■1 распространены факторы PLB-17, PLB-25/1, PLB-25/2, Са, Da, R и TfD. .t " ; \ '

Полагаем такое изменение антигенных факторовв популяциях-обеспечивается mi'.дрейфом генов, адаптационными, способностями животных о, определенными генотипами. -У '■/•=-■'' -'У'-' ' --■-.'. У- .

Представляет 1 большой интерес генетическое изучение асканийской породы,;послужившая'основой многих пород в том i числе.и кавказского Мериноса. Настоящее , исследование .'проводили с'^омощыо' 30 алзелеЯ 7 систем групп крови и 3 полиморфных систем. Уу'-у- У;у'У ^ У;

■ В системах, где • выявили один-два фактора быдо установлено, - что один антиген или аллель встречается чаае, . чём второй. - Так, . антигены ' 7, Системы групп крови и динамика некоторых частот антигенов и аллелей у овец кавказской породы во времени (через 10.лет)' ' .

Сис-|Анти-темы)гены |и ал-,"|лели ' . i ■" Г .

—t—г 1 |2

107Q г.(п-205) j 1088 г. (n-190) I .'..•'•• J 'У^УУ

-т—;— ; '/(„. '. V. I-'-'. . ■ [ Достоверность '

Встреча-(Частота ¡Встречаг(Частота j различия емость j встреча-1емость (встреча-)- '' / антигена| емости | антигена) емости \|'".'; и аллеля|антигена|и адлеля|антигепа| N . в X |и аллеля| в Z .. |и аллеля!

I Г Ь

3 . | 4 г б | б | Л 7

_--1.—_:_I--. .....-_)___1__—

-■'•■'■'■'■'У. ■ ■ Системы групп крови '' У.'.;::

Аа ; 52,7 0,5268 62,6 . 0,6263 АЬ , ■.21,5 0.2145 ,, 18,4 0,1842 ' ;отсутствует'

> .1, 12 13 1 • 4 Г ; Б {• 6 | ■ ■ >'7''

в ' ВЬ 84,9 7 0,8488 85,3 0,8526 ; Р-0,85,(1.Г.-8;

' : ВС ■ 32.2 '- 0.3805- 37,9 , 0,3790 Т-35,85

Вд 19,0 0,1902 32,1 0,3211 :.. 7 '' г..

' Ве ' ' 25,4 0,2537 . 31,1 .. 0,3105 '.

: Вг ' ' 33.7 0,3366 7 ,30,5 , 0,3053 ■

' * 5 В1 49,3 0,4927 40.5 0,4053

' ц ' -' ■ Р1£-17 • ■ 74,2 0,7415 у 37,4 0,3737

Р1В-25/1 68,8 0,6878 52,6 7 0,5263 •

риЗ~25/2 68,8 . . 0,6878: ;52,6 ; 0,5263

с 7Са ■.; 44,4 ' О!4439 ■ 29,0 0,2895 Р-0.95,б.Г.-1;

СЬ .97,1 Л 0,9707 97,4 0,9737 . Т-4.7Д

м ■ ыа 13,1 ; 0.1317 •16,8 0,1684 • отсутствует : ■

; о ". Оа 7 42,0 . 7 0.4195 27.9 0,2790 отсутствует -

1? . 44,4 7;:; 0.4439 20,0 7 0,2000 Р»0,95,<1.£ ,-1;

0' 21.5 7: 0,2146.. 42,6 ' V - 0,4263 Т-31,85

I - I 41.6 X 0,4156 : 62,6 • 0.6263 Р-0.95,<1. Г ',

• • • 1 • ; . 58,4 . 0.5844 • ^.4 ; • 0.3737• • Т-17,7 .. 7''"

■ ■ ■ Полиморфные системы белков.крови. • V . -'"^л :■''77 ■ '

Са Саг7'7 1.3 0,0130 н.т7 . • 7 н.т7." отсутствует . '■¡'У : Са? 98.7' . 0;9870 : " О'

■ нь: МЛ " 13,6 0,1360 11,7 . 0,1170 Р-0,95,<).Г.-1;

- V',77;./'-;: НЬР л:-.' 66,0, ' -0,8640 88,3 0,8830 - Т-45,94 :"V",

• ТГ ТГА . 0.38Ш ; 34,1 : 0,3410 ! Р-0,95,(1.Г.-4; л1;"

\ ТГВ: 9,4 . 0,0940 .14,77 , 0,1470 . Т-32,78

чЛ:;. 0,0390^'^ ^12,8 0;12М V V 7:7.-., ■

тг° . 47,9; 70,4790 37,2 ^ 0,3720 7'-; г-1-:-'

• : л-:' тгБ .. о,8;;- 0,0080 ;.1;2 л ч0,0120 .

' .Аег Аез8 53,1. 'Л 0,5310 53,8 • 0,5380 7' ■7>7^.7 7-'. С / : • ::• АеБи 46,9 7 0,469077 46,2 7* 0,4620' отсутствует ; .:

Аа, Be, Cb. O, I, аллелиО", R. IT.HbP встречались чаде; чем АЬ, ВЬ, . Са, R, D®, М®, НЬ*. У полиаллельных а-. В-. С-систем наиболысе уста-* навливался"аулевой">аелель,./авлокусвтраяс^ррщшкаку.'к^ ; породы-TfA "и TfD. среди поголовья исследованных овец асканийской поро-'.-ды.У,разводимой в племзаводе нАскания-Нова",из 21 теоретически возькж-; ■■'. ного фенотипа выявлено 21, контролируемые в аллелями:TfA, TfB, Tfc, TfD, Tf^ Tf1. . . - '',

' Сопоставление действительного распределения генотшов-cJ теорети-; .чески рассчитанным по Харди-Вайнбергу, покавало хорошее соответствие; по всей опытной популяции аскаиийских овец по A-,' D-, R-, 1-, М-, Tf-, . НЬ-локусам.; Дмтоверное pacxt^eirae между ниот . . рушении генного равновесия в популяции по В-, С-. иАеБ-системам: ... Р<0,05 - Fco.oi: . ;

у Исследование животных кавказской, . киргизской и казахской пород по > эритроцитарным антигенам' выявило генетическое сходство иразличиемех- 1 . ду родственными. группами тошсорушшх овецЯ-^ ' факторов групп крови трех пород на трех.уровнях их частоты: . высокой ; (свыше- BOX), средней (от SO до 80S)» низкой (от 5 до 60Х) и редкой ■ . (ниже БХ); показывает сходство по. одним, различие - по другим антиген нам. В системе Апочти одинаковые ; (средний уровень) частота ш антиге^. ну Аа^ yd дифференцированное различие по аятигеву.АЬ наблдается ыеаду кавказской и киргизской, с одной стороны, и казахским мериносом - с: • другой. .....У\У ууу-у.';'-.У^уУуУ'УУ

■ '.''В систеие В груш крови эмпирическое сравнение антигенов'трех по^. .. род показывает' незначительное различие по большинству эритроцитарных. . факторов. Последовательность их раЦол^вкения внутри тонкорунных по-; род: кавказская-киргизская-казахский иершос. а степень дифференциации между казахским мерицосом и двумя, другими породами " была одинаковой,у хотя кавказский меринос оказал наибольшее влияние на веро исходящие. . истории его создания. Аналогичная картина отмечается и по С-сиетеме.. Обратная картина наблюдалась no R й -О антигенам R-системы и Г антиге- • ну. Число Ма антигена была максимальной у киргизской породы, а затеи у кавкааской И совершенно отсутствовав у казахского мериноса. - •.; у'- ;.' ■ " Генетический анализ эритроцитарных антигенов и полиморфных белиов у родителей и потомков у трех Анализируемых 'пород позволим., определить У шлели,. контролирующие наследственные сочетания антигенных факторов в ■ . группа:* j-рови. ' ' . -.-. .. • У У ■■:\ ".

' Исходя из ревультатсв по сумме 7 локусов, средние данные .индексов*. . ." " генетического сходства-;* ,между. парой 'кавкаэская^киргиасгая составили ;'; ' -г-0,062; кавказская-каэахскийм<грш10с-г-С),9Яб; киргизская - казах о и:;:; '. меринос • 'У г-0,&77.-; Больше разлитой и точности в значениях;-эти, Aahtoje.'. ' .имели" с учетом 30:аллелей: 10;пбл!:м;>рфных систем:_пара ■ кавказская-кир-

■.■'■■.-. ■:,* .у./."- : 23 - 'V ■■.

гизская . породы -г-0»596, кавказская-асканийская -г-0,б81,а киргизе-кая-асканийская -г-0,424. различие, что отмечается по полученным данным, ш связываем с процессом австрализацци, условиями среды и со- . -'держания.. ■ . .".'■'.■

; - Исследования по 7 системам групп крови и 3 локусам полиморфных ; белков - показали нарушение генетического равновесия; у кавказской породы по В- и С-системам (Сиг-48,11Й.Г.-3; Р<0,001 .и Ех.2-130; (1^.-2; Р<0,001), киргизской-В-системе (Ех2-11,1; с!.Г.-1: Р<0,001). асканийс-кой, тага» как у кавказской породы-В-и С-докусам (&.г-б,б; й.Г.-г; ■ Р<0,05 и Ехг-10,4; Р<0,01) и'арилэстераве (Ехг-8,5; <З.Г.-1; ^

;. Р<0,01) и у всех ва счет избытка гетероаигот. ;у.у .■■ ;* ^

' Генетическая структура определяет изменчивость и-управляет адап- ■■

V рационными механизмами, ' позволяякаждой популяции приспосабливаться к условиям внешней среды.. Нарушения адаптивной генетической структуры и уровня генетической изменчивости макет привести к ухудшению состояния

у популяций иш даже ких распаду, что мы видим иапримере рамбулье. Что же касается испанских и кавказских мериносов,то популяции этих овец саше большие в Испании й СНГ< у^лЛУ ; '.у-.'у.у-,: у V у-.. У"'-----• ..Учитывая общность происхождения этих овец мы провели сравнительную характеристику по в полиморфным локусаы крови для установления генетической дивергенции между ними. , За основу были взяты результаты по рамбулье и испанскому мериносу (Мгиуеп Т.е. е1.а1.,1992) .и полученные нами данные по кавказской породе. ■ • " ■

* Рамбулье, маленькое и закрытое стадо овец, произошедшее от испанских мершосов," заметно отличается от его родительской популяции и кавказской пероды. Все фенотипы и аллели отмечавшиеся'у рамбулье выявлялись у. испанских и кавказских мериносов а те, которые отсутствовали у французских овец встречались у двух других пород с частотой от 0,040

V до 0,584. ./Фиксация отдельных адлелей и потеря других у рамбулье была ;. показателем.реальных эволюционных изменений благодаря случайному гене-У тическому дрейфу в этом небольшом и закрытом стаде овец. Сравнение ис-- шшской и кавказской пород показало отсутствие у первой В? и 11 алле: лей,'.говорящей о вы<хкой консозядироваяности. более древней популяции.

И -есе.' или редкие аллели являются частью генотипа.исследуемой породы или принесена совой популяцией в другу». . Анализ происхождения овец не-. . сущих такие аллели как 1 показывает, что эти гены являются своеобраз-. кыми метчиками стад основателей.; Аллель-1 с высокой частотой у аска-нийской и кавказской пород является своеобразной породной характерис-..' тикой и соответствует историческому доказательству о связях двух ; дай-' ных пород и их отличии от рамбудье и испанского мериноса. ' . . ' У у 'Относительно видения генетического дрейфа как эффективного приема для наблюдаемой генетической дивергенции, ад провели сравнительную ха- .

рактеристику по всем 8 полиморфным* локусам.Как и ожидалось все II антигенов, обнаруженные у рамбулье (т.е. Аа, ВЬ.Вс!, Са. СЬ. Оа, МЬ, К, 0. Тзо и I) были также представлены у испанского и кавказского мериносов,-тогда; как три фактора (АЬ, ВЬ и Ма), которые отмечались у испанских и кавказских мериносов и. дополнительно еде 1,установленный только у кавказской породы не выявлялись у рамбулье. По большинству антигенов между тремя популяииями обнаружены высокодостовершз различия..' Здесь же следует отметить/некоторые, особенности:. М^и Р30 аллели выявляются у овец рамбулье, но отличаются от частот их встречаемости у кавказской породы и испанского . мериноса. „Особого внимания - 'заслуживают.' и А-,В-,С-локусы,./ поскольку многие аллели (А^В^ .В^.В" и (Г) отсутствуют /у рамбулье, ■ тогда как они встречаются у двух остальных пород с частотой от 0,001 до 0,300. . ;, ./• .;' . ' .. '.;-!.<'.,'у :■■'.■".■"''.:".■

Отмечено превалирование частоты встречаемости НЬ^ (0,698)над НЬ6 (0,303) у рамбулье и обратное^ у кавказской и испанской пород (НЬР, превалировал над НЬ^). по тракоферриновсыулокусу у кавказской породы ' и испанского '■:• ■' мериноса выявлялись все .. О пять ■ известных ; аллелей (ТГА,Т£в,ТГс,Т£ Т£ Е);.* тогда как" у рамбулье /только ^ три аялеля (ИА,трр,ТГ^,).' Результата по группам крови дополняются данными электрофореза: .'■'.; низкий, уровевьг енетического полиыорфизма у рамбулье по сравнению. ; о -■ испанскими' и северокавказскими овцами'. (21 против 30 и 34 'аллелей по II локусам). • •; •/ -.. •'.... >V.

' .3.3.2.Аллел^^ пород.Каждаяпорода /животных

характеризуется, индивидуальной,ей толшкр/свойстеевной частотой мг®^ -ров. Учитывая это, ; нами были'изучены ряд полутонкорунных пород: •ци-. гайская,.. остфризская,. тексельская', североказахская/ кроссбредная по группам крови и полиморфным системам белков.4 Г-'Л^!;

У цигайских овец на основе семейного анализа в скст?мах А," В, ГС групп крови выявлено по четыре акледя, в системах. В, 1?. М, I - по два аллеля. ■/,/ ■ '/'■ .'.';'-'";:''.'■■...-•-' ■''/./■■'■ /л-/ --'*■-у'-' ■■'/■-.'-. -':

. Отличительной особенностью'; этой, популяции является вырокая ; частота встречаемости генотипов А*??.. иАа/~ (0,428 и 0,208).и низкая концентрация генотипов А^/ь й А^7" (0,С06). По частоте высокой встреча-, емости'аллелей Прежде всего нужно назвать* А° и А~(0.582 и 0,314), ниЕ(4ой была частота А^.аллеля,.-впервые выявленная среди,всех исследованных пород и помесей. ;. //,'■'/ ', '"' ''.'■:'''■ ."'■'.' ".'.■■ ■ В В- системе цигал наиболее встречаемым оказался генотип Вь/ь (0,572), а' среди аллелей В1? (0,692) и В" (0,208). В С-системе у цигайских овец превалировали-аллели С6 (0,717), С® (0,145) и С" (0,107), из генотипов-с"^ (0,554).В В- системе у. исследуемой породы превагаро-иали генотипы В®7®, (0,541 и 0,277) и аллель-(0,679). Р-система в исследованной популяции была, представлена '-Кг и гг -генотипами

(0,390),. а распределеЮ1в/аллелей выглядело ,гаким образом: р (0,415) и г..' (0,585). В (тсистеме превалировали гомо- и гетерозиготный генотипы II (0,497) и и (0,409), а частоты I и 1 адлеля составляли соответственно. О,'701 и 0,299. По М-системе наиболее часто встречаемым оказались генотип М^~;(0,471б) и аллель (Г (0,6160). А всего по цигайской породе было установлено 38 генотипов и 20 аллелей 7 систем групп крови. л1 г'V;=■--_■ V; 'V "V-; ' '■'; ■ :'■'■'.

Анализ соответствия фактического ожидаемому распределении генотипов' по 10 системам показал, если в локусах М, I, ТС ,НЬ генетическое равновесие сохраняется, то в остальных оно нарушено (Р<0,05-Р<0,001)1 из-за суаественного недостатка гетероэигот. ..V-"'-У":1

"Наибодьоее распространение в. исследованной группе у '. тексельских овец имели I,.; ВЬ, СЬ» Ма, Я, Оа, 0^ (от 0,14 до 0.99).'антигены П-У-Групп по предложенной нами классификации.' По А-системе отмечается характерная : деталь для мекспгорых короткохвостых пород' овец-низкая встречаемость антигенов Аа-к АЬ (0,03 н О).Отсюда наиболее высокая 'частота встречаемости .'иэ: генотипов ^гомозиготы Ат/~ (0,963) й ниэкая-гетерози-готы А®^". (0,031), толькоодинслучайбыл с; гомозиготой Аа/а, (0,006). Из аллелей часе' всего выявлялся А" (0.978) и редко А* (0,022). . ''V- ? • ./ По В-системе отмечалась низкая встречаемость • антигенов ВЬ." В<1, Ве, ВГ.; обратная картина вабяадалась в отношении частоты встречаемости антигена Ве. Всего бшо Явлено ^ .. '

' - Генетический анализ С-системы проводили с использованием двух ая-тисывороток (аити-Са и анти^СЬХ. . В результате было выявлено С генотипов ' и 4 аллели'.' Иэ; них наиболее часто встречаемыми генотипами оказа-лись^'.СТ^^^.иа аллелей - . ''. • ".

44 По М-системе^наиболее часто выя^емым - Уенотйп^' оказался Мв/в (0,4)у-ре*е^всего;отмечался м7'^; (0.275),Вс^ча«^ть;а1лелей М^и М~ в исследованной популяции 'бьиа почти одинаковой. '

По 0-системе ;у тексельских овец иэ трех известных генотипов, чаще выявлялась', гомозигота О"^" (0,713), а из аллелей-0" (0,828) .' • •

4'4. У .текёелей по я-систёме . преобладала ч встречаемость антигена (0,58) над О'(0,41);.тогда как по аллелям было наоборот, частотаг ге-йа;составила О.'ббб. а Й .70,344, Из генотипов чаде всего отмечался гг -

; ^^ с^;.;.;../..■ • • - •';*•,••':/. ' •'•.'';; У, тексельских овец низкой была' встречаемость' 1- антигена (0,01) и соответственно".частота-1'¡антигена; (0,99) ,:'; из' генотипов наибо-.; лее: часто, выявляемым' оказался'• 11; (0.745) . > Нарушение' генетического равновесия'.отмечалось в С-, Г М-,' .6-, -К-системах (Р<0,05-Р<0,001)~и было обусловлено за счёт'избытка гомозиготных генотипов. ."41--- : 4 .

:: - -Известно,'..чем" выше степень- гомозиготности, тем меньше число эф- . фективных :алиедей (Ма) в локусах и тем значительнее уменьшается гене-

. тяческое разнообразие в популяции. Самая низкая эффективность была по",', А- и 1-системам -1,035 и 1,310; ватем 0—1,393; Я—1,802; и М—1,969. Наиболее высокая степень.. элективных аллелей отмечегга в докусах В (3,649)' и С (2,355), что соответствует полученным даинкм при характеристике каждой системы групп крови овец. 8 системах А, В, С, 0 отмечалась повышенная частота встречаемости "нулевой".аллели, признак, подт-верздагащий высокий уровень.селекционной.работы..По всем системам групп крови выявлено 27 аллелей, а' генотипов-Б5. • ^'х'');.;.., к.■■ V :

у текредьских овец показано только 6 возможных' типов трачсферрииа '-(АВ. АС, Ш, ВО. ВС, СС), кодируемых аллелями:ТСА,ТГВ,ТГТГС. В изученной нами популяции не было обнаружено особей с ТГЕ аллелью..Частоты встречаемости (в2) типов трансферрина в убывающем порядке распредели-. . лись следующим образом: СС (40,5); ВС (ЗЭ.б).ВВ (10,8)> АЗ (5,4), АС ,'-.' к ВО (1,8). У текседьской породы определено 5 типов.преальбумина из б.контролируемые тремя аллелями -.рг3,',рг!4\:рг0.'Фенотип.рГ:у исследованных овец нами не установлен. ;"•'

У обследованных : озец преобладая тип гаптоглобина-. ^ЁЗ (71,4) -ТОЛЬКО у 28, 6Х бЫЛ АВ,--ОТСУТСТВОВаЛ. ТИП ,АА*ГаПТр'глоб1П13.113.*ТреХ^"Т1у10В V;' эстеразы на долю фенотипа ДА было:2,7Х,Аа-29,3^и.максимальное'чксло.' :;.. на аа-80,012. Нарушение генетического.равновесия отыечааи по трансфер^.' ' рину и преальбумину:. Р<Г 0,05 и Р<0,001;,уV."Й/.Й'V;¿¿-Я 'Я:'т : ;.* Анализ гомоз'иготности в целом по .популяши:тёксе^шсй« рзец т:ока-зал,. что '. доля особей, гомозиготных по преальбумину. была; невысока и . составила 20,53, , а по остальным она: отдалась",?Б1ае:;С;тргясферрК!!у у--л 51,4%, гаптоглсбину - 71,4%, эстеразе- 73,82.' В обсем наблюдаемы:) уро->: . вень гомозиготнсоги по аллелям II лскусоз текселей составил"-0,579.го-'• . ворящий о высокой степени консолидации этой породы". г,:" '.•'..''.у. • . • : , Проведенные исследования. показали, Я что овцы'. тетеельсго^'породыгс: разной степенью гетерозкготности шеют различия по молоадюй продуктив- ' . кости (табл.8). .' «

. 8. Зависимость молочной продуктивности (кг) . от,; степени"гетерозигот-' ности у тексельских овец;(по 10 маркируюскм системам),;-

Исследуемое время [Болыэе з,х | Меньсе С-х | Достоверность; ' V ч": V1 |гетерозигот|гетерозигот | различия ч - •'. У-. '•'/•,;

I на особь | на особь'; '•• Г\'\-':.' * '(.• •'/•.'•..:'"•''■•'"•*;• '"'.

.- ___-,.".—:.:;■ _-' /у

■ .. 1.Подсосный период 104,0*0,63 . 72,73±0.79 Р<0,(Ю1 ; : '... •. :; , 2.3а период лакта- . .

ции после отбивки •• 111,9*0,2 .77,98*0,2 Г: : ^0.001: •:.. ' ; ■ 3. Товарная часть мо- '1 - .-Г.-"-.л Г.'/'^ у*'{С^Р'/^у^-У^. V

' люка- после отбивки 7,7б±0,б2 . • 5,23*0,78; Р<0,001,-"./.^./''\ч\ л.

- -. /у-';:-;--;-/ у.'-: 2?-у .

■ Среди„овецданной породы достоверно (Р<0,001) высокую продуктивность' имели особи с наличиемболее трех Гетерозиготных генотипов на 'одну'-голову (выше, 40К.:;уровнем гетероэиготностиК;При этом не отмечена .■зависимость 'между; молочной ^продуктивностью , и сочетанием' каких-либо конкретных аллелей исследованных систем. -

На основе статистического анализа собранного материала; мы притаи к выводу об отсутствии определенной зависимости между какими-либо антигенными факторами; или аллелями белков и изученными признаками: живая масса, настриг рерсти, .-длина шерсти у^овцематсл, полом родившихся яг-[ит, живой-массой ягненка при рождений, числом ягнят в помете,а также живой массой ягаят..в г, .4, 6 месяцев :и длиной их шерсти.

;. В сыворотке. крови овец остфризской породы было определено 12 типов граасферрдаа.^кодируемых'пятью адлельными генами (Т£А,ТГвДГс, ТГ0.

, впервывустздовлен.подкыорфиэм/' 6с-белка и, «-макроглобулина. Отмечена'максимальнаявстречаемость фенотипов с' всЗЭ (0;62б) ■ и АрРР по «-макроглобухкну (0,877).(Табл.9).!

.'Сопоставление наблвдаемых с теоретически ожидаемыми числами животных' определенного фенотипа в пределах каждой системы показало у остфрувов'отсутствие-нарушенного генетического равновесия по Д-.М-.сн, 1-, ТГ;,Ар-доку сш (Р>0»05), - нооно наблюдалось по В-,;С-, R-.Es-.Gc-сястеыш (р<0,01-1^0.001);ПричЫ.ю>^8-и С-системам ва счет избытка ге-террзвгот, тогда' 1шк до остальным локусам > ва счет иебытка гомозигот.

„По Солызшству - генетических характеристик не.было установлено наличие 'досмвершс.: различиймежду' .особяьвг^чых поколений по частотам -аллелей,' генотипов и антигенов» И всё же сравнение частот у трех генераций показала .вначятелыще'изменения по фенотипам (1.в,М. и аллелями А и В трсвсферрина, особевио, между I и .III генерациями в некоторых случаях между I и II,' или I и4 П1 поколениями. Различия по частотам адледей С^беЛка а ^«а^глобудина мфеду I и. III поколениями соста-вадя 1,7-1,8'раза»;-..-'-- '■'""■■,';■

Сравнение поауляШйтрёх 'поколений остфризских ; овец- по В-доку су, традсферркау Осгбелку и а-макрогдобулину показало, что индекс ходс-тва оо О-локусу иеаду поколениями. I и II составил 0,956, а между I и . '-11.1-0,625 и 11Й1 (1-0,832^ Аналогично близкие данные были получены и .во;оста*ьтм таетемаи;;^/^^:^

;-'*Д-Из поколеиюг''-а гшолениевдет взрастание двух аллелей ТГС и П0. Дм двух* ^ёсет^ ев^ейс^ пород /(м^ . была, -харак-

терна высокая встречаежЬсть.ТГС (соответственно 0,613 и 0,737), тогда как дм мериносовых популяций ТГ* и ТГ° аллелй. - . ; ,,' VТаким образом,. проведенные исследования позволили устано: -ггь не .'только различие; в алледофонде трехгрупп животных, но и в целом пока-

4) «

О) U

S

88 NN из ^ О О

Ю

.....о о о о о о о

ООО о о о о о о о о о о о

«I

s

о Ф о оз о ß

~ ñ Я Ö Ö о 8 8 St i

ñw ia

01 ■г*

см ti н in тч о О О О

о о о о о о о о о о о о.

N в в a n g о w m у

N ч « « s ч1 б щ О о О

w о i* о а о о о о

о о о о о о о о о о о о

I I

В и ®

41 H

о.

К '

V . ш •

.■ ' • - 29 - \ ..-.". ■ ■',-.,' ■ ■ „

■"■14 типов трансферрина у овцематок, .Чз^у ягнят и только б типов У бара-нов-производителей.На15больиее-распросхраяение в целом по всей исследованной популяции получили животные с фенотипами трансферрина АО (17,IX), АС.(10,8Х)М (10,8Х), СС и СС (9,72). Редко встречались жи-■вотше с го^згетотад^ в формированш. которых участвовали аллели Р и В

• (1,44-8,70). ' А всего у,наученных, овец типы трансферрина контролирова-' •: лись; пятью аялелъвыми генами: ■ Т^.Т^.Т^.ТГ0, ТГр. Частота встречаемости ТГР у североказахских кроссбредов.встречается редко, как у,ост-'

Фриаскпх овец,'-.:■■ отсутствовал аллель .трансферрина.Е как у всех. полутон-.:Корувных'овец.СЬ^ь1й(.1аггерес- вызывает ;раскладка■ остальных- четырех трансферриновых>ах1шей;::-№к у мериносов кроссбредные овцы характеризовались .наличием высокой частоты и аллелей. .. Почти с такой же частотой встречался- и что является характерк-л! для большинства ; европейских' полу тонкорунных пород. /повышенная. частота ТГ в аллеля ■ говорит ¿.присутствии определенной "доли кровности" местных грубошерстных североказахских овец; Словом, • у кроссбредных овец комбинируйте! аллели мериносов, .длинноаерстных пород и местньк популяций мелкого рогатого '.скота./.'- .ц*. ;•'.*•.' -'■■■; \

: ' Сравнение ожидаем'и наблюдаемых;чисел конкретных генотипов всей •, группы выявило нарушение .генетического^равновесия-по трансферриновому ■ локусу, ■ ва | счет;, избытка ■ гетеровигот. при„одновременном недостатке гемо-. гиготных''животных, пд К*:. и ^ аллелями ; (х2 -30,6, а. Г. Э; Р<0,001). ...... - У.овец; северокаэахск^.кроссбредов было установлено два аллеля в

локусе встеразы (Е^ и:Ез®) и три генотипа (Е5А/А,£5А/а,Езл/а). По локусу; эстеравы высокую ; частоту распространения у всех половозрастных *' групп Овец.получил, аллель, Е^, что' способствовало Оольшей встречаемости 9 породе фенотипов:Еэ АА (73,63-77,68Х), Ее Аа (14,28-18,90Х). При сравнении фактического с\ожидаешы распределением генотипов- эстеразы было • установлено' 'нарушение гепетического равновесия ва счет избытка гомоокгот (хг-40,(1^.-1; ур<о,001).Расчеты средней гетерозиготности ч'пакав^ " выоогай его:;^ (0,66), чем по эстеразе

(0,16).. -л ;-л.''-' . • ' - ■ ■ .■.

' ; -В популяции ;; североказахских овец были-также определены ряд эрит-;;роцйтарЕЫХ- антигенов,; относящихся к .7.: генетическим системам групп крови. обусловдедные 20 адлальгами генами Л Иэ 29 фактических генотипов,, наиболее расорсстранеЕЕЬяа В-»* ^/системам сказались тетерози-.

; гота; тогда как в ш|ести,осталав^ вревалировали гомозиготы. . * '

• •..'•-.' Авалю генетической структуры у: овец из с-за "Волгодоновский" по 9 системам групп крова к белков показывает,; что ожидаемый уровень-го: мовиготностя (Са) по локусам А.- В, С, О был выпе фактического (Н), обЛ; ратноягсистемам. Тесты гетеро- . ,.;Эйгртвости (Т;Г>) по трем системам; (А^ В, С) соответственно составили

■ - ■ ■-.'СО - 1 _

+0,2, -KI.09 К +2,68, что говорит о наблюдаемом избытке гетерозигот. Кгуч<ние соответствия фактического ожидаемому распределению генотипов в локусах групп крови и полиморфных белков показали о наличии генетического равновесия в D-. M-, R-. и I-системах,.и его отсутствие иэ-sa недостатка или избытка гетерозигот в других (Р<0,01-Р<0,001). ' Число эффективно действующих аллелей (Na) по исследованным нами локу-сам было■меньше предельной величины, за исключением системы трансфер-рина (4,174). . -■■'.'■

Распределение частот аллелей и генотипов, а также уровня гетеро-зиготиости у потомков не носило промежуточного характера между распределением у родителей, а в большинстве случаев повторяли частоты либо матерей, либо отцов, что свидетельствует о влияний процессов отбора в раннем онтогенезе (презиготический'отбор, эмбриональная смертность,; отход ягнят в молочный период). у'

3.3.3. Адлалофокд груСоверстних пород овец. Анализ генетической структуры романовской породы в сравнении с готландскими и тексельскими овцами показал,, что романовскаяпорода ближе всего по некоторым системам (A, (i. I, Es) расположена к текселью, которая тамке отличается вы-' сокой плодовитостью, скороспелостью. Обидам для трех пород.была высокая частота Tfc аллелл. .■•■',"

Однако, несмотря на , определенное сходство как с.тексельской ов-: цой, так и с другими породами по ряду генетических'локусов, романовская порода обладает некоторыми характерными особенностями, отличающими ее от других исследованных пород овец. Система А-' отсутствие антигенов дг и АЬ. ас учетом данных полиморфных систем, низкая концентрация ал-/гля НЬБ. Система Ы- высог-ая частота встречаемости антигена Ma (0,875), ■jxo характерно для грубошерстных овец и два часто встречающихся аллеля - Tfc, TfD и ярко выраженный полиморфизм по альбумину. . _ .,;■ .'■ -

Перечисленные особенности могут служить породной характеристикой романовской породы овец и свидетельствуют об уникальности, данной породы не только на уровне морфологических признаков, но и на уровне генетической структуры.. , "

С помощью F-статисткк Райта и G-статистик Ней определили'популя-ционную структуру у каракульских овец. Величины Fis находятся в преде--, лач о,.- -0,024 по трансферрину до 0.008 по гемоглобину, ' составляя в среднем -0,1^1. Отрицательно^ рначениа Fis указывает на' избыток 15,IX гетерозигот в среднем по всей популяции каракульских овец. :1

Коэффициент Fit равнялся, в среднем -0,044," что указывает также на 4,4Х- избыток гетерозигот у каракульских пород в целом. .Показателе подраадеденности -Fst для всех аллелей подсчитывала как средневзвешенный . j всем исследованным популяциям и варьировал по всем .'локуса^ 07 O.OttUAcS) до 0,109 (КЬ). - ,-. : ;.'■';

31- среднее значение Fst по трем локусам составила 11;7х. Это говорит о том, что 88,ЗХ всей изменчивости находится внутри попудяци t ■ кара-"кульской ' овцы я только 11,7% приходится на межпопуляционну» тменчи-вость. -'..'■"■. V

• Другой показатель, позволяющий оценить подразделенность популяций -C¡st эквивалентный параметру Fst равнялся 0,651. Полученные (.несения Fst и Gst говорят об отсутствии «начительноЛ подразделенноеги между различными популяциями каракульских овец,.за исключением черного й серого каракуля.

Показатель Fst Д&ет возможность определить не только неличину подразделенности популяций, но и оценить уровень, генного потока (Нет), поскольку, как было показано ещё в свое время Райтом, Fst снязан с Nem. Исходя из полученных данных, Nem оказался наибольшим у черного каракуля и составил в среднем 119,3, затем у серого каракуля 114,1 и меньше всего этот показатель был у сурхандарьинского 2,0 и каракалпакского сура 2,2. Таким' образом, исходя из полученных данных., следует, что популяция каракульских овец, в особенности черный и серый больше обмениваются генетическим материалом и вследствие этого имеют сходные генофонды.

Проведенная-кластеризация покавала о близости друг дг. ту каракульских овец (0,146), промежуточной была дистанция (D) эдильбаевской порода как от каракульских овец (0;44б), так и от юавдоказахского мериноса (0,779). ' ' '

• Столь малое значение D,. установленное нами для популяций каракульских овец, говорит об их генетичеаюй близости и свидетельствует в польву сделанного ранее предположения о существовании единого генофонда в исследованной части каракулеводческого ареала.

- - ч 3.3.4. Внутренняя м межпородная дифференциация овец на основе расчёта генеетчеенкж расстояний. Генетическую' оценку овец грех продуктивных направлений проводили с использованием 7 систем групп крови, в итоге было показано 50 аллелей 7 систем групп крови, при этом, 20 ал-.лелей оказались общими для всех исследованных популяций овец. Возможно, .данные гены соответствующих локусов в эволюционном плано являются солее консервативными для вида Ovis, большинства пород овец. Наиболее гетерогенной, какоказалось является Б-система, в ней выявлено наибольшее количество.аллелей (35) (табл.10).

Наименьшая средняя степень гомозиготности (0,477) была Еыявлена у асканийской породы, а максимальная-у каракалпакского сура (0,641).

В наших исследованиях . получена'.- интересная закономерность по Ма антигену. У овец кавказской породы, у которых тонкорунная шерсть, уро-. вень Ма антигена составил 13.2?. у полутонкорунных-цигайской- 62 ост-фризской- 66 и текселя-.74Х. что касается овец с груоой аерстью; рома-

■10. Общая характеристика'.аллелей 7 систем груш крови различных

■ '.' --.'о!. -пород и помесных овец .• ' • •;' V...--'.."''• - ". . -

: ЛокусГ : Обозначение аллелей У . ; •'! Число аллелей 1

■ А. ; а1,аг(а).Ь,аЬ.-'. :-•',".''• ■ '-,••• С V ''.'• '5/ . В Ь,с1.е,е2(е),с1г,ег,Ье2.М.е2<1. - -У. ; , ; •

йе21,1,Ь1,ее21,Ье21,<11,е21,1Л.с»1, \ . . / 35 • .

■■ Ь,Ьд,е1в2.Ьс1г1;г1;^1е2.М1е1е2.-'УУ'я' '.•" . V' , ' . ',"

у'-'У;

с -Л, а,Ь,аЬ,- • ; .• '..У-- :-V/У:-У * У."; .0 а.Ь,- '-У; V :

■:. а.ь,- ' "„ у:л;у; уу :-•.;; .". ' •••у;-з>уу-.- ■

" {г (?.г • ;••••••':. У/У'- У •ч'У'уУУУУУУ;'*>УУ г-. -У"',.

л м уИуУУууУу::^

■■■'■■ У**: У '-УУ ИтогогУЭДУУ-.ч^-У'.''

нозской, молдавской, и'.узбекской' популящщ кгракульской■ породы,4. то -уро-У вень антигена Ма соответственно был 67. 5, 00 и'96.42, високая.она .бы- ' ла и у каракалпакского ■ сура (93, ЗГ) У; Отсюда, - чем. грубее персть у овец, £ тем визе встречаемость 'антигена Мэ.Есть предположение,;что это связано ., с различиями в селекционной направленности при' разведении тонкорунных , полутотсорунных и грубосерстных овец по;' их': шерстным качествам. Малая -О частота Ма антигена в популяциях мериносовых овец может быть следстви-"I ем положительной связи низкой 1юнцентра^с! К(* .аллеля; ЮЛ1М в эритро-У цитах крови чи<-тип) . с какими-то Шерстными качествами, -- по -»юто^ 'ве-. У ■ дется селекция в тонкорупном овцеводстве. у' ' * уУ:УУ чУУУУУУ;:-^

Вычисление'показателей'::дистанции(0) -.'проводили;•на - персональном';': компьютере 1Ш ГС по программам. 'Тейетические 'расстояния^на. оаювадии . суммарных частот антигенов 7 систем.грукп\крови(рис.2).' Анализ 18 .'р£э-У

■ личных пород и.ряда помесей: (п-2205) показал о-возможности примененияд ' генетических маркеров 7 систем групп крови' для : выяснениефилогенети-У. ческой сваей между ними.По результатам. все-кссдедованные;пэродм и по' меси овец располагаются в двух больв^'.кластерах.:.: ВУ. первой-каракуль--;

ские овцы: ■'. черный сур из Увбекистана и каракалпакский сур из Еимкент-"? '■■ ской области; формирующие свой отдельный кластёруув;друго,й части дан-;' ного большого кластера располояились;аскаиййская и кавказашя.породы/ 'замыкающиеся в собственный кластер и отделенные, от' другой группы,;.ци-У -гайской породы и Р1 -О х И, образующие свой мастер.

'.. Другой большой кластер был представление . основном . 'европейским!» породами и рядом помесей различной кровности по^остфризской породе,5 которые в будущем состоят'костяк полу тонкорунной многоплодной . породы \

II генерация остфризов •

- ГУ генерация остфризов,-, .. III генерация остфризов ■ ■ Рз - помеси.в сеОе ■

: Гг - ПхОхОхЦ Н X О / Гг - охохцхо

остфризская; 1935г. ' ■

Г1 - Ох т-

романовская

\.тексель"~ - ", ■

■ североказахская кросс- - . -Средная.порода -•:'.. '.у-1: Т1 - О X Ц • -

■■ цигайская • , ■*;..-•• ¡бсканийская '

•'■ .кавказская - . ' " • каракалпакский сур г

- 33 г

—'.1—1 —^ I

I:

К 1 1

4 - ■

н

Ьг

■ I .

каракуль узбекский :—'-У. ;

Рис.2. Дендрограмма кластеров анализируемых пород и помесных овец

овец в.Республике Молдова. У ■ ■ / ' •

: - Из исходных родительских пород, Рэ (помеси в себе) оказались ближе* остфриэским овцам, - чем к цигайской породе. Эти данные соответствует направленности породообразовательного процесса, предусмотренного схемой ьри создании новой породной группы. А в целом анализ 18 популя-иий п9каэад неслучайный характер' распространения частот антигенных характеристик,; отнесенных нами к различным продуктивным направлениям по хозяйственной классификации. Полученные материала свидетельствуют о несходстве популяций по группам крови, различающихся по их генеалогии и подтверждает правильность существующих представлений, о' родственных свййях исследованных популяций. Аналогичные результаты были , получены прй использований полиморфизма ДНК. Вместе.с тем, при исследовании генетической дифференциации современных пород и помесных животных оказывается, что. овцы как вид чрезвычайно однородны. В тоже же время, гене-

тические различия между разным!! популяциями овец проявляются настолько отчетливо,что по ним мсшю судить о некоторых передвижениях популяций в доисторические времена. Это однако, ье исключает и того, что.генетическая эволюция овец, и даже коз обусловлена не развитием их.как"биологических видов, а социальной историей становления человечества.

Исследования показали, что аллели 7 систем групп крови и поли-цорф;ше системы трансферрина, эстеразы,' преальбумина, 6с-С елка и дру-; гих 0ежовых систем можно эффеггивно.исподьвовать при оценке у овец генетической изменчивости в породах и при выявлении их родственных, связей (мониторинг в;пространстве), изучение ряда поколений (монито-- ринг во времени в разных стадах и группах животных). ... -* . ■

У пород, близких по происхождению, сходных аллелей было больше (асканийская и кавказская),, если же между породами в пролшом и были родственные исторические свяви, то в силу изоляции,, селекционной раб»-; та одинаковых аллелей с близкой их частотой, у них стало немного. ■ Нал--ример, такими являются овцы кавказской породы,' испанского мериноса и' рамбулье, которые достоверно различались между собой по всем'II локу-сам. Аналогичные различия по физиологическим маркерам наблюдались и между другими породами овец. Наглядно эти различия^отражает коэффициент генетического сходства, вычисленный как по антигенам, так и по аллелям нескольких вместе взятых систем крови у трех генераций остфризс-.' ких овец, а также между кавказской и киргизской породами и казахским мериносом. , ' .'■-. ..

Результаты анализа показали, что в 14 изученных нами породах овец чаще всего нарушения отмечали у 10, причем >то наблюдалось по большинству изученных локусов. Следовательно это говорит о том, что селек-; ццонный процесс ' влияет определенным образом ка динамику .аллелей,' гна генетическую структуру той иди иной популяции. Это. четко ' видно по' большинству тонкорунных овец, наиболее изученных по группам крови и полиморфным системам белков крови. Анализ расщепления генотипов пока— зал достоверный недостаток теоретически ожидаемых гетеровигот в породах асканийская и кавказская по В- и С-системам (Р<0»05-Р<6,001). Что же касается цигайских и тексельских овец, то у них в большинстве систем нарушения были связаны с избытком гомозигот (Р<0,05 -.' Р<0,001). П6 остфризам и северокаэахским кроссбредаы нзвувзпия генетического равновесия были связаны с одной стороны 'избытком гетьрозигот ( В- и С- сист темы групп крови) (Р<0,01 - Р<0,001)^ а с другой сторокы/ наоборот, избытком готзигот по другим системам (II, , Ез, ¿.Ос,.'; р,ч Ы) (Р<0,01 Р<0,001).причина изменения генетической структуры популяции может Сыть следствием длительного использования-гомозиготных!производителей, иибг: ридинга (тексёль,:остфризская и'цигайская породы) или влиянием применяемой ' системы племенной работы (североказахская 1фоссбредная псфода). '

• '•* . • ■- 35 -;.

Анализ генетической структуры популяций изученных порол выявил повышенный уровень наблюдаемой гомозиготности диаллельных локусоа, за исключением аршгастеразк. Эта тенденция особенно была заметна и в ряде сложных систем (А, В, С) некоторых пород. ■. '

ВЫВОДЫ . ■ •

1.-Получены и изучены диагностикумы,выявляющие антигены 7 систем групп ■ . крови Овец и 28 эритроцитарньк* факторов коз.Из них 14 овечьих созт-4ветствуют международным стандартам, 5 антисывороток выявляют новне антигены и составляют подтипы антигенов Аа,. Bd.Be, Da, Ыа, приготовлено три новых реагёнта с номерными обозначениями; (Mldi,Mld2,MIcl3). При подборе пар донор-реципиент с целью получения* специфических антисывороток целесообразно испольвовать разнополых и разношерстных овец старше, одного года. Применение реиммунизашш, неспецифических стимуляторов (адгыовант фрейнда, стабилизированная лимфа, сульфозин) .. повышает-иммунологическую реактивность продуцента и увеличивает эффективность проводимых иммунизаций в 2тЗ раза.

3.' С учетом иммуногенности эритроцитарные антигены разделены на 5 классов:! -сильные (Аа, АЬ, ВЬ, Са). 2 - средние (Bd, Be, Bl, Cb). 3; слабые (Вг/Be, Da, Ma, Be). 4 антигены, выявляемые естественными ' антителами О).. 5 - ."аре'активные" антигены (1,1). При составлении

Г. плана иммунизации численность пар (донор-реципиент), для получения реагентов к слабым и средним классам антигенов следует увеличить в >■' 4-6 раз в сравнении с численностью-пар к сильным антигенам.

4.¡Показано, что при межпородной иммунизации овец эритроцитам» крови v j наиболее выраженная реакция отмечается со стороны тиреовдтэй и алре-' ': валовой систем. Приведенные материалы исследований кэнетаггирупт гипотезу о том,что ir-гены; контролирующие силу иммунного ответа ока-

t*V залмсь не.сцепленными с генами групп крови и пешагорфи« 'систем бе-.лков.,. ...-•/' ''- ■' ; -.Л- ■

5.-Проведение сравнительного анализа реагента четырех видов ва доворс-ких, стадах' овеци кЬз позволило установить эквивалентность эритро-, -цитарнух антигенов R и Са овец к R и 0г-20 у поз. а также R овец л

'-"„. коз с J скота и яка. Все это позволяло говорить об оСкеости двух си-стеы R и С у овец и коз. и одной J - у четырех видов жвачных (скота, яка, овец и коз).Не установлена такая общность по ликфапитаршм аа-' тигенам I класса OLA, CLA и BoLA sa основе реагентов крупного рога.' 'того скота:-Л' .*'.' ■ '-.■.■..

6. Исследование фенотияического стаяовленма .антигенов груши кроен и V' оолгагрфных белков в онтогенезе езеа покзгалс, что неейтедавлз кзбе-

: -.гать ранних генетических,маркировок у нгшгг в- течение первые двух

;".■•-.. ■; .. - эа - •• • . - : .

месяцев после рождения. : -.'.■..;'■''>'•,■"

7. Генетический контроль достоверности происхождения овец по физиологическим маркерам являетсй основным и объективным средством проверки соответствия родословных; Для раскрытия полной ситуации о состог янил племенных записей достаточно анализа крови у • £0-302 молодняка в больших отарах (600-800 овцематок) ,от 30 до 50Х- в яебольгаихста-

* дач (200-500 ролов),"Количество недостоверных; записей приходится в основном 1<а лакное отцовство. Суммарная разрешающая способность ис-польосва^ных систем составила от 82,5 до 99,9Х, -..:.■,'- ' / V

8. Широкая апробация генетического метода при контроле .достоверности происхождения ягнят показала, что - целесообразно . ©го проводить не только для. проверки родословных, но.и при оценке Оаравов-произвсдй-телей по качеству потомства, трансплантации эмбрионов, установлен^ моно-'и дивиготных ягнят, купле-продаже производителей, ' V

9. В отличие от крупного рогатого скота, рождение шпоакгопшх, химерных близнецов среди овец различных'поров крайне редкое- явление, У

. овец с многоплодным окотом нам .удаюсь. обнаружить ыоиозиготныхягнят в 8 случаях из 231 двойневых и тройневых потомков(0,04Х).: у

10.По полиморфным системам крови у. 18 различных пород и понесши , овец установлено 60 аллелей. Наименьший уровень'средней степени : гоьгози-готности отмечался у асканийской породы (0,477), . а /максимальный у

. каракалпакского сура (0,641).. •■■;■: V.

11.Методом геномной дактилоскопии установлены. геиотипические особенно-, сти ДНК полиморфизма у пород овец различной продуктивной ваяравлеэ-ности. Полученные материалы подтверждают ранее установленные вако-номерности взаимоотношений пород с испольвозавиеы других физиологи-'

' ческих мазеров. '.■;■■.■ .■.''■■> ■ '■■■"■■'■"■ "-лУ

Практически» предяэшжкя О целью широкого внедрения в овцеводство методов генетического ана^-лиза на основе физиологических маркеров осуществлены следующие меро-: приятия: ■ ■■ ;''■"■.'■ У" " у^:-':; .%'■'■;■■ '

- организовано изготовление швороток-реагентов для ояределения. групп крови овец и коз;при подборе пар донор-реципиент с целью подучеши ;аа-хисывороток целесообразно использовать разнополых и разнопородных овец старше одного года. Применение реиммукиза1щк,н9спещ5ф«ческ1мстшудя-торов (адъюаан'т Фрейнда, стабилизированная лиифа,' судьфозст) повышает иммунологическую реактивность продуцента и увеличивает : вФФективность проводимых имчунизаций в 2-3 раза; У -'.V У С :

т. сформировано эталонное по группам крови донорское - поголовье овец,' * создан Банк сыворото№-реагентов(ТУ-46~12-39-84 от 05.09.84 г.)? ''

• - на основе {применения Банка реагентов разработаны способы' проведения

. . . • _ . ч .- - .. Of? - .,

/.проверки родословных,. оценки баранов-производителей по качеству потом-ства, .травсшшнтации эыбрнонов,. определения ' изменений частот аллелей во времени у различш« 'генераций и пород овец; X' -■'■'-, ; ' ' - систематически . осуществляется участие в международных сравнительных -испытаниях диагностикумов, что:обеспечивает проверку качества подученных реагентов и ¿равнение с эталонными международными стандартами; *

■ - проводится поиск-новых полиморфных систем, пригодных-для исподьэова-. ния в качестве физиологических маркеров. " • -

Хпксок осковиих 'опубликованных работ . 1

I. Марзанов Н.С. Иммунологические методы исследования и их испольао- -; - - вание в' практике овцеводства//Актуальные проблемы развита агро-X - промышленного комплекса: Тез.докл.краев.науч.-практич.коиф.молодых ученых.Ставроподь>1983.-С.141-144. , ■ - ' ■■ . ■

. 2. Казановский С.А.,Акфиногенова'Т.А.,Марзанов Н.С.Системы групп кро-.'■"ви у.овец кавказской породы//Дитология и генетика. -1985. - N6. - С. 446 X -452. ' 4 ■■■■. ■■'■■' '.■■..-■ -. \ •

Сухова ■ И.О. ,Марзанов Н.С. .Гафаров Р.Г. и.др.Пояучеиие ивоиммуннш' ■■I • .".сывороток к. эритроцитам крези,овец//Докд.ВАСХНИЛ.-1988.-М 1 С.02--;-:;з5; X.;'-;ч :.-. "■■ X '. .

4.- Марзанов Н.С. ,Лкщканов П.И'.Группсюпецнфические факторы кроыи овец Ти их "использование -в. селекционно-племенной работе//кэвестия All

.-;,.' МССР^ Серия биол.и химич; наук.-1989.-N 5.~С.43-45. '■'-".

5. Люцканов^П.И..Марзанов Н.С..Вабенко В.Ф. Проверка бар&юв по каче-V ству потомства//Зоотехния.-1930.-Н5.-С.39-40. ' .

■ 6. Марзанов Н.С..Силантьев А.Н..Люцканов П.И,.: Характеристика"генети-

• ческих-связей между различными породами и помесями ;овец//Дитологчя и генетика. -1990<- N5.-C.42-44. ..'.' ' - . ' .-.

7. Марзанов.H.Ci.'.Люцканов П.И. Характеристика породы тексель по снс-''Х- темам групп крови овец//Докд.ВАСХКИЛ.-.19ЭО.-NU.-С.ЗС-41. . -8.".Марзанов К.С.,'Доц!(анов П.И. Группы крови в селекционной работе с\ o:-jUiMH//3ooTexH;«t.-1991.-Nl.-C.21-24. Х-Х-Х Х'\Х" • .

9." Марзанов Н.С.Иммунодогая и ,иммукогекетика овец и коэ.-Кишинев:Шти-X. "инца.-1991.-238 с. (Моногра4«я). / ' ' ■ ■ ' ' * - " ~ •• \ 10. Бабенко В.Ф.', ;Бузу Л.А., Марзанов Н.С; и др.Рекомендации по техно-.

;Х логии' производства - продукции овцеводства л Республике Молдова// X'"'НПО 'Тевит".-Кж1инев: Шедагроинформр'еклаыа.-1992.-85 с.-. : Ii. MiapaakoB ■Н.С.+ЛацкановГГ.И. .Имбаев С.М.': и др.Антигены групп, крое it у коз оренбургской псродьь'У! Мездукзр.кспф.по частной генетике X с.-х^л^отных:Тез.доклХ-Асвэния-Нова..-1993Х-1 е. .

' -Лод£:.еа;;о к -lamsÉ 3I.QI.C4r. .. Заказ 550 ' ' • .

ï-./.-a ICÜ ... С 0бъем î2.o 'гч,-кад.л."