Ферменты как маркеры адаптации сои к условиям выращивания

Иваченко, Любовь Егоровна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Ферменты как маркеры адаптации сои к условиям выращивания
ВАК РФ 03.02.08, Экология (по отраслям)

Автореферат диссертации по теме "Ферменты как маркеры адаптации сои к условиям выращивания"

005012031

На правах рукописи

ИВАЧЕНКО ЛЮБОВЬ ЕГОРОВНА

ФЕРМЕНТЫ КАК МАРКЕРЫ АДАПТАЦИИ СОИ К УСЛОВИЯМ ВЫРАЩИВАНИЯ

03.02.08 - экология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук

1 2 МАР 20\1

Москва-2012

005012031

Работа выполнена на кафедре химии ФГБОУ ВПО «Благовещенский государственный педагогический университет»

Научный консультант:

доктор биол. наук, профессор Коничев Александр Сергеевич

Официальные оппоненты:

доктор биол. наук, профессор Загоскина Наталья Викторовна доктор биол. наук, профессор Воронков Николай Александрович доктор с.-х. наук, профессор Кобозева Тамара Петровна

Ведущая организация: ГНУ Всероссийский научно-исследовательский институт масличных культур им. В. С. Пустовойта РАСХН

Защита состоится 22 марта 2012 г. в 14.00 часов на заседании Диссертационного совета Д 212.155.13 при Московском государственном областном университете по адресу: 141014, Московская обл., г. Мытищи, ул. Веры Волошиной, д. 24

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Московского государственного областного университета по адресу: 105005, Москва, ул. Радио, д. 10а

Автореферат разосла.. ....." февраля 2012 г.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор биологических наук

Т.А. Снисаренко

Общая характеристика работы

Актуальность исследования. Изучение биохимической адаптации живых организмов к постоянно меняющимся условиям окружающей среды находится в центре современных биологических исследований и требует знаний основ адаптивных реакций. Ведущую роль в поддержании внутриклеточного гомеостаза и адаптации к стрессорам играют ферменты [Хочачко, Сомеро, 1988]. Общие закономерности стратегии биохимической адаптации животных достаточно широко изучены [Лукьянова, 2001; Ковалев, 2003; Цветков, 2009], однако для растений, особенно культурных, обобщения такого масштаба отсутствуют.

Важная роль в изучении глубинных процессов регуляции жизнедеятельности принадлежит множественным формам ферментов и, в частности, генетически детерминированным изоферментам [Markert, 1985; Филиппович, Коничев, 1987; Хочачко, Сомеро, 1988; Nortman, Weeden, 1992; Алтухов, 2003]. Используя информацию об изоферментах, в настоящее время селекционеры решают многие теоретические и прикладные задачи селекции [Ережепов, 1985; Илличевский, 1995; Лапина, 1999; Конарев, 2001; Юренкова, 2005]. Практическая значимость изучения полиморфизма ферментных систем заключается в том, что изоферменты - это эффективные генетические маркеры [Райдер, Тейлор, 1983; Конарев, 1983; Chauhan, Gopinathan, 1985; Левитес, 1985; Глазко, Созинов 1993; Алтухов, 1995; Козлов, 1997; Епифанцев и др., 2010]. Отзывчивость ферментных систем на изменения условий среды неоднократно отмечена в литературе [Блехман, 1979; Флеров, 1983; Лукьянова, 2001; Ковалев, 2003; Иваченко и др., 2004; Олениченко, Загоскина, 2005; Коничев и др., 2005; Цветков, 2007; Домаш и др., 2008; Синькевич и др., 2008; Гао и др., 2010; López et al., 2010; Гамбарова, 2011].

В последнее время определенное внимание уделяется изучению генома сои [Keim et al., 1992; Maughan et al., 1995; Сеитова и др., 2004; Рамазанова, 2007, 2008], полиморфизма белков и в том числе ферментов [Gorman, Kiang, 1977; Hildebrand, Hymowitz, 1980; Griffin, Palmer, 1995; Иваченко, 2000, 2010; Селихова, 2003; Семенова, 2006; Епифанцев и др., 2010]. Расширение и обобщение фактического материала о множественных формах ферментов сои может стать одним из инструментов изучения адаптации.

высокобелковой, кормовой и пищевой культуре, но и благоприятными почвенно-климатическими условиями для её возделывания [Синеговская, 2005]. Здесь же находится северный ареал дикорастущей сои (Glycine soja Siebold & Zucc■), которая обладает высоким адаптивным потенциалом [Ала, Тильба, 2005] и является источником многих ценных генов, отсутствующих в генотипе представителей культурной сои [Козак, 2005].

Несмотря на пластичность и широкое распространение культуры, современные сорта сои очень требовательны к локальному размещению в определенных агроэкологических условиях. Для каждой зоны региона необходимо создавать свои сорта. В исследованиях по интродукции сои в нашей стране основное внимание селекционеры уделяют изучению хозяйственно ценных признаков. Но недостаточно внимания отводится изучению биологически активных веществ [Гинс и др., 2001] и ферментов, которые участвуют в адаптации организма к условиям среды [Иваченко, 1995,2001,2010].

В Амурской области выращиваются в основном сорта сои местной селекции, выведенные классическими методами. Они генетически очень близки, что приводит к обеднению генофонда культурной сои и ведет к ограничению ее адаптивного потенциала [Тихончук, 2004]. В связи с акклиматизацией и продвижением выращивания сои на север [Васякин, Гамзиков, 2002; Хегани и др., 2004; Посыпанов, 2007; Кобозева, 2007] возникла необходимость в глубоком изучении ее эколсго-биохимических механизмов устойчивости и продуктивности.

Для более объективной оценки исходного материала культурной и дикорастущей сои на адаптивность необходимо было проанализировать различные сорта и линии сои, произрастающие в Амурской области, а также полученные из разных эколого-географических зон. Важно определить направление биохимической адаптации, используя объективные показатели морфометрических и биохимических тестов в зависимости от комплекса экологических факторов. Для решения этой проблемы необходимо наличие каталога электрофоретических спектров ферментов дикорастущей и культурной сои, изучение влияния среды на активность ферментов и выявление лучших сортов сои, адаптированных к условиям выращивания.

По нашему мнению, характеристика сортов сои по активности и множественным формам ферментов позволит создать паспорта сортов сои, которые можно использовать в селекционной практике для усовершенствования методов создания адаптивных сортов сои.

Цель и задачи работы. Основная цель работы - изучить возможность использования ферментов в качестве маркеров адаптации сои к условиям выращивания. Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи:

1. Выявить влияние агрометеорологических условий выращивания на активность и электрофоретические спектры катапазы, пероксидазы, кислой фосфатазы, эстеразы и амилазы районированных сортов сои.

2. Изучить адаптивный потенциал дикорастущей сои и выявить различия в активности ферментов межвидовых гибридов сои F2 и F3 (G. тах х G. soja) и их родителей.

3. Исследовать активность и электрофоретические спектры ферментов, биохимический состав семян, а также морфологические показатели сортов и сортообразцов сои коллекции ВИР различного эколого-географического происхождения.

4. Установить отзывчивость ферментов исследованных сортов сои к различным агроэкологическим условиям выращивания.

5. Изучить влияние осадка сточных вод (ОСВ) и стимуляторов роста на морфологические и биохимические показатели семян сои и выявить возможность их использования для выращивания сои.

6. Исследовать влияние температурного стресса и тяжелых металлов на энзиматическую активность проростков сои.

7. Оценить возможность использования ферментов в качестве маркеров адаптации сои к различным условиям выращивания для составления биохимических паспортов сортов сои.

Научная новизна и теоретическая значимость. Впервые представлено и экспериментально обосновано перспективное для селекции сои направление исследования ферментов в качестве маркеров ее устойчивости к условиям выращивания. В результате экспериментальной работы выявлено влияние погодных условий на изменение энзиматической активности семян сои различного филогенетического и эколого-географического происхождения. Впервые проанализированы и обобщены закономерности биохимической адаптации дикорастущей и культурной сои к условиям выращивания. Выполнен детальный анализ и систематизированы данные о выявленных электрофоретических спектрах каталаз, пероксидаз, кислых фосфатаз, рибонуклеаз, эсгераз и амилаз семян сои. Впервые изучена связь разнообразия форм ферментов с различными условиями выращивания сои.

Обоснованность научных положений, выводов, рекомендаций. Научные положения диссертационной работы, выводы и рекомендации являются результатом многолетних полевых и лабораторных исследований, проведенных с применением разнообразных биологических, биохимических и физико-химических методов анализа. В исследованиях использовались стандартные и частично модифицированные автором биохимические и биологические методы, применяемые для определения химических и биологических показателей растений. Полученные результаты статистически обработаны.

Практическая значимость. Составлены биохимические паспорта районированных в Амурской области сортов сои; сортов и сортообразцов из других эколого-географических зон, а также линий дикорастущей сои.

Предложен способ использования энзиматической активности в качестве маркера устойчивости сортов сои к различным агроэкологическим условиям. Выявлены сорта сои, которые можно использовать в интродукции и адаптивной селекции для повышения адаптивного потенциала сои.

Основные теоретические положения и практические результаты диссертационной работы используются при чтении лекций и проведении лабораторных работ по биологической химии для студентов 4-5 курсов естественно-географического факультета ФГБОУ ВПО «Благовещенский государственный педагогический университет», а также элективного курса «Химия жизни», рекомендованного Министерством образования и науки Амурской области в качестве учебного пособия для учащихся 9-11 классов общеобразовательных учреждений.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Дикорастущая соя, обладающая высоким адаптивным потенциалом, характеризуется повышенной удельной активностью и небольшим числом форм ферментов (каталаз, пероксидаз, кислых фосфатаз, рибонуклеаз, эстераз и амилаз). Невысокая удельная активность ферментов культурной сои компенсируется увеличением числа их форм, что повышает устойчивость растений в различных условиях выращивания.

2. Стабильная удельная активность и число форм исследованных ферментов или их повышение в различных условиях выращивания семян сои свидетельствует о высоком адаптивном потенциале сорта сои.

3. Адаптивные изменения активности и количества форм ферментов под влиянием условий среды связаны с количественными изменениями антиоксидантов (каротина, аскорбиновой кислоты), микроэлементов, масла и ненасыщенных высших жирных кислот (олеиновой, линоленовой кислоты).

4. Удельную активность и множественные формы ферментов семян можно использовать в качестве маркеров адаптации сортов сои к различным условиям выращивания.

растениеводстве» (г. Барнаул, 2003г.); Международной научной конференции «Перспективы использования геноресурсов в селекции сельскохозяйственных культур Дальнего Востока», (г. Владивосток, 2004г.); региональной научно-практической конференции «Проблемы экологии и рационального использования природных ресурсов в Дальневосточном регионе» (г. Благовещенск, 21-23 декабря 2004г.); V, VI, VII, VIII Международных симпозиумах «Новые и нетрадиционные растения и перспективы их использования» (г. Пущино Московской обл., 2003г., 2005г., 2007г., 2009г.); Ш Всероссийской научно-практической конференции «Инновационные процессы в химическом образовании» (г. Челябинск, 12-15 октября 2009г.); XI Международной научно-методической конференции «Интродукция нетрадиционных и редких растений» (г. Мичуринск Тамбовской обл., 21-25 июня 2010г.); Международной научной конференции «Фундаментальные исследования» (Израиль, 10-17 апреля 2010г.); 1П общероссийской научной конференции «Актуальные вопросы науки и образования» (г. Москва, 11-13 мая 2010г.); Международной научной конференции «Мониторинг окружающей среды» (Италия (Рим-Флоренция), 12-19 сентября 2010г.); Международной научно-практической конференции «Аграрные проблемы соесегощих территорий Азиатско-Тихоокеанского региона» (г. Благовещенск, 8-9 сентября 2010г.); П1 Международном экологическом конгрессе ЕЬРГГ-2011, V Международной научно-технической конференции «Экология и безопасность жизнедеятельности промышленно-транспортных комплексов» (г. Тольятти, г. Самара, 21-25 сентября 2011г.).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 60 работ, включая 13 работ в периодических изданиях, рекомендованных ВАК РФ, 2 монографии, 20 статей в материалах международных, всероссийских и региональных конференций, 20 статей в журналах и сборниках трудов, 5 учебных пособий.

Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы (глава 1), описания материалов, погодных условий вегетационных периодов и методов исследования (глава 2), изложения и обсуждения собственных экспериментальных данных (главы 3-9), заключения и выводов, рекомендаций к практической селекции, списка литературы и приложений. Работа изложена на 389 страницах машинописного текста, включает 65 рисунков и 42 таблицы. Список использованной литературы включает 478 источников, в том числе 292 на иностранных языках.

Личный вклад автора. Автором сформулированы цель и задачи исследований, теоретически обоснованы пути их решения, подобраны и адаптированы для сои методы исследования. Работа написана автором единолично. Исследования проведены при непосредственном участии автора в совместных экспериментах с аспирантами и другими

исследователями (о чем свидетельствуют ссылки на совместные публикации), которым автор выражает искреннюю благодарность.

Часть исследований, представленных в диссертации, выполненных совместно с аспирантами, оценены победой на II Дальневосточном молодежном инновационном конвенте в номинации «Лучший региональный проект» (2010г.). Аспирантка С.И. Лаврентьева на XXIV Всероссийской конференции «Национальное достояние России» при Управлении делами Президента РФ удостоена диплома лауреата первой степени и звания «Национальное достояние России» (2009г.).

Работа выполнена при финансовой поддержке грантов: 1) США -Дальний Восток России: активное партнерство (Портлендский университет - Благовещенский государственный педагогический университет (БГПУ), 2000-2003гг.); 2) БГПУ (2005г.); 3) Global Greengrants Fund (США, 2007г.); 4) Фонда «Согласие» и губернатора Амурской области «Ступени в будущее российской науки» по направлению «Модернизация агропромышленного комплекса» (г. Благовещенск, 2010г.).

Содержание работы Глава 1. Влияние условий выращивания на биохимический состав сон (обзор литературы) В данной главе изложены сведения о сое как экологически пластичной культуре, о ее химическом составе и влиянии на него экологических факторов, а также обобщены материалы о ферментных системах сои и некоторых аспектах их применения в практических целях.

Глава 2. Материал, условия и методы исследования Материал исследования. Материалом для исследования служили семена сортов сои (Glycine max (L.) Merrill), различающихся по скороспелости и происхождению. В работе использованы скороспелые сорта сои Закат, Смена, Соната селекции Государственного научного учреждения «Всероссийский научно-исследовательский институт сои Россельхозакадемии» (ГНУ ВНИИ сои, г. Благовещенск), Соер-4 саратовской селекции и среднеспелые - ВНИИС-1, 0ктябрь-70, Гармония селекции ВНИИ сои и Луч Надежды селекции Дальневосточного государственного аграрного университета (ФГБОУ ВПО ДальГАУ, г. Благовещенск), районированные в Амурской области. С 1987г. по 2011г. для отработки методов исследования и лабораторных опытов семена сортов сои предоставлялись лабораториями семеноведения и селекции ГНУ ВНИИ сои. В 1999-2002гг. семена сортов сои получали из двух Госсортоучастков Амурской области, расположенных в южной (Тамбовский район, с. Садовое) и северной (Мазановский район, с. Белоярово) агроклиматических зонах.

Формы дикорастущей сои (Glycine soja) получены из трех агроклиматических зон Амурской области (КА - Архаринский район,

южная зона, КБ - Белогорский район, центральная зона, КЗ - Зейский район, северная зона). В 2000-2002гг. сою выращивали в культуре на опытном поле ГНУ ВНИИ сои в п. Садовом Тамбовского района Амурской области (южная агроклиматическая зона). Коллекция семян сои различного филогенетического происхождения и 2 гибридные комбинации второго и третьего поколения G. так х G. soja предоставлены для исследований лабораторией генетики ГНУ ВНИИ сои.

В период с 2000г. по 2002г. были изучены 33 сортообразца сои различного эколого-географического происхождения, полученные из Государственного научного центра Всероссийского института растениеводства Россельхозакадемии (ГНЦ ВИР, г. Санкт-Петербург), Дальневосточной опытной станции ВНИИР и образцы селекционеров ДальГАУ. Коллекцию выращивали на поле учебно-опытного хозяйства ДальГАУ (южная агроклиматическая зона). Вторая коллекция семян сои го 26 образцов (получена из ГНЦ ВИР и ГНЦ ВНИИ сои) в 2003г. выращена на агробиостанции Благовещенского государственного педагогического университета (ФГБОУ ВПО БГПУ, г. Благовещенск) (южная агроклиматическая зона) и демонстрационном участке ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт селекции и семеноводства овощных культур Россельхозакадемии» (ГНУ ВНИИССОК, п. Одинцово Московской области).

Опыты по влиянию стимуляторов роста (комплексных препаратов) были проведены в 2003г. на опытных полях ГНУ ВНИИ сои в южной и северной агроклиматических зонах. Комплексные препараты на основе нитрагина и гуминовых кислот, созданные в ГНУ «Тихоокеанский институт биооргашческой химии» (ГНУ ТИБОХ, г. Владивосток), использовали для предпосевной обработки семян в концентрациях, рекомендуемых изготовителем. В опыте использовали два контроля: 1 -сухие семена (контроль без обработки) и 2 - семена, обработанные дистиллированной водой.

Для изучения влияния тяжелых металлов проросты! сои сорта Гармония выращивали на питательной среде при температуре +26°С по общепринятой методике в модификации Бегуна [Бегун, 2005]. В первом опыте использовали растворы сульфата меди, во втором - растворы сульфата цинка в концентрациях б-10"5М; 6Ю"'М и 3-10'3М. Каждый опыт проводился в двадцати повторностях и длился 25 дней до появления второго тройчатого листа.

Для изучения влияния температуры на активность ферментов семена сои сорта Гармония термостатировали при температуре 4°С, 10°С, 23°С, 37°С, 42°С и 45°С в течение 5 часов.

Метеорологические условия в годы исследований отличались от среднемноголетних по температурному режиму и количеству осадков (табл.1). 1999 год оказался сложным по метеоусловиям. В фазе начального

роста сои в обеих агроклиматических зонах тепла и осадков было меньше среднемноголетнего значения. В июле температура воздуха поднялась выше почти на 3°С в северной зоне и на 1,4°С в южной. В южной зоне осадков выпало за июль 141% и август 154% от нормы, в то время как в северной зоне за этот период наблюдался значительный дефицит влаги. Вегетационный период сои прекратился в третьей декаде сентября из-за раннего наступления заморозков. Сумма активных температур соответствовала среднемноголетней (2060°С в северной и 230ГС в южной).

Таблица 1

Метеорологические условия за вегетационные периоды 1999-2003гг.

Месяцы Среднемноголетние 1999 г. 2000г. 2001г. 2002г. 2003г.

С | Ю С | Ю С Ю С | Ю С | Ю С | Ю

Средняя теме] рагура воздуха, °С

V 11,5 13,3 10,4 11,9 12,2 13,7 11,3 13,0 12,8 12,7 9,8 11,9

VI 17,3 20,6 17,1 18.2 18,8 21,4 17,4 19,9 17,6 18,0 17,7 19,5

VII 20,3 22,4 23,1 23,8 20,1 22,3 20,4 21,4 20,5 21,2 19,6 20,6

VIII 19,0 19,8 16,9 18,5 20,0 21,7 18,9 20,7 16,9 17,4 16,5 17,9

IX 8,5 11,2 9,7 11,7 12,7 14,8 7,9 11,9 11,0 11,6 9,8 12,3

X 1,9 2,3 -1,8 1,4 -0,3 2,4 1,9 3,3 -0,6 2,2 1,9 2,3

вреднее 13,1 14,9 12,6 14,3 13,9 16,1 13,0 15.0 13,0 13,9 12,6 14,1

Сумма осадков, мм

V 22 46 29 22 32 14 67 72 44 51 96 29

VI 85 87 47 67 38 21 68 12 89 102 46 54

VII 126 127 62 180 140 151 155 129 148 148 308 230

VIII 108 131 104 202 173 114 82 62 48 103 245 197

IX 80 82 121 55 33 33 17 12 14 19 92 120

X 25 22 27 25 42 51 25 7 30 34 25 22

Сумма 446 495 390 551 458 384 414 294 373 457 812 652

Примечание: С - северная агрозона, Ю - южная агрозона.

В 2000г. в период развития сои стояла жаркая погода во всех агроклиматических зонах, причем температура воздуха в южной зоне была выше нормы (табл.1). Сумма годовых активных температур превышала среднемноголетние данные на 268°С и 465°С по северной и южной зоне соответственно. Недостаток влаги отмечен в первой половине лета и сентябре. И только в третьей декаде июля и августе в области (особенно на севере) зафиксирован значительный объем осадков, что улучшило состояние сои в период бобообразования.

Температурные условия 2001г. соответствовали среднемноголетним значениям для агроклиматических зон возделывания сои в Амурской области. Существенное влияние на рост и развитие сои в этом году оказали осадки. Наименьшее их количество (59% нормы) выпало за период с июня по сентябрь в южной агроклиматической зоне. В северной зоне объем

осадков был близок к норме. Сумма активных температур была немного выше нормы.

Следует- отметить, что за три года исследований (1999-2001 гг.) наблюдалась сходная температурная динамика в течение вегетационного периода по изученным агроклиматическим зонам, с учетом повышения температуры в южной зоне на 1-2°С Существенные различия в метеоусловиях отмечены по осадкам.

Вегетационный период 2002г. был более благоприятным для роста и развития сои в южной агроклиматической зоне. Только в первой половине вегетационного периода температура в этой зоне была ниже среднемноголетнего. В северной агроклиматической зоне отмечены незначительные колебания температуры, но лимитирующим фактором были незначительные осадки в период бобообразования и налива семян.

В 2003г. сою выращивали в Амурской и Московской областях в сложных агрометеорологических условиях. Погодные условия в южной агроклиматической зоне Амурской области были самыми неблагоприятными за годы исследования. Засушливые условия в мае, а также в первой и второй декаде июня сменились обильными осадками, что привело к значительному переувлажнению почвы, сумма осадков превысила среднемноголетние показатели, особенно в северной агрозоне. Средняя температура воздуха за вегетационный период отмечена ниже нормы в июне и августе, поэтому сумма активных температур была несколько меньше нормы. Метеорологические условия в Московской области характеризовались в июне осадками - 46% от нормы и пониженной температурой, а в июле и августе обильными осадками и умеренной температурой.

Основные методы исследования. Полевые опыты закладывали согласно методике изучения коллекционных образцов в селекционном питомнике. Отбор образцов для анализов проводили согласно методике государственного сортоиспытания сельскохозяйственных культур.

Изучение влияния осадка сточных вод (ОСВ) проводилось в условиях полевого опыта на агробиостанции ФГБОУ ВПО БГТТУ. В качестве удобрения использовались осадки сточных вод станции биологической очистки муниципального предприятия водопроводно-канализационной станции г. Благовещенска. Опыт закладывали в трех вариантах: в почву вносились 1) ОСВ с иловых полей; 2) ОСВ цехз механического обезвоживания; 3) компост на основе ОСВ с иловых полей. В качестве контроля использовали почву без внесения осадка сточных вод. ОСВ вносили под сою в период предпосевной подготовки почвы в количестве 20,40 и 60 кг на делянку площадью 10 м2.

Изучали биометрические (количество бобов и семян, масса семян с одного растения, масса 1000 семян) и биохимические показатели изучаемого материала (содержание в семенах белка, масла, аминокислот,

высших жирных кислот, каротина, аскорбиновой кислоты, удельную активность и электрофоретические спектры ферментов).

Содержание белка, масла и их качественный состав определяли хроматографическим методом на сканере Nir-42 в лаборатории ГНУ ВНИИ сои [Низкий, 1999]. Содержание тяжелых металлов определяли методом инверсионной вольтамперометрии [Методика, 1995]. Содержание аскорбиновой кислоты в размолотых семенах сои определяли методом титрования [Плешков, 1985], каротина - фотоколориметрическим методом [Плешков, 1985]. Для биохимического анализа из исследуемого материала (500 мг) готовили экстракты белков, в которых определяли белок по Лоури [Lowry et al., 1951] или биуретовым методом (для массового анализа). Активность ферментов определяли соответствующими стандартными методами: каталазу газомегрическим методом [Ермаков и др., 1987], пероксидазу по Бояркину [Макроносов, 1994], эсгеразную активность по Ван Асперну [Van Asperen, 1962], кислую фосфатазу и амилазу -фотоколоримеггрическим методом [Ермаков и др., 1987], рибонуклеазу по методу Рассела [Rassel, 1963], активность малат-, алкоголь- и глюкозо-6-фосфатдегидрогеназ спектрофотометрическим методом [Кочетов, 1980]. Удельную активность ферментов рассчитывали в единицах на мг бежа.

Электрофоретические спектры исследуемых ферментов выявляли методом электрофореза на колонках 7,5 %-го полиакриламидного геля. Выявление на геле зон с ферментативной активностью (форм ферментов) проводили соответствующими гистохимическими методами [Левитес, 1986; Wendel, Weeden, 1989; Иваненко, 2008]. Поскольку стандартным критерием для характеристики множественных форм ферментов является их относительная электрофоретическая подвижность (Rf), разнокачественность сортов сои оценивали по выявленным формам ферментов согласно их Rf. Нумерация форм проведена от более высокоподвижных (к аноду) к низкоподвижным формам. Каждой форме ферментов было присвоено свое сокращенное обозначение в соответствии со значениями их Rf (для каталазы Kl - К8, пероксидазы П1 - П18, кислой фосфатазы КФ1 - КФ13, рибонуклеаз PI - Р12, эстераз Э1 - Э14, амилаз AI - А10). (Редко встречающиеся дополнительные формы обозначили *).

Выявленные на энзимограммах зоны активности (формы ферментов) разделили по частоте встречаемости на 3 группы (0-19% -низкая встречаемость; 20-49% - средняя встречаемость; > 50% - высокая встречаемость форм).

Биохимические исследования проводили в лаборатории молекулярной биологии БГПУ в шести аналитических повторностях. Статистическую обработку материала и расчет коэффициентов корреляций проводили по методикам H.A. Плохинского [Плохинский, 1970], Б.А. Доспехова [Доспехов, 1979] и A.B. Ваулина [Ваулин, 1998] с помощью программы Microsoft Office Excel, 2007.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Первым этапом работы явилось определение активности ферментов, которые можно использовать в качестве маркеров. Для исследований были выбраны две группы ферментов: оксидоредуктазы (каталаза, пероксидаза, дегидрогеназы) и гидролазы (амилаза, эстераза, кислая фосфатаза, рибонуклеаза). Для всех исследованных ферментов были изучены оптимальные условия определения их активности, выявлена активность в семенах и проростках сои, отзывчивость на наиболее важные стрессоры, а также отработаны методы выявления их электрофоретических спектров [Иваченко, 2008].

Глава 3. Влияние агроклиматических условий выращивания на энзпматическую активность и содержание биологически активных веществ в семенах районированных сортов сой

По результатам наших исследований выявлены и охарактеризованы электрофоретические спектры ферментов сортов сои. Установлено, что спектры каталазы семян сои исследованных сортов относительно стабильны и состоят из 6-8 форм (рис. 1А).

Электрофоретические спектры пероксидазы отличались значительным разнообразием: в семенах обнаружено 18 форм фермента (рис. 1Б). Следует отметить, что сорта сои амурской селекции ВНИИС-1 и Соната содержат максимальное число форм пероксидазы, а сорта сои Луч Надежды (селекции ДальГАУ) и Соер-4 (саратовской селекции) -наоборот, минимальное.

В семенах сои за годы исследований установлено 13 форм кислой фосфатазы (рис. 1В). Сортовые различия проявились по формам фермента с высокой электрофоретической подвижностью. В семенах сои сорта Соер-4 (саратовской селекции) обнаружены все формы фермента.

В семенах сои установлено 14 форм эстераз, которые отличались различной встречаемостью по сортам (рис. 1Г). У сорта Гармония выявлено 10 форм, у сортов ВНИИС-1, 0ктябрь-70 и Смена - 13 форм фермента.

Все формы амилаз (десять) установлены в семенах сои сорта ВНИИС-1, 0ктябрь-70 и Соер-4 (рис. 1Д). Для сорта Луч Надежды выявлено минимальное количество форм фермента - восемь.

Таким образом, впервые выявлены и проанализированы электрофоретические спектры каталаз, пероксидаз, кислых фосфатаз, эстераз и амилаз семян сортов сои, районированных в Амурской области.

Установленные формы ферментов позволили оценить разнокачественность сортов сои, различающихся по скороспелости. Проведенные исследования показали, что скороспелые сорта селекции ГНУ ВНИИ сои и сорт Соер-4 саратовской селекции характеризуются более высокой встречаемостью форм изученных ферментов, за исключением пероксидазы. Установлено, что сорт Соер-4 саратовской

селекции и сорт Луч Надежды селекции ДальГАУ отличались по составу и встречаемости форм исследуемых ферментов от сортов селекции ВНИИ сои.

о 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 -0,6

0,2

1 2 3 4 5 В

6 7

0,4

0,6

0,8

0,2 0,4 -0,6 0,8

0 0,2 0,4 -0,6 ■ 0,8

1 -

2 3

4 5 6 7

3 4 5 6

1 2 3 4 5 6 ЯГ

од 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6

1 2 3 4 5 6 7 8 Рис. 1. Схемы энзимограмм каталаз (А), пероксидаз (Б), кислых фосфатам (В), эстераз (Г) и амилаз (Д) семян районированных сортов сои, полученных в условиях 19992002гг. (1 - ВНИИС-1, 2 - 0ктабрь-70, 3 - Соната, 4 - Закат, 5 - Смена, 6 - Луч Надежды, 7 - Соер-4, 8 — Гармония). Справа указана нумерация выявленных форм фермента.

В настоящее время стоит задача создания новых сортов сои, обладающих устойчивостью к воздействию неблагоприятных факторов внешней среды. Сорта должны иметь короткий вегетационный период и быть хорошо адаптированными к условиям возделывания. Установлено,

что агроклиматические условия периода вегетации сои значительно влияют на величину урожая [Ефимова, 1999].

Изучение удельной активности каталазы семян районированных в Амурской области сортов сои показало, что в неблагоприятном по температурному режиму и количеству осадков 1999г. наблюдалась высокая активность этого фермента (рис, 2А), за исключением скороспелых сортов Соната и Соер-4, семена которых, видимо, успели вызреть до заморозков. В 2000 г. активность каталазы была ниже, чем в 1999г. (табл. 2). Высокой удельной активностью каталазы обладали семена сорта сои Смена, а у сортов Соер-4 и Гритиказ-80, наоборот, она бьша низкой (рис. 2А). Наименьшая активность каталазы выявлена в семенах сои, выращенных в 2001г. Причем в этом году, как и в предыдущем, удельная активность каталазы семян сои, полученных в северной и южной агроклиматических зонах, отличалась незначительно.

северная зона

200

южная зона

К 200Т

Рис. 2. Удельная активность каталазы (А) и пероксидазы (Б) семян сортов сои, полученных в 1999-2001гг. 1— Смена, 2 - Соната, 3 - Закаг, 4 - Рассвет, 5 - Гармония, 6 -ЛучНадежды, 7-ВНИИС-1,8-Соер-4, 9-0ктябрь-70, 10-Гритиказ-80.

При изучении удельной активности пероксидазы семян сои, полученных в 1999-2000 гг., была установлена низкая активность для всех

исследованных сортов (рис. 2Б). В 2001г. выявлена высокая активность фермента, которая значительно различалась по зонам. Активность пероксидазы семян сортов сои, полученных в южной агрозоне, была почти в два раза ниже, чем в северной (рис. 2Б). Очень низкая активность фермента в исследуемые годы отмечена для сортов Луч Надежды селекции ДальГАУ и Соер-4 саратовской селекции.

Таким образом, установленная низкая активность пероксидазы семян сои в сложных погодных условиях 1999г. коррелирует с более высокой каталазной активностью и повышенным содержанием форм этого фермента. И, наоборот, в жарких условиях 2000г. выявлены повышенная активность и количество форм пероксидаз и снижение активности и количества форм каталаз. Эти факты показывают зависимость между активностями двух ферментов антиоксидантного комплекса семян сои. Кроме того, значительный интерес представляет высокое содержание каротина и высших ненасыщенных кислот (олеиновой и линоленовой) в условиях 1999г., когда активность пероксидазы была низкой (табл. 2). Проведенные нами исследования позволяют заключить, что активность ферментов антиоксидантной системы семян сои значительно зависит от погодных условий выращивания и связана с сортовыми особенностями сои.

Таблица 2

Урожайность сои, биохимический состав и активность ферментов в семенах, полученных в разных агроклиматических условиях Приамурья

Признак Северная агрозона Южная агрозона

1999г. 2000г. 2001г 1999г. 2000г 2001г

Каталаза (ед/мг белка х 10""5) 145,6 102,0 40,5 127,2 76,6 57,1

Пероксидаза (ед/мг белка) 2,03 7,2 71,0 2,5 17,2 37,9

Кислая фосфатаза (ед/мг белка х 10"6) 131 158 67,5 122 146 49,7

Эстераза (ед/мг белка х КГ") 372 231 282 342 215 115

Амилаза (ед/мг белка) 3,6 2,6 4,3 2,9 1,8 1,3

Белок,0/« ) 40,9 39,3 39,1 42,0 40,9 40,3

Масло,% 19.7 17,6 19,4 20,0 19,1 19,8

Олеиновая кислота,% 12,3 9,4 9,5 13,4 11,2 11,8

Линоленовая к-та,% 11,1 7,9 10,6 8,7 6,5 7,5

Аскорбиновая кислота, мг % 5,0 2,3 3,1 2,7 1,8 5,2

Каротин, мг % 0,18 0,04 0,03 0,175 0,03 0,04

Урожайность, (ц/га) 14 25 23,2 27 26 21

Скорость биохимических процессов зависит также от уровня активности гидролитических ферментов (табл. 2). Установлены значительные колебания удельной активности кислой фосфатазы, амилазы и эстеразы семян сои в зависимости от погодных условий года выращивания. Анализ активности ферментов показал, что сложные метеорологические условия вегетационного периода 1999г. способствовали увеличению удельной активности амилаз и эстераз.

кг

яг

0 - 0 0

од 0,2 _ 0,2

0,4 |||| 0,4 = 0,4

0,6 • - 0,6 • 0,6 -

0,8 0,8 - 0,8

1 -С 1 ю 1 С

КГ ЯГ

о , а о -. 0

0,2 < 0,2 -1 0,2

; мая

о,4; 0,4 — 0,4

I ЯШ

0,6 ■{ ж 0,6 \ 0,6

1 М

0,8 \ 0,8 { тт 0,8

1 г J 1 ' 1

яг

1999г.

КГ

ИГ

2000г. КГ

2001г.

КГ

кг

0 ; 0 • 0 о •, о ! 0 ■,

т ■Ш1 ОМ 1 яшт м*

0,1 ■( от 0,1 _ ОД на од -! 0,1 \ _ 0,1 -1 ж»

— — ■и ! ят ш

0,2 ! - 0,2 - 0,2 — 0,2 | — 0,2 ; — 0,2 •! —

03 ^ 0,3 ■ 0,3 - _ 0,3 | I - 0,3 I — * 0,3 - —

0,4 ) 0,4 тш 0,4 0,4 ) _ 0,4 1 _ 0,4 1 _

шшт н !

0,5 1 0,5 0,5 — 0,5 1 — 0,5 \ 0,5

0,6 0,6 0,6 0,6 1 0,6 ; 0,6 •

С Ю С Ю С ю

1999г.

2000г. В

ЙГ

0 0,2 0,4 0,6 0,5

ИГ

0 ,

0,2 1 0,4 0,6 -! аз 1

кг

2001г. КГ

0 — 0

0,2 0,2

0,4 0,4

0,6 • - 0,6 -

о,а - 0,8 -

1 1 ■

2000г.

2001г.

Рис. 3. Встречаемость форм эстераз (А), амилаз (Б) и кислых фосфатаз (В) семян сои районированных сортов, полученных в северной (С) и южной (Ю) агроклиматических зонах в 2000-2002гг. ( ~ 0-19% - низкая встречаемость; "" 0-49% - средняя встречаемость; > 50% - высокая встречаемость форм).

Высокая температура 2000г. вызвала повышение удельной активности кислой фосфатазы. В южной агроклиматической зоне в 2001г. при недостаточном количестве осадков в семенах районированных сортов

сои отмечена низкая активность гидролитических ферментов.

Эти данные свидетельствуют об интенсивности распада липидов и углеводов под влиянием стрессовых факторов, на что указывает увеличение содержания высших жирных кислот при повышении активности эстераз (табл. 2).

Изучение электрофоретических спектров исследуемых гидролаз показало, что низкая температура в 1999г. привела к уменьшению числа форм ферментов и их встречаемости (рис. 3).

В семенах районированных сортов сои установлено всего две формы эстераз (Э2 и ЭЗ), причем по одной форме в различных агроклиматических зонах, которые по метеорологическим условиям в этом году различались по количеству осадков. В северной зоне осадков было значительно меньше нормы. Следует отметить, что в этих условиях появляются формы эстераз Э5-Э8 со средней электрофоретической подвижностью. В семенах сои, выращенных в двух агроклиматических зонах в условиях 1999г., выявлено по три формы амилаз: АЗ, А9 и А10.

о ■ 0,1 -0,2 • 0,3 0,4 0,5

КГ

1а 2а За 4а 5а 6а 1626 36 4656 66 Ш

0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 О,в

1а 2а За 4а 5а 6а 16 26 36 46 56 66

1а 2а За 4а 5а 6а 16 26 3646 56 66

Рис. 4. Схемы энзимограмм каталаз (А), пероксидаз (Б) и эстераз (В) семян районированных сортов сои, полученных в северной (а) и южной (б) агроклиматических зонах в 2002г. 1 - ВНИИС-1, 2 - 0ктябрь-70, 3 - Соната, 4 - Закат, 5 - Смена, 6 - Соер-4.

Высокая температура 2000г. вызвала повышение числа форм ферментов гидролаз (рис. 3). Вызывает интерес появление большого количества форм эстераз ЭЗ-Э14, особенно в южной агроклиматической

зоне. Для амилаз в семенах районированных сортов сои установлена высокая встречаемость форм А1-АЗ, А7-А10, в то время как для форм А4-А6 обнаружена различная встречаемость в агроклиматических зонах соесеяния. Формы кислых фосфатаз в 2000г. отличались разнообразием, причем в южной агроклиматической зоне, кроме КФ12 и КФ13 выявлена высокая встречаемость формы КФ8. В 2001г. (в северной агроклиматической зоне по метеоусловиям норма, а в южной - засуха) количество форм эстераз семян сои снизилось в северной зоне до пяти (Э2, ЭЗ, Э8, Э9 и Э14) и в южной до четырех (Э2, ЭЗ, Э11 и Э14) (рис. 3). Для амилаз следует отметить большое число форм (А2, АЗ, А5, А7, А8, А9 и АЮ), причем высокую встречаемость имела одна форма (А10) в северной и две (А9 и А10) в южной агроклиматической зоне. Количество форм кислой фосфагазы семян сои в 2001г. снизилось незначительно, но следует отметить меньшую встречаемость выявленных форм этого фермента у исследованных сортов, за исключением формы КФ7 в северной и КФ1 в южной агрозонах. Следует отметить, что как высокая, так и низкая температуры воздуха при выращивании сои приводят к увеличению количества форм эстеразного комплекса со средней электрофоретической подвижностью.

В 2002г., когда в северной агроклиматической зоне выпало мало осадков в период бобообразования и налива семян, выявлено повышенное количество форм исследованных ферментов, что, по-видимому, способствует их лучшей адаптации к метеоусловиям региона (рис. 4).

Установлено, что встречаемость различных форм исследуемых ферментов в семенах сои районированных сортов зависит как от метеорологических условий года выращивания, так и от агроклиматической зоны возделывания.

В результате биохимической оценки семян сортов сои, районированных в Амурской области, нами показано, что в зависимости от метеорологических условий вегетационных периодов и экологических условий зоны выращивания изменяется активность ферментов (табл.2), что, в свою очередь, приводит к изменению направленности химических процессов и отражается на биохимических показателях семян сои (содержание белка, масла, высших ненасыщенных кислот," аскорбиновой кислоты, каротина) и урожайности.

Глава 4. Влияние погодных условий выращивания на энзиматическую активность семян дикорастущей сои

Известно, что у культурных сортов сои из-за увеличения доли рецессивных генов теряется адаптивный потенциал, что влияет на урожайность. У дикорастущих форм сои как морфологические, гак и хозяйственно ценные признаки кодируются, как правило, доминантными генами, и поэтому адаптивный потенциал растений оптимален [Ала и др., 2009].

В природных условиях морфологические и биохимические показатели дикорастущей сои в большей степени обусловлены факторами среды [Ала, 2002]. Ферменты каталаза и пероксидаза являются важными антиоксидантами. Нами установлена повышенная активность этих ферментов в семенах дикорастущей сои по сравнению с культурной, что, видимо, обусловлено более высоким адаптивным потенциалом G. soja. Изучение активности каталазы и пероксидазы семян дикорастущей сои показало, что если активность пероксидазы увеличивалась, то активность каталазы снижалась (табл. 3).

Выявлены также различия активности кислой фосфатазы, эстеразы и амилазы семян дикорастущей сои от условий года (табл. 3). Следует отметить очень низкую активность пероксидазы и самую высокую активность каталазы, кислой фосфатазы, амилаз и эстераз в условиях 2000г., когда в течение вегетационного периода стояла жаркая погода. В 2001г. удельная активность пероксидазы была выше, в то время как активность остальных исследуемых ферментов низкой. В 2001-2002гг. выявлены незначительные различия по удельной активности амилазы и кислой фосфатазы. В 2002г. по сравнению с 2001г. активность зстеразы и каталазы уменьшилась на 30%, а активность пероксидазы увеличилась в два раза.

Rf А

о 0.2 0,4 0,6 0,8 Rf

0.J -

од

0,3 0.4 0,5 0,6 ■ 0.7

1а 2а За 4а 5а 6а 16 26 36 46 56 66 1в 2в Зв 4в 5в 6в

Рис. 5. Схемы энзимограмм каталаз (А) и пероксидаз (Б) семян линий дикорастущей сои (1- КА-1344, 2 - КА-1388, 3 - КБ-104, 4 - КБ-49, 5 - K3-6316, 6 - K3-6359), полученных в условиях 2000г. (а), 2001г. (6) и 2002г. (в).

Исследование электрофоретических спектров пероксидаз, каталаз, кислых фосфатаз, эстераз и амилаз семян дикорастущей сои в течение трех лет показало значительные различия их по количеству форм в зависимости от метеорологических условий года выращивания.

В семенах дикорастущей сои в условиях жаркого и влажного лета 2000г. выявлено большое количество форм каталазы, пероксидазы, кислой фосфатазы, эстеразы и амилазы. Для каталазы в этом году установлена дополнительная редко встречающаяся более подвижная форма К1* (рис. 5). Наименьшее количество форм гидролаз отмечено в 2001г. (рис.6). В 2002г. выявлена только одна форма пероксидазы, обладающая очень высокой активностью, и увеличение форм гидролаз. Электрофоретические спектры кислой фосфатазы значительно меняются в зависимости от года выращивания.

^ А

о ■ 0,2 ■ 0,4 ■

0,5

О 0,1 0:2 0,3 0,4 0,5 -С,о -

1а 2а За 4а 5а ба 16 26 36 46 56 66 1в 2в Зв 4в 5в бв Б

1а 2а За 4а 5а 6а 16 26 36 46 56 66 1в 2в Зв 4в 5в бв

о 0,2 -0,4 0,3 -

1а 2а За 4а 5а 6а 16 26 36 46 56 66 1в 2в Зв 4в 5в бв Рис. 6. Схема знзимогралш эстераз (А), амилаз (Б) и кислых фосфагаз (В) семян линий дикорастущей сои (1 - КА-1344, 2 - КА-1388, 3 - КБ-104, 4 - КБ-49, 5 - КЗ-6316, 6 -К3-6359), полученных в условиях 2000г. (а), 2001г. (6) и 2002г. (в).

При сравнении результатов исследования дикорастущей сои по хозяйственно ценным и морфологическим признакам (табл. 3) нами установлено, что в более благоприятном по погодным условиям 2002г. в семенах накопилось максимальное количество белка и минимальное -масла. Содержание олеиновой и линоленовой кислот в семенах дикорастущей сои было значительно выше в 2001г., что, видимо, связано с

засушливыми погодными условиями на юге области. Максимальное количество семян, имеющих высокую массу с одного растения, получено в 2001г. Масса 1000 семян по исследуемым годам колебалась незначительно, что свидетельствует о стабильности этого показателя для сои.

Таким образом, установлено, что увеличение температуры воздуха либо количества осадков вызывает повышение активности и количества форм исследуемых ферментов, что, видимо, способствует адаптации дикорастущей сои к неблагоприятным условиям выращивания. При этом возрастает содержание олеиновой и линоленовой кислот, а также количество или масса семян с одного растения.

Таблица 3

Биохимический состав семян и морфологические показатели форм дикорастущей сои (А) и сортообразцов различного эколого-

географического происхождения (Б), выращенных в 2000-2002гг.

Признак 2000г. 2001г. 2002 г.

А Б А Б А Б

Каталаза (ед/мг белка х 10^) 229 152 166 135 104 91

Пероксидаза (ед/мг белка) 33,8 11 466 300 877 260

Кислая фосфатаза (ед/мг белка х Ю"4) 246 174 146 188 159 255

Эстераза (ед/мг белка х 10""*) 238 290 125 120 84 250

Амилаза (ед/мг белка) 9,8 4,2 2,3 4,6 2,1 0,9

Белок, % 48,9 39,3 47,4 41,2 50,4 40,2

Масло,% 10,3 18,2 П,1 18,9 9,5 20,3

Олеиновая кислота,% - 12,4 16,4 13,5 14,6 12,4

Линоленовая к-та,% - 10,2 16,5 9,0 7,1 7,7

Каротин, мг % - 0,054 0,045 0,040 0,035 0,028

Число семян с одного растения, шт. 608 48 1069 49 793 40

Масса семян с одного растения, г 19,8 6,5 33,5 5,9 22,6 5,9

Масса 1000 семян, г 32,7 132 29,8 120 29,5 147

В настоящее время для увеличения адаптивного потенциала сои в селекционном процессе активно применяются линии дикорастущей сои. В результате проведенных нами исследований родительских форм и их гибридов второго и третьего поколений нами выявлены изменения биохимических показателей, в том числе энзиматической активности, в зависимости от генотипа родительских форм и погодных условий года выращивания. Установлено, что гибрид Садовый х КБ-103 оказался лучшим по всем исследуемым показателям.

Глава 5. Влияние погодных условий выращивания на структуру урожая сои, биохимический состав и активность ферментов семян мировой коллекции ВИР, полученных из различных эколого-географических зон Активность и множественные формы ферментов сои, как признак, до сих пор остаются вне поля зрения селекционеров. Хотя именно

ферменты способствуют быстрой адаптации растений к постоянно изменяющимся условиям среды.

В течение 3-х лет нами изучена активность пероксидазы, каталазы, кислой фосфатазы, эстеразы и амилазы сортообразцов сои разного происхождения, которые были разделены на восемь эколого-географических групп.

При изучении активности пероксидазы семян сои выявлены образцы (№ 392, № 595, № 395 селекции ДальГАУ, Кобра хабаровской селекции, Lambert, Ке 73042 из США, Р-72 и 76-11 из Канады, № 4898 из Польши, Омская 4 сибирской селекции), имеющие невысокую удельную активность. Данная закономерность отмечена во все годы исследования. Высокая активность пероксидазы важна для процесса адаптации, но значительно ухудшает вкусовые качества семян. При сравнении полученных данных следует отметить, что в семенах сои 2000г., когда стояла жаркая погода, удельная активность пероксидазы была значительно ниже по сравнению с семенами урожая 2001-2002гг.

Активность каталазы семян сои коллекционных сортообразцов и сортов была стабильной. Наиболее высокая активность фермента установлена для сортообразцов хабаровской селекции. Самой низкой активностью каталазы характеризуются сортообразцы из Китая, Канады, Амурской области, а также Восточно-Европейской эколого-географической группы. Встречаемость форм каталаз по годам варьировала незначительно. Обнаружено от четырех (Gzechnica Pastewna) до восьми (Омская) форм. В условиях 2000г. выявлено шесть форм фермента в образцах Ке 73042 и Lambert селекции США, что важно, так как для них отмечена очень низкая пероксидазная активность.

А Б

2000

Rf 2001

0,2

0,4

0,6

2002

0 - 2000

0,2

0,4

0,6

0,2

0,4

0,6 J

0,2

0,4

0,6

0 1

2001

Rf 0 - 2002

0,2 •( _ 0,2

0,4 1

0,6

0.4

0,6

Рис. 7. Встречаемость форм пероксидаз (А) и каталаз (Б) семян сои различного эколого-географического происхождения, полученных в условиях 2000-2002гг. ( ~ 0-19% -низкая встречаемость; — 0-49% - средняя встречаемость; > 50% - высокая встречаемость форм).

Удельная активность эстеразного комплекса значительно различалась по годам выращивания. В семенах образцов сои № 392, № 595

(селекции ДальГАУ), Dong-Nong 4 (Китай), Лань (Краснодарский край), Lambert (США), Govolga (Чехия), Окская (Рязанская) и Омская 4 (сибирской селекции) отмечены наибольшее содержание масла и высокая удельная активность эстераз. У сорта Амурская бурая (хабаровской селекции) выявлены низкая эстеразная активность и низкое содержание масла. Эстераза семян сортов сои коллекции ВИР представлена большим количеством форм, которые значительно различались по годам (рис. 8).

Rf А

0,2 0,4 0,6 0,8 1

0 -

0,2 ■

0,4 •

0,6 ■ 0,8 1

од

0,4 0,6 0,8 1

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 151617 18 19 2021 22 2324 2526 272829 Rf Б

1 2 3 4 5 6 7 8 9 101112 13 14151617 18 19 20 21 2223 242526 27 28 29 Rf В

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 1516 17 18 19 20212223 2425 26 27 2829

Рис. 8. Схема энзимограмм эстераз семян сортообразцов сои коллекции ВИР, полученных в условиях 2000г. (А), 2001г. (Б) и 2002г. (В). 1 - № 595, 2 - № 392, 3-Х» 452, 4 - № 395, 5 - Амурская бурая, 6 - Юбилейная, 7 - ДЯ-1, 8 - Хэйх>5, 9 - Dong-Nong 4, 10 - А. grichnon, 11 - Шара, 12 - Виза, 13 - Лань, 14 - Severina х Bravalla, 15 -МОК, 16 - Кобра, 17 - Lambert, 18 - MON-25,19 - № 4898,20 - Gzechnica Pastewna, 21 - Сибниик-401, 22 - Безыменская, 23 - Ке 73042, 24 - Локус, 25 - Окская, 26 - Омская, 27 - Юг-30,28 - Волжская, 29 - Labzodin.

В 2000г. следует отметить сортообразцы Безыменская (17 форм), Labzodin (16 форм), Dong-Nong 4 (15 форм) и Омская (14 форм), которые имели дополнительные формы. Небольшое количество форм установлено для сортообразцов, содержащих в родословной дикорастущую сою (Амурская бурая, Виза, Лань и Lambert).

При изучении удельной активности амилаз выявлена низкая активность фермента в семенах сортообразцов из Амурской области (№ 392), Китая, Беларуси (Альбуть), Хабаровского края (Кобра), Рязанской, Саратовской областей, Польши (№ 4888), Канады (Р 72-1). Высокая амияазная активность отмечена у сортообразцов из Амурской области (№ 595), Хабаровского края (МОК), Швеции и Чехии.

Для амилаз семян сои обнаружено от шести (А. grichnon) до десяти (Хэйхэ-5) форм. Семь форм амнлаз установлено в условиях 2000г. в семенах сортообразцов N° 452, № 395, Виза, Лань, MON-25, Волжская и для образца Severina х Bravalla в 2001г., а также в сортообразцах Хэйхэ-5, Шара, Виза, Lambert и Локус в 2002г.

А Б

2000

Rf о , -ß£i

. 2002

0,2

0,в

0,2 - 0,2 -: !

0,4 ■ - 0,4 - : —

0,6 0,6 ■■ _

«а HB

0,8 0,8 - ШК1

1 ■ 1

0 2000 0

ОД _ ОД •

кл

0,2 i — 0,2

0,3 0,3

0,4 0,4

0,5 0,5 ■

0,6 0,6

0 0,1 0,2 03 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,3

1 В

2000

од 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,3 0,9

f Rf

:ooi 0 2002

шт

- ОД -

0,2

- 0,3

_ 0.4 _

0,5

0,6

0,7

0,8

0,9

2002

ЯГ

И о ,

, 1

0,2 <

0,3

I 0,4 | ш 0.6 -!

Рис. 9. Встречаемость форм эстераз (А), кислых фосфатаз (Б) и амилаз (В) семян сои различного эколого-географического происхождения, полученных в условиях 20002002гг. ( ~ 0-19% - шикая встречаемость; 0-49% - средняя встречаемость; *"■■ > 50% - высокая встречаемость форм).

Высокая удельная активность кислой фосфатазы отмечена у культурных сортообразцов № 595 (Амурская область), Dong-Nong 4 (Китай), А. grichnon (Болгария), Ствига (Беларусь), Lambert и MON-25 (США), Окская (Рязанская область), Gzechnica Pastewna (Польша), Белоцветковая-4 (Воронежская область), Severina х Bravalla (Швеция). Большое количество форм выявлено для сортообразца № 395 (одиннадцать форм) и Юбилейная (десять форм).

В результате исследований коллекции семян сои установлены значительные изменения множественных форм исследуемых ферментов в зависимости от метеорологических условий года выращивания. В семенах 2000г., когда в течение вегетационного периода отмечена повышенная температура, а в период налива семян выпало большое количество осадков, следует отметить низкую удельную активность и числа форм пероксвдаз (П6, П7 и П8). В этих условиях выявлена высокая гетерогенность каталаз (Kl, К2, КЗ, К4 и К5), кислых фосфатаз (КФ4, КФб, КФ8, КФ9, КФ11 и КФ13), амилаз (A3, А5, А7, А8 и А9) и особенно эстераз (ЭЗ,Э4, Э5, Э6, Э7, Э8, Э9, Э10, Э11, Э12, Э13) (рис. 7-9).

Недостаток осадков в 2001г., наоборот, вызвал увеличение активности и множественных форм пероксвдаз (П8, П13, П14, П15, П16, П17 и П18) и снижение числа форм других исследуемых ферментов. Для каталаз семян сои в условиях засухи установлены только формы Kl, К2 и К8, кислых фосфатаз - формы КФ6, КФ10 и КФ13, амилаз - формы A3, А5, А8 и А9, эстераз - больше половины образцов содержали форму ЭЗ. В 2000-2001гг. не выявлены различия по удельной активности кислой фосфатазы и амилаз.

В условиях вегетационного периода 2002г., который был более благоприятным для роста и развития сои, установлены только три формы пероксидаз (П7, П8, П18), две формы каталаз (KI и К8) и кислых фосфатаз (КФ5, КФ13), четыре формы эстераз (Э2, ЭЗ, Э10 и Э13) и самое большое количество форм амилаз (AI, А2, A3, А5, А6, А7, А8 и А9).

Следует отметить, что в условиях 2000-2001 гг. выявлена обратная зависимость между количеством множественных форм пероксидаз и каталаз (рис. 7).

Анализируя результаты биохимических и морфометрических показателей (табл. 3), следует отметить, что стрессовые условия в период вегетации (повышенная температура воздуха на 2°С или недостаток влаги на 60%) вызывают изменения в биохимическом составе семян и как следствие - в структуре урожая. Высокая температура воздуха в период вегетации сои способствует увеличению содержания линоленовой кислоты, количества бобов и массы семян с одного растеши, но происходит снижение массы 1000 семян, содержания белка, масла и олеиновой кислоты. Дефицит влаги вызвал увеличение содержания

олеиновой кислоты, каротина и белка, количества бобов и семян с одного растения, снижение массы 1000 семян и содержания линоленовой кислоты.

Таким образом, в разных погодных условиях выращивания коллекции сои различного эколого-географического происхождения отмечены значительные изменения активности и числа форм исследованных ферментов, что отразилось на биохимическом составе семян и структуре урожая сои.

Глава 6. Биохимический состав семян сортов сои коллекции ВИР, выращенной в условиях Амурской и Московской областей По мнению ряда авторов, в повышении устойчивости растений к неблагоприятным факторам среды особую роль играют ферменты каталаза и пероксидаза, которые обладают антиоксидантной функцией [Васильева 2004; 81оикоуа е1 а1., 2005; Прадедова и др., 2011]. При изучении удельной активности пероксидазы семян сои коллекции образцов различных эколого-географических групп, выращенных в условиях Амурской и Московской областей, установлено, что активность значительно различается по сортам. Невысокая пероксидазная активность отмечена у сортов ВгауаИа и СибНИИК-6, выращенных в условиях Амурской и Московской областей. В Амурской области выявлены сорта Салют- 216, Еуа'йГБ, \Уае1зЬа1ег, Тимирязевская-1, Брянская-11, Лучезарная, Линия 52-14 с невысокой активностью, а в Московской области □ ПЭП-22, Светлая, Магева. Данные сорта сои важны для селекции, так как высокая активность пероксидазы значительно ухудшает качество семян при использовании их для пищевых целей. Высокой удельной активностью отличились сорта Соната, Гармония. Самая высокая активность пероксидазы отмечена у сортов 1^га в Амурской области, Брянская-11, а также гибридной линии 52-14 в Московской области.

Анализируя электрофоретические спектры пероксидазы семян сои сортов коллекции ВИР (рис. 10), следует отметить наличие большого числа форм фермента семян сои, полученных в Амурской области по сравнению с этими же сортами, полученными в Московской области. В сортах сои, выращенных в условиях Амурской области, выявлено до 6 форм пероксидазы (ВгауаНа, СибНИИК-315), которые имели невысокую активность фермента. В семенах сортов сои, полученных в условиях Московской области, выявлено от 2 до 5 форм фермента.

Анализ рибонуклеазной активности (РНКазы) семян сои различного эколого-географического происхождения, полученных в Амурской и Московской областях, показал, что высокой активностью фермента обладают семена сортов сои 1^га, ВгауаНа (шведской селекции) и Соер-4 (саратовской селекции), полученных в обоих регионах (табл. 4).

Установлено, что семена сортов сои Оа]асЫ японской, \Vaetshater германской селекции и линии 1040-42 имеют высокую РНКазную

активность в условиях Амурской области, а семена сорта СибНИИК-315 сибирской селекции - в Московской области. В связи с этим сорта сои С^асЫ и \Vaetshater и линию 1040-42 можно рекомендовать к интродукции в Амурской области либо использовать в селекционных программах, а сорт СибНИИК-315 - в Московской области. При изучении электрофоретических спектров рибонуклеазы семян сои сортов коллекции ВИР, полученных в условиях Амурской области, выявлено десять форм фермента, в то время как в Московской области - восемь.

<И Rf А

0,4 ■ 0,5 ■

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26

Рис. 10. Схемы энзимограмм пероксидаз семян сортов сои коллекции ВИР потученных в Амурской (А) и Московской (Б) областях (1 - Соната, 2 - Гармония, 3 - Амурская-57, 4 - Салют 216, 5 - Oajachi, 6 - Evaws, 7 - Major, 8 - Ugra, 9 - Bravalla, 10 - ПЭП-22 11 - Ajma, 12 - Waetshater,13 - Магева, 14 - УСХИ-6, 15 - Брянская 11, 16 -Тимирязевская-1, 17-Лучезарная, 18 - Белоцветковая, 19-Светлая 20-Соер-4 21 -СибНИИК-6,22 - СибНИИК-315,23 - линия 52-М, 24 - линия-1040-42, 25 - линия 590,

26 - линия 02-51). Пропущенные образцы в Московской области - гибель растений на разных стадиях вегетации.

Наибольшее количество форм (четыре) обнаружено в семенах сорта Соер-4 (Саратовская область), выращенного в обоих исследуемых регионах. Также следует отметить сорта сои амурской селекции, Светлая рязанской селекции и Major французской селекции, в семенах которых выявлено по две-три формы РНКаз, как в Амурской, так и в Московской областях. Таким образом, мы предполагаем, что на основе изучения активности и множественных форм рибонуклеаз сои можно отбирать более устойчивые к условиям выращивания сорта.

Таблица 4

Удельная активность некоторых гидролаз в семенах сои, полученных _в Амурской и Московской областях_

Сортообразец, Удельная активность

происхождение рибонухлеазы* эстеразы** амилазы*

Восточно-Азиатская эколого-географическая группа

Соната А. 0,006±0,00043 А. 40,6±0,6 А. 0,96+0,009

Амурская обл. М. 0,0165±0,0012 М. 40,6±1,4 М. 1,22±0,029

Гармония А. 0,019±0,004 А. 29,9±0,6 А. 0,82±0,007

Аму-рская обл. М. 0,052±0,0005 М. 32,1±1,0 М. 1,31±0.021

С^асЫ А. 0,55±0,0 А. 27,5±0,6 А.1,06±0,013

.Япония М,- М.- м,-

Западно-Европейская эколого-географическая группа

Major А. 0.088±0,0085 А. 56,6i2,l А. 1,55±0,023 '

Франция М. 0,1±0,0058 М.52,6±1,1 М. 1,73 ±0,068

Северо-Европейская эколого-географическая группа

Ugra А. 0,54±0,0064 А. 29,б±0,0 А. 1,б8±0,018

Швеция М. 0,49±0,035 М.58,2±1,0 М.1,65±0,02

Bravalla А. 0,496±0,0006 А. 37,4±2,7 А. 0,77±0,014

Швеция М. 0,45±0,043 М.28,4±0,6 М.],1б±0,008

ПЭП-22 А.0,0082±0,00014 А. 24,9±0,0 А. 1,54±0,01

Ленинградская обл М.0,0058±0,00011 М.54,2±1,1 М.1,36±0,013

Средне-Европейская эколого-географическая группа

\Vaetshater А. 0,39±0,007 А. 92,6±1,6 А. 2,11±0,007

Германия М.- М,- М,-

Восточно-Европейская эколого-географическая группа

Магева А. не выращивали А. не выращивали А. не выращивали

Московская обл. М. 0,006±0,0004 М. 41,2±0,8 М. 1,02±0,012

Светлая А. 0,12±0Д011 А. 27,4±0,0 А. 0,77±0,003

Рязанская обл. М. 0,065±0,0007 М.23,8±0,8 М.1,33±0,029

Соер-4 А. 0,57±0,028 А. 44,4±1,1 А. 0,72±0,011

Саратовская обл. М. 0,35±0,0 М.34,6±1,1 М.1,32±0,012

Южная Западно-Сибирская эколого-географическая группа

СибНИИК-б А. 0,0265±1,77 А. 35,6±0,0 А. 0,98±0,009

Новосибирская обл. М. 0,004б±0,00014 М.25,5±1,0 М. 1,32±0,024

СибНИИК-315 А. 0,14±0,0014 А. 45,1±0,6 А. 0,78±0,01б

Новосибирская обл М. 0,59±0,028 М.43,4±0,б М.0,76±0,009

Гибриды

Лшп1я-52М А. не определена А. 27,0±0,3 А. !,0±0,013

М. 0,145±0,01 М.20,5±1,1 М.1,02±0,008

Линия 1040-42 А. 0,3±0,0018 А. 28,2±0,2 А. 1,1±0,015

М. 0,027±0,0014 М.39,5±0,б М.0,77*0,009

Примечание: * (ед./мг белка); ** (ед./мг белка х 10 ).

А - Амурская область; М - Московская область (прочерк (-) — гибель растений на разных стадиях вегетации).

При изучении активности амилазы семян сои сортов коллекции ВИР, высокая активность'фермента характерна для сортов Waetshater из

Германии, Ugra из Швеции, Major из Франции, ПЭП-22 из Ленинградской области, выращенных в Амурской и Московской областях. Остальные исследованные сорта, выращенные в Московской области, имели также высокую активность амилазы, за исключением сорта СибНИИК-315 сибирской селекции. В условиях Амурской области следует отметить низкую активность фермента в семенах сортов сои из ВосточноЕвропейской эколого-географической группы, таких как Соер-4, Светлая, а также сорта Bravalla из Швеции (Северо-Европейская эколого-географическая группа) и СибНИИК-315 (Южная Западно-Сибирская эколого-географическая группа) (табл. 4).

При изучении электрофоретических спектров амилаз семян сои, полученных в Амурской области, выявлено десять форм фермента, а в Московской — девять. Максимальное количество форм (четыре) обнаружено в семенах сорта Major (Франция), возделываемых в обоих регионах. В Амурской области наибольшее количество форм установлено также для сорта Соер-4 (Саратовская область). Наименьшее количество форм (одна) выявлено для сорта Магева (Московская область).

В семенах сои, полученных в условиях Амурской области, высокая активность эстеразы отмечена у сорта Waetshater из Германии (табл. 4). Остальные сорта имели удельную активность в два-три раза ниже. В семенах сои, полученных в Московской области, наивысшей активностью эстеразы отличились сорта Ugra, ПЭП-22 и Major. В результате исследований установлено, что активность эстеразы и амилазы семян сортов сои Гармония и Соната (Амурская область), СибНИИК-315 (Новосибирская область) и Major (Франция) практически одинакова в Амурской и Московской областях, что свидетельствует о высокой стабильности данных сортов в разных агроклиматических условиях выращивания.

Анализируя электрофоретические спектры эстеразы семян сортов сои, выращенных в различных агроклиматических зонах (Амурская и Московская области), следует отметить незначительное количество форм данного фермента (от двух до четырех форм), как по областям возделывания, так и по сортам. Наибольшее количество форм (четыре) обнаружено в сортах сои, выращенных в Амурской области, таких как Major (Франция), Oajachi (Япония), Waetshater (Германия) и гибридной линии 1040-42. Выявлено, что сорта Соната, Гармония (Амурская обл.), Bravalla (Швеция), СибНИИК-6, СибНИИК-315 (Новосибирская обл.), ПЭП-22 (Ленинградская обл.) и линия-52М имеют одинаковое количество форм эстераз и сходную электрофоретическую подвижность, независимо от зоны произрастания, что, видимо, свидетельствует о высокой стабильности этого фермента в семенах.

Анализ активности пероксидазы и ферментов гидролаз в коллекции семян сои различного эколого-географического происхождения,

выращенной в разных агроклиматических зонах (Амурская и Московская области), показал, что адаптивный потенциал сои зависит от сортовых особенностей и условий произрастания. Повышенное количество форм исследуемых гидролаз характерно для сортов Соер-4 (Саратовская область) и Major (Франция) как в Амурской, так и в Московской области. Московский сорт Магева имеет минимальное количество форм рибонуклеаз, эстераз и амилаз. По результатам исследования установлено, что у сортов, выращенных в условиях Амурской области, наблюдается повышенная активность и выявлено большее количество форм пероксвдаз, рибонуклеаз и эстераз, что, вероятно, свидетельствует о лучшей адаптации к данному региону. Возможно, это обусловлено тем, что Дальний Восток является исторической зоной произрастания сои.

Анализ морфологических показателей и биохимического состава семян коллекции сортов сои, выращенных в условиях Амурской и Московской областей, показал, что сорта сои, выращенные в Московской области, почти в два раза превосходят сорта, выращенные в Амурской области, по количеству и массе бобов и семян. По этим показателям в Московской области лучшим оказался сорт Соната амурской селекции, высокие показатели имели сорта Магева (Рязанская обл.), СибНИИК-315 (Омская обл.), Ugra (Швеция) и Major (Франция). По морфологическим показателям в Амурской области выделились сорта местной селекции и японский сорт Oajachi, имеющий крупные бобы и семена. Обращает на себя внимание германский сорт Waetshater, который превосходил все изучаемые сорта по количеству бобов и семян (101 и 188 штук соответственно), а также их массе. По такому важнейшему показателю, как масса 1000 семян, более высокие показатели имели сорта сои, выращенные в Амурской области, особенно выделились гибридные линии, и сорта зарубежной селекции Major (Франция) и Oajachi (Япония). В Московской области по массе 1000 семян отличились сорта СибНИИК-6 и СибНИИК-315 сибирской селекции, Ugra и Bravalla шведской селекции, а также гибридная линия 1040-42.

Анализируя результаты биохимических показателей, следует отметить, что высокобелковых форм в коллекции не обнаружено. Высоким содержанием белка в Амурской области (более 39%) отличились сорта Светлая, Соната и СибНИИК-6, несколько меньше (более 38%) Гармония, Ugra, ПЭП-22, Соер-4, Брянская-11 и линия 1040-42. В Московской области по белку (более 38%) выделились сорта УСХИ-6, Салют-216, Ugra, Bravalla, Магева, Светлая, СибНИИК-315 и линия 1040-42. По содержанию масла большую часть исследуемых сортов сои следует отнести к среднемасличной группе (18-20%). Более высокое содержание масла (20% и выше) выявлено в семенах сортов Соната, Гармония, Брянская-11, СибНИИК-6 и линии 1040-42, полученных в Амурской области, и только для СибНИИК-6 в Московской области. Несколько

меньшим содержанием масла в Московской области отличились сорта Светлая, Соер-4, СибНИИК-315 и линия 1040-42. Таким образом, сорт семян сои СибНИИК-б и линия 1040-42 имели высокий показатель масличности.

Ценность соевого масла связана с высоким содержанием в семенах ненасыщенных жирных кислот, особенно олеиновой и линоленовой. Линоленовая кислота значительно ухудшает качество масла для пищевых целей, но улучшает адаптивные свойства семян в период прорастания при неблагоприятных условиях. По содержанию олеиновой кислоты (более 23 %) в Амурской области выделились сорта сои Соната, УСХИ-6, Тимирязевская-1, Брянская-11. Установлено, что для семян сортов сои, выращенных в Московской области, содержание олеиновой кислоты было значительно ниже, чем в Амурской области. Метеоусловия 2003 года вызвали повышение содержания в семенах сои олеиновой кислоты в Амурской и почти в два раза выше линоленовой в Московской области. Таким образом, по содержанию хозяйственно ценных признаков (белка и масла) в семенах сои в Амурской области выделились районированные сорта Соната и Гармония, а также СибНИИК-6, Брянская-11 и линия 104042. В Московской области следует отметить по этому показателю сорта Светлая, СибНИИК-315 и линию 1040-42.

Нами установлено, что лучшие результаты по урожайности имели сорта Соната, Гармония (селекции ВНИИ сои) и 1^га (шведской селекции), хорошо зарекомендовавшие себя при выращивании в условиях Дальнего Востока. В Московской области они по биохимическим и морфологическим показателям превзошли районированный сорт Магева.

Глава 7. Изменение морфологических и биохимических показателей сои при использовании осадка сточных вод и

комплексных препаратов Осадки сточных вод (ОСВ) являются дополнительным источником доступных растениям микроэлементов. Существующие санитарные нормы и правила регламентируют возможности использования ОСВ в качестве органоминерального удобрения [СанПиН 2.1.7.573-96].

Анализ энзиматической активности в семенах сои показал влияние различных видов ОСВ на активность ферментов (рис. 11). Установлено, что при внесении ОСВ с иловых полей в количестве 20 кг наблюдается увеличение удельной активности каталазы, амилазы и эстеразы. Внесение 40 и 60 кг ОСВ вызвало снижение активности этих ферментов и увеличение активности кислой фосфатазы.

Осадки цеха механического обезвоживания приводят к значительному увеличению активности всех исследуемых ферментов. При внесении ОСВ в количестве 60 кг активность всех изученных ферментов увеличивается более чем в 2 раза и соответствует максимальному приросту урожайности. Использование компоста на основе ОСВ с иловых полей

приводит к незначительному повышению активности ферментов и не улучшает морфологические показатели сои.

Изучение злектрофоретических спектров ферментов семян сои, полученных после внесения различных видов ОС-В в разных количествах, выявило повышенное количество форм исследуемых ферментов (рис.11).

х 80 1

I 60

и, ег>

1 40 1 20 0

со с; 20 1

ю 15 -

О 10 ■

< 5 -

0 •

К 1а 16 ¡в 2а 26 2в За 36 Зв Б

К 1а 16 1в 2а 26 2в За 36 Зв В

ю 60 -с* г? 3 о

Й 20 С

о -1

60 50 •

4 <

ЯГ

К 1а 16 1в 2а 26 2в За 36 Зв

ЯГ

0,2

ю»

0,4 <■»

0,6 к

яг

ив

шв

од • ™

0А ■ ЯШИ

аии

0.6 -

тая

м •

К 1а 16 1в 2а 26 2в За 36 Зв

К 1а (6 1 в 2а 26 2в За 36 Зв Г

К 1а 16 1в 2а 26 2в За 36 Зв Рис. 11. Удельная активность и схемы энзимограмм каталаз (А), амилаз (Б), эстераз (В) и кислых фосфатаз (Г) семян сои, полученных с использованием очистных сточных вод (К - контроль, 1 - ОСВ с иловых нолей, 2 - ОСВ цеха механического обезвоживания, 3 - компост на основе ОСВ с иловых полей, а - концентрация 20 кг х 10 м , б - 40 кг х 10 м2, в -60 кг х 10 м).

У каждого исследуемого фермента существуют стабильные формы, проявляющиеся во всех образцах. Высокой стабильностью характеризуется каталаза. Внесение осадка приводит к появлению новых форм амилаз, кислых фосфатаз и особенно зстераз, что, видимо, позволяет уменьшить стресс, вызываемый ОСВ.

Для установления влияния ОСВ на семена сои контролировали биохимические и морфометрические показатели. Превышений Г1ДК по содержанию Си, Хп, РЬ и Сё как для ОСВ, так и для почв опытного участка не выявлено. Осадки с иловых полей содержат наибольшее количество цинка, а компост на основе ОСВ с иловых полей значительно обогащен свинцом, кадмием и медью [Кашина, Раздобреева, 2006]. Внесение ОСВ различного состава и в различных концентрациях не повлияло на содержание основных хозяйственно ценных признаков (белка и масла) в семенах сои сорта 0ктябрь-70. Под воздействием различных ОСВ в семенах сои было выявлено отклонение от контроля содержания ненасыщенных карбоновых кислот, особенно олеиновой. Ненасыщенные карбоновые кислоты важны для защиты растений от стресса, так как повышают их адаптивные возможности.

Анализ морфологических показателей сои показал, что использование компоста на основе осадка цеха механического обезвоживания в количестве 60 кг оказывает значительное стимулирующее воздействие на растения. Было установлено изменение большинства морфологических показателей, что привело к максимальной урожайности. В других вариантах опыта влияние ОСВ было также достаточно высоким. Стабильным признаком оказалась масса 1000 семян. Внесение ОСВ различного состава и в различных концентрациях не повлияло на содержание основных хозяйственно ценных признаков (белка и масла) в семенах. Такая стабильность свидетельствует о высокой устойчивости генеративных органов растения к стрессу и высокой адаптивности сорта.

Значительное повышение урожайности и отсутствие негативного влияния на хозяйственно ценные признаки позволяют рекомендовать ОСВ в качестве удобрения при выращивании сои в Амурской области.

Одним из факторов стабилизации урожайности сои является предпосевная обработка семян, с помощью которой можно регулировать процессы, происходящие в растениях, применяя химические и биологические регуляторы роста и развития растений. Комплексные препараты, состоящие из штаммов клубеньковых бактерий, микроэлементов и БАВ, используют для предпосевной подготовки семян, для усиления азотного питания растений. Этот приём используется в предпосевной подготовке семян как наиболее действенное начало получения высоких урожаев. Положительное влияние на симбиотическую азотфиксацию оказывает молибден.

Нами изучено влияние комплексных препаратов (нитрагин (Н) + молибден (Мо); Н + Мо + ДВ 47-4; Н + Мо + ДВ 47-4 (Р); Н + Мо + ЭМ-1) на семена сои сорта Соната, выращенных в северной и южной агроклиматических зонах. Повышения активности и числа форм исследуемых ферментов не установлено и, как следствие, не произошло увеличения белка, масла, массы 1000 семян и урожайности. Исследования показали, что внесение комплексных препаратов с нитрагином в почвы Амурской области, видимо, вызывает их антагонизм с местными популяциями ризобий сои. Дальнейшие наши исследования по выращиванию сои в условиях инокуляции семян позволили установить, что внесение ризобий сои из коллекции ГНУ ВНИИ сои в питательную среду вызывает повышение активности рибонуклеазы и улучшение морфологических показателей проростков сои [Лаврентьева, 2011].

Глава 8. Влияние температуры и тяжелых металлов на активность ферментов проростков сои

Установлено, что у различных организмов з ответ на температурный стресс синтезируются белки теплового шока [Панасенко, 2003; Гарбуз, 2007], но значительный интерес представляет изменчивость ферментов, которые отзывчивы на изменение температуры.

Влияние низких и высоких температур на удельную активность ферментов изучено при проращивании семян сои сорта Гармония и дикорастущей сои. Установлено, что удельная активность эстеразы проростков семян дикорастущей сои при температуре от 4°С до 37°С почти в 2 раза выше, чем у культурной (рис.12 А). Причем максимум активности фермента в семенах дикорастущей сои наступает при температуре 37СС и сохраняется достаточно высокой в условиях повышенных температур (42°С и 45°С). Удельная активность эстеразы семян культурной сои при этих условиях достигает значений активности фермента, установленной в семенах дикорастущей сои. В условиях пониженных температур (4°С и 10"С) в семенах культурной сои активность эстеразы крайне низкая, хотя в семенах дикорастущей сои фермент имеет достаточно высокую активность.

При изучении влияния температуры на удельную активность амилазы семян сои было выявлено, что при нормальных условиях удельная активность фермента дикорастущей сои в 2,5 раза выше, чем у культурной (рис. 12Б). В условиях пониженных температур (4°С) наблюдается незначительное повышение удельной активности амилазы семян культурной сои, тогда как для дикорастущей в этих же условиях удельная активность постепенно повышается, достигая максимума при 23°С. Но максимально активен фермент при температуре 42°С. Проращивание семян культурной и дикорастущей сои при температуре 45°С вызывает снижение удельной активности амилазы.

В семенах дикорастущей и культурной сои выявлена сходная удельная активность каталазы при температуре 4°С (рис. 12В). При 10°С наблюдается первый максимум активности каталазы семян дикорастущей сои, в то время как в семенах культурной сои - снижение активности каталазы и увеличение количества форм до семи, а при условиях 23-37°С -минимум активности фермента.

23 37 42 45С"

ас «; ф ю

е£

э-<

4 10 23 37 42 45С

-дикорастущая соя •

-культурная соя

-дикорастущая соя —«•- культурная соя

20 15 10 5 0

10 23 37 42 АЗС

—дикорзстущаясоя —»-кульгуриаясоя

Рис. 12. Удельная активность эстеразы (А), амилазы (Б) и каталазы (В) проростков семян дикорастущей и культурной сои в условиях температурного стресса.

Проращивание семян сои исследуемых образцов в условиях повышенной температуры (42°С) приводит к возрастанию в два раза активности каталазы семян культурной сои и почти в пять раз в семенах дикорастущей сои относительно нормы. При 42°С в семенах культурной сои выявлено 5 форм фермента. При температуре 45°С активность каталазы семян сорта Гармония и дикорастущей сои падает почти до минимума.

Анализ результатов по влиянию температурного стресса на активность РНКаз семян культурной и дикорастущей сои показал, что активность фермента в семенах дикорастущей сои снижается при отклонении от нормальной температуры (23°С) (рис. 13А). Следовательно, ее адаптивный потенциал падает, что, видимо, связано с увеличением числа защитных белков. Появление новых форм рибонуклеаз семян

культурной сои, возможно, указывает на повышение ее адаптивного потенциала в условиях измененной температуры (рис. 13Б).

Таким образом, при температуре 10°С и 42°С исследуемые ферменты семян культурной и дикорастущей сои (за исключением рибонуклеаз) имеют повышенную активность, что, видимо, свидетельствует о высоком адаптивном потенциале сои. Анализ рибонуклеазной активности показал, что в условиях температурного стресса адаптивный потенциал дикорастущей сои связан с повышением активности фермента, а культурной — с появлением в ее семенах дополнительных форм рибонуклеаз.

А Б

Г'7

I0-6

-г? 0,4 30,3

,0,1 <

0,2 0,4 0,6 0,8

4 10 23 3 7 4 2 45С° -дикорастущая соя —культурная соя

* 4 10 23 37 42 45 4 10 23 37 4245С° дикорастущая сся культурная соя

Рис. 13. Удельная активность (А) и схема энзимограмм рибонуклеаз (Б) проростков семян дикорастущей и культурной сои в условиях температурного стресса. Справа указана нумерация выявленных форм фермента.

В основе токсического действия тяжелых металлов лежит их денатурирующее действие на метаболически важные белки. Такие элементы, как Си, 2п, РЬ и Сё, инактивируют большинство ферментов [Иванов и др., 2003]. Ранее нами было установлено, что невысокие концентрации солей меди и хрома оказывают положительное влияние на активность малатдегидрогеназы и алкогольдегидрогеназы проростков семян сои [Иваченко и др., 1999].

Внесение солей тяжелых металлов в питательную среду привело к снижению активности РНКазы проростков сои по отношению к контролю. Исключение составляют образцы, выросшие на питательной среде с внесением сульфата меди в минимальной концентрации (6 • 10"5М). Такое же, как и для рибонуклеазы, положительное влияние сульфата меди в данной концентрации было выявлено при изучении активности каталазы проростков сои по сравнению с контролем. Следует отметить, что повышение концентрации данной соли до 6 • 104 М не вызывает резкого снижения активности каталазы, как в случае РНКазы. При внесении сульфата цинка удельная активность фермента снижалась и практически не зависела от концентрации данной соли. Установлено, что внесение

солей ТМ в питательную среду приводит к появлению новых высокоподвижных форм каталазы.

Глава 9. Использование множественных форм ферментов в качестве маркеров устойчивости сортов сои к различным

условиям выращивания В целом результаты многолетних исследований впервые позволили нам дать характеристику электрофоретических спектров ферментов сои и установить влияние климатических условий выращивания на их изменчивость, а также составить биохимические паспорта для сортов сои.

Таблица 5

Встречаемость форм рибонуклеаз, эстераз, амилаз, кислых фосфатаз, пероксидаз и катал аз в зависимости от погодных условий выращивания

1 2 3 4 5 6 7

Р1,Р2,Р5 Р1,Р2, Р5 Р11 Р4, Р7,Р10

Э4,Э7 Э4 Э5,Э6, Э7,Э 9, Э10, Э11, Э12

Al, А6, А9 А2 Al, А2, А5 А1,А2 Al, А2 А8

КФ1 КФ1 КФ6 КФ9-КФ13

П11,П12, П15, П17 П5, П14, П18 П1 ПЗ, П11, П12 П13, П15, П17 111, П2, П5,П15

КЗ, Кб, К8 КЗ, К4, К5,К7 К4, К5 К6.К7 К4, К5, К8 К2

Примечание: 1 - высокое количество осадков; 2 - низкое количество осадков; 3 - нормальное количество осадков; 4 - высокая температура; 5 - низкая температура; 6 - нормальная температура; 7 - встречаются при любых условиях.

Высокое количество форм ферментов выявлено при повышенной температуре (табл. 5). Формы эстераз Э4-Э8 проявляются при экстремальных условиях (повышенной температуре или засухе или высоком количестве осадков). При низкой температуре специфическими формами каталаз являются Кб и К7 и форма рибонуклеаз Р11. При условиях, где не выявлены специфичные для данных условий формы рибонуклеаз (низкая и нормальная влажность), выявлено по 3-4 формы каталаз защитного фермента-антиоксиданта. Формы пероксидаз П11, П12, П15, П17 и рибонуклеаз PI, Р2 и Р5 встречаются при повышенном количестве осадков и высокой температуре. П1 обнаружена при нормальной температуре и осадках в норме. Форма КФ1 установлена в условиях засухи (при повышенной температуре и небольшом количестве осадков).

Выводы:

1. Установлено, что стабильные показатели удельной активности и числа форм ферментов сои, а также их повышение под влиянием изменяющихся условий среды свидетельствуют о высоком адаптивном потенциале сортов сои.

2. Впервые в результате многолетних исследований электрофоретических спектров ферментов семян сои, полученных в различных агроклиматических условиях, выявлено восемь форм каталаз, десять форм амилаз, тринадцать форм кислых фосфатаз, четырнадцать форм эстераз и двенадцать форм рибонуклеаз.

3. Установлено, что адаптивные возможности дикорастущей сои обусловлены высокой удельной активностью ферментов, а культурной сои - увеличением числа форм ферментов семян.

4. Показано, что осадки сточных вод и комплексные препараты являются потенциальными регуляторами жизнеспособности и продуктивности для растений сои; использование ОСВ в качестве органоминерального удобрения приводит к повышению активности ферментов и увеличению урожайности. При этом содержание белка и масла в семенах сои не изменяется. Внесение комплексных препаратов, содержащих гуминовые кислоты и нитрагин, в почвы Амурской области не привело к изменению биохимических показателей семян сои и урожайности.

5. Увеличение адаптивного потенциала сои в условиях температурного шока, связанного со снижением удельной активности ферментов, компенсируется повышением числа их множественных форм.

6. Установлено, что сульфат меди в низких концентрациях стимулирует, а сульфат цинка оказывает отрицательное действие на удельную активность рибонуклеаз и каталаз проростков сои.

8. Для улучшения качества семян сои, используемых для пищевых целей, и сохранения высокого адаптивного потенциала растений к условиям выращивания необходимо отбирать сорта с низкой активностью пероксидаз и высокой активностью и числом форм каталаз и рибонуклеаз.

9. Впервые установлено, что активность ферментов сои зависит от природно-климатических условий региона и погодных условий вегетационного периода.

10. Установлено, что активность каталазы, пероксидазы, рибонуклеазы, кислой фосфатазы, эстеразы и амилазы может служить показателем адаптивных возможностей сои. На основании полученных данных отобраны сорта сои, сортообразцы и гибридная линия, перспективные для адаптивной селекции и интродукции в различных регионах.

Рекомендации к практической селекции Для выведения новых устойчивых сортов сои и введения адаптивных генов можно применять в селекции стабильные по морфологическим и биохимическим показателям линии дикорастущей сои КА-1388, КБ-49 и КБ-104.

Окская рязанской селекции, Ugra и Bravalla шведской селекции, Major французской селекции, Lambert (США), а также сортообразцы 76-11 канадской селекции, Ке 73042 (США) и № 4888 польской селекции. Сорта сои Oajachi японской селекции, Waetshater германской селекции и гибридную линию 1040-42 можно рекомендовать к интродукции в Амурской области и к использованию в селекционном процессе, а сорт СибНИИК-315 сибирской селекции - в Московской области. Высокую масличность и хорошие адаптивные свойства имеют сортообразцы Лань (ВНИИМК), MON-95 (США), Dong-Nong 4 (Китай).

Список опубликованных работ по теме диссертации Монографии:

1. Иваченко, Л.Е. Ферменты сои: монография / Л.Е. Иваченко. -Благовещенск: Изд-во БГТГУ, 2010. - 214 с.

2. Иваченко, Л.Е. Ферменты как маркеры адаптации сои к условиям выращивания: монография / Л.Е. Иваченко. - Благовещенск: Изд-во БГПУ, 2011.-192 с.

Статьи в периодических изданиях, рекомендованных ВАК РФ:

1. Селихова, O.A. Наследование и изменчивость энзиматической активности в семенах F2 G. max х G soja / O.A. Селихова, П.В. Тихончук, Л.Е. Иваченко // Доклады РАСХН. - 2003. - № 3. - С. 3-4.

2. Селихова, O.A. Изменение генотипической специфики биологически активных веществ семян коллекционных сортообразцов сои / O.A. Селихова, П.В. Тихончук, Л.Е. Иваченко // Arpo XXI. - 2003. - № 7. - С. 71-73.

3. Селихова, O.A. Изменение энзиматической активности семян сои в зависимости от условий выращивания / O.A. Селихова, П.В. Тихончук, Л.Е. Иваченко //Arpo XXI.-2003.7.-С. 111-113.

4. Селихова, O.A. Изменение энзиматической активности семян сои в зависимости от метеорологических условий года / O.A. Селихова, П.В. Тихончук, Л.Е; Иваченко // Аграрная наука.-2003.- № 11.-С. 15-17.

5. Иваченко, Л.Е. Влияние условий выращивания сои на антиоксидантную систему ее семян / Л.Е. Иваченко, O.A. Селихова, П.В. Тихончук, В.К. Гинс // Вестник РАСХН. - 2004. - № 4. - С. 55-57.

6. Гинс, М.С. Изменение биохимического состава семян сои сортов Соната и Гармония при различных условиях выращивания / М.С. Гинс, O.A. Селихова, Е.А. Семенова, Л.Е. Иваченко, Е.В. Романова, С.Р.Е.Або Хегани // Доклады РАСХН. - 2005. - № 5. - С. 10-12.

7. Иваченко, Л.Е. Сравнительный биохимический состав семян сои, выращенных в Амурской и Московской областях / Л.Е. Иваченко, Г.П. Ефимова, М.С. Гинс, С.Р.Е.Або Хегани // Вестник РАСХН. - 2006. - № 6. - С. 47-49.

8. Иваченко, Л.Е. Изменение морфологических и биохимических показателей сои при использовании осадков сточных вод в качестве

удобрения / Л.Е. Иваченко. В.А. Кашина, H.H. Ковалев // Вестник ЧГПУ. -

2010. - Л1» 4.-С. 338-348.

9. Иваченко, JI.E. Влияние метеорологических условий выращивания на электрофоретические спектры ферментов в семенах сои / Л.Е. Иваченко И Доклады РАСХН. - 2011. ~ №1с. 9-11.

10. Иваченко, JI.E. Влияние условий выращивания сои на урожайность и гидролазный комплекс ее семян / Л.Е. Иваченко, С.И. Лаврентьева, A.C. Коничев // Вестник МГОУ. - 2011. - № 2. - С. 32-36.

11. Иваченко, Л.Е. Активность амилаз, эстераз и рибонуклеаз в семенах сои, выращенных а Амурской и Московской областях / Л.Е. Иваченко, С.И. Лаврентьева, И.А. Трофимцова, М.С. Гинс, A.C. Коничев // Вестник МГОУ. - 2011. - № 2. - С. 37-41.

12. Иваченко, Л.Е. Влияние условий выращивания на электрофоретические спектры рибонуклеазы, эстеразного и амилазного комплексов сои / Л.Е. Иваченко, С.И. Лаврентьева, И.А. Трофимцова, A.C. Коничев, М.С. Гинс // Вестник ЧГПУ. - 2011. - № 5. - С. 365-372.

13. Иваченко, Л.Е. Влияние погодных условий выращивания на морфологические показатели и биохимический состав дикорастущей сои / Л.Е. Иваченко, O.A. Селихова, B.C. Ала, АЛ. Ала // Вестник ДВО РАН. -

2011.-№4.-С. 62-72.

Материалы международных, всероссийских и других научных конференций:

1. Селихова, O.A. Биохимический состав семян сои, выращенных в разных агроклиматических условиях Приамурья / O.A. Селихова, В.И. Шаройко, Л.Е. Иваченко // II Международный симпозиум «Химия и химическое образование».: сб. науч. тр. - Владивосток: Изд-во ДВГУ, 2000. - С.66-67.

2. Иваченко, Л.Е. Активность и множественные формы некоторых ферментов в семенах сои, выращенных в условиях Приамурья / JI.E. Иваченко, O.A. Селихова, П.В. Тихончук, В.И. Шаройко // III съезд Биохимического общества: тезисы научных докладов. - Санкт-Петербург: Изд-во «Фарос Плюс», 2002. - С. 586.

3. Иваченко, Л.Е. Изучение межвидовых гибридов F3 сои по хозяйственно ценным признакам и энзиматической активности / Л.Е. Иваченко, О.В. Арклис, B.C. Ала, АЛ. Ала, В.К. Гинс // Новые и нетрадиционные растения и перспективы их использования: сб. статей РУДН. - М., 2003. -Т. 2.-С. 293-296.

4. Иваченко, Л.Е. Влияние метеорологических условий на энзиматическую активность коллекционных сортообразцов сои / Л.Е. Иваченко, O.A. Селихова, П.В. Тихончук // Новые и нетрадиционные растения и перспективы их использования: сб. статей РУДН. - М., 2003. - Т. 1. - С. 197-201.

5. Селихова, O.A. Изменение биохимического состава семян сои в зависимости от агроклиматических условий возделывания 2001 года / O.A.

Селихова, JI.E. Иваченко, П.В. Тихончук // Новые и нетрадиционные растения и перспективы их использования: сб. статей РУДН. - М., 2003. -Т. 1.-С. 202-205.

6. Шаройко, В.И. Влияние регуляторов роста растений на активность каталазы и продукционные процессы сои / В.И. Шаройко, П.Н. Разанцвей, Л.Е. Иваченко Л Новые и нетрадиционные растения и перспективы их использования: сб. статей РУДН. - М., 2003. - Т. 1. - С. 371-373.

6. Селихова, O.A. Биохимическая оценка исходного материала для селекции сои на качество / O.A. Селихова, П.В. Тихончук, Л.Е. Иваченко // Современные проблемы и достижения аграрной науки в животноводстве и растениеводстве: Юбилейная международная науч.-практич. конференция: сб статей АГАУ. - Барнаул, 2003. - Ч. 1. - С. 84-86.

7. Иваченко, Л.Е. Изучение сои различного филогенетического происхождения по хозяйственно ценным признакам и энзиматической активности / Л.Е. Иваченко, О.В. Арклис, B.C. Ала, АЛ. Ала, В.К. Гинс // Генетические ресурсы растениеводства Дальнего Востока: материалы международной научной конференции «Перспективы использования геноресурсов в селекции сельскохозяйственных культур Дальнего Востока»: сб. науч. тр. / под ред. В.П. Царенко. - Владивосток: Изд-во «Дальнаука», 2004. - С. 80-84.

8. Иваченко, Л.Е. Биохимический состав семян сои коллекции ВИР, выращенных в условиях Амурской и Московской областей / Л.Е. Иваченко, Г.П. Ефимова, Або С.Р.Е. Хегани, М.С. Гинс, В.К. Гинс // Новые и нетрадиционные растения и перспективы их использования: сб. статей РУДН. - М., 2005. - Т. 3. - С. 315-319.

9. Иваченко, Л.Е. Электрофоретические спектры каталазы и пероксидазы в семенах сои различного филогенетического происхождения / Л.Е. Иваченко, В.И. Разанцвей, Н. Д. Фоменко // Новые и нетрадиционные растения и перспективы их использования: сб. статей РУДН. - М., 2007. -Т. 2.-С. 159-161.

10. Иваченко, Л.Е. Активность и множественные формы рибонуклеазы в семенах сои различного филогенетического происхождения / Л.Е. Иваченко, С.И. Лаврентьева, И.А. Трофимцова, В.К. Гинс // Материалы VII Международного симпозиума «Новые и нетрадиционные растения и перспективы их использования»: сб. статей РУДН. - М.: РУДН, 2007. - Т. 2.-С. 162-164.

11. Иваченко, Л.Е. Влияние температуры на активность и множественные формы пероксидазы в семенах сои различного филогенетического происхождения / Л.Е. Иваченко, В.А. Кононенко // Интродукция нетрадиционных и редких растений: материалы VIII научно-практической конференции (8-12 июня, 2008г.). - Мичуринск-наукоград РФ, 2008. - Т.З. -С. 53-55.

12. Иваненко, JI.E. Электрофоретические спектры рибонуклеазы при посемейном анализе в семенах сои различного филогенетического происхождения / Л.Е. Иваненко, С.И. Лаврентьева, А.Я. Ала, B.C. Ала // Материалы VIII Международного симпозиума «Новые и нетрадиционные растения и перспективы их использования»: сб. статей РУДН. - М.: РУДН, 2009. - Т. 3.-С. 86-88.

13. Трофимцова, И.А. Элективный курс «Химия жизни» как средство формирования здорового образа жизни школьников / И.А. Трофимцова, Л.Е. Иваненко, С.И. Лаврентьева // Материалы 1П Всероссийской научно-практической конференции «Инновационные процессы в химическом образовании». - Челябинск: Изд-во ЧГПУ, 2009. - С. 230-232.

14. Лаврентьева, С.И. Влияние различных концентраций сульфата меди и сульфата цинка на морфологические показатели проростков сои при инокуляции их семян / С.И. Лаврентьева, Л.Е. Иваченко, М.В. Якименко, A.A. Терехова // Сб. статей XI Международной научно-методической конференции «Интродукция нетрадиционных и редких растений». -Мичуринск, 2010.

15. Иваченко, Л.Е. Характеристика электрофоретических спектров ферментов как маркеров сортов сои / Л.Е. Иваченко, И.В. Егорова, Н.Д. Фоменко // Материалы международной научной конференции «Фундаментальные "исследования», Израиль; Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. - 2010. - № 5. - С. 65-68.

16. Иваченко JL Е. Роль множественных форм ферментов сои в процессе биохимической адаптации к изменяющимся условиям среды / Л.Е. Иваченко // Материалы III общероссийской научной конференции «Актуальные вопросы науки и образования». Москва, 11-13 мая 2010г.; Успехи современного естествознания. - 2010. — № 9. — С. 96-98.

17. Иваченко, Л.Е. Исследование сельскохозяйственных культур, выращенных в Амурской области, на содержание трансгенов / Л.Е. Иваченко, Е.М. Стасюк, Е.С. Маскапьцова, С.И. Лаврентьева, И.А. Трофимцова, П.Е. Осипов, И.В. Егорова // Материалы Международной научной конференции «Мониторинг окружающей среды» (Италия, Рим-Флоренция); Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. - 2010. - № 9. - С. 93-94.

18. Иваченко, Л.Е. Характеристика сортов сои, различающихся по скороспелости, относительно их электрофоретических спектров / Л.Е. Иваченко, С.И. Лаврентьева // Материалы Международной научно-практической конференции «Аграрные проблемы соесеющих территорий Азиатско-Тихоокеанского региона». - Благовещенск: Изд-во ВНИИ сои, 2011. -С. 148-154.

19. Иваченко, Л. Е. Роль ферментов в устойчивости сои к условиям выращивания / Л. Е. Иваченко // V Международный симпозиум «Химия и химическое образование»: сб. науч. тр. - Владивосток: Изд-во

Дальневосточного Федерального государственного университета, 2011. -С. 146-147.

20. Иваченко, JI.E. Влияние сульфатов меди и цинка на активность аспартатаминотрансферазы, рибонуклеазы и каталазы сои / Л.Е. Иваченко, С.И. Лаврентьева, A.B. Казакова, A.A. Терехова // Сб. трудов Ш Международного экологического конгресса ELPIT-2011, V Международной научно-технической конференции «Экология и безопасность жизнедеятельности промышленно-транспортных комплексов». - Тольятти: Изд-во ТГУ, 2011. - С. 93-98. Статьи в сборниках научных трудов:

1. Иваченко, Л.Е. Активность и множественные формы ферментов в семенах сои, полученных в разных агроклиматических условиях Амурской области. 4.1. Пероксидазы / Л.Е. Иваченко, ГЛ. Ефимова // Проблемы экологии Верхнего Приамурья: сб. научн. тр. - Вып.2. - Благовещенск, 1995.-С. 5-15:

2. Иваченко, Л.Е. Активность и множественные формы ферментов в семенах сои, полученных в разных агроклиматических условиях Амурской области. 4.2. Амилазы / Л.Е. Иваченко, В.И. Ющенко // Проблемы экологии Верхнего Приамурья: сб. научн. тр. - Вып.2. - Благовещенск, 1995.-С. 16-25.

3. Иваченко, Л.Е. Активность и множественные формы ферментов в семенах сои, полученных в разных агроклиматических условиях Амурской области. 4.3. Эстеразы / Л.Е. Иваченко // Проблемы экологии Верхнего Приамурья: сб. научн. тр. - Вып.2. - Благовещенск, 1995. - С. 25-34.

4. Соколова, A.B. Влияние солей тяжелых металлов на активность и множественные формы пероксидаз в прорастающих семенах сои сорта ВНИИС-1 / A.B. Соколова, Л.Е. Иваченко // Проблемы экологии Верхнего Приамурья: сб. научн. тр. - Вып.З. - Благовещенск, 1997. - С. 84-90.

5. Иваченко, Л.Е. Активность и множественные формы ферментов в семенах сои, полученных в разных агроклиматических условиях Амурской области. 4.4. Апкогольдегидрогеназа / Л.Е. Иваченко, В.И. Шаройко, Ю.Б. Филиппович // Проблемы экологии Верхнего Приамурья: сб. научн. тр. □ Вып.З. - Благовещенск, 1997. - С.91-97.

6. Филиппович, Ю.Б. Активность и множественные формы ферментов в семенах сои, полученных в разных агроклиматических условиях Амурской области. 4.5. Глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа / Ю.Б. Филиппович, Л.Е. Иваченко, В.И. Шаройко, O.A. Довлатбегова // Проблемы экологии Верхнего Приамурья: сб. научн. тр. - Вып.З. - Благовещенск, 1997. - С. 98103.

7. Иваченко, Л.Е. Активность и множественные формы ферментов в семенах сои, полученных в разных агроклиматических условиях Амурской области. 4.6.Каталаза / Л.Е. Иваченко, В.И. Шаройко, Г.П. Ефимова //

Проблемы экологии Верхнего Приамурья: сб. научн. тр. - Вып.З. -Благовещенск, 1997,- С.104-108.

8. Филиппович, Ю.Б. Активность и множественные формы ферментов в семенах сои, полученных в разных агроклиматических условиях Амурской области. 4.7. Малатдегидрогеназа / Ю.Б. Филиппович, JI.E. Иваченко, В.И. Шаройко // Проблемы экологии Верхнего Приамурья: сб. научн. тр. -Вып.4.-Благовещенск, 1999.-С. 61-66.

9. Филиппович, Ю.Б. Влияние условий среды на активность и множественные формы малатдегидрогеназы и алкогольдегидрогеназы в семенах сои сорта ВНИИС-1 / Ю.Б. Филиппович, JI.E. Иваченко, В.И. Шаройко // Проблемы экологии Верхнего Приамурья: сб. научн. тр. -Вып.4. - Благовещенск, 1999. - С. 67-72.

10. Иваченко, JI.E. Влияние солей тяжелых металлов на активность vi множественные формы алкогольдегидрогеназы и малатдегидрогеназы в прорастающих семенах сои сорта ВНИИС-1/ Л.Е. Иваченко, В.И. Шаройко // Проблемы экологии Верхнего Приамурья: сб. научн. тр. -Вып.4.-Благовещенск, 1999.-С. 73-81.

11. Шаройко, В.И. Активность и множественные формы рибонуклеазы в семенах районированных сортов сои Амурской области / В.И. Шаройко, JI.E. Иваченко, С.А. Лескова // Проблемы экологии Верхнего Приамурья: сб. науч. тр. / под общ. ред. Л.Г. Колесниковой. - Благовещенск: Изд-во БГПУ, 2000. - Вып.5. - С. 58-65.

12. Селихова, O.A. Биологически активные вещества в семенах сои сортов селекции Всероссийского НИИ сои / O.A. Селихова, Л.Е. Иваченко, В.К. Гинс // Селекция и семеноводство овощных культур: сб. науч. тр. ВНИИССОК. под общ. ред. акад. РАСХН В.Ф. Пивоварова. - Вып. 39. -М., 2003.-С. 199-208.

13. Семёнова, Е.А. Активность каталазы, пероксидазы и амилазы в течение вегетационного периода сои сорта ВНИИС-1 / Е.А. Семёнова, Л.Е. Иваченко, П.В. Тихончук // Проблемы экологии Верхнего Приамурья: сб. науч. тр. / под общ. ред. Л.Г. Колесниковой. - Благовещенск: Изд-во БГПУ, 2003. - Вып. 7. - С. 58-65.

14. Ефимова, Г.П. Влияние комплексных препаратов на формирование урожая сои / Г.П. Ефимова, Л.А. Каманина, Л.Е. Иваченко, О.В. Родионова // Проблемы экологии Верхнего Приамурья: сб. науч. тр. / под общ. ред. Л.Г. Колесниковой и Е.И.Маликовой. - Благовещенск: Изд-во БГПУ, 2005,- Вып.8.-С. 79-88.

15. Селихова, O.A. Влияние условий выращивания на структуру урожая и биохимический состав семян сортов сои мировой коллекции / O.A. Селихова, Л.Е. Иваченко, П.В. Тихончук // Проблемы экологии Верхнего Приамурья: сб. науч. тр. / под общ. ред. Л.Г. Колесниковой и Е.И. Маликовой. - Благовещенск: Изд-во БГПУ, 2005. - Вып.8. - С. 97-113.

16. Иваненко, Л.Е. Влияние комплексных препаратов на энзиматическую активность в семенах сои сорта Соната / Л.Е. Иваченко, Г. II. Ефимова, Л.А. Каманина // Проблемы экологии Верхнего Приамурья: сб. науч. тр. / под общ. ред. Л.Г. Колесниковой. - Благовещенск: Изд-во БГПУ, 2007. -Вып.9. - С. 65-76.

17. Кононенко, В .А. Активность и множественные формы пероксидазы в семенах сои / В.А. Кононенко, Л.Е. Иваченко // Проблемы экологии Верхнего Приамурья: сб. науч. тр. / под общ. ред. Л.Г. Колесниковой. -Благовещенск: Изд-во БГПУ, 2009. - Вып. 11. - С. 56-61.

18. Иваченко, Л.Е, Электрофоретические спектры ферментов в семенах сортов сои, выращенных в Московской области / Л.Е. Иваченко, С.И. Лаврентьева, Е.С. Маскальцова, М.С. Гинс // Проблемы экологии Верхнего Приамурья: сб. науч. тр. / под общ. ред. Л.Г. Колесниковой. -Благовещенск: Изд-во БГПУ, 2009. - Вып. 11. - С. 51-55.

19. Иваченко, Л.Е. Разнокачественность семян сои / Л.Е. Иваченко // Проблемы экологии Верхнего Приамурья: сб. науч. тр. // под общ. ред. Л.Г. Колесниковой. - Благовещенск: Изд-во БГПУ, 2009. - Вьш.11. -С. 42-50.

20. Иваченко, Л.Е. Использование физико-химических методов исследования для маркирования генома сои / Л.Е. Иваченко, С.И. Лаврентьева, В.А. Кузнецова, А.В. Казакова, Н.Ю. Зазимко, М.В. Якименко, М.С. Гинс // Нетрадиционные сельскохозяйственные, лекарственные и декоративные растения.-2011. 1(6). -С. 83-84.

Учебные пособия:

1.Иваченко, Л.Е. Химия жизни: учебное пособие к факультативному курсу для учащихся 10-11 классов / Л.Е. Иваченко, И.А. Трофимцова, Т.И. Семина. - Благовещенск: Изд-во БГПУ, 1999. - 100 с.

2. Иваченко, Л.Е. Эколого-биохимические аспекты питания / Л.Е. Иваченко. - Благовещенск: Изд-во БГПУ, 1999. —120 с.

3. Иваченко, Л.Е. Введение в эндоэкологию. 4.1: Молекулярные механизмы адаптации: учебное пособие / Л.Е. Иваченко. - Благовещенск. Изд-во БГПУ, 2006. - 241 с.

4. Методы изучения полиморфизма ферментов сои / Л.Е. Иваченко, В.А. Кашина, Е.С. Маскальцова, В.И. Разанцвей, Е.М. Стасюк, И. А. Трофимцова; под ред. Л.Е. Иваченко. - Благовещенск: Изд-во БГПУ, 2008.-142 с.

5. Иваченко, Л.Е. Химия жизни: учебное пособие к элективному курсу для учащихся 9-11 классов / Л.Е. Иваченко, И.А. Трофимцова, С.И. Лаврентьева. - Изд. 2-е, доп. - Благовещенск: Изд-во БГПУ, 2010. - 210 с. (Допущено Министерством образования и науки Амурской области в качестве учебного пособия для учащихся общеобразовательных учреждений).

ИВАЧЕНКО ЛЮБОВЬ ЕГОРОВНА

ФЕРМЕНТЫ КАК МАРКЕРЫ АДАПТАЦИИ СОИ К УСЛОВИЯМ ВЫРАЩИВАНИЯ

Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук

Лицензия ЛР № 040326 от 19 декабря 1997 г. Сдано в печать 15.12.11 г. Формат 60x84 1/16. Бумага офсетная. Отпечатано на дупликаторе. Усл. печ. л. 2,8. Уч.-изд. л. 2,8. Тираж 100 экз. Заказ 2946

Издательство Благовещенского государственного педагогического университета. Типография Благовещенского гос. пед. университета. 675000, Амурская обл., г. Благовещенск, ул. Ленина, 104.

Содержание диссертации, доктора биологических наук, Иваченко, Любовь Егоровна

ВВЕДЕНИЕ.5

Глава 1. ВЛИЯНИЕ УСЛОВИЙ ВЫРАЩИВАНИЯ НА

БИОХИМИЧЕСКИЙ СОСТАВ СОИ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ).14

1.1. Соя - экологически пластичная культура.14

1.2. Влияние экологических факторов на биохимические показатели сои.21

1.3. Ферментные системы сои и некоторые аспекты их применения в практических целях.32

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ, УСЛОВИЯ И МЕТОДЫ

ИССЛЕДОВАНИЯ.61

2.1. Материал исследования.61

2.2. Климатические условия в годы исследования.62

2.3. Методы исследования.67

Глава 3. ВЛИЯНИЕ АГРОКЛИМАТИЧЕСКИХ УСЛОВИЙ ВЫРАЩИВАНИЯ НА ЭНЗИМАТИЧЕСКУЮ АКТИВНОСТЬ И СОДЕРЖАНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ

СЕМЯН РАЙОНИРОВАННЫХ СОРТОВ СОИ.75

3.1. Влияние агроклиматических условий выращивания на энзиматическую активность семян районированных сортов сои.75

3.1.1. Характеристика электрофоретических спектров ферментов как маркеров сортов сои.79

3.1.2. Характеристика сортов сои, различающихся по скороспелости, относительно их электрофоретических спектров.84

3.1.3. Влияние условий выращивания на удельную активность пероксидазы, каталазы, кислой фосфатазы, зстеразы и амилазы.88

3.1.4. Влияние условий выращивания на множественные формы пероксидаз, каталаз, кислых фосфатаз, зстераз и амилаз.94

3.2. Изучение влияния агроклиматических условий выращивания районированных сортов сои на биохимический состав их семян.111

Глава 4. ВЛИЯНИЕ ПОГОДНЫХ УСЛОВИЙ ВЫРАЩИВАНИЯ НА ЭНЗИМАТИЧЕСКУЮ АКТИВНОСТЬ СЕМЯН ДИКОРАСТУЩЕЙ СОИ. 118

4.1. Влияние условий выращивания на удельную активность пероксидазы, каталазы, кислой фосфатазы, зстеразы и амилазы. 118

4.2. Влияние условий выращивания на множественные формы пероксидаз, каталаз, кислых фосфатаз, зстераз и амилаз. 122

4.3. Изучение влияния агроклиматических условий выращивания дикорастущей сои на морфологические показатели и биохимический состав семян. 126

4.4. Энзиматическая активность семян сои в F2 и F3 (Glycine max х Glycine soja Jhhx родителей. 131

Глава 5. ВЛИЯНИЕ ПОГОДНЫХ УСЛОВИЙ ВЫРАЩИВАНИЯ НА СТРУКТУРУ УРОЖАЯ СОИ, БИОХИМИЧЕСКИЙ СОСТАВ И АКТИВНОСТЬ ФЕРМЕНТОВ СЕМЯН МИРОВОЙ КОЛЛЕКЦИИ ВИР, ПОЛУЧЕННЫХ ИЗ РАЗЛИЧНЫХ ЭКОЛОГО-ГЕО-ГРАФИЧЕСКИХ ЗОН. 139

5.1. Влияние погодных условий выращивания на активность и множественные формы ферментов семян сои мировой коллекции. 139

5.2. Влияние погодных условий выращивания на хозяйственно ценные признаки сои мировой коллекции. 169

Глава 6. БИОХИМИЧЕСКИЙ СОСТАВ СЕМЯН СОРТОВ СОИ КОЛЛЕКЦИИ ВИР, ВЫРАЩЕННОЙ В УСЛОВИЯХ АМУРСКОЙ И МОСКОВСКОЙ ОБЛАСТЕЙ. 184

6.1. Удельная активность и электрофоретические спектры каталазы и пероксидазы семян сортов сои мировой коллекции. 185

6.2. Удельная активность и электрофоретические спектры рибонуклеазы, эстеразного и амилазного комплекса семян сортов сои мировой коллекции. 188

6.3. Морфологические показатели урожая и биохимический состав семян сортов сои мировой коллекции. 196

Глава 7. ИЗМЕНЕНИЕ БИОХИМИЧЕСКИХ И МОРФОЛОГИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ СОИ ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ ОСАДКА СТОЧНЫХ ВОД И КОМПЛЕКСНЫХ ПРЕПАРАТОВ. 202

7.1. Изменение энзиматической активности семян сои при использовании осадка сточных вод в качестве удобрения. 202

7.2. Изменение морфологических показателей сои при использовании осадка сточных вод в качестве удобрения. 208

7.3. Влияние комплексных препаратов на энзиматическую активность семян сои. 210

7.4. Морфологическая и биохимическая характеристика семян сои сорта Соната, полученных после обработки предпосевного материала комплексными препаратами. 216

Глава 8. ВЛИЯНИЕ ТЕМПЕРАТУРЫ И ТЯЖЕЛЫХ МЕТАЛЛОВ НА АКТИВНОСТЬ ФЕРМЕНТОВ ПРОРОСТКОВ СОИ. 219

8.1. Активность каталазы, амилазы, эстеразы и рибонуклеазы проростков сои при температурном стрессе. 219

8.2. Влияние сульфатов меди и цинка на активность рибонуклеазы и каталазы проростков сои. 227

Глава 9. ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МНОЖЕСТВЕННЫХ ФОРМ ФЕРМЕНТОВ В КАЧЕСТВЕ МАРКЕРОВ УСТОЙЧИВОСТИ СОРТОВ СОИ К РАЗЛИЧНЫМ УСЛОВИЯМ ВЫРАЩИВАНИЯ. 232

Введение Диссертация по биологии, на тему "Ферменты как маркеры адаптации сои к условиям выращивания"

Gorman, Kiang, 1977; Hildebrand, Hymowitz, 1980; Griffin, Palmer, 1995; Иваненко, 2000, 2010; Селихова, 2003; Семенова, 2006; Епифанцев и др., 2010]. Расширение и обобщение фактического материала о множественных формах ферментов сои может стать одним из инструментов изучения адаптации.

Соя (Glycine max (L.) Merrill) - уникальный альтернативный источник белка и экономически выгодная техническая культура. Дальний Восток является основным производителем сои в России [Заостровных, Дубовицкая, 2003], но экономика страны обеспечивается отечественной соей всего на 20%, в то время как её мировое производство увеличивается высокими темпами. Амурская область производит 60% всей сои в России [Кочегура, 2001; Шелепа и др., 2011]. Расширение посевных площадей объясняется не только возрастанием интереса к ней как ценной высокобелковой, кормовой и пищевой культуре, но и благоприятными почвенно-климатическими условиями для её возделывания [Синеговская, 2005]. Здесь же находится северный ареал дикорастущей сои (Glycine soja Siebold & Zucc), которая обладает высоким адаптивным потенциалом [Ала, Тильба, 2005] и является источником многих ценных генов, отсутствующих в генотипе представителей культурной сои [Козак, 2005].

В Амурской области выращиваются в основном сорта сои местной селекции, выведенные классическими методами. Они генетически очень близки, что приводит к обеднению генофонда культурной сои и ведет к ограничению ее адаптивного потенциала [Тихончук, 2004]. В связи с акклиматизацией и продвижением выращивания сои на север [Васякин, Гамзиков, 2002; Хегани и др., 2004; Посыпанов, 2007; Кобозева, 2007] возникла необходимость в глубоком изучении ее эколого-биохимических механизмов устойчивости и продуктивности.

1. Выявить влияние агрометеорологических условий выращивания на активность и электрофоретические спектры каталазы, пероксидазы, кислой фосфатазы, эстеразы и амилазы районированных сортов сои.

Научная новизна и теоретическая значимость. Впервые представлено и экспериментально обосновано перспективное для селекции сои направление исследования ферментов в качестве маркеров ее устойчивости к условиям выращивания. В результате экспериментальной работы выявлено влияние погодных условий на изменение энзиматической активности семян сои различного филогенетического и эколого-географического происхождения. Впервые проанализированы и обобщены закономерности биохимической адаптации дикорастущей и культурной сои к условиям выращивания. Выполнен детальный анализ и систематизированы данные о выявленных электрофоретических спектрах каталаз, пероксидаз, кислых фосфатаз, рибонуклеаз, эстераз и амилаз семян сои. Впервые изучена связь разнообразия форм ферментов с различными условиями выращивания сои.

Обоснованность научных положений, выводов, рекомендаций.

Научные положения диссертационной работы, выводы и рекомендации являются результатом многолетних полевых и лабораторных исследований, проведенных с применением разнообразных биологических, биохимических и физико-химических методов анализа. В исследованиях использовались стандартные и частично модифицированные автором биохимические и биологические методы, применяемые для определения химических и биологических показателей растений. Полученные результаты статистически обработаны.

Основные положения, выносимые на защиту:

Апробация работы. Материалы диссертации докладывались на II и V Международных научно-практических конференциях «Химия и химическое образование» (г. Владивосток, 2000г., 12-18 сентября 2011г.); III съезде Биохимического общества (г. Санкт-Петербург, 2002г.); координационном совещании Сибири и Дальнего Востока по сое «Актуальные вопросы производства и переработки сельскохозяйственного сырья в Дальневосточном регионе» (г. Благовещенск, 2002г.); Международной научно-практической конференции «Современные проблемы и достижения аграрной науки в животноводстве и растениеводстве» (г. Барнаул, 2003г.); Международной научной конференции «Перспективы использования геноресурсов в селекции сельскохозяйственных культур Дальнего Востока», (г. Владивосток, 2004г.); региональной научно-практической конференции «Проблемы экологии и рационального использования природных ресурсов в Дальневосточном регионе» (г. Благовещенск, 21-23 декабря 2004г.); V, VI, VII, VIII Международных симпозиумах «Новые и нетрадиционные растения и перспективы их использования» (г. Пущино Московской обл., 2003г., 2005г., 2007г., 2009г.); III Всероссийской научно-практической конференции «Инновационные процессы в химическом образовании» (г. Челябинск, 12-15 октября 2009г.); XI Международной научно-методической конференции «Интродукция нетрадиционных и редких растений» (г. Мичуринск

Тамбовской обл., 21-25 июня 2010г.); Международной научной конференции «Фундаментальные исследования» (Израиль, 10-17 апреля 2010г.); III общероссийской научной конференции «Актуальные вопросы науки и образования» (г. Москва, 11-13 мая 2010г.); Международной научной конференции «Мониторинг окружающей среды» (Италия (Рим-Флоренция), 12-19 сентября 2010г.); Международной научно-практической конференции «Аграрные проблемы соесеющих территорий Азиатско-Тихоокеанского региона» (г. Благовещенск, 8-9 сентября 2010г.); III Международном экологическом конгрессе ЕЬР1Т-2011, V Международной научно-технической конференции «Экология и безопасность жизнедеятельности промышленно-транспортных комплексов» (г. Тольятти, г. Самара, 21-25 сентября 2011г.).

Заключение Диссертация по теме "Экология (по отраслям)", Иваченко, Любовь Егоровна

ВЫВОДЫ:

3. Установлено, что адаптивные возможности дикорастущей сои обусловлены высокой удельной активностью ферментов, а культурной сои -увеличением числа форм ферментов семян.

РЕКОМЕНДАЦИИ К ПРАКТИЧЕСКОЙ СЕЛЕКЦИИ

Для выведения новых устойчивых сортов сои и введения адаптивных генов можно применять в селекции стабильные по морфологическим и биохимическим показателям линии дикорастущей сои КА-1388, КБ-49 и КБ-104.

Для усиления адаптивных возможностей сои в различных агроэкологических условиях рекомендуется использовать сорта сои Соната и Гармония амурской селекции, Соер-4 саратовской селекции, Светлая и Окская рязанской селекции, Ugra и Bravalla шведской селекции, Major французской селекции, Lambert (США), а также сортообразцы 76-11 канадской селекции, Ке 73042 (США) и № 4888 польской селекции. Сорта сои Oajachi японской селекции, Waetshater германской селекции и гибридную линию 1040-42 можно рекомендовать к интродукции в Амурской области и к использованию в селекционном процессе, а сорт СибНИИК-315 сибирской селекции - в Московской области. Высокую масличность и хорошие адаптивные свойства имеют сортообразцы Лань (ВНИИМК), MON-95 (США), Dong-Nong 4 (Китай).

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В настоящее время стоит задача создания новых сортов, обладающих устойчивостью к воздействию неблагоприятных факторов внешней среды. Сорта сои должны иметь короткий вегетационный период и быть хорошо адаптированными к условиям возделывания.

Ведущую роль в поддержании внутриклеточного гомеостаза и адаптации растений к стрессорам играют ферменты. Впервые обосновано и экспериментально развито перспективное для селекции сои направление о роли ферментов в процессе адаптации. Нами проанализированы и обобщены закономерности биохимической адаптации к условиям выращивания культурной и дикорастущей сои. В результате экспериментальной работы прослежено влияние погодных условий выращивания сои на изменения удельной активности и множественных форм ферментов ее семян.

Ферментная система, включающая каталазу и пероксидазу может служить показателем устойчивости сорта. Хорошо известна роль каталазы и пероксидазы в системе иммунной защиты растений, антипатогенном действии по отношению к вирусам и бактериям, к Холодовым стрессам, а также к различным загрязнителям окружающей среды. Ферменты амилазного и эстеразного комплексов, рибонуклеаза, а также кислая фосфатаза являются важнейшими ферментами основных метаболических путей живых систем.

Амурская область является идеальным регионом для производства сои, так как имеет соответствующие агроклиматические условия, где находится северный ареал произрастания дикорастущей сои, обладающей высоким адаптивным потенциалом.

В ходе исследований нами впервые выявлены и систематизированы множественные формы ферментов семян районированных в Амурской области сортов сои и коллекции семян дикорастущей сои коллекции ГНУ ВНИИ сои РАСХН и коллекции ГНУ ВИР РАСХН различного эколого-географического происхождения, выращенных в разные по погодным условиям годы и разных агроэкологических зонах. Установлено восемь форм каталаз, восемнадцать форм пероксидаз, десять форм амилаз, четырнадцать форм эстераз, тринадцать форм кислых фосфатаз и двенадцать форм рибонуклеаз семян сои. Установлено, что скороспелые сорта селекции ВНИИ сои и сорт Соер-4 саратовской селекции имеют более высокую гетерогенность и процентную встречаемость форм исследуемых ферментов, за исключением пероксидаз.

Для дикорастущей сои нами установлена высокая удельная активность и небольшое число множественных форм исследуемых ферментов. В свою очередь, невысокая удельная активность исследуемых ферментов культурной сои видимо компенсируется увеличением гетерогенности ферментов, что способствует повышению адаптивных возможностей культурной сои к различным условиям выращивания.

В результате проведенных исследований мы пришли к заключению, что энзиматическая активность семян сои больше зависит от погодных условий выращивания, чем от сортовых особенностей сои. Впервые нами изучена связь компонентного состава электрофоретических спектров ферментов с изменением погодных условий выращивания сои. Изучение активности ферментов в течение нескольких лет показало, что в семенах районированных сортов удельная активность и гетерогенность множественных форм ферментов выше в северной агроклиматической зоне Амурской области, что является показателем более высокой адаптивности сои к условиям выращивания, а также свидетельствует о возможности успешной акклиматизации лучших амурских сортов в других регионах страны.

Установлено, что встречаемость различных форм исследуемых ферментов больше зависит от погодных условий года выращивания, чем от агроклиматической зоны возделывания. Изучение электрофоретических спектров каталаз, пероксидаз, амилаз, эстераз и кислых фосфатаз семян районированных в Амурской области сортов сои показало, что низкая

248 температура 1999г. привела к уменьшению количества форм и их процентной встречаемости, в то время как высокая температура 2000г. усиливала метаболические процессы. Это отражается на увеличении количества форм ферментов и их процентной встречаемости. Следует отметить, что как низкая, так и высокая температуры воздуха при выращивании сои приводят к увеличению активности и количества множественных форм исследуемых ферментов. Выявлено, что многочисленные формы эстераз со средней электрофоретической подвижностью, проявленные в условиях высокой температуры и повышенной влагообеспеченности 2000г., отсутствовали в 2001г. в условиях, близких к норме. Таким образом, результаты изучения ферментов семян сои показали, что увеличение количества осадков, либо температуры воздуха вызывает повышение активности и количества форм ферментов. Вследствие этого увеличивается адаптивный потенциал сои, что, в свою очередь, улучшает качество семян (возрастает содержание олеиновой и линоленовой кислот) и способствует лучшему приспособлению сои к неблагоприятным условиям выращивания.

Анализ активности каталаз, пероксидаз, кислых фосфатаз, амилаз, и эстераз семян сои сортов коллекции различного эколого-географического происхождения, полученных в 2000-2002гг., показал, что сложные метеорологические условия 2000 и 2001гг. значительно повлияли на распределение электрофоретических спектров исследуемых ферментов. В условиях 2000г., когда в течение вегетационного периода наблюдалась высокая температура и повышенная влажность, в семенах сои выявлена небольшое количество форм пероксидаз и высокая активность каталаз, кислых фосфатаз, амилаз и эстераз. Недостаток осадков в 2001г., наоборот, вызвал увеличение множественных форм пероксидаз и снижение гетерогенности других исследуемых ферментов. В 2000-2001гг., в условиях стресса, установлена обратная зависимость между активностью и количеством множественных форм пероксидаз и каталаз. Таким образом, нами показано, что повышение адаптивного потенциала сои зависит не только от региона возделывания, но и от погодных условий выращивания.

Анализ активности пероксидаз, амилаз, эстераз и рибонуклеаз семян сои сортов коллекции различного эколого-географического происхождения, выращенной в разных агроэкологических зонах (Амурская и Московская области) показал, что высокой активностью обладают сорта сои шведской селекции и Соер-4 саратовской селекции. Наибольшее количество форм характерно для сортов Соната и Гармония амурской селекции, Соер-4 саратовской селекции и Светлая рязанской селекции как в Амурской, так и в Московской областях. Показано, что вышеперечисленные сорта обладают высоким адаптивным потенциалом и их можно рекомендовать к интродукции. Установлено, что семена сортов сои ОазасЫ японской, \Vaetshater германской селекции и гибрид Линия 1040-42 имели повышенную удельную активность ферментов в условиях Амурской области, а семена сорта СибНИИК-315 сибирской селекции - в Московской области. В связи с этим, сорта сои Оа]асЫ, >^ае181га1ег и гибрид Линия 1040-42 можно рекомендовать к интродукции в Амурской области, а сорт СибНИИК-315 - в Московской области. Эксперимент по выращиванию амурских сортов сои и сортов различного эколого-географического происхождения из коллекции ГНЦ ВИР в Московской области позволил установить, что активность исследуемых ферментов сои зависит не только от сортовых особенностей, но и от региона ее произрастания.

Изучение влияния осадка сточных вод на биохимические показатели сои выявило повышение активности ферментов и числа их форм как показателя уровня стресса в зависимости от вида и количества вносимого осадка. Внесение осадка в качестве органоминерального удобрения приводит к значительному повышению урожайности и не изменяет биохимический состав семян сои по основным хозяйственно ценным признакам.

В результате проведенных исследований мы пришли к заключению, что стабильная удельная активность и гетерогенность исследуемых ферментов у сои или их повышение в различных условиях среды свидетельствует о высоком адаптивном потенциале сортов (за исключением пероксидазы, высокая активность которой отражается на вкусовых качествах семян).

Нами в течение всех проведенных исследований установлена важная закономерность для ферментов антиоксидантного комплекса: увеличение каталазной активности непременно влечет за собой снижение пероксидазной активности семян сои. Поэтому селекционерам при отборе сортов сои для выращивания необходимо обращать внимание на сорта сои, в семенах которых установлена высокая каталазная активность и низкая пероксидазная.

Впервые выявлено, что изменение состава электрофоретических спектров ферментов в семенах сои в зависимости от погодных условий выращивания является показателем степени стрессорного воздействия, характеризующего высокую адаптивность сои к условиям выращивания. Изменение количественного состава форм ферментов свидетельствует о качественной стратегии биохимической адаптации растений, степень которой зависит от стрессора.

Внедрение современных биохимических методов исследования для изучения генома сои позволяет быстро анализировать и отбирать селекционный материал, более устойчивый к неблагоприятным условиям.

Таким образом, в диссертации раскрываются важнейшие пути решения задач, имеющих существенное значение для экологии растительного организма и факториальной экологии: изучены биохимические особенности адаптаций сои в различных условиях выращивания.

Библиография Диссертация по биологии, доктора биологических наук, Иваченко, Любовь Егоровна, Москва

1. Айала, Ф. Роль регуляторных генов в адаптивной эволюции / Ф. Айала, Д. Макдональд // Вопросы общей генетики. - М.: Наука, 1981. - С. 92-106.

2. Ала, А. Я. Отбор по крупности семян у сои / А. Я. Ала // Генетика количественных признаков сои. Новосибирск, 1976. - № 5. - С. 25-30.

3. Ала, А. Я. Изучение и использование генофонда культурной и дикой сои в селекции / А. Я. Ала // Автореф. .д.с-х.н. п. Тимирязевский, 2002. - 49 с.

4. Ала, А. Я. Повышение адаптивного потенциала селекции сои / А. Я. Ала // Пути повышения продуктивности полевых культур на Дальнем Востоке: сб. науч. тр. Благовещенск: ВНИИ сои, 2004. - Ч. 1. - С. 88-93.

5. Ала, А. Я. Соя: генетические методы селекции. G. max (L). Merr. х G. soja / А. Я. Ала, В. А. Тильба. Благовещенск: ГЖИ Зея, 2005. - 128 с.

6. Ала, А. Я. Характеристика генофонда дикой и культурной сои рода Glycine willd / А. Я. Ала и др.. // Состояние и перспективы научного обеспечения АПК Дальнего Востока: сб. науч. тр. Благовещенск: ВНИИ сои, 2009.-С. 65-71.

7. Алтухов, Ю. П. Наследование биохимического разнообразия в процессах эволюционного и индивидуального развития / Ю. П. Алтухов, Л. И. Корочкин, Ю. Г. Рычков // Генетика. 1996. - Т. 32. - № 11. - С. 1450-1473.

8. Алтухов, Ю. П. Генетические процессы в популяциях / Ю. П. Алтухов. -М.: ИКЦ Академкнига, 2003. 431 с.

9. Ю.Андреева, В. А. Фермент пероксидаза: участие в защитном механизме растений / В. А. Андреева. М.: Наука, 1988. - 302 с.

10. Баранов, В. Ф. Добрая культура. Научно-популярный очерк о сое / В. Ф. Баранов. Краснодар: Кн. изд-во, 2002. - 79 с.

11. Бегун, С.А. Способы приема изучения и отбора эффективности клубеньковых бактерий сои. Методы аналитической селекции / С.А. Бегун // под общим руководством академика РАСХН Тильба В.А. Благовещенск: Изд-во «Зея», 2005. - 70 с.

12. Бияшев, Р. М. Полиморфизм изоферментов ячменя и возможность его использования в селекционно-генетических исследованиях / Р. М. Бияшев // Автореф .к.б.н.-М., 1985.-22 с.

13. Блехман, Г. И. Причины изменения и особенности проявления рибонуклеазной активности при обезвоживании растений / Г. И. Блехман // Физиология растений. 1979. - Т. 26. - № 5. - С. 932-942.

14. Большаков, В. А. Микроэлементы и тяжелые металлы в почвах / В. А. Большаков // Почвоведение. 2002. - №7. - С. 844-849.

15. Бородин, Е. А. Продукты из сои и здоровье человека / Е. А. Бородин // Перспективы производства и переработки сои в Амурской области. -Благовещенск: Хабар, кн. изд-во, 1998. С. 19-28.

16. Васина, А. А. Приемы возделывания сои Соер 4 в условиях лесостепи Среднего Поволжья. / А. А. Васина // Автореф.к.с.-х.н. п. Усть-Кинельский, 2008. - 23 с.

17. Васякин, Н. И Перспективы возделывания сои в Сибири / Н. И. Васякин., Г. П. Гамзиков // Развитие инновационной деятельности в АПК: Поматериалам Международной научно-практической конференции, Москва, 1112 нояб., 2002. М., 2003. - С. 303-306.

18. Верхотуров, В. В. Взаимное влияние пероксидазы и низкомолекулярных антиоксидантов при прорастании семян пшеницы / В. В. Верхотуров // Автореф. дис.-.к. б. н. □ Иркутск: Сиб. Ин-т физиологии и биохимии растений, 1999. 23 с.

19. Верхотурова, Г. С. Вопросы взаимосвязи фотосинтеза и дыхания / Г. С. Верхотурова, Л. И. Астафурова, Л. И. Кудинова; под ред. В. Л. Вознесенского. Томск: Изд-во Томского ун-та, 1988. - 144 с.

20. Вишнякова, М. А. Генетические ресурсы сои и люпина □ неисчерпаемый источник высокомасличных форм для селекции / М. А. Вишнякова // Материалы 5-й междунар. конф. «Масложировая индустрия □ 2005». СПб., 2005.-С. 60-62.

21. Воробьёва, Р. П. Использование ОСВ / Р. П. Воробьёва // Агрохимический вестник. 2000. - № 6. - С. 23-25.

22. Гамбарова, Н. Г. Сопоставление особенностей действия высокой температуры и экзогенной перекиси водорода на активность антиоксидантной системы хлоропластов пшеницы / Н. Г. Гамбарова // Вестник МГОУ. Серия «Естественные науки». 2011. - № 2. - С. 28-33.

23. Гао, К. Специфичная роль А1ЕХРА1 при росте и адаптации растений АгаЫс1ор818 к стрессу / К. Гао, К. Лю, И. Т. Лю // Физиология растений. -2010. Т. 57. - № 2. - С. 254-259.

24. Гарбуз, Д.Г. Исследование механизмов термоустойчивости: эволюция генетических локусов и мутагенез / Д.Г. Гарбуз и др. // Динамикагенофондов: материалы отчетной конференции памяти Ю.П. Алтухова. М., 2007.-С. 118-121.

25. Гигиенические требования к использованию сточных вод и их осадков для орошения и удобрения. М.: □ Информационно-издательский центр Минздрава России. 1997. - 54 с.

26. Глазко, В. И. Генетика изоферментов животных и растений / В. И. Глазко, И. А. Созинов; под ред. А. А. Созинова. Киев: Изд-во «Урожай», 1993. -528 с.

27. Глазко, В. И. Генетически детерминированный полиморфизм ферментов у некоторых сортов сои (Glycine max) и дикой сои {Glycine soja) / В. И. Глазко // Цитология и генетика. 2000. - Т. 34. - № 2. - С. 77-83.

28. Голубев, В. В. Пути воспроизводства плодородия почв в Амурской области: учебн. пособие БСХИ / В. В. Голубев. Благовещенск, 1990. - 64 с.

29. Делаев, У. А. Испытание сортов сои северного и южного экотипов в условиях Чеченской Республики / У. А. Делаев и др. // Вестн. ЧТУ. 2007. -№ 1.-С. 114-118.

30. Деребизова, О. Ю. Амилазы листьев образцов сои с различной реакцией на длину дня / О. Ю. Деребизова // Методы интенсификации селекционного процесса: сб. статей. Одесса: кн. изд-во, 1990. - С. 5-6.

31. Джамеев, В. Ю. Содержание крахмала в семядолях прорастающей сои в условиях холодового стресса / В. Ю. Джамеев, В. В. Жмурко // Физиология и биохимия растений. 1997. - Т. 29. - № 5. - С. 370-376.

32. Дозоров, А. В. Соя в условиях Левобережья Ульяновской области / А. В. Дозоров. // Зерновое хозяйство. 2002. - № 3. - С. 26-27.

33. Домаш, В. И. Протеолитические ферменты и ингибиторы трипсина высших растений в условиях стресса / В. И. Домаш и др. // Russian Journal of Bioorganic Chemistry. 2008. - Т. 34. - № 3. - С. 353-357.

34. Доспехов, Б. А. Методика полевого опыта / Б. А Доспехов. М.: Колос, 1972.-306 с.

35. Егорова, Т. А. Полиморфные ферменты тутового шелкопряда и пути их использования в селекции / Т. А. Егорова, У. Н. Насириллаев. Ташкент: ГФНТИ, 1993.- 119 с.

36. Епифанцев, А. Т. Получение и свойства изоформ изоцитратлиазы из семядолей Glycine (L.) max / А. Т. Епифанцев, и др. // Прикладная биохимия и микробиология. -2010. -т. 46. — № 1. С. 103-109.

37. Ережепов, А. Изучение активности и изоферментного состава пероксидазы, малат- и глутаматдегидрогеназ в процессе развития пшеницы / А. Ережепов // Автореф. дис. . к. б. н. Алма-Ата, 1984. - 23 с.

38. Ермак, Е. В. Изменение изоферментных спектров оксидоредуктаз сеянцев под влиянием хрома / Е. В. Ермак, С. Ф. Негруцкий // Лесной журнал. 1987. №6.-С. 33-37.

39. Ефимова, Г.П. Адаптивные особенности урожайных, посевных и технологических качеств сортов сои в экологических условиях Приамурья / Г. П. Ефимова // Автореф. . к.с.-х.н. Хабаровск, 1999. - 22 с.

40. Иваченко, Л.Е. Влияние погодных условий выращивания на морфологические показатели и биохимический состав дикорастущей сои / Л.Е. Иваченко и др. // Вестник ДВО РАН. 2011. - № 4. - С. 62-72.

41. Иваченко, Л.Е. Нужны ли нам генетически модифицированные растения? / Л.Е. Иваченко и др.. □ Благовещенск: Изд-во БГПУ, 2008. 129 с.261

42. Иваченко, Л. Е. Ферменты сои: монография / Л. Е. Иваченко // Благовещенск: Изд-во БГПУ, 2010. 214 с.

43. Илличевский, Н. Н. Аллели а-амилазакодирующих генов у различающихся по качеству зерна отечественных сортов мягкой пшеницы / Н. Н. Илличевский и др. // Генетика. 1992. - Т. 28. - № 11. - С. 97-109.

44. Илличевский, Н. Н. Анализ родословных сортов мягкой пшеницы на основе изучения полиморфизма а-амилазы / Н. Н. Илличевский и др. // Генетика. 1995. - Т. 31. -№ 12. - С. 1650-1654.

45. Исайкин, И. И. Оптимизация структуры посевов сои на юге Нечерноземья / И. И. Исайкин // Вестн. Рос. акад. с.-х. наук. 1998. - № 4. - С. 43-44.

46. Календарь, Р. Н. Типы молекулярно-генетических маркеров и их применение / Р. Н. Календарь, В. И. Глазко. // Физиология и биохимия культурных растений, 2002. Т. 34. - № 4. - С. 279-296.

47. Кашмилов, М. М. К вопросу о генеральной концепции охраны вод / М. М. Кашмилов // Проблемы водной токсикологии. Петрозаводск, 1975. - С. 1314.

48. Кислюк, И. М. Тепловой шок увеличивает терморезистентность фотосинтетического транспорта электронов, количество мембран и липидов в хлоропластах листьев пшеницы / И. М. Кислюк и др. // Физиология растений.-2007.-Т. 54.-№4.-С. 517-525.

49. Кобозева, Т. П. Возделывание сои в Нечерноземной зоне России / Т. П. Кобозева и др. // Главный агроном. 2008. - № 5. - С. 17-19.

50. Кобозева, Т. П. Создание сои северного экотипа и интродукция ее в Нечерноземную зону России / Т. П. Кобозева. М.: ФГОУ ВПО МГАУ, 2007. - 100 с.

51. Ковалев, Н. Н. Холинэстераза биохимические механизмы адаптации гидробионтов / Н. Н. Ковалев // Дис. . д. б. н. - Владивосток, 2003. - 280 с.

52. Козлов, Н. Н. Перспективы использования молекулярных маркеров в селекции кормовых культур / Н. Н. Козлов и др. // Сельскохозяйственная биология. 1997. - № 3. - С. 68-74.

53. Козуб, Н. А. Сопряженность аллельных состояний глиадин- и глютенинкодирующих локусов с предзиготическими процессами у озимой пшеницы / Н. А. Козуб, И. А. Созинов // Цитология и генетика. 1993. - Т. 27.-№ 5.-С. 35.

54. Колесникова, Л. Г. Белковые спектры семян сои различного происхождения / Л. Г. Колесникова и др. // Резервы повышения эффективности соеводства. Новосибирск, 1988. - С. 41-48.

55. Комиссарова, Ю. В. Гетерогенность и полиморфизм ингибиторов протеиназ сои и гороха / Ю. В. Комисарова // Автореф. дис. . к.б.н. -СПб.: ВИР, 1998. 21 с.

56. Конарев, В. Г. Белки растений как генетические маркеры / В. Г. Конарев -М.: Колос, 1983.-320 с.

57. Конарев, В. JI. Белковые маркеры в сортовой идентификации и регистрации генетических ресурсов культурных растений / В. JI. Конарев. □ Л.: Наука, 1987.- 182 с.

58. Конарев, В. Г. Молекулярно-биологические подходы к решению актуальных проблем прикладной ботаники, генетики и селекции / В. Г. Конарев.//Вестник с.-х наук. □ 1991. □ № 12. □ С. 52-58.

59. Конарев, В. Г. Морфогенез и молекулярно-биологический анализ растений / В. Г. Конарев. СПб.: ВИР, 2001. - 417 с.

60. Коничев, А. С. Физико-химическая и функциональная характеристика множественных форм ферментов насекомых / А. С. Коничев // Автореф.д.б.н., 1991.-с. 45.

61. Коршиков, И. И. Популяционно-генетическая изменчивость сосны обыкновенной в основных лесорастительных районах Украины / И. И. Коршиков и др. // Генетика. 2005. - Т. 41. - № 2. - С. 216-228.

62. Косицын, А. Б. Растения в экстремальных условиях минерального питания / А. Б. Косицын, Н. В. Алексеева-Панова. Л., 1983. - 176 с.

63. Кочегура, А. В. Вопросы селекции и семеноводства сои на Северном Кавказе / А. В. Кочегура // Селекция и семеноводство сельскозозяйственных культур в России в рыночных условиях. М., 2001. - С. 174-177.

64. Кочетов, Г. А. Практическое руководство по энзимологии /Г. А. Кочетов; под общ. ред. С. Е. Северина М.: Высшая школа, 1980. - 272 с.

65. Красильников, В. Н. Перспективы производства белковых нутрицевтиков /В. Н. Красильников, И. П. Гаврилюк // Растительный белок: новые перспективы. М., 2000. - С. 24-39.

66. Кретович, В. Л. Введение в энзимологию / В. Л. Кретович. -М.: Наука, 1986.-337 с.

67. Лаврентьева, С. И. Влияние условий среды на активность рибонуклеаз сои /С. И. Лаврентьева//Автореф. . к. б. н. □ М., 2011. □ 18 с.

68. Лапина, Г. П. Молекулярные механизмы изменчивости пероксидазы льна в раннем онтогенезе и их регуляция / Г. П. Лапина. Тверь: Твер. гос. ун-т, 1999.-232 с.

69. Левитес, Е. В. Генетика изоферментов растений / Е. В. Левитес. -Новосибирск: Наука, 1986. 145 с.

70. Лукьянова, О. Н. Молекулярные биомаркеры: монография / О. Н. Лукьянова. Владивосток: Изд-во ДВГАЭУ, 2001. - 196 с.

71. Малый практикум по физиологии растений /под ред. А. Т.Макроносова. М.: Изд-во МГУ, 1994.- 184 с.

72. Методика количественного химического анализа проб почв на содержание цинка, кадмия, свинца и меди методом инверсионной вольтамперометрии.

73. Изд-во Госстандарт России Томский центр стандартизации, метрологии и сертификации ООО «НЛП Теханалит» Томск. - 31 с.

74. Методы биохимического исследования растений / под ред. А. И. Ермакова. □ JI.: Агропромиздат, 1987. □ 430 с.

75. Мирсоянов, Р. В. Особенности роста и формирования продуктивности сортов сои пищевого направления в Центральной зоне Краснодарского края / Р. В. Мирсоянов // Автореф.к. с.-х. наук. Краснодар, 2003. - 25 с.

76. Мордвинцев, М. П. Селекция сои для условий Поволжья / М. П. Мордвинцев // Дисс. д.с.-х.н. Пенза, 2008. - 298 с.

77. Мурзаева, С. В. Действие тяжелых металлов на проростки пшеницы; активирование антиоксидантных ферментов / С. В. Мурзаева // Прикладная биохимия и микробиология. 2004. т. 40. с. 114-119.

78. Неделько, Е. Я. Характеристика запасных веществ (белка, масла) семян сои сортов дальневосточной селекции / Е. Я. Неделько // Биология и возделывание сои. Владивосток, 1971. - С. 83-89.

79. Некрасов, Э. В. Фосфолипаза растений. Распространение, возможная физиологическая роль / Э. В. Некрасов // Дис. . к. б. н. Благовещенск, 2000. - 136 с.

80. Недолужко, А. Основные российские регионы производители сои / А. Недолужко // Электронный ресурс. - Режим доступа: http://www.soyworld.ru -9.08.2011.

81. Нецветаев, В. П. Теоретические основы использования белкового полиморфизма для оптимизации селекционного процесса / В. П. Нецветаев // Автореф. . д. б. н. СПб.: ВИР, 2000. - 49 с.

82. Нечаев, А. П. Технологии пищевых производств / А. П. Нечаев, И. С. Шуб, О. М. Аношина и др. // М.: КолосС, 2007. 768 с.

83. Низкий, С. Е. Биохимические исследования растительной продукции методом ИК-сканирования / С. Е. Низкий, В.А. Серебрякова // Проблемы возделывания сои на Дальнем Востоке России: сб. науч. тр. Дальнауч. -метод, центр. Благовещенск, 1999. - 78-84 с.

84. Онищук, В. С. Проблемы почвоведения Приамурья / В. С. Онищук, Ю. С. Чернаков. Благовещенск: БГПИ, 1991. - 86 с.

85. Остерман, JI. А. Методы исследования белков и нуклеиновых кислот -электрофорез и центрифугирование / JI. А. Остерман. М.: Наука, 1981. -323 с.

86. Панасенко, О. О. Структура и свойства малых белков теплового шока / О. О. Панасенко, М. В. Ким, Н. Б. Гусев // Успехи биологической химии. -2003.-Т. 43.-№ 1. С.59-98.

87. Пекеньо, X. П. Производство и переработка соевых бобов / X. П. Пекеньо, М. Ш. Бегеулов // Аграрная наука. 2002. - № 2. - С. 15-16.

88. Перкинс, Э. Г. Состав и физические характеристики соевых семян и соевых продуктов / Э. Г. Перкинс // Руководство по переработке и использованию сои / под ред. В. В. Ключкина и М. JI. Доморощенковой. -М.: Колос, 1998.-С. 40-45.

89. Пивоваров, В. Ф. Селекция и семеноводство овощных культур / В. Ф. Пивоваров. Пенза: Изд-во Пензенская правда, 1999. - 292 с.

90. Питебская, В. С. Влияние биологических особенностей сорта и условий выращивания сои на биохимический состав семян / В. С. Питебская и др. // Известия вузов. Пищевая технология. 2000. - № 4.-С. 14-18.

91. Питебская, В. С. Соя: качество, использование, производство / В. С. Питебская и др.. М.: Аграрная наука, 2001. - 64 с.

92. Плешков, Б. П. Изоферменты растений / Б. П. Плешков. М.: Высш. шк., 1975.-76 с.

93. Плешков, Б. П. Практикум по биохимии растений / Б. П. Плешков. -М.: Колос, 1985.- 175 с.

94. Плохинский, H.A. Биометрия / H.A. Плохинский. Новосибирск: СОАН СССР, 1961.-364 с.

95. Посыпанов, Г. С. Создание сортов сои северного экотипа / Г. С. Посыпанов и др. // Молекулярно-генетические маркеры растений: Тез. докл. международной конф. 11-15 ноября 1996 г. Ялта. Киев: Аграр. наука, 1996.-С. 52-53.

96. Посыпанов, Г.М. Соя в Подмосковье. Сорта северного экотипа для Центрального Нечерноземья и технология их возделывания / Г.М. Посыпанов // М., 2007. 199 с.

97. Проскурина, И. К. Характеристика комплекса нейтральных рибонуклеаз яиц некоторых насекомых / И. К. Проскурина // Дисс. к.б.н. -М., 1985.- 153 с.

98. Радюк, М.С. Влияние низкой положительной температуры на содержание низкомолекулярных антиоксидантов и активность антиоксидантных ферментов в зеленых листьях ячменя / М.С. Радюк и др. // Физиология растений. 2009. - Т. 56. - № 2. - С. 193-199.

99. Райдер, К. Изоферменты / К. Райдер, К. Тейлор. М.: Мир, 1983.- 107 с.

100. Рамазанова, С. А. Идентификация сортов сои с использованием молекулярно-генетических методов / С. А. Рамазанова // Автореф.к.б.н. -Краснодар, 2008. 26 с.

101. Рифай, Г. А. Симбиотическая и фотосинтетическая деятельность сортов сои северного экотипа и обоснование границ их районирования: автореф. дис. к.с.-х.н. / Г. А. Рифай. М., 2001. - 15 с.

102. Рог, JI. Е. Выделение, очистка и свойства двух форм сорбитолдегидрогеназ гемолимфы тутового шелкопряда / JI. Е. Рог, А. С. Коничев, Ю. Б. Филиппович // Биохимия. 1986. - Т. 51. - № 6. - С.

103. Рог, JI. Е. Активность НАДФ-зависимой СДГ и ее множественные формы в онтогенезе тутового шелкопряда. / JI. Е. Рог, А. С. Коничев, Ю. Б. Филиппович // Онтогенез. 1987. - Т. 18. - № 1. - С.

104. Романова, Е. В. Полиморфизм гордеина и изоферментов и их селекционная значимость у ярового ячменя / Е. В. Романова // Автореф. . к. с.-х. н.-М., 1992.-23 с.

105. Романова, Е. В. О биохимическом полиморфизме белков сельскохозяйственных растений / Е. В. Романова, О. Л. Мартынов, А. Ф. Туманян // Вестник РАСХН. 2003. - № 6. - С. 39-40.

106. Рязанцева, Т. М. Сорта сои Дальнего Востока / Т. М. Рязанцева, Т. А. Малыш. Благовещенск: Хабаровское кн. изд-во, 1974. - 77 с.

107. Сеитова, А. М. Оценка генетического разнообразия дикорастущей сои (Glycine soja Siebold et Zucc.) в Дальневосточном регионе России / А. М. Сеитова и др. // Генетика. 2004. - Т. 40. - № 2. - С. 224-231.

108. Селихова, О. А. Исходный материал для адаптивной селекции сои / О. А. Селихова, П. В. Тихончук. Благовещенск: Изд-во ДальГАУ, 2003. - 45 с.

109. Селихова, О. А. Генетические и экологические особенности биохимического состава семян исходного материала для селекции сои / О. А.

110. Селихова // Дис.к. с.-х. н. Благовещенск: Изд-во ДальГАУ, 2003. - 171с.

111. Селихова, О. А. Наследование и изменчивость энзиматической активности в семенах F2 G.MAX х G.SOJA / О. А. Селихова, П. В. Тихончук, JI. Е. Иваченко // Доклады Российской академии сельскохозяйственных наук. 2003. - № 3. - С. 3-4 .

112. Семенова, Е. А. Оценка экологической приспособленности Glycine max (1.) merr. и Glycine soja по энзиматической активности в онтогенезе / Е. А. Семенова // Дисс. .к.б.н. Благовещенск, 2006. - 136 с.

113. Семенова, Е. А. Биохимическая адаптация Glicinemax (L.) Merr. и Glicinesoja: монография / Е. А. Семенова, П. В. Тихончук // Благовещенск: ДальГАУ, 2006. 120 с.

114. Синеговская, В. Т. Посевы сои в Приамурье как фотосинтезирующие системы / В. Т. Синеговская. Благовещенск: ПКИ Зея, 2005. - 120 с.

115. Сичкарь, В. И. Соя. Основные направления и результаты научно-исследовательской работы (по материалам III международной конференции) / В. К. Сичкарь, Л. К. Малыш // С.-х. биология. 1985. - № 8. - С. 116-121.

116. Скворцов, Б. В. Дикая и культурная соя Восточной Азии / Б. В. Скворцов. Харбин: Об-во изучения маньчжурского края, 1927. - 25 с.

117. Скоробогатая, Н. Успешное внедрение сои и зерновых в едином севообороте в Российской Федерации / Н. Скоробогатая // Электронный ресурс. Режим доступа: http://www.soyanews.ru - 30.07.2011г.

118. Созинов, А. А. Полиморфизм белков и его значение в генетике и селекции / А. А. Созинов. М.: Наука, 1985. - 272 с.

119. Соя (генетика, селекция, семеноводство) / А. К. Лещенко и др.; под ред. А. К. Лещенко. Киев: Наукова думка, 1987. - 256 с.

120. Стороженко В. О. Ключевые антиоксидантные ферменты в листьях высших растений при действии стрессовых факторов // Физиология и биохимия культурных растений. 2004. Т.36, № 1. - С. 36 - 42.

121. Темираев, Р. Б. Технология повышения пищевых качеств соевых продуктов / Р. Б. Темираев, А. А. Столбовская, В. А. Чвырева // 3 Международная конференция «Биологическое разнообразие Кавказа»: тезисы докладов. Нальчик, 2001. - С. 158-159.

122. Типисева, И. А. Протеолитические ферменты семян сои / И. А. Типисева // Автореф. к.б.н. М., 1984. - 21 с.

123. Тихончук, П. В. Эколого-генетические основы повышения адаптивного потенциала сои / П. В. Тихончук // Диссер.д.б.н. Благовещенск, 2004. -326 с.

124. Тихончук, П. В. Экологические основы мобилизации генетических ресурсов сои: монография / П. В. Тихончук. Благовещенск: Изд-во ДальГАУ, 2004.- 177 с.

125. Толмачев, М.В. Влияние технологических приемов возделывания на фотосинтетическую деятельность и продуктивность сортов сои / М.В. Толмачев, В.Т. Синеговская // Вестник Алтайского государственного аграрного университета. 2009. - Т. 62. - № 12. - С. 5-8

126. Туманян, А. Ф. Фенотипическая изменчивость количественных признаков яровой пшеницы / А. Ф. Туманян, Е. В. Романова. // Земледелие, 2003. □ №5-С. 42-43.

127. Устюжанина, А. П. Технологии высокобелковой сои / А. П. Устюжанина // Электронный ресурс. Режим доступа: http://rossoya.n4.biz -30.07.2011г.

128. Фадеев, А. А. Элементы агротехники возделывания сои в условиях Чувашской республики / А. А. Фадеев, JI. А. Воробьева // Аграрная наука Евро-Севера-Востока. 2000. - № 2. - С. 44-45.

129. Филиппович, Ю. Б. Множественные формы ферментов насекомых и проблемы сельскохозяйственной энтомологии / Ю. Б. Филиппович, А. С. Коничев. -М.: Наука, 1987. 168 с.

130. Флеров, Б. А. Биотестирование, терминология, задачи, перспективы / Б. А. Флеров. // Теоретические вопросы биотестирования. □ Волгоград, 1983. -С. 13-20.

131. Хаштыров, И. Б. Формирование продуктивности и качество семян новых сортов сои пищевого направления в зависимости от условий выращивания на черноземе выщелоченном Западного Предкавказья / И. Б. Хаштыров // Дисс. .к.с.-х.н. Краснодар, 2009. - 113 с.

132. Хегани, А. Е. Або. Сррта сои для Московской области / А. Е. Або Хегани и др. // Интродукция нетрадиционных и редких растений: Материалы 5-ой Международной научно-практической конференции пос. Персиановский: ДонГАУ, 2004. - Т.1.- С. 10-12.

133. Хедрик, Ф. Генетика популяций / Ф. Хедрик. М.: Техносфера, 2003. -592 с.

134. Химия и биохимия бобовых растений / под ред. М. Н. Запрометова. -М.: Агропромиздат, 1986. 336 с.

135. Хочачко, П. Биохимическая адаптация / П. Хочачко, Дж. Сомеро. М.: Мир, 1988.-568 с.

136. Христофорова, Н. К. Биоиндикация и мониторинг загрязнения морских вод тяжелыми металлами / Н. К. Христофорова. □ М.: Наука, 1989. 192 с.

137. Цветков, И. Л. Кислая фосфатаза гидробионтов как фермент индикатор биохимической адаптации к воздействиям токсических веществ / И. JI. Цветков, и др.. // Известия А. Н. (серия биология). 1997. - № 5. - С. 539545.

138. Цветков, И. JI. Биохимические параметры стресс-редуцирующей реакции гидробионтов при интоксикации / И. Л. Цветков // Автореф.д.б.н. -М., 2009.-46 с.

139. Чернядьев, И. И. Влияние цитокининовых препаратов на пул пигментов и белков различных по устойчивости к водному стрессу сортовпшеницы / И. И. Чернядьев, О. Ф. Монахова // Прикладная биохимия и микробиология. 2003. - т. 39. - № 5. - С. 593-601

140. Чжао, Ф. Ю. Совместное действие солевого и теплового стрессов на рост корней и системы нейтрализации активных форм кислорода трансгенного риса / Ф. Ю. Чжао, Т. Лю, Ч. Ц. Сюй // Физиология растений.2010. Т. 57. - № 4. - С. 556-563.

141. Чупахина Г. Н. Система аскорбиновой кислоты растений: монография / Г. Н. Чупахина-Калининград: Изд-во Калинингр. ун-т., 1997. 120 с.

142. Шерепитко, В. В. Межсортовые различия сои по холодоустойчивости в период прорастания семян / В. В. Шерепитко // С.-х. биол. Сер. Биол. раст. -1999.-№5.-С. 66-69.

143. Шарапов, Н. И. Закономерности химизма растений / Н. И. Шарапов. -Л.: Изд-во Академии наук СССР, 1962. 131 с.

144. Шелепа A.C., Прогноз развития сельского хозяйства на Дальнем Востоке на 2015-2020 г.г. / A.C. Шелепа и др. . Хабаровск: РИЦ ХГАЭП,2011.- 124 с.

145. Шигапов, 3. X. Генетическая изменчивость и дифференциация природных популяций сосны обыкновенной (Pinus sylvestris) / 3. X. Шигапов, Р. М. Бахтиярова, Ю. А. Янабаев // Генетика. 1995. - Т. 31. - № 10. - С. 1386-1393.

146. Щегорец, О. В. Соеводство: учебное пособие / О. В. Щегорец. -Благовещенск: ООО «Издат. компания РИО», 2002. 432 с.

147. Щербаков, В. Г. Биохимия и товароведение масличного сырья: учебное пособие / В. Г. Щербаков. 5-е изд., перераб. и доп. - М.: КолосС, 2003. -360 с.

148. Юренкова, С. И. Полиморфизм видов льна по изоферментным и метаболическим маркерам / С. И. Юренкова и др. // Генетика. 2005. - Т. 41. - № 3. - С. 334-340.

149. Яснецкая, Е. Г. Продукция рибонуклеаз клеточной культуры женьшеня / Е. Г. Яснецкая // Дисс. .к.б.н. Владивосток, 2003. - 113 с.

150. Adams, С. A. Starch metabolism in developing and germinating soybean seeds is independent of (3-amylase activity / C. A. Adams, Т. H. Broman, R. W. Rinne // Ann. Bot. 1981. - V. 48. - P. 433-440.

151. Adams, C. A. Occurrence of multiple forms of a-amylase and absence of starch phosphorylase in soybean seeds / C. A. Adams, Т. H. Broman, S. W. Norby, R. W. Rinne // Ann. Bot. 1981. - V. 48. - P. 895-903.

152. Alexenko, A. Y. Subunit composition of glycinine from various samples of cultivated and wild soybean / A. Y. Alexenko et all. // Soybean Genet. Newsl. -1985.-V. 12. P. 103-111.

153. Alves, P. L. Atividade da peroxidase e da redutase do nitrato em soja cyltivada sob chuva acida simulada e em soio com acidez variavel / P. L. Alves, C. M. Oliva, J. Cambraia, A. T. Cordeiro // Cientifica. 1995. - V. 23. - № 1. - P. 95-106.

154. Amberger, L. A. Inheritance of two independent isozyme variants in soybean plants derived from tissue culture / L. A. Amberger, R. C. Shoemaker, R. G. Palmer // Theor. Appl. Genet. 1992. - V. 84. - P. 600-607.

155. Anderson, L. E. Light dark modulation of enzyme activity in plants / L. E. Anderson // Adv. Bot. Res. 1986. - V. 12. - P. 1-46.

156. Arahira, M. Molecular cloning and expression patterns of Cu/Zn-superoxide dismutases in developing soybean seeds / M. Arahira et all. // Biosc. Biotechnol. Biochem. 1998. - V. 62. - № 5. - P. 1018-1021.

157. Ashida, Y. Isolation and sequencing of a c. DNA clon encoding a 20kDa protein with inhibitory fctivity / Y. Ashida et all. // Biosc. Biotechnol. Biochem. 2000. - V. 64. - № 6. - P. 1305-1309.

158. Askew, M. F. The agricultural implication of genetically modified plants /

159. M. F. Askew // Brighton Crop Prot. Cont. "Weeds": Proc. Int. Cont. Brit. Crop Prot. Counc., Brighton, 17-20 Nov., 1997. Farnham. - 1997. - V. 1. - P. 281290.

160. Bao, X. Study on the superoxide dismutase of soybean seeds from different species in subgenus soja /X. Bao et all. // Acta bot. sinica. 1989. - V. 31. - № 7.-P. 517-522.

161. Beilinson, V. Two subtilisin-like proteases from soybean / V. Beilinson et all. // Physiol. Plantarum. 2002. - V. 115. - P. 585-597.

162. Bernard, R. L. Registration of L 81-4590, L 81-4871, and L 83-4387 soybean germplasm lin lacking the Kunutz trypcin ingibitor / R. L. Bernard, T. Hymowitz // Crop. Sc. 1986. - V. 26. - № 3. - P. 650-651.

163. Bidlack, J. E. NADH oxidation in roots of three determinant soybean cultivars / J. E. Bidlack, C. A. Stutte // Soybean Genet. Newsl. 1988. - V. 15. -P. 182-187.

164. Bidlack, J. E. Soybean cultivar selection on the basis of NADH oxidation: selection scheme, enzyme characteristics, and H^ efflux / J. E. Bidlack, C. A. Stutte // Soybean Genet. Newsl. 1989. - V. 16. - P. 127-132.

165. Biggs, D. R. Intracellular localization of prenyltransferases of isoflavonoid Phytoalexin biosynthesis in bean and soybean / D. R. Biggs, R. Welle, H. Grisebach // Planta. 1990. - V. 181. - № 2. - P. 244-248.

166. Bingchang, Z. Effect of Cercospora Sojina Hara on lipid peroxidation in soybean plants / Z. Bingchang et all. // Soybean Genet. Newsl. 1992. - V. 19. -P. 18-20.

167. Bingchang Z. Superoxide dismutase zymograms patterns and their geographical distributions of semiwild soybean (G. gracilis) in the Northeast of China / Z. Bingchang, X. Bao // Soybean Genet. Newsl. 1991. - V. 18. - P. 107110.

168. Bingchang, Z. A new electrophoretic variants of SBTi-A2 in soybean seed protein / Z. Bingchang et all. // Soybean Genet. Newsl. 1992. - V. 19. - P. 2124.

169. Bingchang, Z. Polymorphism and geographical distribution of fat content of wild soybean G. soja in China / Z. Bingchang et all. // Soybean Genet. Newsl. -1994.-V. 21.-P. 13-16.

170. Birk, Y. Amylolytic- tripsin inhibiting and urease activity in tree varieties of soybeans and in the soybean plant / Y. Birk, V. Waldman // Qual. Plant Mater. Veg. 1965. -V.12. - P. 200-209.

171. Board, J. E. Photoperiod effect before and after flowering on branch development in determinate soybean / J. E. Board, J. R. Settimi // Agron J. 1986. -V. 78.-P. 995-1001.

172. Bohnert, H. J. Plant stress adaptations making metabolism move / H. J. Bohnert // Curr. Opin. Plant Bid. - 1998. - № 1. - P. 267-274.

173. Boote, K. J. Effect of foliar tertilization on photosynthesis, leaf nutrition and yield of Soybeans / K. J. Boote et all. // Agron. J. 1978. - V. 70. - P. 787-791.

174. Bult, C. J. Inheritance and genetic linkage tests of an esterase locus in the cultivated soybean Glycine max / C. J. Bult, Y.-T. Kiang // J. Hered. 1989. - V. 80.-P. 82-85.

175. Bult, C. J. Testing for genetic linkage morphological and electrophoretic loci in the cultivated soybean / C. J. Bult et all. // Soybean Genet. Newsl. 1989. - V. 16.-P. 168-174.

176. Bult, C. J. Electrophoresis methods for soybean genetic studies / C. J. Bult et all. // Soybean Genet. Newsl. 1989. -V. 16. - P. 175-187.

177. Buzzel, R. I. Inheritance of peroxidase activiti in soybean seed coats / R. I. Buzzel, B. R. Buttery // Crop Sei. 1968. - V. 9. - P. 387-388.

178. Cämpeanu, G. Purification of urease from Glycinae hispida seeds and immobilization on polyacrylonitrile gel / G. Cämpeanu, I. Iordächescu, G. Turcu // Rev. roum. Biochim. 1996. -V. 33. - № 3/4. - P. 161-166.

179. Chauhan, K. P. S. Electrophoretic variations of proteins and enzymes in relation to seed quality / K. P. S. Chauhan, V. C. Gopinathan, C. R. Babu // Seed. Technol. 1985. - V. 13.-№3.-P. 629-641.

180. Chen, H. Molecular cloning and characterization of soybean peroxidase gene families / H. Chen, R. A.Vierting // Plant Sci. 2000. - V. 150. - № 2. - P. 129137.

181. Chen, H. Molecular cloning and characterization of soybean peroxidase gene families / H. Chen, R. A.Vierting // Plant Sci. 2000. - V. 150. - № 2. - P. 129137.

182. Cheng-Xian, L. Purification and properties of allantoinase from soybean leaves / L. Cheng-Xian, R. R. Theimer // Acta phytophysiol. sinica. 1993. - V. 19. -№ 3. - P. 229-235.

183. Chiang, Y. C. Inheritance and linkage analysis of phosphoglucose isomerase isozymes in soybeans / Y. C. Chiang, M. B. Gorman, Y. T. Kiang // Biochem. Genet. 1987. - V. 25. - P. 893-900

184. Chiang, Y. C. Genetic analysis of mannose-6-phosphate isomerase in soybeans / Y. C. Chiang, Y.-T. Kiang // Genome. 1988. - V. 30. - P. 808-811.

185. Chipman, R. B. Allocation of nitrogen and dry matter for two soybean genotypes in response to water stress during reproductive growth / R. B. Chipma, C. D. Raper // J. Plant Nutr. 2001. - V. 24. - № 6. - P. 873-888.

186. Clarke, E. J. Developments in plant breeding for improved nutritional quality of soya beans II. Anti-nutritional factors / E. J. Clarke, J. Wiseman // J. agr. Sc. 2000. - V. 134. - Pt 2. - P. 125-136.

187. Cowan, J. C. Soybean protein flavour components / J. C. Cowan, J. J. Rackis, W. J. Wolf// J. Am. Oil Chem. Soc. A review. 1973. - V. 50. - P. 426444.

188. Davies, C. S. Genetic analysis of a null-allele for lipoxygenase-2 in soybean / C. S. Davies, N. C. Nielsen // Crop Sci. 1986. - V. 26. - P. 460-463.

189. Davies, C. S. Flavor improvement of soybean preparations by genetic removal of lipoxygenase-2 / C. S. Davies, N. C. Nielsen // J. Am. Oil Chem. Soc. -1987.-V. 64.-P. 1428-1433.

190. Debroas, D. Study of enzyme activities and physicochemical parameters during hydrolysis of soy peptides by Prevotella ruminicola / D. Debroas, N. Depardon, G. Blanchart // J. Sc. Food Agr. 1998. - V. 78. - № 4. - P. 453-460.

191. Delorme, R. M. New isoenzymes systems in soybeans / R. M. Delorme, H. Skorupska // Soybean Genet. Newsl. 1992. - V. 19. - P. 169-173.

192. Deshimaru, M. Purification and characterization of proteinase inhibitors from wild soja {Glycine soja) seeds / M. Deshimaru et all. // Biosc. Biotechnol. Biochem. 2002. - V. 66.-№9.-P. 1897-1903.

193. Devis, B. J. Disc electrophoresis. II. Method and application to human serum proteinse / B. J. Devis // Ann. N.Y.Acad. Sci. 1964. - V. 121. - № 1. - P. 404-427.

194. Devries, J. D. Water relations, nitrogenase activity and root development of three grain legumes in response to soil water deficits / J. D. Devries et all. // Field Crops Res. 1989. - V. 21. - № 3/4. - P. 215-226.

195. Diaz del Castillo, L. The role of oxygen in the regulation of nitrogenase activity in drought-stressed soybean nodules / L. Diaz del Castillo, S. Hunt, D. B. Layzell // Plant Physiol. 1994. - V. 106. - № 3. - P. 949-955.

196. Dobrescu, A. Research on the activity several oxidative enzymes in soybean organs (G. m. L. Merr) / A. Dobrescu // Lucrari sti Ser. A. Agron. / Univ. Sti Agron. Med. Veter. Bucuresti, 1999. V. 42. - № 2. - P. 23-26.

197. Domagalski, J. M. Nulls for the major soybean Bowman-Birk protease inhibitor in the genus Glycine / Domagalski J. M. et all. // Crop Sc. 1992. - V. 32. - № 6. - P. 1502-1505.

198. Doong, J. Y. H. An electrophoretic Study on soybean isozymes / J.-Y. H. Doong // M. S. Thesis, Univ. of New Hampshire, Durham, 1986. P. 135-140.

199. Doong, J. Y. H. Inheritance of soybean endopeptidase / J. Y. H. Doong, Y. T. Kiang // Biochem. Genet. 1987a. - V. 25. - P. 847-853.

200. Doong, J.-Y. H. Inheritance of aconitase isozymes in soybean / J. Y. H. Doong, Y. T. Kiang // Genome. 1987. - V. 29. - № 5. - P. 713-717.

201. Doong, J.-Y. H. Cultivar identification by isozyme analysis / J. Y. H. Doong, Y. T. Kiang // Soybean Genet. Newsl. 1987. - V. 14. - P. 189-226.

202. Doong, J. Y. H. Inheritance study on a soybean fluorescent esterase / J. Y. H. Doong, Y. T. Kiang // J. Hered. 1988. - V. 79. - P. 399-400.

203. Dubbs, W. E. Specific lipoxygenase isoforms accumulate in distinct regions of soybean pod walls and mark a unique cell layer / W. E. Dubbs, H. D. Grimes // Plant Physiol. 2000. - V. 123. - № 4. - P. 1269-1279.

204. Dubbs, W. E. The mid-pericarp cell layer in soybean pod walls is a multicellular compartment enriched in specific lipoxygenase isoforms / W. E. Dubbs, H. D. Grimes // Plant Physiol. 2000. - V. 123. - № 4. - P. 1281-1288.

205. Duke, S. H. Glutamate dehydrogenase activity in roots : Distribution in a seedling and storage root, and the effects of red and far-red illuminations / S. H. Duke, W. L. Koukkari, T. K. Soulen // Physiol. Plant. 1975. - V. 34. - P. 8-13.

206. Duke, S. H. Low temperature effects on soybean (Glycine max L.J Merr.) mitochondrial respiration and several dehydrogenases during imbibition and germination / S. H. Duke, L. E. Schrader, M. G. Miller // Plant Physiol.- 1977a. -V. 60.-P. 716-722.

207. Duke, S. H. Low temperature effects on three amino acid pools and the activies of glutamine synthetase and asparagines synthetase during soybean germination / S. H. Duke et all. // Plant Physiol.- 1977b. V. 59. - P. 37.

208. Ecological types of chemical composition of G. soja and their ecogeographical distribution // Soybean Genet. Newsl. 1989. - V. 16. - P. 43-46.

209. Erickson, E. A. Inheritance of altered palmitic acid percentage in two soybean mutants / E. A. Erickson, J. R. Wilcox, J. F. Cavins // J. Hered. 1988. V. 79.-P. 465-468.

210. Egli, D. B. Water stress, photosynthesis, seed sucrose levels and seed growth in soybean / D. B. Egli, W. P. Bruening // The Journal of Agricultural Science. -2004. -№ l.-P. 142.

211. Emerson, B. N. Response of soybeans to high temperature during germination / B. N. Emerson, H. C. Minor // Crop Sci. 1979. - V. 19. - P. 553556.

212. Esbenshade, P. R. Genetic analysis of esterase polymorphism in the soybean cyst nematode, Heterodera glycines / P. R. Esbenshade, A. C. Triantaphyllow // J. Nematol. 1988. - V. 20. - P. 486-492.

213. Evans, D. E. Immunological identification of seed lipoxygenase genotypes in soybean / D. E. Evans et all. // Crop. Sc. 1994. - V. 34. - № 6. - P. 15291537.

214. Ezzat, K. S. Fatty acids of lipids from cultured soybean and rape cells / K. S. Ezzat, R. S. Pearce // Phytochemistry. 1980. - V. 19. - P. 1375-1378

215. Fauconnier, M.-L. Revue bibliographique: les lipoxygenases du soja / M.-L. Fauconnier, M. Marlier // Biotechnol. Agron. Soc. Environnem. 1997. - V. 1. -№2.-P. 125-141.

216. Fehr, W. R. Inheritance of reduced linolenic acid content in soybean genotypes A16 and A19 / W. R. Fehr et all. // Crop Sci. 1992. - V. 32. - P. 903-906.

217. Fehr, W. R. Genotype and environment influence on protein components of soybean / W. R. Fehr et all. // Crop Sc. 2003. - V. 43. - № 2. - P. 511-514.

218. Fehr, W. R. Inheritance of reduced palmitic acid content in seed oil of soybean / W. R. Fehr et all. // Crop Sci. 1991. - V. 31. - P. 88-89.

219. Fiske, C. N. The colorimettrice determination of phosphories / C. N. Fiske, G. Subbarow // J. Biol. Chem. 1925. - V. 66. - № 2. - P. 375-400

220. Fournies, J. Induction of lipoxygenase activity in cultured tobacco (Nicotiana tabacum) cell by elicitors of ethylene from Phytophthora parasitica var. nicotianae / J. Fournies, M. T. Esquerre-Tugaye // C. R. Acad. Sci. 1986. -V. 303.-P. 651-654.

221. Frankel, E. N. Flavor and oxidative stability of oil processed from null lipoxygenase-1 soybeans / E. N. Frankel, K. Warner, B. P. Klein // J. Am. Oil Chem. Soc. 1988. - V. 65.-P. 147-150.

222. Friedman, M. Nutritional and health benefits of soy proteins / M. Friedman, D. Brandon//J. Agr. Food Chem.-2001.-V. 49,- №3.-C. 1069-1085.

223. Fu, J. Physiological and biochemical changes during seed filling in relation to leaf senescence in soybean / J. Fu, B. Huand, G. Zhand // Biol. Plantarum. □ 2000. V. 43. - № 4. - P. 545-548.

224. Funk, M. O. The lipoxygenases in developing soybean seeds, their characterization and synthesis in vitro / M. O. Funk et all. // Plant Physiol. -1986.-V. 82.-№4.-P. 1139-1144.

225. Furuya, T. Biochemical characterization of selective inhibitors for a glycyrrhizin-binding lipoxygenase from soybeans / T. Furuya et all. // Biosc. Biotechnol. Biochem. 1997. -V. 61. -№ 3. - P. 495-500.

226. Garcia J. M. Oil bodies and lipid synthesis in developing soybean seeds / J. M. Garcia, L. C. Quintero, M. Mancha // Phytochemistry. 1988. - V. 27. - P. 3083-3087.

227. Gardner, H. W. Hexanal, /rara^-hexenal, and ira«s-2-nonenal inhibit soybean, Glycine max, seed germination. / H. W. Gardner, D. L. Durnbos, A. E. Desjardins // J. Agric. Food Chem. 1990. - V. 38. - P. 1316-1320.

228. Gertler, A. Purification and characterization of 3-amylase from soya beans / A. Gertler, Y. Birk // Biochem. J. 1965. - V. 95. - P. 621 - 627.

229. Gijzen, M. Seed coat traits in soybean: Genomic approaches to link genes to phenotypes: Annual Meeting of the Canadian Society of Agronomy, Guelph, 2001. / M. Gijzen [et all.] // Can. J. Plant Sci. 2002. - V. 82. - № 1. - P. 140.

230. Gizlice, Z. Genetic relationships within old US soybean cultuvar groups / Z. Gizlice et al.. // Crop Sci. 1996. - V. 36. - P. 743-752.

231. Goldraij, A. Arginase is inoperative in developing soybean embryos / A. Goldraij, J. C. Polacco // Plant Physiol. 1999. - V. 119. - № 1. - P. 297-303.

232. Goldraij, A. Arginine degradation by arginase in mitochondria of soybean seedling cotyledons / A. Goldraij, J. C. Polacco // Planta. 2000. - V. 210. - № 4. -P. 652-658.

233. Golinskaya, E. L. Some characteristics of lectins in soybean seeds / E. L. Golinskaya et all. // Soybean Genet. Newsl. 1984. - V. 11. - P. 163-168.

234. Gorgenseu, T. Ter influence of plant lectins on imune reponse against other dietaru proteins / T. Gorgenseu et all. // In Plant Proteins from European Crops. 1998.-P. 198-202.

235. Gorman, M. B. Variety specific electrophoretic variants of four soybean ensymes / M. B. Gorman, Y. T. Kiang // Crop Sci. 1977. - № 17. - P. 963-965.

236. Gorman, M. B. Preliminary electrophoretic observations from several soybean enzymes / M. B. Gorman et all. // Soybean Genet. Newsl. 1982. - V. 9.-P. 140-156

237. Gorman, M. B. Inheritance of soybean electrophoretic variants / M. B. Gorman et all. // Soybean Genet. Newsl. 1983. - V. 10. - P. 67-84.

238. Gorman, M. B. Electrophoretic classification of selected G. max plant introduction and named cultivars in the late maturity groups / M. B. Gorman, Y.-T. Kiang, Y. C. Chiang // Soybean Genet. Newsl. 1984. - V. 11. - P. 135-145. =

239. Gorman, M. B. The line PI 132.201 has the same amylase phenotype as Chestnut, and may be unstable / M. B. Gorman // Soybean Genet. Newsl. 1988. -V. 15.-P. 168-169.

240. Griffin, J. D. Superoxide dismutase (SOD) isoenzymes in soybean / J. D. Griffin, R. G. Palmer // Soybean Genet. Newsl. 1984. - V. 11. - P. 91-92.

241. Griffin, J. D. An additional beta-amylase mobility variant conditioned by the Spl locus / J. D. Griffin, R. G. Palmer // Soybean Genet. Newsl. 1986. - V.13. -P. 150-151.

242. Griffin, J. D. Inheritance and linkage studies with five isozyme loci in soybean / J. D. Griffin, R. G. Palmer // Crop Sci. 1987. - V. 27. - P. 885-892.

243. Griffin, J. D. The Loci Frl and Ep Define Soybean Linkage Group 12 / J. D. Griffin et all. //Crop Sc. 1989.-V. 29.-N l.-P. 80-81.

244. Griffin, J. D. Genetic studies with two superoxide dismutase loci in soybean / J. D. Griffin, R. G. Palmer // Crop Sci. 1989. - V. 29. - P. 968-971.

245. Griffin, J. D. Variability of thirteen isozyme loci in the USDA soybean germplasm collections / J. D. Griffin, R. G. Palmer // Crop Sci. 1995. - V. 35. -№ 3. - P. 897-904.

246. Graef, G. L. Relation of isozyme genotypes to quantitative characters in soybean / G. L. Graef, W. R. Fehr, S. R. Cianzio // Crop. Sci. 1989. - V. 29. - № 3.-P. 683-688.

247. Graef, G. L. Inheritance of three stearic acid mutants of soybean / G. L. Graef, W. R. Fehr, E. G. Hammond // Crop Sci. 1985. - V. 25. - P. 1076-1079.

248. Graef, G. L. Inheritance of fatty acid composition in a soybean mutant with low linolenic acid / G. L. Graef et all. // Crop Sci. 1988. - V. 28. - P. 55-58.

249. Guang-hua, L. The intramitochondrial localization of superoxide dismutase from hypocotyls of etiolated soybean seedlings / L. Guang-hua et all. // Illinois. Res. 1987. - V. 29. - № 2/3. - P. 243-247.

250. Guerin, V. Proteolysis and nitrogen fixation in faba-bean (Vicia-faba) nodules under water stress / V. Guerin et al. // Physiol Plant. 1991. - V. 82. - P. 1-7.

251. Guex, N. Glyoxysomal malate dehydrogenase and malate synthase from soybean cotyledons (Glycine max L.): enzyme association, antibody production and cDNA cloning / N. Guex et all. // Planta. 1995. - V. 197. - № 2. - P. 369375.

252. Haak, K. S. A starch gel electrophoretic procedure for resolving soybeanalcohol dehydrogenase band 1 / K. S. Haak et all. // Soybean Genet. Newsl. -1992. V. 19. □ № 3. - P. 92-97.

253. Hallmark, W. B. Soybean phosphorus and potassium deficiency detection as influenced by plant growth stage / W. B. Hallmark et all. // Agron J. 1988. - V. 80.-P. 586-591.

254. Hammond, E. G. Rapid test for lipoxygenase-2 and -3 / E. G. Hammond, D. N. Duvick, W. R. Fehr // Soybean Genet. Newsl. 1991. - V. 18. - P. 324-326.

255. Hammond, E. G. Rapid screening techniques for lipoxygenases in soybean seeds/E. G. Hammond et all. //Crop Sci. 1992. - V. 32.-№3.-P. 820-821.

256. Hedges, B. R. Inheritance of malate dehydrogenase nulls in soybean / B. R. Hedges, R. G. Palmer // Biochem. Genet. 1992. - V. 30. - P. 491-502.

257. Hegeman C. E. A novel phytase with sequence similarity to purple acid phosphatases is expressed in cotyledons of germinating soybean seedlings / C. E. Hegeman, E. A. Grabau // Plant Physiol. 2001. - V. 126. - № 4. - P. 1598-1608.

258. Hildebrand, D. F. Seed acid phosphatase genotypes of cultivars in the USDA soybean collection / D. F. Hildebrand, T. Hymowitz // Soybean Genet. Newsl. -1980.-V. 7.-P. 35-41.

259. Hildebrand, D. F. Inheritance of an acid phosphatase and its linkage with the Kunitz-trypsin inhibitor in seed protein of soybeans / D. F. Hildebrand, J. H. Orf, T. Hymowitz // Crop Sci. 1980. - V.20. - P. 83-85.

260. Hildebrand, D. F. Inheritance of (3-amylase nulls in soybean seed / D. F. Hildebrand, T. Hymowitz // Crop Sci. 1980. - V. 20. - P. 721-730.

261. Hildebrand, D. F. Spot test for Kunitz trypsin inhibitor activity in soybean seed /D. F. Hildebrand, T. Hymowitz// Crop Sci. 1980. - V. 20. - P. 818-819.

262. Hildebrand, D. F. Soybean Seed ^-amylase variants / D. F. Hildebrand, T. Hymowitz // Soybean Genet. Newsl. 1981. - V. 8. - P. 34 -36.

263. Hildebrand, D. F. Inheritance of lipoxygenase-1 activity in soybean seeds / D. F. Hildebrand, T. Hymowitz.// Crop Sci. 1982. - V. 22. - P. 851-853.

264. Hildebrand D. F. Lipoxygenases / D. Hildebrand // F. Physiol. Plant. 1989. -V. 76.-P. 249-253.

265. Hirata, T. Genetic structure of the Japanese soybean population / T. Hirata, J. Abe, Y. Shimamoto // Genet. Resources Crop Evolut. 1999. - V. 46. - № 5. -P. 441-453.

266. Hösel, W. Characterization of a ß-glucosidase from Glycine max which hydrolyses coniferin and syringin / W. Hösel, R. Todenhagen // Phytochemistry.1980.-V. 19.-P. 1349-1354.

267. Hurkman, W. J. Ultrastructural changes of chloroplasts in attached and detached, aging primary wheat leaves / W. J. Hurkman // Amer. J. Bot. 1979. -V. 66 - P. 64-70.

268. Jervis, L. Affinity purification and subunit structure of soybean lactate dehydrogenase / L. Jervis, E. R. Robertson, C. N. G. Schmidt // Phytochemistry.1981.-V. 20.-P. 2117-2121.

269. Jiang, C.-Z. Photosynthesis, rubisco activity and amount, and their regulation by transcription in senescing soybean leaves / C.-Z. Jiang, S. R. Rodermel, R. M. Shibles // Plant Physiol. 1993. - V. 101. - № 1. - P. 105-112.

270. Jun, L. Isozymatic differentiation in local population of Glycine soja Sieb. & Zucc. / L. Jun et all. // Acta bot. sinica. 1995. - V. 37 - № 9. - P. 669-676.

271. Jung, W. Identification and expression of isoflavone synthase, the key enzyme for biosynthesis of isoflavones in legumes / W. Jung et all. // Nature Biotechnol. 2000. - V. 18.-№2.-P. 208-212.

272. Inoye, J. Effects of temperature and daylength on the flowering of some photo-insensitive soybean varieties / J. Inoye, S. Shanmugasundaram, T. Masuyama // Jpn. J. Trop. Agrlc. 1979. - V. 22. - P. 167-171.

273. Kadlec M., Létal J. Identification of soybean cultivars through isozymes / Kadlec M. et all. // Soybean Genet. Newsl. 1994. - P. 31-35.

274. Kadlec, M. Screening of morphological and biochemical markers ofgenotypes Glycine sp. / M. Kadlec, J. Létal, B. Janousek // Zahradnictvi. 1994. -R. 21.-P. 201-211.

275. Kadlec, M. Prispëvek ke studiu genetickych zdroju sôji (Glycine max / L. / Mer.) z hlediska kvality semen / M. Kadlec et all. // Acta Univ. Agr. Silvicult. Mendelianae Brunensis. 2000. - R. 48. - № 1. - P. 55-59.

276. Kanayama, Y. Purification and characterization of nitrate reductase from nodule cytosol of soybean plants / Y. Kanayama et all. // Physiol. Plantarum. -1999.-V. 105. Iss.3. - P. 396-401.

277. Kanazawa, A. Phylogenetic relation hips of the mitochondrial genomes in the genus Glycine subgenus Soja / A. Kanazawa, A. Tozuka, S. Akimoto // Genes Genet. Syst. 1998.-V. 73.-№4.-P. 255-261.

278. Kang S. M. Characteristics of five glutamine synthetase isozymes in soybean / S. M. Kang, T. Hymowitz // Phytochemistry. 1988. - V. 27. - P. 2017-2021.

279. Karibe, H. Protein kinases from soybean and rice leaves / H. Karibe, S. Komatsu//Biosc. Biotechnol. Biochem. 1996.-V. 60.-№3.-P. 530-531.

280. Kato, Y. Expert system for suitable cropping system utilizing land resource data base / Y. Kato, T. Gomi, H. Fujimori // Misc. Publ. Tohoku Nat. Agr. Exper. Stat. Morioka, Iwate. - 1996. - № 18. - P. 1-60.

281. Keim, P. Evaluation of soybean RFLP marker diversity in adapted germplasm / P. Keim et all. // Theor. Appl. Genet. 1992. - V. 85. - P. 205-212.

282. Kenyon, W. H. Soybean Research Institute Haos Soybean Genet Newsletter / W. H. Kenyon, S. O. Dure // Soybean Genet. Newsl. 1991. - V. 18. - P. 78-81.

283. Keppler, L. D. The initiation of membrane lipid peroxidation during bacteria induced hypersensitive reaction / L. D. Keppler, A. Novasky // Physiol. Mol. Plant Pathol. -1987. - V.30. - P. 233-245.

284. Kiang, Y. T. Amilase and acid Phosphatase genotypes of Glycine max, Glycine soja and Neonotonia wightii / Y. T. Kiang, M. B. Gorman, Y. C. Chiang // Soybean Genet. Newsl. 1981. - V. 8. - P. 93-95.

285. Kiang, Y. T. Inheritance and variation of amylase in cultivated and wild soybeans and their wild relatives / Y. T. Kiang // J. Hered. 1981. - V. 72. - P.382.386.

286. Kiang, Y. T. Genetic linkage of biochemical and morphological traits in soybean / Y. T. Kiang, Y. C. Chiang // Crop Sci. 1985. - V. 25. - P. 1025-1027.

287. Kiang, Y. T. Genetic and linkage analysis of leucine aminopeptidase in wild and cultivated soybean / Y. T. Kiang, M. B. Gorman, Y. C. Chiang // Crop Sci. -1985.-V. 25.-P. 319-321.

288. Kiang, Y. T. Inheritance of NADP-active isocitrate dehydrogenase isozymes in soybeans / Y. T. Kiang, M. B. Gorman // J. Hered. 1985. - V. 76. - P. 279284.

289. Kiang, Y. T. Genetic linkage of the Adhl and W1 loci in soybeans / Y. T. Kiang, Y. C. Chiang // Genome. 1987. - V. 29. - № 4. - P. 582-583.

290. Kiang, Y. T. Genetic study of glutamate oxaloacetic transaminase in soybean / Y. T. Kiang, Y. C. Chiang, C. J. Bult // Genome. 1987. - V. 29. - № 2. -P. 370-373.

291. Kiang, Y. T. Genetic analysis of the Lap2 locus in soybeans and tests of linkage with other loci / Y. T. Kiang, Y. C. Chiang // J. Hered. 1987. - V. 78. -P. 131-132.

292. Kiang Y. T. Mapping the (3-amylase locus (Am3) on soybean linkage group 1 chromosome / Y. T. Kiang, Y. C. Chiang // J. Hered. 1988. - P. 107-109.

293. Kiang, Y. T. Genetic and linkage analysis of aconitate hydratase variants in soybean / Y. T. Kiang, C. J. Bult // Crop Sci. 1991. - V. 31. - P. 322-325.

294. Kikuchi, A. Simple and rapid carotene bleaching tests for the detection of lipoxygenase isozymes in soybean seeds / A. Kikuchi, K. Kitamura // Japan. J. Breedg.- 1987.-V. 37. -№ l.-P. 10-16.

295. Kim, S. Y. Inactivation of catalase and superoxide dismutase by singlet oxygen, derived from photoactivated / S. Y. Kim, O. J. Kwon, J. W Park // Biochimie. 2001. - V. 83. - № 5. - P. 437-444.

296. Kimura, Y. Structural Analysis of Free N-Glycans Occurring in Soybean Seedlings and Dry Seeds / Y. Kimura, E. Kitahara // Biosci. Biotechnol, Biochem. -2000. V. 64. - № 9. - P. 1847-1855.

297. Kishitani, S. Respiration rates of soybean cultivars / S. Kishitani, R. Shibles // Crop Sci. 1986. - V. 26. - P. 580-583.

298. Kitamura, K. Genetic analysis of a null-allele for lipoxygenase-3 in soybean seeds / K. Kitamura et all. // Crop Sci. 1983. - V. 23. - P. 924-927.

299. Kitamura, K. Polymorphism of glycinin in soybean seeds / K. Kitamura, Y. Toyokawa, K. Harada // Phytochemistry. 1980. - V. 19. - P. 1841-1843.

300. Kitamura, K. Spontaneous and induced mutations of seed proteins in soybean (Glycine max L. Merrill) / K. Kitamura // Biotechnology and mutation breeding. Ohmiya Naka, Ibaraki. - 1991. - P. 61-69.

301. Kloth, R. H. Re-evaluation of the inheritance of urease in soybean seed / R. H. Kloth, T. Hymowitz // Crop Sc. 1985. - V. 25. - № 2. - P. 319-321.

302. Kollipara, K. P. Genomic diversity in aneudiploid and diploid Glycine tomentella revealed by cytogenetics and biochemical methods / K. P. Kollipara, R. J. Singh, T. Hymowitz // Genome. 1993. - V. 36. - № 3. - P. 391.

303. Korczak, J. F. Linkage tests between the Ap and Wj loci / J. F. Korczak et all. // Soybean Genet. Newsl. 1980. - V. 7. - P. 49.

304. Koretsky, L. S. The influence of Fusarium oxysporum infection and low temperatures on the activity of soybean esterase and PR proteins / L. S. Koretsky / Buvisindi Icel. AGR. SCI. 2001. - V. 14. - P. 67-73.

305. Kraemer, M. E. Induction of trypsin inhibitor in soybean leves by Mexican bean beetl (Coleoptera Coccinellidae) defoliation / M. E. Kraemer et all. // J. Econ. Entomol. 1987. - V. 80.-№ l.-P. 237-241.

306. Krashnuk, M. Dehydrogenase levels in cold-tolerant and colt-sensitive alfalfa / M. Krashnuk, G. A. Jung, F. H. Witham // Agron J. 1978. - V. 70. - P. 605-613.

307. Kratsch, H.A. The ultrastructure of Chilling Stress / H.A. Kratsch, R.R. Wise // Plant Cell Environ. 2000. - V. 23. - P. 337-350.

308. Kuzma, M. M. Acclimation of soybean nodules to changes in temperature / M. M. Kuzma, D. B. Layzell // Plant Physiol. 1994. - V. 106. - № 1. - P. 263270.

309. Lark, K. G. Molecular phylogeny as genetic tool for soybean breeding / K. G. Lark et all. // Soybean Genet. Newsl. 1992. -№ 19. - P. 169-181.

310. Larsen, A. L. Electrophoretic differences in seed proteins among varieties of soybean, Glycine max L.J Merrill / A. L. Larsen // Crop Sci. 1967. - V. 7. - P. 311-313.

311. Layfer, S. The amylolytic and proteolytic activity of soybean seed / S. Layfer et all. // Cereal Chemistry. 1944. - V. 21. - P. 267-274.

312. Leggett, J. E. Growth and nutrient uptake by soybean plants in nutrient solutions of graded concentrations / J. E. Leggett, M. H. Frere // Plant Physiol. 1971. - V. 48. - P. 457-460.

313. Lee, P.C. Heat shock stress and cell oxidation / P.C. Lee, B.R. Bocher, B.N. Ames // Proc. Nati. Acad. Sci. USA. 1983. - V. 80. - P. 7496-7499.

314. Leidi, E. O. A role for manganese in the regulation of soybean nitrate reductase activity / E. O. Leidi, M. Gomez // J. Plant Physiol. 1985. - V. 118.-№4.-P. 335-342.

315. Li, Wei-Hua. C4 Pathway Enzymes in Soybean Leaves / Wei-Hua Li et all. // Acta bot. Sinika. 2001. - V. 43. - № 8. - P. 805-808.

316. Li, W.D. Effect of Water Deficit on Biomass Production and Accumulation of Secondary Metabolites in Roots of Glycyrrhiza uralensis / W.D. Li et al. // Физиология растений. 2011. - V. 58. - № 3. - P. 476-484.

317. Lin, W. Responses of corn root protoplasts to exogenous reduced nicotinamide adenine dinucleotide: oxygen consumption, ion uptake, and membrane potential / W. Lin // Proc. Natl. Acad. Sci. 1982. - V. 79. - P. 3773-3776.

318. List, G. R. Effect of moisture, microwave heating, and live steam treatment on phospholipase D activity in soybeans and soy flakes / G. R. List et all. // J. Am. Oil Chem. Soc. 1990. -V. 67. - №11. -P, 867 -871.

319. Liu, X. Dongbei shida xuebao / X. Liu, et all. // J. Northeast Norm. Univ. 1996.-№4.-P. 65-68.

320. Lowell, C. A. Oligosaccharide Metabolism and Accumulation in Developing Soybean Seeds / C. A. Lowell, T. M. Kuo // Crop Sc. 1989. - V. 29. - № 2. - P. 459 - 465.

321. Lowry, O. H. Protein measurement with the Folin phenol reagent / O. H. Lowry et all.. J.Biol.Chem. - 1951.- V. 193.-№ l.-P. 265 -275.

322. Lopez, A. P. Activities of antioxidant enzymes during strawberry fruit development and ripening / A. P. Lopez, M. T. N. Gochicoa, A. R. Franco // Biologia plantarum. 2010. - V. 54. - № 2. - P. 349-352.

323. Luna, R. Genotype Bradyrhizobium japonicum strain interactions in dinitrogen fixation and agronomic traits of soybean {Glycine max L. Merr.) / R. Luna, C. Planchon I I Euphytica. 1995. - V. 86. - № 2. - P. 127-134.

324. Mahama, A. A. A modified starch gel electrophoresis procedure for resolving soybean alcohol dehydrogenase band 1 / A. A. Mahama et all. // Soybean Genet. Newsl. 1995. - V. 22. - P. 173-180.

325. Malik, S. S. Isozymic variations in black- and yellow-seeded isogenic lines of «Bragg» soybean / S. S. Malik, B. B. Singh // Soybean Genet. Newsl. 1977. -V. 4.-№41,-P. 21-23.

326. Mangham, P. I. Identification of quantitative trait loci controlling sucrose content in soybean {Glycine soja) / P. I. Mangham et all. // Mol. Breed. 2000. -V. 6. - № l.-P. 105-111.

327. Markert, C. L. Biology of isozymes / C. L. Markert // Isozymes. N.-Y.: Acad. Press., 1975. V. 1,- P. 1-9.

328. Maughan, P. J. Microsatellite and amplified sequence length polymorphisms in cultivated and wild soybean / P. J. Maughan et all. // Genome. 1995. - V. 38. -P. 715-723.

329. McGonigle, B. Homoglutathione selectivity by soybean glutathione S-transferases / B. McGonigle et all. // Pesticide Biochem. Physiol. 1998. - V. 62. -№1.-P. 15-25.

330. Miceli, F. Non-destructive limits to seed growth and leaf protease activities in nodulating and non-nodulating syobean isolines / F. Miceli, G. Zerbi, M. Scalet // J. Agron. And Crop Sci. 2000. - V. 184. - № 1. - P. 23-31.

331. Michailov, V.G. Ecological types of chemical composition of G. soja and their eco-geographical distribution / V.G. Michailov, V.F. Marjushkin, V.I. Sichkar // Soybean Genet. Newsl. 1989. - № 16. - P. 43-46.

332. Milic, V. Nodule efficiency of three soybean genotypes inoculated by different methods / V. Milic, N. Mrkovacki, M. Popovic, D. Malencic // Rostl. vyroba. 2002. - V. 48. - № 8. - P. 356-360.

333. Morita, Y. Charakterization of (3-amylase isozymes in soybean seeds by isoelectric focusing / Y. Morita, F. Yagi // Plant and Cell Physiol. 1979. - V. 20. -P. 797-802.

334. Modi, A. T. Accumulation of glyoxylate cycle enzymes in soybean seed embryo tissues during development and germination / A. T. Modi et all. // Seed Sc. Technol.- 2001. V. 29. - № 2. - P. 387-400.

335. Mrkovcki, N. Effect of N fertilizer application of growth and yield of inoculated soybean / N. Mrkovcki, J. Marinkovic, R. Acimovic // Not. bot. horti agrobot., Cluj-Napoca. 2008. - V. 36. - № 1. - P. 48-51.

336. Narvel, J. M. Agronomic and seed traits of soybean lines lacking seed lipoxygenases / J. M. Narvel, W. R. Fehr, G. A. Welke // Crop Sc. 1998. - V. 38. - № 4. - P. 926-928.

337. Narvel, J. M. Inheritance of elevated palmitate in soybean seed oil / J. M. Narvel et all. // Crop Sc. 2000. - V. 40. - № 3. - P. 635-639.

338. Norbi, S. W. Further Studies on the Electrophoretic Patterns of the Multiple Forms of Amylase in Soybean Seeds / S. W. Norbi, R. W. Rinne // Crop Sc. 1985. -V. 25.-№6.-P. 990-994.

339. Nortman, F. Application of isozymes in plant breeding. Reviews / F. Nortman, N. F. Weeden // Isozymes in plant biology. Dioscorides Press, Portland. 1992.-V. 6.-P. 11-54.

340. Ohashi, K. Growth and Carbon Utilization in Rice Plants Under Conditions of Physiologica Oy Low-Temperature and Irradiance / K. Ohashi, A. Makino, T. Mae // Aust J. Plant Physiol. 2000. - V. 27. - P. 99-107.

341. Ohta, H.A lipoxygenase pathway is activated in rice after infection with rice blast fungus Magnaporthe grísea / H. Ohta et all. // Plant Physiol. 1991. - V. 97. - P.94-98.

342. Oliver, C. Alterations in the antioxidative system of suspension-cultred soybean cells (Glycine max) induced by oxidative stress / C. Oliver et all. // Physiol.Plantarum. 1996. - V. 97. - №. 2. - P. 388-390.

343. Oliveira, D. A. Qalidate fisiológica E Producao de aldeidos em sementes de linhgens de soja com ausecia de lipoxigenases / D. A. Oliveira et all. // Rev. ceres /Univ. fed. Vicosa.- 1999.-V. 46.- №264.-P. 189-197.

344. Orf, J. H. The gene symbols Spia and Spib assigned to Larsen and Caldwell's seed protein bands A and B / J. H. Orf, T. Hymowitz // Soybean Genet. Newsl. -1976,-V. 3.-P. 27-28.

345. Orf, J. H. Inheritance of a second trypsin inhibitor variant in seed protein of soybeans / J. H. Orf, T. Hymowitz // Crop Sci. 1977. - V. 17. - P. 811-813.

346. Orf, J. H. Linkage tests between Spl and Ti proteins / J. H. Orf, T. Hymowitz // Soybean Genet. Newsl. 1977. - V. 4. - P. 26-29.

347. Orf, J. H. Six soybean seed protein electrophoretic variants / J. H. Orf, N.

348. Kaizuma, T. Hymowitz // Seed Sci. Technol. 1980. - V. 4. - P. 401-406.

349. Ortega, J. L. Oxidative turnover of soybean root glutamine synthetase. In vitro and in vivo studies / J. L. Ortega, D. Roche, C. Sengupta-Gopalan // Plant Physiol. 1999. - V. 119. - № 4. - P. 1483-1495.

350. Palmer, R. G. Current and obsolete gene symbols for isozymes and protein variants in soybean / R. G. Palmer, J. D. Griffin, B. R. Hedges // Soybean Genet. Newsl. 1985. - V. 12. - P. 15-28.

351. Palmer, R. G. Qualitative genetics and cytogenetics / R. G. Palmer, T. C. Kilen // Agronomy. 1987. - V. 16. - P. 135-209.

352. Palmer, R. G. Qualitative genetic traits / R. G. Palmer, R. C. Shoemaker // Soybean Genet. Newsl. 1996. - V. 23. - P. 25-42.

353. Panda, A. K. Salt tolerance and salinity effects on plants: a review / A. K. Panda, A. B. Das // Ecotoxicol. Environ. Saf. 2005. - V. 60. - № 3. - P. 324349.

354. Patra, M. Mercury Toxicity in Plants / M. Patra, A. Sharma // Bot Rev. -2000.-V. 66.-P. 379-422.

355. Penheiter, A. R. Soybean root nodule acid phosphatase / A. R. Penheiter, S. M. G. Duff, G. Sarath // Plant Physiol. 1997. - V. 114. - № 2. - P. 597-604.

356. Pfeiffer, T. W. Agronomic Performance of Soybean Lipoxygenase Isolines / T. W. Pfeiffer, D. F. Hildebrand, D. M. Tekrony // Grop Sci. 1992. - V. 32. -№ 2. - P. 357-362.

357. Pfeiffer, T. W. Inheritance of a lipoxygenase-1 allozyme in soybean / T. W. Pfeiffer, D. F. Hildebrand, J. H. Orf// Crop Sci. 1993. - V. 33. - P. 691-693.

358. Prischmam, J. A. Inheritance of double nulles for protein components of soybean seed / J. A. Prischmam, T. Hymowitz // Crop. Sc. 1988. - V. 28. - № 6. -P. 1010-1012.

359. Qi, Z. The role of SOD in protecting the photosynthetic apparatus of soybean leaves from midday high light stress / Z. Qi et all. // Acta agron. sinica. -1994.-V. 20,- №3.-P. 397-401.

360. Rassel, W.E. The precipitation of polyribonucleotides with magnesium salte and etanol / W.E. Rassel //J.Biol. Chem. 1963. - V. 238. - № 9. - P. 3053-3057

361. Rennie, B. D. Genetic and linkage analysis of an aconitate hydratase variant in the soybean / B. D. Rennie, W. D. Beversdorf, R. I. Buzzell // J. Hered. 1987. -V. 78.-P. 323-326

362. Rennie, B. D. Inheritance and linkage analysis of endopeptidase variants in „ soybeans / B. D. Rennie, W. D. Beversdorf, R. I. Buzzell // J. Hered. 1987. - V. 78.- P. 327.

363. Rennie, B. D. Genetic and linkage analysis of low linolenic acid levels in the soybean line PI 361088B / B. D. Rennie et all. // Crop Sci. 1988. - V. 28. - P. 655-657.

364. Research on the Activity of several oxidative enzymes in soybean Organs (Glicine max L. Merr) // Ser. a Agron Univ. Sti. Agron. Med. Veter.-Bucuresti. 1999. V. 42. - №. 2. - P. 23-26.

365. Rickauer, M. Early changes in ethylene synthesis and lipoxygenase activity during defense induction in tobacco cells / M. Rickauer et all. // Plant Physiol. Biochem. 1990. - V. 28. - P. 647-653.

366. Romagni, J. G. Measuring asparagines synthetase activity in crude plant extracts / J. G. Romagni, F. E. Dayan // J. agr. Food Chem. 2000. - V. 48. - № 5.-P. 1692-1696.

367. Romero, F. El zinc en el sistema suela-planta: revisieon / F. Romero // An edafol y agrobiol. 1986. - V. 45. - № 9-10. - P. 1355-1367.

368. Ryu, S. B. Changes in phospholipase D expression in soybeans during seed development and germination / S. B. Ryu, L. Zheng, X. Wang // J. Am. Oil Chem. 1996.-V. 73.-P. 1171-1176.

369. Rubel, A. Protein, oil and fatty acid in developing soybean seeds / A. Rubel etall.//Crop Sci. 1972,-V. 12.-P. 739-741.

370. Rubinstein, B. Redox activity at the surface of oat root cells / B. Rubinstein, A. I. Stern, R. C. Stout//Plant Physiol. 1984. -V. 76. - P. 386-391.

371. Sahota, A. S. Soybeen Seed Coat peroxidase Activity Tests for Cultivar purity Determinations / A. S. Sahota, R. W. Desormeaux // Soybean Genet. Newsletter. 1990. - V. 64. - № 2.- P. 14-17.

372. Schuller, K. A. Phosphorylation of soybean (Glycine max L.) nodule phosphoenolpyruvate carboxylase in vitro decreases sensitivity to inhibition by L-malate / K. A. Schuller, D. Werner // Plant Physiol. 1993. - V. 101. - № 4. - P. 1267.

373. Shahnejat-Bushehri, A. A. Variety-specific electrophoretic profiles of soybean cultivars / A. A. Shahnejat-Bushehri et all. // Iran. J. agr. Sc. 2000. - V. 31.-№ l.-P. 926-928.

374. Shibata, D. Primary structure of soybean lipoxygenase-1 / Shibata, D. et all. // J. Biol. Chem. 1987. - V. 262. - P. 1080-1085.

375. Shibata, D. Primary structure of soybean lipoxygenase-2 / D. Shibata et all. //J. Biol. Chem. 1987.-V. 263.-P. 6816-6821.

376. Shuang, S. Cloning and preliminary structural and functional analysis of two putative receptor-like protein kinase genes from soybean / S. Shuang et all. // J. Plant Physiol, molec. Biol. 2002. - V. 28. - № 3. - P. 241-246.

377. Shuqiu, Z. Effects of Exogenous GA3 on Unloading and Accumulation of Assimilated in Developing Soybean Seeds / Z. Shuqiu, D. Yuling, Y. Shijie // J. China Agr. Univ. 2000. - V. 5. - № 3. - P. 1-5.

378. Shuwen, Z. Inheritance of a new variant of SBTi-A2 in seed protein of soybean (Glycine max) in China / Z. Shuwen, G. Qimin, W. Hai // Soybean Genet. Newsl. 1995. - V. 22. - P. 85-88.

379. Sichkar, V. I. Protein content in protein of soybean mutants, induced by chemical mutagens and gamma rays / V. I. Sichkar, A. P. Levitsky, V. F. Marjushkin. // Soybean Genet. Newsl. 1982. -V. 9. - P. 161-162.

380. Singh, R. J. The genomic relationship between Glycine max (L.) Merr. and G. soja Sieb. and Zucc. as revealed by pachytene chromosome analysis / R. J. Singh, T. Hymowitz // Theor. Appl. Genet. 1988. - V. 76. - № 5. - P. 705-711.

381. Serraj, R.Variation in nitrate tolerance of nitrogen fixation in soybean Glicine max Bradyrhizobium Simbiosis / R. Serraj et al. // J. Plant Physiol. -1992.-V. 140.-№ l.-P. 366-371.

382. Siebeneichler, S.C. Efeitos da baixa temperature no crescimento e nos teores de acucares soluveis e de prolina em dois cultivares de feijao / S.C. Siebeneichler, et al. // Rev. ceres Univ. fed. Vicosa. 2000. - V. 47. - № 273. - P. 495-509.

383. Simoni, A. Biochemical markers for earli screening of tolerant genotypes in the system Glycine max Diaporthe phaseolorum var. caulivora / A. Simoni et all. // J. Genet. Breedg. 1995. - V. 49. - № 2. - P. 169-178.

384. Skorupska, N. T. Restriction fragment length polymorphism in soybean germplasm of the Southern USA / N. T. Skorupska et all. // Crop Sci. 1993. -V. 3.-P. 169-176.

385. Son, B. Y. Relationship of seed germination and lipoxygenase activity in soybean / B. Y. Son et all. // Korean J. Crop Sc. 2002. - V. 47. - № 2. - P. 123126.

386. Stebbins, N. E. Urease is not essential for ureide degradation in soybean / N. E. Stebbins, J. C.Polacco//Plant Physiol.- 1995.-V. 109.-№ l.-P. 169-175.

387. Su, L. C. Lectins and the soybean Phizobium symbiosis. / L. C. Su, S. G. Pueppke, H. P. Friedman // Biochim. Biophys. Acta. - 1980. - V. 629. - P. 292304

388. Sung, J. M. Lipid peroxidation and peroxide-scavenging in soybean seeds during aging / J. M. Sung. // Physiol. Plantarum. 1996. - V. 97. - P. 85-89.

389. Tadera, K. Occurrence of acide-phosphatase inhibitor in soybeans / K. Tadera et all. // Biosc. Biotechnol. Biochem. 1997. - V. 61. - 2. - P. 387-387.

390. Taira, H. Purification and activity characterization of a Kunitz trypsin inhibitor variant in wild soybean {Glycine soja) in Japan / H. Taira // Acta agron. sinica. 1998. -V.24 □ №6.-P. 665-669.

391. Taylor, D.K. Modelling Temperature Effects on Growth-Respiration Relations of Maize / D.K. Taylor et al. // Plant Cell Environ. 1998. - V. 21. - P. 1143-1151.

392. Tenhaken, R. Salicylic acid is needed in hypersensitive cell death in soybean but does not act as a catalase inhibitor / R. Tenhaken, C. Riibel // Plant Physiol. -1997.-V. 115. -№ l.-P. 291-298.

393. Thompson, L. U. Antinutrients and blood glucose / L. U. Thompson // Food Technol. 1988. - V. 42. - P. 123-132.

394. Thu, V. T. Etude de l'activité nitrogénase des nodosités de soja inoculé avec une souche â croissance rapide de Rhizobium / V. T. Thu, J.-J. Drevon, L. Salsac // Agronomie. 1986. - V. 6. - № 2. - P. 175-179.

395. Tshikawa, G. The accumulation pattern in developing seeds ant its relation to fatty acid variation in soybean / G. Tshikawa et all. // Plant Breed. 2001. - V. 20.-№ 5.-P. 417-423.

396. Tsumura, K. Selective proteolysis of the glycinin and beta-conglycinin fractions in a soy protein isolate by pepsin and papain with controlled pH and temperature / K. Tsumura et al. // J. Food Sci. 2004. - V. 69. - P. 363-367.

397. Van Aspern, K. A study of housefly esterases by means of a sensitive colorimetric method / K. Van Aspern // J. Insect. Physiol. □ 1962. □ № 8. □ P. 401406.

398. Vazquez-Tello, A. Sequence of a soybean (Glycine max L.) phosphoenolpyruvate carboxylase cDNA / A. Vazquez-Tello et all.. // Plant Physiol. 1993. - V. 103. - № 3. - P. 1025-1026.

399. Veilenmann, M. E. Evaluation of commercial, soybean cultivars (group III) in the southern part of Buenos Aries province, Argentina / M. E. Veilenmann et all.//Ann. Appl. Biol. 1998,-V. 132.-P. 64-65.

400. Wang, Y. An Isoelectric Separation of Soybean Amilase Isoform and Their Enzymic Characteristics / Y. Wang, M. Arahira // Biosi. Biotechnol. Biochim. 1999. -V.63.- № 4. - P.726-730.

401. Wang, C. Subcellular localization studies indicate that lipoxygenases 1 to 6 are not involved in lipid mobilization during soybean germination / C. Wang et all. // Plant Physiol. 1999. - V. 120. - № 1. - P. 227-235.

402. Weeden, N. F. Genetics of plant isozymes / N. F. Weeden, J. L. Wendel // In. D.E. Soltis and P.S. Soltis (eds.), Isozymes in plant biology. Dioscorides Press, Portland. 1989.-P. 46-72.

403. Weir, A. Identification of QTL for high protein and high linolenic acid in soybean / A. Weir, I. Rajcan / Annual Meeting of the Canadian Society Agronomy Guelph, 2001 // Can. J. Plant Sei. 2002. - V. 82. - № 1. - P. 143.

404. Wendel, J. L. Visualization and interpretation of plant isozymes / J. L. Wendel, N. F. Weeden // In. D.E. Soltis and P.S. Soltis (eds.), Isozymes in plant biology. Dioscorides Press, Portland. 1989. - P. 5-45.

405. Wiesner, I. Identification of soybean cultivars using dry seed characters /1. Wiesner, P. Hofirek, E. Pippalova. // Genet. Siecht. 1993. - V. 29. - P. 325-329.

406. Wittenbach, V.A. Changes in photosynthesis, ribulose biphosphate carboxylase, proleolytic activity and ultrastructure of soybean leaves during senescence / V. A. Wittenbach et all. // Crop Sei. 1980. - V. 20. - P. 225-231.

407. Wu, Z. Co-oxidation of /^-carotene catalyzed by soybean and recombinant pea lipoxygenases / Z. Wu et all. // J. agr. Food Chem. 1999. - V. 47. - № 12. -P. 4899-4906.

408. Wu, Cuo-rong. Nanjing shida xu ebao. Ziram kexue ban / Cuo-rong Wu et all. // J. Nanjing Nom. Univ. Nat. Sei. 2000. - V. 23. - № 4. - P. 88-92.

409. Xia Shu-Fand. Starch Degradation and Degradative Enzymes in Soybean Leaves / Shu-Fand Xia, Xin-Jian Yu // Acta phytophysiol. Sinica. 1989. - V. 15. - № 2. - P. 153-157.

410. Xiangxun, M. Protein and oil content seed as influenced by years and location / M. Xiangxun et all. // Soybean Genet. Newsl. 1991. - V. 18. - P. 113-116.

411. Xiangxun, M. Protein and oil content of soybean seed as influenced by years and location / M. Xiangxun, W. Shuming, L. Aiping, H. Mingxiang // Soybean Genet. Newsl. -1991.-№ 18.-P. 113-116.

412. Xiong, Fu-sheng. Relationship between leaf sucrose and start content and their degradative enzymes activities in crop plants / Fu-sheng Xiong et all. // Acta, agron. sinica. 1994. - V. 20. - № 1. - P. 52-58.

413. Xu, Zhi-ang. Genetic structure of natural populations of wild soybean (G. Soja) in Beijing region / Zhi-ang Xu, Hond-xin Wang // Acta bot. Sinica. 1985. -V. 27.-№ 6.-P. 599-604.

414. Yamagata, H. Molecular cloning and characterization of a cDNA encoding asparagines synthetase from soybean {Glycine max L.) cell cultures / Yamagata H. et all.//Biosc. Biotechnol. Biochem. 1998.-V. 62.-№ l.-P. 148-150.

415. Yazdi-Samadi, V. Components of developing soybean seeds: oil, protein, sugars, starch, organic acids and amino acids / V. Yazdi-Samadi, R. W. Rinne, R. D. Seif// Agron. J. 1977. -V. 69. - P. 481-486.

416. YE, Xiao-Li. Effekt of Sucrose Fatty Acid Ester on the Activity and Conformation of Invertase of Soybean Leaf in vitro and in vivo / Xiao-Li YE et all. // Acta phytophysiol. sinica. 2000. - V. 26. - № 5. - P. 446-447.

417. Yenofsky, R. L. Isolation and characterization of a soybean {Glycine max) lipoxygenase-3 gene / R. L. Yenofsky, M. Fine, C. Liu // Mol. Gen. Genet. 1988.-V. 211.-P. 215-222.

418. Yi-wu, C. Study on the variation of the superoxide dismutase of soybean under salt-stress condition / C. Yi-wu et all. // Agr. Biol. Tecnol. 1995. - V. 38. -№ l.-P. 367.

419. Yoon, M. S. Genotypik end Geographical Variation of 3-amylase Isozyme in soybean Land Races by Isoelectric Focusing (IEF) / Yoon, M. S. [et all. // Korean J. Sci. 2000. - V. 45. - № 2. - P. 139-142.

420. Yu, H. Re-examination of the recombination frequency between acid phosphatase and the Kunitz trypsin inhibitor loci in soybean / H. Yu, Y.-T. Kiang // Soybean Genet. Newsl. 1990. - V. 17. - P. 106-108.

421. Yu, H. Inheritance and genetic linkage studies of isozymes in soybean / H. Yu, Y.-T. Kiang // J. Hered. 1993 b. - V.84. - P. 489-492.

422. Yu, H. Genetic variation in South Korean natural populations of wild soybean (Glycine soja) / H. Yu, Y.-T. Kiang // Euphytica. 1993. - V. 68. - № 3. -P. 213-221.

423. Zalewski, K. Changes in the composition of glycerophospholipids in faba bean seeds during storage / K. Zalewski // Plant Beed. and Seed Sci. 1999. - V. 43.- №2.-P. 21-27

424. Zhang X.-Q. In vivo regulatory phosphorylation of soybean nodule phosphoenolpyruvate carboxylase / X.-Q. Zhang, B. Li., R. Chollet // Plant Physiol. 1995,-V. 108.-№4.-P. 1561-1568.

425. Zhang, F. Mineral nitrogen availability and isoflavonoid accumulation in the root systems of soybean (Glicine max (L.) Merr.) / F. Zhang, F. Mace, D. L. Smith // J. Agron. and Crop Sci. 2000. - 184. - № 3. - P. 193-204.

426. Zhang, Xiao-bing. Shanxi dexue xuebao / Xiao-bing Zhang // Ziran kexue ban. J.Shanxi Univ. Natur. Sci. Ed. 2000. - V. 23 - № 1. - P. 75-77.

427. Zheng, Yi-zhi. Ultrastructural localization of acid phosphatase activity in soybean cotyledon cells / Yi-zhi Zheng, Jing Li, Yang Gao, De-juan Tong // Acta, bot. sinica. 1996. - V. 38. - № 12. - P. 925-929.

428. Zeno, E.B. The effects of temperature on longevity and vitality of soybean seeds / E.B. Zeno // Soybean Genet. Newsletter. 1982. - V. 9. - P. 109-111

429. Zeidler, M. Electrophoretic analysis of plant isozymes / M. Zeidler // Acta. Univ. Palack olomuc. Fac. revum natur. Biol. 2000. - № 38. - P. 7-16.

430. Zeringue, H. J. Relationship between cotton leaf-derived volatiles and growth of Aspergillus flavus / H. J. Zeringue, S. P. Mc Cormick // J. Am. Oil Chem. Soc. 1989. - V. 66.-P. 581-585.

Информация о работе

Иваченко, Любовь Егоровна
доктора биологических наук
Москва, 2012
ВАК 03.02.08

Диссертация

Ферменты как маркеры адаптации сои к условиям выращивания - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему Ферменты как маркеры адаптации сои к условиям выращивания ВАК РФ 03.02.08, Экология (по отраслям)

Автореферат диссертации по теме "Ферменты как маркеры адаптации сои к условиям выращивания"

Содержание диссертации, доктора биологических наук, Иваченко, Любовь Егоровна

Введение Диссертация по биологии, на тему "Ферменты как маркеры адаптации сои к условиям выращивания"

Заключение Диссертация по теме "Экология (по отраслям)", Иваченко, Любовь Егоровна

Библиография Диссертация по биологии, доктора биологических наук, Иваченко, Любовь Егоровна, Москва

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Ферменты как маркеры адаптации сои к условиям выращивания
ВАК РФ 03.02.08, Экология (по отраслям)