Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Факторы персистенции сальмонелл при их внутриклеточном паразитировании

ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Автореферат диссертации по теме "Факторы персистенции сальмонелл при их внутриклеточном паразитировании"

ОРЕНБУРГСКИЙ ОТДЕЛ ПЕРСИСТЕНЦИИ МИКРООРГАНИЗМОВ

ИЭГМ УрО РАН

■ б ОД На правах рукописи

I II СЕН РИЩУК Сергей Владимирович

УДК: 576.851.49:576.809.7

ФАКТОРЫ ПЕРСИСТЕНЦИИ САЛЬМОНЕЛЛ ПРИ ИХ ВНУТРИКЛЕТОЧНОМ ПАРАЗИТИРОВАНИИ

03.00.07 — микробиология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Челябинск — 1993

Работа выполнена в Оренбургском отделе перснстепщш микроорганизмов ИЭ и ГМ УрО РАН.

Научный руководитель: член-корр. РАЕН, доктор медицинских наук, профессор О. В. Бухарин.

Научный консультант: член-корр. РАН, доктор медицинских

наук, профессор В. А. Черешнев.

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор И. И. Долгушин доктор медицинских паук, профессор С. Г. Смирнов.

Ведущее учреждение: Санкт-Петербургский Государственный Санитарно-гигиенический медицинский институт.

Защита состоится «___»___ 1993 года

в '_часов на заседании Специализированного Совета

К.084.04.03 при Челябинском государственном медицинском институте по адресу: 454092, Челябипск-92, ул. Воровского, 64. С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Челябинского государственного медицинского института.

Автореферат разослан «_»_1993 года.

Ученый секретарь Специализированного Совета, кандидат медицинских наук

Н. И. ЖИГАЛОВА

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальнооть проблемы. Среди оотрых кишечных инфекционных заболеваний значительный удельный вео имеют сальмоноллези, роот эаболоваемооти которыми отмечаетоя во многих отраних мира (А.Б. Блпгер о ооавт., 1975; Р.И.Рудакова, А.И.Кортев, 1976; П.М.Попова, Н.А.Чайка, 1962; Б.Л.Черкооокий о ооавт., 1991). Сальмонелле» нанооит существенный в; эд здоровье лсдой и экономический ущорб обществу (В.И.Покровокий, И.Л.Шаханина, 1у79). Труднооти в борьбе о сальмонеллезом обусловлены недостаточной изученноотью патогенеза зтой иЦфекции СВ.И.Покровокий, А.А.Килеоо, Н.Д.Вщук, 1981;, и в чаотности, механизмов внутриклеточного паразитирования возбудителя внутри макрофагов и згсителиоцитов и длительной пероиотенции сальмонелл в организме хозяина (А.Ф.Блогер о ооавт., х980; М.В. Войно-Нсенецкий, 1901).

Среди механизмов бактериальной пероиотенции в пооледнее время приковано внимание к таким факторам, как антилизоцимная (О.В. Бухарин, Б.Я.Уовяцов, 1902), антиинтерфероновая (0. '.ьухарин, В.Ю.Соколов, 1909), антииммуноглобу линовал (К.З.Чернохвоотова, 1987; £.А.Михайлова и др., 1990; 1,1*0С. е1 1986), антикомплементарная (ю.А.ьрудастов, 1992) активности, и установлена широкая их встречаемость у патогенной и условно-патогенной микрофлоры (0.й.Бухврин, 19Ъ7, 19У2).

Доказана значимость антилизоцимного признака во внутриклеточном паразитировании сальмонелл (А.П.Малышкин, 1986) и шигзлл (В.Е.Герасимов, 1988), а также роль антиинторфероновой активности в персистзнции шиголл (В.Ю.СЬколов, 1990). Предполагается, что антиинтерфероновыП фактор также может влиять на способность сальмонелл к внутриклеточному порязнтирочани*.,. Ло этому вопросу в ля-•и'гпгуг« сведения отсутствует, '¿го иг'/чение пгслотавлястся акту-

г

альным, так кпк открывает пути для выяснения биологической роли этого признака персистиромния сальмонелл, что и предопределило побудительные мотивы данного исследования.

Цель у. задачи исследования. Ц&лъ настоящей работы - определить биологическую роль антиинтерфероновой активности сальмрнелл в оочетании с антилизоцимным признаком при их внутриклеточном пара итировании.

Для реалигации этой цели были поставлены оледующие задачи:

1. Изучить связь персистентных характеристик оальмонелл о показателями фагоцитоза на модели перитонеальных макрофагов и ней-

трофилов человека, а такжо цитопатичеоким действием микроорганиэ-

1

мов но клетках Нер-2.

2. На модели экспериментальной оальмонеллезной инфекции у мы->;ей изучить динамику изменений пероистентных овойотв возбудителя

и сопоставить ее с длительностью персиотенции и иммуноморфологическими изменениями селезенки зараженных животных.

3. Сопостг-зить персистентные характеристики оальмонелл о клиническим течением инфекции и длительностью бактериовыделения возбудителя у больных.' • •

Положения, вынооимце на защиту:

i. Антииктерфероновый фактор сальмонелл нарушает процесо их внутриклеточного киллинга, оникая акгивнооть катионных Ое*ков фагоцитов.

'¿. Аутиинтерферонопкй признак сальмонелл, способствуя развитие цитопатичсокого аффекта, определяет тяжесть течения инфекционного процесса и длительность пврсиотирования бактерии в организ мо.

Научная новизна. Впервые экспериментально установлено связь . антиинтерфероновой активности оальмонелл о их опоообноотыо угнетать фагоцитарную реакции в макрофага льном звене и нейтрофилах

человека. Обнаружено выраженное лнутрифагоцитарное и внутриэпите-лиалькое размножение бактерий о актиинтерфероновык признаком к их цитотокеический эффект на эпителиоцпты человека.

Экспериментально выявлена более продолжительная персисгенция сальмонелл, облодиющих сочетанием двух признаков: антиинтерферо-новчм и антилизоцимным. Определено отсутствие специфического влияния онтиинтерферонового фактора сальмонелл но гуморальный иммунный ответ в эксперименте

Доказано наличие связи между ЛИА в сочетании с АЛА у сальмонелл и длительности их бакториовыделения от больных, Антиинтер-фороновый г!ризнак оальмонелл определял тяжесть клинического течения заболевания.

Практическая ценность ■ Теоретическое значение работы заключается в расшифровке роли отдельных персистентных характеристик оальмонелл при внутриклеточном их парозитировании.

Полученные данные попользованы в процессе преподавания курса медицинской микрооиологии по разделу "Кишечные инфекции".

Практическое значение работы опредедяетоя возможностью прогноза характера течения оальмонеллезной инфекции у больных и фор- > мирования у них бактерионооительотва пб наличии антиинтерфероно-вого и антилизоцимного признаков выделенного возбудителя.

Апробация работы, ионовные положения работы доложены и об-оуждены на:

1. Пятой научно-практичеокой конференции врачей-инфекциони-отов, микробиологов, эпидемиологов и паразитологов Оренбургской области (Оренбург, 1991л

2. 10-й итоговой конференции молодых ученых - медиков "Молодые ученые - здравоохранению" (Оренбург, 1991).

3. Конференции молодых ученых-медиков "Иолодыо ученые - здравоохранению" (Оренбург, 19?<?).

ч

k. Il-Я итоговой конференции молодых ученых-медиков "Молодив ученыо - здравоохранению" (Оренбург, 1993).

5. Международной конференции "Загрязнение окружающей среди. Проблемы токсикологии и эпидемиологии" (Иооквв - Пермь, 1999).

Публикации. По теме диооертации опубликовано 6 работ.

Объем и отруктура диссертации. Диосертация представлена на {2С страницах машинописного текога и ооотоит из введения» пяти глав, заключения, выводов и указателя литературы, включаемого I1J отечественных научных литературных ноточннков и UZ иноотранних. Текст иллюстрирован 7 таблицами и 18 рисунками.

Материал и методы и следования. При выполнении экоперимсн-тальной части работы использовалиоь изогенные «ггамны оальмонелл (5. е-г»/е»•''//¿/л ), отличаициеоя по антииитерфероковому признаку, переданному путем конъбгвциониого скрещивания о донорским епгвмно)} кишечной Иалочки по методу Дк. Миллера (1986). Выбор этого вида микроорганизмов был но случайным, так как, по данным В.И.Цоргев-нина и РоА.Михалева (i983), е также БЛ.Черкаосхого о ооовт. (1991;, основным возбудителем оальмонвллоао л настоящее громя яв-ляогоя S. ffw/<f f''/¡c/'S, * '

Исследование рол!Гфакторов пероиотенции оальмонелл при их внутриклеточном паразитировании проводили но модели перитонеаль-ных макрофагов кыиэй по Учитель И»Я. (1978)» нейтрофильнык лейкоцитов человека » по Иванову А.И« и Чухяовику S.A. (1967) и Пмга-ревокому В.£. (19'/9)0 культуры клеток Н®р-2 « по Арбуновой В.Ао (I97U) о

Изучениз связи AM и АЛА о пероистендазй сальмонелл проводили путем вцутрибрвшинноро зарекзнйй 250 мышей линии СМ изогвннн-м атаммами о пооледувщим их вскрытием и забором крови, костного мозга,, ночки0 леченк и зеквзенхк на бактериологическое иосквдовб-ни® 0 Параяявяьно производили определение Т- и В-яимфоцитов в селе-

звнко (Н.А.Краокина и ооавт., 1€83), а также количества антител в крови к 0-антигону в РШ'А. 1йото логический анализ оелезекки мышей ооущеотвляли путем морфоматрии фолликулов и герминативных 8-зин на оерийных орезах (Г.Г.Автяндилов, 1984).

Значение факторов пероиотенции в клиничеокой патологии было раокрыто на 158 клиничеоких и 63 музейных щтаммах сальмонелл, принадлежащих к 8 видам. Иопользовалиоь общепринятые методы идентификации бактерий и изучение антиинторфероновой (О.Б.Бухарин, З.Ю. Соколов, 1990) и антилизоцимной (О.В.Бухарин, Б.Я.Уовяцов, 1982) активностей. Связь антиинтерферонового и антилизоцимного признаков возбудителя о длитальноотьо бактериовыделения и тяжеотыо течения оальмонеллеза устанавливали на ЧЪ штаммах сальмонолл, высеянных от больных о гаотроинтеотинальной фор<ой заболевания и однотипным лечением гентамицином.

Сгахистичеокая обработка результатов проводилаоь общеприняты-кя методиками.о использованием критерия Оьвдента, однофакторного и двухфакторного диоперсиокного анализов (Г.Ф.Лакин, 1990).

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

При изучении роли антиинтерферонового и антилизоцимного факторов в процессе внутриклеточного пара актирования и персиотенции сальмонолл ооновное внимание было уделено антиинтврфэроновому признаку, так как значение антилизоцимного фактора у сальмонелл раскрыли в своих работах А.П.Молышкии (1986) и С.П.Михайлов (1986), которые показали, что последний является одним из факторов их внутриклеточного парсэитирования и пероиотенции в организме хозяина,

В связи с этим мы поставили опыты на клеточных моделях: пери-тонеальных макрофагах мыте» и полимор'чюгаарннх лейкоцитах чплора-ки - <1 целью изучения роли антииитер^г.снозой активности в неруотч-

нии фагоцитоза сальмонелл, обладающих отин признаком.

При заражении мош олоя перитонеальных макрофагов изогенными штаммами сальмонелл, отличными по АИА, в дозе 750 микробных клеток на один фагоцит поолв двухкратного просмотра в каждом моно-олоз IüO макрофагов получен в 2,5 раза ниже захват онтиинтерфз-ронактивного штамма по сравнение о неактивным ^6,0 ¿ 0,8 протав 1^,9 $ 1,0), а также его внутриклеточное размножение (индеко Райте на 50 минутах инкубации - 6,0 + 0,8, на 6 чаоах - 13,2 ¿ l,1*} р < U.OUI). Штамм бе в АИА о 30 минут до 2 часов контакта с макрофагами выражение элиминировалоя (14,9 J 1,0 и 6,7 j¡ 0,7 соответственно), в затем - на 4 -л б часа* находилоя на стабильном уровне (9,5 4 0,6 м 9,i» ¿ 0,9)..

Токим образом, определяется нарушение захвата и переваривания, а также внутркфагоцитарное равмиожение антиинтерфоронактив-ного штамма сальмонелл» '

Следующие эксперименты били поставлены в плане раоиифровки роли нейтрофилышх лейкоцитов в элиминации оаяьмОнолл, обладавших антиинторфероновим фактором, С этой цольо взвеоь паяиморфноядер-ных лейкоцитов в капле цельной крови, взятой ив пальца, заражали 2-миллиэрцной взвесью йзогенных штаммов сальмонелл. Поолв двухкратного проомотро в кавдом мазке 100 неитрофилов определялись в 1,9 раза ниже захват нейтрофилвми активного штамма (2,7 ¿0,2 против 5,1 í 0,3) и окижение его индекса бактерициднооти в Ч раза (0,1 +0,01 против 0,5 ¿0,U3), по сравнении с нейштивнын штаммом,

'1Ьким образом; выявилось аналогичное ó перитонеаяьиыми макрофагами нарувеии« фагоцитоза нейтрофияъными лейкоцитами в отно-венми антиинтерферонактивного втамма, а также его внутримикрофа-гельнов реэмноженив. Сходные результаты на примере клебоиеллезной инфекции не аналогичной модели были получены С.В.Суриковой (1992). Имеотно, что, обладая оильными бактерицидными механизмами

(и.а.Аимариа и др., 1972, 1973, 1977; В.Е.Пигаровокий, 1978, 19Ш| rtPeßcx -nvff S. У. с/ 1971, 1973, 1978), фагоцитарные клетки

(макро- и микрофаги) выполняв» важную функцию в защите организма от оальмоняллеэной инфекции (С.Г.Пак, М.Х.ТУрьянов, М.А.Пальцев, 1988). Причем, акцентируется внимание на роль катионных белков (в т.Че неферментных) лейкоцитов в инактивации бактерий как на стадии их адгезии к поверхности фагоцита, так и во время поглощения микробных клеток (Pcftelier- t/ £efc*t'rterv> 1972; 1971). Исследованиями О.В.Бухарина и В.Ю.Соколова (1988) было показано, что так позываемая онтиинтерфероновая активность бактерий направлена на инактивацию бактерицидной фракции препарата человеческого лейкоцитарного интерферона, вщсленной в чиотом виде и названной "интврцидом". На боэ оонования можно предположить, что "интерцид" и неферментныв катионные белки, описанные вышеуказанными исследователями, - одно и то же бактерицидное начало. Походя из ятого предположения, становится логичеоки объяснимым наы интерео к изучению иотощения катионных белков в лроцеосе фагоцитоза изогенных штаммов оальмонелл полимо.рфнойдерными ¡пнкоцитами (ПМЯЛ).

Количество катионных белков в гранулах лейкоцитов косвенно оценивали по величине ореднего цитохимического коэффициента -СЦК (и.Е.Нигаревокий, 1978, 1979; краситель прочный зеленый любезно предоставлен доктором В.Н.Кокряковим). Установлено достоверное (р < 0,05) ониженке этого показателя на 30 и 75 минутах инкубами изогенннх штаммов сальмонелл о ПМЯЛ по оравненио о не-инфицированними. нейтрофилами. Оанако разности в СЦК меаду атвмна-ми о АИА и бее последней на этих сроках зарегистрировать не уда-лооь. С одной стороны, Э'о можно было объяонить малым удельным сол о рением инакгивируемоя бактериями фикции л суммарном пуле оо'ккх кчтконных белков нейтрофилов '.Н.Л.Пеклемивев, 1906). Дру-

гим существенным моментом, на наш взгляд, является онижение фагоцитарного числа по отвзшенив к штамму, обладающему АИА. В связи о вышеизложенным, целесообразным предотавилооь определение удельного истощения ореднего цитохимичеокого коэффициента (УИСЦК), как отношения величины оникения СЦК к фагоцитарному чиояу, определенному через 30 минут инкубации ПМЯЛ о бактериальной взвесью:

УИСЦК СЦК(к) - СЦК(оп) ФЧ

где СЦК(к) - ' СЦК неинфицированн-ых лейкоцитов;

ЩК(оп) - СЦК инфицированных лейкоцитов.

Было получено почти в 2 раза преобладание УИСЦК в олучав заражения штаммом о признаком, по орвдаению р аналогичным показателем при инфицировании сальмонеллой без АИЛ (О,1» ^ 0,и! против 0,2 д 0,02; р < 0,001). Следовательно, УИСЦК наиболее адекватно отражает взаимосвязь мевду иотощениеи катионных белков ПМЯЛ и количеством захваченных микробных клеток в процесое фагоцитозо и позволяет оценить реально значение АИА оальмонелл. в защите от катионных белков 11МНЛ на начальных этапах фагоцитоза. з .

Для выявления овязи АИА сальмонелл, о их опоообно'стью порази-1 тировать внутри эпителиальной клетки были поставлены модельные эксперименты на культуре клеток Нер-2. При заражении моноолоя 100-миллионной взвесью изогенкых штаммов сальмонелл,, отличных по АИА, и двухкратном просмотре в каждом мазко 10и клеток пооле 2, Ч и б чаоов их сокультивирования установлено нарастание индекса Райта на Ц и 6 часах по оревнению а '£. чаоами инкубации антиинтер-феронактавного итамме о моноолоем (21,3 ¿. 2,1 к 25,9 + 2,3 против 19,8 ^ 1,5; р < 0,05)» что овидетельотвувв о его внутриклеточном размножении. Выракеииое увеличение коэффициента цитопатогенного действия на этих временных интервалах в ол/чае активного штамма • (10,0 ^ 3,0 % - на 2; 39,0 + ^ - на Ь; и 55,0 4 5,0 %. - на

6 часах) указывает на разрушение эпителиальных клеток пооледним. При инкубации Нер>2 с неактивным штаммом наблюдается его элиминация (икдеко Райта на 2 часах - 15,8 + 1,3; ни Ч - 12,0 + 1,4; на 6 - 13,6 + 1,1) и почти в 2 раза менее выращен цитопатогенный эффект на представленных временных интервалах СЦПД на 2, А и 6 часах - 7,0 + 2,6; 23,0 * 4,2; 21,0 ¿ 4,1 % соответственно).

Наши исследования созвучны о указаниями S mi {А И, (J984) о опоообности бактерий партзитировать в "непрофессиональных" (фагоцитах - эпителиальных клетках алиментарного, реопираторного и урогенитального трактов (Jl1trr)s/ 1976; /tfc Gee a-nd fler-n t 1979; СЬо-CfiocA

Важное значение во взаимодействии паразитов о эпителиальными клетками принадлежит онотемо "лиэоцим - антилизоцим", в которой ос воей яоноотьв просматривается роль АЛА инвазированных бактерий, ' как.фактора, определяющего иоход их взаимодействия о эпителиальными клетками, и, как правило, заканчивающийся длительным паразити-рованием микроорганизмов в эпителиоцитах (О.В.Бухарин, 1992; Н.В. Немцова, 1983; Б.Я.Усвяцов, Л.А.Зорифуллина, 1983; В.Г. 1Ъраоимов, 1986). Полученные нами результаты <звидетельотвуют, что во взаимодействии бактериальной клетки о эпителиальной немаловажная роль принадлежит оиотеме "катионные белки - антиинта{тфероновая активность". Однако окончательное решение этого вопрооа в настоящее время требует дальнейших экспериментальных подтверадений.

Таким образом, на клеточных моделях выявлено угнетение фаго-г цктарной реакции в макрофага льном звене и в нейтрофилах человека сальмонеллами; о АИА, опосредованное, по всей видимости, влиянием на катионные белки фагоцитирующих клеток, а такие показано выращенное внутрифвгоцитарное и внутриэпителиальное размножение сальмонелл с АИА и их значительный цитотоксячпский эффект на эпителио-i;,ítii "словека.

ло

На следующем этапе исследований мы раосмотроли значение АИЛ сальмонелл в условиях эчиюриментальной инфекции; на мышах. При вкутрибрюшинном заражении. 250 мышей линии СЗА изогенными штаммами сальмонелл, отличными по антиинтерфероновому признаку, в дозе 1000 микробных клеток но мышь и последующим их вокрытием на протяжении 80 суток с проведением бактериологического анализа орга-ноъ выявлен наиболее продолжительный- высев иэогенной пары сальмонелл из селезенки инфицированных животных по оравнению о другими органами. Так, штамм, о А И А высевался из селезенки в течение 60 суток, в то время как из печени, костного мозга он виделялоя менее продолжительно - 52 и 28, а из почки и крови - всего 16 суток. Аналогичные результаты наблюдались при персистенции штамма бее признака, которая в оелезенке составила 35 суток, в печени и ко отцом мозге - 28, а в почке и крови - 16 и 8 суток. При сравнении продолжительности высева между двумя изогенными штаммами обращает внимание отсутствие достоверной разницы в этом показателе для крови, коотного мозга и ткани почек экспериментальных животных. Из печони штамм, о инздинтерфероновым маркером выделялся в'1,9, о из селезенки - в 1,7 раза дОльие по оравнению оо штаМмом беэ признака (52 против 28.сурок - в печени и 60 против 35 суток - в селезенке). Также получон более выоокий уровень инфицированнооти селезенки экспериментальных животных штаммом о АИА после трех недель инфекции. Так, доля зараженных животных активным штаммом на 28, 42, 52 и 60 сутки составила 100 %, 60 %, 80 % и ОД %, в то время как сальмонелла без АИА выоевалаоь из этого органа на 28 и 35 сутки >у> 40 % и 10 % животных, и о прекращением ее выделения на 42 оутки. Параллельно о длительностью и инфицированноотью оценивалась интенсивность обоемзненкооти органов изучаемыми иэогенны-ми штаммами. Она выражалаоь количеством колонивобразующих единиц • (КОЕ) в переочете на I нл кро>и или I гр органа и предстввлялаоь

в ваде деоятичного логарифма. Начиная с 16 суток экспериментальной инфекции, на всех изучаемых сроких до окончания псроистенции: интенсивность высева изогенного штамма с антиингор^ероновым признаком не,,отличалаоь (кровь и почки) или преобладала' (костный мозг, печень, селезенка) над аналогичным показателем в случае штамма без интересующего нао фактора.

Таким образом, выявлен наиболее продолжительней зыезз.изо-генной пары сальмонелл кз оелезенки животных. Кроме того, прослеживается разница в персистенции изогенных штаммов з печени и селезенке мышей о преобладанием длительности высева антиинтерферон-активного Штамма, по сравнению с неактивным, соответственно на 2ч и £> суток. Экспериментальным путем получен высокий уровень инфицированности (по селезенке) лабораторных животных штаммом с антиинтерфероновой активностью, а также более интенсивный иксов ' из коотного мозга, печени и селссонки штамма с внтиингерфероно-вым маркером,- по сравнению с сальмонеллой без АИА, после 15 суток инфекции. Вышопредставленныс данные на сальмонеллах по лучен к нами впервые, хотя аналогичные результаты, по связи ан?;;:и:терЬеро-нового фактора клебсиелл и нигелл с персистенцией последних были получены Е.В.Суриковой (19У2) и В.й.Соколовым (1950).

В опытах на модельной сальконеллезной инфекции была изучена динамика антиинтерфероновой и антилизоцимной активностей возбудителя. итало очевидным, что, несмотря на одинаковые исходные значения АЛА у атамма с АИА (¡>,5 + 0,3 ел) и без антиинтерферонового признака (5,7 + и,3 ед), их динамика з процессе эксперимента имела существенное различие. Гак, уже через 2ч часа после заражения мышей прослеживается увеличение уровня антилизоцимной активности (по отношению к исходному) у цтамма, не обладавшего антиинтерфе-роновым маркером, до 8,1 0,4 мкг/мл. з то же время, значение АЛА у "тамма с АйА на этом временно:! интеттол-.- не пт.-ччп л ось от

исходных цифр. В дальнейшем изменения величины Ам у интересующих нао сальмонелл имели волнообразный однонаправленный характер, хотя уровень колебания активности у штамма, не имеющего антиинтер-феронового фактора, оыл достоверно выше, чем у сальмонеллы о интересующим нао признаком. Антиинтерсрероновый фактор у неактивного штамма не проявился на всем протяжении опыта, в то же время, изме неьле' представленного показателя у штамма о АИА при иоходном его уровне 4,5 + 0,4 ед. имело волнообразный характер с увеличением значений этого показателя относительно исходных цифр на 16, 28 и 52 сутки (р < 0,05-0,001) и возвращением к исходным величинам на 21, 35 и 42 оутки инфекции. Обращает внимание выраженное падение АИА и АЛА перед элиминацией изогенных штаммов.

Из работ 0.В.Бухарина, Б.Я.Уовяцова (1982), Н.В.Немцевой (1983), А.П.Малышкина (1986), С.П.;*1хайлова (1986), В.£. 1Ъраоимо-ва (1988) следует, что болев выоокий уровень антилиэоцимного признака должен привести к более длительной пероистенции возбудителя в организме хозяина. Но этого не происходит л нашем случао - при заражении, штаммом без АИА, хотя пооледний имел более выоокий показатель антилиэоцимного признака, чем антиинтерферонактивмый возбудитель, на протяжении всего эксперимента. И даже наоборот, прослеживается его менее длительная пероистенция по оравнению со штаммом о АИА (35 суток против 60). Вероятнее всего, более длительное бактериовыделение иэогенного штамма о АИА обусловливается наличием у последнего одновременно двух факторов: антилиэоцимного и ан-тиинтерферонового.

Таким ооразом, пороистенция изогенного штамма о внтиинтерфе-роновыя маркером, в о^ичие от сальмонеллы без АИА, обусловлена наличием одновременно двух факторов: антиинтерферонового и .енткли-эоцимного.

Принимая во внимание указания А.М.Зарицкого (1988) и С.Г.Пака

и др. (1988) о значительной роли гуморального звена иммунной системы в противоинфекционной защите при сальмонеллезе, (^чло любопытно проследить ее взаимоотношение о антиинтерфероновым фактором возбудителя. G этой целью было проведено иммуноморфологичеокое исследование селезенки инфицированных животных (опыты проводилиоь совместно о проблемной лабораторией - зав. А.И.Цмолягин и кафедрой гиотологии - зав. А.А.Отадников, 0IW1). Выбор и качеотае основного объекта селезенки был не олучайным, ток как, во-порвых, последняя играет ключевую роль при сальмонеллезной инфекции в плане инактивации; возбудителя, во-вторых, селезенка является одним из основных периферических иммунокомпетентных органов, п-третьих, наиболее выраженные различия в длительности персиотенции! изоген-ных штаммов оальмонелл получены именно в этом органе.

При заражении мышей иэогенними штаммами сальмонелл, отличными по ЛИА, и гистологическим исследованием селезенки на оерийных орезах о окраокой гематоксилином Майера и эозином, о поолодующим определением диаметра фолликулов и подочетом чиоп митотических делений клеток в В-зоне, обнаружено, что длительное паразитирова-ние сальмонелл о АИА в селезенке мышей сопровождается стимуляцией герминативных I^-зон предотавленного органа. Так, при заражении! штаммом без АИА диаметр фолликулов уволичивалоя ужо на 8 оутки инфекции и затем сохранялся на стаоильном уровне до 42 суток инфекции. Инфицирование штаммом с признаком приладило к увеличении диаметра фолликулов, начиная о 8 оуток, о последующим достижением максимума на 42 оутки инфекции. Так, диаметр фолликулов при заражении штаммом без АИА ооотавил 646,2 + '¿9.5 мкм (8 оутки), 59Q.4 + 53 0 9 мкм (16 оутки), 529,2 * 28,0 мкм (42 оутки), а при заражении атаммом о АИЛ а аналогичные орогеи был достоверно ¿ыше - 794,6 + 14,3 мкм; 1068,9 + 119,9 мкм; 1309,0 + 96,8 мкм. В случка инфицирования активном штаммом отмечалооь также увеличение размера В-

зон селезенки на протяжении всего срока наблюдения с достижением макоимума на 42 'сутки (342,0 + 63,2 мкм против 86,8 + 1,7 мкм в контроле). При заражении неактивным штаммом этот показатель был они|;.зн по сравнению с контролем в большинстве ороков исследования 'йак, на 4? 'оутки инфекции величина В-эоны в случае штамма без АИЛ была в 5 раз меньше по сравнению о контролем (17,1 +8,6 мкм против 86,8 * 1,7 мкм).

Анализ иммунологических показателей, отчасти, подтверждает полученные результаты, осооенно на поздних сроках инфекции (42 оутки), вызванной штаммом с антигштерфероновым маркером. Так, относительное содержание Т-лимфоцитов имело тенденцию к онижекию на подавляющем большинстве ороков наблюдения у зараженных мышей как активным, так'и неактивным штампом, по оравнению с контрольным уровнем, на 28 оутки инфекции выявлено достоверное уменьшение относительного содержания Т-лимфоцитов у инфицированных мышей ц'томмом озз AciA (¿7,4 ± 1,81 %) по сравнению с аналогичным уровнем в случае заражения активным штаммом (34,S + 2,03 %) и интекг-ных животных (Эч,0 + 1,1 %). Относительное содержание &-лимфоци-тов при заражении штаммом Z АИА было достоверно онижено по отношению к контролю на 21, 28 , 35 и 49 сутки наблодения. Однако по-

I

добной закок мерности не выявляется при'зоражении штаммом без АШ Абоолютное содержание B-лимфоцитов в большинстве сроков наблюдения превышало уровень контроля при заражении изогенной парой штам мог и достигало максимальных значений при заражении штаммом без АИА на 28 сутки, а при инфицировании штаммом о признаком - на 42 оутки. Кроме того, на 42 сутки инфекции абсолютное число ^лимфоцитов было достоверно выше в селезенке мышей, зараженных ентиин-терферонактивным отаммом, по сравнению с этим показателем у животных, зараженных неактивным штаммом (105,4 + 8,13 млн против 77,6 + 7,54 млн; р <0;05). Уровни относительного и абсолютного

количества зрелых В-лимфоцитов мало отличались у мышей, зараженных изогенной парой штаммов,.и были увеличены на 21, Ч£ и 49 сутки инфекции по отношению к контролю. Изменения относительного и абсолютного числа незрелых В*лимфоцитов достоверно не отличалиоь у мышей при заражении обоими изогечными штаммами.

Различия в титре антител в РПГА к О-пнтигену сальмонелл в сыворотке кро-зи в случае заражения мышей иоследуемым: изогениыми штаммами выявить но представилось возможным.

изложенные результаты оогласувтоя с данными рада авторов: А.И.Смолягина, В.А.Кривоноса (1987); Р.Давроноэа (1986); З.Б.Ба-тырова, С.Н.Дениоова (1988); Т.А.Лымаревой (1985); М.И.Сомашко, Н.Д.Ющука (1984) о значительном возрастании прэлиферативных процессов в В-завиоимых зонах периферических органов иммунной сиоте-мы, оопрововдающихоя увеличением суммарного пула В-лимфоцитов при экспериментальном оальмонеллезе. По данным Т.А*Хшмаревой (1985), особенно выраженный абсолютный и относительный В-лимфоцитоз в крови нвблюдаетоя при затяжном течении сальмонеллеза. Вэзможно, что эта реакция в ответ на внедрение сальмонеллезного антигена происходит преимущественно в герминативных В-эонах оелезенки. Поэтому гиотологичеокие исследования выявили более выраженные одвиги по интереоующему нао показателю, чем в олучае применения иммунологических методов, ^ак как в пооледних в опыт берутся вое клетки оелезенки. Следовательно, изменения количественного состава герминативных В-зон на фоне общего количества оплег.оцитов могут не выявляться о помощью иммунных оыаороток. Необходимо ответить, что, несмотря на заражение мишей дозой сальмонелл, в 10С0 роз меньшей по сравнению с микробной нагрузкой, примененной А.И. (йолягннют и В.А.Кривонооом (1967), улавливается одинаковая закономерность в реакчии В-звена на антигенный стимул. Анализ данных по - зменоышм в селезенке в ответ на внедрение изогеннчх

штаммов сальмонелл, отличных по AUA, особенно на поздних сроках пероиотенции, нами представлены впервые, ьолее выраженная пролиферация герминативных B-зон оелеэенки при инфицировании мышей ан-тиинтерфэронакгивным штаммом, вероятно, отражает неспецифичеокую их стимуляцию в ответ на более выраженное накопление антигенного материила, что созвучно и нашими данными о более длительной пер-сьотенции и внутриклеточном размножении изогенного штамма о AUA по сравнению о неактивным штаммом. Хотя эта отимуляция не приводит к более интенсивной выработке антител, что подтверждается полученной нами одинаковой их концентрацией в крови в олучае двух вариантов изогенных штаммов оальмонелл.

Таким образом, представленный экспериментальный материал о 4 применением иммуноморфологичеоких исследований селезенки доказывает, что реализация антиинтерферонового фактора сальмонелл происходит на уровне фагоцитарных клеток и не влияет на антитеяообра-пвание в инфицированных животных.

Дальнейшее исследование проводилооь на 63 музейных м 138 " клинических штаммах сальмонелл, выделенных от больных о различными формами и тяжестью течения оальмонеллозной инфекции, находившихся на стационарном лечении в Оренбургской городской инфекционной кли-ническои больнице (гл. врач - В.Н.Мещеряков). Диагноз заболевания, клинические формы и отепень тяжеоти нами были получены из иоторий болезни. Консультативная помощь в этом направлении оказывалась к.н.н. С.П.Михайловым.

При анализе клиничеокого материала видно, что, в отличие от антилизоцимной активности, ореднпе уровни которой не отличаг.иоь у музейных и клинических шгаммов (5,5 +0,3 и 5,0 +0,3 мкг/мл; р > 0,05), а распространенность признака наблюдалаоь у 100 % штаммов двух представленных групп, встречаемость антиинтерфероно-• вой активности у клинических штаммов наблюдалаоь только у kj из

I5ö (.43 %), что било в 3 раза чаще, чем у музейных (у из 63). Средняя величина и диапазоны активнооти в клинической группе штаммов также преобладали по сравнению о музейнымг Так, средннй уровень AUA у клинической группы составил 0,9 + 0,2 од. при наличии диапазона активности от Г до Ю ед., в то время квк у музейных штаммов последний имел величину 0,2 + 0,08 ед. при диапазоне- от 1 до 3 ед.

Данные по распространению и'средним уровням АИА у сальмонелл нами представлены впервые и совпадают о результатами исследований на других видах микроорганизмов: кишечгой палочке, протее, энтеро-бактерэ, цитробактере, клебоиеллах (.Л.С.Ьыкова и др., I99U; В.Ю. Соколов, 1У90; Е.В.Сурикова, 1990). Не исключено, что частота встречаемости, диапазона и уровни активности находятся в тесной зависимости от иоточника выделения и характерны для больного организма.

Та же закономерность выявлена и по распространенности АЛЛ у клиничеоких штаммов сальмонелл и согласуются с результатами наблюдений ряда авторов на других видах возбудителей бактерий: шигел-лах, кишечных палочках, протеях, а также сальмонеллах (0.В.Бухарин и др., 1983; Н.Й.Немцева, 1983; В.Е.Гераоимов, 1987; Л.С.Зыкова, 1986; С.И.Кератева и Б.В.Илинокая, 1987; А.П.Малышкик, 1986; С.П.Михайлов, 1986), хотя, в о.личиа от исследоианий 11. В.НемцевоР (1983) и Л.С.Зыковой (1987) на нигеллах и уропатогенных энтеро-бакгериях, мы не получили различия в уровнях и диапазонах анги-лизоцимной активности у музейных и клиничеоких штаммов оальмонелл.

На следующем этапе наших исследований было изучено влияние факторов пероиотенции на тяжеоть течения сальмонеллезной инфекции у больных. Лля этого штаммы от ЧЧ оольных о гастроинтеотийальной формой сальмонеллеза и однотипным лечением гентамицином по наличию антиинтер^еронового признака раопределилиоь нэ две группы.

В первую вошли 24 штамма, не имеющие АИА; вторую группу ооотавил 21 штамм о антиинтерферононым признаком. В первой группе II штаммов (46,0 + 2,1 %) были выделены от больных о легким течением инфекции; 12 (50,0 + 2,1 Р) - от больных оо ореднетяжелым; и только один штамм (4,0 + 0,8 ¡0 принадлежал больному о тяжелой формой сальмонеллезо. Вторую группу оротавили штаммы преимущественно от 9 сильных (43,0 +2,4 %), наделенные при ороднетяжелой и тяжелой (9 человек - 43,0 ± 2,4 %) формах оальмонеллоза. И только 3 штамма (14,0 + 1,7 %; р < 0,001) были получены от больных о легким течениом инфекции.

Анализируя связь антилизоцимной активности о тяжеотьс течения сальмонелле.^, установлено, что л группе штаммов (35) о вели- 4 чиной.фактора менее 6 мкг/мл II (31,3 %) были выделены от больных о легким точением инфекции; 16 (46,0 ^ 1,4 %) и 8 (23,0 $ 1,2 штаммов ооответотвенно от больных оо ореднетяжвлой и тяжелой формами оальмоноллеза. Аналогичная отруктура прослеживается в группе штаммов о величиной активности б мкг/мл и выше (10 штаммов).

Анилизируя влияние одновременно двух факторов персистенции возбудителя но тяжесть течения евльмонеллеза, установлено, что в группе микроорганизмов (17 штаммов), не Обладающих антиинтерреро-новои активностью, и о внтилизоцимным признаком менее 6 мкг/мл, 9 штаммов ^33,0 + 2,9 %) были выделены от больных о легким, о 7 (41,0 ± 2,9 %) - со ореднотяжелым течением инфекции. Только один возбудитель принадлежал больному о тяжелой формой сальмонсллеза. Во "торой-группе, в которую вошли 7 'штаммов, не обладающих АИА, но о онтилизоцимным фактором б мкг/мл и выше, только 2 штамма (29,0 ^ 6,5 %) высеялиоь от больных с легким течением инфекции, что ь 1,8 раза меньше (р < 0,001) по сравнению о первой группой. Остальные 5 штаммов принадлежали больным со средиетнжелои фо^-юа.

что было в 1,7 раза чаще (р < О,Oui), чем в предыдущей группе. Третью группу ооото"или 18 штаммов о ЛИД и о ЛЛА менее 6 мкг/мл, из которых 11,0 + 1,7 % (2 штамма) выделились от больных о легкой формой заболевания, что было меньше, чем в первой и во второй группах, соответственно в 4,8 (р < 0,001) и 2,6 (р <0,01; роза. В 50,0 ¿ 2,ti % олучаев (9 штаммов) сальноноллы принадлежали больным со ореднетлжелой формой, что было в 1,4 роза (р < 0,001) меньше по сравнению оо второй, но на "9 % больше (р < 0,05) по сравнении о первой группой. От больных о тяжелым течением виоеялооь '' штаммов, количество которых провчоило величину оналогичних в первой группе в 6,5 pasa (р < 0,001). И, наконец, четвертую группу сформировали Э штамма, обладавших АИЛ и величиной АЛЛ С мкг/мл и выше, выделенных от больных о тяжелой t 67,0 ± 15,7 %) формой оальмонеллеза, что в II и 1,7 роза (р < 0,ul) прогноили аналогичный показатель в первой и в третьей группах; и от одного больного - о легким течением оальмонеллеза.

Таким образом, представленный клинические м- териал указывает на овязь ентиинтерфероновой активнооти сальмонелл о тяжеитью точения инфекции. Результаты наших исследований о влиянии антйлизоцим-ного признака im тяжесть заболевания на однозначны.

Полученные результаты были подвергнуты отйтиотичеокой обработке о использованием однофакторного неортогонального диоперои-оиного анализе (Г.Ф.Лакин, 1990), который выявил достоверную (о уровнем значимости > 99,99 Ю овязь вариабельнооти AUA о вариабельностью тяжеоти гаотроиптеотинальной формы оальмонеллеза при силе влияния АИА на тяжеоть, равной, прикорно, 24,4 %. U то ж г время ствтиотичеокий анализ яе подтвердил (р > 0,05) овязь АЛА о тяжеотьв инфекции в иоследуемой выборке, Двухфакторный диопероион-ный анализ подтвердил полученные .ранее результаты отатиотичеокой обработки о использованием однофакторного подхода, кок по внтиин-

гарфер ежовому, так и по антилизоцимному фактору.

Аналогичные'результаты по корреляции AUA о тяжестью течения инфекции получены Е.В. Суриковой (1990) на'примере клебоисллевов и Л.О.Зыковой (1990) на примере уроинфекции, вызванной оиерихия-ми.

Анализировалась такие овяаь меаду факторами; пероистенции вс л буди те ля и длительностью лихорадочного периода, оимптомов по« ракения келудочно-кишечкого тракта (рвоты и диарреи), а таКко ко личеством койко-дней и продолжительностью бактериоввделеиия у сальионеллезных больных.

Шдно, что длительность лихорадочного периода о температуре 38°С и выше, а такг.е продолжительность периода рвохы у больных t сальмонеллами, обладающими онтиинтерфероновым фактором (первая группа), были ооответотвенно в 1,5 л 1,6 раза выше (р > 0,05), чем у больных о бактериями, не имеющими вышеуказанного маркере (вторая группа). Прекращение диарреи и иочезновенио патологичео! примеоей (кровь, оливь) в иопражноннях у больных первой группы штаммов, по сравнению оо второй, наотупадо в о род ком на 1,2 оут< позже (6,4 + 0,5 против 5,? + 0,4 оуток; р > 0,05). Шделение сальмонелл о АИА происходило в" среднем на протяжении 7,0 ^ 0,4 оуток, в то "рем- как штаммы без призно.-и выоевалиоь на «¡,4 дня меньше (4,6 * 0,3 оуток, р < 0,Ul). При этом, по длительности пребывания больных в стационаре (койко-дни) различий между рао-смртриваемыми группами больных выявинь но удалось.

С учетом уровня антилизоцимного фактора изучаемые штаммы сальмонелл также были распределены на две группы. Первую оостав) ли 35 штампов, которые обладали снГгилибоцимной активностью мене' 6 мкг/мл. Во вторую группу воили 10 штаммов с АЛА б мкг/мл и вы ше» Триоды рвоты и гипертермии с температурой 36°С и выше не о личалиоь по длительности у больных, обладавших двумя вириантпми

сальмонелл. Нормализация характере и частоты стула у больных о возбудителямис имеющими антилизоцимную активнооть менгя б мкг/мл, наотупила на Ь»б + 0,1» сутки,, что было на 0,7 суток быстрее, чем в группе сальмонелл о АЛА 6 мкг/мл и выше (р > 0,05). Сроки бак-териОвыделения у больных с возбудителями первой группы были меньше на 1,0 оуток по сравнению со второй (5,5 ¿0,4 против 6,5 + 0»5>? р> 0,05). Продолжительность их нахождения п стационара не отличалась от больных о 'сальмонеллами, имеющими АЛА б мкг/мл и выше (р > 0,05).

По уровню антилизоцимной активности (до б мкг/мл; 6 мкг/мл и выше) и по наличию йнтиинтерферонового признака изучаемые штаммы были распределена на четыре группы. Первую (17 штаммов) ооота-вйли сальмонеллы боа антиинтврфероновой активности И о уролнем антилнзоцимного признака менее 6 мкг/мл. Во пторуй группу вошли 7 штаммов без ДИА, но о антйлизоцимннм фактором б мкг/мл И выше. Третью соотввияй 1н штаммов, облсдающих антиинтерфгроновой активностью и о уровнем АЛА менее б мкг/мл. Четвэртаг сформировалась из 3 штаммов, имеющих антиинтерфероногый признак и величину АЛА б мкг/мл и выше. .

Длитеяьнооть лихорадочного периода о температурой Э8°С и вы-ве была одинакова у больных 0 возбудителями воех раосматривазмых вариантов, а четвертой группе ово? признак отсутствовал, га иокя*"-чением тенденций к поякявиив у йольнтг о третьей группой базстарий з 1,5 раза по оравнениа со атоммами первой и второй груш Ср > 0505). Длительность рвотного периода такие не зависела о? вариантов микроорганизмов, за исхяичекиэм грвтьзй группы, где этот? показатель был йояьпе, чем у бояьикх первой к четвертой групп,, з 1,6 раза + О,*» против 1,5. £ 0,3 и 1,5 ¿0,5 суток), к чем зо второй. - з 2 разве Прк изучении характера стула у больных о сальмонеллами второй и трзтьей групп продолжатель! ость диарреи и

исчезновения патологичеоких примооей не отличалиоь между ообой (5,9 + 0,8 л 6,3 +0,4, р > 0,05). Прокращение нарушения отула у больных о бактериями без АИА и о АЛА менее 6 мкг/мл наступило на 1,0 и 1,4 сутки раньше по оравнени^ оо второй и третьой группами штаммов (4,£ + 0,5 против 5,9 + 0,8 и 6,3 + 0,4 суток, р > 0,05) и з 1,5 роза быстрее, чем у больных о микроорганизмами, обладающими АИА и величиной АЛА 6 мкг/мл и выше (4,9 + 0,5 против 7,3 + 2,0 суток, р > 0,05). Отмечен также более продолжительный период диарреи у больных с этим вариантом штаммов, по сравнению оо второй и третьей группами (р > 0,05). При изучении овязи санации организма больных о факторами пероиотонции установлено, что длитоль-нооть последней была максимальна у больных о четвертой группой штаммов (7,7 + 1,2 суток). Сроки бактериовыделения были менее продолжительны у больных оо штаммами второй и третьей групп (6,0 + 0,5 и 6,9 + 0,5 против 7,7 + 1,2 оуток, р > 0,05). Минимальной длительность выделения возбудителя была у оальмонеллеэных больных оо штаммами первой группы и соотавила 4,0 + 0»2 оуток, что было в 1,5 pasa меньше (р < 0,01) аналогичного показателя во второй и в 1,7 и 1,9 раза (р < 0,02) в третьей и четвертой группах.

Таким образом, наблюдаетоя овязь факторов п'ерсистенции о длительноотыо бактериовыделения у оальмонеллеэных больных, что, вероятно, обусловливает оольшую продолжительность оимлтомов поражения желудочно-кишечного тракта, а воледотвие этого, и периода нахождения на стационарном лечении.

Применение двухфакторного диопероионного анализа позволило подтвердить, что вариабельнооть длительности бактериовыделения у оальмонеллеэных бсльных с вероятностью > 99,99 % определяется вариабельностью факторов пероиотенции возбудителя и определить силу влияния на этот показатель антиинтерфоронового (46,9 '¿) и

антилизоцимного (16,6 %) факторов. Результаты наших исследований по овязи ЛИЛ с длительностью бактериовццелен^Я ооглисуятся с данными Е.В.Суриковой (.1990), в.Ю.Соколова (1990,? и Л.С.ьыковой и др. (1990) на примере клебоиелл, шигелл и уропатогенных кишечных палочек, аорроляция мовду уровнем АЛА и длительностью выделения возбудителя из макрооргпнизма такте представлена в исследованиях многих авторов на оальмонеллах (С.П.Михайлов, 196ь, 1У87; В.Г. Мещеряков, 1987), на шигеллах (К.£.Федосеева, 1986; Б.Е.Герасимов, 1986, 1987; А.Н.Волков и К.К.Федооеева, 1987; В.Ф.Прусс, 1987), на клебоиеллах (К.В.Сурикова, 7990; и др., 1987).

Оценивая фактический материал, на наш взгляд, нредставляют-оя наиоолее важными следующие положения:

во-первых, на клеточных моделях установлено, что онти^нтер-фероно'вый и интилизоцимный признаки сальмонелл спооооствуют их паразитировпнию внутри фагоцитарных и эпителиальных клеток хозяина за счет угнетения фагоцитарной реакции последних;

во-вторых, антиинтерфероновую активность оачьмонелл, вероятно, можно рассматривать в качестве фактора интоксикации при инфекции, что находит овое подтверждение в эксперименте (ци«патогенное действие сальмонелл на эпителиоциты человека) и клинике (связь антиинтерфероновой активнооти сальмонелл о тяжестью про-цеооа);

в-третьих, антиинтерфороновий признв! оальмонелл определяет длительность пребывания возбудителя в организме инфж фованного хозяина.

ВЫВОДИ

I. На клеточных «.оделпх выявлено угнетение фагоцитарной реакции в макрофогальном звена и в нойтро^илзх человека в отношении

сальмонелл о янтиингерфероновым и антилизоцимным факторами, по-о

давляющими катионные белки фагоцитирующих клеток.

2. При инфицировании изогенными штаммами сальмонелл перито-неяльных макрофагов мышей, нейтрофильных лейкоцитов и Нер-2 кле> ток показано выраженное внутрифагоцитарное и внутриэпителиально! размножение бактерий о антиинтерфороновым и антилизоцинным признаками.

* I

3. В экспериментальных условиях инфицирования эпителиоцито человека отмечен значительный цитотокоичеокий эффект внтиинтерф ронактивно"о штамма иэогйнной пары оальмонелл.

4. При воспроизведении экспериментальной сальмонеллезной и фекции на мышах, инфицированных изогенними штаммами, установлен более продолжительная персистенция сальмонелл о онтиинтерфероно вой активностью в печени и селезенке животных. Длительность бак териовыделения значительно усиливается при сочетании у возбудителя одновременно двух факторов: антиинтерферонового и антилизс

цИМНОГО.

Ь,-В условиях экспериментальной инфекции на мышах иммуно-"морфологические исследования селезенки показали, что реализаци; антиинтерферонового фактора сальмонелл происходит на уровне фагоцитарных клеток и не влияет но величину антителообразования ] инфицированных кивотных.

6. Клинико-бактериологичеокий анализ выделенных итаммов сальмонелл от больных показал зависимость длительности бактори выделения от наличия антиинтерферонового и антилизоцимного прг знаков у возбудителя. Установлено зависимость тяжести течения инфекции от наличия ангиингерфероновой активности сальмонелл.

Публикации по теме диосертации

I. Распространенность антиинтерферонового признака среди патогенных энтеробактёрий. // Молодые ученые - здравоохранении

Тез. докл. хи-й итог. конф. молодых ученых - медиков. - Оренбург, 1991. - С. ИО-Ш. Совместно с В.Ю.Соколовым.

2. Антиинтерфероновый признак сальмонелл при их внутриклеточном паразитировании // Молодые ученые - здравоохранению: Тез.докл. конф. молодых ученых - медиков. - Оренбург, 1992. - С. 104-106.

'}. Роль антиинтерфероновой активности сальмонелл в экспериментальной и клинической патологии // Молодые ученые - здравоохранению :Тез. докл. к 11-й конф. молодых ученых. - Оренбург, 1993. -С. 41-42.

4. Роль антиинтерфероновой активности сальмонелл в процессе фагоцитозе ;. -.'.трофильниг;: лейкоцитами человека: Тез. науч. рае . 1-й областной конференции молодых ученых и специалистов. - Оренбург, 1993. - С. 79-80.

5. Значение антиинтерфероновой активности сальмонелл в инфекционной патологии // Загрязнение окружающей среды. Проблемы токсикологии и эпидемиологии: Тез. докл. международной конференции. - Москва - Пермь, 1993. - С. 230-231. Совместно с-В.Ю.Соколовым.

6. В)ль антиинтёрферонового признака сальмонелл при их внутриклеточном паразитировании // Загрязнение окружающей среды. Проблемы токсикологии и эпидемиологии: Тез. докл. международной конференции. - Москва - Пермь, 1993. - С. 2Ь-216.

20.08.1003 г. Тираж 150. Заказ 45СЗ БКМР АДМИНИСТРАЦИИ СЕЛАСТИ