Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Электрофизиологическое исследование роли энкефалинов в деятельности метасимпатической нервной системы

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Чернышева, Ольга Николаевна

Введение.стр.

Глава I. Обзор литературы.стр.

1. Гистоанатомические и ультраструктурные особенности строения нервных элементов ганглиев энтеральной части метасимпатической нервной системы.стр.

2. Функциональная организация микроганглиев энтеральной части метасимпатической нервной системы.стр.

3. Интегративная функция метасимпатической нервной системы.стр.

Глава П. Материал и методы исследований.

1. Обоснование выбора объекта исследований.стр.

2. Метод регистрации, приготовление препарата.стр.

3. Описание комплекса регистрирующей и усилительной аппаратуры.с тр.

4. Статистическая обработка полученных результатов.стр.

Глава Ш. Результаты исследований.

1. Общая электрофизиологическая характеристика электрической и сократительной активности препарата.стр.

1.1. Спонтанная активность.стр.

1.2. Вызванная активность.стр.

1.3. Анализ действия холкно-и адреноблокаторов на протекание вызванных ответов.стр.

1.3.1. Атропин.стр.

1.3.2. Бензогексоний.стр.

1.3.3. Фентоламин и пропранолол.стр.

1.4. Действие тетродотоксина на протекание спонтанной активности.стр.

Заключительные замечания.стр.

2. Изменение электрической и сократительной активности под действием энкефалинов.стр.

2.1. Изменение спонтанной активности.стр.

2.I.I. Действие энкефалинов в растворе с налоксоном.стр.

32.1.2. Действие энкефалинов в растворе с тетродотоксином.стр.

Заключительные замечания.стр.

2.2. Изменение вызванной активности.стр.

2.2.1. Общая характеристика.стр.

2.2.2. Характеристика возбуждающего периода действия энкефалинов.стр.

2.2.3. Характеристика тормозного периода действия энкефалинов.стр.

Заключительные замечания.стр.

3. Фармакологический анализ действия энкефалинов.стр.

3.1. Изменение вызванной активности в растворе, содержащем налоксон.стр.

3.2. Изменение вызванной активности под действием энкефалинов в растворе, содержащем - и J> -адреноо локаторы.стр.

3.3. Изменение вызванной активности под действием энкефалинов в растворе, содержащем холиноблокаторы.стр.III

3.3.1. Атропин.стр. III

3.3.2. Вензогексоний.стр.

3.3.3. Атропин и бензогексоний.стр.

Заключительные замечания.стр.

4. Изменение электрической и сократительной активности под влиянием опиатного алкалоида морфина.стр.

4.1. Некоторые методические замечания.стр.

4.2. Анализ влияния морфина.стр.

Глава У. Обсуждение результатов.стр.

Выводы.стр.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Электрофизиологическое исследование роли энкефалинов в деятельности метасимпатической нервной системы"

Исследование автономной (вегетативной) нервной системы является традиционным и важнейшим направлением отечественной физиологии (И.П.Павлов, К.М.Быков, Л.А.Орбели, Д.Л.Сперанский, В.Н.Черниговский и др.).

Последнее десятилетие ознаменовалось многими разработками в этой области, среди них - создание концепции метасимпатической нервной системы. Ее нейрофизиологическому изучению на современном этапе отводится особое теоретическое и практическое значение (22, 23, 25, 26, 117, 179, 229).

Одним из принципиальных вопросов исследования метасимпатической нервной системы является определение функциональной организации ее клеточных ансамблей. Согласно существующим представлениям в метасимпатической системе насчитывается свыше 20 биологически активных веществ - медиаторов и кандидатов в медиаторы (26, 98, 117, 125, 229). К числу последних принадлежат опиоид-ные нейропептиды - энкефалины. Наличие специфических опиатных рецепторов на мембранах метасимпатических нейронов, присутствие и синтез в них энкефалинов, освобождение эндогенных опиатов во время электрической стимуляции или перистальтического рефлекса сегмента кишки - вот основные моменты, свидетельствующие о реальной возможности участия энкефалинов в местных рефлекторных реакциях метасимпатической нервной системы (79, 98, 105, 106, 144).

В современной научной литературе широко дискутируется вопрос о принадлежности энкефалинов к классам медиаторов или модуляторов. В этом отношении известно, что возможная роль опиоид-ных нейропептидов как периферических нейропередатчиков была постулирована на основании торможения энкефалинами активности метасимпатических нейронов (226). Однако, в последние годы, по мере накопления фактов, наравне с концепцией медиаторной роли энкефалинов развивается и гипотеза о синаптической модуляторной функции опиоидных нейропептидов (84, 119, 170).

В настоящее время отсутствует единое мнение о том, каким может быть значение энкефалинов в механизме функционирования ме-тасимпатической системы. Не существует также определенного ответа на вопрос, какова физиологическая роль опиоидных нейропептидов в регуляции моторной активности кишечного тракта - одной из основных функций, координируемых метасимпатической нервной системой. Учитывая чрезвычайную важность и значимость указанных аспектов в плане понимания управления функциями висцеральных органов, возникла необходимость исследования участия энкефалинов в изменении активности гладкомышечных элементов, иннервируемых ме-тасимпатическими структурами.

Интерес к этой проблеме обусловлен не только ее теоретическим, но и существенным практическим значением. Последнее связано с использованием в клинике препаратов опия и его аналогов, являющихся экзогенными лигандами опиатных рецепторов. Хотя опий и его алкалоиды используются в медицине уже давно, вопросы механизма их действия все еще недостаточно ясны. Адекватное их решение возможно на относительно простых натуральных моделях, которыми являются микроганглионарные сплетения стенок внутренних органов.

Основной целью настоящей работы явилось определение функциональной роли энкефалинов в механизме деятельности энтеральной части метасимпатической нервной системы. В связи с этим были поставлены конкретные задачи:

I. исследовать действие лей- и мет-энкефалинов на электрическую и сократительную активность нервно-мышечного препарата

6. миэнтеральное сплетение-гладкомьппечные элементы";

2. установить зависимость между характером действия энкефа-линов и их формой;

3. оценить влияние адрено- и холиноблокаторов, а также на-локсона (антагониста опиатных рецепторов) и тетродотоксина на эффекты энкефалинов;

4. выяснить вопрос о механизмах действия опиатного алкалоида морфина на электрическую и сократительную активность исследуемого препарата.

Полученные в результате исследования новые данные имеют значение для понимания механизмов регуляции активности гладкой мышцы кишки. В работе впервые показано, что возбуждающее действие лей- и мет-энкефалинов на активность нервно-мышечных препаратов "миэнтеральное сплетение-гладкомышечные элементы" связано с высвобождением эффекторных единиц от тормозного влияния моторных метасимпатических нейронов. Установление связи эффектов энкефалинов с холинергическими интер- и мотонейронами препарата позволило определить роль опиоидных нейропептидов в деятельности энте-ральной части метасимпатической нервной системы как модуляторов холинергической передачи. Показано, что в зависимости от формы энкефалинов (лей- или мет-) имеет место преобладание их эффектов во вставочном или моторном звене дуги местных рефлексов. При изучении эффектов опиатного алкалоида морфина удалось выяснить, что его спазмогенное действие на исследуемом препарате обусловлено в основном освобождением серотонина, прямо активирующего гладкую мыши,у. Помимо того, впервые изучены реакции, происходящие в автономном нервно-мышечном соединении под действием витального красителя метиленового синего.

Таким образом, изложенные в диссертации экспериментальные данные и вынесенные на защиту положения позволяют по-новому представить роль энкефалинов в механизме регуляции активности элементов метасимпатической нервной системы, что открывает дальнейшие перспективы для изучения нисходящего торможения ритмики гладкой мышцы пищеварительного тракта.

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Чернышева, Ольга Николаевна

выводы

1. В исследованиях на изолированных препаратах "миэнтераль-ное сплетение-кольцевой слой гладкой мышцы" слепой кишки морской свинки зарегистрировано наличие двух типов спонтанной активности - постоянного и периодического.

Лей- и мет-энкефалины (0,01-10,00 мкМ) вызывают на этих препаратах появление следующих эффектов: а) однофазное усиление спонтанной и постстимульной активности, более характерное для препаратов с ритмикой первого типа; б) двухфазное возбуждающе-тормозное изменение регистрируемых процессов, более характерное для препаратов с активностью второго типа; в) однофазное угнетение активности, зарегистрированное только у препаратов с периодической ритмикой при введении мет-энкефалина.

2. Возбуждающее действие энкефалинов характеризуется деполяризацией мембраны гладкомышечных клеток, увеличением частоты ЦЦ и амплитуды сокращений. Значения характеризующих этот эффект параметров, а также длительность возбуждающей фазы тем выше, чем выше концентрация (в пределах 0,01-10,00 мкМ) исследуемых нейропептидов.

В случаях двухфазного реагирования возбуждающий период сменяется тормозным, для которого характерны гиперполяризация гладкомышечных клеток, снижение частоты ЦЦ, частоты и амплитуды сокращений, общее расслабление препарата.

3. В опытах ;со стимуляцией нервных структур возбуждающее действие энкефалинов, которое проявляется в увеличении латентного периода и уменьшении амплитуды ТПСП, увеличении амплитуды и длительности фазы следовой деполяризации и соответствующего ей сокращения препарата, более выражено при низкочастотной стимуляции (5 и 10 Гц) и полностью отсутствует в условиях блокады холи-нергических структур.

4. Эффекты энкефалинов не проявляются при совместном применении с налоксоном и тетродотоксином и не связаны с адренерги-ческим звеном метасимпатической нервной системы.

5. Показано, что в зависимости от формы энкефалинов имеет место преобладание их эффектов во вставочном (лей-) или моторном (мет-) звене дуги местного рефлекса.

6. Усиление активности гладкомышечных элементов под действием энкефалинов связано с их влиянием на освобождение ацетилхолина из интернейронов, образующих синаптические контакты с тормозными мотонейронами. По-видимому, в данном случае функциональная роль энкефалинов состоит в ограничении действия тормозного эффек-торного механизма, регулирующего активность гладкой мышцы.

7. Действие морфина на исследуемом препарате состоит в появлении некоординированных сокращений и соответствующих им волн деполяризации мембраны гладкомышечных клеток. Этот эффект связан с освобождением серотонина, прямо активирующего гладкую мышцу.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Чернышева, Ольга Николаевна, Ленинград

1. Артеменко Д.П., Шуба М.Ф. Методика исследования электрических свойств нервных и мышечных волокон с помощью поверхностных внеклеточных электродов. Физиол.журн. АН УССР, 1964, т.10, №й, с.403-407.

2. Ашмарин И.П. Олигопептиды модуляторы памяти и боли (структура, свойства, вероятное эволюционное происхождение). -Журн.эволюц.биохим.и физиол., 1977, т.13, fiS, с.570-578.

3. Ашмарин И. П. Нейромедиаторы и нейромодуляторы. Эволюция соединений и эволюция гипотез. Журн.эволюц.биохим.и физиол., 1979, т.15, №3, с.278-282.

4. Булыгин И.А. Замыкательная и рецепторная функция вегетативных ганглиев. Минск: Наука и техника, 1964, с.226.

5. Булыгин И.А., Солтанов В.В. Электрофизиологический анализ висцеральных афферентных систем. Минск: Наука и техника, 1973, 334 с.

6. Бутягина Н.В., Гнетов А.В., Чернышева О.Н. Тетраметилтионин (метиленовый синий). Аспекты взаимодействия с нервной и мышечной тканью на мембранном уровне. Физиол.журн.СССР, 1984, т.70, Ш, с.508-510.

7. Ватаев С.И. Фоновая и вызванная активность нейронов ганглиев подслизистого сплетения тонкой кишки. Физиол.журн.СССР, 1978, т.64, Ш, с.213-219.

8. Влияние метиленового синего на передачу возбуждения в периферическом вегетативном синапсе. / Ноздрачев А.Д., Гнетов

9. А.В., Качалов Ю.П., Федорова Л.Д., Санин Г.Ю. Физиол.журн. СССР, 1976, т.62, №9, с.1300-1309.

10. Гнетов А.В. Особенности влияния метиленового голубого напериферические вегетативные структуры. Физиол.журн.СССР, 1976, т.62, №9, с.945-948.

11. Действие метиленового синего на спонтанные и вызванные реакции в автономном нервно-мышечном соединении./ Ноздрачев А.Д., Качалов Ю.П., Муравьев В.И., Чернышева О.Н. Физиол.журн. СССР, 1984, т.70, Р4, с.449-455.

12. Ильинский О.Б. Механорецепторы. Вопросы физиологии сенсорных систем. Л.: Наука, 1967, 82 с.

13. Итина Л.В. Рецепторная функция тонкой кишки. Минск: Наука и техника, 1972, 206 с.

14. Качалов Ю.П. Активность клеток энтеральных ганглиев с интак-тными и нарушенными межганглионарными связями. Физиол.журн. СССР, 1980, т.66, №7, с.962-969.

15. Качалов Ю.П., Гнетов А.В. Методика микроэлектродного исследования миэнтерального сплетения кишечника кошки. шизиол. журн.СССР, 1976, т.62, Р9, с.1398-1400.

16. Качалов Ю.П., Ноздрачев А.Д., Погорелов А.Г. Действие холинергических веществ на электрические процессы в ганглии энтеральной нервной системы. Физиол.журн.СССР, 1978, т.64, №11, с.1530-1539.

17. Климов П.К. Пептиды и пищеварительная система. Л. : Наука, 1983.272 с.

18. Климов П.К. Современное состояние исследований по физиологии пептидов. В кн.: Система мозговых и внемозговых пептидов: Тез.докладов. Л.: Наука, 1984, с.3-5.

19. Майоров В.Н. Морфология реактивных состояний вегетативного межнейронного синапса. Л.: Наука, 1969, 152 с.

20. Метасимпатическая нервная система. Некоторые структурнофункциональные аспекты. / Ноздрачев А.Д., Бутягина Н.В., Гнетов А.В., Качалов Ю.П. и соавт. В кн.: Тезисы научных сообщений Ш съезда физиологов Узбекистана. Ташкент, 1983, с.174.

21. Ноздрачев А.Д. Функциональная организация ганглиев миэнтерального сплетения.-Физиол.журн.СССР, 1977, т.63, N96, с.268-276.

22. Ноздрачев А.Д. Вегетативная рефлекторная дуга. Л.: Наука, 1978, 232 с.

23. Ноздрачев А. Д. О структурно-функциональной организации вегетативной (автономной) нервной системы. Физиол.журн.СССР, 1980, т.66, W, с.937-961.

24. Ноздрачев А. Д. Нейрофизиология ганглиев интрамуральных сплетений пищеварительного тракта. В кн.: Физиология вегетативной нервной системы. Л.: Наука, 1981, с.152-186.

25. Ноздрачев А.Д. Физиология вегетативной нервной системы. Л.: Медицина, 1983. 296 с.

26. Ноздрачев А.Д. Адренергические, холинергические, серотонерги-ческие, пуринергические и пептидергические нейроны метасимпатической нервной системы. Физиол.журн.СССР, 1984, т.70, №5, с.649-658.

27. Ноздрачев А.Д., Качалов Ю.П., Гнетов А.В., Спонтанная активность миэнтерального сплетения интактной тонкой кишки кролика. Физиол.журн.СССР, 1975, т.61, №5, с.725-730.

28. Ноздрачев А.Д., Качалов Ю.П., Гнетов А.В. Нейрональная активность миэнтерального сплетения толстой кишки. ДАН СССР, 1976, т.230, с.733-736.

29. Ноздрачев А.Д., Пушкарев Ю.П. Характеристика медиаторных превращений. JI.: Наука, 1980. 229 с.

30. Ноздрачев А.Д., Чернышева О.Н. Пептиды и синаптическая передача в метасимпатической нервной системе. В кн.: Система мозговых и внемозговых пептидов. :Тезисы докладов симпозиума. Л.: Наука, Ленингр. отд-ние, 1984, с.74-76.

31. Ноздрачев А.Д., Чернышева О.Н., Качалов Ю.П. Исследование действия энкефалинов на синаптические процессы в метасимпатической нервной системе. Физиол.журн.СССР, 1984, т.70, тг, с. 1629-1635.

32. Орлов Р.С. Физиология гладкой мускулатуры. М.: Медицина, 1967, 256 с.

33. Орлов Р.С. Синаптическая передача в вегетативных нервно-мышечных соединениях. В кн.: Физиология вегетативной нервной системы. Л.: Наука, 1981, с.129-151.

34. Орбели Л.А. Лекции по физиологии нервной системы. М.-Л.:Мед-гиз, 1938, 209 с.

35. Осиповский С.А., Полесская М.М. Молекулярные механизмы участия пептидов в функциях нервных клеток. Успехи физиол.наук, 1982, т.13, №4, с.74-99.

36. Прижизненное окрашивание препаратов нервной системы метиле-новым синим./ Самойлов М.О., Вшивцева В.В., Гнетов А.В., Самойлов В.О. В кн.: Прижизненная микроскопия нейрона. Л.: Наука, с.83-100.

37. Санин Г.3D. Нейрональная активность подслизистого сплетения пилорического и илеоцекального сфинктеров. Физиол.журн. СССР, 1978, т.64, W6, с.828-834.

38. Сперанский А.Д. Элементы построения теории медицины, M.-JI., 1935, 197 с.

39. Черниговский В.Н. Интероцепторы. М.: Медгиз, I960. 659 с.

40. Черниговский В.Н., Климов П.К., Ноздрачев А.Д., Вагусная афферентация и моторно-эвакуаторная деятельность желудка. -Физиол.журн.СССР, 1972, т.58, Г7, с.297-304.

41. Чернышева О.Н. Чувствительность нейронов миэнтерального сплетения к опиатному алкалоиду морфину. Физиол.журн.СССР, 1984, т.70, №4, с.443-448.

42. Чернышева О.Н. Механизмы участия энкефалинов в регуляции активности гладких мышц. В кн.: Тезисы докладов и сообщений Всесоюзной научной конференции "Механизмы нервной интеграции", Л., 1984, с.75.

43. Чернышева О.Н., Качалов 10.П. Механизмы действия энкефалинов в энтеральной части метасимпатической нервной системы. В кн.: Физиология медиаторов, периферический синапс: Тезисы докладов 5 Всесоюзного симпозиума. Казань, 1984, с.246-248.

44. Шабадаш А.Л. Теория и практика прижизненной окраски нервной ткани метиленовой синью. Горький, 1939, 165 с.

45. Шуба М.Ф. Физический электрон в гладкой мышце. Биофизика, 1961, т.4, №1, с.52-59.

46. Шуба М.Ф. Об электрических свойствах гладкой мышцы. Биофизика, 1965, т.10, №4, с.64-71.

47. A possible vagal adrenergic release of serotonin from enterochromaffin cells in the cat./Ahlman H., Lundberg J., Dahlstrom A., Kewenter J. Acta physiol.Scand., 1976, vol. 98, p. 366-375.

48. Abe Y., Tomita T. Cable properties of smooth muscle. J. Physiol., 1968, vol. 196, p. 87-100.

49. Abrahamsson H. Studies on the inhibitory nervous control of gastric motility. Acta physiol.Scand., 1973» Suppl. 390, p. 1-38.

50. Action of tetrodotoxin on spontaneous electrical activity of some smooth muscle preparations./Tonini M., Lecchini S., Frigo G., Crema A. Eur.J.Pharmacol., 1974, vol. 29, IT 2* p.236-240.

51. Akil H., Mayer D.J., Liebeskind £LC. Antagonism of stimulation-produced analgesia of naloxone, a narcotic antagonist. Science, 1976, vol. 191, p. 961-982.

52. Mbache N., Edwards J. Reversal of nicotine action on the intestine by atropine. Br.J.Pharmac.Chemother., 1951» vol. 6, p. 311-317.

53. Mbache IT., Verney H., Zar M.A. Evidence for the release of two atropine-re s is t ant spasm age ns from Auerbach's plexus. -J.Physiol.(bond.)., 1970, vol. 207, p. 761-782.

54. Ал immunohistochemical and radi©immunological study of the distribution of (met)-arid (leu5) -enkephalin in the gastrointestinal tract./Linnoila R.A., Di Augustine R.P., Miller R.J., Chang K.J., Cuatrecasas P. Neuroscience, 1978, vol. 3, p. 1187-1196.

55. Ал immunohistochemical study of the projections of somatostatin-containing neurons in the guinea-pig intestine./ Costa M., Purness J.В., Llewllyn-Smith I.J., Davies В., Oliver J. Neuroscience, 1980, vol. 5, p. 841-852.

56. Anderson R.K., Lund J.P., Puil E. Enkephalin and substance P effects related to trigeminal pain. Can,J.Physiol.

57. Pharmacol., 1973» vol. 56, p. 216-222.

58. Barker J.1». Physiological roles of peptides in the nervous system. In: Peptides in neurobiology, New York-London,

59. Bennett M.R., Burnstock G. Electrophysiology of the innervation of intestinal smooth muscle. In: Handbook of Physiology» Section 6, Alimentary Canal, Vol.IV, Ed.C.P.Code, Washington, D.C., Amer.Physiol.Soc., 1968, p. 1709-1732.

60. Bennett M.R., Rogers D.C. A study of the innervation of the taenia coli. J.Cell Biol., 1967, vol. 33, p. 573-596.

61. Bitar K.N., Saffouri В., Makhlouf G. Cholinergic and peptidergic receptors on isolated human smooth muscle cells.- Gastroenterology, 1982, vol. 82, p. 832-837.

62. Blanquet P., Bouier M., Gonella J. Effects of enkephalinsand, morphine on spontaneous electrical activity and junction potentials elicited by parasympathetic nerve stimulation in cat and rabbit colon. Br.J.Pharmacol., 1982, vol. 77, p. 4-19-429.

63. Bodansky M., Klausner Y.S., Said S.J. Biological activities of synthetic peptides corresponding to fragments of and to the entire sequence of the vasoactive intestinal peptide. -Proc.Natl.Acad.Sci.USA, 1973» vol. 70, p. 382-384.

64. Bozler E. Conduction, automaticity and tonus of visceral muscle. Experientia, 1948» vol. 4, p. 312-318.

65. Brownlee G.,Johnson E.S. The site of the 5-hydroxytryptamine receptor on the intramural nervous plexus of the guinea-pig isolated ileum. Br.J.Pharmacol.Chemother., 1963» vol. 21, p. 306-322.

66. Burks T.F., Long J.P. Release of intestinal 3-hydroxytrypt-amine by morphine and related agents. J.Pharmac.Exp.Ther., 1966, vol. 136, N 2, p. 267-276.

67. Burnstock G. Purinergic neurons. Pharmacol.Rev., 1972, vol. 3^» p. 309-381.

68. Burnstock G. Purinergic transmission. In: Handbook of Psychopharmacology.Ed.L.L.Iverson, S.H.Snyder, Hew York,

69. Plenum Publ.Corp., 1975» vol. 5, p. 131-194.

70. Burnstock G. Neurotransmitters and tropic factors in the autonomic system. J.Physiol., 1981» vol. 213, p. 1-35. 73* Burnstock G., Prosser C.L. Conduction in smooth muscle: comparative electrical properties. - Am.J.Physiol., 1960, vol. 199, p. 553-559.

71. Burnstock G., Straub E«W. A method for studying the effect of ions and drugs on the resting and action potentials in smooth muscle with external electrodes. J.Physiol., 1958» vol. 140, p. 156.

72. Bury R.W., Mashford M.L. A pharmacological investigation of synthetic substance P on the isolated guinea pig ileum.- Clin.Exp.Pharmacol.Physiol., 1977, vol. 4, p. 453-461.

73. Chalazonitis N. Effects of changes in pC02 and p02 on rhythmic potentials from giant neurone. Ann. N.T.Ac ad. Sci., 1963, vol. 109, И 2, p. 451-479.

74. Chang К.J., Cuatrecasas P. Multiple opiate receptors: enkephalin and morphine bound to receptors of different specificity. J.Biol.Chem., 1979, vol. 254, p.2610-2618.

75. Chang M.M., Ьеетал S.P., Niall H.D. Amino-acid sequence of substance P. Nature, New Biol., 1971, vol. 232, p. 86-87.

76. Clarke G.D., Davidson J.S. Vagal afferent nerve endings in the gastric antral mucosa of the rat. J.Physiol.(Lond.), 1974, vol. 239, р.41Р.

77. Cooke R., Burnstock G. The ultrastructure of Auerbach's plexus in the guinea-pig. 1.Neuronal elements. J.ITeuro-cytol., 1976, vol. 5, p. 171-194.

78. Cooke В., Burnstock G. The u^-trastructure of Auerbach*s plexus in the guinea-pig. 2. Non-neuronal elements. J. ITeurocytol., 1976, vol. 5» p« 195-206.

79. Correlation between morphology, electrophysiology arid птшипо histochemistry of anteric neurons ./Bornstein G.,1.es G., Costa M., Purness J.B. Proc.29 Congress Internat. Union Physiol.Sci., Sydney, Australia, 1983» vol. 15, p.523.06.

80. Costa M., Furness J.B. Slow contraction of the guinea-pig proximal colon in response to the stimulation of an unidentified type of nerve. Br.J.Pharmacol., 1972, vol. 4-5,p. 151P-152P.

81. Costa M., Furness J.B. The peristaltic reflex: an analysis of the nerve pathways and their pharmacology. Haunyn-Schmiedebergs Arch.Pharmacol., 1976, vol. 294, p. 47-60.

82. Costa M., Furness J.B. On the possibility that an indole-amine is a neurotransmitter in the gastrointestinal tract. Biochem.Pharmacol., 1979» vol. 28, p. 565-571.

83. Costa M., Furness J.B. The sites of action of 5-hydrox3r-tryptamine in nerve-muscle preparations from the guinea-pig small intestine and colon. Br.J.Pharmacol., 1979» vol. 65, p. 237-248.

84. Costa М., Furness J.В. The origins, pathways and terminations of neurons with VIP-like immunoreactivity in the guinea-pig small intestine. Neuroscience, 1983» vol. 8, N 4-, p. 665-676.

85. Сох B.M., Weinstock M. The effect of analgesic drugs on the release of acetylcholine from electrically stimulated guinea-^pig ileum. Br.J.Pharmacol., 1966, vol. 27, p. 8192.

86. Davies J., Duggan. A.W. Opiate agonist-antagonist effects on Renshaw cells and spinal interneurones. Nature, 1974-, vol. 250, p. 70-71.

87. Davison J.S. Response of single vagal afferent fibers tomechanical and chemical stimulation of the gastric and duodenal mucosa in cats. Q.J.Exp .Physiol., 1972, vol. 57, p. 4-05-4-16.

88. Distribution of enteric neurons showing immunore activityfor vasoactive intestinal polypeptide (VXP) in the guinea pig intestine. Neuroscience, 1980, vol. 5, p.81-91.

89. Dreyfus C.F., Sherman D.L., Gershon M.D. Intake of serotonin by intrinsic neurons of the myenteric plexus grown in organotypic tissue culture Brain Ees., 1977, vol.128,p. 109-123.

90. Duggan A«W. Enkephalins as transmitters in the central nervous system. Circ.Ees., 1980, vol. 46, p. J149-J153*

91. Effects of microiontophoretically applied methionine-enkephalin on single neurones in rat brain stem./Bradley P.В.,

92. Briggs J., GaytonE.J., Lambert L.A. Nature, 1976, vol. 261, p. 425-426.

93. Effects of opioids on single unit activity./Zieglans-berger W., French E., Siggins G.E., Bloom P. In: Characteristics and Functions of Opioids. Ed.J.M.Van Ree, L.Terenius, Amsterdam, Elsevier, 1978, p. 75-86.

94. Effects of short-time somatostatin infusion on the gastric and intestinal propulsion in humans. /Johansson C., Effendic S., Wisen 0., Uvnas-Wallensten E., Luft E.-Gastroenterology, 1978, vol. 13, p« 481-483.

95. Enkephalin-induced inhibition of cortical neurones and the lack of this effect in morphine tolerant/dependent rats. /Zieglgansberger W., Fry J.P., Hera A., Moroder L., Wunsch E. Brain Res., 1976, vol. 115, p. 160-164.

96. Enkephalin-like immunoreactivity in the human gastrointestinal tract. /Polak J.M., Sullivan S.N., Bloom S.R., Pacer P., Pearse A.G.E. Lancet, 1977, vol. 1, p. 972-974.

97. Evidence that adenosine triphosphate or a related nucleotide is the transmitter substance released by nonadrenergic inhibitory nerves in the gut./Burnstock G., Campbell G., Satchell D.G., Smythe A. Br.J.Pharmacol., 1970, vol. 40, p. 668.

98. Franco R., Costa M., Furness J.B. Evidence that axons containing substance P in the guinea-pig ileum are of intrinsic origin. Naynyn-Schmedeberg*s Arch.Pharmacol., 1979, vol. 307, p. 57-63.

99. Frederickson R.C.A. Enkephalin pentapeptides a review of current evidence for a physiological role in vertebrate neurotransmission. - Life Sci., 1977, vol. 21, p. 23-42.

100. Frederickson R.C.A., Uorris F.H. Enkephalin-induced depression of single neurons in brain areas with opiate receptors -Antagonism by naloxone. Science, 1976, vol. 194, p. 313317.

101. Furness J.B., Costa M. The adrenergic innervation of gastrointestinal tract. Ergebn.Physiol., 1974, vol. 69, p. 1-51.

102. Furness J.B., Costa M. Actions of somatostatin on excitatory and inhibitory nerves in the intestine. Eur.J.Pharmacol., 1979, vol. 56, p. 69-74.

103. Furness J.B., Costa M. Projection of intestinal neurons showing immunoreactivity for vasoactive intestinal polypeptide are consistent with these neurons being the enteric inhibitory neurons. Neurosci.Lett., 1979, vol. 15, p. 199204.

104. Furness J.B., Costa M. Types of nerves in the enteric nervous system. Neuroscience, 1980, vol. 5, p* 1-20.

105. Furness J.B., Costa M., Freeman C.G. Absence of tyrosine activity and dopamine /a- hydroxylase immunoreactivity in intrinsic nerves of the guinea-pig ileum. Neuroscience, 1979, vol. 4, p. 305-310.

106. Furness J.B., Costa M., Miller R.J. Distribution andprojections of nerves with enkephaline-like immuno re activity in guinea-pig small intestine. Neuroscience, 1983, vol. 8, p. 653-664.

107. Gabella G. Innervation of the intestinal muscular coat. -J.Neurocytol., 1972, vol. 1, p. 34-1-362.

108. Gabella G. A special muscle layer in the intestinal muscular coat. J.Physiol.(bond.), 1974-, vol. 24-0, p. 1-3P.

109. Gabella G. Structure of the Autonomic Nervous System. London, Chapman a. Hall, 1976.

110. GershonM.D., Erde S.M. The nervous system of the gut. -Gastroenterology, 1981, vol. 80, p. 1571-1594-.

111. Gintzler A.R., Mussacchio J.M. Interaction between seroto-nine and morphine in the guinea-pig ileum. J.Pharmacol. Exp.Ther., 1974-, vol. 189, p. 4-84-4-92.

112. Gintzler A.R., Rothman Ф.Р., GershonM.D. Ontogeny of opiate mechanisms in relation to the sequential development of neurons known to be components of the guinea-pig^ enteric nervous systeqi. Brain Res., 1980, vol. 189, p. 31-4-8.

113. Hager H., Tafuri W.L. Electron microscopic studies of the fine structure of the plexus myentericus (Auerbach) in the colon of the guinea-pig. Arch.Psychiatr.-Nervenkrank., 1959, Bd. 199, S. 437-471.

114. Harding R., Leek B.F. Gastroduodenal receptor response to chemical and mechanical stimuli, insrestigated by a single fibre technique. J.Physiol.(Lond.), 1972, vol. 222,p. 139-140P.

115. Hill R.G., Pepper C.M., Mitchell J.F. Depression of nociceptive and other neurones in the brain by iontophoretically applied met-enkephalins. Nature, 1976, vol. 262, p. 604-606.

116. Hirst G.D.S., Holman M.E., Spence J. Two types of neurons in the myenteric plexus of duodenum in the guinea-pig. -J.Physiol.(Lond.), 1974, vol. 236, p. 303-326.

117. Hirst G.P.S., McKirdy H.S. A nervous mechanism for descending inhibition in guinea-pig snail intestine. J.Physiol. (Lond.,), 1974, vol. 238, p. 129-143.

118. Hirst G.D.S., McKLrdy H.S. Presynaptic inhibition at mammalian peripheral synapse? Nature, 1974, vol. 250, p.430-431.

119. Hypothalamic polypeptide that inhibits the secretion of immunoreactive pituitary growth hormone./Brazeau P.,

120. Vale W., Burgus H., Ling N., Butcher M., Kivier J., Guille-min E. Science, 1973, vol. 179, p. 77-79.

121. Identification of two related pentapeptides from the brain with potent opiate agonist activity./Hughes J., Smith Т., Kosterlitz H.W., Fothergill L.A., Morgan B.A., Morris H.R. Nature, 1975, vol. 258, p. 577-579.

122. Iggo A. Gastric mucosal chemoreceptors with vagal afferent fibres in the cat. Q.J.Exp.Physiol., 1957, vol. 42,p. 398-409.

123. Immunohistochemical evidence for separate populations of somatostatin-containing and substance P-containing primary afferent neurons in the rat./ Hokfelt Т., Johansson 0., Luft В., Nilsson G., Arimura A. Neuroscience, 1976, vol. 1, p. 131-156.

124. Immunohistochemical studies of the enteric nervous system in tissue culture in sitji:localization of VIP, substance p and enkephalin immunore active nerves./Jessen K.E., Saffrey M.J., Van Noorden S., Bloom S.B., Polak J.M., Burnstock G.

125. Neuroscience, 1980, vol. 5, p. 1717-1735.

126. Imraunohistocheiaical studies using antibodies to leucine-enkephalin: initial observation on the nervous system in rat./Elde R., Hokfelt Т., Johansson 0., Terenius L. -Neuroscience, 1976, vol. 1, p.349-551.

127. Incorporation of labelled amino acids intothe enkephalins. /Sosa R.P., McKnight A.T., Hughes J., Kosterlitz H.W. -EEBS Lett., 1977, vol. 84, p. 195-198.

128. Inhibition of the smooth muscle of the taenia coli./ Burnstock G., Cau$)bell G., Bennett M., Holman M.E. Nature, 1963, vol. 200, N 4906, p. 581-582.

129. Innervation of the guinea-pig taenia coli: are there intrinsic inhibitory nerves which are distinct from sympathetic nerves./Burnstock G., СалфЪеП G., Bennett M., Holman M.E. -Int.J.Neuropharmacol., 1964, vol. 3, p. 163-166.

130. Ito Т., Kuriyama H. Membrane properties and inhibitory innervation of the circular muscle cells of guinea-pig caecum. -J.Physiol., 1973, vol. 231, p. 455-470.

131. Iversen L.L., Nicoll R.A., Vale W.W. Neurobiology of peptides. Neurosci.Res.Prog.Bull., 1978, vol. 16, p. 211-370.

132. Jessell T.M., Iversen L.L. Opiate analgesics inhibit substance P release from rat trigeminal nucleus. Nature, 1977, vol. 268, p. 54-9-551.

133. Katayama Y., North R.A. Does substance P mediate slow synaptic excitation within the myenteric plexus? Nature, 1978, vol. 274, p. 387-388.

134. Kosterlitz H.W., Lees G.M.Pharmacological analysis of intrinsic intestinal reflexes. Pharmac.Rev., 1964, vol. 16, p. 301-339.

135. Kosterlitz H., Waterfield A.A. In vitro models in the study of structure-activity relationships of narcotic analgesics. Ann.Rev.Pharmacol., 1975, vol. 15, p. 29-47.

136. Krulich L., Dhariwal A.P.S., McCann S.M. Stimulatory and inhibitory effects of purified hypothalamic extracts on growth hormone release from rat pituitary in vitro. -Endocrinology, 1968, vol. 83, p. 783-790.

137. Kuriyama H., Osa Т., Toida N. Nervous factors influencing the membrane activity of intestinal smooth muscle. J. Physiol.(Lond.), 1967, vol. 191, p. 251-270.

138. Ъаве B.P., Ehodin J.A.G. Cellular interrelationships and electrical activity in two types of smooth muscle. J. Ultrastruct.Res., 1964, vol. 10, p. 470-488.

139. Larsson L.-J.Ultrastructural localization of a new neuronal peptide (VIP). Histochemistry, 1977, vol. 54, p. 173-176.

140. Larsson L.J., Childers S., Snyder S.H. Met- and leu-enke-phalin immunore activity in separate neurones. Nature, 1979, vol. 282, p. 407-410.

141. Leu-enkephalin-like material in nerves and enterochromaffincells in the gut./Alumets J., Hakanson R., Sundler F., Chang K.-J. Histochemistry, 1978, vol. 56, p. 187-196.

142. Li C.H., Chung D. Isolation and structure of an untriakon-tapeptide with opiate activity from camel pituitary glands. Proc.Natl.Acad.Sci.USA, 1976, vol. 73, p. 1145-1148.

143. Localization of vasoactive intestinal polypeptide to central and peripheral neurons ./Lars son L., Fahrenkrug J., Schaffalitzky de Muckadell O.B., Sundler F., Hakanson R., Rehfeld J.F. Proc .Natl.Acad.Sci.USA, 1976, vol. 73,p. 3197-3200.

144. Manber L., Gershon M.D. A reciprocal adrenergic-cholinergic axoaxonic synapse in the mammalian gut. Am.J.Physiol., 1979, vol. 236, p. E 738-745.

145. Mei N. Mechanorecepteurs vagaux digestive chez le chat. -Exp.Brain Res., 1970, v. 11, p. 502-514.

146. Mei N. Vagal glucoreceptors in the small intestine of the cat. J.Physiol.(Lond.), 1978, vol. 282, p. 485-506.

147. Modulation of nicotinic receptors Ъу opiate receptor agonists in cultured adrenal chromaffin cells./Kumakura K., Karoum F., Guidotti A., Costa E. Nature, 1980, vol.285, p. 489-492.

148. Morita K., North R.A. Opiates and enkephalin reduce the excitability of neuronal processes. Neuroscience, 1981,vol. 6, p. 19^3-1951.

149. Neuronal actions of endorphin and enkephalin among brain regions: a comparative microiontophoretic study./ Nicoll R.A., Siggins G.R., Ling N., Bloom F.E., Guillemin R. -Proc.Natl.Acad.Sci.USA, 1977, vol. 74, p. 2584-2588.

150. Nishi S., North R.A. Intracellular recording from the myenteric plexus of the guinea-pig ileum. J.Physiol.(Lond.), 1973, v. 231, p. 471-491.

151. North R.A. Opiates, opioid peptides and single neurones. -Life Sci., 1979, vol. 24, N 17, p. 1527-1546.

152. North R.A. Electrophysiology of the enteric nervous system. Neuroscience, 1982, vol. 7, N 2, p. 315-325.

153. North R.A., Katayama Т., Williams J.T. On the mechanism and site of action of enkephalin on single myentericneurons.-- Brain Bes., 1979, vol. 165, p. 67-77.

154. Ohkawa H., Prosser O.L. Electrical activity in myenteric and submucous plexus of cat intestine. Am. J.Physiol., 1972, vol. 222, p. 1412-1419.

155. Ohkawa H., Prosser C.L. Functions of neurones in the enteric plexus of cat intestine. Am.J.Physiol., 1972, v. 222,p. 1420-1426.

156. Paintal A.S. Responses from mucosae mechanoreceptors in the small intestine of the cat. J.Physiol., 1957, v. 139, N 2, p. 353-368.

157. Pal ay S.L., Chan-Pal ay V. A guide to the synaptic analysis of the neuropil. Symp.Quant.Biol., 1975, vol. 40, p. 1-16.

158. Paton W.D.M. The action of morphine and related substancies on contraction and on acetylcholine output of coaxially-stimulated guinea-pig ileum. Br.J.Pharmacol., 1957,vol. 11, p. 119-127.

159. Paton W.D.M., Vizi E.S. The inhibitory action of noradrena-line on acetylcholine output by guinea-pig ileum longitudinal muscle strip. Br.J.Pharmacol., 1969, vol. 35, p. 10r28.

160. Pearse A.G.E., Polak J.M. Bifunctional reagents as vapour-and liquid-phase fixatives for immunohistochemistry. J. Histochem.Cytochem., 1975, vol. 7, p.179-186.

161. Peptide neurons in peripheral tissues including the urinary-tract : immunohistochemical studies./HokfeIt Т., Schulzberg M., Elde R., Nilsson G., Terenius L., Said S., Goldstein M. Acta phaxmac.tox., 1978, vol. 4-3, Suppl.2, p. 79-89.

162. Peptidergic neurones./Hokfelt Т., Johansson 0., Ljungdahl A., Lundberg J.M., Schultzberg M. Nature, 1980, vol. 284, N 5756, p. 515-521.

163. Piper P.J., Said S.I., Vane J.R. Effects on smooth muscle preparations of unidentified vasoactive peptides from intestine and lung. Nature, 1970, vol. 225, p. 1144-1146.

164. Polak J.M., Bishop A.E., Bloom S.R. Peptidergic neuronesat the main autonomic innervation of the gut. Gastroenterology, 1978, vol. 74, p. 1080

165. Projections of substance P neurons within the guinea-pig small intestine./Costa M., Furness J.В., Llewellyn-Smith J.J., Cuello A.C. Neuroscience, 1981, vol. 6, p. 411-424.

166. Randic M., Miletic V. Depressant actions of methionineenkephalin and somatostatin on cat dorsal horn neurones activated by noxious stimuli. Brain Res., 1973» vol. 152, p. 196-202.

167. Ranieri P., Mei N., Groussilat J. Les afferences splanchni-ques provenant des mechano recepteurs gastrointestinaux et peritoneaux. Exp.Brain Res., 1973, vol. 16, p. 276-290.199' Richardson K.C. Electron microscopic observations on

168. Auerbach's plexus in the rabbit with special reference to the problem of smooth muscle innervation. Am.J. Anat., 1958, vol. 103, p. 99-136.

169. Rintoul J.R. The comparative morphology of the enteric nerve plexuses. Ph.D.Thesis, University of St.Andrews, USA, 1960.

170. Schaumann W. Inhibition by morphine of the release of acetylcholine from the intestine of the guinea-pig. Br.J. Pharmacol., 1957, vol. 12, p. 115-118.

171. Smooth muscle. Eds.E.Bulbring, A.P.Brading, A.W.Jones, T.Tomita, Baltimore, Williams and Wilkins, Baltimore, 1970.

172. Snyder S.H. Brain peptides as neurotransmitters. Science, 1980, vol. 209, p. 976-983.

173. Somatostatin inhibits adrenergic and cholinergic neurotransmission in smooth muscle ./Cohen M.L., Rosing E., Wiley K.S., Slater J.H. Life Sci., 1978, vol. 23, p. 1659-1664.

174. Stampfli R. A new method for measuring membrane potentials with external electrodes. Experientia, 1954, vol. Ю,p. 508-509.

175. Szerb J.C. Correlation between acetylcholine release and neuronal activity in the guinea-pig ileum myenteric plexus; effect of morphine. Neuroscience, 1982, vol. 7, N 2, p. 327-340.

176. Szolcsanyi J., Bartho L. New type of nerve-mediated cholinergic contraction of the guinea-pig small intestine and its selective blocade by capsaicin. Naunyn-Schmiedebergers Arch.Pharmacol., 1978, vol. 305, p. 83-90.

177. Szurszewski J.H. Recording of electrical activity of smooth muscle by means of the sucrose gap. Proc.4th Intern.Symp. on Gastrointestinal Motility, Bauff, Alberta, Canada, 1973, p. 409-425.

178. Szurszewski J.H., Heems W.A. A study of peripheral input to and its control by postganglionic neurones of the inferiormesenteric ganglion. J.Physiol.(Lond.), 1976, vol. 256, p. 541-556.

179. Tafuri W.L. Auerbach*s plexus in the guinea-pig. I.A quantitative study of the ganglia and nerve cells in the ileum, caecum and colon. Acta Anat., 1957, vol. 31, p. 522-530.

180. Taxi J. Etude, au microscope electronique, de 1 innervation du muscle lisse intestinal comparee a'mammiferes. Arch, biol.(liege), 1964, vol. 75, p. 301-328.

181. The effects of morphine and nalorphine-like drugs in the nondependent chronic spinal dog. /Martin W.R., Eades G.G., Thompson J.A., Huppler K.E., Gilbert P.E. - J.Pharmacol. Exp.Ther., 1976, vol. 197, N 5, p. 517-532.

182. Tomita T. Membrane capacity and resistance of mammalian smooth muscle. J.Theor.Biol., 1966, vol. 12, p. 216-227.

183. Tomita T. Electrical properties of mammalian smooth muscle. -In: Smooth Muscle.Ed.E.Bulbring , A.F.Brading, A.W.Jones, T.Tomita, Baltimore, Williams a.Wilkins, 1970, p. 197-243.

184. Van Nueten J.M., Janssen P.A.J., Fontaine J. Unexpected reversal effects of naloxone on the guinea-pig ileum. Life Sci., 1976, vol. 18, p. 803-810.

185. VIP, enkephalin-, substance P- and somatostatin-like immunore activity intrinsic to the intestine: immunohistochemical evidence from organotypic tissue cultures./ Schultzberg M.,

186. Dreyfus G.F., GershonM.D., Hokfelt Т., JiJlcLe R.P., Nilsson G., Said G., Goldstein M. Brain Res., 1978, vol. 155» p. 239-248.

187. VIP innervation of sphinkters ./Alumets J., Hakanson R., Sundler S1., Uddman R. Scand.J.Gastroenterol., 1978, vol. 13, Suppl.49, p. 6.

188. V/aterfield A.A., Kosterlitz H.W. Stereospecific increase by narcotic antagonists of evoked acetylcholine output in guinea-pig ileum. Life Sci., 1975, vol.16, p. 1787-1792.

189. Werz M.A., Macdonald R.L. Opioid peptides with differential affinity for Mu and Delta receptors decrease sensory neuron calcium-dependent action potentials. J.Pharmacol .Exp. Ther., 1983, vol. 227, N 2, p. 394-403.

190. Williams J.Т., North R.A. Inhibition of firing of myenteric neurons by somatostatin. Brain Res., 1978, vol. 155, Р» 165-168.

191. Williams J.T., North R.A. Effects of endorphins on single myenteric neurons. Brain Res., 1979, vol. 165, p. 57-65.

192. Wood J.D. Excitation of intestinal muscle by atropine,tetro-dotoxin, and xylocaine. Am.J.Physiol., 1972, vol. 222,p. 118.

193. Wood J.D. Neurophysiology of Auerbachfs plexus and control of intestinal motility. Physiol.Rev., 1975, vol. 55, p. 307-324.

194. Wood J.D. Physiology of the enteric nervous system.- In: Physiology of the Gastrointestinal Tract .Ed.L.R.Johnson, New York, Raven Press, 1981.

195. Wood J.D., Rose B.A., Jackson M.H. Effects of nicotine on rebound excitation of guinea-pig small intestine. J. Pharmacol .Exp.Ther., 1976, vol. 196, p. 71-79»

196. Yeu-Nung Wang, Church A.C., Wyatt R.J. Localization of met^б 7enk-Arg -Phe'-like immunoreactivity in the rat gastrointestinal tract.- Neurosci.Lett., 1984, vol.54, p. 319-324.

197. Zieglgansberger W., Tullock J.F. The effects of methionine and leucine enkephalin on spinal neurones of the cat. -Brain Res., 1979, vol. 167, p. 53-64.