Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Экологические аспекты производства и переработки стевии
ВАК РФ 03.00.16, Экология
Автореферат диссертации по теме "Экологические аспекты производства и переработки стевии"
На правах рукописи
Подпоринова Галина Константиновна
ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ПРОИЗВОДСТВА И ПЕРЕРАБОТКИ СТЕВИИ
Специальность: 03.00.16- экология
АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора сельскохозяйственных наук
Воронеж - 2006 г.
Диссертационная работа выполнена в Государственном научном учреждении «Всероссийский научно-исследовательский институт сахарной свеклы и сахара им. А.Л. Мазлумова (п. Ралюнь, Воронежской обл.)
Научный консультант: доктор технических наук,
профессор Полянский Константин Константинович
Официальные оппоненты: доктор биологических наук,
профессор Никулин Анатолий Владимирович
доктор биологических наук,
профессор Буторина Анастасия Константиновна
доктор сельскохозяйственных наук, профессор, Заслуженный деятель науки РФ Стифеев Анатолий Иванович
Ведущая организация: ФГОУ ВПО «Воронежский государственный педагогический университет»
Защита диссертации состоится 22 июня 2006 года в 14 часов на заседании диссертационного совета Д.220.010.06 ФГОУ ВПО «Воронежский государственный аграрный университет имени К.Д. Глинки» по адресу: 394087, г. Воронеж, ул. Мичурина, 1. Факс: (4732) 53-81-39
С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке Воронежского государственного аграрного университета имени К.Д. Глинки
Автореферат разослан 20 мая 2006 г.
Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат сельскохозяйственных
наук, доцент
О. М. Кольцова
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность темы. Создавшиеся критические ситуации в области экологии, питания и здоровья жителей нашей планеты сдерживают устойчивое развитие человечества и представляют реальную угрозу для среды обитания, источников питания и здоровья людей. Эффективное и безопасное решение актуальнейших экологических, медицинских и многочисленных продовольственных проблем является важнейшей жизненно необходимой задачей для всего мирового сообщества.
В настоящее время в России, как и во многих странах мира, вопросы здорового питания возведены в ранг государственной политики («Концепцией государственной политики в области здорового питания населения Российской Федерации до 2005 года»). Большое значение придается созданию технологической основы для производства качественно новых продуктов, не только удовлетворяющих физиологические потребности организма человека в пищевых веществах и энергии, но и выполняющих профилактические и лечебные цели (Ермилова и др., 2000).
В разрезе данной проблемы ведущую роль приобретает комплексное использование нетрадиционных растительных ресурсов, имеющих низкую калорийную эффективность, но обладающих эколого-протекторными качествами. К таким культурам относится растение, родиной которого является Южный Парагвай, - стевия, содержащее в своем составе дитерпеновые гликозиды, обладающие высокой степенью сладости при практически нулевой калорийности. Кроме того, стевия является общепризнанными источниками флавоноидов, дефицит которых испытывает население России при неполноценном питании. Высокая биологическая активность флавоноидов обусловлена наличием анти-оксидантных свойств и, как следствие, широким спектром фармакологического действия.
Необходимо отметить, что в настоящий период в ряде стран осуществляется интенсивное изучение биологических особенностей, роста и развития сте-вии в естественных и искусственных условиях, биохимизма синтеза гликозидов и технологических приемов их выделения, возможностей промышленного использования гликозидов в пищевых отраслях. Широкое распространение стевии в нашей стране затрудняется недостаточной изученностью этой культуры в биологическом, физиолого-биохимическом и экологическом плане. Чрезвычайно важно выявление условий, определяющих ценные биологические особенности для получения экологически чистого растительного сырья, с целью разработки элементов технологии переработки стевии, которые необходимы для успешного введения ее в культуру.
В связи с этим постановка проблемы в направлении формирования экологических аспектов производства, переработки, оценки качества и использования подсластителя из стевии весьма актуальна и своевременна.
Целью исследований было выявить элементы экологически целесообразной технологии возделывания стевии, способствующие получению экологически чистого растительного сырья, установить экологические аспею-ы и физико-
химические закономерности процессов получения подсластителя из стевии заданного уровня качества и оптимальные технологические решения и рецептурные составы функциональных пищевых продуктов на основе стевиозида, обладающие эколого-протекторным действием на организм человека.
Для реализации данной проблемы было предусмотрено решение следующих задач исследований:
1. Изучить особенности формирования экологически чистого сырья стевии при разных условиях минерального питания и применении физиологически активных веществ.
2. Определить химический состав сухих листьев стевии.
3. Установить оптимальные параметры экологически целесообразных процессов получения подсластителя из стевии; разработать физико-химические основы экотехнологий подсластителя заданного уровня качества и научно обосновать выбор оптимальных режимов.
4. Разработать экологически безопасные способ извлечения и промышленную технологию получения биологически активных концентратов стевии, обеспечивающие предотвращение загрязнения природной среды и минимизацию воздействия производства на окружающие экосистемы.
5. Разработать экологически безопасную методику экспресс-контроля качества стевиозидсодержащих продуктов и сложнорецептурных композиций, содержащих подсластитель из стевии.
6. Оптимизировать рецептурный состав и способы производства пищевых продуктов на основе стевии.
7. Провести маркетинговые исследования, определить перспективные направления использования подсластителя из стевии. Оценить экономическую эффективность, экологическую безопасность и социальную значимость разработанных технологий.
Теоретическая значимость и новизна исследований. Впервые показано, что выращивание стевии в ЦЧР с использованием элементов минерального питания в дозах ЫРК (45 — 90) позволяет получить экологически чистое растительное сырье, характеризующиеся низким содержанием вредных веществ, токсических элементов и радионуклидов, гораздо меньшим допустимого уровня для БАД растительного происхождения. Тяжелые металлы, вносимые с удобрениями, не оказывают существенного отрицательного влияния на развитие растений стевии, не снижают урожайности и содержания дитерпеновых гликозидов, не изменяют аминокислотный состав. Оригинальный экспериментальный материал по экологическим аспектам получения растительного сырья стевии впервые рассмотрен и описан с позиций минимизации применяемых при возделывании норм элементов минерального питания в сочетании с ростовыми веществами нового поколения, влияющими на сохранение ценного комплекса органических субстанций данного растения.
Получены новые данные по содержанию хлорогеновой кислоты, характеризующей высокую антиоксидантную активность стевии и продуктов ее переработки, что определяет перспективность использования стевиозида в виде биологически активной добавки в пищевых продуктах функционального назна-
чения. Проведенные исследования углубляют теоретические представления о метаболических процессах, происходящих в растении.
Впервые в России разработаны экологически безопасные технологические приемы переработки стевии, включающие получение растительного сырья, извлечение (экстрагирование) гликозидов, очистку и сушку, обеспечивающие сохранение биологически активных компонентов. Предложенное технологическое решение предотвращает загрязнения природной среды.
Уточнены определенные детали и теоретически обоснованы физико-химические основы процесса экстрагирования гликозидов из растительного сырья стевии водным экстрагентом. Установлены закономерности безреагентных приемов удаления балластных веществ из растворов стевии с применением мембранных, электрохимических и ионообменных процессов. Выявлены и теоретически обоснованы основные технологические параметры вакуум-сублимационного обезвоживания концентрата стевии. Данные исследования явились научно-методической основой оптимизации технологических процессов, они расширяют и углубляют теоретические представления об экологических аспектах переработки стевии.
Предложен метод контроля стевиозида на основе высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), позволяющий усовершенствовать аналитический процесс для растительного сырья и продуктов его переработки в части точности (повышается на 84%), воспроизводимости (возрастает до 96%) и времени определений (сокращается на 80%) при одновременном повышении экологического рейтинга. Впервые показано, что метод главных компонент, адаптированный применительно к стевии и продуктам ее переработки, является теоретической основой оптимизации статистических исследований и определения основных идентификационных признаков многокомпонентных анализируемых объектов.
Созданные оригинальные рецептуры функциональных пищевых продуктов на основе стевии (молочные продукты, соки, напитки), расширили ассортимент продуктов питания для детерминированных групп населения.
Разработана экологически сбалансированная система производства и переработки стевии, способствующая решению одной из проблем экологического аспекта применения БАД растительного происхождения, гармонизации микроэкологического статуса человеческого организма и минимизации негативного воздействия стрессовых факторов окружающей среды.
Практическая значимость заключается в решении народнохозяйственной задачи введения стевии в ареал возделываемых сельскохозяйственных культур ЦЧР, что позволит использовать это ценное растение в производстве пищевых продуктов и лекарственных препаратов.
Несомненное практическое значение имеют разработанные экологически безопасные технологии производства растительного сырья стевии и получения биологически активных концентратов стевии. Предложенный способ получения соответствует современным требованиям «чистых технологий»: в качестве сырья используются растения стевии, выращенные без применения средств химизации при оптимальном фоне минерального питания, в качестве экстрагента — экологически безопасный водный экстрагент, обороты экстрагента и воды на-
5
сосов технологически зациклованы. Данный способ относится к практическим решениям нутрициологии (экологии человека) и не требует значительных затрат, являясь универсальным и комплексным.
Предложенная методика экспресс-определения флавоноидов применима не только для пофазного контроля качества продуктов переработки стевии, но и для идентификации сложнорецепурных продуктов, содержащих антиоксидан-ты.
Разработанный метод определения стевиозида на основе высокоэффективной жидкостной хроматографии может найти применение в качестве контрольного при выращивании стевии и ее первичной и вторичной переработке.
Разработанные рецептуры низкокалорийных диетических молочных продуктов, соков, напитков могут быть рекомендованы для использования в пищевой и молочной промышленности.
Метод главных компонент (разновидность корреляционного анализа) дает статистический паспорт вещества и может найти применение в биологических анализах при обработке данных по выделению наиболее значимых показателей.
Результаты исследования могут быть использованы в учебном процессе по экологическим дисциплинам в высших и среднеспециальных учебных заведениях аграрного профиля.
Обоснованность и достоверность результатов исследований обеспечена наличием многолетних данных, полученных и обработанных с помощью современных методов учета, анализа и пакета программ Microsoft Exel ХР, Statis-tica v. 6.0.
Положения диссертации, выносимые па защиту:
- химический состав и биологические особенности, определяющие значимость стевии для интродукции в ЦЧР как ценного источника биологически активного, экологически безопасного растительного сырья, для выработки подсластителя;
- химический состав и содержание дитерпеновых гликозидов в листьях стевии, свидетельствующие о ценных биологически активных свойствах и позволяющие использовать экологически обоснованное применение низких доз удобрений для обеспечения максимального уровня эколого-продукционного потенциала культуры и получения экологически безопасного растительного сырья для выработки подсластителя;
- физико-химические основы процесса экстрагирования дитерпеновых гликозидов, способствующие организации процесса с применением экологически безвредного экстрагента и эффективным использованием отходов переработки;
- физико-химические особенности, результаты экспериментальных исследований и анализ закономерностей процессов реагентной и безреагентной очистки гликозидсодержащих растворов, обеспечивающие высокий эффект очистки при одновременной минимизации загрязнения окружающей среды;
- физико-химические свойства концентрата из стевии, характеризующие его как перспективный объект сушки. Результаты экспериментальных
исследований и анализ закономерностей процесса обезвоживания концентрата стевии, способствующие оптимальной организации процесса при минимальных потерях целевого компонента и получении продукта с выраженными эколого-пищевыми свойствами;
- экологически безопасная технология переработки и научное обоснование выбора оптимальных режимов, являющаяся основой получения подсластителя из стевии заданного уровня качества при одновременной экологической безопасности производства;
- результаты маркетинговых исследований, экономической, экологической и социальной оценки разработанных технологий, прогнозирующие динамичный рост потребления подсластителя из стевии;
- комплексная экологически сбалансированная система, реализующая все стадии производства, оценки качества и использования подсластителя из стевии максимально эффективно при высоком рейтинге экологической безопасности.
Личный вклад соискателя. Работа основана на результатах 15-летних разносторонних полевых и лабораторных исследований, выполненных лично автором, а также под его руководством и при непосредственном участии, в соответствии с целевыми научными программами, координируемыми Министерством сельского хозяйства Российской Федерации, отраслевой научно-технической программой «Сахароносные растения и сахар», в соответствии с планом НИР ВНИИСС РАСХН 11.07. «Разработать способы извлечения и очистки различных видов сахаристых веществ и натуральных подсластителей с целью комплексной переработки растительного сырья, снижения энергоматериа-лаемкости производства при высокой экологической безопасности», ФГОУ ВПО «Воронежский госагроуниверситет имени К.Д.Глинки». Полностью материалы полевых и лабораторных экспериментальных работ изложены в заключительных отчетах ВНИИСС за 1993 -2005 годы.
Апробация работы. Основные положения диссертационной работы докладывались и получили положительную оценку на: Международных симпозиумах и научных конференциях: «Новые и нетрадиционные растения и перспективы их практического использования» (2003, 2005 гг., г. Пущино); «Экологические аспекты интенсификации сельскохозяйственного производства» (2002 г., г. Пенза); «Проблемы современного растениеводства» (2002 г., г. Пенза); «Медицинской ботаники» (1997 г., г. Киев), «Интродукция нетрадиционных и редких растений» (2004 г., п. Персиановский); Всероссийских научно-практические конференции: «Молодые ученые и специалисты сельскому хозяйству» (1997 г., г. Курск); «Резервы стабилизации аграрного производства» (1996 г., г. Воронеж); «Рациональное использование ресурсного потенциала в агропромышленном комплексе» (1998 г., г. Воронеж); «Аграрная наука в начале XXÍ века» (2001 г., г. Воронеж), «Актуальные проблемы сельскохозяйственной биотехнологии» (2004г., г. Воронеж), «Прогрессивные технологии и оборудование для пищевой промышленности» (2004г., г. Воронеж), «Пути и формы совершенствования фармацевтического образования» (2005 г., г. Воронеж), «Вклад молодых ученых в решение проблем аграрной науки» (2005 г., г. Воро-
неж), «И. В. Мичурин и агротехнические аспекты производства плодов и овощей на современном этапе» (2005 г., г. Мичуринск), «Проблемы рационального использования растительных ресурсов» (2005 г., г. Владикавказ); координационных совещаниях НИИ и вузов Центрально-Черноземного региона: (2000-2005 гг., Воронеж); конференциях профессорско-преподавательского состава, научных сотрудников и аспирантов Воронежского ГАУ им. К.Д.Глинки (2000 — 2005 гг.).
Публикации. Материалы диссертационной работы опубликованы в 2 монографиях, а также в 42 научных и научно-методических работах, опубликованных в различных изданиях, в том числе 20 в изданиях, реферируемых ВАК РФ. Получены патенты на изобретения: Патент № 2005117463/13(019889) 07.06.2005 г. и Патент № 2005117464/13(019890) 07.06.2005 г.
Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, 7 глав, выводов и предложений по практическому использованию результатов исследований, она изложена на 455 страницах машинописного текста, содержит 77 таблиц, 66 рисунков, 6 приложений, список литературы из 664 наименований, в том числе 179 иностранных авторов.
СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ
1 АНАЛИЗ СОСТОЯНИЯ ПРОБЛЕМЫ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЙ
Дан анализ отечественных и зарубежных источников литературы, посвященных перспективности использования стевии в биохимической коррекции негативного воздействия стрессовых факторов окружающей среды; научно-практическому значению и современному состоянию экологических исследований стевии; физиолого-биохимическим свойствам подсластителя из стевии и его влиянию на организм человека; экологическим аспектам получения, оценки качества и использования подсластителя из стевии.
Делается вывод о недостаточной изученности проблемы и обосновывается цель исследований. Подчеркнуто, что, несмотря на большое количество публикаций, они разрознены и часто не глубоки. Сравнительно короткий путь, пройденный наукой в данном направлении, объясняет наличие многих нерешенных задач и отдельных вопросов, частичная реализация которых представлена в настоящей квалификационной работе.
2 УСЛОВИЯ, ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
Почветю-климатические условия. Дана почвенно-климатическая характеристика лесостепной зоны Центрально-Черноземного региона, в которую ин-тродуцируется стевия, и на основе этих данных делается вывод о лимитирующих абиотических факторах при возделывании этой культуры. Недостаток в тепле обуславливает возделывание стевии как однолетней культуры.
Объекты исследований. Объектом исследований явилась новая культура - стевия (8ТЕУ1А ЛЕВАиШАКА (ВЕЯТОЫ!). В работе использовали растения стевии сорта «Рамонская сластена» и растения различных форм плоидности, полученные отделом биотехнологии ВНИИСС имени А.Л. Мазлумова.
Рис. 1 Схема проведения исследований 9
Для сравнения в качестве контрольных образцов исследовали дикую форму стевии. Помимо того, объектами исследований служили экстракты, концентраты и порошкообразные препараты стевии на разных этапах технологического цикла, пищевые продукты и кормовые добавки на основе стевии и продуктов ее переработки, отходы переработки стевии.
Методы и техника исследований. Основой диссертационной работы явились полевые опыты (опыт - проба, однофакторный), наблюдения, учеты и лабораторные исследования. Предшественником в полевых опытах была озимая пшеница. Схема посадки 70 х 25 см. Опыт закладывался методом организованных повторений в 4-х кратной повторности. Учетная площадь делянки 10,5 м2.
Исследовательскую работу выполняли по общепринятым методикам:
В опытах по изучению отзывчивости стевии на обработку регуляторами роста в сочетании с удобрениями, удобрения вносились весной под культивацию согласно схеме опыта. Повторность опыта - трехкратная. В контрольные варианты удобрения не вносили. Растения опрыскивали регуляторами роста с помощью ранцевого опрыскивателя через 2 недели после высадки рассады. Почва опытного участка - чернозем выщелоченный тяжелосуглинистый с содержанием гумуса - 4,5 - 5,0 %, степенью насыщенности основаниями 84 - 88 %. Учетная площадь делянки 10,5 мг. Схема размещения растений 70 х 25 см (57,1 тыс. шт/га). Агротехника в полевых опытах была направлена на создание благоприятных условий для роста и развития растений стевии. Площадь листьев определяли методом отпечатков на бумаге путем взвешивания массы бумаги, соответствующей площади листьев (Третьяков, Карнаухов, Паничкин и др., 1990). Определение хлорофилла осуществлялось после экстракции его из листьев этанолом на спектрофотометре "Спекол" (Баславская, Трубецкова, 1964). Содержание свободных аминокислот в листьях и стеблях стевии - на автоматическом анализаторе Нс1-1200Е (Плешков, 1987; Рядчиков, 1978). Углеводный состав - методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (Рудаков, Федоров, Полянский, 2004). Для изучения антиоксидантной активности использовали электрохимический прибор Яуза-ААА-01 (Яшин, Яшин, Пахомов, 2003). Определение хлорогеновой кислоты осуществляли колориметрическим методом (Храмов и Комарова, 1999). Содержание КРК - по Гинзбургу: азота -ГОСТ 26213-91, фосфора - ГОСТ - 26636-72, калия - ГОСТ 26421 - 62. Содержание нитратного азота - по Починку-Гриссу, ГОСТ 26217-90. Выявление и оценка содержания вредных веществ и радиологические исследования проводили в соответствии со следующими НТД: ГОСТ 26932-86 (свинец), ГОСТ 26930-86 (мышьяк), ГОСТ 26927-86 (ртуть), ГОСТ 26933-86 (кадмий), МУ 2142-80 (ГХЦГ, ДЦЕ, ДДТ), МУК 2.6.1.717-98 (цезий-137, сгронций-90). Содержание микроэлементов - в соответствии с Методическими указаниями по определению тяжелых металлов в кормах и растениях (1992).
При изучении процессов экстракции, очистки и сушки использованы стандартные и общепринятые методы исследований (Инихов, Брио, 1971, По-сыпайко и др., 1989, Полянский и др., 1976, Харитонов и др., 2000). Массовую долю сухих веществ - рефрактометрически по ГОСТ 24908-84 на рефрактометре ИЬ-2 и методом высушивания по ГОСТ 3626-73. Общий и небелковый азот -
10
методом Къельдаля по ГОСТ 23327-98. Массовую долю золы - сжиганием при 400 °С с последующим выщелачиванием обугленной массы и высушиванием до постоянного веса при 105° С по ОСТ 4963 - 85. Массовую долю микро- и макроэлементов - на пламенном фотометре FLAPHO-4 (Германия) и эмиссионном спектрометре JCP/Gtl 3580 Швейцария). Активную кислотность (pH) - потен-циометрически по ГОСТ 26781-85 на иономере рН-150. Температуру - термометрически, использовались термометры по ГОСТ 9177-74. Плотность - арео-метрически, метод и аппаратура по ГОСТ 3625-84, -ареометр по ГОСТ 1848181. Удельное вращение - поляриметрически на сахариметре СУ-4 и поляриметре СМ-3. Оптическую плотность, спектральные характеристики - на фотоэлек-троколориметре ФЭК-56М, спектрофотометре СФ-2624, ИК-анализаторе модели 4250 (США). Электропроводность - кондуктометрически по ГОСТ 22171-83 на кондуктометре ОК-2 (Венгрия). Динамическую вязкость - на реовискозимет-ре Гепплера и ротационном вискозиметре Реотест-2 (Германия). Точку замерзания - на криоскопе «Crio Star» (Германия). Внешний вид, консистенцию, цвет, вкус, запах - органолептически. Индекс растворимости - по ГОСТ 30305.4.95. Определение микробиологических показателей - по ГОСТ 9225-84.
ГЛАВА 3 РАЗРАБОТКА ЭЛЕМЕНТОВ ЭКОЛОГИЧЕСКИ ЦЕЛЕСООБРАЗНОЙ ТЕХНОЛОГИИ ВОЗДЕЛЫВАНИЯ СТЕВИИ С ЦЕЛЬЮ ПОЛУЧЕНИЯ ЭКОЛОГИЧЕСКИ БЕЗОПАСНОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ 3.1. Изучение химического состава растительного сырья стевии Одним из основных факторов, определяющих качество стевии, как сырья для потенциальных переработчиков, является содержание дитерпеновых глико-зидов (Подпоринова Г.К., Агеев В.В., Апасов И.В., 2005).
Скрининговые исследования содержания стевиол-гликозилов в селекционных образцах стевии, полученных в отделе биотехнологии ВНИИСС, проводились разработанным экспресс-методом, основанным на применении ВЭЖХ для определения гликозидного скора анализируемых объектов (Подпоринова Г.К., Верзилина Н.Д.,2005).
Таблица 1 - Содержание стевиозида в селекционных образцах стевии различной плоидности (2003 — 2005 гг.)
Номер образца Плоидность Содержание стевиозида, %
Сорт Рамонская сластена Диплоид 6,1
37 Триплоид 6,8
28 Тетраплоид 6,9
35 Тетраплоид 6,7
36 Тетраплоид 8,5
В диссертационной работе приведены хроматограммы стевиозида, выделенного из селекционных образцов: стандарт; диплоид №33; триплоид №37; тетраплоид №28; тетраплоид №35; тетраплоид №36.
Определение содержания стевиозида в селекционных формах стевии с различной плоидностью показало различия в количестве целевого компонента в листьях анализируемых объектов (Подпоринова Г.К., Верзилина Н.Д., Полянский К.К., 2005), при чем не отмечено прямой зависимости между плоидностью различных селекционных форм и содержанием в них стевиозида, однако по этому показателю выделяется тетраплоидная форма № 36, и этот образец может явиться исходным материалом для дальнейшей селекционной работы по основным продуктивно-качественным параметрам (табл. 1).
Таблица 2 - Содержание хлорогеновой кислоты в листьях селекционных форм стевии различной плоидности (2003 - 2005 гг.)
образцов Плоидность Содержание хлорогеновой кислоты, мМ/г
Сорт Рамонская сластена (33) Диплоид 0,104
37 Триплоид 0,150
28 Тетраплоид 0,112
35 Тетраплоид 0,152
36 Тетраплоид 0,100
Установлено наличие в растениях стевии высокого содержания антиоксидантных веществ, получены сведения об амплитуде колебаний в концентрации этих соединений у различных селекционных образцов стевии.
Не отмечено зависимости между плоидностью образцов стевии и содержанием в них хлорогеновой кислоты, но обнаруженный значительный размах в содержании этого антиоксиданта у различных образцов стевии указывает на то, что в ходе селекционных преобразований возможен отбор и
получение нужных форм с повышенным содержанием в них хлорогеновой кислоты и других антиоксидантов (Подпоринова Г.К., Верзилина Н.Д., Полянский К.К, 2005). Более высокое содержание хлорогеновой кислоты у триплоида №37 и у тетраплоида №35 можно объяснить генотипическим разнообразием стевии и усиливающейся генетической разнокачественностью, образующейся в ходе селекционных операций (селекционный отбор, полиплоидизация и др.).
В ходе исследований, одним из основных моментов, явилось изучение аминокислотного состава вегетативных органов стевии. Констатирована следующая закономерность, что если взять первые по количеству пять аминокислот в листьях верхних ярусов, то в убывающем количестве они будут располагаться следующим образом: дикая форма - пролин, серин, глютаминовая кислота, аспартат, глицин; "Рамонская сластена" - пролин, глицин, серин, аспараги-новая кислота, глютамат; сортообразец №28 - серин, пролин, аспарагиновая кислота, глицин, аланин. Общими для всех форм являются следующие аминокислоты: серин, пролин, глицин, аспартат. Пятой аминокислотой, содержащейся в большом количестве для дикой формы и "Рамонской сластены" будет глютамат, для тетраплоида - аланин. Две аминокислоты, имеющие самое низкое содержание, для всех форм будут метионин и гистидин. Высокое содержание отдельных аминокислот в верхних листьях сопровождается относительно низким содержанием этих же соединений в нижних листьях. Высказано предположение, что верхние листья, как наиболее активно растущие, атграгируют часть определенных аминокислот, необходимых для синтеза специфических для данной формы белков.
Таким образом, проведенный скрининг химического состава растительных образцов стевии, показал высокий количественный уровень и многообразный качественный состав органических субстанций, выделенных из вегетативных тканей растения, что еще раз доказывает ценность стевии как источника биологически активных веществ, получаемых в результате экологически сбалансированных технологий производства.
3.2 Исследование влияния абиотических факторов на повышение продуктивности и качественных показателей стевии
Установлено влияние фотопериода на продуктивность, качественные показатели и индуцирование цветения у стевии, определены оптимальные условия, способствующие росту растений стевии, накоплению в вегетативных органах сухих веществ и, в частности, гликозидов, переходу растений в генеративное состояние и образованию жизнеспособных семян.
Увеличение критической длины дня с 10 до 12 часов приводит к увеличению продуктивных показателей растений: длины стебля, количества и площади листьев; а также качественных характеристик: содержания экстрактивных веществ, в целом, и гликозидов, в частности.
Таблица 3 - Влияние длины дня на рост и развитие растений стевии — сорт
«Рамонская сластена» (2003 - 2005 гг.)
Фотопериод Естественный день 10 часов 12 часов 14 часов НСР05
Длииа стебля, см 15,1 22,5 23,7 13,5 0,42
Число пар листьев, шт. 11,7 7,3 8,4 9,1 0,63
Площадь листа, см2 4,94 5,15 4,86 5,54 0,66
Кол-во цветков, шт 0 11,6 18,2 0 0,87
I [ачало/ массовое цветение . 30/33 31/34 - -
Содержание экстрактивных веществ, % 16,3 17,1 17,4 16,6 0,46
Содержание гликозидов, % 11,4 11,9 13,1 12,5 0,25
В ходе дальнейшего увеличения фотопериода до 14 часов положительная динамика не по одному из показателей не сохраняется, т. обр. при 12 часовом фотопериоде мы наблюдаем оптимум по анализируемым показателям (Верзилина Н.Д., Жужжалова Т.П., Подпоринова Г.К., 2004). Отмечается, что свет и лучистая энергия являются основными экологически значимыми факторами, оказывающими влияние на рост, развитие, продуктивные и качественные показатели стевии как культуры для интенсивного биологизированного земледелия, т.к. темпы роста, периодичность и продолжительность физиологических процессов стевии определяются именно величиной поглощенной солнечной радиации и фотопериодом. Другие экологические (абиотические, антропогенные) факторы менее значимы. Таким образом, эколого-продуктивный потенциал стевии легко реализуется без существенных антропогенных воздействий на агроценоз.
3.3 Изучение действия экологически обоснованных норм внесения минеральных удобрений и физиологически активных веществ па
продуктивность и качественные показатели стевии Опыты по изучению отзывчивости стевии на обработку регуляторами роста были заложены на опытном поле ВНИИСС. Препараты использовали в следующих рабочих концентрациях: гиббереллин - 1, 10, 100 мг/л; ретардант 577 - 0,05 мл/л. В ходе анализа полученных экспериментальных данных доказано, что наибольшую прибавку продуктивных и качественных показателей стевии обеспечивает совместное применение гиббереллина 10 мг/л и ретарданта 577, но вместе с тем эта прибавка незначительна и лишь немного превышает контрольный вариант.
Таким образом, применение стимуляторов роста при возделывании стевии не обеспечивает значимого увеличения продуктивных и качественных показателей, что может служить основой для производства экологически чистого сырья стевии.
Кроме того, ростовые вещества не вызывали перехода растений в генеративное состояние, т.е. оптимум содержания гликозидов не был достигнут растениями в ходе вегетации, что негативно сказывается на качественных показателях стевии как сырья для потенциальных переработчиков.
Таблица 4 - Влияние стимуляторов роста на биометрические, продуктивные и качественные показатели стевии (2003 — 2005 гг.)
Вариант Высота, см Пар побегов, шт. Площадь листа, см2 Сухая масса, ц/га Сухая масса листьев, ц/га % лист ьсв Содержание экстрактивных веществ, % Содср жание глико- зидов, %
Контроль (без обработок) 55,1 11,0 8,38 38,1 18,5 48,6 17,6 12,3
Гиббереллин, 1 мг/л 55,4 11,1 10,13 34,0 16,4 48,2 16,2 11,4
Гиббереллин, 10 мг/л 50,9 10,5 7,81 34,9 18,2 52,1 17,0 11,9
Гиббереллин, 100 мг/л 53,7 13,4 7,59 37,1 18,8 50,7 17,3 12,1
Ретардант 577, 0,05 мл/л 53,2 12,0 10,56 35,4 17,7 50,0 16,8 11,8
Гиббереллин, 1 мг/л + Ретардант 577, 0,05 мл/л 53,6 12,7 8,92 35,1 17,9 51,0 17,1 12,0
Гиббереллин, 10 мг/л + Ретардант 577, 0,05 мл/л 54,2 12,9 8,27 39,1 20,0 51,1 17,8 12,5
Гиббереллин, 100 мг/л + Ретардант 577, 0,05 мл/л 53,5 13,9 8,74 34,2 16,5 48,2 16,4 11,5
НСР 05 0,35 0,48 0,62 0,57 0,64 0,47 0,32 0,26
Для нормального существования растений стевии необходима сбалансированность элементов минерального питания, но при широком использовании минеральных удобрений заметно ухудшается качество получаемой продукции в результате накопления токсинов и нитратов, которые могут оказывать отрицательное влияние на здоровье людей. В связи с этим возникает необходимость разработки экологических приемов безопасных агротехнологий возделывания стевии. Особое внимание заслуживает сбалансированное внесение удобрений в целях снижения потерь из них элементов питания и оптимизации их действия.
Результаты проведенных исследований позволили выявить определенные закономерности, служащие основой для разработки экологически обоснованных технологий возделывания стевии. Наибольшая урожайность сформировалась при внесении ЫРК (45) и составила 42,0 ц/га сухого листа, что на 23,5 % превышает неудобренный вариант.
Таблица 5 - Влияние минерального питания на биометрические, продуктивные и качественные показатели стевии (2003 — 2005 гг.)
Вариант Высота, Пар Площадь Сухая Масса % Содержа- Содер-
см побе- листа, масса, листьев, листь- ние жание
гов, см2 ц/га и/га ев экстрак- глико-
см тивных в-в, % зидов, %
Контроль 54,4 13 7,02 34,0 17,9 52,6 16,1 11,3
(без удобрений)
Ретардант 577 55,9 12,4 7,24 35,7 17,8 49,9 16,3 11,4
№К (45) 54,2 12,6 7,09 42,0 20,4 49,6 17,1 12,0
N1^(45)+ 52,2 11,2 7,54 36,6 18,4 50,3 16,6 11,6
Ретардант 577
ЫРК (90) 53,6 12,6 7,7 29,4 18,7 63,6 15,4 10,8
(90)+ 52,7 12,0 6,59 32,0 20,7 49,3 15,7 11,0
Ретардант 577
НСР 05 0,42 0,28 0,17 0,65 0,47 0,68 0,43 0,31
Применение минерального питания в двойной дозе значимо снижало урожайность. По-видимому, увеличение дозы удобрений под стевию ухудшало состояние растений из-за повышения концентрации их в почве. Подобная динамика прослеживается и по накоплению сухих веществ и, в частности, глико-зидов.
Средний эффект возрастающих доз азотно-фосфорно-калийных удобрений (Ду, ц/га) при постоянстве других факторов отражается в - образной интегральной кривой. Определение первой и второй производной позволяет получить совокупность трех кривых, дающих полные количественные характеристики явления (рис. 3). Первая производная (кривая скорости) показывает, что интенсивный рост эффективности удобрений наблюдается в пределах небольших доз - в среднем до 45 кг/га действующего вещества ЫРК (период 1). С дальнейшим возрастанием суммарных доз удобрений их эффективность уменьшается (кривая скорости на участке 11 падает) в среднем до суммы ЫРК = 120 кг/га, после чего интегральная кривая Ду выходит на плато. Максимальная точка второй производной кривой ускорения (кривая 3) делит период интенсивного роста эффективности удобрений на две фазы: а -возрастания ускорения эффективности удобрений; б - уменьшения ускорения. Обычно на протяжении четвертой фазы (г) наступает предел экономической рентабельности дальнейшего увеличения количества удобрений.
Рис. 3 Кривая отзывчивости стевии на возрастающие дозы минеральных удобрений: 1 — интегральная кривая эффективности удобрений (Ду, ц/га); 2 — скорость роста эффективности удобрений; 3 — ускорение роста
В ходе исследования химического состава вегетативной массы стевии был проведен ряд экспериментов по определению содержания питательных элементов на фоне различных доз минеральных удобрений в зеленой массе стевии и их вынос с урожаем (табл. б). Внесение элементов питания в различных дозах обеспечивало их повышенное накопление в вегетативных органах растений по сравнению с контролем.
Результатом химизации земледелия является накопление в сельскохозяйственной продукции химических элементов, опасных для здоровья человека, поэтому приобретает актуальность проблема контроля содержания тяжелых металлов в продукции при использовании удобрений. С этой целью изучалось накопление тяжелых металлов - цинка, меди, кадмия, никеля и железа, в растительном сырье стевии, выращенном на удобренном фоне при разных дозах минерального питания (табл. 7).
Установлено, что вносимые с удобрениями тяжелые металлы не снижают урожайности стевии. Наибольшие количества меди, цинка, железа, кадмия и никеля выносятся с урожаем стевии на фоне ИРК (90), однако концентрация всех анализируемых элементов в вегетативных органах стевии не превышает ПДК.
Таблица 6 - Содержание азота, фосфора и калия в вегетативной массе стевии (2003 — 2005 гг.)
Варна! гг Содержание азота N. % Содержание фосфора Р2О5, % Содержание калия КзО, %
Контроль (без удобрений) 1,89 0,43 1,74
ЫРК. (45) 2,37 0,74 2,21
ЫРК (90) 3,68 1,17 3,42
НСР 05 0,64 0,53 0,59
Таблица 7 - Содержание тяжелых металлов в вегетативной массе стевии, мг/кг натурально-влажной массы (2003 - 2005 гг.)
Доза удобрений Медь Цинк Железо Кадмий Никель
Контроль (без удобрений) 0,37 1,65 7.5 0,010 0,126
№К (45) 0,53 1,98 8,8 0,012 0,135
№К (90) 0,69 2,37 10,3 0,019 0,164
пдк 30,0 50,0 100,0 0,3 3,0
Это свидетельствует о необходимости применения оптимальных доз удобрений, что позволит снизить концентрацию тяжелых металлов на единицу урожая, и обеспечит получение растительного сырья стевии с высоким уровнем урожайности и достаточными экологическими и технологическими показателями качества.
Для того чтобы иметь объективную картину, отражающую эколого-технологические показатели растительного сырья стевии, степень его экологической чистоты, нами были проведены исследования содержания в стевии, выращенной на различных фонах минерального питания, вредных веществ, токсических элементов и радионуклидов (табл. 8). В сухом листе стевии отсутствовало или содержалось незначительное количество, гораздо меньшее допустимого для БАД растительного происхождения уровня содержания вредных веществ, токсических элементов и радионуклидов. В условиях ЦЧР получено экологически чистое растительное сырье стевии, как при возделывании на неудобренном фоне, так и при внесении различных доз минерального питания.
Отмечено высокое содержание в растительных тканях стевии биологически активных веществ, обладающих антиоксидантными свойствами, но сведения о зависимости накопления антиоксидантов в вегетативной массе стевии от уровня минерального питания в доступных источниках отсутствуют. В свете чего, нами решалась задача по определению закономерностей такой зависимости (Подпоринова Г.К., Верзилина Н.Д., Рудакова Л.В., Полянская Н.К., Яшин Я.И., 2005).
Таблица 8 - Показатели экологической чистоты сухих листьев стевии(2003 - 2005 гг.)
Показатель Вариант Свинец Мышьяк Ртуть Кадмий гхцг ДДЕ ДДТ Цезий 137 Стронций 90 Нитраты
Контроль нчм1 0,27 мг/кг 0,002 мг/кг нчм1 нчм1 нчм1 нчм1 13,87 Бк/кг 3,92 Бк/кг 871,0 мг/кг
ИРК(45) нчм1 0,34 мг/кг 0,003 мг/кг нчм1 нчм1 нчм1 нчм1 18,14 Бк/кг 4,81 Бк/кг 934,0 мг/кг
№К{90) нчм1 0,42 М|Укг 0,005 мг/кг нчм1 нчм1 нчм1 нчм1 21,82 Бк/кг 5,27 Бк/кг 1036,0 мг/кг
Допустимая погрешность измерений ±0,17 +0,0015 +0,21 ±0.21 ±12,4
НД на исследование ГОСТ 2693286 ГОСТ 2693086 гост 2692786 гост 2693386 МУ 214280 МУ 214280 МУ 214280 МУК 2.6.1. 71798 МУК 26.1. 717-98 ГОСТ 2621790
Допустимый уровень для БАД на раст. основе5 6,0 мг/кг 0,5 мг/кг 0,1 мг/кг 1,0 мг/кг 0,1 0,1 0,1 200 Бк/кг 100 Бк/кг 2000 мг/кг
1 - нчм — ниже чувствительности метода
J - Приложение 1 к Сан ПиН 2.3.2.1078-01.
Таблица 9 - Антиоксидантная активность стевии при различных дозах минерального питания (2003 - 2005 гг.)
Вариант АОА, мг/г
Контроль(без удобрений) 15,8
NPK (45) 16,2
NPK (90) 15,6
НСР 05 0,27
Отмечено, что уровень АОА не зависит от обеспеченности растения элементами минерального питания, видимо, накопление значительного количества антиоксидантов в растительных тканях обусловлено генетическими особенностями стевии. В результате анализа полученных экспериментальных данных, отмечена закономерность, свидетельствующая об отсутствии зависимости между уровнем минерального питания и основными продуктивными и качественными показателями растительного сырья стевии.
Таким образом, в ходе проведенных исследований показана возможность получения оптимальной урожайности стевии при одновременно высоком качественном потенциале культуры, реализуемом на достаточном уровне, при использовании экологически обоснованных доз минерального питания, что способствует получению экологически чистого сырья для дальнейшей переработки и предотвращает загрязнение окружающей среды.
Данные положения были взяты нами за основу при формировании технологической системы возделывания стевии, с целью получения экологически чистого растительного сырья. Предлагаемая экологизированная технология определяется нами как система биорациональных приемов (способов и мер) по-
вышения продуктивно-качественных показателей стевии и устойчивости доминантных продуцентов агроценоза к вредным организмам (табл. 10).
Таблица 10 - Концептуальный подход при формировании экологизированной технологии возделывания стевии
Показатель Система
Интенсивная Экологизированная
Ориентированность Доминантный продуцент Доминантный продуцент, агроценоз, агроландшафт
Основная цель Предотвращение потерь урожая Сохранение урожая, получение экологичной (нормативно чистой) продукции, предотвращение негативного влияния нсизбирательных средств защиты на компоненты агроценоза и элементы агроландшафта
Способ достижения цели Снижение воздействия вредных факторов и организмов, их нивелирование, подавление или уничтожение Минимизация воздействия вредных факторов и объектов, регуляция численности полезных и вредных видов
Прогнозируемый результат Сохраненная продукция, сезонное снижение воздействия вредных организмов и факторов, возникновение резистентности к химикатам популяций вредителей, фи-топатогенов, сорняков и их сукцессия, уничтожение полезной биоты, проблема остаточных количеств и токсического последействия химикатов Сохраненная экологичная продукция, воспроизводство почвенного плодородия, чистый агроценоз, активация полезной биоты и ее воспроизводство, долгосрочная стабилизация структуры вредных факторов и обьектов, минимизация их вредоносности и резистентности.
Экологизированная система возделывания стевии имеет в своей основе два взаимосвязанных аспекта: долгосрочную биоценотическую регуляцию биоресурсов агроэкосистемы и самозащиту от вредных факторов и видов, как растения, так и агроценоза в целом. Реализация разработанной технологии предусматривает создание в агроэкосистеме оптимальных условий для активизации продуктивно-качественного потенциала стевии. Закономерным итогом проведенных исследований и поэтапной разработки технологических операций явился синтез оптимальной экологически обоснованной технологии возделывания стевии, обеспечивающей получение стабильных урожаев и экологически чистого растительного сырья стевии. Технология разработана и прошла производственную проверку во ВНИИСС, в ходе которой подтверждена ее адаптивность и эффективность, а экологическая чистота получаемого растительного сырья стевии подтверждена результатами анализа его химического состава.
Резюмируя вышесказанное, следует акцентировать внимание на том, что разработанные агротехнические приемы, в сравнении, с традиционными, менее сложны, но более наукоемки. С экономических позиций они менее затратны,
чем традиционные приемы и средства. Эффект от их применения имеет пролонгированный характер. Практически полностью отпадает необходимость в утилизации неиспользованных агрохимикатов, в санации загрязненных пестицидами почв, а также в проведении определений остаточных содержаний компонентов химикатов в растительном сырье стевии.
Реализация экологизированной технологической системы возделывания стевии позволит существенно изменить традиционные подходы, избежать значительных потерь в массе и качестве, при выращивании и хранении урожая, а также получать в условиях современного агропроизводства ЦЧЗ России высококачественное экологически чистое растительное сырье стевии.
4 РАЗРАБОТКА ЭКОЛОГИЧЕСКИХ ОСНОВ ТЕХНОЛОГИЧЕСКОЙ СИСТЕМЫ ПОЛУЧЕНИЯ ПОДСЛАСТИТЕЛЯ ИЗ СТЕВИИ ЗАДАННОГО УРОВНЯ КАЧЕСТВА
Принципы системного подхода в данной работе служили научной основой не только анализа существующих способов получения подсластителя из стевии и определения тенденций их развития, но и создания технологической системы получения подсластителя из стевии заданного уровня качества при одновременном обеспечении экологической безопасности производственных процессов, включая утилизацию отходов. Проанализированы взаимосвязи системы и окружающей среды.
Проведенный анализ патентной ситуации позволил определить достигнутый в мире уровень технологии получения подсластителя из стевии и тенденции развития исследуемой области. Отмечено, что динамика патентования тесно связана с историческими этапами развития технологии получения подсластителя из стевии, обусловленными изменением представлений о роли питания в жизни человека.
Высказано предположение (Уилсон, 1963, Храмцов, 1992, Дыкало, 1979, Бачурина, 1987, Павлов, 1982), что дальнейшее развитие технологии подсластителя из стевии будет идти в направлении более широкого использования современных электрохимических, мембранных и биотехнологических методов, а также создания принципиально новых безреагентных технологий, способствующих повышению потребительских достоинств продукта, сохранению его уникальных природных свойств на всех этапах выделения и очистки в ходе технологического процесса переработки растительного сырья стевии, и, основное, приводящих к увеличению экологической безопасности производства, минимизирующих стрессовое воздействие на окружающую среду антропогенных факторов.
4.1 Изучение закономерностей экологически безопасного процесса экстрагирования дитерпеновых гликозидов из растительного сырья стевии
Отмечено, что разработан ряд способов выделения дитерпеновых гликозидов из растительного сырья стевии, но все они базируются на экстрагировании с использованием органических растворителей, таких как метанол, этанол,
21
бутанол, хлороформ, диоксан, ацетонитрил (Ри] Ла, Ес1аЫго, 1979, Аша1, 1982, Лысянский, 1973, Кафаров, 1962, Броунштейн, Железняк, 1966), данные органические растворители являются высокотоксичными веществами, и технологические решения процесса экстрагирования на их основе являются экологически несбалансированными по многим аспектам, а именно, производственной санитарии и гигиене, утилизации и рекуперации растворителей, накоплению их в готовом продукте, токсичности отходов и т.п.
Наиболее простым и приемлемым решением поставленной проблемы является возможность использования в качестве экстрагента воды, что не только позволяет максимально снизить содержание сопутствующих примесей и упростить дальнейшую очистку экстракта, но и способствует экологизации процесса, переводя его в разряд экотехнологий.
С целью оптимизации процесса экстракции дитерпеновых гликозидов из растительного сырья стевии, исследовано влияние на степень извлечения таких параметров, как рН экстагента, гидромодуль, т.е. соотношение сырьё - экстра-гент, температура экстрагента, продолжительность процесса.
В ходе проведенных нами исследований достоверно установлено, что рН экстрагента оказывает решающее влияние на степень извлечения целевого компонента из растительного сырья при экстрагировании. Оптимальным является значение рН экстрагента, поддерживаемое в пределах 8,1 - 8,3, уменьшение или увеличение данного показателя приводит к росту потерь дитерпеновых гликозидов от разложения (Подпоринова Г.К., Верзилина Н.Д., Полянский К.К., 2005). Показано, что при противоточной экстракции можно получать экстракты с высокой концентрацией сухих веществ даже в условиях значительного соотношения сухих листьев и экстрагирующей жидкости, но значение гидромодуля 1:5; 1:10 наиболее предпочтительно, т.к. обеспечивает минимальный расход энергии на сгущение экстрактов. Температура осуществления процесса — 70 °С, что предотвращает разложение гликозидов при максимальной степени их извлечения. Продолжительность процесса - 60 минут, гарантирует получение оптимальных по качественным показателям экстрактов (высокое содержание сухих веществ в, отсутствие разложившихся растительных тканей).
В ходе разработки оптимальной технологической системы извлечения дитерпеновых гликозидов стевии из растительного сырья, нами реализованы основные экологические аспекты промышленного процесса, а именно:
1. использование экологически безопасного экстрагента; 2. герметичность оборудования; 3. замкнутость системы обращения экстрагента; 4. замкнутость системы водо- и парооборота; 5. использование в качестве сырья природного нетоксичного растительного продукта; 6. рациональное использование отходов.
Предложенное технологическое решение обеспечивает предотвращение загрязнения природной среды, способствует ведению процесса экстракции на высокотехнологичном, ресурсо- и материалосберегающем уровне. Реализация предложенной схемы в рамках соответствующего технологического регламента позволяет получать экстракты стевии заданного уровня качества, экологически безвредные, содержащие высокий уровень гликозидов и биологически активных веществ, пригодные для непосредственного использования и для дальнейшей переработки с целью получения функциональных пищевых продуктов.
4.2 Исследование экологических аспектов процессов удаления балластных веществ из продуктов переработки стевии Экстракты, получаемые из растительного сырья стевии, имеют сложный состав, который можно представить в виде системы взаимосвязанных элементов (рис. 4).
Рис. 4 Схема взаимосвязи компонентов экстрактов стевии
Рис. 5 Схема взаимосвязи процессов очистки экстрактов стевии от балластных примесей Минеральный состав экстрактов обусловлен двумя источниками: солями воды, использующейся для экстракции, минеральными веществами, внесенными с растительным сырьем. Неорганические компоненты раствора, в основ-
ном, находятся в виде положительно и отрицательно заряженных ионов. Цветность растворов стевии обусловлена в основном продуктами щелочного распада гликозидов и реакции Майяра. Азотистые вещества, содержащиеся в экстрактах стевии, являются потенциальными участниками реакций меланои-динообразования, приводящих к потемнению раствора, снижают эффективность очистки и качества готового продукта. Оставшиеся азотистые вещества составляют незначительную часть экстракта, представляют в основном небелковые высокомолекулярные соединения.
В нашей работе выявлены различные варианты удаления балластных примесей из продуктов переработки стевии: очистка с помощью реактивов; с применением электродиализа, ионообменной обработки (рис. 5). Нами проведены всесторонние исследования по реализации в технологическом потоке различных вариантов комплексной очистки экстрактов стевии.
Очистка экстракта стевии с применением солей алюминия
1. Исходный вариант.
2. Экстракт + 0,5 М раствор в количестве 10% от объема экстракта + известь до рН = 10,5 + (ЫН4)2НР04.
3. Экстракт + 0,5 М раствор в количестве 10% от объема экстракта + известь до рН = 11,5 + (ЫН4)2НР04.
4. Экстракт + 0,5 М раствор в количестве 10% от объема экстракта + известь до рН = 10,8 + (ЫН4)2НР04
+ ионообменная очистка.
5. Экстракт + 0,5 М раствор в количестве 10% от объема экстракта + известь до рН = 10,6 + (№14)2НР04.
+ ионообменная очистка.
6. Экстракт + 0,5 М раствор в количестве 10% от объема экстракта + известь до рН = 10,8 + (МН4)2НР04 + ионообменная очистка.
ы
СЁ
ирн
В доброкачественность □ эффект очистки
Рис. б Диаграмма результатов очистки экстрактов стевии солями алюминия при различных вариантах обработки экстрактов в цикле очистки Очистка экстракта известью, углекислым газом и ионообменными смолами
1. Исходный экстракт.
2. Дефекация известковым молоком (5% от объема экстракта) + сатурация до рН = 11,7 + вторая сатурация в присутствии 1,25% изв. молока до рН = 9,5 + ионообменная очистка (температура 60°С). 3. То же, при температуре 40°С.
4. Дефекация 5% извести + одна сатурация до рН = 9,5 + ионообменная очистка (температура 40°С).
5. То же, при сатурации до рН = 8,5. б. То же, при температуре 60°С.
7. Дефекация 5% извести + первая сатурация с добавлением 2,5% извести до рН = 9,0 + ионообменная очистка (температура 60°С).
□ рН
■ доброкачественность
□ эффект очистки_
Рис. 7 Диаграмма результатов очистки экстракта стевии с использованием извести, углекислого газа и ионообменных смол при различных вариантах обработки экстрактов в цикле очистки:
Рис. 8 Схема реагентного способа получения подсластителя из стевии
На основании проведенных нами исследований разработана технологическая схема и технологический регламент реагентной очистки экстракта, основанная на использовании извести, углекислого газа и ионообменных смол, представленная на рис. 8. Схема предназначена для ведения непрерывного процесса очистки и сгущения экстракта в производственных условиях (Подпори-нова Г.К., 1999). По нашему мнению, данная схема удовлетворяет требованиям
промышленной экологии, при одновременном обеспечении высокого качества готового продукта.
Физико-химическая очистка экстракта с использованием мембранных проиессов Установлена возможность эффективной очистки экстрактов стевии на основе использования мембранных и ионнообменных процессов.
Рис. 9 Схема безреагентного способа получения подсластителя из стевии
; |ищ8ини|
дВ|м}агж
ТТГТ |Т»Т1Т| 1111111 1111111 11Ш11 4-1—1
Показано, что образующийся при работе ионнообменной установки побочный продукт - регенераты (смесь разбавленным минеральных кислот и оснований), могут быть использованы в качестве комплексных жидких удобрений для подкормки различных культур. Отказ в процессе очистки от применения извести и углекислого газа, в свою очередь, исключает образование дефеката и тем самым предотвращает загрязнение окружающей среды.
Разработаны технологическая схема и технологический регламент получения пищевого стевиозида без использования органических растворителей, позволяющие получать стевиозид с оптимальными потребительскими достоинствами.
4.3 Изучение закономерностей процесса сушки продуктов переработки стевии, способствующего получению подсластителя с высокими пищевыми качествами С целью определения перспективных способов получения сухого концентрата сладких веществ стевии нами были проведены экспериментальные исследования процессов распылительного и вакуум-сублимационного обезвожива-
ния концентрата стевии. Результаты экспериментов позволили сделать следующие выводы: органолептические показатели сухого концентрата стевии распылительной сушки вполне удовлетворяют требованиям, предъявляемым к пищевым объектам; однако потери целевого компонента слишком велики, что делает процесс распылительного обезвоживания продуктов переработки стевии малоперспективным с технологической точки зрения (Подпоринова Г.К., Полянский К.К., Верзилина Н.Д., Богомолов Д.М., 2005). Альтернативой ему может служить вакуум-сублимационный способ сушки, позволяющий получать продукт с заданными свойствами при низких энергозатратах и минимальных потерях подсластителя.
Убедительно доказывается возможность использования вакуум-сублимационного обезвоживания для получения подсластителя из стевии, т.к. подобное технологическое решение, разработанное с целью совершенствования традиционной технологии, имеет не только технические преимущества при реализации на практике, но и выраженный экологический аспект производства, является типичным примером безреагентной технологии выделения натурального подсластителя из растительного сырья стевии, что приближает ее к статусу экотехно-логии.
4.4 Синтез оптимальной структуры экологически сбалансированной технологической системы Основными общепризнанными исходными принципами создания технологических систем в пищевой промышленности являются: полное и комплексное использование сырья, экономическая эффективность, энергосбережение, экологическая безопасность (Храмцов, Нестеренко, 1989, Митин, 1997). Наши данные свидетельствуют, что реализация этих принципов достигается в ходе синтеза оптимальной структуры системы, включающего научное обоснование последовательности основных технологических процессов,
Таблица. 11 Характеристика отходов и способы их утилизации в _производстве подсластителя из стевии_
№ Наименование Краткая токсикологиче- Количество Способ утилизации
п/п отходов ская характеристика за один цикл
1. Жом травы стевии Нетоксичен 6,0 кг Используется для приготовления кормовых смесей для с/х животных
2. Фильтраци- Смесь нетокисчпых ос- 0,3 кг Применяется как
онные осадки татков травы, ско- удобрение для улуч-
после очистки агулировавших веществ коллоидной дисперсности, окиси алюминия, фосфатов и сульфатов кальция шения структуры почвы
3. Регенераты Жидкая, нетоксичная 0,0045 м В качестве жидкого
иошкюбмеи- смесь органических ки- удобрения для тех
нм.ч смол слот, оснований и ачог-нокислотных солен щелочных металлов культур, где необходимо увеличить вегетационную массу.
II 7 в П«Ч» 1!.1УчВ(««
н
Рис. 10 Принципиальная схема получения концентрата стевии альтернативных вариантов и оптимальных условий их проведения. В ходе разработки системы на первом этапе синтеза нами выявлены основные взаимосвязи системы с элементами внешней среды. Следующий этап синтеза структуры включал выбор элементов подсистем (операций), их последовательности, вариантов проведения и взаимосвязей между ними. Показано, что в рамках функционирования разработанной системы, все отходы производства концентрата сладких веществ стевии утилизируются без нанесения ущерба окружающей среде (рис. 10), (табл. 11).
5 РАЗРАБОТКА ЭКОЛОГИЧЕСКИ БЕЗОПАСНОЙ ЭКСПЕРТНОЙ АНАЛИТИЧЕСКОЙ СИСТЕМЫ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КАЧЕСТВЕННЫХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ СЫРЬЯ СТЕВИИ И ПРОДУКТОВ ЕЕ ПЕРЕРАБОТКИ
Качество концентрата стевии и пищевых продуктов, содержащих его, определяется совокупностью различных факторов: органолептикой, составом, физико-химическими, микробиологическими и физиологическими свойствами. Все они тесно связаны между собой и определяют технологические и потребительские свойства получаемых по разработанным технологиям продуктов.
Качество сиропов стевии тесно связано с технологичностью. Показано, что физико-химические, реологические и другие характеристики не создают технологических и аппаратурных трудностей при производстве пищевых продуктов.
Анализ микробиологических показателей продуктов переработки стевии н их изменение при различных условиях и сроках хранения показал, что общее количество микроорганизмов в концентратах пнщевогб назначения находится в пределах сотен клеток, плесеней - десятков, что соответствует самым жестким требованиям, предъявляемым к компонентам детского питания (Шаманова и др., 1989).
Таблица 12 - Состав концентрата сладких веществ стевии
Наименование показателя Характеристика продукта
Концентрат сладких веществ стевии (жидкая форма) Концентрат сладких веществ стевии (порошковая форма)
Массовая доля, %: сухих веществ 40-45 92-95
гликозидов 27-32 78-82
общего азота 0,05 не обнаружено
золы 0,63 0,24
Макроэлементы, мг/г
кальция 2,141 3,822
натрия 2,911 4,573
калия 1,412 2,514
магния 0,125 0,236
серы 0,253 0,486
Микроэлементы, мг/г
железа 0,103 0,197
цинка 0,019 0,034
йода 0,003 0,005
серебра 0,006 0,014
Солей тяжелых металлов, мг/г
свинец не обнаружено не обнаружено
мышьяк не обнаружено не обнаружено
ртуть не обнаружено не обнаружено
кадмий не обнаружено не обнаружено
цезий - 137 не обнаружено не обнаружено
стронций - 90 не обнаружено не обнаружено
Нитраты, мг/кг 1036,0 1564,8
ДДТ, мг/кг не обнаружено не обнаружено
ДЦЕ, мг/кг не обнаружено не обнаружено
ГХЦГ, мг/кг не обнаружено не обнаружено
Таблица 13 - Физико-химические свойства экстрактов стевии
Показатель Экстракт стевии
Активная кислотность, ед 5,02
Тигруемая кислотность, "Г 29
Плотность, кг/м* 1284,4
Удельное вращение, град - 15,7
Вязкоеть'мПас 17,8
Точка замерзания2, "С -0,294
Оптическая плотность3, ед 0,216
1 - при т = 3,924 кПа;
2 - для 10% - пых растворов;
3 - для 10% - ных растворов при X = 400 им.
Таблица 14 - Микробиологические показатели концентратов стевии
Показатель Характеристика продукта
Жидкая форма Порошок
Количество мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов (КМАФАнМ), КОЕ в 1 г 20 - 300 10- 120
Бактерии группы кишечной палочки (БГКП), КОЕ в 1 г Не обнаружены
Плесени, КОЕ в 1 г 0-50 | 0-20
Дрожжи, КОЕ в I г Не обнаружены
5.1 Определение аптиоксидаитной активности препаратов стевии В исследованиях использовался новый электрохимический прибор Яуза-ААА-01 для определения антиоксидантной активности экстрактов лекарственных трав, напитков, биологически активных добавок к пище и др. объектов (Яшин, Яшин, Пахомов, 2003), работающий на основе амперометрического метода детектирования, преимуществами которого являются - высокая чувствительность, большая скорость определений, хорошая воспроизводимость, высокая селективность определений в сложных смесях.
Кран-дозатор
Терморегулятор -5-
х:
Ячейлса детектор«
• лнаяого-
хшфровой
Уси.иггет, прсойразо-
Т0К<>Н .... ватеяь
Рзегвдрктель
Компьютер V прмнтсрты
Рис. 11 Принципиальная схема электрохимического прибора для определения антиоксидантнои активности.
Для анализа не требуется реактивов, кроме стандарта, поэтому помимо снижения стоимости определений, полностью исключается проникновение токсичных реагентов в рабочую зону, что повышает экологический рейтинг технологии на данном этапе. Показан высокий уровень антиоксидантной активности (АОА) продуктов переработки стевии (табл. 15), превышающий таковую для всех изученных ранее объектов.
Высокие эколого-пищевые достоинства подсластителя из стевии позволяют отнести его к группе наиболее ценных растений, культивируемых человеком (Подпоринова Г.К., Богомолов Д.М., 2004, Подпоринова Г.К., Полянский К.К., Верзилина Н.Д, 2005). .
Таблица 15 -Антисжсидантная активность продуктов из стевии (стандартное вещество - кверцетин)
Наименование препарата Характеристики АОА, мг/г
Концентрат сладких веществ стевии Стевиозид-35% СВ; содержание гликозидов до 25% 15,5
Стевиозидный порошок Содержание гликозидов до 75% 20,0
Стевиозид Транс гл икозил ированиы й ферментативным путем (фирма "Стевиан") 0,1
В подтверждение вышесказанного, был проведен ряд экспериментов по выявлению влияния продуктов переработки стевии на показатели антиокси-дантной активности организма лактирующих коров, в котором в качестве кормовой добавки в осенний рацион животных были введены: жом стевии, получаемый после экстракции, и водный-экстракт листьев стевии. Обобщенный анализ результатов исследования крови и молока животных, позволил установить выраженное биооксидантное воздействие на организм датирующих коров продуктов переработки стевии. (Полянский К.К., Семенов С.Н., Суркова Н.Е., Пономарев А.Н., Подпоринова Г.К., 2006).
5.2 Контроль содержания гликозидов в растительном сырье Эксперименты базировались на использовании свойства стевиозида подвергаться кислотному гидролизу. При гидролизе стевиозид (молек.вес 804,9) образует циклическую дитерпеновую половину (мол.вес 316,44), которая не принимает участие в реакции, и три глюкозные единицы (мол.вес 488,6). Для определения суммы гликозидов был модифицирован метод определения Мюллера, применяемый для контроля моносахаров в сырье и продуктах сахарного производства (Инструкция по техпохимическому..., 1989).
Полученные экспериментальные данные свидетельствуют, что предгю-женный метод оперативного контроля, в отличии от весового метода, применяемого ранее, позволяет достаточно быстро и точно определить содержание гликозидов в экстрактах и гликозидсодержащих растворах. Он отличается производительностью и безопасностью для здоровья.
При проведении скрилинговых исследований селекционного характера и опытов в растениеводстве, при переработке сырья стевии возникает необходимость в более точном определении в нем содержания гликозидов и, в частности, стевиозида. Поэтому была поставлена задача, разработать простой и надежный количественный хроматографический метод контроля содержания стевиозида, включая пробоподготовку
ВЭЖХ метод анализа стевии был разработан на хроматографнческой системе "Стайер" (ЗАО "НПКФ Аквилон", Россия). В работе оптимизированы три стадии анализа: экстракция стевиозида из листьев, очистка первичного экстракта и хромат^графическое разделение. В качестве экстрагента для выделения ди-терпеповых гликозидов использовали, по указанным выше причинам, воду,
экстракция которой позволяет максимально снизить содержание сопутствующих примесей. Дальнейшая пробоподготовка заключалась в очистке первичного экстракта, для чего была применена неудерживающая твердофазная экстракция с использованием МН2-картриджей. Очищенный и обесцвеченный экстракт анализировали при помощи ВЭЖХ. Было использовано несколько типов аналитических нормально- и обращеннофазовых колонок, но удовлетворительного разрешения пика стевиозида от пиков других дитерпеновых гликозидов и углеводов удалось добиться только на аминофазной колонке.
5.3 Использование метода главных компонент при анализе продуктов переработки стевии Применен метод главных компонент для получения и сравнения линейно-независимых факторов (идентификационных признаков) сложного объекта -экстракта стевии. Особенностью проведения анализа является практическое отсутствие пробоподготовки, т.к. только введение исследуемых растворов в нативной форме гарантирует содержание полной информации об объекте, как в явной, так и в неявной форме. Длины волн выбраны таким образом; чтобы могли детектироваться практически все классы соединений - от Сахаров и органических кислот до фенолкарбоновых кислот и антоцианов (мономерных форм, олигомеров и полимеров). На рисунке 12 представлена хроматограмма экстракта стевии в диапазоне длин волн 208, 230, 254, 270 и 320 нм. Многоволновая хроматограмма экстракта стевии, используемая для определения фальсификации и квалификации этого вида продукции, представляет изменяющийся в течение времени хроматографирования набор оптических "плотностей раствора, протекающего через кювету детектора при разных длинах волн (метод ВЭЖХ с использованием многоволнового спектрофотомегрического детектора). При обработке информационных матриц методом главных компонент количество линейно-независимых столбцов (факторов), практически на 100% описывающих исходную матрицу, уменьшилось до четырех (табл. 16).
Таблица 16 - Факторы и их вклады, ¿полученные из хроматограммы __ экстракта стевии___
Вклады факторов Fic F2c Гзс F4c
89,12% 5,89% 3,65% 0,74%
208 нм -1,743 -0,023 0,385 -0,101
230 нм 0,073 -0,336 -1,539 0,843
254 нм 0,533 -0,793 -0,107 -1,507
270 нм 0,677 -0,561 1,211 0,979
320 нм 0,458 1,715 0,050 -0,213
Таким образом, в ходе проведенных исследований нами показано (Гаври-липа В.А., Сычев С.Н., Верзилина Н.Д., Подпоринова Г.К., Полянский К.К., 2006), что применение комбинации методов многоволновой ВЭЖХ и главных компонент позволяет выделить идентификационные признаки экстракта стевии для последующего их использования при определении подлинности этого продукта.
А
2.0
Рис. 12 Хроматограмма экстракта стевии
6 КОНСТРУИРОВАНИЕ НОВЫХ ЛЕЧЕБНО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКИХ И ДИЕТИЧЕСКИХ ПРОДУКТОВ ПИТАНИЯ НА ОСНОВЕ ПОДСЛАСТИТЕЛЯ ИЗ СТЕВИИ
Создание функциональных продуктов питания с выраженными биолого-экологическими свойствами, сообщаемыми продуктам пищевой, ароматической и стабилизирующей добавкой - интенсивным подсластителем, концентратом сладких веществ стевии представляет значительный практический интерес (Подпоринова Г.К., Полянский К.К., Богомолов Д.М., 2004), в частности, в производстве фруктовых и овощных соков, молочных продуктов (коктейля, йогурта, творожной основы). Использование подсластителя из стевии является одним из путей решения проблемы коррекции питания населения, с целью оздоровления и повышения иммунного статуса различных социальных групп (Подпоринова Г.К., Полянский К.К., Верзилина Н.Д., 2005). В результате проведенных нами работ, созданы новые молочные и кисломолочные продукты, обладающие заданными лечебно-профилактическими свойствами, а именно: антагонистической активностью по отношению к патогенной и условно патогенной микрофлоре кишечника человека, способностью к сдерживанию ее роста и восстановлению уровней полезных популяций микроорганизмов; способностью активизировать иммунологическую реактивность организма человека и уровень его общей неспецифической резистентности; способностью регулировать артериальное давление к уровень содержания сахара в крови; отсутствием необходимости выделения организмом человека инсулина для усвоения натурального подсластителя растительного происхождения.
7 ТЕХНИКО-ЭКОНОМИЧЕСКАЯ, ЭКОЛОГИЧЕСКАЯ И СОЦИАЛЬНАЯ ОЦЕНКА РАЗРАБОТАННОЙ СИСТЕМЫ
7.1 Маркетинговые исследования Проанализирована перспективность внедрения стевии в с/х производство, представлена характеристика подсластителя из стевии как товара, проведен анализ рыночной ситуации, сформированы основные направления использования подсластителя из стевии, а также сегментирование российского рынка продуктов на основе стевии. Маркетинговые исследования показали, что рынок подсластителя из стевии в России обладает определенной привлекательностью, обусловленной его потенциалом, доступностью и предполагаемой доходностью. Стабильность рынка тесно связана с общей экономической ситуацией в стране, которая в последнее время характеризуется положительными тенденциями.
7.2 Оценка экономической эффективности разработанной системы Рассмотрены различные варианты реализации внедрения разработанной технологической системы получения подсластителя из стевии. Разработаны бизнес-планы организации производства концентрата, проведены опытно-промышленные выработки и рассматривается возможность организации производства пищевых и кормовых добавок из стевии в промышленных масштабах. Проведена оценка стоимости вложений, экономической стабильности проекта. Эффективность производства концентрата стевии и пищевых продуктов на ее основе по разработанной системе проанализирована не только по экономическим показателям, но и с учетом экологических и социальных аспектов.
Таблица 17 - Программа производства сахарной свеклы, сахара, стевии, подсластителя из стевии в рамках реализации инновационной концепции
Показатели 2003 20042007 20072010 20112020 20212030
1 2 3 4 5 6
Численность населения, млн. чел 145 145 145 145 145
1 [орма потребления сахара по данным ВОЗ на душу населения, кг/год 20 20 20 20 20
Фактическое потребление сахара в РФ надушу населения, кг/год 40 36 31 25 22
Потребление подсластителей и сахарозаменнтелей в РФ на душу населения, кг/год 4 8 13 19 22
Общее потребление сахара, подсластителей и сахароза-мсимтслсй в РФ на душу населения, кг/год 44 44 44 44 44
Общее производство сахара и подсластителя из стевии в пересчете на сахар, тыс. т 6380 6380 6380 6380 6380
Продолжение таблицы 17
1 2 3 4 5 6
Производство сахара, тыс. т 5800 5220 4495 3625 3190
Производство подсластителя из стсвии в пересчете па сахар, тыс. т 1160 1885 2755 3190
Площадь посева сахар! [Ой свеклы, тыс. га 920 920 1000 950 900
Площадь посева стевии, тыс. га 132 155 170 145
Общая площадь посева обеих культур, тыс. га 920 1052 1155 1120 1045
Урожайность сахарной свеклы, т/га 22,5 22,5 23 24 25
Урожайность стевии, т/га 0,7 0,8 0,9 1,0
Валовый сбор сахарной свеклы, тыс т 20700 20700 23000 22800 22500
ВаповыЯ сбор стевии, тыс. т 92 124 153 145
Выход сахара из свеклы, % 10 10 11 12 13
Выработка белого сахара из свеклы, тыс. т 2070 2070 2530 2736 2925
Выработка белого сахара из ca.xapa-ci.ipi и, тыс. т 3730 3150 1965 8890 2650
Выработка подсластителя из стевии, тыс. т 6,44 9,92 13,76 14,50
Выработка белого сахара из свеклы, % 32,4 32,4 39,7 42,9 45,8
Выработка белого сахара из сахара-сырца, % 58,5 49,4 30,8 13,9 4,2
Выработка подсластителя из стевии, % 9,1 18,2 29,5 43,2 50,0
Выработка белого сахара из свеклы, т/га 2,3 2,3 2,5 2,9 3,3
Выработка подсластителя из стевии в пересчете на белый сахар,т/га 8,8 12,2 16,2 22.0
Выход подсластителя из стевии, % 7,0 8,0 9,0 10,0
Выработка подсластителя из стсвии, т 0,05 0,06 0,08 0,1
Коэффициент сладости 180 190 200 220
7.3 Экологический мониторинг и социальная -значимость разработанных технологий Используя методологию экологической оценки технологии пищевых продуктов, разработанную академиком Н.И.Липатовым (1991), нами выявлено, что экологическая безопасность подсластителя из стевии и пищевых продуктов на его основе, определяется отсутствием вредных и нежелательных компонентов, способных причинить вред здоровью человека. Экологический мониторинг разработанной системы, выполненный на основе методики экологического мониторинга пищевых производств (Храмцов, Евдокимов, 1992, Евдокимов, 1'998) показал, что наиболее безопасными в экологическом отношении являются без-реагентные способы получения подсластителя из стевии, в которых реагенты
не вводятся непосредственно в экстракты (мембранные, электрохимические и ионообменные приемы обработки полупродуктов переработки стевии).
Таблица 17 - Экологический мониторинг технологических процессов _получения подсластителя из стевии__
Производственные процессы Нил получаемого продукта
KoHueinpäT сладких в-в стевии (рса-гетный способ) Концентрат сладких в-в стевии (безреа-геншый способ) Концентрат сладких в-в ст'ешш (ва куум- субли мационной сушки)
Экстрагирование ив ум нв ум нвум
Реагентная очистка в - -
Центрифугирование и ультрафильтрационная обработка - уч -
Деминерализация уч уч -
Электро-химическая обработка - уч -
Филвтрация У У уч-
Концентрирование нв нв ив
Сушка - - нв
Посторонние вещества: нв — не вносятся; в - вносятся; у — удаляются; уч -
удаляются частично; ум - уничтожение микробов.
В целом, разработанная технологическая система получения подсластителя из стевии заданного уровня качества является экологически безопасной при условии соблюдения требований к сырью и материалам, правил техники безопасности и эксплуатации оборудования, санитарных норм, принятых на предприятиях пищевой промышленности.
По нашему убеждению, социальная значимость обусловлена тремя взаимосвязанными аспектами:
- экономическим, связанным с потенциальной возможностью создания нового поколения полезных и вкусных продуктов, содержащих подсластитель из стевии, привлечением потребителя, расширением ассортимента и объемов производства, получением прибыли за счет эффективного, комплексного и рационального использования растительного сырья, а, следовательно, реального жизненного уровня населения;
- экологическим, обусловленным производством натурального продукта из растительного экологически чистого сырья в результате реализации безотходной технологии производства; выработкой на основе подсластителя из стевии широкого ассортимента пищевых продуктов с уникальными, целебными свойствами, способствующими оздоровлению человеческого организма и улучшению его микроэкологии; предотвращением сброса технологических отходов, загрязненных вод, воздуха и газов; снижением уровня загрязнения окружающей среды с пользой для человечества в целом и для конкретного предприятия за счет экономии на штрафных санкциях;
- медико-биологическим, связанным с решением проблемы оздоровления общества в целом путем производства доступных и разнообразных функциональных продуктов питания, защищающих внутреннюю экосистему человека, сохраняющих его здоровье и работоспособность. Взрослым людям продукты с подсластителем из стевии помогут справиться с заболеваниями, возникшими после антибиотнкотерапии, стрессов, облучений, вызывающих снижение уровня защитной системы организма. Разработанная система позволяет получать целую гамму добавок на основе стевии, которые могут применяться в производстве разнообразных пищевых продуктов, при создании фармацевтических препаратов для лечения заболеваний, возникающих в результате нарушения обмена веществ.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
В результате теоретических и экспериментальных исследований установлены экологобисшогические характеристики стевии и выявлены особенности, которые необходимо 'учитывать при возделывании в условиях ЦЧ зоны, с целью получения экологически чистого растительного сырья. Разработана безотходная технология производства концентрата сладких веществ стевии, позволяющая не только' обеспечивать высокую экономическую эффективность производства, но и решать, проблему защиты окружающей среды при выпуске данного продукта. Предложена экспертная аналитическая система скрининга качественных показателей сырья стевии по основным эколого-пищевым параметрам, дающая возможность осуществлять оперативный контроль на различных стадиях технологического цикла.
Резюмируя результаты проведенной работы, необходимо отметить, что исследованиями были затронуты, с одной стороны, основные эколого-биологические и агрофитоценотические характеристики стевии, обуславливающие теоретические и практические задачи ее возделывания в климатических условиях зоны и приемы повышения ее продуктивных и качественных показателей, а с другой, физико-химические основы и закономерности технологических процессов, Связанные с получением основных, представляющих интерес в пищевом отношении, продуктов жизнедеятельности стевии - стевиолгликози-дов. Итогом чего явилось формирование экологических аспектов получения, оценки качества и использования подсластителя из стевии, который, с одной стороны, является необходимым для человека нутрицевтиком, с другой стороны, логическим завершением цикла рациональной переработки растительного сырья стевии.
ОСНОВНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ И ВЫВОДЫ
I. Выявлены особенности формирования экологически чистого сырья стевии при разных условиях минерального питания и применении физиологически активных веществ. Внесение элементов минерального питания в оптимальной дозе повысило урожайность стевии, при этом наибольшая урожайность сформировалась при внесенин ЫРК (45) и составила 42,0 ц/га сухого лис-
та, что на 23,5 % превышает неудобренный вариант. Определено, что наибольшую прибавку продуктивных и качественных показателей стевии обеспечивает совместное применение гиббереллина 10 мг/л и ретарданта 577, но вместе с тем эта прибавка незначительна и лишь немного превышает контрольный вариант.
2. Показано, что вносимые с удобрениями тяжелые металлы не снижают урожайности стевии, вынос наибольшего количества меди, цинка, железа, кадмия и никеля с урожаем стевии отмечен на фоне ЫРК (90). Определено отсутствие в сухом листе стевии или содержание незначительного количества, гораздо меньшее допустимого для БАД растительного происхождения, уровня вредных веществ, токсических элементов и радионуклидов. Установлена закономерность, свидетельствующая об отсутствии зависимости между уровнем минерального питания и основными продуктивными и качественными показателями растительного сырья стевии. Проведен скрининг аминокислотного состава стевии. Показан высокий уровень антиоксидантной активности стевии и продуктов ее переработки, характеризующий данную культуру как источник ценной пищевой добавки для питания человека. Выявлены незначительные различия в содержании хлорогеновой кислоты у форм различной плоидности.
3. Предложен метод контроля количественного содержания етевиозида с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии, который может использоваться для экспресс-контроля качества растительного сырья и продуктов переработки стевии и идентификации сложнорецептурных продуктов питания, содержащих подсластитель из стевии. Метод является экологически безопасным. Применение комбинации методов многоволновой ВЭЖХ и главных компонент позволяет выделить идентификационные признаки подсластителя из стевии для последующего их использования при определении подлинности этого продукта.
4. Теоретически обоснована возможность экстрагирования, разработаны физико-химические основы процесса экстракции гликозидов из растительного сырья стевии и предложен экологически безопасный способ получения биологически активных экстрактов стевии, который заключается в экстракции водным экстрагентом. Оптимизированы технологические параметры процесса экстракции.
5. Выявлены закономерности, определеляющие оптимальные параметры, установлена взаимосвязь и последовательность процессов удаления балластных веществ из растворов стевии. Разработаны технологические схемы и технологические регламенты процессов реагентной и безреагентной очистки стевиозидсодержащих растворов, обеспечивающие высокий эффект очистки, высокую селективность, предотвращение потерь целевых компонентов и высокую экологическую безопасность процессов, при одновременном повышении эколого-пищевых достоинств вырабатываемого продукта.
6. Выявлены теплофизнческие свойства концентрата сладких веществ стевии, характеризующие ею в качестве перспективного объекта сушки. Теоретически обоснованы, экспериментально исследованы механизмы и выявлены основные закономерности процесса вакуум-сублимационного обезвоживания концентрата, которое обеспечивает получение экологически чистого продукта при максимальной степени (до 96 %) сохранения целевых веществ. Показана
высокая экологическая безопасность технологического процесса.
7. Разработана структура технологической системы и научно обоснованы параметры получения подсластителя из стевии заданного уровня качества. Исследованы качественные характеристики получаемых по разработанным технологиям продуктов, показаны их высокие эколого-физиологические свойства и перспективность использования в качестве БАД. Результаты исследований предполагают возможность применения полученных продуктов в качестве вку-со-ароматических добавок, пищевых красителей и нутрицевтиков, способствующих повышению устойчивости организма к воздействиям техногенного характера. Предложенные способ извлечения и промышленная технология получения биологически активных концентратов стевии обеспечивают предотвращение загрязнения природной среды и минимизацию воздействия производства на окружающие экосистемы. Результаты работы внедрены в производство и используются в учебном процессе.
8. Оптимизирован рецептурный состав и способы производства молочных и кисломолочных продуктов на основе стевии. Разработанные технологические приемы выработки и рецептуры пищевых продуктов диетического назначения позволяют получать ценные в пищевом аспекте композиции, обладающие выраженными эколого-физиологическими достоинствами и гармоничными вкусовыми качествами.
9. Закономерным результатом всего обширного комплекса теоретических и практических исследований явился синтез комплексной системы получения, оценки качества и использования подсластителя из стевии, способствующей сохранению экологического и биосоциального баланса экосистемы.
10. Проведены маркетинговые исследования, технико-экономические расчеты, убедительно доказывающие высокую эффективность и значимость внедрения разработанной системы в широкую производственную практику. Систематизированы и получены новые данные о направлениях использования подсластителя из стевии. Установлено, что предложенные технические решения позволяют повысить экологическую безопасность технологических и производственных процессов получения биологически активных компонентов стевии. Оценена социальная значимость работы для решения экологической и биосоциальной проблем обеспечения населения России функциональными пищевыми продуктами нового поколения, с выраженным иммуномодели-рующим и стресспротекторным действием.
ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПО ПРАКТИЧЕСКОМУ ИСПОЛЬЗОВАНИЮ
1. При возделывании в производственных условиях стевию следует размещать по предшественнику - озимая пшеница. Рекомендуемая схема посадки 25x70 см, которой соответствует густота стояния растений 57,1 тыс. шт./га. Внесение азотно-фосфорпо-калпйных удобрений NPK (45) увеличивает сбор сухого листа и гликозидов. Выращивание стевии с применением предложенных технологических элементов позволит производителям сельскохозяйственной продукции повысить рентабельность возделываемых культур и получить экологически чистое растительное сырье стевии с целью выработки ценного про-
39
дукта питания для населения.
2. Для обеспечения высоких качественных показателей концентрата сладких веществ, вырабатываемого из растительного сырья стевии, рекомендуется экологически сбалансированная технология, включающая водную экстракцию; реагентную (соли алюминия; известь и углекислый газ), безреагентную (ультрафильтрация, центрифугирование, ионный обмен и электроактивация) или комбинированную очистку; концентрирование; вакуум-сублимационное обезвоживание.
3. Разработанная методика количественного определения стевиозида с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии, рекомендуется для контроля качественных параметров в процессе переработки растительного сырья и проведения рутинных анализов при селекционном отборе растительных образцов.
4. Разработанные рецептуры низкокалорийных диетических пищевых продуктов могут быть рекомендованы для использования в перерабатывающей промышленности (Патент № 2005117463/13(019889) 07.06.2005 г., Патент № 2005117463/14(019890) 07.06.2005 г.).
Список основных работ, опубликованных по теме диссертации:
Статьи в изданиях, рекомендованных ВАК:
1. Подпоринова Г.К. Использование концентрата стевии в пищевых продуктах / Г.К. Подпоринова. К.К. Полянский, Н.Д. Верзилина // Вестник РАСХН. 2004. - №5. - С. 86 - 88.
2. Подпоринова Г.К. Совершенствование технологии получения концентрата стевии / Г.К. Подпоринова, К.К. Полянский, Н.Д. Верзилина // Пищевая промышленность. 2004. - №9. — С. 87 - 88.
3. Подпоринова Г.К. Производство пищевых продуктов с использованием натурального подсластителя из стевии / Г.К. Подпоринова. К.К. Полянский, Д.М. Богомолов // Пищевая промышленность. 2004. - №7. - С. 80 - 81.
4. Подпоринова Г.К. Перспективы внедрения сахароносной культуры стевии / Г.К. Подпоринова, П.М. Акатов, И.В. Апасов // Сахарная свекла. 2004. -№10.-С. 31-32.
5. Подпоринова Г.К. Стевия в продуктах целебно-профилактического назначения / Г.К. Подпоринова. К.К. Полянский, Д.М. Богомолов // Пищевая промышленность. 2005. - №5. — С. 58 - 59.
6. Подпоринова Г.К. Влияние окислителей на красящие вещества в сахарной промышленности / И.В. Апасов, В.В. Агеев, Г.К. Подпоринова. В.А. Федорук // Пищевая промышленность. 2005. - №11. — С. 60.
7. Подпоринова Г.К. Натуральный подсластитель из стевии / Г.К. Подпоринова. А.Н. Пономарев, Н.Д. Верзилина и др. // Молочная промышленность. 2005. -№1. - С. 42.
8. Подпоринова Г.К. Изучение антиоксидантной активности стевии и продуктов ее переработки / Г.К. Подпоринова. Н.Д. Верзилина, Л.В. Рудакова, Н.К. Полянская, Я.И. Яшин // Пищевая промышленность. 2005.-№9.-С. 97.
9. Подпорииова Г.К. Получение порошкообразного подсластителя из стевии с использованием распылительной сушки / Г.К. Подпорииова. К.К. Полянский, Н.Д. Верзилина, Д.М. Богомолов // Пищевая промышленность. 2005.-№8 .-С. 134.
10. Подпорииова Г.К. Современное состояние технологии производства естественных подслащивающих добавок / Г.К. Подпорииова. К.К. Полянский, Н.Д. Верзилина // Известия высших учебных заведений «Пищевая технология». 2005г.-№4.-С. 39.
11. Подпорииова Г.К. Экстрагирование дитерпеновых гликозидов из растительного сырья стевии / Г.К. Подпорииова. К.К. Полянский, Н.Д. Верзилина // Известия высших учебных заведений «Пищевая технология». 2005г.-№4.-С. 38.
12. Подпорииова Г.К. Изучение химического состава растительного сырья стевии/ Г.К. Подпорииова. К.К. Полянский, Н.Д. Верзилина // Известия высших учебных заведений «Пищевая технология». 2005г.-№4.-С. 74 — 75.
13. Подпорииова Г.К. Совершенствование способов выделения дитерпеновых гликозидов из стевии / Г.К. Подпорииова. К.К. Полянский, Н.Д. Верзилина // Известия высших учебных заведений «Пищевая технология».2005.-№5,6.-С. 120-121.
14. Подпорииова Г.К. Антиоксидантная активность стевии и продуктов ее переработки / Г.К. Подпорииова. Н.Д. Верзилина, Л.В. Рудакова, Н.К. Полянская, Я.И. Яшин // Известия высших учебных заведений «Пищевая технология». 2005.-№5,б.-С. 121 - 122.
15. Подпорииова Г.К. Изучение химического состава стевии / Г.К. Подпорииова. К.К. Полянский, Н.Д. Верзилина // Пищевая промышленность. 2005.-№7.-С. 68.
16. Подпорииова Г.К. Стабилизация хозяйственных отношений в свеклосахарном подкомплексе на основе новых организационных форм / Г.К. Подпорииова. М.А. Смирнов // Сахарная свекла. - 2005. - №7. _ с. 14 - 16.
17. Подпорииова Г.К. Использование окислителей в технологии сахарного производства / Г.К. Подпорииова. И.В.Апасов, В.В. Агеев и др. // Сахарная свекла. - 2005. - №9. - С. 30 - 31.
18. Подпорииова Г.К. Получение идентификационных признаков экстракта стевии комбинацией методов многоволновой ВЭЖХ и главных компонент / Г.К. Подпорииова. В.А. Гаврилина, С.Н. Сычев, Н.Д. Верзилина, К.К. Полянский // Хранение и переработка сельскохозяйственной продукции. 2005. -№12.-С. 36-39.
19. Подпорииова Г.К. Применение озона в технологии сахарного производства / Г.К. Подпорииова. И.В. Апасов, В.В. Агеев, В.А. Федорук // Сахар. 2005. - №6. - С. 52 - 53.
20. Полянский К.К. Влияние продуктов переработки стевии на показатели антиоксидантной активности организма лактирующих коров / К.К. Полянский, С.Н. Семенов, Н.Е. Суркова, А.Н. Пономарев, Г.К. Подпорииова // Вестник РАСХН. - 2006. - №6. - С. 44 - 45 (в печати).
Отдельные издания:
21. Подпоринова Г.К. Подсластители и сахарозаменители: технология производства стевиол-гликозидов / Г.К. Подпоринова. К.К. Полянский, Н.Д. Верзилина - Воронеж: ВГАУ, 2006. - 116 с.
22. Подпоринова Г.К. Натуральные и искусственные подсластители: получение и экспертиза качества / Г.К. Подпоринова, Н.Д. Верзилина, О.Б. Рудаков, В.В. Хрипушин, К.К. Полянский - Москва: ДелиПринт, 2006. - 268 с. (в печати).
Прочие публикации:
23. Подпоринова Г.К. К вопросу получения натурального подсластителя из стевии / Г.К. Подпоринова. A.B. Корниенко, A.C. Корольков // Пути повышения эффективности свеклосахарного производства России в условиях рыночной экономики: Материалы Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 100-летию со дня рождения академика A.JI. Мазлумова. -Рамонь, 1996.-С. 17-18.
24. Подпоринова Г.К. Совершенствование технологии получения концентрата сладких веществ стевии / Г.К Подпоринова // Новые и нетрадиционные растения и перспективы их использования: Материалы III Международного симпозиума. - Пущино, 1999. - С. 122 - 124.
25. Подпоринова Г.К. Дитерпеновые гликозиды стевии - перспективы производства и использования / Г.К. Подпоринова Н Аграрная наука в начале 21 века: Материалы Международной научно-практической конференции. - Воронеж, 2001. - С. 210 - 212.
26. Верзилина Н.Д. О возможностях культуры стевии в условиях Центрально-Черноземной полосы / Н.Д. Верзилина, Г.К. Подпоринова // Проблемы интродукции и экологии Центрального Черноземья: Сб. науч. тр. ВГУ. - Воронеж, 1997.-С. 122- 124.
27. Верзилина Н.Д. Интродукция и рациональное использование стевии в агрокультуре / Н.Д. Верзилина, Г.К. Подпоринова И Рациональное использование ресурсного потенциала в агропромышленном комплексе: Материалы Всероссийской научно-практической конференции. — Воронеж, 1998. — С. 79.
28. Верзилина Н.Д. Биологические особенности роста и развития стевии в условиях умеренного климата / Н.Д. Верзилина, Т.П. Жужжалова, Г.К. Подпоринова // Итоги научно-исследовательских работ агрономического факультета. // Сб. науч. тр. посвященный 90- летию со дня рождения агрономического факультета, ВГАУ, 2004. - С. 26 - 33.
29. Подпоринова Г.К. Выделение дитерпеновых гл и коз идо в стевии из растительного сырья / Г.К. Подпоринова. Л.Н. Путилина, И.В. Апасов, A.B. Громковский // Прогрессивные технологии и оборудование для пищевой промышленности: Материалы III Международной научно-технической конференции, посвященной 100 — летию Заслуженного деятеля науки и техники РСФСР, профессора Попова В.И. - Воронеж: ВГТА, - 20Ö4. - С. 177 - 180.
30. Путилина Л.Н. Пути повышения комплексного использования сахарной свеклы / Л.Н. Путилина, Г.К. Подпоринова. В.А. Лосева. A.B. Корниенко // Прогрессивные технологии и оборудование для пищевой промышленности:
42
Материалы III Международной научно-технической конференции, посвященной 100 - летиго Заслуженного деятеля науки и техники РСФСР, профессора Попова В.И. - Воронеж: ВГТА, - 2004. - С. 186 - 188.
31. Подпоринова Г.К. Использование стевии при производстве продуктов лечебно-профилактического питания / Г.К. Подпоринова. Т.П. Жужжалова, Д.М. Богомолов // Интродукция нетрадиционных и редких растений: Материалы V Международной научно-практической конференции. — Ростовская обл., п. Персиановский: ДонГУ, - 2004. - С. 157 - 159.
32. Подпоринова Г.К. Дитерпеновые гликозиды стевии - перспективные натуральные подсластители / Г.К. Подпоринова. Д.М. Богомолов // Проблемы рационального использования растительных ресурсов: Материалы международной научно-практической конференции. — Владикавказ, - 2004. - С. 113.
33. Рудакова JI.B. Амперометрическое определение антиоксидантной активности стевии и других растительных экстрактов / Л.В. Рудакова, П.К. Полянская, Г.К. Подпоринова и др. // Материалы 2-ой Всероссийской конференции «Пути и формы совершенствования фармацевтического образования». -Воронеж: ВГУ, - 2005. - С. 31-34.
34. Подпоринова Г.К. Изучение химического состава растительного сырья стевии / Г.К. Подпоринова. Н.Д. Верзилина// Новые и нетрадиционные растения и перспективы их использования: Тез. докл. науч.-практ. конференции. -Пущино, - 2005. - С. 411-413.
35. Подпорпнова Г.К. Производство диетических напитков с использованием натурального подсластителя из стевии / Г.К. Подпоринова. Н.Д. Верзилина, К.К. Полянский Н И.В. Мичурин и агротехнические аспекты производства плодов и овощей на современном этапе: Материалы Международной научно-практической конференции, посвященной 150 - летию со дня рождения Великого преобразователя природы И.В. Мичурина. - Воронеж, - 2005. - С. 186 — 190.
36. Подпоринова Г.К. Динамика изменения качества свекловичного сырья / Г.К. Подпоринова. В.В. Агеев, И.В. Апасов // Особенности производства, хранения и переработки сахдрной свеклы на юге России: Материалы Международной научно практической конференции. - Гулькевичи, - 2005. - С. 123 - 127.
37. Подпоринова Г.К. Изучение химического состава новой сахароносной культуры - стевии / Г.К. Подпоринова. О.В. Харина // Вклад молодых ученых в решение проблем аграрной науки: Материалы Межрегиональной научно-практической конференции молодых ученых. - Воронеж, 2005. - С. 233 - 235.
38. Подпоринова Г.К. Получение порошкообразного подсластителя из стевии с использованием распылительной сушки / Г.К. Подпоринова. Д.М. Богомолов, В.В. Агеев // Вклад молодых ученых в решение проблем аграрной науки: Материалы Межрегиональной научно-практической конференции молодых ученых. - Воронеж, 2005. — С. 235 — 238.
39. Семенов C.II. Влияние продуктов переработки стевии на показатели АОА организма лактирующих коров / С.Н. Семенов, Н.Е. Суркова, Г.К. Подпоринова. И.Ю. Кушнир // Актуальные вопросы технологии животноводства, товароведения и ветеринарной медицины: Материалы научно-практической конференции проф.-нреп. и аспир. состава факультета «Технологии животноводст-
43
ва и товароведения» и факультета «Ветеринарной медицины». - Воронеж, 2006. -Выпуск 4, С. 54-56.
40. Полянский К.К. Основные характеристики нового природного анти-оксиданта на основе стевии / К.К. Полянский, С.Н. Семенов, Г.К. Подпоринова. Н.Е. Суркова // Актуальные вопросы технологии животноводства, товароведения и ветеринарной медицины: Материалы научно-практической конференции проф.-преп. и аспир. состава факультета «Технологии животноводства и товароведения» и факультета «Ветеринарной медицины». - Воронеж, 2006. — Выпуск 4, С. 60-61.
Техническая документация:
41. Пат. 2005117463/13(019889). Композиция для производства низкокалорийного молочного коктейля / Пономарев А.Н., Мерзликина A.A., Полянский К.К., Подпоринова Г.К., Верзилина Н.Д.; заявитель и патентообладатель ОАО Молочный комбинат «Воронежский», заявл. 07.06.2005.
42. Пат. 2005117464/13(019890). Творожная основа для производства низкокалорийного диетического изделия / Пономарев А.Н., Мерзликина A.A., Полянский К.К., Подпоринова Г.К., Верзилина Н.Д.; заявитель и патентообладатель ОАО Молочный комбинат «Воронежский», заявл. 07.06.2005.
Публикации, находящиеся в печати
1. Подпорииова Г.К. Накопление хлорогеновой кислоты в стевии в связи с ее плоидностыо / Подпорииова Г.К., Верзилина Н.Д., Жужжалова Т.П., Полянский К.К. И Растениеводство. 2006. - №. - с. (в печати).
2. Подпорииова Г.К. Экологически щадящая технология применения удобрений при возделывании стевии / Подпорииова Г.К., Жужжалова Т.П., Зимин М.В., Полянский К.К. // Вестник РАСХН. 2006. - №. - с. (в печати).
3. Подпорииова Г.К. Влияние элементов минерального питания на получение экологически чистого сырья стевии / Подпорииова Г.К., Жужжалова Т.П., Зимин М.В., Полянский К.К. И Сахарная свекла. 2006. - №. - с. (в печати).
4. Подпорииова Г.К. Особенности аминокислотного состава вегетативных органов стевии / Подпорииова Г.К., Верзилина Н.Д., Жужжалова Т.П., Полянский К.К. // Вестник РАСХН. 2006. - №. - с. (в печати).
Тип. ВГАУ. 3. № 725 - 20(16 г. О&исм 2.0 п. л. Т. 100.
Содержание диссертации, доктора сельскохозяйственных наук, Подпоринова, Галина Константиновна
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1 Анализ состояния проблемы и задачи исследований
1.1 Перспективность использования стевии в биохимической кор- 15 рекнии негативного воздействия стрессовых факторов окружающей среды
1.2 Научно-практическое значение и современное состояние эко- 21 логических исследований стевии
1.3 Физиолого-биохимические свойства подсластителя из стевии 45 и его влияние па организм человека
1.4 Экологические аспекты получения, оценки качества и исполь- 59 зовапия подсластителя из стевии и задачи исследований
ГЛАВА 2 Методология выполнения работы
2.1 Почвенно-климатические условия лесостепи ЦЧР
2.2 Организация работы
2.3 Объекты, методы и техника исследований
2.4 Методы математического планирования и обработки экспери- 80 ментальных данных
ГЛАВА 3 Разработка элементов экологически целесообразной 83 технологии возделывания стевии с целью получения экологически безопасного растительного сырья
3.1 Изучение химического состава растительного сырья стевии
3.2 Исследование влияния абиотических факторов на повышение 96 продуктивности и качественных показателей стевии
3.3 Изучение действия экологически обоснованных норм впесе- 108 пия минеральных удобрений и физиологически активных веществ на продуктивность и качественные показатели стевии
ГЛАВА 4 Разработка экологических основ технологической сис- 135 темы получения подсластителя из стевии заданного уровня качества
4.1 Изучение закономерностей экологически безопасного пронес- 147 са экстрагирования дитерпеповых гликозидов из растительного сырья стевии
4.2 Исследование экологических аспектов процессов удаления 163 балластных веществ из продуктов переработки стевии
4.3 Изучение закономерностей процесса сушки продуктов пере- 223 работки стевии, способствующего получению подсластителя с высокими пищевыми качествами
4.4 Синтез оптимальной структуры экологически сбалансирован- 247 ной технологической системы
ГЛАВА 5 Разработка экологически безопасной экспертной апа- 254 литической системы для определения качественных показателей сырья стевии и продуктов ее переработки
5.1 Определение аитиоксидаитиой активности стевии
5.2 Контроль содержания гликозидов в растительном сырье
5.3 Использование метода главных компонент при скрининговом 303 анализе продуктов переработки стевии
ГЛАВА 6 Конструирование новых лечебно-профилактических и 307 диетических продуктов питания на основе подсластителя из стевии
ГЛАВА 7 Технико-экономическая, экологическая и социальная 332 оценка разрабатываемой системы
7.1 Маркетинговые исследования
7.2 Оценка экономической эффективности разработанной 343 системы
7.3 Экологический мониторинг и социальная значимость разрабо- 349 танных технологий
Введение Диссертация по биологии, на тему "Экологические аспекты производства и переработки стевии"
Актуальность. Создавшиеся критические ситуации в области экологии, питания и здоровья жителей нашей планеты сдерживают устойчивое развитие человечества и представляют реальную угрозу для среды обитаиия, источников питания и здоровья людей. Эффективное и безопасное решение актуальнейших экологических, медицинских и многочисленных продовольственных проблем является важнейшей жизненно необходимой задачей для всего мирового сообщества.
В современном мире деятельность человеческого общества стала самым мощным средообразующим фактором. Поскольку возможности биосферы ограничены, ее ресурсы, жизненное пространство, все составляющие компоненты тесно взаимосвязаны и взаимозависимы, влияние человека на биосферу, на экосистемы распространилось значительно глубже и начало угрожать региональной и глобальной стабильности. В результате непреднамеренные негативные воздействия человека на биосферу привели к необходимости развития теории взаимодействия природы и общества, а самое главное, - к неотложному решению практических задач экологии. К таким задачам, в первую очередь, относятся: обеспечение экологической безопасности за счет неистощающего (рационального или комплексного) природопользования, разработка экологических основ и правил промышленного производства, выработка механизмов решения экологических проблем («Экологическая доктрина РФ», 2004).
Цивилизация человечества тесным образом была связана с введением в культуру диких растений и дальнейшей селекцией их на урожайность и качество продукции. Новые культуры чрезвычайно обогатили пищевой рацион людей, изменяя иногда традиционные особенности питания целых народов. Необходимо отметить, что растения, используемые человеком, в большинстве своем продуцируют сырье для выработки высококалорийных продуктов питания. Типичным примером являются сахарная свекла, сахарный тростник и получаемый из них сахар. Углеводы в настоящее время являются основным элементом рациона человека как высокоэнергетический продукт, и медицииские нормы предусматривают значительное количество потребляемых углеводов. Однако сложившийся стереотип питания привел к тому, что, получая с пищей чрезмерное количество калорий, большая часть населения имеет выраженные в различной степени нарушения обмена веществ. Это вызвано в определенной степени нерациональным несбалансированным питанием. Поэтому система питания человека должна измениться, и па смену высококалорийным продуктам должна последовать нища с незначительной энергетической ценностью, по с высоким содержанием витаминов, минеральных веществ и физиологически активных компонентов (Трибунская и др., 1970). В настоящее время в России, как и во многих странах мира, вопросы здорового питапия возведены в ранг государственной политики. В соответствии с «Концепцией государственной политики в области здорового питапия населения Российской Федерации до 2005 года», большое значение придается созданию технологической основы для производства качественно новых продуктов, не только удовлетворяющих физиологические потребности организма человека в пищевых веществах и энергии, но и выполняющих профилактические и лечебные цели (Ермилова и др., 2000).
Интерес к функциональным продуктам, которые оказывают регулирующее действие на организм и способны заменить лекарственные препараты, стремительно растет во всем мире. При этом особое внимание уделяется вопросам поддержания и восстановления микроэкологии человеческого организма.
В разрезе данной проблемы ведущую роль приобретает комплексное использование нетрадиционных растительных ресурсов, имеющих низкую калорийную эффективность, но обладающих эколого-протекториыми качествами. К таким культурам относится растение, родиной которого является Южный Парагвай, - стевия, содержащее в своем составе дитерпеповые гликозиды, основным из которых является стевиозид, обладающие высокой степенью сладости при практически нулевой калорийности. Кроме того, эти вещества не требуют для своего усвоения выработки инсулина и, следовательно, могут употребляться в пищу людьми, страдающими сахарным диабетом. Также, стевия является общепризнанными источниками флавопоидов, дефицит которых испытывает население России при неполноценном питании. Высокая биологическая активность флавопоидов обусловлена наличием антиоксидантных свойств и, как следствие, широким спектром фармакологического действия, в том числе капилляроукрепляющим (Р-активным) действием.
Интродукция стевии в центральную Европу и, особенно в Россию, начата только в последние десятилетия (Балашова, 1997). Кроме Южной Америки, стевия, благодаря интродукции, культивируется в ряде стран, где за пей предвидят большое будущее (Sasson, 1988). В России, Украине, Белоруссии и Грузии стевия вводится в культуру только с начала 80-х годов, хотя о "медовой траве" в России известно еще с 50-х годов (Алексеев, 1956).
Необходимо отметить, что в настоящий период в ряде стран осуществляется интенсивное изучение биологических особенностей, роста и развития стевии в естественных и искусственных условиях, биохимизма синтеза гликозидов и технологических приемов их выделения, возможностей промышленного использования гликозидов в пищевых отраслях. Широкое распространение стевии в нашей стране затрудняется недостаточной изученностью этой культуры в биологическом, физиолого-биохимическом и экологическом плане.
Растительный организм при переносе в новые условия существования проявляет специфические и неспецифические реакции адаптации к биотическим и абиотическим факторам среды. Кроме изменений морфолого-апатомического строения органов и тканей растений, происходит перестройка различных физиологических функций и биохимических процессов (Некрасов, 1980). Поэтому большое значение имеет экологическое, физиологическое и биохимическое изучение интродуцируемых растений, выявление их защитных реакций и подбор физиологически активных средств эндогенного и экзогенного происхождения, повышающих их агроэкологическую устойчивость. Чрезвычайно важно выявление условий, определяющих цепные биологические особенности для получения экологически чистого растительного сырья, и разработка элементов технологии переработки стевии, которые необходимы для успешного введения ее в культуру.
В связи с этим постановка проблемы в направлении формирования экологических аспектов производства, переработки, оценки качества и использования подсластителя из стевии весьма актуальна и своевременна.
Целыо исследований было разработать элементы экологически целесообразной технологии возделывания стевии, способствующие получению экологически чистого растительного сырья, выявить экологические аспекты и физико-химические закономерности процессов получения подсластителя из стевии заданного уровня качества и оптимальные технологические решения и рецептурные составы функциональных пищевых продуктов на основе стевиозида.
Работа выполнялась в соответствии с целевыми научными программами, координируемыми Министерством сельского хозяйства Российской Федерации в соответствии с планом НИР ВНИИСС PACXII 11.07. «Разработать способы извлечения и очистки различных видов сахаристых веществ и натуральных подсластителей с целыо комплексной переработки растительного сырья, снижения эпергоматериалаемкости производства при высокой экологической безопасности», ФГОУ ВПО «Воронежский госагроупиверситет имени К.Д.Глиики».
В задачи исследований входило:
1. Изучить особенности формирования экологически чистого сырья стевии при разных условиях минерального питания и применении физиологически активных веществ.
2. Определить химический состав сухих листьев стевии. Изучить аминокислотный состав, аитиоксидантпую активность стевии, характеризующие данную культуру как источник ценной пищевой добавки для питания человека.
3. Установить оптимальные параметры экологически целесообразных процессов получения подсластителя из стевии; разработать физико-химические основы экотехнологий подсластителя заданного уровня качества; сформировать структуру экологически сбалансированной технологической системы и научно обосновать выбор оптимальных режимов.
4. Разработать экологически безопасные способ извлечения и промышленную технологию получения биологически активных концентратов стевии, обеспечивающие предотвращение загрязнения природной среды и минимизацию воздействия производства па окружающие экосистемы.
5. Разработать экологически безопасную методику экспресс-контроля качества стевиозидсодержащих продуктов и сложнорецептурпых композиций, содержащих подсластитель из стевии.
6. Оптимизировать рецептурный состав и способы производства пищевых продуктов па основе стевии.
7. Провести маркетинговые исследования, определить перспективные направления использования подсластителя из стевии. Оцепить экономическую эффективность, экологическую безопасность и социальную значимость разработанных технологий.
Научная новизна исследований
Впервые показано, что применение низких доз элементов минерального питания не оказывает влияния на рост, развитие, формирование урожая, химического состава и содержание дитерпеновых гликозидов в листьях стевии, способствуя получению экологически чистого растительного сырья стевии. Определено влияние регуляторов роста экзогенного происхождения на степень использования стевией минеральных веществ, установлено, что ростовые вещества нового поколения (ретардант с проауксиповым эффектом 577) в сочетании с минеральными удобрениями стимулируют продуктивные и качественные показатели стевии.
Получены новые данные о высокой антиоксидаптиой активности стевии и продуктов ее переработки, что определяет перспективность использования сте-виозида в виде биологически активной добавки в пищевых продуктах функционального назначения. Выявлены незначительные изменения в содержании хлорогеновой кислоты характеризующей аитиоксидаптпую активность у форм различной плоидпости.
Впервые в России разработана экологически безопасная технологическая система получения биологически активных концентратов из стевии. Предложенное технологическое решение обеспечивает предотвращение загрязнения природной среды.
Установлена безвредность полученных экстрактов и продуктов переработки стевии, исследованы физико-химические свойства новых продуктов. Выявлена специфическая активность препаратов стевии, обусловленная наличием антиоксидаптов.
Предложен метод определения стевиозида па основе высокоэффективной жидкостной хроматографии, позволяющий оптимизировать аналитический процесс для растительного сырья и продуктов его переработки.
Установлено, что применение комбинации методов мпоговолповой ВЭЖХ и главных компонент позволяет выделить идентификационные признаки подсластителя из стевии и пищевых продуктов па его основе.
Разработана экологически сбалансированная система производства и переработки стевии, способствующая внедрению стевии в с/х производство и расширению ассортимента функциональных продуктов питания для коррекции питания населения, что позволит приблизиться к решению проблем экологического аспекта применения БАД растительного происхождения, гармонизации микроэкологического статуса человеческого организма и минимизации негативного воздействия стрессовых факторов окружающей среды.
Практическая значимость заключается в решении народнохозяйственной задачи введения стевии в ареал возделываемых сельскохозяйственных культур ЦЧР, что позволит использовать это цепное растение в производстве пищевых продуктов и лекарственных препаратов.
Несомненное практическое значение имеют разработанные экологически безопасные технологии производства растительного сырья стевии и получения биологически активных концентратов стевии. Предложенный способ получения соответствует современным требованиям "чистых технологий": в качестве сырья используются растения стевии, выращенные без применения средств химизации при оптимальном фоне минерального питания, в качестве экстрагепта - экологически безопасный водный экстрагент, обороты экстрагепта и воды насосов технологически зациклованы. Данный способ относится к практическим решениям путрициологии (экологии человека) и не требует значительных затрат, являясь универсальным и комплексным.
Предложенная методика экспресс-определения флавопоидов применима пе только для пофазного контроля качества продуктов переработки стевии, ио и для идентификации сложнорецепурных продуктов, содержащих антиокси-данты.
Разработанный метод определения стевиозида па основе высокоэффективной жидкостной хроматографии может найти применение в качестве контрольного при выращивании стевии и ее первичной и вторичной переработке.
Разработанные рецептуры низкокалорийных диетических молочных продуктов, соков, напитков могут быть рекомендованы для использования в пищевой и молочной промышленности.
Метод главных компонент (разновидность корреляционного анализа) дает статистический паспорт вещества и может найти применение в биологических анализах при обработке данных по выделению наиболее значимых показателей.
Результаты исследования могут быть использованы в учебном процессе по экологическим дисциплинам в высших и среднеснециальпых учебных заведениях аграрного профиля.
Положения диссертации, выносимые па защиту:
1. Биологические особенности и химический состав, определяющие значимость стевии для интродукции в ЦЧР как ценного источника биологически активного, экологически безопасного растительного сырья, для выработки подсластителя.
2. Динамика изменения химического состава и содержания дитерпеновых гликозидов в листьях стевии, позволяющие использовать экологически обоснованную технологию применения удобрений для обеспечения максимального уровня эколого-продукциопиого потенциала культуры и получения экологически безопасного растительного сырья.
3. Физико-химические основы процесса экстрагирования дитерпеновых гликозидов, способствующие организации процесса с применением экологически безвредного экстрагепта и эффективным использованием отходов переработки.
4. Физико-химическое особенности, результаты экспериментальных исследований и анализ закономерностей процессов реагептпой и безреагентной очистки гликозидсодержащих растворов, обеспечивающие высокий эффект очистки при одновременной минимизации загрязнения окружающей среды.
5. Физико-химические свойства концентрата из стевии, характеризующие его как перспективный объект сушки. Результаты экспериментальных исследований и анализ закономерностей процесса обезвоживания концентрата стевии, способствующие оптимальной организации процесса при минимальных потерях целевого компонента и получении продукта с выраженными эколого-нищевыми свойствами.
6. Разработанная технологическая система и научное обоснование выбора оптимальных режимов, являющаяся основой получения подсластителя из стевии заданного уровня качества при одновременной экологической безопасности производства.
7. Результаты маркетинговых исследований, экономической, экологической и социальной оценки разработанных технологий, прогнозирующие динамичный рост потребления подсластителя из стевии.
8. Разработанная комплексная экологически сбалансированная система, реализующая все стадии производства, оценки качества и использования подсластителя из стевии максимально эффективно при высоком рейтинге экологической безопасности.
Апробация работы. Основные положения диссертационной работы докладывались и получили положительную оценку па:
Международных симпозиумах и научных конференциях: «Новые и нетрадиционные растения и перспективы их практического использования» (2003 - 2006 гг., г. Пущино); «Экологические аспекты интенсификации сельскохозяйственного производства» (2002 г., г. Пенза); «Проблемы современного растениеводства» (2002 г., г. Пенза); «Медицинской ботаники» (1997 г., г. Киев), «Интродукция нетрадиционных и редких растений» (2004 г., п. Персианов-ский); Всероссийских научно-практические конференции: «Резервы стабилизации аграрного производства» (1996 г., г. Воронеж); «Молодые ученые и специалисты сельскому хозяйству» (1997 г., г. Курск); «Рациональное использование ресурсного потенциала в агропромышленном комплексе» (1998 г., г. Воронеж); «Аграрная паука в начале XXI века» (2001 г., г. Воронеж), «Актуальные проблемы сельскохозяйственной биотехнологии» (2004г., г. Воронеж), «Прогрессивные технологии и оборудование для пищевой промышленности» (2004г., г. Воронеж), «Пути и формы совершенствования фармацевтического образования» (2005 г., г. Воронеж), «Вклад молодых ученых в решение проблем аграрной науки» (2005 г., г. Воронеж), «И. В. Мичурин и агротехнические аспекты производства плодов и овощей на современном этапе» (2005 г., г. Воронеж), «Проблемы рационального использования растительных ресурсов» (2005 г., г. Владикавказ); координационных совещаниях НИИ и вузов Центрально-Черноземного региона: (2000-2005 гг., Воронеж); конференциях профессорско-преподавательского состава, научных сотрудников и аспирантов Воронежского ГА У им. К.Д.Глипки (2000 - 2005 гг.).
Публикации. Материалы диссертационной работы опубликованы в 2 монографиях (в печати), а также в 38 научных и паучпо-методических работах, опубликованных в различных изданиях, в том числе в изданиях реферируемых ВАК РФ. Получены положительные решения на выдачу патентов по двум заявкам на изобретения: № регистрации 2005117463 и № регистрации 2005117464.
Структура и объем диссертации.
Диссертация состоит из введения, 7 глав, выводов и предложений по практическому использованию результатов исследований, она изложена на 470 страницах машинописного текста, содержит 77 таблиц, 66 рисунков, 6 приложений, список литературы из 664 наименований, в том числе 179 иностранных авторов.
Заключение Диссертация по теме "Экология", Подпоринова, Галина Константиновна
ОСНОВНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ И ВЫВОДЫ
1. Выявлены особенности формирования экологически чистого сырья стевии при разных условиях минерального питания и применении физиологически активных веществ. Определено, что наибольшую прибавку продуктивных и качественных показателей стевии обеспечивает совместное применение гиббереллина 10 мг/л и ретарданта 577, но вместе с тем эта прибавка незначительна и лишь немного превышает контрольный вариант. Т. обр., применение стимуляторов роста при возделывании стевии не обеспечивает значимого увеличения продуктивных и качественных показателей, что может служить основой для производства экологически чистого сырья стевии. Внесение элементов минерального питания в оптимальной дозе повысило урожайность стевии, при этом наибольшая урожайность сформировалась при внесении NPK (45) и составила 42,0 ц/га сухого листа, что па 23,5 % превышает неудобренный вариант.
2. Исследован химический состав сухих листьев стевии, в частности, количество дитерпеновых гликозидов. Установлено содержание в вегетативной массе стевии (абсолютно сухое вещество) в фазу бутонизации (хозяйственная спелость) 1,89 % азота, 0,43 % фосфора и 1,74 % калия. Внесение элементов питания в различных дозах обеспечивало их повышенное накопление в вегетативных органах растений. Показано, что вносимые с удобрениями тяжелые металлы не снижают урожайности стевии, вынос наибольшего количества меди, цинка, железа, кадмия и никеля с урожаем стевии отмечен на фоне NPK (90). Определено отсутствие в сухом листе стевии или содержание незначительного количества, гораздо меньшее допустимого для БАД растительного происхождения, уровня вредных веществ, токсических элементов и радионуклидов. В условиях ЦЧР получено экологически чистое растительное сырье стевии, как при возделывании па неудобренном фоне, так и при внесении различных доз минерального питания. Показано, что уровень ЛОЛ не зависит от обеспеченности растения элементами минерального питания. Установлена закономерность, свидетельствующая об отсутствии зависимости между уровнем минерального питания и основными продуктивными и качественными показате-^ лями растительного сырья стевии. Проведен скрининг аминокислотного состава стевии. Показан высокий уровень антиоксидантпой активности стевии и продуктов ее переработки, характеризующий данную культуру как источник ценной пищевой добавки для питания человека. Выявлены незначительные различия в содержании хлорогеновой кислоты у форм различной плоидности.
3. Предложен метод контроля количественного содержания стевиозида с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии, который может использоваться для экспресс-контроля качества растительного сырья и продуктов переработки стевии и идентификации сложнорецентурных продуктов питания, содержащих подсластитель из стевии. Метод предназначен для рутинных анализов и является экологически безопасными. Применение комбинации методов мпоговолновой ВЭЖХ и главных компонент позволяет выделить идентификационные признаки подсластителя из стевии для последующего их использования при определении подлинности этого продукта.
4. Теоретически обоснована возможность экстрагирования, разработаны физико-химические основы процесса экстракции гликозидов из растительного сырья стевии и предложен экологически безопасный способ получения биологиче
Ф ски активных экстрактов стевии, который заключается в экстракции водным экстрагептом. Оптимизированы технологические параметры процесса экстракции.
5. Исследованы закономерности, определены оптимальные параметры, установлена взаимосвязь и последовательность процессов удаления балластпых веществ из растворов стевии. Разработаны технологические схемы и технологические регламенты процессов реагептной и безреагептной очистки стевиозидсодержащих растворов, обеспечивающие высокий эффект очистки, высокую селективность, предотвращение потерь нелевых компонентов и высокую экологическую безопасность процессов, при одновременном повышении эколого-пищевых достоинств вырабатываемого продукта.
6. Изучены теплофизические свойства концентрата сладких веществ стевии, характеризующие его в качестве перспективного объекта сушки. Теоретически обоснованы, экспериментально исследованы механизмы и выявлены основные закономерности процесса вакуум-сублимационного обезвоживания концентрата, которое обеспечивает получение экологически чистого продукта при максимальной степени (до 96 %) сохранения целевых веществ. Показана высокая экологическая безопасность технологического процесса.
7. Разработана структура технологической системы и научно обоснованы параметры получения подсластителя из стевии заданного уровня качества. Исследованы качественные характеристики получаемых по разработанным технологиям продуктов, показаны их высокие эколого-физиологические свойства и перспективность использования в качестве БАД. Результаты исследований предполагают возможность применения полученных продуктов в качестве вку-со-ароматических добавок, пищевых красителей и путрицевтиков, способствующих повышению устойчивости организма к воздействиям техногенного характера. Предложенные способ извлечения и промышленная технология получения биологически активных концентратов стевии обеспечивают предотвращение загрязнения природной среды и минимизацию воздействия производства па окружающие экосистемы. Результаты работы внедрены в производство и используются в учебном процессе.
8. Оптимизирован рецептурный состав и способы производства пищевых продуктов па основе стевии. Разработанные технологические приемы выработки и рецептуры пищевых продуктов диетического назначения позволяют получать ценные в пищевом аспекте композиции, обладающие выраженными эколого-физиологическими достоинствами и гармоничными вкусовыми качествами.
9. Закономерным результатом всего обширного комплекса георетиче-* ских и практических исследований явился синтез комплексной системы получения, оценки качества и использования подсластителя из стевии, способствующей сохранению экологического и биосоциального баланса экосистемы.
10. Проведены маркетинговые исследования, техпико-экоиомические расчеты, убедительно доказывающие высокую эффективность и значимость внедрения разработанной системы в широкую производственную практику. Систематизированы и получены новые данные о направлениях использования подсластителя из стевии. Установлено, что предложенные технические решения позволяют повысить экологическую безопасность технологических и про* изводственпых процессов получения биологически активных компонентов стевии. Оценена социальная значимость работы для решения экологической и биосоциальной проблем обеспечения населения России функциональными пищевыми продуктами нового поколения, с выраженным иммуномодели-рующим и стресспротекторным действием.
ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПО ПРАКТИЧЕСКОМУ ИСПОЛЬЗОВАНИЮ
1. При возделывании в производственных условиях стевию следует раз-« мещать по предшественнику - озимая пшеница. Рекомендуемая схема посадки 25x70 см, которой соответствует густота стояния растений 57,1 тыс. шт./га. Внесение азотно-фосфорно-калийных удобрений NPK (45) увеличивает сбор сухого листа и гликозидов. Выращивание стевии с применением предложенных технологических элементов позволит производителям сельскохозяйственной продукции повысить рентабельность возделываемых культур и получить экологически чистое растительное сырье стевии с целью выработки ценного продукта питания для населения.
2. Для обеспечения высоких качественных показателей концентрата сладких веществ, вырабатываемого из растительного сырья стевии, рекомендуется экологически сбалансированная технология, включающая водную экстракцию; реагептиую (соли алюминия; известь и углекислый газ), безреагент-ную (ультрафильтрация, центрифугирование, ионный обмен и электроактивация) или комбинированную очистку; концентрирование; вакуум-сублимационное обезвоживание.
3. Разработанная методика количественного определения стевиозида с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии, рекомендуется для контроля качественных параметров в процессе переработки растительного сырья и проведения рутинных анализов при отборе растительных образцов.
4. Разработанные рецептуры низкокалорийных диетических пищевых продуктов могут быть рекомендованы для использования в перерабатывающей промышленности.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Стевия в последнее время привлекает внимание исследователей в связи с наличием в ее составе комплекса биологически активных веществ, способных оказывать эколого-протекторное действие на организм человека на микроэкологическом уровне, что, несомненно, оказывает благоприятное воздействие на функционирование всей экосистемы. ^ Хотя стевия является тропической культурой и имеет, в связи с этим, определенные биологические особенности - требования к длине дня, температуре, влажности почвы и воздуха; убедительно показана возможность интродукции и возделывания ее во многих районах страны, в том числе и в ЦЧР. Но для того, чтобы успешно возделывать стевию в климатических условиях данной зоны, необходимы исследования продукционного процесса данной культуры, вследствие чего нами было проведено изучение эколого-биологических и агрофито-ценотических особенностей, в частности, требований к долготе дня, формирования ее генеративных органов, листьев, представляющих собой, во-первых, ассимиляционный аппарат, определяющий продуктивность растений, и, во-4 вторых, хозяйственную часть продукции стевии. Изучение агроэкологических особенностей стевии показало, что эта многолетняя теплолюбивая культура, в отличие от своего естественного ареала, может возделываться в ЦЧ зоне по однолетнему циклу с использованием вегетативного размножения. Установлено, что особенностью стсвии является замедление ее роста и развития с конца мая и по конец июня, после чего следует период интенсивного роста до сентября. Полученные данные позволяют, в определенной стенеии, осуществлять контроль репродуктивного процесса с целыо реализации наиболее важных элементов продуктивности стевии. ^ Отмечено, что увеличение критической длины дня с 10 до 12 часов приводит к увеличению продуктивных показателей растений: длины стебля, количества и площади листьев; а также качественных характеристик: содержания экстрактивных веществ, в целом, и гликозидов, в частности.
Исследование эффективности применения ростовых веществ свидетельствует о том, что действие стимуляторов роста при возделывании стевии не обеспечивает значимого увеличения продуктивных и качественных показателей, что может служить основой для производства экологически чистого сырья стевии.
Отмечено влияние сбалансированных доз минерального питания на эко-лого-продуктивный потенциал культуры, так внесение удобрений повысило урожайность стевии - наибольшая урожайность сформировалась при внесении NPK (45) и составила 42,0 ц/га сухого листа, что па 23,5 % превышает неудобренный вариант. Повышение урожая вегетативной массы стевии па удобренном фоне сопровождается увеличением выноса элементов питания (N, Р, К) из почвы. Это происходит за счет повышения содержания элементов питания в растениях, а, в итоге, и в сырье.
Установлено, что вносимые с удобрениями тяжелые металлы не снижают урожайности стевии. Наибольшие количества меди, цинка, железа, кадмия и никеля выносятся с урожаем стевии на фоне NPK (90), однако концентрация всех анализируемых элементов в вегетативных органах стевии не превышает ПДК. Это свидетельствует о необходимости применения оптимальных доз удобрений, что позволит снизить концентрацию тяжелых металлов на единицу урожая, и обеспечит получение растительного сырья стевии с высоким уровнем урожайности и достаточными экологическими и технологическими показателями качества. Помимо того, в сухом листе стевии отсутствовало или содержалось незначительное количество, гораздо меньшее допустимого для БАД растительного происхождения уровня содержания вредных веществ, токсических элементов и радионуклидов. Следовательно, в условиях ЦЧР возможно получение экологически чистого растительного сырья стевии, как при возделывании на неудобренном фоне, так и при внесении оптимальных доз минерального питания.
Установлено, что уровень антиоксидантной активности не зависит от обеспеченности растения элементами минерального питания, видимо, накопление значительного количества антиоксидантов в растительных тканях обусловлено генетическими особенностями стевии. Отмечена закономерность, свидетельствующая об отсутствии зависимости между уровнем минерального питания и основными продуктивными и качественными показателями растительного сырья стевии.
Изучение биохимических особенностей стевии, в частности, содержания свободных аминокислот в листьях различных селекционных образцов, показало, что изменение генетической системы растения в ходе окультуривания и по-липлоидизации приводит к изменению в содержании некоторых аминокислот. Важной особенностью стевии является, показанная в наших экспериментах, высокая аитиоксидаитная активность ее препаратов, что обусловливает высокую эколого-пищевую ценность этого растения. Кроме того, было выявлено ге-нотипическое разнообразие стевии по содержанию хлорогеновой кислоты, обладающей аптиоксидаптпой активностью, что обусловливает возможность селекции стевии на увеличение содержания в ней аптиоксидантов.
Определена оптимальная структура технологической системы получения подсластителя из стевии, включающая следующие основные подсистемы: экстракции, очистки, концентрирования и сушки. На стадии экстракции доказана возможность использования в качестве экстрагента воды, что не только позволяет максимально снизить содержание сопутствующих примесей и упростить дальнейшую очистку экстракта, но и способствует экологизации процесса. Рассмотрение процессов очистки экстракта стевии в виде единой, взаимосвязанной системы позволило спрогнозировать получение готового продукта высокого качества, с выраженными стресспротекторпыми и аптиоксидантными свойствами, с наименьшими затратами материальных и энергетических ресурсов, при одновременном обеспечении высокой экологической безопасности производственных процессов, что также подтверждено практически.
Использование предлагаемого технологического решения па стадии сушки, способствует получению подсластителя высокого потребительского достоинства при одновременном повышении экологической безопасности производства, а именно, применение вакуум-сублимационного обезвоживания позволяет избежать многостадийного процесса отделения балластных веществ, что влечет за собой исключение: использования реагентов для рафинации, образования фильтрационных осадков и регенератов, требующих дальнейшей утилизации.
Разработанная нами методика контроля содержания стевиозида в растительном сырье с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии, отличающаяся простотой определения и возможностью использования для рутинных анализов, может применяться как для анализа продуктов питания, так и растительных образцов.
Была проведена работа по использованию стевии как источника нату ральпых низкокалориипых подслащивающих компонентов диетического назначения и получены продукты: молочные коктейли, йогурты, творожные изделия, имеющие гармоничный вкус и нежную консистенцию; соки и напитки со сте-вией, обогащенные витаминами, микроэлементами, антиоксидантами.
Таким образом, в результате теоретических и экспериментальных исследований изучены экологобиологические характеристики стевии и выявлены особенности, которые необходимо учитывать при возделывании в условиях ЦЧ зоны, с целью получения экологически чистого растительного сырья. Разработана безотходная технология производства концентрата сладких веществ стевии, позволяющая не только обеспечивать высокую экономическую эффектив-* ность производства, но и решать проблему защиты окружающей среды при выпуске данного продукта. Предложена экспертная аналитическая система скрининга качественных показателей сырья стевии но основным эколого-пищевым параметрам, позволяющая осуществлять оперативный контроль па различных стадиях технологического цикла.
Резюмируя результаты проведенной работы, необходимо отметить, что исследованиями были затронуты, с одной стороны, основные экологобиологические и агрофитоценотические характеристики стевии, связанные с теоретическими и практическими задачами ее возделывания в климатических ^ условиях зоны и приемами повышения ее продуктивных и качественных показателей, а с другой, физико-химические основы и закономерности технологических процессов, связанных с получением основных, представляющих интерес в пищевом отношении, продуктов жизнедеятельности стевии - стевиолгликози-дов. Итогом чего явилось формирование экологически сбалансированной системы получения, оценки качества и использования подсластителя из стевии, который, с одной стороны, является необходимым для человека нутрицевти-ком, с другой стороны, логическим завершением цикла рациональной переработки растительного сырья стевии.
Библиография Диссертация по биологии, доктора сельскохозяйственных наук, Подпоринова, Галина Константиновна, Воронеж
1. Агаев Ю.М. Закономерности клеточного морфогспегического эффекта плоидности (на примере рода Morus L.) / Ю.М. Агаев, А.А. Гуламов // Экспериментальная полиплоидия у шелковицы. Баку: ЭЛМ, 1976.-С. 232-255.
2. Агафонов Н.С. Влияние пролина на метаболические процессы, связанные с морозостойкостью озимой пшеницы / II.C. Агафонов, А.А. Кутовой, А.Ф. Шумейко // Сборник научных работ НИИСХ ЦЧГ1 им. В.В.Докучаева. 1975.- Т. 9, вып. 1. - С.11-18.
3. Агроклиматические ресурсы Белгородской области. Л.: Гидрометеоиздат, 1978. №7. - 79 с.
4. Агроклиматические ресурсы Гидрометеоиздат, 1972. 119 с.
5. Агроклиматические ресурсы Гидрометеоиздат, 1971. 104 с.
6. Агроклиматические ресурсы Гидрометеоиздат, 1971. 124 с.1. Воронежской области. Л.:1. Курской области. Л.:1. Липецкой области. Л.:
7. Агроклиматические ресурсы областей ЦЧР. JL: Гидрометеоиздат, 1971.1971, 1972, 1974.
8. Агроклиматические ресурсы Орловской области. JL: Гидрометеоиздат, 1972. - 119 с.
9. Агроклиматические ресурсы Тамбовской области. JL: Гидрометеоиздат, 1974. - 102 с.
10. Аеров М.Э. Гидравлические и тепловые основы работы аппаратов со стационарным и кипящим зернистым слоем / М.Э. Аеров, С.М. Тодес. JL: Химия, 1968. - 510 с.
11. Азрилевич М.Р. Заменители сахара / М.Р. Азрилевич // Пищевые ингредиенты: сырье и добавки. 2001. - № 2. - С.42-44.
12. Акатов П.М. Перспективы внедрения сахароносной культуры стевии / П.М. Акатов, И.В. Апасов, Г.К. Подиоринова // Сахарная свекла. 2004. № 10. - С. 31 - 33.
13. Александров JT.B. Системный анализ при создании и освоении объектов техники / JI.B. Александров, П.Г1. Шепелев // Обзорная информация. М.: АгроНИИТЭИММП, 1992. - 69 с.
14. Алексеев В.П. Медовая трава "каа-хэ" / В.Г1. Алексеев // Бюллетень ВНИИ чая и субтропических культур. 1956. - №1. - С. 12-14, С. 168-169.
15. Алиев Д.А. Фотосинтетическая деятельность, минеральное питание и продуктивность растений / Д.А. Алиев; Баку: Изд. "ЭЛМ", 1974. -335 с.
16. Алиев Д.А. Особенности первичных реакций фотосинтеза в хлоропластах различных генотипов пшеницы / Д.А. Алиев и др. // Известия АН АзССР, сер. биол. наук. 1988. - N 3. - С. 3-12.
17. Алиев Д.А. Значение фотосинтетических признаков в урожайности и использование их в селекции идеальной пшеницы / Д.А. Алиев, Э.Г. Казибекова // Фотосинтез и продукционный процесс. М.: Наука, 1988.-С. 237-242.
18. Алиев Д.А. Транспорт и распределение ассимилятов при различных допорно-акцепторных отношениях у генотипов пшеницы / Д.А. Алиев и др. // Изв. АН Азербайджана, сер. биол. наук. 1990. - N 1. -С. 114-119.
19. Алиев Д.А. Особенности метаболизма углерода у генотипов пшеницы, контрастных по фотосиптегическим признакам / Д.А. Алиев и др. // Физиол. раст. 1996. - Т. 43, N 1. - С. 49-56.
20. Алмаши А. Быстрое замораживание пищевых продуктов / А. Алмаши, А. Эрдели, Т. Шарой. Пер. с венгер. М.: Легкая и пищевая промышленность, 1981. - 236с.
21. Амелии А.В. Морфофизиологические основы повышения эффективности селекции гороха: Автореф. дисс. . докт. биол. наук. -М., 2001.-346 с.
22. Андреев JI.H. Проблемы интродукции растений в XXI веке / J1.H. Андреев, Б.Н. Головкин // Проблемы ботаники па рубеже XX-XXI веков: Тезисы докл. 2 (X) съезда Русского бот. об-ва. СПб.: Ботанический институт РАН (Т. 2), 1998. С. 268.
23. Андреева Т.Ф. Фотосинтез и азотный обмен листьев / Т.Ф. Андреева; М.: Наука, 1969. 200 с.
24. Апдреепко С.С. Изменение содержания азота и свободных аминокислот в растениях кукурузы при различных рН среды / С.С. Андреенко, Н.Д. Алехина // Научн. докл. высшей школы, сер. биол. наук. 1962.-N4.-С. 167-170.
25. Андруз Дж. Введение в химию окружающей среды / Андруз Дж. и др.. -М: Мир, 1999.-272с.
26. Анишин СЛ. Влияние площади питания стевии на урожай сухого листа в Западной лесостепи Украины / СЛ. Анишин // Введение в культуру стевии низкокалорийного заменителя сахара. - Киев: Изд. ВНИС,1990. - С. 63-66.
27. Апасов И.В. Влияние окислителей на красящие вещества в сахарной промышленности / Апасов И.В., Агеев В.В., Подпорипова Г.К. // Пищевая промышленность. 2005. - №11. - С. 60.
28. Апасов И.В. Использование окислителей в технологии сахарного производства / Апасов И.В., Агеев В.В., Подиоринова Г.К. // Сахарная свекла. 2005. - №9. - С. 30 - 31.
29. Ахназарова СЛ. Оптимизация эксперимента в химии и химической технологии / C.JI. Ахназарова, В.В. Кафаров.- М.: Высшая школа, 1978.-319с.
30. Ахназарова C.JI. Статистические методы планирования и обработки экспериментов / C.JI. Ахназарова, В.В. Кафаров. М.: Изд-во МХТИ, 1972.-289с.
31. Барамбойм Н.К. Механохимия высокомолекулярных соединений / ПК. Барамбойм; М.: Химия, 1978.-384 с.
32. Барыбина Л.И. Изучение качественных показателей модельных фаршевых систем, содержащих КСБУ / Л.И. Барыбина, С.И. Постников // Сб.науч.трудов Сер. Продовольствие. Мясная нром-ть, вып.2. Ставрополь, 1999. - С.56-59
33. Баславская С.С. Практикум по физиологии растений / С.С. Баславская, О.М. Трубецкова. М.: Изд. МГУ, 1964. - 328 с.39.
34. Бассам Д.А. Путь С02 в фотосинтезирующем растении / Д.А.
35. Бассам, M.II. Кальвин // Труды V Междупар. биохим. конгресса, симп. VI. М.: АН СССР, 1962. - С. 300-335.
36. Бачурина Т.П. Разработка технологии деминерализованной творожной сыворотки на основе электродиализа: Автореф. дисс .к.т.н.- М., 1987. 19 с.
37. Беденко В.П. Фотосинтез и продуктивность пшеницы на юго-востоке Казахстана / В.Г1. Беденко; Алма-Ата: Изд. "Наука Казахск. ССР", 1980.-224 с.
38. Бедных Б.С. Использование различных углеводных компонентов в питании детей раннего возраста / Б.С. Бедных, Т.А. Антипова, В.Н. Сергеев // Обзорная информация. Сер. Молочная промышленность. М: АгроНИИТЭИММП, 1989.-33 с.
39. Безлер Н.В. Физиологически активные вещества и адаптация стевии в ЦЧЗ / II.В. Безлер // Новые и нетрадиционные растения и перспективы их практического использования: Тезисы докл. II междупар. симпозиума, т. 2. Пущино. 1997. - С. 27-28.
40. Белецкий Ю.Д. Пара-амипобеизойиая кислота повое биологически активное соединение / Ю.Д. Белецкий; - Ростов-па Дону: Изд. университета, 1993. - 61 с.46.
41. Беликов И.Ф. Основные закономерности транспорта ираспределения ассимилятов у сельскохозяйственных растений / И.Ф. Беликов // Тр. Биолого-ночвеппого ип-та (Владивосток). Т. 20 (123).-С. 154-160.
42. Беличенко A.M. Современные технологии и тенденции в развитии безалкогольной индустрии напитков в России / A.M. Беличенко //Вопросы питания. 1999. - № 2. - С. 24-26.
43. Белов Н.И. и др. Ультрафильтрация и ее применение в технике / Н.И. Белов и др. // ЦНИИТЭИпищепром, Экспресс информация. Сахарная промышленность. -1974. - Вып. 3 - С. 1 -2.
44. Бенин Г.С., Шнайдер Е.Е. Тр. ЦИНСа. Выи. 1, 21, (1951).52.
45. Бенин Г.С., Шнайдер Е.Е. Тр. ЦИНСа. Вып. 2, 69-87, (1953).
46. Бенин Г.С. Применение ионитов в сахарной промышленности / Г.С. Бенин; Москва: изд. научпо-техн. об-ва пищ. пром., 1959. -128 с.
47. Бенин Г.С. Сах. пром. № 4, 56 (1956).
48. Бенин Г.С. Сах. пром. № 12, 41 (1957).
49. Бетрозов О.И. Интенсификация технологии молочного сахара: Автореф. дисс .к.т.н.-М., 1990.-21 с.
50. Бирюков С.В. Взаимосвязь между продуктивностью и физиологическими параметрами ассимиляционного аппарата растений озимой пшеницы в связи с созданием сортов интенсивного типа/С.В. Бирюков и др.//С/х биология. 1986.-N 16. - С. 8-13.
51. Благовещенский А.В. Биохимическая эволюция цветковых растений / А.В. Благовещенский; М.: Наука, 1966. - 326 с.
52. Блауберг И.В. Становление и сущность системного подхода / И.В. Блауберг, Е.Г. Юдин. М.: Наука, 1973. - 211с.
53. Бляхман Д.А. Исследование процесса вакуум-сублимационнойсушки хлебопекарных дрожжей па инертных носителях: Дисс. канд. техн. наук. Воронеж, 2001. - 198 с.
54. Боннер Дж. Молекулярная биология развития / Дж. Боннер. М.: Мир, 1967.- 179 с.
55. Бочарова М.А. Действие физиологически активного соединения картолина на морозостойкость озимой пшеницы / М.А. Бочарова,
56. Т.И. Трунова, II.B. Астахова // Тезисы докладов V республиканской конференции "Физиологические основы повышения продуктивности и устойчивости зерновых культур". Целиноград. -1984.-С. 39.
57. Брехов А.Ф. Разработка способа получения экструдированных ^ сублимированных пищевых продуктов с заданными свойствами /
58. А.Ф. Брехов и др. // Модернизация существующего и разработка новых видов оборудования для пищевой промышленности: Сб. науч. тр. Вып. 13 Воронеж, гос. техпол. акад. - Воронеж, 2003. - С. 8184.
59. Бритиков Е.А. Влияние пролина на поглощение кислорода тканями растений/ Е.А. Бритиков, Г.Ф. Липскеис // Физиол. раст. 1970. - Т. 17, N4.-С. 645-654.
60. Броупштейп Б.И. Физико-химические основы жидкостной экстракции / Б.И. Броупштейп, А.С. Железняк. Л.: Химия, 1966. -318с.
61. Бугаепко И.Ф. Достижения в производстве и применении сахара и подслащивающих веществ / И.Ф. Бугаепко // Итоги пауки и техники. 1990.-Т. 3.- 130 с.
62. Будак Б.М. Разностный метод со сглаживанием коэффициентов длярешения задачи Стефана / Б.М. Будак, Е.Н. Соловьева, А.Б. Успенский // ЖВМ и МФ. 1965. - Т. 5, № 5. - С. 828-840.
63. Булдаков А.С. Пищевые добавки / А.С. Булдаков. СПб., «Ut», 1996. - 240 с.
64. Бутепко Р.Г. Влияние картолина на морозостойкость культурыкаллуспой ткани озимой пшеницы / Бутепко Р.Г. и др.// Докл. АН СССР. 1982. - Т. 2, N 1. - С. 253-253.
65. Быков О.Д. О возможности селекционного улучшения фотосинтетических признаков сельскохозяйственных растений / О.Д. Быков, М.И. Зеленский // Физиология фотосинтеза. М.: Наука,1982.-С. 294-310.
66. Быстрых Е.Е. Фотофосфорилироваиие и продуктивность яровой щ пшеницы / Е.Е. Быстрых, Н.И. Володарский // Сельскохоз. биол.1983,-N9.-С. 27-30.
67. Варданян Г.С. Малоотходная технология рафинированного молочного сахара: Автореф.дисс .к.т.и.-Ставрополь, 1987.-18с.
68. Васшькев1ч C.I. Фггаб1ялапчпыя даследаванне Stevia rebaudiana як патуральнага подсаложвалыпка / СЛ. Васшькев1ч и др. // Вес. АН БССР, сер. биол. н.- 1991.-N3.-C. 114-117.
69. Верба М.К. Исследование процесса сушки материалов методом сублимации. Автореферат кандидатской диссертации, М., 1955. -22 с.
70. Верзилина Н.Д. О возможностях культуры стевии в условиях Центрально-Черноземной полосы / Н.Д. Верзилина, Г.К. Подпоринова // Проблемы интродукции и экологии Центрального Черноземья: Сб. науч. тр. ВГУ. Воронеж, 1997. - С. 122 - 124.
71. Вижиитайте Г.Д. Углеводы молока и молочных продуктов и методы их определения / Г.Д. Вижиитайте, П.Ф. Дьяченко. М.: ЦНИИТЭИ, 1968.- 40 с.
72. Виноградова 10.К. Микроэволюция интродуцировапных растении: теория и эксперимент / Ю.К. Виноградова // Проблемы интродукции растений и отдаленной гибридизации: Тез. докл. Междунар. конф. -М.- 1998.-С. 30-32.
73. Власюк П.А. Химические элементы и аминокислоты в жизни растений, животных и человека / Власюк П.А. и др.. Киев: Наукова думка, 1979. - 280 с.
74. Возможности антиоксидантов // СИБ "Масла и жиры", М.: 2005. -№1 (47).-С. 9.
75. Вознесенский B.JI. Методы исследования фотосинтеза и дыхания растений / B.JT. Вознесенский, О.В. Заленский, О.А.Семихатова. -М.-Л.: Наука, 1965.-305 с.
76. Володарский Н.И. Использование показателей первичных реакций фотосинтеза для диагностики высокой продуктивности яровой пшеницы / Н.И. Володарский, Е.Е. Быстрых // Докл. ВАСХНИЛ. -1982.-N 12.-С. 4-6.
77. Володарский Н.И. Первичные реакции фотосинтеза у высокопродуктивных сортов озимой пшеницы / Н.И. Володарский, Е.Е. Быстрых, Николаева Е.К. // Докл. ВАСХНИЛ. 1981. - N 2. - С. 12-14.
78. Володарский Н.И. Фотохимическая активность хлоропластов высокопродуктивных сортов озимой пшеницы / II.И. Володарский, Е.Е. Быстрых, Николаева Е.К. // Сельскохоз. биол. 1980. - Т. 15, N 3.-С. 366-373.
79. Волохвипский В.М., Пасечник К.А. Сах. пром., № 10,20 (1945).
80. Волыпец А.З. Кинетика процесса сублимационной сушки в электромагнитном поле СВЧ / А.З. Волыпец. Тр. МИХМ, 1969. - Т. I, вып. 2 - С. 75-76.
81. Волыпец А.З. Особенности кинетики процесса сублимационной сушки в поле СВЧ / А.З. Волынец. ЭОМ, 1970. - Т. 6 - С. 44-47.
82. Волыпец А.З. Тепло- и массообмен в технологии сублимационого обезвоживания в вакууме. Автореферат докторской диссертации. М., I960. 32 с.
83. Гавриленко В.Ф. Особенности фотосинтетического энергообмена сортов пшеницы различной продуктивности / В.Ф. Гавриленко, Т.В. Жигалова // Физиолого-биохимические особенности пшениц разной продуктивности. М.: Колос, 1980. - С. 5-44.
84. Гавриленко В.Ф. Активность фотоэнергетических реакций у проростков различных по продуктивности сортов пшеницы / В.Ф. Гавриленко, Т.В. Жигалова, Е.М. Бассарская // Физиол. и биохим. культ, раст. 1985. - Т. 17, N 3. - С. 275-279.
85. Гацеико Р.В. Связь урожайности озимой пшеницы с показателями ассимиляционной поверхности / Р.В. Гаценко, Г.Л. Тимошенко //
86. Вопросы физиологии пшеницы. Кишинев: Штиинца, 1981. - С. 5052.
87. Гвасалия В.П. Изчепие возделывания двулистпика сладкого (медовая трава каа-хэ) в условиях Абхазии / В.П. Гвасалия, Н.В. Коваленко, М.Ч. Гаргулия // Субтропические культуры. 1990. - N 5.-С. 149-156.
88. Георгиевский В.П. Биологически активные вещества лекарственных растений / В.П. Георгиевский, Н.Ф. Комиссаренко, С.Е. Дмитрук. -Новосибирск: Наука. Сиб. отд-ние, 1990. 333 с.
89. Герасименко А. А. Инообменные смолы в пищевой промышленности / А.А. Герасименко, М.А. Абрамова, П.В. Головин. Киев. 1962. 276 с.
90. Гсршанович В.П. Биохимия и генетика транспорта амнокислот убактерий / В.П. Гершапович // Успехи биологической химии. М.: Наука, 1975. - Т. XVI. - С. 135-164.
91. Гинзбург А.С. Инфракрасная техника в пищевой промышленности / А.С. Гинзбург. М., Пищевая промышленность, 1966. - 407 с.
92. Гинзбург А.С. Исследование переноса водяного пара при сублимации льда в каниллярнопористом теле. Тепло- и массообменф в капиллярно-пористых телах / А.С. Гинзбург, К.Б. Гисина. Минск,
93. Паука и техника, 1965. 106 с.
94. Гинзбург А.С. Теплофизичсские характеристики пищевых продуктов / А.С. Гинзбург, М.А. Громов, Г.И. Красовская. М.: Пищевая пром-ть. 1980.-288 с.
95. Гинзбург Л.С. Массообмепные характеристики пищевых продуктов/ А.С. Гинзбург, И.М. Савина. -М.: Пищевая иром-ть, 1982.-280 с.
96. ГН 2.2.5.1313-03 "Предельно-допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны": Утв.гл.гос.сап.врачом РФ 27 апреля 2003 г. М.: "Стандарты", 2004. - 147 с.
97. Головин П.Г., И.Р. Роминский, MJI. Ромаикевич Сов. авт. свид. № 22017(1950).
98. Горбатова К.К. Биохимия молока и молочных продуктов / К.К. Горбатова. М.: Легкая и пищевая промышленность, 1984.-344с.
99. ГОСТ 18078-72 Экстракты плодовые и ягодные. Технические условия. Издание официальное. Переиздание с изменениями. М.: Изд-во стандартов, 1991. - 15 с.
100. ГОСТ 24027.2-80 Сырье лекарственное растительное. Методы определения влажности, содержания золы, экстрактивных и дубильных веществ, эфирного масла. Издание официальное. М.: Изд-во стандартов, 1980. 12 с.
101. ГОСТ 25555.0-82 Продукты переработки плодов и овощей. Методы определения титруемой кислотности. Издание официальное. М.:
102. Изд-во стандартов, 1980. 4 с.
103. ГОСТ 28539-90 Соки плодово-ягодные спиртованные. Технические условия. Издание официальное. М.: Изд-во стандартов, 1990. - 10 с
104. ГОСТ Р 51135-98 Изделия ликероводочиые. Правила приемки и методы анализа. Издание официальное. М.: Изд-во стандартов, 1998. -27 с.
105. ГОСТ Р 51434-99 Соки фруктовые и овощные. Метод определения титруемой кислотности. Издание официальное. М.: Изд-во стандартов, 1999. 13 с.
106. ГОСТ Р 51434-99 Соки фруктовые и овощные. Метод определения титруемой кислотности. Издание официальное. М.: Изд-во стандартов, 1999. 13 с.
107. Гребинский С.А. Рост растений / СЛ. Гребинский. Львов: Изд. Львовского госуниверситета, 1961. - 296 с.
108. Гриб С.И. Опыт использования сооружений искусственного климата / С.И. Гриб, В.А. Еременко, Т.Е. Свиридова // Селекция и семеноводство. 1979. - N 5. - С. 27-29.
109. Грин Д. Молекулярные аспекты жизни / Д. Грин, Р. Гольдбергер. -М.: Мир, 1968.-400 с.
110. Гродзинский A.M. Краткий справочник по физиологии растений / A.M. Гродзинский, Д.М. Гродзинский. Киев: Наукова думка, 1973. -591 с.
111. Груповская В.А. Использование бифидобактерий в рационах молодняка сельскохозяйственных животных / В.А. Груповская, Т.М. Эрвольдер, С.А. Гудков // Обзорная информация. М.: АгроНИИТЭИММП, 1991.- 24 с.
112. Гуйго Э.И. Исследование и разработка методов интенсификации сублимационной сушки пищевых продуктов. Автореферат докторской диссертации. М.: МТИШ, 1956. - 48 с.
113. Гуйго Э.И. Сублимационная сушка в пищевой промышленности / Э.И. Гуйго, Н.К. Журавская, Э.И. Каухчешвили. М.: Пищевая промышленность, 1972. -434 с.
114. Гуляев Б.И. Некоторые физиологические особенности различных по продуктивности сортов яровой пшеницы / Б.И. Гуляев, К.П. Голик // Вопросы физиологии пшеницы. Кишинев: Штиинца, 1981. - С. 4143.
115. Гухман А.А. О характере сублимации льда в вакууме / А.А. Гухмап, А.З. Волынец. ИФЖ, 1968. Т. 15. - С. 778-781.
116. Дворкип В. И. Метрология и обеспечение качества химического анализа / В. И. Дворкип. М.: Химия, 2001. -240 с.
117. Деминерализация методом электродиализа / Д.Уилсон и др.; -под ред. Д.Уилсона.- М. Госатомиздат, 1963. 351 с.
118. Денисова Г.А. Терпеноидсодержащие структуры растений / Г.А. Денисова. JI.: Наука, 1989. - 90 с.
119. Дзюба О.О. Стевия Stevia rebaudiana (Bertoni) Hemsley -интродукция, морфология, биология, возделывание: Автореф. дис. . канд. биол. п. - Санкт-Петербург, 1999. - 15 с.
120. Дзюба О.О. Изменчивость признаков у клопов стевии, полученных из каллусной ткани/ О.О. Дзюба, J1.E. Горбатепко // Тезисы докл. Н(Х) съезда Русского ботан. общества. Санкт-Петербург. - 1998. -Т. 1.-С. 115.
121. Воробьев А.А. Дисбактериозы актуальная проблема медицины. / А.А. Воробьев и др. // Вестник РАМН. - №3. -1997. - С.-6.
122. Дисбактериозы у детей. Учебное пособие для врачей и студентов / А.А. Воробьев и др., под ред. А.А. Воробьева М: КМК Лтд., 1998.- 64с.
123. Доспехов Б.И. Методика полевого опыта / Б.II. Доспехов. М.: Колос, 1979.-416 с.
124. Дубровин И. А. Ценообразование в маркетинге / И. А. Дубровин // Молочная промышленность. №5. - 1993. - С.8-10.
125. Дудкин М.С. Новые продукты питания / М.С. Дудкин, Л.Ф. Щелкунов. М.:МАИК «Наука», 1998. - 304 с.
126. Думанский А.В. Учение о коллоидах / А.В. Думанский. M-J1, Госэпергоиздат, 1948.-416 с.
127. Дыкало Н.Я. Исследование процесса электродиализного обессоливания молочной сыворотки и разработка технологииполучения сухой деминерализованной сыворотки: Автореф. дисс.к.т.н.- М.,1979. 21 с.
128. Дытнерский Ю.И. Исследование свойств пропитанных мембран / Ю.И. Дытперский /1-я Всесоюзная конференция по мембранным методам разделения смесей. Тезисы докладов. М., МХТИ, 1973. - С. 152.
129. Дытнерский Ю.И. Мембранные процессы разделения жидких смесей/ Ю.И. Дытнерский; М.: «Химия», 1975. 359 с.
130. Дэвидсон Дж. Биохимия нуклеиновых кислот / Дж. Дэвидсон; М.:1. Мир, 1968.-334 с.
131. Евдокимов И.А. Научно-технические основы интенсивной технологии молочного сахара. Автореф. дисс. . д.т.н. М., 1998.49 с.
132. Ермакова Е.А. Некоторые результаты экспериментального исследования теплообмена при сублимации льда / Е.А. Ермакова.щ ИФЖ. 1958. - № 12. - С 57-64.
133. Ермакова Е.А. О механизме тепло- и массообмепа при сублимации льда под вакуумом / Е.А. Ермакова. ИФЖ. - 1958. - № 11. - С 3234.
134. Ермилова Е.В. Антиокислительпая активность экстрактов водяники черной / Ермилова Е.В. и др. // ХФЖ. 2000. - Том 34, № 11. - С. 28-30.
135. Жирмунская Н.М. Новый регулятор роста этамон стимулятор роста корневой системы / Н.М. Жирмунская и др. // Агрохимия. -1991. -N 1.- С. 96-104.
136. Зак Е.Г. К вопросу о путях использования аминокислот при фотосинтезе / Е.Г. Зак, А.А. Ничипорович // Физиол. раст. 1964. -Т. 11, N6.-С. 945-950.
137. Зак Е.Г. Образование аминокислот при фотосинтезе: идентификация и деградация глицина, аланина и серина / Е.Г. Зак, А.А. Ничипорович // Физиол. раст. 1964. - Т. 11, N 1. - С. 20-30.
138. Закревская Л.Г. Содержание витаминов группы В в тканях и органах гетерозиспых гибридов и самоопыленных линий кукурузы: Автореф. дис. канд. биол. п. Харьков, 1967. - 22 с.
139. Заявка Великобритании № 1499717, МКИ С13К 10/00, А23К 1/08. Способ получения порошка, содержащего лактулозу, и его применение в кормах / Морипага Милк Инд., заявл.30.06.76, опубл.01.02.78. Приор. Японии 4.06.75 (50/81936) и 5.06.75 (50/83188).
140. Заявка ЕВП № 0302948 А2; заявл. 21.07.87. № 87110541.7; опубл. 15.02.89; МКИ4 C07II15/276; А231 1/22.
141. Заявка ФРГ № 2630157, МКИ Ф23С 23/00. Способ производства содержащего лактулозу порошка / Морииага Милк Инд., заявл. 5.07.76, опубл.31.01.80. Приор. Японии 4.07.75 (81936) и 8.07,75 (83188).
142. Заявка Японии № 52-21063, МКИ С13К 13/00. Способ получения высокочистой порошкообразной лактулозы / Морипата Нюгёк, заявл.26.09.72, опубл.8.06.77.
143. Зубепко В.Ф. Корневая система стевии при вегетативном размножении / В.Ф. Зубепко // Сахарная свекла. 1995. - N 10. - С. 117-118.
144. Зубепко В.Ф. Новый природный заменитель сахара / В.Ф. Зубенко // Вестник с.-х. пауки. 1990. - N 3. - С. 93-96.
145. Зубепко В.Ф. Выращивание рассады стевии / В.Ф. Зубенко и др. // Сахарная свекла. 1992. - N 6. - С. 38-39.
146. Зубенко В.Ф. Хранение корневищ стевии при размножении зелеными черенками / В.Ф. Зубенко и др. // Докл. ВАСХНИЛ. -1991.-N6.-С. 20-22.
147. Зубепко В.Ф. Возбудители болезней стевии и оценка пораженное™ растений / В.Ф. Зубенко и др. // Введение в культуру стевии. Киев: ВНИС, 1990.-С. 67-73.
148. Зубенко В.Ф. Стимулирование фитогормопами приживаемости черенков стевии и рост рассады / В.Ф. Зубенко и др. // Докл.
149. ВАСХНИЛ. 1991.-N2.-С. 16-18.
150. Зубепко В.Ф. Рождение новой отрасли / В.Ф. Зубепко, Б.Д. Чудповский // Сахарная свекла. 1990.- N 5. - С. 49-50.
151. Зуев М.Д. Энциклопедия свеклосахарного производства / М.Д. Зуев; К.: Изд. Сахаротреста, 1924. Т. 2. - 452с.
152. Ильин О.В. Возделывание стевии в интенсивной светокультуре / О.В. Ильин, Т.О. Ильина // Тез. I Междупар. симпозиума "Новые и нетрадиционные растения и перспективы их использования". -Пущино. 1995. - С. 500-501.
153. Инихов Г.С. Методы анализа молока и молочных продуктов / Г.С Инихов, Н.П. Врио. М.: Пищевая промышленность, 1971. - 423 с.
154. Инструкция по порядку и периодичности контроля за содержанием микробиологических и химических загрязнителей в молоке и молочных продуктах на предприятиях молочной промышленности.- М, 1996. 88 с.
155. Инструкция по техпохимическому контролю и учету сахарного производства. Киев, «Пищевая промышленность», 1989г., 347 с.
156. Ионообменные методы очистки веществ / А.Г. Чикин, О.Н. Мягкова; под ред. А.Г. Чикииа.- Воронеж: Изд-во ВГУ, 1984.- 372 с.
157. Исидоров В.И. Введение в химическую экотоксикологию / В.И. Исидоров. СПб.: Химиздат, 1999. - 143 с.
158. Полянский К.К. Использование концентрата стевии в пищевых продуктах / К.К. Полянский, Н.Д. Верзилипа, Г.К. Подпоринова // Вестник Российской академии сельскохозяйственных паук. №5. -2004. - С. 86-88.
159. Шаповалова JT.П. Исследование анионитовых мембран МА-40 в процессе электродиализной обработки растворов лакто-лактулозы / Шаповалова Л.П. и др.. Деп. В ВИНИТИ 11.11.96, № 3281-В96.-7 с.
160. Камовпиков Б.Л. Исследования, методы расчета и оптимизация процесса вакуум-сублимационной сушки мясных- и молочных продуктов. Автореферат докторской диссертации. М.: МТШ1МШ, 1980.- 39 с.
161. Карпиловская Е.Д. Исследования мутагенной активности сахарола / Карпиловская Е.Д. и др. // Введение в культуру стевии источника низкокалорийного заменителя сахара. - Киев: ВИИС, 1990. - С. 125130.
162. Каррер П. Курс органической химии / П. Каррер; Л.: Гос. научно-гехп. изд-во химической литературы, 1966. 1216 с.
163. Кафаров В.В. Основы массопередачи / В.В. Кафаров; М.: «Высшая школа», 1962. 655 с.
164. Кафаров В.В. Системный анализ процессов химической технологии/ В.В. Кафаров, И.Н. Дорохов. М.: Наука, 1976.-500 с.
165. Кафтанов С.В. Мембранная технология повое направление в пауке и технике / С.В. Кафтанов // -1 - я Всесоюзная конференция по мембранным методам разделения смесей. Тезисы докладов. - М., МХТИ. -1973. - С. 121.
166. Ким Ю.М. Интродукция стевии в Узбекистане / Ю.М. Ким, Е.Е. Талалова // Сб. научных тр. по прикл. ботанике, генетике и селекции. СПб., 1991.- Т. 144. - С. 186-191.
167. Кириченко Е.Б. Прогресс фитофизиологии и совершенствование принципов интродукции растений / Е.Б. Кириченко // Проблемы интродукции растений и отдаленной гибридизации: Тез. докл. Междунар. конф. М. - 1998. -С. 83-85.
168. Кислякова Т.Е. Взаимосвязь структуры и функции фотосинтетического аппарата в онтогенезе картофеля / Т.Е. Кислякова, Б.М. Голубкова, И.И. Богачева // Физиол. раст. 1967. -Т. 14, N 1.-С. 5-14.
169. Клюкач В.А. Концепция организации маркетинга в пищевой промышленности / В.А. Клюкач, В.Д. Гончаров. М.: АгроНИИТЭИММП, 1994. - 20 с.
170. Кокотов Ю.А. Иониты и ионный обмен / Ю.А. Кокотов.- JI.: Химия , 1980.-150 с.
171. Комаров В.И. Некоторые инновации в создании пищевых продуктов / В.И. Комаров // Вестник PACXII. 2000. - №1. -С.86-88.
172. Комиссаренко Н.Ф. Дитерпеновые гликозиды и фепилпропаноиды листьев Stevia rebaudiana Bertoni / Н.Ф. Комиссаренко и др. //
173. Растительные ресурсы. 1994. - Т. 30, N 1-2. - С. 53-64.
174. Кондарова И.В. Особенности азотного обмена зимостойких и незимостойких древесных растений / И.В. Кондарова // Физиология морозостойкости древеных растений. М.: Наука, 1964. - С. 95-104.
175. Конн Г.О. Синдромы печеночной комы и лактулоза / Г.О. Конн, М.М. Либертал. М.: Медицина, 1983.-С.339-377.
176. Корниенко А.В. Возделывание стевии / Корниенко А.В. и др. // Сахарная свекла. 1995. - N 10. - С. 22-24
177. Концепция государственной политики в области здорового питания населения России на период до 2005 года // Молочная промышленность. 1998. - №2. - С.5-7.
178. Корнилова О.В. Стевия продуцент низкокалорийиых соединений -заменителей сахара / О.В. Корнилова, В.Г. Ладыгин, Г.А. Семенова // Новые и нетрадиционные растения и перспективы их практического использования: II-й Международный симпозиум,
179. Пущино, 1997: Тез. докл., т. 2. Пущипо. - 1997. - С. 53-55.
180. Коробова М.М. Биологические особенности и химический состав Stevia rebaudiana (Bertoni) Hemsl. при интродукции в Ленинградскую область: Автореф. дис. . канд. биол. п. Санкт-Петербург, 2000.- 19 с.
181. Коробова М.М. Опыт выращивания Stevia rebaudiana в Ленинградской области / М.М. Коробова // Биологическое разнообразие. Интродукция растений: Материалы II Междупар. конф. СПб. - 1999. - С. 387-389.
182. Коровин С.Е. Еще раз о направлении иитродукци-онных исследований в ботанических садах / С.Е. Коровин, А.С. Демидов // Проблемы интродукции растений и отдаленной гибридизации: Тез. докл. Междупар. конф. -М. 1998. - С 107-108.
183. Косариков А.Н. Эволюция производств к чистым технологиям / А.И. Косариков // Экология производства. Научно-технический и методический журнал. М.: ЗАО "Отраслевые ведомости", 2004. -№1. - С. 58-60.
184. Костина В.В. Натуральный подсластитель стевиозид / В.В. Костина // Молочная промышленность. 2004. - N 1. - С. 44-45.
185. Котлер Ф. Основы маркетинга / Ф. Котлер; пер. с англ. Бизнес-книга, 1995. 702с.391 М.:
186. Кочетов А.А. Стратегия ускорения интродукции новых культур прииспользовании регулируемой агроэкосистемы (па примере стевии и дайкопа) / А.А. Кочетов // Аграрп. Россия. 2001. - N6. - С. 60-62.
187. Кравченко Э.Ф. Исследование процессов очистки молочной сыворотки: Авторсф.дис .к.т.н.-М., 1973.-18 с.
188. Кретович BJI. Обмен азота в растениях / B.JI. Кретович,' М.: Наука, 1972.- 527 с.
189. Кретович BJI. Основы биохимии растений / В.Л. Кретович; М.:
190. Советская наука, 1952. 487 с.
191. Кретович В.Л. Усвоение и превращение азота у растений/ В.Л. Кретович, З.С. Каган // Физиология сельскохозяйственных растений, том 2. М.: Изд. МГУ, 1967. - С. 217-288.
192. Крутошикова А. Подслащивающие вещества в пищевой промышленности / А. Крутошикова, М. Угер. М.: Агропромиздат, 1988.- 157 с.
193. Ксепз Л.И. Выращивание рассады стевии па разных фонах удобрений / Л.И. Ксепз, О.В. Савенкова, Л.П. Шишко // Введение в культуру стевии низкокалорийного заменителя сахара. - Киев: Изд. ВИИС, 1990.-С. 36-43.
194. Ксепз Л.И. Действие удобрений па продуктивность стевии / Л.И. Ксепз, Л.А. Сичкар, В.В. Корчак // Введение в культуру стевии -низкокалорийного заменителя сахара. Киев: Изд. ВНИС, 1990. - С. 58-62.
195. Кузьмин З.Е. Интродукция растений и экологическая безопасность / * З.Е. Кузьмин, С.Е.Коровип // Проблемы интродукции растений иотдаленной гибридизации: Тез. докл. Междуиар. копф. М. - 1998. -С.115-116.
196. Кузьмина К.М. Фотосиитетическая деятельность различных по скороспелости форм яровой пшеницы на Юго-Востоке: Автореф. дис. канд. биол. н. Л., 1972. - 24 с.
197. Кумаков В.А. Итоги исследований по частной физиологии яровой пшеницы и физиологическое обоснование модели сорта / В.А. Кумаков // Физиологические и генетические основы селекции. -Саратов. 1984.-С. 3-11.
198. Кумаков В.А. Структура фотосинтетического потенциала разных сортов яровой пшеницы / В.А. Кумаков // С/х биол. 1968. - Т. 3, N1. З.-С. 362-368.
199. Кумаков В.А. Физиологическое обоснование модели сортов пшеницы / В.А. Кумаков; М.: Колос, 1985. 270 с.
200. Кумаков В.А. Физиология яровой пшеницы/ В.А. Кумаков; М.: Колос, 1980.-207 с.
201. Кумаков В.А. Эволюция показателей фотосинтетической деятельности в процессе селекции яровой пшеницы / В.А. Кумаков // Теоретические основы фотосинтетической продуктивности. М.: Наука, 1972.-С. 500-503.
202. Курбапов К.Б. Об энергетической эффективности фотосинтеза у сортов пшеницы различной урожайности / К.Б. Курбанов, К.М. Касумов, Б.Э. Рустамов // Проблемы фотоэнергетики растений иповышение урожайности. Львов. - 1984. - С. 86-87.
203. Курсапов А.Л. Транспорт ассимилятов в растении / A.JI. Курсапов; -М.: Наука, 1976.-646 с.
204. Лапин М.М. Растениеводство с основами селекции и семеноводства / М.М. Лапин; М.: Гос. изд-во сельскохоз. лит-ры, 1956. - 560 с.
205. Лапин П.И. Пути охраны и обогащения растительности / М.М.
206. Лапин; М.:3нание, 1978. - 64 с.
207. Лебедев Д.П. Тепло- и массообмен в процессах сублимации в вакууме / Д.П. Лебедев, T.JI. Перельман. М.: Энергия, 1973. - 336с.
208. Лейбовский М.Г. Современное оборудование для мембранных методов разделения смесей / М.Г. Лейбовский; М.: «ЦИ11ТИХИМНЕФТЕМАШ», 1975.-С. 11.
209. Лепипджер А. Биохимия / А. Лепипджер; М.: Мир, 1976. - 957 с.
210. Леопольд А. Рост и развитие растений / А. Леопольд; М.: Мир, 1968.-494 с.
211. Либерман С.Г. Переработка крови убойных животных па мясокомбинатах / С.Г. Либерман, Л.С. Пожарская, М.Л. Файвишевский. М.: Пищевая промышленность, 1980. - 200 с.
212. Лимарепко АЛО. Stevia rebaudiana: вырщивапие в условиях закрытого грунта и фармакологические свойства. Перспективы применения / АЛО. Лимарепко и др.//Биологическое разнообразие. Интродукция растений: Материалы научи, конф. СПб. - 1995. - С. 156-157.
213. Липатов Н.Н. Экология молока и молочных продуктов / Н.Н. Липатов // Обзорная информация. М.: АгроНИИТЭИММП, 1991.69 с.
214. Липатов П.П. Вопросы экологизации пищевых производств / Н.И. Липатов, Л.Л. Лисенкова// Вестник PACXII. 1995. - №3. - С.22-23.
215. Липатов Н.Н. Мембранные методы разделения молока и молочных продуктов / Н.Н. Липатов, В.А. Марьип, П.А. Фетисов. М.:
216. Пищевая промышленность, 1976.-168 с.
217. Липатов С.М. Физико-химия коллоидов / С.М. Липатов; М-Л.: Госхимиздат, 1948.- 372 с.
218. Лисицин В.П. Стевия подсластитель или лекарственное растение /
219. B.Н. Лисицип, Е.Л. Волович // Молочная промышленность. 2002. -N5.-С. 1-4.
220. Лисицин В.Н. Стевия повое сахароносное растение / В.Н. Лисиции, Е.Л. Волович // Пищевая промышленность. - 2002. - №5.1. C. 29-30.
221. Литвииенко Л.Г. Фотохимическая активность хлоропластов и продуктивность сельскохозяйственных растений / Л.Г. Литвииенко //Научи, труды Украинской с.-х. акад. 1974. - Вып. 102. - С. 59-65.
222. Литвииенко Л.Г. О связи между фотохимической активностью хлоропластов и интенсивностью фотосинтеза некоторых сельскохозяйственных растений / Л.Г. Литвииенко, Гуляев Б.И. // Физиол. и биохимия культурн. растений. 1972. - Т. 4, N 3. - С. 230232.
223. Лобанова А.А. Исследование биологически активных флавоноидов в экстрактах из растительного сырья / А.А. Лобанова, В.В. Будаева, Г.В. Сакович // Химия растительного сырья. 2004. - № 1. - С. 4752.
224. Лобов С.В. Синтез и выделение продуктов трансгликозировапия стевиозида / С.В. Лобов // Введение в культуру стевии. Киев: ВНИС, 1990.-С. 109.
225. Логвинов Н.Е., Г.Д. Соболева, Н.И. Онуфриева. Труды ЦИНСа. -1937.
226. Лосева В.А. Интенсификация очистки соков и сиропов в сахарном производстве / В.А. Лосева; Воронеж: ВГУ, 1990. - 176 с.
227. Лукашэвич Н.П. Фотасштэтычная дзейпасуль пасевау гароху ва умовах Беларуа / Н.П. Лукашэвич // Becni АН БССР. Сер. сельскагасп. п.- 1992.- С. 21-28.
228. Лурье А.А. Сорбенты и хроматографические носители (справочник) /
229. A.А. Лурье; М.: Химия, 1972.-320 с.
230. Лыков А.В. Теория сушки / А.В. Лыков; М.: Энергия, 1968. - 471 с.
231. Лыков А.В. Теория тепло- и массопереноса / А.В. Лыков, Ю.А.
232. Михайлов. М.-Л.: Госэпергоиздат, 1963. - 536 с.
233. Лыков А.В. Теория тепло- и массопереноса / А.В. Лыков, Ю.А. Михайлов. М.-Л., Госэпергоиздат, 1963. - 535 с.
234. Лысянский В.М. Исследование процесса противоточного массообмепа в системе твердое тело жидкость. Дисс. на соискание ученой степени канд. техн. наук. Киев, 1958. 200 с.
235. Лысянский В.М. О коэффициенте диффузии сахара в свекле /
236. B.М. Лысянский; Труды Киевск. техпол. ин-та нищ. пром-ти, 1953.-вып. 13.-С. 51-61.250.
237. Лысянский В.М. Исследование массообмепа в диффузионныхаппаратах непрерывного действия / В.М. Лысяпский, А.П. Верхола, Н.П. Путапко // Сахарная промышленность. 1966. - № 6. -710с.
238. Ляпшипа З.Ф. Зависимость урожая зерна от продуктивности фотосинтеза яровой пшеницы / З.Ф. Ляшиина // Важнейшие проблемы фотосинтеза в растениеводстве. М.: Наука, 1970. - С 161-170.
239. Ляховкин А.Г. Стевия медовая трава: растение лекарственное и пищевое в вашем доме / А.Г. Ляховкин, А.П. Николаев, В.Б. Учитель. - СПб., 1999. - 96 с.
240. Ляховкин А.Г. Результаты изучения мировых растительных ресурсов во Вьетнамо-Российском центре интродукции, селекции и семеноводстве с/х культур / А.Г. Ляховкин и др. // Ханой, 1992. -С. 111-112.
241. Ляховкин А.Г. Медовая трава во Вьетнаме / А.Г. Ляховкин и др. // -Ханой, 1992.- 36 с.
242. Максимов В.И. Кислотность кишечника как защитный фактор организма хозяина / В.И. Максимов, В.Е. Родоман // Микробиология. -1998.-№4.-С.96-101.
243. Максимов В.И. Лакгулоза и микроэкология толстой кишки / В.И. Максимов, В.Е. Родоман, В.М. Бопдаренко // Микробиолия. 1998. -№5. - С.101-107.
244. Максимова А.А. Особенности фотосинтетической деятельности кукурузы при оптимизации условий выращивания в степи УССР:
245. Автореф. дисс. канд. биол. н. Кишинев, 1980. - 23 с.
246. Мамедов Н.Д. Структурно-функциональная организация электроитраиспортной цепи фотосинтеза у разных генотипов пшеницы / Н.Д. Мамедов и др. // Физиология растений. 1990. - Т. 37, N3.-С. 476-483.
247. Мелептьева Г.А. Фармацевтическая химия / Г.А. Мелеитьева; -М.: Медицина, 1976. Т.2. - С. 584.
248. Методические рекомендации но проведению патентных исследований / Под ред. Павловой Т.Н. М.: 1987. - 174 с.
249. Методы спектрального анализа / А.А. Бабушкин и др.. М., 1962. -С. 509.
250. Мипакова О.А. Можно ли получить экологически чистую продукцию при длительном применении удобрений / О.А. Мипакова // Сахарная свекла. 2004. - № 10. - С. 23 - 24.
251. Митрофанов Б.А. Роль листьев, стеблей и колосьев озимой пшеницы в фотосинтезе посева / Митрофанов Б.А. и др. // Путиповышения интенсивности и продуктивности фотосинтеза. Киев: Наукова думка, 1969.- С. 69-86.
252. Мицик В.Е. Новые виды молочных продуктов с использованием стевиозида / В.Е. Мицик, JI.M. Шульгина // Введение в культуру стевии. Киев. - 1990.-С. 131-137.
253. Моделирование производственных процессов в мясной и молочной промышленности / Ю.А. Ивашкин и др., под ред. Ю.А. Ивашкина. М.: ВО «Агропромиздат», 1987. -232 с.
254. Мокроносов А.Т. Общие пути углеродного питания растений// Биохимия и биофизика фотосинтеза / А.Т. Мокроносов; М.: Наука, 1965.-С. 290-304.
255. Некрасов В.И. Актуальные вопросы развития теории * акклиматизации растений / В.И. Некрасов; М.: Наука, 1980. - 102 с.
256. Некрутман С.В. Диэлектрические свойства пищевых продуктов па частоте 2375 МГц / С.В. Некрутман // Электронная обработка материалов. 1973. - №4. - С. 82-84.
257. Николаенко С.В. Повышение эффективности сублимационной сушки ферментных препаратов. Дисс. канд. техн. наук. Воронеж. 1990.
258. Ничипорович А.А. Фотосинтез и теория получения высоких урожаев / А.А. Ничипорович; М.: Наука, 1956. - 94 с.
259. Ничипорович А.А. Неуглеводные продукты фотосинтеза / А.А. Ничипорович // Труды V Междунар. биохим. конгресса, симп. VI.
260. М: АН СССР, 1962. С. 360-384.
261. Ничипорович А.А. О путях повышения продуктивности фотосинтеза растений в посевах / А.А. Ничипорович // Фотосинтез и вопросы продуктивности растений. М.: Изд. АН СССР, 1963. - С. 5-36.
262. Ничипорович А.А. Пути управления фотосинтетической деятельностью растений с целыо повышения их продуктивности / А.А. Ничипорович II Физиология с/х растений (том 1). М.: Изд. МГУ, 1967.-С. 309-353.
263. Ничипорович А.А. Теория фотосинтетической продуктивности растений / А.А. Ничипорович // Итоги науки и техники (физиология растений, т. 3). М., 1977. - С. 11-54.
264. Ничипорович А.А. Физиология фотосинтеза и продуктивность растений / А.А. Ничипорович // Физиология фотосинтеза. М.: Наука, 1982.-С. 7-33.
265. Ничипорович А.А. Фотосинтетическая деятельность растений в посевах / А.А. Ничипорович; М.: Наука, 1961. - 136 с.
266. Образцов А.С. Биологические основы селекции растений / А.С. Образцов; М.: Колос, 1981.-271 с.
267. Образцова В.И. Азотный обмен деревьев и кустарников в условиях степной зоны УССР / А.С. Образцов, Л.И Никифорова // Рост и устойчивость растений. Киев: Наукова думка, 1966. - С. 210-216.
268. Оканенко А.С. Особенности фотосинтеза сахарной свеклы. Образование, передвижение и накопление Сахаров у сахарной свеклы / А.С. Оканенко // Физиология с/х растений (том 7). М.: Изд. МГУ, 1968.-С. 127-275.
269. Опарин А.И. Зеленый дыхательный пигмент подсолнечника / А.И. Опарин //Изв. Российской АН. 1922. - Сер. 6, т. 16. - С. 535-538.
270. Орешко В.Г. Бюлл. научи техн. информации, № 12, 28 (1947).
271. Орлов А.А. Способ повышения морозостойкости растений/ А.А. Орлов, А.П. Стацепко // Тезисы докл. V съезда общества физиологов растений России и Международной конференции "Физиология растений основа фитобиотехнологии". - Пенза - 2003. -С.313-314
272. Осинова В. А. Экспериментальное исследование процессов теплообмена / В.А. Осинова; М.: Энергия. 1979. - 320 с.
273. Остапенко Д.И. Содержание аминокислот и нуклеиновых кислот в * генеративных органах кукурузы в связи с гетерозисом / Д.И.
274. Остапенко, Р.В. Нагорная // Физиол. и биохимия культурн. растений. 1977. - N9, вып. 1. - С. 35-39.
275. Павлов В.А. Новые методы переработки молочной сыворотки / Павлов В.А; М.: Агропромиздат, 1990. -148 с.
276. Павлов В.А. Технология молочного сахара из сыворотки термохлоркальциевого осаждения: Автореф. дисс .к.т.н.- J1, 1982.21 с.
277. Павлов И.О. Активные потери пищевых продуктов / И.О. Павлов; -Сб.:ГОСИНТИ, 1958.-43-49.
278. Палилова А.Н. Содержание свободных аминокислот в образцах кукурузы с различной цитоплазмой / Палилова А.Н. и др.// Генетика гетерозиса. Минск: Урожай, 1964. - С. 75-83.
279. Папин А.Н. Иммунобиология и кишечная микрофлора / А.Н. Панин, П.И. Малик, Е.В. Малик. М.: Аграрная наука, ИК «Родник», 1998.-48 с.
280. Панфилов В.А. Системный подход к проблеме развитиямашинных технологий в перерабатывающих отраслях / В.А. Панфилов // Изв.вузов. Пищевая технология. 1995. - №1-2. -С.98-100.
281. Пат США № 4599403; заявл. 07.10.85. № 785200; опубл. 08.07.86; МКН С07Н 1/08; НКН 536/18.1.
282. Пат. США № 3723410; заявл. 01.12.70. № 94628; опубл. 27.03.73; МКН С07С 47/18,1-IKH 536-4.
283. Пат. США № 4082858, заявл. 02.06.76 № 692218; опубл. 04.04.78; МКН А23С 3/00; С07 II15/00; IIKII 426/597.
284. Пат. Японии № 55-81567 (А); опубл. 19.06.80; МКН3 А231 1/22;1. С07Н 1/08.
285. Пат. Японии № 56-121453 (А); заявл. 27.02.80. № 55-23755; МКН3 А231 1/22; С07Н 1/08.
286. Пат. Японии № 56-121454 (А); заявл. 27.02.80. № 55-23756; МКН31. А231 1/22; С07Н 1/08.
287. Пат. Японии № 56-121455 (А); заявл. 27.02.80. № 55-23757; МКН31. А231 1/22; С07Н 1/08.
288. Пат. Японии № 57-86264 (А); МКН3 А231 1/22.
289. Пат. Японии №.55.39731 (А); опубл. 19.03.80. МКН 3 А231 1/22; C07I-I 1/08.
290. Патент РФ № 2187053. Способ непрерывной сублимационнойсушки термолабильиых материалов / Д.П. Лебедев, Б.II. Быховский, ВИЭСХ. 2002.
291. Патент РФ №2197874. Способ получения сублимированных пищевых продуктов и установка для его осуществления. / Антипов С.Т., Кретов И.Т., Шахов С.В., Игнатов В.Е., Белозерцев А.С., ВГТА, 2003.(5)
292. Патент США № 3716408, МКИ С13К 9/00. Процесс производства порошка лактулозы / Морипага Милк Инд., заявл. 1.10.71, опубл. 13.02.73., приор. Японии 31.05.71.
293. Патент США № 4394178, МКИ С13Д 3/12. Способ разделения лактулозы и лактозы селективной адсорбцией цеолитнымимолекулярными ситами / Унион Карбиде Корп., заявл. 10.12.81, опубл. 19.07.83.
294. Патент США № 4536221, МКИ С13К 5/00. Способ получения лактулозы из лактозы в виде сиропа или кристаллического продукта / Заявл. 1.08.83, опубл.20.08.85., приор. Италии 17.12.82 (24814).
295. Пашкарь С.И. Физиологически активные соединения в селекционно-генетических процессах / С.И. Пашкарь; Кишинев: Штиипца, 1970.- 172 с.
296. Пашковский Ф.М. Опыт внедрения непрерывно действующих установок на сахарных заводах УССР / Ф.М. Пашковский и др.; -М., ЦИНТИпищепром, 1963. 64 с.
297. Перегудов Ф.И. Введение в системный анализ / Ф.И. Перегудов, Ф.П. Тарасенко. М.: Высшая школа, 1989. - 367 с.
298. Перелыгин В.М. Диссоциация гидроксида кальция в водных растворах / В.М. Перелыгип, П.М. Подгориова, А.И. Ситников // Изв. вузов. Пищевая технология. 1999. - №4. - С.52-53.
299. Иванова J1.C. Переработка молочной сыворотки с помощью адсорбентов иоиообмепииков / J1.C. Иванова, C.J1. Грабчак, Г.В.Кричевская // Молочная промышленность. 1992. - №4. - С.28-32.
300. Пищевая химия / А.П. Нечаев и др.; под ред. А.П. Нечаева. СПб.: ГИОРД, 2001.-592 с.
301. Племенков В.В. Введение в химию природных соединений / В.В. Племепков. Казань: Изд-во КГМУ, 2001. - 326 с.
302. Плешков Б.П. Биохимия сельскохозяйственных растений / Б.П. Плешков. М.: Агропромиздат, 1987. - 494 с.
303. Плешков Б.П. Практикум по биохимии растений / Б.П. Плешков. -М.: Колос, 1976.-255 с.
304. Подгорнова Н.М. Оценка массовой кристаллизации сахарозы в вибрирующем слое при низких температурах / Н.М. Подгорнова, С.М. Петров, А.Г. Шестов // Сахарная промышленность. 1998. -№ 3. - С.25-27.
305. Подпоринова Г.К. Совершенствование технологии получения концентрата сладких веществ стевии / Г.К. Подпоринова // Новые и нетрадиционные растения и перспективы их использования: Материалы III Международного симпозиума. Пущино. - 1999. -С.122 - 124.
306. Подпоринова Г.К. Разработка промышленной технологии получения концентрата сладких веществ стевии без использования органических растворителей: Дис. . канд. с/х и. Рамонь, 2000 с.196
307. Подпоринова Г.К. Дитерпеновые гликозиды стевии перспективы производства и использования / Г.К. Подпоринова // Аграрная паука в начале 21 века: Материалы Международной научно-практической конференции. - Воронеж. - 2001. - С. 210 - 212.
308. Подпоринова Г.К. Стевия в продуктах целебно-профилактического назначения / Г.К. Подпоринова, К.К. Полянский, Д.М. Богомолов // Пищевая промышленность. 2005. - №5. - С. 58 - 59.
309. Подпоринова Г.К. Изучение антиоксидантпой активности стевии и продуктов ее переработки / Подпоринова Г.К. и др. // Пищевая промышленность. 2005. - №9. - С. 97.
310. Подпоринова Г.К. Получение порошкообразного подсластителя из стевии с использованием распылительной сушки / Подпоринова Г.К. и др. // Пищевая промышленность. 2005. - №8. - С. 134.
311. Подпоринова Г.К. Изучение химического состава растительного сырья стевии / Г.К. Подпоринова, Н.Д. Верзилина // Новые и нетрадиционные растения и перспективы их использования: Тез. докл. науч.-практ. конференции. Пущипо. - 2005. - С. 411-413.
312. Подпоринова Г.К. Антиоксидаитная активность стевии и продуктов ее переработки / Г.К. Подпоринова, К.К. Полянский, Н.Д. Верзилина // Известия высших учебных заведений. Пищевая технология.2005. №5,6.-С. 121-122.
313. Подпоринова Г.К. Совершенствование способов выделения дитерпеновых гликозидов из стевии / Г.К. Подпоринова, К.К. Полянский, Н.Д. Верзилина // Известия высших учебных заведений. Пищевая технология. 2005г. - №5,6. - С 120-121.
314. Подпоринова Г.К. Изучение химического состава растительного сырья стевии / Г.К. Подпоринова, К.К. Полянский, Н.Д. Верзилина // Известия высших учебных заведений. Пищевая технология. 2005. -№4.-С. 74-75.
315. Подпоринова Г.К. Изучение химического состава стевии / Г.К. Подпоринова, К.К. Полянский, Н.Д. Верзилина // Пищевая промышленность. 2005. - №7. - С. 68.
316. Подпорииова Г.К. Стабилизация хозяйственных отношений в свеклосахарном подкомплексе на основе новых организационных форм / Г.К. Подпорииова, М.А. Смирнов // Сахарная свекла. 2005. - №7. - С. 14-16.
317. Подпорииова Г.К. Подсластители и сахарозамеиители: технология производства стевиол-гликозидов / Г.К. Подпорииова, К.К. Полянский, Н.Д. Верзилина. Воронеж: ВГАУ, 2006. - 116 с.
318. Покровский В.И. Политика здорового питания. Федеральный и региональный уровни / Покровский В.И. и др.; Новосибирск: Сиб. унив. изд-во, 2002. - 344 с.
319. Полянский К. К. Топинамбур: перспективы использования в молочной промышленности / К.К. Полянский и др.; Воронеж: изд. ВГУ, 1999.- 176 с.
320. Полянский К.К. Кристаллизация лактозы в производстве молочных продуктов: Автореф. дисс .д.т.п. М., 1981.-51 с.
321. Полянский К.К. Совершенствование технологии получения концентрата стевии / К.К. Полянский, Н.Д. Верзилина, Г.К. Подпоринова // Пищевая промышленность. 2004. - №9. - С.87-88.
322. Полянский К.К. Использование концентрата стевии в пищевых продуктах / К.К. Полянский, Г.К. Подпоринова, Н.Д. Верзилина // Вестник РАСХН. 2004. - №5. - С.86-88.
323. Полянский К.К. Актульпая проблема аптиоксидантная активность пищевых продуктов / К.К. Полянский, J1.B. Рудакова // Молочная промышленность. - 2004. - N 11. - С.74.
324. Полянский К.К. Влияние продуктов переработки стевии на показатели антиоксидантной активности организма лактирующих коров / К.К. Полянский и др. // Вестник PACXII. 2006. - №. - с.
325. Полянский Н.Г. Методы исследования ионитов / Н.Г. Полянский, Г.В. Горбунов, H.J1. Полянская. М.: Химия, 1976. - 208 с.
326. Пономарев A.II. Натуральный подсластитель из стевии / Пономарев А.Н. и др. // Молочная промышленность. 2005. - №1. - С. 42.
327. Поповский В.Г. Сублимационная сушка пищевых продуктов растительного происхождения / В.Г. Поповский; М.: Пищевая промышленность, 1975. - 47 с.
328. Портуровская С.П. Фотосиптетическая деятельность растений озимого ячменя при различных условиях выращивания / С.П. Портуровская // Научн. труды Ставропольского с/х института. -1972.-Т. 1, вып. 35.-С. 88-91.
329. Посыпайко В.И. Химические методы анализа / В.И. Посынайко, II.А. Козырева, ЮЛ. Логачева. М.: Высшая школа, 1989. - 447 с.
330. Практика использования ферментативных методов анализа приразработке технологий молочных продуктов детского питания / В.К. Фирсов и др. // Мат. 2 Межд. НТК Пища. Экология. Человек. М., 1997.-С. 104.363.
331. Применение ионного обмена в молочной промышленности / А.Г.
332. Храмцов и др. // Обз. информация, сер. Цельномолочная пром-ть. -М.: ЦНИИТЭИМ1111, 1972.- 44с.
333. Пробиотичсский кисломолочный продукт для школьников / Эрвольдер НЛО. и др. // Молочная промышленность. 1999. -№Ц.-С. 17-18.
334. Подпоринова Г.К. Прогрессивные способы извлечения дитерпеновых гликозидов из стевии / Г.К. Подпоринова, К.К. Полянский, Н.Д. Верзилина// Пищевая промышленность. 2004. -№12.-С. 61.
335. Продукты с нетрадиционными биологически активными добавками / А.Ф. Цыб и др. // Молочная промышленность. 1999. - №11. -С.11-13.
336. Полянский К.К. Производство пищевых продуктов сиспользованием натурального подсластителя из стевии / К.К. Полянский, Г.К. Подпоринова, Д.М. Богомолов // Пищевая промышленность: сырье и добавки. 2004. - №7. - С. 80-81.
337. Производство подсластителей, обогащенных ароматическими и красящими веществами / Касьянов Г.И. и др. // Известия ВУЗов. Пищевая технология. 1996. - №5-6. - С. 28-29.
338. Протопопов И.И. Интеллектуальные технологии оптимизации переработки биосырья / И.И. Протопопов // Известия ВУЗов. Пищевая технология. 1995. - № 1-2. - С. 104-106.
339. Протопопов И.И. Компьютерная диагностика молочных продуктов / И.И. Протопопов // Обзорная информация. М.: АгроНИИТЭИММП,1992. 40 с.
340. Протопопов И.И. Системный анализ процессов производства сыров с целыо его интенсификации, оптимизации и автоматизации / И.И. Протопопов // Обзорная информация,- М.: АгроНИИТЭИММП, 1988.-44 с.
341. Процесс экстракции сахара из свеклы. Теория и расчет / В.М. Лысяпский; М.: Пищевая промышленность, 1973. С. 224.
342. Радкевич В.А. Экология / В.А.Радкевич; М.: Высш. шк., 1998. -159 с.
343. Разиев С.Э. О первичных процессах фотосинтеза в проростках пшеницы разной продуктивности / С.Э Разиев и др. // Физиология растений. 1987. - Т. 34, N 2. - С. 237-243.
344. Рева Л.П. Быстрый метод количественного определения белков в соках сахарного производства / JI.II. Рева, Г.А. Симанина // Сахарная промышленность. 1978. -№1. - С. 12-16.
345. Рогов И.А. Сверхвысокочастотный нагрев пищевых продуктов / И.А. Рогов, С.В. Некрутман. -М.: Агропромиздат, 1986.-351 с.
346. Роговский СВ. Размножение стевии (Stevia rebaudiana Bertoni) черенками и особенности выращивания в условиях правобережной лесостепи Украины// Автореф. канд. дисс. Киев, 1992. - 25 с.
347. Роговский СВ. Применение регуляторов роста для стимуляции укоренения и роста травянистых черенков стевии / С.В. Роговский, Э.Е. Забигайло // Физиология и биохимия культурных растений. -1993.-Т. 25, N5.-С 514-517.
348. Родионова Н.С. Лечебно-профилактические белковые продукты с модифицированным углеводным составом / II.C. Родионова, Л.Э. Глаголева, К.К. Полянский // Молочная промышленность. 1998. -N2.-С. 13-14.
349. Рубин Б.А. Курс физиологии растений / Б.А. Рубин; М.: Высшая школа, 1961.- 584 с.
350. Рудаков О.Б. Спутник хроматографиста. Методы жидкостной хроматографии / О.Б. Рудаков и др.; Воронеж: Водолей, 2004. -528 с.
351. Рудаков О.Б. Хроматография и хроматографические приборы / О.Б. Рудаков, К.К. Полянский // Молочная промышленность. 2004. - N 4.-С. 38-39.385386387388389,390391,392,393,394,395.396.397.
352. Рудаков О.Б. Растворитель как средство управления процессом в жидкостной хроматографии / О.Б. Рудаков; Воронеж: Изд-во Воронеж ун-та, 2003. - 300 с.
353. Рудаков О.Б. Физико-химические системы сорбат сорбент - элюент в жидкостной хроматографии / О.Б. Рудаков, В.Ф. Селеменев. -Воронеж: Изд-во Воронеж, ун-та, 2003.-300 с.
354. Рябцева С.А. Совершенствование технологии лактулозы. Дисс.к.т.н. -Ставрополь, 1992. 158 с.
355. Рядчиков В.Г. Улучшение зерновых белков и их оценка / В.Г. Рядчиков; М.: Колос, 1978. - 368 с.
356. С. А., 1985, V. 103, N21, р. 578. С.А, 1985, V 103, № 11, р. 512.
357. С.А., 1975, V. 83, N1, р. 473. С.А., 1977, V 86, № 1,р. 504. С.А., 1980, V. 93, №4, р. 742. С.А., 1982, V. 97, N3, р. 459. С.А., 1984, V. 101, №20, р. 377.
358. С.А., 1985., V 103, №21, р. 578
359. Савченко Н.И. Использование биохимических методов при изучении явления гетерозиса в селекции гибридной пшеницы / Н.И. Савченко // Гетерозис сельскохозяйственных растений, его физиолого-биохимические и биофизические основы. М.: Колос, 1975.-С. 156-158.
360. СанПиН 2.3.2.1078-01.Санитарно-эпидемиологические правила и нормативы. Гигиенические требования безопасности и пищевой ценности пищевых продуктов.
361. Сапронов А.Р. Красящие вещества и их влияние на качество сахара / А.Р. Сапронов, Р.А.Колчева. М.: Пищевая промышленность, 1975.-345 с.
362. Саратиков А.С. Перспективы создания природных аптикопвульсаитов / Саратиков А.С. и др. // Тез. Всесоюз. конф. "Новые лекарственные препараты из растений Сибири и Дальнего Востока. Выпуск.2. Томск: изд-во ТГУ, 1989. - С. 153-154.
363. Сарджвеладзе Г.П., Лазишвили Л.А., Абхазава Д.М., Каландия А.Г., Харебава Л.Г. Способ производства лечебно-тонизирующего напитка: Пат. 1813400// Изобретения. 1993. - N 17. - С. 15.
364. Сарджвеладзе Г.П., Кутубидзе В.В., Харебава Л.Г., Цилосани М.В. Композиция для безалкогольного напитка: Пат. 1792627//
365. Изобретения. 1993. - N 5. - С. 9.
366. Сарджвеладзе Г.П., Харебава Л.Г. Способ получения концентрата из растения Stevia rebaudiana Bertoni: Пат. 1796128// Изобретения. -1993.-N7.-С. 9.
367. Сарджвеладзе Г.П., Цанава В.П., Джугели Р.Я., Харебава Л.Г. Способ приготовления низкокалорийного напитка: Пат. 1797816// Изобретения. 1993. - N 8. - С. 11.
368. Сафаров С.А. К морфологическому обоснованию создания скороспелых высокоурожайных сортов пшеницы / С.А. Сафаров, Ш.А. Ахмедов // Вестник с/х науки Азербайджана. 1989. - N 5. - С. 9-11.
369. Селюков П.Г. Исследования оптических свойств продуктов, подвергаемых обработке терморадиацией. Автореферат кандидатской диссертации. М.: МТИПП, 1968. 19 с.
370. Сидоренко Ю.И. Влияние сахарозы на сорбцию красящих веществ анионитом АВ-17-2П / Ю.И. Сидоренко // Пищевая промышленность. -1991. №4. - С.56-58.
371. Сикорская С.Б. Биолого-морфологические особенности стевии /Stevia rebaudiana (Bertoni)/ при интродукции в условиях ЦЧЗ России: Автореф. дио. канд. биол. паук. Курск, 2004. - 20 с.
372. Синтез и медико-биологическое изучение меланоидинов и других продуктов сахароаминной реакции Майяра (САРМ) / Давидянц С.Б. и др. // Мат. I конференции Северо-Кавказского региона «Современные достижения биотехнологии». Ставрополь. - 1995.-С. 82.
373. Скворцов А.К. О некоторых общих аспектах интродукции растений / А.К. Скворцов // Проблемы интродукции растений и отдаленной гибридизации: Тез. докл. Междунар. конф. М. - 1998. - С 188-190.
374. Скурихин И.М. Все о пище с точки зрения химика / И.М. Скурихин,
375. A.П. Нечаев. М.: Высшая школа, 1991.-С. 55-57.
376. Смоляр В.И. Медико-биологическое исследование листьев стевии /
377. B.И. Смоляр идр.// Введение в культуру стевии низкокалорийного заменителя сахара. - Киев: ВНИС, 1990. - С. 112-117.
378. Совершенствование микробиологического контроля при производстве молочных продуктов детского питания / Г.П.
379. Шаманова и др. // Обзорная информация. Сер. Молочная промышленность. М.: АгроНИИТЭИММП, 1989. - 40 с.
380. Способы получения сухой лактулозы / В.Д. Харитонов и др. // Молочная промышленность. 2000. - № 4. - С. 17-18.
381. Степаненко Б.Н. Химия и биохимия углеводов (полисахариды) / Б.Н. Степаненко; М.: Высшая школа, 1977. - 40 с.
382. Суханова М.А. Особенности синтеза стевиол-гликозидов в растениях Stevia rebaudiana Bertoni / М.А. Суханова и др. // Тезисы докл. V съезда физиологов. Пенза. - 2003. -С.526.
383. Сытпик К.М. Физиология листа / К.М. Сытник, Л.И. Мусатенко, Т.Л. Богданова. Киев: Наукова думка, 1978. - 392 с.
384. Сычев С.Н. Применение метода главных компонент (факторного анализа) для анализа хроматографических данных в ВЭЖХ / С.Н. Сычев // Сорбциопиые и хроматографические процессы». 2004. -Т.4- Вып.2. - С.134 - 142.
385. Сычев С.Н. Применение метода главных компонент для свертки информации при обработке мпоговолновых хроматограмм вина / С.Н. Сычев и др. // Известия ОрелГТУ, серия «Естественные науки». 2003.-№3-4.-С. 138- 142.
386. Табенцкий А.А. Фотосинтез листьев кукурузы в связи с водным режимом / А.А. Табенцкий // Пути повышения интенсивности и продуктивности фотосинтеза (вып. 2). Киев: Наукова думка, 1967. -С. 47-65.
387. Биоантиоксидант / Е.Б. Бурлакова и др., под ред. Е.Б. Бурлаковой, Москва. 2002. - С. 683.
388. Технология сахара / П.М. Силииа и др., под ред. П.М. Силина. М.: Пищепромиздат, 1958. 478 с.
389. Товарткиладзе Я.Н. Математический анализ диффузионного процесса / Я.Н. Товарткиладзе // Пищевая промышленность. -1963.-№ 12.-С. 18-22.
390. Третьяков Н.Н. Практикум по физиологии растений / Третьяков М.Н. и др.. М.: Агропромиздат, 1990. - 271 с.
391. Трулевич Н.В. Ботанико-географические коллекции природной флоры (научный, природоохранный, образовательивй аспекты) / Н.В. Трулевич // Проблемы интродукции растений и отдаленной гибридизации: Тез. докл. Междупар. копф. М. - 1998. - С 210-212.
392. Тутельян В.А. Биологически активные добавки в питании человека/ В.А. Тутельян и др.; Томск: Изд-во НТЛ, 1999. - 296 с.
393. Удовидченко Л.П. Введение стевии в культуру в ЦЧЗ России / Л.П. Удовидченко, А.В. Корниенко, Т.П. Жужжалова // Новые и нетрадиционные растения и перспективы их практического использования: П-й Международный симпозиум. Пущино. - 1997. - С. 778-779.
394. Устепко Г.П. Фотосинтетическая деятельность растений в посевах как основа формирования высоких урожаев / Г.П. Устепко // Фотосинтез и вопросы продуктивности растений. М.: Наука, 1963. - С. 37-70.
395. Фаудеи Л. Биогенез аминокислот / Л. Фаудеп // Биохимия растений. -М. 1968.-С. 204-224.
396. Федеральный закон «О качестве и безопасности пищевых продуктов», принят 1.12.98 г.
397. Федоров В.Д. Экология / В.Д. Федоров, Т.Г. Гильмапов. М.: Изд-во МГУ, 1980.-464 с.
398. Федоров П.С. Биохимические и физиологические основы гетерозиса / П.С. Федоров; Фрунзе: Кыргызстан, 1968. - 195 с.
399. Федоров П.С. Биохимическая разнокачествеииость семян родительских форм двойного межлинейного гибрида кукурузы ВИР 156 / П.С. Федоров // Труды Киргизского НИИ земледелия. 1960. -N3.-С. 3-11.
400. Федоров П.С. Биохимическая разнокачествеииость семян родительских форм гибридов / П.С. Федоров // Кукуруза. 1961. - N 2.-С. 38-39.
401. Федотов В.А. Растениеводство Центрально-Черноземного региона / Федотов В.А. и др.; под ред. В.А. Федотова. Воронеж: Центр духовного возрождения Черноземного края, 1998. - 464 с.
402. Феллепберг Г. Химия охраны окружающей среды / Г. Фелленберг; -М.: Мир, 1966.- 121 с.
403. Фетгер К. Электрохимическая кинетика / К. Фстгер; М., «Химия», 1967. -856 с.
404. Филатов Г.В. Физиологическая генетика продукционных процессов сельскохозяйственных растений / Г.В. Филатов, В.Е. Шевченко, Н.Д. Верзилина. Воронеж: ФГОУ ВПО ВГАУ, 2003. -249с
405. Халва Э. Формирование урожая многолетних бобовых трав / Э. Халва, Ф. Храбе // Формирование урожая основных сельскохозяйственных культур. М.: Колос, 1984. - 367 с.
406. Харборп Дж. Биохимия фенольпых соединений / Дж. Харборн. М.: Мир, 1968-340 с.
407. Холуненко И.П. Поступление продуктов фотосинтеза в семе па соииз листьев главного стебля / И.П. Холупенко, В.М. Мсдяпников / Биол.-иочв. ии-т ДВНЦ АН СССР. Владивосток, 1973. - 22 с.
408. Храмов В.А. Способ определения хлорогеновой кислоты в растительных объектах / В.А. Храмов, В.И. Комарова // Санитария и гигиена. 1999.-N6.-С. 71.
409. Храмцов А.Г. Регулирование состава и свойств молочного полисахаридного концентрата электродиализом: Автореф. дисс .к.т.н. М., 1988.-19С.
410. Храмцов А.Г. Молочный сахар / А.Г. Храмцов; М.: Агропромиздат, 1987. - 224 с.
411. Храмцов А.Г. Микрофильтрация молочного сырья / А.Г. Храмцов, Е.Р. Абдулина, И,А. Евдокимов // Обзорная информация. Сер. Молочная промышленность. М.: АгроНИИТЭИММП, 1991. - 40 с.
412. Храмцов А.Г. Деминерализация лактозосодержащего сырья методом электродиализа / А.Г. Храмцов и др. // Обзорная информация. Сер. Молочная промышленность. М.:Агро11ИИТЭИММП, 1992.-32 с.
413. Храмцов А.Г. Безотходная технология в молочной промышленности / А.Г. Храмцов, П.Г. Нестеренко. М.: Агропромиздат, 1989. - 279 с.
414. Цанава В.П. Влияние некоторых состав летучего комплекса травы Цанава, Г.П. Сарджвеладзе, Л.Г. культуры. 1991.-N3.-С. 11-15.технологических приемов на двулистника сладкого / В.П. Харебава // Субтропические
415. Цанава В.П. Исследование летучих соединений двулистника сладкого / В.П. Цанава, Г.П. Сарджвеладзе, Л.Г. Харебава // Субтропические культуры. 1989. - № 3. - С. 73-79.
416. Царева И.Г. Майонез «Диабетический», содержащий стевиозид / И.Г. Царева, Е.В. Журавко, Е.В. Грузинов // Масла и жиры. 2004. -№6. -С. 1-2.
417. Цитович И.К. Курс аналитической химии / И.К. Цитович; М.: Высшая школа, 1964. - 378 с.
418. Цицин Н.В, Ботанические сады СССР / Н.В. Цицин; М.: Наука, 1974.- 191 с.
419. Чижов Г.Б. Теплофизические процессы в холодильной технологии пищевых продуктов / Г.Б. Чижов; М.: Пищевая промышленность. -1979.-272 с.
420. Чудновский А.Ф. Теплообмен в дисперсных средах / А.Ф. Чудповский; М.: Гостехиздат, 1954. - 444 с.
421. Шаманова Г.П. Концептуальные подходы к получению экологически чистых молочных продуктов / Г.П. Шаманова // Молочная промышленность. 1999. - №1. - С. 27.
422. Шатилов И.С. Использование физиологически активной радиации кукурузой при разной густоте стояния / И.С. Шатилов, А.Г. Замараев // Известия ТСХА. 1965. - Вып. 5-6. - С. 148-161.
423. Шафферт Е.Э. Морфолого-анатомическое и цитоэмбриологическое исследование вегетативно-репродуктивной системы стевии (Steviarebaudiana (Bertoni) Hemsl.) в условиях интродукции на южном берегу Крыма: Автореф. дис. .канд. биол. п. Ялта, 1992. - 22 с.
424. Шафферт Е.Э. Строение, топография и онтогенез трихомов Stevia rebaudiana / Е.Э. Шафферт, А.А. Чеботарь // Ботан. журнал. 1994. -Т. 79, N 4.- С. 38-48.
425. Шевелева С.А. Пробиотики, пребиотики и пробиотичеекие продукты / С.А. Шевелева // Вопросы питания. 1999. - №2. - С. 32-40.
426. Шевелуха B.C. Закономерности ростовых процессов и продуктивность сельскохозяйственных растений / B.C. Шевелуха // Физиолого-генетические основы повышения продуктивности зерновых культур. М.: Колос, 1975. - С. 25-34.
427. Шевелуха B.C. Сельскохозяйственная биотехнология / B.C. Шевелуха и др.. М.: Высшая школа, 1998. - 416 с.
428. Шевелуха B.C. Эффективность действия регуляторов роста картолина на продуктивность ярового ячменя в условиях почвенной засухи / B.C. Шевелуха и др. // Сельскохоз. биол. 1987. - N 9. - С. 3-6.
429. Шевелуха B.C. Влияние картолина на засухоустойчивость ячменя / B.C. Шевелуха и др. // Тезисы докладов V республиканской конференции "Физиологические основы повышения продуктивности и устойчивости зерновых культур". Целиноград. -1984.-С. 15.
430. Шевелуха B.C. Действие картолина на продуктивность и фотосинтетический аппарат ярового ячменя в условиях засухи / B.C.
431. Шевелуха и др.//Докл. ВАСХНИЛ. 1985. - N7. - С. 14-16.
432. Шепдеров Б.А. Функциональное питание и пробиотики: микроэкологические аспекты / Б.А. Шепдеров, М.А. Мапвелова.-М.:Агар, 1997.-24 с.
433. Шеренкова Х.А. Активизация картолииом РНК-полимеразы влистьях ячменя при действии засухи / Шеренкова Х.А. и др. // Физиология растений. 1983. - Т. 30, N 5. - С. 47-49.
434. Шостка Г.Д. Железодефицитное малокровие и некоторые вопросы регулязии эритропоэза / Г.Д. Шостка; Л.: 1970. - 349 с.
435. Шульгин И.А. Архитектура растений пшеницы как фактор их продуктивности / И.А. Шульгин и др. // Биол. пауки. 1986. - N 5. -С.5-25.
436. Шустов В.Я. Биологическая роль и практическое применение микроэлементов / В.Я. Шустов; Рига, 1975. - 186 с.
437. Щеголев В.II. Исследования по усовершенствованию оборудования и технологии сахарного производства / В.Н. Щеголев; Воронеж, 1967. - 52 с.
438. Щербаков В.Г. Биохимия / Щербаков В.Г и др.; под ред. Щербакова В.Г. Изд. 2-е., перераб. и доп.-СПб; ГИОРД, 2003. 440 с.
439. Экологическая доктрина Российской Федерации //Экология производства. Научно-технический и методический журнал. М.: ЗАО "Отраслевые ведомости", 2004. -№1. - С. 4-15.
440. Экологическая химия /под ред. Ф. Корте. М.: Мир, 1997. - 396 с.
441. Ярмолюк Г.И. Боташчна та ембрюлопчпа характеристика Stevia rebaudiana Bertoni (Asteraceae) / Г.И. Ярмолюк и др. // Укр. ботаи. жури. 2000. - Т. 37, N 3. - С. 321-326.
442. Ярмолюк Г.И. Ботаническая и морфологическая характеристикастевии / Г.И. Ярмолюк, В.Е. Белоус // Введение в культуру стевии -источника низкокалорийного заменителя сахара. Киев: ВНИС, 1990.-С. 6-8.
443. Ярмолюк Г.И. Микроспорогенез и развитие мужского гаметофита у стевии / Г.И. Ярмолюк, А.И Рогова // Введение в культуру стевии -низкокалорийного заменителя сахара. Киев: В11ИС. - 1990. - С. 97101.
444. Яушева Э.Я. Исследование сублимационной сушки говяжьего мяса при высокотемпературном радиационном энергоподводе с целыо интенсификации процесса. Автореферат кандидатской диссертации. М.: МТИИМПП, 1966.- 18 с.
445. Яшин Я.И., Яшин А.Я., Пахомов В.П. Установка для определения суммарной антиоксидантпой активности биологически активных соединений. Патент на изобретение N2003123073/15(024965). Дата подачи заявки 25.07.2003.
446. Ahmed M.S., R.H. Bobberstoin, N.P. Farnsworth, J Chromatogr, 1980, P. 387-393.
447. Akita, M., et al., Mass propagation of shoots of Stevia redaudiana using a large scale bioreactor. Plant Cell Reports, 1994. 13: P. 3-4.
448. Antolovich M., Prenzler P.D., Mc Donald E., Robards K. Methods for testing antioxidant activity, Analyst, 2002, vl27, P. 183-198.
449. Baptista s.w., seima-Dzimitas R. Efeito do acido giberelico no desenvolvimento de plantas de estevia (Stevia rebaudiana (Bert.) Bertoni)// Cientifica. 2003. - Y. 31, N 1. - P. 31-41.
450. Basuki and Sumaryono, Effects of black plastic mulch and plant density on the growth of weeds and of Stevia. Biotrop Special Publication, 1990(38): P. 107
451. Bennet R. Biosynthesis of steviol from kaurene// Phytochem. 1967. - V. 6.-P. 1107-1110.
452. Bespalhok Filho, J.C., L.G.E. Vieira, and J.M. Hashifnoto, Factors influencing the in vitro micropropagation of axillary shoots of Stevia rebaudiana (Bert). Revista Brasileira de Fisiologia Vegetal, 1992.4(1): P. 59-61.
453. Bian, Y.M., Studies on Stevia rebaudiana - a new sweet-tasting plant: refining stevioside and determination of its concentration. Chinese. Plant Physiology Communications, 1981(3): P. 15-17.
454. Bjorkman J. Characteristics of the photosynthetic apparatus as revealed by laboratory measurements// Prediction and measurement of photosynthetic productivity. Pudoc, Wageningen, 1970. - P. 193-231.
455. Blann W.A., The International Sugar, 311 (1949); Zucker, 243 (1950).
456. Blann W.A., The International Sugar, 311 (1949); Zucker, 243 (1950).
457. Brandle, J., Genetic control ofrebaudioside A and С concentration in leaves of the sweet herb, Stevia rebaudiana. Canadian Journal of Plant Science, 1999. 79(1): P. 85-92.
458. Brandle, J.E. and N. Rosa, Heritability for yield, leaf: stem ratio and stevioside content estimated from a landrace cultivar of Stevia rebaudiana. Canadian Journal of Plant Science, 1992. 72(4): P. 12631266.
459. Brandle, J.S. A.G.M., Stevia rebaudiana: Its agricultural, biological, and chemical properties Review. Canadian Journal of Plant Scicnce, 1998. 78(4): P. 527-536.
460. Buana, L. and D.I I. Goenadi, -A study on the correlation between growth and yield in Stevia. Menara Perkebunan, 1985. 53(3): P. 68-71.
461. Buana L. Determination of the required growth variables in an agronomic experiment with Stevia.Indonesian. Menara Perkebunan, 1989. 57(2): P. 129-131.
462. Bubais G.E., Bietrich P.C., Lee J.F. (1981). Biterpenoid sweeteners synthesis and sensory evalution of steviaside analogues nondergadable to stevial. 24: 1989, P. 1269-1271.
463. Bubais G.E., Bietuch R.S. Lee J.F. Biterpenoid Sweeteners,Synthesis and sensory evalnation of stevioside analogues nondergradable to steviol J. Med. Chem 24: 1997, P. 1269-1271.505.
464. Burianer I. Histy Cukrovarnicke, n 2, 41 (1957).
465. Carneiro J. W.P. and T.A. Guedes. Influence of the contact ofstevia seeds with the substrate, evaluated by means of the Wiebull function. Revista Brasileira de Sementes, 1992.14(1): P. 65-68.
466. Carvalho M. A.M.d. and L.B.P. Zaidan, Propagation of Stevia rebaudiana from stem cuttings. Pesquisa Agropecuaria Brasileira, 1995.30(2): P. 201-206.
467. Chalapathi, M.V., B. Shivaraj, and V.R.R. - Parama, - Nutrient uptake and yield of stevia as influenced by methods of planting and fertilizer levels. Crop Research, 1997.14(2): P. 205-208.
468. Chen, S. and S. Shu, Study on storage technique of Stevia rebaudiana seed. Acta Agronomica Sinica, 1995. 21(1): P. 102-105.
469. Chen, S.Y. and Q.R. Li, Effect of growth substances on the stevioside content ofStevia rebaudiana. Plant Physiology Communications, 1993. 29(4): P. 265-267.
470. Cheng T-F, Chang W-II (1981) Post harvest changes in stevioside contents ofStevia leaves and stems. Nate Sci Comn. Mon. 9: P. 775-782.
471. Cheng T-F, Chang W-H (1983) Studies on the nonstevioside components of Stevia extracts. Ко Ilsuch, Fa Chan Yubh Kan 11: P. 96108.
472. Conner D.E., Moran E.T. Ability of probiotic and soluble complex carbohydrates supplemented in the starting feed to decrease colonization of Salmonella in ccca of broiler chicks infected at hatch. // Poult.Sci. N71(l),1992.-P. 145.
473. Copson D.A. Microwave Heating. Westport, Connecticut, AVI, 1968, 292 p.
474. Crammer В., Ikan R. Sweet glyosides from the Stevia plant// Chem. Brit.- 1986.-V7 22, N 10.-P. 915-916, 918.
475. D.L. Modhavi, S.S. Deshpande and D.K. Salunkhe, Food Antioxindants: Technological, Toxicological and Health Perspective, Marccl Dekker, New Yourk 1996, P. 5-64
476. Damisch W. Beitrage zur Ertragsphysiologie dcr Getreides. 2. Mitt. Die Attractiones-Productionsbeziehungen in der Kornfullungspervode beiverchoelenen Winterweizengenotypen// Arch. Zuctungsforseh. 1973.- T. 3,N 4.-S. 285-296.
477. Darise M., Kohda H., Mizutani K., Kasair., Tanaka O. (1983) Chemical constituents of flowers of Stevia rebaudiana Bertoni. Agric Biol Chem 47: 1987, P. 133-135.
478. Dobberstein R.H., Suzuki F.A. Flavor enhancing and modifying materials. U.S. Pat. N 4612942, 8.03-84-23.09.86.
479. Donalisio, M.G.R., et al, Stevia rebaudiana. Portuguese. Agronomico, 1982. 34: P: 65-68.
480. Dorfman R.J., Ness W.R. Antiadrogenous activities of steviol// Endocrinology. 1960. - N 67. - P. 282-285.
481. Esaki S., Tanaka R., Kamiya S. Synthesis and taste of certain steviol glycosides (Diterpenes contained in Stevia rebaudiana// Agric. Biol. Chem.- 1984.-V.48,N7.-P. 1831-1834.
482. Felippe, G.M., Stevia rebaudiana, a review. Portuguese. Journal of Chromatography, 1978.161: P. 403-405.
483. Ferreira C.M., Handro W. Production, maintenance and regeneration from cell suspension cultures of Stevia reubadiana (Bertoni) Hemsley// Plant Cell Reports. 1988. - N 7. - P. 123-126.
484. Ferreira C.M., Handro W. Some morphogenetic responses in leaf explants of Stevia rebaudiana cultured in vitro// Revista Brasileira Botanica. 1987. - V. 10, N 1. - P. 113-117.
485. Fivian W., Zucker, 529-538 (1956).
486. Frankenberger W.J.Jr., Chang A.C., Arshad M. Response of Raphanus sativus to the auxin precursor L-tryptophan applied to soil// Plant and Soil. 1990. - V. 129, N 2. - P. 235-241.
487. Fuesgen L., Schuman CM Pharm.Ztg.-1994.-Bdl39 (15). S.9-16.
488. Fujita S., Taka K., Fujita Y. Miscellaneous contribution to the essential oils of the plants from various territories. XLI. On the components og the essential oil of Stevia rebaudiana Bertoni// J. Pharm. Soc. Jap. 1977. -V. 97,N 6. - P. 692-694.
489. Galpcrin dc Levy R.H. Stevia rebaudiana Bertoni: extraccion, purificacion у empleo del stevisiodo// 5 Reun. teen. пае. espec. у prod, arom. у med., Costelar Comun. Buenos Aires. 1982. - P. 47-57.
490. Genovese S., Riccardi G., Rivellese A.A. Lactulose improves blood glucose response to an oral glucose test in non-insulin dependent diabetic patients // Diab. Nutr. Metab. N5, 1992. P. 295-297.
491. Goenadi D.H. Effect of slope position on the growth of stevia in Indonesia// Comn. Soil and Plant Anal. 1987. - V. 18, N 11. P. 13171328.
492. Golombus, M.,The Cultivation of Stevia, "Nature"s Sweetener",. 1997, QMAFRA: Ontario Canada, P. 4.
493. Greve J.W.M., Gouma D.J., Buurman W.A. Complication in obstructive jaundice: Role of endotoxins // Scand.Gastroenterol. N27, 1992.-P. 8-12.
494. Ilagensen E.A., Sugar, April, 36 (1946).
495. Halliwell B. and Gutteridge J.M.C. Free Radicals in Biology and Medicine, Oxford University Press, New York, 3rd edn. 1999.
496. Ilandro W., Ferreira C.M. Stevia reubadiana Bertoni: production of natural sweeteners// Med. and aromat plants. Berlin, 1989. - P. 468487.
497. Handro W., Well K.G., Kerbayu G.B. Tissue culture of Stevia rebaudiana, a sweetening plant// Plant Medica. 1977. - V.32, N 1. - P.115.117.I
498. Ilandro Wand Ferrera С. M. Stevia rebaudiana (Bert.) Bertoni. Production of Natural Sweeteners Institut of Bioseinces University of Sao Paulo, cp, 11461, 05499, 1996, Sao Paolo, Brasil.
499. Hanson J.R., White A.F. Studies in terpenoid biosynthesis-II of steviol// Phytochem. 1968. - V. 7, N4. - P. 595-597.
500. Harju M. Lactulose as a substrate for p-galactosidases. Results and discussion // Milchwissenschaft, 1986, N6. P. 349-352.
501. Hashimoto J., M. Moriyasu, S. Nakamura, S. Ichiguro, M. Kamura; J. Chrematogr., 1978, P. 403-405.
502. Hoffman K., Mosel D.A. Untersuchungen uber die Wirkungsweise der Lactulose im Darm // Klin.Wochenschr., 1964, v.42, S. 126-130.
503. Hoyle, F.C.,A review Of Four Potential New Crops for Australian Agriculture,. 1992, Department of Agriculture: Perth, P. 34.
504. Huang, Y. S., et al., Studies on the variation ofsteviosides content and selection of type R-A in Stevia rebaudiana. Journal of Plant Resources & Environment, 1995. 4(3): P. 28-32.
505. Igarashi C., Ezawa I. Effects of whey calcium and lactulose on the strength of bone in ovariectomized osteoporosis model rats // Pharmacometrics, N 42, 1991.-P. 245-253.
506. Igarashi C., liyama Y., Kato R., Tomita M. et al. Effect of bifidobacterium longum and lactulose on the ctrength of bone in ovariectomized osteoporosis model rats//Bifidus№7,1994. P. 139
507. Ishima N., Katajama O., Yokojama (1978). Sensory evaluation of Stevia sweeteners. Sth. Int. Congr. Food saenu and technology, Kyoto, P. 158.
508. Ishima N., Katayma O. (1976). Sensory evalution of steviaside as a Sweetener. Rep. Natl. Food Besp. Inst. 31: P. 80-85.
509. Jia, G.N., -An experiment on the cultivation ofStevia rebaudiana Chinese. Shanxi Agricultural "Science, 1984(1): P. 20-21.
510. Kaneda N. Chemical studies on sweet diterpene-glycosides of Stevia rebaudiana: Convertion of stevioside into rebaudioside A // Chem. Pharm. Bull. 1977. - V. 25, N 9. - P. 2466-2467.
511. Kawatani Т., Kaneki Y., Tanabe Т., Sakamoto I. On the cultivation of kaa-he-e to nitrogen fertilization rates and to the major elements of fertilizer//Jap. J. Trop. Agric. 1978. - V. 21, N 1. - P. 173-178.
512. Kehrer J. Free radical as mediators of tissue injury and desease// Critical reviews in toxicology. 1993. - V. 23, N 1. - P. 21-48.
513. Kinghorn A.D., Soejarto D.D. Current status of stevioside as a sweetening agent gor humen use// Economic and medicinal plantresearch. 1985. - V. 1, N 1. - P. 54-59.1. Щ
514. Kirk P.R., Leech R.M. Amino acid biosynthesis by isolated chloroplasts during photosynthesis// Plant Physiol. 1972. - V. 50, N 2. - P. 228-234.
515. Kitada Y., Sasaki M., Yamazoe Y. Simultaneous determination of stevioside, rebaudioside A and С and dulcoside A in foods by high-performance liquid chromatography// J. Chromatogr. 1989. - V. 37, N 2. - P. 229-237.
516. Klassen G., Z. Ver. Deutsche Zuckerindustrie, 53, 760-761 (1903).
517. Kobayashi M., Horikana S., Yamasaki K., Degrandi I.II., Ueho J., Mitsuhashi II. Dulcosides A and B, new diterpene glucoside from Stevia rebaudiana//Phytochemistry. 1977. - V. 7, N 1. - P. 16-25.
518. Kohda I I., Kasai K., Yamasaki M. New sweet diterpene glycosides from Stevia rebaudiana//Phytochem. 1976. - V. 15. - P. 981-983.
519. Kohola II., Kasai R., Yamasaki K., Murakami К., Tanaka O. New sweet diterpene glucosides from Stevia rebaudiana// Phytochemistry. 1976. -V. 5, N6.-P. 975-981.
520. Komai K., Iwamura J.I. Effects of stevioside and and its relative compounds on growth of rice and lettuce seedling// J. Pestic. Sci. 1983. - N 8. - P. 445-450.566.
521. Kot T.V., Pettit-Young N.A. Lactulose in the management ofconstipation: a current review // Ann.Pharmacother, N26, 1992. P. 1277-1282.
522. Kudo M., Koga J. Photoperiodic response and its variation in Stevia rebaudiana Bertoni// Jap. J. Trop. Agric. 1977. - V. 20, N 2. - P. 211217.
523. Laber I.J., Latzko E., Gibbs M. Photosynthetic path of carbon dioxide in spinach and corn leaves// J. Biol. Chem. 1974. - V. 249, N 11. - P. 3436-3441.
524. Kumpulainen J.T. and Salonen J.T. Natural Antioxidants and Food Quality in Atherosclerosis and Cancer Prevention, Royal Society of Chemistry, Capridge 1996.
525. Lima Filho, O.F.d. and E. Malavolta, Nutritional interactions in Stevia (Stevia rebaudiana .Bert.) Portuguese. Arquivos de Biologia e Tecnologia, 1997.40(2): P. 351-357.
526. Limo Filho; O.F.d., et al., Uptake and accumulation of nutrients in Stevia rebaudiana 1~ Macronutrients. & II Micronutricnts. Scientica Agricola, 1997. 54(1/2): P. 14-22,23-30.
527. Lovkova M., Buzuk G., Sokolkva S., Kliment,eva N. Chemical features of medicinal plants// Applied Biochemistry and Microbiology. 2001. -V. 37, N 3. - P. 229-237.
528. Mack D.R., Flick J.A., Durie P.R. et al. Correlation of intestinal lactulose permeability with exocrine pancreatic dysfunction. // J.Pediatr., N120, 1992. P. 696-701.
529. Madsen R.F. Ultrafiltration as a Metod for Yuse Purifikation. «Z. Zukerind», 21, 1971,№12, s. 612 —614.
530. Makapugay H.C., Nanayakkara N.P.D., Kinghorn A.D. Improved high-performance liquid chromatographic separation of the Stevia rebaudiana sweet diterpene glicosides using linear gradient elution// J. Chrom. -1984.-V. 283, N3.-P. 390-395.
531. Martelli A., Frattini C. Unusial essential oils with aromatic properties. L Volatile components of Stevia rebaudiana Bert.// Flavour and Fragnance J. 1985.-V. 1, N 1. - P. 3-7.
532. McCree K.J., Troughton J.II. Prediction of growth rate at different levels from measured photosynthesis and respiration rates// Plant Physiol.1966.-V. 41, N4.-P. 559-566.
533. Melis, M.S. and A.R. Sainati, Effect of calcium and verapamil on renal function of rafs during treatment with stevioside. Journal of Ethnopharmacology, 1991. 33(3): P. 257-262.
534. Metivier J.R., Viana A.M. Determation of microgram quantities of steviosides from leaves of Stevia rebaudiana Bert, by two dimensional thin layer chromatography// J. Exp. Bot. 1979. - V. 30, N 6. - P. 805810.
535. Metivier J.R., Viana A.M. The effect of long and short daylength upon the growth of whole plants and the level of soluble proteins, sugar and stevioside in leaves of Stevia rebaudiana Bert.// J.Exp. Bot. 1979a. - V. 30.-P. 1211-1222.
536. Mitsuhashi IT, Ueno J., Sumida I. Studies on growing Stevia rebaudina Bertoni. Determination of stevioside// Yakugaki zasshi. 1975. - Vol. 95, N 12.-P. 1501-1503.
537. Mitsukami M., Shiiba K., Ohasha II. Enzymatic determination of stevioside in Stevia rebaudiana// Phytochem. 1982. - V. 21, N 8. - P. 1927-1930.
538. Miyagawa II., Fujioka N., Kohda II., Yamasaki K., Taniguchi A., Tanaka R. Studies on the tissue culture of Stevia rebaudiana and its components. II. Induction of shoot primordia// Planta Med. 1986. - N 4. -P. 321-323.
539. Miyazaki, Y., II. Watanabe, and T. Watanabe, Studies on yhe cultivation of Stevia rebaudiana bertoni. Ill Yield and stevioside content of 2-year-old plants. Eisi Shikenjo hokoku., 1978. 96: P. 86-89.
540. Mizota Т., Tamura Y., Tomita M. / Lactulose as a sugar with physiological significance //Bull.Int.Dairy Fed.,1987, N 212.- P. 69-76.
541. Molero J.F.L. La prorogation de Kee hee Stevia rebaudiana Bertoni// Primer simposio National de la stevia (Kee hee) (Asuncion, Paraguay, Julio 1983).-29 p.
542. Mosettig E., Ness B.R. Stevioside. II. The structure of the aglucon// J. Org. Chem. 1955. - V. 20. - P. 884-889.
543. Murayama, S., et al., Studies on the cultivation of Stevia rebaudiana Bertoni. Science Bulletin of the College of Agriculture University of the Ryukyus, 1980.
544. Nakamura, S. and Y. Tamura, - Variation in the main glycosides of stevia. Japanese Journal of Tropical Agriculture, 1985. 29(2): P. 109115.
545. Natural Antioxidants-Chemistry, Health Effects and Applications, ed F. Shanidi, AOCS Press Champaigh, 1997, eh. 24.
546. Nurhaimi-Hasris and N. Toraan-Mathius, In vitrio technology for seed production in plantation crops. Warta Pusat Penelitian Bioteknologi Perkebunan, 1995.1(1): P. 2-9.
547. Oddone, В., How to Grow Stevia,. 1999, Guarani Botanicals, Inc.: Pawcatuck, Connecticut, P. 1-30.
548. Oligosaccharides and probiotic bacteria / Modler II.W., Birlouez I., Holland S. et al. // Bull, of the IDF 313 -58 p.
549. Pezzuto J.M., Compadre C.M., Iwanson S.M., Nanayakkara H.F., Kinghorn A.D. Metabolically activated steviol, the adlycone of stevioside is mutagenic// Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1985. - V. 82, April. - P. 2478-2482.
550. Phillips K.S. Stevia: step in developing of a new sweetener. Newbure: Berkshire UK, 1989.- 106 p.
551. Planas G.M., Kuc J. Contraceptive property of Stevia rebaudiana// Science (Washington). 1968. - N 162 (3857). - P. 1007.
552. Reinefeldt E., Bliesener К. M., Borrass V. Studie uber die Braunung technischer Zuckersafte unter besonderer Berucksichtigung phenolischer Komponenten // C.r. 17 Assem. gen. Comneiss. int. tech. mar. Copenhagne, 1983. S 671-696.
553. Riedel, Deutsche Zuckerindustrie, 32, 931 (1907).
554. Roncucci L., Donate P.D., Carati L. Et al. Antioxidant vitamins or lactulose for the prevention of the reccurence of colorectal adenomas //Dis. Colon Rectum 36, 1993. P.227-234.
555. Rowland I.R., Metabolic interactions in the gut // Probiotics, The Scientific Basis. Chapman and Hall, London, 1992. P.29-53.
556. Ruddat M., Lang A., Mosettig E. Gibberellin activity of steviol, a plant terpenoid//Naturwissensch. 1963. - Bd. 50. - S.23.
557. Rumpler, Deutsche Zuckerindustrie, 26, 586-590, 626-630 (1901).
558. Rumpler, Int. Kongress Angew. Chem., Berlin, 1 1, 1903, 59-69; Z.
559. Sakaguchi M., Kan T. Japanese researches on Stevia rebaudiana Bertoni and stevioside// Cit. Cult. 1982. - N34. - P. 235-248.
560. Sasson A. Biotechnologies and development. Paris: Unesco Techn. centre for agr. and rural cooper. - 1988. - 361 p.
561. SchumanC.//Ztschr.artz.Forbild.-1992.-Bd 86 (18) S. 901 - 914.
562. Shephard D.C., Levin W.B. Biosynthesis in isolated Acetabularia chloroplasts. I. Protein amino acids// J. Cell. Biol. 1972. - V. 54, N 2. -P. 279-294.
563. Sheu, B.W., F. Tarnai, and Y. Motoda, Effects of boron on the growth, yield and contents of Stevioside and Rebaudioside-A of Stevia rebaudiana. - Journal of Agricultural Science; 1987. Japan. 1987. 31(4).
564. Shigekata Y. Studies on carbohydrate formation in Stevia rebaudiana. I. A simple determination way by means of TLC-densitometer of glycosides content during the plant growth// Jap. J. Crop Sci. 1986. - V. 55,N2.-P. 189-195.
565. Shock C.C. Rebaudi's stevia: natural noncaloric sweetener// Calif. Agric. 1982. -V. 36, N9-10.-P. 4-5.
566. Shock C.C. Experimental cultivation of Rebaudi's stevia in California-Davis// Agron. Progr. Rept. Univ. Calif. 1982a. - Coop. Extn. Agr. Exp. Sta., 122.-8 p.
567. Shu, S., Stevia rebaudiana variety trials. Chinese. Zuowu Pinzhong Ziyuan, 1989(1): P. 17-18.
568. Shyu, Y.T., et al., Effects of harvesting dates on the characteristics, yield, and sweet. Journal of Agricultural Research of China, 1994. 43(1): P. 29-39.
569. Siegers C.-P., Hertzberg-Lottin E., Otte M., Schneider B. Anthranoid laxative abuse risk for colorectal cancer // Gut 34, 1993. -P. 1099-1101.
570. Sinha Chitra, Gehlawat Jagdish K. Inversion of sucrose with cation resins // Indian J.Chem. Technol.-1995, v.2, №3. P. 171-172.
571. Slamet, I.I I. and S. Tahardi, The effect of shading and nitrogen fertilization on the flowering of Stevia rebaudiana Bertoni. Menara Perkebunan, 1988. 56(2): P. 34-37.
572. Soejarto D.D., Kinghorn A.D., Farnworth B.B. Potential sweetening agents of plant origin. III. Organoleptic evalution of stevia leaf herbarium samples for sweetness// J. Nat. Prod. 1982. - V. 45, N 5. - P. 590-599.
573. Sumida T. Reports on Stevia rebaudiana Bertoni introduced from Brasil as a new sweetnes resourse in Japan// Misc. Pub. Hokkaido Natl. Agric. Exp. Sta.- 1973.-N2.-P. 69-83.
574. Soejarto, D.D., et al, Potential sweetening agents of plant origin. II. Field search for. Economic Botany, 1983. 37(1): P. 71-79.
575. Spengler 0. und F. Todt, Z. Wirtschaftagr. Zuckerind., 92, 152-159 (1942).
576. Strauss, S., The perfect sweetener? Technology Review, 1995. 98: P. 1826.
577. Sumida T. Problems of stevia growing technology// Jap. Food Sci. -1978.-V. 17, N8.-P. 24-30.
578. Sumida T. Studies on stevia rebaudiana Bertoni as a new possible crop for sweetening resource in Japan// J. Cent. Agric. Exp. Stn. 1980. - V. 31,N l.-P. 67-71.
579. Suzuki K., Uehara M., Endo Y., Goto S. Effect of lactose, lactulose and sorbitol on iron, zinc and copper utilization in rats // Jpn. Soc. Nutri. Food Sci. 1986, V.39.-P. 217-219.
580. Takanashi K., Matsuda M., Ohashi K. Analysis of anti-rotavirus activity of extract from Stevia reubadiana// Antiviral Research. 2001. - V. 49, N l.-P. 15-24.
581. Takemura K., Aoyagi K., Narita K. Lactulose therapy Kidney Dial. 27, I989.-P. 461-465.
582. Tamura Y., Mizota Т., Schimamura S. Lactulose and its application to the food and pharmaceutical industries // Bull. Int. Dairy Fed., 1994.-E-doc 289.- P. 43-53/
583. Tamura Y., Nakamura S., Fukui H., Tabata M. Clonal propagation of Stevia rebaudiana Bertoni by stem-tip culture// Plant Cell Repts. 1984a.- V.3,N5.-P. 183-185.
584. Tamura Y., Nakamura S., Fukui H., Tabata M. Comparison of stevia plants grown from seeds, cutting and stem-tip culture// Plant Cell Repts.- 1984. V.3,N5.-P. 180-182.
585. Tanaka F. Experimental and clinical studies on digestion, absorption and utilization of lactulose // Bull. Kobe. Med. Col., 1962, 212. P. 328338.
586. Tanaka 0. Chemistry of Stevia rebaudiana Bertoni// Recent Adv. Nat. Prod. Res. 1980. - V. 1, N 1. - P. 111-119.
587. Tateo, et al., Stevioside Content and Morphological Variability in a Population ofStevia Rebaudiana (Bertoni) Bertoni From Paraguay. Italian Journal of Food Science, 1998. 10(3): P. 261-267.
588. Terada А., Нага H., Kataoka M., Mitsuoka T. Effect of lactulose on the composition and metabolic activity of the human faecal flora // Microb. Ecol. Health Dis. 1992, v.5. P. 43-50.
589. Thielepape Dr. E., Zucker, N 4, 73-76 (1951).641.
590. Tirtoboma, The effect of cutting material and internode number on thegrowth and yield of Stevia rebauhana. Menara Perkebunan, 1988. 56(4); P. 96-101.
591. Treske R.S., Gzermac L. Lactulose bei Salmonellenenteritis eine Alternative zur antibiotischen Chemotherapie // Therapiewoche 31, 1981.-P. 1213-1217
592. U.S.Patent N 4147773, A61K 37/00. Powdery composition comprising viable bifidobacteria cells and lactulose / Morinaga Milk Industry Co., Japan. Prior. 12.12.77, pat.03.04.79.
593. U.S.Patent N 5415695 C13F. Method of preparing solid lactulose / Duphar Int.Res.B.V., Netherlands. Patl6.05.95, prior. 18.03.88 NL N 8800678.
594. Urban, Reinigung von Zuckersaften; Z. Ver. Deutsche Zuckerindustrie, 76.690 (1926).
595. US Patent N 5128323, Int.Cl.A61K 31/70. Composition having anti endotoxic activity / pat.7.07.92, prior.26.05.88, Duphar J.R., NL.
596. Utumi, M.M., et al., Macronutrient deficiencies in Stevia: Visual symptoms and effects on growth, chemical composition, and stevioside production Portuguese. Pesquita Agropecuaria Brasileira, 1999. 34(6): P. 1039-1043.
597. Valio J.F., Roche R.F. Effect of photoperiod on growth and flowering of Stevia rebaudiana Bertoni// Japan Journ. Crop Sci. 1977. - V. 46, N 2. -P. 243-248.649.
598. Vendemiale G., Palasciano G., Circlli F. et al. Crystalline lactulose inthe therapy of hepatic cirrhosis: Evaluation of clinical and imimmological parameters: Preliminary results / Drug Res. 42 (II), 1992. P. 969-972.
599. Ver. Deutsche Zuckerindustrie, 53, 798-809 (1903). Gans, Jahrb. Kgl. Preuss, Geol. Landesanst, 26, (1905), 27 (1906); t. Ver. Deutsche Zuckerindustrie, 31, 1670 (1903).
600. Viana A.M., Metivier J.R. Changes in the levels of total soluble proteins and sugars during leaf ontogeny in Stevia rebaudiana Bert.// Ann. Bot. -1979.-V. 15, N3.-P. 469-474.
601. Watson D.J., Witts K.J. The net assimilation rates of wild and cultivated beets// Ann. bot., N. S. 1959. - V. 23, N 91. - P. 431-439.
602. Weng, X.Y., J.Y. Sun, and R.C. Zang, Study on the growth and physiological characteristics of Stevia rebaudiana SM4 Chinese. Journal of Zhejiang Agricultural University, 1996. 22(5): P. 538-540.
603. White J.R., Kramer J., Campbell P.K., Bernstein R. Oral use of a topical preparation containing an extract of Stevia rebaudiana and the chrysantemum flower in the management of hyperglycemia// Diabet Care. 1994. - V. 17(8), N 6. - P. 940-941.
604. Whittingham C.P. Photorespiration: its mechanism and significance// * Agron. Jusitana. 1979. - V. 39, N2-3. - P. 115-129.
605. Willenbrink J. Transport 14C-markierter Assimilate in Phloem von Pelargonium zonale und Phaseolus vulgaris// Planta. B. 71, N 1. - S. 171-183.
606. Wollenweber E., Dietz V.II. Occurrence and distribution of free flavonoid aglycones in hlants// Phytochem. 1981. - V. 20, N 5.- P. 869932.
607. Wood И.В., Allerton R., Diehl H.W., Fletcher H.G. Stevioside. I. The structure of the glucose moieties// J. Org. Chem. 1955. - V. 20, N 7. - P. 875-883.
608. Wood В., R. Allorton, H.W.Aieht, Y.G.Fletcher, G.Org. Chem., 1955, h/ 875-883.
609. Yamamoto N.S., Kelmer A.M., Bracht E.S., Ishii F.S., Kemmelmeier M.A., Bracht A. Effect of steviol and its structural analogues on glucose production and oxygen uptake in rat renal tubules// Experimentia. 1985. - V.26,N 1.-P.41-45.
610. Yang J.W., Chang W.C. In vitro plant regeneration from leaf explants of Stevia rebaudiana Bertoni//Z. Pflanzenphysiol. 1979. - B. 93. - S. 337343.
611. Zaidan L.B.P., Dietrich S.M.C., Fellipe G.M. Effect of photoperiod on flowering and stevioside content in plants ofiStevia rebaudiana Bertoni// Jap. J. Crop Sci. 1980. - V. 49, N 4. - P. 569-574.
612. Zhao, Y.G., The effect of microelements on Stevia rebaudiana. Zhejiang Agricultural Science, 1985: P. 1.
613. Zilian B.P., Sonia M.C., Dietrich A., Fellipe G.M. Effect of photoperiod on flowering and steviosidae cjntent in plants of Stevia rebaudiana Bertoni// Japanese Journal of Crop Science. 1980. - V. 49, N 4. - P. 569-672.
- Подпоринова, Галина Константиновна
- доктора сельскохозяйственных наук
- Воронеж, 2006
- ВАК 03.00.16
- Элементы технологии возделывания стевии (Stevia Rebaudiana Bertoni) на черноземе выщелоченном Центрального Предкавказья
- Хозяйственно-биологическая оценка стевии сорта рамонская сластена при введении в культуру на выщелоченных черноземах
- Культивирование стевии с использованием метода светокультуры для создания продуктов функционального питания
- СТЕВИЯ (STEVIA REBAUDIANA BERTONI) В ЦЕНТРАЛЬНОМ ЧЕРНОЗЕМЬЕ (АГРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ И ФИЗИОЛОГО-БИОХИМИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ КУЛЬТУРЫ)
- Биологические особенности и химический состав stevia rebaudiana (bertoni) hemsl. при интродукции в Ленинградскую область