Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Биологические особенности и химический состав stevia rebaudiana (bertoni) hemsl. при интродукции в Ленинградскую область

ВАК РФ 03.00.05, Ботаника

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Коробова, Мария Марковна

ВВЕДЕНИЕ.

I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1. Морфологические и биологические особенности стевии.

2. Интродукция.

3. Химический состав и фармакологические свойства биологически активных веществ растения.

4. Использование в народном хозяйстве.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Биологические особенности и химический состав stevia rebaudiana (bertoni) hemsl. при интродукции в Ленинградскую область"

В последние десятилетия в связи с ухудшением экологической обстановки и использованием синтетических пищевых добавок значительно увеличилось число заболеваний, вызванных нарушением обмена веществ. К числу таких болезней относится и сахарный диабет, от которого только в странах СНГ страдает около 15 млн. человек (Мицык, Шульгина, 1990). Применение диетических подсластителей может в значительной мере решить проблему здорового питания больных сахарным диабетом. Среди растений, содержащих сладкие вещества, используемые в качестве заменителей сахара, одним из наиболее перспективных является стевия (Sievia rebaudiana (Bertoni) Hemsl.) - многолетнее травянистое растение, родина которого - Парагвай. В некоторых странах, особенно в Японии, сумма сладких гликозидов стевии (основным из которых является стевиозид) широко применяется в пищевой промышленности. Несмотря на большой интерес, проявляемый к этому растению в последние годы, до сих пор недостаточно исследованы биологические особенности развития стевии в условиях теплиц и открытого грунта, качественный химический состав листьев, фармакологическая активность суммы сладких веществ, а также продуктивность растений, выращенных в Ленинградской области. В то же время такие сведения дают возможность интродукции стевии в новые регионы, в том числе на Северо-Запад Европейской части России.

Основной целью диссертационной работы было изучение биологических особенности стевии при ее интродукции в Ленинградскую область для расширения возможностей практического использования этого растения.

В задачи исследования входило:

- Изучение морфологических особенностей стевии и исследование развития растений при семенном и вегетативном размножении.

- Выяснение возмояшости выращивания стевии в открытом грунте в северных и южных районах Ленинградской области.

- Определение продуктивности растений при выращивании в теплицах и открытом грунте.

- Исследование влияния удобрений на продуктивность и биологию стевии.

Исследование качественного состава химических веществ, находящихся в листьях стевии.

- Разработка для селекционных целей экспресс-метода определения суммы дитерпеновых гликозидов.

- Проведение сравнительной фармакологической оценки некоторых препаратов, полученных из листьев интродуцированных растений стевии.

Научная новизна исследования обусловлена тем, что в результате работы впервые проведено изучение онтогенетических особенностей стевии и показаны отличительные черты каждого возрастного состояния (вплоть до молодого генеративного) этого растения при выращивании его из семян. Установлена структура формирования куста стевии при вегетативном размножении в течение 5-ти лет.

Показаны возможности выращивания стевии в теплицах и открытом грунте в пределах Ленинградской области. Разработан экспресс-метод для определения суммы сладких веществ. Определена фармакологическая активность некоторых препаратов стевии.

Практическая значимость работы состоит в следующем: найдены оптимальные дозы удобрений АУА, ускоряющие рост и развитие стевии, которые рекомендованы для практического применения. Разработанный экспресс-метод предложен для проведения селекционных работ со стевией. Показана зависимость содержания суммы дитерпеновых гликозидов от индивидуальных особенностей растений, выращенных из укорененных черенков, а также от яруса листьев. Данные о продуктивности растений, выращенных в открытом и закрытом грунте, могут быть использованы при разработке режима заготовки сырья. Проведенная фармакологическая оценка препаратов стевии позволяет рекомендовать их для использования в медицинской практике, в частности, для профилактики и лечения больных сахарным диабетом.

Основные положения диссертации были доложены и представлены на научно-практических конференциях «Химия и технология лекарственных веществ» (Санкт-Петербург, 1994); «Анализ и прогнозирование результатов интродукции декоративных и лекарственных растений мировой флоры в ботанические сады» (Минск, 1995); Международной конференции «Биологическое разнообразие. Интродукция растений» (Санкт-Петербург, 1995); Международной конференции, посвященной 100-летию со дня рождения академика Н.В. Цицина, «Проблемы интродукции растений и отдаленной гибридизации» (Москва, 1998); на П(Х) съезде Русского Ботанического общества «Проблемы ботаники на рубеже ХХ-ХХ1 веков» (Санкт-Петербург, 1998); Второй Международной конференции «Биологическое разнообразие. Интродукция растений» (Санкт-Петербург, 1999). На настоящий момент по материалам диссертации опубликовано 6 работ.

Содержание работы изложено на 142 страницах машинописного текста, содержит 25 рисунков, 18 таблиц. Список цитируемой литературы включает 159 наименований, в том числе 68 на иностранных языках.

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части, включающей четыре главы, каждая из которых содержит заключение, выводов и списка использованной литературы.

Заключение Диссертация по теме "Ботаника", Коробова, Мария Марковна

ВЫВОДЫ

1. Установлено, что стевия — многолетнее поликарпическое травянистое растение и характеризуется наличием геофилии.

2. Выявлено, что при семенном размножении растения в первый год развития успевают пройти следующие возрастные состояния: проростков, ювенильное и имматурное, виргинильное и частично (до 30 % особей) молодое генеративное (остальные особи проходят молодое генеративное во второй и последующий годы развития).

3. Подтверждены данные о преимуществе использования зеленых черенков для размножения стевии. По нашим данным, лучшие сроки для черенкования — май-июнь.

4. Установлено, что зона выращивания стевии может быть расширена вплоть до северных районов Ленинградской области.

5. Максимальная продуктивность наблюдалась у растений, выращенных в открытом грунте Лужского района (89.6 ± 7.9 г листьев на растение).

6. Выявлена высокая отзывчивость стевии на новые виды удобрений АУА, применение которых способствовало изменению анатомической структуры листа (увеличение числа слоев палисадной паренхимы и толщины листовой пластинки) и повышало ее продуктивность, в среднем на 38 %.

7. Кроме достаточно полно изученных в химическом отношении дитерпеновых гликозидов, в листьях стевии найдены группы действующих веществ, которые могут быть рекомендованы для выделения и более углубленного изучения.

Разработанный экспресс-метод предложен для использования в селекционной практике.

8. Показано, что отвар и сироп стевии проявляют более выраженную и разнообразную фармакологическую активность, чем стевиозид.

Заключение

На основании проведенных опытов, можно сделать выводы, что:

- Сироп, стевиозид, так же как и отвар из листьев стевии не обладают острой и подострой токсичностью.

- На модели язв преджелудка по Г.Шеи отвар и сироп превосходили по активности стевиозид.

- На модели стресс-индуцированных деструкций все три препарата проявили примерно равную активность.

Гипогликемические (противодиабетические) свойства выявлены для отвара и сиропа, но не обнаружены для стевиозида.

Следовательно, сироп и отвар проявляют более выраженную разнообразную активность, чем стевиозид.

Более углубленное изучение препаратов листьев стевии показало, что из числа использованных в работе моделей патологических процессов наибольшая активность была зарегистрирована на следующих: повышение сосудистой проницаемости под действием ксилола; серотониновый отек; стресс-индуцированные деструкции слизистой желудка (иммобилизация); язвы желудка, вызванные перевязкой привратника. Обращает на себя внимание то, что общим звеном в патогенезе всех этих патологий является нарушение системы микроциркуляции крови, которое, в свою очередь, в свою очередь, может приводить к нарушениям трофики тканей и, как следствие, к снижению резистентности к любым агрессивным воздействиям. Способность препаратов стевии снижать проницаемость стенки сосудов и микроциркуляции, продемонстрированная в первых двух из перечисленных тестов, может объяснять и их гастропротективное действие. Так, основным звеном при развитии иммобилизационных деструкций является нарушение микроциркуляции в слизистой, вызванное стресс-индуцированным выбросом катехоламинов, Эти трофические нарушения вызывают местное нарушение образования факторов защиты от агрессивного действия желудочного сока (Меерсон, Шейникова, 1988), Поскольку все изученные препараты стевии ограничивали развитие деструкций слизистой желудка, но не нормировали ректальную температуру животных, можно предположить, что их эффективность в данном тесте также не обуславливалась центральным стресс-протективным действием (например, адаптогенным), а была связана с нормализацией микроциркуляции в слизистой желудка. К числу ведущих ульцерогенных факторов при перевязке привратника также относится пептический, поэтому способность препаратов повышать устойчивость слизистой к агрессивному действию желудочного содержимого за счет нормализации микроциркуляции может объяснять противоязвенное действие препаратов на этой модели. Язвы, вызванные бутадионом, характеризуются несколько иным патогенезом. Малая эффективность препаратов на этой модели может быть объяснена тем, что их действие, очевидно, не опосредуется через систему синтеза простогландинов.

Механизмы весьма умеренного противоопухолевого действия, отмеченного для отвара листьев стевии, нуждаются в дальнейшем изучении, Однако, положительное влияние препаратов на состояние сосудистой стенки предположить, что он может несколько ограничивать процесс инвазии опухолевых клеток и как следствие - рост опухоли. Если предложенный механизм верен, не исключена возможность тормозящего действия препаратов стевии на метастазирование злокачественных новообразований. Центральных, опосредующихся через ЦНС свойств препаратов из листьев стевии практически не выявлено (тесты плавания до полного утомления, влияния на действие наркотических средств и конвульсантов, на осуществление ориентировочного рефлекса). Вероятно, вещества, определяющие биологическую активность

125 исследованных препаратов, не проникают через гемато-энцефалический барьер, структуру этих макромолекул и их способность снижать сосудистую проницаемость.

Изложенное выше позволяет прогнозировать целесообразность включения препаратов из листьев стевии в рацион больных, страдающих трофическими язвами, вызванными нарушениями кровообращения (диабетическими, болезнь Рейно),

Известно, что широкораспространенная детская патология - аллергические диатезы - обусловлена сложным комплексом иммуноаллергических реакций, приводящих к нарушению проницаемости сосудистой стенки. Одной из основных причин диатезов детей являются пищевые аллергены (шоколад, яйца, цитрусовые). Поэтому включение в детское питание препаратов из листьев стевии, обладающих способностью нормализировать нарушенную сосудистую проницаемость, является перспективным наряду с использованием препаратов эриотропной (глюкокортикоиды, стабилизаторы мембран) и патогенетической (антигистаминные средства) терапии. Следует отметить, что к числу заболеваний, ведущим патогенным фактором в возникновении которых является нарушение микроциркуляции, относится достаточно широко распространенная профессиональная патология - вибрационная болезнь. Возможно включение сладких веществ да стевии в состав спецпитания для работников соответствующих профессий.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Коробова, Мария Марковна, Санкт-Петербург

1. Артюшенко 3. Т., Федоров Ал. А., Атлас по описательной морфологии высших растений: Плод. Л. 1979. 394 с.

2. Алексеев В. П. Медовая трава Каа-хе // Бюл. ВНИИ чая и субтроп, культур. 1956. № 1. С. 28.

3. Андронова Е. В. Влияние условий укоренения in vitro на жизнеспособность черенков стевии после их пересадки на почву // Научно-технический бюл. ВИР. 1990. Вып. 204. С. 51-55.

4. Андронова Е. В., Лемешев Н. К. Особенности клонального микроразмножения Stevia rebaudiana Bertoni // Научно-технический бюл. ВИР. 1990. Вып. 204. С. 55-60.

5. Анишин С. Л. Влияние площади питания стевии на урожай сухого листа в западной лесостепи УССР // Введение в культуру стевии источника низкокалорийного заменителя сахара. Киев. 1990. С. 63-66.

6. Антонов В. И. Оптимальные сроки зеленого черенкования стевии в условиях защищенного грунта // Введение в культуру стевии источника низкокалорийного заменителя сахара. Киев. 1990. С. 44-49.

7. Барнаулов О. Д., Лимаренко А. Ю., Маничева О. А. Первичная оценка р-витаминной активности галеновых препаратов из некоторых видов Polygonum L. и их влияние на образование экспериментальных дистрофий желудка//Растительные ресурсы, 1980, Т. 16, с. 29-35.

8. Барнаулов О. Д., Маничева О. А., Комиссаренко Н. Ф. Сравнительнаяоценка влияния некоторых флавоноидов на альтерацию стенки желудка у резерпинизированных или иммобилизированных мышей // Хим-фарм. журнал, 1983, № 8, с. 946-957.

9. Безлер Н. В, Удовиченко Л. П. Проблемы интродукции стевии в ЦентральноЧерноземной полосе // Тезисы докладов, представленных II (X) съезду Русского ботанического общества. СПб. 1998. Т. 2. С. 272-273.

10. Белоус В. Е., Олейник Н. А., Бердышев А. Г., Анишин С. Л. Развитие зародышей стевии в естественных и искусственных условиях // Введение в культуру стевии источника низкокалорийного заменителя сахара. Киев. 1990. С. 92-96.

11. Бондарев Н. И. Особенности процессов роста и образования дитерпеновых стевиол-гликозидов в культурах стевии (Stevia rebaudiana Bertoni) IN VITRO//Автореф. канд. дисс. М. 1998. С. 1-27.

12. Бугаенко И. Ф. Заменители сахарозы // Пищ. Пром-стъ. 1988. № 2. С.51-53.

13. Бодруг М. В. Интродукция стевии ( Stevia rebaudiana Bertoni ) в Молдове // Материалы научн. конф. «Биологическое разнообразие. Интродукция растений». СПб. 1995. С. 142-143.

14. Васшьнев1ч С. I., Хасянев1ч А. I., Адамчык Г. Г., Бяpдзiчaвeц Л. Г. Фiтaбiяxiмiчныя даследаванш Stevia rebaudiana Bert, як натуральнага падслалоджвальника // Весщ Академп навук БССР. 1991. № 3. С. 114117.

15. Гвасалия В.П., Коваленко Н. В., Гаргулия М. Ч. Изучение возможности возделывания двулистника сладкого(медовая трава каа-хэ) в условиях Абхазии//Субтроп, культуры. 1990. № 5.С. 149-156.

16. Вульф Е. В., Малеева О. Ф. Мировые ресурсы полезных растений. Л. 1969. С. 414.

17. Гацура В. В., Саратиков А. С. Фармакологические агенты в экспериментальной медицине и биологии. Томск. 1977. 156 с.

18. Голубев В. Н., Гедрих М. Г., Русакова И. А. Ресурсосберегающая технология природного подсластителя пищевых продуктов стевиозида // Пищ. пром-сть. 1997. № 5. С. 10-11.

19. Горбатенко Л. Е., Дзюба О. О. Интродукция стевии на юге России // Тр. I Всерос. конф. по ботанике и ресурсоведению. СПб., 1996. С. 133.

20. Соц. реконструкция и наука. 1935. Вып.4. С. 115 Знаменская В. В., Жужжалова Т. П., Подвигина О. А., Корниенко А. В. Исследование методов вегетативного размножения для получения рассады стевии ^е\та геЬаисИапа ВеЛош ) // Тез. I Междунар.

21. Симпозиума «Новые и нетрадиционные растения и перспективы их практического использования». Пущино. 1995. С. 544-545.

22. Зубенко В. Ф. Научное обеспечение новой отрасли агропромышленного комплекса // Введение в культуру стевии источника низкокалорийного заменителя сахара. Клев. 1990.

23. Зубенко В. Ф., Чудновский Б. Д. Рождение новой отрасли // Сахарная свекла: производство и переработка. 1990. № 5. С.49-50.

24. Зубенко В. Ф., Роговский С. В., Чудновский Б. Д. Стимулирование фитогормонами приживаемости черенков стевии и роста рассады // Доклады ВАСХНИЛ. 1991 а. №2. С. 116-118.

25. Зубенко В. Ф., Ковальчук М. И., Гресь Е. И., Чудновский Б. Д. Хранение корневищ стевии при размножении зелеными черенками // Доклады ВАСХНИЛ. 1991.№ 6. С. 20-22.

26. Зубенко В. Ф.,Ковальчук М. И., Гресь Е. И. Выращивание рассады стевии // Сахар, свекла. 1992. № 6. С.38-39.

27. Ильенко И. И. Микроклональное размножение стевии в культуре in vitro // Введение в культуру стевии источника низкокалорийного заменителя сахара. Киев. 1990. С. 74-78.

28. Иосебидзе Н. И. Атлас-определитель всходов лекарственных растений. Тбилиси. 1981. 83 с.

29. Карпиловская Е. Д., Цапко Е. В., Федюк Е. А., Петршценко Л. Н. Исследования мутагенной активности сахарола // Введение в культуру стевии источника низкокалорийного заменителя сахара. Киев. 1990. С. 125-130.

30. Ким Ю. М. Интродукция новых нетрадиционных культур и перспективы их внедрения в сельскохозяйственное производство республики // Генофонд растительных ресурсов основа для селекции. Ташкент. 1993. С. 49-50.

31. Ким Ю. М., Талалова Е. Е. Интродукция стевии в Узбекистане // Сб. тр. по прикл. ботанике, генетике и селекции.Спб. 1991. Т. 144. С. 186-191.

32. Ким Ю. М., Дусейнов Т. К. Выращивание новой культуры стевии в условиях поливной зоны Узбекистана // Растит. Ресурсы Центр.Азии и их селек.значение.-Ташкент.-1994. С. 102-112.

33. Кирилов Л. Медоносна трева от семейство Сложноцветни // Природа. 1959. № 3. С. 79.

34. Кисничан Л. П., Мику В. Е. Размножение Stevia rebaudiana семенами. // Материалы III Междунар. конфер. по селекции, технологии возделывания и переработке нетрадиционных растений. Алушта, 1994. С. 106.

35. Ковальчук М. И.,Гресь Е. И., Карплюк В. Г., Шендрик Е. Н. Применение нитроаммофоски при выращивании рассады стевии из зеленых черенков // Введение в культуру стевии источника низкокалорийного заменителя сахара. Киев. 1990. С. 50-57.

36. Комиссаренко Н. Ф., Деркач А. И., Ковалев И. П., Бублик Н. П., Черменева Г. А., Котов А. Г., Зинченко В. В. Дитерпеновые гликозиды и фенилпропаноиды листьев Stevia rebaudiana Bertoni (Asteraceae) // Растит, ресурсы. 1994. Т.30. Вып. 1-2. С. 53-64.

37. Корниенко А. В., Жужжалова Т. П., Знаменская В. В. Стевия на приусадебном участке. Рамонь. 1996. 9 с.

38. Коробова М. М. О вегетативном размножении стевии // Тезисы докладов, представленных II (X) съезду Русского ботанического общества. СПб. 1998. Т. 2. С. 302.

39. Кочетов А. А. Изучение особенностей роста и развития растений стевии (Stevia rebaudiana Bertoni) в регулируемых условиях // Автореф. канд. дисс. СПб. 1996.

40. Кривченко В. И., Лемешев Н. К. Перспективы интродукции и внедрения в производство новых технических культур // Сб. науч. тр. по прикл. ботанике, генетике и селекции. СПб. 1989. Т. 125. С.3-9.

41. Ксенз Л. И., Савенкова О. В., Шишко Л. П. Выращивание рассады стевии на разных фонах удобрений // Введение в культуру стевии источника низкокалорийного заменителя сахара. Киев. 1990 а. С. 36-43.

42. Ксенз Л. И., Сичкар Л. А., Корчак В. В. Действие удобрений на продуктивность стевии// Введение в культуру стевии источника низкокалорийного заменителя сахара. Киев. 1990 б. С. 58-62.

43. Левгерова Н. С. Использование экстракта стевии как природного подсластителя в компота х// Тез. докл. Междунар. научно-метод.конф. Орел. 1996. С. 147-149.

44. Левина Р. Е. Морфология и экология плодов. Л.: Наука. 1987. 159 с.

45. Ляпина И. Б. Заменители сахара // Опыт зарубежных предприятий пищевой промышленности. М. 1990. Вып.1. С. 25.

46. Ляховкин А. Г., Солдатов В. Н., Титов Д. А., Теханович Г. А., Чан Динь Лонг, Нгуен Лок. Результаты изучения мировых растительных ресурсов во вьетнамо-российском центре интродукции, селекции и семеноводства с/х культур. Ханой. 1992. С. 111-112.

47. Ляховкин А. Г., Николаев А. П., Учитель В. Б. Стевия медовая трава: Растение лекарственное и пищевое в вашем доме // СПб:ЗАО «Весь». 1999. 96 с.

48. Мамулаишвили И., Кобалия О. Стевия // Субтроп, культуры. 1990. № 3. С. 125.

49. Маринко И. В. Возможно, «элексир долголетия» найден? // Пищевая промышленность. 1994. № 7. 24 с.

50. Меерсон Ф. 3., Шейникова М. Г. Адаптация к стрессорным ситуациям и физическим нагрузкам. М., 1988. 253 с.

51. Мицык В. Е., Шульгина Л. М. Новые виды молочных продуктов с использованием етевиозида // Введение в культуру стевии источника низкокалорийного заменителя сахара. Киев. 1990. С. 131-137.

52. Молоковский Д. С., Давыдов В. В., Тюленев В. В. Действие адаптогенных фитопрепаратов при экспериментальном аллоксановом диабете. -Проблемы эндокринологии, 1989. Т. 35. № 6. С. 82-87.

53. Павлова Г. Н., Ерашова Л. Д., Алехина Л. А. Стевия источник натурального подсластителя продуктов питания // Пищевая пром-сть. 1997. № 5. 9 с.

54. Птичкина Н. М., Карманова Е. В., Данилов Д. В. Низкокалорийный подсластитель в пищевых студневых композициях // Вестник РАСХН. 1995. № 5. С. 66-68.

55. Работнов Т. А. Жизненный цикл многолетних травянистых растений в луговых ценозах // Тр. БИН РАН АН СССР. Сер. 3. Геоботаника. 1950. Вып.6. С. 7-204.

56. Работнов Т. А. Методы изучения семенного размножения тра-вянистых растений в сообществах // Полевая геоботаника. 1960. С. 20-41.

57. Роговский С. В. Размножение стевии ^елаа геЬаисИапа ВеЛош) черенками и особенности выращивания в условиях правобережной лесостепи Украины // Автореф. канд. дис. Киев. 1992. 25 с.

58. Роговский С. В., Чудновский Б. Д. Влияние эндогенных фитогормонов на приживаемость черенков стевии и последующий рост рассады и растений // Введение в культуру стевии источника низкокалорийного заменителя сахара. Киев. 1990. С. 24-32.

59. Роговский С. В., Забигайло Э. Е. Применение регуляторов роста для стимуляции укоренения и роста травянистых черенков стевии // Физиол. и биохимия культ, раст. 1993. Т. 25. № 5. С. 514-517.

60. Савенкова О. В., Корчак В. В. Определение оптимального режима полива при доращивании рассады стевии, полученной методом культуры ткани // Введение в культуру стевии источника низкокалорийного заменителя сахара. Киев. 1990. С. 33-35.

61. Удовиченко Л. П., Корниенко А. В., Кураков В. И. Отдельные элементы технологии возделывания стевии в ЦЧП // Материалы I Международного симпозиума «Новые и нетрадиционные растения и перспективы их практического использования». Пущино. 1995. С. 582583.

62. Уранов А. А. Онтогенез и возрастной состав популяций // . Онтогенез и возрастной состав популяций цветковых растений. М. 1967. С. 3-8.

63. Ушморов А. Г. Оценка действия противоопухолевых препаратов на оформившиеся опухоли в эксперименте // Экспер. Онкология. 1989. № 6. С. 72.

64. Фаулер М. В. Экономические аспекты промышленного культивирования клеток растений // Биотехнология сельскохозяйственных растений. М. 1987. 11 с.

65. Федоров Ал. А., Кирпичников М. Э., Артюшенко 3. Т. Атлас по описательной морфологии высших растений: Лист. М.-Л. 1956 302 с.

66. Федоров Ал. А., Кирпичников М. Э., Артюшенко 3. Т. Атлас по описательной морфологии высших растений: Стебель и корень. М.-Л. 1962.352 с.

67. Федоров Ал. А., Кирпичников М. Э., Артюшенко 3. Т. Атлас по описательной морфологии высших растений: Цветок. М.-Л. 1975. 349 с.

68. Федоров Ал. А., Артюшенко 3. Т. Атлас по описательной морфологии высших растений: Соцветие. Л. 1979. 292 с.

69. Харитонов В. А. Парагвай//Наука. М.1976. С.5-7.

70. Хиль Г. Н. Подслащивающие вещества в пищевой промышленности за рубежом // Пшц.пром-сть. 1986. № 4. С. 61-62.

71. Цанава В. П., Сарджвеладзе Г. П., Харебава Л. Г. Исследование летучих соединений двулистника сладкого // Субтропические культуры. 1989. № 3.С. 73-78.

72. Цанава В. П., Сарджвеладзе Г. П., Харебава Л. Г. Влияние некоторых технологических приемов на состав летучего комплекса травы двулистника сладкого // Субтропические культуры. 1991. № 3. С. 4-70.

73. Ценопопуляции растений. М.: Наука. 1976. 214 с.

74. Ценопопуляции растений. М.: Наука. 1978. 181 с.

75. Чудновский Б. Д., Запольский О. Ю. Способы выращивания рассады стевии из материала, полученного in vitro. // Введение в культуру стевии -источника низкокалорийного заменителя сахара. Киев. 1990. С. 9- 13.

76. Шафферт Е. Э., Чеботарь А. А. Развитие мужской генеративной сферы у стевии Stevia rebaudiana (Bertoni) Hemsley в условиях южного берега Крыма // Известия АН респ.Молдавия. 1992. № 6. С. 10-18.

77. Ярмолюк Г. И., Ролова А. И. Микроспорогенез и развитие мужского гаметофита у стевии // Введение в культуру стевии источника низкокалорийного заменителя сахара. Киев. 1990. С .97- 101.

78. Ярмолюк Г. И., Ильенко И. И., Кинах В. В. Процесс мейоза и гаметогенеза у Stevia rebaudiana // Тезисы докладов VI съезда Укр. общества генетиков и селекционеров им. Н. И. Вавилова. Полтава. 1992. Т. 3. С. 147.

79. Akashi Н., Yokayama Y. Dried-leave extracts of Stevia. Toxicological test. // Shokuhin Kokyo. 1975. 18 (20), p. 34-43.

80. Angkapradipta P., Warsito Т., Faturachim P. N, P, К fertilizer requirement level of Stevia rebaudiana Bertoni on latosolic soil // Menara Perkebunan.-1986. Vol.54. № 1. P. 1-6

81. Angkapradipta P., Warsito T.,Katiman M. Manuring of Stevia rebaudiana Bertoni on andosol // Menara Perkebunan.-1986.-Vol.54.-№ 6. P. 131-137.

82. Aranda J. B. Conferencia sobre el Caa Hee // Asuncion, 1945. P. 32-38.

83. Ascar A. A review on sweeteners//Nutr. 1988. V.12.№ 11. P .706-713.

84. Atmawinata O., Hudaya S., Zairisman R., Pudjosunarjo R.S. Utilization of stevia sweetener in soft drinks // Menara Perkebunan.- 1987.-Vol.55.-N3.P.38-41

85. Bertoni M.S. Eupatorium rebaudianum // Bot. De la Escuela de Agricultura de la Asuncion del Paraguay. 1899. Vol. II. P. 35.

86. Bertoni M.S. Plantas Usuales del Paraguay // Asuncion, 1901. P. 18.

87. Bertoni M.S. Le Kaa He-e: sa nature et ses propriétés // An.Cient. Paraguay. 1905. Ser.I, 5. P. 1-14.

88. Bertoni M. S., 1918.// An.Cient. Paraguay. Ser.II 6, 129. P. 1-16.

89. Bohlmann F., Dutta L.N., Dorner W., King R.M., Robinson H. Zwei neue Guajanolide sowie weitere Longipinenenester aus Stevia-Arten // Phytochem. 1979. Vol.18. P. 673-675.

90. Bridel M., Lavieille R. Sur le principe sucre desfeuilles de Kaa-he-e(Stevia rebaudiana Bert.) // CR Acad Sei Paris. 1931 a. 192:1123-1125

91. Bridel M., Lavieille R. Le principe a saveur sucre de Kaa-he-e (Stevia rebaudiana Bert.). // J. Pharm. Chim. 1931 b Vol. 14. P.99. P. 113.

92. Bridel M., Lavieille R. Le principe a saveur sucre de Kaa-he-e (Stevia rebaudiana Bert.) // J. Pharm. Chim. 1931 c. Vol. 14. P. 154-161.

93. Brimblecomble H. W. Effects of psychotropic drugs on open-field behavior in rats // Psychopharmacology, 1963, Vol. 4, P. 139-147.

94. Cramer B., Ikan R. Sweet glycosides from the stevia plant. //Chemistry in Britain. 1986. V.22. №.10.P. 915-916.

95. Czechowiak C.,Dubois J.,Vasseur J.Culture in vitro du Stevia rebaudiana Bertoni//Comptes rendus de 1 Academie des sciences.-1984.-Vol.298.-N6,-P.173-175

96. Darise V., Kohda H.,Mizutani K.,Kasai R, Tanaka O. Chemical constituents of flowers of Stevia rebaudiana Bertoni // Agric. and Biol. Chem. Jap.- 1983.-Vol. 47. № 3. P. 133-135.

97. Fujita S., Taka R., Fujita Y. Miscellaneous contributions to the essential oils of the plants from various territories. XLI. On the components of the essential oil of

98. Stevia rebaudiana Bertoni // J.Pharm.Soc. Jap.(Yakugaku zasshi). 1977. Vol. 97. № 6. P. 692-694. Ferreira C. M. Cultura de tecidos de Stevia rebaudiana (Bert.) Bertoni // MSc Thesis.

99. Grashoff J. L. A systematic study of the North and Central American species of Stevia // Ph. Dr. diss. Univer.Texas , Austin. Univ.Mich.Microfilm №. 737556. 1972;

100. Grashoff J. L. Novelties in Stevia (Compositae: Eupatorieae) // Brittonia. 1974. Vol. 26, № 4. P. 347-384.

101. Botany.-1968.-Vol.22. N4.-326p. Inglett G. E. Natural and synthetic sweeteners // Hort.Science.-1970.-Vol.5-N3,-P. 139-141

102. Handa S. S., Chawla A. S., Moninder. Hypoglycaemic plants (A review) //

103. Fitoterapia, 1989, no. 3, p. 195-224. Kang K.H., Lee E.W. Physio-ecologial studies on stevia (Stevia rebaudiana Bertoni)

104. Kor.J.Crop.Sci.-1981.-Vol.26.-Nl.-P.69-85 Kienle U. Stevia susstoff von Europas Fieldern? // Landtechnik. 1989. № 5. P. 171-173.

105. King R. M. and H. Robinson Multiple pollen forms in two species of the genus Stevia (Compositae). // Sida . 1967. № 3. P. 165-169.

106. Kinghorn A. D., Soejarto D. D. Current status of stevioside as a sweetening agent for human use. // Economic and medicinal plant research. 1985. Vol.1. P.l-52.

107. Knoch K. Klimakunde von Sudamerika. // Berlin. 1930. P.206-212. Kohda H., Kasai R., Yamasaki K., Murakami K., Tanaka O. // Phytochem. 1976. Vol. 15. P. 981.

108. Kobayashi M., Horikawa S., Degrandi I. H., Ueno J., Mitsuhashi H.// Phytochem.1977. Vol.16 (9). P. 1405. Kudo M., Koga J. Photoperiodic response and its variation in Stevia rebaudiana

109. National de la stevia (Kee hee). Julio. 1983. Asuncion. Paraguay. 29 p. Mosettig E., Nes W. R. Stevioside.il. Structure of the aglucon // J.Org. Chem.1955. Vol.20, № 7. P. 884-899.

110. Mosettig E., Beglinger U., Dolder E., Lichte H., Quitt P., Waters J.A. The absolute configuration of steviol and isosteviol // J. Amer. Chem. Soc. 1963. Vol. 85. № 15. P2305-2309.

111. Phillips K. S. Stevia: Steps in developing a new sweetener // Berkshire UK. 1989. P. 1-43.

112. Planas G. M., Kuc J. Contraceptive properties of Stevia rebaudiana // Science, 1968, Vol. 162, № 3857, P. 1007.

113. Potella B.A., Pereira N.A. Efeito da Caa-hee (Stevia rebaudiana Bert.) sobre a fertilidade de animais experimentatis. // Revista brasileiria de farmacia. 1988, Vol. 1/3, P. 46-50.

114. Rasenack P. Lber die Susstoffe des Eupatorium rebaudianum und des Susholzes // Chem. Zentral-Blatt. 1908. Vol. 23. P. 78-79.

115. Robinson B.L. and R.M. King Eupatorieae systematic review. In : The Biology and Chemistry of Compositae . Academic Press. New York. 1977.Vol.1., P.437-485.

116. Sakamoto I., Kohda H., Murakami K.,Tanaka O. Quantitative analysis of stevioside // J. Pharm. Soc. Japan. 1975. Vol. 95. P. 1507-1510.

117. Sakamoto I., Yamasaki K., Tanaka O.H Chem. Pharm. Bull. 1977. Vol.25. P. 844.

118. Sakamoto I., Yamasaki K., Tanaka O.H Chem. Pharm. Bull. 1975.Vol.25. P 3437.

119. Sakaguchi M., Kan T. Japonese researches on Stevia rebaudiana Bertoni and stevioside // Ci.Cult. 1982. № 34. P. 235-248.

120. Shock C. C. Experimental cultivation of Rebaudis Stevia in California // Agronomy Progress Report. Univ. of Caifornia. 1982 a. № 12. P. 28-61.

121. Shock C. C. Rebaudi" s stevia: natural noncaloric sweeteners // Calif. Agric.1982 b.Vol. 36. № 9. P. 10.

122. Shay H., Komarov S.A., Feld S. S., Meranse D., Grundstein M., Siplet H. Simple method for uniform production of gastric ulceration in rat // Gastroenterology, 1945, № 5, P. 43-61.

123. Shyu Y. T., Liu S. Y., Li H. Y., Wu W. K., Su C.G. Effects of harvesting dates on the characteristics, yield and sweet components of Stevia (Stevia rebaudiana Bertoni) lines// Journ.of Agric.Research of China. 1994. № 43:1. P. 29-39.

124. Soejarto D. D., Compadre C. M., Medon P. J., Kamath S. K., Kinghorn A.D. Potential sweetening agents of plant origin. II. Field search for sweet-tasting Stevia species // Economic Bot. 1983. № 37 (1). P. 71-79.

125. Sosa V. E., Oberti J. C., Prasad J. S., Herz W. Flavonoids and eupahakonenin B from Stevia satureiaefolia //Phytochem. 1984. Vol.23.P. 1515-1516.

126. Sumida T. Reports of Stevia rebaudiana Bertoni introduced from Brazil as a new sweetness resource in Japan. Misc. Publ. Hokkaido Natl.Agric.Exp.Sta.1973. №2. P. 69-83.

127. Sumida T. Problems of stevia growing technology // Jap. Food Sci. 1978. Vol. 17, № 8. P.24-30.

128. Sumida T. Studies on Stevia rebaudiana Bertoni as a new possible crop for sweetening resource in Japan// J.Cent. Agric.Exp. Stn. 1980. Vol.31. P.67-71.

129. Tamura Y., Nakamura S., Fukui H., Tabata N. Comparison of Stevia plants grown from seeds, cuttings and stem-tip cultures for growth and sweet diterpene glucosides// Plant Cell Repts.-1984.-Vol. 3. № 5. P. 180-182.

130. Tanaka O. Chemistry of Stevia rebaudiana Bertoni // Saengyak Hakhoe Chi. 1980. № 11. P. 219-227.

131. Tanaka O. Steviol-glycoside: new natural sweeteners // Trends in analytical chemistry. 1982. Vol.1. № 11. P. 246-248.

132. Wada Y., Tamura T., Kodama T., Yamada T., Ushida Y. Callus cultures and morphogenesis of Stevia rebaudiana // Yukagaku. 1981. № 30. P. 215-219.

133. Wood H. B., Allerton R, Diehl H. W., Fletcher H.G. Stevioside.I. Structure of the glucose moieties // J. Org. Chem. 1955. Vol. 20. № 7. P. 875-883.