Биохимическая характеристика конденсата выдыхаемого воздуха у телят в норме и при респираторной патологии

Черницкий, Антон Евгеньевич

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Биохимическая характеристика конденсата выдыхаемого воздуха у телят в норме и при респираторной патологии
ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Биохимическая характеристика конденсата выдыхаемого воздуха у телят в норме и при респираторной патологии"

На правах рукописи

1111111)1111111

003488069

ЧЕРНИЦКИЙ АНТОН ЕВГЕНЬЕВИЧ

БИОХИМИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА КОНДЕНСАТА ВЫДЫХАЕМОГО ВОЗДУХА У ТЕЛЯТ В НОРМЕ И ПРИ РЕСПИРАТОРНОЙ ПАТОЛОГИИ

03.00.04 - биохимия

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

1.0 ДЕК 2009

Воронеж-2009

Работа выполнена в отделе патобиохимии и патофизиологии ГНУ Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии РАСХН.

Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор

Рецкий Михаил Исаакович

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор

Артюхов Валерий Григорьевич

кандидат биологических наук Алёхин Юрий Николаевич

Ведущая организация: ГОУ ВПО «Воронежская государственная медицинская академия им. H.H. Бурденко»

го совета ДМ 006.004.02 в ГНУ Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии РАСХН (394087, г. Воронеж, ул. Ломоносова, 114-6).

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке ГНУ Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии РАСХН.

Автореферат разослан «'ЯР» 2009 г.

Защита состоится <<

<.й£у>№ :

2009 г. в-Ö часов на заседании диссертационно-

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат биологических наук

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Респираторные болезни молодняка крупного рогатого скота занимают одно из ведущих мест в общей заболеваемости сельскохозяйственных животных, уступая лишь желудочно-кишечным заболеваниям (Аликаев В.А., 1986; Абрамов С.С., 1989; Красочко П.А., 1997; Грибко С.М., 1998 и др.) и наносят огромный ущерб сельскохозяйственному производству, являясь одной из причин высоких затрат на лечение, снижения продуктивности, вынужденного убоя и падежа телят (Красочко П.А., 1997; Шахов А.Г. с соавт., 2000; Пахмутов В.М. с соавт., 2006 и др.).

Структурные изменения в органах дыхательной системы, сопровождающие развитие респираторной патологии, предваряются изменением интенсивности биохимических процессов, в частности, свободнорадикального окисления, представляющего собой универсальное неспецифическое звено развития патологии органов дыхания (Зенков Н.К. с соавт., 2001; Kharitonov S.A., Barnes P.J., 2001; Wood L.G. et al., 2003).

При респираторных заболеваниях, сопровождающихся воспалением бронхов и паренхимы легких, изменяются биохимические свойства бронхоаль-веолярной жидкости, которая содержит в своем составе, как нелетучие, так и более 200 испаряющихся веществ (Гельцер Б.И. с соавт., 2000; Анаев Э.Х., Чу-чалин А.Г., 2002), определение которых используется в медицине для ранней диагностики и прогнозирования развития респираторных заболеваний, а также для слежения за динамикой их течения (Kharitonov S.A., Barnes P.J., 2001; Mutlu G.M. et al., 2001).

Состав конденсата выдыхаемого воздуха (КВВ) отражает изменения, которые происходят в составе бронхоальвеолярной жидкости (Бестужева C.B., 1985; Яковлева О.А., 1990; Гельцер Б.И. с соавт., 2000; Mutlu G.M. et al., 2001; Hunt J., 2002). Поэтому большинство маркеров респираторных заболеваний, определяемых в бронхоальвеолярной жидкости, могут быть идентифицированы и в конденсате выдыхаемого воздуха (КВВ), исследование которого в настоящее время все шире используется в медицине для оценки функционального состояния дыхательной системы, диагностики респираторных заболеваний и оценки эффективности проводимого лечения (Анаев Э.Х., Чучалин А.Г., 2006; Kharitonov S.A., Barnes P.J., 2001).

Однако на сегодняшний день данных о биохимическом исследовании конденсата выдыхаемого воздуха у сельскохозяйственных животных крайне мало (Reinhold P. et al., 1999, 2000), а в отечественной ветеринарной медицине подобные исследования практически не проводились, отсутствуют и сведения о возможности использования КВВ для ранней диагностики респираторной патологии у продуктивных животных.

Это и определило общую направленность работы, выбор методологических подходов и экспериментальных моделей.

Цель и задачи исследований. Основной целью данного исследования являлось изучение биохимического состава конденсата выдыхаемого воздуха, определение биохимических показателей, пригодных для диагностики и ранне-

го прогнозирования патологии респираторного тракта и разработка метода ранней диагностики бронхолегочной патологии у телят.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

— изучить показатели, характеризующие метаболический и оксидантно-антиоксидантный статус здоровых телят и телят, больных субклиническим тра-хеобронхитом;

— изучить влияние внутривенного введения раствора пероксида водорода на функциональное состояние респираторной системы, метаболический и окси-дантно-антиоксидантный статус телят.

— разработать способ ранней диагностики воспалительного процесса в органах дыхания у телят при субклиническом течении респираторных заболеваний;

— разработать устройство и способ получения конденсата выдыхаемого воздуха и изучить возрастную динамику биохимического состава КВВ у телят;

— изучить биохимические параметры КВВ телят, больных субклиническим трахеобронхитом;

— провести сравнительное изучение биохимических параметров конденсата выдыхаемого воздуха у здоровых и телят с клинически выраженной респираторной патологией;

— изучить показатели конденсата выдыхаемого воздуха и крови, характеризующие метаболический и оксидантно-антиоксидантный статус телят при субклиническом трахеобронхите;

— определить наиболее информативные биохимические показатели конденсата выдыхаемого воздуха, пригодные для ранней диагностики и прогнозирования респираторных заболеваний у телят.

Научная новизна. Впервые в отечественной ветеринарной медицине разработана методика получения конденсата выдыхаемого воздуха у телят и изучена возрастная динамика его биохимического состава. Показана взаимосвязь показателей пероксидного окисления липидов, антиоксидантной системы и системы оксида азота в крови и КВВ телят в норме и при патологии респираторной системы. Даны качественные и количественные характеристики ряда соединений, отражающих повреждение дыхательных путей, воспалительные изменения и нарушения тканевых биохимических процессов. Впервые проведено исследование конденсата выдыхаемого воздуха у телят при субклиническом трахеобронхите и определены наиболее информативные показатели КВВ для диагностики респираторной патологии. Разработан способ определения воспалительного процесса в органах дыхания у телят для выявления субклинического течения трахеобронхита, основанный на внутривенном применении раствора пероксида водорода. Новизна проведенных исследований подтверждена положительным решением о выдачи патента РФ на изобретение «Способ ранней диагностики трахеобронхита у телят» по заявке № 2008124214/13(029363) от 08.07.2009.

болеваний у телят. Разработан способ, позволяющий диагностировать наличие воспалительного процесса в трахее и бронхах у телят на самых начальных стадиях, еще до клинического проявления трахеобронхита, что может быть использовано в ветеринарной практике для ранней диагностики и прогнозирования риска развития респираторной патологии у молодняка крупного рогатого скота.

Апробация работы. Основные результаты исследований были представлены на Первом съезде ветеринарных фармакологов России (Воронеж, 2007), Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы болезней молодняка в современных условиях» (Воронеж, 2008); XII Международной Пущинской школе-конференции молодых ученых «Биология — наука XXI века» (Пущино, 2008); Международной научно-практической конференции «Образование, наука, практика: инновационный аспект» (Пенза, 2008).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 8 научных работ: б статей и 2 тезиса докладов, в том числе 2 статьи опубликованы в журналах, рекомендованных ВАК.

Структура и объём работы. Диссертация изложена на 203 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, объектов и методов исследования, результатов собственных исследований, обсуждения, выводов и практических предложений. Список использованной литературы содержит 445 источников, из них 144 отечественных и 301 иностранных. Иллюстративный материал включает 7 рисунков, 2 фотографии и 22 таблицы.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Состояние оксидантно-антиоксидантного статуса и системы оксида азота у телят при субклиническом трахеобронхите.

2. Использование внутривенного введения раствора пероксида водорода для выявления субклинического течения респираторных заболеваний у телят.

3. Биохимические параметры конденсата выдыхаемого воздуха и крови, характеризующие метаболический и оксидантно-антиоксидантный статус у здоровых телят и при субклиническом трахеобронхите.

4. Биохимические показатели конденсата выдыхаемого воздуха, наиболее информативные для ранней диагностики и прогнозирования респираторных заболеваний у телят.

2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Работа выполнена в отделе патобиохимии и патофизиологии Государственного научного учреждения Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии Россельскохозака-демии в 2006-2009 гг. в соответствии с планом НИР по теме 08.04.01 «Разработать методы ранней диагностики, эффективные средства и способы профилактики и лечения массовых незаразных и вызываемых условно-патогенными микроорганизмами заболеваний у молодняка высокопродуктивных животных» (№ гос. регистрации 15070.3666026906.06.8.001.2).

Исследования проведены совместно с сотрудниками отдела клинической биохимии А.И. Золотаревым, Г.Н. Близнецовой, Т.Г. Ермоловой, отдела физико-

химических методов исследований В.И. Шушлебиным и Г.Г. Чусовой и отдела микробиологии, вирусологии и иммунологии А.Г. Шаховым и Ю.Н. Бригадировым ГНУ ВНИВИПФиТ РАСХН, за что автор выражает им благодарность.

Таблица 1

Схемы основных опытов

№ п/п Задачи опыта Возраст телят Группы телят (п)

1. Изучить показатели, характеризующие метаболический и окси-дантно-антиоксидантный статус здоровых телят и телят, больных субклиническим трахеобронхи-том. 30-45 суток Здоровые (14) Субклинический трахеобронхит (12) Клинически выраженный трахеобронхит (14)

2. Изучить влияние внутривенного введения раствора пероксида водорода на метаболический и ок-сидантно-антиоксидантный статус телят. 30-45 суток Клинически здоровые (26)

3. Изучить влияние внутривенного применения пероксида водорода на функциональное состояние респираторной системы у телят и разработать способ ранней диагностики воспалительного процесса в органах дыхания у них при субклиническом течении трахеоб-ронхита. 30-45 суток Клинически здоровые (36) Субклинический трахеобронхит (14)

4. Разработать методику получения КВВ у телят и изучить возрастную динамику биохимического состава КВВ у новорожденных телят. 1,2,3, 7,15 и 30 суток Клинически здоровые (18)

5. Изучить биохимические параметры КВВ у клинически здоровых и телят с клиническими признаками трахеобронхита. 30-45 суток Клинически здоровые (13) Клинически выраженный трахеобронхит (14)

6. Изучить биохимические параметры КВВ у телят, больных субклиническим трахеобронхитом. 2,30-45 суток Клинически здоровые (18) Здоровые (8) Субклинический трахеобронхит (7)

Опыты проведены в производственных условиях животноводческого хозяйства ОАО «Воронежпищепродукт» Новоусманского района Воронежской области на 162 телятах (табл.1).

На протяжении всех опытов за телятами велось постоянное клиническое наблюдение: учитывалось состояние слизистой оболочки, мышечного тонуса, рефлекторной возбудимости, сосательного рефлекса, появление уверенной позы стояния, количество резцов, регистрировалась температура тела, частота сердечных сокращений и дыхательных движений.

Для выявления телят с субклиническим трахеобронхитом применяли пальпацию последнего трахеального кольца (Золотарев А.И. с соавт., 2008) и внутривенное введение 0,6% раствора пероксида водорода на 0,9% растворе хлорида натрия в дозе 0,4 мл/кг массы тела. При этом регистрировали реакцию телят на введение 0,6% раствора пероксида водорода, определяли температуру тела, количество дыхательных движений, чувствительность гортани и трахеи, наличие или отсутствие одышки, носовых истечений, кашля, хрипов, чувствительности последнего трахеального кольца.

Для исследования использовали стабилизированную гепарином венозную кровь, полученную из яремной вены животных в одинаковые промежутки времени в утренние часы до кормления.

Конденсат выдыхаемого воздуха у животных получали по разработанной нами методике в утренние часы до кормления. Кровь и конденсат выдыхаемого воздуха транспортировали в сосудах с тающим льдом при температуре 0-4 °С в течение одного часа после его взятия. При необходимости кровь, сыворотку крови и конденсат выдыхаемого воздуха замораживали и хранили при температуре —20°С.

Содержание в сыворотке крови и конденсате выдыхаемого воздуха глюкозы, холестерина, креатинина, мочевины, кальция, неорганического фосфора, активность у-глутамшпрансферазы (у-ГТ ), аспартат- (АсАТ) и аланинтранс-феразы (АлАТ), щелочной фосфатазы (ЩФ) определяли на биохимическом анализаторе «Hitachi-902» (Япония), содержание в крови цинка, меди, марганца, железа - на атомно-адсорбционном спектрофотометре «Perkin Elmer» модель 703 (США). В ряде опытов активность у-ГТ определяли с помощью наборов фирмы «Vital Diagnostic» (Россия).

Для оценки интенсивности процессов пероксидного окисления липидов, состояния системы антиоксидантной защиты и интенсивности синтеза оксида азота у телят в крови и КВВ определяли: содержание малонового диальдегида (мкМ/л), содержание диеновых конъюгатов (ДК) (Е232/Е220) и кетодиенов (Е278/Е220) (Каминов Ф.Х. с соавт.,1999), активность каталазы (мкМ Н202/лхмин) и глутатион-пероксидазы (мМ восстановленного глуташона/лхмин) с использованием в качестве субстрата пероксида водорода, восстановленного глутатиона (мкМ/л) (Буз-лама B.C. с соавт., 1997), супероксиддисмутазы (усл.ед./мг Hb) (Сирота Т.В., 1999); содержание стабильных метаболитов оксида азота (мкМ/л) (Близнецова Г.Н. с соавт., 2002), S-нитрозогиолов (нМ/л) (Kubes Р. et al., 1999; Moore K.P., Maní A.R., 2002), ферроксидазную активность церулоплазмина (мкМ бензохино-на/лхмин) (Антонов М. П. с соавт., 1985).

Индекс эндогенной интоксикации (ИЭИ) рассчитывали по содержанию в сыворотке крови веществ низкой и средней молекулярной массы (Гребнева

O.JI. с соавт., 2006). Сорбционную способность эритроцитов (%) определяли по степени поглощения красителя метиленового синего эритроцитарной массой (Тогайбаев A.A. с соавт., 1988).

Каждую пробу исследовали в 3-х аналитических повторностях. Обработку экспериментальных данных проводили методами математической статистики, принятыми в биологии и медицине, с использованием компьютерных прикладных статистических программ «Statistica 5.0» (Stat Soft Inc., 1998) и «Microsoft Excel» на PC IBM «Pentium IV». Достоверность различий оценивали методом парных сравнений, используя t-критерий Стъюдента. Статистически достоверными считали различия при уровне значимости р<0,05 (Лакин Г.Ф., 1990; Гельман В.Я., 1999).

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Оксидантно-антиоксидантный статус и состояние системы оксида азота у телят при субклиническом и клинически выраженном

трахеобронхите

Результаты проведенных исследований показали, что содержание малонового диальдегида в крови у телят, больных субклиническим трахеобронхи-том в 1,36 раза (р<0,05) выше чем у здоровых животных (табл. 2).

Таблица 2

Состояние системы ПОЛ-АОЗ в крови телят при _субклиническом трахеобронхите_

Показатели Группы телят

Здоровые (п=14) Больные

Субклинический трахеоброн-хит (п=12) Клинически выраженный трахеоброн-хит (п=14)

МДА, мкМ/л 0,87 ±0,05 1,18 ±0,09* 1,37 ±0,07*

ЦП, мкМ бензохинона/лхмин 0,34 ±0,05 0,35 ± 0,06 0,25 ± 0,03 *А

Каталаза, мкМ Н202/лхмин 35,5 ±1,12 39,7 ± 1,19* 31,8 ± 1,40*

СОД, усл.ед./мг Hb 0,75 ±0,14 0,78 ± 0,10 0,52 ±0,06* А

ГПО, мМ GSH/лхмин 24,7 ± 1,38 27,7 ± 1,13* 23,3 ± 0,75

Примечание: * - р[_2,з < 0,05; * - рг-з < 0,05

Повышение концентрации вторичных продуктов ПОЛ при неизменной активности основных биоантиоксидантов крови у телят, больных субклиническим трахеобронхитом, косвенно может указывать на повышенное образование активных форм кислорода.

У телят с субклиническим трахеобронхитом в крови была статистически достоверно выше активность каталазы на 11,8% и глутатионпероксидазы - на 12,1%. Отмечена тенденция повышения активности СОД. Наиболее высокая положительная линейная взаимосвязь существует между каталазой и ГПО (г=+ 0,89, р<0,05), что вероятно связано с идентичностью субстрата (Н202) для каталазы и селензависимой ГПО.

С развитием клинических признаков трахеобронхита у больных телят происходило значительное снижение мощности ферментативного звена системы антиок-сидантной защиты. Так, при клинически выраженном трахеобронхите активность СОД в крови у больных телят составляла всего 69,3% (р<0,05) от таковой у здоровых животных, а активность каталазы снижалась на 10,4% по сравнению со здоровыми и почти на 20,0% по сравнению с телятами с субклиническим течением трахеобронхита. В тоже время при клинически выраженном трахеобронхите активность ГПО в крови у телят по сравнению со здоровыми животными и телятами с субклиническим трахеобронхитом статистически достоверно не отличалась, хотя имела стабильную тенденцию к понижению. Ферроксидазная активность церуло-плазмина крови телят при клинически выраженном трахеобронхите также снижалась, как по сравнению со здоровыми животными (на 26,5%, р<0,01), так и телятами с субклиническим течением заболевания (на 28,6%, р<0,01).

С развитием симптомокомплекса трахеобронхита возникает отрицательная линейная взаимосвязь между СОД и каталазой (г = -0,67, р<0,05). У телят с клинически выраженным трахеобронхитом в парах СОД-ГПО и каталаза-ГПО статистически достоверных зависимостей не установлено, что свидетельствует об истощении функционального потенциала системы АОЗ. Это приводит к тому, что при клиническом проявлении трахеобронхита у телят уровень МДА в крови повышается у здоровых животных в 1,57 раза (р<0,01), и на 16,1 % - у телят с субклиническим трахеобронхитом.

Между уровнем стабильных метаболитов оксида азота (ИОх) в сыворотке крови у телят, больных субклиническим трахеобронхитом, и у здоровых животных статистически достоверных различий не установлено (табл. 3).

Таблица 3

Содержание стабильных метаболитов оксида азота и Б-нитрозотиолов

в сыворотке крови у телят

Телята

Показатель Здоровые (п=14) Субклинический трахеобронхит (п=12)

ТчЮх, мкМ/л 65,0 ± 3,69 68,5 ±3,14

ЯБШ, нМ/л 5575,0 ±505,27 2025,0 ±511,32*

Примечание: * - р < 0,05 по сравнению со здоровыми

С развитием симптомокомплекса трахеобронхита, уровень >Юх в сыворотке крови у телят возрастал до 82,4 ± 2,01 мкМУл, или на 26,8% (р<0,05), по сравнению со здоровыми и на 20,3% (р<0,05) - по сравнению с телятами с субклиническим течением заболевания.

Считается, что стабилизация оксида азота в форме 8-нитрозотиолов может предотвращать локальную инактивацию N0*, что позволяет переносить биологическое действие оксида азота на цели, отдаленные от места его образования (Б1ат1ег ¿Б. с1 а1., 1992; \Утк Б .А. е1 а1., 1996; Г^аГ Т. е1 а1., 2002).

Установлено, что содержание Б-нитрозотиолов в сыворотке крови у телят, больных субклиническим трахеобронхитом, по сравнению со здоровыми было в 2,75 раз (р<0,05) ниже. При этом между уровнем Б-нитрозотиолов и ЫОх в сыворотке крови телят установлено наличие отрицательной корреляции (г = -0,74, р<

0,05), хотя по данным некоторых авторов (ТееПБсИ М. е1 а1., 2002) существует прямая зависимость между уровнем N0" и содержанием Б-нитрозотиолов в биологических жидкостях. Снижение уровня Б-нитрозотиолов в сыворотке крови у телят при субклиническом трахеобронхите, по всей вероятности, указывает на истощение депо оксида азота в форме Б-нитрозотиолов вследствие развития ок-сидативного стресса и воспаления в органах дыхательной системы.

3.2. Применение пероксида водорода для ранней диагностики респираторных болезней телят

При клиническом исследовании возможно выявление трахеобронхита у телят путем пальпации первого трахеального кольца. В случае повышенной чувствительности трахеи при воспалении это провоцирует у животных появление каш-левой реакции (Беляков И.М., 1975; Сноз Г.В., 2006). Однако повышенная чувствительность первого трахеального кольца и всей трахеи регистрируется лишь при выраженном трахеите и бронхите (сухой или влажный кашель, жесткое везикулярное дыхание, хрипы, экспираторная одышка и т.д.). Определение чувствительности трахеи пальпацией последнего трахеального кольца, предложенное Золотаревым А.И. с соавт. (2008), позволяет диагностировать трахеобронхит на более ранних этапах течения болезни, однако не дает возможности выявлять воспалительный процесс в нижележащих участках трахеи и бронхах.

Основываясь на том, что в концентрациях, превышающих физиологические, Н202 и ОН* вызывают преобладающую контрактацию трахеи и бронхов (ОЫ^бик К. е! а1., 1991; ВаппепЬе^ О. й а1., 1993 и др.), что при повышении чувствительности слизистой оболочки вследствие воспаления может проявляться в виде кашлевой реакции, нами разработан способ ранней диагностики субклинического трахеобронхита путем внутривенного введения клинически здоровым животным 0,6% раствора пероксида водорода на 0,9% растворе хлорида натрия в дозе 0,4 мл/кг массы тела.

Для этого было отобрано 40 телят 1-1,5-месячного возраста, из них 14 с клинически выраженным трахеобронхитом (1 группа) и 26 клинически здоровых телят. Всем телятам внутривенно вводили раствор пероксида водорода в дозе 0,4 мл/кг массы тела. По характеру реакции на введение Н202 телята этой группы были разделены на две (2-я и 3-я группы).

У телят с симптомокомплексом трахеобронхита (1-я группа), как при пальпации первого и последнего трахеального колец, так и при внутривенном введении раствора Н202 отмечался кашель (от 3 до 9 кашлевых толчков) с выделением мокроты. У них сразу или через 1-2 минуты после введения раствора Н202 происходило учащение дыхания и регистрировались первые кашлевые толчки. Кашель с выделением мокроты продолжался от 7 до 16 мин (в среднем 11,0±0,93 мин). Через 16,2±0,89 мин частота дыхательных движений возвращалась к исходным значениям.

Как видно из данных, представленных в таблице 4, у клинически здоровых телят (2-я группа) температура тела, частота дыхательных движений и сердечных сокращений, а также чувствительность последнего кольца трахеи при

пальпации по сравнению с клинически здоровыми телятами 3-й группы статистически достоверно не отличались.

Таблица 4

_Результаты клинического исследования телят_

Показатели Телята

Больные (1-я группа) Клинически здоровые

2-я группа 3-я группа

Температура тела, °С 39,8±0,22* 39,0±0,06 38,7±0,06

Частота дыхательных движений, в мин. 54±4,7* 35±3,2 29±3,1

Частота сердечных сокращений, в мин. 118±10,3* 91±9,3 86±5,2

Наличие кашлевой реакции при пальпации последнего кольца трахеи Есть Нет Нет

Примечание: * - р < 0,05 - 0,001 по сравнению с телятами 3-й группы

У телят 2-й группы введение раствора Н202, вследствие повышения концентрации Н202 выше некоторого «порогового» значения, вызывало преобладающую контрактацию трахеи и бронхов, что, на фоне повышения чувствительности слизистой оболочки на самых начальных стадиях воспаления, провоцировало кашлевую реакцию. Телята этой группы на пальпацию последнего трахеального кольца реагировали в среднем только через 4,2±0,37 суток после выявленной калиевой реакции на введения раствора Н202.

У телят 3-й группы внутривенное введение того же количества Н202 не вызывало кашлевой реакции, поскольку дополнительное введение Н202 в кровяное русло, по всей вероятности, не приводило к превышению физиологической концентрации Н202 и, следовательно, не вызывало контрактации трахеи.

Установлено, что метод пальпации последнего трахеального кольца позволяет определять повышение чувствительности слизистой оболочки трахеи и бронхов в среднем за 3,8±0,17 суток до развития клинических признаков трахеобронхита.

Таблица 5

Сроки выявления чувствительности верхних отделов респираторного тракта на

введение Н202 и пальпацию последнего трахеального кольца у телят (п=10)

Возраст телят, сутки Время от выявления по пробе до развития клинических симптомов болезни, сутки Разница, сутки

Субклиническое течение, определяемое Клинически выраженный трахеоброн-хиг Проба

Введение Н202 Пальпация последнего трахеального кольца

по реакции на Н202 по пальпации трахеального кольца

М±т 35,9±1,46 40,1±1,39 43,9±43,9 8,0±0,30 3,8±0,17 4,2±0,37

Мт 30 34 38 6 3 2

Мах 45 50 54 9 5 6

-и-

В тоже время внутривенное введение 0,6% раствора пероксида водорода в дозе 0,4 мл/кг массы тела позволяет диагностировать повышение чувствительности верхних отделов респираторного тракта за 8,0±0,30 суток до развития симптомокомплекса трахеобронхита, то есть в среднем на 4,2±0,37 суток раньше, чем при пальпации последнего трахеального кольца.

У здоровых телят концентрация МДА в крови после введения раствора Нг02 достоверно не изменялась. В тоже время у телят с субклиническим трахео-бронхитом через 48 часов после введения 0,6% раствора Н202 концентрация МДА в крови снижалась по сравнению с фоном на 16,9% (р<0,05) (табл. 6).

Таблица 6

Состояние системы ПОЛ-АОЗ в крови у телят после введения 0,6% Н202

Показатель Телята

Здоровые Субклинический трахеобронхит

До введения 0,6%Н202 (фон) Через 48 ч после введения До введения 0,6% н2о2 (фон) Через 48 ч после введения

МДА, мкМ/л 0,87 ± 0,05 0,88 ± 0,03 1,18 ±0,09 0,98 ± 0,08*

ЦП, мкМ бензохино-на/лхмин 0,34 ±0,06 0,32 ±0,04 0,35 ± 0,06 0,35 ± 0,03

Катал аза, мкМ Н202/лхмин 35,5 ±1,69 37,6 ±2,74 33,7 ± 1,19 42,8 ±2,19*

СОД, усл.ед./мг НЬ 0,78 ±0,14 0,63 ± 0,16 0,75 ± 0,10 0,81 ± 0,21

ГПО, мМ ОБН/лхмин 24,7 ± 1,78 28,7 ± 0,42 26,4 ± 1,13 26,4 ±0,46

Примечание: * - р < 0,05 - 0,01 по сравнению с исходным фоном до введения Н202

Анализ компонентов ферментативного звена системы АОЗ показал, что внутривенное введение раствора Н202 существенно не влияет на активность СОД и ГПО в крови телят. При этом у телят, больных субклиническим трахе-обронхитом, активность каталазы крови начинала повышаться уже через 1 час после введения раствора Н202, а через 48 часов достигала своего максимума.

У здоровых телят через 48 часов после введения раствора Н202 активность каталазы в крови по сравнению с исходным фоном достоверно не изменялась. У телят с субклиническим трахеобронхитом активность каталазы повышалась на 27,1% (Р<0,05), вероятно, за счет субстратной индукции фермента (Ланкин В.З. с соавт., 2001). Ферроксидазная активность церулоплазмина крови после введения раствора Н202 у телят обеих опытных групп по сравнению с фоном не изменялась. Через 48 часов после введения раствора Н202 в сыворотке крови телят с субклиническим трахеобронхитом снижалась на 31,9% концентрация мочевины (р<0,05) и на 17,3% ИЭИ (р<0,05). При этом повышался до оптимальных значений уровень глюкозы в крови, и несколько снижалась ССЭ — по сравнению с исходным фоном на 4,0 % (Р<0,05).

Таким образом, введение 0,6% раствора пероксида водорода в дозе 0,4 мл/кг массы тела позволяет диагностировать повышение чувствительности слизистой оболочки трахеи и бронхов на самых начальных стадиях воспаления за 8,ОН),30

суток до развития симптомокомплекса трахеобронхита, то есть в среднем на 4,2±0,37 суток раньше, чем методом пальпации последнего трахеального кольца.

3.3. Разработка методики получения конденсата выдыхаемого воздуха

у телят

Вариабельность объема, мл

1,5-2,5

1,5-2,0

1,5-1,

Коэффициент вариации, %

Показатель

Первая

Порции КВВ

Вторая

Третья

Объем КВВ, мл

1,8*0,34

1,8*0,35

1,7*0,22

Результаты наших исследований показали, что использование конденсирующих систем со стеклянными контейнерами, рекомендуемых некоторыми авторами (Анаев Э.Х., Чучалин А.Г., 2002; Hunt J., 2002), для получения конденсата выдыхаемого воздуха у телят в условиях хозяйства нецелесообразно из-за непредсказуемости поведения животного во время процедуры получения КВВ и хрупкости материала контейнера. Для получения КВВ у животных больше подходят контейнеры из полипропилена (Анаев Э.Х. и Чучалин А.Г., 2002). Эти особенности были учтены нами при разработке системы для получения КВВ у телят.

Разработанное и сконструированное устройство для получения КВВ у телят включает: 1) полипропиленовый контейнер-накопитель; 2) внешний контейнер со льдом; 3) маску с системой клапанов; 4) силиконовую трубку, соединяющую выдыхательный клапан с контейнером-накопителем (рис.1). У опытных телят при помощи сконструированного нами устройства собирали по три КВВ с интервалом в 30 минут (рис. 2).

чие?

..., ■ >г

Рис.1. Устройство для получения конденсата Рис.2. Процедура получе-

выдыхаемого воздуха у телят нияКВВ у теленка

Установлено, что средний объем КВВ, образующийся при спокойном равномерном дыхании телят в течение 15 минут, равен 1,8*0,5 мл (1,5-2,5 мл), коэффициент вариации составил 29-32%. Средний объем выдыхаемого воздуха за 15 минут составил 119,0*15,5 л (112-125 л, при 95% доверительном интервале) (табл.7).

Таблица 7

_Объем КВВ, взятого у телят в 3-х последовательных повторностях_

Соотношение между объемом собранного КВВ и объемом выдыхаемого воздуха выражалось следующим уравнением:

Уквв (мл) = 0,013хУвыдых. возд..(л) + 0,255 (г = +0,65, р<0,01)

Результаты исследований показали, что требуется, по крайней мере, 15 минут и приблизительно 120 л воздуха, чтобы собрать КВВ в объем, превышающий 1,5 мл, который достаточен для проведения анализов и определения физических (рН) и некоторых биохимические показателей.

3.4. Возрастная динамика биохимического состава КВВ телят в первый месяц после рождения

Исследования проведены на клинически здоровых телятах, у которых получали КВВ в возрасте 1,2,3,7,15 и 30 суток по разработанной нами методике.

Установлено, что в КВВ определяются некоторые метаболиты и активность ряда ферментов, но в количествах значительно более низких, чем в крови, и их содержание в КВВ после рождения значительно возрастает (табл.8).

Таблица 8

Содержание ряда метаболитов в КВВ и сыворотке крови здоровых телят (п=18)

Возраст, сутки Глюкоза, мМ/л Кальций, мМ/л Фосфор, мМ/л Холестерин, мМ/л NOx, мкМ/л

1 0,023±0.003 3,85 ±0,35 0.07±0,011 2,60 ± 0,06 0.01±0.003 2,20 ± 0,06 0,013±0.002 0,53 ± 0,05 9,4 ± 0.78 716,8±25,32

2 0.028±0.002 3,78 ± 0,35 0.13±0,014* 2,50 ± 0,09 0.03±0.010 2,23 ± 0,06 0,017±0.001 0,86 ± 0,07* 13,7 ± 1.43* 564,1±26,70*

3 0,025±0,003 3,81 ±0,19 0.07±0.005 2,60 ±0,11 0.01±0.003 2,18 ±0,05 0.010±0.001 0,82 ±0,13* 10.2 ± 1.33 481,1± 40,10*

7 0,022±0,003 0.10±0,003 0.01±0.002 0.015±0.002 13,4 ± 1.27

15 0,028±0,002 5,0 ± 0,54 0.05±0,010 2,56±0,05 0.01±0.001 2,74±0,08 0.012±0.001 2,48±0,26 12.0 ± 0.67 151,2±10,47*

30 0,81±0,071* 4,8 ±0,17 0.11±0.010 2,98±0,07 0.30±0.031* 2,70±0,11 0,65±0,046* 4,90±0,46 10.9 ±5.41 97,0 ±9,8*

Примечание: в числителе - показатели КВВ, в знаменателе - сыворотки крови

*- р < 0,05 - 0,001 по сравнению с уровнем в суточном возрасте.

Выявлена различная возрастная динамика суммы стабильных метаболитов оксида азота (NOx) в крови и КВВ. Если в сыворотке крови клинически здоровых животных их уровень снижается к месячному возрасту по сравнению с первыми сутками после рождения более чем в 7 раз, то в КВВ - существенно не изменяется.

Изменение активности ЩФ и у- ГТ в КВВ у здоровых телят (табл. 9), также как и в сыворотке крови (особенно в 1-2-е сутки жизни), связано, вероятно, со всасыванием этих макромолекулярных белков из молозива. При этом активность АсАТ и АлАТ существенно не изменяется до 2-недельного возраста и заметно увеличивается только в 30-суточном возрасте, что, может быть связано с интенсификацией процессов глюконеогенеза (Ferre P., Williamson D., 1978).

Таблица 9

Активность ферментов в КВВ и сыворотке крови клинически здоровых телят, __Е/л, (п=18)_

Возраст, сутки ЩФ у-ГТ АсАТ АлАТ

1 2.2±0,21 848,0±88,98 2.6±0.26 674,7±69,68 2,0+0,21 72,6± 11,05 1.4±0.12 12,5±2,73

2 5,2+0,92* 528,9+57,50* 6,4+0.83* 339,2+153,74* 2.4+0,25 64,8±10,10 0.9±0Л9 15,4±3,34

3 1.7±0,19 510,0+45,35* 1.2±0,18 239,6±102,65* 1.4±0.16 62,6±20,27 0.7+0.16* 15,9+2,03

7 3.2+0,30 3.0+0,26 1.5+0,13 0.9+0.07

15 7.0±0,72 385,1+29,61* 2.9±0,50 49,0±5,24* 2.7±0,21 61,5 ± 5,78 1.7+0,20 8,4 + 0,81*

30 3.0+0,28 351,0+34,92* 2,9+0.57* 23,4±2,72 18.9+1,92* 71,6+6,58 3.3 + 0,22* 12,3+1,19

Примечание: в числителе - показатели КВВ, в знаменателе — сыворотки крови * - р < 0,05 - 0,001 по сравпеншо с уровнем в суточном возрасте.

3.5. Биохимические параметры КВВ клинически здоровых телят и телят с клинически выраженным трахеобронхитом

Установлено, что у телят, с клиническими признаками трахеобронхита, содержание глюкозы по сравнению со здоровыми уменьшалось в сыворотке крови на 64,4% (р<0,01), в - КВВ на 37,5% (р<0,05) (табл. 10). Корреляционный анализ показал наличие между уровнем глюкозы в КВВ и в сыворотке крови телят статистически достоверной прямой линейной взаимосвязи (г = +0,79, р<0,05). У больных телят отмечалась тенденция к повышению содержания мочевины в КВВ, что может указывать на развитие дистрофических процессов и нарушение микроциркуляции в слизистой оболочке бронхов вследствие воспаления (Соляник Е.В., 1996; Хасина М.А., 2004). Концентрация кальция в КВВ и сыворотке крови больных телят в сравнении с клинически здоровыми достоверно не изменялась, а неорганического фосфора повышалась в КВВ в 5,1 раза, в крови - на 27,2% (р<0,05).

Активность определяемых ферментов в большинстве проб КВВ была выше границы обнаружения только для у- ГТ и АлАТ. Активность ЩФ и АсАТ удалось определить менее чем в 30% проб КВВ. Активность АлАТ как в КВВ, так и в сыворотке крови достоверно не изменялась. Если в крови отмечалась только тенденция к повышению активности у-ГТ, то в КВВ у больных телят она достоверно возрастала в 3,36 раза (р<0,05).

По мнению Хасиной М.А. и соавт. (2004), повышение активности ферментов различной субклеточной локализации (цитоплазматических — АлАТ и ЛДГ, мембраносвязанных - ЩФ и у-ГТ, митохондриальной АсАТ) в КВВ при неспецифических заболеваниях легких отражает степень структурно-функционального повреждения клеток респираторного тракта (от нарушения

проницаемости мембран до цитолиза) и связано выходом этих компонентов в бронхоальвеолярную жидкость.

Таблица 10

Некоторые метаболиты и активность ферментов, определяемых в КВВ и _сыворотке крови телят _

Показатель Больные (п=14) Клинически здоровые (п=13)

Глюкоза, мМ/л 0.05 ±0,01* 1,65 ±0,33* 0,08 ± 0,01 4,64 ±0,39

Мочевина, мМ/л 1.43 ±0.27 4,08 ± 0,20 1.05 ±0,08 2,43 ± 0,26

Кальций, мМ/л 0.07 ±0.04 2,65 ±0,11 0.05 ± 0,03 2,89 ± 0,08

Фосфор, мМ/л 0,51 ±0,19* 3,51 ±0,38* 0.10 ±0,01 2,76 ± 0,12

ИЭИ 10.10 ±0,40 20,28 ± 0,46* 10,46 ± 0,33 15,68 ± 0,76

ЩФ, Е/л 470 ± 53,9 ** 546 ± 56,5

у-ГТ, Е/л 4,57 ±0,57* 36,5 ± 4,4 1,36 ±0,17 24,3 ± 1,9

АсАТ, Е/л ** 42,6 ± 4,5 ** 38,6 ± 2,6

АлАТ, Е/л 1,41 ±0,22 6,7 ±0,7 1,60 ±0.25 8,3 ± 0,8

Примечание: в числителе - показатели КВВ, в знаменателе - сыворотки крови

* - р < 0,05 — 0,001 по сравнению с клинически здоровыми животными.

* * - акшвносгь (концентрация) выше границы обнаружения менее чем в 30% проб.

Результаты исследований показывают, что активность мембраносвя-

занной у-ГТ в КВВ может быть использована в качестве маркера воспалительного процесса в органах дыхательной системы у телят.

Содержание веществ низкой и средней молекулярной массы (ИЭИ) в крови у больных телят увеличивалось на 29,3% (р<0,01), в то время как в КВВ остается без существенных изменений.

Установлено, что содержание диеновых конъюгатов и кетодиенов в КВВ у больных и клинически здоровых телят статистически достоверно не отличалось (табл.11).

В тоже время характер изменений содержания МДА в КВВ и в крови у телят с респираторной патологией имел разную направленность. Так, если в крови у больных телят отмечалась тенденция к повышению содержания МДА, то в КВВ концентрация МДА снижалась в 1,87 раза (р<0,001) по сравнению с клинически здоровыми животными (табл. 10). Корреляционный анализ показал, что между содержанием МДА в КВВ и крови у телят существует вероятная отрицательная линейная взаимосвязь (г = — 0,65, р<0,05).

Таблица 11

Некоторые показатели системы ПОЛ-АОЗ, определяемые в КВВ и _в крови телят_

Показатели Клинически здоровые (п=13) Больные (п=14)

ДК, Е232/Е220 2,05 ± 0,020 2.04 ±0.012

Кетодиены, Е278/Е220 1,16± 0,018 1,16 ± 0,012

МДА, мкМ/л 0,28 ± 0,030 0,93 ± 0,062 0.15 ± 0.030* 1,22 ±0,181

GSH, мкМ/л 112,0 ±1,30 108.0 ±0,71*

ЦП, мкМ бензохинона/лхмин 0,012 ±0.002 0,30 ±0,031 0,012 ±0,001 0,33 ± 0,050

NOx, мкМ/л 3.7 ±0,53 66,5 ±2,41 13.3± 2,43* 78,2 ±4,30*

Примечание: в числителе - показатели в КВВ, в знаменателе — в крови

* - р < 0,05 — 0,001 по сравнению с клинически здоровыми животными

Результаты наших исследований показали, что содержание восстановленного глутатиона (GSH) в КВВ у клинически здоровых телят варьирует от 108,5 до 118,7 мкМУл (в среднем 112,0±1,30 мкМ/л).

У телят с респираторной патологией концентрация восстановленного глутатиона находилась в пределах от 104,6 до 109,2 мкМ/л, в среднем 108,0±0,71 мкМ/л, что ниже (р<0,05), чем у клинически здоровых животных. Феррокси-дазная активность церулоплазмина и в КВВ, и в крови у больных телят по сравнению с клинически здоровыми животными статистически достоверно не отличалась. При патологии респираторного тракта в КВВ у телят происходит снижение содержания МДА и GSH.

Полученные результаты согласуются с данными Игнатовой ГЛ. и соавт. (1998), которые указывают, что при обострении хронического бронхита отмечается снижение содержания продуктов ПОЛ в КВВ с одновременным падением антиоксидантной активности КВВ.

В качестве интегрального показателя содержания NO* и нитритов в КВВ и сыворотке крови у телят мы рассматривали сумму стабильных метаболитов оксида азота (NOx = N02"+N03") (Близнецова Г.Н., 2004).

Анализ полученных данных показал, что в сыворотке крови у больных телят содержание NOx возрастало по сравнению с клинически здоровыми животными на 17,5% (р<0,05) (рис. ЗА), в то время как в КВВ уровень NOx увеличивался в 3,61 раза (р<0,01) (рис. ЗБ).

Рис. ЗА. Содержание стабильныхметабо- Рис- ЗЕ- Содержание стабильных мета-литов оксида азота в сыворотке крови те- болитов оксида азота в КВВ телят пят (мкМ/л) (мкМ/л)

При этом повышение содержания NOx в КВВ у больных телят находилось в прямой зависимости от тяжести заболевания. Корреляционный анализ показал, что между содержанием NOx в КВВ и сыворотке крови у телят существует достаточно высокая положительная взаимосвязь (г = +0,74, р<0,05).

Это свидетельствует о том, что повышение уровня NOx в КВВ у телят, по-видимому, связано с развитием явлений оксидагивного стресса и воспаления в органах дыхательной системы, а результаты проведенных исследований указывают на возможность использования показателя содержания суммы стабильных метаболитов N0* в КВВ в качестве маркера острого воспалительного процесса в органах дыхания у телят.

3.6. Биохимические параметры конденсата выдыхаемого воздуха у телят с субклиническим трахеобронхитом

Установлено, что еще до развития клинических признаков патологии респираторного тракта, уже в возрасте 2-х суток у впоследствии заболевших телят (как правило, в 3-4-недельном возрасте) по сравнению с оставшимися здоровыми в КВВ в 1,53 раза была повышена активность АлАТ, в 1,64 раза - у-ГТ, в 1,58 раза - ЩФ, в 2,47 раза — содержание холестерина, в 1,63 раза - кальция и в 1,57 раза-NOx (табл. 12). При этом в сыворотке крови не отмечалось существенных различий в активности ферментов и содержании метаболитов у оставшихся здоровыми и впоследствии заболевших телят.

Более высокий уровень холестерина, активности ферментов различной субклеточной локализации (цитоплазматической АлАТ, мембраносвязанных — ЩФ и у-ГТ) и уровня стабильных метаболитов оксида азота в КВВ у телят, предрасположенных к развитию респираторной патологии, по всей вероятности, связан со структурно-функциональным повреждением клеток респираторного тракта и выходом этих компонентов в бронхоальвеолярную жидкость (Хасина М.А. с соавт., 2004). В целом, изменения в составе КВВ свидетельствуют о начинающемся воспалительном процессе в слизистой оболочке трахеобронхиального дерева (Хасина М.А. соавт., 2004; Kharitonov S.A., Barnes P.J., 2001).

Таблица 12

Биохимический состав КВВ у телят в 2-суточном возрасте_

Показатели Оставшиеся здоровыми (п=12) Заболевшие (п=6)

Глюкоза, мМ/л 0,020±0,007 0,043±0,006

Кальций, мМ/л 0,070±0,011 0,192±0,069*

Фосфор, мМ/л 0,020±0,007 0,030±0,009

Холестерин, мМ/л 0,020±0,003 0,042±0,006*

ЩФ, Е/л 4,0±0,53 6,3±0,84*

у-ГТ, Е/л 3,9±0,49 8,8±0,53*

АсАТ, Е/л 2,5±0,25 2,2±0,28

АлАТ, Е/л 0,57±0,047 0,80±0,073*

ЫОх, мкМ/л 10,9±1,30 15,5±1,94*

Примечание: *- р < 0,05 — 0,001 по сравнению с оставшимися здоровыми животными

Концентрация глюкозы, мочевины, неорганического фосфора как в КВВ,

так и в сыворотке крови у телят с субклиническим трахеобронхитом по сравнению со здоровыми животными достоверно не изменялась. У телят, с субклиническим трахеобронхитом, отмечалась тенденция к снижению концентрации кальция в КВВ, в то время как в сыворотке крови она оставалась без изменений. Полученные данные согласуются с результатами исследований Анаева Э.Х. и Чучалина А.Г. (2006), которые показали, что концентрация кальция в КВВ у здоровых людей выше, чем у пациентов с заболеваниями легких.

Корреляционный анализ показал отсутствие статистически достоверной взаимосвязи между активностью у-ГТ в КВВ и в сыворотке крови у телят (г = +0,01). У телят с субклиническим трахеобронхитом отмечалась тенденция к повышению содержания веществ низкой и средней молекулярной массы в крови, в то время как в КВВ показатель содержания МСМ оставался без изменений. Это может указывать на нарушение процессов утилизации МСМ, которые у здоровых животных протекают в различных клеточных структурах органов дыхания от эндотелиоцитов до альвеолоцитов и клеток интерстиция (Симбирцев С.А. с соавт., 1987; МаПеШ М., СЫавалй Я., 1983; 81асМу Р.Я. et а1., 1983).

Активность ферментов в большинстве проб КВВ была выше границы обнаружения только для у-ГТ и АлАТ. Активность АлАТ как в КВВ, так и в сыворотке крови достоверно не изменялась. Активность у-ГТ в КВВ у телят с субклиническим трахеобронхитом возрастала по сравнению со здоровыми животными в 2,78 раза (р<0,05), в сыворотке крови - дос-Рис. 4. Активность у-ГТ «КВВ у телят, (Е/л) товерно не изменялась (рис. 4).

трахсобронхит

Содержание диеновых конъюгатов и кетодиенов в КВВ у телят с субклиническим трахеобронхитом и у здоровых животных статистически достоверно не отличались.

Характер изменений содержания МДА в КВВ и в крови у телят с респираторной патологией имел разную направленность. Так, если в крови у телят с субклиническим трахеобронхитом содержание МДА возрастало в 1,36 раза (р<0,05), то в КВВ концентрация МДА, напротив, снижалась в 1,60 раза (р<0,05) по сравнению со здоровыми животными. При субклиническом трахе-обронхите концентрация вБН в КВВ снижается по сравнению со здоровьми животными на 4,0% (р<0,05). Ферроксидазная активность церулоплазмина в КВВ и в крови у телят, больных субклиническим трахеобронхитом, по сравнению со здоровыми животными, статистически достоверно не отличалась (табл. 13).

Таблица 13

Некоторые показатели системы ПОЛ-АОЗ, определяемые в КВВ и крови телят

Показатели Здоровые (п=8) Субклинический трахеобронхит (п=7)

ДК, Е232/Е220 2.07 ± 0.021 2.02 + 0.012

Кетодиены, Е278/Е220 1,17 + 0.018 1,16 + 0.012

МДА, мкМ/л 0.32 + 0.040 0,83 + 0,042 0,20 ± 0,050* 1,13 + 0,071*

СБН, мкМ/л 113.9+1.29 109.5 + 0.60*

ЦП, мкМ бензохинона/лхмин 0,01 + 0,001 0,31 + 0,065 0,02 + 0,003 0,30 + 0,017

>Юх, мкМ/л 3.20 + 0.72 65,0 + 3,69 5.22 + 0.82* 68,5 + 3,14

Примечание: в числителе - показатели КВВ, в знаменателе—сыворотки крови

* - р < 0,05 - 0,001 по сравнению со здоровыми животными Полученные данные позволяют рассматривать снижение содержания вторичных продуктов ПОЛ в КВВ с одновременным уменьшением антиокси-дантной активности КВВ (в том числе снижение содержания СБН, как основного компонента системы АОЗ легких) в качестве диагностического критерия воспалительного процесса в органах дыхания.

В конденсате выдыхаемого воздуха содержание Ж)х у телят, больных субклиническим трахеобронхитом, возрастало по сравнению со здоровыми животными на 63,1% (Р<0,05) (рис. 5). При этом в сыворотке крови у больных телят отмечалась лишь незначительная тенденция к повышению их уровня. При этом корреляционный анализ показал слабую прямую взаимосвязь между уровнем Ж)х в КВВ и в сыворотке крови у телят (г = +0,20; р>0,05).

Таким образом, установлено, что в среднем за 8,0±0,33 суток до клинического проявления болезни при субклиническом течении тра-хеобронхита в КВВ у телят снижена концентрация МДА в 1,60 раза, йЗН - на 4,0%, а содержание стабильных метаболитов оксида азота повышено в 1,63 раза.

В целом результаты проведенных исследований свидетельству-Рис. 5. Содержание стабильных метаболи- ют 0 том> 4X0 определение актив-то« оксида азота в КВВ телят, (мкМ/п) ности у-глутамилтрансферазы и

уровня стабильных метаболитов оксида азота в КВВ может быть информативным для оценки степени структурно-функционального повреждения клеток респираторного тракта и представлять интерес для раннего прогноза и выявления бронхолегочной патологии еще до развития ее клинических симптомов.

ВЫВОДЫ

1. Разработаны устройство и способ получения конденсата выдыхаемого воздуха у телят. Средний объем конденсата выдыхаемого воздуха, образующегося у телят при спокойном равномерном дыхании за 15 минут равен 1,8±0,5 мл (1,5-2,5 мл). Для определения биохимических показателей требуется не менее 1,5 мл конденсата выдыхаемого воздуха.

2. В 1-2-е сутки жизни в конденсате выдыхаемого воздуха и сыворотке крови у здоровых телят установлен наиболее высокий уровень активности ЩФ и у-ГТ. Высокая активность ЩФ и у-ГТ в КВВ и сыворотке крови в начале не-онатального периода связана, по всей вероятности, со всасыванием этих мак-ромолекулярных белков из молозива. Активность АсАТ и АлАТ в конденсате выдыхаемого воздуха у телят с 1-2-х суток жизни до 2-недельного возраста существенно не изменяется, и заметно увеличивается только к 30-суточному возрасту, что, вероятно, связано с интенсификацией процесса ппоконеогенеза.

3. Установлена различная возрастная динамика содержания в крови и в конденсате выдыхаемого воздуха стабильных метаболитов оксида азота у оставшихся здоровыми и заболевших телят. В сыворотке крови клинически здоровых телят уровень стабильных метаболитов оксида азота к месячному возрасту, по сравнению с первыми сутками после рождения, снижается более чем в 7 раз, а в конденсате выдыхаемого воздуха уровень стабильных метаболитов оксида азота статистически достоверно не изменяется.

у\ А

пЬ 1 т

Здоровые Субклинический

трахеобронхиг

оксида азота — в 1,57 раза. При этом достоверных различий в содержании стабильных метаболитов оксида азота и активности ферментов в сыворотке крови у оставшихся здоровыми и впоследствии заболевших телят в этом возрасте не установлено.

5. Более высокий уровень холестерина, активности ферментов различной субклеточной локализации (цитоплазматической - АлАТ, мембраносвязанных

- ЩФ и у-ГТ) и уровня стабильных метаболитов оксида азота в конденсате выдыхаемого воздуха у телят, предрасположенных к развитию респираторной патологии, связан со структурно-функциональным повреждением клеток респираторного тракта и выходом этих компонентов в бронхоальвеолярную жидкость. Изменения в составе конденсата выдыхаемого воздуха свидетельствуют о начинающемся воспалительном процессе в слизистой оболочке трахеобронхиального дерева.

6. У телят, больных субклиническим трахеобронхитом, по сравнению со здоровыми животными выше содержание в крови малонового диальдегида в 1,36 раза, активности каталазы - на 11,8%, глутатионпероксидазы - на 12,1%, отмечается тенденция повышения активности СОД. При субклиническом трахеобронхите у телят по сравнению со здоровыми животными содержание глюкозы в сыворотке крови ниже в 1,43 раза, а концентрация мочевины выше в 1,63 раза, при этом отмечается тенденция к повышению содержания в сыворотке крови веществ низкой и средней молекулярной массы.

7. У здоровых телят в возрасте 30-45 суток активность у-ГТ в конденсате выдыхаемого воздуха составляет от 0,90 до 1,30 Е/л, содержание суммы стабильных метаболитов оксида азота - от 1,19 до 4,64 мкМ/л. Изменения в составе конденсата выдыхаемого воздуха отражают характер изменений состава бронхоальвеолярной жидкости на самых ранних стадиях развития болезни.

В среднем за 8,0±0,33 суток до развития симптомокомплекса трахео-бронхита в конденсате выдыхаемого воздуха у телят в 2,78 раза повышена активность у-ГТ, в 1,63 раза — содержание стабильных метаболитов оксида азота, нарушается процесс утилизации молекул средней массы клетками бронхолегочного аппарата.

8. С развитием клинических признаков трахеобронхита у телят происходит снижение мощности ферментативного звена системы антиоксидантной защиты. При клинически выраженом трахеобронхите активность СОД в крови у больных телят составляет всего 69,3% от таковой у здоровых животных, активность каталазы снижается на 10,4%, а активность ГПО в крови больных трахеобронхитом и здоровых животных существенно не отличаются. При этом содержание малонового диальдегида в крови у телят повышается по сравнению со здоровыми животными на 57,5%.

- уровень стабильных метаболитов оксида азота, в 3,36 раза - активность у-

глутамшпрансферазы, на 3,7% снижается содержание восстановленного глута-тиона и в 1,87 раза - малонового диальдегида.

10. Наиболее информативными для диагностики и прогнозирования респираторных заболеваний у телят являются изменения активности у-глутамил-трансферазы и содержания стабильных метаболитов оксида азота в конденсате выдыхаемого воздуха. В возрасте 2-х суток (за 3-4-недели до развития клинических признаков патологии респираторного тракта) у впоследствии заболевших телят содержание >Юх и активность у-глутамшггрансферазы в конденсате выдыхаемого воздуха повышены по сравнению с животными, оставшимися здоровыми, в 1,57 и 1,64 раза соответственно.

При субклиническом трахеобронхите за 6-9 суток до клинического проявления болезни, содержание ЫОх в конденсате выдыхаемого воздуха у телят повышено по сравнению со здоровыми животными в 1,63 раза, а активность у-ГТ —в 2,78 раза.

При клинически выраженном трахеобронхите повышение уровня Ж)х и активности у-глутамшггрансферазы в конденсате выдыхаемого воздуха у телят находятся в прямой зависимости от тяжести заболевания.

11. Внутривенное введение 0,6% раствора пероксида водорода на 0,9%-ном хлориде натрия в дозе 0,4 мл/кг массы тела телятам при субклиническом трахеобронхите приводит к повышению активности ферментативного звена системы АОЗ и снижению содержания вторичных продуктов ПОЛ в крови, повышению до оптимальных значений уровня глюкозы и снижению содержания мочевины в сыворотке крови. Введение раствора пероксида водорода в указанных дозах способствует улучшению энегетического обмена, уменьшению явления эндогенной интоксикации и улучшению состояния биологических мембран у телят.

12. Применение способа, основанного на оценке реакции телят на внутривенное введение 0,6% раствора пероксида водорода на 0,9%-ном хлориде натрия в дозе 0,4 мл/кг массы тела, позволяет диагностировать повышение чувствительности слизистой оболочки трахеи и бронхов на самых начальных стадиях воспаления, в среднем за 8,0±0,30 суток до развития симптомокомплекса трахе-обронхита. В случае возникновения кашлевой реакции через 1-7 минут после введения 0,6% раствора пероксида водорода на 0,9%-ном хлориде натрия в указанных дозах у телят диагностируют субклинический трахеобронхит.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Для выявления воспалительного процесса в органах дыхания у телят рекомендуется применение способа, учитывающего реакцию телят на внутривенное введение 0,6% раствора пероксида водорода на 0,9% растворе хлорида натрия в дозе 0,4 мл/кг массы тела. В случае возникновения кашлевой реакции через 1-7 минут после введения 0,6% раствора пероксида водорода на 0,9%-ном хлориде натрия в указанных дозах у телят (в среднем за 8,0±0,30 суток до развития симптомокомплекса трахеобронхита) диагностируют субклинический трахеобронхит.

2. Для раннего прогноза и выявления бронхолегочной патологии у телят рекомендуется определение в конденсате выдыхаемого воздуха активности у-глутамилтрансферазы и уровня стабильных метаболитов оксида азота. Повышение активности 7-ГТ более 1,30 Е/л и содержания суммы стабильных метаболитов оксида азота выше 4,7 мкМ/л в КВВ может указывать на наличие воспалительного процесса в органах дыхания.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Черницкий А.Е. Конденсат выдыхаемого воздуха как тест-объект для оценки состояния легких у сельскохозяйственных животных II Материалы Первый съезд ветеринарных фармакологов России-Воронеж, 2007.- С.628-631.

*2. Близнецова Г.Н., Ковалев A.A., Черницкий А.Е. и др. Система анти-оксидантной защиты телят при бронхопневмонии// Вестник Российской академии сельскохозяйственных наук — 2008 — №1.— С.76-78.

*3. Близнецова Г.Н., Черницкий А.Е., Ковалев A.A. и др. Биохимические параметры конденсата выдыхаемого воздуха телят // Ветеринария.— 2008.— №3.— С.44-47.

4. Черницкий А.Е. Конденсат выдыхаемого воздуха в диагностике и прогнозировании респираторных болезней у телят // Биология - наука XXI века: тез. докладов 12-й Пущинской международной школы-конференции молодых ученых. - Пущино, 2008 - С.114.

5. Черницкий А.Е. Способ определения воспалительного процесса в органах дыхания у телят // Биология — наука XXI века: тез. докладов 12-й Пущинской международной школы-конференции молодых ученых. - Пущино, 2008.- С.159.

6. Черницкий А.Е. О возможности использования пероксида водорода для ранней диагностики трахеобронхита у телят // «Актуальные проблемы болезней молодняка в современных условиях». Материалы Международной научно-практической конференции. - Воронеж: изд-во "Истоки", 2008 - С.264-268.

7. Черницкий А.Е., Чусов Д.Б. Биохимические параметры конденсата выдыхаемого воздуха у телят при острой бронхолегочной патологии // «Актуальные проблемы болезней молодняка в современных условиях». Материалы Международной научно-практической конференции.-Воронеж: изд-во "Истоки", 2008,- С.668-672.

8. Черницкий А.Е., Ермолова Т.Г. Состояние системы ПОЛ-АОЗ у телят при трахеобронхите // Образование, наука, практика: инновационный аспект: Сб. материалов международной конференции, посвященной памяти профессора А.Ф. Блинохватова. - Пенза: РИО ПГСХА, 2008. - С.481.

*- издания из Перечня ведущих рецензируемых научных журналов и изданий ВАК РФ

Подписано в печать 17.11.09. Формат 60x84 '/16. Усл. печ. л. 1.4 Тираж 100 экз. Заказ 1887

Отпечатано с готового оригинала-макета в типографии Издательско-полиграфического центра Воронежского государственного университета.

394000, Воронеж, ул. Пушкинская, 3.

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Черницкий, Антон Евгеньевич

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Распространение, этиология и патогенез респираторных болезней. телят.

1.2. Роль оксидативного стресса в патогенезе респираторных болезней.

1.3. Система антиоксидантной защиты органов дыхания.

1.3. Роль оксида азота в регуляции респираторной функции легких.

1.4. Критериии оценки функционального состояния дыхательной системы.

1.5. Конденсат выдыхаемого воздуха как объект изучения нереспираторных функций легких.

2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Объекты исследования.

2.2. Методы исследования.

2.2.1. Получение биологического материала.

2.2.2. Методы биохимических исследований крови.

2.2.3. Методы биохимических исследований КВВ.

2.3. Статистическая обработка результатов.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Оксидантно-антиоксидантный статус и состояние системы оксида азота у телят при субклиническом и клинически выраженном трахеобронхите.

3.2. Применение пероксида водорода для ранней диагностики респираторных болезней телят.

3.3. Разработка методики получения конденсата выдыхаемого воздуха у телят

3.4. Возрастная динамика биохимического состава КВВ телят в первый месяц после рождения.

3.5. Биохимические параметры КВВ клинически здоровых телят и телят с клинически выраженным трахеобронхитом.

3.6. Биохимические параметры конденсата выдыхаемого воздуха телят с субклиническим трахеобронхитом.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Биохимическая характеристика конденсата выдыхаемого воздуха у телят в норме и при респираторной патологии"

Актуальность проблемы. Респираторные болезни молодняка крупного рогатого скота занимают второе место в общей заболеваемости животных, уступая лишь желудочно-кишечной патологии (Аликаев В.А., 1986; Абрамов С.С., 1989; Красочко П.А., 1997; Грибко С.М., 1998 и др.). Они наносят огромный ущерб сельскохозяйственному производству, сдерживают развитие животноводства и служат одной из причин снижения продуктивности и племенных качеств животных, вынужденного убоя и падежа телят, высоких затрат на лечение (Красочко П. А., 1997; Шахов А.Г. с соавт., 2000).

По данным Департамента ветеринарии МСХ РФ в 2006-2007 г.г. респираторная патология регистрировалась у 26,5-27,3% от всех народившихся и в общей заболеваемости молодняка крупного рогатого скота респираторная патология составила в эти годы 33,1 и 35,1%. При этом падеж составил 39,2 и 38,5% от всего павшего молодняка соответственно в 2006 и 2007 году.

Болезни органов дыхания чаще регистрируются у телят 1-3-месячного возраста, причем в 7,2-15,6% случаев животные переболевают два и более раз (Гафурова A.M., 1993; Красочко П.А., 1997; Шахов А.Г. с соавт., 2000; Пахмутов В.М. с соавт., 2006 и др.), при этом летальность и вынужденный убой значительно возрастают (Грибко С.М., 1998). Большинство авторов указывает на полиэтиологичную природу респираторных заболеваний (Музычин С.И., 1988; Абрамов С.С., 1989; Фукс П.П., 1990; Красочко П.А., 1997; Грибко С.М., 1998; Шахов А.Г. с соавт., 2000 и др.).

Структурные изменения в органах дыхательной системы предваряются изменением интенсивности биохимических процессов, в частности, свободноради-кального окисления, представляющего собой универсальное неспецифическое звено развития патологии органов дыхания (Зенков Н.К. с соавт., 2001; Kharitonov S.A., Barnes P.J., 2001; Wood L.G. et al., 2003). Чрезмерное повышение интенсивности пероксидного окисления липидов, являющегося частным случаем свобод-норадикального окисления, приводит к нарушению проницаемости и структурной целостности биомембран, окислительного фосфорилирования, процессов микросомального окисления, репликации и т.д. Развитие патологии вызывает изменение прооксидантных и антиоксидантных ресурсов клетки, что приводит к формированию оксидативного стресса (Осипов А.Н. с соавт., 1990; Зенков Н.К. с соавт., 2001 и др.). Это является основным метаболическим синдромом, который способствует развитию многочисленных морфофункциональных нарушений в организме, в том числе и в органах дыхательной системы (Семенов В.Л., 1989; Григорьева И.В. с соавт., 1993; Зенков Н.К. с соавт., 2001; Kharitonov S.A., Barnes P.J., 2001). В настоящее время считается, что в механизмах оксидативного стресса и антиокси-дантной защиты принимает участие и другой свободный радикал - оксид азота (NO*) (Зенков Н.К. с соавт., 2001).

Как известно при респираторных заболеваниях, сопровождающихся воспалением бронхов и паренхимы легких, происходит выпотевание в просвет бронхов и альвеол экссудата, состоящего из плазмы, слущенного эпителия и форменных элементов крови. При этом существенно изменяются биохимические свойства бронхоальвеолярной жидкости, которая содержит в своем составе, как нелетучие, так и более 200 испаряющихся веществ (Гельцер Б.И. с соавт., 2000; Анаев Э.Х., Чучалин А.Г., 2002). Они составляют первую линию защиты от микробной и бактериальной инфекции, аллергенов, оксидантов окружающей среды, поступающих с вдыхаемым воздухом. Многие из определяемых в бронхоальвеолярной жидкости веществ могут быть маркерами воспалительного процесса. Качественные и количественные характеристики этих соединений отражают повреждение дыхательных путей, воспалительные изменения, нарушения биохимических процессов. Поэтому они могут быть использованы для ранней диагностики и прогнозирования развития респираторных заболеваний, а также для слежения за динамикой их течения (Kharitonov S.A., Barnes P.J., 2001; Mutlu G.M. et al., 2001).

Большинство маркеров респираторных заболеваний, определяемых в бронхоальвеолярной жидкости, могут быть идентифицированы в конденсате выдыхаемого воздуха (КВВ). Изменения состава конденсата отражают нарушения, которые происходят в жидкостном слое, выстилающем поверхность бронхиального дерева (Бестужева С.В., 1985; Яковлева О.А., 1990; Гельцер Б.И. с соавт., 2000; Mutlu G.M. et al., 2001; Hunt J., 2002). Сопоставимость биохимических изменений в конденсате выдыхаемого воздуха и бронхоальвеолярной жидкости позволяет предложить исследование конденсата выдыхаемого воздуха в качестве метода диагностики функционального состояния дыхательной системы (Анаев Э.Х., Чучалин А.Г., 2006; Kharitonov S.A., Barnes P.J., 2001).

В медицине исследование конденсата выдыхаемого воздуха является одним из перспективных направлений в пульмонологии. Анализ маркеров окси-дативного стресса и воспаления в конденсате выдыхаемого воздуха может расширить спектр традиционных методов исследования органов дыхания и у животных. Благодаря доступности и неинвазивности метода, исследование конденсата выдыхаемого воздуха, может найти широкое применение, как в диагностике респираторных заболеваний, так и в оценке эффективности проводимого лечения. Однако на сегодняшний день данных о биохимическом исследовании конденсата выдыхаемого воздуха у сельскохозяйственных животных крайне мало (Reinhold P. et al., 1996, 1999, 2000), а в отечественной ветеринарной медицине подобные исследования практически не проводились.

Это и определило общую направленность работы, выбор методологических подходов и экспериментальных моделей.

Цель и задачи исследований. Основной целью данного исследования является изучение биохимического состава конденсата выдыхаемого воздуха, определение биохимических маркеров, пригодных для диагностики и раннего прогнозирования патологии респираторного тракта и разработка метода ранней диагностики бронхолегочной патологии у телят.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи: — изучить показатели, характеризующие- метаболический и оксидантно-антиоксидантный статус здоровых телят и телят, больных субклиническим тра-хеобронхитом;

- изучить влияние внутривенного введения раствора пероксида водорода на функциональное состояние респираторной системы, метаболический и окси-дантно-антиоксидантный статус телят.

- разработать способ ранней диагностики воспалительного процесса в органах дыхания у телят при субклиническом течении респираторных заболеваний;

- разработать устройство и способ получения конденсата выдыхаемого воздуха и изучить возрастную динамику биохимического состава КВВ у телят;

- изучить биохимические параметры КВВ телят, больных субклиническим трахеобронхитом;

- провести сравнительное изучение биохимических параметров конденсата выдыхаемого воздуха у здоровых и телят с клинически выраженной респираторной патологией;

- изучить показатели конденсата выдыхаемого воздуха и крови, характеризующие метаболический и оксидантно-антиоксидантный статус телят при субклиническом трахеобронхите;

- определить наиболее информативные биохимические показатели конденсата выдыхаемого воздуха, пригодные для ранней диагностики и прогнозирования респираторных заболеваний у телят.

Научная новизна. Впервые в отечественной ветеринарной медицине разработана методика получения конденсата выдыхаемого воздуха у телят и изучена возрастная динамика его биохимического состава. Показана взаимосвязь показателей пероксидного окисления липидов, антиоксидантной системы и системы оксида азота в крови и КВВ телят в норме и при патологии респираторной системы. Даны качественные и количественные характеристики ряда соединений, отражающих повреждение дыхательных путей, воспалительные изменения и нарушения тканевых биохимических процессов. Впервые проведено исследование конденсата выдыхаемого воздуха у телят при субклиническом трахеобронхите и определены наиболее информативные маркеры КВВ для диагностики респираторной патологии. Разработан способ определения воспалительного процесса в органах дыхания у телят для выявления субклинического течения трахеобронхита, основанный на внутривенном применении раствора пероксида водорода. Новизна проведенных исследований подтверждена положительным решением о выдачи патента РФ на изобретение «Способ ранней диагностики трахеобронхита у телят» по заявке № 2008124214/13(029363) от 08.07.2009.

Практическая значимость. На основе анализа конденсата выдыхаемого воздуха определены и предложены критерии оценки состояния дыхательной системы и раннего прогнозирования возможности развития респираторных заболеваний у телят. Разработан способ, позволяющий диагностировать наличие воспалительного процесса в трахее и бронхах у телят на самых начальных стадиях, еще до клинического проявления трахеобронхита, что может быть использовано в ветеринарной практике для ранней диагностики и прогнозирования риска развития респираторной патологии у молодняка крупного рогатого скота.

Апробация работы. Основные результаты исследований были представлены на Первом съезде ветеринарных фармакологов России (Воронеж, 2007), Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы болезней молодняка в современных условиях» (Воронеж, 2008); XII Международной пущинской школе-конференции молодых ученых «Биология - наука XXI века» (Пущино, 2008); Международной научно-практической конференции «Образование, наука, практика: инновационный аспект» (Пенза, 2008), а также на ежегодных отчетных сессиях ГНУ ВНИВИПФиТ РАСХН в 2006-2008 гг.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 8 научных работ: 6 статей и 2 тезиса докладов, в том числе 2 статьи опубликованы в журналах, рекомендованных ВАК.

На защиту выносятся следующие положения:

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Черницкий, Антон Евгеньевич

ВЫВОДЫ

1. Разработаны устройство и способ' получения конденсата выдыхаемого воздуха у телят. Средний объем конденсата выдыхаемого воздуха, образующегося у телят при спокойном равномерном дыхании за 15 минут равен 1,8±0,5 мл (1,5-2,5 мл). Для определения биохимических показателей требуется не менее 1,5 мл конденсата выдыхаемого воздуха.

4. В возрасте 2-х суток (за 3-4-недели до развития клинических признаков патологии респираторного тракта), у впоследствии заболевших телят по сравнению с оставшимися здоровыми в конденсате выдыхаемого воздуха повышена активность у-глутамилтрансферазы - в 1,64 раза, аланинамино-трансферазы - в 1,53 раза, щелочной фосфатазы - в 1,58 раза, содержание холестерина — в 2,47 раза, кальция — в 1,63 раза, стабильных метаболитов оксида азота - в 1,57 раза. При этом достоверных различий в содержании стабильных метаболитов оксида азота и активности ферментов в сыворотке крови у оставшихся здоровыми и впоследствии заболевших телят в этом возрасте не установлено.

5. Более высокий уровень холестерина, активности ферментов различной субклеточной локализации (цитоплазматической - АлАТ, мембраносвязанных - ЩФ и у-ГТ) и уровня стабильных метаболитов оксида азота в конденсате выдыхаемого воздуха у телят, предрасположенных к развитию респираторной патологии, связан со структурно-функциональным повреждением клеток респираторного тракта и выходом этих компонентов в бронхоальвеолярную жидкость. Изменения в составе конденсата выдыхаемого воздуха свидетельствуют о начинающемся воспалительном процессе в слизистой оболочке трахеобронхиального дерева.

В среднем за 8,0±0,33 суток до развития симптомокомплекса трахеобронхита в конденсате выдыхаемого воздуха у телят в 2,78 раза повышена активность у-ГТ, в 1,63 раза - содержание стабильных метаболитов оксида азота, нарушается процесс утилизации молекул средней массы клетками бронхолегочного аппарата.

9. При клинически выраженном трахеобронхите у телят изменяется состав конденсата выдыхаемого воздуха. Содержание глюкозы в конденсате выдыхаемого воздуха, по сравнению со здоровыми животными, снижается на 37,5%, в 5,1 раза повышается содержание неорганического фосфора, в 3,59 раза - уровень стабильных метаболитов оксида азота, в 3,36 раза — активность у-глутамилтрансферазы, на 3,7% снижается содержание восстановленного глутатиона и в 1,87 раза - малонового диальдегида.

10. Наиболее информативными для диагностики и прогнозирования респираторных заболеваний у телят являются изменения активности у-глутамил-трансферазы и содержания стабильных метаболитов оксида азота в конденсате выдыхаемого воздуха. В возрасте 2-х суток (за 3-4-недели до развития клинических признаков патологии респираторного тракта) у впоследствии заболевших телят содержание NOx и активность у-глутамилтрансферазы в конденсате выдыхаемого воздуха повышены по сравнению с животными, оставшимися здоровыми, в 1,57 и 1,64 раза соответственно.

При субклиническом трахеобронхите за 6-9 суток до клинического проявления болезни, содержание NOx в конденсате выдыхаемого воздуха у телят повышено по сравнению со здоровыми животными в 1,63 раза, а активность у-ГТ - в 2,78 раза.

При клинически выраженном трахеобронхите повышение уровня NOx и активности у-глутамилтрансферазы в конденсате выдыхаемого воздуха у телят находятся в прямой зависимости от тяжести заболевания.

12. Применение способа, основанного на оценке реакции телят на внутривенное введение 0,6% раствора пероксида водорода на 0,9%-ном хлориде натрия в дозе 0,4 мл/кг массы тела, позволяет диагностировать повышение чувствительности слизистой оболочки трахеи и бронхов на самых начальных стадиях воспаления, в среднем за 8,0±0,30 суток до развития симптомокомплекса трахеобронхита. В случае возникновения кашлевой реакции через 1-7 минут после введения 0,6% раствора пероксида водорода на 0,9%-ном хлориде натрия в указанных дозах у телят диагностируют субклинический трахеобронхит.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

2. Для раннего прогноза и выявления бронхолегочной патологии у телят рекомендуется определение в конденсате выдыхаемого воздуха активности у-глутамилтрансферазы и уровня стабильных метаболитов оксида азота. Повышение активности у-ГТ более 1,30 Е/л и содержания суммы стабильных метаболитов оксида азота выше 4,7 мкМ/л в КВВ может указывать на наличие воспалительного процесса в органах дыхания.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Черницкий, Антон Евгеньевич, Воронеж

1. Абрамов С.С. Болезни дыхательной системы // Незаразные болезни молодняка / И.М. Карпуть, Ф.Ф. Порохов, С.С. Абрамов и др.; под. ред. И.М. Карпутя. Минск: Ураджай, 1989. - С. 85-90.

2. Абрамов С.С., Арестов И.Г. и др. Профилактика незаразных болезней молодняка. -М.: Агропромиздат, 1990. С. 110-123.

3. Авдеев С. Н., Анаев Э.Х., Чучалин А.Г. Применение метода индуцированной мокроты для оценки интенсивности воспаления дыхательных путей // Пульмонология. 1998. - № 2 . - С. 81-87.

4. Аликаев В.А. Болезни дыхательной системы // Внутренние незаразные болезни сельскохозяйственных животных / И.Г. Шарабрин, В.А. Аликаев, Л.Г. Замарин и др. 6-е изд., испр. и доп. - М.: Агропромиздат, 1986. - С. 441—447.

5. Анаев Э.Х., Чучалин А.Г. Исследование конденсата выдыхаемого воздуха в пульмонологии (Обзор зарубежной литературы) // Пульмонология. -2002. № 2. - С. 57-66.

6. Анаев Э.Х., Чучалин А.Г. Конденсат выдыхаемого воздуха в диагностике и оценке эффективности лечения болезней органов дыхания // Пульмонология. 2006. - № 4. - С. 12-20.

7. Андреев Е.В., Драгомир А.В. Острые респираторные заболевания крупного рогатого скота. Кишинев: Карта Молдовеняске, 1979. - 128 с.

8. Аненко А.А., Вельтищев Ю.А., Спектор Е.Б. и др. Перекисное окисление липидов при пневмонии у детей // Метаболизм легких при неспецифических заболеваниях органов дыхания. Л., 1979. - С. 61-62.

9. Антонов М.П., Антонова Л.А., Пашутина Т.В. Особенности определения активности церулоплазмина с п-фенилендиамином в качестве субстрата // Лаб. дело. 1985.-№6.-С. 335-338.

10. Ардаматский Н.А., Решетникова О.П. К проблеме этиологии и патогенеза острых пневмоний // Тер. арх. 1982. — № 4. - С. 10-12.

11. Артемьева С.С. Роль оксида азота и оксидативного стресса в постна-тальной адаптации телят: Дисс. . канд. биол. наук. Воронеж, 2006. - 206 с.

12. Багдонас И., Бальчюнатис А. К вопросу этиологии бронхопневмонии телят // Вопросы профилактики заболеваний животных. Вильнюс, 1983. - С. 28-32.

13. Бакаев О.А. Неспецифические бронхопневмонии телят в промышленном комплексе по выращиванию и откорму молодняка крупного рогатого скота и меры их профилактики: Дисс. . канд. вет. наук. Душанбе, 1985. - 168 с.

14. Балтийская Н.В., Коркина Л.Г., Селиванов Л.И. и др. Исследование хемилюминесценции изолированных полиморфноядерных лейкоцитов и цельной крови у больных острыми пневмониями // Тер. арх. — 1991. № 12. - С. 2327.

15. Барабой В.А., Брехман И.И., Голоткпн В.Г. и др. Перекисное окисление и стресс. СПб.: Наука, 1992. - С. 35-89.

16. Беляков И.М. Диагностика внутренних незаразных болезней сельскохозяйственных животных. — М.: Колос, 1975. 45 с.

17. Бестужева С.В. Биохимическое исследование нереспираторной функции легких по конденсату паров выдыхаемого воздуха у здоровых лиц, у больных с заболеваниями легких и при сердечно-сосудистой патологии: Метод, рекомендации. Минск, 1985. - 17 с.

18. Бестужева С.В. К вопросу о методических подходах в изучении сур-фактантной системы легких // Клин. лаб. диагн. 1995. — № 3. - С. 32-36.

19. Бестужева С.В. Современное состояние вопроса о сурфактантной системе легких // Тер. арх. 1995. - № 3. - С. 50-55.

20. Бестужева С.В., Сыромятникова Н.В., Колб В.Г. Изучение липидного обмена в плазме и сурфактанте у больных неспецифическимн заболеваниями легких // Метаболизм легких при неспецифических заболеваниях органов дыхания.-Л., 1979.-С. 64-65.

21. Биркун А.А., Нестеров Е.Н., Кобозев Г.В. Сурфактант легких. -Киев: Здоровье, 1981. 160 с.

22. Близнецова Г.Н. Пероксидное окисление липидов, антиоксидантная система и оксид азота при токсическом повреждении печени: Дисс. . канд. биол. наук. Воронеж, 2004. - 194 с.

23. Близнецова Г.Н., Ермакова Н.В., Мохаммед З.Д. и др. Спектрофото-метрический метод определения метаболитов оксида азота // Вестник ВГУ. Серия химия, биология. 2002. - № 1. - С. 1-5.

24. Бобырев В.Н. Свободнорадикальнос окисление в патогенезе заболеваний, сопряженных со старением // Патофизиология. 1989. - № 5. - С. 90-94.

25. Бузлама B.C., Рецкий М.И., Мещеряков Н.П. и др. Методическое пособие по изучению процессов перекисного окисления липидов и системы антиоксндантной защиты организма у животных. Воронеж, 1997. - 35 с.

26. Ванин А.Ф. Оксид азота в биологии: история, состояние и перспективы исследований // Биохимия. 1998. - Т. 63, вып. 7. - С. 867-869.

27. Васильева Г.И., Киселева А.К., Рублев Б.Д. и др. Тканевая гетерогенность системы мононуклеарных фагоцитов при взаимодействии с Yersinia pestis // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 1990. - № 11. — С. 75-78.

28. Васильева Н.М., Курашвили JT.B., Петрина С.Н. Содержание некоторых липидных веществ в сыворотке крови детей, больных острой пневмонией // Метаболизм легких при неспецифических заболеваниях органов дыхания. Л., 1979.-С. 66-67.

29. Вельтищев Ю.Е. Проблемы мембранной патологии // Вопросы охраны материнства и детства. 1981. - № 4. - С. 3-9.

30. Волчегорский И.А., Долгушин И.И., Колесников О.И. и др. Экспериментальное моделирование и лабораторная оценка адаптивных реакций организма. Челябинск: ЧГПУ, 2000. - 187 с.

31. Габриэлян Н.И., Левицкий Э.Р., Дмитриев А.А. и др. Скрининговый метод определения средних молекул в биологических жидкостях: Методические рекомендации. М., 1985. - 24 с.

32. Гафурова A.M. Фармакологическая и токсикологическая характеристика торилема и его испытание при респираторных заболеваниях телят: Дисс. . канд. вет. наук. М., 1993. - 128 с.

33. Гельман В.Я. Компьютерный анализ медицинских данных для аспирантов. СПб.: СПбМАПО, 1999. - 59 с.

34. Гельцер Б.И., Кривенко Л.Е., Невзорова В.А. и др. Респираторное влаговыделение и значение его исследования в пульмонологии // Тер. арх. -2000.-№3.-С. 46-50.

35. Гельцер Б.И., Петешова Е.Е., Кочеткова Е.А. и др. Определение метаболитов оксида азота в конденсате выдыхаемого воздуха как способ оценки NO-реактивности дыхательных путей у больных бронхиальной астмой // Тер. арх.-2003.-№ 10.-С. 91-94.

36. Гельцер Б.И., Хасина М.А., Собина А.И. Взаимосвязь липидного состава экспиратов и вентиляционной функции легких у больных острой пневмонией // Тер. арх. 1990. - № 12. - С. 20-23.

37. Герасименко Н.И., Приймак А.А., Сегеди С.А. и др. Эндогенная ок-сигенация перекисью водорода // Вестн. хир. им. И.И. Грекова. 1978. — № 7. -С.127-132.

38. Гончарова В.А., Доценко Е.К., Абрамова И.А. Значение исследования катехоламинов и гистамина при неспецифических заболеваниях легких // Тер. арх. 1980. - № 3. - С. 29-32.

39. Гончарова В.А., Доценко Е.К., Абрамова И.А. Легочной метаболизм биологически активных веществ и его связь с патологией органов дыхания // Метаболизм легких при неспецифических заболеваниях органов дыхания. — Л., 1979.-С. 18-21.

40. Гончарова В.А., Сыромятникова Н.В., Доценко Е.К. и др. Клинико-биохимическое исследование нсгазообменных функций легких у больныхострым бронхитом с различными вариантами течения // V Нац. конгр. по болезням органов дыхания: Сб. рез. М., 1995. - № 1503.

41. Гончарова В.А., Сыромятникова Н.В., Шаталин Г.И. Биологически активные вещества легочной ткани при бронхолегочном процессе у кроликов // Бюлл. эксп. биол. и мед. 1981. -№ 4. - С. 412-414.

42. Горбацевич Л.И., Тимофеев Н.Н. О внутриартериальном применении растворов перекиси водорода в эксперименте и клинике (Обзор литературы) // Вестн. хир. им. И.И. Грекова. 1972. - № 2. - С. 119-123.

43. Горизонтов П.Д., Белоусова О.И., Федотова М.И. Стресс и система крови. М.: Медицина, 1983. - 217с.

44. Гребнева О.Л., Ткачук Е.А., Чубейко В.О. Способ подсчета показателя веществ низкой и средней молекулярной массы плазмы // Клин, лаб.-диагн. -2006.-№2.-С. 17-18.

45. Грибко С.М. Иммуностимуляторы в профилактике и терапии респираторных болезней молодняка крупного рогатого скота: Дисс. . канд. вет. наук. Воронеж, 1998. - 155 с.

46. Григорьева И.В., Ракита Д.Р., Гормаш В.Я. Особенности регуляции перекисного окисления липидов при острой пневмонии и при острой пневмонии в сочетании с сахарным диабетом // Тер. арх. 1993. - № 3. - С. 27-31.

47. Гусев В.А., Даниловская Е.В. Роль активных форм кислорода в патогенезе пневмокониозов // Вопр. Мед. Химии. 1987. - № 5. - С. 9-15.

48. Гуткин B.C., Горбытов В.А., Востряков А.П. и др. Бактерицидная активность и хемилюминесценция мононуклеарных фагоцитов животных // С.-х. биология. 1986. - № 6. - С. 78-86.

49. Данилевский В.М. Бронхопневмония телят. Этиология, патогенез, диагностика, профилактика и лечение // Ветеринария 1985. - № 1. - С. 16-19.

50. Дорофеева С.Г. Роль пастерелл в этиологии респираторных болезней молодняка крупного рогатого скота: Автореф. дисс. . канд. вет. наук. М., 1988.- 18 с.

51. Двинская Л.М., Никифорова JI.H. Определение переокисления липи-дов тканей с помощью теста 2-тиобарбитуровой кислотой // Изучение липидно-го обмена у сельскохозяйственных животных / Методические указания. Боровск, 1980. - С. 37^0.

52. Дубинина Е.Е. Некоторые особенности функционирования ферментативной антиоксидантной защиты плазмы крови человека // Биохимия. 1993. -Т. 58, вып. 2.-С. 268-273.

53. Ерохин В.В. Функциональная морфология легких. М.: Медицина, 1987.-272 с.

54. Ефанова ЛИ., Сайдулдин Е.Т. Защитные механизмы организма. Иммунодиагностика и иммунопрофилактика инфекционных болезней животных / Под ред. Шахова А.Г. Воронеж: ВГАУ, 2004. - 391 с.

55. Жильвинский А.Д. Гематологические, серологические и бактериологические результаты исследований экспериментальной пневмонии у телят // Научные труды Латвийской сельскохозяйственной академии. 1979. - С. 8587.

56. Журавлев А.И. Развитие идей Б.Н. Тарусова о роли цепных процессов в биологии II Биоантиокислители в регуляции метаболизма в норме и патологии. -М.: Наука, 1982. С. 3-37.

57. Зенков Н.К., Ланкин В.З., Меныцикова Е.Б. Окислительный стресс: Биохимический и патофизиологический аспекты. М.: МАИК "Наука / Периодика", 2001.-343 с.

58. Игнатова Г.Л., Волчегорский И.А., Волкова Э.Г. и др. Состояние процессов перекисного окисления липидов при хроническом бронхите // Тер. арх. 1998. - № 3. - С. 36-37.

59. Кривенко Л.Е., Гельцер Б.И. Адаптивные реакции кардиореспиратор-ной системы при хроническом бронхите и его преморбидных формах // Тер. арх. 1998. - № 3. - С. 32-36.

60. Каверин Н.Н. Оксидантно-антпоксидантный статус новорожденных телят и влияние на него селеноорганического препарата селекор: Дисс. . канд. биол. наук. Воронеж, 2005. - 206 с.

61. Каган В.Е., Орлов О.Н., Прилипко Л.Л. Проблема анализа эндогенных продуктов перекисного окисления липидов // Итоги науки и техники. Сер. Биофизика. М., 1986.-Т. 18.-С. 1-135.

62. Камилов Ф.Х., Винькова Г.А., Орлова Н.С. Активность перекисного окисления липидов и антиоксидантных ферментов в слезной жидкости при посттравматическом увейте // Клин. лаб. диагн. 1999. - № 7. - С. 7-9.

63. Коваленко Л.И. Бронхопневмония телят: предупреждение и лечение // Ветеринария. 1982. - № 11. - С. 57-59.

64. Колесова О.Е., Маркин А.А., Федорова Т.Н. Перекисное окисление липидов и методы определения продуктов липопероксидации в биологических средах // Лаб. дело. 1984. - № 9. - С. 540-546.

65. Комар С.И., Коробейникова Э.Н., Евдокимова Е.В. Липиды конденсата выдыхаемого воздуха у больных пневмонией // Клин. лаб. диагн. 1996. -№ 6. - С. 24-27.

66. Кондрахин И.П. Методика диагностики и прогнозирования бронхопневмонии телят по биохимическому тесту // Ветеринария. 1997. - № 12. - С. 43-45.

67. Копьева Т.Н., Амосова О.М. Полиморфноядерпый лейкоцит: роль в развитии острого и хронического неспецифического воспаления в легких // Тер. арх. 1987. — № 3. - С. 142-145.

68. Королюк М.А., Иванова А.И., Майорова И.Т. и др. Метод определения активности каталазы // Лаб. дело. 1988. — № 1. - С. 16-19.

69. Красочко П.А. Моно- и ассоциативные вирусные респираторные инфекции крупного рогатого скота (иммунология, диагностика, профилактика и терапия): Автореф. дисс. . докт. вет. наук. Минск, 1997. - 34 с.

70. Кулинский В.И., Колссниченко Л.С. Структура, свойства, биологическая регуляция глутатионпероксидазы // Успехи соврем, биологии. 1993. - Т. 113, вып. 1. - С. 107-122.

71. Лакин Г.Ф. Биометрия. М.: Высш. шк., 1990. - 352 с.

72. Литонян З.М. Состояние обмена углеводов в легких при введении гидрокортизона и инсулина и действии острой гипоксии: Автореф. дисс. . канд. мед. наук. -М., 1980. 23 с.

73. Манухина Е.Б., Малышев И.Ю. Стресс, адаптация оксид азота // Биохимия. 1998. - Т. 63, вып. 7. - С. 992-1006.

74. Маянский Д.Н. Хроническое воспаление. М.: Медицина, 1991.272 с.

75. Мельничук Д.О., Цвшховський М.Т., Грищенко В.А. Закономерное^ формування колострального 1муштету в новонароджених телят // Укр. 6ioxiM. журн. 2002. - Т. 74, № 2. - С. 21-24.

76. Меныцикова Е.Б., Зенков Н.К. Метаболическая активность грануло-цитов при хронических неспецифических заболеваниях легких // Тер. арх. -1991.-№ И.-С. 85-87.

77. Меньшикова Е.Б., Зенков Н.К. Окислительный стресс при воспалении // Успехи соврем, биологии. 1997. - Т. 117., вып. 2. - С. 155-171.

78. Меньшикова Е.Б., Зенков Н.К. Примирование гранулоцитов крови при воспалении // Патол. физиология и эксперим. терапия. 1992. - № 3. - С. 14-16.

79. Меньшикова Е.Б., Зенков Н.К., Реутов В.П. Оксид азота и NO-синтазы в организме млекопитающих при различных функциональных состояниях // Биохимия. 2000. - Т. 65, вып. 4. - С. 485-503.

80. Меньщикова Е.Б., Зенков Н.К., Шергин С.М. Биохимия окислительного стресса. Оксиданты п антиоксид анты. Новосибирск: Изд. СО РАМН, 1994.-203 с.

81. Митрофанов П.М. Микоплазменные респираторные инфекции у телят//Ветеринария. 1978. - № 11.-С. 110-113.

82. Мотавкин П.А., Гельцер Б.И. Клиническая и экспериментальная патофизиология легких. М.: Наука, 1998. - 366 с.

83. Музычин С.И. Инфекционный ринотрахеит и парагрипп-3 крупного рогатого скота (эпизоотология, иммунитет и профилактика): Автореф. дисс. . докт. вет. наук. Казань, 1988. - 42 с.

84. Мустакимов Р.Г. Профилактика и лечение бронхопневмонии у телят и ягнят. Душанбе: Ирфон, 1988. - 61 с.

85. Мустакимов Р.Г. Флюорография в ветеринарии. 2-е изд., перераб. и доп. - М.: Агропромиздат, 1985. - 111 с.

86. Невзорова В.А., Гельцер Б.И. Окись азота и гемоциркуляция легких // Пульмонология. 1997. - № 2. - С. 80-85.

87. Нестеров Е.Н. Состояние сурфактанта и роль его изменений в патогенезе некоторых заболеваний легких // Сурфактантная система легких в норме и патологии. Киев: Наукова Думка, 1983. - С. 91-97.

88. Нестеров Е.Н., Папевская Г.Н. Сурфактантная система легких и коррекция ее нарушений при бронхолегочных заболеваниях // Пульмонология. -2000. № 3. - С. 19-25.

89. Никитин Б.П., Потапова В.Н., Устинова В.Я. и др. Содержание окси-пролина в моче и крови при острой пневмонии у детей // Метаболизм легких при неспецифических заболеваниях органов дыхания. JL, 1979. - С. 92-93.

90. Осадчук М.А. Гликопротеиды, мукопротепды, и метаболиты коллагена в оценке эволюции воспалительного и склеротического процесса в легких при острых и хронических пневмониях: Автореф. дисс. . канд. мед. наук. -Куйбышев, 1975. -21 с.

91. Осипов А.Н., Азизова Ю.А., Владимиров Ю.А. Активные формы кислорода и их роль в организме // Успехи биол. химии. 1990. - Т. 31, № 2. -С.180-208.

92. Островский А.Д., Курбанов Х.Ч., Выдумкина С.П. Активность сывороточного лизоцима при хронической пневмонии у детей // Особенности клиники и лечения неспецифических заболеваний легких у детей. Л., 1977. - С. 53-57.

93. Пахмутов В.М., Балковой И.И., Бабешсо Ю.В. и др. Сведения о незаразных болезнях сельскохозяйтвенных животных в субъектах Российской Федерации в 2005 г. // Вет. консультант. -2006. № 6 (121) - С. 3-7.

94. Петров К.И. О взаимосвязи некоторых биохимических показателей с состоянием функции и структуры легких // Метаболизм легких при неспецифических заболеваниях органов дыхания. Л., 1979. - С. 49-55.

95. Поберезкина Н.Б., Осинская Л.Ф. Биологическая роль супероксиддис-мутазы // Укр. биохим. журн. 1989. - Т. 61, № 2. - С. 14-27.

96. Пронин Н.И. Особенности метаболизма перекисей липидов при ток-сикосептической форме пневмонии у детей раннего возраста // Метаболизм легких при неспецифических заболеваниях органов дыхания. Л., 1979. - С. 7980.

97. Пудова К.В. Спектр адениловых нуклеотидов в крови и аденилатцик-лаза эритроцитов у новорожденных детей с заболеваниями органов дыхания: Автореф. дисс. . канд. биол. наук. Горький, 1974. - 18 с.

98. Реутов В.П., Орлов С.Н. Физиологическое значение гуанилатциклазы и роль окиси азота и нитросоединений в регуляции активности этого фермента // Физиология человека. 1993. - Т. 19., № 1. - С. 124-135.

99. Реутов В.П., Сорокина Е.Г., Охотин В.Е. и др. Циклические превращения оксида азота в организме млекопитающих. М.: Наука, 1998. - 156 с.

100. Рецкий М.И., Бузлама B.C., Шахов А.Г. Значение антиокепдантного статуса в адаптивной гетерогенности и иммунологической резистентности животных // Ветеринарная патология. 2003. - № 2. - С. 63-65.

101. Рецкий М.И., Шахов А.Г., Золотарев А.И. и др. Роль кислотно-основного состояния в формировании колострального иммунитета у новоролсденных телят // Вестник Россельхозакадемии. 2005. - № 3. - С. 69-71.

102. Ровкина Е.И. Сравнительная характеристика маркеров воспаления дыхательных путей у больных бронхиальной астмой: Автореф. дисс. . канд. мед. наук. СПб., 2007. - 15 с.

103. Романова JI.K. Особенности секреции альвеолярного сурфактанта в интактном и регенерирующем легком крыс при действии колхицина // Бюл. экспер. биол. 1980. - Т. 89, № 7. - С. 21-25.

104. Романова JI.K. Особенности ультраструктурной организации сурфак-гантноп системы легкого в норме и при действии некоторых патогенных факторов // Вестник АМН ССР. 1983. - № 11. - С. 44-53.

105. Семенов B.JI. Перекисное окисление липидов как механизм биоэнергетической регуляции при воспалении органов дыхания // Патол. физиол. и экс-перим. терапия. 1989. - № 2. - С. 17-20.

106. Серая И.П., Нарциссов Я.Р. Современные представления о биологической роли оксида азота // Успехи совр. биологии. 2002. - Т. 122, № 3. - С. 249-258.

107. Сидоренко Г.И., Зборовский Э.И., Левина Д.И. Поверхностно-активные свойства конденсата выдыхаемого воздуха (новый способ исследования функций легких) // Тер. арх. 1980. - № 3. - С. 65-68.

108. Симбирцев С.А., Беляков Н.А., Малахова М.Я. и др. Участие легких в поглощении молекул средней массы из крови // Пат. физиол. и эксперим. терап. 1987. - № 3. - С. 70-72.

109. Сирота Т.В. Новый подход в исследовании процесса аутоокисления адреналина и использование его для измерения активности супероксиддисмута-зы // Вопр. мед. химии. 1999. - Т. 45, № 3. - С. 263-272.

110. Скулачев В.П. НгСЬ-сенсоры легких и кровеносных сосудов и их роль в антиоксидантной защите организма // Пульмонология. — 2001. — № 2. — С. 6-8.

111. Сноз Г.В. Исследование дыхательной системы // Клиническая диагностика с рентгенологией / Е.С. Воронин, Г.В. Сноз, М.В. Васильев и др.; Под ред. Е.С. Воронина. М.: «КолосС», 2006. - С. 176-221.

112. Соляник Е.В. Эпидемиологическая и функционально-метаболическая характеристика хронического бронхита и его преморбидных форм на судоремонтном предприятии: Автореф. дисс. . канд. мед. наук. Владивосток, 1996. -24 с.

113. Сосунов А.А. Оксид азота как межклеточный посредник // Соро-совский образовательный журнал. 2000. - Т. 6, № 12. - С. 27-34.

114. Стальная И.Д., Гаришвили Т.Г. Метод определения малонового диальдегида с помощью 2-тиобарбитуровой кислоты // Современные методы в биохимии. М., 1977. - С. 66-68.

115. Суровикина М.С. Кининовая система при патологических процессах // Кинины и кининовая система крови. М., 1978. — С. 21-33.

116. Сыромятникова Н.В. Биохимическая природа легочного сурфактанта // Сурфактанты легкого в норме и при патологии. М., 1983. - С. 38-44.

117. Сыромятникова Н.В. Современные представления о значении биохимических исследований у пульмонологических больных // Актуальные проблемы пульмонологии. Л., 1982. - С. 112-123.

118. Сыромятникова Н.В., Гончарова В.А., Котенко Т.В. Метаболическая активность легких. Л.: Наука, 1987. - 85 с.

119. Сыромятникова Н.В., Кочегура T.J1. Клпншсо-биохимические сопоставления у больных с неспецифическими заболеваниями органов дыхания // Тер. арх. 1980. -№> 7. - С. 36-37.

120. Сыромятникова Н.В., Кочегура T.J1. Методика интегральной биохимической оценки активности воспалительного процесса в легких // Проблемы пульмонологии, вып. 8. J1., 1980. - С. 233-238.

121. Сыромятникова Н.В., Страшилина О.А. Исследование биохимических и реологических свойств мокроты в динамике легочной патологии // Вопросы лабораторной диагностики. — Минск, 1981. С. 52-53.

122. Сюрин В.Н., Самуйленко А .Я., Соловьев Б.В. и др. Вирусные болезни животных. М: ВНИТИБП, 1998. - 928 с.

123. Таганович А.Д. Исследование сурфактантной системы легких с помощью биохимических методов // Пульмонология. 1996. — № 1. - С. 45-50.

124. Тогайбаев А.А., Кургузкин А.В., Рикун И.В. и др. Способ диагностики эндогенной интоксикации // Лаб. дело 1988. - № 9. - С. 22-24.

125. Федорова Л.М., Аверьянов П.Ф. Состояние сурфактантной системы легкого при острых пневмониях у детей // Всесоюзный конгресс по болезням органов дыхания, 1-й. Киев. - 1990. - № 885.

126. Фукс П.П. Вирусно-микоплазменная патология генитальных и респираторных органов крупного рогатого скота (этиология, патогенез, диагностика): Автореф. дпсс. . докт. вет. наук. Казань, 1990. - 38 с.

127. Хазипов Н.З., Гаффаров К.З., Халдагаев Р.Г. Хламидиозы крупного рогатого скота и меры борьбы с ними. Казань: Таткнигонздат, 1980. - 223 с.

128. Харитонов С.А., Барнс П.Дж., Чучалин А.Г. Окись азота (NO) в выдыхаемом воздухе: новый тест в пульмонологии // Пульмонология. 1997. - № З.-С. 7-12.

129. Хасина М.А., Двинская С.А., Белоглазова С.И. и др. Конденсат паров выдыхаемого воздуха в оценке степени нарушения метаболизма бронхоле-гочной системы при неспецифических заболеваниях легких // Клин. лаб. диагн. -2004.-№5.-С. 15-17.

130. Хасина М.Ю. Минеральный обмен легких в условиях нормы и острого воспаления: Автореф. дис. . канд. мед. наук. Владивосток, 2004. - 18 с.

131. Хышиктуев Б.С. Метаболизм липидов и процессы пероксидации при хронических неспецифических заболеваниях легких: Автореф. дисс. . канд. мед. наук. Челябинск, 1990. - 17 с.

132. Хышиктуев Б.С., Хышиктуева Н.А., Иванов В.Н. Методы определения продуктов перекисного окисления липидов в конденсате выдыхаемого воздуха и их клиническое значение // Клин. лаб. диагн. 1996. - № 3. - С. 13-15.

133. Цветкова М.М. Факторы риска и прогнозирование развития респираторной патологии у юношей-подростков: Автореф. дисс. . канд. мед. наук. -Хабаровск, 2007. 24 с.

134. Шагидевич Э.А. Состояние и перспективы изучения пастереллезов с.-х. животных // Труды ВИЭВ. 1984. - Т. 60. - С. 58-63.

135. Шахов А.Г., Ануфриев А.И., Сулейманов С.М. и др. Респираторные болезни телят // Комплексная экологически безопасная система ветеринарной защиты здоровья животных. М.: ФГНУ «Росинформагротех», 2000. - С. 163186.

136. Ширинский И.В., Ширинский B.C., Козлов В.А. Влияние гормона эпифиза мелатонина на иммуносупрессию, вызванную глюкокортикоидами in vitro // Эксперим. и клинич. фармакол. 2005. - Т. 68, № 1. - С. 45-47.

137. Эколого-адаптацпонная стратегия защиты здоровья и продуктивности животных в современных условиях / Отв. ред. Шахов А.Г. Воронеж: Воронежский государственный университет, 2001. - 207 с.

138. Яковлева О.А. Диагностические возможности изучения конденсата выдыхаемого воздуха // Тер. арх. 1990. - № 3. - С. 102-107.

139. Adnot S., Raffestin В., Eddahibi S. et al. Loss of endothelium-dependent relaxant activity in the pulmonary circulation of rats exposed to chronic hypoxia // J. Clin. Invest. 1991.-Vol. 87.-P. 155-162.

140. Adnot S., Raffestin В., Eddahibi S. NO in the lung // Respir. Physiol. -1995.-Vol. 101.-P. 109-120.

141. Albina J.E., Caldwell M.D., Henry Jr.W.L. et al. Regulation of macrophage functions by L-arginine // J. Exp. Med. 1989. - Vol. 169. - P. 1021-1029.

142. Albina J.E., Cui S., Mateo R.B. et al. Nitric oxide- medicated apoptosis in murine peritoneal macrophages // J. Immunol. 1993. - Vol. 150. - P. 5080-5085.

143. Allen R.C., Loose L.D. Phagocytic activation of luminol-dependent chcmiluminescence in rabbit alveolar and peritoneal macrophages // Biochem. and Biophys. Res. Commun. 1976. - Vol. 69. - P. 245-252.

144. Alpert S.E., Kramer C.M., Hayes M.M. et al. Morphologic injury and lipid peroxidation in monolayer cultures of rabbit tracheal epithelium exposed in vitro to ozone // J. Toxicol. Environ. Health. 1990. - Vol. 30. - P. 287-304.

145. Antczak A., Kharitonov S.A., Montuschi P. et al. Inflammatory response to sputum induction measured by exhaled markers // Respiration. 2005. - Vol. 72. -P. 594-599.

146. Antczak A., Nowak D., Shariati B. et al. Increased hydrogen peroxide and thiobarbituric acid-reactive products in expired breath condensate of asthmatic patients // Eur. Respir. J. 1997. - Vol. 10. - P. 1235-1241.

147. Archer S.J., Tolins L.R., Weir E. Hypoxic pulmonary vasoconstriction in enhanced by inhibition of the synthesis of an endothelium-dcrived relaxing factor // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1989. - Vol. 164. - P. 1198-1205.

148. Asano К., Chee С.В., Gaston В. et al. Constitutive and inducible nitric oxide synthase gene expression, regulation, and activity in human lung epithelial cells // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1994. - Vol. 91. - P. 10089-10093.

149. Bannenberg G., Kimland M., Ryrfeldt A. et al. Hydrogen peroxide-induced broncho- and vasoconstriction in the isolated perfused and ventilated guinea pig lung // Pharmacol. Toxicol. 1993. - Vol. 72, № 4-5. - P. 314-320.

150. Barnard J.W., Wilson P.S., Moore T.M. et al. Effect of nitric oxide and cyclooxygenase products on vascular resistance in dog and rat lungs // J. Appl. Physiol. 1993. - Vol. 74. - P. 2940-2948.

151. Barnes P.J. Reactive oxygen species and airway inflammation // Free Radical Biol, and Med. 1990. - Vol. 9. - P. 235-243.

152. Barnes P.J. Airway epithelial receptors // Eur. Respir. Rev. 1994. -Vol. 4.-P. 371 -379.

153. Barnes P.J. Nitric oxide and asthma // Res. Immunol. 1995. - Vol. 146. - P. 698-702.

154. Barutussio A. Antioxidant defenses of rabbit alveolar lining fluid // Lung and Respir. 1988.-Vol. 5.-P. 11-12.

155. Bassoulet C., Lonchampt M., Canet E. Differential immunolocalization of type 1, II, III nitric oxide synthase isoforms in murine lung epithelium // Eur. Respir. J. 1996. - Vol. 9. - P. 23-124.

156. Baynes J.W. Role of oxidative stress in development of complications in diabetes mellitus // Diabetes. 1991. - Vol. - 40. - P. 405-412.

157. Becher G., Winsel K., Beck E. et al. Breath condensate as a method of noninvasive assessment of inflammation mediators from the lower airways // Pneu-mologie. 1997. - Vol. 51. - P. 456-459.

158. Belik J. Myogenic response in large pulmonary-arteries and its ontogeny // Pediatric Res. 1994. - Vol. 36. - P. 34-40.

159. Belvisi M.G., Barnes P.J., Larkin S. et al. Nitric oxide synthase activity is elevated in inflammatory lung diseases // Eur. J. Pharmacol. 1995. - Vol. 283. -P. 255-258.

160. Benson В. Surfactant proteins // Appl. Cardiopulm. Pathophysiol. -1995.-Vol. 5.-P. 37-38.

161. Berg J.T., Smith R.M. Endotoxin protection of rats from O2 toxicity: chemiluminescence of lung neutrophils // Res. Commun. Chem. Pathol. Pharmacol. -1984. Vol. 44. - P. 461-476.

162. Bernhard W., Haagsman H.P., Tschernig T. et al. Conductive airway surfactant: surface-tension function, biochemical composition, and possible alveolar origin // Am. J. Respir. Cell. Mol. Biol. 1997. - Vol. 17. - P. 41-50.

163. Bcsser Т.Е., Szenci O., Gay C.C. Decreased colostral immunoglobulin absorption in calves with postnatal respiratory acidaosis // J. Amer. Vet. Med. Assoc. 1990.-V. 196, №8. -P. 1239-1243.

164. Bitterman P.В., Salzman L.E., Adelberg S. et al. Alveolar macrophage replication: one mechanism for the expansion of the mononuclear phagocyte population in the chronically inflamed lung // J. Clin. Invest. 1984. - Vol. 74. - P. 460469.

165. Blake D.R., Allen R.E., Lunec J. Free radicals in biological system a review orientated to inflammatory processes // Brit. Med. Bull. - 1987. - Vol. 43. -P. 371-385.

166. Block E.R., Herrera H., Couch M. Hypoxia inhibits L-arginin uptake by pulmonary-artery endothelial-cells // Amer. J. Physiol. Lung Cell. Mol. Physiol. -1995.-Vol. 13.-P. L574-L580.

167. Borland C., Cox Y., Higenbottam T. Measurement of exhaled nitric oxide in man // Thorax. 1993. - Vol. 48. - P. 1160-1162.

168. Brooks M.M. Activation of eggs by oxidation-reduction indicatirs // Science. 1947. - Vol. 106. - P. 320.

169. Bulkley G.B. Free radicals and other reactive oxygen metabolites: Clinical relevance and the therapeutic efficacy of antioxidant therapy // Sugery. 1993. -Vol. 113.-P. 479-483.

170. Burnett D., Path M.R.C., Chamba A. Neutrophils from subjects with chronic obstructive lung disease show enhanced chemotaxis and extracellular proteolysis//Lancet. 1987. - Vol. 11.-P. 1043-1047.

171. Butler A.R., Rhodes P. Chemistry, analysis, and biological roles of S-ni-trosothiols // Analytycal biochemistry. 1997. - Vol. 249. - P. 1-9.

172. Cantin A.M., North S.L., Hubbard R.C. et al. Normal alveolar epithelial lining fluid contains high levels of glutathione // J. Appl. Physiol. 1987. - Vol. 63. -P. 152-157.

173. Celermajer D.S., Dollery C., Burch M. et al. Role of endothelium in the maintenance of low pulmonary vascular tone in normal-children // Circulation. -1994.-Vol. 89, №5.-P. 2041-2044.

174. Cerutti P.A., Trump B.F. Inflammation and oxidative stress in carcinogenesis//Cancer Cells. 1991.-Vol.3.-P. 1-7.

175. Cervin A., Onnerfalt J., Edvinsson L. et al. Functional effects of neuropeptide Y receptors on blood flow and nitric oxide levels in the human nose // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 1999. - Vol. 160. - Vol. 1724-1728.

176. Chakraborti S., Gurtner G.H., Michael J.R. Oxidant-mediatcd activation of phospholipase A2 in pulmonary endothelium // Amer. J. Physiol. 1989. - Vol. 257.-P. 430-437.

177. Chan W. Cellular interactions of vitamin E, cytokines and growth factors //Nutr. Res. 1996. - Vol. 16. - P. 427-434.

178. Chanez P., Dent G., Yukawa T. et al. Generation of oxygen free radicals from blood eosinophils from asthma patients after stimulation with PAF of phorbol esters //Eur. Respire. Dis. 1990. - Vol. 3. - P. 1002-1007.

179. Chartrain N.A., Geller D.A., Koty P.P. et al. Molccularcloning, structure, and chromosomal localization of the human inducible nitric oxide synthase gene// J. Biol. Chem. 1994. - Vol. 269. - P. 6765-6772.

180. Church D.F., Pryor W.A. Frcc-radical chemistry of cigarette smoke and its toxicological implications // Environ. Health Perspect. 1985. - Vol. 64. - p. 111-126.

181. Churg A., Cherukupalli K. Sigarette smoke causes lipid peroxidation of rat tracheal epithelium // Int. J. Exp. Pathol. 1993. - Vol. 74. - P. 127-132.

182. Clement M.G., Dimori M. Inhaled nitric oxide counter balances Etl dependent pulmonary hypertension and bronchoconstriction in the pig // Mediat. In-flam. 1994. - Vol. 3. - P. 131-135.

183. Clements J.A. Surface tension of lung extracts // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1957. - Vol. 95. - P. 170-172.

184. Cohen A.B., Rossi M., Gescy D. et al. Neutrophil turnover in normal rabbit lungs // J. Clin. Invest. 1982. - Vol. 69. - P. 794-798.

185. Corradin S.B., Fasel N., Buchmuller-Rouiller Y. et al. Induction of macrophage nitric oxide production by interferon-y and tumor necrosis factor-a is enhanced by interieukin-10 // Eur. J. Immunol. 1993. - Vol. 23. - P. 2045-2048.

186. Cremona G., Higenbottam T.W., Takao M. et al. Exhaled nitric oxide in isolated pig lungs // J. Appl. Physiol. 1995. - Vol. 78. - P. 59-63.

187. Cross C.T., Van der Vliet A., O'Neill C.A. et al. Oxidants, antioxidants, and respiratory tract lining fluids // Environ. Health Perspect. 1994. - Vol. 102 - P. 185-191.

188. Curzio M. Interaction between neutrophils and 4-hydroxyalkenals and consequences on neutrophil motility // Free Radical Res. Commun. 1988. - Vol. 5. - P. 55-66.

189. Curzio M., Esterbauer H., Poli G. et al. Possible role of aldehydic lipid peroxidation products as chemoattractants // Int. J. Tissue React. 1987. - Vol. 9. -P. 295-306.

190. D'Orleans-Juste P., Wood E.G., Mitchell J.A. et al. Endothelin, EDRF and prostacyclin are released from bovine venous as well artherial endothelial cells // Brit. J. Pharmacol. 1990. - Vol. 99. - P. 100-104.

191. Dargaville P.A., McDougall P.N., South M. Surfactant abnormalities in severe viral bronchiolitis // Appl. Cardiopulm. Pathophysiol. 1995. - Vol. 5. - P. 20-23.

192. Davidge S.T., Baker P.N., McLaughlin M.K. et al. Nitric oxide produced by endothelial cells increases production of eicosanoids through activation of prostaglandin H synthase // Circ. Res. 1995. - Vol. 77. - P. 274-283.

193. De Mey S.J., Vanhoute P.M. Anoxia and endothelium-dependent reactivity of the canine femoral artery // J. Physiol. 1983. - Vol. 335. - P. 65-74.

194. De Sanctis G.T., MacLean J.A., Hamada K. et al. Contribution of nitric oxide synthases 1 > 2 and 3 to airway hyperresponsiveness and inflammation in murine model of asthma // J. Exp. Med. 1999. - Vol. 189. - P. 1621-1630.

195. Di Mauro C., Cavalli G., Amprimo M.C. et al. Influence of 4-hydroxyn-onenal on chemiluminescence production by unstimulatid and opsonized zymosan-stimulated human neutrophils // Cell Biochem. and Function. 1990. - Vol. 8. - P. 147-155.

196. Dianzani C., Parrini M., Ferrara C. et al. Effect of 4-hydroxynonenal on superoxide anion production from primed human neutrophils // Cell Biochem. and Function. 1996. - Vol. 14. - P. 193-200.

197. Dimori M., Albertini M., Aggugini G. et al. The endothelin-1-dependent bronchoconstriction is differently counterbalanced by prostanoids and nitric oxide (NO) // Eur. Respir. J. 1996. - Vol. 5. - P. 757-762.

198. Dinh-Xuan A.T. Endothelial modulation of pulmonary vascular tone // Eur. Res. J. 1992. - Vol. 5. - P. 757-762.

199. Dinh-Xuan A.T. Role of nitric oxide in cardiovascular and respiratory physiopathology // Arch. Intern. Physiol. Biochem. Biophys. 1994. - Vol. 102., № 4. - P. A3-A9.

200. Dinh-Xuan A.T., Cremona G., Higenbottam T.W. Endothelial disfunction and remodelling of the circulation in chronic hypoxic pulmonary-hypertension // Appl. Cardiopulmonary Pathophysiol. 1994. - Vol. 5. - P. 93-99.

201. Donaldson K., Slight J., Bolton R.E. The effect of products from bron-choalveolar-derived neutrophils on oxidant production and phagocytic activity of alveolar macrophages // Clin. Exp. Immunol. 1988. - Vol. 74. - P. 477-482.

202. Draper H.H., Squires E.J., Mahmoodi H. et al. A comparative evaluation of thiobarbituric acid for the determination of malondialdehyde in biological materials // Free Radical Biol, and Med. 1993. - Vol. 15. - P. 353-364.

203. Duan X., Pinkerton K., Plopper C. Increase of antioxidant enzymes in target sites within the lung following long-term ozone exposure // Amer. Rev. Respir. Dis. 1993. - Vol. 147. - A441.

204. Durieu-Trautmann O., Federici C., Creminon C. et al. Nitric oxide and endothelin secretion by brain micro vessel endothelial cells: Regulation by cyclic nucleotides Hi. Cell Physiol. 1993.-Vol. 155.-P. 104-111.

205. Dworski R., Murray J.J., Jacksonroberts L. et al. Allergen-induced synthesis of F2-isoprostanes in atopic asthmatics. Evidence for oxidant stress // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 1999. - Vol. 160. - P. 1947-1951.

206. Eddahibi S., Adnot S., Carvill C. et al. L-arginin restores endothelium-dependent relaxation in pulmonary circulation of chronically hypoxic rats // Amer. J. Physiol. 1992. - Vol. 236. - P. L196-L200.

207. Edwards S.W., Hallett M.B., Campbell A.K. Oxygen-radical production during inflammation may be limited by oxygen concentration // Biochem. J. 1984. -Vol. 217.-P. 851 -854.

208. Engstrom P., Easterling L., Baker R. et al. Mechanisms of extracellular hydrogen peroxide clearance by alveolar type II pneumocytes // J. Appl. Physiol. -1990. Vol. 69. - P.2078-2084.

209. Engstrom P., Easterling L., Baker R. et al. Mechanisms of extracellular hydrogen peroxide clearance by alveolar type II pneumocytes // J. Appl. Physiol. -1990. Vol. 69. - P.2078-2084.

210. Erel O. A novel automated method to measure total antioxidant response against potent free radical reactions // Clin. Biochem. 2004. - Vol. 37. - P. 112119.

211. Esterline R., Trush M.A. Lucigenin chemiluminescence and its relationship to mitochondrial respiration in phagocytic cells // Biochem. and Biophys. Res. Commun. 1989. - Vol. 159. - P. 584-591.

212. Pagan K.A., Tyler R.C., Sato K. et al. Relative contributions of endothelial, inducible, and neuronal NOS to tone in the murine pulmonary circulation // J. Biol. Chem. 1999. - Vol. 277. - P. 472-478.

213. Feelisch M., Rassaf Т., Mnaimneh S. et al. Concomitant S-, N-, and heme-nitros(yl)ation in biological tissues and fluids: implications for the fate of NO in vivo // FASEB J. 2002. - Vol. 16, № 13.-P. 1775-1785.

214. Ferre P., Williamson D.H. Evidence for the participation of aspartate aminotransferase in hepatic glucose synthesis in the suckling newborn rat // Biochem. J. 1978. - Vol. 176, № 1. - P. 335-338.

215. Fischer A., Mayer В., Rummer W. Nitric-oxide synthase in vagal sensory and sympathetic neurons innervating the guinea-pig trachea // J. Aut. Nerv. System. 1996. - Vol. 56. - P. 157-160.

216. Fisher A.B., Dodia C. Roles of phospholipase Аг enzymes in synthesis and degradation of lung dipalmitylphosphatidylcholine // Appl. Cardiopulm. Patho-physiol. 1995. - Vol. 5. - P. 29-30.

217. Folkerts G., Engels F., Nijkamp F.P. Endotoxin-induced hyperreactivity of the guinea-pig isolated trachea cincides with decreased prostaglandin Ег production by the epithelial layer // Brit. J. Pharm. 1989. - Vol. 96. - P. 388-394.

218. Forman H.J. Oxidant radical production and lung injury // Oxygen Radicals: Systemic Events and Disease Processes. Basel: Karger, 1990. - P. 71-96.

219. Formanek W., Inci D., Laurener R.P. ct al. Elevated nitrite in breath condensates of children with respiratory disease // Eur. Respir. J. 2002. - Vol. 19. - P. 487-491.

220. Frank S., Zacharowski K., Wray G.M. et al. Identification of copper/zinc superoxide dismutase as a novel nitric oxide-regulated gene in rat glomerular mes-angial cells and kineys of endotoxemic rats // FASEB J. 1999. - Vol. 13. - P. 869882.

221. Fukuda N., Jayr C., Lazrak A. et al. Mechanisms of TNF-alpha stimulation of amiloride-sensitive sodium transport across alveolar epithelium // Am. J. Physiol. Lung. Cell. Mol. 2001. - Vol. 280, № 6. - P. L1258-L1265.

222. Furukawa K., Harrison D.J., Salen D. et al. Expression of nitric oxide synthase in human nasal mucosa // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 1996. - Vol. 153. - P. 847-850.

223. Gaily J.A., Montague P.R., Reeke G.N. et al. The NO hypothesis: possible effects of a short-lived, rapidly diffusible signal in the development and function of the nervous system // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1990. - Vol. 87. - P. 35473551.

224. Gard V.C., Hassid A. Nitric oxide-generating vasodilators and 8-bromo-cyclic guanosinemonophosphate inhibit mitogenesis and proliferation of cultured rat vascular smooth muscle cells // J. Clin. Invest. 1989. - Vol. 83. - P. 1774-1777.

225. Garvey E.P., Oplinger J.A., Furfme E.S. et al. 1400W is a slow, tight binding, and highly selective inhibitor of inducible nitric-oxide synthase in vitro and in vivo // J. Biol. Chem. 1997. - Vol. 272, № 8. - P. 4959-4963.

226. Gaston В., Drazen J.M., Loscalzo J. et al. The biology of nitrogen oxides in the airways // Amer. J. Respir. Crit. Care Med. 1994. - Vol. 149. - P. 538-551.

227. Gaston В., Sears S., Woods J. et al. Bronchodilator S-nitrosothiol deficiency in asthmatic respiratory failure // Lancet. 1998. - Vol. 351. - P. 1317-1319.

228. Geertsma M.F., Broos H.R., Van den Barselaar M.T. et al. Lung surfactant suppresses oxygen-dependent bactericidal functions of human blood monocytesby inhibiting the assembly of the NADPH oxidase // J. Immunol. 1993. - Vol. 150. -P. 2391-2400.

229. Gerlach H., Rossaint R., Pappert D. et al. Autoinhalation of nitric oxide after endogenous synthesis in nasopharynx // Lancet. 1994. - Vol. 343. - P. 518519.

230. Gessner C., Kuhn H., Seyfarth I I.J. et al. Factors influencing breath condensate volume // Pneumologie. 2001. - Vol. 55, № 9. - P. 414-419.

231. Giaid A., Maghazachi A., Stewart D. et al. Nitric oxide synthase and en-dothelin-1 activities in lung of patients with pulmonary hypertension // Europ. Respir. J. 1994.-Vol. 7.-P. 219-221.

232. Gilmour N.J. The role pasteurella in respiratory disease of cattle // Ed. by W.B. Martin Boston. London, 1978. - Vol. 3. - P. 356-362.

233. Glasscr S.W., Korfhagen T.R., Wert S.E. et al. Transgenic models for study of pulmonary development and disease // Am. J. Physiol. 1994. - Vol. 267. -P. L489-L497.

234. Grasemann H., Michler E., Wallot M. et al. Decreased concentration of exhaled nitric oxide (NO) in patients with cystic fibrosis // Pediatric Pulmonol. -1997.-Vol. 24.-P. 173-177.

235. Greening A.P., Lowric D.B. Extracellular release of hydrogen peroxide by human alveolar macrophages: The relationship to cigarette smoking and lower respiratory tract infections // Clin. Sci. 1983. - Vol. 65. - P. 661-664.

236. Grisham M.B., Von Ritter C., Smith B.F. ct al. Interaction between oxygen radicals and gastric mucin // Amer. J. Pysiol. 1987. - Vol. 252. - P. 93-96/

237. Groves J.T. Peroxynitrite: reactive, invasive and enigmatic // Curr. Opin. Chem. Biol. 1999. - Vol. 3, № 2. - P. 226-235.

238. Guo F.H., Comhair S.A., Zheng S. et al. Molecular mechanisms of increased nitric oxide (NO) in asthma: evidence for transcriptional and post-translation-al regulation of NO synthesis // J. Immunol. -2000. Vol. 164. - P. 5970-5980.

239. Gustafsson L.E., Leone A.M., Persson M.G. et al. Endogenous nitric oxide is present in the exhaled air of rabbits, guinea-pigs and humans // Biochem. Bio-phys. Res. Commun. 1991. - Vol. 181. - P. 852-857.

240. Gutzwiller A., Blum J.W. Effects of oral lactose and xylose loads on blood glucose, galactose, xylose, and insulin values in healthy calves and calves with diarrhea // Am. J. Vet. Res. 1996. - Vol. 57, № 4. - P. 560-563.

241. Haagsman H.P. Structural and functional aspects of the collectin SP-A // Immunobiology. 2002. - Vol. 205. - P. 476-489.

242. Haagsman H.P. Structural and functional aspects of the collectin SP-A // Immunobiology. 2002. - Vol. 205. - P. 476^189.

243. Haagsman H.P., Diemel R.V. Surfactant-associated proteins: functions and structural variation // Сотр. Biochem. Physiol. A. Mol. Integr. Physiol. 2001. -Vol. 129.-P. 91-108.

244. Hachida M., Koynagi H. Increasing surfactant and protein contents in alveolar lumen after lung preservation // J. Jap. Assoc. Thorac. Surg. 1990. - Vol. 38, № 9. - P. 30-34.

245. Halbower A.C., Tuder R.M., Franklin W.A. et al. Maturation-related changes in endothelial nitric-oxide synthase immunilocalzation in developing bovine lung // Amer. J. Physiol. Lung Cell. Mol. Physiol. - 1994. - Vol. 11. - P. L585-L591.

246. Halliwcll B. Reactive oxygen species in living systems: Source, biochemistry, and role in human disease // Amer. J. Med. 1991. - Vol. 91. - P. 14-22.

247. Hamid Q., Springall D.R., Riveros-Moreno V. et al. Induction of nitric oxide synthase in asthma // Lancet. 1993. - Vol. 342. - P. 1510-1513.

248. Hammerschmidt D.E., Jacob H.S. The stimulated granulocyte as a source of toxic oxygen compounds in tissue injury // Pathology of Oxygen. L.: Acad. Press., 1982. - P. 59-73.

249. Hampl V., Archer S.L., Nelson D.P. et al. Chronic EDRF inhibition and hypoxia: Effects on pulmonary circulation and systemic blood presure // J. Appl. Physiol. 1993. - Vol. 75. - P. 1748-1775.

250. Hampl V., Cornfield D.N., Cowan N.J. Hypoxia potentiates nitric oxide synthesis and transiently increases cytosolic calcium levels in pulmonary artery endothelial cells // Europ. Respir. J. 1995. - Vol. 8. - P. 515-522.

251. Hanazawa Т., Kharitonov S.A., Oldfield W. et al. Nitrotyrosine and cystenyl leukotrienes in breath condensates are increased after withdrawal of steroid treatment in patients with asthma // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2000. - Vol. 161.-P. A919.

252. Hasunuma K.M., Yamaguchi D.M., Rodman R.F. et al. Effects of inhibitors of EDRF and EDHF on vasoreactivity of perfused rat lungs // Amer. J. Physiol. 1991. - Vol. 260. - P. L97-L104.

253. Hay D.P., Muccitelli R.M., Page C.P. ct al. Correlation between airway epithelium-induced relaxation of rat aorta in the co-axial bioassay and cyclic nucleotide levels // Brit. J. Pharm. 1992. - Vol. 105. - P. 954-958.

254. Hickey M.J., Granger D.N., Kubes P. Inducible nitric oxide synthase (iNOS) and regulation of leucocyte/endothelial cell interactions: studies in iNOS-de-ficient mice // Acta Physiol. Scand. 2001. - Vol. 173. - P. 119-126.

255. Hills B.A., Bulter B.D., Drake R.E. Surfactant identified in lung lymph and their ability to act as abhesives // J. Appl. Physiol. 1985. - Vol. 58, № 2. - P. 514-520.

256. Hislop A.A., Springall D.R., Buttery L.D.IC. et al. Abundance of endothelial nitric-oxide synthase in newborn intrapulmonary arteries // Arch. Dis. Childhood. 1995. - Vol. 73.-P. 17-21.

257. Ho L.P., Innes J.A., Greening A.P. Nitrite levels in breath condensate of patients with cystic fibrosis is elevated in contrast to exhaled nitric oxide // Thorax. -1998. Vol. 53, № 8.-P. 680-684.

258. Hogg N., Kalyanaraman B. Nitric oxide and lipid peroxidation // Biochim. Biophys. Acta. 1999. - Vol. 1411, № 2-3. - P. 378-384.

259. Hohlfeid J., Tshom H., Tiryaki E. et al. Surfactant protein A (SP-A) alterations in bronchoalveolar lavage of lung transplantant patients // Appl. Cardiop-ulm. Pathophysiol. 1995. - Vol. 5. - P. 59-61.

260. Holm B.A., Keicher L., Liu M. et al. Inhibition of pulmonary surfactant function by phospholipases //J. Appl. Physiol. 1991. - Vol. 71, № 1. - P. 317-321.

261. Horowitz A.D., Moussavian В., Whitsett J.A. Roles of SP-A, SP-B, and SP-C in modulation of lipid uptake by pulmonary epithelial cells in vitro // Am. J. Physiol. 1996. - Vol. 270. - P. L69-L79.

262. Horvath I., Donnelly L.E., Kiss A. et al. Combined use of exhaled hydrogen peroxide and nitric oxide in monitoring asthma // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 1998.-Vol. 158.-P. 1042-1046.

263. Horwarth P.H., Redington A.E., Springall D.R. Epithelially derived en-dothelin and nitric oxide in asthma // Intern. Arch. Allergy Immun. 1995. - Vol. 107.-P. 228-230.

264. Huie R.E., Padmaja S. The reaction of NO with superoxide // Free Radic. Res. Commun. 1993.-Vol. 18. - P. 195-199.

265. Hunt J. Breath condensate: an evolving tool for noninvasive evaluation of lung disease // J. Allergy Clin. Immunol. 2002. - Vol. 110. - P. 28-34.

266. Hunt J., Byrns R.E., Ignarro L.J. et al. Condensed expirate nitrite as a home marker for acute asthma // Lancet. 1995. - Vol. 346. - P. 1235-1236.

267. Ischiropoulos H., Zhu L., Beckman J.S. Peroxynitrite formation from macrophage-derived nitric oxide // Arch. Biochem. Biophys. 1992. - Vol. 298. - P. 446-451.

268. Jates G.J. Infection between viruses and bacteria in bovine respiratory disease // Canad. Vet. J. 1984. - Vol. 25, № 1. - P. 37-41.

269. Jubsis Q., Raatgeep H.C., Schellekens S.L. et al. Hydrogen peroxide in exhaled air of healthy children: reference values // Eur. Respir. J. 1998. - Vol. 12. -P. 483-485.

270. Kamosinska В., Radomski A., Man S.F. et al. Role of inducible nitric-oxide synthase in regulation of whole-cell current in lung epithelial cells // J. Pharmacol. Exp. Ther. 2000. - Vol. 295. - P. 500 - 505.

271. Kane D.W., Tesauro Т., Koizumi Т. et al. Excrcise-induced pulmonary vasoconstriction during combined blockade of nitric-oxide synthase and beta-adrenergic receptors // J. Clin. Invest. 1994. - Vol. 93. - P. 677-683.

272. Kasahara Y., Iwai K., Yachie A. et al. Involvement of reactive oxygen intermediates in spontaneous and CD95(fas/APO-l)-mediated apoptosis of neutrophils // Blood. 1997. - Vol. 89. - P. 1748-1753.

273. Kasielski M., Nowak D. Long-term administration of N-acetylcysteine decreases hydrogen peroxide exhalation in subjects with chronic obstructive pulmonary disease // Respir. Med. 2001. - Vol. 95, № 6. -P. 448-456.

274. Kawamoto H., Takumida M., Takeno S. et al. Localization of nitric oxide synthase in human nasal mucosa with nasal allergy // Acta. Otolaryngol. Suppl. (Stockh.). 1998. - Vol. 539. - P. 65-70.

275. Kharitonov S.A., Barnes P.J. Exhaled Markers of Pulmonary Descase // Am. J. Respir. Crit. Care Med. -2001. Vol. 163. - P.1693-1722.

276. Kharitonov S.A., Chung F.K., Evans D.J. et al. Reference values of exhaled nitric oxide for healthy children 6-15 years old // Pediatr. Pulmonol. 1999. -Vol. 27. - P. 54-58.

277. Kharitonov S.A., Chung F.K., Evans D.J. et al. The elevated level of exhaled nitric oxide in asthmatic patients is mainly derived from the lower respiratory tract // Am. J. Respir. Crit. Care. Med. 1996. - Vol. 153. - P. 1773-1780.

278. Kharitonov S.A., Sapienza M.A., Barnes P.J. et al. Prostaglandins E2 and F2a reduce exhaled nitric oxide in normal and asthmatic subjects irrespective of airway calibre changes // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 1998. - Vol. 158. - P. 1374-1378.

279. Kikkawa Y.Y., Hahn H.S., Yang S.S. et al. Mucopolysaccharide in the pulmonary alveolus. IT. Electron microscopic observations // Lab. Invest. 1970. -Vol. 22. - P. 272-280.

280. Kikkawa Y.Y., Yoneda K., Smith F. et al. The type II epithelial cells of the lung. II. Chemical composition and phospholipid synthesis // Lab. Invest. 1975. -Vol. 32.-P. 295-302.

281. Kinnula V., Chang L., Everitt J.I. et al. Oxidants and antioxidants in alveolar epithelial type II cells: in situ, freshly isolated, and cultured cells // Amer. J. Physiol. 1992. - Vol. 262. - P. 69-77.

282. Kishore U., Bernal A.L., Kamran M.F. et al. Surfactant proteins SP-A and SP-D in human health and disease // Arch. Immunol. Ther. Exp. (Warsz). 2005. -Vol. 53.-P. 399-417.

283. Kolvij A., Schijns M., Frederiks W.M. et al. Distribution of xanthine ox-idoreductase activity in human tissues A histochemical and biochemical study // Virchows Arch. В Cell. Pathol. - 1992. - Vol. - 63. - P. 17-23.

284. Kondo Т., Inokuchi Т., Ohta K. et al. Distribution, chemical coding and origin of nitric oxide synthase-containing nerve fibres in the guinea pig nasal mucosa// J. Auton. Nerv. Syst. -2000. Vol. 80. - P. 71-79.

285. Kosugi H., Kojima Т., Kikugawa K. Characteristics of the thiobarbituric acid reactivity of human urine as a possible consequence of lipid peroxidation // Lipids. 1993. - Vol. 28. - P. 337-343.

286. Kourembanes S., McQuillan L.P., Leung G.K. et al. Nitric oxide regulates the expression of vasoconstrictors and growth factors by vasculare endothelium under both normoxia and hypoxia // J. Clin. Invest. 1993. - Vol. 92. - P. 99-104.

287. Kouyoumdjian С., Adnot S., Levame M. et al. Continuous inhalation of nitric oxide protects against development of pulmonary hypertension in chronically hypoxic rats // Ibid. 1994. - Vol. 94. - P. 578-584.

288. Kubes P., Payne D., Grisham M.B. et al. Inhaled NO impacts vascular but not extravascular compartments in postischemic peripheral organs // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 1999. - Vol. 277, № 2. - P. H676-H682.

289. Kuitert L.M., Newton R., Barnes N.C. et al. Eicosanoid mediator expression in mononuclear and polymorphonuclear cells in normal subjects and patients with atopic asthma and cystic fibrosis // Thorax. 1996. - Vol. 51. - P. 1223-1228.

290. Laskin J.D., Heck D.E., Gardner C.R. et al. Prooxidant and antioxidant functions of nitric oxide in liver // Antioxid. Redox. Signal. 2001. - Vol. 3. - P. 261-271.

291. Laszlo F., Whittle B.J. Colonic microvascular integrity in acute endotox-aemia: Interactions between constitutive nitric oxide and 5-lipooxygenase products // Europ. J. Pharm. 1995. - Vol. 277. - P. R1-R3.

292. Lee Т.Н. Interactions between alveolar macrophages, monocytes, and granulocytes. Implications for airway inflammation // Amer. Rev. Respir. Dis. -1987.-Vol. 135.-P. 14-17.

293. Leeman M., Dcbeyl V.Z., Delcroix M. et al. Effects of endogenous nitric oxide on pulmonary vascular tone in intact dogs // Amer. J. Physiol. 1994. - Vol. 266. - P. H2343-H2347.

294. Lefer«A.M., Ma X. Decreased basal nitric oxide release in hypercholesterolemia increases neutrophil adherence to rabbit coronary artery endothelium // Arteriosclerosis and Thrombosis. 1993. - Vol. 13. - P. 771-776.

295. Leff A.R. Role of leukotrienes in bronchial hyperresponsiveness and cellular responses in airways // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2000. - Vol. 161. - P. S125-S132.

296. Leurs R., Brozium M.M., Jansem W. et al. Histamine Hi-receptor-mediated cyclic GMP production in guinea pig lung tissue is an L-arginine-dependent process // Biochem. Pharm. 1991. - Vol. 42. - P. 271-277.

297. Libermann H., Bathkc W. Zun Schutz grober jungrinder Aufzuchtbes-tande var erregcr bedingten Krankheiten aus virologischer und bacteriologisher sicht // Vet. Med. Inf. 1969. - Vol. 6, № 5. - P. 134-144.

298. Linnane S.J., Keatings V.M., Costello C.M. et al. Total sputum nitrate plus nitrite is raised during acute pulmonary infection in cystic fibrosis // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 1998. - Vol. 158. - P. 207-212.

299. Liu R.H., Hotchkiss J.H. Potential genotoxicity of chronically elevated nitric oxide: A review // Mutation Res. 1995. - Vol. 339. - P. 73-89.

300. Loukides S., Bouros D., Papatheodorou G. et al. The relationships among hydrogen peroxide in expired breath condensate, airway inflammation, and asthma severity // Chest. 2002. - Vol. 121, № 2. - P. 338-346.

301. Lundberg J.O., Farkas-Szallasi Т., Weitzberg E. et al. High nitric oxide production in human paranasal sinuses // Nal. Med. 1995. - Vol. 1. - P. 370-373.

302. Lundberg J.O., Weitzberg E. Nasal nitric oxide in man // Thorax. 1999. - Vol. 54. - P. 947-952.

303. Lundberg J.O., Weitzberg E., Nordvall S.L. et al. Primarily nasal origin of exhaled nitric oxide and absencc in Kartageners syndrome // Eur. Respir. J. -1994.-Vol. 7.-P. 1501-1504.

304. Maclean M.R., Mcculoch K.M., Baird M. Endothelium Et(A)-receptor-mediated and Et(b)-receptor-mediated vasoconstriction in rat pulmonary arteries and arterioles // J. Cardiovasc. Pharmacol. 1994. - Vol. 23. - P. 838-845.

305. MacMicking J.D., North R.J., LaCourse R. et al. Identification of nitric oxide synthase as a protective locus against tuberculosis // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1997. - Vol. 94, № 10. - P. 5243-5248.

306. Maiorano V., Chianese R, Fumarulo R. ct al. Thymomodulin increases the depressed production of superoxide anion by alveolar macrophages in patients with chronic bronchitis // Int. J. Tiss. React. 1989. - Vol. 11. - P. 21-25.

307. Majewska E., Kasielski M., Luczynski R. et al. Elevated exhalation of hydrogen peroxide and thiobarbituric acid reactive substances in patients with community acquired pneumonia // Respir. Med. 2004. - Vol. 98, № 7. - p. 669-676.

308. Mannick J.В., Asano К., Izurni К. et al. Nitric oxide produced by human В lymphocytes inhibits apoptosis and Epstein-Barr virus reactivation // Cell. 1994. -Vol. 79.-P. 1137-1146.

309. Martelli M., Colasanti R. The proteolytic etiopathogenesis of pulmonary emphysema // Minerva. Med. 1983. - Vol. 74. - P. 2599-2603.

310. Martin W.J., Powis G.W., Kachel K.L. Nitrofurantoin-stimulated oxidant production in pulmonary endothelial cells // J. Lab. and Clin. Med. 1985. - Vol. 105.-P. 23-29.

311. McCuslcer K. Mechanisms of respiratory tissue injury from cigarette smoking // Amer. J. Med. 1992. - Vol. 93. - P. 18-21.

312. McElroy M.C., Postle A.D., Kelly F.J. Catalase, superoxide dismutase and glutathione peroxidase activities of lung and liver during human development // Biochim. et biophys. acta. 1992. - Vol. 1117.-P. 153-158.

313. McKinnon K.P., Madden M.C., Noah T.L. et al. In vitro ozone exposure increases release of arachidonic acid products from a human bronchial epithelial cell line // Toxicol. Appl. Pharmacol. 1993. - Vol. 118. - P. 215-223.

314. McQuillan L., Leung G., Marsden P. et al. Hypoxia inhibits expression of NOS via transcriptional and posttranscriptional mechanisms // Amer. J. Physiol. -1994.-Vol. 36.-P. H1921-H1927.

315. Michel Т., Feron O. Nitric oxide synthases: which, where, how, and why?//J. Clin. Invest. 1997.-Vol. 100 - P. 2146-2152.

316. Miller R.A., Britigan B.E. Protease-cleaved iron-transferrin augments oxidant-mediated endothelial cell injury via hydroxyl radical formation // J. Clin. Invest. 1995. - Vol. 6. - P. 2491-2500.

317. Miranda K.M., Espey M.G., Wink D.A. A rapid, simple spectrophoto-metric method for simultaneous detection of nitrate and nitrite // Nitric Oxide. -2001.-Vol. 5,№ l.-P. 62-71.

318. Moali C., Brollo M., Custot J. et al. Recognition of alpha-amino acids bearing various C=NOH functions by nitric oxide synthase and arginase involvesvery different structural determinants // Biochemistry. 2000. - Vol. 39, № 28. - P. 8208-8218.

319. Moilanen E., Vapaatalo H. Nitric oxide in inflammation and immune response // Ann. Med. 1995. - Vol. 27. - P. 359-367.

320. Montuschi P., Corradi M., Ciabattoni G. et al. 8-isoprostane in breath condensate is increased in healthy smokers // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 1999. -Vol. 159.-P. A887.

321. Montuschi P., Corradi M., Ciabattoni G. et al. Increased 8-isoprostane, a marker of oxidative stress, in exhaled condensate of asthma patients // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 1999. - Vol. 160. - P. 216-220.

322. Montuschi P., Kharitonov S.A., Carpagnano E. et al. Exhaled prostaglandin E2: a new biomarker of airway inflammation in COPD // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2000. - Vol. 161. - P. A821.

323. Moore K.P., Mani A.R. Measurement of protein nitration and nitrosothi-ol formation in biology and medicine // Methods Enzymology. 2002. - Vol. 359. -P. 256-268.

324. Munakata M., Huang I., Mitzner W. et al. Protective role of the epithelium in the guinea pig airway // J. Appl. Physiol. 1989. - Vol. 66. - P. 1547-1552.

325. Munakata M., Masaki Y., Sakuma I. et al. Pharmacological differentiation of epithelium-derived relaxing factor from nitric oxide // Ibid. 1990. - Vol. 67.-P. 665-670.

326. Munday R., Winterboume C.C. Reduced glutathione in combination with superoxide dismutase as an important biological antioxidant defense mechanism // Biochem. Pharmacol. 1989. - Vol. 38. - P. 4349-4352.

327. Murphy H.S., Warner R.L., Bakopoulos N. et al. Endothelial cell determinants of susceptibility to neutrophil-mediated killing // Shock. 1999. - Vol. 12.-P. 111-117.

328. Mutlu G.M., Garey K.W., Robbins R.A. et al. Collection and analysis of exhaled breath condensate in humans // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2001. - Vol. 164.-P. 731-737.

329. Naimark A. Cellular dynamics and lipid metabolism in the lung // Fed. Proc. 1973. - Vol. 32. - P. 1967-1971.

330. Nathan C. Nitric oxide as a secretory product of mammalian cells // FASEB J. 1992. - Vol. 6. - P. 3051-3064.

331. Nathan C., Xie Q.W. Regulation of biosynthesis of nitric oxide // J. Biol. Chem. 1994.-Vol. 269.-P. 13725-13728.

332. Nijkamp F.P., Folkerts G. Nitric-oxide and bronchial reactivity // Clin. Exp. Allergy. 1994. - Vol. 24. - P. 905-914.

333. Nijkamp F.P., Folkerts G. Reversal of arachidonic acid-induccd tracheal relaxation into contraction after epithelium removal // Europ. J. Parm. 1986. - Vol. 131.-P. 315-316.

334. Nijkamp F.P., Oosterhout A.J.M. Influence of 15-hydroperoxy-arachidonic acid on lung beta-adrenoceptor function and airway reactivity // Agents Actions. 1984. - Vol. 15. - P. 85-86.

335. Nijkamp F.P., Van der Linde H., Folkerts G. Nitric oxide synthesis inhibitors induce airway hyperresponsiveness in the guinea pig in vivo and in vitro // Amer. Rev. Respir. Dis. 1993. - Vol. 148. - P. 727-734.

336. Nikula K.J., Wilson D.W. Response of rat tracheal epithelium to ozone and oxygen exposure in vitro // Fundam. Appl. Toxicol. 1990. - Vol. 15. - P. 121— 131.

337. Ninomiya H., Uchida Y., Saotome M. et al. Endothelins constrict guinea pig tracheas by multiple mechanisms // J. Pharm. Exp. Ther. 1992. - Vol. 262. - P. 570-576.

338. Nowak D., Kalucka S., Bialasiewicz P. et al. Exhalation of h2o2 and thiobarbituric acid reactive substances (TBARs) by healthy subjects // Free Radic Biol Med. 2001. - Vol. 30, № 2. -P. 178-186.

339. Oae S., Shinhama K. Organic thionitrites and related substances // Org. Prep. Proced. Int. 1983. - Vol. 15. - P. 165-98.

340. Oosting R.S., Van Greevenbrock M.M.J., Verhoff J. et al. Structural and functional changes of surfactant protein A induced by ozone // Am. J. Physiol. -1991. Vol. 261, № 5. - P. L77- L83.

341. Olafsdottir K., Atzori L., Ryrfeldt A. et al. Mechanisms of hydroperox-ide-induced broncho- and vasoconstriction in isolated and perfused rat lung // Pharmacol. Toxicol. 1991.-Vol. 68, №3. — P. 181—186.

342. Panda K., Rosenfeld R.J., Ghosh S. et al. Distinct dimcr interaction and regulation in nitric-oxide synthase types I, II, and III // J. Biol. Chem. 2002. - Vol. 277, № 34. - P. 31020-31030.

343. Panus P.C., Shearer J., Freeman B.A. Pulmonary metabolism of reactive oxygen species // Exp. Lung Res. 1988. - Vol. 14. - P. 959-976.

344. Panus P.C., Shearer J., Freeman B.A. Pulmonary metabolism of reactive oxygen species // Exp. Lung Res. 1988. - Vol. 14. - P. 959-976.

345. Parlar H. Photochemical generated reactive oxygen species in the environment // Reactions and Processes. Vol 2., Pt F. - Berlin: Springer-Verlag, 1991. -P. 229-252.

346. Patterson C.E., Rhoades R.A. Protective role of sulfhydryl reagents in oxidant lung injury // Exp. Lung. Res. 1988. - Vol. 14. - P. 1005-1020.

347. Pavlovic D., Foumier M., Aubier M. et al. Epithelial vs. serosal stimulation of tracheal muscle: Role of epithelium // J. Appl. Physiol. 1989. - Vol. 67. - P. 2522-2526.

348. Penghai Wang P., Zweier J.L. Measurement of nitric oxide and per-oxynitrite generation in the postischemic heart. Evidence for peroxynitrite-mediated reperfusion injury // J. Biol. Chem. 1996. - Vol. 271, № 46. - P. 29223-29230.

349. Pennington J.E., Rossing Т.Н., Boerth L.W. et al. Isolating and partial characterization of a human alveolar macrophage-dcrived neutrophil activating factor // J. Clin. Invest. 1985. - Vol. 75. - P. 1230-1237.

350. Persson M.G., Wiklung N.P., Gustafsson L.E. Positive end-expiratory pressure ventilation elicits increases in endogenously formed nitric-oxide as detected in air exhaled by rabbits // Anesthesiol. 1995. - Vol. 52. - P. 969-974.

351. Pompella A., Maellaro E., Casini A.F. et al. Measurement of lipid peroxidation in vivo: A comparison of different procedures // Lipids. 1987. - Vol. 22. -P. 206-211.

352. Porsti I., Paakkari I. Nitric oxide-based possibilities for pharmacotherapy // Ann. Med. 1995. - Vol. 27. - P. 407-420.

353. Post M., ven Golde L.M. Metabolic and developmental aspects of the pulmonary surfactant system // Biochem. Biophys. Acta: Rev. Biomembr. 1988. -Vol. 947, № 2. - P. 249-286.

354. Poumarat F., Martel J.L. Mycoplasmoses respiratories ous bovins // Res. Med. Veter. 1985. - Vol. 161, № 12. - P. 1115-1122.

355. Pryor W.A. Biological effects of sigarette smoke, wood smoke, and the smoke from plastics: The use of electron spin resonance // Free Radical Biol. Med. -1992.-Vol. 6.-P. 659-676.

356. Pryor W.A. Free radical reactions in biology: Initiation of lipid autoxida-tion by ozone and nitrogen dioxide // Environ. Health Perspect. 1976. - Vol. 16. -P. 180-181.

357. Putman E., Van Golde L.M.G., Haagsman H.P. Toxic oxidant species and their impact on the pulmonary surfactant system // Lung. 1997. - Vol. 175. - P. 75-103.

358. Ramis I., Bioque G., Lorente J. et al. Constitutive nuclear factor-kappa В activity in human upper airway tissues and nasal epithelial cells // Eur. Respir. J. -2000. Vol. 15. - P. 582-589.

359. Rassaf Т., Kleinbongard P., Preik M. et al. Plasma nitrosothiols contribute to the systemic vasodilator effects of intravenously applied NO // Circ. Res. -2002.-Vol. 91. P.470-477.

360. Reid K.B., Lauson P., Hoppe H.J. et al. Human and bovine lung surfactant protein D: cloning, expression and functional studies involving the binding to allergens and reseptors // Appl. Cardiopulm. Pathophysiol. 1995. - Vol. 5. - P. 9698.

361. Reinhold P., Becher G., Elschner M. et al. Relationship between an increase of LTB4 in exhalation and the degree of airway responsiveness in clinically healthy and BRSVinfected animals // Eur. Respir. J. 1996. - Vol. 9, № 23. - P. 417.

362. Reinhold P., Langenberg A., Becher G. et al. Das atemkondensat-ein nichtinvasiv zu gewinnendes medium zum nachweis von entztindungsmediatoren der lunge // Berl. Miinch. Tierarztl. Wochenschr. 1999. - Vol. 112. - P. 254-259.

363. Ricagna F., Miller V.M., Tazelaar H.D. et al. Endothelin-1 and cell proliferation in lung organ cultures: Implications for lung allografts // Transplantation. -1996.-Vol. 62.-P. 1492-1498.

364. Ricciardolo F.L., Sterk P.J., Gaston B. et al. Nitric oxide in health and disease of the respiratory system // Physiol. Rev. 2004. - Vol. 84. - P. 731-765.

365. Rice W.R., Sarin V.K., Fox J.L. et al. Surfactant peptides stimulate uptake of phosphatidylcholine by isolated cells // Biochem. Biophys. Acta. 1989. -Vol. 1006, № 2. - P. 237-245.

366. Rimar S., Gillis C. Selective pulmonary vasodilation by inhaled nitric oxide is gue to haemoglobin inactivation // Circulation. 1993. - Vol. 88. - P. 28842887.

367. Robbins R.A., Barnes P.J., Springall D.R. et al. Expression of inducible nitric oxide in human lung epithelial cells // Biochem. Biophys. Res. Commun. -1994. Vol. 203. -P. 209-218.

368. Rodman D.M., Yamaguchi Т., Hasunuma K. et al. Effects of hypoxia on endothelium-dependent relaxation of rat pulmonary artery // Amer. J. Physiol. -1990. Vol. 258. - P. L207-L214.

369. Russell P., Wright C., Kapeller K. et al. Attenuation of chronic hypoxic pulmonary hypertension in rats by cyclooxygenase products and by nitric oxide // Europ. Respir. J. 1993. - Vol. 6. - P. 1501-1506.

370. Rustow В., Haupt R., Stevens P.A. et al. Type II pneumocytes secrete vitamin E together with surfactant lipids // Amer. J. Physiol. 1993. - Vol. 265. - P. 133-139/

371. Salvemini D., Seibert K., Masferrer J.L. et al. Endogenous nitric oxide enhances prostaglandin production in a model of renal inflammation // J. Clin. Invest. 1994.-Vol. 93.-P. 1940-1943.

372. Sarih M., Souvannavong V., Adam A. Nitric oxide synthase indused macrophage death by apoptisis // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1993. - Vol. 191.-P. 503-508.

373. Sartori C., Lepori M., Busch T. et al. Exhaled nitric oxide does not provide a marker of vascular endothelial function in healthy humans // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 1999. - Vol. 160. - P. 879-882.

374. Sautebin L., Ialenti A., Ianaro A. et al. Modulation by nitric oxide of prostaglandin biosynthesis in the rat // Brit. J. Pharmacol. 1995. - Vol. 114. - P. 323-328.

375. Scarpelli E.M. Lung surfactants: in vitro vs. in vivo // J. Appl. Physiol. -2002.-Vol. 93.-P. 911-916.

376. Scarpelli E.M. The surfactant system and anexploration of the symbols // Appl. Cardiopulm. Pathophysiol. 1995. - Vol. 5. - P. 135-139.

377. Scarpelli E.M. The Surfactant System of the Lung. Philadelphia, PA: Lea & Febiger, 1968.

378. Scarpelli E.M. The surfactant system of the lung // Int. Anesthesiol. Clin.- 1977.-Vol. 15.-P. 19-60.

379. Schedin U., Frostell C., Persson M.G. et al. Contribution from upper and lower airways to exhaled endogenous nitric oxide in humans // Acta Anaesth. Scand.- 1995. Vol. 39. - P. 327-332.

380. Sedlak J., Lindsay R.H. Estimation of total, proteinbound and nonprotein sulfhydril groups in tissue with Ellman's reagent // Anal. Biochem. 1968. - Vol. 25, № l.-P. 192-205.

381. Sethi S., Eastman A.Y., Eaton J.W. Inhibition of phagocyte-endotheliun interactions by oxidized fatty acid: A natural anti-inflammatory mechanism // J. Lab. Clin. Med. 1996. - Vol. 128. - P. 27-38.

382. Shaul P.W., North A.J., Wu L.C. et al. Endothelial nitric oxide synthase is expressed in cultured human bronchiolar epithelium // J. Clin. Invest. 1994. -Vol. 94.-P. 2231-2236.

383. Sheng II., Ishii K., Murad F. Generation of an endothelium-derived relaxing factor-likc substances in bovine tracheal smooth muscle // Amer. J. Physiol. -1991. Vol. 260. - P. L.489-L493.

384. Sheu F.S., Zhu W., Fung P.C. Direct observation of trapping and release of NO by glutathione and cysteine with electron paramagnetic resonance spectroscopy // Biophys. J. -2000. -Vol. 78. P. 1216-226.

385. Shimosegawa Т., Toyota T. NADPH-diaphorase activity as a marker for nitric-oxide synthase in neurons of the guinea-pig respiratory tract // Amer. J. Respir. Crit. Care Med. 1994. - Vol. 150. - P. 1402-1410.

386. Shingu M., Yoshioka K., Nobunaga M. Human vascular smooth muscle cells and endothelial cells lack catalase activity and are susceptible to hydrogen peroxide // Inflammation. 1985. - Vol. 9. - P. 309-320.

387. Shohet S.B. // Мембраны и болезнь. М., 1980. - С. 76-89.

388. Sibille Y., Reynolds H.Y. Macrophages and polymorphonuclear neutrophils in Lung defense and injury // Amer. Rev. Respir. Dis. 1990. - Vol. 141. - P. 471-501.

389. Sies H. Oxidative stress From basic research to clinical application // Amer. J. Med. - 1991.-Vol. 91.-P. S31-S38.

390. Simms И.Н., D'Amico R. Subcellular location of neutrophil opsonic receptors is altered by exogenous reactive oxygen species // Cell. Immunol. 1995. -Vol. 166.-P. 71-82.

391. Simon R., DeHart P., Nadeau D. Resistance of rat pulmonary alveolar epithelial cells to neutrophil- and oxidant-induced injury // Amer. J. Respir. Cell Mol. Biol. 1989. - Vol. 1. - P. 221-229.

392. Singh S., Evans T.W. Nitric oxide, the biological mediator of the decade: fact or fiction? // Eur. Respir. J. 1997. - Vol. 10. - P. 699-707.

393. Sodergren E., Nourooz-Zadeh J., Berglund L. et al. Re-evaluation of ferrous oxidation in xylenol orange assay for the measurement of plasma lipid hydroperoxides // J. Biochem. Biophys. Methods. 1998. - Vol. 37. - P. 137-146.

394. Sparrow M.P., Mitchell H.W. Modulation by the epithelium of the extent of bronchial narrowing produced by substances perfused through the lungen // Brit. J. Pharm. 1991,- Vol. 103.-P. 1160-1164.

395. Staddy P.R., Lapworth R., Bird R. Angiotensin-converting enzyme and its clinical significance a review // J. Clin. Path. - 1983. - Vol. 36. - P. 938-947.

396. Stamler J.S., Roddy M.A., Currie K.E. et al. Nitric oxide regulates basal systemic and pulmonary vascular resistance in healthy humans // Circulation. 1994. - Vol. 89. - P. 2035-2040.

397. Stamler J.S., Simon D.I., Osborne J.A. et al. S-nitrosylation of proteins with nitric oxide: synthesis and characterization of biologically active compounds // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1992. - Vol. 89. -P. 444-448.

398. Stuehr D.J. Mammalian nitric oxide synthases // Biochim. Biophys. Acta. 1999.-Vol. 1411. - P. 217-230.

399. Taha R., Olivenstein R., Utsumi T. et al. Prostaglandin H Synthase 2 Expression in Airway Cells from Patients with Asthma and Chronic Obstructive Pulmonary Disease //Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2000. - Vol. 161. - P. 636-640.

400. Tomlinson A., Appleton I., Moore A.R. et al. Cyclo-oxygenase and nitric oxide synthase isoforms in rat caragecnin pleurisy // Brit. J. Pharmacol. -1994.-Vol. 112.-P. 693-698.

401. Torrielli M.V., Dianzani M.U. Free radicals in inflammatory disease // Free Radicals in Molecular Biology, Ageing, and Disease. N.Y.: Raven Press, 1984. - P. 355-379.

402. Tsan M.-F., White J.E., Santana T.A. et al. Tracheal insufflation of tumor necrosis factor protects rats against oxygen toxicity // J. Appl. Physiol. 1990. -Vol. 68.-P.1211-1219.

403. Turrens J.F., Freeman B.A., Crapo J.D. Hyperoxia increased H2O2 release by lung mitochondria and microsomes // Arch. Biochem. and Biophys. 1982. -Vol. 217.-P. 411-421.

404. Uncles D.R., Daugherty M.O., Frank D.U. ct al. Nitric oxide modulation of pulmonary vascular resistance is red blood cell dependent in isolated rat lungs // Anesth. Analg. 1996. - Vol. 83. - P. 1212-1217.

405. Utsumi Т., Klostergaard J., Akimaru K. et al. Modulation of TNF-a-priming and stimulation-dependent superoxide generation in human neutrophils by protein kinase inhibitors // Arch. Biochem. and Biophys. 1992. - Vol. 294. - P. 271-278.

406. Vilim V., Wilhelm J. What do we measure by a luminal-dependent chemiluminescence of phagocytes? // Free Radical Biol, and Med. 1989. - Vol. 6. -P. 623-629.

407. Visner G.A., Chesrown S.E., Monnier J. et al. Regulation of manganese superoxide dismutase: IL-1 and TNF induction in pulmonary artery and microvascular endothelial cells // Biochem. and Biophys. Res. Commun. 1992. - Vol. 188. - P. 453-462.

408. Vonhoutte P.M. Epithelium-derived relaxing factor(s) and bronchial reactivity // J. Allergy Clin. Immun. 1989. - Vol. 83. - P. 855-861.

409. Ward C., Wong Т.Н., Murray J. et al. Induction of human neutrophil ap-optosis by nitric oxide donors: evidence for a caspase-depcndent, cyclic-GMP-inde-pendent, mechanism // Biochem. Pharmacol. 2000. - Vol. 59. - P. 305-314.

410. Ward P.A. Mechanisms of endothelial cell injury // J. Lab. Clin. Med. -1991.-Vol. 118.-P. 421-426.

411. Warner R.L., Paine R., Christensen P.J. et al. Lung sources and cytokine requirements for in vivo expression of inducible nitric oxide synthase // Amer. J. Respir. Cell Molec. Biol. 1995.-Vol. 12. - P. 649-661.

412. Weber H., Heilmann P., Meyer B. et al. Effect of canine surfactant protein (SP-A) on the respiratory burst of phagocytic cells // FEBS Lett. 1990. - Vol. 270. - P. 90-94.

413. Weiss S.J. Tissue destruction by neutrophils // New Engl. J. Med. -1989. Vol. 320. - P. 365-376.

414. White D.C., Teasdale P.R. Blood oxygenation with hydrogen peroxide. In vitro study // Brit. J. Anaesth. 1966. - Vol. 38. - P. 339-343.

415. White C.W., Repine J.E. Pulmonary antioxidant defense mechanisms // Exp. Lung. Res. 1985. - Vol. 8. - P. 81-96.

416. Whitsett J.A. Surfactant proteins in innate host defense of the lung // Biol. Neonate. 2005. - Vol. 88. - P. 175-180.

417. Whitsett J.A., Glasser S.W., Tichelaar J.W. et al. Transgenic models for study of lung moiphogenesis and repair: Parker B. Francis lecture // Chest. 2001. -Vol. 120. - P. 27-30.

418. Wink D.A., Grisham M.B., Mitchell J.B. et al. Direct and indirect effects of nitric oxide in chemical reactions relevant to biology // Methods Enzymol. 1996. -Vol. 268.-P. 12-31.

419. Wink D.A., Mitchell J.B. Chemical biology of nitric oxide: Insights into regulatory, cytotoxic, and cytoprotective mechanisms of nitric oxide // Free Radic. Biol. Med. 1998. - Vol. 25. - P. 434-456.

420. Wink D.A., Miranda K.M., Espey M.G. et al. Mechanisms of the antioxidant effects of nitric oxide // Antioxid. Redox. Signal. 2001. - Vol. 3, № 2. - P. 203-213.

421. Wood L.G., Gibson P.G., Garg M.L. Biomarkers of lipid peroxidation, airway inflammation and asthma // Eur. Respir. J. — 2003. Vol. 21. - P. 177-186.

422. Wright D.T., Cohn L.A., Li H. et al. Interactions of oxygen radicals with airway epithelium // Environ. Health Perspect. 1994. - Vol. 102. - P. 85-90.

423. Wright J.P., Dobbs L.G. Regulation of pulmonary surfactant secretion and clearance // Ann. Rev. Physiol. 1991. - Vol. 53. - P. 395-414.

424. Xie Q., Kashiwarbara Y., Nathan C. Role of transcription factor NF-kB/Rel in induction of nitric oxide synthase // J. Biol. Chem. 1994. - Vol. 269. - P. 4705-4708.

425. Xue C., Rengasamy A., Le Cras T.D. et al. Distribution of NOS by in normoxic, hypoxic, rat lung: Upregulation of NOS by chronic hypoxia // Amer. J. Physiol. 1994. - Vol. 267. - P. L667-L678.

426. Yates D.H., Kharitonov S.A., Robbins R.A. et al. Effect of a nitric oxide synthase inhibitor and a glucocorticosteroid on exhaled nitric oxide // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 1995. - Vol. 152. - P. 892-896.

427. Yates D.H., Kharitonov S.A., Thomas P.S. et al. Endogenous nitric oxide is decreased in asthmatic patients by an inhibitor of inducible nitric oxide synthase // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 1996. - Vol. 154. - P. 247-250.

428. Yates W.G. Prevention of experimental bovine pneumonia pasteurellesis with an extract of Pasteurella haemolytica // Canad. J. Сотр. Med. 1983. - Vol. 47, № 3. - P. 257-265.

429. Zharikov S.I., Herrera H., Block E.R. Role of membrane potential in hypoxic inhibition of L-arginin uptake by lung endothelial cells // Amer. J. Physiol. -Lung Cell. Mol. Physiol. 1997. - Vol. 16. - P. L78-L84.

430. Zweir J.L., Samouilov A., Kuppusamy P. Non-enzymatic nitric oxide synthesis in biological systems // Biochim. Biophys. Acta. 1999. - Vol. 1411, № 2-3.-P. 250-262.

Информация о работе

Черницкий, Антон Евгеньевич
кандидата биологических наук
Воронеж, 2009
ВАК 03.00.04

Диссертация

Биохимическая характеристика конденсата выдыхаемого воздуха у телят в норме и при респираторной патологии - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы