Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Андрогенез в культуре изолированных пыльников пшеницы

ВАК РФ 03.00.12, Физиология и биохимия растений

Автореферат диссертации по теме "Андрогенез в культуре изолированных пыльников пшеницы"

РГб

1 7 ЫнН ГЛАВНЫЙ БОТАНИЧЕСКИЙ САД

НАЦИОНАЛЬНОЙ АКАДЕМИИ НАУК РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН

На правах рукоииси УДК Л И 1.1.0:', Г,

БАЛАБАТЫРОВ Ергазы Батталович

АНДРОГЕНЕЗ В КУЛЬТУРЕ ИЗОЛИРОВАННЫХ ПЫЛЬНИКОВ ПШЕНИЦЫ

03.00.12 — физиология растений

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

г. Алматы, 1993

Работа выполнена на кафедре физиологии и биохимик растений биологического факультета Казахского государственного национального уни-перситета им. Аль-Фараби.

Научные руководители

Официальные оппоненты

Ведущее учреждение

доктор биологических наук, профессор И. Р. РАХИМБАЕВ

доктор биологических наук, профессор А. Б. ВИТАЛИЕВ

академик Казахской Академии сельскохозяйственных наук, доктор биологических наук Р. А. УРАЗАЛИЕВ

кандидат биологических наук, Б. Б. АНАПИЯЕВ

Казахский научно-исследовательский институт земледелия

Защита состоится 21 мая 1993 г. в 14 часов на заседании специализированного совета К.008.12.0? при Главном ботаническом саде Национальной Академии наук Республики Казахстан по адресу: 480070, Алматы, Главный ботанический сад, ул. Тимирязева, 44.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Главного ботанического сада.

Автореферат разослан 20 апреля 1993 года.

ученым секретарь специализированного совета,

кандидат Оиологических А- ИУРМУХАНБЕТОВА

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА' РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Получение гаплоидов в культуре изолированных пыльников и шкросяор в настоящее время является наиболее эффективным методом селекции. Вопросы получения гаплоидов обсуждены во многих работах (Бутемко, 1964, 1975; Сандврланд, Данвелл, 1975; Хохлов, Тырнов п др. 1976; Вензель, Ничше, 1976; Дукьянюк, Игнатова, 1961; Ху Хан, 1983{Суханов, 1984: Данвелл, 1985; Пикард, 1990; Рахлмбаев н др. 1992 .Используя удвоенные гаплоиды гибридов за очень короткое время можно достичьгомозиготности и получить константные иэоген-кые линия. Это позволит ускорить селекционный процесс в 2-3 раза.

Однако, сдерживающим фактором широкого использования гаплоидной технологии в селекционных программах является отсутствие высокоэффективных методов массового получения гаплоидов. '¿го связано с недостаточной изученноегьи фпзиологическях закономерностей андрогонеза.

Цель и задачи исследования. Основной целью работы деялось изучение влияния углеводных компонентов питательной среди на формирование андрогенных структур я гаплоидише растенай-регенераятов в культуре изолированных Пильняков и кихроспор пшеницы и совершенствование на этой основе гаплоидной технологии.

Для успешного достижения поставленных целей необходимо было решить следующие задачи:

1. Испытание авдрогеяетической способности различных сортов и гибридов;

2. Подбор и оптимизация питательных сред;

3. Испытание влияния различных углеводов на авдрогенез;

4. Изучение влияния углеводного голодания микроспор на индуицио андрогенных структур ;

5. Цитологические и эмбриологические исследования каллусов, эмбриовдов и растений-регенерантов.

6. Оптимизация условий культивирования пыльников и микроспор для повышения выхода андрогенных структур и зеленых растений-регенерантов.

Науччая новизна. Впервые в культуре изолированных пняьни-ков и кикрсскор пшеницы показано вндуцирумце'е действие углеводного голодания ьякроспор на ¡¡ормхротше акдрогенных структур Е регенерацию золеных растенкй-рагенорантов. Выявлена так-se зависимость между составом углеводных компонентов питательной среди к типам морфогенеза в культуре пильнвкоп. Показано благоприятное действие высоких концентраций кальтоэы на формирование змбрискдша структур, ыор*! о генных каллусов к зелень« растений-регенерантов.

Практическое значение. Выявлены отзывчивые к андрогенеэу генотипы говекиц: Казахстанская 3, Казахстанская 4, Карагакдкн-скля 70, Гсстиануы; гибриды Прогресс х Гостиакум, Казахстанская 126 х Зритроспермум 116, Саратовская 29 х Казахстанская 3; сложные гибриды: Гибрид I (Саратовская 29 х Линия 26 (безостая 1 яровая форма) х (Скала х Ранг); Гибрид 2 (Скала х Целинная 21) х (йаяк х Прзоосхая); Гибрид 3 (Омская 17 х СЕР 2098) х ( Пиротрнкс 26 х Ульбинская 93). ли сорта к гибриды могут быть привлечены б селекционные программы для быстрого получения гаплоидов , а также использованы в качестве модельных объектов для изучения физиологических, цятоэибриологиче-сккх и генетических закономерностей андрогенеза. Подобраны оптимальные для культивирования пыльников и микроспор шакицн питательные срэда ( Л 6 и ЬлеЯдеса). Предложены оптимизированные среды, способствующие эмбриоадогенезу и прямой регенерации зеленых растений непосредственно в нкдуцирутаей среде. Установлены оптимальные для амбриовдогенеза и формирования зеленых растений-регенерантов углеводные компоненты среды. Впервые предложена схема создания углеводного голодания микроспор для повышения выхода андрогенных структур и зеленых растенкй-ре-генерантов пшеницы. Предложена технология одноступенчатой регенерации зеленых растений-регенерантов в суспензионной культуре.

Структура и об-ьем. Диссертация состоит из введения, трех глав, выводов в списка литературы. Работа изложена на страницах машинописного текста и содержит 9 таблиц и 13 рисунков. Список литературы включает 190 наименований работ отечественных и зарубежных авторов.

Апробация работ». Материала дкссортсцет долсжеки на Конференции иолодздс учеюсс к специалютов Каз1У (Ллт.:аг-Ата,1907, 1988), на Мээдународном симпозиуме по клеточной и гекноЗ технологии для зарноньи злаков (Алма-Ата,198Э), Всесоюзной конференции по охр ai и и рациональному использованию прирояшх ресурсов (Уфа, IS89).

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИСОЩОВАЛНЯ

В качество схсперннзитального материала слуишг сорта я гжЗради шешщи, предсгазлэгаше ííasíDEií земледелия, институтом ботаники и Кцрагищанскши СХОС: Казахстанская 3, Казахетакская 4, Казахстанская 8, Казахстанская II, Карагандинская 70, Целинная 21» Саратовская 29, Прогресс, Гостиануи н габрздниэ комбинации первого поколения: Прогресс х Госглаиум, Казахстанская 3 х Саратовская 29, Казахстанская 126 х Эритроспермум П6, слсшше гпОрэды парного поколения: Габрцд I (Caparовскал 29 х Линия 25 (Бозостад I, яровая форма)) х (С*::ала х Ранг); гибрид 2 (Скала х Целинная 21) х (Мая?; х Приобская); Кк5рзд 3 (Омская 17 х СЕР 2098) хЙнротрикс 28 х Улъйпюкая 93).

Методы исследования. Экспэрпиентаяьшм растения взращивали а тепличном комплексе Каз.НЙИ землздаахя пра температура 22-26°С. В восеннз-лзтнее время выращивали з полезых условиях на экспериментальном участке того se института.

Все отобраны э особа подвергались кмуалыкед и цитологическому контроле для определения стадшх развитая макроспор .

Дня культивирования пшшпгков и гаяроспор йкдц цепельзова-на: жидкая модифицированная ср-зда й 6 о 0,5 мг/л - вата-лша Вр 0,5 мг/л - витамина Bg, I trr/л - аскорбиновой кислой!, I мг/л - цакотииозоЗ кислота, 100 мг/я кс-зояяэзига, 0,2 иг/д глутамина, 90 г/л сахарозы или 95 г/л мальтозы , I~I,5 isv/x 2,4-Д, 0,2-0,5 ат/я - юшвпгаа, рН 5,8, Среда Потаю я твердая среда КлеЙцеса о 0,5 мг/л -Bj, 0,6 мг/л - Bg, I .'tr/л ~ С, I иг/л -РР, 100 мг/л сахарозы, 7 г/л агара, I мг/л - 2,4-Д, 0,2 от/л кинетика, рН - 5,8.

Серии экспериментов со изучении особенностей углэ водного "голодания" микроспор проводила на жидкой иодифигироганной среде й 6. Для этого в течение 1,,2, 4, 6, 8, 10, 12, 14 су тс«

проводили продВДльтпваровшша пшгышков на среде с 0,3 М концентрацией машшта, исключая иэ индуцкрущей среда углеводные компоненты. Соответственно; по истечении втого вршени по отдельности в коздом варианте включали в состав сред сахарозу в концентрациях 30, 60, 80 г/л шн мальтозу - 32, 64, 95 г/л; ила глюкозу - 1С, 32, 48 г/л; ни фруктозу 16 , 32 , 48 г/л. Ин-кубеихш пыльников и микроспор проводил: как на свету, тшс и в темноте. На свету шшубащя пыльников с плотностью аосова 100120 шук на 5 мл жидкой среди проводили при освецонности 15002000 лк, температуре 27~30°С, на круговой качалке в течете 25-30 дней.

Для культивирования получвшшх адрогешшх структур использовали различные модификации среда МО. Каллусы пассировали на среду МС й 2 (для эмбриовдогоноза) с 30 г/л сахарозой, 7 г/л агара, 100 мг/л дрокжевого экстракта, I иг/л 2,4-Д, 0,2 мг/л кинетика, рН 5,8. Часть андрогешшх структур переносили на сроду МО й 3 ( для каллусогенеэа) 1-1,5 мг/л - 2,4-Я. Зыбрио-вдц и адвентивные почки первсакквали на среду МС с 1/2 концентрацией минеральна* солей основного состава с 20 г/л сахарозы, 7 г/л агара, 0,2 ¡.тг/л ПУК,0,2 мг/л кинетика.

Для карлологлческого анализа использовали временные даэ-лашшо препараты иэ меристематяческих зон андрогешшх структур и корешков растеш114-роГ0нерантов. Фиксацию материалов осуществляли в фиксатора Кларка в смеси абсолютного спирта в ледяной уксусной кислоты (3:1). Для получения ыонослоя клеток использовали цитазу - смесь ферментов вилочховой железы улиток, а также пектинаэу я целлвлазу. В качестве красителя попользовали ацетокаршн и водный раствор фуксинсоркистой кислоты.

Окраску постоянных микротомшас препаратов проводили реактивом Шиф|>а о подкраской гемотоксилином и алцкановым синим. Вое экспериментальные данные статистически обработаны с применением общепринятых методах.

РЕЗУЛЬТАТЫ ШЗДОВШЙ И КХ СБСВДИП1Е

Сравнительная авдрогенная способность разягппсс сортов и гибпидов паетщц э кулмуро кзо.тлревашшх пыдыошов и шкрослср

Способность к андрогшшзу в культура шыымксз йыла изучена у 10 сортов и у 6 гибридов мягкой гшеилцц. Прл очш баки нсплтаны среда НС, З 6, ЕлзДдеса, Потато, Гамборга и 2велега.

Андрогенаткчесгсая реакция различных генотипов на этих средах представлена в таблице 3.1. Из подученных результатов видно, что почта у всех ясштагсшх геног.чясв подучена разнообразные андрсгенниа структуры ( эмбрясвда, глобулн, калдуси), J некоторых генотипов получены дпгаплогднио растсдал. Частота их формирования зависела от геногапичосюгс особенностей сортов, гибридных комбинаций и состава питлт&дышх сред.

Особенно яркий контраст по частота пу^вцди андротетшх структур проявляется при сравнении гецсптгтст»: Касахстогга"я.т 8» Казахстанская И, Целинная 21, Прогресс о другпмя хчнотип^ш: Казахстанская 3, Казахстанская 4, Гибрид Казахстане 3 х Саратовская 29, гибрид Казахстанская 126 х Эритрсск9р>ум 116, Гибрид- I, Гибрид - 2, Гибрид - 3,.

Первая группа генотипов обладала низкой авдрогзнэшчес-кой способностью. Среди них выявлены copia, зооб^о не проязл:-пзие никаких реакскй in на одной среда ( паярзлэр, !\азс;ктан~ окая 0), Остальные гзцотшш показали слабое кагпуссзбраз ¿заняв только на какой-нибудь одной среде: Казахстанская II аа среде А' 6 (0,33?); Прогресс на срэдэ Нйзйдеса (0,53,">); 1Ь-дшшая 21 на среда Потато (0,27$). На отЕцдартйоЗ среде ПС, Гамборга и Евелега этп генотипы также на проявляли -¡нхакгвс авдрогонетичес!шх рэахсцай. ШглышкЕ постепенно обесцвечивалась.

Таблзпю ЗД

Влкя'ллб генотипа z питательной среди на аядрогенез в культуре енлъюп-сов псенкцы, %

Генотипы

Частота индукция аэдрогенннх структур

1 »6 ЕлеЯдеса Потато мл в: II

Казахстанская 3 3,0+0,61 2,16+0,52 0.K3+0.34 0, 66+0,33 i. 6±0,44

Казахстанская 4 2,60±0,57 4,35+0,74 2,13+0,27 0. 30±0,22 T 54±0,44

Казахстанская 5 1,70±0,46 0,79iP,36 0,17-0,14 0 i! 15+0,43

Казахстанская 8 0 0 0 0 0

Казахстанская II 0,33+0,22 0 0 0 0

Карагандинская 70 3,44+0,6 0,6öi0,33 2,83iO.G 1*0,42 3. 60±I,44

Целинная 21 0 0 0,27+0,18 0 0

Саратовская 29 0,66*0,31 0,4%0,24 0,6Ь±0,3 0 0, 83+0,3S

Прогресс 0 0,53+0,25 0 0 0

Гостяануы I,II±0,34 1,8*0,4? 0,92+0,34 0, 54^0,20 T , 0*0.50

Прогресс х Гостваяум 7,45x0,87 16,69+1,15 7,65jfi, &S 0 8, 2+1,85

Саратовская 29 х Казахстан.3 3,0i0,62 3,20^0,64 1,60+0,44 0 0

Казах.126 х Эрзтроспермум 116 18,Ъ2+1,42 2,13^0,51 I,7lIo.4S 0 0

Гибрид I 14,54*1,43 1,73+0,46 3,89+0,7 0 о MtI ,43

Гидрид 2 2,17+0,59 0,80±0,3I 0.75+0,34 I, 33+0,45 2. 17*0,59

Гибрид 3 9,66+1,20 I.06*0,41 I,ü0±0,43 0 2, 66*1,20

торяяи упругость, ^.срсспосы шгутря шзс сь'.о^талжзь и постепенно СТЗДЮЕНЛЗСЬ кс"КИЗЯОСЯОООб5ШК55,

Вторая группа - гто.з основном, гибридные ком-

бинация с нестабильная! гояотипшг. Сим обладали до сольно т-сокат ецдрогенвтячвскзмя потенциями почти на всех средах, крооэ сроды Гаяоорга л ¿¡полога, £тн гокотилы на срэдо & бфогь-израгаля до 18,82;? алпрогеншлс структур, (например, гидрид Казахстанская к 126 х фнтроспермун 116), У других объектов этой группа ($ормироианио андрогенных структур варьировало в иироккх пределах на разных средах з зависимости от геноткпичс-сках особенностей. Тах,гибрид Гсетиакум х Прогресс на среде Блейдеса такзв показал высокую продуктивное п>, гдо частота т-дукции андрогенных структур составила 16,Этот ;ко гапотаа пркмеряо одинаковый урэзень андрогеиеза аогсзил ¡¡а средах » & и Потато (соответственно 1, <15% а 7,65~).

Следует выделить и тратьн.кроможуто'шул группу, куда ¡¡ажио отнести Казахстанскую 5, Саратовскую 29, Кзрагаэдинокув 70, Гостианум. стн сорта превосходят по способности к азярогокозу первую группу , но все-хе намного уступает гкбртаним фор^п'г. Они проявляет аядрогенеткческуы реааадш.в основной,иа сродах й б и Блейдеса. Причем, сорта Карагандинская 70 п Гсстиаиутл обладали высокой аыдрох»енетичоской способность», т.о. она продуцировали гмОраокдя ::а всех сродах. Црагссы« накосо:.: отшгг-ется на среде К 6 у сорта Карягапдгнская 70.

На стандартной срэдо ¡,Ю тол:-.ко иекоторда генотпш б'дт:; способны к нвдукцяи шшгусогенеза: Казозгсгзтогая 3 ~ 0,665? 5 Казахстанская 4 - 0,355; Карагадацшсхшя 70 - 1$; Гос-тиолум -0,54%; Гйбрвд - 3 - 1,33?, Однако эти каллусы были пло:;ораа-тущие, рихлие, водяквстиэ с гокогопкой структурой. Кевду гем, некоторая модификация этой среды, а шэнно, замена ИУК ка 2,4-Д I мг/л шш I мг/л 2,4-Д и 0,2 мг/л кяаатяпа, ловмаетгз концентрации углеводных компонентов орзды до £0-100 г/л способствовало индуцированию авдрогешшх структур. Этот показатель составлял у таких генотипов как Казахстанская 5 (1,16^); Карагандинская 70 (9,6>); Саратовская 29 (0,83/0; Гостианум (4%); Прогресс х Гостианум При этой, наряду с увмлча-

ггаем количества андрогенных структур, пзквнялэаь к кх строе-

Рис. Последовательные стадии авдрогенеза в культуре пыльников пшеницы { сорт Казахстанская 3, среда Елойдсса)

I. Каллусогонез; 2. Формирование проэмбрио; 3. Эмбриоидогенез (первичный) ; 4. Полиэыбраония (вторичный эмбриоидогеноз;.

аио. Преобладало количество гот-зрагоцц:'" плотник каллусов о высоким мор^огвнетг.чоскюл:; потенциями.

Очень biícokju способность к ацдрог~.:.)Еу на среде £ 6 -7,45;?; Ш- 8,2? проявила гзбрэдиая гл?лб/::лц:!л Dforpccc г. Гос-тианум, превысив по частота нидутацш а^григктюс структур в неск.оль!ta раз родительсгаю формы. Тек ло гкбргдагая ясмбкнацкя Саратовская 29 х Казахстанская 3 прояапдл ргюокую зкррогэно5К-ческую реакшш на сродо Í С - 3,06?; Бдойдеса 3,2?; Цотато -1,6?; превосходя родаздльсвдо форьш.

Високув андрогенотичоскуя реакцкв пролзхиа? п другие гибридные коыбинасрв!, тшсне как: Казахстанские. 126 х српгрооперг муы 116 ( на среде ñ Г, - 18,82$, ЕчеГдас;- -2,13?, Лотато -1,71?), Гибрид I ( нч среда № 6 - 14,5*;?, мейдсс?. -1,73;?, Потато - 3,89?, ¡.й- 3,54?), Гкбрзд 2 { г:з срадо )í 5 - 2,17?, БлвДдеса -0,80?. Потато - 0,755, КО - 1,23?), Гкбрзд S ( на среде » 6 - 9,66?, Ело tosca - 1,06?, Потато - I,2'¿?, W3-2,66?). Отсюда слгдуст, что щтнаа "отгжгззэо'п» л ачлроге-незу" находится под генетически» кон-трогам :í его реализация зависит от гэноткянческих особенностей с с: ртов к пйрядоп, ¡¡я* сокая активность з этой отпоавнка гааркяявх кскбкнадгЗ, т.о. генотипов с нестабильными- генокаш, по-вхчгвдиу, оагэлна о ккодействиел геиоэ, о чем оввдргаоствуег высокая атдсэгсгшйя способность гкбргяов сменно первого покольккя. Учет этого обстоятельства может способствовать у.5учшан;ъэ технологи! гаплоидной солекцга.

Следует такзэ отметать, что гзнотпп« оглычаатал и по способности образовывать вкбрконды, каллусы г зеленно тмте.юл-регенерантн. Причем чзвтота юс образования. вааисит но толк» от генотипа, условий выращивания к друг:у {акторов, на й се состава питательной среды.

Ряд генотипов: Казахстанская 8, Казахстанская II, Целки-нал 21, Саратовская 29, Прогресс, Гоотиаяуы, Гкбрвд 2, вообще не образовали эмбрноады. Другие геноталн индуцировали змб-риовдкые структуры на какой-нибудь одной среде. Например, сорт Казахстанская 5 на среде й 6 (0,53?), гибрид Саратовская 29 х, Казахстанская 3 на среде Блейцеса (0,6?), Ргбрвд 3 па

ораго Л; в (2С16$),

С раз!'.-* чаототой т даух рчзких среда;; оЗразовшш иябрл-арт КМшкогоискед- 3 - на средь й С (0,66^) и на среде Блойдоса (0,0-3^) 1 сор? ^рагшданская 70 - к,'. среди 6 (К) и па спаде Иотато (0,гибрш Прогресс з: Гостнанум на среда й 6 (1,77/.) к ш сред о ЬтеКдьса (3,22-Д); Г»-,Ср;д I - 12,5?. ш с роде й 6 (Г2,5^) к г:а ерзде Потато (0,8£). Наконец, Ка-сгот.такская 4 о частотой 0/31% - на сроде й 6 я - ка

оредо Елзйдесь и - з>ц сродо Потато образовал омСрпоили.

Такта офшвем, огл'^малхной для генотипов Каосасгансгля 3, Кагшжтаци'ля 5, Кар£.га>данская 70, Саратсэсхья 2!) х Казахстанская 3. Каг&хстшокея К-5 Эрлтросгшр.'сд: 1Ь>, I, рдд 2, Хийонд 3 сказалась среда Л 6. На ьтпй о роде аслбакьгай г.щх.п шбрисгодо отиа^он у гонстаяов Казах стаксг.ая 126 х Эрг.т-роопзрс'м ПС (3,С£>) и у Г^Орада 3 (2.165?). Ллк гокотвпов Кг.ззхзтзлосал 4 (¡шллуоог.-'гез 2,893, шЗрноздогеназ 1,46*), Гостяалл'.ч (каануоогдне*,) 2,13/»)» Прогресс (кадяусогеяоз 0,53£), Прогресс х Гоотканук (к&зд'оогвкез 13,47^, игбркоидогеноз -3.22Й поддолдаой яглдоуся среда БлзЁдгса. На средс Потато ыакюшалышЯ пнход омбрноилов обнаружен у генотипов Казахстанская 4 <0,8?.) к йбрвдь I (0,6%). Среда Ш сказалась малеэф-фэктпшюК е отнспаксЕ ьыбриовдогенвза.

Осауад&к азодогеш-'гяческвй потенцкал гопсткяа, для пол-паЦ оценки изоЗходимо у'чптниать,главным образом ,регшшращ:в. особенно <кшзиш: рас тона {;. В казах вкспаръ'антаг бояьешнетво вто.еичккх омОраоздов формировали либо зелашге растения, либо альбиносы (та&шзта 3,2). Причем, первичные пыльцевые оыбриоиды в основном формировал* нормальные зеленые растеивя. Следовательно, больная часть альбинооных растений приходилась на дол» вторичных амбриовдов. Альбиносл возникала такае и в тсу слу-чаэ, есля рег-ек&рацая осуществлялась путсье оргвлогенеза в кал-дуезшй культура.

Наиболее внеокий процент регенерации растений из всего количества полученных каллусов и эмбриоздов найлвдаго у генотипов Казахстанская 3 (5,38$), Казахстанская 4 (4,08$), Казахстанская 126 х Эрнтроспермум 116 (2,5$), 1йбрвд I (4,63£), йбрид 3 (3,02/2). Из инх количество зеленых растений - регеке-

Таблица 3.2

Значапио генотипа для реген;ц;ацг.л растений а культуре пыльников пиениш (обобщенные показатели на разнюс питательных среда?)

Генотипы Количество культипиро-ua:\ííiíx ш:/а>-йк&оз.атук Всего рг-с- тоний-реге- нерантов.2 Регецсрапия зелених Dac-tülü'.í, % Foreh'ñp;uiK.i зльбвкосиих

Казахстанская 3 3000 5,30 4,23 1,15

Гкбркд 1 00GÛ 3.7Э Ü,£4

Казахстанская 4 3000 4,00 2,SO 1,4В

Гпбркд 3 :то 3,02 1,00 4,IÔ

Казахстанская 125 г Эрптросдериугл 116 ■аьо 2,54 1,76 0,78

KapursimnHCKxi 70 22?,0 I, öl Of 37

«»«грвсс TooTj.un.i- I

1Y.Ö1

рантов составило у гелолшов: Казахстанская 3 (4.23>), Хазах-отанокоя 4 (2,60^), Казахстанская 126 х Эригроспермум 116 Ц,7б£), Гйбрвд 3 (1,6€;Г), При о та: следует отмотать, что гшокив показатели рогзасрают связали с там, что не всегда ембриовди формируют расгоязи, так-как часть амбраоидов иролк-£■0 пирует в различный тлш каллусов, часть га вовсе ко прорастает и постепенно вакрочмтируется. Кроме того, некоторые вто-рачныа ЕМбрь'сдци терях/с гяхожесть и при отделе гак друг от друга «огибают из-за кару мши трофических связей с каллусной нао-соЯ. Палиэмбряоздн на одном каллусе малоэффективны из-за очень '.шзкой всхскзспичет емкао вмбрио;щов ка каллусе, тем ниже ех всхожесть.

До семян б^ли довздаш дкгаяловдныа регонораиты сорта Казахстанская 3, Казахстанская 4, Гибрида 'Казахстанская 126 х Зр!!троспер;.П'М 116, с такяе Гнбрэда I, Гибрида 3» Подученные о:' сортов регенеранти на отличались от исходник родительских форм. Отлачяё иабдвдала у гаплоидов, полученных из гибридных форм по разнш морфоиотрэтесюш параметрам, ссосашго у слогзшх гибридов (гибрид I, габрвд.2).

Следователь!», оптимальной для формирования андрогдавнх структур в культуре пыльников гпенкцц является среда Л 6. В результате испытаний удалось выявить бысокоотзывчнвыо к андро-генозу сорта: Казахстанская 4, Карагандинская 70, Гостиадум и гибридные комбинации Прогре со х Гостаануы, Казахстанская 126 х Зрктросперфм 116, Гибрид I, Гцбрдд 2, Гибрид 3. Установлено, что гпбрвды обладает высокой акдрогенетическоЗ потенцией по сравнению с сортами. Эта генотипы могут быть рекомендованы дая включения в программу гаплоидной селекции для улучшения оуществукцих н выведения новых сортов пшеницы с использованием гаплоидной технологии.

Дидаше углов одних компонентов питательной среды на ш^дрогенеэ в культуре изолированных пыльников пшекада

В качестве источника углерода чаще всего попользуется сахароза, тотаа как функции других углеводов мало исследованы. В связно с отим, для управления ыорфогенетическими процесса^

fa в культуре тканей прододкаютел Еослвдовашш ради pnrvxvna: углеводных компонентов.

Нтщ бкло испытано влшата т иэдрогсивз раэнчк углзго» доп: сахарозы, мальтоза, гдакоза, фруктозч, a kiicsj casnta-глтпгата в различных концентрациях: 0,1 М? 0,2 Щ 0,3 М, IJpc-вадклц три серзга экспериментов:

I) Опыт It Культивировала цолла грш>шпсц 2) Олат 2j Глхг,-кччоски кзолировяли i ихроспоры путей надрезания лиьиккоэ! 3) Опыт Э: Цвлив гшльюощ чероз 5-7 суток кульетвпр0в£вз!я г« кидко!! сродо спонтшшо раскрывались и г.зшроспорц вцходпли в среду. Обломка шш,ш;ков удаляли, а глкрсояора продол&елз культивировать на тсЛ ко среда (rait иаьиааекая "глтдахздоиигозангая среда"),

Прл использовашш 0,3 и кетаинт^эде! глвя..»« Г.гйр'Д I н га б ряд Казахстанская 126 х Эрагроспврчум 116 проявили слабое кад^соойразование с частотой 0,26;? а 0,53^ соотввтотоспно;

Xepoiaie результаты была получепа гтрп испальсоп.-астл высоких концентрация сахароза г пальтоян в огитах I н III, 3 я тих опытах у всех испытуемых генотипов бала получада как г'[бплс— иди, тек ц различные тшш каллусов. Исключение составил! ре- . з/льтатн по опыту II при культагоировгнин иикроояор, ввделэгапос механическим путей. Это.вадимо, связано о кару шагаем коррелятивных связей мадцу пыльникси и пэдкроспорани ¡ш катальном по. Возможно, стсшса пальника визелявт какио-то вещества, сткмуяпрущяе процесс андрогекезе. Мвхшптческоо изоларавшпш микроспор а их культивирование отдельно от пальников создаст, по-видимому, дефицит этих физиологически активных веществ в питательной среде, что тормозит индукции процесса авдрогокеза. Это предположение получило дополнительное подтверждение в ро-зультатох опыта III, при недельном предкультивированан микроопор вместе с обломками пыльников,

С увеличением концентрации углеводов возрастает частота индукцпп андрогетшх структур у всех испытуемах газотипов. Тек, при использовшши 0,2 М концентрации мальтозы Гибрид I а га брад Казахстанская 126 х Эрятроспор.чум 116 формировали соогзет-ствешго 2,66% и 0,5% эмбриоидов.а также 2,05$ и 1,46$ каллусов. Однако Гибрид 2 и Гибрид 3 m ореда этого же состава но фор.га-

роьью ^.'/бркоидьоге структуры, но лишь о невысокой частотой (1,0-,;? и 1,06^ соответственно) образовали каллусы в культура шшлдцеэз (ояит I). Б огито III в культуре микроспор гокотк-г,и Гчбрцд I у. Казахстанская 125 х Зритросперцуу 116 с низко!! пазтетой Формировала ембрискдше (0,9255 и 0,4G?.') и к&длускые (1,23;? и 1,0750 структуру, а генотипы Гибрид 2 а Гкбркд 3 £ормдроваяц калдуси с частотой 0,92^ и 0,40£. Причем, каллусы, индуцнровашше kluc в культуре пальников, тда и в культуре кккрсолоп была иог^огсптца« При цультивкровшии шгльни-ков и ¡."»'распор на ср«до и 0.2 '' сахарозой продзят шходй как каллу с ос, ток к инбриопдов о.:ачлтсш>шй, В в той случав Золе в эазокую оидрогзнзтичэск:,'.*) pi-sraaro прсдтгл Гибрид I а гибели Казахстанская. 126 х Эригрсекзруум 116 с. частотой эм5— риовдогз::зза 0,?6'б- z калдусогекеял 2, ЗСЙ к 1,39$ соотаетот-Евшз. В to %» EJгенотипы Гй^рзд 2 и Ifcöpiu 3 ограничилась только (1,04;' и 2,45/0 каллуоообразовшшсм.

Кз^ольинц ънход шдрогешшх структур е спите I огмэчзн ?а орадй -з 0,3 ü сахарозой у гшотша Казазсотслская 125 х Эри.1росаер.;ум . При этом частота каллусоойразования

составила '¡2,62$: ом^риоядогокеза 6,12?. 3 оснто I на средэ с 0,3 "* нэльтозо! .',;а!'С5шалыш11 вахйд авдрогеннкх структур бал отыочэк у г-дютада Хйбрцд I (9,29%). В опыте III на срадь с сахарозой максимальный шкод андрогешшх струщур также отмечен у гибрида Казахстанская 126 х Эратроспермум ИВ (25,66^). На сред? с 0,3 й мальтозой у генотипа Гибрид I частота келлу-согенеэа состаьила 21,16$ д ембрковдогенеза 4,55?.

Генотипы Гн-Зрэд 2 и Гибрид 3 показала низкие результата е оиата I, хдв частота каидсоойразоваюм на срадо с сахарозоЗ составил* 5.86Й, 8,7в$,ка сраде с мальтозой 4,ОЙ и 4.9736 соответственно. Чазтота а;.к5риозда1к>т?за у атих генотипов на среда с сгхарозоЛ составила соответственно 1,60,2, 1,7% и на иадъ-T0S9 1,035? и 0,6555. Эти показателя в слы-re III 01сазатась еца иа», на йахарозэ 3,93^ п 4,38$ , а на мальтозе 2,55? т. 3,о% к.алдуссгзпэза«

Ср-зда о сахарозой по количеству аядрогенных структур гак р. культуре пыякшхоз, так и з культур-э макроспор намлого

ярепосходат open? о иальтоэо". Органе», в качеоизгогс». ст:тс?-ттп ерз&л о мальтозе;! превосходит прс'/у с са™г<розс£,о or:--лчтельсгэует произдрщшй качлусннЗ окгга:». Kaxr:cu, cfcr^'F^" эмвгееся nn сродо о ».-лльтозоЗ, почта ".а 100 % .тгтсл м">р"" гвнкип. L'to яяэткко о готерогошсЯ етругсуро" "лчгг.-ся, керкру irrte в ocií!. ином ьолеюп растетлк Г. прот'л^опсгоптсп

»rote H'¡ сахарозе X/-Í часть приходятся нг? доля морфбггялк

i^v^cr, Храню того, na пср~пчнс.1 и; кг;: о i п j о f ерс~о * 0,Г KotmoaTp:;t5íeS маэтози с большой чпсгстоГ ? гпгге I f •; культу;< Пильняке») частотой i- ого; го Ш нпдеззг ~ л:--

ajvs$it$ анлрогон?-т>х структур отшча-nt аря»уч pc-ni'rpati^ у»-,?.-. to.'cííí лз якльцегсгг лг/бриокдоя лаке бс.-; псросег"" ко ср.?"" лгл

Пр;г.'9%70.-он ъ гжлсч с л/us о i-.-r и"» рсгсдапТ-"'""'*

ике гальиошт ^.«брЕсвдов гзстеет.п таг ¡алкг.:. ssraurr . ¿"л сллст-.п-ел^йт о что 2 р.". су тс; гьтс л и л^тг :г лл

сслчгспркятю юздействтот ка оСразойа&ео ' ;слл ■>, í«:.Kavier г- к сккоскотует гэхгч^ргаг'.г гс;:с!Г'" о."?;-

О'-'т.чл р>-?г?П'-р::»хг;я гагалс-дких рллгсгшЛ э .qvay/íía rf¿r.:?"~ KOTi tt 1пг.р£юпор rn;o-.e ияглдтго лсказсла ¿•салш-а^кзй рэггпг-рг-цкв эрлл? мать тез и по сравногаго с друпаа углезгадтап »сето-нонта'.'л.

Поотоцу д.*«г '•срог-скоувойаяае гапяонцзой хвягалагж: i*o»ko Сале йн ислааьзог-ать сочогвшв условл" опэтоз I и III- гиумуле потапллг? культаиярсвать совместно кая лнльшкя, тая л взеи-pn»üJiHHs микроспор«, Кая уяв указывалось ешю, это растерло? восмояности для лучкего проявления отзшчавссгл кнкроопор к акгрогонезу. Целесообразно удалять остатка пыльников от гдхк-роспор пс-раэ 7 суток культивирования. В этом случае "пишлпео-sve факторы" стщгляторпой природы остаются в питательной ops-да н усиливают процесс андрогенвэа.

Таким образом, предлагаемый способ культнвярования пыльников и микроспор на жидкой среде $ 6 с добавлением мальтозы способствузт повышению выхода андрогенисс структур и зеленых растештй-рзгенерантов и моьгот быть рекомендован для разработки сднссту пенчатой технологии получения гаплоидов.

аЛззкт "углеводного голодания" микроспор isa ащфоганез в суспеизношюй культура

Эксперименты проводи.™ на ранее вияьлепшс нами двух внооко-05зшзчаЕ1й! к авдрогенезу х'еногипах: Гиоркд I и Гибрид Казахстанская 126 х Эритросперцум П6, & таюм на двух генотипах со средней отзывчивастью : Biópiw 2 и Гибрид 3„

Д>'ЛЬ'Л1Б1фОВа!ШО пыльников и микроспор проводили на квдкой среде Кб о I мг/л 2,4-JU 0,2 кг/л - кинетика; 0,5 ыг/л Bj-; 0,5 »г/л - В^; I ыг/л - РР; I мг/л ~ С; 100 мг/л - мээоднози-та; 2 мг/л - глицина? 4 мг/л - глу ташка ; рН 5,9. В контрольных вариантах }знсе»иш угл&иоди: сахароза - 60 и 90 г/л, каямоза 95 и 64 г/л, глюкоза ~ 48 г/л, фруктоза 48 г/л. В качаемо оокематика нспачьзованла 0,3 ?.; конценрацрю машшта.

Результаты проведенных опнтов пжаэалл, что при культивировании штаников и микроспор на безуглэаодной среде происходят морфогенэгЕПвбкаэ изменения, связашшз с голоданием мнкрооопр.

Tax, в надах опытах по аерэ возрастания длительности куль-тцБироаанйД палькдкоа н микроспор ка безугловодиой ородз в присутствии 0,3 LS кснценг'рациЕ мешшга (в частности в варианте 1), отмечается увеличение количества микроспор типа Р-зерек. Эги юшрсспора слайоокрашшаэыи к мелкие. Появление моз^одеги.--4ecicix разных ыикроспор, щадимо, связано с тем, что не вое микроспору трофичосга связшш с тнакяш стенки пыльника. Длительное кульЕиваровалко шлышкоа в условиях углеводного голодания приводки к массовой табели микроспор. При в там погибает дкг.о те микроспора, которые прикреплены к талетуму. Кроме того, по нашим даяиыч постгадодовач реабилитация микроспор завиен? ко иного;.! от углэводенх компонентов среда а условии обработки я культивирования, Так, яри перенося гшлышков и микроспор поело 2.4,6,В,10,12 суток голодания ка сроду с 0,3 М концентрацией фруктоеи во всех вариантах ни еднк пз генотипов не проявил никаких ищюгенетическЕх реакций. Оставленные на гакой среде ипфоспора прзкрацадз дзлензхэ п в конце-концов погибали.

Ткан образок,фруктоза оказывала шиибирущеэ действие на роо? ц разытио кикроспор. Hi прЕсутствиа глжкоза в.питательной среде поайг yi-леводасго голодания вешгауемно гонотига рее-

А

хь_

А

• !

14

13

Схема эксперимента по изучению "голодового стресса" в icy ль ту ре изолированных пыльников и микроспор пшеницы с последущей регенерацией.

I, Холгдоьоя предобработка погруженных в веду доиоршх рао-прц температура 4«7°Сртечзнив 4-7 суток в темнота

(I атак голодания).

2» Прздкульяшфовзете лшагспсов на базуглеводной кадкой спаде й 6 с 0,3 М концентрацией матшга при температуре 27-на круговой качалка (II этап голодания). 3. Прэдкультивлровазшв шлышков на безуглзведной твердей о^дз Й 6 с 0,3 Ц концентрацией маышга (Б мал голодания).

4; Культивирование пальников на жидкой средо Й 6 с 90 г/л,-с.;.;зрозой шы 95 г/л иалмозоЗ, ели 48 г/л глюкозой, или 48 г/л фруктозой.

5. 1\уяыив2рова1ше ьилышков и шкроопор вначале на баауг-

лзеодной средо (голодание), а ег/гзу на аддкой среда Й 6 о 90 г/л оахарозой или 95 г/л мальтозой, идц 43 г/л глагсогсг«, илк 48 г/л фруктозой.

6ч Кудьтаварование изолированных шткроснор вначале на без-угдоводнэй средо (голодание), а затеи на евдкой среде й 6 с 30 г/л саларозоИ ша 95 г/д цальяозой, шн 43 г/л глжозой, 43 г/л ^р./ктозой.

7. сУирЛСД^ОГОЕЗБ,

8, Органогенез.

9. Кавдусогеназ.

10, Регенерация гаплоидных растений.

II. Пзрзвэд рогзнврантов в водную культуру (среда Кноппа). 12. КодхакираванЕе в фазу кущения.

13^ Пер'Эвод регэяорантов в водную культуру (среда Кноппа). 14;' Пйросадка рагоиарштов е почву.

гзрозалех по-разаому. Та:;, Гибрид 2 во всех вариантах опытов

проявил никаких агдрогшеадпесках реакщй, 1йбрвд 3 в едо-ш;чншс случаях посла двухдневного голодания фор>!ЕроБал оибрио-

и калгуешз структура. Однако дальне £иеа культавированке гкяьипа» я макроспор, ивдерашпшх ь манните более 6-а суток, иа среде, содершцзл глнкову, приводило к их массовой гибели. ОггявчиЕаа гепотшш Габрцд I и Гибрид Казахстанская 126 х Эри:г-роспэрчуц 116 в ошггах П и Ш при переносе шаыиаив н микроспор, вццвргашшх в орада с ыакнитоы в случае еедкой (опыт П)

в точение двух cjtok, а твердой /опит Ш/ в точение четырех суток на сродо с 0,3 M кощентрацяей глпкозы прошили низкую частоту оыбриокдогонеза 0,20$ и 0,45% и каллусогоназа 0,57Й 0,65л. На срсдо о глпкозоЯ родов сфорларогапко адцрогошгао структуры ПОСТОП81ШО теряют «Ор|»ГОДШИ потсп'ЛОЛ Л ОЧОВНйЛ suc масса пря длительном хультшшровшпя ко ерг-дэ искротазг го» палпсь.

Культивировали« пальшш» я мкхроспор на бсзуглего^юЗ <Р>-де с 0,3 M концентрацией нанята «озяо счптйть вторе" ''лушмгто голодооого стресса. ПревнД этап голодания (.тссроспоры ггроте.п;г>» паэт Холодову о обработку, когда кодссья вшгарглваптся в течвгтг' четырех днеЛ в холодильнике, т.о. с поекрецсшег/ ¡¡жжттст-ческой деятельности донорюх растешь. Сдздсгл-е.т. :*о, . nrzzz оксперимектах применяется двухступенчатая спэгема ооазаязд "голапового стресса" о целью перекдэтошм шперссягор «а опоре» фнтнчй путь развития.

Однако, на постголодовую рояшмации накросаор огромнее ~:т> яние оказявают углеэсшша кемзоиячтн среда, лх кембгпг'дря я концентрация.

Так, в опыте П при хультнваровмти ладыглсой п мигероопор Гйбрица I и Глбрдда Казахстанская 126 х Эритроспср.ЧУ» 116 ла 4-6 суток голодания и последущего переноса па сре:(У о 60 г/л сахарозой отмечали образогшшо ембриоддоз с чгзтотоЗ 0,57 % и 1,1 <Й, & такзо каллусов 2,lit п

Лля гибрида 2 н Гибрида 3 оптимальные сказалось ?глеводпоо голодание в течени 2-4 суток» где частота окбриогдогеиеза составила 0,33£ и 0,40£, а калдусогенеоа 1,33$ а 2,0? в варианте II. 3 варианте III при культивдровалш пнльгш-ков п мткроегтор ¡¡а твердой безуглеводной среде окз звдвржпза-ля солее, длительные сроки "голодания". Это, видимо, связано с сохранением трофической связи ьтезду стенкаг.ш пшшнкка и микроспорами в период голодания. В этил варианте гибряд Казахстанская 126 х Эритроспермум 116 и Гибрид I продуцировала алд-рогешше структуры о первого дня голодания до 10 суток, в дальнейшем частота образования андрогенннх структур резко снижалась.

Со:г.рачг;-£;о орока "голодания" в жидкой среде по сравненню с гвердой средой, хшдшло связано со спонтшпшы выходом Азпсро-спор при условия постоянного двлаешш среда на качалке, т.е. разрывал трофкчзскоЯ овязя ыезду пыльником п шкроспорой.Как сЗсувдаяооь в обзорз литературы, пылышки могут вадолять в среду вещества гормонального и ферментативного характера или па ¡шаышс непосредсгвошш питает микроспоры через ткани та-сбаума.

Кроме того, благоприятное действие мальтозы на процесс вм<5риоидогеибза»воаможно, связано с индукцией формирования Р-зерен с пооледувдим (¿ортнровашзм глобулярные структур.

Как показали результаты опытов.Гкбркд I а габрвд Казахстанская 126 х Эрцтроспорм/м 116 показала наилучше результаты в опыто II, когда пшшшш и микроспор« первоначально подверглись углеводному голоданию в течение 4-6 суток, а затем культивировались на срздз.содэркащой 90 г/л сахароза. В этом случае частота индукции оыбриовдов составила 6,0?» и 9,28;», калду-оов 26,85/5 и 47,965? соответственно.

В опыта II , т.е. при культивировании изолированных мшерозпор ка срзде о 50 г/л сахарозой максимальный выход шц-рогешшх структур наблвдаатся ка 4-е сутки голодшшя, где частота эизраоздогенеза составила 3,71£ и 5,28? и каэдусогенеза 19,11% к 25,1-0.

Средпеотэнвчпвыо генотипы гибрид 2 и гибрид 3 в оште П, по сравнения) с друпаи вариантами, показала бол&а высокие результаты. При культивировании пылышков на среда с сахарозой посла 4-6 суток голодания образовалось амбриондов с частотой 1,65$ и 3,7152 и каллусов 12,28% к 17,51%.

7 генотипов Гибрпд 2 и Гибрзд 3 предел голодового даапа-зона оказался короче. Она дродуцдровалн андрогешша структуры до 6, ыакоЕцуи .до 6 суток голодц.^л, в частности,'у генотипа Гибрид 3, Таксы образом, облая частота индукции андрогекзше структур » зтшс генотипов составила 9,14$ н 16,755.

У генотипа Гибрид I частота емрновдогенеэа оказалась насколько вале (3,57$), относительно образования каллуса (17,27£), посла 4 сугск голодшия н перекоса на среду с 95 г/л цальтози. У всех нешзтуежх генотипов в от ом варианте после 6 суток го-

лодаппя частота образования аддрогетошх структур сжигалась. Причем, следует отметить, что болзе глубокое голодание .хотя и сшшает общую частоту андрогегогнх структур, но способствует образованию эмбриоидов и морфогошшх каядусса, сзобсшю ня среде с мальтозой.

На выживаемость тльщ доела голодания оказивает глнянзэ и углеводные компоненты среды. йга играет больную роль татсю при Формировании вмбриопдов и морфогеннше каллусов. Так, па среде с сахарозой у яопытуегдгх генотипов посла углеводного голодания большую часть аяцрогегашх структур составляли немор-фогошмэ калдуси. Между тем, на среде с мальтозой (95 г/л) парусу с эмбряокдамп отмечалось образование шр$«гешшх каллусов (0101 составляли 80$). Кроте того, на первичной индуцирующей средо отмечали образованно большего числа вторячкнх эибрз-оидов а адвентивных кочек. На этой среда омбрзоидн сфсршро— вались бистро в течение 25-27 суток. йткако, кок першчшо, так и вторичша эмбриоддн на шщуцирущей среде прорастали.

Таким образом, голодание является наиболее притдогаалыш Фактором повмшащим выход андрогегапхх структур.

ВЫВОДЫ

1. В результате испытания 10 сортов и б гибридных комбинаций пшеницы выявлены отзывчивые к агарогенезу сорта: Казахстанская 3, Казахстанская 4, Карагавдинская 70, Гостианум и високоотзив'ивие гибрвды: Казахстанская 126 х Эригросперг,5ум 116, Саратовская 29 х Казахстанская 3, Прогресс х Бостиацум, а также сложные гибрида: гибрвд Л I (Саратовская 29 х Линия 25 (Безостая I, яровая форма)) х (Скала х Ранг); Гибрид 2 (Скала х Целинная 21) х (Маян х Приобская); Гибрвд 3 (Смекая 17 х СБР 2098) х Шро трико 28 х Улъбинская 93). Эти генотиш рекомендуется из пользовать в экспериментальных исследованиях по акдрогенезу и в практической селекции с применением гаплоидной технологии.

2. Разработав-оптимизированная' модификация питательной среды X 6 для культивирования как пыльников,так и микроопор,дополненная I мг/л 2,4-Д; 0,2 мг /л кинэтина, 0,5 мг/л Вц,

0,5 глг/;; Bg, Г ur/я PF, I иг/л С, 100 иг/я ûsiîoseyû, 2 ыг/з гллцорЕиа, 4 мг/л глутаыдяа, 95 г/л ьальтозн, pli - 5,8.

3. Углеводен коипонвнтаиа питательной среды, нанбедае благоприятней для кадяусогенэза является сахар-за в концбнт-рацЕн 30 г/л, а для сидукцвп вабраоЕдогашза и рогвнерацга раотаниу - кальтоза 95 ыг/л.

4. Прод^льтнвдровшше ыдкроопор в точение 7 оуток с пыль-цанеуа (коэднцпЬнпрованная среда) обеспечдваэт высокий внход оздрогзших структур по сравнению с частыцд культурами изолированных культур.

5. 'Углеводное голодмше" ьшкроспор оказывает вндуцнрув-щее влияние на авдрогонез. При üi'OJ дучпзй эффект впаивает

!iголодание11 шшроспэр в твчзгаз &-3 суток, вклвчая холодовую предобработку в ■ яечзнпа 4 суток. Рекомендуется взшэчеть про-процадуру "углеводного голодания" б гаплоидную ^езнолопш для повшюнзя аддрогекного поташщада а культура пцдышков и уек-

роспор ks3iehs1.

СПИСОК

работ, оаублшювашшх по ыатериалаы диосвртацш

I'. Еал а батыров Е.Б. Регенерация гаплоидна* растений в культуре изолирование шлыиксз паакщы // Теа.докл.конф.шя. учвшис л спецдашютоз КазГУ - Алх/л-Ата, 1938, - С.97.

2. Башбатнров Е.Б. Вшшде фзтогормонов на частоту нвдук-цзн бцдротешкх структур в кульзуре пыльников пиенкцы. -

В lai.: "Актуальные проблем современной биологии",Алма-Ата, 1988. - С.122-128,

3. Балабатыров Е.Б. Суспензионная культура павницы. Тез.донл. конф.мод. учета к специалистов КазГУ. - Алма-Ата, 19890 -С.89.

4. Еа£тулаоБ К.Я., Балабатыров Е^э., Сг,;аров K.M. Влияние генотипа п питательной средн на ьддроганез0 // Тез» докл„ ЫэЕДунар. окшгазяума: "Клеточные д гвшшэ биотехнологии для зерновых злаков", Акла-Ата, 1989.

Б. Балабатиров Е.Б., Багадпев А.Б., Ражшбеев И.Р0 Регенерация з&язкнх гашювдов в к >турэ пыльников пшзницн на езд-

них средах. // Тоз; до ял. Мгздунар". симпозиума: "Кдетотпиэ а геннаэ Ояотехяодоия для зерисзнх злаков™;- -'Алма-Ата, 1989.

б. Баяабатиров Е.Б. Морфогенез в кулътуро тшдакоэ

- В гаи: // Изучение, охры'.а п рацгональпоэ :;сподьзоргл!то раотатолыпа ресурсов. - Уфа, 1989, - C.I28-I3I.

■г