Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Активность транспортных АТФаз и межклеточный обмен электролитов у сельскохозяйственных животных в норме и при включении в рацион биологически активных веществ

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Активность транспортных АТФаз и межклеточный обмен электролитов у сельскохозяйственных животных в норме и при включении в рацион биологически активных веществ"

На правах рукописи

РЫЖКОВА Галина Федоровна

АКТИВНОСТЬ ТРАНСПОРТНЫХ АТФаз И МЕЖКЛЕТОЧНЫЙ ОБМЕН ЭЛЕКТРОЛИТОВ У СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ В НОРМЕ И ПРИ ВКЛЮЧЕНИИ В РАЦИОН БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ

03.00.04-биохимия

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук

Воронеж - 2005

Работа выполнена в ФГОУ ВПО «Курская государственная сельскохозяйственная академия имени И.И. Иванова»

Научные консультанты: доктор ветеринарных наук, профессор

Вишняков Сембн Иванович доктор биологических наук, профессор Рецкий Михаил Исаакович

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор

Папин Николай Ефимович доктор медицинских наук, профессор Прокопенко Леонид Георгиевич доктор биологических наук, доцент Вашанов Геннадий Афанасьевич

Ведущая организация: Всероссийский государственный

научно-исследовательский институт животноводства

Защита состоятся 2005 года в часов на засе-

дании Диссертационного совета Д 006.004.01 во Всероссийском научно-исследовательском ветеринарном институте патологии, фармакологии и терапии (394087, г. Воронеж, ул. Ломоносова 114-6).

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке Всероссийского научно-исследовательского ветеринарного института патологии, фармакологии и терапии.

/С « »

Автореферат разослан « » (ЛШ шш 2005 г.

Ученый секретарь диссертационного совета кандидат биологических наук

Т.И. Ермакова

S7 V 1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Важнейшие достижения молекулярной биологии за последние годы связаны с изучением биологических мембран и транспортных АТФаз. Транспортные АТФазы, встроенные в биологические мембраны, образуют ионные насосы, изучение которых является ведущей проблемой для целого ряда лабораторий; ей посвящены многочисленные исследования, как в нашей стране, так и за рубежом.

Активный транспорт ионов натрия и калия через клеточную мембрану происходит с участием Na+, К - аденозинтрифосфатазы (Na+, К+ -АТФазы), которая является основным компонентом Na - насоса, поэтому его называют Na+, К+ - АТФазным насосом (Jorgensen Р., 1974; For-gae M., Chin G., 1981; Teller J.K., 1981; Albers F.W., Benthem P.P., Groot J.C., 1992; Hochgesand D.H., Dunn J.J., Crook R.B., 2001 и др.).

В настоящее время накоплены обширные экспериментальные и теоретические материалы по клеточной проницаемости, ионному транспорту, активности транспортных АТФаз и рефляции этих систем (Болдырев A.A., 1985; Кагава Я., 1985; Кометиани З.П., 1987; Евдотиенко Ю.В., с соавт., 19%; Титов В.Н., 1997; Pritehard J.B. et al., 1999; Davis-Kaplan S.R., et al., 2004 и др.). Однако изучение этих проблем в основном проводилось на изолированных клетках, тканях и лабораторных животных. Работ же по изучению активности АТФаз у сельскохозяйственных животных с учетом их возраста, физиологического состояния, продуктивности, факторов питания весьма мало, и они в основном носят фрагментарный характер.

В настоящее время установлено, что активность АТФаз, расщэеделение мо-новаленгаых электролитов, интенсивность обмена аминокислот изменяется с возрастом, при гипертонической болезни, неврозах, белковом голодании, ревматизме, болезнях щитовидной железы, депрессивных состояниях и т.д. (Болдырев A.A., 1977; Мороз А.М., 1983; Alan Swann С., 1985;StenB.Q.etaL, 1991;SlromD., Holm S., 1997; Peris S. et aL, 2000; Lipozencic J, Ljubojevic S., 2004 и др.). Следовательно, определяя активность Na+, К+- АТФазы, можно судить об интенсивности функционирования Na- насоса в различных органах и таанях сельскохозяйственных животных в зависимости от вышеуказанных факторов.

Установлено, что от активности Na-Hacoca зависит распределение натрия, калия и большинства свободных аминокислот в организме животных. Однако эта зависимость показателей обмена электролитов от активности Na+, К+ -АТФазного насоса у различных видов сельскохозяйственных животных изучена недостаточно.

В последнее время в кормлении молочных коров, как в нашей стране, так и за рубежом широкое применение находит соя, так как эта бобовая культура содержит до 54% полноценного белка, сбалансирована по аминокислотному составу, минеральным веществам. Тем самым она компенсирует дефицит белка и незаменимых аминокислот в рационах крупного рогатого скота. Однако влияние муки термически обработанного зерна сои на активность транспортных АТФаз, показатели минерального и белкового обмена изучено недостаточно.

Практически отсутствуют данные об изменении активности АТФаз, содержании моновалентных электролитов и свободных аминокислот в

тканях овец в возрастном аспекте, а

minier, при включении в рацион овец

рос НАЦИОНАЛЬНАЯ БИБЛИОТЕКА 1

СПс О»

пиридоксина, как в отдельности, так и в комплексе с серосодержащими веществами (метионином и сульфатом натрия), количество которых в кормовых рационах обычно бывает недостаточным для удовлетворения потребности животных в сере. Не изучено влияние этих добавок на шерстную и мясную продуктивность овец.

В настоящее время как дополнительные источники кормового белка широко и с успехом используются в животноводстве отходы мясной, молочной, пищевой и микробиологической промышленности (Агабабян Р.Г., 1975; Шманенков Н.Ф., 1975; Бейлин М.И., Жадан A.B., 1979; Сте-пурин Р.Ф., 1982; Кочикьянц В.И., 1983; Жадан A.M., 1984; Юрченко

B.И. с соавт., 1990; Faldet М.А., Satter L.D., 1991; Zuger К., Kraus W., 1996; Кальницкий Б.Д., 1999; Победнов A.B., Тарушкин В.И., 1999 и др.).

Вопрос использования отходов кожевенного производства в качестве протеиновой кормовой добавки является актуальной проблемой, так как они составляют 40% и более от массы кожи. Однако большинство этих отходов содержит оксид хрома (III), что требует дополнительной обработки по их дехромированию.

Разработан ряд способов дехромирования кожевенных отходов и получения из них протеиновых кормовых добавок (Хорин А.Н., 1976; Smith L.R., 1976; Hollwey D.E., 1977; Баскова H.A. и др., 1978; Уруджев P.C., 1979; Barti-aux-Thill N., Francois E, 1980, Rosebnongh R.W., Steele N.C., 1981; Вишняков

C.И. с сотр., 1983, 1985, 1986, 1998 и др.). Получаемые препараты содержат различные количества хрома (Ш). Поэтому их широкое использование в рационах свиней требует изучения не только физиологических и зоотехнических показателей животных, но и исследований, связанных с влиянием добавок из дехром ированных кожевенных отходов на состояние белкового, минерального обменов и ролью транспортных АТФаз в этих процессах

Изучение активности АТФаз, обмена моновалентных электролитов, аминокислот у различных видов сельскохозяйственных животных позволит более глубоко раскрыть интимные биохимические процессы в организме в норме, а также при применении животным различных биологически активных веществ. Все вышеизложенное и определило общую направленность работы, выбор методических подходов и экспериментальных моделей.

Цель и задачи исследований. Целью настоящей работы явилось изучение активности АТФаз, распределение моновалентных электролитов и свободных аминокислот в тканях различных видов сельскохозяйственных животных в зависимости от возраста, репродуктивных периодов в норме и при введении в рацион витаминных, серосодержащих и протеиновых добавок.

Для достижения этой цели на разрешение были поставлены следующие задачи:

1. Установить зависимость активности АТФаз от состава и pH инкубационной среды и изучить в сравнительном аспекте АТФазную активность, содержание натрия, калия и свободных аминокислот в тканях коров и телят в норме.

2. Определить активность АТФаз, распределение моновалентных электролитов и свободных аминокислот между эритроцитами и плазмой крови коров в зависимости от фенологических репродуктивных периодов;

] MilOi.i, {»4 4j I- '<r»iH«»ff j ? i , t*; 4ti-

3. Изучить влияние соевой муки на активность транспортных АТ-Фаз, показатели минерального и белкового обмена в тканях коров в период лактации и на молочную продуктивность животных.

4. Определить АТФазную активность, распределение натрия, калия и свободных аминокислот между эритроцитами и плазмой крови овец и ягнят.

5. Изучить АТФазную активность, содержание моновалентных электролитов и свободных аминокислот в тканях овец при введении в рацион пиридоксина и серосодержащих добавок и влияние данных добавок на шерстную и мясную продуктивность животных.

6. Провести сравнительное изучение активности АТФаз, распределения натрия, калия и свободных аминокислот между эритроцитами и плазмой крови у свиноматок и поросят, а также изменения этих биохимических показателей в различные репродуктивные периоды у свиноматок.

7. Определить химический состав протеиновой кормовой добавки из дехромированных кожевенных отходов и изучить активность АТФаз, содержание и распределение моновалентных ионов в тканях при введении свиньям различных доз оксида хрома (III).

8. Изучить влияние протеиновой кормовой добавки из дехромированных кожевенных отходов на активность транспортных АТФаз, показатели минерального и белкового обмена в тканях свиней, их физиологическое состояние и продуктивность.

Научная новизна и теоретическая значимость работы. На основании проведенных исследований установлены изменения активности транспортных АТФаз и распределение электролитов в органах и тканях сельскохозяйственных животных.

Впервые установлено, что у коров в период глубокой стельности АТФазная активность снижается и увеличивается соотношение K:Na, одновременно падает уровень свободных аминокислот в эритроцитах и плазме крови. В период лактации АТФазная активность и соотношение моновалентных электролитов нормализуется, при этом содержание свободных аминокислот повышается и колеблется в пределах нормы в течение всего молочного периода. У телят обменные процессы протекают более активно, чем у коров-матерей. Включение в рацион коров соевой муки оказывает стимулирующее влияние на активность транспортных АТФаз, показатели белково-минерального обмена, иммунобиологическую реактивность лактирующих коров. Также показано, что у новорожденных ягнят активность АТФаз и соотношение K:Na значительно выше, чем у овцематок. Комплексное использование пиридоксина и серосодержащих веществ в рационах овец приводит к снижению активности АТФаз, но при этом у животных не выявлено нарушения обмена моновалентных катионов между эритроцитами и плазмой крови; содержание же свободных аминокислот у них заметно увеличивается, повышается продуктивность овец и качество шерсти. Впервые установлено, что у поросят-сосунов активность АТФаз, соотношение K:Na в тканях выше, чем у взрослых животных, а суммарное содержание свободных аминокислот в эритроцитах и плазме крови у свиноматок значительно выше, чем у молодняка. У свиноматок в различные репродуктивные периоды активность АТФаз существенно не изменяется. При этом максимальное содержание моновалентных катионов отмечается в супоросный период, минимальное: калия - у холостых, а натрия - у подсосных свиноматок.

Впервые показано, что скармливание свиньям протеиновой добавки с повышенным содержанием хрома III (более 400 мг/кг сухого вещества препарата) или дача животным токсических доз оксида хрома (Ш) (1,5 - 4,0 г/кг массы тела) сопровождается снижением активности АТФаз и увеличением содержания хрома в органах и тканях свиней. Включение в рацион свиней протеиновой кормовой добавки из дехром ированных кожевенных отходов с содержанием в ней хрома не более 7,0 мг/кг способствует повышению активности АТФаз, нормализации соотношения моновалентных элеетролигов, увеличению суммарного количества свободных аминокислот в тканях. При этом более существенно повышается интенсивность роста животных, по сравнению с использованием в рационе свиней эквивалентного количества мясокостной, рыбной муки и шротов.

Новизна полученных результатов подтверждена авторскими свидетельствами на изобретение №№ 1076062, 1169592, 1205345, 1287329, 1302470, 1561234 и патентами №№ 1817683,2062036.

Практическая значимость и пути ее реализации. Комплексное определение активности Na+, К+ - АТФазы, содержания натрия, калия, свободных аминокислот в тканевых гомогенатах и субклеточных фракциях является чувствительными биохимическими тестами, позволяющие объективно судить о состоянии метаболических процессов в организме сельскохозяйственных животных в зависимости от их возраста, физиологического состояния, характера протеинового питания.

Доказана возможность широкого использования в рационах овец пиридоксина и серосодержащих веществ, как в отдельности, так и в комплексе; в составах рационов и комбикормов для свиней - протеиновой комовой добавки из кожевенных отходов с содержанием в ней хрома (III) не более 10 мг/кг сухого препарата; в составе рационов и зер-носмесей для коров - соевой муки.

На основании проведенных исследований Государственным Агропромышленным комитетом СССР yi верждено Временное наставление по применению в свиноводстве протеиновой кормовой добавки из дехромированных кожевенных отходов, а Управлением развития кожевенной, обувной и кожга-лантерейной промышленности Министерства легкой промышленности СССР утверждены технические условия на протеиновую кормовую добавку из отходов кожевенного производства ТУ 17-06-115-85.

По результатам проведенных исследований разработано Методическое пособие по выделению, очистке и изучению транспортных АТФаз в органах и тканях животных, которое рассмотрено, одобрено и рекомендовано к изданию секцией «Патология, фармакология и терапия» Отделения ветеринарной медицины РАСХН (протокол №1 от 24 марта 2005 г.). Результаты исследований включены также в Методические рекомендации по диагностике, терапии и профилактике нарушений обмена веществ у продуктивных животных, которые рассмотрены, очобрены и рекомендованы к изданию секцией «Патология, фармакология и терапия» Отделения ветеринарной медицины РАСХН (протокол № 2 от 8 июля 2005 г.).

Основные положения, выносимые на защиту: - изменения АТФазной активности и распределение электролитов в тканях сельскохозяйственных животных (коров, овец, свиней) в зависимости от их возраста;

- изменение АТФазной активности, содержания моновалентных катионов и свободных аминокислот в тканях коров в различные репродуктивные периоды и при включения в их рацион соевой муки;

- влияние пиридоксина и серосодержащих веществ на АТФазную активность, распределение натрия, калия и свободных аминокислот в тканях овец, а также на продуктивность и качество шерсти животных;

- химический состав протеиновой кормовой добавки из дехромиро-ванных кожевенных отходов и ее влияние на организм свиней и их продуктивность;

- изменение активности АТФаз, соотношения моновалентных катионов и показателей минерального обмена при отравлении свиней оксидом хрома (III);

- динамика активности транспортных АТФаз, содержания натрия, калия, хрома, свободных аминокислот в тканях свиней в зависимости от количества хрома (III) в протеиновой кормовой добавке из дехромиро-ванных кожевенных отходов.

Апробация работы. Материалы диссертационной работы доложены на: Всесоюзной научно-технической конференции молодых ученых «Актуальные вопросы профилактики и лечения болезней у сельскохозяйственных животных» (Москва, 1985); Городской научной межвузовской конференции «Молодые ученые вузов - производству и народному хозяйству» (Курск, 1986); Секции биохимии Московской академии ветеринарной медицины и биотехнологии (Москва, 1987); Второй отчетной научно-технической конференции СКТБ Курского научно-производственного кожевенно-обувного объединения (Курск, 1988); Всесоюзном симпозиуме «Биохимия сельскохозяйственных животных и продовольственная программа» (Киев, 1989); Всесоюзной научно-практической конференции «Эффективность использования кормов в птицеводстве» (Новосибирск, 1990); Научной конференции профессорско-преподавательского состава Белгородской сельскохозяйственной академии «Пути возмещения дефицита протеина в рационах сельскохозяйственных животных» (Белгород, 1990); Межвузовской конференции «Спектрометрические методы анализа окружающей среды» (Курск, 1995); Научно-практической конференции «Повышение эффективности функционирования АПК» (Курск, 1995); Научно-практической конференции, посвященной 25-лстию факультета ветеринарной медицины Курской государственной сельскохозяйственной академии (Курск, 1997); 10, 12 и 15 Международных научно-практических конференциях «Новые фармакологические средства в ветеринарии» (Санкт-Петербург, 1998, 2000, 2003); Научно-практической конференции «Проблемы межклеточного обмена электролитов, белково-минерального питания и резистентности животных» (Курск, 1998); Научно-практической конференции «Пути повышения продуктивности, воспроизводительной способности, профилактики и лечения сельскохозяйственных животных» (Курск, 1999); Всероссийской научной конференции «Вопросы общей биологии в ветеринарии» (Москва, 2000); Международной научно-практической конференции «Научно-прикладные аспекты состояния и перспективы развития животноводства и ветеринарной медицины», по-

священной 50-летию основания Курской государственной сельскохозяйственной академии (Курск, 2001), всероссийской научно-практической конференции, посвященной 120-легию ветеринарной службы Курской области (Курск, 2005), а также на ежегодных научных конференциях профессорско-преподавательского состава Курской государственной сельскохозяйственной академии им. профессора И.И. Иванова в 1985-2005 г.г.

Публикации результатов исследований. Основные материалы диссертации изложены в 40 печатных работах, из которых 8 статей в центральной печати; Методическое пособия по выделению, очистке и изучению транспортных АТФаз в органах и тканях животных; 8 авторских свидетельств и патентов на изобретения и 1 положительное решение о выдаче патента.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследований, результатов собственных исследований и их обсуждения, выводов, практических предложений, списка литературы и приложений. Работа изложена на 304 страницах машинописного текста, содержит 92 таблицы и 36 рисунков. Список использованной литературы включает 455 источников, в том числе 244 иностранных.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Экспериментальная часть работы выполнена в 1985-2005 г.г. в Курс кой государственной сельскохозяйственной академии им. проф. И.И. Иванова, учебно-опытном хозяйстве № 1 Курской госсельхозакадемии, хозяйствах Курской области. Схема основных экспериментов представлена на рисунке 1.

Объектом исследования были: коровы (п=56) и телята (п=34) симментальской и черно-пестрой породы; овцематки (п=80), ягнята (п=20) и валухи (п=20); свиньи (п=238) и поросята-сосуны (п=130) крупной белой породы. Животных подбирали по принципу аналогов с учетом происхождения, массы тела, возраста и развития. Все животные находились в одинаковых условиях кормления и содержания при постоянном соблюдении распорядка дня и обеспечении необходимых условий. Кормление производилось в соответствии с нормами, рекомендованными ВИЖем. Оценка питательности кормов и балансирование производилось по таблицам М.Ф. Томмэ (1963), А.П. Калашникова и Н.И. Клейменова (1985). Во время опытов осуществляли контроль за состоянием здоровья животных, вели наблюдение за приемом и поедаемостью корма, учитывали их реакцию на различные внешние раздражители.

Кровь для исследований у крупного рогатого скота и овец брали из яремной, у свиней - из хвостовой вены. В качестве антикоагулянта применяли гепарин. Гепаринизированную кровь сразу же помещали в термос со льдом и через 15-20 минут доставляли в лабораторию.

При проведении биохимических исследований определяли следующие показатели: АТФазную активность - по К. Keeton и J. Koneko (1972); при этом фосфор - по Fiske F., Subbaroy G. (1925). Активность Na+,K+ - АТФазы рассчитывали по разности между общей и уабаинне-чувствительной АТФ-азной активностями. Содержание натрия и калия в

Рис. 1. Общая схема исследований

эритроцитах и плазме крови - методом пламенной фотометрии по Г.И. Герчиковой (1963) и A.A. Покровскому (1969). Содержание хрома -атомно-абсорбционным методом на спектрофотометре AAS - IN в условиях лаборатории кафедры аналитической химии Санкт-Петербургского государственного университета, а также колориметрическим методом с дифенилкарбазидом по С.И. Вишнякову, С.А. Леван-товскому, Г.Ф. Рыжковой (1983). Содержание аминокислот в тканях -на автоматическом анализаторе «Хитачи» в лаборатории Курской биофабрики и методом нисходящей хроматографии на бумаге по Р.Х. Кар-молиеву (1971) в модификации С.А. Левантовского (1973). Общий белок в сыворотке крови определяли биуретовым методом, в тканях - ло Кьельдалю. Содержание общих иммуноглобулинов в сыворотке крови определяли колориметрическим методом (Вишняков С.И., Левантов-ский С.А.,1980). Гистологические и гистохимические исследования органов и тканей проводили в условиях лаборатории кафедры анатомии и хирургии Курской государственной сельскохозяйственной академии. РНК выявляли методом Ж.Браше (1950) в модификации М.С. Жакова, И.М. Карпуть (1970); ДНК - методом Фельгена (1967); гликоген - методом A.A. Шабадаша (1947).

Результаты опытов обрабатывались статистически по Дж.У. Снеде-кор (1961), А.П. Плохинскому (1974), Г.Ф. Лакину (1980) с использованием t-критерия Стьюдента. Различия рассматривались как достоверные при Р<0,05.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

3.1. АТФазная активность и распределение электролитов в тканях крупного рогатого скота

Исследования проведены на коровах и телятах симментальской породы. Кровь для исследований брали в следующие сроки: а) при изучении биохимических показателей у коров - в течение 5-6 дней после отела, у телят в возрасте 3-4 месяцев; б) при изучении биохимических показателей в различные репродуктивные периоды коров - за 5-10 дней до отела и на 15,20,30,90 и 150 дни после отела и далее ежемесячно до запуска. Органы и ткани исследовали после убоя животных.

3.1.1. АТФазная активность мембран эритроцитов и распределение натрия, калия и свободных аминокислот между эритроцитами и плазмой крови коров и телят

Проведенные исследования позволили установить, что у телят активность Na+, К+ - АТФазы мембран эритроцитов в 1,5 раза выше, чем у коров (табл. 1). По всей вероятности, возрастные различия АТФазной активности мембран эритроцитов крупного рогатого скота связаны с конформационными особенностями их белкового компонента. При этом следует подчеркнуть, что транспортная Na+, К+ - АТФаза составляет лишь небольшую часть белков стромы эритроцитов.

Что касается содержания моновалентных электролитов в крови крупного рогатого скота, то нами установлено, что в эритроцитах и ге-

моглобине новорожденных телят содержится примерно в 2 раза меньше натрия и в 2,5 - 3,0 раза больше калия, чем в аналогичных пробах коров-матерей (табл. 2).

Таблица 1

Активность К+ - АТФазы теней эритроцитов коров и телят

РН = 7,4)

Условия определения Ыа+, К+ - АТФазы Удельная активность Ыа+,К+-АТФазы, нМоль Р,/мг белка в мин.

коровы (п=10) телята (п=10)

Общая АТФаза (№+-115,0 мМ; К+-20,0 мМ; -5,0 мМ) минус Мя2*-АТФаза (Мя*+-мМ) 0,40 ± 0,03 0,55 ± 0,07*

Общая АТФаза минус уабаин-нечувствительная АТФаза (Ыа+-115,0 мМ; 1С"- 20,0 мМ; М§2+-5мМ; уабаин - 10"4 М) 0,37 ± 0,04 0,53 ± 0,04**

Примечание:*- Р<0,05; **- Р<0,01

Таблица 2

Содержание натрия и калия в компонентах крови коров и телят, __мг-экв/л_

Группы животных Плазма Эритроциты Строма Гемоглобин

N3 К № К N3 К № К

Коровы, (п=10) 128,8 ±5,3 4,4 ±0,6 86,0 ±6,6 22,1 ±3,4 11,9 ±1,2 5,0 ±0,4 111,8 ±8,8 30,2 ±2,4

Телята в возрасте 6 дн, (п=10) 133,2 ±6,8 5,2 ±0,5 45,8 ±4,8* 60,2 ±4,6* 11,5 ±1,1 7,8 ±1,6 66,9 ±4,2* 11,Ъ ±4,5*

Телята в возрасте 34 мес, (п=10) 127,6 ±6,4 4,0 ±0,4 78,6 ±4,3 25,8 ±3,8 11,8 ±1,4 7,0 ±0,8 112,6 ±9,8 35,8 +2,8

Примечание: * - Р<0,001 по сравнению со взрослыми животными

С возрастом у телят постепенно увеличивается содержание натрия и уменьшается количество калия в эритроцитах и к 3-4-х месячному возрасту эти показатели у них приближаются к уровню взрослых животных.

При изучении электролитного состава стромы эритроцитов у коров и телят установлено, что у новорожденных телят связанных ионов калия содержится примерно в 1,5 раза больше, чем у взрослых животных. С возрастом происходит снижение концентрации этого катиона. Причем у телят на 2 иона калия, находящегося в строме, приходится 3 иона натрия, что соответствует соотношению этих ионов при связывании их транспортной системой плазматической мембраны. У коров в строме эритроцитов содержание натрия примерно в 2,2 раза выше, чем калия. Полученные данные дают основание предполагать, что у крупного ро-

гатого скота наблюдаются возрастные изменения проницаемости мембран эритроцитов для ионов.

Таким образом, в строме эритроцитов, как телят, так и коров обнаруживаются значительные количества натрия и калия, несмотря на многократную обработку этих клеток замораживанием-оттаиванием и отмыванием их изотоническим раствором глюкозы. По-видимому, ионы Иа+ и К+ либо прочно связаны с компонентами стромы эритроцитов, либо находятся в ее толще. Не исключено, что часть натрия и калия, обнаруживаемая в строме эритроцитов, находится в составе их биологических компонентов-переносчиков, которые после присоединения катионов этих металлов перешли, по-видимому, в гидрофобное состояние. Селективное связывание натрия и калия в биологических мембранах может происходить ионообменными участками транспортной Ыа+, К+ - АТФазы, активность которой у коров в 1,5 раза ниже, чем в строме эритроцитов телят.

Поскольку активный транспорт натрия из эритроцитов в плазму крови происходит более активно у телят, чем у коров, то это способствует более интенсивной сопряженной транспортировке аминокислот из плазмы крови в эритроциты. При этом просматривается определенная взаимосвязь между «откачиванием» N8 из клеток и поступлением в них аминокислот против концентрационного градиента, что особенно выражено у телят. Уровень свободных аминокислот в эритроцитах у телят примерно в два раза выше, чем в плазме.

В плазме крови количество большинства свободных аминокислот (глутаминовой и аспарагиновой, глицина, аланина, тирозина, серина, треонина, метионина и цистина) у коров и телят примерно одинаково. И только уровень лизина, аргинина, валина, гистидина и лейцинов у коров достоверно выше, чем у телят.

Разница в содержании свободных аминокислот в эритроцитах в зависимости от возраста выражена более значительно. В эритроцитах у телят по сравнению со взрослыми животными установлен более низкий уровень цистина, лизина, аргинина, валина, лейцинов, гистидина и метионина. Причем у телят отмечается более низкая концентрация главным образом незаменимых аминокислот. Для остальных аминокислот возрастные различия несущественны. Аминокислотный состав плазмы крови характеризуется большим постоянством. Но, несмотря на более низкий уровень свободных аминокислот в плазме крови новорожденных телят, указанные механизмы обеспечивают примерно одинаковый коэффициент их распределения ((}) между эритроцитами и плазмой крови, как у телят, так и у коров.

Диапазон колебаний коэффициента С? у коров составляет 2,32-1,23, у телят - 2,17-1,44, за исключением цистина, для которого значение 0 превышает вышеуказанные границы. Независимо от возрастного фактора наиболее высокий коэффициент О характерен для лизина и цистина, низкий - для серина, аргинина, лейцинов. Остальные аминокислоты занимают промежуточное положение. Это дает основание полагать, что степень связывания различных аминокислот эритроцитами неодинакова, то есть различные аминокислоты по разному сорбируются и десор-

бируются эритроцитами, но проявляющаяся при этом закономерность у коров и телят для каждой отдельной аминокислоты остается однотипной.

3.1.2. АТФазная активность, распределение натрия, калия и свободных аминокислот в органах и тканях коров симментальской породы

Как показали проведенные исследования, гомогенаты тканей коров обладают высокой АТФазной активностью. В гомогенате почек активность №+, К+-АТФазы (в нМоль Р,/мг белка в мин) составила 66,2±5,8; двенадцатиперстной кишки - 74,8+6,8; в спинном мозге и скелетной мышце активность фермента немного ниже и соответственно составляет 41,2±3,0 и 40,8+2,6, а в печени и сердце его величина еще ниже - 25,4±2,8 и 32,4±2,7 соответственно (рис. 2).

Скелетная Печень Почки Сердце Спинной 12-перстная мышца мозг кишка

■ М&ЫаД - АТФаза □ Мв- АТФаза П ЫаД - АТФаза

Рис. 2. Активность АТФаз (нМоль Р,/мг белка в мин) в органах и тканях коров симментальской породы

Кроме того, не установлено прямой зависимости между активностью транспортной Иа+, К+ -АТФазы и соотношением К:Ыа в органах и тканях, особенно в 12-перстной кишке, почках и спинном мозге. Так, несмотря на высокую АТФазную активность, величины соотношения К:Ыа в этих тканях довольно низкие и соответственно равны 1,15; 0,99 и 1,40. В мышечной же и сердечной ткани активность АТФаз была более низкой при относительно высоком калиево-натриевом соотношении (4,39 и 3,18).

Результаты исследования содержания моновалентных электролитов в органах и тканях показали, что наибольшее количество калия содержится в сердце - 94,2±4,8 мг-экв/кг сырой ткани. В скелетной мышце, печени, спинном мозге его уровень несколько ниже и составляет соответственно 86,9±4,7; 87,8±3,6 и 70,6±4,0 мг-экв/кг сырой ткани. Высокое содержание натрия установлено в ткани кишечника (64,8±3,6), спинном мозге (50,4±3,2), почках (64,2±4,2), а наименьшее - в скелетной мышце (19,8+2,9 мг-экв/кг сырой ткани).

При исследовании аминокислотного состава органов и тканей коров наиболее низкое суммарное содержание свободных аминокислот уста-

новлено в клетках тканей мышцы и сердца, соответственно 29,99±3,32 и 36,82±4,42 мг%. Более высокий уровень суммы аминокислот характерен для печени и почек, соответственно 47,65±4,27 и 54,82±4,69 мг%. Для этих тканей характерно более высокое содержание гистидина, треонина, тирозина, метионина, фенилаланина, лейцинов, чем в мышце и сердце. Однако количество аргинина и аспарагиновой кислоты достоверно выше в клетках мышцы и сердца (Р<0,001), чем почек и печени. В почках содержится больше серина, глутаминовой кислоты, метионина, чем печени. Указанные различия, по-видимому, объясняются различной степенью использования этих аминокислот в биосинтезе белка клеток различных тканей, а также неодинаковой скоростью их транспорта через плазматическую мембрану.

3.1.3. Содержание натрия и калия в некоторых органоидах клеток коров симментальской породы

Выделение ядерной и митохондриальной фракций проводилось путем дифференциального центрифугирования в рефрижераторной центрифуге по методу Robertson J. D. (1964) и Буркова И.А. и Киселева А.Ф. (1970).

Установлено, что митохондрии и ядра клеток печени и сердца содержат значительные количества прочно связанных ионов натрия и калия. При этом содержание связанного натрия от общего его количества в тканях составило: в ядрах печени 25,0% и сердца 15,7%, митохондриях печени 15,1% и сердца 15,4%; калия соответственно 23,5; 12,5; 10,8 и 5,5 % (табл. 3).

Таблица 3

Содержание натрия и калия в митохондриях и ядрах печени

и сердца коров

Натрий Калий

в% в%

Объект мг-экв к содержа- мг-экв к содержа-

исследования /1000 г сы- нию /1000 г сы- нию в цель-

рой ткани в цельной рой ткани ной

крови крови

Печень

Гомогенат 30,5 ± 1,6 - 88,5 ±1,4 -

Митохондрия 4,6 ± 0,6 15,1 9,6 ±1,5 10,8

Ядра M±0L5 25,0 20,8 ±0,25 23,5

Сердце

Гомогенат 30,5 ± 1,5 - 89,5 ± 3,5 -

Митохондрия 4,7 ± 0,3 15,4 5,00 ± 0,25 5,5

Ядра 4,8 ± 0,3 15,7 11,2 ±0,25 12,5

Как видно из приведенных данных, в изученных органоидах натрий и калий находятся в значительных количествах (от 5,5 до 25,0%) в связанном состоянии. Ядра печени лучше связывают натрий и калий, чем аналогичные органоиды сердца. Митохондрии обеих тканей относительно лучше связывают натрий, чем калий.

3.1.4. АТФазная активность, распределение натрия, калия и свободных аминокислот между эритроцитами и плазмой крови коров в различные репродуктивные периоды

Установлены различия в АТФазной активности, соотношении натрия и калия и содержании свободных аминокислот в эритроцитах и плазме крови коров в различные репродуктивные периоды. Активность транспортных АТФаз наиболее заметно снижается в конце сухостойного периода (за 9-10 дней до отела), затем происходит постепенное увеличение их активности, которая достигает максимума во время пика лактации (табл. 4)

Таблица 4

АТФазная активность теней эритроцитов коров в предродовой и послеродовой периоды и разгар лактации, нМоль Р,/мг белка в мин при

Транспортные АТФазы 9-10 дней до отела 15-20 дней после отела Разгар лактации (20-30 день)

Общая АТФаза (М§2+,Ыа+,К+-АТФаза) 2,32 ± 0,09* 2,66 ± 0,08* 2,34 ± 0,06***

М^+-АТФаза 1,31 ±0,06* 1,51 ±0,06* 1,14 ±0,03**

Ыа+,К+-АТФаза 1,01 ±0,03** 1,15 ±0,02** 1,20 ± 0,03***

Примечание: * - Р<0,05; ** - Р<0,01; *** - Р<0,001 Содержание натрия в эритроцитах и плазме крови (рис. ЗА) в предродовой период было достоверно более высоким, чем в послеродовой период и разгар лактации. Содержание калия (рис. ЗБ) в компонентах крови во все физиологические периоды исследований находилось примерно на одном уровне.

1Ю

160 140 120 100 10 60

-ж-

йй

Предродовой Послеродовой Разгар период период лактации

О Иа эритроцитов П \а плазчы

Послеродовой Рвдар .юстиции период

□ Ктритроцитов ПК плазмы

Б

Рис. 3. Динамика содержания натрия (А) и калия (Б) в эритроцитах и плазме крови коров в предродовой и послеродовой периоды и разгар лактации 15

В связи с этим величина соотношения моновалентных электролитов в эритроцитах и плазме крови коров в послеродовой период и разгар лактации была более низкой.

Таким образом, установлена обратная взаимосвязь между уровнем активности АТФаз и соотношением натрия и калия в эритроцитах у коров в различные репродуктивные периоды.

В предродовой период в эритроцитах и плазме крови установлен наиболее низкий уровень свободных аминокислот (табл. 5).

Таблица 5

Суммарное содержание свободных аминокислот в эритроцитах и плазме крови коров в различные репродуктивные периоды

Репродуктивные периоды £ свободных аминокислот

Эритроциты Плазма

Предродовой 30,85 ± 1,68 12,15 ± 1,05

Послеродовой (дни):

третий 35,31 ±1,18 19,65 ± 0,56*

пятый 38,52 ± 1,17* 18,43 ±0,75*

десятый 40,97 ± 1,34* 15,74 ±0,67

пятнадцатый 42,05 ± 1,37* 15,51 ±0,75

Разгар лактации 30,92 ± 2,46 15,06 ± 1,18

Примечание: *- Р<0,05 по сравнению с предродовым периодом

В плазме крови сравнительно с первыми 3-5 днями послеродового периода наиболее значительна разница по метионину, валину, лизину (Р<0,01- Р<0,001), фенилаланину, гистидину, а также по заменимым аминокислотам: цистину, серину, глицину, тирозину и глутаминовой кислоте (Р<0,02-0,001).

Подобные различия в концентрации аминокислот сохраняются и к 15-му дню лактации. Однако они статистически достоверны только для лейцинов, гистидина, тирозина и глутаминовой кислоты (Р<0,02-0,01).

В эритроцитах из незаменимых аминокислот наиболее низкий уровень метионина, валина, треонина, аргинина, гистидина, лизина, а из заменимых: аланина, тирозина, глутаминовой и аспарагиновой кислот (Р<0,05-0,001). По-видимому, в предродовой период в организме коров происходит расходование большого количества аминокислот и энергии АТФ не только на усиленный рост плода, но и на образование промежуточных продуктов обмена для последующей лактации.

После отела (3-5 день) наблюдается рост уровня свободных аминокислот вначале в плазме, а затем в эритроцитах (10-15 день), что, вероятно, связано с их перераспределением и накоплением в эритроцитах для последующего использования в период наиболее интенсивной функции молочной железы. При этом отмечается постепенное выравнивание общего количества аминокислот в плазме и приближение его к уровню, отмеченному в разгар лактации.

Поступление свободных аминокислот в клетку сопряжено с активным «откачиванием» из нее ионов натрия, поэтому отмечается связь между изменением концентрации свободных аминокислот, отношением Иа/К в ней

и активностью транспортных АТФаз в различные репродуктивные периоды у коров.

3.1.5. АТФазная активность мембран эритроцитов коров в зависимости от ионного состава и рН инкубационной среды

АТФазная активность мембран эритроцитов у животных изменяется в зависимости от ионного состава инкубационной среды. В отсутствии в среде ионов Иа , К и активность фермента не обнаружена. При

добавлении же к инкубационной среде ионов и К+ регистрировали очень слабую его активность, примерно одинаковую для обоих объектов исследования (табл. 6).

Таблица 6

Влияние ионов К+, М§2+ и уабаина на АТФазную активность

теней эритроцитов (рН = 7,4)

Ионный состав инкубационной среды, мМоль Удельная активность Ыа+, К+ - АТФазы, нМоль Р,/ мг белка в мин.

коровы (п=10) телята (п=10)

Отсутствие ионов К+ и Мя2+ 0 0

Ыа+- 115,0; К+-20,0 0,17 ±0,01 0,19 ±0,01

М^+-5,0 0,39 ± 0,05 0,65 ± 0,06*

115,0; К+- 20,0; Мк^-5,0 0,79 ± 0,08 1,20 ±0,13

115,0; К+-20,0; 5,0; уабаин-Ю^М 0,42 ±0,04 0,67 ±0,09*

; - т_

Примечание: *-Р<0,05-0,01

Активность АТФазы заметно повышалась при наличии в инкубационной среде ионов , Ыа+ и К+. Под действием уабаина активность АТФазы, чувствительной к комплексу ионов К+ и снижалась в строме эритроцитов животных обеих возрастных групп примерно до величин, обнаруживаемых при наличии в инкубационной среде только ионов Следовательно, под действием уабаина Иа+, К+ - АТФаза почти полностью блокируется. Поэтому активность транспортной №+,К+-АТФазы определяли как разницу между общей АТФазой (№+, М^-АТФазой) и М^ - АТФазой.

3.1.6. Влияние соевой муки на АТФазную активность, распределение моновалентных электролитов и аминокислот в крови коров

При мировом дефиците белка очень важное значение имеет сбалансированное протеиновое и аминокислотное питание животных. В последние десятилетия структура кормов существенно изменилась. Редкими стали рыбная мука, дрожжи. Такое сырье, как мясокостная мука, сухое молоко - дорогостоящие, поскольку завозятся из Ближнего и Дальнего зарубежья. В связи с этим в животноводстве актуальным является в большей мере использование местных кормовых источников, имеющих большую биологическую ценность. К таким источникам можно отнести зерно сои.

Соевую муку, используемую в кормлении коров опытной группы, получали путем обработки ее зерна на АВМ-04 при температуре 110°С в течение 20 мин. Затем зерно измельчали на молотковой дробилке. 06-

работанная таким образом соевая мука представляла собой сухой рассыпной продукт желто-коричневого цвета, приятного запаха, с крупностью помола, не превышающей 3 мм.

Коровы контрольной группы получали рацион, в общем протеине которого 25% занимал протеин кормовой ячменно-пшеничной муки, а опытной группы - протеин муки термически обработанного зерна сои. Сравнительный анализ химического состава соевой муки (СМ) и кормовой ячменно-пшеничной муки (КЯПМ) показал, что по уровню сырого протеина, содержанию минеральных веществ (кальция, фосфора, магния, меди), сумме аминокислот, в том числе незаменимых соевая мука превосходит ячменно-пшеничную в 2,5-3 раза.

Как показали проведенные исследования, включение в рацион коров соевой муки стимулирует активность транспортных АТФаз и белково-минеральный обмен. В мембранах эритроцитов лактирующих коров удельная активность общей К+ - АТФазы превышает этот показатель у кон-

трольных животных на 12,1%; - АТФазы - на 10,0%, Иа+, К+ - АТФазы -на 13,9%; в сухостойный период соответственно - на 6,1; 7,2 и 5,0 % (рис. 4).

□ Контроль ■ Опыт

^ I » к

А © Р- 8 < «

Рис. 4. Активность АТФаз мембран эритроцитов (нМоль Р1/мг белка в мин) коров в период лактации и сухостойный период при введении в рацион соевой муки

Ферментативная активность изученных транспортных систем изменяется и в ходе лактации (рис. 5). Так, общая, 2+- и К+ - АТФазная активность варьируют: в контроле соответственно от 0,61+0,02 до 0,79+0,05; от 0,29+0,01 до 0,35+0,03 и от 0,32+0,01 до 0,44±0,02 нМоль Р1/мг белка в мин, в опыте - от 0,66+0,01 до 0,88±0,05; от 0,30±0,01до 039± 0,02 и от 0,34+0,01 до 0,49+0,03 нМоль Р^мг белка в мин соответственно. Причем наиболее высокий уровень АТФазной активности приходится на 5 и 6 месяцы лактации, наиболее низкий -на 9 и 10 месяцы, как у опытных, так и у контрольных животных. При этом у животных, получавших соевую муку, прирост ферментативной активности был выше, чем у контрольных во все месяцы лактационного периода.

123456789 10 Месяцы лактации

Рис. 5. Активность Ма+,К+ -АТФазы мембран эритроцитов коров по месяцам лактации при включении в рацион соевой муки

В период сухостоя активность всех транспортных систем гораздо ниже, чем у л актирующих коров, как в опытной, так и в контрольной группах.

Следовательно, в различные физиологические периоды в организме происходит перестройка ферментативной активности. По-видимому, это изменение носит адаптивный характер и направлено, прежде всего, на формирование и развитие плода, а также образование молозива и молока.

Установлена прямая зависимость между активностью №+Д+-АТФазы и соотношением К:Ыа в эритроцитах коров. Соотношение моновалентных электролитов уменьшается в период сухостоя за счет увеличения концентрации натрия, что свидетельствует о снижении активности Иа, К - насоса После отела и особенно в разгар лактации повышается как активность Ка+Д+- АТФазы, так и соотношение К№ в эритроцитах, то есть отмечается параллелизм между вышеупомянутыми показателями. Это дает основание считать, что при снижении уровня генерации АТФ в эритроцитах происходит перераспределение катионов между клеткой и ее средой, приводящее к ослаблению функции Ыа+, К+ - АТ-Фазного насоса, в результате чего клетки теряют ионы к и поглотают ионы Ыа+.

Соотношение К'ЛЧа в эритроцитах животных обеих подопытных фупп несколько повышается к концу лактации: у животных контрольной группы с 3,80 (1 месяц) до 4,27 (10 месяц); у опытных животных с 3,59 (1 месяц) до 4,13 (10 месяц). В сухостойный период величина этого соотношения составляет в опыте - 4,26, в контроле - 4,31.

Результаты исследований динамики содержания калия и натрия в эритроцитах и плазме крови коров свидетельствуют о том, что в период лактации у животных, получавших соевую муку, уровень калия в эритроцитах был выше, чем у контрольных животных, потреблявших яч-менно-пшеничную муку, и составил 67,8±0,32 мг-экв/л (в контроле 65,5±0,30 мг-экв/л). По содержанию же натрия, наоборот, наблюдалась

некоторая тенденция его снижения в эритроцитах опытных животных до 17,3±0,06 мг-экв/л (в контрольной группе 18,3±0,07 мг-экв/л), но разница эта статистически недостоверна.

В плазме крови у молочных животных опытной группы уровень калия выше, чем контрольной на 5,7% (Р<0,05), у сухостойных - на 9,4 % (Р<0,05). По содержанию натрия заметной разницы между группами животных в среднем за десять месяцев лактации не выявлено; в опыте этот показатель составил 134,0±0,79 мг-экв/л, в контроле - 131,5±0,51 мг-экв/л (Р<0,05); в сухостойный период соответственно 133,8+0,17 и 134,910,85 мг-экв/л.

Анализируя эти показатели по периодам лактации, можно отметить, что содержание данных макроэлементов колеблется в различные месяцы этого репродуктивного периода, что, видимо, обусловлено сложными изменениями физиологических процессов в организме коров в связи с биосинтезом молока, формированием и развитием плода в период беременности.

Снижение количества натрия и калия в эритроцитах и плазме крови в первые три месяца лактации мы связываем с перестройкой обмена веществ в этот период, характеризующейся выделением больших количеств электролитов с молоком и их участием в биосинтезе белков. Отмеченное в последние месяцы лактации и период глубокой стельности уменьшение в эритроцитах концентрации калия и увеличение количества натрия (несмотря на его дефицит в организме) обусловлено усилением функции коры надпочечников, сопровождающейся значительной выработкой минералокортикоидов, и рядом изменений вводно-солевого гомеостаза. Уровень обоих электролитов в плазме крови в предродовой период возрастает, что можно объяснить активной ролью ионов в сократительной функции матки и мышц, обеспечивающих родовой акт.

Распределение натрия и калия между эритроцитами и плазмой крови зависит не только от физиологического состояния, но и от уровня протеинового питания. Так, в наших опытах при введении в рацион коров муки термически обработанного зерна сои количество калия в эритроцитах в среднем за лактацию возрастает до 17,3±0,06 мг-экв/л, а натрия - падает до 67,8±0,32 мг-экв/л; в сухостойный период соответственно до 16,2±0,02 и 70,2±0,07 мг-экв/л. В плазме крови уровень натрия достигает в период лактации 134,0 ± 0,79, в сухостойный период - 133,8±0,17 мг-экв/л; калия соответственно - 4,48 ± 0,07 и 4,54 ± 0,02 мг-экв/л, что способствует усилению работы К+ - АТФазного насоса в исследуемом материале.

Анализ аминокислотного состава сыворотки крови коров при включении в их рацион соевой муки позволил установить, что в среднем за лактацию по сумме заменимых и незаменимых аминокислот между опытными и контрольными животными существенной разницы не наблюдалось. Так, сумма заменимых аминокислот в опытной группе составила 4,24, в контрольной- 4,15; незаменимых - соответственно 3,72 и 3,63. В период сухостоя сумма незаменимых аминокислот в крови опытных коров была несколько выше, чем в контроле и составила 4,00 (в контроле 3,63); количество заменимых аминокислот находилось примерно на одном уровне - 4,07 в опыте и 4,15 в контроле.

Анализируя эти показатели по месяцам лактации (рис. 6), можно отметить, что суммарная концентрация аминокислот в крови снижалась к середине молочной продуктивности, достигая минимума к 7-му месяцу, затем с 8 по 10-ый месяцы наблюдался ее рост, приближаясь к первоначальному уровню. Сумма всех аминокислот, в том числе и незаменимых у животных, получавших соевую муку, была выше, чем у контрольных.

11,00 -| -й-Контроль

10,50 - 0пыт

10,00 -9,50 9,00 " 8,50 -8,00 7,50 " 7,00 " 6,50

6,00

1

8

10

Месяцы лактации Рис. 6. Суммарное содержание свободных аминокислот (мг %) в сыворотке крови коров по месяцам лактации при введении в рацион сои

23 и 21 19 17 " 15 -13 -И "

9

7 1

Контроль Опыт

1

8

10

Месяцы лактации Рис. 7. Среднесуточный удой (кг) коров в течение лактации при введении в рацион соевой муки

Как видно из данных, представленных на рисунке 7, лактационная кривая в обеих группах подчинена общей закономерности.

В первые четыре месяца лактации дача соевой мука стимулирует молокоооразование и среднесуточный удой коров опытной группы выше, чем у коров контрольной группы соответственно за 1-4 месяцы лактации на 10,4% (Р>0,05); 13,2% (Р<0,05); 12,2% (Р<0,05); 14,6% (Р>0,05); в 5-й, 6-й, 7-й месяцы лактации молочная продуктивность опытных животных также выше, чем контрольных на 1,30; 0,65; 0,05 кг соответственно, но эта разница не является статистически достоверной. В 9-й и 10-й месяцы лактации, дача соевой муки несколько тормозит синтез молока у животных опытной группы, и они уступают по уровню среднесуточного удоя животным контрольной группы соответственно

3.2. АТФазная активность и распределение электролитов в органах и тканях овец

Для проведения экспериментов было подобрано 80 овцематок, 20 ягнят и 20 валушков в возрасте 9-10 месяцев. Из валушков были сформированы 4 группы: одна контрольная и три опытные по 5 голов в каждой. Средняя продолжительность опыта 150 дней. Кровь для исследований брали у новорожденных ягнят и в возрасте 20, 105-110 дней; у взрослых животных -ежемесячно.

3.2.1. АТФазная активность и распределение натрия, калия и свободных аминокислот между эритроцитами и плазмой крови

овцематок и ягнят

Установлено, что активность транспортных АТФаз в эритроцитах новорожденных ягнят почти в 7,5 раз, а у ягнят 20-дневного возраста почти в 5 раз выше, чем у овцематок (рис. 8). При этом у ягнят этих возрастных групп также выше соотношение K:Na, чем у взрослых животных, соответственно в 13,5 и 6,2 раза. К 105-110 дню жизни ягнят АТФазная активность теней эритроцитов у них снижается до уровня взрослых овец.

на 1,32 и 1,02 кг.

18 -16 ■ 14 -

□ Овцематки

В Ягнята новорожденные

□ Ягнята в 20 дя.

■ Ягнята в 105-110 дк.

12 ■

1" ■

МДОа,К-АТФ- Ме-АТФ-ам ТЧаДС-АТФ-аза

Рис. 8. Активность АТФаз мембран эритроцитов (нМоль Р1/мг белка в мин) у овцематок и ягнят

Установлено, что эритроциты взрослых животных относятся к ЬК-генотипу: в них содержится мало калия (15,8±1,1 мг-экв/10 мл клеток) и много натрия (85,0±1,7 мг-экв/10 мл клеток). У ягнят же, наоборот, эритроциты характеризуются более высоким содержанием калия и низким натрия, особенно это выражено у новорожденных животных: содержание у них в эритроцитах калия составляет 92,8±8,8, а натрия -36,2±4,6 мг-экв/10 мл клеток (рис. 9).

На основании этого эритроциты новорожденных ягнят можно отнести к НК-генотипу. С возрастом у ягнят постепенно уменьшается содержание калия и увеличивается количество натрия в этих клетках крови, достигая к 105-110-дневному возрасту уровня взрослых животных с ЬК-генотипом.

□ Овцематки

Ш Ягнята новорожденные

□ Ягнята в 20 дн.

■ Ягнята в 105-110 да

100

50 -

N8 К N8 плазмы К плазмы

эритроцитов эритроцитов

Рис. 9. Содержание натрия и калия (мг-экв/103 мл клеток) в эритроцитах и плазме крови овцематок и ягнят

Аналогичная закономерность наблюдается между овцематками и новорожденными ягнятами, ягнятами в 20 - дневном и в 105-110-дневном возрасте по содержанию натрия и калия в плазме крови.

Так, содержание натрия у новорожденных ягнят несколько превышает этот показатель у взрослых животных и составляет 184,2±12,2 мг-экв/л. С возрастом ягнят эта величина несколько падает (до 146,4±6,8 мг-экв/л к 105-110 дню).

Содержание калия также несколько выше у новорожденных ягнят, чем у овцематок и ягнят старшего возраста и составляет 6,4±0,8 мг-экв/л.

С возрастом содержание этого элемента в плазме крови ягнят снижается, что особенно заметно к 105-110 дню и составляет 4,6±0,40 мг-экв/л. У взрослых животных этот показатель достигает уровня 5,6+0,50 мг-экв/л.

Если предположить, что одна часть эритроцитов является эмбриональными клеточными популяциями (содержит калия 110, а натрия 30 мг-экв/л), а другая часть - эритроцитами взрослых популяций (содержит

калия 15, а натрия 90 мг-экв/л), то неодинаковое содержание натрия и калия в этих клетках новорожденных и взрослых животных можно объяснить различным соотношением популяций эмбриональных и постэмбриональных эритроцитов. По-видимому, мембраны эритроцитов эмбриональных популяций обладают большей проницаемостью для ионов калия, чем для натрия.

3.2.2. Активность АТФаз и распределение электролитов в тканях овец при введении в рацион пиридоксина и серосодержащих добавок

У овец важное значение имеет обмен серосодержащих аминокислот, которые лимитируют биосинтетические процессы в организме. На обмен этих аминокислот оказывает существенное влияние витамин В6, основной коферментной формой которого является фосфопиридоксаль (пиридоксаль-5-фосфат). В наших исследованиях изучено влияние пиридоксина как в отдельности, так и в комплексе с метионином и сульфатом натрия на АТФазную активность, обмен моновалентных электролитов и свободных аминокислот у молодняка овец. В опытах мы использовали валухов 9-10-месячного возраста. Схема проведения опытов представлена в таблице 7.

Таблица 7

Схема проведения опытов на овцах_

Группы животных п Условия проведения опытов

Контрольная 5 Основной сено-силосно-концентратный рацион

Первая опытная 5 ОР + 4 мг пиридоксина

Вторая опытная 5 ОР + 4 мг пиридоксина + 5 г сульфата натрия

Третья опытная 5 ОР + 4 мг пиридоксина + 2 г метионина

Таблица 8

Содержание натрия и калия в плазме крови овец (мг-экв/л)

Группы животных Калий Натрий

Начало опыта Конец опыта Начало опыта Конец опыта

Контрольная 5,4 ± 0,4 5,5 ± 0,2 135,6±4,4 136,0±5,6

Опытные: Первая (ОР + В6) 5,7 ± 0,4 5,9 ± 0,3 136,1 ±3,8 136,8±4,2

Вторая (ОР + В6+ ^БО,,' ЮН20) 5,6 ±0,3 6,2 ± 0,6 141,6±5,0 140,8±4,4

Третья (ОР + В6 + метионин) 5,8 ± 0,5 5,8 ± 0,4 141,4±4,8 140,6±3,8

Как видно из данных, представленных в таблице 8, животные всех опытных групп относятся к ЬК-генотипу. Количество натрия и калия в эритроцитах и плазме крови овец опытных групп находилось примерно на одном уровне с контрольными животными.

Результаты изучения активности транспортных АТФаз в мембранах эритроцитов овец свидетельствуют о том, что при введении в рацион животных биологически активных веществ, содержащих серу (вторая и третья опытные группы), происходит статистически достоверное снижение активности транспортных АТФаз (табл. 9), что можно объяснить увеличением содержания сульфгидрильных групп в эритроцитах за счет серосодержащих аминокислот (метионина, цистеина и цистина), т.к. известно, что чем больше этих групп, тем ниже активность фермента.

Таблица 9

АТФазная активность мембран эритроцитов молодняка овец

Группы животных Удельная АТФазная активность, нМоль Р/мг белка в мин Соотношение K:Na

MgT,Na+, К+-АТФаза Mg^-АТФаза Na+,K+-АТФаза

1 2 1 2 1 2 1 2

Контрольная 2,48± 0,24 2,61± 0,23 1,44± 0,18 1,51± 0,15 1,04± 0,08 1,10± 0,08 0,21 0,19

Опытные: Первая 2,64± 0,26 2,69± 0,30 1,50± 0,12 1,55± 0,18 1,11± 0,14 1,14± 0,12 0,21 0,18

Вторая 2,5 2± 0,25 1,88± 0,10*« 1,51± 0,18 1,02± 0,07* 1,01± 0,07 0,86± 0,03* 0,25 0,18

Третья 2,44± 0,30 1,77± 0,11* 1,46± 0,12 0,92± 0,08** 0,98± 0,08 0,85± 0,03* 0,20 0,18

Примечание: * - Р<0,05; ** - Р<0,01; 1-начало опыта; 2 - конец опыта

Соотношение же K:Na в эритроцитах овец контрольной и опытных групп существенно не изменялось.

Таким образом, несмотря на снижение активности Na+, К+ - АТФазы у животных всех опытных групп не выявлено нарушений обмена моновалентных катионов между эритроцитами и плазмой крови.

По-видимому, в эритроцитах отец, относящихся к LK-генотипу, содержащих большое количество сульфгцдрильных групп, распределение натрия и калия между эритроцитами и плазмой зависит не только от активности Na-Hacoca, но и от следующих факторов: K/Na обменной диффузии с участием мембранных белков, содержащих сульфгидрильные группы; уровня АТФ-зависимой задержки натрия в эритроцитах, активируемой цистеином; активности КУС1 - транспортной системы эритроцитов, которая контролируется уровнем сульфгцдрильных групп в эритроцитах.

При скармливании овцам пиридоксина и серосодержащих добавок, особенно метионина, происходит статистически достоверное увеличение суммарного содержания свободных аминокислот в эритроцитах и плазме крови животных. Это происходит главным образом за счет повышения уровня цистина, цисте ина и метионина в крови. Сумма свободных аминокислот и коэффициент их распределения между эритроцитами и плазмой (Q) у животных всех подопытных групп колебались в пределах нормы.

3.2.3. Влияние пиридоксииа и серосодержащих добавок на шерстную и мясную продуктивность овец

Введение в рацион овец пиридоксина как отдельно, так и в сочетании с серосодержащими веществами оказало положительное влияние на качество шерсти у животных. Так, настриг шерсти в чистом волокне у валухов третьей опытной группы оказался на 28,7% выше, чем у животных контрольной группы, что, по-видимому, можно объяснить активацией белкового обмена и соответственно процессов биосинтеза кератина. Овцы этой же опытной группы имели более высокие показатели мясной продуктивности, по сравнению с контролем их убойный вес был выше на 20,8%, а убойный выход - на 1,4%.

3.3. АТФазная активность и распределение элею-ролитов в органах и тканях свиней

Объектом исследований служили свиноматки и поросята-сосуны крупной белой породы. Кровь для исследований брали в следующие -

сроки: а) при изучении биохимических показателей у свиноматок - в молозивный период; у поросят-сосунов - в возрасте 1-3, 30 и 60 дней; б) при изучении биохимических показателей у свиноматок с учетом физиологического состояния - в холостой, супоросный и подсосный периоды; в) при изучении биохимических показателей при введении в рацион свиней хромсодержащих протеиновых добавок - в начале и в конце опыта. Органы и ткани исследовали после убоя животных.

3.3.1. АТФазная активность, распределение натрия, калия и свободных аминокислот между эритроцитами и плазмой крови свиноматок и поросят-сосунов

Анализ полученных данных показывает, что активность транспортных АТФаз в эритроцитах новорожденных поросят почти в 1,5 раза, а у 30-дневных поросят - в 1,2 раза выше, чем у свиноматок (рис. 10).

У поросят 60-дневного возраста эти показатели приближаются к таковым у взрослых животных. При этом у поросят-сосунов всех возрастных групп соотношение К:Ка в эритроцитах выше, чем у свиноматок соответственно в 1,13; 1,03 и 1,04 раза. Установлено, что активность Ыа+, К+ - АТ-Фазы мембран эритроцитов у свиней в 10 раз превышает активность %

данного фермента в эритроцитах у коров и овцематок, относящихся к ЬК-генотипу.

В гомогенатах тканей свиней АТФазная активность выше, чем в эритроцитах от 8,1-8,3 раза (мышцы, печень) до 16,6 раза (почки).

Соотношение К:№ в этих тканях соответственно составило 1,45; 1,23 и 0,96, т.е. активность фермента и соотношение моновалентных электролитов в тканях не находятся в прямой зависимости. Можно предположить, что активность фермента выше в тех тканях, в которых большое количество клеток контактирует с внеклеточной средой и участвует в образовании межклеточного пространства, заполненного тканевой жидкостью. Эти «пограничные» клетки, по-видимому, имеют более активные Ыа+, К+ - АТФазные насосы.

□ Свиноматки I Поросята новорожденные О Поросята в 30 дн. ■ Поросята в 60 дн.

М£^1а,К-АТФюа Мд-АТФаза ^К- АТФаза

Рис. 10. Активность АТФаз эритроцитов свиноматок и поросят (нМоль Р1/мг белка в мин)

Содержание моновалентных электролитов в эритроцитах и плазме крови поросят в онтогенезе не претерпевает значительных изменений, чем отличается от эритроцитов коров и телят (табл. 10). У новорожденных поросят содержание моновалентных электролитов в эритроцитах и плазме крови превышает их значение у взрослых животных.

Анализ аминокислотного состава крови свидетельствует о том, что суммарное содержание свободных аминокислот в эритроцитах и плазме у подсосных свиноматок выше, чем у новорожденных поросят, и составляет соответственно 58,74±1,71 и 23,21±1,36 мг% (рис. 11).

Таблица 10

Содержание натрия и калия в эритроцитах и плазме крови у свино-_маток и поросят (мг-экв/л)_

Эритроциты Плазма

Группы животных Натрий Калий Натрий Калий

Свиноматки 12,22±0,56 94,84±1,28 141,08±0,41 4,84±0,15

Поросята:

новорожденные 12,78±0,88 95,90±2,68 148,08±0,33 4,98±0,08

в возрасте 30 дней 11,72±0,58 94,50±1,22 143,68±0,80 4,68±0,10

в возрасте 60 дней 11,66±0,82 94,20±1,06 142,05±0,46 4,44±0,06

мг% 70 -

60 -50 -40 -3020 -10 ■ о - —

Эритроциты Плазма крови

Рис. 11. Суммарное содержание свободных аминокислот в эритроцитах и плазме крови свиноматок и новорожденных поросят

У поросят-сосунов суммарное содержание свободных аминокислот с возрастом изменяется следующим образом: у новорожденных поросят их уровень в эритроцитах составляет41,7±1,72 мг%, в плазме-10,2±0,87 мг%.

Начиная с 30-дневного возраста, отмечается постепенное снижение, и в 60-дневном возрасте (у отьемышей) суммарное содержание свободных аминокислот составляет в эритроцитах 32,1±4,28 мг%, в плазме - 11,3±1,17 мг%, приближаясь к уровню у свиноматок.

Высокая концентрация свободных аминокислот у поросят-сосунов создает условия для усиленного биосинтеза белка, и это, по-видимому, связано с тем, что у молодняка транспорт свободных аминокислот в клетки происходит относительно в больших количествах, чем у взрослых животных. Источником аминокислот в этот период жизни молодняка служит молозиво или молоко, содержащее легкоусвояемые полноценные белки.

Возрастное снижение уровня аминокислот у поросят отмечается в основном за счет лизина, аргинина, аспарагиновой кислоты, серина, глицина, валина, лейцинов и в меньшей степени за счет других аминокислот, в частности, цистеина. По-видимому, в различные периоды физиологического состояния молодого организма особенно резко проявляется избирательная потребность в отдельных аминокислотах

Коэффициент характеризующий распределение свободных аминокислот между эритроцитами и плазмой крови, у поросят выше в первые дни жизни и составляет 4,11, у поросят 30-дневного возраста - 2,21 и в 60-дневном возрасте - 2,84.

■ Свиноматки □ Поросята новорожденные

I .

Таким образом, концентрация аминокислот в клетках новорожденных поросят намного выше, чем во внеклеточной среде (плазме), особенно в сравнении с поросятами более старших возрастов. Достаточно высокий уровень свободных аминокислот в клетках и величина коэффициента 0 могут поддерживаться за счет внутриклеточного их синтеза, особенно в печени. Относительно высокое значение коэффициента С? выявлено для следующих аминокислот: лейцинов, гистидина, лизина, аланина, глутаминовой кислоты. Можно предположить, что в плазматических мембранах клеток исследуемых тканей содержится большее количество специфических переносчиков аминокислот (пермиаз) именно для этих аминокислот.

3.3.2. АТФазная активность, распределение натрия, калия и свободных аминокислот между эритроцитами и плазмой крови свиней в различные репродуктивные периоды

Во все репродуктивные периоды у свиноматок не установлено существенных различий в активности транспортных АТФаз (табл. 11).

Таблица 11

Активность АТФаз и соотношение К:№ в эритроцитах свиноматок _в различные репродуктивные периоды__

Удельная активность, нМольР/мг белка в мин

Свиноматки М^.КаМС- - АТФа- К:Ыа

АТФаза за АТФаза

Холостые 8,38 ± 0,53 4,38 ±0,18 4,00 ± 0,35 8,39

Супоросные 8,36 ± 0,44 4,14 ± 0,25 4,22 ±0,19 8,21

Подсосные 8,18 ±0,36 4,12 ±0,26 3,97 ±0,10 8,64

Максимальное соотношение К:№ отмечено у свиноматок в подсосный период - 8,64, минимальное - 8,21 в супоросный период.

Максимальная концентрация натрия и калия, как в эритроцитах, так и плазме крови установлена у супоросных; минимальный уровень калия - у холостых, а натрия - у подсосных свиноматок (табл. 12).

Таблица 12

Содержание натрия и калия (мг-экв/л) в эритроцитах и плазме крови

свиноматок в различные репрод1 /ктивные периоды

Свиноматки Эритроциты Плазма

Натрий Калий Натрий Калий

Холостые 11,30 ±0,87 94,86 ± 0,88 141,50 ±0,77 4,78 ± 0,22*

Супоросные 11,50 ±0,60 95,42 ± 0,85 143,20 ±0,44 6,10 ±0,05

Подсосные 11,00 ±0,55 95,04 ± 1,18 139,10 ±0,60* 5,92 ±0,21*

Примечание: *-Р<0,05 по сравнению с супоросными свиноматками

В зависимости от физиологического состояния свиноматок уровень свободных аминокислот колеблется следующим образом: наибольшее их содержание в эритроцитах отмечается в первую половину супорос-ности (59,2±1,65 мг%), а наименьшее - в подсосный период (55,3±1,65 мг%). Аналогичная динамика наблюдается и в плазме крови (табл. 13)

Таблица 13

Содержание свободных аминокислот в эритроцитах и плазме крови _свиноматок в различные репродуктивные периоды_

Физиологическое состояние свиноматок Суммарное содержание свободных аминокислот, мг%

Эритроциты Плазма

Холостые 56,8 ± 1,85 23,9 ± 1,35

Супоросные: первая половина вторая половина 59.2 ± 1,96* 56.3 ± 1,80 28,3 ± 1,95* 22,7 ± 1,50

Подсосные 55,3 ± 1,65 21,7 ± 1,35

Примечание: *-Р<0,05 по сравнению с холостыми свиноматками

Определенная взаимосвязь между физиологическим состоянием и уровнем аминокислот в крови у супоросных и подсосных свиноматок проявляется в более высоком их содержании в первую половину супо-росности и снижением во время подсоса. При этом содержание свободных аминокислот в крови находится в прямой зависимости от интенсивности обмена и молочной продуктивности животных, а именно: с началом деятельности молочной железы резко увеличивается потребление аминокислот из «резерва» на формирование аминокислотного состава молока. В этот период интенсифицируются процессы аминирова-ния и переаминирования в печени, продукты этих процессов используются для построения белков молока, что и отображается на изменении уровня свободных аминокислот в крови у лактирующих животных. Не менее важным фактором, обусловившим повышенное содержание аминокислот в начале беременности, является их значительное поступление в организм с кормами в связи с интенсификацией обменных процессов.

3.3.3. Влияние протеиновой кормовой добавки на АТФазную активность и распределение моновалентных электролитов и аминокислот в тканях свиней

Проведенные комплексные биохимические и клинические исследований доказали возможность использования в рационах свиней как источника белка протеиновой кормовой добавки из отходов кожевенного производства. Эту добавку вводили в количестве 20-30 г на каждую кормовую единицу. Во всех сериях опытов протеиновая кормовая добавка скармливалась животным в виде гидролизата в смеси с запаренными концентрированными кормами. Опыты проводили на откормочном поголовье свиней; средняя продолжительность откорма составила 4 месяца. Кровь для исследований брали в начале и конце опыта; органы

и ткани - после контрольного убоя животных. Схема опытов представлена в таблице 14.

Таблица 14

Серии опытов Всего Из них: Содержание хрома (III) в протеиновой добавке, мг%

животных Контроль Опыт

Первая 10 5 5 42

Вторая 85 40 45 10

Третья 138 69 69 0,25

Четвертая 10 5 5 Вводили хромосодержащие соединения в виде Ст203 и Cr2(S04)318H20 (0,5 г - 4,0 г хрома/кг массы тела)

Анализ химического состава протеиновых кормовых добавок из де-хромированных отходов кожевенного производства свидетельствует о том, что они являются ценным кормовым белком.

Сравнительная оценка химического состава протеиновых добавок и мясокостной муки, которую заменяли этим продуктом, показала, что по содержанию переваримого протеина они превосходят мясокостную муку в 1,7 раза.

При определении аминокислотного состава установлено, что в различных вариантах добавок из дехромированных отходов кожевенной промышленности по сравнению с мясокостной мукой содержится меньше гистидина, треонина, валина, лейцина, изолейцина, тирозина и фенилала-нина и больше пролина, глицина, аланина, цистина. По сумме аминокислот протеиновые добавки второго и третьего вариантов превосходят мясокостную муку. Количество хрома (Ш) в белковом препарате третьего варианта ниже, чем в мясокостной муке (соответственно 0,25 и 0,38 мг%).

В эритроцитах свиней установлено изменение активности Ыа+, К+ -АТФазы, концентрации Сг3 , соотношения К:Ыа в зависимости от содержания хрома (1П) в протеиновой добавке (табл. 15).

Активность Ыа+,К+ -АТФазы мембран эритроцитов во всех сериях опытов на начало эксперимента у опытных и контрольных животных не имела существенных различий. В конце эксперимента у свиней первой опытной группы (Сг3 в протеиновой добавке 42 мг%) этот показатель снизился по сравнению с контролем на 12%. У свиней второй и третьей опытных групп (Сг34 в протеиновой добавке соответственно 10 мг% и 0,25 мг%) активность фермента была несколько выше, чем у контрольных животных. В конце четвертой серии опытов (при введении свиньям оксида хрома III) активность Ыа+, К+ -АТФазы у опытных животных упала на 42% по сравнению с контролем.

Следует отметить, что активирующее действие протеиновой кормовой добавки на активность фермента зависело и от уровня хрома III в белковом препарате.

Таблица 15

Активность транспортных АТФаз, содержание хрома и соотношение К:Ыа в эритроцитах свиней в зависимости от со-

держание хрома (III) в протеиновой добавке

Серии опытов Группы животных Удельная активность (в нМольРь/мг белка в мин.) Содержание Сг (III) в мкг%

МК1+,Т>1а+,К+-АТФаза Мй^-АТФаза Ма+,К+-АТФаза

I II I П I II I II I П

I Контроль Опыт Р 7,68*0,71 7,75*0,58 >0,05 7,53*0,24 6,87*0,65 >0,05 3,14*0,18 3,52*0,24 >0,05 3,11*0,16 2,98*0,10 >0,05 4,54*0,53 4,25*0,32 >0,05 4,42*0,08 3,89*0,55 >0,05 23,02*1,98 23,94*2,18 >0,05 22,91*2,18 28,17*2,64 >0,05 8,16 8,07 8,23 7,14

II Контроль Опыт Р 7,54±0,44 7,32*0,73 >0,05 7,87*0,44 7,86*0,61 >0,05 3,91*0,27 3,84*0,40 >0,05 4,00*0,24 3,82*0,23 >0,05 3,63*0,17 3,48*0,33 >0,05 3,87*0,20 4,04*0,38 >0,05 22,68*2,24 24,04*1,62 >0,05 22,23*1,76 27,24*2,36 >0,05 7,86 7,64 7,59 7,22

Ш Контроль Опыт Р 8,04*0,26 8,16*0,19 >0,05 8,26*0,16 8,27*0,18 >0,05 3,90*0,16 3,78*0,10 >0,05 4,02*0,12 3,90*0,11 >0,05 4,14*0,10 4,38*0,09 >0,05 4,24*0,04 4,87*0,07 >0,05 23,08*2,87 23,66*3,04 >0,05 22,90*3,37 22,32*3,60 >0,05 7,46 7,34 7,84 7,75

IV Контроль Опыт Р 8,98*0,2! 8,77*0,18 >0,05 9,06*0,14 5,11*0,14 <0,001 4,59*0,14 4,24*0,9 >0,05 4,71*0,11 2,58*0,11 <0,001 4,39*0,07 4,53*0,09 >0,05 4,35*0,03 2,53*0,03 <0,001 22,98*2,76 23,14*2,96 >0,05 23,16*1,12 76,06*4,24 <0,001 8,24 8,08 8,57 3,%

Примечание: 1 - начало опыта; И - конец опыта

В конце периода наблюдения в эритроцитах животных в первой серии опытов повышалось содержание хрома (Ш) по сравнению с контрольными на 23%; во второй серии - на 5,7%; в третьей серии различий в этом показателе между опытной и контрольной группами животных не выявлено.

В эритроцитах подопытных свиней в четвертой серии концентрация хрома увеличилась в 3,3 раза по сравнению с контролем. Аналогичная закономерность наблюдалась и в тканях подопытных животных.

Таким образом, Cr (III) в определенной степени может оказывать стимулирующее влияние на активность №+,К+-АТФазы в эритроцитах и гомогенатах тканей свиней, и активность Na+, К+ -АТФазы может служить весьма чувствительным тестом, реагирующим на повышение уровня переваримого протеина в рационе свиней и содержание хрома в белковом препарате и тканях подопытных животных.

Проведенные балансовые опыты по усвояемости хрома в организме животных позволили установить, что усвояемость остаточного хрома из протеиновой добавки была невысокой. Установлено, основная часть этого элемента (99,14%) выводится из организма через кишечник и только очень малое количество (0,86%) усваивается.

Из всосавшегося количества усваивается в расчете на 100 г прироста массы тела (при среднесуточном приросте 500 г) только 38 мкг в сутки.

При этом коэффициент усвояемости белка протеиновой добавки у свиней опытной группы составлял по азоту 85,6%.

Благодаря избирательному всасыванию хрома (III) в пищеварительном тракте и постоянному выведению его из организма свиней содержание этого микроэлемента в тканях животных опытной группы не превышало его количеств у животных контрольной группы. Исключением из этого являются печень и почки, в которых отмечено увеличение уровня хрома (Ш) соответственно с 28,0±1,28 до 48,1±7,20 и с 27,4±2,02 до 34,8±1,90 мкг% при даче свиньям протеиновой кормовой добавки с содержанием хрома 42 мг% (первая серия опытов). Увеличение содержания хрома в данном случае можно объяснить тем, что печень способна задерживать физиологически активные вещества, а почки, по-видимому, концентрируют их при выведении из организма с мочой.

Вместе с тем, установлено, что при введении животным токсических доз трехвалентного хрома в виде Сг203 и Cr2(S04)3 активность Na+,K+-АТФазы в эритроцитах снижалась в 1,7 раза, а гомогенатах тканей - в 2,4 -4,3 раза по сравнению с контролем. Это свидетельствует о том, что в больших дозах Cr является эффективным ингибитором этого фермента.

По мнению ряда авторов (Webb L.Jy1963" Bernhard S., 1968 и др.), ионы тяжелых металлов, в частности Си , Hgf+, Ag2+ н Cr3* или их производные оказывают ингибирующее действие на ряд ферментов, у которых остатки цистеина (SH-группы) играют важную роль в каталитической активности. К таким ферментам относится и АТФаза, в активном (субстратном) центре которой локализованы SH-группы. Реагирование ионов тяжелых металлов с SH-группами с образованием меркаптидов -это наиболее общий путь неконкурентного ингибирования ферментов. Можно полагать, что и Сг3+ оказывает ингибирующее влияние на активность АТФазы аналогичным образом.

РОС НАЦИОНАЛЬНА*■ втЛМТБКА |

г П шяшяЛтлт I

09 мл

Установлена прямая зависимость между активностью Na+, К+- АТФа-зы и соотношением K:Na в эритроцитах свиней. При скармливании животным протеиновой добавки соотношение моновалентных электролитов остается в эритроцитах в норме и лишь несколько снижается при содержании в препарате 42 мг% хрома (III). При интоксикации животных хромом (1П) соотношение K:Na снижается до 3,96 (в норме 8,57), что свидетельствует о нарушении распределения моновалентных электролитов в этих клетках, т.е. о снижении активности Na+, К+-АТФазного комплекса.

Проведенные исследования содержания калия и натрия в эритроцитах и плазме крови показали, что количество моновалентных электролитов в эритроцитах свиней в норме колеблется (в мг-экв/л): калия - от 93,98±5,45 до 98,72±2,48, а натрия - от 11,52±0,91 до 12,39±1,11. Плазма крови, наоборот, характеризуется высоким содержанием натрия и низким калия. Так, колебания калия в плазме крови составили (в мг-экв/л) от 6,54±0,83 до 6,67±0,78, а натрия - от 124,35±2,65 до 131,13±6,48. Это согласуется с тем, что в этих клетках у животных калий преимущественно локализуется внутри клеток, а натрий - во внеклеточной среде. У сельскохозяйственных животных распределение натрия и калия зависит от ряда факторов, в том числе и от уровня протеинового питания.

При введении животным токсических доз хрома количество калия в эритроцитах снижается с 98,72±2,48 (в норме) до 88,56±2,34 мг-экв/л, а натрия - увеличивается с 11,52±0,91 до 22,34±1,36 мг-экв/л. В плазме крови, наоборот, уровень калия повышается до 11,03±0,91 мг-экв/л (в норме 6,59^0,85 мг-экв/л), а натрия уменьшается до 105,65±4,02 мг-экв/л (в норме 131,13±6,48 мг-экв/л). Приведенные данные еще раз свидетельствуют об ослаблении активности Na+,K+- АТФазного комплекса в эритроцитах при отравлении свиней хромом, нарушении перераспределения моновалентных электролитов между эритроцитами и плазмой крови при поступлении в организм свиней токсических количеств трехвалентного хрома.

При сопоставлении данных об активности Na+,K+- АТФазы и уровня свободных аминокислот установлено, что содержание свободных аминокислот в тканях свиней примерно в 10-30 раз выше, чем в эритроцитах, и параллельно с этим и удельная активность Na+,K+- АТФазы соответственно выше в 8-12 раз. Поэтому существует высокая степень корреляционной связи между этими показателями (г =+0,82; Р<0,01). Эта зависимость особенно характерна для клеток почек, имеющих самую высокую активность АТФаз и наибольшее суммарное содержание свободных аминокислот, что объясняется активно протекающими процессами реабсорбции с участием Na+, К+- А ТФаз но го насоса в почках.

Суммарное содержание свободных аминокислот в эритроцитах как опытных, так и контрольных животных превышает их уровень в плазме крови. Это связано с тем, что эритроциты регулируют постоянство содержания свободных аминокислот в плазме и представляют собой своеобразное подвижное «депо» аминокислот в циркулирующей крови. При этом четко проявляется неравномерность распределения аминокислот между плазмой и эритроцитами. Это позволяет предположить, что как в плазме, так и в эритроцитах изменение концентрации аминокислот происходит в^опдеделенном ритме, что, по-видимому, способствует пре-

; •"■'jTfMft, | 34

'st W < ,

одолению концентрационного барьера и обеспечивает относительное постоянство уровня электролитов и свободных аминокислот в плазме.

Протеиновая кормовая добавка оказывает положительное влияние на показатели белкового обмена у свиней. Результаты третьей серии опытов показали, что количество общего белка, концентрация иммуноглобулинов, уровень свободного аминного азота у опытных свиней были несколько выше, чем у животных контрольной группы, и эти показатели соответственно составили: общий белок - 6,84±0,15 и 6,63±0,13 г% (Р>0,05); иммуноглобулины - 2,56±0,07 и 2,26±0,09 г% (Р<0,05); свободный аминный азот 5,01±0,11 и 4,73±0,10 мг% (Р>0,05).

Скармливание свиньям протеиновой добавки не приводит к нарушению углеводного обмена, что обычно наблюдается при гиперпротеи-I немии. При этом в клетках тканей опытных животных, особенно в пе-

чени, возрастает в 1,3 - 1,4 раза количество гликогена, РНК и ДНК, что свидетельствует об усилении биосинтетических процессов.

Вследствие активизации обменных процессов в клетках тканей животных, получавших протеиновую добавку, отмечается заметное увеличение прироста живой массы при более высоком выходе продуктов убоя. Так, в трех опытных группах прирост массы тела на одну голову был выше соответственно на 57,2%, 33,3% и 3,2%, а убойный выход - на 3,2%, 8,2% и 0,5% по сравнению с контрольной группой. При этом затраты корма на 1 кг прироста живой массы в опыте были на 7-10% ниже, чем в контроле.

ВЫВОДЫ

1. У сельскохозяйственных животных активность транспортной Иа+,К+- АТФазы в мембранах эритроцитов меняется в зависимости от возраста, генотипа. У новорожденных телят и поросят ее активность в эритроцитах в 1,5 раза выше, чем у коров и свиноматок; у ягнят - в 8 раз выше, чем у овцематок. К трехмесячному возрасту этот показатель у молодняка приближается к таковому у взрослых животных. Активность

К+- АТФазы мембран эритроцитов у свиней НК-генотипа в 10 раз выше, чем у коров и овец с ЬК-генотипом.

2. АТФазная активность мембран эритроцитов коров и телят изме-V няется в зависимости от ионного состава инкубационной среды. В отсутствии в среде ионов К+ и АТФазная активность в строме эритроцитов не обнаруживается. При добавлении к инкубационной сре-

- де ионов Ыа+ и К+ регистрируется низкая активность этого фермента.

При наличии в инкубационной среде ионов М§2+ и особенно комплекса ионов Мё2+, №+ и К+ активность как общей, так и и №+,К+-

АТФазы повышается. При этом обе системы мембран эритроцитов гид-ролизующие АТФ у телят в 1,5 раза активнее, чем у коров.

3. Под действием уабаина активность АТФазы, чувствительной к комплексу ионов Иа+, К+, М§2+, снижается в мембране эритроцитов коров и телят примерно до величин, обнаруживаемых при наличии в инкубационной среде только ионов М§2+. Ыа\К.+-АТФаза под действием уабаина практически полностью блокируется.

4. На активность Ыа+,К+-АТФазы у сельскохозяйственных животных влияет соотношение K.Na в инкубационной среде и концентрация водородных ионов (рН). Наибольшая активность АТФаз регистрируется при инкубации теней эритроцитов в среде, содержащей высокую концентрацию ионов Na+ (150 мМоль) и низкую - К (5 мМоль) и отношение Mg : Na2AT® =1:1 (Mg2+ - 5 мМодь, Na2ATO - 5 мМоль) при рН = 8,0.

5. У сельскохозяйственных животных активность Ыа+,К+-АТФазы в мембранах эритроцитов меняется в зависимости от репродуктивных периодов у самок. У коров активность этого фермента снижается в сухостойный период (за 9-10 дней до отела), затем происходит ее постепенное увеличение, достигая максимума во время разгара лактации. При этом содержание натрия в эритроцитах и плазме крови коров в предродовой период достоверно увеличивается. В послеродовой период и разгар лактации его содержание снижается, т.е. восстанавливается работа Na-Hacoca. Содержание калия в эритроцитах и плазме крови во все репродуктивные периоды находится примерно на одном уровне.

Активность АТФаз у свиноматок в различные репродуктивные периоды не имеет отклонений от средних показателей; при этом максимальное содержание натрия и калия отмечается в период супоросности, а минимальное: калия - у холостых, а натрия - у подсосных свиноматок.

6. Активность Na+, К+- АТФазы в гомогенатах тканей сельскохозяйственных животных значительно выше, чем в мембранах эритроцитов: у свиней - в 4,5-10 раз; у крупного рогатого скота - в 32-100 раз.

7. Содержание моновалентных электролитов (Na+ и К+) в эритроцитах изменяется с возрастом животных. У крупного рогатого скота нет выраженных возрастных различий в содержании натрия в плазме крови, но при этом количество калия в плазме новорожденных телят несколько выше (5,2±0,5 мг-экв/л), чем у коров-матерей (4,4±0,6 мг-экв/л). У взрослых овец в эритроцитах LK-генотипа мало калия (16,1 ±1,4 мг-экв/л) и много натрия (84,9±1,6 мг-экв/л). У ягнят, наоборот, в эритроцитах более высокий уровень калия (92,8±8,8 мг-экв/л) и низкий - натрия (52,2±7,7 мг-экв/л). С возрастом у ягнят постепенно уменьшается содержание калия и увеличивается количество натрия в эритроцитах, достигая уровня взрослых животных. В эритроцитах свиней установлено высокое содержание калия (94,84±1,28 мг-экв/л) и низкое - натрия (12,22±0,56 мг-экв/л). У поросят содержание натрия и калия в эритроцитах в онтогенезе не меняется, в отличие от телят и ягнят.

8. Активность Na+, К+- АТФазы, уровень натрия и калия в эритроцитах зависит от породы и генотипа животных. У коров симментальской породы в эритроцитах содержится больше натрия, чем калия, в эритроцитах коров черно-пестрой уровень калия в 3-4 раза выше, чем натрия. Взрослый крупный рогатый скот симментальской породы и овцы породы Прекос по содержанию калия в эритроцитах относятся к LK - генотипу. Взрослый крупный рогатый скот черно-пестрой породы, новорожденные телята и ягнята - к НК- генотипу. В первые три месяца жизни телят и ягнят происходит замена эритроцитов НК-генотипа на эритроциты LK- генотипа. Эритроциты свиней соответствуют клеткам

НК-генотипа. Активность Ка+,К+- АТфаз мембран эритроцитов у свиней ЦК-генотипа в 10 раз выше, чем у коров и овец с ОС-генотипом.

9. У крупного рогатого скота в онтогенезе более активно изменяется содержание катионов в эритроцитах, гемоглобине и строме. В эритроцитах и гемоглобине новорожденных телят содержится в 2-3 раза больше калия и в 2 раза меньше натрия, чем у коров-матерей. В возрасте 3-4 месяцев эти показатели у телят приближаются к их уровню у взрослых животных. Содержание натрия в строме эритроцитов у коров и телят примерно одинаковое. Концентрация калия в строме эритроцитов у новорожденных телят в 1,5 раза выше, чем у коров-матерей; с возрастом количество калия в этих клетках снижается.

10. Содержание свободных аминокислот в эритроцитах животных выше, чем в плазме крови: у коров - в 1,74; овец - в 1,80; свиней - в 2,53 раза. Коэффициент распределения (<3) для всех аминокислот в эритроцитах свиней (НК-генотип) в 1,5 раза выше, чем у коров и овец, имеющих эритроциты ЬК - генотипа. В органах и тканях свиней, крупного и мелкого рогатого скота общее содержание свободных аминокислот превышает их уровень в эритроцитах в 7-20 раз.

11. В эритроцитах и плазме крови крупного рогатого скота не установлено возрастных различий в содержании свободных аминокислот. При этом коэффициент распределения аминокислот (С}) у клинически здоровых коров колеблется в пределах 2,32-1,23; у телят - 2,17- 1,44. Исключение составляет цистин, у которого коэффициент у коров равен 4,36, у телят - 3,27. Для отдельных аминокислот (глицина, алаиина, тирозина, серина, глутаминовой кислоты) значение коэффициента 0 у телят выше, чем у коров.

У свиней возрастные различия по содержанию свободных аминокислот более выражены, чем у крупного рогатого скота. У новорожденных поросят их общая концентрация в эритроцитах в 1,4, а в плазме - в 2,3 раза ниже, чем у свиноматок. Коэффициент распределения свободных аминокислот (0) у клинически здоровых свиноматок колеблется в пределах 4,82-1,54; у поросят-сосунов - 10,00-2,11, у поросят он наиболее высокий по лейцинам (10,0).

12. В клетках органов и тканей свиней и крупного рогатого скота содержание свободных аминокислот превышает их уровень в эритроцитах, при этом в тканях скелетной и сердечной мышц их количество в 1,5-2,0 раза ниже, чем в клетках печени и почек.

13. У коров в эритроцитах и плазме крови наиболее низкое суммарное содержание свободных аминокислот характерно для предродового периода (30,85±0,60 и 12,15±1,05 мг% соответственно). На 3-5 день после отела их уровень повышается вначале в плазме (до 19,65±0,56 мг%), а затем на 10-15 день - в эритроцитах до 42,05±1,37 мг%. В плазме крови к 10-15 дню послеродового периода происходит постепенное выравнивание общего количества свободных аминокислот и приближение его к уровню, характерному для разгара лактации (15,06±1,18 мг%).

У свиней во все репродуктивные периоды суммарное содержание свободных аминокислот в эритроцитах более чем в два раза выше, чем в плазме. Наибольшее суммарное содержание свободных аминокислот в

эритроцитах и плазме крови установлено в первую половину супорос-ности (59,20±1,96 и 28,29±1,95 мг% соответственно); во вторую половину супоросности суммарное содержание свободных аминокислот в эритроцитах и плазме крови не отличается от уровня у холостых свиноматок; у подсосных свиноматок этот показатель несколько ниже и составляет 55,3± 1,65 мг% в эритроцитах и 21,7±1,35 мг% в плазме крови.

14. Включение в рацион овец в течение 5 месяцев пиридоксина и сульфата натрия или пиридоксина и метионина благоприятно влияет на состояние здоровья животных, прирост массы тела и качество шерсти; настриг шерсти у валухов увеличивается более, чем на 25%; убойный вес -до 20,8%; убойный выход - до 1,4%. При этом снижается активность Na+,K+- АТФазы теней эритроцитов, а содержание натрия и калия в эритроцитах существенно не меняется. Снижение активности фермента происходит с одновременным увеличением в эритроцитах уровня серосодержащих аминокислот (цистеин). Поддержание нормального межклеточного распределения электролитов в крови связано с усилением обменной диффузии натрия и АТФ-зависимого его удержания в эритроцитах, а также активацией К+,СГ-транспорта, который контролируется сульфгид-рильными группами эритроцитов овец LK-генотипа.

15. Включение в рацион молочных коров соевой муки, прошедшей термическую обработку, в количестве 25% от уровня общего протеина оказывает стимулирующее влияние на активность №+,К+-АТФазы мембран эритроцитов, показатели белкового обмена, естественную резистентность организма и распределение свободных аминокислот в сыворотке крови животных; усиливает биосинтез жира и молочного белка, по сравнению с животными, получавшими ячменно-пшеничную муку. При этом на 7-8% снижаются затраты кормов на 1 кг молока.

16. Использование в рационах коров соевой муки в первые четыре месяца лактации приводит к повышению среднесуточных удоев соответственно по месяцам на 10,4; 13,3; 12,2 и 14,6 %. В последующие три месяца лактационного периода эти различия значительно менее выражены.

17. Включение в рацион свиней (по 25-30 г на каждую кормовую единицу) протеиновой кормовой добавки из дехромированньгх кожевенных отходов с содержанием хрома (III) 0,25-10 мг /100 г сухого вещества стимулирует активность Na+,K+ - АТФазы, белково-минеральный обмен, биосинтез нуклеиновых кислот и гликогена в тканях, повышает прирост массы тела на 10-15 %, снижая затраты кормов. При этом содержание хрома (Ш) в тканях и соотношение K/Na в эритроцитах свиней существенно не изменяется и находится на уровне контрольных животных. Скармливании свиньям протеиновой добавки с содержанием хрома (Ш) 42 мг% приводит к увеличению количества хрома (Ш) в печени и почках и снижению активности транспортных АТФаз и соотношения K:Na в эритроцитах.

18. При введении свиньям токсических доз соединений хрома (Ш) в эритроцитах резко снижается активность Ыа+,К+-АТФазы, соотношение K/Na и увеличивается содержание Cr3* в тканях, что указывает на блокирование Na-Hacoca под действием высоких концентраций хрома (III).

19. Скармливание свиньям протеиновой кормовой добавки из де-хромированных кожевенных отходов сопровождается повышением уровня общего белка и иммуноглобулинов в сыворотке крови, аминокислот в эритроцитах и плазме крови. При этом не происходит нарушения соотношения лимитирующих аминокислот (лизин/цистеин + ме-тионин) в этих компонентах крови свиней.

20. Дача протеиновой кормовой добавки из отходов кожевенного производства позволяет заменять в рационах свиней такие дефицитные корма, как мясокостная, рыбная мука, шроты, получая при этом дополнительный прирост массы тела (от 3,2 до 57,2% на одну голову) при более высоком выходе полноценных продуктов убоя (от 0,5 до 8,2%) и при снижении кормовых затрат (на 7-10%) на единицу продукции.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. С целью восполнения в растительных рационах дефицита переваримого протеина, а также замены таких дефицитных кормов, как мясокостная и рыбная мука, шроты рекомендуется скармливать откормочному поголовью свиней протеиновую кормовую добавку из дехромиро-ванных отходов кожевенного производства в количестве 25-30 г на каждую кормовую единицу. Включение в рацион свиней протеиновой кормовой добавки способствует получению дополнительного прироста массы тела при более высоком выходе полноценных продуктов убоя животных при снижении на 7-10% кормовых затрат на единицу продукции.

2. Для восполнения в рационе дефицита кормового белка и стимуляции молокообразования в первые месяцы лактации коров рекомендуется использовать протеиновую кормовую добавку в виде соевой муки в количестве 25% от общего протеина рациона.

3. Для оценки состояния метаболических процессов в организме сельскохозяйственных животных в зависимости от их возраста, физиологического состояния, протеинового питания рекомендуется использовать следующие биохимические тесты: определение активности транспортных АТФаз, содержание и распределение натрия, калия, свободных аминокислот в эритроцитах, плазме крови, тканевых гомогенатах и суб* клеточных фракциях.

СПИСОК ОСНОВНЫХ РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Вишняков С.И. Использование раздубленных отходов кожевенного производства в качестве сырья для белкового корма / С.И. Вишняков, Н.М. Пичугин, В.В. Морозов, Г.Ф. Рыжкова // Кожевенно-обувная промышленность, 1983. - № 3. - С.6-7.

2. Вишняков С.И. Колориметрический способ определения хрома в органах и тканях / С.И. Вишняков, С.А. Левантовский, Г.Ф. Рыжкова // Ветеринария, 1983.-№ 8.-С.71-73.

л. Вишняков С.И. Влияние скармливания белкового концентрата, приготовленного из дехромированных отходов кожевенного производ-

ства на привесы свиней / С.И. Вишняков, С.А. Левантовский, Г.Ф. Рыжкова и др. // Физиологические основы кормления сельскохозяйственных животных в условиях промышленной технологии: Сборник научных трудов Воронежского СХИ. - Воронеж, 1983. - С.85-89.

4. Вишняков С.И. Особенности белкового, углеводного и минерального обмена у свиней при скармливании белкового концентрата / С.И. Вишняков, С. А. Левантовский, Г.Ф. Рыжкова // Сельскохозяйственная биология, 1984. - № 11. - С. 77-79.

5. Вишняков С.И. О токсичности трехвалентного хрома для свиней / С.И. Вишняков, С.А. Левантовский, В.В. Морозов, Г.Ф. Рыжкова // Ветеринария, 1985. - № 5. - С.69-70.

6. Рыжкова Г.Ф. Влияние белкового концентрата из кожевенных отходов с различным содержанием Cr (III) на АТФазную активность гомогенатов тканей свиней / Г.Ф. Рыжкова // Актуальные вопросы профилактики и лечения болезней сельскохозяйственных животных: Тез. докл. Всесоюзной научно-технической конференции молодых ученых. - Москва, 1985. - С. 55-57.

7. Вишняков С.И. Биологическая роль и токсичность трехвалентного хрома для свиней / С.И. Вишняков, С.А. Левантовский, Г.Ф. Рыжкова и др. и Диагностика и терапия незаразных болезней сельскохозяйственных животных: Сб. научных трудов ВНИИНБЖ. - Воронеж, 1986. - С. 76-80.

8. Вишняков С.И. Усвояемость трехвалентного хрома у свиней / С.И. Вишняков, С.А. Левантовский, Г.Ф. Рыжкова // Диагностика и терапия незаразных болезней сельскохозяйственных животных: Сб. научных трудов ВНИИНБЖ. - Воронеж, 1986. - С. 80-83.

9. Вишняков С.И. К вопросу о содержании хрома в кормах и его усвояемость в организме / С.И. Вишняков, Г.Ф. Рыжкова, H.A. Паничев // Сельскохозяйственная биология, 1987. - № 3. - С. 73-75.

10. Вишняков С.И. Кормовая протеиновая добавка из дехромиро-ванных кожевенных отходов и ее использование в свиноводстве: Методические рекомендации / С.И. Вишняков, С.А. Левантовский, Г.Ф. Рыжкова. - Курск, 1988. -С. 67.

11. Вишняков С.И. Применение протеиновой кормовой добавки, полученной по новой технологии, в рационах растущих свиней / С.И. Вишняков, С.А. Левантовский, Г.Ф. Рыжкова // Тез. докл. 2-ой отчетной научно-технической конференции. - Курск, 1988. - С. 52-53.

12. Вишняков С.И. Протеиновая кормовая добавка из кожевенных отходов и ее использование в свиноводстве / С.И. Вишняков, С.А. Левантовский, Г.Ф. Рыжкова, H.A. Миненков //Биохимия сельскохозяйственных животных и продовольственная программа: Тез. докл. Всесоюзного симпозиума. - Киев, 1989. - С. 90.

13. Вишняков С.И. Испытание пептидного препарата из кожевенных отходов в рационах цыплят-бройлеров / С.И. Вишняков, С.А. Левантовский, Г.Ф. Рыжкова // Эффективность использования кормов в птицеводстве: Тез. докл. Всесоюзной научно-практической конференции. -Новосибирск, 1990. - С. 74-76.

14. Вишняков С.И. Использование пептидного препарата из кожевенных отходов в кормовых рационах свиней и цыплят-бройлеров / С.И. Вишняков, С.А. Левантовский, Г.Ф. Рыжкова И Пути возмещения дефицита протеина в рационах сельскохозяйственных животных: Межвузовский сборник научных трудов. - Белгород, 1990. - С. 39-43.

15. Вишняков С.И. Белково-минеральный обмен молодняка свиней при скармливании сухого пептидного гидролизата / С.И. Вишняков, С.А. Левантовский, Г.Ф. Рыжкова, H.A. Миненков // Сельскохозяйственная биология, 1992. - № 6. - С. 78-81.

16. Вишняков С.И. Биологическое действие хрома в зависимости от его валентности / С.И. Вишняков, С.А. Левантовский, Г.Ф. Рыжкова // Биологические науки, 1992. - № 3 (345). - С. 105-108.

17. Вишняков С.И. Содержание хрома в кормах и продуктах убоя животных / С.И. Вишняков, Г.Ф. Рыжкова // Спектрохимические методы анализа окружающей среды: Тез. докл. международной конференции. -Курск, 1995.-С 37-38.

18. Рыжкова Г.Ф. Изучение активности транспортных АТФаз / Г.Ф. Рыжкова // Повышение эффективности функционирования АПК: Тез. докл. научно-практической конференции. - Курск, 1995. - С. 37-38.

19. Вишняков С.И. Содержание хрома в тканях свиней, его биологическая роль и токсичность / С.И. Вишняков, С.А. Левантовский, Г.Ф. Рыжкова // Повышение эффективности функционирования АПК: Тез. докл. научно-практической конференции. - Курск, 1995. - С. 150.

20. Вишняков С.И. Пептидный препарат из кожевенных отходов как источник кормового протеина / С.И. Вишняков, С.А. Левантовский, Г.Ф. Рыжкова // Проблемы повышения эффективности и устойчивости земледелия: Научные труды Курской ГСХА. - Курск, 1996. - Т. 9. -С. 158-163.

21. Вишняков С.И. Разработка рецептуры БВД, содержащей пептидный препарат из кожевенных отходов, технологии ее гранулирования и результаты испытания в свиноводстве / С.И. Вишняков, С.А. Левантовский, Г.Ф. Рыжкова // Повышение продуктивности, воспроизводительной способности, профилактики и лечения сельскохозяйственных животных: Материалы научно-практической конференции, посвященной 25-летию факультета ветеринарной медицины КГСХА. - Курск, 1997. - С. 46-49.

22. Рыжкова Г.Ф. АТФазная активность в эритроцитах свиней три введении им токсических соединений хрома / Г.Ф. Рыжкова // Новые фармакологические средства в ветеринарии: Материалы 10-ой международной межвузовской научно-практической конференции. - Санкт-Петербург, 1998.-С. 103-104.

23. Рыжкова Г.Ф. АТФазная активность в эритроцитах свиней при включении в рацион протеиновой кормовой добавки / Г.Ф. Рыжкова // Новые фармакологические средства в ветеринарии: Материалы 10-ой международной межвузовской научно-практической конференции. -Санкт-Петербург, 1998. - С. 112.

24. Вишняков С.И. АТФазная активность теней эритроцитов и показатели белково-минерального обмена коров симментальской породы в зависимости от состава инкубационной среды и ее рН / С.И. Вишняков, Г.Ф. Рыжкова // Проблемы межклеточного обмена электролитов, белково-минерального питания и резистентности животных: Материалы научно-практической конференции. - Курск, 1998. - С. 7-10.

25. Дорохина Э.Э. Влияние белково-витаминной добавки на обмен макроэлементов и гуморальные факторы защиты организма поросят-отьемышей / Э.Э. Дорохина, С.И. Вишняков, Г.Ф. Рыжкова // Проблемы межклеточного обмена электролитов, белково-минерального питания и резистентности животных: Материалы научно-практической конференции. - Курск, 1998. - С. 74-76.

26. Дорохина Э.Э. Показатели обмена макроэлементов в тканях по-

^осят при скармливании БВД / Э.Э. Дорохина, С.И. Вишняков, .Ф. Рыжкова, М.И. Подчалимов // Пути повышения продуктивности, воспроизводительной способности, профилактики и лечения сельскохозяйственных животных: Тез. докл. научной конференции. - Курск, 1999. - С. 60-62.

27. Рыжкова Г.Ф. АТФазная активность и распределение натрия и калия в эритроцитах овец при введении в рацион пиридоксина и серосо-

держащих добавок / Г.Ф. Рыжкова // Новые фармакологические средства в ветеринарии: Материалы 12-ой международной межвузовской научно-практической конференции. - С.-Петербург, 2000. - С. 108-109.

28. Вишняков С.И. Возрастная динамика АТФазной активности и распределение моновалентных электролитов между эритроцитами и плазмой крови овец / С.И. Вишняков, Г.Ф. Рыжкова // Вопросы общей биологии и ветеринарии: Сб. научных трудов Московской государственной академии ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина. - Москва, 2000. - С. 193-196.

29. Вишняков С.И. Хром (Ш), его экологические проблемы и пути их решения в зонах функционирования кожевенных предприятий / С.И. Вишняков, С А Левантовский, Г.Ф. Рыжкова // Вопросы общей биологии и ветеринарии: Сб. научных трудов Московской государственной академии ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина. - Москва, 2000. - С. 196-201.

30. Вишняков С.И. Использование пептидного препарата из кожевенных отходов при раннем отъеме поросят / С.И. Вишняков, С.А. Левантовский, Г.Ф. Рыжкова, В.А. Крохина, И.П. Иванова // Научно-прикладные аспекты состояния и перспективы развития животноводства и ветеринарной медицины: Тез. докл. международной научно-практической конференции. - Курск, 2001. - С. 76-78.

31. Рыжкова Г.Ф. Белковые добавки для животноводства из отходов кожевенного производства / Г.Ф. Рыжкова, Н.О. Клименко // Экология и жизнь: Сборник материалов IV международной научно-практической кон ференции (часть Щ. - Пенза, 2001. - С. 114-115.

32. Рыжкова Г.Ф. АТФазная активность и распределение электролитов в эритроцитах и плазме крови овцематок и ягнят / Г.Ф. Рыжкова // Пути повышения продуктивности, воспроизводительной способности, профилактики и лечения сельскохозяйственных животных: Материалы гаучно-пракгической конференции Курской ГСХА. - Курск, 2001. - С. 52-53.

33. Рыжкова Г.Ф. Показатели белково-минерального обмена в крови и молоке коров начальный период лактации при включении в рацион сои / Г.Ф. Рыжкова, М.В. Милюкова // Улучшение продуктивных качеств, профилактика и лечение болезней сельскохозяйственных животных: Материалы научно-практической конференции профессорско-преподавательского состава и аспирантов по итогам НИР за 2001 год. - К>рск, 2002. - с. 98.

34. Рыжкова Г.Ф. Активность Ыа+, К+ - АТФазы и распределение натрия и калия в эритроцитах лактирующих коров при введении в рацион сои / Г.Ф. Рыжкова, М.В. Милюкова // Новые фармакологические средства в ветеринарии: Материалы 15-ой международной научно-практической конференции, посвященной 300-летию Санкт-Петербурга. ' - С.-Петербург, 2003. - С. 79-80.

35. Рыжкова Г.Ф. Иммунобиологическая реактивность коров при введении в рацион соевой муки / Г.Ф. Рыжкова, М.В. Милюкова,

С.А. Левантовский // Новые фармакологические средства в ветерина- *

рии: Материалы 15-ой международной научно-практической конференции, посвященной 300-летию Санкт-Петербурга. - С.-Петербург, 2003. - С. 106-107.

36. Вишняков С.И. Эффективность использования протеиновой кормовой добавки из кожевенных отходов при откорме свиней / С.И. Вишняков, С.А. Левантовский, Г.Ф. Рыжкова // Актуальные проблемы биологии и ветеринарной медицины: Сб. научных трудов Курской ГСХА. - Курск, 2003.

37. Рыжкова Г.Ф. Показатели АТФазной активности в крови и молоке коров в начальный период лактации при включении в рацион сои / Г.Ф. Рыжкова,

M.B. Милюкова // Актуальные проблемы биологии и ветеринарной медицины: Сб. научных трудов Курской ГСХА. - Курск, 2003. - С. 79-81.

38. Рыжкова Г.Ф. Белковый обмен у коров при введении в рацион сои / Г.Ф. Рыжкова, С.А. Левантовский, М.В. Милюкова, М.И. Рецкий // Ветеринария, 2004. - № 11. - С. 45-46.

39. Вишняков С.И. Использование протеиновой кормовой добавки из кожевенных отходов в свиноводстве / С.И. Вишняков, С.А. Левантовский, Г.Ф. Рыжкова и др. // Материалы Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 120-летию ветеринарной службы Курской области. - Курск, 2005. - С. 104-107.

40. Рыжкова Г.Ф. Методическое пособие по выделению, очистке и определению активности транспортных АТФаз в органах и тканях животных / Г.Ф. Рыжкова, С.И. Вишняков, М.И. Рецкий. - Воронеж, 2005. - 31с.

Авторские свидетельства и патенты

1. A.c. 1076062 СССР, МКИ А 23 К 1/10. Способ получения корма из отходов кожевенного производства / С.И. Вишняков, С.А.Левантовский, В.В.Морозов, Н.М.Пичугин, Г.Ф. Рыжкова (СССР). -№ 3338774/30-15; Заявл. 10.09.81; Опубликов. 28.02.84. Бюл. №8.-2 с.

2. A.c. 1169592 СССР, МКИ А 23 К 1/10. Способ получения корма из отходов кожевенного производства / С.И.Вишняков, С.А. Левантовский, В.В. Морозов, Н.М.Пичугин, С.А. Васько, Г.Ф. Рыжкова (СССР). -№ 3636489/30-15; Заявл. 19.08.83; Опубликов. 30.07.85. Бюл. № 28. -2 с.

3. A.c. 1287329 СССР, МКИ А 23 К 1/10. Способ получения корма из отходов кожевенного производства / С.И.Вишняков, С.А. Левантовский, В.В.Морозов, Н.М.Пичугин, Г.Ф.Рыжкова, А.Ж. Сельцов, Н.Г.Федорченко (СССР). - № 3829720/30-15; Заявл. 21.12.84; (для служебного пользования).

4. A.c. 1205345 СССР, МКИ А 23 К 1/10. Способ получения кормовой добавки из отходов кожевенного производства / Н.М. Пичугин, С.А. Самсонов, В.В. Морозов, Г.Ф. Рыжкова и др. (СССР). -№ 3521476/30-15; Заявл. 28.09.82; (для служебного пользования).

5. A.c. 1302470 СССР, МКИ А 23 К Г/10. Способ получения кормовой добавки из отходов кожевенного производства / Н.М. Пичугин, С.А. Самсонов, В.Н. Тамазина, Г.Ф. Рыжкова и др. (СССР). -№ 3888551/30-15; Заявл. 22.05.85; (для служебного пользования).

6. A.c. 1561234 СССР, МКИ А 23 К 1/10. Способ получения кормовой добавки из отходов кожевенного производства / Н.М. Пичугин, Ю.К. Кириленко, С.И. Вишняков, Г.Ф. Рыжкова и др. (СССР). -№ 4310484/30-15; Заявл. 28.09.87; (для служебного пользования).

7. Патент 1817683 СССР, МКИ А 23 К 1/10. Способ получения кормовой добавки из отходов кожевенного производства /С.И. Вишняков, С.А. Левантовский, Г.Ф. Рыжкова (СССР). № 4929304/15; Заявл. 19.04.91; Опубликов. 23.05.93. Бюл. № 19. -2с.

8. Патент 2062036 РФ, МПК 6 А 23 К 1/10. Способ получения белкового корма / С.И. Вишняков, С.А. Левантовский, Г.Ф. Рыжкова, С.А. Чалабянц (РФ). № 92009160/15; Заявл. 30.11.92; Опубликов. 20.06.96. Бюл. № 17. -2с.

9. Решение о выдаче патента на изобретение РФ, МПК 7 А 61 К 35/64, А 61 Р 37/00. Способ получения препарата для повышения резистентности организма животных / A.A. Евглевский, А.Ф. Лебедев, Е.П. Евглевская, Г.Ф. Рыжкова и др. (РФ). № 2003135681/15 (038295); Заявл. 08.12.2003. _

Формат 60x84 1/16. Бумага дм множительных аппаратов Печать на копировальном аппарате КГСХА Усл.печл 2,0. Уч.-издл. 2,0. Тираж 100 ж.

№16985

РНБ Русский фонд

2006-4 19620

Содержание диссертации, доктора биологических наук, Рыжкова, Галина Федоровна

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Биологические мембраны, их структура и функции.

1.1.1. Структура биологических мембран.

1.1.2. Функции биологических мембран.

1.1.3. Химический состав биологических мембран.

1.1.4. Проницаемость клеточных мембран.

1.1.5. Пассивный и активный транспорт.

1.2. Транспортные АТФазы и их активность.

1.2.1. Ка+, К+ - АТФаза и ее активность.

1.2.1.1. Общая характеристика К+ - АТФазы.

1.2.1.2. Роль Ыа+, К+ - АТФазы в активном транспорте электролитов через клеточные мембраны.

1.2.1.3. Роль К+ - АТФазы в активном транспорте аминокислот через клеточные мембраны.

1.2.1.4. Ыа+, К+ - АТФаза тканей животных и факторы, влияющие на ее активность.

1.2.2. Структура и биологическая роль

§2+ - АТФазы.

1.2.3. Структура и биологическая роль Са2+ - АТФазы.

1.2.4. Аниончувствительная АТФаза и ее роль в процессах энергообеспечения клеток.

1.2.5. Биологическая роль К+, Н+-АТФазы.

1.3. Межклеточный обмен электролитов и его регуляции.

1.3.1. Биологическая роль и межклеточный обмен макроэлементов.

1.3.2.Межклеточное распределение натрия и калия в тканях.

1.3.3. Локализация натрия и калия в клетках.

1.3.4. Регуляция межклеточного обмена электролитов.

1.3.5. Межклеточное распределение свободных аминокислот и моносахаридов.

1.4. АТФазная активность и содержание электролитов в тканях животных при протеиновой недостаточности рациона.

1.5. Использование сои в кормлении коров.

1.6. Возможности использования в кормлении животных протеиновой кормовой добавки из отходов кожевенного производства.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. АТФазная активность и распределение электролитов в тканях крупного рогатого скота.

3.1.1. АТФазная активность теней эритроцитов и распределение натрия, калия и свободных аминокислот между эритроцитами и плазмой крови коров и телят.

3.1.2. АТФазная активность, распределение натрия, калия и свободных аминокислот в органах и тканях коров симментальской породы.

3.1.3. Содержание натрия и калия в некоторых органоидах клеток коров симментальской породы.

3.1.4. АТФазная активность, распределение натрия, калия и свободных аминокислот между эритроцитами и плазмой крови коров в различные репродуктивные периоды.

3.1.5. АТФазная активность мембран эритроцитов коров в зависимости от ионного состава инкубационной среды и рН.

3.1.6. Влияние соевой муки на АТФазную активность, распределение моновалентных электролитов и аминокислот в крови коров.

3.1.6.1. АТФазная активность мембран эритроцитов коров при введении в рацион соевой муки.

3.1.6.2. Распределение натрия и калия между эритроцитами и плазмой крови коров.

3.1.6.3. Содержание общего белка и иммуноглобулинов в сыворотке крови коров в периоды лактации и сухостоя при включении в рацион соевой муки.

3.1.6.4. Содержание свободных аминокислот в сыворотке крови коров при включении в рацион соевой муки.

3.1.6.5. Влияние соевой муки на молочную продуктивность коров.

3.2. АТФазная активность и распределение электролитов в органах и тканях овец.

3.2.1. АТФазная активность и распределение натрия, калия и свободных аминокислот между эритроцитами и плазмой крови овцематок и ягнят

3.2.2. АТФазная активность и распределение электролитов в тканях овец при введении в рацион пиридоксина и серосодержащих добавок.

3.2.3. Влияние пиридоксина и серосодержащих добавок на шерстную и мясную продуктивность овец.

3.3. АТФазная активность и распределение электролитов в органах и тканях свиней.

3.3.1. АТФазная активность, распределение натрия, калия и свободных аминокислот между эритроцитами и плазмой крови свиноматок и поросят-сосунов.

3.3.2. АТФазная активность, распределение натрия, калия и свободных аминокислот между эритроцитами и плазмой крови свиней в различные репродуктивные периоды.

3.3.3. Влияние протеиновой кормовой добавки на АТФазную активность и распределение моновалентных электролитов и аминокислот в тканях свиней.

3.3.3.1. Химический состав протеиновых добавок.

3.3.3.2. Влияние протеиновой кормовой добавки на активность АТФаз и показатели минерального обмена в органах и тканях свиней.

3.3.3.3. Влияние протеиновой кормовой добавки на некоторые показатели белкового обмена у свиней.

3.3.3.4. Влияние протеиновой кормовой добавки на содержание

ДНК, РНК и гликогена в тканях.

3.3.3.5. Влияние протеиновой кормовой добавки на физиологическое состояние, продуктивность и аминокислотный состав мяса свиней

4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

ВЫВОДЫ.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Активность транспортных АТФаз и межклеточный обмен электролитов у сельскохозяйственных животных в норме и при включении в рацион биологически активных веществ"

Изложенные в диссертации материалы являются обобщением результатов многолетней научно-исследовательской работы по изучению АТФазной активности, обмену макро- и микроэлементов, свободных аминокислот у сельскохозяйственных животных, выполненной по теме № 7 , номер государственной регистрации 01.200.2 02024.

Актуальность темы. Важнейшие достижения молекулярной биологии за последние годы связаны с изучением биологических мембран и транспортных АТФаз. Транспортные АТФазы, встроенные в биологические мембраны, образуют ионные насосы, изучение которых является ведущей проблемой для целого ряда лабораторий; ей посвящены многочисленные исследования как в нашей стране, так и за рубежом.

В настоящее время накоплены обширные экспериментальные и теоретические материалы по клеточной проницаемости, ионному транспорту, активности транспортных АТФаз и регуляции этих систем (Котык А., Япачек К., 1980; Данко И.М., Казьмин С.Д., Колосов Е.В., 1984; Болдырев A.A., 1985; Кагава Я., 1985; Кометиани З.П., 1987; Евдотиенко Ю.В., Кузина Л.Ю., Медведев Б.И., Юрков И.С., 1996; Титов В.Н., 1997 и др.).

Однако изучение этих проблем в основном проводилось на изолированных клетках, тканях и лабораторных животных. Работ же по изучению АТФазной активности у сельскохозяйственных животных с учетом их возраста, физиологического состояния, продуктивности, факторов питания очень мало, и они в основном носят фрагментарный характер.

В настоящее время установлено, что АТФазная активность изменяется с учетом возраста, периодов репродуктивной деятельности животных, гипертонических болезнях, неврозах, белковом голодании, ревматизме, болезнях щитовидной железы, депрессивных состояниях и т.д. (Болдырев A.A., 1977; Мороз A.M., 1983; Alan Swann С., 1985 и др.).

Дальнейшее изучение АТФазной активности у различных видов сельскохозяйственных животных в указанном направлении позволит более глубоко раскрыть интимные биохимические процессы в организме не только в норме, но и при развитии патологических процессов.

Активный транспорт ионов натрия и калия через клеточную мембрану происходит с участием Na+, К+ - аденозинтрифосфатазы, которая является основным компонентом Na - насоса, поэтому его называют Na+, К+ - АТФазным насосом (Jorgensen Р., 1974; Stein W., 1974; Forgae М., Chin G., 1981; Teller J.K., 1981 и др.). Следовательно, определяя активность Na+, К+- АТФазы, можно судить об интенсивности функционирования Na - насоса в различных органах и тканях сельскохозяйственных животных в зависимости от вышеуказанных факторов.

Установлено, что от активности Na - насоса зависит распределение натрия, калия и большинства свободных аминокислот в организме животных. Однако эта зависимость показателей обмена электролитов от активности Na±, К* -АТФазного насоса у различных видов сельскохозяйственных животных изучена недостаточно.

Поэтому, представляет определенный интерес проследить изменение этих показателей у взрослых животных и молодняка:

- у коров - в различные репродуктивные периоды и при включении в рацион сои. В последнее время в кормлении молочных коров как в нашей стране, так и за рубежом соя находит широкое применение, так как эта бобовая культура содержит до 54% полноценного белка, сбалансирована по аминокислотному составу, минеральным веществам. Тем самым она компенсирует дефицит белка и незаменимых аминокислот в рационах крупного рогатого скота. Представляет определенный интерес изучить влияние муки термически обработанного зерна сои на различные биохимические показатели как дойных, так и сухостойных коров, в частности на активность транспортных АТФаз, показатели минерального и белкового обмена;

- у овец - при включении в рацион серосодержащих добавок и пиридок-сина, количество которых в кормовых рационах обычно бывает недостаточным для удовлетворения потребности животных в сере, которая необходима для биосинтеза белка. Однако биохимические процессы, связанные с использованием серосодержащих веществ в кормлении овец остаются почти неизученными, а имеющиеся литературные данные по АТФазной активности, распределению моновалентных электролитов, обмену аминокислот недостаточны. В связи с этим актуальным является изучение эффективности скармливания пиридоксина как в отдельности, так и в комплексе с серосодержащими веществами (метио-нином и сульфатом натрия) на вышеперечисленные показатели;

- у свиней - в различные репродуктивные периоды и при включении в рацион протеиновых кормовых добавок. В настоящее время как дополнительные источники кормового белка широко и с успехом используются в животноводстве отходы мясной, молочной, пищевой и микробиологической промышленности (Агабабян Р.Г., 1975; Шманенков Н.Ф., 1975; Бейлин М.И., Жадан A.B., 1979; Степурин Р.Ф., 1982; Кочикьянц В.И., 1983; Жадан A.M., 1984; Юр-ченко В.И., Каримов Т.К., Кударов С.Е., 1990 и др.).

В последние десятилетия активно дискутируется проблема использования отходов кожевенной промышленности в протеиновом питании свиней и птицы (Быканов А.Ф. и др., 1975; Иргашев И.Х., Хамракулев Т.К., 1979; Джа-фарова P.M., Куракина Т.А., Капралова И.А., 1982; Кудашева A.B., Кульчумова Г.И., 1982; Вишняков С.И., Левантовский С.А., Рыжкова Г.Ф., 1983; Джафарова P.M., Капралова И.А., 1983 и др.).

Вопрос использования отходов кожевенного производства в качестве протеиновой кормовой добавки является актуальной проблемой, так как они составляют 40% и более от массы кожи. Однако большинство этих отходов содержит оксид хрома (Ш), что требует дополнительной обработки по их дехро-мированию.

В настоящее время разработан ряд способов дехромирования кожевенных отходов и получения из них протеиновых кормовых добавок (Хорин А.Н., 1976; Smith L.R., 1976; Hollwey D.E., 1977; Баскова H.A. и др., 1978; Уруджев P.C., 1979; Bartiaux-Thill N., Francois Е, 1980, Rosebrongh R.W., Steele N.C., 1981; Вишняков С.И. с сотр., 1983, 1985, 1986, 1998 и др.).

Получаемые препараты содержат различные количества хрома (Ш). Поэтому широкое использование их в рационах свиней требует изучения не только физиологических и зоотехнических показателей животных, но и глубоких биохимических исследований, связанных с белково-минеральным обменом и ролью транспортных АТФаз в этих процессах.

Цель и задачи исследований. Целью настоящей работы явилось изучение АТФазной активности, распределение минеральных веществ и свободных аминокислот в тканях различных видов сельскохозяйственных животных в норме в зависимости от возраста, репродуктивных периодов и при введении в рацион витаминных, серосодержащих и протеиновых добавок.

Для достижения этой цели на разрешение были поставлены следующие задачи:

1. Изучить АТФазную активность, содержание натрия, калия и свободных аминокислот в тканях коров и телят.

2. Установить АТФазную активность, распределение моновалентных электролитов и свободных аминокислот между эритроцитами и плазмой крови коров в зависимости от а) состава инкубационной среды и ее рН и б) репродуктивных периодов;

3. Изучить влияние соевой муки на активность транспортных АТФаз, показатели минерального и белкового обмена в тканях коров в период лактации и на молочную продуктивность животных.

4. Определить АТФазную активность, распределение натрия, калия и свободных аминокислот между эритроцитами и плазмой крови овец и ягнят.

5. Изучить АТФазную активность, содержание моновалентных электролитов и свободных аминокислот в тканях овец при введении в рацион пиридок-сина и серосодержащих добавок и влияние данных добавок на шерстную и мясную продуктивность животных.

6. Определить АТФазную активность, распределение натрия, калия и свободных аминокислот между эритроцитами и плазмой крови свиноматок и поросят-сосунов, а также изучить изменения данных биохимических показателей в различные репродуктивные периоды свиноматок.

7. Определить химический состав протеиновой кормовой добавки из де-хромированных кожевенных отходов и установить ее влияние на активность транспортных АТФаз, показатели минерального и белкового обмена в тканях свиней, их физиологическое состояние и продуктивность.

8. Изучить в сравнительном аспекте АТФазную активность, содержание минеральных веществ в тканях при отравлении свиней оксидом хрома (Ш).

Научная новизна работы. На основании биохимических исследований установлены изменения активности транспортных АТФаз и распределение электролитов в органах и тканях сельскохозяйственных животных.

Впервые установлено, что

- у коров в период глубокой беременности АТФазная активность снижается и увеличивается соотношение К:Ыа, одновременно падает уровень свободных аминокислот в эритроцитах и плазме крови. В период лактации АТФазная активность и соотношение моновалентных электролитов нормализуется, при этом содержание свободных аминокислот повышается и колеблется в пределах нормы в течение всего молочного периода. У телят обменные процессы протекают более активно, чем у коров-матерей. Включение в рацион коров соевой муки оказывает стимулирующее влияние на активность транспортных АТФаз, показатели белково-минерального обмена, иммунобиологическую реактивность лактирующих коров.

- у ягнят, особенно новорожденных, АТФазная активность и соотношение К:Ма значительно выше, чем у овцематок; комплексное использование пи-ридоксина и серосодержащих веществ в рационах овец приводит к снижению АТФазной активности, но при этом у подопытных животных не выявлено нарушения обмена моновалентных катионов между эритроцитами и плазмой крови; содержание же свободных аминокислот у них заметно увеличивается, кроме того, повышается продуктивность овец и качество шерсти.

- у поросят-сосунов, особенно новорожденных, показатели АТФазной активности, соотношение К:№ в тканях выше, чем у взрослых животных; суммарное содержание свободных аминокислот в эритроцитах и плазме крови у свиноматок значительно выше, чем у молодняка. У свиноматок в различные репродуктивные периоды АТФазная активность не имеет отклонений от средних показателей; максимальное содержание моновалентных катионов отмечается в супоросный период, минимальное: калия - у холостых, а натрия - у подсосных свиноматок. Включение в рацион свиней протеиновой кормовой добавки из дехромированных кожевенных отходов с содержанием в ней хрома, соответствующим нормам ПДК (не более 7,0 мг/кг) способствует усилению обменных процессов в организме животных (повышению АТФазной активности, нормализации соотношения моновалентных электролитов, увеличению суммарного количества свободных аминокислот в тканях). При этом повышается среднесуточный прирост живой массы свиней, причем более выраженно, чем при использовании в рационе животных эквивалентного количества мясокостной, рыбной муки и шротов. Кроме того, скармливание свиньям протеиновой добавки с повышенным содержанием хрома Ш (более 400 мг/кг сухого вещества препарата) или дача животным токсических доз оксида хрома (Ш) (1,5 - 4,0 г/кг живой массы) сопровождается снижением АТФазной активности и увеличением содержания хрома в органах и тканях свиней.

Новизна полученных результатов подтверждена авторскими свидетельствами №№ 1076062, 1169592, 1205345, 1287329, 1302470, 1561234 и патентами №№ 1817683, 2062036 на способ получения корма из отходов кожевенного производства.

Практическая значимость и пути ее реализации. Комплексное изучении межклеточного обмена (определение активности Ыа±, К* - АТФазы, содержания натрия, калия, свободных аминокислот в тканевых гомогенатах и субклеточных фракциях) дает возможность установить биохимические тесты, позволяющие судить о состоянии метаболических процессов в организме сельскохозяйственных животных в зависимости от их возраста, физиологического состояния, протеинового питания.

Доказана возможность широкого использования в рационах овец пири-доксина и серосодержащих веществ как в отдельности, так и в комплексе; в составах рационов и комбикормов для свиней - протеиновой комовой добавки из кожевенных отходов с содержанием в ней хрома (Ш) не более 10 мг/кг сухого препарата; в составе рационов и зерносмесей для коров - соевой муки.

На основании проведенных исследований Государственным Агропромышленным комитетом СССР разработано временное наставление за № 406 от 19. 05. 1988 г. по применению в свиноводстве протеиновой кормовой добавки из дехромированных кожевенных отходов (в порядке широкого производственного опыта), утвержденное заместителем начальника подотдела развития комбикормовых предприятий в сельском хозяйстве А.Г. Ключковским. Заместителем начальника Управления развития кожевенной, обувной и кожгалантерей-ной промышленности Министерства легкой промышленности СССР М.В. Ла-ненкиным утверждены технические условия на опытную партию протеиновой кормовой добавки из отходов кожевенного производства ТУ 17-06-115-85 (см. приложение).

Использование вышеуказанного комплекса биохимических исследований в ветеринарной и зоотехнической науке может служить новым научным направлением сельскохозяйственной биологии при изучении межклеточного обмена.

Апробация работы. Материалы диссертационной работы доложены на: Всесоюзной научно-технической конференции молодых ученых «Актуальные вопросы профилактики и лечения болезней у сельскохозяйственных животных» (Москва, 1985); городской научной межвузовской конференции «Молодые ученые вузов - производству и народному хозяйству» (Курск, 1986); секции биохимии Московской академии ветеринарной медицины и биотехнологии (Москва, 1987); второй отчетной научно-технической конференции СКТБ Курского научно-производственного кожевенно-обувного объединения (Курск, 1988); всесоюзном симпозиуме «Биохимия сельскохозяйственных животных и продовольственная программа» (Киев, 1989); всесоюзной научно-практической конференции «Эффективность использования кормов в птицеводстве» (Новосибирск, 1990); научной конференции профессорско-преподавательского состава Белгородской сельскохозяйственной академии «Пути возмещения дефицита протеина в рационах сельскохозяйственных животных» (Белгород, 1990); межвузовской конференции «Спектрометрические методы анализа окружающей среды» (Курск, 1995); научно-практической конференции «Повышение эффективности функционирования АПК» (Курск, 1995); научно-практической конференции, посвященной 25-летию факультета ветеринарной медицины Курской государственной сельскохозяйственной академии (Курск, 1997); десятой, двенадцатой, пятнадцатой международных научно-практических конференциях «Новые фармакологические средства в ветеринарии» (Санкт-Петербург, 1998, 2000, 2003); научно-практической конференции «Проблемы межклеточного обмена электролитов, белково-минерального питания и резистентности животных» (Курск, 1998); научно-практической конференции «Пути повышения продуктивности, воспроизводительной способности, профилактики и лечения сельскохозяйственных животных» (Курск, 1999); всероссийской научной конференции «Вопросы общей биологии в ветеринарии» (Москва, 2000); международной научно-практической конференции «Научно-прикладные аспекты состояния и перспективы развития животноводства и ветеринарной медицины», посвященной 50-летию основания Курской государственной сельскохозяйственной академии (Курск, 2001), всероссийской научно-практической конференции, посвященной 120-летию ветеринарной службы Курской области (Курск, 2005), а также на ежегодных научных конференциях профессорско-преподавательского состава Курской государственной сельскохозяйственной академии им. профессора И.И. Иванова в 1985-2005 г.г.

Основные материалы, изложенные в диссертации, получены автором самостоятельно. В разработке колориметрического способа определения хрома, принимали участие профессор кафедры органической и биологической химии Вишняков С.И., доцент этой кафедры Левантовский С.А., в разработке способа получения протеиновой кормовой добавки из отходов кожевенного производства принимали участие профессор Вишняков С.И., доцент Левантовский С.А., а также инженерно-технические работники Курского научно-производственного кожевенно-обувного объединения Морозов В.В. и Пичугин Н.М. за что автор приносит им искреннюю благодарность.

Основные положения, выносимые на защиту:

- изменения АТФазной активности и распределение электролитов в тканях сельскохозяйственных животных (коров, овец, свиней) в зависимости от их возраста;

- изменение АТФазной активности, содержания моновалентных катионов и свободных аминокислот в тканях коров в зависимости от ионного состава инкубационной среды, репродуктивных периодов и включения в их рацион соевой муки;

- влияние пиридоксина и серосодержащих веществ на АТФазную активность, распределение натрия, калия и свободных аминокислот в тканях овец, а также на продуктивность и качество шерсти животных;

- динамика активности транспортных АТФаз, содержания натрия, калия, хрома, свободных аминокислот в тканях свиней в зависимости от количества хрома в протеиновой кормовой добавке;

- изменение активности АТФаз, соотношения моновалентных катионов и показателей минерального обмена при отравлении свиней оксидом хрома (III);

- химический состав соевой муки и ее влияние на молочную продуктивность коров;

- химический состав протеиновой кормовой добавки из дехромирован-ных кожевенных отходов и ее влияние на физиологическое состояние свиней и их продуктивность.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Рыжкова, Галина Федоровна

ВЫВОДЫ

1. У сельскохозяйственных животных активность транспортной Na+,K+- ' АТФазы в мембранах эритроцитов меняется в зависимости от возраста, генотипа. У новорожденных телят и поросят ее активность в эритроцитах в 1,5 раза выше, чем у коров и свиноматок; у ягнят - в 8 раз выше, чем у овцематок. К трехмесячному возрасту этот показатель у молодняка приближается к таковому у взрослых животных. Активность Na+, К+- АТФазы мембран эритроцитов у свиней НК-генотипа в 10 раз выше, чем у коров и овец с LK-генотипом.

2. АТФазная активность мембран эритроцитов коров и телят изменяется в зависимости от ионного состава инкубационной среды. В отсутствии в среде ионов Na+, К+ и Mg2+- АТФазная активность в строме эритроцитов не обнаруживается. При добавлении к инкубационной среде ионов Na+ и К+ регистрируется низкая активность этого фермента. При наличии в инкубационной среде ионов Mg и особенно комплекса ионов Mg2+, Na+ и К активность как общей, так и Mg2+- и Na+,K+- АТФазы повышается. При этом обе системы мембран эритроцитов гидролизующие АТФ у телят в 1,5 раза активнее, чем у коров.

3. Под действием уабаина активность АТФазы, чувствительной к комплексу ионов Na+, К+, Mg2+, снижается в мембране эритроцитов коров и телят примерно до величин, обнаруживаемых при наличии в инкубационной среде только ионов Mg2+. №+,К+-АТФаза под действием уабаина практически полностью блокируется.

4. На активность №+,К+-АТФазы у сельскохозяйственных животных влияет соотношение K:Na в инкубационной среде и концентрация водородных ионов (рН). Наибольшая активность АТФаз регистрируется при инкубации теней эритроцитов в среде, содержащей высокую концентрацию ионов Na+ (150 мМоль) и низкую - К (5 мМоль) и отношение Mg2+: №гАТФ =1:1 (Mg2+ - 5 мМоль, ЫагАТФ - 5 мМоль) при рН = 8,0.

5. У сельскохозяйственных животных активность Na+,K+-АТФазы в мембранах эритроцитов меняется в зависимости от репродуктивных периодов у са- . мок. У коров активность этого фермента снижается в сухостойный период (за 9-10 дней до отела), затем происходит ее постепенное увеличение, достигая максимума во время разгара лактации. При этом содержание натрия в эритроцитах и плазме крови коров в предродовой период достоверно увеличивается. В послеродовой период и разгар лактации его содержание снижается, т.е. восстанавливается работа Ыа-насоса. Содержание калия в эритроцитах и плазме крови во все репродуктивные периоды находится примерно на одном уровне.

Активность АТФаз у свиноматок в различные репродуктивные периоды не имеет отклонений от средних показателей; при этом максимальное содержание натрия и калия отмечается в период супоросности, а минимальное: калия -у холостых, а натрия - у подсосных свиноматок.

6. Активность К+- АТФазы в гомогенатах тканей сельскохозяйственных животных значительно выше, чем в мембранах эритроцитов: у свиней - в 4,5-10 раз; у крупного рогатого скота - в 32-100 раз.

7. Содержание моновалентных электролитов (Ыа+ и К+) в эритроцитах изменяется с возрастом животных.

У крупного рогатого скота нет выраженных возрастных различий в содержании натрия в плазме крови, но при этом количество калия в плазме новорожденных телят несколько выше (5,2±0,5 мг-экв/л), чем у коров-матерей (4,4±0,6 мг-экв/л).

У взрослых овец в эритроцитах ЬК-генотипа мало калия (16,1 ±1,4 мг-экв/л) и много натрия (84,9±1,6 мг-экв/л). У ягнят, наоборот, в эритроцитах более высокий уровень калия (92,8±8,8 мг-экв/л) и низкий - натрия (52,2±7,7 мг-экв/л). С возрастом у ягнят постепенно уменьшается содержание калия и увеличивается количество натрия в эритроцитах, достигая уровня взрослых животных.

В эритроцитах свиней установлено высокое содержание калия (94,84±1,28 мг-экв/л) и низкое - натрия (12,22±0,56 мг-экв/л). У поросят содержание натрия и калия в эритроцитах в онтогенезе не меняется, в отличие от телят и ягнят.

8. Активность К+- АТФазы, уровень натрия и калия в эритроцитах ^ зависит от породы и генотипа животных. У коров симментальской породы в эритроцитах содержится больше натрия, чем калия, в эритроцитах коров черно-пестрой уровень калия в 3-4 раза выше, чем натрия. Взрослый крупный рогатый скот симментальской породы и овцы породы Прекос по содержанию калия в эритроцитах относятся к ЬК - генотипу. Взрослый крупный рогатый скот черно-пестрой породы, новорожденные телята и ягнята - к НК- генотипу. В первые три месяца жизни телят и ягнят происходит замена эритроцитов НК-генотипа на эритроциты ЬК- генотипа. Эритроциты свиней соответствуют клеткам НК-генотипа. Активность Ыа+,К+- АТфаз мембран эритроцитов у свиней НК- ' генотипа в 10 раз выше, чем у коров и овец с ЬК-генотипом.

9. У крупного рогатого скота в онтогенезе более активно изменяется содержание катионов в эритроцитах, гемоглобине и строме. В эритроцитах и гемоглобине новорожденных телят содержится в 2-3 раза больше калия и в 2 раза меньше натрия, чем у коров-матерей. В возрасте 3-4 месяцев эти показатели у телят приближаются к их уровню у взрослых животных. Содержание натрия в строме эритроцитов у коров и телят примерно одинаковое. Концентрация калия в строме эритроцитов у новорожденных телят в 1,5 раза выше, чем у коров-матерей; с возрастом количество калия в этих клетках снижается.

10. Содержание свободных аминокислот в эритроцитах животных выше, чем в плазме крови: у коров - в 1,74; овец - в 1,80; свиней - в 2,53 раза. Коэффициент распределения ((}) для всех аминокислот в эритроцитах свиней (НК-генотип) в 1,5 раза выше, чем у коров и овец, имеющих эритроциты ЬК - генотипа. В органах и тканях свиней, крупного и мелкого рогатого скота общее содержание свободных аминокислот превышает их уровень в эритроцитах в 7-20 раз.

11. В эритроцитах и плазме крови крупного рогатого скота не установле но возрастных различий в содержании свободных аминокислот. При этом коэффициент распределения аминокислот (С£) у клинически здоровых коров колеблется в пределах 2,32-1,23; у телят - 2,17- 1,44. Исключение составляет цистин, у которого коэффициент у коров равен 4,36, у телят — 3,27. Для отдельных аминокислот (глицина, аланина, тирозина, серина, глутаминовой кислоты) значение коэффициента С2 у телят выше, чем у коров.

У свиней возрастные различия по содержанию свободных аминокислот более выражены, чем у крупного рогатого скота. У новорожденных поросят их общая концентрация в эритроцитах в 1,4, а в плазме - в 2,3 раза ниже, чем у свиноматок. Коэффициент распределения свободных аминокислот (О) у клинически здоровых свиноматок колеблется в пределах 4,82-1,54; у поросят-сосунов - 10,00-2,11, у поросят он наиболее высокий по лейцинам (10,0).

12. В клетках органов и тканей свиней и крупного рогатого скота содержание свободных аминокислот превышает их уровень в эритроцитах, при этом в тканях скелетной и сердечной мышц их количество в 1,5-2,0 раза ниже, чем в клетках печени и почек.

13. У коров в эритроцитах и плазме крови наиболее низкое суммарное содержание свободных аминокислот характерно для предродового периода (30,85±0,60 и 12,15±1,05 мг% соответственно). На 3-5 день после отела их уровень повышается вначале в плазме (до 19,65±0,56 мг%), а затем на 10-15 день -в эритроцитах до 42,05±1,37 мг%. В плазме крови к 10-15 дню послеродового периода происходит постепенное выравнивание общего количества свободных аминокислот и приближение его к уровню, характерному для разгара лактации (15,06±1,18мг%).

У свиней во все репродуктивные периоды суммарное содержание свободных аминокислот в эритроцитах более чем в два раза выше, чем в плазме. Наибольшее суммарное содержание свободных аминокислот в эритроцитах и плазме крови установлено в первую половину супоросности (59,20±1,96 и 28,29±1,95 мг% соответственно); во вторую половину супоросности суммарное содержание свободных аминокислот в эритроцитах и плазме крови не отличается от уровня у холостых свиноматок; у подсосных свиноматок этот показатель несколько ниже и составляет 55,3±1,65 мг% в эритроцитах и 21,7±1,35 мг% в плазме крови.

14. Включение в рацион овец в течение 5 месяцев пиридоксина и сульфата натрия или пиридоксина и метионина благоприятно влияет на состояние здоровья животных, прирост массы тела и качество шерсти; настриг шерсти у валухов увеличивается более, чем на 25%; убойный вес -до 20,8%; убойный выход - до 1,4%. При этом снижается активность Na+,K+- АТФазы теней эритроцитов, а содержание натрия и калия в эритроцитах существенно не меняется. Снижение активности фермента происходит с одновременным увеличением в эритроцитах уровня серосодержащих аминокислот (цистеин). Поддержание нормального межклеточного распределения электролитов в крови связано с усилением обменной диффузии натрия и АТФ-зависимого его удержания в эритроцитах, а также активацией К+,СГ-транспорта, который контролируется сульфгидрильны-ми группами эритроцитов овец LK-генотипа.

15. Включение в рацион молочных коров соевой муки, прошедшей тер- , мическую обработку, в количестве 25% от уровня общего протеина оказывает стимулирующее влияние на активность Ыа+,К+-АТФазы мембран эритроцитов, показатели белкового обмена, естественную резистентность организма и распределение свободных аминокислот в сыворотке крови животных; усиливает биосинтез жира и молочного белка, по сравнению с животными, получавшими ячменно-пшеничную муку. При этом на 7-8% снижаются затраты кормов на 1 кг молока.

16. Использование в рационах коров соевой муки в первые четыре месяца лактации приводит к повышению среднесуточных удоев соответственно по ме- • сяцам на 10,4; 13,3; 12,2 и 14,6 %. В последующие три месяца лактационного периода эти различия значительно менее выражены.

17. Включение в рацион свиней (по 25-30 г на каждую кормовую единицу) протеиновой кормовой добавки из дехромированных кожевенных отходов с содержанием хрома (III) 0,25-10 мг /100 г сухого вещества стимулирует активность Na+,K+ - АТФазы, белково-минеральный обмен, биосинтез нуклеиновых кислот и гликогена в тканях, повышает прирост массы тела на 10-15 %, снижая затраты кормов. При этом содержание хрома (Ш) в тканях и соотношение K/Na в эритроцитах свиней существенно не изменяется и находится на уровне контрольных животных. Скармливании свиньям протеиновой добавки с содержанием хрома (Ш) 42 мг% приводит к увеличению количества хрома (Ш) в печени и почках и снижению активности транспортных АТФаз и соотношения K:Na в эритроцитах.

18. При введении свиньям токсических доз соединений хрома (Ш) в эритроцитах резко снижается активность №+,К+-АТФазы, соотношение K/Na и увеличивается содержание Сг3+ в тканях, что указывает на блокирование Na-Hacoca под действием высоких концентраций хрома (III).

19. Скармливание свиньям протеиновой кормовой добавки из дехромиро-ванных кожевенных отходов сопровождается повышением уровня общего белка и иммуноглобулинов в сыворотке крови, аминокислот в эритроцитах и плазме крови. При этом не происходит нарушения соотношения лимитирующих аминокислот (лизин/цистеин + метионин) в этих компонентах крови свиней.

20. Дача протеиновой кормовой добавки из отходов кожевенного производства позволяет заменять в рационах свиней такие дефицитные корма, как мясокостная, рыбная мука, шроты, получая при этом дополнительный прирост массы тела (от 3,2 до 57,2% на одну голову) при более высоком выходе полноценных продуктов убоя (от 0,5 до 8,2%) и при снижении кормовых затрат (на 710%) на единицу продукции.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. С целью восполнения в растительных рационах дефицита переваримо- ' го протеина, а также замены таких дефицитных кормов, как мясокостная и рыбная мука, шроты рекомендуется скармливать откормочному поголовью свиней протеиновую кормовую добавку из дехромированных отходов кожевенного производства в количестве 25-30 г на каждую кормовую единицу. Включение в рацион свиней протеиновой кормовой добавки способствует получению дополнительного прироста массы тела при более высоком выходе полноценных продуктов убоя животных при снижении на 7-10% кормовых затрат на единицу продукции. ^

2. Для восполнения в рационе дефицита кормового белка и стимуляции молокообразования в первые месяцы лактации коров рекомендуется использовать протеиновую кормовую добавку в виде соевой муки в количестве 25% от общего протеина рациона.

3. Для оценки состояния метаболических процессов в организме сельскохозяйственных животных в зависимости от их возраста, физиологического состояния, протеинового питания рекомендуется использовать следующие биохимические тесты: определение активности транспортных АТФаз, содержание и распределение натрия, калия, свободных аминокислот в эритроцитах, плазме '' крови, тканевых гомогенатах и субклеточных фракций.

Предлагается использовать для оценки активности транспортных АТФаз следующие показатели нормы для сельскохозяйственных животных.

Активность АТФаз у разных видов клинически здоровых животных

Удельная АТФазная активность

Вид животных Объект нМоль Р(/ мг белка в мин исследования М§2+ ,Ыа+, К+ Ыа+, К+

- АТФаза АТФаза АТФаза

Эритроциты 1,74 ±0,09 1,00 ±0,05 0,75±0,04

Почки 108,4 ±8,2 42,2 ± 2,4 66,2±5,8

Сердце 56,1 ±5,7 23,7 ± 3,0 32,4 ± 2,7

Спинной мозг 73,3 ± 5,8 32,1 ±2,8 41,2 ±3,0

Крупный рогатый Скелетная 74,6 ± 5,2 33,8 ± 2,6 40,8 ± 2,6 скот мышца

Печень 44,2 ± 4,7 18,8 ± 1,9 25,4 ± 2,8

Двенадцати- 127,0±11,5 52,2 ± 4,7 74,8 ± 6,8 перстная кишка

Эритроциты 7,68 ±0,71 3,14±0,18 4,54±0,53

Скелетная 68,88 ±1,44 35,22±1,04 33,66±0,41

Свиньи мышца

Сердце 49,56 ±0,55 18,24±0,22 31,33±0,33

Печень 82,86 ±1,19 39,27±0,84 43,59±0,36

Почки 107,66±1,21 47,88±0,08 59,77±1,13

Овцы Эритроциты 2,09 ±0,13 1,17 ±0,09 0,92 ±0,04

Почки 60,23 ±2,84 24,62±1,04 35,61±2,84

260

Библиография Диссертация по биологии, доктора биологических наук, Рыжкова, Галина Федоровна, Курск

1. A.c. 1076062 СССР, МКИ А 23 К 1/10. Способ получения корма из отходов кожевенного производства / С.И. Вишняков, С.А.Левантовский, В.В.Морозов, Н.М.Пичугин, Г.Ф. Рыжкова (СССР). № 3338774/30-15; Заявл. 10.09.81; Опубликов. 28.02.84. Бюл. № 8. -2 с.

2. Аврутина, А.Я. Аминокислотное питание свиней и птицы / А.Я. Аврутина, А.П. Дмитриченко.- М.: Колос, 1966. -106 с.

3. Агабанян, Р.Д. Использование отходов винных, плодово-овощных и кожевенных заводов при откорме свиней / Р.Д. Агабанян: Автореф. дис. канд. с.-х. наук. Самарканд, 1975. -19 с.

4. Акименко, В.К. Выделение и свойства растворимой Атфазы митохондрий сердца быка /Акименко В.К., А.Б. Минков, Л.Е. Бакеева, А.Д. Виноградов.- Биохимия, 1972.-Т. 37.-В.2.-с. 112-116.

5. Александровская, О.В. Цитология, гистология и эмбриология./ О.В. Алексендровская, Т.Н. Радостина, H.A. Козлов.- М.:Агропромиздат, 1987.448 с.

6. Антонов, Б.И. Лабораторные исследования в ветеринарии (биохимические и микологические) Б.И. Антонов.- М.: Агропромиздат, 1991.-88 с.

7. Афонский, С.И. Новые представления в биологии промежуточного обмена веществ сельскохозяйственных животных и значение их в ветеринарной клинике / С.И. Афонский.-Труды MB А (Биохимия).- 1957.21.- С.22-37.

8. Бабич, A.A. Соя на корм / A.A. Бабич // М.: Колос.- 1974.- 112 с.

9. Баладян A.M., Маносян А.О., Камалян Р.Г./ Биохимические показатели крови при нормальном отеле и при задержании последа// Ветеринария, 1989, №1, с.43-45

10. Бекер, В.Ф. Биохимия лизиса и использование его препаратов в питании животных / В.Ф. Бекер // Рига: Зинатке, 1976.- 186 с.

11. Белоногов, А. Соя- культура больших возможностей / А.Белоногов, JL Половинко, Д. Левангин // Молочное и мясное скотоводство.- 1999.- №. 6.- с.13-14.

12. Бергельсон, Л.Д. Мембраны, молекулы, клетки / Л.Д. Бергельсон.-М.: наука, 1982.- 182 с.

13. Болдырев, A.A. Влияние пероксида водорода и гипохлорида на активность Na, К-АТФазы мозга / A.A. Болдырев, Е.Р.Булыгина, Е.А. Волынская, Е.Г. Корелла, О.В.Тюлина. Биохимия, 1995.- 60- в. 10.- С. 1688-1695.

14. Болдырев, A.A. Na, К-АТФаза как олигомерная система / A.A. Болдырев.- Итоги науки и техники.- ВИНИТИ.- Биол. химия.- 1982.-е. 75146.

15. Болдырев, A.A. Na, К-АТФаза солевых желез утки /О.Д. Лопина, И.А.Свинухова //Биохимия, 1981, Т. 46, вып. 8. С. 46-51.

16. Болдырев, A.A. Биологические мембраны и транспорт ионов / A.A. Болдырев.-М., 1985. -156 с.

17. Болдырев, A.A. Биохимия активного транспорта ионов и транспортные АТФазы / О.Д. Лопина, А.О. Рубцов и др.- М.изд. МГУ, 1985.- 203 с.

18. Болдырев, A.A. Современное состояние проблемы транспортных АТФаз и транспортные аденозинтрифосфатазы / A.A. Болдырев.- М.: изд. МГУ, 1977.- 115 с.

19. Болдырев, A.A. Транспортные аденозинтрифосфатазы / A.A. Болдырев.-М.: МГУ, 1977.- 196 с.

20. Болдырев,А.А. Транспортные АТФазы в норме и патологии /A.A. Болдырев, В.А.Ткачук // Биохимия, 1974.- Т.39.- С. 17-21.

21. Бреслер, В.М. Транспорторганических кислот через плазматические мембраны /В.М. Бреслер, A.A. Никифоров.- Л.: Наука, 1981. -112 с.л .

22. Броун, И.И. Ca : третий сопрягающий ион / И.И. Броун // Биохимия, 1994, Т. 59, вып. 12. С. 1779-1783.

23. Бруевич, Т.С. Профессиональные аллергические дерматозы/ Т.С.Бруевич.- М.: Медицина, 1982.- 192 с.

24. Бурлакова, Е.Б. Влияние изменений в липидах мембран митохондрий на активность Mg зависимой АТФазы /Е.Б. Бурлакова, Ю.А.Заславский, Л.Н.Шишкина //Радиобиология.- 1984.-Т.24.- С. 505-508.

25. Бушнева, И.А. Активность аденозининтрифосфатаз мембран эритроцитов голодающих животных / И.А. Бушнева, А.Т. Иващенко // Известия АН Казахской ССР.- Сер. Биология.- 1981.- № 1.- С.22-24.

26. Бушнева, И.А. Свойства мембраносвязанной НСО 43 5 0 - AT Фазы эритроцитов /И.А. Бушнева, А.Т.Иващенко .- Каз ССР Рылым Акад. Хабарлары, Изв. АН Каз ССР. Сер.биол.- 1981.- N 3.- С.43-46.

27. Быканов, А.Ф. Способ получения кормовой муки из отходов кожевенной и обувной промышленности: / Труды Кубанского СХИ.-/ А.Ф. Быканов. Краснодар, 1975. -С. 8 .

28. Васильева, Е.А. Клиническая биохимия сельскохозяйственных животных / Е.А. Васильева М.: Россельхозиздат, 1982.- 254 с.

29. Вишняков, С.И. Активность Na+, К+- АТФазы и распределение электролитов в тканях овец с эритроцитами 4 К- генотипа / С.И. Вишняков /Деп. во ВНИИ тех.эконом. исследов. с.-х.- М.:1984.

30. Вишняков, С.И. Активность Na+,K+-ATOa3bi и распределение электролитов в тканях крупного рогатого скота / С.И. Вишняков.- Деп.во ВНИИ тех. эконом, исследов. с.-х. М.: 1983.- № 175- 83 деп.

31. Вишняков, С.И. Биохимическая характеристика обмена макроэлементов в организме сельскохозяйственных животных в норме и патологии: дис.доктора вет. наук.- / С.И.Вишняков Москва: MB А, 1966. -430 с.

32. Вишняков, С.И. Изучение белково-минерального обмена при токсической диспепсии телят / С.И. Вишняков, В.П. Херувимов, A.A. Сорокина.- Научн. Труды Курского СХИ. Курск - 1964.- Вып.2. С.204-212.

33. Вишняков, С.И. Использование раздубленных отходов кожевенного производства в качестве сырья для белкового корма / С.И. Вишняков и др. -Кожевенно-обувная промышленность, 1983.- № 3.- С.6-7.

34. Вишняков, С.И. К вопросу о содержании хрома в кормах и его усвояемости у свиней / С.И. Вишняков, Г.Ф. Рыжкова, H.A. Паничев // Сельскохозяйственная биология, 1987.- № 3.- С. 73-75.

35. Вишняков, С.И. Колориметрический метод определения хрома в органах и тканях / С.И. Вишняков, С.А. Левантовский, Г.Ф. Рыжкова.//Ветеринария, 1983.- № 8.- С. 71-73.

36. Вишняков, С.И. Межклеточный обмен в организме животных /С.И. Вишняков.- М.: Агропромиздат, 1988.- 158 с.

37. Вишняков, С.И. Межклеточный обмен электролитов и его изучение у с.-х. животных / С.И. Вишняков.- Воронеж: Центрально-Черноземное издательство, 1972.- 69 с.

38. Вишняков, С.И. Модифицированный колориметрический способ определения белка в сыворотке крови по биуретовой реакции / С.И. Вишняков, С.А. Левантовский.-Информационный листок.- № 240-81.-Курск: МТ ЦНТИ, 1980. -С.4 .

39. Вишняков, С.И. О токсичности соединений трехвалентного хрома для свиней / С.И. Вишняков, С.А. Левантовский, В.В. Морозов, Г.Ф. Рыжкова // Ветеринария, 1985.- № 5.- С.69-70.

40. Вишняков, С.И. Обезвоживание организма и перераспределение электролитов в крови животных / С.И. Вишняков.- Научные труды Воронежского СХИ, 1975.-t.70.- С. 188-191.

41. Вишняков, С.И. Обмен макроэлементов у с.-х. животных / С.И. Вишняков.-М.: Колос, 1967. -136 с.

42. Вишняков, С.И. Особенности белкового, углеводного и минерального обмена и АТФазная активность у свиней при скармливании белкового концентрата /С.И. Вишняков, С.А. Левантовский, Г.Ф. Рыжкова сельскохозяйственная биология, 1984.- № 11.- С.77-80.

43. Владимиров, Ю.А. Структурная организация мембран /Ю.А. Владимиров, А.Ф.Поглазов.- в кн.: Биологические мембраны.- Медицина, 1973.- 247 с.

44. Газдаров, В.М. О ферментной регуляции уровня свободных аминокислот в тканях цыплят / В.М. Газдаров // Труды ВНИИ физиологии и биохимии с.-х. животных .-М.,1971.- Т. 10.- С.73-74.

45. Геккелер, К.Е. Аналитические и препаративные лабораторные методы / К.Е.Геккелер, X, Экштайн.- М.: Химия, 1994.- 416 с.

46. Георгиевский, В.И. Минеральное питание животных / В.И. Георгиевский, Б.Н. Анненков, В.Т. Самохин // М.: Колос, 1979.- 472 с.

47. Герчикова Г.И. Определение содержания натрия и калия в эритроцитах методом фотометрии // Г.И. Герчикова // Лабораторное дело, 1963.-№ 1.- С.5-9.

48. Гинецинский , А.Г. Физиологические механизмы водно-солевого равновесия / А.Г. Гинецинский.- М.: 1963. -28 с.

49. Глебов, Р.Н. Свойства и функции АТФазы мембран секреторных гранул / Р.Н. Глебов, Г.Н. Крыжановский // Успехи современной биологии, 1983.- Т.95.- вып.2.

50. Глебов, Р.Н. Эндоцитоз и экзоцитоз / Р.Н. Глебов.- М.: Высш.шк., 1991.- 144 с.

51. Гноевой, В.И. Эффективность различных способов подготовки сои к вскармливанию молодняка крупного рогатого скота / В.И. Гноевой, А.Г. Чепурной В.Н., Борсуков В.Н. // Н.И.И. животноводства лесостепи и Полесья УССР.- 1991.- №.58.-с.26-29.

52. Голубовская, О.И. Активность ферментов плазматических мембран почек собак при действии полиеновых антибиотиков in vivo и in vitro / О.И. Голубовская, Л.С. Кравченко // Биохимия.- 1979.- Т.44,- вып.1.- С. 160-165.

53. Градусов, Ю.Н. Аминокислотное питание свиней / Ю.Н. Градусов.-М.: Колос, 1968.-320 с.

54. Даниленко, М.П. Адренергическая и холинергическая регуляция а+, К+- АТФазы / М.П. Даниленко.- Труды института физиологии АН Каз. ССР,1982, Т.25 .- С. 12-49.

55. Данко, И.М. Роль одновалентных катионов Na+ и К+ в регуляции клеточной пролиферации и биосинтеза макромолекул / И.М. Данко, С.Д. Козьмин, Е.В. Колосов. Успехи современной биологии, 1984.- т.97.-вып.З.

56. Деревянский, В. Соя в кормлении дойных коров / В. Деревянский, В. Смоляр, П. Кузьмич // M и M скотоводства.- 1993, № 4, с. 35-37.

57. Джафарова, P.M. Исследование возможности получения белкового кормового продукта из отходов кожевенного производства / P.M. Джафарова, Т.А. Куракина, И.А. Капралова.- Сб.науч.трудов Моск.вет.акад., 1982.-Т. 1 .-С.78-81.

58. Джонсон, Р. Справочник биохимии /Р.Джонсон, Д.Эллиот, У. Эллиот, К. Джонс.-М.: Мир,- 1991.- 114 с.

59. Древаль, В.И. Влияние ионизирующего излучения на АТФазные активности плазматических мембран / В.И. Древаль //Укр.биохим.ж.- 1993.65, №2.-С. 99-102.

60. Древаль, В.И. Влияние многократного облучения крыс на активность Ca и Mg АТФазы плазматических мембран тимоцитов /В.И. Древаль // Радиационная биология и радиэкология- 1994.- 34, № 1.- С. 45-48.

61. Дъёндъши, Г. Изменение активности Na-K- АТФазы в корковом и мозговом веществе почки при острой почечной недостаточности при эксперименте / Г. Дъёндъши // Патологическая физиология и экспериментальная терапия, 1981.-№ 5.- С. 51-53.

62. Дьяков М.И. Минеральное питание сельскохозяйственных животных / М.И. Дьяков, Ю.В. Голубенцева.- «Сельхозгиз», М.: 1947. 64 с.

63. Елисеев, В.Г. Выявление дезоксирибонуклеиновой кислоты. Реакция Фёльгена / В.Г. Елисеев // Основы гистологии и гистологической техники. -М.: Медицина, 1967.- С. 231-233.

64. Елисеев, В.Г. Гистология / В.Г. Елисеев.- М.: Медгиз, 1963. -218 с.

65. Емельянов, H.A. К методике определения инулинового пространства мышц грызунов / H.A. Емельянов.- Лабораторное дело, 1969.-№ 2. 5 с.

66. Ерсков, Э.Р. Протеиновое питание с.-х. животных / Э.Р. Ерсков.-Агропромиздат, 1985. 106 с.

67. Жаров, A.B. Гистохимические и электронно-микроскопические исследования биопсийного материала печени молочных коров / A.B. Жаров // Труды Всесоюзн.конфер.по патолог.анатомии животных.- Тбилиси, 1973.-С.14-19.

68. Жигунова, А.Т. Некоторые показатели углеводного обмена в печени и мышцах кроликов при добавлении хрома и никеля в рацион /

69. A.Т.Жигунова, С.З. Моисеев // Сб.науч. трудов Ленинградского ветеринарного института.- Л.,1980.-№ 64.- С.24-28.

70. Заверюхин, В.И. Производство и использование сои /В.И. Заверюхин, И.Л. Левандовский // Киев.: «Урожай».- 1988.- 112 с.

71. Збарский, Б.И. Роль электролитов в обмене белков / Б.И. Збарский.-М., 1949.-56 с.

72. Зборовский, А.Б. К изучению активности цитохромоксидазы и ее молекулярных форм, АТФазы и адениловой системы крови у больных ревматизмом /А.Б.Зборовской, В.Ф.Мартемьянов, Т.А. Морозова.-Советская медицина.- 1978.- № 7.- С. 101-104.

73. Зборовский, А.Б. К изучению активности цитохромоксидазы и ее молекулярных форм, АТФазы и адениловой системы крови / А.Б. Зборовский, Т.А. Морозова,- В сб. «Вопросы кардиоревматологии».-Актюбинск.- 1977.- С. 40-42.

74. Иваницкий, С.Б. Биологические и технологические аспекты использования сои при получении пищевых продуктов / С.Б. Иваницкий,

75. B.Г. Лобанов, C.B. Назаренко // Пищевая технология.- 1998.- № 1.-е. 8-12.

76. Иванова, Л.А. Влияние ионов натрия на активность ацетилхолинэстеразы эритроцитов /Л.А. Иванова // Биохимия.- 1967.-Т.32.-5.-С.-975-979.

77. Иващенко, А.Т. Аниончувствительная аденозинтрифосфатаза мембран эритроцитов крысы / А.Т. Иващенко // Биохимия, 1978. т.43, вып.6, С. 1086-1089.

78. Иващенко, А.Т. Выделение и свойства аниончувствительной аденозинтрифосфатазы из мембран эритроцитов / А.Т. Иващенко, И.А. Бушнева//Биохимия, 1981.Т.46, вып.З, С. 486-488.

79. Иващенко, А.Т. Исследования аденозинтрифосфатазной активности ядер клеток печени и тимуса крысы / А.Т. Иващенко // Биохимия, 1978. Т. 43, вып.11, С. 2064-2068.

80. Иващенко, А.Т. Механизм влияния анионов на активность аденозинтрифосфатаз / А.Т. Иващенко // Науч.докл.высш.школы Биол.н.-1981.-№7.- С. 5-15.

81. Иващенко, А.Т. Стимулируемая бикарбонатом АТФаза мембран эритроцитов крысы / А.Т. Иващенко, С.Т. Рыскулова.// Вопросы мед.химии.- 1975, вып.5, С. 492-494

82. Ивков, В.Г. Динамическая структура липидного бислоя. / В.Г. Ивков, Г.Н. Берестовский//М.: 1981. 76 с.

83. Ивков, В.Г. Липидный бислой биологических мембран / В.Г. Ивков, Г.Н. Берестовский // М.: 1981- 144 с.

84. Играшев, И.Х. Исследование возможности получения из отходов хромированной кожи продукта с высоким содержанием протеина / И.Х. Играшев, Т.К. Хамракулев // Труды УзНИВИ, 1979.- Т. 29, ч.2. С. 87-91.

85. Ильин, B.C. О механизме влияния инсулина на гексокиназную реакцию / B.C. Ильин, Г.Ф. Титова.- Вопросы медицинской химии.- 1956. № 2-С. 203-205.

86. Кагава, Ясуо. Биомембраны (перевод с японского) / Ясуо Кагава.-М.: Высшая школа, 1985.- 303 с.1. Л I

87. Кальницкий, Б.Д. Минеральные вещества в кормлении животных / Б.Д. Кальницкий.- JL: Агропромиздат, 1985. 96 с.

88. Кармолиев, Р.Х. Современные биохимические методы исследования в ветеринарии и зоотехнии / Р.Х. Кармолиев.- М.: Колос, 1971. -46 с.

89. Карнухина, Л.И. Переработка отходов кожевенно-обувного производства / Л.И. Карнухина, A.B. Пономарева A.B., Р.Н. Чайковская.-Киев: Техника, 1983.- 64 с.

90. Клиценко, Г.Т. Влияние различных доз поваренной соли в рационах молочных коров на использование азота / Г.Т. Клиценко. Науч.труды Укр. с.-х. академии, 1952.- т. 2.- С. 291-296.

91. Клюева, H.H. Роль гуанидиновых групп аргининовых остатков Na, К -АТФазы и глутамойдегидрогеназы во взаимодействии с холестерином / H.H. Клюева, И.М. Матвеева, К.А. Кожевникова // Упр. биохим.ж., 1989.-61.№5.- с. 29-34.

92. Колосова, И.А. Роль GTP- связывающих белков в регуляции Na+, К+, 2CI" котранспорта: действие фторид иона /И.А. Колосова, И.Бернхард, С.Н. Орлов, Ф.Р. Бюллер.// Биохимия, 1993.Т. 58, С.456 .

93. Кометиани, З.П. Кинетика мембранных транспортных ферментов /З.П. Кометиани, М.Г. Векуа.- Высш.шк., 1988.- 111 с.

94. Комтон, П.О. Влияние тироксина на активность ферментов митохондрий печени крыс / П.О. Комтон.- Укр.биохим.журнал.-1974.-46.-№1 .-С. 46-50.

95. Костерин, С.А. Кинетика гидролиза АТФ катализируется Mg2+- АТ-фазной плазменной мембраны клетки гладкомышцы /С.А. Костерин, Н.Ф. Браткова, В.П. Зимина. // Биохимия.- 1995.- № 9.- С. 1103-1109.

96. Котык, А. Мембранный транспорт / А. Котык, К. Яначек.- М.: Мир, 1980.-341 с.

97. Кребс, ЕМ. Липиды клеточных мембран / Е.М. Кребс // Л; 1981- 158с.

98. Крестинская, Т.В. Активность сукцинатдегидрогеназы и Na, К — зависимой АТФазы в клетках почечных канальцев крысы при натрийурезе, вызванном фуросемидом / Т.В. Крестинская, И.Б. Манусова // Вопросы мед. химии, 1975.- в. 4.-С. 375-379.

99. Кроленко, С.А. Проницаемость клеток для неэлектролитов. XI съезд Всесоюзн.физиол.общества им. И.П. Павлова / С.А. Кроленко, H.H. Никольский.- М., 1970.- Т.1.- С.3-7.

100. Крохина, В. А. Повышение полноценности кормления и эффективности использования кормов при откорме свиней. Автореферат дис.докт.с.-х. наук/В. А. Крохина // Дубровицы, 1981.- 52 с.

101. Кудашева, A.B. Отходы кожевенного производства в рационе животных / A.B. Кудашева, Г.И. Кульчумова.- Животноводство, 1982.- № 4.- 13 с.

102. Кузнецов, В.В. Обмен веществ и продуктивность рано отнятых поросят при разном уровне витамина С в рационе / В.В. Кузнецов.-Автореферат дис. канд. биол. Наук.- 1986.- 18 с.

103. Куликова, О.Г. Исследование АТФазной и АТФ-зависимой аккумуляции Са2+ ядрами скелетных мышц. Эффекты денервации и электрической стимуляции / О.Г. Куликова, Г.А. Савостьянов, Л.М. Белявцева, Н.И. Разумовская // Биохимия, 1982.-Т.47.-В.7.- С. 1216-1221.

104. Кульберг, А .Я. Рецепторы клеточных мембран. / А.Я. Кульберг // М.: Высшая школа, 1987.- 103 с.

105. Курилов Н.В., Коршунов В.Н., Севастьянова Н.А. и др. Нормирование протеинового питания животных с. 17-23. В кн.: Новое в кормлении высокопродуктивных животных/ Под ред. акад. ВАСХНИЛ Калашникова А.П.-М.: Агропромиздат, 1989.-262с.

106. Левантовский, С. А. Динамика свободных аминокислот в эритроцитах и плазме крови коров при скармливании амидного жома в различные периоды лактации / С.А. Левантовский.- Автореф. дисс. канд. биол. Наук.- Боровск, 1974. 16 с.

107. Левантовский, С.А. Прямое определение свободных аминокислот в эритроцитах млекопитающих и их распределение между компонентами крови / С. А. Левантовский.- Науч.труды Воронежского СХИ, 1973.- Т.8.-вып.З.- С. 54-59.

108. Левина, Ц.И. Об активности (Ыа+,К+, активируемой АТФазы и транспортной АТФазы в мозгу при экспериментальном воздействии фенола и бензола / Ц.И. Левина : в Сб.: Митохондрии. Биохимия и ультраструктура.- М.: Наука, 1973. -С. 38-43.

109. Левицкий, Д.О. / Кальций и биологические мембраны / Д.О. Левицкий; под ред. А.А. Болдырева.- М.: Высш.шк., 1990.- 124 с.

110. Лемешко, В.В. Митохондриальные Са транспортирующие системы и их роль в регуляции окислительного метаболизма / В.В.

111. Лемешко // Биохимия животных и человека. Ионный гомеостаз клетки.-Киев: Наукова думка.- 1990.- Вып. 14.- С. 23-33.

112. Ленинджер, А. Биохимия / А, Ленинджер. Биохимия. М.: Мир, 1974.957 с.

113. Ленинджер, AJL Митохондрия /АЛ Ленинджер.- М.: Мир, 1966. -96 с.

114. Ли, B.C. Липидный состав и структурно-функциональные свойства мембран эритроцитов разного возраста / B.C. Ли и др.- Вопросы мед. химии, 1982.-т.28.- № 6.- С. 66-71.

115. Либерман, Е.А. Живая клетка / Е.А. Либерман.-М.: 1982. -102 с.

116. Ливак, И.И. Влияние частичного белкового голодания на течение обменных процессов в организме поросят / И.И. Ливак.- Научно-техн. бюл. УкрНИИ физиологии и биохимии с.-х. животных, 1984.- № 6/2.- С. 28-31.

117. Лисовская, И.И. Аденозинтрифосфотаза клеточных мембран и перенос ионов / Н.И. Лисовская // Успехи биологической химии.- 1967.- № 8.- С. 93.

118. Лихтенштейн, Г.И. Многоядерные окислительно-восстановительные металлоферменты. / Г.И. Лихтенштейн.- М.: Наука, 1979.- 320 с.

119. Лихтенштейн, Г.И. О химическом механизме АТФазной реакции в системах трансформации энергии / Г.И. Лихтенштейн, Л.А. Сырцова, Н.И.Тертышная // Докл. АН СССР.- 1982.- 262.- № 4.- С. 1013-1016.

120. Лишко, В.К. Конформационные изменения в структуре ионного насоса при взаимодействии Na+ -К+- АТФазы с оубаином / В.К. Лишко, М.К. Малышева, Н.М. Полякова // Биохимия.- 1970.-t.35, вып. 3,- С. 510515.

121. Лишко, В.К. Мембраны и жизнь клетки / В.К. Лишко, М.И. Шевченко.- К.: Наук, думка, 1987.- 104 с.

122. Луцкий, Л.Я. Влияние стресс-факторов на клиническое состояние и функцию печени бычков при откорме / Л.Я., Луцкий, В.И. Михайлов и др.-В кн. «Профилактика нез.бол.с.-х.жив.».-М.: Колос, 1977.- С. 210-212.

123. Малахов, А.Г. Нормативы биохимических показателей обмена веществ в организме крупного рогатого скота / А.Г. Малахов, Р.Х. Кармолиев.- Методич.указ.-М.: MB А, 1986.- 28 с.

124. Мартиросов, С.М. Бионасосы роботы клетки /С.М. Мартиросов.-М.: Радио и связь, 1981.- 40 с.

125. Матюшичев, В.Б. Влияние внешнего Р-рентгеновского облучения на аденозинтрифосфатазную активность тканей крыс / В.Б. Матюшичев, В.Р. Таратухин, И.П. Ашмарин, Н.В. Кулева.- Ленинград: Вестник ЛГУ, 1974.-№3.- С.75-82.

126. Мельник, П.П. Перспективы развития производства и переработки сои / П.П. Мельник, В.А. Каращин // Техника и оборудование для села 1999.-№9.- с.3-4.

127. Микоелян Н.П./ Факторы влияющие на структурно-функциональные свойства эритроцитарных мембран у беременных женщин// Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1997, т.123, №1, с.26-28

128. Митин, Е. Некоторые вопросы кормления коров в сухостойный период / Е. Митин.- Достижения с.-х. науки и практики.- Серия 2.-«Животноводство и ветеринария»,- М.: 1981.- № 1.- С. 33-37.

129. Младек, М Переработка отходов кожевенной промышленности / К. Младек, В. Пивонька, О. Тимченко.- М., 1977.-67 с.

130. Мороз, A.M. Активность Na+, К+ АТФазы в эритроцитах после воздействия лазерного излучения /A.M. Мороз.- Укр. биохим.ж., 1984.-Т.55.- № 6,- С. 674-676.

131. Муллинз, Д. Современные проблемы электробиологии / Д. Муллинз.- М.: Мир, 1964.-120 с.

132. Наточин, Ю.В. О натриевом насосе почечной клетки / Ю.В. Наточин.-Ж. Эволюц.биохимии и физиол.- 1969, Т.5.- №2.- С. 241-248.

133. Нейфах, С.А. «Мембранная» гипотеза регуляции энергетического обмена клетки /С.А. Нейфах.- Первый биохим. съезд.-1.- 79, 1964. -С. 6472.

134. Никольский, H.H. Транспорт Сахаров через клеточные мембраны / H.H. Никольский,- JL: изд. ЛГУ.- 170 с.

135. Новиков, А. Нуклеотидфосфатазная активность клеточных мембран /А. Новиков, Э. Эсснер, С. Голдфишер, М.Хэйес // В кн. «Ультраструктура и функция клетки.- М.: 1965. С. 84-111.

136. Нок, Т. Транспортные системы и усвояемость питательных веществ / Т. Нок // Химико-фармацевтический журнал.-1973.- т. 8 № 10.-С. 15-18.

137. Овчинников, Ю.А. Мембрано-активные комплексы / Ю.А. Овчинников, A.M. Шкроба, В.Т. Иванова.- М.: Наука, 1975. 76 с.

138. Овчинников, Ю.А. Химические инструменты исследования биологических мембран / Ю.А. Овчинников.- Вестник АН СССР.- 9.-1970.-С.47-54.

139. Олль, Ю.К. Минеральное питание животных в различных природно-хозяйственных условиях / Ю.К. Олль.- Л.: Колос, 1967.- 208 с.

140. Орлов С.Н., Покудин Н.И., Котелевцев Ю.В. Транспорт калия, анионов и активность Na+ насоса мембран эритроцитов: три различных механизма регуляции внутриклеточным кальцием// Биохимия, 1987. т.52, вып. 8, с.1373-1386

141. Орлов, С.Н. Транспорт калия, анионов и активность Na+- насоса мембраны эритроцитов: три различных механизма регуляции внутриклеточным кальцием /С.Н. Орлов, Н.И. Покудин, Ю.В.Котелевцев // Биохимия, 1987.Т. вып.8, С. 1373-1386.

142. Пайон, Р. Влияние рациона на содержание аминокислот в тканях / Р. Пайон.- в кн.: Белковый обмен и питание,- М.: Колос, 1980.- С. 180-193.

143. Петров, Р.В. Клеточные мембраны и иммунитет / Р.В. Петров, Р.И. Атауллаханов.- М.: Высш.шк., 1991.- 144 с.

144. Петрова, А.Т. Обмен калия, натрия, хлора у лактирующих коров /

145. A.Т. Петрова, Д.Т. Волков // Труды ВНИИФБж.- Боровск, 1970.- Т. 9.- с. 3436.

146. Петрова, А.Т. Обмен калия, натрия, хлора у лактирующих коров /А.Т. Петрова, Д.Т. Волков.-Труды ВНИИФБЖ, 1970.- Т.9. -С. 106-109.

147. Петровский, К.С. Как улучшить внутреннюю среду /К.С. Петровский.- Химия и жизнь, 1981.- № П.- С.44-47.

148. Писарева, JI.H. Факторы, определяющие функциональную активность Na, К- АТФазы / JT.H. Писарева // Цитология, 1991.- 33.- № 11.-с. 26-31.

149. Писарева, JI.H. Итоги работы по очистке Na, К- АТФазы / JI.H., Писарева.- В кн. «Транспортные АТФазы».- Изд. МГУ,- М.: 1977, С. 51-57.

150. Плохинский, H.A. Биометрия / H.A. Плохинский. -М.: МГУ, 1970.-изд.2,- 367 с.

151. Победнов, A.B. Соя в кормлении животных и птицы / А.В.Победнов,

152. B.И. Тарушкин //Кормопроизводство.- 1999, № 2.- с.29-32.

153. Поглазов, А.Ф. Реагрегация структурного белка внешних мембран митохондрий /А.Ф. Поглазов, В.В. Мясянжинов, Б.Ф. Поглазов // Биохимия.- 33.- № 5.- 1968.- С. 1069-1073.

154. Покровский, АА Аминокислотный сослав белков мембран субклеточных структур печени крысы и влияние на него белковой недостаточности / АА. Покровский // Вопросы питания.-1976 № 5.- С25-29.

155. Покровский, A.A. Биохимические методы исследований в клинике / A.A. Покровский.- М.: Медицина, 1969. 212 с.

156. Поликар, А. Молекулярная цитология мембранных систем живой клетки / А. Поликар.- М.: МИР.- 1972.- 158 с.

157. Попов, И.С. Протеиновое питание животных / И.С. Попов, А.П. Дмитриченко, В.М. Крылов.- М.: Колос, 1975. 76 с.

158. Потехин С.А., Кондратьева Л.Ф./ Эффективность использования азота коровами в зависимости от распадаемости протеина кормов// Доклады Российской академии сельскохозяйственных наук, 2002. №4, с.47-51

159. Руденко, C.B. Аномальный транспорт катионов при стимуляции Са-зависимого К- канала в регидратированных эритроцитах / C.B. Руденко, Н.М. Пересецкая // Биохимия, 19954.-60.- 7-. С. 1146-1154.

160. Рэкер, Э. Биоэнергетические механизмы: новые взгляды / Э. Рэкер.-М.: Мир, 1979.-216 с.

161. Сальманович, B.C. Распределение вне- и внутриклеточных электролитов и воды в миокарде разных отделов сердца собак /B.C. Сальманович // «Физиол. животных СССР».- Т.55.- № 2, 1969 .- С. 186-193.

162. Сейц, И.Ф. Роль ионов калия и аммония в реакции переноса фосфата с фосфопировиноградной кислоты на адениловую систему / И.Ф. Сейц .Биохимия, 1949.-Т.14.-2.- С. 134-140.

163. Симонов, Г.В. и др. Влияние карнозина на активность Na, К — АТФазы: перспективы применения в клинической кардиологии /Г.В. Симонов и др. // Биохимия, 1992.- т.57, вып. 9.- С. 34-39.

164. Скулачев, В.П. Биоэнергетика. Мембранные преобразователи энергии / В.П. Скулачев.- М.: Высш.шк., 1989.- 283 с.

165. Скулачев, В.П. Рассказы о биоэнергетике /В.П. Скулачев.- М.: Молодая гвардия, 1978.- 250 с.

166. Снедекор, Дж.У. Статистические методы в применении к исследованиям в сельском хозяйстве и биологии / Дж.У Снедекор.- М.: Сельхоз. литературы, журналов и плакатов, 1961.- 503 с.

167. Сорокина, Д.А. Структурно-функциональные свойства белков / Д.А. Сорокина, И.Н. Залевская.- Киев: Выща шк., 1989.- 216 с.

168. Сперанская, Н.В. Количественная оценка проницаемости мембран эритроцитов для одновалентных катионов /Н.В. Сперанская, В.Н. Титов.-Лаб. дело, 1981.-№ 10.- С.592-595.

169. Степанян, P.A. АТФазная активность плазматических мембран печеночной ткани кур в онтогенезе /P.A. Степанян, A.A. Симонян // Биологический журнал Армении, 1983.- т.36.-№10.-С.830-834.

170. Степурин, Р.Ф. Об использовании отходов свиноводства для производства белковых кормов / Р.Ф. Степурин.- В кн.: Пути повышения эффективности кормления с.-х. животных.- Кишинев, 1982.- С. 45-47.

171. Страйер, Л. Биохимия / Л. Страйер.- М.: Мир, 1984.- Т. 1. 397 с.

172. Страйер, Л. Биохимия / Л. Страйер.- М.: Мир, 1984. -Т.2. 308 с.

173. Страйер, Л. Биохимия / Л. Страйер.- М.: Мир, 1985.-Т.З. 232 с.

174. Сухомлин, К.Г. Активность некоторых ферментов энергетического обмена у птицы при разных белковых добавках к рациону / К.Г. Сухомлин и др.- Сб.науч.трудов ТСХА.- М., 1986.- С.111-114.

175. Сысоев A.A. Линамика некоторых показателей крови, у стельных коров с. 196-197 в кн.: Физиолого-биохимические основы высокой продуктивности сельскохозяйственных животных Ленинград. «Наука» Л. отдел. 1983. С. 121

176. Сысоев, A.A. Основы физиологии репродуктивной системы коров /A.A. Сысоев .- Изд. Харьков. Ун-та, 1968. 76 с.

177. Ташмухамедов, Б.А. Нейротоксины в исследовании биологических мембран / Б.А. Ташмухамедов, П.Б. Усманов.- М.: Высш.шк., 1991.- 112 с.

178. Ташмухамедов, Б.А. Транспорт ионов через биологические мембраны и механизм действия физиологически активных веществ / Б.А. Ташмухамедов.- Ташкент: ФАН, 1982. 56 с.

179. Ткачев, Е.З. Обмен макроэлементов между кровеносной и пищеварительной системами у растущих свиней / Е.З. Ткачев, В.Д. Марков // Докл. ВАСХНИЛ,- 1980.- № 8.- С. 26-27.

180. Ткачук, В.А. Выделение из скелетных мышц кролика и характеристика высокоочищенных препаратов сарколеммы, содержащих Na+,K+- АТФазу /В.А. Ткачук, A.A. Болдырев.- Биохимия, 1974.-t.39.-869 с.

181. Трошин, A.C. О механизмах клеточной проницаемости и причинах возникновения биоэлектрических потенциалов / A.C. Трошин.- Сб. «Пробл. лабильности, парабиоза и торможения».- М.: 1962 .- С.231-232.

182. Трошин, A.C. Проблема клеточной проницаемости / A.C. Трошин.-М.: Л.: АН СССР, 1956. 78 с.

183. Трошин, A.C. Распределение веществ между клеткой и средой / A.C. Трошин.- Л.: Наука, 1985.- С.101-107.

184. Умарова, Ф.Т. Изучение структурно-функциональной зависимости ингибирующего влияния флавопоидов на Na, К+ АТФ- азу и их положительно-инотропного действия / Ф.Т. Умарова, Э.Х. Батиров, В.М.Меклер // Биологические мембраны.- 1998.- т. 15, № 1.- с. 24-34.

185. Утеулин, K.P. Особенности действия анионов на АТФазу митохондрий /K.P. Утеулин, А.Т. Иващенко. // Биохимия, 1982. т. 47, вып.Ю.-С. 1641-1644.

186. Файзулина, Ф.Р. Влияние белков, подвергнутых тепловому воздействию на АТФазную активность эритроцитов / Ф.Р. Файзулина, P.A. Гареев // Изв. АН Каз ССР, сер.биол.- 1991.- № 4.- С. 72-75.

187. Финеан, Дж Мембраны и их функции в клетке /Дж.Финеан, Р.Калэман, Р. Митчелл.- М.: Мир, 1977. 108 с.

188. Хататурян, С. А. Влияние инсулина и глюкозы на систему аденозинтрифосфат- аденозинтрифосфатаза при реанимации / С.А. Хачатурян // Ж. «Экспер.клинич.мед.».- т. 7.- № 5, 1967.- С. 13-21.

189. Хенниг, А. Минеральные вещества, витамины, биостимуляторы в кормлении с.-х. животных/ А.Хенниг.- М.: Колос, 1976.- 559 с.

190. Хижняк, C.B. Вызванные ионизирующим излучением изменения в функциональных свойствах Са2+ -АТФазы саркоплазматического ретикулума мышц кролика: восстановленной в липосомах / C.B. Хижняк,

191. B.М. Войцицкий, Н.Е. Кучеренко // Биологические мембраны.- 1996.- № 2.1. C. 208-215.

192. Холтер, Г. Каким образом различные вещества попадают в клетку /Г. Холтер.- В кн.- «Живая клетка». -М.: Мир,1966.- С.130-145.

193. Хомутовский, A.C. Содержание ДНК в клетках экспериментальных метастазов перевивной рабдомиосаркомы мышц / A.C. Хомутовский, Т.В.Борхсениус, Т.В.Вахтин// Цитология.- 1972.-Т. 14.-№ 7.-с.911-915.

194. Челушкина, Т.С. Свободные аминокислоты плазмы крови поросят в зависимости от уровня протеина в рационе /Т.С. Челушкина, М.И. Материкина, А.И. Кашаров.- Бюлл.ВНИИ физиол., биохимии и питания с.-х. животных, 1971.- вып.2 (41).- С.6-9.

195. Чепелев, H.A. Влияние пиридоксина и серусодержащих веществ на показатели белкового обмена, аминокислотный состав и физико-механические свойства шерсти овец / H.A. Чепелев: Автореф.дис. канд. биолог, наук.- Москва, 1984.-21 с.

196. Четверин, А.Б. Симметричная модель натриевого насоса / А.Б. Четверин //Докл. АН СССР.- 1981.- Т.256.- № 1. С. 221-224.

197. Чумаченко, В.Е. Определение естественной резистентности и обмена веществ у с.-х. животных / В.Е. Чумаченко, A.M. Высоцкий, H.A. Сердюк, В.В. Чумаченко.- Киев: Урожай.- 1990.- 136 с.

198. Шкорбатов, Ю.Г. Биоэлектрические свойства клеточных ядер / Ю.Г. Шкорбатов, В.Г. Шахбазов // Успехи современной биологии, 1992, т. 112, вып.4, с. 499.

199. Шманенков, H.A. Физиолого-биохимические основы рационального использования кормового протеина/ H.A. Шманенков. -Сб.: Проблемы белка в сельском хозяйстве.- М., 1975. С. 17-28.

200. Шманенков, Н.А. Концентрация свободных аминокислот в органах и тканях телят — молочников в зависимости от уровня поступающего в организм лизина / Н.А. Шманенков, П.П. Валуйский.- В кн.: Обмен веществ у животных.- Фрунзе: Илим, 1982.- С.96-99.

201. Щеглова, М.В. О влиянии дигитонина на активность Na, К- АТФазы из мозга быка /М.В. Щеглова и др. // Биохимия.- 1981. т. 46, вып. 1.- С. 6269.

202. Юрасова, Т.Ф. Свойства транспортной Na,K- АТФазы почек различных животных / Т.Ф. Юрасова, З.У.Бекмухаметова, Э. Тампулатов .В кн. «Трансп. Ионов через биол.мембраны и механ.действия физиол.активн.веществ".- Ташкент.-1982.- С. 76-90.

203. Якимчук, Е.Ф. Влияние серосодержащих добавок на свойства шерсти (опыты по улучшению кормового рациона овец асканийской тонкорунной породы) / Е.Ф. Якимчук, И.М. Авясов.- Овцеводство.- 1970,- № 2.- С. 21-23.

204. Abeynardena, M.J. Lipid-protein interactions of reconstituted membrane-as-sociated adenosinetriphosphatases / M.J. Abeynardena, J.S. Allen, J.S. Charnak // Biochim. et Biophys. Acta, 1983.- 729, N l.-p. 62-74.

205. Abusalan, K.M. Ingibition of erythrocyte membrane ATPase with antisickling and anaesthetic substances and ionophoric antibiotics / K.M. Abusalan / Life Sciences, 1995.-58, N3.-p.l87-193.

206. Agar, N. J.Biochem.-1973.-4, N 20.-p.l87-188.

207. Agnes, F. Considerasion sulla ATPase Na-K dipendente ouabaina -sensibile negli eritrociti di cane. Adenosine triphosphatase in dog red cells / F.Agnes//Clin. Vot., 1980.-p.740-745.

208. Albers, F.W., van Benthem, P.P., and de Groot, J.C.,"Localization of Na/K ATP-ase in the inner ear.", Acta Otorhinolaryngol.Belg., Vol.46, No. 4, 1992, pp. 351-353.

209. Allfrey,V.G. Sodium-dependent «transport« reactions in the cell nucleus and their role in protein and nucleic acid synthesis / V.G.Allfrey // Proc.Nat. Acad.- USA, 1961.-47, N 7.-p.907-932.

210. Anderson, R.E. Alkaline phosphatase and ATPase activities of cultured osteoblasts from the ondosteum of rabbit long bonea /R.E. Anderson// Tissue Int., 1982.- 34.-Suppl., N 1,1. -p. 212-218.

211. Anner, B.M. Na+, K+- pump in the liposome / B.M. Anner // 1977.-467, N.3.-340-345.

212. Arselio, P The organization and fanction of biological membranes / P. Arselio Carvalho // Cienc. biol.- 1980.-5.-N 3.-P.211-240.

213. Arselio, P.Carvalho. The organization and fanction of biological membranes / P.Carvalno Arselio // Cienc.biol.-1980.- 5.- N 3.- p.211-240.

214. Ashford, Ch.A. The effect of potassium on the glucolysis of brain tissue with reference of Pasteur effect / Ch.A. Ashford, K.C. Dixon// Biochem., 1935.29, N 1.- p.16-18.

215. Askari, A. (Na++K+) -dependent adenosine triphosphatase. Regulation of inorganic phosphase magnesium ion, and calcium ion interacrions with the enzyme by onabuim / A.Askani// Biol.Chem.-1983.-258,N 6.-p.3453-3460.

216. Atinmo, T. Decreased dietary protein or energy intake and plasma growth hormone levels of the pregnant pig, its fetuses and developing progeny / T. Atinmo // Nutr.-1976.-v.106, N 7.-p.940-946.

217. Aviv, A. Na+-K+- ATPase in vascular amooth muscle cell grown in vitro / A.Aviv// Amer.J. Physiol., 1983.- 244, N 3.- p.227-233.

218. Awasthi Yogesh, C. Awasthi Sanjay Physiological role of glutatione S-transferases in protection mechanisms against lipid peroxidation: A commentary / C. Awasthi Yogesh, Pior. Zimniac, S J I Biochem. Arch.-1995,-11, N 2.- p.47-54.

219. Bader, H. Comparison of sources of a phosphorylated intermediate in transport ATPase / H.Bader, R.Post, G.Bond // Biochim.et biophys. acta .-1968.-15.-N l.-p.41-46.

220. Bader,H. Comperison of sources of a phosphorylated intermediate in transport ATPase / H. Bader, R.L. Post, G.H. Bond // Biochim. Et biophys. acta.-1968.-15; N l,p.41-46.

221. Balansky, R. Effect of K, G and on mutagenic and carcinogenic activities of some chemical carcinogens / R. Balansky // Mutat Res. Environ. Mutagenes and Related Subj, 1989.-216, N.5.-p.290-291.9

222. Bartiaux-Thill, N. Utilisation de 1 oxyde de chrome dans la mesure de la consommation a 1 herbage. /N.Bartiaux-Thill, Francois E. // Bull.-Rech.agron.Gembloux, 1980, 15, N 2.p.l07-l 19.

223. Bartosz, G. Aging of the erythrocyte / G.Bartosz// Experientia, 1982.- 38, N 12.-p. 1484-1485.

224. Baskin Gordon, S. A spectrin-dependent ATPase of the human erythrocyte memdrane / S. Baskin Gordon, G.Landon Roberta // J.Biol.Chem.-1981.-256.-N 11 5428-5435.

225. Benzi, G. In the Mg2+- ATPase- dependent proton pumping activity of the synaptic vesicles a factor involved in the cerebral hypoxia / G.Benzi, A.Gorini, B.Ghigini, A.Moretti, F. Dagani, R.F.Villck// Neurochemical Research.-1996.-21, N 1.- p.7-18.

226. Bernhard, S. The Structure and Function of Enzymes. /S.Bernhard // W.A. Benjamin Inc., NewYork, 1968.

227. Beyer,K.H. Ensymes, drugs and transport phenomena. / K.H., J.E.Baer // Protoplasma,63.-1967, N 4-3.- P.l 12-120.

228. Bianchi, V. Effects of hexavalent chromium on the adenylate pool of hamster fibroblasts. /V.Bianchi, P.Debetto //Toxicology.- 1982, 25, N 1.-p. 19-30.

229. Blank, M. Anion pump mechanism based on channel processes in the Na, K-ATPase / M. Blank // Bioelectrochemistry and Bioenergetics.- 1995.- N 2.-p. 275-279.

230. Blank, M. Anion pump mechanism based on channel processes in the Na, K-ATPase /M.Blank//.- Bioelectrochemistry and Bioenergetics.-1995,N 2.-p.275-279.

231. Blank, M. Effects of low frequency magnetic fields on Na, K ATPase activity / M.Blank, L. Soo, V.Papsteun // Bioelectrochemistry and Bioenergetics.-1995, N2.- p.267-273.

232. Blank, M. Na,K-ATPase function in 60 Hz electromagnetic fields: Program and Abstr. 38 th Annu. Meet.New Orleans, La, March 6-10 / M.Blank // Biophys.J.-66, N 2.- Pt.2.-p 27.

233. Boxer,D.H., Lenking, R.E., Tanner, M.J. Biochem, J. -1974.- 137.- N 3.-p. 531-534.

234. Brabes, V. Adenosine triphosphatese activity of the red cell membrane in paroxysmal nocturnal haemoglobinuria./ V.Brabes, L.Mircevova, J.Palek //Brit.L.Haemotol, 1969,16.-N 4, p.421-428.

235. Bradburg, M.W. The effect of chronic osmotic distur dance on the concentrations of cationes in cerebospinal of cationes in cerebrospinal fluid. / M.W. Bradburg, C.R. Kleeman // J. Physiol. (Engl.), 204, N 1.- 1969.- P. 181193.

236. Brodal, B.P. Effect of insulin on (Na+, K+) activated adenosine triphosphatase activity in rat muscle sarcolemma /B.P.Brodal, E.Jebens, O.Iversen//.-Nature.-1974.-249, N 5452.-p.41-43.

237. Burke, J.M.,McKay, B.S., and Jaffe, G.J., "Retinal pigment epithelial cells of the posterior pole have fewer Na/K adenosine triphosphatase pumps than peripheral cells", Invest Ophthalmol.Vis.Sci.,Vol. 32, No&, 1991, pp.2042-2046.

238. Carilli ,C.T. The active site structure of Na+-and K+- stimulated ATPase / C.T. Carilli // Biol. Chem.-1982.-257, N 10.- p.5601-5606.

239. Casu, A . Structure of membranes./ A. Casu, V.Pala, R.Monacelli, Ferro M, Nanni G. // Jtal.J.Biochem., 17, N 2.-1968.-P 77-89.

240. Charalambous, B.M. An inproved procedure for the preparation and measurement of (Na++K+) ATPase in guman erytrohrocytes / B.M. Charalambous, M.M. Afzal // Biochim.et Biophys. acta, 1982.- 691, N l.-p.71-82.

241. Clausen,T. The Na+ K+- pump, energy metabolism and obesity / T.CIasen, O. Hansen. // Biochem.and Biophys. Res.Commun.,1982.- 104, N 2.-p.357-362.

242. Clausen, T. Long- and short-term regulation of the Na+- K+ pump in skeletal muscle / T.Clausen//.- News in Physiogical Sciences -1996.- N11 .-p24-30.

243. Cloix J.F. Purification d'un inhibiteur endogene de la sodium-potassium-ATPase /J.F. Cloix// C.r. Acad. Sei., 1983.- Ser.3.-296,N 5.-p.213-216.

244. Coben, L.A. Uptake of iodide by chiroid plexus in vivo and location of the iodide pump // Amer.J. physiol., 1969.-N 1. p.89-97.

245. Crane, R.K. In Membrane Transport and metabolism / R.K.Crane//Praha, 1961.-p.439-449.

246. Cristensen, H.N. Role of membranes in secretory proceses / H.N. Cristensen// Amsterdam, London.-1972.-p.433-447.

247. Cummunis, J.T. Adenosine triphosphate levels and adenosine triphosphatases in neurouslia and neuronal membranes of the vestibular nucleus / J.T.Cummunis, H.Hyden//Biochem. et biophys.acta, 1962.-60, N 12.- p.271-283.

248. Cunter-Smith, P.J. J.Membrane Biol.-1982.-66, N l.-p.25-39.

249. Curran, P.E., Schultz, S.V. Handbook of physiol., Washington, 1968.-p. 1217-1243.

250. Curran, P.F. Kinetic relations of the Na- amino acid interaction at the mucosal border of intestine / P.F.Curran // Gen.Physiol., 1967.-50, N 5.-p.l261-1286.

251. Danielli, I.F. A contribution to the thery of permeability of thin films /I.F. Danielli, H.Danson// Cell.Comp.Physiol.-1934.-v.5.-p. 495-508.

252. Davis-Karlan, S.R. «Genome-wide analysis of iron-dependent growth releals a novel yeast gene required for vacuolar acidification« / S.R. Davis-Karlan, D.M. Ward, S.L. Shiflett, J.Karlan.- J.Biol.Chem.,Vol.279, N 6, 2004.-pp.4322-4329.

253. Davson, H. A centribution to the theory of permeability of thin films / H.Davson,J.T.Danielli//.-J.Cell.comp. Physiol.-1935.-5.-p.494-508.

254. DeBacker, C.M. and Wolosin, J.M., " A vesicular preparation enriched in basolateral membranes from cow ciliary bodi epithelium", Curr.Eye Res., Vol.10, No.6,1991, pp.537-545

255. Demanet, J.C. Stude du sodium et du potassium échangeables Parle Na24 et K42 en clenigue / J.C.Demanet, M.Engel, R.S.Mach// Schweiz. med.wochenschr., 1958.-88, N 47.-p. 1180-1185.

256. Deriel Mark, R. Hexose-specific inhibition in vitro of human red cell Ca2+- ATPase activity / R.Mark Deriel, S.Safeer Richard, D.Blas Susan, B.Devis Faith, J. Devis Paul // Biochim. Et biophys. Biomembranes.- 1992.- 1110.- N 1.-p.l 19-122.

257. Dikranian, K. « Intermediate filaments and ATPase activity in the vascular wall of vertebrates« / K.Dicranian, M.Trosheva, M.Petrov. Acta Histochem. Vol. 94, N1.-1993, pp.13-19.

258. Edmonds, C. Transport of potassium by the colon of normal and sodium-depleted rats. / Edmonds C., Marriott J.C. // J. Endocrinol., 39.-N.4.- P.517-531.

259. Elin, R.J. Body Fluid electrolyne composition of chonically magnesium-deficient and control rats / RJ.Elin, W.D.Armstrong, L.Singer // Amer.J. physiol.- 1971 .-220, N 2.- p. 543-548.

260. Esmann, M. Na+, K+- ATPase struct. And Kinet. / M.Esmann, J.C.Skon, C.Christiansen// London.- 1979.-p.21-24.

261. Fair, P.H. Serum amino acid concentrations durino starvation in the prawn / P.H. Fair, L.K. Sick// Comp. Biochem and Physiol.- 1982.-1373, N. 2.-p.l95-200.

262. Fergison, R.K., Woodburg, D.M. Penetration of C14 -inulin and C14 sucrose into brain, cerebrospinal fluid and skeletal muscle of developing rats // Exptl. Brain. Res., 1969- 7.- N 3.- p.181-194.

263. Finean, J.B. Membranes and their cellular functions /J.B.Finean// Oxford, London, Edinburgh, Melburne.-1974.-p.647-651.

264. Fischer, P.D. Effect of microwave rediation (2450 MHZ)24 on active and pussive components of Na+ efflux from human erythrocytes. / P.D. Fischer, M.J.Poznansky, W.A.Voss. // Radiat Ree., 1982, 92.- N 2, p.411-412.

265. Fisher, P.D. Effect of micromave radiation (2450 MUZ)24 on active and pussive components of Na+ efflux from human erythrocytes // Radiat Res., 1982.92, N2.- p.411-412.

266. Forgae, M. K-independent active transport of Na by the (Na+ and K+) -Stimulated adenosine triphosphatase / M.Forgae, G. Chin // Biol.Chem.- 1981.-v.256, N 8.-p.3645-3646.

267. Forgae, M. K-independent active transport of Na+ by the (Na+and K+)-Stimulated adenosine triphosphatase / M.Forgae, G.Chin//.-Biol.Chem.-1981.-v.256, N.8.-p.3645-3646.

268. Gemelli, M. Comportamente degli ac grassic dell ATPase Na+, K+-dipendente nella membrana eritrocitaria / M.Gemelli, S.Averasa// Haematologica, 1971.- 56 N 1 l-12.-p.547-551.

269. Gerhards, S. The effect of potassium ions on the absoption of ortophasphate and the formation of metaphosphate by bakers yeast / S.Gerhards, H.Liseleff, B. Thannhauser// Biol. Chem., 1949.- 173, N 2.-p. 733-742.

270. Gill, D.S., Ahuja, S.P., and Bhatia, I.S., " Comparative characterization of membraneboind & free ATPase from cow & buffalo milk fat globule membranes", Indian J.Biochem.Biophys., Vol.17, No.4, 1980, pp.282-286.

271. Goldman, S.S. Gold resistance of the brain during hibennation / S.S. Goldman, J.S.Wills// Cryobiology.-1973.-10, N 3.-p.218-224.

272. Graf Ernst Molecular properties of calcium-pumping ATPase prom human erythorocytes / Graf Ernst, K.Verma Anil, P.Gorski Jeffrey, Lo-paschuk Gary, Niggli Verena, Zurini Mauro, Carafoli Ernesto // Biochemistry.- 1982.-21, N 18.-p. 4511-4516.

273. Graf Ernst, Verma Anit K,Gorski Jeffrey P., Lo-paschuk Gaiy, Niggli Verena, Zurini Mauro, Carafoli Ernesto. Molecukar properties of calcium-pumhing ATPase prom human erythrocytes // Buochemistry.-1982.- 21, N 18.-p.4511-4516.

274. Grone, R.K. Na+ dependent transport in the intestine and other animal tissues / R.K. Grone// Federation Proc., 1965.- 24.- p. 1000-1006.

275. Hales, C.N. The role of sodium and potassium in insulin secretion from rabbit pancreas / C.N. Hales, R.D.C. Milner// Physiol, 1968.-194, N.3.-p.725-743.

276. Hambidge, K.M. Chromium nutrition in man / K.M. Hambidge //The American Journal of clinical nutrition.- 1974, 27.- p.505-514.

277. Hamlyn, J.M. Endogenous onabain, sodium balance and blood pressure: A review and a hypothesis / J.M.Hamlyn J.M., B.P.Hamilton, P.Manunta // J.of Hypertension, 1996.- 14, N 2.-p.l51-167.

278. Hammerman, M.R. Na+- dependent transport of glycine in renal brush border membrane vesicles / M.R. Hammerman, E. Sacktor //Biochim.et.biophys. acta.-1982.-686, N 2.-p.l89-196.

279. Harmony,T. Na-K-ATP ase distribution in the brain of the rabbit. //T. Harmony T, Urba-Holingren, R,Urbay C.M. Brain Res.-N 1.- 1967.-P.-109-111.

280. Hartmann, P.E. J. Endocrinol.-1973.-59.-59, N 2.-p.231-247.

281. Harvey, J.A., Mcliwain, H. Excitatory acidic amino acids and thecation content and sodium ion flux of isolated tissues from the brain // Biochem.J.-1968.- 108.-N2.-p. 269-274.

282. Helli, J., Tata, P.S. Effect of somemotabolic inhibitorn on the electrolyte and urea consentration gradients in rat Kidney / J.Helli, P.S. Tata // Physiol, bohemosl., 1967.- 16.- N 5.- p. 428-440.

283. Henning, G. Chromatographic d' affinise pour la defection d' un inhibiteur endogene humain de la Na+,K+-ATPase / G.Henning, J.Cloix. // C.R. Acad.Sci.,1983.-Sec.3.-297, N 6.-p.295-298.

284. Henning, G. Cloix J.F.C.R. Acad.Sci.- 1983.-57,N3.-p.609-620.

285. Hevesy, G. Exchange of cellular potassium // Biol.Med., 1941-16, N 1.-p.1-27.

286. Hisoshi, M. The a-and ß-subunits of lamb kidney Na, K- ATPase ARS both glycoproteins / M.Hisoshi // Biochim. and Biophys.Res.Commun.-1982.-107, N 1.- p.229-231.

287. Hochgesand, D.H. «Catecholaminergic regulation of Na-K-Cl cotransport in pigmented ciliary epithelium: differences between PE and NPE» D.H. Hochgesand, J.J.Dunn, R.B. Crook / Exp.Eye Res., Vol.72, N 1, 2001, pp. 1-12.

288. Holgkin, A.L. Active transport of cations in giant axons from Sepia and Loligo / A.L. Holgkin, R.D.Keynes // Physiol.-1955.-128.-p.28.

289. Hollway, D.E. Process for recovery and separation of nutritious Proteinhydrolysate and chromium from chrome leather Scrap./ D.E.Hollway //United States patent.- 260-123, 7.-1977.

290. Horisberger Jean-Daniel. Structurefinction relationship of Na, K- ATPase / Horisberger Jean-Daniel, Lemas Victor, Kraehenduhi Jean-Pierre, Rossier Bernard C //Annu. Rev. Physiol. Vol. 53.- Paio Alto (Calif.), 1991.-p.565-584.

291. James, A. Biochem.et biophysic / A.James, J.Schafer, A.John// Acta.-1967.-135, N5.-p.l081-1083.

292. Jan, A. Uptake of chromium by rat liver mitochondria./ A.Jan,Tor Norseth. // Toxicology, 1982, 24.-N 2.-p.l 15-122.

293. Jontofsohn, R . Amino acid content of erythrocytes in uremia / RJontofsohn//Amer.J.Clin. Nutr.-1978.-31,N 10.- p. 1956-1960.

294. Jorgensen, P.L. Isolation and characterization of the components of the sodium pump / P.L. Jorgensen // Ouart. Revs.Biophys.-1974.-7, N 2.-p.239-274.

295. Kajikawa, H.»Glucose transport dy mixed ruminal bacteria from a cow« / H.Kajikawa, M.Amari, S.Masaki.- Appl.// Environ.Microbiol.Vol. 63, N 5, 1997.- pp. 1847-1851.

296. Kakinuma, Y. Amplification of the Na+- ATPase of streptococcus faecalis at alkaline pH / Y. Kakinuma, K. Igarashi // FEBS Zett.- 1990.- 261, N 1.- p. 135138.

297. Kamovsky Morris J. The concept of lipid domainsin membranes / J. Kamovsky Morris, M.Kleinfeld Alan, L.Moover Richard, D.Klausner Richard // J. Cell Biol.- 1982.- 94, N 1.- p.1-6.

298. Kamovsky, Morris J. The concept of lipid domainsin membranes /Morris J. Katovsky, Alan M.Kleinfeld, Richard L.Moover, Richard D. Klausner// J. Cell Biol.-1982.-94, N1.- p.1-6.

299. Kaplia, A.A. « Thermal sensitivity of Na+,K+- ATPase isoenzymes in the brain and kidney.« / A.A. Kaplia, A.V. Kravtsov, V.V. Kravtsova .-Ucr. //Biokhim. Zh., vol.66, N 6, 1994.- pp.58-66.

300. Karjalainen, E. Specific interaction of adenine nucleotides with the amino acid transport mechanism in the nuclear membrane / E. Karjalainen// Acta chem.scand., 1966.-20, N 2.-p.586-588.

301. Karli, J.K. Effect of heparin on myocardial contractility of the dog and Na, K-ATPase / J.K. Karli // Res.Commun. Chem.Pathol and Pharmacol.-1984.-43,N l.-p.79-96.

302. Kaufmann, U. Untersuchungen über dio Ensymausrustung Ver Schicdener Gewebe beim Schoein / U. Kaufmann// Arch. exp. Veterinarmen., 1981.-35.- N 4.- p.585-593.

303. Keeton, K. Characterization of adenosine triphosphetase in erythrocyte mtmbranes of the cows / K. Keeton, K. Koneko, J.// Proc.Exp.Biol. and Med., 1972.-v.140,N l.-p.30.

304. Kehoe J.S. Gold. Spring Harbos Symp.Guant. Biol.-1976.-40.-p.l45-155.

305. Kennedy, S J. Membrane Buol/SJXennedy//1978.^2, N3.-p.265-279.

306. Keulen, HJ. Electrolyt und Metabolitkonzentrationen im Gehirn nach normovolamischer Drucksenkung. / H.J. Keulen, U. Steude, W.Brendel, F. Medzinradaky .- Z.ges.exptl.Med. 146, N3.- 1968.-241-260.

307. Kjeldsen, K. Changes in the number of Na-K-pumps and active Na-K-transport with age and K-depletion in rat skeletal muscle / K.Kjeldsen// Acta physiol. Scand., 1982.-114, N.2.-30 p.

308. Knovles, A.F. The subunit structure of buf heart mitochondrial adenosine triphosphatase. / A.F. Knovles, H.S.Penefaky.- J. Biol. Chem.247, N 20, 1972.6624-6630.

309. Kocic, I., "Pretreament with rimalkalim changes the adrenergic repronsiveness of isolated guinea pig papillary muscle", Eur. J.Pharmacol., Vol. 332, No. 1, 1997, pp.65-70.

310. Kosterin, S.A. Kinetics of ATP hydrolysis catalyzed by Mg2+ ATPase from smooth muscle cell plasma membranes / S.A. Kosterin, N.F. Bratkova, V.P.Zimina // Biochemistry-Moscow.- 1995.- 60, N 9.- p.l 103-1109.

311. Koston, K. Charactorization of adenosine triphosphatase in crytharocyte membranes of the cows./ K.Koston, J.Koneko.- Proc.Exp.Biol. and Med Vol. 140, N 1, 1972,30.

312. Kracke, G.R. Partial purification and characterization of (Na+,K+) -ATPase from plasma membrane / G.R. Kracke // Membrane Biol.-1981.-63, N 1-2.-p. 147-156.

313. Kuchler, R. The role of sodium and potassium in regulating amino acid accumulation and protein synthesis in L,M- strain mouse fibroblasta / R.Kuchler// Biochim. et Biophys. acta, 1967, N 3.- 136.-p.473-483.

314. Kurella, E. G., Inhibition of Na+ / K+- ATPase by phenoxyl radicals of Etoposide (VP-16): Role of sulfhydryls oxidation /E.G. Kurella, A.N.Oserov, R.Goldman, A.A. Boldyrev // Biochimice et Biohysice Acta- Bioenergetics.-1995.-1232, N 1-2.-p.52-58.

315. Kursky, M.D. and Grigoryeva, V.A., " Enzymatic properties in muscle membranes.", Ukr.Biokhim. Zh., Vol. 47, No.5, 1975, pp. 619-634.

316. Kyte, J. Molecular considerations relevant to the mechanism of active transport /J.Kyte// Nature.-1981 .-292.-p.201 -204.

317. Langer, P. Biochem. etbiophysy P.Langer// acta, 1979.-557,N 2.-p283-294.

318. Lazzarini, A. Effect of chromium (VI) and chromium (III) on energe charge and oxygen consumption in rat thymocytes./ A.Lazzarini, S.Luciani, M. Beltrame, P.Arslan.// Chem.-Biol. Interact.- 1985, 53.- N 3, p.273-281.

319. Lerner, J. Amino acid transport and intracellular Na+ and K+ content of < chicken erythrocytes genetically selected for high and low leucine transport activity / K.E. Lerner// Nutr.-1982.-112, N 12.-p.276-282.

320. Lev, A.A. A stady of sodium release in course of ATP hydrolysis by membrane ATP-ase / A.A. Lev, L.N.Pisareva // Memb.Biol., 1970.-2, N 2.-p.108-118.

321. Levinson, C. The role ofion transport in the regulation of respiration in the Ehrlich mouse ascites-tumor cell / C.Levinson, H.C. Hempling // Biochem. et Biophys. acta, 1967.- 135, N 2.-p.306-318.

322. Lewell, E.A. Isoforma of the L-subunit of Na, K-ATPase and their ; significance:Pap. Meet "Ion Pumps, Stract. And Mech"., Gathenburg, Aug. 12-14.-1999./ E.A.Lewell, O.I. Shamraj, J.B. Lingred// Acta Physiol.Scand.Suppl.-1992.-146, N607.-p.l61-169.

323. Lipozencic, J. and Ljubojevic, S., " Identification of Langerhans cells in dermatology.", Art.Hig.Rada Torsikol., Vol.55, No. 2-3, 2004, pp. 167-174.

324. Logan, J.G. Hypertension and (Na-K) ATPase activity in brain / J.G. Logan, M.J. George//Biochem. Pharmacol., 1982.-31, N 6.-p.l 156-1158.

325. Lupulescou, A. L action des hormones steroids sur le metabolisme hydro9 # "yy ^sodigue et udiee a 1 aide dusodium radioactive (Na ). / A.Lupulescoi, A.L.

326. Bojinescoi A.L. // Folia endocrinol., 12 , N 4.- 1959.- 506-513.

327. Mahler, H.K. Basic biological chemistry./ H.K. Mahler, E.H. Cordes.-P. 395-397,N.-J. London, Tokyc, 1968.

328. Mazzonti L., Rabini R.A., Cugini A.M., Zolese G. Effect of calcium on Na+, K+ ATPase isolated from human placenta// Biochim. Int. - 1992. - 27. №5. - p.847-852

329. McDonough, A.A., Hiatt, A., and Edelman, I.S., " Characteristics of antibodies to guinea pig (Na+ + K+) adenosine triphosphatase and their use in cell-free synthesis studies", J. Membr.Biol., Vol. 69, No. 1,1982, pp. 13-22.

330. Mehlhorn, H., " Ultrastructural localization of alkaline phosphatase and ATP-ase in cyst stages of Sarcocystis tenella (Sporozoa, Coccidia) parasitis in the esophagus of sheep (author's transl).", Z. Parasitenka., Vol.46, No.2, 1975, pp.95-109.

331. Melormick, M.E. Plasma free erythrocyte free and plasma peptide amino acid exchange calves in steary state and fasting metabolism / M.E. Melormic, K.E. Webb // Nutr.-1982.-112, N.2.- p. 276-282.

332. Mertz, W. Biological role of chromium / W.Mertz // Federation Proceedings, 1967,26.-p.l86-193.

333. Michael, H. Erythrocyte membrane-bound enzymes ATP-ase, phosphatase and adenylate kinase in human, bovine and porcine orythrocytes./ H. Michael, H. Donald.-Biochom. Et biophys. acta.-255, N 1, 1972.- 239-250.

334. Milla, E. Rapporto fra assorbimento di sodio consumo di ossigeno in un preparate di rene isolato di conlglio / E. Milla, G.Torelli, A. Faelli, S.Costantini // Cell.BioI., 1977., 73.- p.88-100.

335. Mitchell, P. Inhibition of mitochondrial adenosine triphosphatase by adenosine diphosphate./PMichell, J. Moyle.-BiochemJ., 116, N4.-1970.-10-11.

336. Montecucco, O.C. Labelling of the hydrophobic domain of the Na+,K+ -ATPase / O.C. Montecucco// FEBS Lett.-128, N 1 .-p. 17-21.

337. Moretti, R., Martin, M., Proverbio, F., and Marin, R., "Ouabain-insensitive Na-ATPase activity in homogenates from different animal tissues", Comp Biochem. Physiol B,Vol.98, No.4, 1991, pp.623-626.

338. Moure, R.J. Effect of repeated fasting on ATPase activities in the brain or rats of different ages / R.J. Moure // Physiol.bosemosl, 1981,30.- N 4.- p.335-339.

339. Munzer, J.S. Silvius, J.R., and Biostein, R., "Delivery of ion pumps from exogenous membrane-rich sources into mammalian red blood cells", J.Biol.Chem., Vol. 267, No.8, 1992, pp.5202-5210.

340. Nelson, G.J. Composition of neutral lipids from erythrocyres of common mammals. / G.J. Nelson .- J.Lipid Res.-8, N 4.- 1967.- 374-379.

341. Niederlander Erwin. Natrium ist wiching fur die Fruchtbarkeit der Kune // Rinderwelt.- 1996,- 21, N 3.- p.30.

342. O Riordan, A.M., Quinn, T., and Baird, A.W., " Role of prostaglandin E (2) and Ca (2+) in bradykinin induced contractions of guinea-pig gallbladder in vitro", Eur. J.Pharmacol., Vol. 431, No.2, 2001,pp.245-252.

343. Orellano, L.E. Fortlaufende Messunda der Kalium und Natrium Verluste des Myokards. Arch. Kreislaufforsch. / L.E. Orellano, D. Credo, HJ. Bretscheneider.- 53, N3-4.- 1967.- 264-307.

344. Pagliarani, A. Salinity-dependence of the properties of gill (Na++ K+) -ATPase in rainbow frout ( Oncorhynchus mykiss) / A.Pagliarani, V.Ventrella, V.Ballestrazzi // Compar. Biochem.and Physiol. B.-1991.-100, N 2.- p. 229-236.

345. Pandolfo, L. Azione de alcucuni gormoni surrenall sul contenuto di ratti albini surrnectomizzati. / L.Pandolfo, P. Buzzanca .- Boll.Soc.Ital.bio sperim.-33, N 10-12.-1957,1958.- 1815-1819.

346. Patzelt-Woncsler, R. Evidence two different reactive sulfhydrye groupe in the ATP- binding sites of (Na++K+) ATPase /R. Patzelt-Woncsler// Eur.J.Biochem.-1981.-114, N 1.- p.79-87.

347. Peris, S., Solanes, D., Pena, A., Enric- Rodriguez-Gil, J., and Riga, T., " Ion-mediated resistance to osmotic changes of ram spermatozoa: the role of amiloride and ouabain", Theriogenology, Vol. 54, No 9, 2000, pp. 1453-1467.

348. Peters, G. Der Einflus von Nebenieren rindehor monen auf die renal Wasser- und Elektrolytauscheidung bei adrenalektomierten und normalen Ratten nach Ganle von Wasser Durst. / G. Peters.- Arch, exptl. Fathol. Und Pharmacol.-235, N2, 1959- 155-184.» »

349. Peters, G. Regylation de 1 excretion renale d eau d electrolytes. / ; G.Peters.- Bull. Schweis. Arad.med.Wiss .- 29, N 3-4, 1967.- 313-337.

350. Platt, D. Biochemical studies of membrane glycoproteins during red cell ageing / D.Piatt // Mech. Ageing and Develop., 1980.-14, N l-2.-p.l 19-126.

351. Poelafsen, B. Lipid roguirement of membrane bound ATP-ase./ B.Poelafsen, L.Deenon.- Eur. J.Biochom., 40, N 1.-1973.- 245-257.

352. Pomero, P.J. Control by internal calcium of membrane permeability to sodium and potassium / P.J. Pomero, R.Whittam// J. Physiol (Cr. Brit.), 1971.214, N 3.-p.481-507.

353. Pond,W.G. Early protein: effects on later growth a carcass composition of ; lean or obese swine/ W.G. Pond // Nutr.-1980.-110, N 12.- p.2506-2513.

354. Porter, R.P. Biophys. et biochim. cytol.-1961, N10.-219. In E.D. Roberts / R.P. Porter //Cell Biology.-Forth edition of General cytology. Philad.-London.-1965.-p. 54-66.

355. Poullain, B. Influence du jeune proteigive de lonque duree sur la teneur on acides aminos sanquis et musculaires durât // Nutr. And Metab., 1977.- V.21.-N 5.- p.281-293.

356. Pritchard, J.B. « Mechanism of organic anion transport across the apical membrane of choroids plexus« / J.D. Prichard, D.H.Sweet, R.Waiden .- ; J.Biol.Chem., Vol.274, N 47, 1999.-p.33382-33387.

357. Puigserver Pere, Provertio Teresa, Marin Reinaldo. Protein Na+ -stimulated ATPase activity of basolateral plasma membranes from guinea-pid kidney cortex eels.// Biochim. et Biophys. Acta. 1998. -688.- №3. -p.757-763

358. Rabito, C.A. The basolateral systems / C.A. Rabito, M.V. Karsh//Biol.Chem.-1982.-257, N 12.-p.6802-6808.

359. Rakhman, L.M., Moshkovskii,I., and Lavretskaia, E.F., " Effect of psychotropic and anticonvulsant on the conformational transitions in transport ATPase.", Farmakol. Toksikol., Vol. 38, No.6, 1975, pp. 660-663.

360. Repke, K.B. Bedeutung der Praparations-methode fur die Eigenshaften der (Mg) und (Na,K) - ATPase der Herz -muskel - Zellmembran von Meerschweinchen. / K.B.Repke, R.Schon // Acta Biol.Med.- 1971,26.- p.51.

361. Repke, K.P. Utmost cytoplasmis location of catalytic center in Na, K-motive ATPase / K.P.Repke// Biomed.acta.-1983.-42, 7-8.-p.825-835.

362. Rhoda, B. Na- ATPase mammalian erythrocyte membranes / B.Rhoda// An.New York Academy os Sciences, 1974.-v.242, N 29.- p.305-315.

363. Rise-Evans C. Red blood cell biomembraine structure and deformability / Evans C Rise, D.Charman// Scand. J.Clin, and Lab.Invest.-1981.- 41 Suppl.-N156.- p.99-100.

364. Robertson, I.D. Ultrastructure of excitable membranes and craybich median-giant Synapse/ID. Robertson// AnaN. JAcad.Sci-1961 .-N94.-p339-389.

365. Robinson, J.D. Differences between CTP and ATP as substrates for the (Na++K> ATPase / J.D. Robinson // Arch.Biophys., 1982.-213, N 2.-p.650-657.

366. Robinson, R.D. Proposed reaction mechanism for the (Na++K+) -dependent adenosine rtiphosphatas / R.D. Robinson // Nature.- 1971.-233, N.5319.-p.419-421.

367. Rocaw M.D.,Sarac E., Lechman E., West M.,Angeski J.P., Zeidel M.L. Chronic regulation of transepithelial Na+ transport by the rate of apical Na+ entry // American Journal of Physiology- Cell Phisiology.-1996.-N 2.- p. C600-C607.

368. Rohani, F. Physiol, and Pharmacol. / F. Rohani, J.D. Welty, D.F. Hastings // 1982.- 60, N8.- p.l 119-1124.

369. Rokaw M.D. Chronic regulation of transepitheliat Na+ transport by the rate of ahical Na+entry / M.D.Rocaw, E.Sarac, M.West, J.Angeski, J.P.Johnson, M.L. Zeider // American Journal of Physiology Cell Physiology.- 1996.- N 2.-p. C600-C607.

370. Romero, P.J. The affinity of Ca pump of human erythrocytes for extornal Na+ or K+ / P.J. Romero, E.Romero// Biochem et biophys. acta, 1982.691, N 2.-p.359-46I.

371. Rosebrongh, R.W. Effect of supplemental dietary chromium or nicotinic acid on carbohydrate metabolism during basal starovation and reffeding periods in poults./ R.W. Rosebrongh, N.C.Steele.// Poultry Sci.-1981.- 60, N 2.- p.407-417.

372. Rosengurt, E. Adv.Enzyme Actic. and synth., Oxford, 1981.- p.61-85.

373. Sachs, J.R. Ouabain-insensitive sodium movements in the human red blood cell / J.R.Sachs // J. Gen.Physiol.- 1971.-57.-p.259-282.

374. Samaha, F.J. Studies on the Na+ and Reactivated adenosine tryphophatase in human striated muscle / F.J. Samaha, J.Gergely// Arch. Biochem.Biophys, 1966.- 114.-481 p.

375. Samarzija, J. Electrophysiological analisis of rat renal sugar and amino acid transport / L.Samarzija, B.T. Hinton, E. Fromter. // Pflugers Arch.- 1982.393, N2,- p.190-197.

376. Schafer, J.A. Change in Na+ uptake during amino acid transport./ J.A. Schafer, J.A. Jacgues.// Biochim. et biophys. acta., vol. 135,N5, 1967.- 1001.

377. Schatamann, H.J. (Ca + Mg ) activated membrane ATPases in human red cells and their possidle relationato cation transport. / H.J. Schatamann, G.L. Rossi. Biochim. etBiochis. acta, 241, N 2, 1971.- 379-392.

378. Schner, W. On Na+ and K+ stimulated hydrolysis of adenosinetriphoshate /W.Schner // Europ.J.Biochem.-1967.-1 .-N 3.-p.334-343.

379. Schonefeld, M. Hypoxia-induced amphiphiles renal inhibit renal Na+, K+-ATPase /M.Schonefeld, S.Noble, A.M. Bertorello, L.J. Mandel, M.H. Creer, D.Portilla//Kidney international.- 1996.-p. 1289-1296.

380. Schrier Stanley,L. Actin-activated ATPase in human red cell membranes / L. Schrier Stanley, Britta. Hardy, Irene.Junda, Lisa. Ma // Blood.- 1981.-58, N 5.-p. 953-962.

381. Schrier, S.U. ATP synthesis in human erythrocyte membranes /S.U. Schrier // Amer, J.physiol.-1966.- 210.- p. 139-145.

382. Schrtier, S.V. ATP aynthesis in human erythrocyte membranes. / S.V.Schrier Biochim et biophys. acta .- 135, N 4, 1967.- 591-598.

383. Seiler, S., Eleisher, S.J. Isolation of plasma membrane vesicles from rabbit transport studies // Biol. Chem., 1982.- 257.- N 22 .- p. 11862-13871.

384. Shaheen A.A. Effect of various stressors on the level of lipid peroxide, antioxidants and Na+,K+- ATPase activity in rat brain / A.A. Shaheen, A.A.A. Elfattan, M.Z. Gad // Experientia.- 1996.- N 4.- p. 336-339.

385. Shao, Qiming. Inhibition of cardias sarcolema Na+- K+ ATPase by oxiradical generating systems Qiming. Shao, Taku. Matsubara, Bhatt.Sunil R., Dhalla S. Naranjan//Mol. And Cell Biochem.- 1995.- 147, N 1-2.- p. 139-144.

386. Shen, B.Q. « Rapid procedure for obtaining tracheal apical membranes « / B.Q. Shen, C.M. Yang, Widdicombe .-Am.J.Physiol, Vol. 261,N 2 Pt 1, 1991.-pp. L 102-L 105.

387. Shields, R.G. Effect of moderate or severe protein restriction during pregnancy on sow and progeny digestive ansymes / R.G. Shields, D.C. Mahan, K.E. Ekatrom // Nutr.-1980.-110, N 8.- p. 1507-1516.

388. Shomaev, A.A. Transketolase activity in protein deficieny. / A.A. Shomaev, Tazhibaev Sh.S.// Hung., Annu.Meet Biochem. Organis Int. Particip 25th Anniv.Biochem. Sect. Budapest.- 1979.-p. 109-110.

389. Skon, J.C. The influence of some cations an adenosinetriphosphatase from periferel nerves /J.C. Skon // Biochem. Et Biophys acta.-1957/- 23.-p.394-401.

390. Skou, J. Ch. Biochim. et piophys / J.Skou // Acta.-1979.- 567.-p. 421-435.

391. Skou,J.C. The influence of some cations on an adenosinetriphosphatase from periferel nerves / J.C.Skou//Biochem EtBiophys^cta.- 1957.-23.-p394-401.

392. Smigan, P., Greksak, M., Cerna, S., and Boda, K., " The isolation and some properties of dairy cow liver mitochondria", Physiol Bohemoslov., Vol 33, No.4, 1984, pp.336-341.

393. Smith,L.R. Preparation of hich-quality gelatine having low chromium content from chromed waste stock/L.R. Smith//.-Patent USA 260/118.-1976.

394. Smoezkiewiezow, A. Effect of electrolytes on the activity of glatemic oxalactic transaminase / A.Smoezkiewiezow, H.Kajawa // Nature, 1960.-188, N.4749.-p.487-488.

395. Solano-Munoz, G. Deviations from Michaelis-Menten kinetics / G.Solano-Minoz, P.B.Meginley, R.Woolfson, W.G.Bardsley // Biochem J.-1981 .-v. 193.-p.339-352.

396. Soler, G., Mataix, F.J., and Ruiz-Amil, M., "Physico-chemical properties of guinea pig liver argininosuccinate synthetase (author s transi).", Rev. Esp.Fisiol., Vol.38, No. 1, 1982, pp. 83-90.

397. Solomon, A.K. Membrane transport and metabolism / A.K. Solomon// Proc.Sempes, 1961.-94 p.

398. Spach, C. Activité de ATPase erythrocytaire chez le rat en fonection de la teneur du regime en proteins on en acides / C.Spach, A.Aschkenasy//.-C.r. Soc.boil.-1971.-165,Nl 1 .-p.2066-2069.

399. Speech, C. Activité de ATPase erythrocytaire chez le rat en fonetion de la teneur du regime on proteins on en acides aminis / C.Speech,A.C. Aschkinasy// C.r.Sol.diol.-l 971 .-165, N. 11.- p.2066-2069.

400. Steen, W. Active transport of cations across biological membranes /W.Steen, J. Eilan, W.Lieb// Ann.N.J.Acad.Sci,-1974.-227.-p.328-336.

401. Stern, N. Effect of oldesterone on the human erythrocyte sodium-potassium pump in vitro / N. Stern// Clin.Sci., 1983.-64, N 2.-p.l86-189.

402. Steun, W. Active transport of cations across biological membranes / W.Steun, J.Eilam, W.Lieb// Ann.N.J.Acad.Sci.-1974.-227.-p.328-336.

403. Steven, B. Isclation of plasma membrane from rabbit transport studies / B. Steven, E. Sidney//Biol.Chem.-l982.-257,N 22.-p.l3862-13871.

404. Stokes, J.B., Amer, J. Physiol., 1982.-242, N 5.- p.514-520.

405. Strom, D. and Holm, S., A quantitative histochemical study of the spatial distribution of intrascicular fibre types in the porcine masseter and soleus muscles", Arch.Oral Biol., Vol. 39, No.4, 1994, pp. 295-300.

406. Strom, D. and Holm, S., Fibre type grouping in porcine masseter and soleus muscles assessed by the enclosed fibre type concept. A statistical and computational analysis", J.Oral Rehabil., Vol. 24, No. 5, 1997, pp. 389-400.

407. Strom, D., " Masseter muscle performance. Significance of structure and metabolism. A morphological and experimental study", Swed.Dent.J.Suppl, Vol. 67, 1990, pp. 1-94.

408. Stucki, P. The response to potassium of the Na K pump ATPase in lov -K xed blood allés from cattle at birth an in later fife / P.Stucri, H.J. Schatzmann // Experientia.-1983.- 39, N 5.- p.535-536.

409. Sugawara, H. Effect of potassium on the carbohydrate metabolism in brain homogenate, Scient, papers all / H.Sugawara// Gen.Educt univer. Tokyo, 1961.-1 l.-N.l.-p. 119-137.

410. Suleiman, M.S. The effect of inhibition of the Na-pump in normal Tyrode and during G-depletion, on the aminoacid content of isolated perfused guinea-pig hearts / M.S.Suleiman, R.A. Charman//J.Physiol, 1991.-438.- p.318.

411. Swanljung P. Studies on the activation of purified mitochondriale ATPase by phospholipids / P.Swanljung // Biochim. et Biophys.acta., 1973.-305, N 3.-p.519-533.

412. Swann, A.C. Chronic ethanol (Na+- K+) adenosine triphosphate: apparent adaptation in cation binding and enzyme conformation / A.C. Swann// Tharmacol and Exp. Ther., 1985.-232, N 2,- p.469-475.

413. Swarts, H. G.P. Cation fluxes and (Na++ K+) activated ATPase activity in erythrocytes of patients with essential hypertension / H.G.P. Swarts // Clin.and Exp. Hypertens, 1981.- 3, N 4.- p.831-849.

414. Sweander, K., fCGilkeson, R J J3iol.Chem.-1985.-260, N 15.-p.9016-9022.

415. Takagi, I., " Effect of thyroid-stimulating hormone, estrogens and other thyroid-tropic substances in vitro on Na+, K+- activated ATP-ase of pig thoroid gland", Jpn. J.Physiol, Vol. 18, No 6, 1968, pp. 723-730.

416. Teller, J.K. Enzymatyczne podstawy dzialania pompy sodowey / J.K. Teller//Post.boil.Komorki.-1981.-8,N.4.-p.367-382.

417. Tilson, M.D. Regional distribution of sodium potassium-activated adenosine triphosphatase in the ran gastrointestinal tract /M.D. Tilson// Valo J. Biol.and Med., 1972.-45-N l.-p.l2-14.

418. Tremblay, Andre. Effects of dietary sodium restriction and potassium intake on cholesterol side-chain cleavage cytochrome p-450 and adrenodoxin m RNA levels /Andre.Tremblay, Jean-Guy. Lehoux // J.Steroid Biochem., 1989,34, N 1-6.- p.385-390.

419. Tukel, S.S. Effects of acetaminophem on methemoglobin, dismutase and Na+- K+ ATPase activities of humem erythrocytes / Biochemistry and molecular Biology International.- 1995.- 35, N 4.-p.719-724.

420. Turkozkan, N. The effect of 2-chloroadenasine on the ATP level Na, K-ATPase activity in experimental brain ischemia of gerbil / N.Turkozkan, S.Aykol, A.Bilgihan // General Pharmacology, 1996.- 27, N 1.-p. 165-166.

421. Ussing, H.H. Potassium in the aminal organism / H.H. Ussing// Herasgeber: Int.K./Inst. Bern, 1960.-p.74-76.

422. Uycki, E.M. Antiproliferative and genotoxic effects of chromium on cultured mammalian cells /E.M. Uycki, Nishio Akira//.-Toxicol. And environ Health.-1983.-1 l.-p.227-235.

423. Valiullin, V.V., Deviataev, A.M., Islamov, R.R., Valiullina, M.E., and Terlov, A.I., " Effects of sensitization of the guinea pig slow muscle in disorders of the neurotrophic control.", Biull. Eksp.Biol.Med, Vol. 113,No2,1992, pp. 198-200.

424. Van der Westuysen, J.M. Adaptation to protein deficiency: Cortisol, thyraxine, insulin and glucose in younge piga // S. Aft. J.Anim.Sci., 1976.-6, N 2.- p.101-104.

425. Wallach, D.N. Protein conformations in cellular membranes / D.N.Wallach, P.HZahler// Proc.NaLAcad.Sci. -USA.-1966.-56.-N5.- p.1552-1559.

426. Walther, K. Effects of thyroid extract on the electrolyte pattern of red blood celles in rats. / K. Walther, M.Csernovszky, L.Mustardy. Arch. internat.pharmacol.-122, N 1-2, 1954.- 190-195.

427. Wamberg, Soven. Effects of beeding and short-term fasting on water and electrolyte turnover in fetal milk (Mustela vison) / Soven.Wamberg, Tausen Anne-Helene, Jan.Elnef // Brit.I.Nutr.- 1996.-76,N 5.- p.711-715.

428. Watanbe, K. Bull.Jap. Soc.Sci. Fish., 1982.- 48, N 7.- p.917-920.

429. Webb, L.J. Enzyme and Metabolic Inhibitirs / L.J.Webb//.-Academic Press Inc.-New York.-1963.- 3.

430. Wheeler, D.D.J. Neurichem.-l975.-24,N 6.-p.l 197-1202.

431. Wheeler, K.P., Christensen, H.N. Biol.Chem.-l967.-242, N 17.-p.1450-1457.-p.3782-3788.

432. Whittemore, C.T. A preliminary re-assessment of the requirements for major minerals by growing pigs / C.T.Whittemore, J.H. Manson// .-Vet.Rec.-1995.-137,N 9.- p.218-220.

433. Whooler, K.P. Rolo of Na+ the transport of amino acide in rabbit red cells. /R.P.Wholer, H.N.Christensen.- G.Biol. Chom.vol. 242, N 7, 1967, 1450.

434. Wiggins, P.M. Efflux of sodium from anaerobic Kidney slices / P.M.Wiggins// Biochim. et biohys. Acta, 1967.-135, N 5.- p.894-902.

435. Wiley, J.S. Effect of onabain on deoxymicleoside metabolism in hereditary spherocytic human erythrocytes / J.S.Wiley // Biochem. et Biophys. Acta, 1967.- 135, N5.- p.1071-1074.

436. Winter, C.G. Ultracentrifugal analysis of the ensymatically active fragments produced by digitonin action on Na,K-ATPase / C.C. Winter, A.J. Moss// Na,K-ATPase Struct. And Kinet., London e.a.-1979.-p. 25-32.

437. Zelander, T. and Kirkedy, S., " ATP-ase activity in the human oral mucous membrane, the guinea pig and the rabbit epidermis. A light- and electronmicroscopical investigation", Anat.Anz., Vol. 155, No. 1-5, 1984, pp. 389-398.