Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Активация микосимбиотрофизма регуляторами роста
ВАК РФ 03.00.23, Биотехнология
Автореферат диссертации по теме "Активация микосимбиотрофизма регуляторами роста"
На правах рукописи
НУСИНСКАЯ Марина Владимировна
'I ; г ■ - -г.
« I ! I
Активация микосимбиотрофизма регуляторами роста
03.00.23 - биотехнология
Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук
Санкт-Петербург - 2000
Работа выполнена в Санкт-Петербургском государственном Технологическом институте (техническом университете).
Научные руководители: доктор технических наук, профессор
Кандидат биологических наук, доцент
Яковлев Владимир Иванович
Зольникова Наталья Васильевна
Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор, академик РАСХН кандидат биологических наук, ведущий научный сотрудник
Левитин Марк Михайлович Хотянович Анатолий Владимирович
Ведущая организация: Ботанический институт им. В.Л. Комарова Российской Академии наук.
Защита состоится 3 ноября 2000 года в 10 часов на заседании Диссертационного совета Д 053.25.09 в Санкт-Петербургском государственном Технологическом институте (Техническом университете) по адресу: 198013, Санкт-Петербург, Московский пр., 26, СПГТИ(ТУ).
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Санкт-Петербургского государственного Технологического института (Технического университета). Замечания и отзывы по данной работе, заверенные печатью, в одном экземпляре, просим направлять по адресу: 198013, Санкт-Петербург, Московский пр., 26, СПГТИ(ТУ), Ученый Совет.
Автореферат разослан 2 октября 2000 года
Ученый секретарь Диссертационного совета,
канд.техн.наук Цци Т.Б. Лисицкая
Е Ш. ш7 о
п Г п 0 ;. />
Актуальность темы. Экологические последствия антропогенного воздействия, которые еще недавно осознавались как негативные тенденции, в настоящее время фактически превратились в одну из приоритетных проблем. Этот вопрос остро стоит в Северо-Западном регионе Рсссии, где количество природоохранных мероприятий не соответствует уровню производства, вследствие чего, содержание токсичных элементов в почвах может значительно превышать предельно допустимые концентрации.
Кроме того, ограниченность земельных ресурсов в промышленных регионах бассейна Ладожского озера и необходимость увеличения объема производства продукции растениеводства приводит к значительной интенсификации земледелия, включающей в себя внесение больших доз химических средств защиты растений и минеральных удобрений, которые накапливаются в почвах или вымываются фунтовыми водами, так как используются растениями не более чем на 60% [Небольсин, 1993]. Этот эффект вызван распадом ассоциаций почвенных микроорганизмов, играющих решающую роль в процессах самоочищения почвы, выпадением чувствительных видов, практически полным исчезновением из микробоценоза агрономически ценных микроорганизмов - свободноживущих азотфиксаторов и микоризных грибов, снижением биохимической активности почвы и деградацией экосистем [Рабинович, 1999; Кирюшин, 1996].
Поэтому одним из основных вопросов для сельскохозяйственной науки является поиск альтернативных путей между все возрастающей интенсификацией земледелия и сохранением в окружающей среде условий, при которых не нарушались бы симбиотические связи организмов.
Одним из важнейших приемов экологического земледелия является внесение микоризообразующих грибов арбускулярного типа (АМ-грибов), которые дают растению возможность более полно использовать вносимые удобрения, позволяя, тем самым, снизить дозы их применения [Gianinazzi-Pearson, 1996]. АМ-грибы повышают адсорбционную и поглотительную способность корней растений по отношению к различным элементам питания (таким как цинк, медь и т.д.). Кроме того, они улучшают водное питание растений, повышают их продуктивность и стрессоустойчивость [Маршунова, 1990].
В настоящее время разработаны многочисленные приемы использования эндомикоризных грибов в практике растениеводства [Базилинская, 1990]. Эти методы незаменимы на бедных и малоудобренных почвах [Marschner, Dell, 1994], а также при восстановлении земель, нарушенных в результате добычи полезных ископаемых, так как позволяют значительно ускорить рекультивацию [Зольникова и др., 1997]. Однако они имеют ряд недостатков, к числу которых относится их высокая себестоимость, позволяющая использовать данные методы в основном для дорогостоящих культур [Sieverding, 1986].
Обзор имеющихся данных показывает, что в почве существует достаточно видов аборигенных АМ-грибов, которые угнетаются интенсивными сельскохозяйственными технологиями [Муромцев, 1984]. Нативные штаммы являются более приспособленными к местным почвенным условиям и растениям-хозяевам - представителям естественного фитоценоза. Разработка приемов активации этих штаммов может иметь большое сельскохозяйственное значение, так как помимо положительною действия на растения, АМ-грибы способствуюг развитию почвенных микроорганизмов-азотфиксаторов [Israel, 1987; Сдобникова и др., 1987] Таким образом, восстановление естественного микоризного фона позволит значительно снизить почвоутомление и повысить продуктивность и стрессоустойчивость растений при низких затратах.
Цели и задачи исследовании. Целью исследования являлось изучение и разработка методов активации роста и развития естественных и интродуцированных эндомикоризных грибов арбускулярного типа в корнях растений с помощью регуляторов роста.
В задачи исследований входило:
- разработка метода оценки веществ - индукторов микосимбисггрофизма;
- поиск стабильного, безвредного индуктора микосимбисггрофизма;
- разработка метода активации микосимбиотрофизма в вегетационных и микровегетационных условиях;
- усовершенствование метода определения АМ-грибов в корнях растений.
Научная новизна исследований. Проведен скрининг и отобраны микроорганизмы, реакции которых на воздействие регуляторами роста адекватны реакции микотрофных растений. Доказано, что зеленая микроводоросль Clorella vulgaris шт. 157 и грибы класса Zygomycetes - Mucor mucedo (L: Fr.) и Rhizopus stolonifer (Ehrenberg: Fr. Lind) могут быть использованы в качестве тест-объектов для поиска веществ - индукторов микосимбисггрофизма.
Практическая значимость работы. Разработан метод оценки регуляторов роста - активаторов развития АМ-грибов в корнях растений, включающий в себя использование в качестве тест-объектов микроводоросли Clorella vulgaris шт. 157 и гриба класса Zygomycetes - Rhizopus stolonifer (Ehrenberg: Fr. Lind).
Найден новый синтетический регулятор роста - гидрогттерин, который является не только индуктором микосимбиотрофизма, но и стимулирует развитие высших растений, повышает их продуктивность и сгрессоустойчивость.
Проведены модельные испытания, показывающие, что обработка семян гидроптерином в концентрации 1*10"® мг/мл стимулирует развитие эндомикоризных грибов в корнях растений в микровегетэционных и вегетационных условиях от +20 до +660 %, повышает продуктивность растений до +43%, усиливает их сгрессоустойчивость.
Оптимизирован метод Крюгер с соавторами [Крюгер и др., 1968] определения АМ-грибов в корнях растений, подобран новый краситель кислотный чисто-голубой антрахиноновый 2 «3*> О. 62070.
Апробаиия работы. Результаты работы были доложены на четвертой и пятой международных конференциях «Регуляторы роста и развития растений» (Москва, 1997; Москва 1999), третьем международном конгрессе «Окружающая среда для нас и будущих поколений: экология, бизнес и экологическое образование» (Самара-Астрахань, 1998), всероссийской конференции «Экологические проблемы биодеградации промышленных, строительных материалов и отходов производств» (Пенза, 1998), всероссийской молодежной научной конференции «Растение и почва» (Санкт-Петербург, 1999).
Рабата была апробирована в вегетационных опытах в лаборатории биотехнологии Ставропольской государственной сельскохозяйственной академии.
Публикации. По теме диссертации опубликовано б печатных работ.
Объем и структура работы. Диссертация включает введение, 7 глав, состоящих из обзора литературы, описания объектов и методов исследования, результатов и их обсуждения, а также заключение, выводы, список цитируемой литературы и два приложения. Работа изложена на 162 трзницах текста, иллюстрирована 7 рисунками, включает 17 таблиц. Список литературы состоит из 280 источников, из них 157 зарубежных авторов.
УСЛОВИЯ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Объекты исследования. Вегетационные и микровегетационные исследования проводились на следующих растениях: люцерна посевная (Medicago sativa): сорт «Карлыпаш», (СФА-21), сорт «Староместный» (Казахстан); люцерна хмелевидная; донник белый (Melilotus albus) однолетний, сорт «Поволжский»; овес посевной (Avena sativa), сорт «Теремок», (Кировская обл.); райграс пастбищный (Lolium perenne); горох посевной (Rsum sativum) кормоеой, сорт «Эврика» К 8734 (Иркутская обл.); Plectrantus austrelis; ячмень обыкновенный или многорядкый (Hordeum vulgare), сортосмесь; бархатцы отклоненные (Tagetes patula) низкорослые сорт «Пометный легион». Субстратами служили почвы: дерново-подзолистая, супесчаная; смеси дерново-подзолистой, легкосуглинистой с песком 1:1 и вермикулитом 1:1.
Для исследования действия регуляторов роста использовались бактерии Pseudomonas sp. (№ 31) и Rhizobium meliloti; дрожжи класса Ascomycetes -Saccharomyces cereviseae (Meyen) и класса Deuteromycetes - Candida tropicalis (Castellani, Berkhouf); грибы класса Zygomycetes - Mucormucedo (L: Fr.), Rhizopus stolonifer (Ehrenberg: Fr. Lind) из коллекции кафедры TMC; зеленая водоросль Clorella vulgaris шт. 157 из коллекции лаборатории микробиологии БИНИИ СПГУ; микоризообразующие грибы класса Zygomycetes: Glomus mosseae (Y,V) Gerd. et Trappe; G. fasciculatum (E3) (Thaxter sensu Gerd.) Gerd. et Trappe; G. monosporum Gerd. et Trappe из коллекции лаборатории почвенной микологии ВНИИСХМ.
Были апробированы следующие регуляторы роста: ¡З-индолил-З-уксуснзя кислота (ИУК), 6-бензиламинопурин (б-БАП), Лентехнин, Эмистим, Моноэтаноламмониевая соль барбитуровой кислоты (МЭАБ), Гидрогттерин.
Метопы исследований. Оценку действий регуляторов роста на микроорганизмы проводили по следующим схемам: дрожжи, бактерии и грибы выращивали на плотных питательных средах. В жидкую питательную среду вносили регуляторы роста в различных концентрациях. Микроорганизмы количественно засевали в среду с регуляторами в и аэробно культивировали трое суток для бактерий и дрожжей и семь суток для грибов на ротационной качалке (220 об/мин). Аэробное культивирование Clorella vulgaris производилось на минеральной среде трое суток при освещении 2000 л к. Пробы культуральной жидкости бактерий, дрожжей и водорослей отбиралась каждые сутки для подсчета количества микроорганизмов. Определение проводилось измерением оптической плотности культуральной жидкости на спектрофотометре при А.=540 нм [Сухаревич, Медведева, 1990]. Накопление биомассы грибов определяли весовым методом. Количество жизнеспособных микроорганизмов определяли методом Коха [Сухаревич, Медведева, 1990].
Изучение влияния регуляторов на прорастание семян растений проводили по методике Всероссийского института растениеводства [Кочеговз, 1972]. Стимулирующий эффект оценивался по ускорению всхожести семян и увеличению средней длины и сухой массы ростков.
Накопление инокуляционного материала было проведено по методу Мосс и Гердеманна [Зольникова, 1993]. Микровегетационные и вегетационные опыты проводили по общепринятым методикам [Журбицкий, 1936]. Для уничтожения
аборигенных эндомикоризных грибов в почве, проводилась гамма-стерилизация экспериментально подобранной дозой облучения - 2.5 МРад. Определение полной влагоемкое™ субстрата проводили стандартным способом [Соколов, 1975]. Семена перед посадкой помещались в воду (контроль) или в растворы регуляторов роста в указанных ранее концентрациях [Лихолат, Шишова, 1999], эндомикоризный инокулюм вносился в виде субстратно-корневой смеси в количестве 5-50 г на сосуд [Зольникова, 1993; Menge, Timmer, 1982].
Стрессовые условия создавали внесением алюминия в концентрации 8 г/кг субстрата [Авдонин, 1965].
По окончании экспериментов определяли длину и вес растений, частоту встречаемости микоризной инфекции, интенсивность микоризации, обилие микоризных структур (арбускул и везикул) [Зольникова, 1993], а также содержание хлорофилла в листьях методом спиртовой вытяжки [Шульгин, Клешнин, 1959] и редуцирующих Сахаров в корнях методом Шомоджи-Нельсона [Somogi, 1952]. Обнаружение АМ-грибов в корнях растений проводилось по методу Крюгер с соавторами [Крюгер и др., 1968]. Количественный учет развитая эндомикоризных грибов в корнях растений проводили модифицированным методом Травло [Зольникова, 1993].
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ ОБНАРУЖЕНИЕ ЭНДОМИКОРИЗНЫХ ГРИБОВ В КОРНЯХ РАСТЕНИЙ
Для наблюдения за развитием АМ-грибов в корнях растений грибные структуры окрашивают, что позволяет отличить их от растительных тканей. Наиболее простым и легкодоступным является метод окраски, предложенный Л.Р. Крюгер с соавторами [Крюгер и др., 1968], однако предложенный ими краситель -бытовой анилиновый синий в настоящее время не производится. Поэтому для совершенствования эффективного метода обнаружения АМ-грибов в корнях растений необходимо было подобрать доступный краситель с известной структурой.
Были испытаны 6 органических красителей: метиловый голубой (CI 52015) - основной; прямой голубой К (CI 22610); прямые голубые (CI 24400 и CI 24410); прямой синий светопрочный (CI34140) и чисто-голубой антрахиноновый 2 «3» (CI 62070) - кислый на мицелии микромицетов Rhizopus stolonifer и Mucor mucedo, которые использовались как модель АМ-грибов, так как они относятся к тому же классу Zygomycetes.
Из 6 испытанных красителей 5 образовали прочный комплекс с клеточными стенками грибов и не отмывались 40%-ной молочной кислотой, которая используется для удаления красителя из тканей корня.
Следующим этапом окрашивали корни растений Plectrantus austrelis, содержащих эндомикоризный гриб Glomus fasciculatum. Прямые красители образовали с тканями корня стойкие комплексы, не разрушаемые молочной кислотой, после обработки которой корни не утратили густой синей окраски, и были светонепроницаемы. Кислотный краситель вымывался из корней молочной кислотой и оказался эффективным при окраске внутрикорневых структур гриба. При микроскопировании наблюдали окрашенные в голубой цвет гифы и везикулы G. fasdcullatum на фоне прозрачных тканей корня.
Таким образом, оптимальным красителем оказался кислотный чисто-голубой антрахиноновый 2 «3», который был рекомендован для использования в методе Крюгер.
Показано также, что снижение времени мацерации и выдержки в молочной кислсгге корней молодых растений до 40 минут, а также увеличение времени прокрашивания до 40-45 минут позволяет сохранить в целости корни с содержащейся в них микоризой и снизить погрешность результатов опыта.
РАЗРАБОТКА МЕТОДА ОЦЕНКИ РЕГУЛЯТОРОВ РОСТА -ИНДУКТОРОВ МИКОСИМБИОТРОФИЗМА
Одним из путей активации микосимбиотрофизма может быть использование регуляторов роста [Зольникова и др., 1997]. Изучение влияния регуляторов на развитие эндомикоризы в корнях растений - длительный и трудоемкий процесс. Для ускорения процедуры отбора индукторов микосимбиотрофизма перед нами стояла задача создать простые модели, которые могли бы воспроизвести взаимоотношение системы эндомикоризный гриб - растение с регуляторами роста. Наиболее подходящими моделями являются свободноживущие микроорганизмы [Зольникова, 1979].
Для исследований были отобраны различные микроорганизмы и известные регуляторы роста растений - р-ИУК, лентехнин, б-БАП и эмистим, а также вещества, предложенные в качестве регуляторов - гидроптерин и МЭАБ. Данные соединения применялись в концентрациях, принятых для работы с растительными объектами [Kende, Zeevaart, 1997].
Как видно из данных, приведенных в таблице 1, на большинство веществ прореагировали только три тест-объекта - зеленая водоросль С.vulgaris и грибы класса Zygomycetes - R.stolonifer и M.mucedo, а из исследованных веществ на микроводоросли и грибы класса Zygomycetes оказали положительное влияние только четыре - р-ИУК, б БАП, лентехнин и гидроптерин в концентрации 1*10^ мг/мл.
При воздействии регуляторов на C.vulgaris очевидно, что наибольшей активностью обладают лентехнин и ПУК, что соответствует их широко известному стимулирующему действию на растения [Сакало, Курчий, 1999]. По воздействию на грибы наибольшую активность проявил гидроптерин в концентрации 1*10"6 мг/мл, что позволяет предположить, что он будет положительно влиять не только на рост растений, но и на усиление микоризо образования в их корнях.
Вторым этапом исследований микоризоиндуцирующих свойств этих веществ было проведение опытов с высшими растениями и эндомикоризными грибами (табл. 2). Поскольку АМ-грибы являются облигатными симбиотрофами, оценить действие микоризоиндукгоров можно только в вегетационных или полевых условиях. Наиболее простым и эффективным способом является постановка опыта в горшечной культуре на декоративном растении Plectrantus austrelis. Эта растение хорошо размножается черенками, культивируется в различных условиях, неприхотливо и его корни положительно отзываются на микоризацию различными АМ-грибами [Зольникова, 1992].
Данные таблицы 2 показывают, что эндомикоризный гриб, а также все регуляторы роста стимулируют развитие растений, однако совместное применение препаратов с АМ-грибом не оказывает существенного влияния на продуктивность растений по сравнению с вариантами раздельного применения.
Анализ действия гидрогттерина в концентрации 1*10"® мг/мл показал, что исследуемый препарат проявил себя как стимулятор роста растений, сравнимый с известными - ИУК и лентехнином.
Развитие эндомикоризных структур в корнях растений незначительно стимулировала только (5-ИУК, что дало увеличение веса растений на 14%. Лентехнин существенно не изменил ни один из показателей микатрофности и развития растений. Таким образом, совместное применение ИУК и лентехнина с эндомикоризными фибами является нецелесообразным, так как дает схожие результаты с применением каждого из этих регуляторов по отдельности.
При обработке черенков гидрогтгерином с последующей микоризацией длина и вес наземной части растений увеличились на 55 и 43% соответственно, что на 28% больше, чем при сравнении с контрольными микоризованными растениями, вес корня возрос на 14%.
Анализ данных по микоризации корней растений показал, что применение гидроптерина увеличивает не только частоту встречаемости микоризной инфекции на 17%, но и основные показатели - интенсивность микоризации на 81%, обилие запасающих и питающих органов - везикул и арбускул на 38 и 20% соответственно по сравнению с вариантом инокуляции в^азаоЛаШт (табл.2).
Сравнивая полученные данные, становится очевидно, что основной эффект стимуляции растений гидрогтгерином обусловлен не только его действием на метаболизм растений, но, главным образом, на его микосимбиотрофизм
Следующим вариантом проверки действия регуляторов на развитие эндомикоризы служил опыт с овсом - растением, широко используемым для исследований АМ-грибов [Зольникова, 1992].
Как свидетельствуют данные, указанные в таблице 3, все регуляторы роста одинаково положительно действуют на увеличение веса наземной части растений и на удлинение корня. Как и в предыдущем опыте гидроптерин действует аналогично лентехнину и р-ИУК. Вес наземной части возрастает на 26%, длина корня на 12%.
В вариантах с внесением эндофита все вещества стимулировали развитие растений. Развитие микоризного гриба в корнях контрольного варианта было довольно низким для овса - хорошо известного растения-хозяина АМ-грибов [Муромцев и др., 1988]. Так, интенсивность микоризации составляла всего 12.9%, обилие арбускул 1.8%, что существенно ниже обычных для этого растения показателей. Такое слабое инфицирование объясняется тем, что опыт проходил в микровегетационных условиях, не являющихся оптимальными для развития микоризованных растений [Муромцев и др., 1986].
При сравнении с микоризованными растениями оказалось, что, как и в предыдущем опыте, ИУК и лентехнин существенно не повлияли на их развитие. Анализ содержания микоризы в корнях растений показал, что ИУК значительно повысила частоту встречаемости микоризной инфекции на 72% и содержание запасающих структур - везикул на 93%, однако при этом другие основные показатели - интенсивность микоризации и обилие арбускул остались на прежнем уровне. Лентехнин повысил содержание всех микоризных структур на 13-23.% Таким образом, оба регулятора увеличили активность развития АМ-грибов в корни растений, но незначительно повлияли на ее развитие, что слабо отразилось на показателях растения.
Обработка гидрогтгерином увеличила длину и вес наземной части на 2635%, что на 26-12% выше, чем у контрольных растений, содержащих только АМ-
Таблица 1
Влияние исследуемых веществ на микроорганизмы
Регуляторы Flavobacterl um sp. Azospirillum sp. Saccharo- myces cerevlziae Candida tropicalis Clorella vulgaris Mucor mucedo Rhizopus stotonlfer
Время культивирования 3 суток 7 c^ гтк
Клеток 10"' % к К. Клеток 10"' % к К. Клетик lO'7 % к К. Клеток 10"' % к К. Клеток 10-' % к К. Масса, г % к К. Масса, г % к К.
Контроль 0.23 100 1.41 100 8.3 100 8.5 100 2.6 100 0.601 100 0.405 100
ИУК тег1 мг/мл 0.16 71 0.89 63 8.5 102 8.8 104 3.2 1?4 0.661 ho 0.441 ioV ■'J
6 БАП то*4 мг/мл - 7.7 93 8.0 94 3.0 : ": 113 0.559 93 0.373 92
Лентехнин mcr1 мг/мл 0.13 59 0.97 69 8.7 105 8.8 1D4 3.3 126 I.>'''■'' 0.649 108 0.442 109
Эмистим 1*10'4 мг/мл 8.1 98 8.3 98 2.8 107 0.649 108 0.433 107
Гидроптерин 1* 10" иг/ил 0.08 34 1.05 75 8.0 96 7.8 92 1.4. 55 0.558 93 0.397 98
Гидроптерин ХЧО-'мг/ил 0.21.. 92 1.35 96 9.3 Iii 9.3 109 3.1 ii> 0.679 '113 0.478 118
Гидроггтерич 1П041 нг/мл 7.8 94 8.4 99 2.6 99 0.619 103 0.401 99
МЭАБ 1»Ю'6 мг/мл 7.8 94 7.5 88 2.5 96 0.607 101 0.389 96
МЭАБ 1»10® мг/мл 6.3 76 7.6 89 2.1 82 0.637 106 0.413 102
Таблица 2
Влияние регуляторов на рост Plectrantus austrelis и развитие эндомикоризного гриба Glomus fasciculatum в его корнях
Регуляторы Назенная часть Корень Микориэация
Удлинение Вес Удлинение Вес F М в А
мм %к К 1 %к К 2 г %к К1 %к К 2 мм %к К 1 %к К 2 г К 1 %к К 2 % %к К 2 % %к К 2 % %к К 2 % %к К 2
Без инокуляции Контроль 1 (К1) 123 100 - 30.0 100 ~ 96 100 - 4.8 100
р-ИУК ШО"1 мг/мл 154 Ä5 -- 36.9 - 104 108 - 5.4 113 -
Лентехнин 1ж10'4 мг/мл 156 127 > - - 37.2 {¿4 - 106 110 - 5.6 117
Гидроптерин то"» нг/мл 153 ¿"¿4 - 37.8 126 -- 100 104 - 5.6 117
G. fasciculatum Контроль 2 (К2) 150 122 100 33.6 112 100 86 90 100 5.2 108 100 60 100 52 100 5.6 100 12 100
Р-ИУК 1П0-4 мг/мл 159 129 106 38.4 128 114 85 89 99 5.5 115 106 67 112 51 99 6.5 11*6 13 109
Лентехнин 1»10 4 мг/мл 162 i32 108 35.1 117 105 82 85 95 4.5 94 87 68 114 55 107 5.4 96 12 98
Гидроптерин 1*10_а иг/мл 191 155 127 42.9 143 128 81 84 94 5.9 123 114 70 117 94 181 7.7 138 15 120
гриб. Возросла также и длина корня на 18%. Содержание микоризных структур под влиянием гидрогттерина увеличилось в несколько раз. Так, интенсивность микоризации возросла в 1.2 раза, обилие арбускул и везикул в 2.9 и 3.9 раз сотнею ценно, частота встречаемости микоризной инфекции выросла в 7.6 раз.
Эти результаты, как и данные предыдущего опыта, показывают, что стимуляция микоризообразования существенно влияет на продуктивность растений.
Аналогичные результаты получены также для гороха посевного и бархатцев отклоненных.
Следующим этапом была проверка действия регуляторов роста на аборигенные эндомикоризные грибы. Для этого были использованы бархатцы отклоненные низкорослые - однолетние растения, использующиеся в декоративных целях, а также для получения витаминизированных пищевых красителей и эфирных масел [Касумов, Гулиев, 1989].
Бархатцы являются высоко микотрофными растениями и часто ' используются для изучения эндомикоризных грибов [Карандашов и др., 1999].
В опыте была использована нестерильная дерново-подзолистая почва, насыщенная аборигенной микрофлорой, идентифицируемой как Glomus sp. . [Зольникова, 1988].
Анализ полученных данных, приведенных в таблице 4, показал, что ИУК и гидрогтгерин стимулировали рост растений и увеличение веса корней.
Стерилизация почвы для инактивации аборигенной микоризы не дала значительных отрицательных результатов. Микоризация растений в контрольном варианте была невысокой, что соответствует литературным данным о меньшей эффективности нативной микоризы по сравнению с селективными штаммами [Муромцев и др., 1988].
Обработка семян ИУК не оказала влияния на АМ-грибы, следовательно, удлинение ростков и увеличение веса корней произошло благодаря действию регулятора на метаболизм растения.
Применение гидрогттерина значительно стимулировало аборигенную микоризу. Частота встречаемости микоризной инфекции возросла на 71%, интенсивность микоризации на 47%, обилие арбускул на 11%. Это, в свою очередь, повлияло на развитие растений. Так, длина и вес ростков увеличились на 13 и 27% по сравнению с контролем с нестерильной почвой. Вес корня возрос на 30%.
Таким образом, згти данные подтверждают результаты предыдущих опытов о стимуляции гидроптерином в концентрации 1*10"6 мг/мл микоризообразования в корнях растений. При этом действие гидрогттерина эффективно не только для интродуцированных селективных штаммов, но и для аборигенных микоризных грибов.
При сравнении результатов микровелетационных опытов с данными, полученными при воздействии регуляторов на микроорганизмы, становится очевидно, что влияние исследованных веществ на растения и микоризообразующие грибы адекватно влиянию этих же веществ на предложенные нами тест-объекты. Так, например, при воздействии ИУК возрастает вес наземной части растений на 14-27% и увеличивается рост клеток C.vulgaris на 24%; повышается интенсивность микоризации растений на 2-10%, и возрастает биомасса грибов на 9%. При применении гидрогттерина вес наземной части растений увеличивается на 15-26%, рост клепок C.vulgaris усиливается на 19%; интенсивность микоризации возрастает на 39-81%, биомасса R.stolonifer
п
Таблица 3
Влияние регуляторов на рост овса посевного и развитие микоризного гриба Glomus mosseae в его корнях
Регуляторы, Наземная часть Корень Микориэация
Длина Вес ,0 1лина Вес F М в А
мм % к К 1 %к К 2 г % К К 1 % к К 2 мм % к К 1 % к К2 г % К K1 % к К 2 % % к К2 % % к К 2 % % к К 2 % К 2
Без иноку ляции Контроль 1 СК1) 119 100 -- 14.1 100 - 103 100 -- 45.4 100
р-ИУК то"1 мг/мл 132 111 -- 17.9 127 -- 111 108 47.2 104
Лентехнин 1*10-* мг/мл 130 109 - 131 128 114 ¿1% «5.3 102
Гидрогттерии 1М0"® мг/ил 125 105 - 17.8 ¿26 - 115 iia - »9.0 108
G. mosseae Контроль 2 (К2) 119 100 100 17.0 121 loo 123 100 30.9 68 100 13 100 42 100 8.1 100 1.8 100
р-ИУК 1*10-* мг/мл 131 110 iio 18.2 107 127 123 103 37.7 83 {¿2 22 172 46 110 15 193 1.8 100
Лентехнин 1*10 '' мг/мл 138 ¿16 its 17.9 1-27 105 125 102 40.9 90 132 21 164 50 its 9.2 ггэ 2.2 Ф
Гидроптерии 1*10"® »г/ил ISO Щ 126 19.D 135 112 145 141 up 40.4 89 # 98 7S0 95 226 39 «1 7.1 394
Таблица 4
Влияние регуляторов на рост бархатцев отклоненных и развитие аборигенного микоризного гриба в его корнях
Регуляторы Наземная часть Корень Микоризация
Длина Вес Длина Вес F М в А
мм %к К 1 %к К 2 г %К К 1 %к К 2 мм %к К1 %к К 2 г %к К 1 %к К 2 % %К К 2 % %к К 2 % %к К 2 % %к К 2
Контроль 1(К1) без микоризы 47 100 - 24.6 100 - 7.5 100 - 8.8 100 - -
Контроль 2(К2) (аборигенная микориза) 48 102 100 22.3 91 100 7.0 93 100 9.2 105 100 15.7 100 367 100 9.6 100 3.8 100
р-ИУК то-4 нг/мл 52 111 108 22.0 89 99 6.5 87 93 9.9 из 108 15.5 99 37.3 102 9.0 94 3.9 103
Гидропгерин 1*10-* мг/мл 54 lis йз 28.3 lis 127 7.0 93 100 12.0 136 130 26.8 171 54.1 147 10.4 108 4.2 Й1
увеличивается на 18%. Действие МЭАБ в концентрации 1*10"® мг/мл ингибирует рост клеток С.^дапэ на 18% и снижает развитие растений на 10%; уменьшает прирост биомассы Я.йп1оп№г на 4% и снижает интенсивность микоризации на 27%. Очевидно, что предложенные нами тест-объекты отражают взаимодействие высших растений и эндомикоризных грибов с регуляторами, следовательно, такая модель может быть использована для массового первичного отбора регуляторов роста - индукторов микосимбисгрофизма.
Активация как аборигенной, так и интродуцированной микоризы, а также ускорение роста и улучшение развития растений под воздействием регулятора, свидетельствует о возможное™ использования предложенного метода индукции микосимбиотрофизма в практике растениеводства.
Очевидно, что из всех рассмотренных препаратов, гидроптерин в концентрации 1*10"® мг/мл является оптимальным стимулятором как для АМ-грибов, так и для растений. Однако прежде чем рекомендовать данное вещество к использованию, необходимо оценить ело росгрегулирующие свойства.
БИОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА РОСТРЕГУЛИРУЮЩИХ СВОЙСТВ ГИДРОПТЕРИНА
Азотфиксирующие бактерии являются важнейшим источником азота для растений семейства бобовых, вступающих с ними в эндосимбиоз. Также имеется большой объем данных о взаимоотношениях небобовых растений с азсгтфиксирующими микроорганизмами. В связи с этим, необходимо проверить предлагаемый нами микоризоиндуктор гидроптерин по его действию на азотфиксирующие почвенные микроорганизмы.
Анализ данных, приведенных на рисунке 1 показал, что все использованные регуляторы давали наибольшую стимуляцию роста Pseudomonas sp. на вторые сутки воздействия, в дальнейшем этот эффект снижался. Максимальное действие ß-ИУК на вторые сутки увеличивало количество микроорганизмов на 48%, лентехнин также давал наибольший прирост количества клеток (204%) на вторые сутки, на третьи количество микроорганизмов снизилось.
• Контроль - * - ИУК А —Лентехнин И Гидроптерин
Рис. 1. Влияние регуляторов роста на развитие почвенной бактерии Pseudomonas sp.
• Контроль - «» ИУК —4— Лентехнин X Гидроптерин
Рис. 2. Влияние регуляторов роста на развитие почвенной бактерии йЫгоЫит теШой
Применение гидрогтгерина оказало максимальное стимулирующее действие на первые сутки (209%), несколько меньшее на вторые и, на третий день, количество клеток почти сравнялось с контрольным значением.
Rhizobium meliloti также наибольший прирост давала на вторые сутки культивирования (Рис.2). В этом случае наибольшую активность проявил гидрогттерин. С первого дня количество клеток возросло на 55%, достигло максимума на вторые сутки (+89%) и к третьим суткам составляло +47%.
Таким образом, гидрогттерин является стимулятором для ассоциативного азотфиксатора - Pseudomonas sp.
Также очевидно, что гидроптерин является хорошим стимулятором, превосходящим по эффективности ИУК и лентехнин, для симбиотического азотфиксатора Rhizobium meliloti, существенно повышая его рост на искусственных средах.
Полученные нами результаты показали, что отобранное вещество -гидрогттерин в концентрации 1*10"6 мг/мл хорошо действует на рост и развитие высших растений, эндомикоризных грибов и азотфиксирующих почвенных бактерий. Для дальнейшего использования этого вещества в растениеводстве необходимо провести оценку экологической безопасности препарата для высших растений.
Известно, что обрабатывая семена биорегуляторами, можно управлять такими важными физиологическими процессами как прорастание, рост стебля и листьев, заложение и рост корней, переход к цветению, плодоношению, созреванию плодов и семян [Посыпанов и др., 1991]. Поэтому одним из основных экспериментов, используемых в целях определения экологической безопасности регуляторов, является исследование влияния препарата на всхожесть семян и на удлинение проростков.
Проведены исследования по воздействию препарата на семена и проростки различных сельскохозяйственных культур: бобовых, злаковых, а также декоративных растений.
Результаты опытов полностью соответствуют известным данным. Как лентехнин, так и ИУК существенно не изменили всхожесть семян овса, гороха и бархатцев, а также стимулировали удлинение проростков [Зенькевич, 1984; Кан, 1982].
Гидроптерин стимулировал прорастание семян овса и бархатцев на 12 и 14% соответственно, хотя на всхожесть гороха влияние было менее значимым (+8%), значительно стимулировал удлинение проростков плектрантуса (+53%), гороха (+30%) и несколько меньше овса (+11%).
В целом можно сказать, что гидрогттерин не только положительно влияет на всхожесть семян и существенно стимулирует удлинение проростков, но и является стимулятором роста растений, сравнимым по действию с известными -лентехнином и ИУК.
Проведенные в 1983 поду испытания по действию гидрогтгерина на белых мышей и крыс показали, что препарат является безвредным для теплокровных животных и может бьгть отнесен к классу практически нетоксичных веществ, что подтверждено актом токсикологических испытаний Института токсикологии Минздрава СССР сгт 4 ноября 1983 года [Студенцов и др., 1983].
НЕКОТОРЫЕ АСПЕКТЫ ПРИМЕНЕНИЯ ГИДРОПТЕРИНА ДЛЯ УЛУЧШЕНИЯ ПРИЖИВАЕМОСТИ МЕЛКОСЕМЯННЫХ ТРАВ
Семена кормовых и газонных мелкосемянных трав отличаются плохой всхожестью и приживаемостью, поэтому нормы высева всегда значительно завышены. Испытания совместного применения гидроптерина и эндомикоризных грибов были направлены на повышение приживаемости и развития данных растений при высеве.
Для опытов были взяты бобовые кормовые травы - донник и люцерна, а также злаковая трава - райграс. Размер семян этих растений не превышает 2 мм.
Первым этапом проверяли влияние гидроптерина на всхожесть семян и удлинение проростков. Данные таблицы 5 свидетельствуют о том, что р-ИУК практически не влияет на всхожесть семян, что подтверждает литературные данные [Кан, 1982].
Отмечено видо- и соргоспецифичное действие гидроптерина на всхожесть растений. Препарат хорошо влияет на прорастание семян люцерны посевной сорта «Староместный», очень сильно стимулирует всхожесть люцерны хмелевидной и райграса, и слабо ингибирует всхожесть люцерны сорта «Карлыпаш». При этом прорастание семян донника белого снижается на 28%.
Удлинение проростков донника и райграса при применении гидроптерина было в 1.5 раза сильнее, чем при воздействии ИУК (+31 и +21% соответственно).
Также хорошее действие гидрогттерин оказал на люцерну хмелевидную (+18%), однако проростки люцерны посевной обоих сортов слабо ингибировались.
Обобщая полученные результаты, можно сделать следующий вывод: по действию на всхожесть семян гидрогттерин проявляет видо- и соргоспецифичностъ. В большинстве случаев препарат в концентрации 1*10"6 мг/мл действует как стимулятор, но для его применения необходимо проводить индивидуальное испытание каждого растения.
Следующим этапом проверки действия препарата и эндомикоризных грибов служили микровегетационные опыты. Поскольку известно, что микориза помогает приживаемости растений в условиях, способствующих ее развитию, необходимо было проверить, создает ли гидрогттерин подобные условия, помогающие развитию микоризы, и, как следствие, улучшению приживаемости мелкосемянных трав.
Были проведены микровегетационные опыты, результаты которых приведены в таблице б. Показано, что применение микоризы существенно влияет на увеличение веса наземной части растений и удлинение корней. При этом длина стебля практически не изменяется, а вес корня значительно снижается.
Совместное использование АМ-грибов с известными регуляторами роста -лентехнином и ИУК не дало никакого эффекта. Все показатели сравнимы с контрольным вариантом 2 в пределах математической погрешности. На микоризацию корней данные регуляторы также не оказали положительного действия.
Одновременное применение гидроптерина в концентрации 1*10"' мг/мл и эндомикоризного гриба Glomus mosseae существенно повысило вес наземной части обоих растений, длину стебля райграса и длину корня люцерны. При этом значительно возросла интенсивность микоризации корня, а также обилие везикул и арбускул.
Таблица 5
Влияние регуляторов на всхожесть семян и удлинение проростков на 3 сутки
Растения Количество проросших семян Удлинение про эостков
Контр., шт ИУК 1*10 * мг/мл Гидроптерин 1*10"6 мг/мл Контр., мм ИУК 1»10'4 мг/мл Гидроптерин 1*10'6 мг/мл
шт % к контр. шт % к контр. мм % к контр. мм % к контр.
Донник белый 64 56 88 46 72 12.5 14.3 • -114 16.4 • 131
Люцерна хмелевидная 46 56 ■121 76 165 7.8 7.4 94 9.4 118 -
Люцерна сорт «Староместный» 46 50 109 54. ГШ'; 6.9 6.0 87 6.1 83
Люцерна сорт «Карлыпаш» 72 70 97 66 92 9.2 8.3 90 8.9 97
Райграс пастбищный 80 82 103 98 "123 - 5.2 5.7 110 6.3 -3121-':
Таблица б
Влияние регуляторов на рост, развитие и микотрофносгь райграса и люцерны
Регуляторы, Наземная часть Корень Микоризация
Длина Вес Длина Вес Р М В А
мм °/о К К 1 °Ак К 2 г % к К 1 % к К 2 ми % к К 1 %к К2 г % к К1 % к К 2 % % к К 2 % % к К 2 VII % к К 2 % % к К 2
Райграс-контроль 1 Без микоризы ГК1) 358 100 - 1.63 100 - 202 100 - 4.57 100
Райграс + в. то5- 5еае Контроль 2 (К2) 353 99 100 1.81 111 100 225 100 4.31 94 100 54 100 62 100 12 100 24 100
р-ИУК 1*10 мг/мл 379 106 107 1.86 103 222 110 99 4 23 93 98 46 85 33 61 11 92 25 104
Лентехнин 1*10 мг/мл 408 114 116 1.96 по 108 228 из 101 3.25 71 75 28 52 32 52 7 58 15 60
Гидроптерин 1*10 ' мг/мл 396 1у 112 2.10 129 I16 230 114 102 3.37 74 78 52 96 86 139 14 У7 32 133
Люцерна-контроль 1 Без микоризы (К1) 55 100 - 3.4 100 - 47 100 -- 9.8 100
Люцерна + С. тоз-зеае Контроль 2 (К2) 58 106 100 4.1 121 100 53 11? 100 8.2 84 100 48 100 36 100 3.0 100 12 100
р-ИУК 1*10 мг/мл 59 107 102 4.0 ¿8 98 54 115 102 8.1 83 99 51 107 39 108 3.3 109 11 88
Лентехнин 1*10 мг/мл 56 102 97 4.2 124 102 55 117 104 7.8 80 95 50 104 32 89 3.2 107 12 100
Гидроптерин 1*10'' мг/мл 61 111 105 4.6 135 112 59 126 111 7.6 78 93 74 154 62 172 4.1 137 17 143
Аналогичные результаты получены для люцерны посевной сортов "Карлыпаш" и Хтароместный" и донника белого сорта "Поволжский".
Таким образом, очевидно, что гидроптерин существенно повлиял не только на микоризацию корней данных растений, но и значительно улучшил такие показатели как длина и вес наземной части и длина корня. Гидрогттерин можно рекомендовать для улучшения приживаемости мелкосемянных трав для быстрого задерненения земли.
АКТИВАЦИЯ МИКОСИМБИОТРОФИЗМА В СТРЕССОВЫХ УСЛОВИЯХ
Для почв Северо-Западного региона характерно повышенное содержание подвижного алюминия, так как регион расположен в зоне промывного земледелия. Доля таких почв в сельхозугодиях Ленинградской области составляет свыше 50% [Почвы Ленинградской области, 1973], это является одним из факторов, ограничивающих развитие растений. Для снижения токсичности используются методы химической мелиорации, в частности, внесение извести, что приводит к закреплению алюминия в пахотном слов.
Микориза является известным антистрессовым фактором для растений [ВеОТепй^ау, 1996; Б^ББег, 1996]. Следовательно, можно предположить, что инокуляция эффективными коллекционными культурами, а также активация нативной микоризы регулятором роста может позволить снизить нормы внесения химических мелиорантов и увеличить продуктивность растений.
Анализ данных микровегетационного опыта, приведенных в таблице 7, показал, что внесение в почву алюминия в концентрации 8 г/кг субстрата снизило вес наземной части и корня растений на 35% и 16%, что соответствует литературным данным [Авдонин, 1965]. Существенно пониженным оказалось содержание в листьях хлорофилла а и Ь (71-70%) и редуцирующих Сахаров в корнях (66%). Также алюминий ингибировал развитие энчомикоризных грибов в корнях растений: интенсивность микоризации снизилась на 30%, частота встречаемости микоризной инфекции на 52%, содержание арбускул и везикул на 42 и 73% соответственно.
Воздействие гидрогттерином несколько снизило отрицательный эффект от внесения алюминия. Однако применение препарата полностью не сняло стресс, наблюдавшийся у растений. Единственными показателями, восстановившими первоначальный уровень, оказались содержание хлорофилла Ь в листьях и интенсивность микоризации корней. Содержание остальных микоризных структур по-прежнему были ниже нормы, но значительно выше, чем в контроле без внесения биопенных добавок.
Инокуляция эффективным коллекционным эндомикоризным грибом оказала на растения овса антистрессовое воздействие, сравнимое с действием гидроптерина. Отзгтого приема вес наземной части возрос на 38% по отношению к контролю. Увеличился вес корня, содержание хлорофилла возросло на 23 и 20%, количество редуцирующих Сахаров снизилось на 42%. Последнее можно объяснить активным их использованием АМ-грибом.
Частота встречаемости микоризной инфекции, а также содержание арбускул и везикул практически приблизились к контрольным показателям варианта без внесения стрессового фактора, интенсивность микоризации возросла на 16%.
Наиболее оптимальным вариантом воздействия на овес при алюминиевом стрессе оказалось совместное применение гидроптерина и эндомикоризного гриба
Glomus mosseae. В этом случае последствия внесения алюминия были практически нивелированы. Показатели веса наземной часто, веса корня, содержания хлорофилла в листьях, редуцирующих Сахаров в корнях были сравнимы в пределах погрешности с контрольными вариантами без алюминия. Частота встречаемости микоризной инфекции увеличилась как по сравнению с контролем с внесением алюминия (+144%), так и с контролем без него (+18%). Интенсивность микоризации также значительно возросла по отношению к контролю с алюминием на 124, к контролю без алюминия на 56%, обилие арбускул возросло на 326 и 14% соответственно. Обилие везикул, увеличившись на 76%, достигло того же количества, что и в варианте без внесения стрессового фактора.
Таким образом, очевидно, что гидроптерин в концентрации 1*10"6 г/л является хорошим стимулятором для развития микоризы в корнях овса. Для загрязненных почв бедных естественной микоризой, наиболее эффективным является применение гидроптерина совместно с препаратом микоризных грибов, оказывающих антистрессовое действие на растения.
Следующий опыт проводился в вегетационных условиях, приближенных к полевым. Семена ячменя многорядного высаживались в вегетационные сосуды емкостью 7 кг в почву, загрязненную алюминием, и выращивались в вегетационных домиках без двух стенок.
Данные, приведенные в таблице 8, свидетельствуют, что растения ячменя были плохо развиты и слабо прореагировали на внесение гидроптерина и микоризного гриба.
Содержание АМ-грибов в корнях при внесении гидроптерина увеличилось на 448%, препарата Glomus monosporum на 278%, при совместном воздействии на 822%. Это незначительно отразилось на показателях продуктивности растений, при раздельном применении препаратов Glomus monosporum и гидроптерина уменьшилось кущение растений на 11% и 9% соответственно, остальные параметры остались без изменения. Наилучшее воздействие, как и в предыдущем опыте, оказал вариант совместного применения препаратов, где вес стебля с колосом увеличился на 14%.
Во время проведения опыта наблюдалось сильное снижение температуры воздуха ночью до 0°С, на почве до - 1°С, а также высокая влажность. Это отрицательно сказалось на общем состоянии выращиваемых растений. Помимо этого, ячмень - культура, чувствкггельная к алюминиевому загрязнению, доза 8 г/сосуд является критической, снижающей урожай до 50% [Авдонин, 1965], поэтому внесение биологических мелиорантов даже совместно с 0.5 нормы извести оказалось малоэффективным. Для быстрого восстановления естественного уровня урожайности ячменя в данных условиях, по-видимому, необходимо предварительное применение большего количества химических мелиорантов.
Несмотря на вышеизложенное, очевидно, что применение гидроптерина стимулирует развитие эндомикоризных грибов, как естественного дикого, так и внесенного культурного штамма.
Гидроптерин был направлен на экспертизу на опытную станцию Ставропольской сельскохозяйственной академии, где были получены положительные результаты о влиянии препарата на микоризообразование в корнях растений.
IS
Таблица 7
Влияние регуляторов роста на овес посевной в условиях алюминиевого стресса (нестерильная почва с низким содержанием АМ-грибов)
Регуляторы Вес наземной части Вес корня Хлорофилл а Хлорофилл Ь Сахар а Микоризация
F м в А
г ЧЬ к К 2 % к К1 г % it К2 % к К 1 иг/ л % к К 2 "Г/ л '* к К 2 МГ/ л % к К 2 % %к К 2 % к К 1 % % к К 2 %к К 1 % % к К 2 % к К1 % % к К 2 %к К1
Контр. 1 (К1) без алюминия 8.7 - 100 4.5 - 100 7.0 - 6.0 - 0.03 - 8.9 100 24 " 100 3.6 - 100 8.6 - 100
Контр. 2 (К2) 5.6 100 65 3.8 100 84 5.0 100 4.2 100 о.ог 100 4.3 100 48 16 100 70 2.1 100 58 2.3 100 27
Гидроптерин 1«10"6 мг/мл 6.7 US 77 4.3 ш 93 6.1 122 5.8 144 0.02 108 5.9 137 66 29 Щ 121 2.9 138 81 6.7 291 78
Glomus mosseae 7.8 Ц*. 89 4.3 115 96 6.1 123 5.0 120 Э.01 58 7.8 181 88 27 167 116 3.1 148 86 8.3 61 97
Гидропте-рин 1*10'6 мг/мл, G.mosseae 8.5 151 98 4.5 121 101 7.1 145 6.2 ' ' КГ 0.02 103 11 44 lis 37 щ 4s 3.7 176 103 9.8 426 114
Таблица 8
Влияние регуляторов роста на ячмень многорядный в условиях
алюминиевого стресса (нестерильная почва с низким содержанием АМ-грибов, с добавлением 0.5 нормы извести 7.5 г
на сосуд)
Регуляторы Наземная часть Кущение Микоризация
длина вес F м В А
ни % к К 1 % к К 2 г % к К 1 % к К 2 % к К 1 % к К 2 % % к К 1 % It К 2 % % к К 1 % к К 2 % % к К1 % It К 2 % % it К 1 % к К 2
Контроль 1 (К1) нативная микориза 510 100 - 2.47 100 - 4.6 100 1.7 100 - 2.3 100 0.03 100 - 0.01 100
Гидроптерин 1*10"6 мг/мл нативная микориза 496 97 - 2.67 108 - 4.2 91 - 4.5 270 - 12.6 546 0.05 180 - 0.47 47р
Контроль 2 (К2) + G. monosporum 505 99 100 2.44 99 100 4.1 89 100 10.2 Stl 100 8.7 378 100 0.04 йб 100 2.76 276 100
Гидроптерин 1«10 а мг/мл + G. monosporum 483 95 96 2.82 114 116 4.6 100 112 10.3 «6 101 21.2 922 244 0.28 ltw 700 4.73 473
ВЫВОДЫ
1. Найден новый синтетический регулятор роста - тодроптерин, обработка которым приводит к насыщению корней растений АМ-грибами - как нативными, так и интродуцированными штаммами, а также повышает продуктивность растений. Разработан метод активации роста и развития естественных и интродуцированных эндомикоризных грибов арбускулярного типа в корнях растений, заключающийся в обработке семян гидроптерином. Опытным путем подобрана оптимальная концентрация регулятора - 1*10"6 мг/мл.
2. Разработана модель, отражающая взаимодействие АМ-грибов и высших растений с регуляторами роста, включающая в себя использование микроорганизмов - тест-объектов и позволяющая проводить в короткие сроки первичный массовый отбор модуляторов микосимбиотрофизма. Проведен скрининг и подобраны микроорганизмы - тест-объекты: зеленая микроводоросль Clorella vulgaris шт. 157 и гриб класса Zygomycetes - Rhizopus stolonifer(Ehrenbeng: Fr. Lind).
3. Установлено, что гидроптерин является безопасным для почвенной микрофлоры, причем для некоторых почвенных микроорганизмов, таких как Rhizobium meliloti и Pseudomonas sp. (№ 31), препарат в концентрации 1*10"6 мг/мл является стимулятором, усиливающим рост на 89% и 104%.
4. Оптимизирован метод определения эндомикоризных грибов в корнях растений, подобран новый краситель чисто-голубой антрахиноновый 2 "3" CI62070.
5. Установлено, что совместное применение гидрогттерина и эндомикоризного гриба повышает продуктивность растений в стрессовых условиях при повышенной концентрации алюминия.
6. Выявлено, что гидроптерин является активатором прорастания семян некоторых растений, таких как овес, люцерна и бархатцы, увеличивая всхожесть на 14-63%, а также повышает приживаемость мелкосемянных трав до 35%.
По материалам диссертации опубликованы следующие работы:
1. Зольникова Н.В., Нусинская М.В., Яковлев В.И. Регуляторы роста растений -активаторы микосимбиотрофизма сельскохозяйственных культур // Регуляторы роста и развития растений: Тез. докл. IV междунар. конф. - М., 1997,- С. 261.
2. Нусинская М.В., Ковжина Л.П., Зольникова Н.В. Краситель чисто-голубой антрахиноновый для окраски структур эндомикоризных грибов класса Zygomycetes в тканях корня растений // Микология и фитопатология.- 1998.- Т. 32,- Вып. 3.- С. 47-49.
3. Яковлев В.И., Зольникова Н.В., Нусинская М.В., Лисицкая Т.6. Повышение стрессоустойчивости растений на почвах с высокими концентрациями алюминия // Окружающая среда для нас и будущих поколений: экология, бизнес и экологическое образование: Тез. докл. III междунар. конгр. - Самара, 1998.-С. 31-32.
Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Нусинская, Марина Владимировна
ВВЕДЕНИЕ.
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1 Биология эндомикоризы.
1.2 Эндомикориза, ее роль в повышении продуктивности сельскохозяйственных структур.
1.3 Снижение микоризного статуса при применении интенсивных технологий в сельском хозяйстве.
1.4 Инокуляция растений эффективными штаммами АМ-грибов, как сельскохозяйственный прием.
1.5 Получение препаратов эндомикоризных грибов, активация нативной микоризы.
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
2.1 Материалы исследований.
2.2 Методы исследований.
ГЛАВА 3. ОБНАРУЖЕНИЕ ЭНДОМИКОРИЗНЫХ ГРИБОВ
В КОРНЯХ РАСТЕНИЙ.
ГЛАВА 4. СКРИНИНГ ВЕЩЕСТВ - ИНДУКТОРОВ
МИКОСИМБИОТРОФИЗМА.
ГЛАВА 5. БИОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА РОСТРЕГУЛИРУЮЩИХ
СВОЙСТВ ГИДРОПТЕРИНА.
ГЛАВА 6. НЕКОТОРЫЕ АСПЕКТЫ ПРИМЕНЕНИЯ ГИДРОПТЕРИНА ДЛЯ УЛУЧШЕНИЯ
ПРИЖИВАЕМОСТИ МЕЛКОСЕМЯННЫХ ТРАВ.
ГЛАВА 7. АКТИВАЦИЯ МИКОСИМБИОТРОФИЗМА В
СТРЕССОВЫХ УСЛОВИЯХ.
Введение Диссертация по биологии, на тему "Активация микосимбиотрофизма регуляторами роста"
В последние годы, в связи с возрастающим загрязнением среды, все большее значение приобретают приемы экологического земледелия. Для получения экологически чистой сельскохозяйственной продукции необходимо в первую очередь снижать внесение минеральных удобрений. Одним из факторов, позволяющих растению утилизировать более полно вносимые удобрения, являются почвенные микроорганизмы.
Арбускулярная микориза (AM) является самым распространенным примером симбиоза в растительном царстве [1]. Многими исследователями установлено, что такой симбиоз в значительной степени способствует росту и развитию растения, а жизнедеятельность некоторых дикорастущих культур (как древесных, так и травянистых) невозможна без эндофитных взаимоотношений [2, 3, 4]. В растительных сообществах грибы-симбионты не только обеспечивают растение биогенными веществами, но и перераспределяют их между растениями биоценоза [5,6, 7, 8, 9,10].
К настоящему времени накоплен большой фактический материал о разностороннем положительном влиянии AM на продуктивность растений. Проведенные в различных почвенно-климатических условиях эксперименты показали, что инокуляция растений селективными штаммами эндомикоризных грибов приводит к повышению урожая, улучшению их минерального, особенно фосфорного питания и усилению устойчивости к стрессам и заболеваниям [11]. Польза эндомикоризы для роста и развития растений в естественных и агроэкосистемах неоспорима. Без использования АМ-грибов невозможно получить стабильную и экологически чистую сельскохозяйственную продукцию, а также восстановить нарушенные экосистемы с наименьшими потерями.
В настоящее время разработаны многочисленные приемы использования эндомикоризных грибов [11, 12]. Один из главных недостатков этих методов - высокая себестоимость, позволяющая использовать их в основном для дорогостоящих культур.
Обзор имеющихся данных показывает, что в почве существует достаточно видов аборигенной эндомикоризы, которые угнетаются при использовании интенсивных сельскохозяйственных технологий. Активация нативных АМ-грибов с помощью различных сельскохозяйственных приемов может значительно снизить почвоутомление и повысить продуктивность и стрессоустойчивость растений.
Поэтому целью исследования явилось изучение и разработка методов активации роста и развития естественных и интродуцированных эндомикоризных грибов арбускулярного типа в корнях растений с помощью регуляторов роста.
В связи с этим в задачи исследования входило:
- Разработка метода оценки веществ - индукторов микосимбиотрофизма;
- Поиск стабильного безвредного индуктора микосимбиотрофизма;
- Разработка метода активации микосимбиотрофизма в вегетационных и микровегетационных условиях;
- Усовершенствование метода определения АМ-грибов в корнях растений.
Научная новизна: проведен скрининг и отобраны микроорганизмы, реакции которых на воздействие регуляторами роста адекватны реакции микотрофных растений. Доказано, что зеленая микроводоросль Clorella vulgaris нгг. 157 и грибы класса Zygomycetes - Mucor mucedo (L.: Fr.) и Rhizopus stolonifer (Ebrenberg: Fr. Lind) могут быть использованы в качестве тест-объектов для поиска веществ - индукторов микосимбиотрофизма.
По материалам диссертации опубликовано 6 работ:
Материалы диссертации были представлены на четвертой и пятой международных конференциях «Регуляторы роста и развития растений» (Москва, 1997; Москва 1999), третьем международном конгрессе «Окружающая среда для нас и будущих поколений: экология, бизнес и экологическое образование» (Самара-Астрахань, 1998), всероссийской конференции «Экологические проблемы биодеградации промышленных, строительных материалов и отходов производств» (Пенза, 1998), всероссийской молодежной научной конференции «Растение и почва» (Санкт-Петербург, 1999).
Автор выражает благодарность докт. биол. наук Н.И Дзюбенко, зав. отделом кормовых трав ВИРа, канд. биол. наук Л.В. Пономаревой, зав. 7 сектором биологической мелиорации ВНИПТИМ и сотрудникам сектора за помощь в проведении исследований, а также канд. биол. наук O.K. Струнниковой, заведующей лабораторией почвенной микологии ВНИИСХМ и сотруднику лаборатории канд. биол. наук Н.М. Лабутовой за оказанные научные консультации.
Заключение Диссертация по теме "Биотехнология", Нусинская, Марина Владимировна
выводы
1. Найден новый синтетический регулятор роста - гидроптерин, обработка которым приводит к насыщению корней растений АМ-грибами - как нативными, так и ингродуцированными штаммами, а также повышает продуктивность растений. Разработан метод активации роста и развития естественных и интродуцированных эндомикоризных грибов арбускулярного типа в корнях растений, заключающийся в обработке семян гидроптерином. Опытным путем подобрана оптимальная концентрация регулятора - 1 * 10"6 мг/мл.
2. Разработана модель, отражающая взаимодействие АМ-грибов, и высших растений с регуляторами роста, включающая в себя использование микроорганизмов - тест-объектов и позволяющая проводить в короткие сроки первичный массовый отбор модуляторов микосимбиотрофизма. Проведен скрининг и подобраны микроорганизмы - тест-объекты: зеленая микроводоросль Clorella vulgaris шт. 157 и гриб класса Zygomycetes - Rhizopus stolonifer (Ehrenberg: Fr. Lind).
3. Установлено, что гидроптерин является безопасным для почвенной микрофлоры, причем для некоторых почвенных микроорганизмов, таких как Rhizobium meliloti и Pseudomonas sp. (№ 31), препарат в концентрации l^lO"6 мг/мл является стимулятором, усиливающим рост на 89% и 104%.
112
4. Оптимизирован метод определения эндомикоризных грибов в корнях растений, подобран новый краситель чисто-голубой антрахиноновый 2 "3" CI62070.
5. Установлено, что совместное применение гидропгерина и эндомикоризного гриба повышает продуктивность растений в стрессовых условиях при повышенной концентрации алюминия.
6. Выявлено, что гидроптерин является активатором прорастания семян некоторых растений, таких как овес, люцерна и бархатцы, увеличивая всхожесть на 14-63%, а также повышает приживаемость мелкосемянных трав до 35%.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Грибы, образующие эндомикоризу арбускулярного типа с высшими растениями, широко известны как эффективные и экологически безопасные регуляторы роста, увеличивающие продуктивность растений, улучшающие их минеральное питание и повышающие стрессоустойчивость [13]. Однако, методы регуляции роста растений с помощью эндомикоризных грибов трудоемки и дорогостоящи. Они включают в себя не только длительную стадию подготовки инокулюма, но и необходимость переноса значительного количества субстратов, насыщенных инфекционными пропагулами [12].
Почвы естественных растительных сообществ содержат достаточное количество аборигенных АМ-грибов, способствующих развитию растений [40]. Однако применение интенсивного земледелия угнетает развитие эндомикоризы на сельскохозяйственных площадях, что, в свою очередь, не позволяет растению полностью утилизировать питательные вещества и приводит к увеличению норм вносимых удобрений и загрязнению окружающей среды [121].
Это побудило нас к разработке метода активации аборигенных АМ-грибов с помощью регуляторов роста. Существуют данные о влиянии различных веществ на эффективность колонизации растений гифами эндомикоризных грибов. Так, например, в работе Зольниковой с соавт. исследуется регулятор роста терпеноидной природы - фузикокцин [151], в работе Нейра с соавт. изофлавоноиды биоханин А и формононетин [184], также стимуляции микоризообразования различными флавоноидами посвящены работы Филлипса, Тсаи и других исследователей [185, 186]. Однако главным недостатком этих веществ является высокая стоимость их получения. Так, флавоноиды получают из корней бобовых растений [228], фузикокцин из культуральной жидкости гриба Fusicoccum amygdali Del [187]. Это делает применение данных препаратов возможным только для лабораторных исследований.
Для практического использования метода активации микосимбиотрофизма в сельскохозяйственной практике необходимо было подобрать недорогой синтетический препарат, который был бы нетоксичен для растений и животных.
Поскольку АМ-грибы являются облигатными симбиотрофами и не растут на питательных средах, определить влияние регуляторов роста на микосимбиотрофизм можно только в растущем растении [151]. Это связано с определенными трудностями, вызванными длительностью экспериментов. Для того чтобы ускорить и упростить процесс отбора регуляторов, нами были проведены исследования по определению тест-объектов, отражающих взаимоотношения между АМ-грибом, высшим растением и регуляторами роста.
В результате проведенного скрининга были отобраны два микроорганизма: зеленая микроводоросль Clorella vulgaris шт. 157 и гриб, относящийся к тому же классу Zygomycetes, что и АМ-грибы - Rhizopus stolonifer (Ehrenberg: Fr. Lind). Clorella vulgaris является широко распространенным тест-объектом [231], Rhizopus stolonifer в таком качестве используется впервые.
Для обнаружения эндомикоризных грибов в корнях растений существуют различные методы, большинство из которых трудоемки и включает в себя применение различных токсичных веществ [225, 226, 227, 228]. Наиболее простым и доступным является метод Крюгер с соавт. [224], однако, его применение ограничено из-за снятия с производства красителя, точная формула которого неизвестна.
Для проведения исследований было необходимо подобрать эффективный краситель, формула которого соответствовала международной классификации CI. Нами был проведен скрининг различных красителей и выбран наиболее эффективный - кислотный чисто-голубой антрахиноновый 2 "3" (CI 22610). Сравнение действия этого вещества с действием известного красителя показало, что выбранный нами препарат полностью прокрашивал все структуры эндофита в корнях и вымывался из коры корня, что позволило нам использовать его в дальнейших исследованиях.
Мы проверили возможность использования разработанного метода скрининга с помощью тест-объектов для определения влияния регуляторов роста на микосимбиотрофизм растений. Сравнение полученных результатов с данными микровегетационных и вегетационных опытов показало, что влияние исследованных веществ на растения и АМ-грибы адекватно влиянию этих же веществ на предложенные нами тест-объекты. Таким образом, эта модель может быть использована для массового отбора регуляторов роста - индукторов микосимбиотрофизма.
В процессе разработки и обоснования метода скрининга были апробированы различные вещества - известные регуляторы роста растений: (3-ИУК, 6 БАП, лентехнин, эмистим [198, 199, 200, 201, 208, 209, 212], и предполагаемые регуляторы: гидроптерин и МЭАБ.
Все вещества, за исключением МАЭБ, стимулировали рост хлореллы, однако на развитие Rhizopus stolonifer большинство из них не повлияли.
Из всех исследованных препаратов нами был выбран гидроптерин, стимулировавший не только рост микроводоросли, но и значительно увеличивающий биомассу гриба.
Предыдущими исследователями было установлено, что гидроптерин О в небольших концентрациях (около 1.7*10" мг/мл) стимулировал рост микроводоросли платимонас зеленый на 20 и более процентов [213]. Проведенные нами эксперименты показали, что увеличение роста микроводоросли Clorella vulgaris происходило при значительно меньшей концентрации 1*10^ мг/мл, которая и была принята за рабочую.
Отобранный препарат значительно стимулировал рост и развитие растений в микровегетационных и вегетационных условиях, повышал стрессоустойчивость растений, положительно влиял на всхожесть семян и удлинение проростков. Сравнение действия препарата с такими известными регуляторами как р-ИУК и лентехнин позволило заключить, что гидроптерин является эффективным регулятором роста растений.
Препарат оказал значительное влияние на развитие эндомикоризных грибов в корнях растений. Под действием гидроптерина возрастала не только частота встречаемости микоризной инфекции, но и основные показатели: интенсивность микоризации и содержание запасающих и питающих структур АМ-гриба в корнях растений - везикул и арбускул -увеличивались в несколько раз. При этом такой результат был получен как для грибов различных селекционных видов: Glomus mosseae, G.fasciculatum, G.monosporum, так и для аборигенных эндомикоризных грибов. Опыты проводились с использованием различных растений-хозяев: злаковых, бобовых и декоративных культур.
Также нами было установлено, что гидроптерин в рабочей концентрации значительно стимулирует рост симбиотических и ассоциативных азотфиксирующих микроорганизмов - Rhizobium meliloti и Pseudomonas sp. (№ 31) на питательных средах.
Проведенные в 1983 году в институте токсикологии Минздрава СССР исследования показали, что данное вещество может быть отнесено к
V классу практически нетоксичных веществ [213]. Четырнадцатикратное введение белым крысам гидроптерина в суммарной дозе 1400 мг/животное не привело к изменениям регистрируемых показателей, которые можно было бы трактовать как вредное токсическое действие препарата.
Препарат 2-оксо-(ЗН)-5,6,7,8-тетрагидроптеридин п-гидрат j 1
10" -И0") : 1 (гидроптерин) является производным пиримидинового основания - урацила [213].
При воздействии на микроводоросли было указано, что препарат активирует клеточное деление [213]. Наши опыты показали, что гидроптерин также стимулирует рост листьев, задерживает образование корней и ускоряет закладку стеблевых почек. Помимо этого, под воздействием препарата семена растений быстрее выходили из состояния покоя, усиливался фотосинтез в листьях, повышалась устойчивость растений к неблагоприятным воздействиям.
Эти данные позволяют отнести гидроптерин к классу регуляторов роста растений - цитокининов.
Основной физиологический эффект цитокинина заключается в активации клеточных делений [194]. В отличие от ауксина, создающего необходимые условия для митоза, выражающегося в дифференцировке и репликации ДНК, цитокинин активирует работу РНК-полимераз, образование РНК и синтез белков.
Скорость передвижения цитокининов гораздо выше, чем у ауксинов, этим можно объяснить более раннее по сравнению с ИУК действие гидроптерина на растительные объекты.
Преобладающая концентрация цитокинина задерживает образование корней и снимает апикальное доминирование. Это может объяснить снижение длины корней при увеличении их веса практически во всех проведенных нами опытах. Повышение всхожести семян в большинстве опытов также может быть объяснено тем, что цитокинин, возможно, активирует синтез гидролитических ферментов.
Цитокинины не только задерживают старение листьев, но и регулируют формирование хлоропластов на ранних стадиях развития листа, а также их рост и деление за счет стимулирования синтеза хлоропластных РНК и белков, что наряду с участием в регуляции транспирации листьев - открыванием устьиц, приводит к большей фотосинтетической активности. Это также подтверждает данные, полученные в наших опытах.
Одним из важнейших свойств цитокининов является их способность повышать устойчивость клеток растения к различным неблагоприятным воздействиям. Механизм такого действия не совсем ясен, однако установлено, что повышение уровня цитокининов при неблагоприятных условиях жизни растения стимулирует синтез стрессовых белков, защищающих клетку. Проведенные нами опыты показали, что гидроптерин частично снимает стресс, вызванный алюминием.
Обработка семян растений гидроптерином перед посевом способствовала увеличению насыщенности корневой системы арбускулами - структурами эндомикоризного гриба непосредственно отвечающими за обмен питательными веществами между макро- и микросимбионтом. Это, в конечном итоге, активизировало микосимбиотрофизм растений, что повлияло на урожай зеленой массы.
Гидроптерин активирует работу ферментов, что, по-видимому, стимулирует поток Сахаров из растений к грибу, минеральных элементов и воды от гриба к растению. Таким образом, происходит интенсификация обмена между грибом и растением, усиливающего симбиотические процессы и в результате рост растений.
В результате проделанной работы, нами найден новый краситель, который может быть рекомендован для исследования структур эндомикоризных грибов в корнях растений.
Также разработан метод тест-отбора регуляторов роста - индукторов микосимбиотрофизма, который можно рекомендовать для поиска новых препаратов со значительно меньшими затратами труда и времени, чем при использовании общепринятого способа.
Методом скрининга нам удалось найти новый эффективный безвредный и недорогой индуктор микосимбиотрофизма, который также
Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Нусинская, Марина Владимировна, Санкт-Петербург
1. Simon L., Bousquest J., Levesque R.C., Lalonde M. Origin and diversificationof endomycorrhizal fungi and coincidence with vascular land plants // Nature. 1993.-V. 363.-P. 67-69
2. Кураков А., Каверзнева Г., Благовещенская 3. Роль эндомикоризы в минеральном питании сельскохозяйственных растений // Агрохимия. -1985.-№6.- С. 129
3. Муромцев Г.С. Микориза // Наука и жизнь. 1984. - № 12. - С. 38-41
4. Tinker Р.В. Effects of VAM on plant nutrition and plant growth // Physiol.
5. Veget. 1981. - Vol.16. - № 4. - P. 743-746
6. Каратыгин И.В. Коэволюция грибов и растений // Труды Ботанического
7. Ин-та им. В.Л. Комарова РАН. 1993. - Вып. 9. - С. 118
8. Селиванов И.А. Взаимосвязь микориз и микоризоподобных образований исущность отношений сожительствующих организмов // Микориза и другие формы консортивных отношений в природе. -Пермь, 1981 .-С.3-18
9. Francland J. Fungal sucession-unravelling the unpredictable // Mycol. Res.1998.-V. 102.-Parti.-P. 1-15
10. Harley J.L. The significance of mycorrhiza // Mycol. Res. 1989. - V. 92. - №2.-P. 129-139
11. O'Dell Т.Е., Castellano M.A., Trappe J.M. Biology and application of ectomycorrhizal fungi // Soil Microb. Ecol. 1993. - V. 14. - P. 75-92
12. Vietheiling H., Alt M., Mader P., Bollr Т., Wiemken A. Spreading of Glomus mosseae, a vesicular-arbuscular mycorrhizal fungus, across the rhizosphere of host and non-host plants // Soil Biol. And Biochem. 1995. - V. 27. - № 8. -P. 1113-1115
13. Маршунова Г.Н. Приемы инокуляции сельскохозяйственных культур эндомикоризными грибами // Труды ВНИИСХМ. 1990,- Т. 60,- С. 63-73
14. Базилинекая М.В. Улучшение обеспечения растений макро- и микроэлементами за счет деятельности почвенных микоризных грибов (обзорная информация).- М.:ВНИИТЭИ Агропром, 1990.-137 с.
15. Gianinazzi-Pearson V. Plant cell responses to arbuscular mycorrhizal fungi: Getting to the roots of the symbiosis // Plant Cell. 1996. - V. 8. - № 10. -P. 1871-1883
16. Phipps C.J., Taylor T.N. Mixed arbuscular mycorrhizae from the Triassic of Antarctica // Mycologia. 1996. - V. 88. - № 5. - P. 707-714
17. Remy W., Tailor T.N., Hass H„ Kerp H. Four Hundred-Million-Year-Old Vesicular Arbuscular Mycorrhizae // Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 1994. -V. 91.-P. 11841-11843
18. Taube-Baab H., Balttruschat H. Ertragsleistungen von Erdbeerpflanzen nach Inoculation mit VA-Mycorrhiza-Pilzen // Erwerbs Obstbau. - 1996. - B. 38. -№ 5. - S. 144-147
19. Morton J.B., Benny G.L. Revised classification of arbuscular mycorrhizal fungi (Zygomycetes): a new order, Glomales, two new suborders, Glomineae and Gigasporineae, and two new families, Acaulosporaceae and
20. Gigasporaceae, with an emendation of Glomaceae // Mycotaxon. 1990. - V. 37.-P. 471-491
21. Селиванов И.А. Микосимбиотрофизм форма консортивных связей в растительном покрове Советского Союза. -М.: Наука, 1981. - 232 с.
22. Карандашов В.Е., Кузовкина И.Н., Георге Э., Марпшер X. Совместное культивирование арбускулярных микоризных грибов и генетически трансформированных корней растений in vitro // Физиология растений. -1999. Т. 6. - № 1. - С. 102-108
23. Tommerup I.C., Abbot L.K. Prolonged survival and viability of VA-mycorrhizal hyphae after root death // Soil Biol, and Biochem. 1981. - № 13. -P. 431-433
24. Муромцев Г.С., Гусева Е.Г., Вострякова В.И., Серебренникова Н.В., Зольникова Н.В. Роль почвенных микроорганизмов в фосфорном питании растений // Успехи микробиологии. 1985. - № 20. - С. 16-24
25. Муромцев Г.С., Маршунова Г.Н., Павлова В.Ф., Зольникова Н.В. Роль почвенных микроорганизмов в фосфорном питании растений // Успехи микробиологии. 1985. - № 20. - С. 174-196
26. Gianinazzi-Pearson V., Gianinazzi S. The physiology of vesicular-arbuscular mycorrhizal roots // Plant and soil. 1983. - V. 71. - P. 197 - 209
27. Hayman D.S. Mycorrhiza and its significance in horticulture // The Plantsman. 1971,- V.2.-№4. -P. 214-224
28. Jackson R., Mason Ph. Mycorrhiza// Just. Biol. Stud. 1984. - P. 159
29. Селиванов И. А. Структура фикомицетных тамнискофаговых (везикулярно-арбускулярных) микориз // Микориза растений. -Пермь, 1975. С. 60-95
30. Tisserant В., Gianinazzi S., Gianinazzi-Pearson V. Relationship between lateral root order, arbuscular mycorrhiza development, and the physiological state of the symbiotic fungus in Platanus acerifolia // Can. J. Bot.- 1996.-V.74.-P. 1947-1955
31. Hayman D.S. Interaction between non-pathogenic soil microorganisms and plants. New York: Acad. Press., 1978. - 401 p.
32. Gerdemann J.W., Trappe J.M. Genera and species of Endogonaceae. The Endogonaceae in the Pacific Northwest//Mycol. memoir.- 1974. № 5,- P. 560
33. Bonfante-Faloso P., Grippiolo R. Ultrastructural and cytochemical changes in the wall of arbuscular-vesicular mycorrhizal fungus,during symbiosis // Can. J. Bot. 1982. - V. 60. - № 12. - P. 2302-2312
34. Gianinazzi-Pearson V. Host-fungus specify, recognition and compatibility in mycorrhizae // Genes involved microbe-plant interactions. New York, 1984. - P. 225-253
35. Haas J.H., Krikun J. Efficacy of endomycorrhizal fungus isolates and inoculum quantities required for growth response // New Phytol. 1985. - V. 100,-№4.-P. 613-621
36. Harley J.L., Smith S. Mycorrhizal Symbiosis.-New York:Acad.Press., 1983.224 p.
37. Asai Т. Ober das Vorkommen und die Bedeutung der Wurzelpilze in der Landpflanzen // Japan. J. Bot. 1934. - V. 7. - P. 107-150
38. Прянишников Д.Н. Избранные произведения,- M.: Наука, 1976.- 297 с.
39. Утемова Л.Д. Распространенность микосимбиотических связей в сем. Роасеае // Флора и раст. Сибири и Дальнего Востока: Чтения памяти JI.M. Черепнина: Тез. докл. Вторая Всерос. конф. Красноярск.: КБИ, 1996. -С. 357-359
40. Buwalda J., Stribley D., Tinker P. Vesicular-arbuscular mycorrhizal of winter and spring cereals // J. Agr. Sci. 1985. - V. 105. - № 3. - P. 649-657
41. Baltruschat H. Evaluation of the suitability of expanded clay as carrier material for VA mycoirhiza spores in field inoculation of maize // Angewandte Botanik. 1987. - B. 61. - № 1-2. - S. 163-169
42. Gavito M. E., Varela L. Response of "criollo"maize to single and mixed species inocula of arbuscular mycorrhizal fungi // Plant and Soil. 1995. - V. 176.-№ l.-p. Ю1-105
43. Соколова H.A., Пахненко O.A., Дурынина Е.П. Питание и продуктивность растений при инокуляции их ВАМ-грибами // Агрохимия. 1998. - № 5. - С. 51-57
44. Govinda R.Y.S., Bagyaraj D.R., Rai P.V. Selection of an efficient VA mycorrhizal fungus for finger millet 2. Screening under field conditions // Zentralblatt Microbiol. 1983. - V. 138. - № 6. - P. 415
45. Krishna K.R. Studies on vesicular-arbuscular mycorrhiza on cereals at ICRISAT center // Cereal Nitrogen Fixation. Patancheru: ICRISAT. 1986. -P. 11
46. Van Auken O.W., Brown S.C. Importance of arbuscular mycorrhizae to drymass production of a native Texas Сз and C4 grass // Tex. J. Sci. 1998. -V. 50,-№4.-P. 291-304
47. Subba Rao N.S., Tilak K.V., Singh C.S Effect of combined inoculation of Azospirillum brasilence and vesicular-arbuscular mycorrhiza on pearl millet (Pennisetum americanicum) // Plant Soil. 1985. - V. 84. - № 2. - P. 283-286
48. Hayman D.S. Improved establishment of white clover in ill grassland by inoculation with mycorrhizal fungi // Forage Legumes: Abstr. Proceedings of a Symposium by the British Grassland Society. London, 1984. - P. 44-47
49. Powell C.L., Daniel J. Growth of white clover in undisturbed soils after inoculation with efficient mycorrhizal fungi // N.Z.J, Agr. Res. 1978. - V. 21. - №4.-P. 621-627
50. Skipper H.D., Struble J.E. Influence of Glomus clarodieum (VAM fungus) and phosphorus on soybean growth in fumigated microplots // Proceedings of the 6-th North American Conference of Mycorrhizae. Oregon. 1985. - P. 253
51. Powell C.L. Field inoculation with VA mycorrhizal fungi // VA-mycorrhiza CRS Press Boca Ration Florida. 1984. - P. 205-222
52. Bard E.I., Din S.M.S., Moawad H. Enhancement of nitrogen fixation in lentil, faba bean and soybean by dual inoculation with Rhizobia and mycorrhizae // Plant Soil. 1988. - № 2. - P. 117-124
53. Самошкин В.И., Постникова О.Н., Jlex И.А. Роль микоризы везикулярно-арбускулярного типа в минеральном питании томатов // Бюллетень ВНИИСХМ. 1987. - № 47. - С. 14-17
54. Ortas I. The influence of use of different rates of mycorrhizal inoculum on root infection, plant growth and phosphorus uptake // Commun. Soil Sci. and Plant Anal. 1996. - V. 27. - № 18-20. - P. 2935-2946
55. Smith G.S. Effects of mycorrhizal infection on plant of growth, nitrogen and phosphorus nutrition in glasshouse grown Allium сера L. // New Phytol. -1986.-V. 104,-№2. -P. 89-95
56. Gianinazzi-Pearson V. Mycorrhizas and inoculation of transplantanted onions // Report 1984 (Rothamsted Experimental Station). Haprenden, 1985.- P. 174
57. Brechelt A. Wirkung werschiediner organischer Dungemittel auf die Effizienz der VA-Mycorrhiza // Z. Fur Acker- und Pflanzenbau. 1987. - B. 158. - № 4. - S. 280-286
58. Singh O.S. Fungal inoculate increases seeding growth // Biotechnology. -1985. V. 3. -№ 10. - P. 855
59. Hall I.R. Inoculation with vesicular-arbuscular mycorrhizal fungi in the greenhouse production of asparagus seedlings // N. Z. Agr. Res. 1985. -V. 28.-№2.-P. 293-297
60. Negeve J.M., Roncadori R.W. The interaction of vesicular-arbuscular mycorrhizal and soil phosphorus fertility on growth of sweet potato (Impomoea batatas) // Field Crops Res. 1985. - V. 12. - № 2. - P. 181-185
61. Vestberg M., Uosukainen M. Effect of AMF inoculation on routine and subsequent growth of cutting and microcuttings of green house rose «Mercedes» // COST Action 8.21. Workshop and M.C. Meeting. Budapest. -1996.-P. 211
62. Ключников А.А. Ассоциация грибов, образующих везикулярно-арбускулярную микоризу, и бактерий и их влияние на развитие картофеля: Автореф. дис. канд. биол. наук. М., 1990. - 25 с.
63. Хрущева Е.П. О микотрофии сельскохозяйственных культур, возделываемых в условиях Горьковской области // Труды Горьковского сельскохозяйственного ин-та. 1972. - Т. 33. - С. 78-86
64. Мауриц В. Наличие А-микоризы в Финляндии и возможности ее использования в сельскохозяйственном производстве // Разработка экологически безопасных методов ведения сельского хозяйства. СПб., 1993.-С. 99-101
65. Taylor T.N., Remy W., Hass H., Kerp H. Fossil arbuscular mycorrhizae from the early Devonian // Mycologia. 1995. -V. 87. - P. 560-573
66. Karagiannidis N., Velemis O., Stavropoulos M. Root colonization and spore population by VA-mycorrhizal fiingi in four grapevine root-stocks // Vitis. -1997.-V. 36.-№2.-P. 57-60
67. Дарага A.B., Горскова B.A., Кулаев И.С., Муромцев Г.С. Влияние микоризации на накопление фосфора в тканях корней кукурузы и его дальнейшее распределение по растению // Бюллетень ВНИИСХМ. 1987. -№47.-С. 5-8
68. Кураков А.В. Некоторые аспекты экологии ВАМ // Сельскохозяйственая биология. 1985. 10. - С. 101-112
69. Gianinazzi-Pearson V., Gianinazzi S. Role of endomycorrhizal fungi in phosphorus cycling in the ecosystem // The fimgal community, its organization and role in the ecosystem. Budapest, 1981. - P. 637 - 652
70. Marschner H., Dell B. Nutrient Uptake in Mycorrhizal Symbiosis // Plant Soil. 1994.-V. 159.-P. 89-102
71. Якоби JI.M. Эндомикоризные грибы: микоризообразование и влияние на продуктивность овса в зависимости от условий минерального питания // Бюллетень ВНИИСХМ. 1987. - № 47. - С. 11-17
72. Gnekow М.А. Die Role von VA-Mykorrhiza bei der Phosphaternahrung von Kulturpflanzen in Abhangigkeit von Phosphatdungung und Bewittschaftungsweise //Diss, p.h.d. Berlin, 1988. - S. 57
73. Муромцев Г.С., Гусева Е.Г., Зольникова H.B. Влияние эндомикоризных грибов на продуктивность, азотное, фосфорное и калийное питание вики и овса на рекультивированном грунте//Агрохимия,- 1988,- № 6. С. 64-75
74. Муромцев Г.С., Гусева Е.Г., Зольникова Н.В. Урожай вики и поступление фосфора в растения при инфицировании эндомикоризными грибами // Сельскохозяйственная биология. 1986. - N° 10. - С. 52-55
75. Jacobsen I. Phosphorus inflow into roots of mycorrhizal and non-mycorrhizal peas under-field conditions // Phys. and Gen. Asp. of Mycorrhizae. Paris INRA.- 1986.-P. 317-321
76. Karunarate S., Baker J.H., Baker A.V. Phosphorus uptake by mycorrhizal and non-mycorrhizal roots of soybean // J. Of Plant Nutrion. 1986. - V. 9. - № 10. -P. 1303-1313
77. Mahandas S. Field response of tomato (Lycopersion esculentum Mill "Pusa Ruby") to inoculation with VA mycorrhizal fungus Glomus fasciculatum and with Azotobacter vinelandi // Plant Soil. 1987. - V. 97. - № 2. - P. 295-297
78. Miller D.D., Domoto P.A., Walker C. Colonization and efficacy of different endomycorrhizal fungi with apple seeding at two, phosphorus levels // New Phytologist. 1985. - V. 100. - № 3. - P. 393-402
79. Schubert A., Cammarata S. Effect of inoculation with different endophytes on growth and P nutrion of grape vine plants grown in pots // Phys. and Gen. Asp. of Mycorrhizae. Paris INRA. 1986. - P. 327-331
80. Killham K. Vesicular-arbuscular mycorrhizal meditation of trace and minor elements uptake in perennial grasses relation to livestock herbage // British Ecological Soc. Spec. Pull. 1985. - № 4. - P. 225-232
81. Arines J., Vilarino A. Effect of VA-mycorrhizae on Mn uptake by red clover and on soil Mn oxidizing bacteria // Plant Physiol. 1990. - № 79. - P. A98
82. Arines J., Vilarino A. Effect of VA-mycorrhizae on Mn uptake by red clover and on soil Mn oxidizing bacteria // Plant Physiol. 1990. - № 79. - P. A98
83. Krishna K.R., Bagyaraj D J. Growth and nutrient uptake of peanut inoculated with the mycorrhizal fungus Glomus fasciculatum compared with non-inoculated ones // Plant soil. 1984. - V. 77. - № 2/3. - P. 405-408
84. Kwapata M.B., Hall A.E. Effects of moisture regime and phosphorus on mycorrhizal infection, nutrient uptake, and growth of cowpea (Vigna unguigulata L. Walp) // Field Crops Res. 1985. - V. 12. - № 3. - P. 211-250
85. Suzuki H., Kumagai H., Oohashi K., Enomoto S., Ambe F. Study on the distribution of various elements in arbuscular mycorrhiza marigold by multitraces technique // RIKEN Accel. Progr. Rept. 1998. - V. 32. - P. 132
86. Suzuki H., Kumagai H., Oohashi K., Enomoto S., Ambe F. Study on the uptake of various elements into arbuscular mycorrhiza marigold by multitraces technique // RIKEN Accel. Progr. Rept. 1998. - V. 32. - P. 131
87. Brown M.S., Bethlenfalvay G.J. Glycine-Glomus-Rhizobium symbiosis. VI. Photosynthesis in Nodulated, Mycorrhizal, or N- and P-Fertilized Soybeans Plants // Plant Physiol. 1987. - V. 85. - № 1. - P. 120
88. Kucey R., Paul E. Vesicular-arbuscular mycorrhizal spore populations in various Sashatchewan soils and the effect of inoculation with Glomus mosseae on faba bean growth in greenhouse and field trials // Can. J. Soil Sci. 1983. -V. 63. - № 1. - P. 87-95
89. Чиллаппагари П.Ч.К. Некоторые физиологические и экологические особенности возбудителя корневых гнилей злаков и подходы кбиологической защите от них:Автореф. дис.канд.биол.наук.-М.Д987.-26 с.
90. Bartschi Н., Gianinazzi-Pearson V., Vegh I. Vesicular-arbuscular Mycorrhizal Formation and Root Rot Disease (Phytophtora cinnamomi) Development in Chamaecyparis lawsoniana //Phytopath. -1981. V. 102. - P. 213 - 218
91. Caron M., Fortin J.A., Richard C. Effect of phosphorus concentration and Glomus intraradices on Fusarium grown and root rot of tomatoes // Phytopathology. -1986. V. 79. - №8. - P. 946-949
92. Graham J.H., Menge J.A. Influence of vesicular-arbuscular mycorrhizae and soil phosphorus on take-all disease of wheat // Phytopathology. 1982. - V. 72.-№l.-P. 95-98
93. Krishna K.R., Bagyaraj D.J. Interaction between Glomus fasciculatum and Sclerotium rolfsii in peanut // Can J. Bot. 1983,- V. 61,- № 11,- P. 2349-2351
94. Pinochet J., Calvet C., Camprubi A., Fernandez C. Interactions between migratory endoparasitic nematodes and arbuscular mycorrhizal fungi in perennial crops: a review//Plant Soil. 1996. - V. 185. - P. 183-190
95. Smith G.S. The role of phosphorus nutrition in interactions of vesicular-arbuscular mycorrhizal fungi with stillborn nematodes and fungi // Phytopathology. 1988. - V. 78. - № 2. - P. 371-374
96. Traquair J.A. Fungal biocontrol of root disease: endomyccorhizal suppression of Cylindrocarpon root rot: Pap. IMC'5: 5-th Int. Mycol. Congr. Vancouver, 1994 // Can. J. Bot. 1995. - V. 73. - Suppl. 1. - Sec. A-D. - P. 89-95
97. Harris D., Pacovsky R.S., Paul E.A. Carbon economy of soybean Rhizobium - Glomus associations//New Phytologist. - 1985. - V. 101. - № 3. - P. 427-440
98. Дурынина Е.П., Великанов JT.JI., Чиллиппагари П.Ч.К. Влияние эндомикоризных грибов на поглощение азота, фосфора и калия пшеницей в раннем онтогенезе // Вестник Моск. Ун-та. Сер. 17. Почвоведение. 1993. - № 2. - С. 47-54
99. Singh O.S., Singh R.S. Effects of phosphorus and Glomus fasciculatum inoculation on nitrogen fixation, P uptake and yield of lentil (Lens culinaris Medic) grown on an unsterilized sandy loam // Envir. and Exp. Bot. 1986. -V.26.-№2.-P. 185-190
100. Duan X., Newman D.S., Reiber J.M., Green-Graid D., Saxton A.M., Auge R.M. Mycorrhizal influence on hydraulic and hormonal factors implicated in the control of stomata conductance during drought // J. Exp. Bot. 1996. - V. 47.-№303.-P. 1541-1550
101. Levi V., Krikun J. Effect of vesicular-arbuscular mycorrhiza on Citrus jambhizi water relations // New Phytol. 1980. - V. 85. - № 1. - P. 25-31
102. Ellis J.R., Larsen H.J., Boosalis M.G. Drought resistance of wheat plants inoculated with vesicular-arbuscular mycorrhizae // Plant Soil. 1985. - V. 86. -№3.-P. 369-378
103. Hetrick В.A., Hetrick J.A., Bloom J. Interaction of mycorrhizal infection, phosphorus level, and moisture stress in growth of field corn // Can. J. Bot. -1984. V. 62. - № 11. - P. 2267-2271
104. Sieverding E. Influence of soil water regimes on VA-mycorrhiza. IV. Effect on root growth and water relations on Sorghum bicolor // J. Agronomy and Crops Science. 1986. - V. 157. - № 1. - P. 36-42
105. Bothe H., Hildebrandt U., Kaldorf M., Sonnwald S., Schmitz B. Arbuscular mycorrhiza and heavy metal plants in Germany // COST Action 8.21, Workshop andM.C. Meeting: Abstr., 1996. Budapest. Hungary. - P. 135
106. Shupper H., Dehn В., Sticher H. Interaktionen zwischen VA-Mykorrhizen und Schwermetallbelastungen // Angew. Bot. 1987. - Bd. 61. - № 1-2. - S. 85-96
107. Strasser R.J. Stress as driving force for adaptation and evolution: mycorrhiza as stress-buffer // COST Action 8.21. Workshop and M.C. Meeting. Budapest. -1996. P. 176
108. Ho I. Vesicular-arbuscular mycorrhizas of halophytic grasses in the Alvord Desert of Oregon //Northwest Sci. 1987. - V. 61. - № 3. - P. 223-229
109. Damjanova I., Dobolyi C. Soturo hazai pillagosviragi novenyek arbiszkularis mikorrhizaja ket hazai szikes talajon // Mikol. Kozl. 1993.-V. 32.-№ 3.-P.43-51
110. Шнырева-Дарага A.B. Взаимоотношения партнеров в симбиозе везикулярно-арбускулярного типа // Микология и фитопатология. 1990. - Т. 24. - Вып. 6. - С. 583-590
111. GogalaN. Regulation of mycorrhizal infection by hormonal factors produced by hosts and fungi // Experientia. 1991. - V. 47. - № 4. - P. 331-340
112. Karabaghi C., Sotta В., Gay G. Le role des mycorhizes davs la colonization des continents et la diversification de ecosystemes terrestres // Rev. Forest. Fr. -1997. V. 49. - Num. special. - P. 99-109
113. Saito M. Regulation of arbuscular mycorrhiza symbiosis: Hyphal growth in host roots and nutrient exchange // JARQ: Jap. Agr. Res. Quart. 1997. - V. 31.- №3.-P. 179-183
114. Joner E. Recycling of P from mineralized plant material trough arbuscular mycorrhiza: Pap. Semin. Phosphorus Balance and Util. Agr. Towards Sustainability, 17-19 March, 1997 // Kgl. Skogsoch lantbruksakad. Tidskr. -1998. - V. 137. - № 7. - P. 137-140
115. Callow J.A., Capaccio L.C.M., Parish G.,Tinker P.B. Detection and estimation of polyphosphate in vesicular-arbuscular mycorrhizas // New Phytol.- 1978. -V. 80. -№ 1. P. 125-134
116. Cox G., Moran K.J., Sanders F., Nockolds C., Tinker P.B. Translocation and transfer of nutrients in vesicular-arbuscular mycorrhizas. 1П. Polyphosphate granules and phosphorus translocation // New Phytol. 1980. - V. 84. - № 5. -P. 649-659
117. Gianinazzi-Pearson V., Gianinazzi S. Enzymatic studies on the metabolism of vesicular-arbuscular mycorrhiza // Physiol. Veg.- 1976.- V. 14.- № 4.-P. 833-841
118. Кирюшин В.И. Экологические основы земледелия.-М.:Колос,1996-367 с.
119. Рабинович Г.Ю. Микробиологическая оценка двух систем земледелия // Вестнинк РАСХН. 1999. - № 1. - С. 55-57
120. Возняковская Ю.М. Микробиологические основы экологической системы земледелия // Агрохимия. 1995. - № 5. - С. 115-125
121. Наумкин В.Н. Биологизация систем земледелия // Достижения науки и техники АПК. 1998. - № 4. - С. 35-38
122. Киреева Н.А. Комплексы микромицетов в почвах, загрязненных нефтью // Проблемы ботаники на рубеже XX XXI веков. Тез. докл. П(Х) съезд Русского ботанического общества. - СПб.: БИН, 1998. - Т. 2. С. 24-25
123. Kahiluoto Н., Vestberg М. How to measure the effectiveness of mycorrhiza: Pap. Semin. Phosphorus Balance and Util. Agr. Towards Sustainability, 17-19 March, 1997 // Kgl. Skogsoch lantbruksakad. Tidskr. 1998. - V. 137. -№7.- P. 119-120
124. Зольникова H.B. ВАМ-грибы в агрофитоценозах // Разработка экологически безопасных методов ведения сельского хозяйства. СПб, 1993. С. 99-101
125. Маршунова Т.Н. Эффективность эндомикориз и ее зависимость от почвенных условий // Труды ВНИИСХМ. 1985. - Т. 55. - С. 27-33
126. Сдобникова О.В., Кулешова А.Н., Пайкова И.В., Мазур О.П., Маршунова Т.Н. Влияние инфицирования растений эндомикоризнымигрибами на урожай, усвоение азота и фосфора бобовыми культурами // Вестник сельскохозяйственной науки. 1991. - № 7. - С. 78-83
127. Хрущева Е.П. Влияние удобрений на развитие пшеницы // Микология и фитопатология. 1985. - Т. 19. - Вып. 2. - С. 138-141
128. Conway L. P. Phosphate response curves of mycorrhizal and nonmycorrhizal plants. I. Responses to superphosphate // N. Z. J. Agr. Res. 1980. - V. 23. -№2. - P. 225-231
129. Gryndler M., Lipowsky J. Effect of phosphate fertilization on the populations of arbuscular mycorrhizal fungi // Rostl. vyroba. 1995. - V. 41. - № 11. -P. 533-540
130. Hepper C.M. The effect of nitrate and phosphate on the vesicular-arbuscular mycorrhizal infection of lettuce //New Physiol. 1983. - № 92. - P. 389-399
131. Jacobsen I. Mycorrhizal fungi a biological resource in plant nutrion: Pap. Semin. Phosphorus Balance and Util. Agr. - Towards Sustainability, 17-19 March, 1997 // Kgl. Skogsoch lantbruksakad. Tidskr. - 1998. - V. 137. - № 7. -P. 113-118
132. Tingstrup I., Jacobsen I. Effect of soil P levels on mycorrhiza functioning: Pap. Semin. Phosphorus Balance and Util. Agr. Towards Sustainability, 1997 //Kgl. Skogsoch lantbruksakad. Tidskr. - 1998. - V. 137. - № 7. - P. 121123
133. Крюгер JI.В. Динамика микоризообразования у некоторых луговых злаков // Агробиология. 1961. - № 2. - С. 13-21
134. Головко Э.А., Кострома Е.Ю., Заименко И.В. Влияние бессменного возделывания пшеницы на микотрофность и урожай // Микоризы и другие формы консортивных связей в природе Пермь, 1994. - С. 35-43
135. Степанов С.Б., Селиванова JI.A. Экологически безопасные сельскохозяйственные технологии в интенсивном земледелии // Разработка экологически безопасных методов ведения сельского хозяйства. СПб., 1993. - С. 51-63
136. Allen Е.В., Allen M.F. Natural re-establishment of vesicular-arbuscular mycorrhizae following strip-mine reclamation in Wyoming // J. Appl. Ecol. -1980.-V. 17.-№ l.-P. 139-147
137. Voros I., Szegi J. Studies on the colonization of recultivated mine spoils by endomycorrhizal fungi // Zentralbe Microbiol. 1992. - V. 147. - P. 236-243
138. Муромцев Г.С., Зольникова Н.В. О возможности применения эндомикоризных грибов при биологической рекультивации земель // Сельскохозяйственная биология. -1985. № 9. - С. 10-14
139. Neeraj J., Varma А.К. VA-mycorrhiza: A promising biofertilizer // Everyman's Sci. 1995. - V. 30. - № 3. - P. 76-81
140. Gould A., Liberta A. Effects of topsoilstorage during surface mining of viability of VAM // Mycologia. 1981. - V. 73. - № 5. - P. 914-922
141. Дурынина Е.П., Чиллиппагари П.Ч.К., Егорова И.А., Морозова JI.E. Продуктивность растений при их микоризации эндомикоризными грибами//Вестн. Моск. Ун-та. Сер. 17. Почвоведение. 1990,- № 1,- С. 4248
142. MacLeod W.J., Robson A.D., Abbot К. Effect of phosphate supply and inoculation with a vesicular-arbuscular mycorrhizal fungus on the death of the root cortex of wheat, rape and subterranean clover // New Phytol. 1986. -V. 103.-№2.-P. 349-357
143. Boddington C.L., Dodd J.C. The Importance of Arbuscular Mycorrhizal Fungi (AMF) in the Establishment and Sustainability of Tropical Agroforestry Ecosystems // COST Action 8.21, Workshop and M.C. Meeting: Abstr., 1996. Budapest. Hungary. - P. 118
144. Feldmann F., Idczak E. Inoculum Production of Vesicular-Arbuscular Mycorrhizal Fungi for Use in Tropical Nurseries // Techniques for mycorrhizal research / Ed. By Norris J.R., Read D., Varma A.K. London: Acad. Press, 1992.-P. 118-136
145. Ricken В. Mycorrhizal Management in Tropical Agricultural Ecosystems // COST Action 8.21 Workshop and M.C.Meeting. Budapest. -1996. P. 216
146. Sieverding E. Vesicular-Arbuscular Mycorrhiza Management in Tropical Agrosystems. Eschborn. -1991. 372 p.
147. Piccini D., Azkon R. Effect of phosphate solublizing bacteria and vesicular-arbuscular mycorrhizal fungi on the utilization of Bayovar rock phosphate by alfalfa plants using a sand-vermiculite medium // Plant Soil. - 1987. - V. 101. -№ l.-P. 45-50
148. Backhaus G.F., Feldmann F. Mycorrhiza in gartnerischen Substraten -endlich einsatzzeif ? // TASPO Gartenbaumag. - 1996. - B. 5. - № 4. - S. 1214
149. Gran F., Gerber W. Der Einfluss von Mycorrhizapils en auf die Bodenstructur und deren Bedeufung fur den Lebendverbau // Schwez. Z. Forstw. 1997. - B. 148,- № 11,- S. 863-886
150. Sylvia M. The promise (and obstacles) of AMF inoculation // COST Action 8.21 Arbuscular mycorrhizas in sustainable soil-plant systems. 8-th NACOM Innovation and Hierarchical Integration. Jackson. 1990. - P. 156
151. Клевенская И.JI., Трофимова С.С., Таранов С.А., Кондрашин Е.Р. Сукцессия и функционирование микробиоценозов в молодых почвах техногенных экосистем Кузбаса // Микробиоценозы почв при антропогенном воздействии. Новосибирск, 1985. - С. 3-11
152. Batchugjin Е., Albertova J., Gryndler М., Yosatka М. Isolation of arbuscular mycorrhizal fungi from polluted soils for rehabilitation of degraded ecosystems // COST Action 8.21, Workshop and M.C. Meeting: Abstr., 1996. Budapest. Hungary. - P. 116v
153. Culdin P., Mejstrik V., Sasek V. New techniques of artificial mycorrhizavintroduction in forestry // Cesska Mycologie. 1986. - V. 40. - № 2. - P. 112
154. Trinidade A.V., Dias A.C.P., Jucksch I. Efeito de residuos urbanos e de fimgos micorrizos arbusculares no crescimento de capimgordura Melinis minutiflora E Cedrela fissilis em rejelto de mineracao // Rev. Arvore. 1997. -V. 21. -№4. - P. 575-582
155. Wood Т., Way W. Commercial pot culture inoculum production: quality and other headaches // Proceedings of the 6-th North American Conference on Mycorrhizae. Oregon. 1985. - P. 84
156. Bagyaraj D.J. Vesicular-Arbuscular Mycorrhiza: Application in Agriculture // Techniques for mycorrhizal research / Ed. By. Norris J.R., Read D., Varma A.K. London.: Acad. Press, 1992. - P. 816-832
157. Peterson R.L., Piche Y., Plenchette C. Mycorrhizae and their potential use the agricultural and forestry industries // Biotechnology Adv. 1984. - V. 2. - № 1. -P. 101-120
158. Зольникова H.B. Сравнительная характеристика эффективности двух методов изоляции спор эндомикоризных грибов из почвы // Микология и фитопатология. 1983. - Т. 17. - № 5. - С. 433-438
159. Nadarajah P., Nawawi A., Stone B.C. Use components of vesicular-arbuscular mycorrhizal fungi as inoculum // Proceedings of the 6-th North American Conference on Mycorrhizae. Oregon. 1985. - P. 257
160. Hayman D.S. Methods for evaluating and manipulating vesicular-arbuscular mycorrhiza //Microbial Methods for Environmental Biotechnology. 1984. -№19.-P. 95-117
161. Menge J.A. Developing widescale VA mycorrhizal inoculation: is it practical or necessary? // Proceedings of the 6-th North American Conference on Mycorrhizae. Oregon. 1985. - P. 80-82
162. Hayman D.S., Day J.M., Dye M. Preliminary observations on dual inoculation of white clover // Physiological and Genetically Aspects of Mycorrhizae. -Paris: INRA, 1986. P. 467-474
163. Tudge С. Fungi that help crops to grow // The future with Rothamsted. -1985.-14 p.
164. Dalpe Y., Mitrow G. Long-term preservation of Glomus mosseae // Abstr.: 8-th North American Conf. On Mycorrhiza (NACOM) "Innovation and Hierarchical Integration". Jackson. Wyoming. - 1990. - P. 66
165. Tommerup I.C. Strategies for long-term preservation of VA-mycorrhizal fungi // Proceedings of the 6-th North American Conference on Mycorrhizae. Oregon. 1985. - P. 87-88
166. Habte M., Byappanhalli B.N. Influence of pre-storage on the effectiveness of root inoculum of Glomus ageratum // J. Plant Nutr. 1998. - V. 21. - № 7. -P. 1375-1389
167. Гельцер Ф.Ю. Препарат Симбионт-2, стимулирующий урожайность растений. Авт. свид. СССР № 921488 // Бюллетень изобретений. 1975. -№ 10. - 16 с.
168. Гельцер Ф.Ю. Препарат, стимулирующий урожайность возделываемых растений, Симбионт-1. Авт. свид. СССР № 370932 // Бюллетень изобретений. 1973. - № 12. - 22 с.
169. Warner A., Mosse В., Dingemann I. The nutrient film technique for inoculum production // Proceedings of the 6-th North American Conference on Mycorrhizae. Oregon. -1985. P. 85-86
170. Nemec S., Ferguson J J. A fluid-drilling applicator for applying VAM in the field // Proceedings of the 6-th North American Conference on Mycorrhizae. Oregon. 1985. - P. 244
171. Jeffries P. Use of mycorrhiza in agriculture // Cultural Reviews in Biotechnology. 1987. - V. 5. - № 4. - P. 319-357
172. Alten H.V. State of the commercial use of AMF-inoculum in Germany// Abstr.: 8-th North American Conf. On Mycorrhiza (NACOM) "Innovation and Hierarchical Integration". Jackson. Wyoming. - 1990. - P. 157
173. Laursen G.A., Treu R., Seppelt R.D., Stephenson S.L. Mycorrhizal assessment of vascular plants from subantarctic Macquarie Island // Arct. And Alp. Res. -1997. V. 29. - № 4. - P. 483-491
174. Vestberg M., Vare H. Mycorrhizas in arctic ecosystems a case study from northern Finland // COST Action 8.21 Workshop and M.C.Meeting. Budapest. - 1996. - P. 214
175. Christie P., Nicolson Т.Н. Are mycorrhizas absent from the Antarctic ? // Trans. Brit. Mycol. Soc. 1983. - V. 80. - № 3. - P. 557-560
176. Kulkarni S.S., Raviraja N.S., Sridhar K.R. Arbuscular mycorrhizal fungi on tropical sand dunes of west coast of India // J. Coast. Res. 1997. - V. 13. -№ 3.-P. 931-936
177. Requena N., Jeffries P., Barea J.M. Assessment of natural mycorrhizal potential in a decertified semiarid ecosystem // Appl. and Environ. Microbiol. -1996. V. 62. - № 3. - P. 842-847
178. Sanchez-Diaz M. The role of arbuscular mycorrhizas in plant water relations and drought tolerance of plants // COST Action 8.21. Workshop and M.C. Meeting. Budapest. 1996. - P. 68
179. Бурова Л.Г. Экология грибов макромицетов. М.: Колос, 1986. - 222 с.
180. Druge U., Schonbech F. Urchen fur Wachstumsfoderugen durch VA Mycorrhiza under Burucksichtigung der Phytohormone // Miff. Biol. Bundesanst. 1990. - № 226. - P. 18-26
181. Safir G., Nair M. Method and compositions for stimulating vesicular-arbuscular mycorrhizal fungi // Patent № 5.002.603.03.26.1991. US. -15 p.
182. Tsai S., Phillips D. Flavonoids released naturally from alfalfa promote development of symbiotic Glomus spores in vitro // Appl. Environ Microbiol. -1991.-V. 57.-P. 1485-1488
183. Nair M.G., Safir G.R., Siqueira J.O. Isolation and Identification of Vesicular-Arbuscular Mycorrhiza Stimulatory Compounds from Clover (Trifolium repens) Roots // Appl. And Env. Microbiology. 1991. V. - 57. - № 2. - P. 434-439
184. Муромцев Г.С., Герасимова H.M., Кобрина H.C., Коренева В.М., Смоляков B.C. Регуляторы роста растений микробного происхождения // Успехи микробиологии. 1984. - Т. 19. - С. 106-135
185. Йотер С. Методы почвенной микробиологии.- М.: Колос, 1983- 296 с.
186. Возняковская Ю.М. Некоторые новые методы количественного учета почвенных микроорганизмов и изучения их свойств: Методические рекомендации. Л.: ВНИИСХМ, 1987. - 53 с.
187. Бабьева И.П., Голубев В.И. Методы выделения и идентификации дрожжей. М.: Пищевая пром-ть, 1979. - 120 с.
188. Hata К. Studies on Plant Growth Accelerating Substances // Agric. and Biol. Chem. 1962. - V. 26. - № 5. - P. 278-287
189. Зольникова H.B., Воробьев Н.И. Методы исследования грибов, образующих с растениями микоризу арбускулярно-везикулярного типа: Методические рекомендации. СПб.: ВНИИСХМ, 1992. - 43 с.
190. Соколов А.В. Агрохимические методы исследования почв. М.: Наука, 1975.-605 с.
191. Шевелуха B.C., Калашникова Е.А., Дегтярев С.В., Кочиева Е.З., Прокофьев М.И., Новиков Н.Н., Ковалев В.М., Калашников Д.В. Сельскохозяйственная биотехнология. М.: Высш. шк., 1998. - 416 с.
192. Бондарь В.И., Лузик Л.В., Архангельский Н.С. Роль регуляторов роста растений в повышении урожая и качества корнеплодов кормовой свеклы // Регуляторы роста и развития растений: Тез. докл. Четвертая междунар. науч. конф. М.: МСХА, 1997. - С. 153
193. Давидчук Н.В. Действие ИУК на процессы набухания клубочков и рост растений сахарной свеклы // Регуляторы роста и развития растений: Тез. докл. Пятая междунар. науч. конф. -М.: МСХА, 1999-С. 24
194. Davies P.J. Plant Hormones and Their Role in Plant Growth and Development. Dordrecht: M.Nijhoff Publ, 1987. - 681 p.
195. Kende H., Zeevaart J.A.D. The five "classical" plant hormones // Plant Cell. -1997. V. 9. - № 7. - P. 1197-1210
196. Niahko V.Ph. Phytohormones controlling plant nutrition and crop capacity // Plant Physiol. 1997. - V. 114. -№ 3. - Suppl. P. 171
197. Батукаев A.A. Влияние 6-БАП и ГК на удлинения микропобегов винограда в культуре in УЙго//Регуляторы роста и развития растений: Тез. докл. Пятая междунар. науч. конф. М.: МСХА, 1999. - С. 305
198. Загриценко И.П., Милов А.А. Влияние экзогенных фиторегуляторов (ГК, 6-БАП) на продуктивность картофеля // Регуляторы роста и развития растений: Тез. докл. Пятая междунар. науч. конф.-М.:МСХА, 1999 С. 256
199. Зауралов О.А., Колмыкова Т.С. Влияние продолжительности обработки семян регуляторами роста на растения в полевых условиях // Регуляторы роста и развития растений: Тез. докл. Пятая междунар. науч. конф. -М.: МСХА, 1999. -С. 185
200. Зенькевич В.Б., Исаев В.А., Яковлев В.И. Исследование окисления керогена болтышского сланца с целью получения биологически активных веществ // Получение и применение регуляторов роста: Межвуз. сб. науч. тр. Л ., 1984. - С. 12-17
201. Исаев В.А., Яковлев В.И., Галынкин В.А., Мустафова Н.Н., Аак О.В., Зайцев В.А., Жукова Н.В. Способ получения стимулятора ростарастений. Авт. свид. № 1083595 // Бюллетень изобретений. 1982. -№3. -16 с.
202. Жеребцова Г.П. Стимулирующее влияние лентехнина на рост деревьев и кустарников в экологических условиях промышленного города // Получение и применение регуляторов роста: Межвуз. сб. науч. тр. Л., 1984. - С. 61-64
203. Лисицкая Т.Б., Зольникова Н.В. Влияние фосфатмобилизующей бактерии и регуляторов на рост и развитие райграсса // Регуляторы роста и развития растений: Тез. докл. Пятая междунар. науч. конф. -М.: МСХА, 1999. С. 208
204. Нусинская М.В. Влияние лентехнина на микотрофность овса // Регуляторы роста и развития растений: Тез. докл. Пятая междунар. науч. конф. -М.: МСХА, 1999. С. 224
205. Яковлев В.И., Александрова Л.С. Лентехнин регулятор роста растений // Получение и применение регуляторов роста: Межвуз. сб. науч. тр. -Л., 1984.-С. 6-11
206. Артемьева Г.М., Хохлова Л.П., Кашина О.А. Цитогенетическая активность эмистима и его влияние на продуктивность яровой пшеницы и люцерны (сорт Айслу, Татарстан) // Агрохимия. -1999. № 1. -С. 60-64
207. Сакало В.Д., Курчий В.М. Влияние регуляторов роста на ферменты метаболизма сахарозы и продуктивность сахарной свеклы // Регуляторы роста и развития растений: Тез. докл. Пятая междунар. науч. конф. -М.: МСХА, 1999.-С. 128-129
208. Сухаревич В.И., Медведева Н.Г. Методы выделения чистых культур, подсчета клеток микроорганизмов: Методические указания. Л.: ЛТИ им. Ленсовета, 1990. - 27 с.
209. Кочетова Е.А. Ускоренный метод определения всхожести и силы роста семян // Информационный листок Ленинградского центра научно-технической информации и пропаганды. -Л., 1972. С. 40
210. Журбицкий 3. В. Теория и практика вегетационного метода. М.: Наука, 1986.-360 с.
211. Лихолат Т.В., Шишова Т.К. Влияние гиббереллина и ризосферных диазотрофов на продукционные процессы растений // Регуляторы роста и развития растений: Тез. докл. Пятая междунар. науч. конф. -М.: МСХА, 1999.-С. 48-49
212. Menge J.A., Timmer I. Procedures for inoculation of plants with vesicular-arbuscular mycorrhizae in laboratory, greenhouse and field // Method and Principe Mycorrhizal Research. St.Paul. 1982. - P. 59 - 68
213. Ferguson J., Woodhead S. Production of Endomycorrhizal inoculum // Method and Principe Mycorrhizal Research. St. Paul: BP, 1982. - P. 47 - 54
214. Manjunath A., Bagyaraj D. Components of VA mycorrhizal inoculum and their effects on growth of onion // New Phytol. -1981. V. 87. - P. 355-363
215. Авдонин H.C. Свойства почв и урожай. М.: Крлос, 1965. - 365 с.
216. Шульгин И.А., Клешнин А.С. О корреляции между оптическими свойствами и содержанием хлорофилла в листьях растений // Доклады Акад. наук. 1959. - Т. 125. - № 6. - С.156-168
217. Somoji М. Determination of reducing sugar // J. Biol. Chem. 1952. - V. 195.-№1.-P. 19-22
218. Kormanik P., Brayn W., Schultz R. Procedures and equipment for staining large numbers of plant roots for endomycorrhizal assay // Can. J. Microbiol. -1980. -V. 26.-P. 536-538
219. Kormanik P., McGraw A. Quantification of vesicular-arbuscular mycorrhizae in plant roots//Method and Principe Mycorrhizal Research. St Paul. -1982.-P.33-45
220. Newman E.A. Method of estimating the total length of root a sample // J.Appl.Scol. 1996. - V. 3. - P. 139
221. Phillips J., Mando D., Hauman D. Improved procedures for clearing roots and staining VAM-fungi for rapid assessment of infection // Trans.Brit.Mycol.Soc. -1970. V. 55. - P. 158-161
222. Билай В.И. Основы общей микологии. Киев: Выща школа, 1989. -392 с.
223. Нусинская М.В., Ковжина Л.П., Зольникова Н.В. Краситель чисто-голубой антрахиноновый для окраски структур эндомикоризных грибов класса Zygomycetes в тканях корня растений // Микология и фитопатология. 1998. - Т. 32. - Вып. 3. - С. 47-49
224. Зольникова Н.В. Метод массового отбора фитотоксичных почвенных микроорганизмов (разработка и применение): Автореф. дис. канд. биол. наук.-Л., 1979.-21 с.
225. Шабаев В.П., Смолин В.Ю. Влияние эндомикоризных грибов на содержание «биологического» и минерального азота в растениях овса // Агрохимия. 1989. - № 11. - С. 62-67
226. Талатина Г.А. Влияние некоторых способов окультуривания песчаных почв на микоризообразование овса // Труды Горьковского сельскохозяйственного института. -1972. Т. 33. - С. 105-115
227. Гусева Е.Г. Эндомикоризные грибы как фактор биологической рекультивации земель: Автореф. дис. канд. биол. наук-Л., 1987- 21 с.
228. Касумов М.А., Гулиев Б.М. Некоторые особенности и урожайность бархатцев (Tagetes erecta L.P. patula L.) при выращивании их в условиях Апшерона и Нах. АССР // Докл. Акад. наук Азерб. ССР. 1989. - Т. XLV. -№4. -С. 51-53
229. Зольникова Н.В. Glomus gerdemanni эндомикоризный гриб из дерново-подзолистой почвы Ленинградской области // Микология и фитопатология. - 1988. - Т. 22. - № 3. - С. 202-208
230. Нусинская М.В. Разработка экспресс-метода определения влияния регуляторов роста на систему растение-микориза // Растение и почва. Проблемы агрохимии, агрофизики и фитофизиологии: Тез. докл. Всерос. молод, конф. СПб., 1999. - С. 164-165
231. Зольникова Н.В., Нусинская М.В., Яковлев В.И. Регуляторы роста растений -активаторы микосимбиотрофизма сельскохозяйственных культур // Регуляторы роста и развития растений: Тез. докл. IV междунар. конф. М., 1997. - С. 261
232. Проворов Н.А. Соотношение симбиотрофного и автотрофного питания азотом у бобовых растений: генетико-селекционные аспекты // Физиология растений. 1996. - Т. 43. - № 1. - С. 127-135
233. Умаров М.М. Ассоциативная азотфиксация. М.: Наука, 1986. - 116 с.
234. Садыков Б.Ф., Ильина Л.Б., Пропадущая Л.А., Горбунова В.Ю. Возможные пути активизации ассоциативной азотфиксации в ризосфере пшеницы // Сельскохозяйственная биология. 1988. - № 6. - С. 58-60
235. Минеев В.Г., Шабаев В.П., Сафрина О.С., Смолин В.Ю. Влияние бактерий рода Pseudomonas на урожай столовой свеклы и вынос азота растениями // Доклады ВАСХНИЛ. 1991. - № 9. - С. 26-28
236. Черемисов Б.М. Усиление азотфиксации новое направление в селекции пшеницы и других небобовых полевых культур // Сельскохозяйственная биология. -1988. - № 6. - С. 43-49
237. Посыпанов Г.С., Посыпанова В.Н., Нворгу Ф.Г. Влияние обработки семян эксудатом и аллелостимом на рост, развитие и урожай семян сои // Биологический азот: Тез. докл. Вторая всесоюз. науч. конф. Калуга.: СОИСАФ, 1991.-С. 29
238. Кан А.А. Предварительная обработка, прорастание и жизнедеятельность семян // Физиология и биохимия покоя и прорастания семян. М., 1982. -С. 320
239. Зенькевич В.Б., Зайцев В.А., Жукова Н.В. К методике оценки биологической активности стимуляторов роста // Получение и применение регуляторов роста: Межвуз. сб. науч. тр.-Л.,1984.- С. 29-31146
240. Подзолистые почвы Северо-Запада Европейской части СССР / под ред. А.А. Роде. М.: Колос, 1979. - 256 с.
241. Почвы Ленинградской области / под ред. Н.А. Ногина. Л.: Лениздат, 1973.-286 с.
242. Рис. 1. Везикулы и гифы АМ-гриба Glomus mosseae в корнях растения Plectrantus austrelis, Офашенные в голубой цвет красителем «чисто-голубой антрахиноновый 2 «3»»Л
243. Рис. 2. Везикулы и гифы АМ-гриба "Glomus fa -turn "в корнях "растения Plectrantus austrelis, окрашенные в голубой цвет красителем «чисто-голубой антрахиноновый 2 «3»»
244. Контроль □ ИУК — А Лентехнин-X—Эмистим --ж- Гидропт. 10(-4) О Гидропт. 10(-6)1. Н-—Гидропт. 10(-8)
245. Рис. 3. Влияние регуляторов роста на развитие Saccharomyces cereviziaeм/о*10' 14 — 13 — 12 — 11 — 10 — 9 — 8 — 7 — 6 — 5 — 4 — 3 — 2 —1 сутки4 сутки2 сутки3 сутким/о*10'11 -г3 сутки1 сутки Контроль — Эмистим1. Гидропт. 10(-8)
246. Рис. 4. Влияние регуляторов роста на развитие Candida tropicalis2 сутки1. ИУК ■ ж- -Гидропт. 10(-4)4 сутки а Лентехнин О Гидропт. 10(-6)•Контроль □ ИУК А Аентехнин О Гидроптерин
247. Рис. 5. Влияние регуляторов роста на развитие Pseudomonas sp. м/о*10'
248. Влияние регуляторов на рост гороха посевного сорт «Эврика» и развитие микоризного гриба Glomus mosseae в его корнях
249. Регуляторы Наземная часть Корень Микоризация
250. Удлинение Вес Удлинение Вес F М В Амм % к К 1 % к К 2 г % к К 1 % к К 2 мм % к К 1 % к К 2 г % к К 1 % к К 2 % % к К 2 % % к К 2 % % к К 2 % % к К 2
251. Без инокуляции Контроль 1 (К1) 556 0 -- 65 0 — 175 0 -- 37 0р-ИУК 1*10-4 мг/мл 506 -9 — 79 +22 — 168 -4 — 41 +12
252. Лентехнин 1*1(Г4 мг/мл 495 11 77 +19 182 +4 — 44 +19
253. Гидроптерин 1*1(Г6 мг/мл 562 + 1 75 +15 — 184 +5 45 +22
254. Glomus mosseae Контроль 2 (К2) 517 -7 0 68 +5 0 166 5 0 41 +11 0 16 0 37 0 21 0 0.8 0р-ИУК 1*104 мг/мл 534 -4 +3 80 +23 +18 161 8 -3 47 +26 +14 20 +25 30 - 18 11 -46 0.2 -80
255. Лентехнин 1*10 "4 мг/мл 512 -8 -1 78 +20 +15 163 -7 -2 47 +28 + 15 15 8 29 -22 12 -50 0.8 0
256. Гидроптерин 1*10"6 мг/мл 550 1 +6 85 +31 +25 154 -12 -7 51 +37 +24 46 +188 70 +89 37 +75 4.4 +450
257. Влияние регуляторов на рост бархатцев отклоненных сорт «Почетный легион»и развитие микоризного гриба Glomus mosseae в его корнях
258. Регуляторы Наземная часть Корень Микоризация
259. Удлинение Вес Удлинение Вес F М В Амм % к К 1 % к К 2 г % к К 1 % к К 2 мм % к К 1 % к К 2 г % к К 1 %к К 2 о/ /о % к К 2 % % к К 2 % %к К 2 % %к К 2
260. Без инокуляции Контроль 1 (К1) 47 0 — 24.6 0 -- 7.5 0 — 8.8 0р-ИУК 1*10~4 мг/мл 56 +18 — 30.0 +22 -- 8.3 +10 — 10.3 +17
261. Лентехнин 1*10~4 мг/мл 54 +15 -- 29.3 +19 8.4 +12 — 10.3 +17
262. Гидроптерин 1*10"6 мг/мл 55 +17 — 30.5 +24 -- 8.8 +17 -- 9.7 +10
263. Glomus mosseae Контроль 2 (К2) 52 +11 0 29.8 +21 0 9.0 +20 0 8.0 -9 0 8.2 0 16.4 0 5.2 0 1.7 0р-ИУК 1*10"4 мг/мл 59 +26 +14 30.1 +22 +1 8.5 +13 -6 11.1 +26 +39 8.8 +7 17.9 +9 4.6 12 1.7 -2
264. Лентехнин 1*10"4 мг/мл 58 +23 +12 33.7 +37 +13 9.0 +20 0 10.0 + 14 +25 9.4 +14 16.9 +3 4.3 17 1.5 - 14
265. Гидроптерин 1*10"6 мг/мл 60 +28 +15 36.7 +49 +23 10 +33 +11 10.2 +16 +28 10.0 +22 22.3 +36 5.9 +13 2.5 +47
266. Влияние регуляторов на рост люцерны посевной сорт «Карлыпаш» и развитие микоризного гриба Glomusmosseae в его корнях
267. Регуляторы Наземная часть Корень Микоризация
268. Удлинение Вес Удлинение Вес F М В Амм % к К 1 % к К 2 г % к К 1 % к К 2 мм % к К 1 % к К 2 г % к К 1 % к К 2 /о % к К 2 /о % к К 2 о/ /О % к К 2 % %к К 2
269. Без инокуляции Контроль 1 (К1) 54 0 4.2 0 68 0 -- 11.0 0
270. Р-ИУК 1*10'4 мг/мл 56 +4 4.9 +17 — 67 -2 13.0 +18
271. Лентехнин 1*10"4 мг/мл 57 +6 5.0 +19 — 71 +4 13.1 +19
272. Гидроптерин 1*10"6 мг/мл 56 +4 — 5.1 +20 — 67 1 -- 12.5 +14
273. Glomus mosseae Контроль 2 (К2) 56 +4 0 5.0 +19 0 57 16 0 14.2 +29 0 29.2 0 54.6 0 14.8 0 18.2 0
274. Р-ИУК 1*10"4 мг/мл 58 +7 +4 5.2 +24 +4 60 12 +5 13.1 +19 - 8 30.4 +4 53.5 -2 12.1 - 18 11.5 -37
275. Лентехнин 1*10"4 мг/мл 55 +2 -2 5.2 +24 +4 56 18 -2 13.4 +22 -6 31.2 +7 56.2 +3 12.7 - 14 10.2 -44
276. Гидроптерин 1*10"6 мг/мл 62 +15 + 11 5.5 +31 +11 55 19 -3 15.0 +36 +6 34.5 +18 72.1 +32 18.5 +25 22.4 +23
277. Влияние регуляторов на рост люцерны посевной сорт «Староместный» и развитие микоризного гриба
278. Glomus mosseae в его корнях
279. Регуляторы Наземная часть Корень Микоризация
280. Удлинение Вес Удлинение Вес 7 М В Амм %к К 1 % к К 2 г % к К 1 %к К 2 мм % к К1 % к К 2 г % к К 1 % к К 2 /о % К К 2 /о % к К 2 /о % к К 2 % %к К 2
281. Без инокуляции Контроль 1 (К1) 76 0 — 4.2 0 — 59 0 7.7 0р-ИУК 1*1(Г4 мг/мл 79 +4 — 5.1 +21 60 +2 8.6 +11
282. Лентехнин 1*10"4 мг/мл 80 +5 5.1 +21 61 +4 — 9.2 +19
283. Гидроптерин 1*10"6 мг/мл 81 +7 — 5.0 +19 — 60 +2 — 8.6 +12
284. Glomus mosseae Контроль 2 (К2) 81 +7 0 5.0 +19 0 49 17 0 12.6 +64 0 18.7 0 39.6 0 12.4 0 8.3 0р-ИУК 1*10"4 мг/мл 83 +9 +3 5.1 +21 +2 52 12 +6 11.4 +48 -9 19.3 +3 39.2 - 1 10.5 - 15 6.5 -22
285. Лентехнин 1*10"4 мг/мл 79 +4 -2 4.9 +17 -2 47 -20 -4 11.7 +52 -7 18.3 -2 41.2 +4 10.9 12 6.8 - 18
286. Гидроптерин 1*10"6 мг/мл 94 +24 +16 5.5 +31 +10 47 -20 -4 10.7 +39 -15 22.8 +22 61.0 +54 14.8 +19 9.5 +14
287. Влияние регуляторов на рост донника белого сорт «Поволжский»и развитие микоризного гриба Glomus mosseae в его корнях
288. Регуляторы Наземная часть Корень Микоризация
289. Удлинение Вес Удлинение Вес F М В Амм % к К 1 % к К 2 г % к К 1 %к К 2 мм % к К 1 % к К 2 г % к К 1 %к К 2 /О % к К 2 % % к К 2 о/ /О %к К 2 % % к К 2
290. Без инокуляции Контроль 1 (К1) 86 0 — 3.6 0 -- 51 0 — 10.0 0
291. Р-ИУК 1*10"4 мг/мл 97 +13 4.2 + 17 62 +22 — 10.1 +1
292. Лентехнин 1*1(Г4 мг/мл 96 +11 — 4.1 +14 -- 63 +24 — 9.7 -3
293. Гидроптерин 1*10"6 мг/мл 96 + 12 — 4.2 +17 — 64 +25 9.9 -1
294. Glomus mosseae Контроль 2 (К2) 98 +14 0 4.3 +19 0 65 +27 0 10.1 +1 0 11.6 0 23.7 0 9.2 0 1.4 0р-ИУК 1*10'4 мг/мл 101 +17 +3 4.5 +25 +5 67 +31 +3 9.7 -3 -4 10.8 7 24.7 +4 9.0 -2 1.2 - 14
295. Лентехнин 1*10 4 мг/мл 97 +13 -1 4.4 +22 +2 66 +29 +2 9.9 -1 -2 12.1 +4 19.4 18 8.7 -5 1.2 - 18
296. Гидроптерин 1 МО"6 мг/мл 100 +16 +2 4.8 +33 +12 72 +41 +11 9.4 -6 -7 14.3 +23 32.2 +36 10.3 +12 1.7 +21mz.1.'1. Wx.1. УТВЕРЖДАЮ.
297. Зам? директора Института токсикологии Минздрава СССР по научной работе .: у^'да^н. .ju, М.Б.Предтеченский1. V " ноября 1983г.1. АКТ токсикологических испытаний препарата м Гвдроптерин
298. При подкожном введении вещества в до,зе 2 г/кг гибели; .подопытных мышей не зарегистрировано, т.е. средняя смертельная до.за лежит выше этой величины, Ее точное значение определить не удалось ив-за плохой растворимости препарата*
299. В эксперименте на, .белых крысах при .трехнедельном введении вещества в желудок в дозе 0,5 г/кг видимых признаков интоксикации и гибели животных не отмечено.
300. В 1999-2000 годах проведены исследования в вегетационных опытах действия гидроптерина при обработке семян яровой пшеницы сорта Харьковская 46. Результаты представлены в таблице.
-
Нусинская, Марина Владимировна
-
кандидата биологических наук
-
Санкт-Петербург, 2000
-
ВАК 03.00.23
- Влияние регуляторов роста на адаптивность и урожайность яровой пшеницы в Приангарье
- ВЛИЯНИЕ РЕГУЛЯТОРОВ РОСТА НА АДАПТИВНОСТЬ И УРОЖАЙНОСТЬ ЯРОВОЙ ПШЕНИЦЫ В ПРИАНГАРЬЕ
- Подбор и эффективность средств снижения развития корневых гнилей яровой пшеницы в Приангарье
- Исследование биологических особенностей микоризы арбускулярно-везикулярного типа в фитоценозах Ставропольского края и подбор эффективных индукторов микоризообразования зерновых культур
- ПОДБОР И ЭФФЕКТИВНОСТЬ СРЕДСТВ СНИЖЕНИЯ РАЗВИТИЯ КОРНЕВЫХ ГНИЛЕЙ ЯРОВОЙ ПШЕНИЦЫ В ПРИАНГАРЬЕ
