Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Адренергетическая модуляция функции низкопороговых механорецепторов

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Городецкая, Наталья Владимировна

Список использованных в тексте сокращений

Введение

ГЛАВА 1. Обзор литературы

1.1. Строение кожи

1.2. Морфо-функциональная характеристика рецепторного аппарата кожи

1.3. Роль катехоламинов в регуляции функции механорецепторов кожи

1.4. Влияние катехоламинов на функцию механорецепторов мышечных веретен

1.5. Влияние катехоламинов на немиелинизированные афференты кожи

1.6. Механизмы воздействия катехоламинов на рецепторную единицу соматосенсорной системы

1.7. Классификация адренергических рецепторов и механизмы передачи сигнала после их активации

1.7.1. Передача сигнала а1 -адренорецепторами

1.7.2. Передача сигнала а2-адренорецепторами

1.7.3. Передача сигнала Р-адренорецепторами

ГЛАВА 2. Материалы и методы исследования

2.1. Объект исследования, анестезия

2.2. Регистрация артериального давления

2.3. Регистрация импульсной активности волокон болыпеберцового нерва

2.4. Стимуляция механочувствительных рецепторов кожи

2.5. Исследование сезонных изменений чувствительности кожных афферентов крысы к механическому раздражению

2.6. Введение физиологически активных веществ

2.7. Растворы

2.8. Обработка экспериментальных данных

ГЛАВА 3. Характер влияния адренергических агонистов и антагонистов на системное артериальное давление

3.1. Результаты исследования

3.2. Обсуждение результатов

ГЛАВА 4. Функциональная характеристика механо-чувствительных рецепторных единиц безволосистой кожи крысы

4.1. Состав и электрофизиологическая характеристика афферентных единиц болынеберцового нерва крысы

4.2. Значение способа стимуляции при тестировании механорецепторов кожи

4.3. Сезонные изменения функции механорецепторов

ГЛАВА 5. Влияние экзогенного адреналина на функциональные показатели тактильных рецепторных единиц безволосистой

5.1. Результаты исследования

5.2. Обсуждение результатов

ГЛАВА 6. Влияние агониста а2-адренорецепторов, клонидина, на тактильные рецепторы кожи

6.1. Результаты исследования

6.2. Обсуждение результатов 114 Заключение 118 Выводы

Введение Диссертация по биологии, на тему "Адренергетическая модуляция функции низкопороговых механорецепторов"

Актуальность проблемы. К настоящему времени установлено, что большую роль в модулировании деятельности механорецепторов соматосенсорной системы играют вегетативные и, в том числе, симпатические влияния. Эффекты действия катехоламинов были выявлены на висцероцепторах, на афферентах мышечных веретен, на низкопороговых и ноцицептивных механочувствительных единицах кожи (Акоев и др., 1974, 1976; Грачев, Алексеев, 1980; Nilsson, 1972; Freeman, Rowe, 1981; Pierce, Roberts, 1981; Hunt et al., 1982; Passatore et al, 1985; Shyu et al., 1989; Kolzenburg et al., 1994). При этом показано, что симпатомиметики могут оказывать на функцию механорецепторов как тормозное, так и возбуждающее влияние (Акоев и др., 1974, 1976; Freeman, Rowe, 1981; Passatore et al, 1985). Однако механизмы, лежащие в основе такого неоднозначного воздействия, до конца не ясны. Предполагают, что это может быть обусловлено параллельным влиянием катехоламинов как на различные части рецепторного аппарата так и на близлежащие сосуды и на контрактильные элементы окружающих тканей (Ильинский, 1975; Зевеке, Ефес, 1985).

С другой стороны, известно, что адреналин и норадреналин являются неселективными агонистами и активируют одновременно al-, a2- и Р-адренорецепторы. В исследованиях, выполненных на различных объектах, показано, что цепь внутриклеточных и мембранных реакций, сопровождающих лиганд - рецепторное взаимодействие, обусловлена не только функциональным предназначением клетки-мишени, но и в значительной мере зависит от типа активированного адренорецептора (Williams, North, 1985; Berridge, Irvine, 1989). На этом основании можно предположить, что характер воздействия катехоламинов на механочувствительные афференты может определяться не только множественностью путей влияния их на сенсорную терминаль, как предполагалось ранее, но и обуславливаться активацией различных типов адренорецепторов.

Однако, работы по исследованию механизмов воздействия адреналина и норадреналина на механочувствительные рецепторные единицы, осуществленные в условиях селективной блокады различных типов адренорецепторов, весьма немногочисленны и выполнены, преимущественно, на механоноцицептивных афферентных единицах (Levine et al, 1986; Sato, Perl. 1991; Shyu et al., 19896). Подобные сведения относительно низкопороговых механорецепторов отсутствуют.

Выяснение механизмов адренергической модуляции механорецепторов соматосенсорной системы является важным не только с теоретической точки зрения, но и приобретает особую значимость в связи с широким использованием адреномиметиков в качестве фармакологических препаратов при корректировке различных видов патологий. Настоящее исследование, выполненное в рамках данной проблемы, посвящено рассмотрению механизмов воздействия адреномиметических аминов на низкопороговые (тактильные) рецепторы кожи в условиях селективной блокады различных типов адренорецепторов.

Цель и задачи исследования: Основной целью настоящей работы явилось исследование периферических компонентов адренергической регуляции функции механорецепторов соматосенсорной системы крысы в условиях in vivo.

При этом были поставлены следующие задачи:

• Изучить характер воздействия экзогенного адреналина на низкопороговые механочувствительные рецепторные единицы безволосистой кожи стопы.

• Изучить характер и выраженность воздействия адреналина на системное артериальное давление крысы в условиях действия недавно синтезированных селективных антагонистов а1- и а2-адренорецепторов - беноксатиана и эфароксана.

• Сопоставить характер воздействия экзогенного адреналина на низкопороговые механочувствительные рецепторные единицы безволосистой кожи стопы с его влиянием на них в условиях фармакологической блокады а1-, а2- и Р-адренорецепторов.

• Исследовать влияние селективного агониста а2-адренорецепторов -клонидина - на низкопороговые механорецепторные единицы безволосистой кожи стопы.

• Изучить закономерности сезонных изменений функционального состояния кожных механорецепторов.

Научная новизна. Впервые в условиях т у1уо показано модулирующее воздействие адренергических агонистов (адреналина и клонидина) на функциональное состояние низкопороговых механорецепторных единиц безволосистой кожи крысы. Установлено неоднозначное участие различных типов адренорецепторов (а1, а2 и Р) в наблюдаемых явлениях.

В результате выполненной работы впервые обнаружена ведущая роль активации а2-адренорецепторов в осуществлении торможения деятельности тактильных рецепторных единиц, наблюдаемом при увеличении концентрации адреналина в плазме крови.

Впервые показано, что предварительное введение недавно синтезированного селективного антагониста а2-адренорецепторов -эфароксана - существенно снижает прессорный эффект адреналина на системное артериальное давление.

Теоретическое и практическое значение. Полученные данные представляются важными для понимания механизмов регуляции тактильной чувствительности. Показано, что функциональное состояние низкопороговых кожных механорецепторов может изменяться при возрастании концентрации адреналина, циркулирующего в крови.

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Городецкая, Наталья Владимировна

ВЫВОДЫ

1. Адреналин, вводимый внутривенно в дозе 10мкг/кг, вызывает изменение чувствительности низкопороговых механорецепторных единиц безволосистой кожи стопы крысы в условиях отсутствия нисходящего влияния со стороны ЦНС. В пределах группы афферентных единиц, изменяющих чувствительность к механическому раздражению после введения адреналина, большая часть реагирует ее уменьшением, меньшая - увеличением или флуктуацией.

2. Внутривенное введение адреналина (10 мкг/кг) сопровождается достоверным повышением среднего артериального давления на 105±11% относительно исходного уровня. При введении адреналина на фоне действия а1-адреноблокатора, беноксатиана, прирост АД составляет 94±5%, тогда как на фоне действия а2-адреноблокатора, эфароксана - 76±8%. При этом действие селективных а-адреноблокаторов не влияет на скорость возрастания АД и время достижения им максимального уровня.

Внутривенное введение агониста а2-адренорецепторов, клонидина, в дозе 10мкг/кг сопровождается выраженным кратковременным увеличением среднего артериального давления на 68 ± 6% по сравнению с его исходным уровнем.

3. Предварительное введение Р-адреноблокатора, обзидана, не изменяет характер воздействия адреналина на тактильные рецепторные единицы безволосистой кожи стопы крысы.

В условиях селективной блокады а1-адренорецепторов введение адреналина приводит к уменьшению чувствительности рецепторных единиц. Рецепторные единицы, реагирующие увеличением чувствительности, не выявлены.

124

Введение адреналина на фоне а2-адреноблокады у большинства механорецепторов сопровождается увеличением чувствительности к механическому раздражению.

4. Клонидин, вводимый внутривенно в дозе 10 мкг/кг, у 50% исследованных рецепторных единиц вызывает торможение функционального состояния, что характеризуется либо снижением чувствительности рассмотренных афферентов к механическому раздражению, либо полным исчезновением их ответной реакции. У остальных единиц введение клонидина не сопровождается изменением параметров ответа на механическое раздражение.

Введение клонидина, осуществляемое в условиях а2-адреноблокады, не вызывает изменения регистрируемых параметров ответов РЕ.

5. Параметры ответов кожных афферентов на механическое раздражение изменяются в течение года. При этом функциональное состояние тактильных рецепторных единиц улучшается в весенне-летний период года, тогда как у высокопороговых афферентов улучшение функциональных возможностей наблюдается, напротив, в осенне-зимний период.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Обобщая материалы нашего исследования, можно заключить, что адреномиметики оказывают выраженный модулирующий эффект не только на функцию висцероцепторов, афферентов мышечных веретен и механоноцицепторов, как было показано ранее другими авторами, но и изменяют возбудимость низкопороговых кожных механорецепторов.

При рассмотрении механизмов, лежащих в основе такого влияния катехоламинов на тактильные рецепторные единицы кожи, нельзя не учитывать возможности опосредованного воздействия данных препаратов за счет местных и системных гемодинамических реакций. На основании сопоставления временных параметров системных гемодинамических реакций (глава 3) и динамики изменения чувствительности изучаемых рецепторных образований к механическому раздражению (глава 5, 6), можно прийти к выводу о том, что прессорный эффект развивается значительно быстрее, чем возникают реакции рецепторов. Кроме того, к моменту восстановления исходного уровня среднего артериального давления чувствительность рецепторных единиц не приходит к начальному значению. Таким образом, прямой корреляции между уровнем САД и изменением состояния афферентных единиц не наблюдается.

Изменение функционального состояния РЕ может быть обусловлено также местными гемодинамическими реакциями на введение катехоламинов. При этом необходимо учитывать два возможных фактора воздействия - изменение температуры близлежащих тканей, окружающих рецепторное образование, возникающего вследствие локальной вазоконстрикции и изменение ионного состава среды.

Дискуссия о возможной роли кожных механорецепторов в восприятии температурных воздействий ведется достаточно давно.

Однако, согласно наиболее распространенной точке зрения, в рецепции колебаний температуры могут принимать участие лишь медленно адаптирующиеся механорецепторы, тогда как быстро адаптирующиеся единицы (тельца Пачини и Мейсснера) не реагируют появлением импульсной активности в ответ на термические воздействия (Loewenstein, 1961). Выявлено также, что снижение температуры приводит к возрастанию длительности потенциала действия, значительному увеличению ЛП и возрастанию пороговой амплитуды стимула, вызывающего ответ (Ильинский, 1975). Следует отметить, что согласно результатам нашего исследования введение катехоламинов не сопровождалось выраженными изменениями ЛП ответа и длительности ПД. Таким образом, наблюдаемые нами изменения возбудимости тактильных рецепторов не являются, по всей видимости, реакцией на снижение температуры.

Возможно, что изменение системного АД и констрикции близкорасположенных к рецепторным образованьям сосудов может приводить к изменению транскапиллярного обмена и состава интерстициальной жидкости. Однако, наличие многослойной капсулы и тесно связанных друг с другом пластин, образующих единую наружную оболочку инкапсулированных механорецепторов делают их практически невосприимчивыми к изменению состава окружающей их среды (Ильинский, 1975).

В связи с вышеизложенным представляется наиболее вероятным, что наблюдаемые нами изменения возбудимости низкопороговых инкапсулированных механорецепторов кожи крысы обусловлены непосредственным воздействием катехоламинов на сенсорное окончание. В пользу этого предположения косвенно свидетельствуют также данные электрофизиологических и морфологических исследований, выполненных другими авторами. (Акоев и др., 1974, 1976; Marchand et al., 1993; Devor et al., 1995; Yagi, Sumino,1998).

Известно, что в состав сенсорной терминалы входят непосредственно рецепторная терминаль, область генерации потенциала действия и зоны его проведения. Каждая из этих областей потенциально может являться местом приложения того или иного химического медиатора и, в том числе, катехоламинов. В связи с низкой проницаемостью оболочек исследуемых рецепторных окончаний вводимые нами катехоламины могли проникать внутрь капсулы лишь через сосуды. Показано, что входящие в инкапсулированные рецепторные окончания сосуды чаще всего заканчиваются в области перехвата Ранвье либо разветвляются в наружной капсуле (Ильинский, 1975). В область внутренней колбы капилляры никогда не входят. По всей вероятности, наиболее вероятной точкой приложения вводимых нами препаратов может быть область генерации ПД, а, именно, первого-второго перехватов Ранвье.

При рассмотрении молекулярных механизмов лежащих в основе наблюдаемых нами явлений можно предположить, что при повышении концентрации катехоламинов и активации соответствующих адренорецепторов происходит изменение проницаемости ионных каналов мембраны РЕ. При этом, по-видимому, активация al- и а2-адренорецепторов, приводит к противоположным по направлению процессам (табл.10).

Известно, что стимуляция al-адренорецепторов вызывает активацию потенциалзависимых и потенциалнезависимых Са2+ каналов (Berridge, Irvine, 1989), тогда как стимуляция а2- адренорецепторов, напротив, сопровождается их торможением и уменьшением входящего тока в нервные терминали (Williams, North, 1985). Именно с торможением входящего тока Са2+ связывают антиноцицептивное воздействие клонидина, наблюдаемое, в частности, в опытах на крысах (Konno, Takayanagi, 1984). Вполне возможно, что наблюдаемый нами тормозный эффект воздействия селективного агониста а2

121 адренорецепторов клонидина обусловлен его влиянием на

Са каналы.

Вероятно также, что снижение возбудимости тактильных афферентов при активации а2-адренорецепторов может быть обусловлено изменением проницаемости К+ каналов. В ряде работ было показано, что активация а2-адренорецепторов сопровождается открытием К+ каналов, увеличением выходящего К+ тока, гиперполяризацией мембраны и подавлением импульсной активности нервных клеток (АсИ^ашап, УапёегМае1п, 1982; Egan е! а1., 1983). В пользу возможного участия калиевых каналов в наблюдаемой нами модуляции чувствительности низкопороговых механорецепторов свидетельствуют также данные об их участии в сопряжении деятельности механо- и электоровозбудимой мембран, полученные на тельцах Пачини висцерального происхождения (Акоев и др., 1988).

Представляется важным также подчеркнуть, что в соответствии с полученными нами и литературными данными, при исследовании тех или иных закономерностей деятельности тактильных рецепторных образований кожи особое внимание следует обращать на существование сезонных колебаний их функции и способы тестирования их чувствительности.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Городецкая, Наталья Владимировна, Санкт-Петербург

1. Акоев Т.Н., Алексеев Н.П. Функциональная организация механорецепторов. Л. Наука. 1985.

2. Акоев Г.Н., Крылов Б.В., Цой С. Л. Возможная роль потенциалзависимых калиевых каналов в генерации ответов телец Пачини. Нейрофизиология. 20 (5): 623-630. 1988.

3. Акоев Г.Н., Челышев Ю.А., Эльман С.И. Адреналин и возбудимость одиночных механорецепторов телец Пачини. Нейрофизиология, 6 (3) : 312-317. 1974.

4. Арутюнян Р. С. Влияние раздражения симпатического нерва на проприоцепторы скелетных мышц. ДАН СССР 166 : 492-495. 1966.

5. Арутюнян Р. С. Современные представления о структуре и функции мышечных веретен у млекопитающих. Успехи физиол. наук. 27 (4) : 73-95. 1996.

6. Богданов Е.Г., Зайцев Д.А., Игнатов Ю.Д., Шавва А.Г. Изучение болеутоляющего действия новых производных имидазолина и их влияния на артериальное давление в условиях болевого воздействия. Эксп. и клин, фармакол. 60 (5): 23-26. 1997.

7. Бранков Г. Основы биомеханики. М. Мир. 1981.

8. Волкова Н.К., Черепнов В.Л. О строении телец Пачини. Архив анатомии, гистол. Эмбриол. 60 (6): 101-105. 1971.

9. Грачев И. И., Алексеев Н .П. Роль рецепторов в регуляции лактации Л. Наука. 1980.

10. Дворецкий Д.П., Поленов С.А. Транскапиллярный обмен жидкости. В кн.: Физиология кровообращения. Физиология сосудистой системы. Л. Наука. 218-227. 1984.

11. Догель А.С. (Dogiel A. S.) Die nervenendigungen im Bauchfell, in den Schnen, den Muscelspindeln und dem Centrum tendineum des Diafragmasbeim Menschern und bei Saugetieren. Arch. Mik. Anat., Bd 59 (1) : 1-31. 1902.

12. Догель A.C. Концевые нервные аппараты в коже человека. Записки Росс. Акад. Наук. 17 : 8. 1903.

13. Енин JI. Д., Колосова Л. И., Чирков В. В. Влияние кастрации на деятельность механорецепторов кожи крыс. Нейрофизиология. 11 (16) : 632-634. 1979.

14. Енин JI. Д., Ноздрачев А. Д. Роль низкопороговых тактильных кожных афферентов крыс в рецепции механического повреждающего воздействия. Физиол. журн. им. И. М. Сеченова. 81 (12) : 154-163. 1995.

15. Енин JI. Д., Цирульников Е. М., Потехина И. JL Сравнительная функциональная характеристика рецепторных структур кожи животных и человека. Журн. эволюц. биохимии и физиологии. 25 (3) : 412-414. 1989.

16. Енин JI. Д., Цирульников Е.М. Потехина И.Л., Гаврилов Л.Р. Температурная зависимость рецепторных структур и температурная рецепция. Журн. эволюц. биохимии и физиологии. 28 (3) : 353-358. 1992.

17. Жирмунская Е. А. Электрофизиологический анализ влияния симпатической нервной системы на кожную рецепцию. Физиол. журн. СССР 28 (5): 491-500. 1940.

18. Зевеке A.B., Ефес Е.Д. Механизм симпатической модуляции активности кожных рецепторов (с А5-волокнами). Нейрофизиология. 17 (4): 517-521. 1985.

19. Ильинский О.Б. Физиология сенсорных систем. Часть третья. Физиология механореепторов. Л. Наука. 1975.

20. Калантаевская К.А. Морфология и физиология кожи человека. Киев: Здоров'я. 1965.

21. Клейнбок И. Я., Габдуллина Е. Ж. Температурная рецепция кожи человека в разные сезоны года. Важнейшие теор. и практ. проблемы терморецепции. Минск. 1986.

22. Кубынин А. Н., Беляев Д. Г., Шесталов И. П. Исследование биологических ритмов боли и аналгезии. Тезисы докладов 2 конференции Российской ассоциации по изучению боли (Новгород). : 50-53. 1995.

23. Майоров Д.Н., Мурашев А.Н., Медведев О.С. Гипотензивный эффект клонидина в условиях прямой и радиотелеметрической регистрацииартериального давления у крыс. Эксп. и клин, фармакология. 58 (6) : 19-21. 1995.

24. Марусева A.M. О влиянии симпатической нервной системы на деятельность проприоцепторов скелетной мышцы лягушки. ДАН СССР 37 (7-8): 269-272. 1942.

25. Нумеров A.C., Хацкевич Г.А., Зайцев A.A. Влияние клофелина на болевой синдром при травме нижней челюсти. Эксп. и клин, фармакол. 58 (1): 20-22. 1995.

26. Пахомов П.П., Проппер-Гращенков Н.И. Влияния симпатической нервной системы на кожные рецепторы лягушки. Физиол. журн. СССР. 30 (2): 195-206. 1941.

27. Самойлов В.О., Пономаренко Г.Н., Енин Л.Д. Низкочастотная биоакустика. СПб РЕВЕРС. 1994.

28. Теплов С.И. Гормональные факторы регуляции. В кн.: Физиология кровообращения. Регуляия кровообращения. Л. Наука. : 94-153. 1986.

29. Фролов Е.П., Персина И.С., Роль кожи в иммунологических реакциях. В кн.: Кожа. М. Медицина : 140-168. 1982.

30. Цирульников Е. М., Неменов М. И., Андреева И. Г. Лазерное излучение для исследования кожной чувствительности. Сенсорные системы. 11 (2): 222-232. 1997.

31. Челышев Ю.А., Гатауллин P.P. Анализ модулирующего влияния катехоламинов на электрогенез в изолированном механорецепторе.Нейрофизиология 14 (2): 158-163. 1982.

32. Черепнов В.Л. Ультраструктура внутренней колбы телец Пачини. Журн. эволюц. биохим. и физиол. 4 (1) : 91-96. 1968.

33. Черниговский В.Н. Интероцепторы. М. Медгиз. 1960.

34. Юрьева Е.Т. О природе второго тонкого волокна, подходящего к инкапсулированным чувствительным нервным окончаниям. Русск. арх. анат. гистол. и эмбриол. 6 (2): 209-216. 1927.

35. Abel Е. L. Circannual changes in the duration of the immobility response of rats in the forced swim test. Physiol. Behav. 58 (3): 591-593. 1995.

36. Adhajanian G.K., VanderMaeln C.P. a2 adrenoreceptor-mediated hyperpolarization of locus coeruleus neurons: Intracellular studies in vivo. Science. 215: 1394-1396. 1982.

37. Ahlquist R.P. A study of adrenotropic receptors. Am. J. Physiol. 153: 586589. 1948.

38. Alojaro M.E., Ohta Y., Kemmotsu O. The effect of clonidine on the activity of neurons in the rat dorsal raphe nucleus in vitro. Anesth. Analg, 79 (2) : 257-260. 1994.

39. Amat J., Tores A. Circannual rhythm in the effects of stress on the humoral immune response of the rat. Neurosci. Lett. 160 (2): 190-192. 1993.

40. Andres K.H., During M.V. Morphology of cutaneous receptors. In : Handbook of sensory physiology, v. 2 Somatosensory system. Ed. Iggo A., Berlin, Heidelberg, New York. : 3-28. 1973.

41. Banker B., Girvin J. The ultrastructural features of mammalian muscle spindle. J Neuropath. Exp. Neurol. 30: 155-195. 1971.

42. Barker D., Saito M. Autonomic innervation of receptors and muscle fibres in cat skeletal muscle. Proc. R. Soc. Lond. B. 212 : 317-332. 1981.

43. Benelli A., Arletti R., Basaglia R., Bertolini A. Male sexual behaviour : further studies on the role of alpha2 adrenoreceptors. Pharmacol. Res. 28 (1): 35-45. 1993.

44. Bernard C., Influence du grand sympathetique sur la sensibilite' et sur la calorification. C.R. Soc. Biol. Paris. 3 : 163-164,1851.

45. Berridge M.J., Irvine R.F. Inositol phosphates and cell signalling. Nature. 341 : 197-205. 1989.

46. Bevan S. Intracellular messengers and signal transduction in nociceptors. In: Neurobiology of nociceptors. Ed. by C. Belmonte and F. Cervero. Oxford university Press. 298-324, 1996.

47. Bhoola K.D., Diete-Spiff K., Webster R.A. The effect of adrenaline on mammalian muscle spindles.- J. Physiol. 164 : 16-19. 1962.

48. Bissette G. , Griff D., Carnes M., Goodman B., Lavine M., Levant B. Apparent seasonal rhythms in hypothalamic neuropeptides in rats without photoperiod changes. Endocrinology. 136 (2): 622-628. 1995.

49. Brummelen J.K., Vermey P., Timmermans P.B., Van Zwieten P.A. Alpha-1 and alpha-2 adrenoceptor mediated vasoconstriction in the forearm: differences between normotensive and hypertensive subjects. J. Hypertens. Suppl 3 : 89-91. 1985.

50. Bureau J. P., Coupe M., Labrecque G., Vago P. The chronobiology of inflammation. Pathol Biol (Paris). 35 (6): 942-950. 1987.

51. Bylund D.B. Syntypes of a2- adrenoreceptors: Pharmacological and molecular biological evidence converge. Trends Pharmacol Sci. 9: 356361. 1988.

52. Bylund D.B., Eikenberg D.C., Hieble J.P., Langer S.Z., Lefkowitz R.J., Minnemann K.P., Molinoff P.B., Ruffolo R.R., Trendelenburg U. International Union of pharmacology nomenclature of adrenoreceptors. Pharmacol. Rev. 46 (20) : 121-136. 1994.

53. Bylund D.B., Ray-Prenger C. Alpha-2A and alpha-2B adrenergic receptor subtypes : attenuation of cyclic AMP production in cell lines containing only one receptor subtype. J. Pharmac. Exp. Ther. 251 : 640-644. 1989.

54. Canver C.C., Pilli G. The use of intrapleural clonidine for postoperative pain control. J. Cardiovasc. Surg. (Torino) 37 (2): 183-185. 1996.

55. Carpenter T.S., Stenmark K.R. High-dose epinephrine is not superior to standart- dose epinephrine in pediatric in hospital cardiopulmonari arrest. Pediatrics 99 (3): 403-408. 1997.

56. Carr R.W., Proske U. Multiple sites of impulse initiation in the mammalian muscle spindle. Prim. Sensory Neuron. 1 (4) : 327-339. 1996.

57. Castro M.I., Eisenach J.C. Pharmacokineticks and dynamics of intravenous, intrathecal, and epidural clonidine in sheep. Anesthesiology, 71:418-425. 1989.

58. Catton W.T. Threshold recovery and fatigue of tactile receptors in frog skin. J. Physiol. 158 : 333-365. 1961.

59. Catton W.T.Mechanoreceptor function. Physiol. Rev. 50 (3) : 297-318. 1970.

60. Cauna N. The mode of termination of the sensory nerves and its significance. J. Comp. Neurol. 113 (3): 169-210. 1959.

61. Chambers M.R., Anderes K.H., During M., Iggo A. The structure and function of slowly adapting type II mechanoreceptor in hairy skin. J. Physiol. 57 (4): 417-445. 1972.

62. Charocopos F. The mechanism of beta-adrenergic receptor blocade-induced elevation of arterial blood pressure in rats. Arch Int Physiol Biochim. 90 (3): 173-178. 1982.

63. Chernetski K.E. Sympathetic enhancement of peripheral sensory input in the frog. J. Neurophysiol. .27 : 493-515. 1964.

64. Cheung Y-D., Barnett D.B., Nahorski S.R. 3H-rauwolscine and 3H-yohimbine binding for rat cerebral and humanplatelet membranes: Evidence for possible heterigeneity of a2-adrenoreceptors.Eur J Pharmacol. 84: 79-85. 1982.

65. Chouchkov C. N. Cutaneous receptors Adv. Anat. Embryol. Cell Biol. 54. (5) : 1-62. 1978.

66. Chouchkov C.N. On the fine structure of Krause's bulbs of human skin, oral cavity and rectum. Arch. Histochem. Japan. 35 (3): 365-375. 1973.

67. Crandall C.G., Etzel R.A., Johnson J.M. Evidence of functional p-adrenoceptors in the cutaneous vasculature.Am. J. Physiol. 273(2) Pt2H 1038-1043. 1997.

68. DTstria M., Delrio G., Chieffi G. Receptors for sex hormones in the skin of amphibia. Gen. and Comp. Endocrinol. 26 (2): 281-283. 1975.

69. Davis K.D., Treede R.D., Raja S.N., Meyer R.A. and Campbell J.N. Topical application of clonidine relieves hyperalgesia in patients with sympathetically maintained pain. Pain. 47 : 309-317. 1991.

70. Dellon E. S., Keller K., Moratz V., Dellon A.L. The relationships between skin hardness, pressure perception and two-point discrimination in the fingertip. J. Hand. Surg. Br. 20 (1): 44-48. 1995.

71. Devor M., Janig W., Michaelis M. Modulation of activity in dorsal root ganglion by sympathetic activation in nerve injured rats. J. Neurosci. 71 : 38-47. 1994.

72. Devor M., Shinder V., Govrin-Lippmann R. Sympathetic sprouting in axotomized rat DRG: Ultrastructure. Soc. Neurosci. Abstr. 21 : 894. 1995.

73. Egan T.M., Henderson G., North R.A. Williams J.T. : Noradrenaline-mediated synaptic inhibition in rat locus coeruleus neurons. J. Physiol (Lond). 345: 477-488. 1983.

74. Eisenach J.C., DuPen S., Dubolis M., Miguel R., Allin D. Epidural clonidine analgesia for intractable cancer pain. Pain. 61 (3) : 391-399. 1995.

75. Eldred E., Schnitzlein H., Buchwald J. Response of muscle spindles to stimulation of sympathetic trunk. Exp. Neurol. 2 : 13-25. 1960.

76. Filos K.S., Goudas L.C., Patroni O., Polyzou V. Hemodynamic and analgesic profile after intratecal clonidine in humans. A dose-response study. Anesthesiology. 81 (3): 591-601. 1994.

77. Filos K.S., Goudas L.C., Patroni O., Polyzou V. Intrathecal clonidine as a sole analgesic for pain relief after cesarean section. Anesthesiology. 77 : 267-274. 1992.

78. Flavahan N.A., Cooke J.P., Sheperd J.T., Vanhoutte P.M. Human postjunctional al and a2 adrenoceptors: differential distribution in arterial and veins. J. Pharmacol. Exp. Ther. 241 : 361-365. 1987.

79. Flavahan N.A., Grant T.L., Greig J., McGrath J.C. Analysis of the alpha-adrenoreceptor-medated and other components in sympathetic vasopressor responses of the pithed rat. Br. J. Pharmacol. 86 (1): 265-274. 1985.

80. Freeman B., Rowe M. The effect of sympathetic nerve stimulation on responses of cutaneous Pacinian corpuscles in the cat. Neuroscience Letters. 22: 145-150. 1981.

81. Frey M. von. Beitrage zur Sinnesphysiologie der Haut III.- Ber. Verland, Gesellsch. Wissensch. Math.-Phys. Leipzig, Bd 47 : 166-184. 1895.

82. Frisk-Holmberg M., Paalzow L., Wibell L. Relationship between the cardiovascular effects and steady-state kinetics of clonidine in hypertension: Demonstration of a therapeutic window in man. Eur. J. Clin. Pharmacol. 26: 309-313. 1984.

83. Fukuda T., Naito H. The effects of intrathecal clonidine in spontaneously hypertensive rats. Masui 43 (1): 64-69. 1994.

84. Gentili M., Juhel A., Bonnet F. Peripheral analgesic effect of intra-articular clonidine. Pain. 64: 593-596. 1996.

85. Gilchrist H. D., Allard B. L., Simone D. A. Enhanced withdrawal responses to heat and mechanical stimuli following intraplantar injection of capsaicin in rats. Pain. 67 (1) : 179-188. 1996.

86. Goering J., Zimmerman B.G. Analysis of adrenoceptor blockade and hypotension elicited by urapidil and prazosin in conscious rat. J. Pharmacol. Exp. The.r May 237 (2): 553-557, 1986.

87. Goyagi T., Nishikawa T. The addition of epinephrine enhances postoperative analgesia by intrathecal morphine. Anesth. Analg. 81 (3) : 508-513. 1995.

88. Gozariu M., Bustmante D., Le Bars D., Wilier J.C. Effects of clonidine on a C-fiber reflex in the rat. Eur. J. Pharmacol. 313 (1-2): 51-62. 1996.

89. Habgood I.S. Sensitization of sensory receptors in the frog' s skin. J. Physiol. Ill : 195-213. 1950.

90. Habler, H-J., Janig W., Koltzenburg, M. Activation of unmielinated afferents in chronically lesioned nerves by adrenaline and exitation of sympathetic efferents in the cat. Neurosci. Lett. 82 : 35-40. 1987.

91. Hashimoto K. Fine structure of the Meissner corpuscle of human palmar skin. J. Invest. Dermatol. 60 (1): 20-28. 1973.

92. Hastings M. H. Neuroendocrine rhythms. Pharmacol Ther. 50 (1) : 35-71. 1991.

93. Hieble J.P., Bondinell W.E., Ruffollo R.R. Alpha and beta adrenoceptors: from the gene to the clinic. 1. molecular biology and adrenoceptor subclassification. J. Med. Chem. 38 (18) : 3415- 3444. 1995.

94. Hieble J.P., Kolpak D.C. Mediation of the hypotensive action of systemic clonidine in the rat by alpha2 adrenoreceptors. Br. J. Pharmacol. 110 (4) : 1635-1639. 1993.

95. Hille B. Modulation of ion-channal function by G-protein coupled receptors. Trends Neurosc. 17: 531-536. 1994.

96. Hines M., Tower S. Studies on the innervation of sceletal muscles. Bull. JohnHopk. Hosp. 42 : 264-307. 1928.

97. Hinsey J.C. Some observation on the innervation of skeletal muscle of the cat. J. Comp. Neurol. 44: 87-95. 1927.

98. Hunt C. The effect of sympathetic stimulation on mammalian muscle spindles. J. Physiol. 151 : 332-341. 1960.

99. Hunt C.C. The reflex activity of mammalian small-nerve fibres. J. Physiol (Lond). 115 : 456-469. 1951.

100. Jamali S., Monin S., Begon S., Dubousset A.M., Ecoffey C. Clonidine in pediatric caudal anesthesia. Anesth. Analg. 78 (4): 663-666. 1994.

101. Kathol R. G. Circannual rhythm and peak frequency of corticosteroid excretion: relationship to affective disoder. Psychiatr. Med. 3 (1) : 53-63. 1985.

102. Keele C.A., Armstrong d. Substances producing pain and itch. Edward Arnold, London. 1964.

103. Khalberg F., Khaoberg E., Iatsyk G. V., Siutkina E. V., Safin Sh. R„ Grigor'ev A. E., Abramian A. S. Development of arterial pressure effects of beta-adrenomimetic agents. Biull. Eksp. Biol. Med. 112 (8) : 202-205. 1991.

104. Khasar S. G., Green P.G., Chou B., Levine J.D. Peripheral nociceptive effects of a-2 adrenergic receptor agonists in the rat. Neuroscience. 66 (2) : 427-432. 1995.

105. Kolzenburg M., Kess S., Budweiser S., Ochs G., and Toyka K.V. The properties of unmmyelinated nociceptive afferents change in painful chronic nerve constriction neuropathy. In : Proceedings of the 7th Word

106. Congress on pain, V. 2. Progress in pain management. Ed. Gebhart, Hummond, Jensen. 511-522. IASP Press. Seattle. 1994.

107. Konno F., Takayanagi I. Effect of morphine, clonidine and papaverine on synaptosomal 45Ca uptake and antinococeptive action in rats. Jpn J Pharmacol. 34: 101-107. 1984.

108. Kress M., Reeh P. Chemical exitation and sensitization in nociceptors. In: Neurobiology of nociceptors. Ed. Belmonte C. & Cervero F. Oxford, New York, Tokio. : 259- 296. 1996.

109. Kroin J.S., McCarthy .J., Penn R.D., Lubenow T.R., Ivankovich A.D. Intrathecal clonidine and tizanidine in conscious dogs: comparison of analgesic and hemodynamic effects. Anesth. Analg. 82(3): 627-635. 1996.

110. Kubinin A. N., Ignatov I. D. Chronopharmacological features of the pain-relieving effects of analgesics. Anesteszol. Reanimatol. 4 : 7-9. 1996.

111. Kucera J, Walro J. Treatment with beta bungarotoxin blocks muscle spindle formation in fetal rats. Development. 110: 483-489. 1990.

112. Marchand J.E., Zhang X., Wurm W.H., Kream R.M. Differential expression of alpha-2 adrenergic receptor subtypes by sensory and sympathetic neurons. Anesthesiology. 79. A 894. 1993.

113. Maze M., Tranquilli W. Alpha-2 adrenoceptor agonists: Defining the role in clinical anesthesia. Anesthesiology. 74 : 581-605. 1991.

114. McLeod A.A., Brown L.E., Kitchell F.A., Dedor F.A., Kuhn c., Shand D.G., Williams R.S. Hemodinamics and metabolic responses to exercise after adrenoceptor blocade in humans. J. Appl. Physiol. 56 : 716-722. 1984.

115. McMahon S.B. Mechanizms of sympathetic pain. Br. med. Bull. 3 : 584600. 1991.

116. McSorley P.D., Warren , D.J. Effects of propranolol and metoprolol on the peripheral circulation. Br. Med. J. 2 : 1598- 1600. 1978.

117. Medgett I.C., Ruffolo R.R. Alpha adrenoceptor mediated vasoconstriction in the art hindlimb: alpha2 adrenoceptors in saphenous arterial bed. J.Pharmacol. Exp. Ther. 246 : 249-254. 1988.

118. Miller M.R., Ralston H.J., Kasahara M. The pattern of cutaneus innervation of the human hand. Am. J. Anat.102 (2) : 183-197. 1958.

119. Morawetz R. F., Parth P., Poppel E. Influence of the pain perception measurement technique on the diurnal variation of pain perception In: Pain measurement in man: neurophysiological correlates of pain. B.Bromm (Ed.). Elsevier Amsterdam. 1984.

120. Nichols J.D., Hyde N.A., Sugden K.Determination of underivatised efaroxan and idazoxan in blood plasma by capillary gas chromatography with mass-selective detection. Analyst. 114 (10) : 1215-1218. 1989.

121. Nicolau G.Y., Lakatua D., Sackett-Lundeen L., Haus E. Circadian and circannual rhythms of hormonal variables in eldery men and women. Chronobiol. Int. 1 (4): 301-319. 1984.

122. Nilsson B.I. Effects of sympathetic stimulation on mechanoreceptors of cat vibrissae. Acta Physiol. Scand. 85 : 390-397. 1972.

123. O'Malley T.P., Postma G.N., Holtel M., Girod D.A. Effect of local epinephrine on cutaneous blood flow in the human neck. Laryngoskope. 105 (2) : 140-143. 1995.

124. Ossipov M.H., Lopez Y, Bian D., Nicholos M.L., Porreca F. Synergistic antinociceptive interaction of morphine and clonidine in rats with nerve-ligation injury. Anesthesiology 86 (1): 196-204. 1997.

125. Passatore M., Grassi C, Filippi G.M. Sympathetically -induced develpoment of tension in jaw muscles: the possible contraction of intrafusal muscle fibres. Pfuluges Arch. 405 (1): 297-304. 1985.

126. Patrizi G., Munger B.L. The cytology of incapsulated nerve endings in the art penis. J. Ultrastruct. Res. 13 : 500-515. 1965.

127. Patron W.D., Vizi E.S. The inhibitory action of noradrenaline and adrenaline on acetylcholine output in guinea-pig ileum longitudinal muscle strip. Br. J. Pharmacol. 35 : 10-28. 1969.

128. Petrovaara A., Kauppila T., Jyvasjarvi E., Kalso E. Involvement of supraspinal and spinal segmental alpa-2-adrenergic mechanisms in the medetomidine -induced antinociception. Neuroscience 44 (3) : 705-714. 1991.

129. Phillips D.K. Chemistry of alpha- and beta-adrenergic agonist and antagonists. In: Handbook of experimental Pharmacology: Adrenergic activators and ingibitors. Berlin: Springer-Verlag. 54 (1) : 3-61. 1981.

130. Pierce J.P., Roberts W.I. Sympathetically induced changes in the responses of guard hair and type II receptors in the cat. J. Physiol. 314 : 411-428. 1981.

131. Pollmann L., Harris P. H. Rhythmic changes in pain sensitivity in teeth. Int. Chronobiol. 5 (3): 459-464. 1978.

132. Portela A., Northrup G., Halberg F., Cornelissen G., Wendt H., Melby J. C., Haus E. Changes in human blood pressure with season, age and solar cycles: a 26 year record. Int. J. Biometeorol. 39 (4) : 176-181. 1996.

133. Richards R.L. Causalgia, a centennial review. Arch. Neurol. 16 : 339-350. 1967.

134. Ringkamp M., Schmelz M., Kress M., Allwang M., Ogilvie A., Reeh P.W. Activated human platelets in plasma excite nociceptors in rat skin, in vitro. Neurosci. Lett. 170 (1) : 103-106. 1994.

135. Roberts W. A hypothesis on the physiological basis for causalgia and related pains. Pain. 24 : 297-311. 1986.

136. Roberts W., Elardo S.M. Sympathetic activation of unmyelinated mechanoreceptors in cat. Brain research. 339 : 123-125. 1985.

137. Ruffini A. On the minute anatomy of the neuromascular spindles of the cat and their physiological significance. J Physiol. 23 : 193-208. 1898.

138. Ruffolo R.R. Distribution and function of peripheral a-adrenoreceptors on the cardiovascular system. Pharmacol Biochem Behav. 22 : 827-833. 1985.

139. Ruffolo R.R., Hieble J.P. Alpha adrenoreceptors : recent developments Pharmacol Ther. 61 (1, 2): 1-64. 1994.

140. Sanders, K. H., Zimmermann M. Mechanoreceptors in rat glabrous skin: redevelopment after nerve crush. J. Neurophysiol. 55 (4): 644-659. 1986.

141. Santini M. New fibers of sympathetic nature in the inner core of Pacinian corpuscles. Brain. Res. 16 : 535-538. 1969.

142. Santini M., Ibata Y., Pappas G.D. the fine structure of the sympathetic axons within the Pacinian corpuscle. Brain Research. 33 : 279-287. 1971.

143. Sato J. , Suzuki S., Tamura R., Kumazawa T. Norepinephrine exitation of cutaneous nociceptors in adjuvant induced inflamed rats does not depend on sympathetic neurons. Neurosci. Lett. 177 : 135-138. 1994.

144. Sato J., Perl E. Arenergic exitation of cutaneous pain receptors induced by peripheral nerve injury. Science. 251 : 1608-1610. 1991.

145. Shephard R. J., Shek P. N. Interactions between sleep, other body rhythms, immune responses and exrecise. Can. J. Appl. Physiol. 22 (2) : 95-116. 1997.

146. Shyu B.C., Olasson B., Andersson S.A. Sympathetic and noradrenaline effects on C-fibre transmission : Single-unit analisis. Acta Physiol. Scand. 137 : 85-91. 1989. (a)

147. Shyu B.C., Olasson B., Huang K.N., Widerstrom E., Andersson S.A. Effects of sympathetic stimulation on C-fibre responses in rabbit. Acta Physiol. Scand. 137 : 73-84. 1989. (6)

148. Simonneaux V., Ebadi M., Bylund D.B. Identification and characterization of (x2d- adrenergic receptors in bovine pineal gland. Molec Pharmac. 40: 235-241. 1991.

149. Sinclair D. Cutaneous sensation. London-New York-Toronto. 1.967.

150. Skingle M., Hayes A.G., Tyers M.B. Antinociceptive activity of clonidine in the mouse, rat and dog. Life Sci. 31: 1123-1132. 1982.

151. Solomon S. E., Brody M.J., Gebhart G.F. Pharmacological characterization of alpha adrenoreceptors involved in the antinociceptive and cardiovascular effects of intrathecally administrated clonidine. J. Pharmacol. Exp. Ther. 251: 27-38. 1989.

152. Sothera R. B. Circadian and circannual characteristics of blood pressure self- measured for 25 years by clinically-healthy man. Chronobiologia. 21 (1): 17-20. 1994.

153. Spencer P.S. and Scaumburg H.H. An ultrastructural study of inner core of the Pacinian corpuscle. J. Neurocytol. 2 : 217-235. 1973.

154. Strian F., Lautenbacher S., Galfe G., Holzl R. Diurnal variations in pain perception and thermal sensitivity. Pain. 36 (1) : 125-131. 1989.

155. Szolcsanyi J., Anton F., Reeh P.W., Handwerker H.O. Selective excitation by capsaicin of mechano-heat sensitive nociceptors in rat skin. Brain Res. 446 (2): 262-268. 1988.

156. Timmermans P.B., Van Zwieten P.A. Perspective: a2 Adrenoceptors: classification, localization, mehanizms and targets for drugs. J. Med Chem. 25: 1389-1401. 1982.

157. Wang J.K., Johnson K.A., Ilstrup D.M. Sympathetic blocks for reflex sympathetic dystrophy. Pain. 23 : 13-17. 1985.

158. Weber H. Ueber anesthesie durch adrenalin. Verh. Dtsch. G. Inn. Mrd. 21 : 616. 1904.

159. Wilkberg J.E.S. Synthesis of 3H-acetylcholine in the rabbit lacrimal gland and its release by electrical field stimulation. Acta Physiol. Scand. 468 (Suppl) : 1-89. 1979.