Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

Аберрации хромосом у лошади при нарушениях воспроизводительной функции

ВАК РФ 06.02.01, Разведение, селекция, генетика и воспроизводство сельскохозяйственных животных

Автореферат диссертации по теме "Аберрации хромосом у лошади при нарушениях воспроизводительной функции"

На правах рукописи

ШАРАСЫСИНА Ольга Геннадьевна

АБЕРРАЦИИ ХРОМОСОМ У ЛОШАДИ ПРИ НАРУШЕНИЯХ ВОСПРОИЗВОДИТЕЛЬНОЙ ФУНКЦИИ

Специальность 06.02.01. - «Разведение, селекция, генетика и воспроизводство сельскохозяйственных животных»

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Санкт - Петербург 2006

Работа выполнена в проблемной лаборатории кафедры ветеринарной генетики и животноводства Санкт-Петербургской Государственной академии ветеринарной медицины.

Научный руководитель: Жигачев А .И.

доктор биологических наук, (СПГАВМ)

профессор, заслуженный деятель РФ

Официальные оппоненты: Доктор сельскохозяйственных наук,

профессор, заслуженный деятель науки РФ Завертяев Б.П.

(ГНУ ВНИИГРЖ)

кандидат биологических наук, доцент Митютько В.И.

(СПГАУ)

Ведущее учреждение: Всероссийский научно-исследовательский институт коневодства (ВНИИК)

Защита диссертации состоится (¿//(¡¿¿¿К- 2006г. в // часов

на заседании диссертационного совета Д. 006.012.01. по защите докторских диссертаций в ГНУ Всероссийский научно-исследовательский институт генетики и разведения сельскохозяйственных животных (ГНУ ВНИИГРЖ) Российской академии сельскохозяйственных наук по адресу: 196601, Санкт-Петербург, г.Пушкин, Московское шоссе, 55-а. Факс: 465-99-85

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГНУ ВНИИГРЖ. Автореферат разослан «&.»2005г.

Ученый секретарь диссертационного совета,

доктор биологических наук /Г.Н.Сердюк/

lcx>6A 64Г

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы

Еще не прошло и половины столетия как Levan А.& Tjio J. (1956) на человеке, Moorhed et al. (1960) на животных успешно апробировали методику культивирования лимфоцитов периферической крови для получения препаратов хромосом. Однако за эти годы на многих видах млекопитающих выполнены сотни исследований, позволившие на новом уровне познать закономерности функционирования наследственности и изменчивости. По сути дела только с 60х годов XX века было установлено истинное число и морфология хромосом, их репродукция у большинства продуктивных (Гольдман И.Л. и др., 1969, Яковлев А.Ф., 1985) и домашних видов животных, а в последующем выявлены геномные и структурные аберрации в кариотипах.

К сожалению, цитогенетических исследований на лошади крайне мало как в нашей стране, так и за рубежом (Пименова Т.И., 1987, Жигачев А.И., 1996, Bowling, 1997, Kuiper H.J.,2001). В тех же немногих работах, которые были выполнены на лошади показано, что цитогенетические методы могут найти применение, прежде всего для выяснения причины нарушения воспроизводительной способности животных (Hainan С., 1982, Жигачев А.И., Богачева Т.В., 1993, Bowling А.Т., 1997, Kuiper H.J.,2001). Безусловно, это имеет особую практическую ценность в племенном коневодстве, если еще иметь в виду биологическое малоплодие и значительный интервал между поколениями у этого вида.

По расчетам ВНИИКоневодства (Калашников В.В., 2003) научно обоснованная потребность в лошадях в стране превышает фактическую численность более чем втрое и составляет 6,2 млн. голов. В связи с этим значение цитогенетических исследований в коневодстве трудно переоценить.

Научная работа выполнена в рамках отраслевой программы СХ: 042, раздел 01.01.6 по теме «Изучение роли наследственности и факторов внешней среды в этиологии врожденных аномалий, нарушений жизнеспособности и плодовитости, животных для разработки методов профилактики отдельных форм патологии и повышения потенциала продуктивности» (№ гос. регистрации 01860125237).

Цель и задачи исследований

Целью работы является изучение кариотипа, частоты и спектра аберраций у лошадей с нарушениями половых циклов, с фенотипическими отклонениями от нормы, с аномальным потомством для обоснования и разработки принципов цитогенетического мониторинга в коневодстве.

Задачи исследований:

- провести морфометрический анализ хромосом лошадей без феноти-пических и физиологических отклонений;

изучить кариотип лошадей с нарушениями половых циклов, с фено-типическими отклонениями от нормы, с аномальным потомством;

- определить показатели генетической нестабильности у лошадей с фенотипическими и физиологическими нарушениями;

- выявить животных с дисбалансом половых хромосом

- выявить взаимосвязь изменений кариотипа с фенотипическими и физиологическими отклонениями от нормы.

Научная новизна

Получены данные по показателям хромосомной нестабильности у лошадей с нарушениями половых циклов, с фенотипическими отклонениями от нормы, с аномальным потомством.

Приоритетными являются данные о том, что частота хромосомных аберраций у лошадей с физиологическими и фенотипическими отклонениями от нормы значительно выше, чем у лошадей без нарушений.

В результате отбора по фенотипу и физиологическим изменениям, выявлены и описаны животные с дисбалансом половых хромосом: 64,ХХ/63,ХО - мозаика Тернера и 64,ХУ/65,ХХУ - мозаика Кляйнфельтера.

Научная и практическая значимость работы

В результате исследований получены новые данные по частной генетике лошади и ветеринарной цитогенетике.

Полученные данные могут быть использованы: для выявления причин фенотипических отклонений от нормы, нарушений физиологических функций; для цитогенетической диагностики жеребцов и кобыл перед началом племенного использования.

Апробация работы

Основные результаты исследований рассмотрены и обсуждены на отчетах кафедры ветеринарной генетики и животноводства СПбГАВМ в 2002 -2005гг., на научных конференциях профессорско-преподавательского состава и аспирантов СПбГАВМ в 2002 - 2005гг., на Всероссийской научно-практической конференции «Искусственное осеменение в коневодстве - истоки биотехнологии в животноводстве» (ВНИИКоневодства РАСХН, 2004).

Структура и объем работы

Диссертация изложена на 103 страницах и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов исследования и обсуждения, выводов, предложений и библиографического указателя (154 названий). Работа иллюстрирована 13 таблицами и 9 рисунками.

Основные положения, выносимые на защиту:

- повышенная частота хромосомных аберраций у лошадей с физиологическими и фенотипическими отклонениями от нормы;

- мозаика Тернера 64,ХХ/63 ДО, ее связь с фенотипическими проявлениями.

- мозаика Кляйнфельтера 64,ХУ/65,ХХУ, ее связь с фенотипическими проявлениями.

- цитогенетический мониторинг в племенном коневодстве.

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Цитогенетическому исследованию подверглись животные, принадлежащие частным владельцам и находящиеся в различных конюшнях Ленинградской области, с нарушениями половых циклов, отставанием в росте, крипторхизмом и аномальным потомством. Так же цитогенетический анализ был проведен у двух фенотипически нормальных животных (жеребца и кобылы), от которых получали здоровое потомство. Согласно клиническим анализам все животные были здоровы, на протяжении 6 последних месяцев, до взятия крови, не болели вирусной инфекцией.

Кобыла Греция была выбрана для исследования, в связи с тем, что у нее отмечались нерегулярные половые циклы. Кобыла не приходила в охоту по 3 - 6 месяцев. Отмечались случаи, когда, придя охоту, она оставалась в состоянии полового возбуждения по 25 - 30 дней, а затем снова следовал длительный перерыв.

Кобыла Валенсия выбрана для исследования в связи с тем, что, по заявлению владельца, впервые в охоту она пришла в возрасте 8 месяцев, половые циклы нерегулярные, отмечается отставание в росте при нормальных условиях кормления и содержания.

Кобыла Хелсора выбрана для исследования, так как у нее наблюдались нерегулярные половые циклы. Кобыла небольшого роста (143 см в холке), при этом у нее удлиненное тело на непропорционально коротких ногах.

Исследование кобылы Трапеза решено было провести в связи с тем, что дважды от нее получали жеребят с признаками атаксии.

Объектом исследования кобыла Форма стала в связи с тем, что все полученные от нее жеребята имели различные аномалии (атаксия, аноф-тальмия и др.)

Цитогенетическое исследование жеребца Наблуса было решено провести в связи с тем, что его рост (140см в холке) гораздо ниже средних показателей по породе (154см).

Жеребец Ремингтон - правосторонний крипторх. При ректальном исследовании было выявлено абдоминальное расположение крипторхирован-ного семенника.

Жеребец Аморс - правосторонний крипторх. Абдоминальный крип-торхизм. За 8 лет использования в разведении от него получено 6 жеребят.

Препараты хромосом готовили из клеток периферической крови в проблемной лаборатории ветеринарной генетики Санкт-Петербургской государственной академии ветеринарной медицины.

Препараты хромосом полуяали путем культивирования лимфоцитов переферической крови по общепринятой методике (Moorhead, Nowell, Mellman et al., 1960).

Анализ препаратов хромосом проводили под микроскопом МБИ - 15 при увеличении хЮОО в иммерсионной системе и по микрофотографиям.

Микрофотосъемку производили на микроскопе МБИ - 15 на пленки: Kodak Academy200 (рис. 1), Fuji SuperialOO и 200, Kodak Professional T400CN, Konica200. Для повышения контрастности фотоотпечатков использовали зеленый светофильтр ЗС 10; ЗС 8; ЗС 1 (Федин, Барский, 1971). Проявка пленки и печать фотографий производилась в специализированной фотомастерской.

Для изучения хромосомного набора и аберраций анализировали равномерно окрашенные метафазные пластинки, по 50 - 100 метафаз на каждое животное.

Измерение длины хромосом производили штангенциркулем по микрофотографиям. Вычисляли относительную длину, центромерный индекс хромосом и индекс спирализации. Классифицировали хромосомы согласно стандартной классификации (Levan A. et al., 1964, Графодатский А.С. и др., 1988). При ка-риотипической оценке животных руководствовались Методическими рекомендациями исследования хромосом сельскохозяйственных животных (1977).

При построении кариограммы, хромосомы которые нельзя достоверно идентифицировать при рутинной окраске располагались согласно убыванию их линейных размеров.

Полученный материал обработан статистическими методами по Г.Ф.Лакину (1980), с использованием микрокалькулятора CASIO.

Данные, полученные в ходе исследований, сравнивали с результатами анализа уровня естественного мутирования хромосом в соматических клетках лошадей, полученными Т.И.Пименовой (1987).

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Морфометрический анализ хромосомного набора лошади без физиологических и фенотипических отклонений от нормы

Для анализа хромосомного набора лошади исследовали препараты хромосом фенотипически нормальных животных, без отклонений воспроизводительной функции. Анализ хромосом производился при рутинном окрашивании. Проанализировано 11 метафаз жеребца и 13 метафаз кобылы. Для анализа использовались только метафазы с полным набором хромосом.

Результаты представлены в таблице 1.

Согласно морфометрическому анализу Х-хромосома в основном является второй по величине. Хотя в некоторых метафазах Х-хромосома имела почти такие же размеры, как и одна из пары метацентрических аутосом. В разных клетках у одной и той же особи относительные размеры

Х-хромосомы были различны. В среднем относительная длина X-хромосомы составила 6,34% с колебаниями от 5,54% до 7,14%. Центромер-ный индекс Х-хромосомы составил в среднем 42,97% с колебаниями от 42,44% до 43,5%. Эти данные позволяют отнести ее к метацентрикам.

/

% .*

• - 5 >;V, »'

•г.

* 9

л *. *

i

■s ;,

•п

щ

-

•WW

•vVi

-vVi

«'¿If*,

/

Рисунок 1. Метафазные пластинки снятые на пленку Kodak Academy200.

Достоверная идентификация У-хромосомы при рутинном окрашивании невозможна. При построении кариограммы за У-хромосому принимали один из маленьких акроцентриков, не имевших пару.

Таблица 1

Результаты морфометрического анализа хромосом лошади без физиологических и фенотипических отклонений

№ хромосомы Относительная длина Центромерный индекс

% (+/-) % (+/-)

1 7,95 0,7 37,75 0,28

2 5,62 0,59 30,53 0,41

3 5,19 0,58 28,01 0,34

4 4,89 0,32 33,37 0,4

5 4,45 0,13 36,05 0,51

6 3,97 0,18 38,29 0,42

7 3,68 0,12 46,52 0,43

8 3,6 0,12 39,15 0,5

9 3,44 0,15 41,22 0,44

10 3,17 0,17 43,17 0,44

11 2,57 0,13 41,38 0,35

12 2,06 0,12 40,44 0,42

13 1,87 0,14 40,28 0,42

14 4,78 0,32 -

15 4,2 0,11 -

16 3,62 0,25 -

17 3,23 0,16 -

18 2,96 0,12 -

19 2,74 0,2 -

20 2,66 0,12 -

21 2,48 0,29 -

22 2,31 0,15 -

23 2,06 0,28 -

24 1,8 0,16 -

25 1,46 0,24 -

26 1,29 0,17 -

27 1,11 0,21 -

28 0,99 0,46 -

29 0,85 0,24 -

30 0,76 0,35 -

31 0,72 0,3 -

X 6,34 0,8 42,97 0,53

У 1,2 0,3 -

Анализ значений центромерного индекса показал, что его среднее значение у первой пары аутосом составило 37,75% с колебаниями от 37,47% до 38,03%. В связи с тем, что в 66,6% случаях центромерный индекс превысил значение 37,5% - первую пару аутосом можно отнести к метацен-трикам (Levan et. al, 1964), но часть хромосом (33,4%) имели субметацен-трическое строение.

Аутосом ы с 4-й по 6-й пары имеют субметацентрическое строение, согласно значениям центромерного индекса.

Аутосомы с 7-й по 13 пары относятся к метацентрикам, т.к. их центромерный индекс значительно превышает 37,5%.

3.2. Морфометрический анализ хромосомного набора лошадей имеющих физиологические и фенотипические отклонения от нормы

Морфометрический анализ хромосом производился для каждого исследуемого животного при рутинном окрашивании. Для этого анализировались метафазы, имеющие полный диплоидный набор хромосом. Вычисляли относительную длину хромосом и центромерный индекс и индекс спирализации.

Исследование восьми лошадей с нарушениями половых циклов, отставанием в росте, крипторхизмом и двух лошадей с нормальной воспроизводительной функцией и фенотипом, соответствующим породной принадлежности, выявило различие морфометрических показателей.

Анализ морфометрических показателей хромосом исследуемых животных не выявил значительных различий относительной длины хромосом. Выявлены некоторые различия в показателях центромерного индекса, определяющего тип строения хромосом. В основном это касается хромосом 8, 12 и 13 пар. У некоторых лошадей с нарушениями, хромосомы восьмой пары, согласно центромерному индексу, имеют метацентрическое строение, в отличие от субметацентрического - у нормальных. А хромосомы 12 и 13 пары, в отличие от метацентрического строения - у нормальных животных, имеют субметацентрическое. Так же различия встречаются в 4,9,10 парах.

Не было выявлено отклонений в показателях центромерного индекса, определяющего тип строения хромосомы, у кобыл Хелсора и Трапеза, а так же у жеребца Аморс. Наибольшее количество различий в типе строения хромосом выявлено у жеребца Ремингтон (1-5 пары, 8, 9 пары) достоверность различия составила Р>0,999, а так же у кобылы Греция - недостоверное различие по 6 паре, высокая степень достоверности (Р=0,99) по 8 паре, и по 9, 10 паре (Р>0,999).

У остальных животных встречались отклонения от нормы в двух -трех парах хромосом.

Вычисление индекса спирализации проводилось по двум формулам, одна из которых была предложена Т.И.Пименовой (1987). Существенные

различия в показателях наблюдались в тех случаях, когда самой длинной хромосомой оказывалась Х-хромосома, а не хромосома первой пары. Т.И.Пименова предлагала использовать в вычислениях отношение суммы показателей относительной длины 11, 12,13 к показателю длины хромосом первой пары. В этом случае, если хромосомы первой пары оказываются самыми крупными, показатели двух формул приблизительно одинаковы, а если наиболее крупной оказывается Х-хромосома, то разница в значениях формул оказывается существенной.

3.3. Структурные аберрации хромосом у лошадей с физиологическими и фенотипическими отклонениями

Для изучения структурных изменений хромосом исследовали от 50 до 102 метафаз для каждой лошади. Учитывали количество метафаз с аберрациями, общее число аберраций, а так же провели учет хроматид-ных пробелов.

Изучение структурных изменений хромосом у исследуемых лошадей показало, что в большинстве случаев количество метафаз с аберрациями и количество аберраций на 100 клеток у них выше, чем у животных, изученных Т.И.Пименовой (1987), у которых не наблюдалось каких-либо феноти-пических и физиологических отклонений (табл. 2).

Таблица 2

Частота и спектр структурных изменений хромосом у лошадей с физиологическими и фенотипическими отклонениями.

лошадь кол-во метафаз метафаз с аберрациями аберрации пробелы

всего на ЮОкл одиночные фраг. парные фрагменты кольцевые

п % п % п % п % п %

Греция 102 7 6,86 14 13,7 6 66,7 3 21,4 5 35,7 5 4,9

Валенсия 54 9 16,6 12 22,2 9 75 3 25 0 0 3 5,55

Хелсора 61 6 9,8 6 9,83 3 50 2 33,3 1 16,7 3 4,92

Форма 50 4 8 6 12 2 33,3 2 33,3 2 33,3 2 4

Трапеза 50 5 10 7 14 3 42,9 4 57,2 0 0 1 2

Ремингтон 58 3 5,2 5 8,62 1 20 2 40 2 40 4 6,89

Наблус 63 8 12,7 14 22,2 5 35,7 6 42,9 3 21,4 4 6,35

Аморс 55 4 7,3 6 10,9 3 50 3 50 0 0 3 5,45

При сравнении результатов частоты структурных изменений хромосом у коб. Греция, с данными, полученными Т.И.Пименовой (1987) при анализе уровня естественного мутирования хромосом в соматических клетках лошадей, наблюдаются некоторые различия в показателях. Данные коб. Греция сравнивали с результатами анализа лошадей полукровных верховых пород и лошадей спортивной группы, т.к. коб. Греция является полукровной помесью и используется в спорте. Наблюдаются различия по показателю метафаз с аберрациями у коб. Греция (6,86%) и полукровными верховыми лошадьми (3,79%) с высокой степенью достоверности (Р>0,99); при сравнении этого >хе показателя коб. Греция с лошадьми спортивной группы (5,11%), разница не так велика.

Разница в частоте аберраций на 100 клеток достоверна (Р>0,999) у коб. Греция (13,7) и полукровных лошадей (3,96), а так же у коб. Греция и лошадей спортивной группы (6,67).

При сравнении результатов коб.Вапенсия и данных, полученных Т.И.Пименовой (1987) использовали данные полукровных верховых и чистокровных верховых лошадей, т.к. кобыла является помесью латвийской и чистокровной верховой породы.

Выявлены значительные различия в количестве метафаз у коб. Валенсия (16,6%) и лошадей полукровных пород (3,79%), и чистокровной верховой породы (4,75%). Разница в обоих случаях значительна и достоверна (Р>0,999).

Достоверная разница (Р>0.999) отмечается и при сравнении показателей частоты аберраций на 100 клеток у коб. Валенсия (22,22) с данными полукровных (3,96) и чистокровных (5,75) лошадей.

Различие так же наблюдается в частоте появления пробелов у коб. Валенсия (5,55%) и лошадей чистокровной верховой породы (7,25%), однако разница в данном случае имеет низкую достоверность (Р<0,9).

Так как коб. Хелсора является помесью ахалтекинской и торийской пород, сравнение результатов структурных изменений хромосом проводился с данными лошадей ахалтекинской породы и полукровных верховых.

Имеется разница (Р>0,95) в частоте метафаз с аберрациями коб. Хелсора (9,8%) и ахалтекинских лошадей (6,33%). При сравнении этого же показателя у коб. Хелсора и полукровных лошадей (3,79%), разница более значительна (Р>0,999).

При сравнении показателя частоты аберраций на 100 клеток коб. Хелсора (9,83) и полукровных лошадей (3,96) обнаруживается значительная разница (Р>0,999).

Результаты, полученные при исследовании частоты структурных аберраций, коб. Форма сравнивались с данными чистокровных верховых лошадей.

Частота метафаз с аберрациями у коб. Форма (8%) выше таковой у лошадей чистокровной верховой породы. Разница достоверна (Р>0,98).

Достоверное различие (Р>0,999) наблюдается в показателях частоты аберраций на 100 клеток у коб.Форма (12) и чистокровных лошадей (5,75).

Разница наблюдается в частоте появления пробелов у коб. Форма (4%) и лошадей чистокровной верховой пород (7,25%), с достоверностью Р>0,95.

Результаты кариотипирования коб. Трапеза сравнивали с данными орловских рысистых лошадей.

Достоверное различие (Р>0,999) наблюдается в показателях частоты метафаз с аберрациями коб. Трапеза (10%) и орловских рысистых лошадей (3,82%). Такой же результат получен при сравнении показателей частоты аберраций на 100 клеток. У коб.Трапеза (14) этот показатель превышает таковой у орловских рысистых лошадей (4,39).

Разница в частоте пробелов у коб.Трапеза (2%) и орловских рысистых лошадей (3,09%) недостоверна (Р<0,9).

При сравнении показателей жер.Ремингтон с данными полукровных верховых лошадей и лошадей спортивной группы, обнаружено: достоверное различие (Р>0,999) в частоте аберраций на 100 клеток жер.Ремингтон (8,62) и полукровных (3,96). Достоверная разница (Р>0,98) наблюдается при сравнении этого же показателя с данными лошадей спортивной группы (6,67).

Различие в показателях частоты метафаз с аберрациями жер. Ремингтон (5,2%) с данными полукровных лошадей (3,79%) недостоверно (Р<0,9). Этот показатель у Ремингтона очень близок к таковому у спортивных лошадей (5,11%).

Жер. Наблус относится к арабской чистокровной породе лошадей. В работе Т.И.Пименовой (1987) исследование арабских лошадей не проводилось, поэтому показатели частоты хромосомных аберраций жер.Наблус сравнивали с показателями чистокровных верховых, ахалтекинских и полукровных лошадей. Частота метафаз с аберрациями у жер. Наблус (12,7%) значительно превышает таковую у чистокровных верховых (4,75%), ахалтекинских (6,33%), полукровных лошадей (3,79%) с высокой степенью достоверности (Р>0,999).

Частота аберраций на 100 клеток так же оказалась значительно выше у жер. Наблус (22,22) чем у чистокровных верховых (5,75), ахалтекинских (11,39) и полукровных верховых (3,96) лошадей (Р>0,999).

Значительная разница в частоте пробелов (Р>0,9) наблюдалась у жер.Наблус (6,35%) и ахалтекинских лошадей (3,8%). С чистокровной верховой (7,25%) и полукровной (5,68%) разница незначительна и недостоверна (Р<0,9).

При сравнении результатов частоты и спектра аберраций жер. Аморс, использовали данные полукровных верховых лошадей. Различие наблюда-

и

ется в показателях частоты метафаз с аберрациями и частоты аберраций на 100 клеток (Р>0,999), у жер. Аморс значение этих показателей выше, чем у полукровных лошадей.

При разделении исследованных лошадей по группам: крипторхи, кобылы с неполноценными половыми циклами, кобылы с аномальным (атаксия) потомством; обнаружена достоверная разница в частоте аберраций на 100 клеток между крипторхами и кобылами с неполноценными половыми циклами, у которых этот показатель значительно выше (табл. 3). В целом же, у крипторхов, самые низкие показатели структурных мутаций по сравнению с другими групппами изученных животных, за исключением частоты пробелов (6,17%).

Таблица 3

Частота структурных изменений хромосом у лошадей различных групп

группа животных кол-во метафаз метафаз с абер-рац. аберрации пробелы

п % Всего на 100 клеток п %

крипторхи ИЗ 7 6,25±1,05 11 9,77±1,14 3,5 6,17±0,72

кобылы с нарушен, половых циклов 217 22 10,1±2,88 32 15,25±3,66 3,6 5,12±0,13

кобылы с аномальн. потомством 100 9 9,0 ±1,0 13 13,0±1,0 1,5 3,0±1,0

разница крипторхи - коб.с нарушением половых циклов 3,9» 5,48** 1,05»

разница крипторхи - кобылы с аномальным потомством 2,75» 3,23* 3,17»

разница кобылы с нарушением половых циклов - коб. с аномальным потомством 1,15* 2,25* 2,12*

* - разница недостоверна

** - Р>0,95

При сравнении этих же показателей в группах «животные с нормальным ростом» и «животных с отставанием в росте», у последних метафаз с аберрациями оказалось достоверно больше (табл. 4). Таким образом, мож-

но предположить, что задержка в росте так же может быть обусловлена повышенной частотой аберраций.

Таблица 4

Частота структурных изменений хромосом у лошадей с нормальным ростом и с отставанием в росте

группа животных кол-во метафаз метафаз с аберрациями аберрации пробелы

п % Всего на 100 клеток п %

лошади с отставанием в росте 178 23 12,9 ±1,9 32 18,09 ±4,13 10 5,6 ±0,4

лошади с нормальным ростом 315 23 7,3 ±0,8 38 11,84 ±0,98 15 4,7 ±0,7

разница 5,6** 6,25*** 0,9

**- Р>0,95

*** - Р=0,9

При анализе структурных аберраций в метафазах некоторых лошадей были обнаружены кольцевые хромосомы. Причем, у лошадей с дисбалансом половых хромосом, их частота составила 40% - у жер. Ремингтон, 35,71% - у коб. Греция от общего количества структурных аберраций. Это самые высокие показатели из всех полученных. Т.И.Пименова (1987) в своих исследованиях кольцевых хромосом не обнаружила.

Цитогенетический анализ хромосом кобыл, от которых неоднократно получали потомство с атаксией и другими аномалиями, выявил высокую частоту структурных аберраций по сравнению с уровнем спонтанного хромосомного мутирования у лошадей, приведенный Пиминовой Т.И. (1987). По остальным показателям эти лошади не имеют существенных различий.

3.4. Геномные мутации у лошадей с физиологическими и фенотипическими нарушениями

Для определения анеуплоидии нами изучались клетки с числом хромосом 2п ± 2, т.е. с набором от 62 до 66 хромосом. Анализ геномных нарушений проводился для каждой лошади отдельно. Частота гипердиплоидных, гиподиплоидных и полиплоидных клеток представлены в таблице (табл. 5).

Для определения геномных нарушений у коб. Валенсия исследовалось 49 диплоидных метафаз с 2п±2. Из них анеуплоидными оказались 4 (8,16%) клетки. Эти клетки были представлены гиподиплоидами, 4,8% клеток с 2п-1 и 4,8% клеток с 2п-2.

Таблица 5

Частота геномных мутаций у лошадей

лошадь кол-во метафаз подробно просмотр. кол-во метафаз 2п=64 анеуплоидные

анеуплоид-ных метафаз 2п+/-2 гиподипло-идных метафаз 2п-1 гипердиплоидных метафаз 2п+1

п % -п % п % п %

Греция 85 53 62,35 32 37,65 29 34,1 0 0

Валенсия 49 45 91,84 4 8,16 2 4,08 0 0

Хелсора 51 47 92,16 4 7,84 3 5,88 1 1,96

Форма 43 42 97,68 1 2,32 1 2,32 0 0

Трапеза 40 39 97,5 1 2,5 1 2,5 0 0

Ремингтон 50 39 77 И 22 2 4 9 18

Наблус 52 49 94,23 3 5,77 1 1,92 2 3,84

А морс 48 46 95,84 2 4,16 2 4,16 0 0

При построении кариограмм из метафаз с 2п = 63, обнаружили, в одном случае отсутствие одного маленького акроцентрика, и в другом - отсутствие одного большого метацентрика, предположительно Х-хромосомы.

Гипердиплоидных клеток, как и полиплоидных у коб.Валенсия не обнаружено.

Из 51-й диплоидной метафазы коб Хелсора 4 (7,84%) оказались с измененным набором. Из них в Зх клетках (5,88%) наблюдалось отсутствие одной хромосомы, т.е. диплоидный набор этих клеток составил 2п-1. Причем в двух клетках отсутствовали большие метацентрики, а в одной - маленький акроцентрик. Была так же обнаружена одна клетка (1,96%) с гипердиплоидным набором 2п+1. Лишней оказалась хромосома средней величины, метацентрического строения.

У коб Форма анализировали 42 метафазы, с целью обнаружения анеу-плоидных клеток. Была обнаружена только одна клетка (2,32%) с числовым нарушением. В метафазе с геномным нарушением отсутствовала одна ак-роцентрическая аутосома средней величины. Гипердиплоидных клеток у коб. Форма обнаружено не было.

Из всех исследованных клеток коб Трапеза только 40 оказались с набором хромосом 2п±2. Из которых, только одна клетка (2,5%) была анеуп-лоидной с недостающей одной хромосомой. При раскладке гиподиплоид-ной метафазы по парам гомологов обнаружено, что недостает одной субме-

тацентрической хромосомы средней длины.,Гипердиплоидных и полиплоидных клеток у коб. Трапеза не обнаружено.

При исследовании пятидесяти двух мегафаз жер Наблус, было обнаружено 3 (5,77%) с анеуплоидным набором. Из которых, одна метафаза (1,92%) была гиподиплоидной, с отсутствующей акроцентрической аутосомой среднего размера. Две клетки (3,84%) содержали лишние хромосомы 2п=65. В одном случае лишней оказалась маленькая акроцентрическая хромосома, а в другом - тоже метацентрик, но несколько большего размера.

У жер. Аморс было проанализировано 48 метафаз с набором 2п±2. Анеуплоидные метафазы составили 4,16%. Все они были представлены гипоплоидами с хромосомным набором 2п-1, всего 2 клетки. При раскладке хромосом из гиподиплоидных метафаз по парам гомологов выявлено отсутствие маленьких акроцентриков в обоих случаях.

У двух исследованных лошадей были обнаружены существенные числовые изменения кариотипа.

У коб Греция было проанализировано 85 метафаз с набором 2п±2. Количество анеуплоидных метафаз составило 37,65%, из которых 90,6% пришлось на гиподиплоиды. Основное количество гиподиплоидных метафаз составили клетки с набором 2п-1, т.е. содержащие по 63 хромосомы. Таких клеток обнаружено 34,1% от общего числа исследованных метафаз.

Для построения кариограммы использовали равномерно окрашенные метафазные пластинки с нормальным диплоидным набором (2п = 64) и метафазы с неполным набором (2п = 63). Кариограмму составляли, опираясь на морфометрические показатели хромосом.

При построении кариограммы и раскладке хромосом по парам гомологов для коб.Греция из метафаз с гиподиплоидным набором (2п = 63), была обнаружена только одна половая Х-хромосома (рис. 2). Второй крупный метацентрик отсутствовал. В клетках с нормальным набором (2п = 64), обе Х-хромосомы присутствовали.

В нашем случае кобыла мозаика имела, в общем, нормальный фенотип, единственным, что выделяет ее из основной массы лошадей - достаточно высокий рост (172 см) в холке. Нерегулярность и неполноценность половых циклов у данной кобылы является характерной картиной для данного типа хромосомного дисбаланса. Не исключена возможность фертиль-ности данной кобылы, но успешное использование в воспроизводстве однажды не гарантирует последующее плодотворное осеменение.

У жер.Ремингтон было исследовано 50 метафаз с набором 2п±2. Из них с числовыми нарушениями оказалось 11 клеток (22%). В двух метафа-зах (4%) наблюдалось отсутствие хромосом 2п-1. В обеих отсутствовали метацентрические хромосомы средней длины.

II II и и и II

И Ц II н «в в,

II II «I И II М

£ Д А» М «л л* **

»А «А. # *

1

Рисунок 2. Хромосомы коб. Греция, 63,ХО.

В девяти клетках (18%) хромосомный набор оказался гипердиплоидным (рис. 3). В каждой такой метафазе присутствовала одна лишняя хромосома. При построении кариограммы из гипердиплоидных метафаз, обнаружили присутствие лишней, достаточно крупной, метацентрической хромосомы. Можно предположить, что это дополнительная половая X-хромосома. В случае с жер. Ремингтон можно говорить о мозаицизме 64,ХУ/65,ХХУ, так называемая мозаика Кляйнфельтера.

|Л 1* «я ** »*

*«

л л

л*»

Рисунок 3. Хромосомы жер. Ремингтон, 65,ХХУ.

В литературе лошадей с таким кариотипом до сих пор описано не было. У людей мозаицизм с такой комбинацией половых хромосом встречается в 10% случаев синдрома Кляйнфельтера. Возможно, что такое состояние встречается чаще. Так, Paulsen и соавторы (1968) при обследовании шести индивидов 46,ХУ/47,ХХУ, у которых был выявлен мозаицизм в тестику-лярной ткани, обнаружили, что только у трех из них мозаицизм выявлялся в лимфоцитах (Симпсон Дж., 1985).

Возможно, что у лошадей может наблюдаться такая же картина, и именно поэтому до сих пор не было обнаружено и описано случаев 64,ХУ/65,ХХУ.

В клинической картине у 46,ХУ/47,ХХУ реже, чем у 47,ХХУ индивидов встречается гинекомастия, азооспермия, недоразвитие яичек. Уровень тестостерона выше у 46,ХУ/47,ХХУ пациентов, а в биоптате яичек обнаруживаются зрелые формы сперматозоидов (Симпсон Дж., 1985). Таким образом, недоразвитие одного из семенников у нашего жеребца, его нормальное половое поведение, вполне соответствует клинической картине, характерной для такой мозаики. При работе с данной лошадью хозяевами отмечалась некоторая «туповатость», неусидчивость, что так же может являться следствием хромосомного нарушения. У людей с синдром Кляйнфельтера отмечается умственная отсталость, низкий коэффициент интеллекта (Simpson, 1979).

Полиплоидных клеток у исследуемых животных обнаружено не было.

ВЫВОДЫ

1. В норме кариотип лошади содержит 64 хромосомы: 13 пар мета- и субметацентрических, 18 пар акроцентрических, пара половых хромосом. Первая пара, как правило, самая крупная мета- или субметацентрического строения. Вторая и третья пара - крупные субметацентрики. Хромосомы 4 - 6 пары субметацентрического строения. Хромосомы 7-13 пары - мета-центрического строения. Х-хромосома - крупный метацентрик второй или первый по величиине. У-хромосома - маленький акроцентрик.

2. При сплошном окрашивании достоверно можно определить первую (крупный метацентрик), вторую (крупный субметацентрик) пару хромосом, четырнадцатую пару (крупный акроцентрик) и половую Х-хромосому. Рутинное окрашивание дает возможность анализировать геномные и некоторые структурные нарушения.

3. У лошадей с физиологическими и фенотипическими отклонениями от нормы, хромосомная нестабильность оказалась значительно выше, чем у лошадей в норме. Частота клеток с аберрациями колебалась от 5,2% до 16,6%. Уровень аберраций на 100 клеток находился в пределах от 8,62 до 22,22. У некоторых животных обнаружены кольцевые хромосомы. Полиплоидных клеток не выявлено.

4. У кобыл с нарушениями половых циклов частота хромосомных аберраций оказалась самой высокой по сравнению с жеребцами-крипторхами (Р>0,95) и кобылами с аномальным потомством. Частота метафаз с аберрацииями составила 10,15+/-2,88%. Уровень аберраций на 100 клеток - 15,25+/-3,66.

5. В группе лошадей с отставанием в росте частота хромосомных нарушений выше, чем у животных с нормальным ростом (Р>0,95). Частота клеток с аберрациями у лошадей с отставанием в росте составляет 12,9+/-1,9%, уровень аберраций на 100 клеток - 18.09+/-4,13.

6. Выявлена кобыла с дисбалансом половых хромосом, 2п= 64,ХХ/63,ХО. Соотношение клеток в кариотипе: 64,63% - содержат нормальный 64,XX набор, 35,37% - с отсутствием Х-хромосомы (63,ХО). Кобыла имела фенотипические отклонения от нормы в росте - высота в холке 172 см., против 163 - 165 см. в среднем по породе и нарушения половых циклов.

7. Выявлен жеребец - с аномальным кариотипом, 2п= 64,ХУ/65,ХХУ. Клеток с нормальным мужским кариотипом - 81,25%, клеток с лишней X-хромосомой - 18,75%. Жеребец - абдоминальный крипторх, с нормальным половым рефлексом, плохо обучаемый в работе.

ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПРОИЗВОДСТВУ

1. Лошадей, имеющих отклонения в росте и развитии, с нарушениями половых циклов, рекомендуется проверять на наличие хромосомных аберраций.

2. Осуществлять онтогенетическую аттестацию жеребцов, перед их использованием в воспроизводстве и кобыл перед зачислением в производящий состав.

СПИСОК РАБОТ ОПУБЛИКОВАНЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ:

1. Шараськина О.Г. Особенности кариотипа лошади и использование цитогенетического анализа в диагностике бесплодия //Мат. 58-й науч. конф. молодых ученых и студентов СПбГАВМ. - СПб. - 2004. - С. 81 - 82.

2. Жигачев А.И., Шараськина О.Г. Практическое значение t цитогенетических исследований в коневодстве //Учен. зап. Витебской гос.

академии вет. медицины. - Витебск. - 2004. - Т.40, ч.2. - С. 84 - 86.

3. Жигачев А.И., Богачева Т.В., Шараськина О.Г. Цитогенетический мониторинг при разведении племенных лошадей //Сборник докл. научн.-практич. конференции и координац. совещания, поев. 100-летию со дня рождения Скаткина П.Н. «Искусственное осеменение в коневодстве -истоки биотехнологии в животноводстве». - Дивово. — 2004. - С. 73 - 76.

06-64

Подписано в печать 06.12.2005 Формат 60 х 84 1/16. Бумага офсетная Объем 1 п.л. Тираж 100 экз. Заказ № 39 Издательство СПбГАВМ, Черниговская, 5.

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Шараськина, Ольга Геннадьевна

Введение.

1.Обзор литературы.

1.1. Нарушения плодовитости у лошадей.

1.1.1. Бесплодие лошадей.

1.1.2. Мутации как причины снижения плодовитости.

1.2. Кариотип лошади и хромосомные нарушения.

1.2.1. Нормальный кариотип лошади.

1.2.2. Хромосомные аберрации у лошадей.

1.2.3. Хромосомный полиморфизм у лошадей.

1.2.4. Аномалии половых хромосом у кобыл.

1.2.5. Аномалии половых хромосом у жеребцов.

1.2.6. Псевдогермафродитизм и интерсексуальность.

1.2.7. Хромосомные дефекты при раршх абортах.

1.2.8. Аутосомные трисомии.

1.2.9. Полиплоидия у лошадей.

1.3. Типы и механизмы возникновения хромосомных нарушений.

1.4. Причины хромосомных аберраций.

2. Материал и методика исследований.

2.1. Объект исследований.

2.2. Методы исследования.

3. Результаты собственных исследований.

3.1. Морфометрический анализ хромосомного набора лошадей без физиологических и фенотипических отклонений от нормы.

3.2. Морфометрический анализ хромосомного набора лошадей имеющих физиологические и фенотипические отклонения от нормы.

3.3. Структурные аберрации хромосом у лошадей с физиологическими и фенотипическими отклонениями.

3.4. Геномные мутации у лошадей с физиологическими и фенотипическими отклонениями.

Обсуждение результатов.

Выводы.

Предложения производству.

Введение Диссертация по сельскому хозяйству, на тему "Аберрации хромосом у лошади при нарушениях воспроизводительной функции"

Актуальность проблемы

Еще не прошло и половины столетня как Levan А. & Tjio J.(1956) на человеке, Moorhed et al. (1960) на животных успешно апробировали методику культивирования лимфоцитов периферической крови для получения препаратов хромосом. Однако за эти годы на многих видах млекопитающих выполнены сотни исследований, позволившие на новом уровне познать закономерности функционирования наследственности и изменчивости. По сути дела только с 60х годов XX века было установлено истинное число и морфология хромосом, их репродукция у большинства продуктивных

Гольдман И.Л. и др., 1973, Яковлев А.Ф., 1985) и домашних видов животных, а в последующем выявлены геномные и структурные аберрации в кариотипах.

В нашей стране первые и наиболее масштабные исследования по цитогенетике животных начаты в ВИЖе (Гольдман И.Л.и др., 1973, Гольдман И.Л., Жигачев А.И., 1977) и ВНИИРГЖ (Яковлев А.Ф., Носач А.К., Трофимова Л.В., цит. по А.Ф.Яковлеву, 1985). В первом из них заложены основы ветеринарной цитогенетики, а во втором - молекулярной цитогенетики.

С 80х годов в Ленинградском Ветеринарном Институте (Санкт-Петербургская Государственная Академия Ветеринарной Медицины) были развернуты работы и развито несколько направлений в цитогенетике: популяционная, экологическая и ветеринарная (Жигачев А.И., Никитин Н.С., Черкасов В.В. 1984)

Исследования по цитогенетике выполнялись и в других НИИ и ВУЗах (Стефанова В., 1987, Куликова С.Г., 1992 , Кочнева М.Л., 2005). В качестве объекта для исследований в основном использовали крупный рогатый скот и реже свиней. При этом были получены важные в теоретическом и практическом отношении результаты, которые излагаются в главе «Обзор литературы». К сожалению, цитогенетических исследований на лошади крайне мало как в нашей стране, так и за рубежом (Пименова Т.И., 1987, Жигачев А.И., 1996, Bowling А., 1997, Kuiper H.J.,2001). В тех же немногих работах, которые были выполнены на лошади показано, что цитогенетические методы могут найти применение, прежде всего для выяснения причины нарушения воспроизводительной способности животных (Hainan С., 1982, Жигачев А.И., Богачева Т.В.,1993, Bowling А.Т., 1997, Kuiper HJ.,2001). Безусловно, это имеет особую практическую ценность в племенном коневодстве, если еще иметь в виду биологическое малоплодие и значительный интервал между поколениями у этого вида.

По расчетам ВНИИКоневодства (Калашников В.В., 2003) научно обоснованная потребность в лошадях в стране превышает фактическую численность более чем втрое и составляет 6,2 млн. голов. В связи с этим значение цитогенетических исследований в коневодстве трудно переоценить.

Цель и задачи исследований

Целью работы является изучение кариотипа, частоты и спектра аберраций у лошадей с нарушениями половых циклов, с фенотипическими отклонениями от нормы, с аномальным потомством для обоснования и разработки принципов цитогенетического мониторинга в коневодстве.

Задачи исследований:

- провести морфометрический анализ хромосом лошадей без фенотипических и физиологических отклонений;

- изучить кариотип лошадей с нарушениями половых циклов, с фенотипическими отклонениями от нормы, с аномальным потомством;

- определить показатели генетической нестабильности у лошадей с фенотипическими и физиологическими нарушениями;

- выявить животных с дисбалансом половых хромосом;

- выявить взаимосвязь изменений кариотипа с фенотипическими и физиологическими отклонениями от нормы.

Научная новизна

Впервые получены данные по показателям хромосомной нестабильности у лошадей с нарушениями половых циклов, с фенотипическими отклонениями от нормы, с аномальным потомством.

Приоритетными являются данные о том, что частота хромосомных аберраций у лошадей с физиологическими и фенотипическими отклонениями от нормы значительно выше, чем у лошадей без нарушений.

В результате отбора по фенотипу и физиологическим изменениям, выявлены и описаны животные с дисбалансом половых хромосом: 64,ХХ/63,ХО - мозаика Тернера и 64,ХУ/65,ХХУ - мозаика Кляйнфельтера.

Научная и практическая значимость работы

В результате исследований получены новые данные по частной генетике лошади и ветеринарной цитогенетике.

Полученные данные могут быть использованы: для выявления причин фенотипических отклонений от нормы, нарушений физиологических функций; для цитогенетической диагностики жеребцов и кобыл перед началом племенного использования.

Апробация работы

Основные результаты исследований рассмотрены и обсуждены на отчетах кафедры ветеринарной генетики и животноводства СПбГАВМ в 2002

2005гг., на научных конференциях профессорско-преподавательского состава и t аспирантов СПбГАВМ в 2002 - 2005гг., на Всероссийской научно-практической конференции «Искусственное осеменение в коневодстве -истоки биотехнологии в животноводстве» (ВНИИКоневодства РАСХН, 2004).

Структура и объем работы

Диссертация изложена на 103 страницах и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов исследования и

Заключение Диссертация по теме "Разведение, селекция, генетика и воспроизводство сельскохозяйственных животных", Шараськина, Ольга Геннадьевна

1. в норме кариотип лошади содержит 64 хромосомы: 13 иар мета- и

субметацентрических, 18 пар акроцентрических, иара иоловых хромосом. Первая иара, как иравило, самая круиная мета- или субметацешрического

строения. Вторая и третья иара - круииые субметаиеитрики. Хромосомы 4 - 6

иары субмет'ацеитрического строения. Хромосомы 7 - 13 иары —

метацентрического строения. Х-хромосома — круиный метацентрик второй или

иервый ио величине. У-хромосома — маленький акроцентрик. 2. При СШ10ШН0М окрашивании достоверно можно определить нервую

(круиный метацентрик), вторую (круиный субметацентрик) иару хромосом,

четырнадцатую иару (круиный акроцентрик) и иоловую Х-хромосому. Рутинное окрашивание дает возможность анализировать геномные и

некоторые структурные нарушения. 3. У лошадей с физиологическими и фенотииическими отклонениями от

нормы, хромосомная нестабильность оказалась значительно выше, чем у

лошадей в норме. Частота клеток с аберрациями колебалась от 5,2% до 16,6%. Уровень аберраций на 100 клеток находился в пределах от 8,62 до 22,22. У

иекоторых животных обнаружены кольцевые хромосомы. Полиплоидных

клеток не выявлено. 4. У кобыл с нарушениями иоловых циклов частота хромосомиых

аберраций оказалась самой высокой по сравнению с жеребцами-крипторхами

(Р>0,95) и кобылами с аномальным потомством. Частота метафаз с

аберрациями составила 10,15±2,88%. Уровень аберраций на 100 клеток -

15,25±3,66. 5. В группе лошадей с отставанием в росте частота хромосомных

нарушений выше, чем у ЖРШОТНЫХ С нормальным ростом (Р>0,95). Частота

клеток с аберрациями у лошадей с отставанием в росте составляет 12,9±1,9%,

уровень аберраций на 100 клеток— 18,09±4,13. 6. Выявлена кобыла с дисбалансом половых хромосом, 2п= 64,ХХ/63,ХО.

Соотношение клеток в кариотипе: 64,63% - содержат нормальный 64,ХХ

набор, 35,37% - с отсутствием Х-хромосомы (63,ХО). Кобыла имела

фенотипические отклонения от нормы в росте - высота в холке 172 см., против

163 — 165 см. в среднем по породе и нарушения половых циклов. 7. Выявлен жеребец - с аномальным кариотином, 2п= 64,ХУ/65,ХХУ.

Клеток с нормальным мужским кариотипом — 81,25%, клеток с л1Ш1ней X-

хромосомой — 18,75%. Жеребец — абдоминальный крипторх, с нормальным

половым рефлексом, плохо обучаемый в работе. ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПРОИЗВОДСТВУ

I. Лошадей, имеющих отклонения в росте и развитии, с нарушениями

ноловых циклов, рекомендуется нроверять на наличие хромосомных

аберраций. 2. Осуществлять цитогенетическую аттестацию жеребцов, иеред их

иснользованием в воспроизводстве и кобыл неред зачислением в

цроизводящир состав.

Библиография Диссертация по сельскому хозяйству, кандидата биологических наук, Шараськина, Ольга Геннадьевна, Санкт-Петербург

1. Бочков Н.П., Захаров А.Ф., Иванов В.И. Медицинская генетика. - М. — 1984.-366с.

2. Бочаров А.И. Акушерство, гинекология и искусственное осеменение сельскохозяйственных животных. Л. - 1967. - С. 7 - 41.

3. Богачева Т.В. Применение цитогенетики в селекции животных и для оценки мутагенных факторов//Автореферат дисс. . к.б.н. — СПб. — 1995. -20 с.

4. Бродский В.Я., Урываева И.В. Клеточная полиплоидия. Пролиферация и дифференцировка. М.: Наука. - 1981. - 257с.

5. Визнер Э., Виллер 3. Ветеринарная патогенетика. — М. 1979. — 425с.

6. Винтер, цит. по Визнеру и Виллеру (1979) (5)

7. Гольдман И.Л., Живалев И.К. Сравнительная характеристика кариотипа крупного рогатого скота различных пород //Сб. науч. работ ВИЖ. -1973.-Т. 34.-С. 48-50.

8. Гольдман И.Л., Жигачев А.И. Цитогенетическое исследование 23 случаев врожденных аномалий крупного рогатого скота //Цитология и генетика. 1977. №1. - С. 80 - 82.

9. Графодатский А.С., Раджабли С.И. Хромосомы сельскохозяйственных и лабораторных млекопитающих. Новосиб. - 1988. -128с.

10. Глуховский и др. (1970), цитата по Визнер Э. и Виллер 3

11. Государственная Книга Племенных Лошадей Тракененской Породы. Т.6. Ч. 1. Жеребцы. - ВНИЖ. - 2001. - 436с.

12. Государственная Книга Племенных Лошадей Тракененской Породы. -Т.6. 4.2. Кобылы. — ВНИИК.-2001. -610с,

13. Государственная Книга Племенных Лошадей Чистокровной Арабской Породы. Т.8. - ВНИИК. - 2000. - 431с.

14. Давыдов В.У., Андреев Г.М., Смышляев И.В. Воспроизводство лошадей. СПб. - 2000. - 176с.

15. Демин Ю.С., Сафронова Л.Д. Цитогенетический MOHiiiOpHhi В животноводстве //Изв. АН СССР, сер. биол. 1984. - 5. - С. 702 - 715.

16. Демин Ю.С., Пименова Т.И. Цитогенетический анализ спонтанного мутационного процесса у лошадей //Генетика. 1985. - Т. 21. - №6. - С. 1066 -1067.

17. Демин Ю.С., Пименова Т.И. Анализ естественного мутирования хромосом у лошадей //1-ая Всезоюзная конференция по цитогенетике сельскохозяйственных животных: Тез. докладов. — М., 1985.- С. 25 — 26.

18. Джапаридзе С.Т., Гольдман И. Л., Паршутина А. Л. О цитогенетических причинах нарушения воспроизводительной способности свиней //С-х. биология. 1988. - №4. - С. 127 - 129.I

19. Жигачев А.И., Яковлев А.Ф., Носач А.К. Цитогенетический контроль племенных быков //Молочное и мясное скотоводство. 1982. - №6.I

20. Жигачев А.И., Никитин Н.С., Черкасов В.В. Робертсоновская транслокация 1/29 аутосом и ее связь с нарушениями репродуктивных функций и болезнями крупного рогатого скота //Сборник научных трудов ЛВИ. 1983. Вып. 75.-С. 40-42.

21. Жигачев А.И., Никитин Н.С., Черкасов В.В. О частоте транслокаций1/29 хромосом в спонтанной выборке крупного рогатого скота //Докл.ВАСХНИИЛ. 1984. - №4. - С. 21 - 22.

22. Жигачев А.И. Генетический груз и мониторинг вредных мутаций в популяциях крупного рогатого скота//Автореф. дисс. . д. б. н. Л. — 1986. — с. 38.

23. Жигачев А.И., Курчанов Н.А., Никитин Н.С., Марусяк В.Г. Цитогенетические методы в практике животноводстве //Вестник с-х науки. -1988.- №9. -С. 62-69.

24. Жигачев А.И., Курчанов Н.А. Цитогенетический анализ кариотипа домашней свиньи //Сельскохозяйственная биология. 1989. - №4. - С. 8 - 11.

25. Жигачев А.И., Богачева Т.В. Моносомия в системе половых хромосом (2пЧЗЗ, ХО) у бесплодных кобыл //Морфология, физиология и патология у животных. СПб. - 1993. С. 60 - 62.I

26. Жигачев А.И., Баланин В.И., Вшить Д.В., Вилль Э.В., Лукъяново И.С., Манжола А.П., Семенов Б.С., Хохрин С.Н. Все о лошади. СПб. - 1996. 525с.

27. Завертяев Б.П., Красота В.Ф., Меркурьева Е.К. Биотехнология в1.'животноводстве. М. - 1994.

28. Задорожин П.А. Наследственность в патологии животных. — Уссурийск ПСХИ. 1993. 14с.

29. Исследование хромосом с-х. животных: Методические рекомендации / Ред. А.Ф. Яковлева. Л.:ВРЩИРГЖ. - 1977. - 65с.

30. Калашников В.В. Прошлое, настоящее и будущее коневодства //Зоотехния. 2003. №11. - С. 13 - 18.

31. Куликова С.Г. Трисомии аутосом и их фенотипическое проявление у крупного рогатого скота //Проблемы селекции сельскохозяйственных животных. 1997. - С. 95 - 103.

32. Куценко С.А. Основы токсикологии //Тез. доклад, съезда токсикологов России. М. - 2003. — С. 11-12.I

33. Коневодство: справочник /Сост. Релизов А.А. М. - 1992. - 192с.

34. Коченева И.Л. Мониторинг популяций сельскохозяйственных животных животных в разных экологических условиях //Автореф. дисс. .д.био^.наук. Новосибирск. - 2005. - 25с.

35. Лазюк Г.И., Николаев Д.Л., Хмель Р.Д. Облучение населения Беларуси вследствие аварии на Чернобыльской АЭС и динамика врожденных пороков развития //Международный журнал радиационной медицины. — 1999. -№1. С.63 — 70.

36. Лобашев М.Е. Генетика. Л. — 1969. - 752с.

37. Малхасян М.А., Майтесян Е.С., Камалян Р.Г. Цитогенетическое исследование хромосомных аберраций в лимфоцитах лошадей //Физиологические аспекты тренировки лошадей. ВНИИК. - 1989. - С. 254 -257.

38. Маудерер, 1957 по цит. ВизнерЭ. и ВиллерЗ.(1979) (5)

39. Мюртцинг А. Генетические исследования. Иностранная литература. - 1963.-453с.

40. Осипова Н.А., Петухов В.Л., Магер С.Н., Кочнева М.Л. Спонтанная изменчивость хромосом и плодовитость свиней в разных экологических зонах //В кн. Панова Б.Л., Петухова В.Л. «Проблемы селекции с-х животных». — Новосибирск. 1997. - С. 93 - 95.

41. Прокофьева-Бельговская А.А. Гетерохроматические районы хромосом. -М. 1986. -431с.

42. Пименова Т. И. Хромосомный контроль в коневодстве /'/Популяционная изменчивость вида и проблема охраны генофонда млекопитающих: Тез. докладов Всесоюзного совещания. — М., 1983. — С. 154 —I155.

43. Пименова Т.И. Изучение изменчиврсти хромосом у лошадей //Третья национальная конференция по цитогенетике. Пловдив - Болгария, 1984. - С. 284-287.

44. Пименова Т.И. Цитогенетика в коневодстве //Коневодство и конный спорт. 1985. - №4. - С. 31 - 32.

45. Пименова Т.И. Хромосомные аномалии у домашней лошади //С.-х. биология. 1985. - №12. - С. 63 - 66.

46. Пименова Т.И. К вопросу цитогенетической диагностике бесплодия у лошадей //Цитогенетика и биотехнология. — JI. — 1989. С. 88 - 89.

47. Пименова Т.И. Изучение изменчивости хромосом у лошадей //Автореферат дисс. на соиск. степ, к.б.н. -М. 1989.- 16с.

48. Симпсон Дж., Глобус М.С., Мартин Э.О., Сарто Г.Е. Генетика в акушерстве и гинекологии. М. — 1985. - 520с.

49. Смирнов O.K., Гольдман И.Л., .Живалев И.К., Кракоеевич А.Н. Цитогенетическое тестирование крупного рогатого скота в селекционных целях //Доклады академии с-х наук им. В.И.Ленина. 1987. - №1. - С. 29-30.

50. Студенцов А.П. Ветеринарное акушерство и гинекология. — М. —1961.

51. Стефанова В.Н. Спонтанные транслокации у свиней на современном этапе исследований //Цитогенетика и молекулярная генетика с-х животных. -Л.- 1987.-С. 36-49.

52. Смирнов O.K., Гольдман И.Л., Живалев И.К., Кленовицкий П.М., Коновалов М.А., Розикова Е.А., Черекаева Е.А. Цитогенетика в селекции животных //Животноводство. 1984. - №9. - С. 17-20.

53. Турков В.Д., Шелепина Г.А., Вишняков А.А., Клицов С.В. Цитогенетический контроль в клеточной инженерии и экологическом мониторинге //АПК Достижения науки и техники. 1990. - №8. - С.20 - 21.

54. Федотов П.А. Коневодство. М. - L989. - 272с.

55. Федин Л.П., Барский И.Я. Микрофотография. Л. - 1971. -201с.

56. Хиппен (1949), цит. по ВизнеруЭ. и ВиллеруЗ (5)

57. Эрнст Л.К., Жигачев А.И. Профилактика генетических аномалий крупного рогатого скота. Л. - 1990. - 240с.

58. Эрнст Л. К. Проблемы селекции и биотехнологии сельскохозяйственных животных. М. - 199^. - 359с.

59. Яковлев А.Ф. Проблемы и перспективы использования достижений молекулярной генетики в животноводстве //С-х биология. — 1983. №2. - С. 3 -10.

60. Яковлев А.Ф. Цитогенетическая оценка племенных животных. М. -1985.-256с.

61. Abe S., Miyake Y., Kageyama S.,Watanabe G.,Taya K.,Kawakura K. Deletion of the Spy region on the Y-chromosome detected in a case of equine gonadal hypoplasia (XY femail) with abnormal hormonal profiles //equine Vet. Jour. -1999.-4.-P. 336-338.

62. Basrur P.K., Kanagawa H., Gilman J.P.W. Further studies on the cell populations of an intersex horse //Journal of Comparative Medicine. 1970. - 34. -P. 294-298.

63. Bjork G., Evers K.E., Hansen H.J., Henricson B. Congenital cerebellar ataxia in the Gotland pony breed // zentrablatt for Veterinarmededizin. Reihe A (Berlin). 1973. - 20. - P. 341 - 354.

64. Blue M.G. A cytogenetical study of prenatal loss in the mare //Theriogenology 1981. - 15. - P. 295 - 309.

65. Bowling A.T. Horse genetics. USA. - 1997. - 196p.

66. Bowling A.T., Millon L. Two autosomal trisomies in the horse: 64,XX,-26+t (26q26q) and 65,XX,+ 30 //Genome.- 1990. 33. - P. 679 - 682.

67. Bowling A.T., Millon L., Hughes J.P. An update of chromosomal abnormalities in mares //Journal of Reproduction & Fertility. 1987. - Suppl.35. - P. 149- 155.

68. Bouters R., Vandeplassche M., DeMoor A. An intersex (male pseudohermaphrodite) horse with 64,XX/65,XXY mosaicism //Equine Vet. Jour. -1972.-4.-P. 150- 153.

69. Bielanski W., Kleczkowska A., Tischner M. Porownawcze badania cytigenetyczne rodzicow I rodzenstwa zrediecia z rzekomym hermafrodytyzmen meskim //Med. Wet. 1980. - R. 36. - №8. - P. ,492 - 494.

70. Bruere A.N., Blue M.G., Jaine P.M. Preliminary observations on the occurrence of the equne XO syndrome //New Zealand Vet. Jour. — 1978. — V.26. -№6.-P. 145- 146.

71. Braun U. Chromosomal bedingte intersexualitat bei rind, schaf und pferd //Tierarztliche Umschau. 1987. - №10. - P. 828 - 832.

72. Buckland R.A., Fletcher J.M., Chandley A.C. Characterization of thedomestic horse karyotype using G- and C-bending techniques //Experientia. 1976.i-32.-P. 1146-1149.

73. Buoen L.C., Zhang Т.О., Ruth G.R., Weber A.F., Kittleson S.L. Sterility associated with an XO karyotype in a miniatyre horse mare //Equine Vet. Jour. -1993.-2.-P. 164- 165.

74. Bugno M., Klukowska J., Slota E., Tischner M., Switonski M. A sporadic case of the sex-reversed mare (64,XY; SRY-negative): molecular and cytogenetic studies of Y-chromosome /Aberiogenology. 2003. - V.59. - №7. - P. 1597 - 1603.

75. Constant S.B., Larsen R.E., Asbury A.S., Buoen L.C., Mayo M. XX male syndrome in cryptorhid stallion //Journal of Veterinary Medical Assosiation. -1994. -205.-P. 83-85.

76. Clmdley A.C., Fletcher J., Rossdale P.D., Peace C.K., Ricketts S.W., McEnery R.J., Throne J.P., Short R.V., Allen VV.R. Chromosome abnormalities as a cause of infertility in mares //Journal of Reproduction and Fertility. 1975. - Supp. 23.-P. 377-383.

77. Coates J.W., Schmuts S.M., Rousseaux C.G. A survey of malformed aborted bovine fetuses, stillbirth and nonvilable neonates for abnormal karyotypes //Can. Jour, of Vet. Res. 1988. - 52. - P. 258 - 263.

78. Cox J.E. Developmental abnormalities of the male reproduction tract //In McKinnonA. Equine reproduction. USA. - 1 ^93. - P. 895 - 904.

79. Cortes D. Cryptorchidism: aspects of fertility and neoplasm //Horm. Res. -2001.-55.-P. 113-116.

80. Cribiu E.P. Cariotype normal et anomalies chromosomiques du cheval domestique //Recueil. de Med. Vet. 1984. - 160. - P. 131 - 139.

81. DeBowes R.M., Leipold H.W., Terner-Beatty M. Cerebellar abiotrophy //Vet. Clinics of North America: Equine Practice. 1987. - 3. - P 345 - 352.

82. Dunn, И.О., McEntee, K., Hansel, W. Diploid-triploid chimerism in a bovine true hermaphrodite // Cytogenetics. 1970. - 9. - P. 245 - 249.

83. Dunn H.O., Vaughan J.T., McEntee K. Bilaterally cryptorchid stallion with female karyotype //Cornell Vet. 1974. - V.64. r №2. - P. 265 - 275.

84. Dunn H.O., Smiley D., Duncan J.^., McEntee K. Two equine true hermaphrodites with 64,XX/64,XY and 63,X0/64,XY chimerism //Cornell Veterinarian. 1981. - 71. - P. 123 - 135.

85. Duzcan, Atmaca M., Cetin G., Bagci H. Cytogenetic studies in patients with reproductive failure //Acta. Obstet. Gynecol. Scand. 2003. - 82. - P. 53 - 56.

86. Farag I.M., Mona Abdel A. Cytogenetical study in domestic Egyptian Arabian horses //Jour. Egypt Ger. Soc. Zool. 1993. - 12. - P. 345 - 352.

87. Glujiovsch N., Bistriceanu M., Suciu A. A case of intersexuality in the horse with type 2A+XXXY chromosome formula //British Vet. Jour. 1970. -V.126. - №10. — P. 522-525.

88. Gerneke W.H. & Coubrough R.I. Intersexuality in the horse //Onderstepoort Jour, of Vet. Research. 1970. - 37. - P. 211 - 216.

89. Gustavsson I. Cytogenetic analysis of cattle chromosomes, current utilization and speculation of fixture application //Ann. De Gen. et de Select. Animate. 1977. - V.9. - №4. - p. 459 - 462.

90. Hare W.C.D., Singh E.L. Cytogenetics in animal reproduction //Farnham Royal.- 1979.-96.

91. Hainan C.R. Sex chromosome mosaicism and infertility in mares //The Veter.record. 1985. - V. 116. №20. - P. 542 T 543.

92. Haynes S.E., Reisner A.H. Cytogenetics and DNA analyses of equine abortion //Cytogenetics and Cell Genetics. 1982. - 34. - P. 204 - 214.

93. Hayes H.M. Epidemiological features of 5009 cases of equine cryptorchidism //Equine Vet. Jour. 1986. - 18. - P. 467 - 471.

94. Harrison L. Equine disease quaterty. USA. - 1996.

95. Hinrichs K., Riera F.L., Klunder L.R. Establishment of pregnancy after embryo transfer in mares with gonadal dysgenesis //Jour, in Vitro Fert. Embryo Transf. 1989. - №5. - P. 305 - 309.

96. Hughes J.P., Benirschke K.,Kennedy P.C., Trommershausen-Smith A. Gonadal dysgenesis in the mare //Jour, of Reprod. and Fert. — 1975. —Suppl. 23. — P. 385 390.

97. Hughes J.P., Kennedy P. XO-gonadal dysgenesis in the mare (report of two cases) //Equine Vet. Jour. 1975. - 7. - P. 109 - 112.

98. Hughes J.P., Trommershausen-Smith A. Infertility in horses associatedwith chromosomal abnormalities //Austr. Vet. Jour. 1977. - №6. - P. 253 - 257.i

99. Hughes J.P. Sex chromosome abnormalities //Jour, of Repr. And Fert. Suppl. 1982. - 32. - P. 273 - 275.

100. Huston J., Hasthorpe S., Heyns C. Anatomical and functional aspects of testicular desent and cryptorchidism //Endocr. Ver. 1997. - 18. - P. 259 - 280.

101. Husmann D.A. Cryptorchidism problems extrapolating experimental animal data undesonded testicle //Jour. Urol. - 1998. - 159. - P. 1039 - 1040.

102. Hultgren B.D. lleocolonic aganglionosis hi white progeny of overo spotted horses //Jour, of Am. Vet. Med. Assoc. 1982. - 180. - P. 289 - 292.

103. Hook (1978) цит по Симпсону Дж. (50)

104. Kent M.G., Shoffner R.N., Buoen L., Weber A.F. XY sex-reversal syndrome in the domestic horse //Cytogenetics and Cell Genetics. — 1986. 42. - P. 8-18.

105. Kieffer N.V., Burns S.J., Judge N.G. Male pseudo-hermaphroditism of the testicular feminizing type in a horse //Equine Vet. Jour. — 1976. — 8. P. 38 - 41.

106. Kopp E., Mayr В., Czaker R., Schleger W. Nucleolus organizer regions in the chromosomes of the domestic horse //Jour, of Heredity. 1981. - V.72. - №5. -P. 357-358.

107. Koch P., Fisher H. Die Oldenburger Fohlenataxie als Erbkrankheit //Tierarztliche Umschau. 1951. - 6. - P. 158 - 159.

108. Kubien E.M., Pozor M., Tischner M. Clinical, cytogenetic and endocrine evaluation of a horse with a 65,XXY karyotype //Equine Vet. Jour. 1993. - 24. - P. 333-335.

109. Kiibein E., Tischner M. Reproductiye success of a mare with a mosaic karyotype 64,XX/65,XX,+30 //Equine Vet. Jour. 2002. - 34. - P. 99 - 100.

110. Leyan A., Fredga K., Sandberg A. Nomenclature for centromeric position on chromosomes //Hereditas. 1964. - 52. - P.201.

111. Long S.E. Chromosome anomalies and fertility in the mare //Equine Vet. Jour.- 1988.-2.-P. 89-93.

112. Long S.E. A tandem translocation in the horse //11th European Colloq. on Cytogen. of Domest. Anim. Copenhapen. - 19,94. - P. 92 - 94.

113. Loida L. Sexual differentiation in relation to sex chromosome constitutioniin cattle and swine //Cytogenetics of animals. 1989. - P. 257 - 260.

114. Leipold H., DeBowes R., Bennelt S., Cox J., Clem M. Cryptorchidism in the horse: genetic implications //Proc. Ann. Cony. Of AAEP. 1986. - 31. - P.579 -589.

115. Leipold H., Schalles R. Genetic defects in cattle: transmission and controle //Vet. Med. small Anim. Clin. 1977. - V.72. - № 1. - P. 80 - 85.

116. Leipold, H.W., Brandt, G.W., Guffy, M. and Blauch, В. Congenital atlanto-occipital ftision in a foal // Vet. Med.: Small An. Clin. 1974. - 69. - P. 1312 -1316.

117. Makinen A., Katila Т., Anderson M., Gustavson I. Two sterole stallions with XXY-syndrome //Equine Vet Jour. 2000. - 32. - P. 358 - 360.

118. Makinen A., Katila Т., Kuokkanen fyl. XO syndrome in the marc //NordiVet. Med. 1986. - B.38. - №1. - P. 16 - 21.

119. Miyake Y.I., Ishikawa Т., Kawata K. Three cases of mare sterility with sex-chromosomal abnormality (63,XO) //Zuchtygiene. 1979. - 14. - P. 145 - 150.

120. Moreno-Millan M., Delgado Bermejo J., Lopes Castillo G. An intersex horse with X chromosome trisomy //Vet. Rec. 1989. - 124. - P. 169 - 170.

121. Mcllwraith C., Owen R., Basrur P. An equine cryptorchid with testicular and ovarian tissues //Equine Vet. Jour. 1976. - 8. - P. 156 - 160.

122. McEntee K. Scrotum and testis: anatomy and congenital anomalies //In Reproductive pathology of domestic animals. Canada. - 1990. - P. 224 - 251.

123. McCabe E. Overo lethal with foal syndrome: equine model etoganglionic mega colon (Hirschsprung diseasr) //Am. Jour. Med. Gen. 1990. - 36. - P. 336 -340.

124. Mayhew I.G., Brown C.M., Stowe H.D., Trapp A.L., Derksen F.J., Clement S.F. Equine degenerative myeloencephalopathy: a vitamin E deficiency that may be familial //Jour, of Vet. Intern. Med. 1987. - 1. - P. 45 - 50.

125. Mayhew I.G., Watson A.S., Heissan J.A. Congenital occipito-atlanto-axial malformations in the horse //Equine Vet. Jour. 1978. - 10. - P. 103 - 113.

126. Moorhead P.S., Nowell P.S., Mellman W.I. Chromosome preparations of leucocytes cultured from human peripheral blood //Exper. Cell Res. I960. - V.20. -P. 613-616.

127. Palmer A.C., Blakemore W.F., Cook W.R., Piatt H., Whitwell K.E. Cerebellar hypoplasia and degeneration in the young Arab horse: clinical and neuropathological features //Vet. Record. 1973, - 93. — P. 62 - 66.

128. Pailhoux E., Cribiu E., Parma P., Catinot C. Molecular analysis of an XY mare with gonadal dysgenesis //Hereditas. 1995. - V. 122. - P. 109 - 112.Paulsen и др. (1968) цит. по Симпсону Дж.

129. Power М.М. Equine half sibs with an unbalanced X;15 translocation or trisomy 28 //Cytogen. and Cell Genet. 1987. - 45. - P. 163 - 168.

130. Power M.M. Y chromosome length variation and its significance in the horse //Jour, of Heredity 1988. - 79. - P. 311 - 313.

131. Power M.M. The first description of a balanced reciprocal translocation t(lq;3q) and its clinical effects in mare //Equine Vet. Jour. 1991. - 23. - P. 146 — 149.

132. Pravochenski R. Kon slaski //Roczniki nauk rolniczych. 1953. - T.66. -№2. - p.5 — 22.

133. Pulos L., Hutt F. Lethal dominant with in horses //Jour. Heredity. 1969. -V.60.-№2.-P. 59-63.

134. Richer C.L., Power M.M., Klunder L.R., McFeely R.A., Kent M.G. Siandart cariotype of the domestic horse //Hereditas. 1990. - 112. - P. 289 - 293.

135. Ryder O.A., Epel N.C., Benirschke K. Chromosome banding studies of the Equidae //Cytogen. and Cell Genet. 1978. - 20. - P. 323 - 350.

136. Schneider J.E., Leipold H.W. Recessive lethal white in two foals //Jour, of Equine Med. and Surg. 1978. - 2. - P. 479 - 482.

137. Smith A.T. Lethal white foals in mating of overo spotted horses //Theriogenology. 1977. - 8. - P. 303 - 312.

138. Schneider, J.E. and Leipold, H.W. Recessive lethal white in two foals // Jour, of Equine Med. Surg. 1978. - 2. - P. 479 r 482.

139. Sharp A.J., Wachtel S.S., Benirschke K. H-Y antigen in a fertile XY female horse//Jour, of Rep. and Fert. 1980.-58. - P. 157- 160.

140. Simpson J.L. Gonadal dysgenesis and sex chromosome abnormalities: phenotypic kariotypic correlations /Яn Vallet H., Porter I. Genetic mechanisms of sexual development. USA. - 1979. - P. 365 - 405.

141. Trommershausen-Smith A., Hughes J.P., Neely D.P. Cytogenetic and clinical findings in mares with gonadal dysgenesis //Jour, of Rep. Fert. Suppl. -1979.-27.-P. 276.

142. Vandeplassche M., Spincemaille J., Bouters R. Die zystoseEierstocksdegeneration bei der sau //Dt. Tierarztl. Wschr. 1971. - J.78. - №4. - S. 91-93.

143. Vandenbroeck M., Maghinrogister G. Anatomical and histophysiological particularities of cryptochidism: unilateral cryptochidism in the pig //Ann. Med. Vet. -1995.-139.-P. 167-174.

144. Vonderfecht S.L., Bowling A.T., Cohen M. Congenital intestinal aganglionosis in white foals //Vet. Pathology. 1983. - 20. - P. 65 - 70.

145. Wilier S., Wilier H., Wiesner E. Chromosomenaberrationen beim PferdMonatshefTe fur Veterinar medizin. 1981. - 36. - №10. -P. 386 - 394.i

146. Walker K.S., Bruere A.U. XO condition in mares //New Zeal. Vet. Jour. -1979.-27.-P. 18-19.

147. Watson A.G., Mayhew I.G. Familial congenital occipitoatlantoaxial malformation (OAAM) in the Arabian horse //Spine. 1986. - 11. - P. 334 - 339.

148. Weste S., Penington D.G. Fluorometric measurement of DNA in bone narrow celle //Jour. Histochem. Cytochem. 1982. - V. 20. - P. 627 - 633.