Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

Использование метода культуры ткани в селекции гречихи

ВАК РФ 06.01.05, Селекция и семеноводство

Автореферат диссертации по теме "Использование метода культуры ткани в селекции гречихи"

На правах рукописи 1>арсуко»а Клена Николаевна

РГ Б 0

11 дпр

Использование метода культуры ткани в селекции гречихи

06 01.05 - селекция и семеноводство

Автореферат

диссертации на соискание учёной степени кандидата сельскохозяйственных наук

Благовещенск

2000

Работа выполнена в Приморском научно-исследовательском институте сельского хозяйства в 199-/*-1999 гг.

Научные руководители: кандидат сельскохозяйственных наук П.П. Фисенко; кандидат сельскохозяйственных наук Л.М. Моисеенко

Официальные оппоненты: доктор сельскохозяйственных наук, профессор И.М. Шиндин; кандидат сельскохозяйственных наук В.П. Соловьев

Ведущая организация - Всероссийский научно-исследовательский институт сои

Защита состоится 25 апреля 2000 года в <10 часов на заседании диссертационного совета К 120.07.02 при Дальневосточном государственном аграрном университете по адресу: 675005, г. Благовещенск, ул. Политехническая, 86

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке ДальГАУ

Автореферат разослан марта 2000 г

Ученый секретарь диссертационного совета

к.с.-х.н.

О.В. Щегорец

Общая характеристика работы

Актуальность темы. Важное место в обеспечении населения полноценным питанием отводится гречихе, как незаменимой диетической культуре.

В Приморском крае под гречихой ежегодно, в среднем, занято около 20 тыс. га. Выращивание ее экономически выгодно уже при урожайности 3-5 ц/га. Однако производство гречихи в последние годы находится на низком уровне при средней урожайности в крае 5-8 ц/га. В лучших хозяйствах получают по 10-12 ц/ra. Причины значительных отклонений потенциальной семенной продуктивности от реальной заключены в высокой зависимости этой культуры от технологии возделывания, а также в биологических и физиологических особенностях данной культуры (Лаханов А.П., 1997). Районированные в крае сорта Приморская 7 и Изумруд имеют высокие потенциальные возможности по продуктивности, но характеризуются узким генетическим потенциалом устойчивости к неблагоприятным факторам среды, вносящим основной вклад в снижение урожайности. Отсутствие в генофонде культуры генотипов с высокой устойчивостью к постоянно изменяющимся условиям произрастания обуславливает актуальность создания нового исходного материала, обладающего повышенным потенциалом адаптивности.

В создании новых сортов гречихи с измененной природой важное место должны занять методы биотехнологии. Их внедрение в селекцию целого ряда культур уже дало положительные результаты: созданы сорта риса, ячменя, озимой пшеницы (Шевелуха B.C., 1986).

Метод культуры клеток и тканей гречихи довольно широко разработан зарубежными и отечественными исследователями: создана методическая база, определены биотехнологические подходы к ее селекции (Ya-mane Y., 1974; Srejovic V., NeSkoviC М., 1981, 1985; Румянцева H.И., 1990 и

др.). Но до сих пор не созданы сорта на основе метода биотехнологии. В этой связи использование метода культуры ткани в селекционной работе с гречихой приобретает особую актуальность и практическое значение.

Цель и задачи исследований. Цель данной работы заключалась в изучении метода культуры ткани гречихи и оценке полученных регене-рантных линий по схеме селекционного процесса в условиях Приморского края. Были поставлены следующие задачи:

1) изучить процесс каллусогенеза и наработать каллусные линии из различных эксплантов, районированных сортов;

2) реализовать основные пути морфогенеза в каллусных культурах (органогенез и соматический эмбриогенез);

3) провести микроклонирование и укоренение регенерантов in vitro;

4) осуществить перевод пробирочных растений в нестерильные условия;

5) оценить потомство регенерантов по наиболее ценным селекцион-но-хозяйствешцлм признакам в полевых условиях, выявить ценные для се: лекции сомаклональные варианты.

Научная новизна исследований. Впервые в зоне Дальнего Востока проведено изучение метода культуры тканей гречихи в прикладном аспекте. Получены каллусные культуры из различных эксплантов местных сортов. Определены экспланты, обладающие высокой каллусообразующей способностью. Выбраны оптимальные варианты питательных сред для инициации каллуса, индукции и пролиферации эмбриоидов. Реализованы и исследованы основные пути морфогенеза гречихи в культуре in vitro: органогенез и соматический эмбриогенез. Отработана техника одновременного микроразмножения и укоренения растеннй-регенерантов и перевод их в почву.

Впервые в полевых условиях селекционного и контрольного питомников дана оценка шести поколений регенерантов гречихи по основным

хозяйственно-полезным признакам.

Практическая значимость работы. Впервые применен в практической селекции гречихи метод культуры ткани. Полученные с его использованием регенерантные линии гречихи расширяют генетическое разнообразие исходного материала за счет изменчивости адаптивности, продуктивности, крупности зерна, форме и окраске плодов и др.

Результаты исследований по регенерации сортов гречихи, районированных в Приморском крае, могут быть использованы селекционерами при создании новых генотипов гречихи.

Установлены тесные корреляционные взаимосвязи между продуктивностью растения и фенотипическимп признаками толщина первого междоузлия, число соцветий с плодами. Рекомендуется отбор высокопродуктивных генотипов гречихи проводить с их учетом.

Из популяции регенерантов в результате отбора получены три линии гречихи, которые изучаются в контрольном питомнике в конкурсном сортоиспытании. Две линии, с измененной окраской и формой плодов, могут быть использованы в качестве генетических маркеров в биологических и генетических исследованиях.

Апробация работы. Материалы диссертации были представлены на научной сессии Общего собрания Дальневосточного отделения РАСХН «Научное обеспечение АПК Дальнего Востока» (Уссурийск, 1993), научной сессии годичного собрания ДВ НМЦ РАСХН (Уссурийск, 1999), конференции молодых ученых ПримНИИСХ (Уссурийск, 1999).

Публикации. Основные положения диссертации изложены в шести научных статьях.

Структура н объем диссертации. Диссертация изложена на 141 странице машинописного текста. Состоит из введения, обзора литературы, описания объектов и методов исследования, трех глав с экспериментальными данными и их обсуждением, выводов, рекомендаций для селек-

ционной практики, списка литературы и семи приложений. Содержит 22 таблицы, 22 рисунка. Список литературы представлен 265 работами, из которых на иностранных языках -41.

Объект и методы исследования

В качестве объекта исследований использовались сорта гречихи, районированные в крае - Приморская местная и Изумруд, а также гомо-стильная длинностолбчатая форма, полученная во ВНИИЗБК (Фесен-коН.Н., 1981).

Экспериментальная работа проводилась в два этапа: лабораторный состоял в разработке метода культуры ткани гречихи и выполнялся в лаборатории биотехнологии (1991-1994 гг.); полевой заключался в оценке ре-генерантов в селекционных питомниках лаборатории зерновых и крупяных культур (1994-1999 гг.).

Методика исследований с культурой ткани гречихи

На этапе введения в культуру in vitro в качестве первичных экснлан-тов использовались: незрелые зародыши на разных стадиях развития, семядоли незрелых зародыше», семядоли п ««¡¡окоы.ш нсдсльних jCviini • ских проростков. Поверхностная стерилизация объектов осуществлялась в два эгапа, согласно рекомендации Мазур В.А., растворами 2%-ного и 10%-ного хлорамина и 70%-ного этанола.

Пробирки с эксплантами гречихи культивировались в течение 5-10 дней в темноте при температуре 23±2°С до образования первичного каллуса (Мазур В.А., 1983), который пересаживали на среды для поддержания роста каллусной ткани. Пассажи каллусных культур на свежие среды проводили через 25-35 дней.

Каллусогснез, соматический эмбриогенез и микроклональное раз-

б

множение гречихи изучались на питательных средах, предложенных Ма-зурВ.А. (1983, 1985), Румянцевой Н.И. (1989, 1990), ТакаЬа1а У. (1988) в нашей модификации.

Каллусные культуры, эмбриоиды и регенеранты гречихи культивировались в пробирках с ватно-марлевыми пробками при 16-часовом дне с интенсивностью освещения 4-5 тыс. лк и температуре 23±2"С.

Приготовление и стерилизацию боксов, посуды, инструментов, питательных сред проводилась по общепринятым методикам Бутенко Р.Г. (1989).

Перевод регенерантов в нестерильные условия осуществлялся в переоборудованные парники и пластмассовые стаканчики с субстратом (в культуральной комнате).

Условия и методика проведения полевых опытов

Семенное потомство регенерантов гречихи в полевых условиях изучалось в селекционном и контрольном питомниках.

Метеорологические условия в период роста и развития гречихи в годы исследований были неблагоприятными, за исключением 1994 года. В 1996, 1998 гг. наблюдалось переувлажнение почвы, в ¡597, п. - недостаток влаги. Эти факторы наряду с ранними заморозками 1995, 1997, 1999 гг. отрицательно сказались на урожайности гречихи.

Опытные делянки располагались на выровненных по плодородию и рельефу участках, на лугово-бурых оподзоленных почвах с тяжелым механическим составом. Пахотный слой - 20-24 см, "со сравнительно высоким уровнем плодородия. Площадь делянок в селекционном питомнике составляла 2,25-4,5 м2, в контрольном - 10,0 м2 в двухкратной повторности. Стандарт высевался через каждые 10 номеров. Делянки изолировались друг от друга посевом тетраплоидной гречихи (Фесенко Н.В., 1983).

Агротехнические приемы при выращивании регенерантов гречихи выполнялись в соответствии с общепринятыми в крае. Посев в селекционном питомнике проводился вручную, в контрольном - сеялкой СКС-6-10 в первой декаде июля. Фенологические наблюдения и учеты осуществлялись по методике государственного сортоиспытания сельскохозяйственных культур (1961). Перед уборкой с делянки равномерно отбиралось по 10 типичных нормально-развитых растений для определения величины основных количественных признаков гречихи. (Методические указания по изучению коллекционных образцов кукурузы, сорго и крупяных культур, 1968).

Уборка начиналась при созревании 70-80% зерна. В селекционном питомнике делянки убирались вручную, в контрольном — комбайном «Сампо-50».

В семенах определяли содержание белка по Къельдалю, жира - по Сокслету. Содержание рутина в зеленой массе устанавливали по методике Высочиной Г.И., Кульпиной Т.Г., Березовской Т.П. (1987).

Регенерантные линии и исходный сорт гречихи оценивались с помощью основных статистических характеристик количественной изменчивости по Доспехову Б.А. (1979), Рокицкому П.Ф. (1973, 1974).

Оценка экологической пластичности регенерантных линий гречихи проводилась по методике Eberhart S.A., Russell W.А. (1966) в изложении Пакудииа В.З. (1976), заключение по адаптивности материала - по Чека-лину Н.М. (1981).

Результаты исследований

Каллусо! сисз и морфогенез в культуре тканей гречихи посевной Индукция каллусогенсза в культуре ткани незрелого зародыша гречихи

При изучении каллусогснеза нами были использованы зародыши сорта Изумруд и гомостильной (ДД) формы. Существенных различий в ходе

каллусообразования у изученного сорта и формы не отмечено. Средние периоды инициации каллуса достоверно не отличаются и составляют для гомостильной формы 10 дней, для эксплантов сорта Изумруд - 12 дней (рис. 1).

1 - Изумруд; . □ недозрелые зародыши

2 - гомостильная форма гречихи; Оссядоли недозрелых зародышей

3 - Приморская местная; □ гипокотили недельных проростков

□ семядоли недельных проростков О средняя по сорту

Рис. 1. Каллусогенез гречихи посевной

Анализ каллусообразования у зародышей гречихи посевной показывает, что у обоих образцов на эксплантах размером 1,3-3,5 мм каллус не

формируется. Активность процесса возрастает с увеличением размера зародыша. При этом у зародышей сорта Изумруд наблюдается тенденция к прорастанию без образования каллуса.

У незрелых зародышей сорта Изумруд, изолированных in vitro на молочной стадии развития эндосперма, каллусообразующая способность составляет 9,1%, у гомостилыгой (ДД) формы - 22,2%. Значение данного показателя было выше при пассировании на среды более зрелых зародышей, вычлененных на восковой стадии, и составило, соответственно, 77,8 и 40%. В целом, каллусообразование проходит лучше у -эксплантов сорта Изумруд: каллус формируется на 40% культивируемых объектов, у гомо-стильной формы - 28,6% (рис.1).

Индукция каллусогснеза в культуре тканей гипокотнлей недельного асептического проростка гречихи

Установлено, что первыми индуцируют каллусную ткань гипокотили гомостильной (ДД) формы. Процесс дедифференциации клеток у них завершается в течение 5-8 дней у 100% изолятов. На 7-9-й день культивирования у 81,3% эксплантов сорта Изумруд наблюдается индукция каллуса, у остальной части материала этот процесс начинается на 12-14-й день. Период инициации каллусной ткани из гипокотилей гречихи сорта Приморская местная был наиболее длительным (до 36 дней).

Продолжительность периода каллусообразования и культивирования тканей in vitro особенно важны для получения сомаклональных вариаций, так как, по мнению Н.В. Катаевой, Р.Г. Бутенко (1983), это приводит к изменению плоидности, структурным перестройкам хромосом и накоплению генных мутаций.

В наших исследованиях гипокотили проростков всех сортов характеризуются высоким значением показатели каллусообразования (рис. 1). Каллусообразующая способность у эксплантов гомостильной (ДД) формы

составляет 100%, сорта Изумруд - 94,1%, Приморской местной - 80%.

Индукция каллусогснсза в культуре тканей семядолен незрелого зародыша гречихи

При культивировании семядолей незрелых зародышей на средах для индукции каллуса наблюдается тесная связь между генотипом первичного экспланта и ходом каллусогенеза. В большинстве случаев, экспланты го-мостильной формы инициируют каллусную ткань в течение более длительного времени, чем семядоли незрелых зародышей сорта Изумруд. Кал-лусообразующая способность у изученных объектов варьирует в зависимости от состава среды и генотипа изолята. В целом, наблюдается активное каллусообразование на эксплантах сорта Изумруд (рис. 1).

Индукция каллусогенеза в культуре тканей семядолен недельных асептических проростков

Наиболее интенсивно каллусообразование проходит на эксплантах сорта Изумруд, средний период инициации составляет 14 дней.

У изолятов сорта Приморская местная образование первых клеточных делений каллусной ткани происходит в течение более длительного периода - от 18 до 65 дней. При этом каллус формируется на всех первичных эксплантах.

Таким образом, экспланты изученных сортов и формы гречихи характеризуются высокой каллусообразующей способностью. Тип экспланта оказывает существенное влияние на ход каллусогенеза, наибольшая каллу-сообразующая способность отмечается у семядолей и гипокотилей.

Соматический эмбриогенез (эмбриоидогенсз) и органогенез в каллусной культуре гречихи посевной.

Появление эмбриоподобных структур на глобулярной и сердечко-

видной — торпедовидной стадиях развития наблюдается визуально, примерно, на 12-14-й день. Однако длительность индукции эмбриоидов варьирует в зависимости от сортовой принадлежности каллуса. Более продолжительный по времени этот процесс у каллусных линий сорта Изумруд (до 105 дней) и гомостилыюй (ДД) формы (до 51 дня). На каллусе сорта Приморская местная нарастание соматических зародышей происходит в течение наиболее короткого периода - 12-14 дней.

Каллусные культуры изученных генотипов характеризуются высокой способностью к соматическому эмбриогенезу, на что указывает средняя величина эмбриоидогенного потенциала (67,4±6,0). Достоверных различий в ходе эмбриоидогенеза между генотипами сортов и каллусными линиями разных эксплантов не отмечается (табл. 1).

Таблица 1.

Эибриоидогенный потенциал гречихи посевной, %__

Тип экспланта Сорт, форма —^ Каллусные линии Средний по сорту, форме

гипокотилей проростков незрелых зародышей семядолей незрелых зародышей

Приморская местная Изумруд Гомостильная (ДД) форма 76,9 47,5±22,7 56,8±18,4 85,7±14,4 64,5±12,6 62,9±0,3 76,9±1,4 56,2±8,7 69,2±8,8

Средний по типу экхпланта 62,2±14,7 71,3±14,4 63,7±0,9 67,4±6,0

Дальнейшие этапы морфогенеза прошли не все соматические зародыши. Большинство из них завершили свое развитие на глобулярной и сердечковидпой - торпедовидной стадиях, пролиферацию побегов из них осуществить не удалось (табл. 2).

Период от образования эмбрионда в глобулярной стадии до листо-стебельной фазы развития, в среднем, составляет 55,3±26,6 - 75,3±23,2. Существенных различий среди генотипов по заданному показателю не наблюдается. Однако значения морфогенетического потенциала в зависимости от генотипа достоверно различны у сортов Приморская местная и Изумруд. Каллусные линии гречихи гомостильной (ДД) формы и сорта

Приморская местная характеризуются высокой регенерационной способностью, а Изумруда - низкой (10,7±7,15%).

Таблица 2.

Регенерация из соматических зародышей гречихи посевной_

Сорт, форма Выход эмбрнои-догенных линий, пролифериро- вавших побеги, % Средний период регенерации, дн. Выход эмбрноидогенных линий, не завершивших морфогенез на стадии, %

глобулярной сердечка-торпеды листо-стебельной

Приморская местная Изумруд Гомостильная (ДД) форма 42,9 * 10,7±7,15 * 49,1±26,2 55,3±26,6 75,3±23,2 72,2±3,5 57,1 81,3±9,6 50,95±26,0 0 6,6±2,0 0 0 4,2 0

Примечание: (*) различия достоверны при Р=0,05

Культивирование каллусных линий сорта Приморская местная и го-мостильной (ДД) формы на эмбриогенной среде (Мэ), в состав которой входит ИУК (0,2 мг/л) и БАП (2,0 мг/л), сопровождается образованием не только эмбриоидов, но и появлением меристематически активных зон. Из которых в дальнейшем наблюдается массовое формирование почек и органогенных структур. Среднее количество микропобегов в расчете на одну пробирку составляет до 40 штук.

Мнкроклоналыгое размножение регенерантов гречихи

При регенерации из каллусной культуры через органогенез в большинстве случаев формируется несколько побегов, в то время как при «прорастании» соматических эмбриоидов происходит развитие только одного. Микроклонирование такого материала предотвращает потерю уникальных форм и позволяет получать достаточное количество семенного материала.

Целыо наших опытов по микроразмножению гречихи стал поиск оптимального варианта питательной среды, одновременно обеспечивающей

активный рост надземной части и хорошее развитие корневой системы.

По результатам наблюдений за микроклонами весь материал но морфологическим параметрам разделен па шесть основных морфотипов (табл. 3): 1) А| - регенеранты с нормально-развитым побегом и хорошо развитой корневой системой, имеющей корневые волоски; 2) А2 - регенеранты с нормально-развитым побегом и среднеразвитой корневой системой, имеющей корневые волоски; 3) А3 - развитие побега аналогичное двум предыдущим, но корневая система слабая, без корневых волосков: 4) К -регенеранты со слаборазвитым побегом, но имеющие корневую систему; 5) Б - регенеранты с развитым побегом, но без корней; 6) В - слаборазвитый побег без корней.

Совместное введение в состав среды (IV) ИУК и ИМК, обеспечивает регенерацию побегов и индукцию корнеобразования и 66,7% микроклонов, превысив контроль (безгормональная среда) на 8,7%. Доля неполноценных регенератов (без корневой системы) снизилась на 15,1% по сравнению с контролем..

На I варианте питательной среды число растений с корневой системой и нормально-развитым побегом было ниже, чем в контроле на 3,4%.

Таблица 3.

Морфотииы регенератов гречихи на средах для микроклонирования _ _(пассаж 25 днем)______

Вариант питательной среды Регенеранты с корневой системой, % Регенеранты без корневой системы, %

А| ! Д: А, | К всего Б ! В всего

Р (контроль fieч гормонов) I (ИМК 0,5 мг/л) IV (ИМК 0,2 мг/л + ИУК 0,5 мг/л) 34,6 14,2 10,3 15,9 23,3 17,5 2,1 0 4,7 7,1 28,4 21,2 58,0 54.6 66.7 5,8 0 1,8 22,1 30,7 11,0 27.9 30.7 12.8

Количество междоузлий на стебле у гречихи служит основным показателем, определяющим эффективность размножения in vitro при микроме-

ренковании. Длина стебля, а значит, и количество узлов на нем увеличиваются пропорционально времени культивирования. Однако при этом происходит появление в узлах генеративных органов, что делает непригодными микрочеренки для клонирования. С целью повышения эффективности микроразмножения, образующиеся соцветия (бутоны) были использованы нами в качестве эксплантов на среде Т (Takahata Y., 1988). Часть изолятов вначале образовывают каллусную ткань, из которой происходит регенерация многочисленных побегов (от 7,0±0,8 до 10,0±0,8). Среднее число микропобегов из одной пробирки составляет 2,3±0,8.

Перевод регенерантов гречихи в условия in vivo

Перевод растений-регенерантов в условия in vivo и получение семенного потомства Re - самые важные этапы в процессе микроклонального размножения гречихи.

Пробирочные растения, культивируемые in vitro при постоянных параметрах освещенности, влажности воздуха, длине светового дня, температуры на искусственных питательных средах, особенно чувствительны к смене условий при переводе in vivo.

На первом этапе работы (1991 г.) посадка регенерантов (с хорошо развитой корневой системой, без генеративных органов или с их зачатками) осуществлялась в парники, покрытые полиэтиленовой пленкой, в период посева гречихи (II-III декада июля). С целью предотвращения переопыления у растений разных линий, они между собой изолировались марлевым экраном.

Выживаемость полученного материала невысокая и варьирует от 0 до 52,6% в зависимости от происхождения регенерантов.

В дальнейшем наряду с посадкой в парники нами изучалась возможность перевода пробирочных культур в стаканчики с субстратом, что позволяет выращивать материал круглогодично в контролируемых условиях.

Среди изученных субстратов наиболее подходящими оказались опилки. Максимальное значение выживаемости в опыте (75%) отмечалось с предварительной обработкой корневой системы растений-регенерантов 0,005%-ным раствором «Нарцисса».

Результаты полевых испытаний семенного потомства регенерантов

Изменчивость основных количественных и качественных признаков у регенерантов гречихи (R2i 1*з)

У гречихи макромутации под действием индуцированного мутагенеза возникают редко. Основную ценность и практическое значение представляют микромутации с незначительными отклонениями от обычной нормы их варьирования, которые изменяют количественные признаки растений: урожайность, размер и форму семян, содержание химических веществ и т.д. (Алексеева Е.С., Бляндур О.В., Лысиков В.Н., 1978). Их труднее выявить фенотипическ'и и поэтому установить тип изменений среди потомства регенерантов позволяет метод статистической обработки данных и биохимических анализов (Алексеева Е.С., ПаушеваЗ.П., 1979).

Регенеранты не имели отличий от растений исходного сорта по длине вегетационного периода (78-80 дней) и длине первого междоузлия (2,7-4,3 см). В нескольких поколениях у них отмечены достоверные изменения по высоте растений, толщине первого междоузлия, числу узлов на главном стебле, числу ветвей второго порядка, числу соцветий с плодами, продуктивности, крупнозерности, содержанию белка, жира, рутина (табл. 4, 5).

Наряду с вариабельностью количественных признаков наблюдались качественные изменения окраски и формы плодов. На протяжении шести генераций регенерантов отмечено стабильное проявление черной и темно-коричневой окраски плодов, а также плодов с сильно выраженными

крыльями и округлой формой. В то время как у исходного сорта Приморская местная плоды коричневого цвета удлиненной формы.

Таблица 4.

Изменчивость морфологических признаков регенерантов гречихи (Яг, Яз), _ коррелирующих с продуктивностью __

Исходный сорт, ре-генеранты х±Бх а ||'ш гтп'п | тах V, % г±Бг

Толщина первого междоузлия, см

Приморская местная Регенсранты, Я; Приморская местная Регенеранты, Я, 0,47±0,03 0,63±0,02 0,48±0,02 0,60±0,01 0,16 ** 0,12 ** 0,3 0,4 0,3 0,3 0,8 0,9 0,7 0,9 25.5 20.6 22,9 21,7 0,76±0,15 ** 0,67±0,14 ** 0,85±0,12 ** 0,51±0,08 **

Число ветвей второго порядка, шт.

Приморская местная Регенеранты, Яг Приморская местная Регенеранты, Я^ 2,6±0,4 5,3±0,6 1,3+0,3 2,6±0,2 2,7 ** 1,3 ♦* 0 0 0 0 5,0 12,0 5,0 11,0 66,9 58,9 111,5 91,9 0,48±0,18 * 0,75±0,13 ** 0,67±0,18 ** 0,63±0,07 **

Число соцветий с плодами, шт.

Приморская местная Регенеранты, Я2 Приморская местная Регенеранты, Я3 26,9±4,2 51,2±4,6 19,8±0,7 26,9±0,1 24,3 ** 7,1 ** 10,0 17,0 14,0 2,0 89,0 117,0 50,0 70,0 69.1 49.2 16,1 49,4 0,93±0,09 ** 0,67±0,14 *♦ 0,81±0,14 ** 0,80±0,06 **

Примечание. (*) достоверно при Р=0,05, (**) - при Р=0,01.

Таблица 5.

Изменчивость основных хозяйственно-ценных признаков __у регенерантов гречихи (Яг, Яр._(__

| Исходный сорт, ре- х±Бх (1 Ит V, %

| генеранты шш гпах

Масса 1000 зерен, г

Приморская местная 24,5±0,3 24,5 24,8 1,7

Регенеранты, Я2 31,4±0,2 6,9 ** 31,4 31,6 0,99

Приморская местная 24,0±0,5 24,0 24,5 3,6

Регенеранты, Я5 28,1±0,9 4,1 ♦* 27,2 29.0 10,6

Продуктивность растения, г

Приморская местная 2,5±0,4 0,3 9,8 74,8

Регенеранты, Я2 7,4±0,8 4,9 ** 1,7 20,5 61,5

Приморская местная 2,9±0,4 0,7 6,5 56,2

Регенеранты, Я? 3,8±0,2 0,9 ** 0,2 11,7 61,6

Содержание рутина, %

(в зеленой массе)

Приморская местная 3,2±0,17 3,1 3,3 6,3

Регенеранты 4,5±0,17 1,3 * 4,2 4,8 6,7

Содержание белка, %

Приморская местная 13.2±0,2 12,8 13,5 3,6

Регенеранты 14,4±0,2 1,2 * 13,9 14,8 2,0

Примечание. Различия достоверны: (*) при Р=0,05; (**) при Р=0,01.

Большинство из полученных нами вариаций у регенерантов гречихи представляют практическую ценность для селекции, так как отражают изменения по ряду хозяйственно-полезных признаков (табл. 5).

В целом, использование метода культуры ткани в селекции гречихи позволяет значительно расширить спектр генетической изменчивости.

Оценка экологической пластичности реге-нерантных линий гречихи по признаку продуктивности семян с одного растения

В создании высокоурожайных сортов гречихи важное место занимает селекция на высокую семенную продуктивность. Исходя из этого, у регенерантов гречихи второго-пятого поколения нами определялась экологическая пластичность по признаку масса семян с одного растения.

Таблица 6.

Экологическая пластичность регенератных линий гречихи._

Исходный сорт, регенерантная линия Средняя продуктивность растения, г Параметры стабильности

коэффициент регрессии Ы варианса стабильности 52СН

Приморская местная 1,7 0,43 0,278

к 1-1 4,5 1,22 0,375

Я 1-3 4,4 1,33 1,767

В процессе исследований выявлено, что значение коэффициента регрессии (Ы) у исходного сорта Приморская местная значительно ниже 1,0 (табл. 6). Значение вариансы стабильности (82сН) также низкое, это указывает на то, что сорт слабо реагирует на улучшение или ухудшение условий выращивания. Основным его недостатком является низкая продуктивность. У полученных на его основе регенерантов она значительно выше. Так, регенерантная линия Я 1-1 (Ы>1, 82сП низкая) характеризуется повышенной продуктивностью и предсказуемой реакцией на изменение условий среды в сторону улучшения, т.е. при возделывании по интенсивной техно-

логии.

Продуктивность, г

Индексы условий, г

Примечание. 1 - сорт Приморская местная, 2 - Я 1-1, 3 - Я 1-3, 4 - средняя по опыту.

Рис. 2. Линии регрессии продуктивности регенерантов на изменение условий выращивания.

Регенерантная линия Я 1-3 (Ы>1, 82(И высокая) отличается меньшей предсказуемостью результатов в связи с подверженностью случайным изменениям из-за большой величины вариансы стабильности (рис. 2).

Варианса стабильности (82сИ) у данного генотипа характеризуется также низким значением, т.е. исходный сорт Приморская местная довольно стабильный, одинаково реагирующий на улучшение или ухудшение условий среды.

Таким образом, регенерантные линии, полученные в результате использования метода биотехнологии, имеют различную степень экологической пластичности между собой и в сравнении с исходным сортом.

Корреляционная зависимость между продуктивностью

и рядом фенотипическнх признаков лучших регене-рантных линий, их хозяйственно-бнологи.ческая оценка в селекционных питомниках.

В результате оценки растений-регенерантов второго и третьего поколений был выявлен целый ряд положительных изменений хозяйственно-ценных признаков, которые необходимо сохранить и закрепить в потомстве с помощью отборов. В гетерозиготной популяции гречихи сложно правильно оценить генотипы по продуктивности на основании проявляемых фенотипическнх признаков. В этом плане селекционеру помогает знание корреляционных взаимосвязей между основными хозяйственно-полезными признаками.

Нами изучены корреляционные связи между продуктивностью и девятью количественными признаками у регенерантов и исходного сорта Приморская местная. Достоверные связи существуют между продуктивностью и толщиной первого междоузлия, числом ветвей второго порядка, числом соцветий с плодами (табл. 7).

Таблица 7.

Корреляционные связи отдельных морфологических признаков __гречихи с продуктивностью одного растения. _

Коэффициент корреляции (г) между Коэффи- Коэффици-

Исходный продуктивностью и циент де- ент множе-

сорт, регене- толщиной числом вет- числом со- термина- ственной 1Ф

ранты первого вей второго цветии с ции корреляции

междоузлия порядка плодами О Я

Приморская местная 0,64±0,15 ** 0,48±0,21 ** 0,73±0,16 ** 0,65 ** 0,81 ** 9,31

Регенеранты, Я2 0,67±0,14 ** 0,75±0,13 ** 0,67±0,14 ** 0,68 ** 0,82 ** 12,99

Приморская местная 0,66±0,14 ** 0,48±0,17 * 0,98*0,04 *♦ 0,96 ** 0,98 ** 11,56

Регенеранты, Я5 0,77*0,15 0,74±0,!6 ** 0,94±0,08 ** 0,91 ** 0,95 ** 41,24

Примечание. (*) значение достоверно при Р=0,05, (**) при Р=0,01.

В условиях муссонного климата Приморского края отбор фенотипов по толщине первого междоузлия особенно важен при выведении неполегающих сортов гречихи (Моисеенко Л.М., Угнивенко З.И., 1985).

Результаты корреляционного анализа использовались нами в дальнейшей работе при отборе продуктивных генотипов по фенотипу.

Причем, в результате целенаправленных отборов в пятом поколении из популяции регенерантов выделены линии, у которых сопряженность коррелятивных связей между изученными признаками усилилось.

Множественная корреляционная связь между признаками толщина первого междоузлия, число соцветий с плодами и продуктивностью растения у регенерантов пятого поколения характеризуется также высокими значениями коэффициентов корреляции (11=0,94) и детерминации (0=0,88), что доказывает эффективность отбора генотипов по вышеуказанным фено-типическим признакам.

Анализ потомства регенерантов второго и третьего поколения позволил выявить ценную микромутацию для гречихи - крупнозерность, которую удалось закрепить с помощью индивидуального и индивидуально-семейного отборов.

Кроме вышеуказанных линий гречихи несомненный интерес для генетических и биологических исследований представляют две регенерант-ные линии с маркерными признаками — черной окраской и с ярко выраженной крылатостыо плодов.

В настоящее время посевные площади под сортом гречихи Приморская местная, районированном в 1951 году, сведены к минимуму. В производстве доминируют высокоурожайные сорта Приморская 7 и Изумруд, созданные с использованием Приморской местной в качестве материнской формы. Генетический потенциал данного сорта далеко не исчерпан, поскольку он вобрал в себя лучшие качества местных, инорайонных сортов,

завезенных ранее из других регионов страны, и обладает достаточно высоким резервом адаптивности к неблагоприятным погодным условиям выращивания в крае.

Изучение эксплантов сорта Приморская местная подтверждает тот факт, что данный генотип является пластичным и при культивировании в условиях in vitro. Обладая максимальной регенерационной способностью, он обеспечивает получение жизнеспособных регенерантов и их фертилыю-го потомства селекционно-значимыми изменениями признаков. Это подтверждается результатами наших исследований (табл. 8):

Таблица 8.

Характеристика лучших регенерантных линий гречихи _ (средние за 1998-1999 гг.).__i_

Сорта, регенерантные линии Урожайность, ц/га Масса Содержание Пленчатость, % Выход крупы, %

1000 зерен,г белка, % жира, %

Приморская местная (исходный сорт) К 1-1 10,1 15,1 *+ 24,0 28,5 13,2 14,8 *+ 2,95 2,87 21,4 19,0 78,6 81,0 *+

Я 1-3 12,1 34,0 *+ 14,3 * 3,13 * 20,0 80,0

Я 1-5 ' 15,6 *+ 28,5 * 14,2 * 2,81 - 22,5 77,5 '

Приморская 7 (стандарт) Изумруд (стандарт) НСР о.5 12,6 14,4 1,8 27,0 32,3 4,0 13,4 13,6 0,64 3,0 3,2 0,16 21,3 20,0 1,4 78,7 80,0 1,4

Примечание. (*) значение достоверно выше значения исходного сорта, (+) стандарта Приморская 7; (-) ниже стандарта при Р=0,05.

В контрольном питомнике по массе 1000 зерен отобраны три линии, превысившие исходный сорт Приморская местная. Регенерантная линия Я 1-3 по данному признаку превосходит стандарт Приморская 7 и находится на уровне крупносемянного сорта Изумруд. Ее преимуществом является низкая пленчатость зерна - 20% и высокий выход крупы - 80%.

Крупность зерна, пленчатость, выход крупы, содержание в зерне белка и жира определяют технологические свойства сортов гречихи и их пищевую ценность. Из популяции регенерантов по комплексу ценных при-

знаков выделена линия Я 1-1, характеризующаяся крупносемянностыо, высокой урожайностью, повышенным содержанием белка и низкой плен-чатостыо. Кроме этого, данная линия по результатам четырехлетнего испытания относится к интенсивному типу сортов, т.е. особенно отзывчива при возделывании по интенсивной технологии.

Регенерантная линия Я 1-5 также превосходит исходный сорт Приморская местная по целому ряду признаков: массе 1000 зерен, содержанию белка и урожайности.

Таким образом, на основании проведенных исследований нами установлено, что метод культуры ткани является результативным для создания исходного материала гречихи, характеризующегося изменениями селекционно-важных признаков и улучшения сортов.

Быводы

1. Метод культуры ткани наравне с другими методами селекции может успешно применяться при создании .исходного материала, использование которого позволит изменить селекционно-хозяйственные признаки, а также улучшить существующие сорта.

2. Впервые получены и исследованы каллусные культуры из эксплан-тов сортов Приморская местная, Изумруд и гомостильной длинностолбча-той формы. Экспланты изученных сортов и форм гречихи характеризуются высокой каллусообразующей способностью. Однако существенной разницы между генотипами по данному показателю не выявлено.

3. Тип экспланта оказывает существенное влияние на ход каллусоге-неза у изученных сортов и форм гречихи. Наибольшая каллусообразующая способность отмечается у семядолей и гипокотилей проростков.

4.Установлены достоверные временные различия в каллусогенезе у эксплантов сорта Изумруд и Приморская местная.

5. Впервые осуществлены процессы непрямого соматического эм-

бриогенеза и органогенеза из эксплантов районированных в Приморском крае сортов гречихи — Приморская местная, Изумруд, а также длинно-столбчатой гомостильной формы. Продолжительность периода образования эмбриоидов зависит от генотипа. Наиболее высоким морфогенетиче-ским потенциалом характеризуется сорт Приморская местная.

6. Микроразмножение и укоренение регенерантов гречихи осуществляется одновременно на одной питательной среде с минеральной основой по Мурасиге и Скугу, дополненной 0,2 мг/л ИМК и 0,5 мг/л ИУК. С целью повышения коэффициента размножения у гречихи перспективно использование в качестве эксплантов асептических бутонов.

7. Впервые при переводе регенерантов гречихи в условия in vivo наряду с акклиматизацией материала используется ростостимулирующий препарат «Нарцисс», который повышает выживаемость растений.

8. Впервые в полевых условиях при изучении шести поколении регенерантов в Ri, R3 выявлена изменчивость по высоте растений, толщине первого междоузлия, числу узлов на главном стебле, числу ветвей второго порядка, числу соцветий с плодами, продуктивности, крупнозерности, содержанию рутина, белка, жира, форме и окраске плодов.

9. По признаку «продуктивность растений», полученные линии гречихи характеризуются различной степенью экологической пластичности.

10. Установлены тесные корреляционные взаимосвязи между продуктивностью растения и фенотипическими признаками: толщиной первого междоузлия, числом соцветий с плодами. Это позволяет проводить более эффективно оценку высокопродуктивных генотипов гречихи.

Рекомендации для селекционной практики

1. При создании и улучшении существующих сортов гречихи метод культуры ткани достаточно эффективен и должен использоваться наравне с другими методами.

2. В качестве исходного материала для селекции предложены три ре-генерантные линии гречихи, выделенные по массе 1000 зерен, содержанию белка и рутина, продуктивности и пленчатости.

3. В дальнейшем при биологических и генетических исследованиях в

качестве генетических маркеров интерес представляют две линии с изме-

»

ненной окраской и формой плодов.

4. При отборе оценку генотипов необходимо, прежде всего, проводить по толщине первого междоузлия и числу соцветий с плодами.

Список опубликованных работ по теме диссертации

1. Регенерация гречихи посевной в условиях in vitro // Научное обеспечение ЛПК Дальнего Востока: Материалы науч. сессии (Уссурийск, 1820 августа, 1993 г.) / РАСХН. Дальневост. отд-ние. - Новосибирск, 1995. -С.159-161.

2. Регенерация гречихи посевной (Fagopyrum esculentum Moench) через каллусную культуру // Некоторые вопросы селекции и технологии возделывания сельскохозяйственных культур в Приморье: Сб. науч. тр. / РАСХН. Дальневост. отд-ние. ПримНИИСХ. - Новосибирск, 1994. - С.З-10.

3. Микроразмножение регенератов гречихи in vitro // Вопросы научного обеспечения сельскохозяйственного производства Приморья: Сб. науч. тр. / РАСХН. Дальневост. отд-ние. ПримНИИСХ. - Хабаровск, 1997. -С.27-31.

4. Межвидовая гибридизация гречихи с использованием физиологически активных веществ // Вопросы научного обеспечения сельскохозяйственного производства Приморья: Сб. науч. тр. / РАСХН. Дальневост. отд-ние. ПримНИИСХ. - Хабаровск, 1997. - С.40-46.

5. Перспектива использования нетрадиционных методов селекции

для создания нового исходного материала гречихи // Генофонд растений Дальнего Востока России: Материалы конф., посвящ. 70-летию ДВ оп. ст. ВИР / РАСХН. ВИР. - Владивосток, 1999. - С.44-47. (соавт. Моисеен-ко Л.М.)

6. Оценка экологической пластичности регенерантных линий гречихи по признаку продуктивности семян с одного растения // Пути воспроизводства плодородия почв и повышения урожайности сельскохозяйственных культур в Приамурье: Сб. науч. тр. / ДальГАУ. - Благовещенск, 1999. -С. 185-189. (соавт. Моисеенко Л.М., Фисенко П.П.) -

Содержание диссертации, кандидата сельскохозяйственных наук, Барсукова, Елена Николаевна

ВВЕДЕНИЕ.

1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР.

1.1. Основные методы селекции гречихи.

1.1.1. Внутривидовая гибридизация.

1.1.2. Межвидовая гибридизация.

1.1.3. Индуцированный мутагенез.

1.1.4. Полиплоидия.

1.2. Обзор основных методов биотехнологии сельскохозяйственных растений.

1.2.1. Сомаклональная изменчивость и ее использование в селекции.

1.2.2. Применение метода культуры тканей и органов для создания новых форм гречихи.

1.2.2.1. Культура зародышей гречихи.

1.2.2.2. Каллусогенез и органогенез в культуре тканей гречихи.

1.2.2.3. Соматический эмбриогенез гречихи.

1.2.2.4. Перспектива использования генной инженерии в селекции гречихи.

2. ОБЪЕКТ, МЕТОДИКА И АГРОКЛИМАТИЧЕСКИЕ УСЛОВИЯ ПРОВЕДЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЙ.

2.1. Объект.

2.2. Методика экспериментов с культурой ткани гречихи.

2.3. Методика проведения полевых опытов.

2.4. Агроклиматические условия проведения исследований.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.

3.1. Каллусогенез и морфогенез в культуре тканей гречихи посевной.

3.1.1. Индукция каллусогенеза в культуре ткани незрелого зародыша гречихи.

3.1.2. Индукция каллусогенеза в культуре тканей гипокотилей недельного асептического проростка гречихи.

3.1.3. Индукция каллусогенеза в культуре тканей семядолей незрелого зародыша гречихи.

3.1.4. Индукция каллусогенеза в культуре тканей семядолей недельных асептических проростков.

3.1.5. Соматический эмбриогенез (эмбриоидогенез) и органогенез в каллусной культуре гречихи посевной.

3.2. Микроклональное размножение регенерантов гречихи.

3.3. Перевод регенерантов гречихи в условия in vivo.

3.4. Результаты полевых испытаний семенного потомства регенерантов.

3.4.1. Изменчивость основных количественных и качественных признаков у регенерантов гречихи (R2 - R3).

3.4.2. Оценка экологической пластичности регенерантных линий гречихи по признаку продуктивности семян с одного растения.

3.4.3. Корреляционная зависимость между продуктивностью и рядом фенотипических признаков лучших регенерантных линий, их хозяйственно-биологическая оценка в селекционных питомниках.

Выводы.

Рекомендации для селекционной практики.

Введение Диссертация по сельскому хозяйству, на тему "Использование метода культуры ткани в селекции гречихи"

Актуальность темы. Важное место в обеспечении населения полноценным питанием отводится гречихе, как незаменимой диетической культуре. Она - одна из древнейших сельскохозяйственных культур, возделываемых человеком уже в течение четырех тысячелетий III.

В Приморском крае под гречихой ежегодно, в среднем, занято около 20 тыс. га / 2 /. Выращивание её в Приморье считается экономически выгодным даже при урожайности 3-5 ц/га, поэтому интерес производителей к ней неуклонно возрастает. Однако, производство гречихи в последние годы, находится на низком уровне не только в крае, но и в России в целом: средняя урожайность в крае составляет 3-4 ц/га / 3 /, в стране - 5-7 ц/га / 4 /, хотя отдельные хозяйства получают по 10-12 ц/га. Причины столь значительных отклонений потенциальной семенной продуктивности от реальной заключены в высокой зависимости этой культуры от технологии возделывания, а также в биологических и физиологических особенностях данной культуры 15/. Гречиха имеет узкий генетический потенциал устойчивости к неблагоприятным факторам среды, вносящим основной вклад в снижение урожайности. Районированные в крае сорта Приморская 7 и Изумруд имеют высокие потенциальные возможности по продуктивности, занесены в каталог Государственной комиссии по сортоиспытанию сельскохозяйственных культур как особо ценные по технологическим качествам. Однако, необходимо расширять сортимент гречихи за счет форм с различной пластичностью, предназначенных для выращивания не только в Приморском крае, но и во всей зоне Дальнего Востока. Учитывая, что в генофонде культуры отсутствуют генотипы с высокой устойчивостью к постоянно изменяющимся условиям произрастания, важно получение нового исходного материала, обладающего повышенным потенциалом адаптивности.

В создании новых сортов гречихи с измененной природой особое место должны занять современные методы биотехнологии. Широкое внедрение данных методов в селекцию ряда сельскохозяйственных культур уже дало положительные результаты: созданы сорт риса Биориза / 6 /, ячменя - Исток, Одесский 115, Эльф, Рамос, Суздалец, Биос-1 111, озимой пшеницы - Смуглянка / 8 /.

Исходя из того, что метод культуры клеток и тканей гречихи довольно широко разработан зарубежными и отечественными исследователями: создана методическая база, выявлены общие закономерности морфогенеза, определены биотехнологические подходы к ее селекции / 9-21 /, открывается реальная перспектива его успешного внедрения в практическую селекцию. В то же время остаются не исследованными вопросы прикладного характера. Отсутствуют сорта, созданные на основе методов биотехнологии. В этой связи, изучение метода культуры ткани в селекционной работе с гречихой в условиях Приморского края является актуальным.

Цель и задачи исследований. Цель данной работы заключалась в изучении метода культуры ткани гречихи и оценке, полученных регенерантных линий, по схеме селекционного процесса в условиях Приморского края. Были поставлены следующие задачи:

1) изучить процесс каллусогенеза и наработать каллусные линии из различных эксплантов, взятых, в основном, от районированных в Приморском крае сортов;

2) реализовать основные пути морфогенеза в каллусных культурах (органогенез и соматический эмбриогенез);

3) провести микроклонирование и укоренение регенерантов in vitro;

4) осуществить перевод пробирочных растений в нестерильные условия;

5) оценить потомство регенерантов по наиболее ценным селекционно-хозяйственным признакам в полевых условиях, выявить сомаклональные варианты, представляющие интерес для селекции.

Научная новизна исследований. Впервые в зоне Дальнего Востока проведено изучение метода культуры тканей гречихи в прикладном аспекте. Получены каллусные культуры из различных эксплантов местных сортов. Определены экспланты, обладающие высокой каллу сообразующей способностью.

Выбраны оптимальные варианты питательных сред для инициации каллуса, индукции и пролиферации эмбриоидов. Реализованы и исследованы основные пути морфогенеза гречихи в культуре in vitro: органогенез и соматический эмбриогенез. Отработана техника одновременного микроразмножения и укоренения растений-регенерантов и перевод их в почву.

Впервые регенерантные линии гречихи изучены в полевых условиях Приморского края. Дана оценка шести поколений регенерантов гречихи в селекционном и контрольном питомниках по основным хозяйственно-полезным признакам.

Практическая значимость работы. Освоен и используется в практической селекции гречихи метод культуры ткани. Полученные с его использованием регенерантные линии гречихи расширяют генетическое разнообразие исходного материала за счёт изменчивости по ряду признаков: адаптивности, продуктивности, крупности зерна, форме и окраске плодов и др.

Результаты, проведенных исследований по регенерации сортов гречихи, районированных в Приморском крае, могут быть использованы селекционерами, работающими методами культуры тканей, при создании новых генотипов гречихи.

Установлены тесные корреляционные взаимосвязи между продуктивностью растения и фенотипическими признаками - толщина первого междоузлия и число соцветий с плодами. Данные признаки рекомендуется использовать при отборе высокопродуктивных генотипов гречихи.

В итоге целенаправленных отборов из популяции регенерантов получены три линии гречихи, которые изучаются в контрольном питомнике и конкурсном сортоиспытании. Две линии, с измененной окраской и формой плодов, могут быть использованы в качестве генетических маркеров в биологических и генетических исследованиях.

Апробация работы. Материалы диссертации были представлены на научной сессии Общего собрания Дальневосточного отделения РАСХН "Научное обеспечение АПК Дальнего Востока" (Уссурийск, 18-20 августа 7

1993 г.), научной сессии годичного собрания ДВ НМЦ РАСХН от 26 января 1999 г., конференции молодых ученых Приморского НИИСХ (Уссурийск, 1999 г.).

Публикации. Основные положения диссертации изложены в шести научных статьях.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 141 страницах машинописного текста. Состоит из введения, обзора литературы, описания объектов и методов исследования, трех глав с экспериментальными данными и их обсуждением, выводов, рекомендаций для селекционной практики, списка литературы и семи приложений. Содержит 22 таблицы, 22 рисунка. Список литературы представлен 265 работами, из которых на иностранных языках -41.

Заключение Диссертация по теме "Селекция и семеноводство", Барсукова, Елена Николаевна

Выводы

1. Метод культуры ткани наравне с другими методами селекции может успешно применяться при создании исходного материала, использование которого позволит изменить селекционно-хозяйственные признаки, а также улучшить существующие сорта.

2. Впервые получены и исследованы каллусные культуры из эксплантов сортов Приморская местная, Изумруд и гомостильной длинностолбчатой формы. Экспланты изученных сортов и форм гречихи характеризуются высокой каллусообразующей способностью. Однако существенной разницы между генотипами по данному показателю не выявлено.

3. Тип экспланта оказывают существенное влияние на ход каллусогенеза у изученных сортов и форм гречихи. Наибольшая куллусообразующая способность отмечается у семядолей и гипокотилей проростков.

4. Установлены достоверные временные различия в каллусогенезе у эксплантов сорта Изумруд и Приморская местная.

5. Оптимальной по составу средой для индукции каллусогенеза является среда с минеральной основой В5, дополненная гормональными добавками 2,4-Д (5 мг/л) и кинетина (ОД мг/л).

6. Впервые осуществлены процессы непрямого соматического эмбриогенеза и органогенеза из эксплантов районированных в Приморском крае сортов гречихи - Приморская местная, Изумруд, а так же длинностолбчатой гомостильной формы. Продолжительность периода образования эмбриоидов зависит от генотипа. Наиболее высоким морфогенетическим потенциалом характеризуется сорт Приморская местная.

7. Среды Рэ (0,1 мг/л 2,4-Д) и Мэ (ИУК - 0,2 мг/л, БАП - 2,0 мг/л), применяемые в качестве эмбриогенных, одинаково эффективны. Оптимальной по составу для органогенеза является среда Мэ, содержащая ИУК в количестве 0,2 мг/л и БАП - 2,0 мг/л.

8. Микроразмножение и укоренение регенерантов гречихи осуществляется одновременно на одной питательной среде с минеральной основой по Му-расиге и Скугу, дополненной 0,2 мг/л ИМК и 0,5 мг/л ИУК. С целью повышения коэффициента размножения у гречихи перспективно использование в качестве эксплантов асептических бутонов.

9. Впервые при переводе регенерантов гречихи в условия in vivo наряду с акклиматизацией материала используется ростостимулирующий препарат "Нарцисс", что повышает выживаемость растений.

10. Впервые в полевых условиях при изучении шести поколений регенерантов, в R2, R3 выявлена изменчивость по высоте растений, толщине первого междоузлия, числу узлов на главном стебле, числу ветвей второго порядка, числу соцветий с плодами, продуктивности, крупнозерности, содержанию рутина, белка, жира, форме и окраске плодов.

11. По признаку "продуктивность растений", полученные линии гречихи характеризуются различной степенью экологической пластичности.

12. Установлены тесные корреляционные взаимосвязи между продуктивностью растения и фенотипическими признаками: толщина первого междоузлия, число, соцветий с плодами. Это позволяет проводить более эффективно оценку высокопродуктивных генотипов гречихи.

Рекомендации для селекционной практики

1. При создании и улучшении существующих сортов гречихи метод культуры ткани достаточно эффективен и должен использоваться наравне с другими методами.

2. В качестве исходного материала для селекции предложены три реге-нерантные линии гречихи, выделенные по признакам: масса 1000 зерен, содержание белка и рутина, продуктивность, пленчатость.

3. В дальнейшем при биологических и генетических исследованиях в качестве генетических маркеров интерес представляют две линии с измененной окраской и формой плодов.

4. При отборе оценку генотипов необходимо, прежде всего, проводить по толщине первого междоузлия и числу соцветий с плодами.

113

Библиография Диссертация по сельскому хозяйству, кандидата сельскохозяйственных наук, Барсукова, Елена Николаевна, Благовещенск

1. Биохимия культурных растений. Т. 1: Хлебные и крупяные культуры /Ред.

2. А. И. Ермаков, М. И. Княгиничев, И. К. Мурри. 2-е изд., перераб. и доп. М.: Сельхозиз, 1958. - 701с.

3. Посевные площади сельскохозяйственных культур в Приморском крае в1996 году: Статистический сборник. Владивосток, 1997 - 34с.

4. Валовые сборы и урожайность сельскохозяйственных культур за 1996 г.:

5. Статистический сборник. Владивосток, 1997. - 63с.

6. Моисеенко Л. М. Биологические особенности и селекционное использование коллекции гречихи в Приморском крае: Дис. . канд. с.-х. наук. -Уссурийск, 1979. 184с.

7. Кучеренко Л. А., Харченко П. Н., Ковалева Е. Н. Использование методовбиотехнологии в селекции риса //Состояние и перспективы развития сельскохозяйственной биотехнологии: Материалы Всесоюзной конференции, Москва, июнь 1986 г. Л., 1986. - С. 94-98.

8. Шевелуха В. С. Проблемы и перспективы новой биотехнологии в селекциии растениеводстве //Состояние и перспективы развития сельскохозяйственной биотехнологии: Материалы Всесоюзной конференции, Москва, июнь 1986 г. Л., 1986. - С. 12-18.

9. Некоторые итоги важнейших научных исследований академии //Вестник

10. РАСХН. 1996. -№ 1. - С. 3-7.

11. Yamane Y. Induced differentiation of buckwheat plants from subcultured callusesin vitro //The Japanese Journal of Genetics. 1974. - Vol. 49, № 3. - P.139.146.

12. Bohanec В. Plant cell culture techniques for breeding buckwheat (Fagopyrumesculentum Moench) //Proc. of the 4th Intern. Sump. On Buckwheat, Orel. USSR, 11 -15 July, 1989. Orel, 1989. - Part I - P. 108-111.

13. Srejovic V., Neskvic M. Regeneration of plants from cotyledon fragments ofbuckwheat (Fagopyrum esculentum Moench.) //Zeitschr. Pflanzenphysiol. -1981.-Vol. 104, № l.-P. 37.

14. Srejoic V., Neskovic M. Effect of gibberellic acid on organogenesis in buckwheat tissue culture //Biologia plantarum. 1985. - Vol. 27, № 6. - P. 432437.

15. Takahata Y., Yumonji E. Plant regeneration from hypocotyl section and callusin buckwheat (Fagopyrum esculentum Moench.) //Annual Report of the Faculty of Education Iwate Univ. 1985. - Vol. 45, № 1. - P. 137-142.

16. Takahata Y. Plant regeneration from cultured immature inflorescence of common buckwheat (Fagopyrum esculentum Moench.) and perennial buckwheat (F. cymosum Meisn.) //Japan J. Breed. 1988. - Vol. 38, № 4. - P. 409-413.

17. Румянцева H. И. Морфогенез в культуре тканей гречихи: теоретические иприкладные аспекты: Дис. . канд. биол. наук. Казань. 1990. - 217с.

18. Румянцева Н. И., Сергеева Н. В., Хакимова J1. Э. и др. Органогенез и соматический эмбриогенез в культуре двух видов гречихи //Физиология растений. 1989. - Т. 36, вып. I. - С. 187-194.

19. Суриков И. М., МазурВ. А. Получение регенерантов из различных тканей гречихи в культуре in vitro //Генетические основы селекции и семеноводства гречихи: Сб. науч. тр. /Кишинев СХИ. Кишинев, 1985. - С. 98-100.

20. Мазур В. А. Получение каллуса из растительных тканей гречихи Fagopyrum esculentum Moench. //Культура клеток растений и биотехнология. -Кишинев, 1983. С. 11-12.

21. Мазур В. А. Особенности получения каллуса из растительных тканейгречихи //Перспективы повышения урожайности и качества зерна гречихи. Кишинев, 1983. С. 67-68.

22. Мазур В. А. Получение регенерантов из тканей гипокотиля гречихи вкультуре in vitro //Науч.-техн. бюл. ВНИИ растениеводства. 1984.-Вып. 144. - С. 28-29.

23. Вавилов Н. И. Основные задачи советской селекции растений и пути ихосуществления. //Избр. тр. в 5-ти т. М.; Д.: Наука, 1965. - Т. 5. - С. 305324.

24. Отчет по селекции и семеноводству крупяных культур (просо, гречиха,чумиза). 1940-1943 гг. /Исп. М. Э. Элентух. Ворошилов, 1943. - 23с.

25. Отчет по селекции и семеноводству крупяных культур за 1944 г. (просо,гречиха). /Исп. М. Э. Элентух. Ворошилов, 1944. - 16с.

26. Отчет по селекции крупяных культур (просо, гречиха) за 1946 /Исп. М. Э.

27. Элентух. Ворошилов, - 1946. - 7с.

28. Неттевич Э. Д. Вопросы методики селекции гречихи //Бюл. укр. НИИрастениеводства, селекции и генетики. Харьков, 1959. - № 5. - С. 110116.

29. Шубина А. Ф. Опыт по скрещиванию гречихи //Селекция и семеноводство. 1938. -№ 6. - С. 27-29.

30. Алексеева Е. С. Успехи селекции гречихи и перспективы ее развития

31. Генетика, селекция, семеноводство и возделывание крупяных культур: Сб. науч. тр. /Кишинев СХИ.- Кишинёв, 1989. С. 5-9.

32. Фесенко Н. Л. Селекция и семеноводство гречихи. М.: Колос, 1983.191с.

33. Горина Е. Д. Биологические особенности скороспелых сортов гречихипоукосного направления в БССР //Генетика, селекция, семеноводство и возделывание гречихи. М.: Колос, 1976. - С. 120-127.

34. Горина Е. Д. Морфологические параметры скороспелых сортов гречихи в

35. БССР //Земледелие и растениеводство в БССР: Сб. науч. тр. /Белорус. НИИ земледелия. 1977. - Вып. 21. - С. 100-107.

36. Фесенко Н. В., Драгунова В. Е. О признаках отбора при селекции гречихина скороспелость //Бюл. науч.-техн. информ. ВНИИЗБК. Орел, 1972. -Вып. 3. - С. 32-35.

37. Фесенко Н. В., Драгунова В. Е. Об особенностях цветения и плодообразования у сортов гречихи разной спелости //Бюл. науч.-техн. информ. ВНИИЗБК. Орел, 1973. - № 4. - С. 3-6.

38. Фесенко Н. В., Драгунова В. Е. Повторяемость признаков, характеризующих скороспелость сортов гречихи //Бюл. науч.-техн. информ. ВНИИЗБК. Орел, 1973. - № 4 - С. 46-50.

39. Фесенко Н. В., Драгунова В. Е. Методика селекции гречихи на скороспелость //Генетика, селекция, семеноводство и возделывание гречихи. -М.: Колос, 1976. С. 113-119.

40. Альтгаузен JI. Ф. Некоторые данные из работ с гречихой //Журнал опытной агрономии. 1910. - Т. II, № 6. - С. 801-829.

41. Моисеенко Л. М. К вопросу о селекции гречихи на неполегаемость в условиях Приморского края //Науч.-техн. бюл. /ВНИИЗБК Орел, 1983. -№31 - С. 72-76.

42. Моисеенко.' JI. М. Изучение исходного материала гречихи в Приморскомкрае //Науч.-техн. бюл. /СибНИИСХ. Новосибирск, 1979. - Вып. 10, 11. -С. 111-114.

43. Моисеенко JI. М., Угнивенко 3. И. Исходный материал гречихи для условий Приморского края //Особенности рациональной системы земледелия Дальнего Востока: Сб. науч. тр. /ПримСХИ. Уссурийск, 1985. - С. 21-24.

44. Моисеенко JI. М., Угнивенко 3. И. Исходный материал для селекции гречихи //Основные направления интенсификации растениеводства в Приморском крае: Сб. науч. тр. /ПримНИИСХ. Новосибирск, 1985. - С. 2427.

45. Угнивенко 3. И. Комплексная оценка полегаемости гречихи в условиях

46. Приморского края //Основные направления интенсификации растениеводства в Приморском крае: Сб. науч. тр. /ПримНИИСХ. Новосибирск, 1985.-С. 17-21.

47. Бобков С. В. Создание исходного материала для селекции интенсивныхсортов гречихи на основе комплексного использования мутантных форм: Дис. . канд. с.-х. наук. Л., 1990. - 165с.

48. Суворова Г. Н. Морфобиологические особенности узколистной формы

49. Горец и использование ее в селекции: Дис. . канд. с.-х. наук, Л., 1990. - 156с.

50. Мартыненко Г. Е. Морфобиологические особенности и перспективы селекции детерминантной формы гречихи //Перспективы повышения урожайности и качества зерна гречихи. Кишинев, 1983. - С. 21-25.

51. Шейкин В. Н. Сравнительная характеристика форм гречихи с детерминированным ростом //Пути повышения урожайности полевых культур. Минск: Урожай, 1990. Вып. 21. - С. 100-105.

52. Сабитов. А. М. Новые формы селекции гречихи //Селекция и сортоваяагротехника зерновых культур в Башкирии: Сб. науч. тр. /БНИИЗиС. -Уфа, 1991.-С. 85-93.

53. Коблев С. Ю. О результатах селекции короткостебельной формы гречихи

54. Орловский карлик //Науч.-техн. бюл. /ВНИИЗБК. Орел, 1983. - № 31. -С. 69-71.

55. Коблев С. Ю. Биологические особенности, результаты селекции перспективы использования короткостебельной формы гречихи Орловский карлик //Перспективы повышения урожайности и качества зерна гречихи: Сб. науч. тр. /Кишинев. СХИ. Кишинев, 1983. - С. 43-47.

56. Фесенко Н. В., Коблев С. Ю. Короткостебельный мутант Орловский карлик донор неполегаемости //Селекция и семеноводство. - 1981. - № 12. - С. 20 - 22.

57. Фесенко Н. В., Мартыненко Г. Е. Тенденции эволюции гречихи в восточно-европейском ареале и использование их в селекции //Вестник Российской академии с.-х. наук. 1998. - № 1. - С. 10-13.

58. Сумцова JI. С. Оценка технологических свойств зерна гречихи //Перспективы повышения урожайности и качества зерна гречихи. Кишинев, 1983. - С. 114-116.

59. Тараненко J1. К. Генетическое обоснование совершенствования, методовселекции гречихи Fagopyrum esculentum Moench: Автореф. дис. . д-ра с.-х. наук /Укр. НИИ земледелия Харьков, 1989 - 46 с.

60. Паушева 3. П., Донцова Т. В. Изучение наследования хозяйственноценных признаков у внутривидовых гибридов гречихи в F, //Известия Тимирязевской с.-х. академии. 1980. - Вып. 2. - С. 36-40

61. Соляник В. И. Особенности наследования хозяйственно-ценных признаков у гречихи //V съезд Всесоюз. о-ва генетиков и селекционеров им Н. И. Вавилова, Москва, 24-28 ноября. 1987 г.: Тез. докл. М., 1987. - T.IV. -С. 175.

62. Горина Е. Д., Дорофеева А. М. Улучшение крупности и выравненное™зерна гречихи различными методами //Селекция, генетика и биология гречихи: Сб. науч. тр. /ВНИИЗБК. Орел, 1971. - С. 29-3

63. Соболев А. Н. Крупность семян и урожайность гречихи //Науч.-техн.бюл. ВНИИЗБК Орел, 1986 - Вып. № 35 - С. 53-54.

64. Петелина Н. Н. Об использовании тетраплоидов в селекции гречихи

65. Селекция и семеноводство. 1956. - № 2 - С. 58-59.

66. Петелина Н. Н. Задачи селекции гречихи //Биология и возделывание гречихи. М., 1962. - С. 53-62.

67. Петелина Н. Н. Роль фасциаций в селекции гречихи //Науч. тр. Тула,1966.-Т. 1.-С. 48-51.

68. Петелина Н. Н. О некоторых путях использования полиплоидии в селекции гречихи //Науч. тр. /ВНИИЗБК- Орел, 1968. Т. П. - С. 243-251.

69. Петелина Н. Н. О новом сорте гречихи Краснострелецкая //Науч. тр. /

70. ВНИИЗБК. Орел, 1968. - Т. П. - С. 251-257.

71. Петелина Н. Н. Создание исходного материала для селекции крупноплодных сортов диплоидной гречихи //Науч. тр. /ВНИИЗБК, Орел, 1971.-Т. Ш.-С. 128-135.

72. Петелина Н. Н. О крупнозерных сортах гречихи //Зерновое хозяйство.1975. -№ 6 -С. 36.

73. Петелина Н. Н. Лесостепной зоне крупнозерные, скороспелые, высококачественные сорта: /гречиха/. //Селекция и семеноводство. 1982. -№ 10. - С. 7-9.

74. Петелина Н. Н. Роль интрогрессивной гибридизации в селекции гречихи

75. Селекция и семеноводство основных с.-х. культур Тат. АССР. Казань, 1984. - С. 13-20.

76. Петелина Н. Н., Галактионова В. М. Значение ранних провокационныхпосевов в селекции крупнозерной диплоидной гречихи (на устойчивость к экстремальным 1°) //Селекция и семеноводство с.-х. культур Тат. АССР. Казань, 1984. - С. 44-49.

77. Петелина Н. Н. Кадырова Ф. 3. Использование интрогрессии в формообразовании гречихи обыкновенной //Селекция и семеноводство. 1991. -№4.-С. 15-16.

78. Победоносцева Е. А., Сулакова Е. П. Направления и методы селекциигречихи //Селекция зернобобовых и крупяных культур: Науч.-техн. бюл. /СибНИИРС. Новосибирск, 1979. - Вып. 10, 11, - С. 78-81.

79. Моисеенко Л. М. Селекционная работа с гречихой в ПримНИИСХ

80. Вопросы селекции и технологии возделывания полевых культур в Приморье: Сб. науч. тр. /РАСХН. Сиб. отд-ние. ПримНИИСХ. Новосибирск, 1992.-С. 30-33.

81. Педоченко В. Ф. Сравнительная оценка некоторых методов селекциигречихи //Вопросы технологии возделывания сельскохозяйственных культур в Приморском крае: Сб. науч. тр. /РАСХН. Сиб. отд-ние, ПримНИИСХ. Новосибирск, 1991. - С. 3-6.

82. Педоченко В. Ф. Использование некоторых методов селекции исходногоматериала гречихи //Вопросы селекции и технологии возделывания, полевых культур в Приморье: Сб. науч. тр. /РАСХН. Сиб. отд-ние. ПримНИИСХ. Новосибирск, 1992. - С. 33-35.

83. Анохина Т. А. О принципах отбора на продуктивность растений в сортовых популяциях гречихи //Перспективы повышения урожайности и качества зерна гречихи. Кишинев, 1983. - С. 29-33.

84. Анохина Т. А. Методы и результаты селекции диплоидных сортов гречихи: Автореф. дис. . д-ра с.-х. наук. Жодино, 1990. - 45 с.

85. Горина Е. Д. Фертильность соцветий гречихи и селекционное значениеэтого явления //Генетика, селекция, семеноводство и возделывание гречихи. М. : Колос, 1976. - С. 68-78.

86. Елагин И. Н. Об использовании гетерозиса у гречихи //Доклады

87. ВАСХНИЛ. 1955. - № 1. - С. 17-20.

88. Кротов. А. С. Внедрить в производство гибридные семена гречихи

89. Земледелие. 1957. - № 5. - С. 92-93.

90. Соловьев Г. М. Значение гетеростилии при гибридизации гречихи

91. Селекция и семеноводство. 1952. - № 4. - С. 17-20.

92. Фесенко Н. Б. Наследование признаков в F, межсортовых гибридов гречихи //Сельскохозяйственная биология. 1968. - Вып. 3, № 5. - С. 681 -687.

93. Фесенко Н. Б., Антонов Б. В. Характер комбинационной способности усортов гречихи //Генетика. 1973. - Т. 9, № 5. - С. 30-35.

94. Алексеева Е. С., Паушева 3. П. Генетика, селекция и семеноводство гречихи. Киев: Вища школа, 1979. - 200 с.

95. Петров Д. Ф., Железнов. А. В. Гетерозис и некоторые возможности использования его в селекции гречихи //Селекция, генетика и биология гречихи: Сб. науч. тр. /ВНИИЗБК. Орел, 1971. - С. 123-131.

96. Железнов А. В. Методы получения партеногенетических гаплоидов угречихи //Апомиксис и его использование в селекции. М. : Колос, 1976. - С. 65-68.

97. Альтгаузен Л. Ф. К вопросу об оплодотворении гречихи //Журнал опытной агрономии. 1907. - Т. 8, № 4. - С. 407-412.

98. Приезжев И. В. Исследование гетерозиса у гречихи //Изв. ТСХА. 1962.3(46). С. 47-58.

99. Шубина А. Ф. Инцухт в селекции гречихи //Селекция и семеноводство.1936. -№ 3. С. 66-71.

100. Замяткин Ф. Е. Самоопыляющаяся гречиха //Селекция, генетика и биология гречихи: Сб. науч. тр. /ВНИЗБК. Орел, 1971. - С. 103-111.

101. Замяткин Ф. Е. Результаты и перспективы селекционной работы с гречихой в Восточной Сибири //Селекция полевых культур Восточной Сибири. Новосибирск, 1980. - С. 57-63.

102. Фесенко Н. В., Антонов В. В. Влияние инбридинга на проявление признаков у гречихи //Бюл. науч.-техн. инф. ВНИИЗБК. Орел, 1975. -Т. XI. - С. 44-47.

103. Шумный В. К., Коваленко В. И., Квасова Э. В., Колосова Л. Д. Некоторыегенетические и селекционные аспекты систем размножения у растений //Генетика. 1978. - Т. XIV, № 1. - С. 25-35.

104. Фесенко Н. Н. Наследование типа цветка у гречихи: Автореф. дис. .канд. биол. наук. Л., 1983. - 21 с.

105. Анохина Т. А., Горина Е. Д. К селекции гречихи на самофертильность

106. Генетика цветка и проблемы совместимости у гречихи. М. : Наука, 1988. - С. 128-140.

107. Фесенко Н. В., Антонов В. В., Лохматова В. Е. Генетические предпосылки и результаты селекции гречихи на гетерозис //Генетика цветка и проблема совместимости у гречихи. М. : Наука, 1988. - С. 153-161.

108. Фесенко Н. В., Антонов В. 3. К селекции синтетических сортов гречихи

109. Науч.-техн. бюл. /СибНИИРС. Новосибирск, 1979. - Вып. 10, II. - С. 66-70.

110. Бриггс Ф., Ноулз П. Научные основы селекции растений. М.: Колос,1972.- 399 с.

111. Палилов А. И. Многократный гетерозис. Минск: Наука и техника, 1976.- 160 с.

112. Палилов А. И. Генетико-популяционные процессы и гетерозис у гречихи

113. Селекция, генетика и биология гречихи: Сб. науч. тр. /ВНИИЗБК. -Орел, 1971.-С. 112-122.

114. Бобер А. Ф., Тараненко Л. К. Метод поликросса в селекции гречихи

115. Генетика, селекция, семеноводство и возделывание гречихи: Науч. тр. /ВАСХНИЛ. М.: Колос, 1976. - С. 93-96.

116. Горина Е. Д. Эффективность посевов сортосмесей гречихи //Селекция исеменоводство. 1957. - № 4. - С. 48-50.

117. Тараненко А. К., Мажаева Т. В., Каратбей П. Ф. и др. О методах и результатах селекции гречихи в Украинском НИИ земледелия //Селекция и семеноводство. Киев, 1983. - Вып. 53. - С. 14-19.

118. Голенковский К. П. Кормовое и пищевое значение гречихи Б. 1а1апсиш

119. Селекция, генетика и биология гречихи: Сб. науч. тр. /ВНИИЗБК. -Орел, 1971.-С. 82-86.

120. Кротов А. С., Голенковский К. П. Татарская гречиха //Тр. по приклад, ботанике, генетике и селекции. 1971. - Т. 46, вып. 1. - С. 160-181.

121. Культурная флора СССР. Т. Ш: Крупяные культуры (гречиха, просо, рис)

122. Под общ. Ред. А. С. Кротова. Л. : Колос, 1975. - 365 с.

123. Кротов А. С. Многолетняя гречиха //Селекция и семеноводство. 1968.4. С. 78-79.

124. Шевчук В. К. Исходный материал для селекции гречихи на устойчивостьк заболеваниям: Дис. . канд. с.-х. наук. Каменец-Подольский, 1987. -154 с.

125. Сальников В. К. Появление тетраплоидных форм при межвидовых прививках гречихи //Вестник с.-х. наук. 1958. - № 8. - С. 82-88.

126. Астафьев А. М. К получению гибрида Fagopyrum sagittatum х Fagopyrumtataricum //Селекция, генетика и биология гречихи: Сб. науч. тр. /ВНИИЗБК. Орел, 1971. - С. 153-158.

127. Morris М. R. Cytogenetic stadies on buckwheat //Hereditas. 1951. - Vol. 42.-P. 85-89.

128. Гришина E. E. Несовместимость при межвидовых скрещиваниях у гречихи //Генетика, селекция, семеноводство и возделывание гречихи. М.: Колос, 1976. - С. 37-41.

129. Кротов А. С., Голубева Е. А. Цитогенетическое изучение межвидовогогибрида F. tataricum х F. cymosum //Тр. по прикладной ботанике, генетике и селекции /ВИР. Л., 1973. - Т. 51, вып. 1. - С. 256-260.

130. Кротов А. С., Драненко Е. Т. Амфидиплоид гречихи Fagopyrum giganteum Krot. sp. nova //Бюл. ВИР. Л., 1973. - Вып. 30. - С. 41-44.

131. Банникова В. П. Межвидовая несовместимость у растений. Киев. Наукова думка, 1986. 202 с.

132. Линскенс Г. Ф. Реакция торможения при несовместимом опылении и еепреодоление //Физиология растений. 1973. - Т. 20, вып. 1. - С. 192-203.

133. Поддубная-Арнольди В. А. Цитоэмбриология покрытосемянных растений. М.: Наука, 1976. - 507 с.

134. Тараненко Л. К., Шаповал А. И., Левенко Б. А., Булах А. А. Некоторыеаспекты межвидовой гибридизации гречихи //Генетика, селекция, семеноводство и возделывание крупяных культур: Сб. науч. тр. /Кишинев СХИ. Кишинев, 1987. - С. 53-61.

135. Юмагужин М. С., Фатхутдинова Р. А., Сабитов А. М. Крупноплодная полиплоидная форма самофертильной гречихи //Известия АН /Рос. АН. Сер. биол. 1993. - № 1. - С. 130-131.

136. Алексеева Е. С., Бляндур 0. В., Лысиков В. Н. Индуцированный мутагенез перекрестноопыляющихся культур. Кишинев: Штиинца, 1978. -162 с.

137. Филипчук П. Д. Изучение действия высоких доз гамма-излучений на растения и создание исходного материала для селекции гречихи методом радиационного мутагенеза: Автореф. дис. . канд. с.-х. наук. Кишинев, 1978.-24 с.

138. Гаврилюк Г. М. Использование химических и мутагенных веществ в селекции на урожай и качество зерна гречихи : Автореф. дис. . канд. с.-х. наук. Жодино, 1984. - 22 с.

139. Роик Н. В. Использование совместного действия гамма-излучений и химических мутагенных веществ для создания исходного материала в селекции гречихи: Автореф. дис. . канд. с.-х. наук. Кишинев, 1978.-19 с.

140. Белоножко В. Я. Получение исходного материала в селекции гречихи путем обработки пыльцы, семян и вегетирующих растений разными мутагенными факторами: Автореф. дис. . канд. с.-х. наук. Одесса, 1983. -21 с.

141. Белоножко В. Я. Использование лазерного излучения для создания исходного материала в селекции гречихи //Приемы и методы повышения урожайности полевых культур. Киев, 1981. - С. 74-76.

142. Рарок В. А., Рогожинский К. Ю., Власенко В. М. Роль повторных гаммаоблучений семян в селекции гречихи //Перспективы повышения урожайности и качества зерна гречихи: Сб. науч. тр. /Кишинев. СХИ. -Кишинев, 1983. С. 51-53.

143. Алексеева Е. С., Рарок В. А. Повторное многократное гамма-облучениекак метод радиационного мутагенеза гречихи //Вторая всесюз. конф. по с.-х. радиологии: Тез. докл. Обнинск, 1984. - Т. 2. - С. 36-37.

144. Алексеева Е. С., Рарок В. А. Появление мутаций у старших поколенийгречихи //Вторая всесоюз. конф. по с.-х. радиологии.: Тез. докл. Обнинск, 1984.-Т. 2.-С. 36.

145. Герасименко В. Г. Экспериментальный мутагенез в селекции гречихи наскороспелость //Перспективы повышения урожайности и качества зерна гречихи: Сб. науч. тр. /Кишинев. СХИ. Кишинев, 1983. - С. 54-56.

146. Герасименко В. Г. Индуцированные скороспелые мутанты гречихи и ихселекционная ценность //Повышение урожайности и качества крупяных культур методами селекции и технологии возделывания (гречихи): Науч. тр. /ВНИИЗБК. Орел, 1985. - С. 48-51.

147. Кириленко С. К. Влияние модификатора мутационного процесса тиаминобензойной кислоты на появление хлорофилльных мутаций гречихи в М. //Перспективы повышения урожайности и качества зерна гречихи: Сб. науч. тр. /Кишинев. СХИ. Кишинев, 1983. - С. 58-64.

148. Шевчук В. К. Исходный материал для селекции гречихи на устойчивостьк заболеваниям: Дис. . канд. с.-х. наук. Каменец-Подольский, 1987. -154 с.

149. Алексеева Е. С., Бочкарева JI. П. Коллекция мутантов гречихи и её краткая характеристика //Повышение урожайности и качества крупяных культур методами селекции и технологии возделывания (гречиха): Сб. науч. тр. /ВНИИЗБК. Орел, 1985. - С. 15-18.

150. Дорофеева А. М. К вопросу о селекции тетраплоидной гречихи

151. Земледелие и растениеводство в БССР: Сб. науч. тр. Минск: Урад-жай, 1973. - Т. 16. - С. 120-123.

152. Мухин Н. Д., Врублевский А. JL, Лаврукович С. Д. Создание аутотетраплоидных форм гречихи //Земледелие и растениеводство в БССР: Сб. науч. тр. Минск: Ураджай, 1973. - Т. 16. - С. 112-119.

153. Елагин И. Н. О состоянии и задачах по улучшению селекции и семеноводства гречихи //Селекция, генетика и биология гречихи : Сб. науч. тр. /ВНИИЗБК. Орел, 1971. - С. 4-13.

154. Победоносцева Е. А., Сулакова Е. П. Направления и методы селекциигречихи //Науч.-техн. бюл. /СибНИИРС. Новосибирск, 1979. - Вып. 10, 11. - С. 78-82.

155. Ткачев А. Т. Цитогенетическое и селекционно-генетическое исследование природы пониженной плодовитости аутотетраплоидов гречихи посевной: (Fagopyrum esculentum Moench. ): Автореф. дис. . канд. биол. наук. -М., 1975.-25 с.

156. Алексеева Е. С., Фалендыш Л. Г., Маликов В. Г. Аспекты реализации селекционно-генетического потенциала зеленоцветковых ди- и тетрапло-идных форм гречихи //Морфология и генетика процессов роста и развития: М.: Наука, 1989. С. 37-39.

157. Кротов А. С., Драненко Е. Т. Амфидиплоид гречихи Fagopyrum giganteum Krot. sp. nova //Бюл. ВИР. Л., 1973. - Вып. 30. - С. 41-44.

158. Фролова С. Л., Мансурова В. В. Результаты переопыления между тетраплоидной и диплоидной гречихой //Докл. АН СССР. 1948. - Т. LX, № 3. с. 493-496.

159. Соболев А. Н. Жизнеспособный триплоид гречихи //Генетические основы селекции и семеноводства гречихи: Сб. науч. тр. /Кишинев. СХИ. -Кишинев, 1985.-С. 80-83.

160. Соболев А. Н. Ультракороткопестичная форма у триплоидной гречихи

161. Цитогенетический и математический подход к изучению биосистем. М. : Наука, 1986.-С. 72-75.

162. Неттевич Э. Д., Фесенко Н. В. Биологический метод изоляции обыкновенной гречихи //Селекция и семеноводство. 1964. - № 2. - С. 41-45.

163. Фесенко Н. В. Развитие селекции гречихи в России //Корни и крона Шатиловского эксперимента: Сб. матер, научно-практич. конф. Россельхо-закадемии к 100-летнему юбилею Шатиловской и 75-летию Новосиль-ской опыт. ст. Орел, 1996. - № 2. - С. 154-163.

164. Муромцев Г. С. Достижения и перспективы исследований по биотехнологии сельскохозяйственных растений //Сельскохозяйственная биология. 1996.-№ 5. - С. 3-9.

165. Бутенко Р. Г. Клеточные технологии в селекционном процессе

166. Состояние и перспективы развития сельскохозяйственной биотехнологии: Материалы Всесоюз. конф., Москва, июнь 1986 г. Л., 1986. - С. 29-38.

167. Марьяхина И. Я., Полумордвинова И. В., Кокорева В. А., Луконина Е. И.

168. Биотехнология получения фертильных форм межвидовых гибридов лука на основе полиплоидизации in vitro //Состояние и перспективы развития сельскохозяйственной биотехнологии: Материалы Всесоюз. конф. Москва, июнь 1986 г. Л., 1986. - С. 88-93.

169. Новоселова А. С., Мазин В. В. Использование методов биотехнологии вселекции многолетних бобовых трав //Состояние и перспективы развития сельскохозяйственной биотехнологии: Материалы Всесоюз. конф., Москва, июнь 1986 г. Л., 1986. - С. 63-69.

170. Maheswari P., Kusan Kanta Control of fertilization //Pollen physiology andfertilization. 1961. - P. 187-193

171. Kanta K., Rangaswamy N. S., Maheswari P. Test-tube fertilization in a flowering plant//Nature. 1962.-Vol. 194, N4835.-P. 1214-1217.

172. Zhang Gulhe, Song Pellun Оплодотворение in vitro гибридов риса группindica и japonica //Sci. agr. sin. 1993. - Vol. 26, N 5. - C. 19-24.

173. Терновский M. Ф., Шинкарева И. К., Ларькина Н. И. Получение межвидовых гибридов табака путем опыления семяпочек in vitro //Генетика. -1976. Т. ХП, № 10. - С. 40-45.

174. Здруйковская-Рихтер А. И., Бабасюк М. С. Опыление и оплодотворениесемяпочек в культуре in vitro //Физиология растений. 1974. - Т. 218, №6.-С. 1482-1484.

175. Reed S. М. and Collins G. В. Interspecific hybrids in Nicotiana throught invitro culture of fertilizereds ovules //J. Hered. 1978. - Vol. 69. - P. 311-315.

176. Zenkteler M. In vitro Pollination and Fertilization //Cell Culture and Somatic

177. Cell Genetics of Plants. 1984. - Vol. 1. - P. 269-275.

178. Moue T. Interspecific hybridization between an A-genome species (chinsse

179. Cabbage) and a C-genome species (cabbage) of Brassica Embryo and ovulo culture cabbage //Plant Breed Abst. 1980. - Vol. 50. - P. 702.

180. Kranz and Lorz H. Micromanipulation and in vitro fertilization with singlepollen grains of maize //Sexnal Plant Reproduction. 1990. - Vol. 3, N 3. - P. 160-169.

181. Уралец Л. И. Получение гибридных семян томатов опылением пестиковin vitro //Физиология и биохимия культурных растений. 1981. - Т. 13, -С. 77-80.

182. Stewart J. In vitro fertilization and embryo rescue //Env. And Exp. Botany.1981. Vol. 21, N 3/4. - P. 301-315.

183. Гирко В. С. Преодоление постгамных барьеров несовместимости при отдаленной гибридизации злаков //Докл. Рос. акад. с.-х. наук. 1996. -№1.-С. 4-7.

184. Майстров П. Д., Баннокова В. П., Чередниченко В. Н. и др. Сравнениедвух методов получения отдаленных гибридов при скрещивании тритикале с рожью //Цитол. и генет. 1993. - Т. 27, № 3. - С. 25-30.

185. Козловская В. Ф., Мусалитин Г. М. Использование эмбриокультуры приполучении растений первого поколения первого беккроса межвидовых гибридов пшениц //Вестн. Рос. акад. с.-х. наук. 1993. - № 5. - С. 14-17.

186. Титова И. В., Тимин Н. И., Юрьева Н. А., Дмитриева Н. Н. Применениеметода культуры изолированных зародышей в межвидовой гибридизации лука //Труды по селекции и семеноводству овощных культур. 1982.-Вып. 15.-С. 57-65.

187. Курсаков Г. А. Применение изолированной культуры зародышей и тканей при отдаленной гибридизации плодовых растений //Тканевые и клеточные культуры в селекции растений: Науч. тр. /ВАСХНИЛ. М., 1979. - С. 70-77.

188. Кравцов II. В., Касьянова В. Г. Культура изолированных зародышей какметод преодоления стерильности отдаленных гибридов плодовых растений //Физиология растений. 1968. - Т. 15, № 5. - С. 931-933.

189. Шаденко А. А., Кадыров Р. М., Узбекова С. В. и др. Создание гена гибридного белка на основе 8-эндотоксинов Bacillus thuringiensis Cry ША и Cry 1А(а) и экспрессия его производных в Escherichia coli //Молекуляр. биол. 1993. - Т. 27, № 4. - С. 952-959.

190. Генерозов 3. В., Рябов Е. В., Конарева Т. Н. и др. Получение рекомбинантных оболочек сферических фитовирусов и исследование возможности их использования для иммуноферментной диагностики //Молекуляр. биол. 1996. - Т. 30, № 2. - С. 461-469.

191. Внучкова В. А., Неттевич Э. Д., Чеботарева Т. М. и др. Использованиеметодов и in vitro в селекции ячменя на устойчивость к токсичности почв //Докл. ВАСХНИЛ. 1989. - № 7. - С. 2-5.

192. Аветисов В. А., Давыдова Ю. В., Мелик-Саркисов О. С. и др. Получениерезистентных к гидролитическим ферментам клеточных клонов и реге-нерантов картофеля с повышенной устойчивостью к фитофторозу //Биотехнология. 1992. - № 1. - С. 18-22.

193. Копертех Л. Г., Бутенко Р. Г. Клеточная селекция яровой мягкой пшеницы на устойчивость к хлоридному засолению //Докл. РАСХН. 1996. -№ 3. - С. 3-4.

194. Мелик-Саркисов О. С., Табель Б. В., Цоглин Л. Н. и др. Технология иоборудование для промышленного производства мини-клубней картофеля //Вестн. с.-х. науки. 1991. - № 12. - С. 134-137.

195. Чернобровкина М. А., Чернобровкин С. Л., Мартиросян Ю. Ц. и др. Особенности выращивания мини-клубней картофеля в биотехнологической системе //С. х. биология. - 1994. - № 3. - С. 65-72.

196. Хавкин Э. Е., Ко Э. X. Организация регулирующих рост генов у кукурузы. 1. Функциональные кластеры генов. //Физиология растений. 1995. -Т. 42, №3.-С. 395-407.

197. Хавкин Э. Е., Ко Э. X. Организация регулирующих рост генов у кукурузы. 2. Локусы количественных признаков. //Физиология растений. -1995.-Т. 42, №4.-С. 629-646.

198. Муромцев Г. С. Фузикокцин новый фитогормон? //Физиология растений. 1996. - Т. 43, № 3. - С. 478-492.

199. Павлова 3. Н., Лоскутова Н. А., Внучкова В. А. и др. Ксилоглкжановыеолигосахарины элиситоры защитных реакций растений //Физиология растений. - 1996. - Т. 43, № 2. - С. 279-284.

200. Атанасов А. Биотехнология в растениеводстве /Пер. с болг. Е. В. Дейнеко; Под ред. Л. Д. Колосовой, Е. В. Дейнеко Новосибирск, 1993. - 241 с.

201. Попов А. С. Криогенное хранение культур клеток растений //Культураклеток растений. М.: Наука, 1981. - 187 с.

202. Stanwood Р. С. Cryopreservation of seed germplasm //Amer. Soc. Agron.

203. Annu. Meet. 1993. Cincinnati, 1993. - P. 153-154.

204. Eberhart S. A. Breeder's perspective of long-term storage //Amer. Soc. Agron.

205. Annu. Meet. 1993. Cincinnati, 1993. - P. 150.

206. Pattison G. A. National collections exchange of plant material through

207. Community states //Plant Hearth and Eur. Single Market: Proc. Symp. Brit. Grop Prot. Counc., Assoc. Appl. Biol. And Brit. Soc. Plant Pathol., Reading, 30th March 1st April 1993. - Farnham, 1993. - P. 413-416.

208. Edallo S., Zucchinali С., Perenzin М., Salamin F. Chromosomal variation andfrequency of spontaneous mutation associated with in vitro culture and plant regeneration in maize //Maydica. 1981. - Vol. 26, N 1. - P. 39-56.

209. Витанова 3., Влахова M., Денчев П. и др. Сомаклональная изменчивость

210. Физиология и биохимия культурных растений. 1990. - Т. 22, № 5. - С. 419-426.

211. Fukui К. Sequential occurrence of mutations in a growing rice callus //Theor.and Appl. Genet. 1983. - Vol. 65, N 3. - P. 226-230.

212. Prat D. Genetic variability induced in Nicotiana sylvestris by protoplast culture //Theoret. Appl. Genet. 1983. - Vol. 64, N 3. - P. 223-230.

213. Evans David A., Sharp William R. Single gene mutations in tomato plants regenerated from tissue culture //Science. 1983. - Vol. 221, N 4614. - P. 949951.

214. Биотехнология растений. Клеточная селекция /Отв. ред. Глеба Ю. Ю. ;

215. АН УССР Отд. клет. биол. и инжен. Ин-та ботаники им. Н. Г. Холодного. Киев: Наукова думка, 1990. - 280 с.

216. Gengenbach В. G., Green С. Е., Donovan С. М. Inheritance of selectedpathotoxin resistance in maize plants regenerated from cell cultures //Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1977. - Vol. 74, N 11. - P. 5113-5117.

217. Змеева В. H. Тенденции изменчивости некоторых хозяйственно полезныхпризнаков в популяциях сомаклонов и андрогенных дигаплоидов риса Oriza sativa L.: Автореф. дис. . канд. с.-х. наук. Владивосток,!995. -27 с.

218. Россеев В. М. Получение каллусной культуры ячменя с высокой регенерационной способностью и изучение растений-регенерантов //Междунар. конф. "Биология культивируемых клеток и биотехнология": Тез. докл. Новосибирск, 1988. - Ч. 2. - С. 264.

219. Кушнаренко С. В. Морфогенез и регенерация растений в культуре соматических тканей пшеницы //Междунар. конф. "Биология культивируемых клеток и биотехнология": Тез. докл. Новосибирск, 1988. - Ч. 2. -С. 265.

220. Эльконин Л. А., Тырнов В. С., Ишин А. Г. Сомаклональная изменчивостьв культуре гаплоидных тканей сорго //Междунар. конф. "Биология культивируемых клеток и биотехнология": Тез. докл. Новосибирск, 1988.-Ч. 2.-С. 273.

221. Папазян Н. Д., Бичехвост Г. И. Исследование изменчивости в потомстверегенерантов пшеницы и ячменя //Междунар. конф. "Биология культивируемые клеток и биотехнология" : Тез. докл. Новосибирск, 1988. - Ч. 2. - С. 266.

222. Гостимский С. А., Ежова Т. А., Багрова А. М. Генетический анализ сомаклональных изменений у посевного гороха //Междунар. конф. "Биология культивируемых клеток и биотехнология": Тез. докл. Новосибирск, 1988.-Ч. 2.-С. 271.

223. Skrzypczak L., Thiem В. Fagopyrum esculentum М. Tissue culture and thecontrol of active compounds content //Buckwheat Research: Proc. 3d Int. Symp. Buckwheat, Pulawy, Poland, 7-12 July, 1986. Pulawy,1986. - Part 2. -P. 57-58.

224. Samimy Cyrus Barrier to interspecific crossing of Fagopyrum esculentumwith Fagopyrum tataricum. I. Site of pollentube arrest. II Organogenesisfrom immature embryos of tataricum //Euphytica. 1991. - Vol.54, N 3. - P. 215-219.

225. Рубцова M. А., Левенко Л. К., Шаповал А. И., Янчук Р. И. Получениемежвидовых гибридов между гречихой обыкновенной и гречихой татарской с помощью эмбриокультуры //Физиология и биохимия культурных растений. 1994. - Т. 26, № 6. - С. 563-566.

226. Юмагужин М. С., Мардамшин А. Г., ЗиякаеваК. Р., Фатхутдинова Р. А.

227. Использование метода эмбриокультуры в создании гибридной гречихи //2 съезд Биохим. о-ва РАН, Москва, 19-23 мая, 1997: Тез. стенд, сообщ. Пущино, 1997. - Ч. 2. - С. 546.

228. Суворова Г. Н., Кострубин М. М. Метод эмбриокультуры в применении кгречихи //Достижения биотехнологии агропромышленному комплексу: Тез. докл. Всесоюз. конф., 14-18 октября 1991 г. - Черновцы, 1991. -Т. I.-C. 55.

229. Барсукова Е. Н. Регенерация гречихи посевной (Fagopyrum esculentum

230. Moench) через каллусную культуру //Некоторые вопросы селекции и технологии возделывания сельскохозяйственных культур в Приморье: Сб. науч. тр. /РАСНХ. Дальневосточное отделение. ПримНИИСХ. Новосибирск, 1994. - С. 3-10.

231. Барсукова Е. Н. Микроразмножение регенерантов гречихи in vitro.

232. Вопросы' научного обеспечения сельскохозяйственного производства Приморья: Сб. науч. тр. /РАСХН. Дальневосточное отделение. ПримНИИСХ. Хабаровск, 1997. - С. 27-31.

233. Kreft I. Breeding perspectives //Buckwheat Research: Proc. Znd Int. Symp.

234. Buckwheet, Miyazaki. Japan, 7-10 Sept. 1983. Miyazaki, 1983. - P. 3-12.

235. Neskovic M., Srejovic V., Vujicic R. Buckwheat (Fagopyrum esculentum Moench) //Cropsi Berlin, 1986. P. 579-593.

236. Биотехнология растений: культура клеток /Пер. с англ. В. Н. Негрука спредисл. Р. Г. Бутенко. М.: Агропромиздат, 1989. - 280 с.

237. Поддубная-Арнольди В. А. Сравнительно-эмбриологическое исследование диплоидных и тетраплоидных форм гречихи //Ботанический журнал. 1948. - Т. 33, № 2. - С. 181-194.

238. Hirose Tamaki, Ujihara Akio, Kitabayashi Airomi, Minami Mineo Morphology and identification by isozyme analyses of interspecific hybrids in buckwheat //Fagopyrum. 1993. - Vol. 13 - P. 25-30.

239. Суриков И. M. Несовместимость и эмбриональная стерильность растений. М.: Агропромиздат. - 1991. - 220 с.

240. Суриков И. М., Гавриленко Т. А., Дунаева Е. С. и др. К вопросу о преодолении и использование межвидовой несовместимости сельскохозяйственных растений с помощью методов in vitro //Сельскохозяйственная биология. 1986. - № 4. - С. 3-9.

241. Srejovic V., Neskovic М. Vegetative propagation of buckwheat in vitro

242. Fagopyrum. 1983. - Vol. 3. - P. 5-6.

243. Зиякаева К. P., Асфандиярова P. P. Культивирование изолированных тканей гречихи //Актуальные вопросы биотехнологии. Уфа, 1990. - С. 5359.

244. Adachi Т., Suputtidada S., Miike Y. Plant regeneration from anther culture incommon buckwheat (Fagopyrum esculentum) //Fagopyrum. 1998. - Vol. 8. -P. 5-9.

245. Adachi Т., Yamaguchi A., Miike I., Hoffmann F. Plant regeneration fromprotoplasts' of common buckwheat (Fagopyrum esculentum Moench.) //Plant Cell Repts. 1989. - Vol. 8, N 4. - P. 247-250.

246. Lachmann S., Adachi T. Callus regeneration from hypocotyl protoplasts oftartary buckwheat (Fagopyrum tataricum Gaertn.) //Fagopyrum. 1990. -Vol. 10. - P. 62-64.

247. Батыгина Т. Б., Васильева В. Е., Маметьева Т. Б. Проблемы морфогенезаin vivo и in vitro. Эмбриоидогенез у покрытосеменных растений //Ботанический журнал. 1978. - Т. 63, № 1. - С. 87-111.

248. Neskovic М., Vujcic R., Budimir S. Somatic embryogenesis and bud formationfrom immature embryos of buckwheat (Fagopyrum esculentum Moench.)

249. Plant Cell Reports. 1987. - Vol. 6, N 6. - P. 423-426.

250. Комаров В. И., Иванова Е. А. Генная инженерия на службе продовольствия //Вестник Российской академии сельскохозяйственных наук. 1999. - № 2. - С. 79-80.

251. Neskovic М., Vinterhalter В., Miljus Djkic, а. о. Susceptibility of buckwheat (Fagopyrum esculentum Moench.) to Agrobacterium tumefaciens and A. rhizogenes //Fagopyrum. 1990. - Vol. 10. - P. 57-61.

252. A. c. 818241. Способ селекции самоопыленных линий гречихи с длинностолбчатым типом цветка/Н. Н. Фесенко //Бюл. информ. 1981. - № 10.

253. Murashige Т., Skoog F. A. A revised medium for rapid growth and bioassayswith tobacco tissue cultures //Physiol, plantarum. 1962. - Vol. 15, N 23. - P. 473.

254. Gamborg O. L., Miller R. A., Ojima K. Nutrient requirements of suspensionculture of soybean root cells //Ep. Cell. Res. 1968. - Vol. 50, N 1. - P. 152.

255. Трушечкин В. Г., Высоцкий В. А., Леонтьев-Орлов О. А. Размножениеклоновых подвоев яблони методом культуры ткани //Сельскохозяйственная биология. 1982. - Т. XVII, № 4. - С. 455-457.

256. Иванов Г. И. Почвы Приморского края., Владивосток, 1964. 107 с.

257. Иванов Г. И. Классификация почв равнин Приморья и Приамурья. Владивосток, 1966. 47 с.

258. Синельников Э. П. Лугово-глеевые почвы северо-западной части Приморского края //Пятая научная конференция: Тез. докл. /Прим. СХИ. -Уссурийск, 1966. С. 12 - 14.

259. Лихачева В. А. Буро-подзолистые и лугово-бурые оподзоленные почвы

260. Суйфуно-Ханкайской низменности//Агрономия: Науч. тр. /Прим. СХИ; Прим. с.-х. опыт. ст. Владивосток, 1966. - Вып. 1. - С. 31 - 36.

261. Методика Государственного сортоиспытания сельскохозяйственныхкультур. М., 1961. - Вып. 1. - 240 с.

262. Классификатор рода Fagopyrum Mill. /Гречиха/ВИР; Сост. А. С. Кротов идр. Л., 1974. - 16 с.

263. Методические указания по изучению коллекционных образцов кукурузы,сорго и крупяных культур (просо, гречиха, рис). /ВИР; Сост. Г. Е. Шма-раев и др. JI., 1968. - 51 с.

264. Практикум по агрохимии. /Под ред. Б. Я. Ягодина. М.: Агропромиздат.1987.-511 с.

265. Высочина Г. И., Кульпина Т. Г., Березовская Т. П. Содержание флавоноидов в некоторых видах Polygonum L. секции Persicaria (Mill.) Д. С. флоры Сибири //Раст. ресурсы. 1987. - Т. 23, вып. 2. - С. 229 - 234.

266. Доспехов Б. А. Методика полевого опыта. 4-е изд., перераб. и доп. - М.:1. Колос, 1979.-416 с.

267. Рокицкий П. Ф. Биологическая статистика. 3-е изд., испр. - Минск.:

268. Вышэйшая школа, 1973. 320 е.

269. Рокицкий П. Ф. Введение в статистическую генетику. Минск, 1974.448 с.

270. Eberhart S. A., Russell W. A. Stability parameters for comparing varieties

271. Crop. Sci. 1966. - Vol. 6, № 1. - P. 36-40.

272. Пакудин В. 3. Параметры оценки экологической пластичности сортов игибридов //Теория отбора в популяциях растений. Новосибирск, 1976. -С. 178-189.

273. Чекалин Н. М., Голубев А. А., Кудрин И. А. Методы повышения эффективности отбора по количественным признакам //Селекция зернобобовых культур. М., 1981. - С. 101-123.

274. Агроклиматические ресурсы Приморского края. Л.: Гидрометеоиздат,1973.- 147 с.

275. Основные итоги работы РАСХН за 1998 г. /РАСХН. М., 1998. - 326 с.

276. Hammatt N., Davey М. R. Somatic embryogenesis and plant regenerationfrom cultured zygotic embryos of soybean (Glycine Max. (L.) Merr.) //Plant. Physiol. 1987. - Vol. 128. - P. 219-226.

277. Komatsuda Т., Ohyama K. Genotypes of high competence for somatic embryogenesis and plant regeneration in soybean Glycine max. //Theoret. appl.

278. Genet. 1988. - Vol. 75, № 5. - P. 695-700.

279. Катаева Н. В., Бутенко Р. Г. Клональное микроразмножение растений.1. М.: Наука, 1983.-96 с.

280. Диас С., Долгих Ю.И., Шамина З.Б., Шевелуха B.C. Значение физиологических и генетических факторов в индукции эмбриогенного каллуса у разных линий кукурузы //Доклады РАСХН. 1994. - № 2. - С. 6-7.

281. Бегунов И.И., Красникова H.H., Самусь В.И. и др. Хитозан природныйиндуктор болезнеустойчивости растений //Производство экологически безопасной продукции растениеводства: Регион, рекомендации. Пу-щино. 1996 - Вып. 2. - С. 214-215.

282. Мудрик Н. В. Исходный материал для селекции сои в Приморье: Дис. .канд. с.-х. наук. Уссурийск, 1983. - 205 с.

283. Экологическая пластичность сортов сельскохозяйственных культур в Западной Сибири: Науч. техн. бюл. /ВАСНИЛ Сиб. отд - ние. СибНИ-ИСХ. - 1989.-Вып. 5/6.-60с.

284. Лаханов А. П. Физиологические основы селекции гречихи на высокую и стабильную семенную продуктивность //Первый междунар. семпоз. "Новые и нетрадиц. растения и перспективы их практ. использования": Тез. докл. Пущино, 1995. - С. 438 - 440.

285. Dorn L. A., Schmitt J. The genetic basis of phenotypic plasticity: Do plasticity genes exist or not ? //6th Congr. Eur. Soc. Evol. Biol., Arnhem, 24 28 Ang., 1997: Progr. Abstr. - Heteren; Wageningen, 1997. - P. 23 - 26.

286. Литун П. П. Взаимодействие "генотип среда" в генетических и селекционных исследованиях и способы его изучения //Проблемы отбора и оценки селекционного материала. - Киев, 1980. - С. 63 - 92.

287. Гораш А. С. Оценка генотипов гречихи по ее фенотипам //Генетика, селекция, семеноводство и возделывание крупяных культур: Сб. науч. тр. /Кишинев. СХИ. Кишинев, 1991. - С. 59-62.1. Продолжение приложения I1 2 3 4 5 6 7 8

288. I 15,9 17,2 -1,3 46,3 28,0 18,3за месяц - - 84,2 84,0 0,21. Июль 1.17,0 18,5 -1,5 7,7 30,0 -22,31. 20,5 20,0 0,5 28,6 31,0 -2,4

289. I 20,4 21,4 -1,0 107,6 32,0 75,6за месяц - - . 143,9 93,0 50,91. Август 1.20,4 21,8 -1,4 55,0 40,0 15,01. 21,9 21,1 0,8 46,7 41,0 5,7

290. I 18,4 19,6 -1,2 22,2 40,0 -17,8за месяц - - 123,9 121,0 2,91. Сентябрь 1.17,2 17,5 -0,3 10,8 38,0 -27,21. 16,9 14,8 2,1 77,4 35,0 42,4

291. I 12,9 12,6 0,3 0,8 33,0 -32,2за месяц - - 89,0 100,0 -11,01. Продолжение приложения I1 2 3 4 5 6 7 81. Сентябрь 1.18,0 20,3 -2,3 2,7 32,0 -29,31. 11,6 15,6 -4,0 5,9 35,0 -29,1

292. I 12,2 13,1 -0,9 0,0 33,0 -33за месяц - - 8,6 100,0 -91,41998 Июнь 1.13,9 14,2 -0,3 10,5 27,0 -16,51. 15,5 15,6 -0,1 30,4 29,0 1,4

293. I 17,8 17,2 0,6 13,6 28,0 -14,4за месяц - - 54,5 84,0 -29,51. Июль 1.20,0 18,5 1,5 46,7 30,0 16,71. 19,7 20,0 -0,3 0,3 31,0 -30,7

294. I 20,2 21,4 -1,2 3,0 32,0 -29,0за месяц - - 50,0 93,0 -43,01. Продолжение приложения I1 2 3 4 5 6 7 81. Август 1.20,2 21,8 -1,6 34,0 40,0 -6,01. 19,8 21,1 -1,3 73,2 41,0 32,2

295. I 18,4 19,6 -1,2 41,9 40,0 1,9за месяц - - 149,1 121,0 28,11. Сентябрь 1.19,1 17,5 1,6 166,1 32,0 128,11. 15,9 14,8 1,1 5Д 35,0 -29,9

296. I 14,4 12,6 1,8 46,2 33,0 13,2за месяц - - 217,4 106,0 111,41999 Июнь 1.15,0 14,2 0,8 36,1 27,0 9Д1. 17,7 15,6 2Д 6,5 29,0 -22,5

297. I 17,6 17,2 0,4 24,3 28,0 -3,7за месяц - - 66,9 84,0 -17,11. Продолжение приложения I1 2 3 4 5 6 7 81. Июль 1.19,6 18,5 1Д 25,0 30,0 -5,01. 21,5 20,0 1,5 18,8 31,0 -12,2

298. I 22,7 21,4 1,3 35,9 32,0 3,9за месяц - - 79,7 93,0 -13,31. Август 1.21,5 21,8 -0,3 4,2 40,0 -7,61. 20,2 21,1 -0,9 16,1 41,0 -24,9

299. I 21,3 19,6 1,7 32,4 40,0 -7,6за месяц - - 52,7 121,0 -68,31. Сентябрь 1.21,3 12,5 3,8 3,7 32,0 -34,31. 14,1 14,8 -0,7 13,8 35,0 -21,5

300. I 12,7 12,6 -0,1 8,6 33,0 -24,4за месяц - - 26,1 100,0 -79,9

301. Рис. 1. Динамика эмбриоидогенеза на каллусных линиях гречихи сорта Изумруд различного происхождения1. Продолжение приложения 380 п

302. Период образования эмбриоидов, дн. ^ на среде Мэ ■ на среде Рэ

303. Рис. 3. Динамика эмбриодогенеза на каллусных линиях гречихи сорта Приморская местная