Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Защитное действие фитоадаптогенов на кроветворение при токсическом воздействии ацетата свинца

ВАК РФ 03.00.16, Экология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Пашкевич, Ирина Анатольевна

Введение.

Глава 1. Обзор литературы.

1.1. Влияние токсического действия ацетата свинца на организм человека и животных.

1.2. Регуляция кроветворения. Запрограммированная клеточная гибель.

1.3. Протекторные и биологические эффекты адаптогенов.

Глава 2. Материалы и методы исследования.

2.1. Экспериментальные животные.

2.2. Исследование периферической крови.

2.3. Выделение клеток костного мозга у лабораторных животных.

2.4. Приготовление и окраска препаратов костного мозга.

2.5. Изучение процессов запрограммированной клеточной смерти (апоптоза) и некроза.

2.6. Исследование продуктов перекисного окисления липидов в суспензии клеток костного мозга в тесте с тиобарбитуровой кислотой.

2.7. Аргентофильность ядрышек в клетках костного мозга.

2.8. Статистическая обработка результатов.

Глава 3. Результаты собственных исследований.

3.1. Гематологические показатели при по дострой интоксикации ацетата свинца.

3.2. Цитотоксическое действие ацетата свинца на клетки костного мозга мышей in vivo.

3.3. Влияние ацетата свинца на перекисное окисление липидов в клетках костного мозга in vivo.

3.4. Анализ ядрышкового аппарата клеток костного мозга при свинцовой интоксикации.

3.5. Сравнительная оценка действия п-тирозола и экстракта родиолы розовой на клетки костного мозга in vivo при воздействии ацетата свинца.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Защитное действие фитоадаптогенов на кроветворение при токсическом воздействии ацетата свинца"

Актуальность темы. В последние годы случаи отравления сельскохозяйственных животных солями тяжелых металлов приобретают массовый характер. Одной из причин интоксикации организма животных является загрязнение окружающей среды отходами производственных объектов, чрезмерным ростом численности автотранспорта и содержание в кормах некоторых токсических веществ, в частности ионов свинца. Свинец, в настоящее время вызывает повышенный интерес как приоритетный загрязнитель окружающей среды, ежегодные промышленные и транспортные выбросы которого превышают 400 ООО тонн (Авцын и др., 1991).

Поступление данного ксенобиотика в организм животных и человека может приводить к различным нарушениям в состоянии их здоровья, изменениям на молекулярном, клеточном, органном и системном уровнях. Механизм действия свинца на организм реализуется путем соединения металла с различными активными группами белков, в том числе ферментных (Меркурьева и др., 1980; Хмельницкий и др., 1987). Свинец снижает процессы окислительного декарбоксилирования, действует на SH-содержащие ферменты (дегидрогеназу, декарбоксилазу и др.). Данный элемент препятствует переносу железа от трансферрина к ретикулоцитам, воздействует на синтез глобина. Свинец угнетает образование цитохрома Р-450 - гемопротеида, непосредственно участвующего в неспецифической системе окисления в микросомах печени (Свинец, ВОЗ, 1980; Кальницкий, 1985; Смоляр, 1989).

Одним из малоизученных аспектов свинцовой интоксикации является нарушение механизмов клеточной гибели. Недавние исследования показали, что цитотоксическое действие многих тяжелых металлов обусловлено индукцией апоптоза - контролируемой клеточной гибели и/или некроза (Владимировская и др., 1997; Кудрин, Жаворонков, 1998). Вместе с тем, в литературе фактически отсутствуют данные об апоптоз-индуцирующей активности свинца, хотя именно этот эффект может доминировать в механизмах развития нарушений в различных органах и тканей.

В настоящее время актуальной проблемой является профилактика и коррекция нарушений кроветворения, вызванных воздействием ксенобиотиков. Проявляющийся при этом неэффективный гемопоэз, как правило, сопряжен с усилением запрограммированной и патологической клеточной смерти в костном мозге. Известно, что одним из основных механизмов цитотоксичности ксенобиотиков является индукция ими окислительного стресса. Накопление активных форм кислорода (АФК) приводит к структурной и функциональной дезорганизации клеток (Владимиров, Арчаков, 1979). Поддержание устойчивого состояния окислительно-восстановительного гомеостаза клетки может происходить при действии адаптогенов природного происхождения, которые оказывают влияние как на клеточные мембраны, так и на ее метаболизм, проявляя антиоксидантную и антигипоксантную активность. Это является одним из ключевых подходов к коррекции функциональных нарушений в системе кроветворения при действии ксенобиотиков. Для коррекции токсических воздействий в последнее время широко применяются лекарственные препараты растительного происхождения - фитоадаптогены, для которых характерна малая токсичность и возможность длительного их применения без существенных побочных явлений (Саратиков, Краснов, 1987; Дардымов, Хасина, 1993). Представляет интерес сравнительное изучение эффективности действия разных видов адаптогенов, так как они обладают широким спектром защитного действия под влиянием токсических и стрессорных факторов. Однако механизмы компенсаторно-адаптационных процессов, лежащие в основе их действия на организм, остаются недостаточно выясненными, что существенно снижает возможности их практического применения.

Цель работы: исследование закономерностей цитотоксического действия ацетата свинца на систему кроветворения и коррекция этих нарушений фитоадаптогенами.

Задачи исследования:

1. Оценить миелотоксическое действие различных доз ацетата свинца.

2. Изучить влияние свинца - индуктора перекисного окисления липидов на процессы апоптоза и некроза клеток костного мозга.

3. Изучить полиморфизм ядрышек клеток костного мозга при свинцовой интоксикации.

4. Исследовать процессы перекисного окисления липидов и изменения ядрышкового аппарата, а также физиологической и патологической гибели клеток костного мозга в восстановительном периоде после действия ацетата свинца.

5. Дать сравнительную оценку протекторного действия п-тирозола и экстракта родиолы розовой на клетки костного мозга в условиях интоксикации свинцом и в динамике восстановительного периода.

Научная новизна работы:

1. Оценен вклад окислительного стресса в миелотоксическое действие свинца. Доказано, что при свинцовой интоксикации характерно значительное повышение уровня продуктов перекисного окисления липидов в клетках костного мозга in vivo.

2. Установлено влияние ацетата свинца на запрограммированную клеточную гибель и некроз. Доказано, что ацетат свинца преимущественно индуцирует блеббинг и некроз клеток костного мозга in vivo.

3. Проведен анализ ядрышкового аппарата клеток костного мозга в условиях свинцовой интоксикации и в восстановительном периоде. Показано, что при подострой интоксикации свинцом в основном увеличивается количество ядрышек с морфологией, свидетельствующей о снижении транскрипционной активности хроматина.

4. Впервые показано защитное действие фитоадаптогенов в условиях свинцовой интоксикации организма животных. Обнаружено более выраженное защитное действие п-тирозола по сравнению с экстрактом родиолы розовой.

Практическая значимость работы.

Данная работа является фрагментом темы «Исследование гомеостаза организма при экстремальных воздействиях: механизм, пути коррекции при нарушениях» (номер государственной регистрации - 01970007696), выполняемой на базе Международного научного центра исследований экстремальных состояний организма при Президиуме Красноярского научного центра СО РАН с 1995 г. и кафедры анатомии и физиологии сельскохозяйственных животных Красноярского государственного аграрного университета.

Работа носит экспериментальный характер.

Полученные результаты расширяют представления о клеточных механизмах цитотоксического действия тяжелых металлов (ацетата свинца). Выявленные закономерности изменений на клеточном уровне позволяют оптимизировать пути коррекции токсических эффектов ксенобиотиков. Продемонстрирована эффективность экстракта родиолы розовой и п-тирозола -синтетического аналога одного из биологически активных веществ родиолы розовой в снижении цитотоксического действия ацетата свинца.

Апробация работы.

Основные положения диссертации доложены на заседаниях Ученого совета института биотехнологии и ветеринарной медицины КрасГАУ в 1999 и 2000 гг.; X Международном симпозиуме «Концепция гомеостаза: теоретические, экспериментальные и прикладные аспекты», Красноярск 2000 г.; семинарах Международного научного центра исследований экстремальных состояний организма при Президиуме КНЦ СО РАН в 1999, 2000 и 2001 гг.; заседаниях Красноярского отделения Всероссийского общества физиологов имени И.П. Павлова, Красноярск в 2000 и 2001 гг.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Обнаружены выраженные изменения в системе крови при действии ацетата свинца: уменьшение количества эритроцитов, концентрации гемоглобина и увеличение числа ретикулоцитов и лейкоцитов. Это свидетельствует об анемии организма животных, а также о стимуляции регенераторных процессов в кроветворной ткани.

2. Установлено влияние ацетата свинца на процессы физиологической и патологической гибели клеток костного мозга, уровень продуктов перекисного окисления липидов и активность ядрышкового аппарата.

3. При подостром введении ацетата свинца на 28 сутки восстановительного периода исследуемые процессы носили обратимый характер.

4. Показана эффективность применения экстракта родиолы розовой и п-тирозола для снижения токсического действия ацетата свинца на клетки костного мозга. П-тирозол проявляет более высокую защиту организма животных в условиях свинцовой интоксикации.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 3 печатных работ, из них 2 - в центральной печати.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 100 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, практических предложений и списка литературы. Работа содержит 5 таблиц, 25 рисунков. Библиографический указатель включает 194 литературных источников, из них 132 отечественных и 62 иностранных.

Заключение Диссертация по теме "Экология", Пашкевич, Ирина Анатольевна

ВЫВОДЫ

1. Установлено, что токсическое действие ацетата свинца проявляется в изменение гематологических показателей, выражающееся в уменьшении количества эритроцитов, концентрации гемоглобина и нарастании числа ретикулоцитов и лейкоцитов в периферической крови.

2. Гемато- и миелотоксичность ацетата свинца коррелируют с процессами окислительного стресса, регистрируемым по увеличению продукции малонового диальдегида в клетках костного мозга.

3. Интенсивность окислительного стресса в костном мозге при подостром введении ацетата свинца соответствует динамике накопления клеток с признаками повреждения мембран и цитоскелета (блеббинг плазматической мембраны).

4. Индуцируемые ацетатом свинца окислительный стресс и повреждение биомембран составляют патогенетическую основу гибели клеток костного мозга по механизмам некроза и апоптоза.

5. Существует тесная взаимосвязь между сохранностью ядерного материала, активностью ядрышкового аппарата и степенью повреждения клеток костного мозга при действии тестируемого ксенобиотика.

6. Гемато- и миелотоксичность при подостром введении ацетата свинца носят обратимый характер, который выражается в восстановлении исследуемых гематологических показателей, уровня запрограммированной клеточной гибели клеток костного мозга, перекисного окисления липидов и параметров ядрышкового аппарата.

7. Введение фитоадаптогенов (экстракта родиолы розовой и п-тирозола) нормализует показатели гемопоэза при подострой интоксикации ацетатом свинца. П-тирозол оказывает более выраженный защитный эффект при действии ксенобиотика, проявляющийся в уменьшении повреждения

82 ядрышкового материала и биомембран, явления окислительного стресса и количества клеток костного мозга с признаками апоптоза, некроза. 8. Установлено, что роль ацетата свинца в состоянии экологической среды показывает его гемато- и миелотоксичность, а также возможность профилактики и коррекции этих нарушений в организме животных при помощи фитоадаптогенов.

Практические предложения

1. Обнаруженная выраженная антитоксическая активность экстракта родиолы розовой и п-тирозола в отношении ацетата свинца, позволяет рекомендовать их при кормлении сельскохозяйственных животных в качестве пищевой добавки (в виде шрот) для профилактики и лечения заболеваний.

2. Результаты исследований рекомендуем использовать в качестве информационного материала для специалистов животноводства при проведении лекций, практических занятий по курсу токсикологии, фармакологии и патофизиологии при подготовке специалистов зооветеринарного профиля.

3. Полученные результаты о влиянии ацетата свинца на клетки периферической крови и костного мозга могут служить в качестве скрининг-теста на токсичность ксенобиотиков.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Пашкевич, Ирина Анатольевна, Красноярск

1. Абидова С.С., Овчинников И.В., Шамирзаев Б.И., Ишанкулова Г.Ф. Влияние а-токоферола на перекисное окисление липидов крови у больных с эхинококкозом печени // Эксперим. и клинич. фармакология. 1998. - Т. 61, №2.-С. 41-44

2. Абрамова Е.В., Дыгай A.M., Гольдберг В.Е. и др. Влияние экстракта шлемника байкальского на регенерацию кроветворения у мышей линии C57BL/6 с карциномой легких Льюис, получавших циклофосфан // Эксперим. онкология. 1991. - Т. 13, № 6. - С. 68-70

3. Авцын А.П., Жаворонков А.А., Риш М.А., Строчкова Л.С. Микроэлементозы человека. М.: Медицина, 1991. - 496 с.

4. Адо А.Д. Вопросы общей нозологии. М.: Медицина, 1985. - 240 с.

5. Аккуратова Л.О., Крендаль Ф.П. Роль перекисного окисления липидов в механизме действия фитоадаптогенов // Фармация. 1989. - Т. 36, № 6. - С. 83-85

6. Алексеев Ю.В. Тяжелые металлы в почвах и растениях. Л.: Агропромиздат, 1987. - 142 с.

7. Амосова Е.Н., Зуева Е.П., Гольдберг Е.Д. Возможность использования лекарственных растений Сибири и Дальнего Востока для лечения злокачественных новообразований // Фармация. 1994. - № 6. - С. 32-37

8. Андреева Л.И., Кожемякин Л.А., Кишкун А.А. Модификация метода определения перекисей липидов в тесте с тиобарбитуровой кислотой // Лаб. дело. 1988.-№ 11.-С. 41-43

9. Андреева Л.И., Иванова Л.И., Титова М.В., Петрова B.C. Биохимические механизмы апоптоза // Программируемая клеточная гибель. СПб.: Наука, 1996.-С. 51-71

10. Бажанова Е.Д. Роль апоптоза в развитии нервной системы млекопитающих // Успехи соврем, биологии. 1999. - Т. 119, № 4. - С. 368-374

11. Барабой В.А. Механизмы стресса и перекисное окисление липидов // Успехи соврем, биологии. 1991. - Т. 111, № 6. - С. 923-931

12. Беляева Н.Н., Гасимова З.М., Климова Д.М. Влияние интоксикации свинцом на течение вирусной инфекции // Гигиена и санитария. 1994. - № 1. - С. 32-35

13. Биленко М.В. Ишемические и реперфузионные повреждения органов. М.: Медицина, 1989.-368 с.

14. Бокриса Дж. О.М. Химия в окружающей среде. М.: Химия, 1982. - 671с.

15. Бондарев Л.Г. Микроэлементы благо и зло. - М.: Знание, 1984. - 144 с.

16. Булычева Т.И., Дергунова Н.Н., Артеменко Е.Г. и др. Анализ пролиферативной активности клеток с помощью новых моноклональных антител к ядрышковому белку В23/нуклеофозмину // Цитология. 2000. - Т. 42, № ю.-С. 944-953

17. Буштуева К.А., Лифлянд Л.М. О нормировании автомобильных выбросов // Гигиена и санитария. 1988. - № 12. - С. 48-51

18. Виноградова И.Л., Багрянцева С.Ю., Дервиз Г.В. Метод одновременного определения 2,3-ДФГ и АТФ в эритроцитах // Лаб. дело. 1980. - № 7. - С. 424-426

19. Владимиров Ю.А., Арчаков А.И. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. М.: Наука, 1979. - 252 с.

20. Владимировская Е.Б., Масчан А.А., Румянцев А.Г. Апоптоз и его роль в развитии опухолевого роста // Гематология и трансфузиология. 1997. - Т. 42, № 5. с. 4-9

21. Волянский Ю.Л., Колотова Т.Ю., Васильев Н.В. Молекулярные механизмы программированной клеточной гибели // Успехи соврем, биологии. 1994. -Т. 114, №6. -С. 679-692

22. Габович Р.Д., Припутина Л.С. Гигиенические основы охраны продуктов питания от вредных химических веществ. Киев: Здоров'я, 1987. - 248 с.

23. Галитовский В.Е., Гогвадзе В.Г. Ингибиторы энергетики митохондрий предотвращают межнуклеосомную фрагментацию ДНК в тимоцитах // Биохимия. 1998. - Т. 63, № 12. - С. 1616-1620

24. Гнидой И.М. Состояние перекисного окисления липидов и тиол-дисульфидной системы у детей при воздействии свинца в низких дозах // Токсикологический вестник. 2000. - № 3. - С. 27-29

25. Голиков С.Н., Саноцкий И.В., Тиунов Л.А. Общие механизмы токсического действия. Л.: Медицина, 1986. - 280 с.

26. Гольдберг Е.Д., Дыгай A.M., Шахов В.П. Методы культуры ткани в гематологии. Томск, 1992. - 264 с.

27. Гольдберг Е.Д., Дыгай A.M., Жданов В.В. и др. Динамическая теория регуляции кроветворения // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1999. -Т. 127, №5.-С. 484-494

28. Гончар М.Т. Экологические проблемы сельскохозяйственного производства. Львов: Вища шк., 1986. - 144 с.

29. Гуськов Е.П., Кения М.В., Лукаш А.И. Роль низкомолекулярных антиоксидантов при окислительном стрессе // Успехи соврем, биологии. -1993. Т. 113, № 4. - С. 456-470

30. Давыдова С.Л. О токсичности ионов металлов. -М.: Знание, 1991. 29 с.

31. Дардымов И.В., Хасина Э.И. Элеутерококк: Тайны «панацеи». СПб.: Наука, 1993.- 125 с.

32. Дементьева JI.A., Яременко К.В. Влияние экстракта родиолы розовой на опухолевый процесс в эксперименте // Вопр. онкл. 1987. - Т. 33, № 7. - С. 57-60

33. Дубинина Е.Е., Бурмистров С.О., Ходов Д.А. и др. Окислительная модификация белков сыворотки крови человека, метод ее определения // Вопросы мед. химии. 1995. - Т. 41, № 1. - С. 24-26

34. Дудич Е.И., Семенкова Л.Н., Дудич И.В. и др. Изучение процесса апоптоза раковых клеток, индуцированного а-фетопротеином // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 2000. - Т. 130, № 12. - С. 604-612

35. Егорова А.Б., Успенская Ю.А., Круглик О.В. и др. Нарушение серотонинергической регуляции пролиферации клеток костного мозга при действии ксенобиотика-индуктора окислительного стресса // Эксперим. и клинич. фармакология. 1998. - Т. 61, № 4. - С. 34-37

36. Егорова Н.Н. Оценка токсичности и опасности атмосферных загрязнений с помощью метода хемилюминесценции // Токсикологический вестник. -2000.-№ 1.-С. 32-36

37. Ершов Ю.А., Плетенева Т.В. Механизмы токсического действия неорганических соединений. М.: Медицина, 1989. - 272 с.

38. Ерышова О.В. Загрязнение тяжелыми металлами окрестностей Красноярска // Химия в сельском хозяйстве. 1996. - № 3. - С. 37-38

39. Зайцева К.К., Аксенов И.В., Нефедов В.П. Фитосоединения как средства оптимизации гомеостаза: Информационный бюллетень. - М., 1995. - 36 с.

40. Зацепина О.В., Воронкова Л.Н., Сахаров В.Н., Ченцов Ю.С. Ультраструктура интерфазных ядрышек клеток СПЭВ при их компенсаторной гипертрофии и деградации, вызываемых локальным УФ-микрооблучением // Цитология. 1988. - Т. 30, № 7. - С. 787-794

41. Збарский И.Б. Организация клеточного ядра. М.: Медицина, 1988. - 368 с.

42. Зенков Н.К., Меныцикова Е.Б., Вольский Н.Н., Козлов В.А. Внутриклеточный окислительный стресс и апоптоз // Успехи соврем, биологии. 1999. - Т. 119, № 5. - С. 440-450

43. Зигель X., Зигель А. Некоторые вопросы токсичности ионов металлов / Пер. с англ. С.Л. Давыдовой. М.: Мир, 1993.-368 с.

44. Иконникова О.А., Ленская Р.В., Кондратчик К.Л. Чернов В.М. Ультраструктурный портрет и активность ядрышковых организаторов лейкозных клеток при «общем» типе острого лейкоза у детей // Гематология и трансфузиология. 1990. - Т. 35, № 11. - С. 11-14

45. Калиман П.А., Загайко А.Л., Шаламов Р.В. и др. Содержание и состав липопротеинов крови и печени крыс и некоторые показатели окислительного стресса при введении хлорида кобальта // Укр. биохим. журн. 1997. - Т. 69, № 5-6. - С. 138-148

46. Калинина Е.В., Новичкова М.Д., Щербак Н.П. Саприн А.Н. Роль антиоксидантной системы и факторов транскрипции bcl-2 и р53 в развитии лекарственной резистентности клеток линии К562 // Цитология. 2001. - Т. 43, №4.-С. 351

47. Кальницкий Б.Д. Минеральные вещества в кормлении животных. Л.: Агропромиздат, 1985. - 207 с.

48. Камильджанов А.Х. Экспериментальные данные к обоснованию предельно допустимой концентрации свинца в атмосферном воздухе // Гигиена и санитария. 1983. - № 6. - С. 79-81

49. Кения М.В., Лукаш А.И., Гуськов Е.П. Роль низкомолекулярных антиоксидантов при окислительном стрессе // Успехи соврем, биологии. -1993.-Т. 113, №4.-С. 456-470

50. Козинец Г.И., Погорелов В.М., Хазем Г.М. и др. Физиологическая (запрограммированная) гибель клеток при гемопоэзе // Клиническая и лабораторная диагностика. 1996. - № 1. - С. 35-38

51. Козинец Г.И., Макаров В.А. Исследование системы крови в клинической практике. М.: Триада-Х, 1997. - 480 с.

52. Козлова Н.М., Слобожина Е.И., Черницкий Е.А. Окисление мембранных белков и изменение поверхностных свойств эритроцитов // Биофизика. -1998. Т. 43, № 3. - С. 480-483

53. Колесниченко JI.C., Кулинский В.И. Глутатионтрансферазы // Успехи соврем, биологии. 1989. - Т. 107, № 2. - С. 179-194

54. Краснов Е.А. Саратиков А.С., Суров Ю.П. Растения семейства толстянковых. Томск, 1979. - 208 с.

55. Краснов Е.А., Саратиков А.С., Нефедов В.П. Физико-химические свойства нового адаптогена тирозола // Коррекция гомеостаза. - Красноярск, 1996. -С. 128-129

56. Крендаль Ф.П. Исследование препарата из биомассы культуры ткани родиолы розовой // Фармация. 1989. - Т. 36, № 5. - С. 58-62

57. Кудрин А.В., Жаворонков А.А. Роль микроэлементов и кальция в регуляции апоптоза // Успехи соврем, биологии. 1998. - Т. 118, № 5. - С. 623-629

58. Кузина К.И., Фокина В.Д., Покровская С.Ф. Химизация, окружающая среда и качество продукции. М., 1982. - 58 с.

59. Кузнецов А.Ф., Демчук М.В. Гигиена сельскохозяйственных животных // Общая зоогигиена. М.: Агропромиздат, 1991. - кн. 1. - 399 с.

60. Кулинский В.И., Колесниченко Л.С. Биологическая роль глутатиона // Успехи соврем, биологии. 1990. - Т. 110, № 1. - С. 20-33

61. Кундиев Ю.И., Трахтенберг И.М., Краснюк Е.П. и др. К продолжению дискуссии о предельно допустимой концентрации свинца в воздухе рабочей зоны // Токсикологический вестник. 1999. - № 2. - С. 25-29

62. Ладонин В.Ф. Влияние комплексного применения средств химизации на содержание тяжелых металлов в почве и растениях // Химия в сельском хозяйстве. 1995. -№ 4. - С. 32-35

63. Лакин Г.Ф. Биометрия. М.: Высш. шк., 1990. - 352 с.

64. Левина Э.Н. Общая токсикология металлов. Л.: Медицина, 1972. - 184 с.

65. Лукин С.В., Солдат И.Е. Транслокация свинца в системе почва растение // Докл. РАСХН. - 1998. - № 5. - С. 21-23

66. Лушников Е.Ф., Загребин В.М. Апоптоз клеток: морфология, биологическая роль, механизмы развития // Арх. патологии. 1987. - № 2. - С. 84-89

67. Мамаев Н.Н., Мамаева С.Е., Либуркина И.Л. и др. Активность ядрышковых организаторов нормальных и лейкозных клеток человека // Цитология. -1984.-Т. 26, № 1.-С. 46-51

68. Мамаев Н.Н., Мартинес К.У., Морозова Е.О., Иванова Н.А. Характеристика окрашенных серебром ядрышек в бластных элементах разного диаметра больных острыми лейкозами // Цитология. 1988. - Т. 30, № 12. - С. 14781482

69. Мамаев Н.Н., Мамаева С.Е. Структура и функция ядрышкообразующих районов хромосом: молекулярные, цитологические и клинические аспекты // Цитология. 1992. - Т. 34, № 10. - С. 3-25

70. Марина Т.Ф., Михалева Л.К., Суслов Н.И. Сравнительное действие пара-тирозола и экстракта родиолы розовой на центральную нервную систему // Механизмы развития патологических процессов. Кемерово, 1994. - С. 6668

71. Маслова Л.В. Кардио-протекторное действие адаптогенных препаратов при стрессе: Автореф. дис. . канд.мед.наук. Томск, 1989. - 18 с.

72. Меньшиков В.В. Лабораторные исследования в клинике. Справочник М.: Медицина, 1987.-368 с.

73. Меныцикова Е.Б., Зенков Н.К. Антиоксиданты и ингибиторы радикальных окислительных процессов // Успехи соврем, биологии. 1993. - Т. 113, № 4. С. 442-455

74. Меныцикова Е.Б. Окислительный стресс при воспалении // Успехи соврем, биологии 1997.-Т. 117, № 2. - С. 155-171

75. Меркурьева Р.В., Красовский Т.Н., Бурмантова Н.П. и др. Изменение ферментных систем различной локализации при воздействии некоторых химических веществ // Гигиена и санитария. 1980. - № 1. - С. 25-28

76. Москалев Ю.И. Минеральный обмен. М.: Медицина, 1985. - 288 с.

77. Мур Дж., Рамамурту С. Тяжелые металлы в природных водах. М.: Мир, 1987.-285 с.

78. Натан Д.Г., Зифф К.А. Регуляция кроветворения // Гематология и трансфузиология. 1994. - Т. 39, № 2. - С. 3-10

79. Нефедов В.П., Успенская Ю.А., Круглик О.В., Нефедова В.В. Участие ионных механизмов в реализации протекторного действия п-тирозола на клетки костного мозга в условиях окислительного стресса // Докл. АН. -1999. Т. 366, № 6. - С. 833-834

80. Новик А.А., Крысюк О.Б., Салтыкова Л.Б., Лесничий В.В. Проблема апоптоза в гематологии // Программируемая клеточная гибель. СПб.: Наука, 1996.-С. 157-175

81. Новожилова А.П., Плужников Н.Н., Новиков B.C. Механизмы клеточной смерти: проблемы и перспективы // Программируемая клеточная гибель. -СПб.: Наука, 1996.-С. 3-29

82. Павловская Н.А. Содержание свинца в крови и моче работающих // Гигиена и санитария. 1990. - № 8. - С. 42-44

83. Павловская Н.А. К вопросу о клинико-гигиенической апробации ПДК свинца и его неорганических соединений в воздухе рабочей зоны // Токсикологический вестник. 1999. - № 4. - С. 29-33

84. Петрович Ю.А., Гуткин Д.В. Свободнорадикальное окисление и его роль в патогенезе воспаления, ишемии и стресса // Патол. физиология и эксперим. терапия. 1986. - № 5. - С. 85-92

85. Погорелов В.М., Байдурин С.А., Капланская И.Б. и др. Морфометрические параметры злокачественных клеток при нелейкемических гемобластозах с первичным поражением лимфатических узлов // Гематология. 1992. - № 3. -С. 5-10

86. Погорелов В.М., Козинец Г.И. Морфология апоптоза при нормальном и патологическом гемопоэзе // Гематология и трансфузиология. 1995. - Т. 40, №5. с. 17-24

87. Погорелов В.М., Луговская С.А., Федорова И.М. Апоптоз в системе крови // Патофизиология органов и систем. Типовые патологические процессы (Экспериментальные и клинические аспекты): Тез. докл. I Российского Конгр. по патофизиологии. М., 1996. - С. 94

88. Полянский Н.Г. Свинец. Аналитическая химия элементов. М.: Наука, 1986.-357 с.

89. Прищеп Т.П., Хоружая Т.Г., Хныкина Л.А. и др. Таблетки с экстрактом родиолы. // Фармация. 1980. - № 4. - С. 31-33

90. Ревич Б.А. Свинец в биосубстратах жителей промышленных городов // Гигиена и санитария. 1990. - № 4. - С. 28-33

91. Робинсон М.В., Труфакин В.А. Апоптоз клеток иммунной системы // Успехи соврем, биологии. 1991. - Т. 111, №2. - С. 246-259

92. Самуилов В.Д., Олескин А.В., Лагунова Е.М. Программируемая клеточная смерть // Биохимия. 2000. - Т. 65, № 8. - С. 1029-1046

93. Саратиков А.С., Краснов Е.А. Родиола розовая ценное лекарственное растение: Золотой корень. - Томск, 1987. - 254 с.

94. Саратиков А.С., Краснов Е.А. Растительные психостимуляторы-адаптогены // Фундаментальные науки медицине (реалии, приоритеты, перспективы). -Красноярск: Наука, 1998. - С. 366-381

95. Сатпаева Х.К., Илюхина Л.Е., Алибеков М.И. Нарушения в системах гемо-и лимфокоагуляции при хроническом действии ацетата свинца // Влияние химических и физических факторов окружающей среды на организм. -Алма-Ата, 1988.-С. 102-104

96. Свинец. Гигиенические критерии состояния окружающей среды 3 / Пер. с англ. Женева: ВОЗ, 1980. - 193 с.

97. Скипина Е.Г., Колесинская Р.Д., Абишева З.С. Влияние уксуснокислого свинца на рефлекторные реакции артерий и вен у взрослых и растущих животных // Влияние химических и физических факторов окружающей среды на организм. Алма-Ата, 1988. - С. 148-151

98. Смолина Е.В., Савченко А.П., Долиденок А.В. и др. Функциональное состояние системы крови животных различных мест обитания при действии негативных экологических факторов // Гомеостаз и окружающая среда. -Красноярск, 1997. С. 114-117

99. Смоляр В.И. Гипо- и гипермикроэлементозы. Киев: Здоровья, 1989. -152 с.

100. Соколова Г.Н., Щербакова З.А., Шашкова О.Б. Применение метода атомно-абсорбционной спектроскопии (ААС) для гигиенической оценки накопления свинца и меди в растительных материалах // Гигиена и санитария. 1989. - № 5. - С. 52-53

101. Стефанов Б., Рибаров С., Кайнакчиева Р. и др. Влияние токоферола на некоторые гематологические показатели при интоксикации свинцом // Гигиена и санитария. 1982. - № 8. - С. 64-65

102. Таланов Г.А., Хмелевский Б.Н. Санитария кормов: Справочник. М.: Агропромиздат, 1991. - 303 с.

103. Тиунов J1.A., Кустов В.В., Линючева Л. А. и др. Метгемоглобинобразование при хронической интоксикации свинцом // Гигиена и санитария. 1981. - № 8. - С. 75-76

104. Уманский С.Р. Апоптоз: молекулярные и клеточные механизмы // Молекуляр. биология. 1996. - Т. 30, № 3. - С. 487-502

105. Успенская Ю.А. Пути коррекции миелотоксического действия экологически вредных факторов химической природы: Дис. канд.биол.наук. Красноярск, 1998. - 124 с.

106. Успенская Ю.А., Круглик О.В., Нефедов В.П. Коррекция миелотоксических эффектов ксенобиотиков адаптогенами растительного происхождения // Фундаментальные науки медицине (реалии, приоритеты, перспективы). - Красноярск: Наука, 1998. - С. 38-50

107. Утешев Д.Б., Сергеев А.В., Утешев Б.С. Апоптоз: фармакологические аспекты // Эксперим. и клинич. фармакология. 1998. - Т. 61, № 4. - С. 5765

108. Федоров А.И., Жанов М.С., Карпуть И.М. и др. Микроэлементозы сельскохозяйственных животных. Минск: Ураджай, 1986. - 95 с.

109. Филов В.А. Вредные химические вещества. Неорганические соединения элементов I-IV групп. Д.: Химия, 1988. - 512 с.

110. Фриденштейн А .Я., Лурия Е.А. Клеточные основы кроветворного микроокружения. М.: Медицина, 1980. - 216 с.

111. Фролова О.Е. Морфофункциональная характеристика моноцитов. Значение исследования нуклеолярного аппарата // Клинич. лаб. диагонстика.- 1998. -№ 10.-С. 3-8

112. Хансон К.П. Апоптоз: Современное состояние проблемы // Известия АН. Серия биол,- 1998.-№2.-С. 134-141

113. Хмельницкий Г.А., Локтионов В.Н., Полоз Д.Д. Ветеринарная токсикология. М.: Агропромиздат, 1987. - 319 с.

114. Цыпленкова В.Г., Бескровнова Н.Н. Апоптоз // Арх. патологии. 1996. -№5.-С. 71-74

115. Шепотько А.О., Дульский В.А., Сутурин А.Н. и др. Свинец в организме животных и человека // Гигиена и санитария. 1993. - № 8. - С. 70-73

116. Челидзе П.В. Ультраструктура и функции ядрышка интерфазной клетки.- Тбилиси: Мецниереба, 1985. 118 с.

117. Челидзе П.В., Зацепина О.В. Морфофункциональная классификация ядрышек // Успехи соврем, биологии. 1988. - Т. 105, № 2. - С. 252-268

118. Чертков И.Д., Фриденштейн А.Я. Клеточные основы кроветворения. М.: Медицина, 1977. - 274 с.

119. Чертков И.Л., Гуревич О.А. Стволовая кроветворная клетка и ее микроокружение. М.: Медицина, 1984. - 240 с.

120. Чертков И.Л., Дризе Н.И. Взлеты и падения клеточной гематологии за три четверти века // Гематология и трансфузиология. 2001. - Т. 46, № 3. - С. 10-14

121. Чумаков П.М. Роль гена р53 в программированной клеточной смерти // Известия АН. Серия биол. 1998. - № 2. - С. 151-156

122. Чухловина M.J1. Свинец и нервная система // Гигиена и санитария. -1997,-№5.-С. 39-42

123. Шилов В.Н., Сергиенко В.И. Окислительный стресс кератиноцитов -этиопатогенетический фактор псориаза // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 2000. - Т. 129, № 4. - С. 364-369

124. Штейн Г.И., Кудрявцева М.В., Кудрявцев Б.Н. Изменение морфометрических параметров окрашенных серебром ядрышек гепатоцитов крыс при циррозе печени и в процессе ее реабилитации // Цитология. 1999.- Т.41, № 7. С. 574-579

125. Шустов В.Я. Микроэлементы в гематологии. М.: Медицина, 1967. -158 с.

126. Яременко К.В. Адаптогены как средства профилактической медицины. -Томск, 1990.-96 с.

127. Ярилин А.А. Апоптоз и его место в иммунных процессах // Иммунология.- 1996,-№6.-С. 10-20

128. Ястребов А.П., Юшков Б.Г., Большаков В.Н. Регуляция гемопоэза при воздействии на организм экстремальных факторов. Свердловск: УрО АН СССР, 1988.- 153 с.

129. Alnemri E.S. Hidden powers of the mitochondria // Nat. Cell. Biol. 1999. -V. l.-P. 40-42

130. Arends M.J., Morris R.G., Wyllie A.H. Apoptosis: The role of endonuclease // Amer. J. Pathol. 1990. - V. 136. - P. 593-598

131. Arends M.J., Wyllie A.H. Apoptosis: mechanisms and roles in pathology // Intern. Rev. Exp. Pathol. 1991. - V. 32. - P. 223-254

132. Burdon R.N. The heat shock proteins // Endeavour. 1988. - V. 12, № 3. - P. 133-138

133. Buttke T.M., Sandstrom P.A. Oxidative stress as a mediator of apoptosis // Immunol. Today. 1994. -V. 15, № 1. - P. 7-10

134. Chinnaiyan A., Dixit V. The cell death machine // Curr. Biol. 1996. - V. 6. -P. 555-562

135. Cohen G.M., Sun X.M., Snowden R.T. et al. Key morphological features of apoptosis may occur in the absence of internucleosomal DNA fragmentation // Biochem. J. 1992. - V. 286. - P. 331-334

136. Derenzini M., Pession A., Threre D. Quantity of nucleolar silver-stained proteins is related to proliferating activity in cancer cells // Lab. Invest. 1990. -V. 63.-P. 137-140

137. Derenzini M., Pession A., Farabegoli F. et al. Relationship between interphasic nucleolar organizer regions and growth rate in two neuroblastoma cell lines // Amer. J. Pathol. 1989. - V. 134. - P. 925-932

138. Derenzini M., Ploton D. Interphase nucleolar organizer regions in cancer cells // Int. Rev. Exp. Pathol. 1991. -V 32. - P. 149-191

139. Derenzini M., Sirri V., Trere D., Ochs R.L. The quantity of nucleolar proteins nucleolin and protein B23 is related to cell doubling time in human cancer cells //Lab. Invest. 1995. - V. 73, № 4. - P. 497-502

140. Dormer P., Hulter L., Mergenthaler H.G. Proliferation and maturation of human bone marrow cells in infections diseases // Path. Res. Pract. 1990. - V. 186, № l.-P. 145-149

141. Dumaswala U.I., Dumaswala R.U., Levin D.S. et al. Improved RBC preservation correlates with decreased loss of bands 3,4,1 acetylcholine stress and lipids in microvesicles //Blood. 1996. - № 87. - P. 1612-1616

142. Ghibelli L., Nosseri C., Coppola S. et al. The increase in H202 induced apoptosis by ADP-ribosylation inhibitors is related to cell blebbing // Exp. Cell Res. 1995. - V. 221. - P. 470-477

143. Ghibelli L., Fanelli C., Rotilio G. et al. Rescue of cells from apoptosis by inhibition of active GSH extrusion // FASEB J. 1998. - V. 12. - P. 479-486

144. Gores G.J., Herman В., Lemasters J.J. Plasma membrane bleb formation and rupturei a common feature of hepatocellular injri // Hepatology. 1990. - V. 11, № 4. - P. 690-698

145. Gottlieb Т., Oren M. p53 in growth control and neoplasia // Biochim. Biophys. Acta, Gene Struct. Expr. 1996. - V. 1287. - P. 77-102

146. Hadjiolov A.A. Nucleolus and ribosome biogenesis: Cell biology monographs. New York: Springer - Verlag. - 1985. - 268 p.

147. Halliwele B. Free radicals, antioxidants and human disease: where are we now? // Lab. and Clin. Medicine. 1992. - V. 119. - P. 598-620

148. Hampton M.B., Fadeel В., Orrenius S. Redox regulation of the caspases during apoptosis // Ann N.Y. Acad. Sci. 1998. - V. 854. - P. 328-335

149. Hastie L.E., Patton W.F., Hechtman H.B. et al. Filamin redistribution in an endothelial cell reoxygenation ingury model // Free Radic. Biol. Med. 1997. -V. 22, № 6. - P. 955-966

150. Hernandez-Verdun D. The nucleolus today // J. Cell. Sci. 1991. - V. 99. - P. 465-471

151. Hockenbery D.M., Oltvai Z.N., Yin X.M. et al. BCL-2 function in antioxidant path way to prevent apoptosis // Cell. 1993. - V. 75. - P. 241-251

152. Jacobson M.D., Weil M., Raff M.C. Programmed cell death in animal development // Cell. 1997. - V. 88. - P. 347-354

153. Kelley L.L., Koury M.J., Bondurant M.C. Survival death of individual proerythroblasts results from differing erythropoietin sensitivities: effects of calcium and of protein and RNA synthesis // J. Cell. Physiol. 1992. - V. 151, № 3.-P. 487-496

154. Kerr J.F. A histochemical study of hypertrophy and ishaemic injury of rat liver with special reference to changes is lysosomes // J. Pathol. Bacterid. 1965. - V. 90.-P. 419

155. Knight C.R., Rees R.C., Griffin M. Apoptosis: a potential role for cytosolic transglutaminase and its importance in tumor progression // Biochem. biophis. acta. 1991. - V. 1096, № 2. - P. 312-318

156. Leek R.D., Alison M.R., Sarraf C.E. Variations in the occurrence of silver-staining nucleolar organizer regions (AgNORs) in non-proliferative and proliferative tissues // J. Pathol. 1991. - V. 165. - P. 43-51

157. Lowe S.W., Schmitt E.M., Smith S.W. p53 is required for radiation induced apoptosis in mouse thymocytes // Nature. - 1993. - V. 362, № 6423. - P. 847-849

158. Mary J.Y. Normal human granulopoiesis revisited. II. Bone marrow data // Biomed. and Prarmacotherapy. 1984. - V. 38, № 1. - P. 66-67

159. Matsumoto Т., Terasaki Т., Mukai K. et al. Relation between nucleolar size and growth characteristics in small cell lung cancer cell lines // Jap. J. Cancer Res. 1991.-V. 82.-P. 820-828

160. Messam C.A., Pittman R.N. Asynchrony and commitment to die during apoptosis // Exp. Cell. Res. 1998. - V. 238. - P. 389-398

161. Mills J.C., Stone N.L., Erhardt J. et al. Apoptotic membrane blebbing is regulated by myosin light chain phosphorylation // J. Cell Biol. 1998. - V. 140, № 3. - P. 627-636

162. Miyoshi H., Umeshita K., Sakon M. et al. Calpain activation in plasma membrane bleb formation during test-butyl hydroperoxide-induced rat hepatocyte ingury // Gastroenterology. 1996. - V. 110, № 6. - P. 1897-1904

163. Motoyama H., Wang F., Roth A.K. et al. Massive cell death of immature hematopoietic cell and neurons in bcl-x-deficient mice // Science. 1995. - V. 267.-P. 1506-1510

164. Nagata S. Apoptosis by death factor // Cell. 1997. - V. 88. - P. 355-365

165. Negulescu P.A., Shastri N., Cahalan M.D. Intracellular calcium dependence of gene expression in single T lymphocytes // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1994. -V. 91.-P. 2873-2877

166. Nemecek G.M., Coughlin S.R., Handley D.A. et al. Stimulation of aortic smooth muscle cell mitogenesis by serotonin // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1986. V. 83, № 3. - P. 674-678

167. Newbold K.M., Rollanson T.P., Luesley D.M. Ward K. Nucleolar organizer regions and proliferative index in glandular and squa mous carcinoma of cervix // J. Clin. Pathol. 1989. -V. 42. - P. 441-442

168. Nikicicz E.P., Norback D.H. Argyrophilic nucleolar organizer region (AgNOR) staining in normalbone marrow cells // J. Clin. Pathol. 1990. - V. 43. -P. 723-727

169. Oltvai Z.N., Milliman C.L., Korsmeyer C.L. Bcl-2 heterodimerizes in vivo with a conserved homolog, Bax, that accelerates programmed cell death // Cell. -1993. V. 74, № 4. - P. 609-619

170. Papa S., Skulachev V.P. Reactive oxygen species, mitochondria, apoptosis and aging//Mol. Cell. Biochem. 1997. - V.174.-P. 305-319

171. Peitsch M., Polzar В., Stephan H. et al. Characterization of the endogenous deoxyribonuclease involved in nuclear DNA degradation during apoptosis // EMBO J. 1993. - V. 12. - P. 371-377

172. Phelps P.X., Smith M.W., Trump B.F. Cytosolic ionized calcium and bleb formation after acute cell ingury of cultured rabbet renal tubule cells // Lab. Invest. 1989. - V. 60, № 5. - P. 630-642

173. Ploton D., Menager M., Jeannesson P. et al. Improvement in the staining and in the visualization of the argyrophilic proteins of the nucleolar organizer region at the optical level // Histochem. J. 1986. - V. 18. - P. 5-18

174. Reed J.C. Bcl-2 and the regulation of programmed cell death // J. Cell. Biol.1994.-V. 124, № l.-P. 1-6

175. Roussel P., Andre C., Comai L., Hernandez-Verdun D. The rDNA transcription machinery is assembled durihg mitosis in active NORs and absent in anactive NORs // J. Cell Biol. 1996. - V. 133. - P. 235-246

176. Salvesen G.S., Dixit V.M. Caspase activation the induced-proximity model // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1999. -V. 96. - P. 10964-10967

177. Satoh M., Lindahl T. Role of poly (ADP-ribose) formation in DNA repair // Nature. 1993. - V. 356. - P. 356-358

178. Seiter P., Zatsepina O.V., Hoffmann M., Grummt I. Constitutive and strong association of PAF 53 with RNA polymerase I // Chromosoma. 1997. - V. 106. -P. 216-255

179. Sirri V., Roussel P., Trere D., et al. Amount variability of total and individual Ag-NOR proteins in cells stimulated to proliferate // J. Histochem. Cytochem.1995. V. 43, № 9. - P. 887-893

180. Sirri V., Roussel P., Gendron M.C., Hernandez-Verdun D. Amount of the two major Ag-NOR proteins, nucleolin, and protein B23 is cell-cycle dependent // Cytometry. 1997. - V. 28, № 2. - P. 147-156

181. Squier M.K.T., Miller A.C.K., Malkinson A.M., Cohen J.J. Calpain activation in apoptosis // J. Cell. Physiol. 1994. - V. 159. - P. 229-235

182. Steller H. Mechanisms and genes of cellular suicide // Science. 1995. - V. 267.-P. 1445-1449

183. Thompson C.B. Apoptosis in the pathogenesis and treatment of disease // Science. 1995. - V. 267. - P. 1456-1462100

184. Trump B.F., Berezesky I.K., Osornio-Vargas A.R. Cell death and the disease process. The role of calcium // Cell death in biology and pathology. London, 1981.-209 p.

185. Van Gorp R.M.A., Broers J.L.V., Reutelingsperger C.P.M. et al. Peroxide-induced membrane blebbing in endothelial cells associated with glutatlione oxidation but not apoptosis // Am. J. Physiology. 1999. - V. 277. - P. 20-28

186. Wyllie A.H., Kerr J.F., Currie A.R. Cell death: The significance of apoptosis // Intern. Rev. Cytol. 1980. - V. 68. - P. 251-306

187. Yamamoto K., Farber J.L. Metabolism of pyridine nucleotides in cultured rad hepatocytes intoxicated with tert-butyl hydroperoxide // Biochem. Pharmacol. -1992. V. 13, № 5. - P. 1119-1126

188. Zatsepina O.V., Voit R., Grummt I. et al. The RNA-polymerase I-specific transcription initiation factor UBF is associated with transcriptionally active and inactive ribosomal genes // Chromosoma. 1993. - V. 102. - P. 599-611