Влияние янтарной кислоты и ее производных на состояние свободнорадикальных процессов экспериментальных животных

Московцева, Ольга Михайловна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Влияние янтарной кислоты и ее производных на состояние свободнорадикальных процессов экспериментальных животных
ВАК РФ 03.00.00, Биологические науки

Автореферат диссертации по теме "Влияние янтарной кислоты и ее производных на состояние свободнорадикальных процессов экспериментальных животных"

На правах рукописи

Московцева Ольга Михайловна

ВЛИЯНИЕ ЯНТАРНОЙ КИСЛОТЫ И ЖЕ ПРОИЗВОДНЫХ НА СОСТОЯНИЕ СВОБОДНОРАДИКАЛЬНЫХ ПРОЦЕССОВ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ

03.00.13 - физиология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Нижний Новгород 2006

Работа выполнена в ГОУ ВПО «Нижегородская государственная медицинская академия» Росздрава РФ на кафедре биологии.

Научный руководитель:

доктор биологических наук Щербатюк Татьяна Григорьевна Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор Великанов Валериан Иванович кандидат биологических наук, Тулупов Геннадий Васильевич

Ведущая организация:

ФГОУ ВПО «Чувашская государственная сельскохозяйственная академия» г. Чебоксары

Защита диссертации состоится « 2 » ноября 2006 г. в 13— часов на заседании диссертационного совета Д 220.047.01 при ФГОУ ВПО «Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия» по адресу: 603107, Нижний Новгород, пр. Гагарина, д. 97.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия».

Автореферат разослан « 1 » октября 2006г.

Учёный секретарь диссертационного совета Иващенко М.Н,

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ.

Актуальность.

Надежность биологической системы определяется механизмами ее адаптации к действию факторов среды и условиям жизнедеятельности (Величковский Б.Т., 2001), т.к. любое изменение состояния в среде воспринимается организмом как стрессор (Карташов Ю.И., 2001). Поддержание постоянства определенных параметров внутренней среды организма при действии стресс-факторов обеспечивается организованными определенным образом и соподчиненными между собой гомеостатическими системами (Меерсон Ф.З., 1988), являющимися важнейшим инструментом адаптационных механизмов организма (Панин J1.E; 1978; Меерсон Ф.З., 1988; Крыжаповский Г.Н., 2000; Барабой В.А., 2006).

Установлено, что в основе механизма действия на организм большинства факторов среды и условий жизнедеятельности лежит избыточная продукция свободных радикалов, ведущая к нарушению свободнорадикального гомеостаза в результате развития окислительного стресса (Козлов Ю.П., 1973; Зенков Н.К, и др., 2001; Барабой В .А., 2006).

По мнению Ф.З. Меерсона умеренная активация свободнорадикальных процессов является частью общего адаптационного механизма, направленного на поддержание клеточного гомеостаза (Меерсон Ф.З., 1988). Однако длительный и чрезмерный по интенсивности стресс вызывает патологические изменения этих систем и, как следствие, возникновение и развитие эндогенных заболеваний, в частности злокачественных новообразований.

В связи с этим, применение биологически активных веществ, расширяющих пределы адаптации организма, позволит повысить неспецифическую устойчивость организма к экстремальным воздействиям.

Так как нарушение свободнорадикальных процессов сопровождается развитием гипоксического состояния (Лукьянова Л.Д., 2000; Оковитый C.B., Смирнов A.B., 2001; Свиряева И.В., Рууге Э.К., 2005), то необходимо включение в комплексную профилактику и терапию заболеваний, сопряженных с развитием окислительного стресса, экзогенных веществ с выраженными антиоксидантными (Ларионова В.Б. и др., 1989; Кения М.В., 1993) свойствами.

■ Исследования последних лет позволили взглянуть на янтарную кислоту (ЯК) не только как на энергетический субстрат, но и как на регулятор функций живых систем. Работами школы профессора М.Н. Коидрашовой было показано наличие у ЯК биологической активности с уникальным сочетанием проявлений: по отношению к здоровому организму сукцинаты выступают в роли адаптогенов, а при наличии патологических процессов демонстрируют нетипично высокий для адаптогенов терапевтический эффект.

В экспериментальных и клинических работах показаны антигипоксическое (Кондрашова М.Н. и др., 1997; Маевский Е.И. и др., 1997; Лукьянова Л.Д., 1999), антиоксидантное (Гогвадзе В.Г., 1997; Ананенко A.A. и др., 1997), детоксицирующее (Косенко Е.А. и др., 1997; Ананенко A.A. и др., 1997), радиопротекторное (Косенко Е.А., Каминский Ю.Г., 1997; Ившщкий Ю.Ю.,

1998) и др. свойства янтарной кислоты и ее производных (КаггШа Т., 1970; Коваленко АЛ., Романцов М.Г., 1999; Романцов М.Г.,2002; Кондрашова М.Н., 2002,2003).

Таким образом, широкий спектр действия янтарной кислоты и ее производных, а также отсутствие побочных эффектов определяют необходимость изучения действия янтарной кислоты и ее производных на физиологическое состояние организма, а также возможность использования их для коррекции изменений свободнорадкальных процессов.

Цель исследования:

Изучить влияние янтарной кислоты и ее производных на физиологическое состояние свободнорадикальных процессов и в условиях окислительного стресса.

Задачи исследования:

1. Изучить влияние комплекса олигосахарида хитозана сукцинат-аскорбата и входящих в него веществ (доза 100мг/кг веса, курс 7 дней) на активность свободнорадикальных процессов, интенсивность поглощения ИК-голучения и структуропостроение плазмы крови здоровых животных;

2. Выявить взаимосвязь изменения свободнорадикального баланса с кристаллооптическими характеристиками плазмы крови экспериментальных животных;

3. Исследовать влияние янтарной кислоты и ее производных на состояние свободнорадикальных процессов экспериментальных животных в условиях окислительного стресса;

4. Изучить морфофугасциональное состояние печени экспериментальных животных на фоне введения янтарной кислоты, олигосахарида хитозана сукцииата и комплекса олигосахарида хитозана сукцинат-аскорбата.

Научная новнзна.

Впервые изучено влияние комплекса олигосахарида хитозана сукцинат-аскорбата и входящих в него веществ (доза 100мг/кг веса, курс 7 дней) на активность свободнорадикальных процессов организма экспериментальных животных в условиях нормы и при окислительном стрессе. Показано достоверное повышение антиоксидантной активности и снижение интенсивности хемилюмипесценции плазмы крови экспериментальных животных на фойе введения комплекса олигосахарида Х1гтозана сукцинат-аскорбата.

Показано, что введение аскорбшювой кислоты в дозе 100 мг/кг веса крыс курсом 7 дней приводит к повышению интенсивности хемшпоминесценщш и снижению общей антиоксидантной активности плазмы крови здоровых животных, а также усилению окислительного стресса в модельных условиях.

Показана обратная корреляционная взваимосвязь интенсивности поглощения ИК-излучения на полосе поглощения 1070 см ** с продуктами перекисного окисления липидов ДК (г = - 0.83) и МДА (г = - 0.79) в плазме крови.

Впервые изучены особенности структурной организации фации плазмы крови крыс в условиях окислительного стресса. Выявлена высокая корреляционная зависимость между показателями свободнорадикалыгой активности и кристаллооптическими характеристиками плазмы крови: максимальная интенсивность хемилюминесценции / количество трещин (г — 0.71), прозрачность (г = -0.70) краевой зоны, количество кристаллов в центральной зоне (г - -0.97); общая антиоксидантная активность плазмы крови / прозрачность краевой зоны (г = 0.84), размер конкреций (г = -0.47); содержание карбонильных производных белков / прозрачность (г = 0.82) краевой зоны фаций плазмы крови.

Впервые показано применение комплекса олигосахарида хитозана сукцинат-аскорбата для коррекции морфологического состояния печени экспериментальных животных (Патент РФ- регистрационный К» 2004130510/14 (033139) от 18.10.2004 Положительное решение от 1.09.2005г).

Практическая значимость.

Результаты работы являются обоснованием для экспериментальных и клинических исследований возможностей применеши комплекса олигосахарнда хитозана сукщшат-аскорбата как стимулятора физиологических функций организма в норме и при окислительном стрессе, а также применения в клинической практике в качестве средства для ингибирования роста опухоли (Заявка на патент № 2006128441 и 2006128442 от 07.08.2006г.).

Возможно применение комплекса олигосахарида хитозана сукципат-аскорбата в ветеринарной практике для расширения адаптогенных возможностей организма животных.

Апробация работы.

Основные положения диссертации доложены и обсуждены (в виде 3 устных и 3 стендовых докладов) на XII Международной научной конференция студентов, аспирантов и молодых ученых «Ломоносов-2005» (Москва, 2005); 4-ой национальной научно-практической конференции с международным участием «Активные формы кислорода, оксид азота, антиоксиданты и здоровье человека» (Смоленск, 2005); V Сессии Молодых Ученых НижГМА (Н.Новгород, 2006); X юбилейной межвузовской конференции молодых ученых «Актуальные проблемы патофизиологии» (Санкт-Петебург, 2004); VII Конгрессе международной ассоциации морфологов (Казань, 2004); Всероссийской выставке научно-технического творчества молодежи (Москва, 2004,2005).

По теме диссертационного исследования опубликовано 10 работ, из них 1 статья в научно-практическом журнале «Вестник Санкт-Петербургской Государственной Медицинской Академии им. И.И. Мечникова», 5 статей в сборниках научных трудов (Москва; Смоленск; Ростов-на-Дону; Днепропетровск), 3 работы в тезисах научных конференций и 1 патент.

Положения, пыиосимые па защиту:

1. Комплекс олигосахарид хитозана сукц1шат-аскорбат в дозе 100 мг/кг веса оказывает выраженное антиоксидантное действие на организм здоровых животных, а также увеличивает резерв нормальных гепатоцитов, выражающийся в достоверном возрастании числа двуядерных клеток печени.

2. Изменения состояния свободнорадикальных процессов организма экспериментальных животных отражаются в структуропостроении плазмы крови.

3. Введение комплекса олигосахарида хитозана сукцииат-аскорбата и входящих в него веществ в дозе 100 мг/кг веса курсом 7 дней в условиях моделирования окислительного стресса способствует восстановлению свободнорадикального баланса в организме экспериментальных животных.

4. Комплекс олигосахарид хитозана сукцинат-аскорбат эффективен для коррекции морфологического состояния печени экспериментальных животных.

Объем п структура работы.

Диссертация изложена на 160 страницах машинописного текста, иллюстрирована 24 рисунками и 19 таблицами; состоит из введения, обзора литературы, общей характеристики методов исследования, главы собственных наблюдений и их обсуждения, выводов и списка литературы, содержащего 287 источников, из которых 79 иностранных.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Эксперименты выполнены на 264 белых нелинейных крысах, самцах, массой 270±25 г. Исследовали действие следующих веществ:

- янтарная кислота (ЯК или сукцинат);

- аскорбиновая кислота САК или аскорбат).

Учитывая плохую способность к проникновению через мембраны янтарной и аскорбиновой кислот, а также возможность раздражения слизистой желудочно-кишечного тракта, мы использовали их комплексы с олнгосахаридом хитозана (Ох), способного легко абсорбироваться в кишечнике и быстро попадать в системный кровоток. Олигосахарид хитозана является водорастворимым производным ферментативного расщепления высокомолекулярного хитозана морских ракообразных.

Комплексы олигосахарид хитозана с сукцинатом и аскорбатом образуются посредством ионной связи, легко распадающейся на составляющие компоненты в желудочно-кишечном тракте:

- олигосахарид хитозана сукцинат ЮхС):

- олигосахарид хитозана аскорбат (ОхА);

- олигосахарид хитозана сукцинат аскорбат (ОхСА) (ТУ 9289-004-5718472903), в котором олигосахарид хитозана - 70%, сукцината - 15% и аскорбата 15%.

Исследуемые вещества животным вводили с помощью зонда в желудок в виде раствора концентрацией 100 мг/кг веса ежедневно (7 дней). Доза, способ и курс введения веществ были установлены согласно «Руководству по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ» (2000) и работам В.Н. Анисимова, М.Н. Кондрашовой (1979), C.B. Цвиренко и др. (1987), Н.И. Федотчева и др. (1997).

Моделирование окислительного стресса проводили посредством трансплантации опухоли. В нашей работе использована экспериментальная модель опухолевого роста - лимфосаркома Плисса (ЛФС) (Плисс, 1961), приобретенного в НИИ Экспериментальной диагностики и терапии опухолей РОНЦ им. Н.Н.Блохина РАМН (г. Москва).

Согласно экспериментальным данным В.А.Горькова и Л.С.Васильевой (1973) кинетика развития ЛФС Плисса имеет следующие стадии роста: начальная нестационарная фаза начинается латентным периодом до 3 суток, и продолжается общим - до 9 суток; затем идет линейная фаза роста опухоли. Таким образом, влияние янтарной кислоты и ее производных на организм экспериментальных животных в условиях окислительного стресса изучали во время общего периода (с 3-го, 6-го дней) начальной фазы роста ЛФС Плисса. Основные этапы исследования и количество экспериментальных животных представлены в таблице 1.

На 1этапе исследования здоровые животные ежедневно 7 дней получали исследуемые вещества в дозе 100 мг/кг веса животного. Животные контрольной группы получали через зонд чистую воду. Через день после отмены введения веществ проводили биохимические анализы плазмы крови и морфологические исследования ткани печени. Эвтаназию животным проводили под эфирным наркозом.

На 2 этапе оценивали изменение свободнорадикальных процессов организма крыс в условиях окислительного стресса.

3 этап. Исследуемые вещества в дозе 100 мг/кг веса, растворенные в воде, животным вводили по 1 мл в желудок с помощью зонда 7 дней. Животные контрольной группы получали через зонд чистую воду. Через день после отмены введения исследуемых веществ подопытным животным производили трансплантацию клеток перевивного штамма лимфосаркомы Плисса. Контролем сравнения служили показатели животных с ЛФС Плисса, получавшие до трансплантации опухоли через зонд воду. Оценивали интенсивность роста опухоли и продолжительность жизни подопытных животных на фоне введения исследуемых веществ.

На 4 этапе эксперимента исследуемые вещества животные получали с 3-го и 6-го дней после моделирования окислительного стресса. Оценка результатов воздействий осуществлялась на следующий день после окончания манипуляций. На этот момент срок роста опухоли составлял 11 и 14 дней, соответственно. Контролем служили показатели животных с лимфосаркомой Плисса (без воздействий) с аналогичными сроками роста опухоли. Оценивали свободнорадикальную активность плазмы крови, особенности ее структурной организации, а также изменение морфофункциональных характеристик печени.

Таблица 1

Основные этапы исследования.

Этап исследования Группы подопытных животных п N

1 .Влияние янтарной кислоты и 1- контрольная (вода) 10

ее комплексов с 2- опытная-1 (ЯК) 10

олигосахаридом хитозана и 3- опытная-2 (ОхС) 10

аскорбиновой кислотой на 4- опытная-3 (АК) 10

биохимические и 5- опытная-4 (ОхА) 10

морфологические показатели б- оиытная-5 (ОхСА) 10 60

организма здоровых животных

2. Особенности метаболизма 1 - интактная 12

экспериментальных животных 2 - ЛФС-3,

на фоне моделирования срок роста опухоли 3 дня 12

окислительного стресса 3 - ЛФС-6,

срок роста опухоли 6 дней 12

4 -ЛФС-10,

срок роста опухоли 10 дней 12 48

3. Состояние организма 1- контрольная (вода+ЛФС) 12

экспериментальных животных 2- опытная-1 (ЯК + ЛФС) 12

на фоне введения янтарной 3- опытная-2 (ОхС+ЛФС) 12

кислоты и ее комплексов с 4- опытная-3 (АК+ЛФС) 12

олигосахаридом хитозана и 5- опытная-4 (ОхА+ЛФС) 12

аскорбиновой кислотой до 6- оиытная-5 (ОхСА + ЛФС) 12 72

моделирования окислительного

стресса

4. Влияние янтарной кислоты, 1- контрольная-11(ЛФС, без

олигосахарида хитозаиа воздействий - срок роста

сукцината и олигосахарида опухоли 11 дней) 12

хитозана сукцинат-аскорбата на 2- опытная-1 (ЛФС+ ЯК) 10

биохимические и 3- опытная-2 (ЛФС+ ОхС) 10

морфологические показатели 4 опытная-3 (ЛФС+ ОхСА) 10

организма животных в условиях 5- контрольная-14 (ЛФС, без

окислительного стресса воздействий- срок роста

опухоли 14 дней) 12

6- опытная-4 (ЛФС+ЯК) 10

7- опытная-5 (ЛФС+ОхС) 10

8- опытная-6 (ЛФС+ОхСХ) 10 84

Для оценки биологических эффектов используемых веществ были применены методы исследования, представленные в таблице 2.

Таблица 2

Методы исследования.

Состояние свободнорадикального окисления 1, Индуцированная хемилюминесценция (Imax, Бхл =1/ АОА) (Кузьмина Е.И. и др., 1983); 2, Молекулярные продукты ПОЛ: диеновые коньюгаты (ДК), малоновый диальдегид (МДА) (Fletcher D.L. et al., 1973); 3, Уровень карбонильных производных белков в плазме крови (Дубинина Е.Е., 1993)

Уровень эндогенной интоксикации Вещества низкой и средней молекулярной массы (ВНСММ) (Малахова М.Л., 1995)

Спектроскопия плазмы крови Метод инфракрасной спектроскопии плазмы крови (Гордецов A.C., 2003)

Состояние системной структурной организации биологической жидкости Метод клиновидной дегидратации биологических жидкостей (Шабалин В.Н., Шатохина С.Н., 2000,2002)

Изменение структуры опухолевой ткани и ткани печени Метод оптической микроскопии (Волкова О.В., 1971; Гистология..., 1983 Морфометрический анализ ткани (Солопаева И.М. и др., 1982)

Эффективность применения янтарной кислоты и ее производных оценивали по увеличению продолжительности жизни экспериментальных животных (Руководство,,., 2000), а также противоопухолевому эффекту: процент торможения роста опухоли (ТРО), высчитываемого по объему (V) (Руководство..., 2000) или массе (ш) (Экспериментальная оценка..., 1980) опухоли: ТРО = (Уконтроля-Уопыта) / Уконтроля* 100%; ТРО = (ш контроля-т опыта) / m контроля* 100%.

Полученные данные обработаны на IBM PC/AT с помощью пакетов прикладных программ Statistica-6.0 (Windows ХР) и Microsoft Excel. Достоверность различий средних определяли по t-критерию Стьюдента, используя поправку Бонферонни. Выборки считались пр1шадлежащими к разным генеральным совокупностям при р< 0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

1. Влияние янтарной кислоты и ее комплексов с олигосахарндом хитозана н аскорбиновой кислотой на биохимические и морфологические показатели организма здоровых животных.

Одним га путей повышения неспецифической устойчивости организма к экстремальным воздействиям является применение биологически активных веществ, расширяющих пределы адаптации организма (Анисимов A.A., 2003). В поддержании свободнорадикального гомеостаза организма на стационарном уровне, обеспечивающим нормальное функционирование клеток, особую роль играет введение экзогенных антиоксидаитов. Проведенные исследования показали, что введение комплекса олигосахарида хитозана сукцииат-аскорбата (ОхСА) в дозе 100 мг/кг веса животного (курсом 7 дней) приводит к достоверному повышению антиоксидантной активности (АОА) и снижению интенсивности хемилюмипесцентного свечения (Imax) плазмы крови здоровых животных, в то время как на фоне введения янтарной кислоты (ЯК), олигосахарида хитозана сукцината (ОхС) и олигосахарида хитозана аскорбата (ОхА) в дозе 100 мг/кг веса 7 дней свободнорадикальные процессы в плазме крови здоровых животных изменяются недостоверно.

Однако ряд работ свидетельствует о возможное™ инверсии антиоксидантного действия экзогенных веществ в условиях in vivo в прооксидантное (Bowry, 1995, 1992; Бурлакова Е.Б,, Крашаков С.А., 1992; Ланкип В.З. и др., 1999; Ланкин В.З., 2001; Ланкин В.З., Тихазе, 2004; Трещалшт Е.М., 2005;), что было подтверждено в ходе нашего исследования на примере аскорбиновой кислоты. Было показано, что введение аскорбиновой кислоты в дозе 100 мг/кг веса курсом 7 дней способствует усилению свободнорадикальных процессов в организме здоровых крыс: повышение Imax на 12%, снижение АОА на 8% (р<0.05)(рис.1).

группы ЖИВОТНЫХ

Рис, 1. Интенсивность хемилюминесценции и общая антиоксид а нтная активность плазмы крови здоровых животных на фоне введения ЯК. ОхС. АК, ОхА и ОхСА.

Выявленное в ходе проведенных исследований снижение активности свободнорадикальных процессов в плазме крови здоровых животных на фоне введения комплекса олигосахарида хитозана сукщшат-аскорбата, по сравнению с показателями животных, получавших компоненты данного комплекса в аналогичной дозировке, свидетельствует об усилении антиоксидантных свойств веществ, входящих в комплекс, при их совместном использовании.

Методом инфракрасной спектроскопии регистрировали изменения соотношений фосфорсодержащих веществ в плазме крови (Лифшиц В.М., 2000) на полосах поглощения ИК-спеюра, соответствующих связям фосфор—кислород (Р-О) (Norman А., 1978; Верболович В.П., 1995; Гордецов A.C., 2003; Каргаполов A.B., 2003). Анализ ИК-спектров плазмы крови экспериментальных животных показал, что наиболее информативными из выбранных полос поглощения являются 1125 см и 1070 см соответствующих глюкозе (Norman А., 1978) и фосфолипидам (Каргаполов A.B., 2003), а максимальные пики па данных полосах поглощения были зафиксированы на фоне введения комплекса ОхСА (табл. 3).

Таблица 3

Интенсивность поглощения ИК-излучения плазмой крови экспериментальных

животных.

Полосы поглощешм 1165, см"1 1150, см"1 1125, см1 1070, см'1

Средние высоты пиков поглощения, мм

кошроль 2.70 ±0.01 5.00 ±0.02 0.71 ±0.01 4.00 ±0.01

Ж 2.60 ± 0.07 4.30 ±0.01* 0.93 ± 0.02* 6.50 ±0.01*

ОхС 2.40 ±0.11* 4.55 ± 0.02* 2.00 ±0.01* 5.40 ±0.03*

АК 2,3 ± 0.04* 4.31 ±0.01* 0.77 ±0.03 4.80 ±0.04*

ОхА 2.6 ±0.02* 4.32 ±0,03* 1.00 ±0.01* 4.71 ± 0.03*

ОхСА 2.65 ± 0.05 4.40 ±0.01* 2.65 ±0.03* 6.55 ±0.01*

* - различия достоверны относительно контроля (р < 0.05),

Максимальное изменение интенсивности поглощения ИК-излучения плазмой крови здоровых животных зафиксировано на фоне введения комплекса олигосахарида хитозана сукщшат-аскорбата: па полосах поглощения 1125 см и 1070 см *1 интенсивность поглощения ИК-излучения плазмой крови здоровых животных, получавших комплекс ОхСА повысилась по сравнению с контролем, на 273% и на 64% , соответственно, в то время, как введение АК изменило эти показатели лишь на 8% и 7%, соответственно (табл. 3).

Проведенный корреляционный анализ показал, что интенсивность поглощения ИК-излучения на полосе поглощения 1070 см *1 о братнопропор цио нал ьно продуктам перекисного окисления липидов ДК (г = -0.83) и МДА (г =-0.79) в плазме крови. Учитывая, что фосфолипиды являются

основным субстратом ПОЛ в плазме крови, то увеличение интенсивности поглощения ИК-юлучения в области 1070см ~1 можно рассматривать как показатель ингибирования ПОЛ.

Методом клиновидной дегидратации (Шаболин В.Н., Шатохина С.Н., 1996) оценивалось влияние исследуемых веществ на состояние системной структурной организации биологической жидкости при переводе ее в твердую фазу путем высушивания капли плазмы на предметном стекле. Высохшая капля носит название «фация».

• Морфологическая картина плазмы крови здоровых животных характеризуется следующими особенностями (рис.2):

а) краевая (белковая аморфная) - широкая (1/2 радиуса фации), полупрозрачная; равномерно по всей зоне рассечена небольшим числом аркообразных трещин среднего размера; большое количество круглых конкреций среднего размера;

б) центральная (солевая кристаллическая) - большое количество беспорядочно ориентированных дендритных кристаллов и зерен; трещины располагаются радиально, а также образуют структуру типа сети.

в) промежуточная (белково-солевая смешанная) - множество мелких кристаллических зерен.

контроль аскорбиновая олигосахарид

кислота хитозана аскорбат

Рис. 2 . Морфологическая картина фаций плазмы крови здоровых крыс на фоне введения АК и ОхА.

Для оценки связи кристаллооплгических характеристик плазмы крови крыс и ее свободнорадикальной активности провели корреляционный анализ: максимальная интенсивность хемилюминесценции / количество трещин (г = 0.71), прозрачность (г = -0.70) краевой зоны, количество кристаллов в центральной зоне (г = -0.97); общая антиоксидантная активность плазмы крови / прозрачность краевой зоны (г = 0.84), размер конкреций (г = -0.47); содержание альдегид - и кетон-динитрофенилгидразонов / прозрачность (г - 0.82) краевой зоны фаций плазмы крови.

На фойе введения сукцинатсодержащих веществ структура фации плазмы экспериментальных животных изменилась не значительно, в то время как введешь аскорбиновой кислоты и ее комплекса с олигосахаридом хитозана способствовало сшшешпо прозрачности периферической зоны и увеличению

количества трещин и размера конкреций (рис. 2), что, согласно результатам корреляционного анализа, свидетельствует о снижении АОА и повышении свободнорадикальной активности плазмы крови экспериментальных животных.

Морфометрический анализ изменений структуры ткани печени здоровых животных на фоне введения комплекса ОхСА и веществ, его составляющих, выявил, что только в печени животных, получавших комплекс ОхСА, увеличивается резерв нормальных гепатоцитов, выражающийся в достоверном возрастании числа двуядерных клеток печени.

На основании полученных результатов о повышении антиоксидантного статуса организма экспериментальных животных при использовании комплекса олигосахарида хитозана сукщшат-аскорбата, а также его положительном влиянии на структуру печени, играющей основную роль в детоксикации оргашкма, можно предположить, что применение этого комплекса будет расширять пределы адаптации организма к экстремальным воздействиям.

Однако верность данного положешм требует экспериментального подтверждения. Для этого мы использовали модель окислительного стресса -трансплантируемую опухоль лимфосаркома Плисса.

2. Особенности метаболизма экспериментальных животных на фоне моделирования окислительного стресса.

Перевиваемые опухоли, обладая основными характеристиками злокачествешшх опухолей человека, являются наиболее удобными моделями при решении вопросов, требующих одномоментного получения однородного материала в большом объеме (Экспериментальная оценка..,, 1980).

Полученные результаты свидетельствуют о развитии окислительного стресса на фоне роста ЛФС Плисса, что проявляется в изменении параметров состояния про — антиоксидантной системы, а также отражается в структурной организации фаций плазмы крови.

Показано, что в начальный период роста опухоли ЛФС Плисса происходит постепенное повышение 1тах и содержания ДК, на фоне незначительного снижения количества МДА и АОА плазмы крови экспериментальных животных (табл. 4, рис. 3),

По данным литературы (Барабой В,А., 1993; Журавлев А.И., 1993) МДА образуется в процессе окислительной деструкции липоперекисей липндов при вторичной атаке кислородом и является интегральным показателем активности перекисного окисления липидов (ПОЛ) (Зенков В.З. и др., 2001). В связи с чем можно сделать вывод, что ранняя стадия роста ЛФС Плисса (3-6 дней) характеризуется невысокой общей активностью ПОЛ на фоне интенсификациии образования первичных продуктов ПОЛ.

Таблица 4

Интенсивность хемплюмнпесценцни, общая антноксндаптпая активность (АОА), содержание диеновых коиыогатов (ДК) и малопового диальдегида (МДА) в плазме крови крыс с ЛФС Плнсса на сроках роста опухоли 3,6 и 10

дней.

Срок роста опухоли, дни Imax, mV 1/S (АОА), отн.ед. да, МДА,

0 0,412 ±0,033 0,242 ±0,016 0,030 ±0,002 032 ± 0,02

3 0,444 ±0,025 0,210 ±0,012 0,051 ±0,004* 0,27 ± 0,02

6 0,585 ± 0,036* 0,180±0,001* 0,059 ± 0,005* 0,16 ±0,01*

10 0,532 ± 0,052* 0,181 ±0,019* 0,038 ±0,002* 1,06 ± 0,09*

* - различия достоверны относительно показателей животных интактной группы (р < 0.05).

На сроке роста опухоли 10 дней свободиорадикальные процессы в плазме крови экспериментальных животных достоверно выше аналогичных показателей здоровых животных: 1шах, ДК» МДА выше на 29%, 27% и более чем в 2 раза, соответственно, а АОА ниже на 25%. Однако достоверно снижается концентрация ДК на 36% и повышается содержание МДА в 6,5 раз, по сравнению с аналогичными показателями на сроке роса опухоли 6 дней. Это свидетельствует об усилении окислительной деструкции липоперекисей липидов на стадии линейного роста ЛФС Плисса.

рятятя ьтвк/япй

( мда/дк

в *

а. о

о £

х S

о Й

S я

.■•■■i'

^V L

Í 5

Здня б дней Юдней

срок роста опухоли, дни

* - различия достоверны относительно контроля (р < 0.05).

Рис. 3 Интенсивность свободнорадикалыгых процессов и ПОЛ в плазме крови крыс tía ранних сроках развития окислительного стресса.

В результате исследования окислительной модификации белков показано достоверное увеличение уровня спонтанного образования альдегид- (270нм) и кетон- динитрофенилгидразонов (363 нм) в плазме крови на 21% и 49%, соответственно. А после применения растворов сукцината, олигохита сукцината и олигохита сукцината-аскорбата с 6-го дня роста опухоли выявлено достоверное снижение этих показателей.

Учитывая тот факт» что образование свободных радикалов является одним из путей метаболизма эндогенных токсических веществ (Лужников и др., 2000), оценивали уровень веществ иизкой и средней молекулярной массы (ВСНММ) в эритроцитах и плазме крови экспериментальных животных (Малахова М.Я., 1995). Увеличение содержания ВС11ММ в эритроцитах па 17% без значительного подъема концентрации этих веществ в плазме крови экспериментальных животных свидетельствует об обратимом характере этих изменений на сроке роста опухоли 3 дня (рис, 4) (р<0.05). Дальнейший рост опухоли сопровождается снижением содержания ВНСММ в эритроцитах на 34% и повышением их уровня в плазме крови и 70 % к 10 дню роста опухоли (р<0.05).

Рис. 4. Уровень ВНСММ в плазме крови эксперименталып»тх ж!твотнмх на ранних сроках развития окислительного стресса.

На данном этапе исследования были подтверждены коррелящюпные связи кристалл ооптических характеристик плазмы крови экспериментальных животных с ее свободнорадикальной активностью, полученные на здоровых животных. Так, рост опухоли характеризуется снижением прозрачное™ и увеличением количества трещин периферической зоны, а также снижением количества кристаллов, трещин и конкреций в центральной зоне.

Выявлены особенности, характерные для фаций плазмы крови животных всех изученных сроков роста опухоли: отсутствие промежуточной зоны, значительное увеличение количества конкреций неправильной формы и распределение трещин под углом в краевой зоне.

Рис.5. Морфологическая картина фации плазмы крови крыс здоровых и в условиях окислительного стресса

Таким образом, нарушение свободнораднкального баланса, повышение содержания ВНСММ, а также изменение структуропостроения фаций плазмы крови животных в процессе роста экспериментальной опухоли лимфосаркома Нлисса свидетельствует об окислительном стрессе и может использоваться как модель окислительного стресса.

3. Состояние организма экспериментальных животных на фоне введения янтарной кислоты и ее комплексов с олигосахарндом хитозана и аскорбиновой кислотой до моделирования окислительного стресса.

Использование янтарной кислоты и ее комплексов с олигосахарндом хитозана и аскорбиновой кислотой до моделирования окислительного стресса дало возможность оценить эффективность применения этих веществ для расширения адаптационных возможностей организма.

Полученные результаты показали, что на фоне предварительного введения всех исследуемых веществ происходит изменение скорости роста опухоли, однако только их комплексное введение в виде олигосахарида хитозана сукцината-аскорбата тормозит рост опухоли, сохраняя значимый противоопухолевый эффект (ТРО > 50%) в течение 20 дней. Это согласуется с представлениями о возможности торможения роста опухоли посредством введения экзогенных веществ с антиоксидантными свойствами. Тем более, что показанный на первом этапе нашего исследования выраженный антиоксидантный эффект данного комплекса подтверждает данное положение.

Следует отметить, что предварительное введение аскорбиновой кислоты, проявившей прооксидантные свойства в эксперименте на здоровых животных, стимулирует рост опухоли, увеличивая объем опухоли на 19 день после трансплантации ЛФС Плисса на 23%, по сравнению с контрольными животными (р<0.05).

Штамм ЛФС Плисса метастазирует (Плисс, 1961). В собственных экспериментах у животных контрольной группы в 50% случаев метастазы в лимфоузлах обнаруживались на 12 день после трансплантации опухоли. Аналогичная картина наблюдалась у животных, получавших аскорбиновую

кислоту и янтарную кислоту. Введение веществ, содержащих олигосахарид хитозана снижало частоту возникновения метастазов на ра1ших сроках роста опухоли. Так, на фоне предварительного введения комплекса ОхСА метастазы обнаруживались только через 20 дней роста опухоли.

Торможение роста опухоли в группе животных, получавших до трансплантации ЛФС Плисса комплекс ОхСА, способствовало увеличению продолжительности их жизни в среднем на 78% (р < 0,05). Изменение продолжительности жизни животных-опухоленосителей остальных групп, по сравнению с контролем, имело недостоверный характер (рис. 6)

ТЕ *

2 с с:

ОхСА ОхА АК ОхС ЯК

контроль

ИМ'ЧЧЧ'Ч

...............■...........--•

' .".и 1и ЦЩ'."Л' шнии

10 15 20 25 ■ 30 продолжительность жизни, дни

-I-

* - различия достоверны относительно контроля (р < 0.05).

Рис. 6. Продолжительность жизни экспериментальных животных в условиях окислительного стресса на фоне предварительного введения янтарной кислоты и ее производных.

Таким образом, введение янтарной кислоты и ее комплексов с олигосахаридом хитозана и аскорбиновой кислотой до моделирования окислительного стресса тормозит рост перевивной опухоли и увеличивает продолжительность жизни экспериментальных животных.

На основании этого была проведена серия экспериментов по изучению действия комплекса олигосахарида хитозана сукцинат-аскорбата и веществ, его составляющих на организм животных в условиях окислительного стресса.

4. Влияние янтарной кислоты, олигосахарида хитозана сукнината и олигосахарида хитозана сукцннат-аскорбата на биохимические и морфологические показатели организма животных в условиях окислительного стресса

Прооксидантное действие аскорбиновой кислоты в дозе 100 мг/кг, показанное при введении здоровым животным, а также усиление окислительного стресса позволили в дальнейшем отказаться от использования аскорбиновой кислоты и ее комплекса с олигосахаридом хитозана.

Выявлено, что применение янтарной кислоты и ее производных на ранних сроках развития окислительного стресса способствует снижению свободнорадикалыюй активности (табл. 5, рис. 7) и содержания ВНСММ (табл. 6, рис.7) в плазме крови экспериментальных животных.

Таблица 5

Интенсивность хемилюминесцентного свечения (Гтах) и общая антноксидаитная активность (АОА) плазмы крови экспериментальных

животных.

1тах, тУ АОА, отн.ед.

Группы животньгх сЗ-го дня с 6-го дня сЗ-го дня с 6-го дня

интактная 2,070±0,028 0,0419±0,0009

контроль 2,224±0,007** 2,586±0,041** 0,0357±0,0005** 0,0304±0,00И**

ЯК 1,989±0,035* 2,371*0,079* 0,0388±0,0007* 0,0342±0,0017*

ОхС 2,058±0,019* 2,282±0,029* 0,03 85±0,0004* 0,0368±0,0023*

ОхСА 2,069±0,008* 2,318±0,023* 0,0433±0,0003* 0,0371 ±0,0008*

** - различия достоверны относительно показателей животных интактной группы (р < 0.05). * - различия достоверны относительно контроля (р < 0,05).

Независимо от сроков начала введешм веществ наибольшая коррекция свободнорадикалыюй активности и уровня ВНСММ в плазме крови экспериментальных животных (на 25% и 26%, по сравнению с контролем) наблюдалась на фоне применения комплекса ОхСА (рис. 7).

Таблица б

Содержание ВНСММ в плазме крови экспериментальных животных, у.е.

Группы животных Срок роста опухоли 11 дней Срок роста опухоли 14 дней

интактная 9,13 ±0,13 9,13 ± 0,14

контроль 12,48 ± 0,28** 12,64 ±0,25**

ЯК 11,62 ± 0,27* 10,42 ± ОД 7*

ОхС 10,84 ±0,48* 12,08 ±0,13*

ОхСА 9,39 ± 0,45* 9,35 ± ОД7*

** - различия достоверны относительно показателей животных интактной группы (р < 0.05).

* - различия достоверны относительно контроля (р < 0.05).

100

группы животных

Т 150

■ 130

- 110

- 90 Е

■ 70 Е

• 50 X

- 30

■ 10

-10

11тах/аоа 1ГСММ

Рис. 7. Изменение активности свободнорадикальных процессов и содержания ВНСММ в плазме крови экспериментальных животных при введении ЯК, ОхС и ОхСА на ранних сроках развития окислительного стресса.

О нормализации свободнорадикального баланса в организме экспериментальных животных на фоне введения растворов сукцината, олигосахарида хитозана сукцината и комплекса олигосахарида хитозапа сукцината-аскорбата также свидетельствует достоверное уменьшение уровня спонтанного образования альдегид- (270нм) и кетон- дишпрофешшгидразонов (ЗбЗнм) в плазме крови.

ИК - спектры плазмы крови животных в норме и в условиях окислительного стресса, имеют разные спектральные характеристики. При окислительном стрессе интенсивность поглощения ИК-излучения плазмой крови на всех полосах поглощения достоверно ниже, чем у здоровых животных. Максимальное снижение интенсивности поглощения отмечено на полосе поглощения 1165, см*1. Соотношения исследуемых полос поглощения 1165/1070, 1165/1150, 1165/1125, о.у.е. по сравнению с интактными животными достоверно снизились на 15 %, 17 % и 20 %, соответственно (р < 0.05).

Введение экспериментальным животным исследуемых веществ (ЯК, олигосахарида хитозана сукцината, олигосахарида хитозана сукципат-аскорбата) в дозе 100 мг/кг курсом 7 дней изменяет параметры ИК - спектра плазмы крови. При этом введение янтарной кислоты вызывает и у изтгактных животных и у животных с ЛФС Плнсса наименьшее гаменение интенсивности поглощения ИК-излучения, а введение олигосахарида хитозана сукцинат-аскорбата — наибольшее. Все препараты вызывают нормализацию морфологической картины плазмы крови по сравнению с контрольными животными (рис. 8).

Препараты ЯК и ОхС в большей степени улучшают центральную зону фации, что характеризуется увеличением количества ломаных трещин. На фоне введения комплекса ОхСА наблюдается восстановление структуры периферической зоны фаций плазмы крови с образованием аркообразных трещин и конкреций правильной формы.

интактная

= .. ..^..Гу* контроль_11 Ввк^.:-■ , .....коитроль_14

Ы' /-?: . / / Уи Ну. /V г> «у;"-}'. 1 '/у /V ^

^^^^^^^^ ! "ПVР А Ч ШЯ».

а) б)

Рис. 8. Морфологическая картина фаций плазмы крови экспериментальных животных на фоне введения -ЯК. ОхС и ОхСА с 3-го (а) и 6-го (б) дней роста опухоли.

Анализ клиновидной дегидратации плазмы крови экспериментальных животных позволяет заключить, что введение янтарной кислоты и ее производных с 3-го дня роста опухоли нормализует метаболические процессы,

что отражается в особенностях структуропостроепия фации плазмы крови, в то время как введение этих веществ с 6-го дня малоэффективно.

Коррекция свободнорадикального состояния организма - опухоленосителя, посредством введения ЛК, ОхС и ОхСА, на рашшх сроках развития окислительного стресса расширяет адаптационные возможности организма, что проявляется в нормализации структуры ткани печени. Введение ЯК и ОхС пртодит к снижению дистрофических процессов в печени, в то время как ОхСА стимулирует восстановительные процессы в ткани печени животных на фоне окислительного стресса. Введение комплекса ОхСА стимулировало в печени животных выраженные регенерационные процессы, о чем свидетельствует большое количество двуядерных печеночных клеток, гепатоцитов с увеличенными гиперхромными ядрами, с плотной базофилыюй цитоплазмой, крупными, увеличенными в числе ядрышками (табл.7).

Таблица 7

Морфометрнчсскне показатели гепатоцитов неченн экспериментальных животных на фоне введения янтарной кислоты, олнгосахарнда хитозана сукцината (ОхС) и олнгосахарнда хитозана сукцннат-аскорбата (ОхСА).

Группы Количество Суммарный Средний

животных нормальных ядер. объем ядер объем ядер

Интактная 6.60±0.24 2.00±0.24 0.36

контроль 3.35±0.10** 1.5010.21 0.42

ЯК 4.13±0.20* 1.54±0.24 0.40

ОхС 4.31 ±0,31* 1.77±0.16 0,41

ОхСА 5.52±0.28* 2.00±0.13* 0.37

Группы Количество Суммарный Средний Количество

животных ядрышек объем Объем двуядерных

ядрышек ядрышек гепатоцитов.

Интактная 2Л2±0.14 0.50±0.08 0.24 0.13 ±0.01

контроль 1.66±0.25 0.43±0.12 0.26 0.12 ±0.01

ЯК 1.80±0.22 0.30±0.07 0.17 0.04 ±0.01*

ОхС 1.82±0.20 0.36±0.04 0.20 0.08 ±0.01*

ОхСА 1.98±0.18 0.62±0.07 0.32 0.20 ± 0.02*

** - различия достоверны относительно показателей животных интактной группы (р < 0.05).

* - различия достоверны относительно контроля (р < 0.05).

Таким образом, сравнительное изучение биологического действия сукцинагсодержащих веществ на экспериментальной модели окислительного стресса выявило, что применение комплекса олнгосахарнда хитозана сукцинат-аскорбата в дозе 100 мг/кг веса (курсом 7 дней) на ранних сроках роста опухоли восстанавливает свободпорадикальлый баланс организма, что приводит к нормализации морфолопгческой картины плазмы крови и структуры ткани печени экспериментальных животных.

ВЫВОДЫ

1. Проведен сравнительный анализ веществ, входящих в комплекс олигосахарид хитозана сукцинат-аскорбат, и выявлено усиление антиоксидантных свойств этих веществ при их совместном использовании. На фоне введения комплекса олигосахарид хитозана сукцинат-аскорбата в дозе 100 мг/кг веса курсом 7 дней достоверно снижается интенсивность хемилюминесцентного свечения и повышается общая антиокс ид антная активность плазмы крови здоровых животных, а также увеличивается резерв нормальных гепатоцитов, выражающийся в достоверном возрастании числа двуядерных клеток печени.

2. Показано, что аскорбиновая кислота в дозе 100 мг/кг (курсом 7 дней) оказывает прооксидантный эффект, достоверно повышая интенсивность хемилюминесцентного свечения и снижая общую антиоксидантную активность плазмы крови здоровых животных, а также усиливает окислительный стресс в модельных условиях.

3. Анализ ИК-спектров плазмы крови экспериментальных животных показал, что интенсивность поглощения ИК-излучения на полосе поглощения 1070 см *1 имеет обратную корреляционную взваимосвязь с содержанием продуктов перекисного окисления липидов ДК (г = - 0.83) и МДА (г = - 0.79).

4. Выявлена высокая корреляционная зависимость между показателями свободнорадикальной активности и характеристиками структуропостроения плазмы крови: максимальная интенсивность хемилюминесценции / количество трещин (г = 0.71), прозрачность (г = -0.70) краевой зоны, количество кристаллов в центральной зоне (г = -0,97); общая антиоксидантная активность плазмы крови / прозрачность краевой зоны (г = 0.84), размер конкреций (г = -0.47); содержание альдегид - и кетон-динитрофенилгидразонов / прозрачность (г = 0,82) краевой зоны фаций плазмы крови.

5. Установлено, что введение комплекса олигосахарида хитозана сукцинат-аскорбата и входящих в него веществ в дозе 100 мг/кг веса курсом 7 дней при окислительном стрессе восстанавливает свободнорадикальный баланс организма экспериментальных животных.

6. Выявлено снижение содержания веществ низкой и средней молекулярной массы в плазме крови экспериментальных животных на 25% при введении олигосахарида хитозана сукцинат-аскорбата (доза 100 мг/кг, 7 дней) на ранних сроках развития окислительного стресса.

7. Доказана эффективность применения комплекса олигосахарид хитозана сукцинат-аскорбат для коррекции морфологического состояния печени экспериментальных животных. Показано увеличение количества нормальных и двуядерных гепатоцитов на 65% и 67%» соответственно, свидетельствующее о стимуляции ре генерационных процессов в печени.

Практические рекомендации.

1. С целью адаптации организма животных к неблагоприятным условиям и для коррекции морфофункционального состояния печени можно рекомендовать применение комплекса олигосахарида хитозана сукцинат-аскорбата в дозе 100 мг/кг веса или подобрать дозу в соответствии с видом животного и способом введения.

2. Положительное влияние комплекса олигосахарида хитозана сукцинат-аскорбата на организм экспериментальных животных, а также деструктивное действие на ткань опухоли является основой для клинических исследований.

3. Новые данные об антиоксидантных свойствах производных янтарной кислоты и прооксидантных свойствах высоких дозировок аскорбиновой кислоты, а также выявленные корреляционные взаимосвязи параметров свободнорадикальных процессов со структурными характеристиками фаций плазмы крови, способствующих пониманию механизмов структуропостроення фаций, могут быть включены в соответствующие разделы программ по биологии, физиологии и биохимии при подготовке специалистов медико-биологического и ветеринарного профиля.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Морфологическая картина дегидратированной плазмы крови животных-опухоленосителей на фоне действия озонированного физиологического раствора, ионизирующего излучения и янтарной кислоты / Московцева О.М. [и др.] // Вестник Санкт-Петербургской государственной медицинской академии им. И.И. Мечникова. - СПб, 2004. - № 4(5). - С. 126-128.

2. Щербатюк, Т.Г. Исследование действия биологически активных добавок на печень крыс-опухоленосителей методами светооптической микроскопии гистологических препаратов и клиновидной дегидратации фаций гомогенатов / Т.Г. Щербатюк, О.М. Московцева, Ю.П. Потехина, Н.Л. Иванова, В.Г. Фролов,

B.А. Лазарева, А.Ф. Агапова // Функциональная морфология биологических жидкостей: Матер. 3 Всероссийской научно-практ. конф.. - Москва, 2004, - С.92-93.

3. Московцева, О.М. Особенности морфологической картины плазмы крови крыс на разных сроках роста Лимфосаркомы Плиса / О.М. Московцева, Т.Г. Щербатюк, Ю.П. Потехина, Т.В. Исаева // Научный потенциал мира 2004: Матер. 1 Междунар. научно-практ. конф. Том 2. Биология. - Днепропетровск : Наука и мир, 2004. - С. 18-20.

4. Московцева, О.М. Влияние сукцината, олигохит сукцината, «актива» и ацетата хитозана на свободно-радикальную активность организма-опухоленосителя / О.М, Московцева, Т.Г. Щербатюк, Е.С. Клинцова // Обмен веществ при адаптации и повреждении: Матер. 4-ой межвуз. Междунар. Биохим. научно-практ. конф. - Ростов-на-Дону, 25-26 марта 2005. - С, 117-120.

5. Московцева, О.М. Оценка эффективности применения производных хитозана у крыс с лимфосаркомои Плисса / О.М. Московцева, Т.Г. Щербатюк, Е.С. Клинцова // Сб. тез. XII Междунар, Научи. Конф. студентов, аспирантов и молодых ученых «Ломоносов». - Москва : МГУ им.М.В.Ломоносова, 2005. -

C.461-462.

6. Московцева, О.М. Изменение уровня эндогенной интоксикации плазмы крови крыс-опухоленосителей на фоне введения биологически активных добавок / О.М. Московцева, Т.Г. Щербатюк, О.М. Буловятова // Бюллетень Волгоградского научного центра РАМН. -Волгоград: ВОЛГМУ, 2005. - вып. 1. -С. 78.

7. Щербатюк, Т.Г. Морфологическое состояние печени животных-опухоленосителей на фоне влияния биологически активных добавок / Т.Г. Щербатюк, НЛ. Иванова, О.М. Московцева, А.Ф. Агапова // Дни науки - 2005: Матер. Междунар. научно-практ. конф. Том.19. — Днепропетровск, 2005. - С.58-60.

8. Московцева, О.М. Сравнительная оценка действия олигосахарида хитозана и ß-глюкана на свободнорадикальный статус организма крыс с лимфосаркомой Плисса / О.М. Московцева, Т.Г. Щербатюк // Активные формы кислорода, оксид азота, антиоксиданты и здоровье человека: Сборник трудов 4-ой нац. научно-практ. конф. - Смоленск, 2005.-С.229-230.

9. Московцева, О.М. Влияние сукцината, олиго-О-ппокозамин-сукцината и олиго-О-глюкозамин-сукцинат-аскорбата на свободнорадикальный статус плазмы крови крыс -опухоленосителей / Т.Г. Щербатюк, О.М. Московцева // Биология - наука XXI века: тез. докл, 10-й Междунар. Пущинской школы-конф. молодых учёных. — Пущино, 2006.- С. 154.

10. Пат. 2271813 Яи, МПК7 А 61 К 31/702, 31/194, 31/375, А 61 Р 1/16. Способ коррекции морфологического состояния печени опухоленосителей / Т.Г. Щербатюк, Н.Л. Иванова, В.Г. Фролов, О.М. Московцева. - № 2004130510; заявлено 18.10.2004; опубликовано 20.03.2006, Бюл. № 8.

Подписано к печати 27.09.2006. Формат 60 х 84 V« Бумагаписчая. Печать офсетная. Усл.печ.л.2. Тираж 100 экз. Заказ 79.

Полиграфический участок НижГМА 603005, Н.Новгород, ул. Алексеевская, 1

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Московцева, Ольга Михайловна

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЕ СОСТОЯНИЕ СВОБОДНОРАДИКАЛЬНЫХ ПРОЦЕССОВ ОРГАНИЗМА И ПУТИ ИХ КОРРЕКЦИИ ПРИ ДЕЙСТВИИ СТРЕСС ФАКТОРОВ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ).

1.1 Свобо днорадикальные процессы в организме.

1.1.1. Перекисное окисление липидов.

1.1.2. Окислительная модификация белков.

1.2. Антиоксидантная система организма.

1.3. Взаимосвязь свободнорадикальных и энергетических процессов в организме в условиях стресса. 30 1.3.1. Особенности свободнорадикальных процессов и энергетического обмена в условиях злокачественного роста.

1.4. Способы предупреждения и коррекции нарушений свободнорадикальных процессов и энергетического обмена организма при стрессе, вызванном злокачественным ростом.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1 Схема эксперимента. Ход исследования.

2.2 Методы исследования. 52 2.2.1. Методы оценки свободнорадикального состояния организма экспериментальных животных.

2.2.1.1. Определение свободнорадикальной активности методом индуцированной хемилюминесценции.

2.2.1.2. Метод определения концентрации диеновых коньюгатов.

2.2.1.3.Метод определения концентрации малонового диальдегида.

2.2.1.4. Метод определения окислительной модификации белков по уровню карбонильных производных.

2.2.2. Метод регистрации веществ низкой и средней молекулярной массы.

2.2.3. Метод измерения уровня глюкозы в крови.

2.2.4. Метод инфракрасной спектроскопии плазмы крови.

2.2.5. Метод клиновидной дегидратации биологических жидкостей.

2.2.6. Морфологические методы исследования.

2.2.7. Оценка противоопухолевого эффекта.

2.2.8. Методы статистической обработки.

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

3.1. Влияние янтарной кислоты и ее комплексов с олигосахаридом хитозана и аскорбиновой кислотой на биохимические и морфологические показатели организма здоровых животных.

3.1.1. Состояние свободнорадикальных процессов на фоне введения исследуемых веществ.

3.1.2. Особенности ИК - спектров плазмы крови здоровых животных, получавших растворы ЯК и ее комплексов.

3.1.3. Особенности морфологической картины плазмы крови здоровых животных, получавших растворы ЯК и ее комплексов.

3.1.4. Влияние исследуемых веществ на структуру ткани печени здоровых животных. 72 Заключение к главе 3.1.

3.2. Особенности метаболизма организма экспериментальных животных в условиях моделирования окислительного стресса.

3.2.1. Условия моделирования окислительного стресса.

3.2.2. Состояние свободнорадикальных процессов в организме экспериментальных животных во время роста лимфосаркомы Плисса.

3.2.3. Содержание веществ низкой и средней молекулярной массы в плазме крови животных в процессе роста лимфосаркомы Плисса.

3.2.4. Особенности структуропостроения фации плазмы крови в процессе роста опухоли.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Влияние янтарной кислоты и ее производных на состояние свободнорадикальных процессов экспериментальных животных"

Актуальность проблемы. Надежность биологической системы определяется механизмами ее адаптации к действию факторов среды и условиям жизнедеятельности [34], т.к. любое изменение состояния в среде воспринимается организмом как стрессор [74]. Поддержание постоянства определенных параметров внутренней среды организма при действии стресс-факторов обеспечивается организованными определенным образом и соподчиненными между собой гомеостатическими системами [123], являющимися важнейшим инструментом адаптационных механизмов организма [18, 94, 123, 142].

По мнению Ф.З. Меерсона умеренная активация свободнорадикальных процессов является частью общего адаптационного механизма, направленного на поддержание клеточного гомеостаза [123]. Однако длительный и чрезмерный по интенсивности стресс вызывает патологические изменения этих систем и, как следствие, возникновение и развитие эндогенных заболеваний, в частности злокачественных новообразований.

Так как нарушение свободнорадикальных процессов сопровождается развитием гипоксического состояния [112, 139, 162], то необходимо включение в комплексную профилактику и терапию заболеваний, сопряженных с развитием окислительного стресса, экзогенных веществ с выраженными антиоксидантными [77, 104] свойствами.

Исследования последних лет позволили взглянуть на янтарную кислоту (ЯК) не только как на энергетический субстрат, но и как на регулятор функций живых систем. Работами школы профессора М.Н. Кондрашовой было показано наличие у ЯК биологической активности с уникальным сочетанием проявлений: по отношению к здоровому организму сукцинаты выступают в роли адаптогенов, а при наличии патологических процессов демонстрируют нетипично высокий для адаптогенов терапевтический эффект.

В экспериментальных и клинических работах показаны антигипоксическое [88, 111, 118], антиоксидантное [2], детоксицирующее [2, 93], радиопротекторное [68, 92] и др. свойства янтарной кислоты и ее производных [78, 89, 90, 241].

Цель исследования:

Задачи исследования:

1. Изучить влияние комплекса олигосахарида хитозана сукцинат-аскорбата и входящих в него веществ (доза 100мг/кг веса, курс 7 дней) на активность свободнорадикальных процессов, интенсивность поглощения ИК-излучения и структуропостроение плазмы крови здоровых животных;

2. Выявить взаимосвязь изменения свободнорадикального баланса с характеристиками стр.уктуропостроения фаций плазмы крови экспериментальных животных;

4. Изучить морфофункциональное состояние печени экспериментальных животных на фоне введения янтарной кислоты, олигосахарида хитозана сукцината и комплекса олигосахарида хитозана сукцинат-аскорбата.

Научная новизна.

Впервые изучено влияние комплекса олигосахарида хитозана сукцинат-аскорбата и входящих в него веществ (доза 100мг/кг веса, курс 7 дней) на активность свободнорадикальных процессов организма экспериментальных животных в условиях нормы и при окислительном стрессе. Показано достоверное повышение антиоксидантной активности и снижение интенсивности хемилюминесценции плазмы крови экспериментальных животных на фоне введения комплекса олигосахарида хитозана сукцинат-аскорбата.

Показано, что введение аскорбиновой кислоты в дозе 100 мг/кг веса крыс курсом 7 дней приводит к повышению интенсивности хемилюминесценции и снижению общей антиоксидантной активности в плазмы крови здоровых животных, а также усилению окислительного стресса в модельных условиях.

Показана обратная корреляционная взваимосвязь интенсивности поглощения ИК-излучения на полосе поглощения 1070 см с продуктами перекисного окисления липидов ДК (г = - 0.83) и МДА (г = - 0.79) в плазме крови.

Впервые изучены особенности структурной организации фации плазмы крови крыс в условиях окислительного стресса. Выявлена высокая корреляционная зависимость между показателями свободнорадикальной активности и характеристиками структуропостроения плазмы крови: максимальная интенсивность хемилюминесценции / количество трещин (г = 0.71), прозрачность (г = -0.70) краевой зоны, количество кристаллов в центральной зоне (г = -0.97); общая антиоксидантная активность плазмы крови / прозрачность краевой зоны (г = 0.84), размер конкреций (г = -0.47); содержание карбонильных производных белков / прозрачность (г = 0.82) краевой зоны фаций плазмы крови.

Впервые показано применение комплекса олигосахарида хитозана сукцинат-аскорбата для коррекции морфологического состояния печени экспериментальных животных (Патент РФ- регистрационный № 2004130510/14 (033139) от 18.10.2004 Положительное решение от 1.09.2005г).

Практическая значимость.

Результаты работы являются обоснованием для экспериментальных и клинических исследований возможностей применения комплекса олигосахарида хитозана сукцинат-аскорбата как стимулятора физиологических функций организма в норме и при окислительном стрессе, а также применения в клинической практике в качестве средства для ингибирования роста опухоли (Заявка на патент № 2006128441 и 2006128442 от 07.08.2006г.).

Возможно применение комплекса олигосахарида хитозана сукцинат-аскорбата в ветеринарной практике для расширения адаптогенных возможностей организма животных.

Апробация работы.

Москва, 2005); 4-ой национальной научно-практической конференции с международным участием «Активные формы кислорода, оксид азота, антиоксиданты и здоровье человека» (Смоленск, 2005); V Сессии Молодых Ученых НижГМА (Н.Новгород, 2006); X юбилейной межвузовской конференции молодых ученых «Актуальные проблемы патофизиологии» (Санкт-Петебург, 2004); VII Конгрессе международной ассоциации морфологов (Казань, 2004); Всероссийской выставке научно-технического творчества молодежи (Москва, 2004, 2005).

Положения, выносимые на защиту:

1. Комплекс олигосахарид хитозана сукцинат-аскорбат в дозе 100 мг/кг веса оказывает выраженное антиоксидантное действие на организм здоровых животных, а также увеличивает резерв нормальных гепатоцитов, выражающийся в достоверном возрастании числа двуядерных клеток печени.

3. Введение комплекса олигосахарида хитозана сукцинат-аскорбата и входящих в него веществ в дозе 100 мг/кг веса курсом 7 дней в условиях моделирования окислительного стресса способствует восстановлению свободнорадикального баланса в организме экспериментальных животных.

Заключение Диссертация по теме "Биологические науки", Московцева, Ольга Михайловна

ВЫВОДЫ

1. Выявлено усиление антиоксидантных свойств веществ, входящих в комплекс олигосахарид хитозана сукцинат-аскорбат при их совместном использовании. На фоне введения комплекса олигосахарид хитозана сукцинат-аскорбата в дозе 100 мг/кг веса курсом 7 дней достоверно снижается интенсивность хемилюминесцентного свечения и повышается общая антиоксидантная активность плазмы крови здоровых животных, а также увеличивается резерв нормальных гепатоцитов, выражающийся в достоверном возрастании числа двуядерных клеток печени.

3. Определено, что интенсивность поглощения инфракрасного излучения на полосе поглощения 1070 см имеет обратную корреляционную взваимосвязь с содержанием продуктов перекисного окисления липидов ДК (г = -0.83) и МДА (г = -0.79).

4. Выявлена высокая корреляционная зависимость между показателями свободнорадикальной активности и характеристиками структуропостроения плазмы крови: максимальная интенсивность хемилюминесценции / количество трещин (г = 0.71), прозрачность (г = -0.70) краевой зоны, количество кристаллов в центральной зоне (г = -0.97); общая антиоксидантная активность плазмы крови / прозрачность краевой зоны (г = 0.84), размер конкреций (г = -0.47); содержание альдегид - и кетон-динитрофенилгидразонов / прозрачность (г = 0.82) краевой зоны фаций плазмы крови.

5. Установлено, что введение комплекса олигосахарида хитозана сукцинат-аскорбата в дозе 100 мг/кг веса курсом 7 дней при окислительном стрессе восстанавливает свободнорадикальный баланс организма экспериментальных животных.

6. Выявлено снижение содержания веществ низкой и средней молекулярной массы в плазме крови экспериментальных животных на 25 % при введении олигосахарида хитозана сукцинат-аскорбата (доза 100 мг/кг, 7 дней) на ранних сроках развития окислительного стресса.

7. Доказано увеличение количества нормальных и двуядерных гепатоцитов на 65% и 67%, соответственно, свидетельствующее о стимуляции регенерационных процессов в печени.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ.

Свободнорадикальное окисление является частью физиологических процессов клетки. Однако в основе механизма действия на организм большинства факторов среды и условий жизнедеятельности лежит избыточная продукция свободных радикалов, ведущая к нарушению свободнорадикального гомеостаза в результате развития окислительного стресса [18, 38, 58, 64, 71, 80, 98, 165, 178, 222, 231, 236, 238, 266]. В поддержании свободнорадикального гомеостаза организма особую роль играет введение экзогенных антиоксидантов.

Антиоксидантное действие янтарной кислоты и ее производных показано в экспериментальных работах при гипоксическом нарушении беременности [88], токсическом повреждении почек высокими дозами витамина D [2] и после клинической смерти [44]. Однако работ, показывающих действие янтарной кислоты и ее производных на состояние свободнорадикальных процессов здорового организма и при окислительном стрессе, вызванном ростом опухоли, нами не обнаружено.

На первом этапе исследования мы провели сравнительный анализ действия янтарной и аскорбиновой кислот, а также их комплексов с олигосахаридом хитозана на про-антиоксидантный баланс организма здоровых животных. Выявлено усиление антиоксидантного эффекта этих веществ при их совместном использовании в виде комплекса олигосахарида хитозана сукцинат-аскорбата. На фоне введения этого комплекса в дозе 100 мг/кг веса курсом 7 дней достоверно снижается максимальная интенсивность хемилюминесцентного свечения и повышается общая антиоксидантная активность плазмы крови здоровых животных, а также увеличивается резерв нормальных гепатоцитов, выражающийся в достоверном возрастании числа двуядерных клеток печени на 43% и объемной доли ядрышек на 36% (р<0.05).

Показано, что аскорбиновая кислота в дозе 100 мг/кг (курсом 7 дней) оказывает прооксидантный эффект, достоверно повышая интенсивность хемилюминесцентного свечения и снижая общую антиоксидантную активность плазмы крови здоровых животных, что подтверждает возможность инверсии антиоксидантного действия АК в условиях in vivo в прооксидантное, и согласуется с работами Т.С. Морозкиной с сотр. [131] и Н. Sakagami.[260].

Усиление свободнорадикальной активности плазмы крови здоровых животных на фоне введения аскорбиновой кислоты было визуально подтверждено с помощью метода клиновидной дегидратации биожидкостей [198], т.к. выявленные изменения в структуре фаций плазмы крови животных данной группы (снижение прозрачности, увеличение количества трещин и конкреций, а также их размера в периферической зоне фаций), имеют высокую корреляционную взаимосвязь с параметрами свободнорадикальных процессов (Imax, АОА).

По данным А.В. Каргаполова полосе поглощения 1070 см соответствуют фосфолипиды [73], в связи с чем, выявленная нами высокая корреляционная взаимосвязь интенсивности поглощения ИК-излучения на данной полосе с содержанием продуктов перекисного окисления липидов -диеновых коньюгатов (г = - 0.83) и мапонового диальдегида (г = - 0.79) в плазме крови позволяет косвенно судить об интенсивности ПОЛ.

Показанный на организме здоровых животных антиоксидантный эффект комплекса олигосахарида хитозана сукцинат-аскорбата дал основу для изучения действия этого комплекса и веществ, входящих в него, в условиях окислительного стресса.

В выборе модели окислительного стресса мы основывались как на литературных данных, так и на собственных результах. Многочисленными работами показано, что опухолевый рост сопровождается повышением свободнорадикального окисления и истощением антиоксидантной защиты в организме [7, 18, 62, 66, 81, 96, 134, 144, 156, 175, 184, 207]. На моделях экспериментальных опухолей (эритромиелоз Швеца, карцинома Герена, лимфосаркома Плисса и др.) показано снижение общей активности СОД [13, 180], каталазы [168], а-токоферола, аскорбиновой кислоты [103] и др. антиоксидантов в тканях животных-опухоленосителей.

Нами показано, что рост экспериментальной опухоли лимфосаркома Плисса, сопровождается изменением параметров состояния про -антиоксидантной системы: уже на 6 день после перевивки опухоли наблюдается достоверное снижение АОА на 26% и повышение максимальной интенсивности хемилюминесценции на 42 % с одновременным ростом ДК на 97 % в плазме крови экспериментальных животных. А на 10 день - содержание малонового диальдегида выросло в 2.3 раза, по сравнению с контролем.

Учитывая тот факт, что образование свободных радикалов является одним из путей метаболизма эндогенных токсических веществ [109], то одной из причин повышения свободнорадикальной активности плазмы крови может быть увеличение содержания веществ низкой и средней молекулярной массы (ВНСММ) на 45% в плазме крови животных к 10 дню роста опухоли. Известно, что при неоплазии в организме происходит накапливание в высоких концентрациях конечных и промежуточных продуктов нарушенного обмена, продуктов неуправляемого протеолиза, деструкции органов и тканей, а так же разнообразных биологически активных веществ, гидроперекисей, липидов, полиаминов, фенолов [120].

Выявлены особенности структуропостроения плазмы крови крыс, характерные для фаций животных всех изученных сроков роста опухоли: отсутствие промежуточной зоны, увеличение количества конкреций неправильной формы и распределение трещин под углом в краевой зоне.

Таким образом, перевивная опухоль лимфосаркома Плисса на ранних стадиях роста вызывает нарушение свободнорадикального гомеостаза, в связи с чем, может быть использована как адекватная модель окислительного стресса.

Показанное в ряде работ торможение роста перевивных [241] и снижение частоты развития спонтанных опухолей [4, 78, 154], а также увеличение продолжительности жизни онкологических больных [82] на фоне применения сукцинатсодержащих веществ, подтверждены результатами нашего исследования. Так, ведение комплекса олигосахарида хитозана сукцинат - аскорбата (доза 100 мг/кг, курс 7 дней) до моделирования окислительного стресса тормозит рост опухоли на 64%, что способствует увеличению продолжительности лсизни экспериментальных животных на 78%.

Стимуляция роста опухоли на фоне введения аскорбиновой кислоты в дозе 100 мг/кг до трансплантации ЛФС Плисса согласуется с данными Н.А. Харьковской с сотр., показавшими увеличение скорости роста опухоли после введение морским свинкам АК в дозе 1 г/кг [192] и T.Shingu (1975) показано ускорение роста карциномы Эрлиха у мышей после введения аскорбата внутрибрюшинно в дозе 25 мг/сутки [263]. В связи с чем, мы не использовали аскорбиновую кислоту и ее комплекс с олигосахаридом хитозана на следующем этапе.

Изучение действия сукцинатсодержащих веществ (янтарной кислоты, олигосахарида хитозана сукцината и олигосахарида хитозана сукцинат -аскорбата) на состояние свободнорадикальных процессов организма животных в условиях окислительного стресса выявило следующее:

1). Применение янтарной кислоты и ее производных в концентрации 100 мг/кг курсом 7 дней на ранних сроках роста опухоли способствует снижению максимальной интенсивности хемилюминесцентного свечения, увеличению общей антиоксидантной активности и уменьшению содержания ВНСММ в плазме крови экспериментальных животных.

2). Независимо от сроков роста опухоли на момент начала введения исследуемых веществ наибольшую коррекцию свободнорадикальных процессов организма экспериментальных животных оказывает олигосахарид хитозана сукцинат-аскорбат. Так, в соответствии со сроком роста опухоли общая АОА повысилась на 21 и 49%, в то время как содержание малонового диальдегида снизилось на 57% и 49%, а спонтанное образование карбонильных производных аминокислот, отражающее степень окислительной модификации белков в плазме крови, снизилось на 11% и 18%, соответственно.

3) Применение комплекса олигосахарида хитозана сукцинат-аскорбата с 3-го и 6-го дня после трансплантации ЛФС Плисса приводит к деструкции ткани опухоли, что выражается в достоверном увеличении числа гибнущих клеток опухоли в 4.7 раза на фоне снижения активных клеток опухоли на 47%.

4). Введение комплекса олигосахарида хитозана сукцинат-аскорбата на ранних сроках развития окислительного стресса способствует увеличению количества нормальных и двуядерных гепатоцитов на 65% и 67%, соответственно, что свидетельствует о регенерационных процессах в печени. Полученные данные свидетельствуют об активирующем влиянии ОхСА на регенерационные процессы в печени, что возможно объясняется наличием в этом комплексе полисахарида, усиливающего, по данным В.И. Щербакова и Д.Н. Маянского [203], репаративные процессы. Итак, данный комплекс стимулирует пролиферативную активность гепатоцитов как у здоровых животных, так и в условиях окислительного стресса.

На основании этих результатов запатентован способ коррекции морфологического состояния печени экспериментальных животных.

Таким образом, сравнительное изучение биологического действия ЯК и АК кислот, а также их комплексов с ОХ, выявило, что только применение комплекса олигосахарида хитозана сукцинат-аскорбата в дозе 100 мг/кг курсом 7 дней в здоровом организме оказывает выраженный АО эффект, а использование этого комплекса на ранних сроках роста опухоли восстанавливает свободнорадикальный баланс организма, нормализует морфологическую картину плазмы крови и структуру ткани печени экспериментальных животных, а также вызывает деструкцию ткани опухоли, что способствует увеличению продолжительности жизни экспериментальных животных в условиях окислительного стресса.

128

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Московцева, Ольга Михайловна, Нижний Новгород

1. Автандилов, Г.Г. Введение в количественную патологическую морфологию.- М. : Медицина, 1980.- 216 с.

2. Анаэробное образование сукцината и облегчение его окисления -возможные механизмы адаптации клетки к кислородному голоданию / Е.И. Маевский и др. // Биофизика. 2000. - Т. 45, № 3. - С. 509-513.

3. Анисимов, В.Н. Влияние янтарной кислоты на частоту спонтанных опухолей и продолжительность жизни у мышей СЗН/Sn / В.Н. Анисимов, М.Н. Кондрашова // Докл. АН СССР. 1979.- Т. 248, № 5. С. 1242-1245.

4. Анисимов, В.Н. Молекулярные и физиологические механизмы старения. СПб. : Наука, 2003. - 468с. - ISBN 5-02-026199-8.

5. Антиоксиданты и атеросклероз: критический анализ проблемы и направление дальнейших исследований / В.З Ланкин и др. // Патогенез. 2004. - №1. - С. 71-86.

6. Арутюнян, А.В. Методы оценки свободнорадикального окисления и антиоксидантной системы организма. Метод, реком. / А.В. Арутюнян, Е.Е. Дубинина, Н.Н. Зыбина. СПб: «Фолиант».- 2000,- 104с.

7. Архипенко, Ю.В. Свободнорадикальное окисление при гипоксии и реоксигенации: плюсы и минусы / Ю.В. Архипенко, Т.Г. Сазонтова // Свободные радикалы и болезни человека : сб. тр. нац. науч.-практ. конф. с межд. уч.- Смоленск, 19-22 сентября 1999.- С. 21-22.

8. Арчаков, А.И. Модификация белков активным кислородом и их распад / А.И. Арчаков, И.М. Мохосоев // Биохимия. 1989.- Т. 54.- С. 179.

9. Афанасьев, И.Б. Кислородные радикалы в химии и биологии. Минск: Наука и техника, 1984. - С. 13-29.

10. Бабенко, Г.А. О нарушении обмена микроэлементов металлов в опухоли и других тканях организма-носителя новообразования / Г.А. Бабенко // Микроэлементы в медицине.- Киев. Здоров'я, 1973. -Вып.47. - С. 3-8.

11. Баглей, Е.А. Изменение ферментативных антиокислительных систем при развитии опухолей, индуцированных вирусом саркомы Молони / Е.А. Баглей, A.M. Тараховский, В.Я. Моргун // Экспериментальная онкология. 1981. - Т.З, № 6. - С. 33-36.

12. Бакеева, Л.Е. Ультраструктура митохондрий и дыхание мышц диафрагмы. Влияние повреждения ткани / Л.Е. Бакеева, Д.Б. Зоров, Е.Н. Мохова // В кн.: Регуляция энергетического обмена и физиологическое состояние организма. М.: Наука, 1978. - С. 103-112.

13. Балаж, А. Биология опухолей: Сомнения и надежды. -М. : Мир, 1987. -310с.

14. Балдуева, И.А. Оценка некоторых параметров клеточного иммунитета у больных раком, молочной железы и лимфогранулематозом в динамике лечения / И.А. Балдуева, Ж.К. Пухова, Л.П. Гавриленкова // Вопр. онк. 1992. - Т. 38. - № 7. - С.787-792.

15. Баличева, Л.В. Структурно-метаболические и функциональные изменения в печени опухоленосителей / Л.В. Баличева // Актуальные вопросы современной онкологии,-М., 1973.- С. 91-111.

16. Барабой, В.А. Стресс: природа, биологическая роль, механизмы, исходы. Киев: Фитосоциоцентр, 2006.-424 с. - ISBN 966-306-121-7.

17. Белоусова, М.Н. Биохимические особенности опухолевых клеток / М.Н. Белоусова // Биология злокачественного роста. -М. : Медицина, 1965.-С. 78-89.

18. Бельченко, Л.А. Адаптация человека и животных к гипоксии разного происхождения / Л.А. Бельченко // Соросовский образовательный журнал. 2001.- Т. 7, № 7. - С. 33-39.

19. Береговская, Н.Н. Энерготранспортное фосфорилирование. Биофизические аспекты / Н.Н. Береговская //Нарушения биоэнергетики в патологии и пути их восстановления. М., 1993. - С. 11-20.

20. Биленко, М.В. Ишемические и реперфузионные повреждения органов (молекулярные механизмы, пути предупреждения и лечения). М.: Медицина, 1989,- 368с. - ISBN 5-225-00747-3.

21. Биоантиокислители в регуляции метаболизма в норме и патологии / Под ред. А.И. Журавлева.- М.: Наука, 1982,- 240с

22. Биофизика рака / Н.М. Эммануэль, Р.Е. Кавецкий, Б.Н. Тарусов, Е.П. Сидорик. Киев : Наук. Думка, 1976. - 259 с.

23. Биохемилюминометр БХЛ-07 / С.В. Ермолин и др. // Активные формы кислорода, оксид азота, антиоксиданты и здоровье человека : сб. тр. 4-ой нац. научн.-практ. конф. с межд. уч. Смоленск, 26-30 сентября 2005. - С. 21-23.

24. Болдырев, А.А. Окислительный стресс и мозг // Соросовский образовательный журнал. 2001.- № 7.- С.21-28.

25. Бондарь, Т.Н. Восстановление органических гидроперекисей глутатионпероксидазой и глутатион-8-трансферазой: влияние структуры субстрата / Т.Н. Бондарь, В.З. Ланкин, В.Л. Антоновский // Докл. АН СССР. 1989. - Т. 304, № 1.-С.217-220.

26. Бродский, В.Я. Клеточная полиплоидия. Пролиферация и дифференцировка / В.Я. Бродский, И.В. Урываева. М. : Наука, 1981. -259с.

27. Бурлакова, Е.Б. Антиоксиданты в химиотерапии опухолей / Е.Б. Бурлакова, Н.П. Пальмина // Вопр. онкол. 1990. - Т. 36, № 3. - С. 1155-1162.

28. Бурлакова, Е.Б. Кинетические особенности токоферолов как антиоксидантов / Е.Б. Бурлакова, С.А. Крашаков, Н.Г. Храпова. -Черноголовка, 1992. 56с.

29. Бурлакова, Е.Б. Антиоксиданты как универсальные модификаторы состава, структуры и свойств мембран / Е.Б. Бурлакова // Свободные радикалы и болезни человека : сб. тр. нац. науч.-практ. конф. с межд. уч. - Смоленск, 19-22 сентября 1999. - С. 49-50.

30. Васильев, С.Ц. Роль янтарной кислоты в терапии митохондриальных болезней у детей / С.Ц. Васильев, А.Б. Сафонов // Педиатрия. 2000.-№2,-С. 88-91.

31. Влияние мелатонина, аскорбиновой и янтарной кислот на кумуляцию токсического эффекта гаммафоса (амифостина) при его повторном применении / М.В. Васин и др. // Фармакология и токсикология. -2004.-Т. 137, № 5. С.515-518.

32. Величковский, Б.Т. Свободнорадикальное окисление как звено срочной и долговременной адаптации организма к факторам окружающей среды / Б.Т. Величковский // Вестник РАМН. 2001,- № в.- С. 45-53.

33. Виноградов, А.Д. Преобразование энергии в митохондриях / А.Д. Виноградов // Соросовский образовательный журнал. 1999. - № 9. - С. 11-19.

34. Владимиров, Ю.А. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах / Ю.А. Владимиров, А.И. Арчаков. М.: Наука, 1972. - 252 с.

35. Владимиров, Ю.А., Шерстнев М.П. Хемилюминееценция клеток животных / Ю.А. Владимиров, М.П. Шерстнев. М.:ВИНИТИ, 1989. -170 с.

36. Владимиров, Ю.А. Свечение, сопровождающее биохимические реакции / Ю.А. Владимиров // Соросовский образовательный журнал. -1999.-№ 6.-С. 25-32.

37. Владимиров, Ю.А. Свободные радикалы в биологических системах / Ю.А. Владимиров //. Соросовский образовательный журнал. 2000. - Т. 6, № 12.-С. 13-19.

38. Владимиров, Ю.А. Активированная хемилюминееценция и биолюминесценция как инструмент в медико-биологических исследованиях / Ю.А. Владимиров // Соросовский образовательный журнал. 2001. - Т. 7, № 1,- С. 16-23.

39. Владимиров, Ю.А. Свободные радикалы в клетке / Ю.А. Владимиров // Природа. 1997. - № 4. - С. 47-54.

40. Владимиров, Ю.А. Физико-химические основы патологии клетки: Курс лекций Электронный ресурс.- Режим доступа: http://biophysics.hotmail.m/doc/doc.htm/- Загл. с экрана.

41. Войтовицкий, В.К. Цитогенетическое изучение метастазов асцитной лимфосаркомы Плисса / В.К. Войтовицкий // Цитология. 1971. - Т. 13, № 3. - С. 362-367.

42. Волкова, О.В. Основы гистологии с гистологической техникой / О.В. Волкова, Ю.К. Елецкий. М.: Медицина, 1971. - 272 с.

43. Гистология / Ю.И. Афанасьева и др. / Под ред. В.Г. Елисеева и др-М. : Медицина, 1983. 592 с.

44. Гланц, Стентон. Медико-биологическая статистика / Стентон Гланц. -М. : Практика, 1999. 560с.- ISBN

45. Голотюк И.А. Функционально-морфологические изменения печени при раке молочной железы // Вопросы онкологии, 1978.- Т.24, №8.- С. 7983.

46. Гонский, Я.И. Энергообеспечивающее и свободнорадикальное окисление при опухолевом росте и индуцированном бластогенезе / Я.И. Гонский, Н.Н. Береговская // Нарушения биоэнергетики в патологии и пути их восстановления. М. - 1993. - С. 21-26.

47. Гордецов, А. С. Диагностическая ИК-спектроскопия / А.С. Гордецов // Нижегородский Медицинский журнал. 2003. - № 3. - С. 72-76.

48. Горожанская, Э.Г. Сдвиги изоэнзимного спектра лактатдегидрогеназы в злокачественных опухолях как результат прогрессии / Э.Г. Горожанская, B.C. Шапот // Вопросы онкологии. 1973. - Т. 19, № 4. -С. 96.

49. Горысов, В. А. Кинетический анализ роста лимфосаркомы Плисса / В.А. Горысов, Л.С. Васильева // Вопросы онкологии .- 1973. Т. 19, № 7. - С. 91-93.

50. Дмитриев, Л.Ф. О роли мембранных фосфолипидов в окислительном фосфорилировании. Гипотеза LC-сопряжения / Л.Ф. Дмитриев // Молекулярная биология. 1985. - Т. 19, № 4. - С. 1001-1010.

51. Дубинина, Е.Е. Состояние антиоксидантной системы эритроцитов новорожденных детей при острой и хронической гипоксии / Е.Е. Дубинина, Л.Н. Софронова, Н.П. Раменская // Вопр. мед. химии. 1989. -№1. - С. 56-59.

52. Дубинина, Е.Е. Окислительные модификации белков / Е.Е. Дубинина, И.В. Шугалей //Успехи современной биологии, 1993.- Т. 113, № 1,- 7181.

53. Дынник, В.В. Регуляция цикла трикарбоновых кислот / В.В. Дынник // Молекулярные механизмы клеточного гомеостаза : сб. тр. / отв. ред. И.И. Гительзон.- Новосибирск: «Наука», 1987. С. 113-129.

54. Журавлев, А.И. Развитие идеи Б.Н. Тарусова о роли цепных процессов в биологии / А.И. Журавлев // Биоантиокислители в регуляции метаболизма в норме и патологии. М. : Наука, 1982. - С. 3-36.

55. Журавлев, А.И. Свободнорадикальная биология: Лекция. М. : Моск. вет. акад., 1993. - 70с. - ISBN 5-86341-007-8.

56. Зайцев, В.Г. Связь между химическим строением и мишенью действия как основа классификации антиоксидантов прямого действия / В.Г. Зайцев, О.В. Островский, В.И Закревский // Экспериментальная и клиническая фармакология, 2003. Т. 66, № 4. - С. 66-70.

57. Зенков, Н.К. Окислительный стресс: Биохимический и патофизиологический аспекты / Н.К. Зенков, В.З. Ланкин, Е.Б. Меныцикова. -М. : МАИК «Наука/Интерпериодика», 2001. 343 с.-ISBN 5-7846-0050-8.

58. Иванов, И.И. Перераспределение антиоксидантов липидной природы в организме животного при раке / И.И. Иванов, Б.Н. Тару сов // Физико-химические механизмы злокачественного роста. М. : Наука, 1970. - С. 112-115.

59. Иванов, К.П. Основы энергетики организма: Теоретические и практические аспекты. Том 1. Общая энергетика, теплообмен и терморегуляция / К.П. Иванов. Л.: Наука, 1990.- 307с.- ISBN 5-02025656-0.

60. Ивницкий, Ю.Ю. Янтарная кислота в системе средств метаболической коррекции функционального состояния резистентности организма / Ю.Ю. Ивницкий, А.И. Головко, Г.А. Софронов. СПб.: Лань, 1998. -82 с.

61. Ингибирование гидролиза фосфолипидов фосфолипазой А2 в мембранах микросом и митохондрий, подвергшихся перекисному окислению липидов / П.С. Балевская и др. // Бюлл. Эксп. Биол. и Мед. 1985.-№2.- С 161-163.

62. Кавецкий, Р.Е. Опухоль и организм.- Киев: Госмедиздат УССР, 1962.-299с.

63. Каган, В.Е. Проблема анализа эндогенных продуктов перекисного окисления липидов / В.Е. Каган, О.Н. Орлов, JI.JL Прилипко. М. : ВИНИТИ, Сер. Биофизика.- 1986.-Т. 18.-С. 191.

64. Казимирко, В.К. Антиоксидантная система и ее функционирование в организме человека / В.К. Казимирко, В.И. Мальцев Электронный ресурс. Режим доступа: http://www.health-ua.com/articles/773.html

65. Каргаполов, А.В. Особенности инфракрасного спектра крови в норме и патологии / А.В. Каргаполов // Применение ИК спектроскопии при диагностике и прогнозировании различных заболеваний. 2003. - С. 1519.

66. Карташов, Ю.И. Контроль состояния адаптационных ресурсов человека / Ю.И. Карташов / Валеология. 2001. - № 3. - С. 21 -23.

67. Карузин, И.И. Инактивация цитохрома Р-450 в гидроксилазных реакциях / И.И. Карузин, А.И. Арчаков // Биохимия. 1985. - вып. 50. -С. 1805.

68. Каюшин, Л.П. Свободные радикалы и их превращения в облученных белках / Л.П. Каюшин, М.К. Пулатова, В.Г. Кривенко. М. : Атомиздат, 1976. -269с.

69. Кения, М.В. Роль низкомолекулярных антиоксидантов при окислительном стрессе / М.В. Кения, А.И. Лукаш, Е.П. Гуськов // Успехи современной биологии. 1993. - Т. 113, № 4. - С. 456-460.

70. Коваленко, А.Л. Реамберин 1,5% для инфузий: от эксперимента в клинику / А.Л. Коваленко, М.Г. Романцов. С.-Пб. : «СП Минимакс», 1999. - 112 е.-ISBN 5-93568-001-7.

71. Кожевников, Ю.Н. О перекисном окислении в норме и патологии / Ю.Н. Кожевников // Вопросы медицинской химии. 1985. - Т. 31, № 5. - С. 2-7.

72. Козлов, Ю.П. Свободные радикалы и их роль в нормальных и патологических процессах. М. : МГУ, 1973. - 175 с.

73. Козлов, Ю.П. Перекисное окисление липидов и проблема канцерогенеза / Ю.П. Козлов // Актуальные вопросы современной онкологии. М : МГУ, 1979. - Т. 5. - С. 72-83.

74. Колесниченко, JI.C. Глутатионтрансферазы / Л.С. Колесниченко, В.И. Кулинский // Успехи современной биологии. 1989. - Т. 107, №2. - С. 179-195.

75. Кольман, Я. Наглядная биохимия: Пер. с нем. / Я. Кольман, К.-Г. Рём. -М.: «МИР», 2000,- 469с,- ISBN 5-03-003304-1.

76. Кондрашова, М.Н. Выясненные и наметившиеся вопросы на пути исследования регуляции физиологического состояния янтарной кислотой / М.Н. Кондрашова // Терапевтическое действие янтарной кислоты. Пущино, 1976. - № 4. - С. 12.

77. Кондрашова, М.Н. Гомеостазирование физиологических функций на уровне митохондрий / М.Н. Кондрашова и др. // Молекулярные механизмы клеточного гомеостаза : сб. тр. / отв. ред. И.И. Гительзон.-Новосибирск : «Наука», 1987. С. 40-66.

78. Кондрашова, М.Н. Гормоноподобное действие янтарной кислоты / М.Н. Кондрашова // Вопр. Биол., Мед., Фарм. Химии. 2002. -№ 1.- С. 7-12.

79. Концентрационная инверсия антиоксидантного и прооксидантного действия |3-каротина в тканях in vivo / В.З Ланкин и др. // Бюлл. Эксп. Биол. и Мед. 1999.-Т. 128, № 9. - С. 314-316.

80. Косенко, Е.А. Янтарнокислый натрий радиопротектор / Е.А. Косенко, Ю.Г. Каминский / Янтарная кислота в медицине, пищевой промышленности, сельском хозяйстве: сб. науч. статей / Под ред. М.Н. Кондрашовой. -Пущино : ОНТИПНЦРАН, 1997. - С. 128-133.

81. Крыжановский, Г.Н. Введение в общую патофизиологию. М. : РГМУ, 2000.-71 с.

82. Крыжановский Г.Н. Дизрегуляционная патология / Г.Н. Крыжановский // Пат. Физиол. и Эксп. Тер. 2002. - №3. - С.2-19.

83. Кузьменко, Д.И. Оценка резерва липидов сыворотки крови для перекисного окисления в динамике окислительного стресса у крыс / Д.И. Кузьменко, Б.И. Лаптев // Вопр. мед. хим. 1999. - №1. - С. 47-52.

84. Кулинский, В.И. Активные формы кислорода и оксидативная модификация макромолекул: польза, вред и защита / В.И. Кулинский // Соросовский образовательный журнал. 1999. - № 1. - С. 2-7.

85. Куценюк, В.В. Фотодинамическая терапия злокачественных опухолей / В.В. Куценюк, Н.Ф. Гамалея // Онкология. 2003. - Т. 5, № 1. - С. 6972.

86. Лакин, Г.Ф. Биометрия. М. : Высшая школа, 1980.- 293 с.

87. Ланкин, В.З. Метаболизм липоперекисей в тканях млекопитающих / В.З. Ланкин // В кн.: Биохимия липидов и их роль в обмене веществ. -М. : Наука; 1981.-С. 75-95.

88. Ланкин, В.З. Свободнорадикальные процессы в норме и при патологических состояниях: Пособие для врачей / В.З. Ланкин, А.К. Тихазе, Ю.Н. Беленков. М. : РКНПК МЗ РФ. - 2001.- 78 с.

89. Ларионова, В.Б. Перспективы применения антиоксидантов в лечении онкологических больных / В.Б. Ларионова, С.П. Свиридова, Э.Г. Горожанская // Биоантиоксидант: Тез. докл. -М.: Наука, 1989. Т.2. - С. 35-42.

90. Ленинджер, А. Основы биохимии. М., 1985,- 380с.

91. Лифшиц, В.М. Медицинские лабораторные анализы. Справочник / В.М. Лифшиц, В.И. Сидельникова. М.: Триада-Х. - 2000.-312 с.

92. Лихтенштейн, А.В. Введение в проблемы биохимии и физиологии опухолевого роста / А.В. Лихтенштейн, Л.С. Бассалык // Элементы патологической физиологии и биохимии. М. МГУ. - 1992. -С. 113134.

93. Лужников Е.А. Клиническая токсикология. М: Медицина, 1999,- 416с.

94. Лукьянова, Л.Д. Биоэнергетическая гипоксия: понятие , механизмы и способы коррекции / Л.Д. Лукьянова // Бюлл. Эксп. Биол. и Мед. -1997.-Т. 124, №9.-С. 244-253.

95. Лукьянова, Л.Д. Новые подходы к созданию антигипоксантов метаболического действия / Л.Д. Лукьянова // Вестник РАМН. 1999. -№3. - С. 18-25

96. Лукьянова, Л.Д. Современные проблемы гипоксии / Л.Д. Лукьянова // Вестник РАМН. -2000.- № 9.- С. 3-12.

97. Лукьянова, Л.Д. Гипоксия при патологиях. Молекулярные механизмы и принципы коррекцию / Л.Д. Лукьянова // Перфторорганические соединения в биологии и медицине. Пущино, 2001. - С. 56-69.

98. Лукьянова, Л.Д. Митохондриальная дисфункция при гипоксии и кислородзависимая генная регуляция адаптационных процессов / Л.Д. Лукьянова // Научн. тр. I Съезда физиологов СНГ, Том 1,- Сочи, Дагомыс, 19-23 сент. 2005. С. 169.

99. Лю, Б.Н. Антиоксидантная система клетки и канцерогенез / Б.Н. Лю, М.Л. Ефимов //Усп. совр. биол. 1976. - Т. 82, № 2. - С. 236-251.

100. Маевский Е.И. Сукцинат аммония как средство коррекции ацидоза в условиях рабочей гипоксии / Е.И. Маевский и др. // Российский биомедицинский журнал Medline.ru. 2001. - Т. 2, ст.19. - С. 114.

101. Малахова, М,Я. Метод регистрации эндогенной интоксикации. Пособие для врачей. СПб: Изд. СПб мед. акад. последипл. образования. - 1995. - 35 с.

102. Манойлов, С.Е. О тканевом дыхании в митохондриях печени при опухолях у крыс / С.Е. Манойлов, В.И. Фирсова, Ю.С. Манойлов // Вопросы онкологии. 1972. - Т. 18, № 8. - С. 50-54.

103. Маянский, А.Н. Актуальные проблемы фагоцитоза / А.Н. Маянский // Моделирование и клиническая характеристика фагоцитарных реакций,- Горький, 1989.- С. 5-15.

104. Меерсон, Ф.З. Адаптация к стрессорным ситуациям и физическим нагрузкам / Ф.З. Меерсон, М.Г. Пшенникова. М. : Медицина. - 1988. -256 с.

105. Меерсон, Ф.З. Энергетические аспекты адаптации / Ф.З. Меерсон, В.Е. Каган. Л.: Медицина,- 1978,- 192с.

106. Мембраны субклеточных органелл как источник супероксидных радикалов при ишемии печени / JI.C. Варданян и др. // Бюл. Эксп. Биол. и Мед. 1990. - №6. - С. 550-552.

107. Меныцикова, Е.В. Антиоксиданты и ингибиторы радикальных окислительных процессов / Е.Б. Меныцикова, Н.К. Зенков // Усп. совр. биол. 1993. - Т. 113, № 4. - С. 442-453.

108. Метелица, Д.Н. Активация кислорода ферментными системами. М.: Наука, 1982. - с.

109. Механизмы адаптации гомеостатических систем при действии на организм субэкстремальных факторов (энергетический гомеостаз) / Под ред. JI.E. Панина. Новосибирск, 1980. - 96 с.

110. Мид, Дж. Свободнорадикальные механизмы повреждения липидов и их значение для клеточных мембран / Дж. Мид / В кн.: Свободные радикалы в биологии (пер. с англ.). М. : Мир. - 1979. -С. 68-87.

111. Митохондриальные болезни: современные концепции / Э.К. Рууге и др. // Активные формы кислорода, оксид азота, антиоксиданты и здоровье человека : сб. тр. 4-ой нац. научн.-практ. конф. с межд. уч. -Смоленск, 26-30 сентября 2005. С. 150-151.

112. Морозкина, Т.С. Энергетический обмен и питание при злокачественных новообразованиях / Под ред. B.C. Шапота. Мн. : Беларусь, 1989. - 191 е.- ISBN 5-338-00237-Х.

113. Моругова, Т.В. Влияние лекарственных средств на свободнорадикальное окисление / Т.В. Моругова, Д.Н. Лазарева // Эксп. и Клин. Фарм. 2000. - Т. 63, № 1. - С. 71-75.

114. Мохова, Е.Н. Дыхание митохондрий в тканевых препаратах / Е.Н. Мохова // В кн.: Регуляция энергетического обмена и физиологическое состояние организма. М. : Наука, 1978. - С. 67-72.

115. Нейфах, Е.А. Накопление перекисей липидов в органах животных -опухоленосителей in vivo / Е.А. Нейфах, В.Е. Каган // Биохимия, 1969. -Т. 34, № 4. С. 692-698.

116. О факторах, влияющих на регуляцию процессов биологического окисления в тканевых препаратах / Л.Д. Лукьянова и др. // В кн.: Регуляция энергетического обмена и физиологическое состояние организма. -М.: Наука, 1978. С. 90-101.

117. Оболенский, С.В. Лабораторная диагностика интоксикаций в практике интенсивной терапии. Уч. пособ. / С.В. Оболенский, М.Я. Малахова. -СПб.: Спб ИУВ, 1993,- 16 с.

118. Окислительные модификации белков сыворотки крови человека, метод ее определения / Е.Е. Дубинина и др. // Вопросы медицинской химии. 1995.-Т. 41, № 1,-С. 24-26.

119. Окислительная модификация белков: окисление триптофана и образование битирозина в очищенных белках с использованием системы Фентона / Е.Е. Дубинина и др. // Биохимия. 2002. - Т. 67, № 3,-С. 413-421.

120. Оковитый, С.В. Антигипоксанты. Лекция / С.В. Оковитый, А.В. Смирнов // Эксп. и Клин. Фарм. 2001.- Т. 64, № з. - С. 76-80.

121. Основы биохимии: В 3-х томах / А. Уайт и др.. М. : Мир, 1981. - Т. 1.- 534 с.

122. Панин, Л.Е. Энергетические аспекты адаптации. Л. : «Медицина». -1978.- 192 с.

123. Патологическая физиология. Учебник / Под ред. А.Д. Адо и др.. М.: Триада-Х, 2000. - 574с. -ISBN 5-8249-0023-Х.

124. Перекисное окисление липидов сыворотки крови больных раком молочной железы / Ф.К. Шарипов и др. // Клиническая лабораторная диагностика. -2003. -№ 5. -С. 13-15.

125. Песков, А.Б. Повышение эффективности фармакотерапии заболеваний сердечно-сосудистой системы с помощью композиции субстратов энергетического обмена / А.Б. Песков, Е.И. Маевский, M.JI. Учитель // Бюлл. Эксп. Биол. и Мед. 2005.- Т. 139, № в.- С. 635-637.

126. Плисс Г.Б. Онкологическая характеристика нового штамма лимфосаркомы крысы / Г.Б. Плисс // Бюлл. Эксп. Биол. и Мед. 1961. -№2.-С. 95-99.

127. Подопригорова, В.Г. Оксидативный стресс и язвенная болезнь. М.: Медицина, 2004. - 175 с. - ISBN 5-225-04278-3.

128. Поливода, Б.И. Повреждение клеточных мембран гидроперекисью линоленовой кислоты/Б.И. Поливода//Биофизика. 1986. - Т.31, №. 3. -С. 453-455.

129. Применение гипертермии и гипергликемии при лечении злокачественных опухолей / Н.Н. Александров, Н.Е. Савченко, С.З. Фрадкин, Э.А.Жаврид. М.: Медицина, 1980. - 256 с.

130. Реамберин: реальность и перспективы: Сборник научных статей. -СПб., 2002. 168 с. - ISBN 5-89720-050-5.

131. Регуляция энергетического обмена и физиологическое состояние организм / Под ред. М.Н. Кондрашовой. М.: «Наука», 1978.- 238 с.

132. Романов, B.C. Количественно качественная характеристика альтеративных изменений раков молочной железы при терморадиотерапии 7 B.C. Романов // Тез. докл 6-ой конференции молодых ученых Волго-Вятского региона. -1989.-С. 150-151.

133. Романцов, М.Г. Реамберин для онкологии: возможности привенения / М.Г. Романцов // Реамберин: реальность и перспективы : Сборник научных статей. СПб, 2002. - С. 136-138.

134. Ротенберг, Ю.С. О роли митохондрий в реализации действия токсических и фармакологических веществ / Ю.С. Ротенберг, Б.А. Курляндский // В кн.: Регуляция энергетического обмена и физиологическое состояние организма. М.: Наука, 1978. - С. 212-215.

135. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Ред. В.П.Фисенко и др.- М.: ЗАО «ИИА «Ремедиум». 2000. - е.- ISBN

136. Рэкер, Э. Биоэнергетические механизмы: новые взгляды. М. : Мир. -1979.-216 с.

137. Рябов, Г.А. Гипоксия критических состояний. М.: Медицина, 1988. -С. 27-29.

138. Рябов, К.П. К вопросу о функциональном состоянии митохондрий гепатоцитов крыс с саркомой-45 / К.П. Рябов, Т.С. Морозкина // Здравоохранение Белоруссии. 1972. - № 9. - С. 47-50.

139. Сверхмалые дозы доксорубицина: ингибирование опухолевого роста в эксперименте / JI.A. Островская и др. // Бюлл. Эксп. Биол. и Мед. -2002. № 4. - С. 52-54.

140. Свободнорадикальные реакции и рак / С. Чевари и др. // Вопросы медицинской химии. 1992. - Т. 38, № 5. - С. 4-5.

141. Свободные радикалы и болезни человека. Сб.тр. национальной научно-практической конференции с международным участием. Смоленск, 19-22 сентября, 1999.-208 с.

142. Свободные радикалы в живых системах / Ю.А. Владимиров и др. // Итоги науки и техники. Сер. «Биофизика». М.- 1991. - Т.29. - 250 с.

143. Свободно-радикальные механизмы иммунного повреждения опухолевых клеток.и роль антиоксидантных систем в их защите/ В.З Ланкин и др. //Биоантиоксиданты. М., 1989. - С.163 - 182.

144. Сергеев, А.В. Содержание ретинола, (3-каротина, аскорбиновой кислоты в плазме крови и функциональная активность лимфоцитов больных раком толстой кишки / А.В. Сергеев // Вопросы питания. -1984. -№3. С. 27-30.

145. Сидорик, Е.П. Биохемилюминесценция клеток при опухолевом процессе / Е.П. Сидорик, Е.А. Баглей, М.И. Данко / Отв. ред. В.Г. Пинчук. Киев: Наук, думка, 1989. - 220с. - ISBN 5-12-000772-4.

146. Скулачев, В.П. Энергетика биологических мембран / АН СССР, секция хим.- техн. и биол. наук. М.: Наука.- 1989.- 564 с.

147. Скулачев, В.П. Кислород в живой клетке: добро и зло / В.П. Скулачев // Соросовский образовательный журнал. 1996. - № 3. - С. 4-10.

148. Скулачев, В.П. Законы биоэнергетики / В.П. Скулачев // Соросовский образовательный журнал. 1997. - № 1. - С. 9-14.

149. Скулачев, В.П. Альтернативные функции клеточного дыхания / В.П. Скулачев // Соросовский образовательный журнал. 1998. - № 8. - С. 27.

150. Соколовский, В.В.' Тиолдисульфидная система в биохимическом механизме реакции организма на экстремальные воздействия / В.В. Соколовский // Вестник Санкт-Петербургской государственноймедицинской академии им. И.И. Мечникова. 2004. - №4 (5). - С. 97100.

151. Солопаева, И.М. Количественная морфология биоктатов органов пищеварения: метод, реком. / И.М. Солопаева, С.Б. Стефанов, Т.Ф. Жданова. Горький. - 1982. - 16 с.

152. Способ диагностики эндогенной интоксикации / С.Г. Галактионов и др. // Лабораторное дело. 1988. - № 9. - С. 22-24.

153. Сравнительный анализ влияния антибиотиков на свободно-радикальное окисление in vitro и in vivo / Н.Ф. Абдрашитова и др. // Бюлл. Эксп. Биол. и Мед. 1998. - Т. 125, №3. - С. 297-299.

154. Суханова, Г.А. Биохимия клетки / Г.А. Суханова, В.Ю. Серебров. -Томск. : «Чародей». 2000. - 184 с. - ISBN 5-7515-0203-0

155. Таги-Заде, С.Б. Злокачественная опухоль как гипогликемический фактор в организме / С.Б. Таги-Заде // Труды НИИ рентгенологии, радиологии и онкологии. Баку, 1972. - Т. 9. - С. 264-267.

156. Тараховский, A.M. Активность супероксиддисмутазы в тканях опухоли и печени животных-опухоленосителей / A.M. Тараховский, Г.В. Глинский, В.А. Шляховенко // Укр. Биохим. Журнал. 1980. - Т. 52, № 5. - С. 628-632.

157. Тихонов, А.Н. Молекулярные преобразователи энергии в живой клетке / А.Н. Тихонов // Соросовский образовательный журнал. 1997. - № 7. -С. 10-17.

158. Трапезников, Н.Н. Онкология: учебник / Н.Н. Трапезников, А.А. Шайн. М.: Медицина, 1992. - 397 е.- ISBN 5-225-00852-6.

159. Трещалина, Е.М. Противоопухолевая активность веществ природного происхождения. Рыбинск: Изд-во «Практическая медицина», 2005. -270с. - ISBN 5-98811-010-Х.

160. Трубников, Г.А. Место антиоксидантной терапии в системе паллиативной помощи больным раком легкого / Г.А. Трубников, Т.А. Левина, Ю.И. Журавлев // Паллиативная медицина и реабилитация. -1997.-№2.-С. 43.

161. Труханова, Л.С. Влияние аскорбиновой кислоты на индукцию сарком матки у мышей / Л.С. Труханова // Вопросы онкологии. 1987. - Т. 33, № 11. - С. 53-57.

162. Тургунова, Л.Г. Состояние окислительной модификации белков при острых и хронических лейкозах / Л.Г. Тургунова. Электрон, ресурс. - Режим доступа: http://www.rusnaiLka.com/TIP/All/Medicine/33.html

163. Туровецкий, В.Б. Нарушение функциональных и конформационно-динамических свойств митохондрий печени крыс при развитии лимфосаркомы Плисса / В.Б. Туровецкий, Э.А. Авакян // Известия АН СССР (серия Биология). -1981. № 6. - С. 930-933.

164. Федин, А.И. Оксидантный стресс и применение антиоксидантов в неврологии / А,И. Федин // Атмосфера. Нервные болезни. 2002. - № 1. -С. 15-18.

165. Федунь, A.M. Роль инфракрасной спектроскопии сыворотки крови в комплексной диагностике рака легкого / A.M. Федунь, М.В. Кукош, А.С. Гордецов // Нижегородский Медицинский журнал. Н.Н.: Медицина. -2002. -№1.- С. 60-65.

166. Флеров, М.А. Перекисное окисление белков плазмы крови больных сахарным диабетом типа 1 / М.А. Флеров, Н.Н. Смирнова, З.В. Светлова // Проблемы эндокринологии. 2003. - Т. 49, № 4. - С. 3-4.

167. Харьковская, Н.А. Экспериментальное изучение влияния аскорбиновой кислоты на спонтанный бластомогенез / Н.А. Харьковская, Р.А. Фарон, С.А. Хрусталев. деп. В ВИНИТИ 26.01.87. № 570-В87.

168. Хитозан per os. Пер.с англ. / Под ред Риккардо А.А. Муццарелли. -Н.Новгород.: изд-во «Вектор-ТиС», 2001. 372 с. - ISBN 88-86889-038; ISBN 5-93126-025-0.

169. Ходосова, И.А. Ферменты опухолевых клеток / Отв. ред. В.Я. Фель. -Л.: Наука, 1988.- 176 с.

170. Хохлов, А.П. Модуляция синтетическими антиоксилантами стимулиндуцированного образования цАМФ / А.П. Хохлов, К.Н. Ярыгин, А.Г. Шитин // Бюлл. Эксп. Биол.и Мед. 1986. - № 8. - С. 160162.

171. Цвиренко, С.В. Некоторые механизмы регуляции регенерации тканей при экстремальных состояниях / С.В. Цвиренко и др. // Механизмы аварийного регулирования и адаптации при действии на организм экстремальных факторов. Свердловск, 1984. - С. 12-20.

172. Шабалин, В.Н. Аутогенные ритмы и самоорганизация БЖ / В.Н. Шабалин, С.Н. Шатохина // Бюлл. эксп. биол. и мед. 1996. - № 10. - С. 364-371.

173. Шабалин, В.Н. Принципы аутоволновой самоорганизации БЖ / В.Н. Шабалин, С.Н. Шатохина // Вестник РАМН, 2000. № 3. - С. 45-49.

174. Шабалин, В.Н. Морфология БЖ в клинической лабораторной диагностике / В.Н. Шабалин, С.Н. Шатохина // Клин. лаб. Диагностика. -2002.-№3,-С. 25-32.

175. Шапот, B.C. Биохимические аспекты опухолевого роста. М.: Медицина, 1975.- 304 с.

176. Шелепов, В.П. Некоторые эндокринные нарушения, вызываемые опухолью в организме / В.П. Шелепов, С.Я. Давыдова, B.C. Шапот // Вопросы медицинской химии. 1980. - № 1. - С. 105-110.

177. Щербаков, В.И. Реактивные изменения стромы печени при введении зимозана / В.И. Щербаков, Д.Н. Маянский, Г.В. Правоторов // Бюлл. эксп. биол. мед., 1981. №12. - С. 731 - 734.

178. Экспериментальная оценка противоопухолевых препаратов в СССР и

179. США / Г.Аттаси и др. Под ред. З.П.Софьиной (СССР), А.Голдина (США) и др. -М.: Медицина, 1980. -295 с.

180. Элементы патологической физиологии и биохимии: Учеб. Пособие // Под ред. И.П.Ашмарина,- М.: Изд-во МГУ, 1992,- 192с,- ISBN 5-21102339-0.

181. Янтарная кислота в медицине, пищевой промышленности, сельском хозяйстве: сб. науч. статей / Под ред. М.Н. Кондрашовой Пущино: ОНТИ ПНЦ РАН, 1997,- 300с. - ISBN 5-201-14360-1.

182. Ярмоненко, С.П. Кислородный эффект и лучевая терапия опухолей / С.П. Ярмоненко, А.А. Вайнсон, Э. Магдон. М. : Медицина, 1980. -248 с.

183. Пат. 2117289 Ru Способ диагностики злокачественных новообразований / Гордецов, А.С. № 96116510 / 14 ; заявлено 08.12.1996 ; опубликовано 08.10.1998.

184. Abou-Seif М.А.М., El-Khawaga О. Oxidative fragmentation of proteins by a natural antioxidant / Abstract number: B2-007P Электронный ресурс. -Режим доступа: http://www.blackwellpublishing.comfebsabstract2005/default.asp.

185. Adelman, R. Oxidative damage to DNA: Relation to species metabolic rate and fife span / R. Adelman, R.L. Saul, B.N. Ames // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1988. - Vol. 85. -P. 2706-2708.

186. Advanced oxidation protein products as a novel marker of oxidative stress in uraemia / V. Witko-Sarsat et. al. // Kidney Int. 1996. - № 49. - P. 13041313.

187. Advanced oxidation protein products as novel mediators of inflammation and monocyte activation in chronic renal failure / Witko-Sarsat et. al. // J. Immunol. 1998. - № 161. - P. 2524-2532.

188. Aisenberg, A.C. The glycolysis and respiration of tumors // Acad. Press. -1961.-V. 5.-P. 1036 1074.

189. Ames, B.N. Oxidants, antioxidants, and the degenerrative diseases of aging / B.N. Ames, M.K. Sbigenaga, T.M. Hagen // Proc. Natl. Acad. Scin. USA. -1993. P. 7951-7922;

190. Banks, B. Reassessment of the role of ATP in vivo / B. Banks, C. Vernon // J. Theoret. Biol. 1970,- № 29.- P. 301-306.

191. Bemheim, F. Biochemical implication of pro-oxidants and antioxidants // Radiation Res. 1963. - Vol. 3. - P. 17-32.

192. Bondy, S.C. Contribution of hepatic cytochrome P 450 systems to the generation of reactive oxygen species / S.C. Bondy, S. Naderi // Biochem. Pharmacol. 1994. - Vol. 48. - P. 155-159.

193. Bover, B. Hormonal effects of nonendocrine tumors / B. Bover, G. Gordan // Ann. Rev. Med. 1965. - vol. 16. - P. 83-118.

194. Bowry, V.W. Vitamin E in human low-density lipoprotein. When and how antioxidant becomes a pro-oxidant / V.W. Bowry, K.U. Ingold, R. Stacker // Biochem. J. 1992. - Vol. 288.- P. 341-344.

195. Bowry, V.W. Extraordinary kinetic behavior of the a-tocopheroxyl (vitamin E) radical / V.W. Bowry, K.U. Ingold // J. Organization Chem. 1995. -Vol. 60. - P. 5456-5467.

196. Brain chemiluminescence and oxidative stress in hyperthyroid rats / A.M. Adamo, S.F. Llesuy, J.M. Pasquini, A. Boveris // Biochem. J. 1989. - Vol. 263. - P. 273-277.

197. Copper-ion-dependent damage to the bases in DNA in the presence of hydrogen peroxide / O.I. Aruoma et al. // Biochem. J. 1991. - Vol. 273. -P. 601-604.

198. Capel, I.D. Superoxide dismutase activity ceruloplasmin activity and lipoperoxide levels in tumour and host tissues of mice bearing the Lewis lung carcinoma / I.D. Capel, A.C. Thornley // Eur. J.Cancer Clin. Oncol. -1982. Vol. 18, №5. - P. 507-513.

199. Cayanis, E. Effect of tumors with different growth rates on enzymes in host liver / E. Cayanis, O. Greengard // Enzyme. 1983. - Vol. 29, № 4. - P. 217222.

200. Chance, B.C. The interaction of energy and electron transfer reactions in mitochondria/B.C. Chance, G. Hollunger// J. Biol. Chem. 1961. - Vol. 236, № 5. - P.1534-1584.

201. Cochrane, C.G. Mechanism of oxidant injury of cells // Molecular Aspects of Medicine. -1991. V.12. -P.137-147.

202. Cornwell, D.G. Fatty acid paradoxes in the control of cell proliferation: Prostaglandins, lipid peroxides, and cooxidation reactions / D.G. Cornwell, N. Morisaki // Free Radicals in Biology. 1984. - Vol. 6. - P. 96-149.

203. Davies K.J.A. Protein damage and degradation by oxygen radicals // J. boil. Chem., 1987. Vol. 262, № 20. - P. 9895-9901.

204. Determination of carbonyl content in oxidatively modified proteins / R.L. Levine et al. // Methods Enzymology. 1990. - Vol. 186,- P. 464-478.

205. Eaton, J.W. Catalases and peroxidases and glutathione and hydrogen peroxide: Mysteries of the bestiary // J. Lab. and Clin. Med, 1991. Vol. 118. - P. 3-4.

206. Esterbauer, H. Cytotoxicity and genotoxicity of lipid-oxidation products.// Am.J.Clin. Nutr. -1993. Vol. 57. - P.779-786.

207. Fletcher, D.L. Measurement of fluorescent lipid peroxidation products in biological system and tissues / D.L. Fletcher, C.J. Dillared, A.Y. Tappel // Analyt. Biochem. -1973. Vol. 52. - P.497-499.

208. Formation of free radicals and nitric oxide derivative of hemoglobin in rats during shock syndrome / U. Westenberger et al. // Free Radical Res Comimm. 1990.-№ 11.-P. 167-178.

209. Gardner, P.R. Superoxide sensitivity of Escherichia coli 6-phosphogluconate dehydratase / P.R. Gardner, I. Fridovich // J. Biol. Chem. 1991. - 266. - P. 1478-1483.

210. Glutathione peroxidase, superoxide dismutase, and catalase inactivation by peroxides and oxygen derived free radicals / E. Pigeolet et al. // Mech. Ageing Develop. 1990. - Vol. 51. - P. 283-297.

211. Halliwell, B. Lipid peroxidation: its mechanism, measurement, and significance / B. Halliwell, S. Cbirico // Am. J. Clin. Nutr. -1993. Vol. 57. -P. 715-725.

212. Hunt, J.V. Hydroxyl radical production and autooxidative glycosylation / J.V. Hunt, R.T. Dean, S.P. Wolff//Biochem. J. 1988. - Vol. 256. - P. 205212.

213. Imlay, J.A. DNA damage and oxygen radical toxicity / J.A. Imlay, S. Linn // Science . 1988. - Vol. 240. - P. 1302-1309.

214. Jones, O.T.G. Mechanisms of superoxide formation by neutrophils and other cell types / O.T.G. Jones, J.T. Hancock, S.A. Jones // Biol. Chem. / Hoppe-Seyler. 1992/ - Vol. 373. - P. 737.

215. Kalousova, M. Advanced Glycation End-Products and Advanced oxidation protein products in patients with diabetes mellitus / M. Kalousova, J. Skrha, T. Zima // Physiol. Res. 2002. - Vol. 51. - P. 597-604.

216. Kamata, T. Studies on the isomer of succinic acid / T. Kamata, T. Suga, T. Нага //Jap. J. Vet. Sci. 1970. - Vol. 32, № 4.- P. 169-175.

217. Know, W.E. The enzymic pattern of neoplastic tissue // Adv. Cancel Res. -1967.-Vol. 10.-P. 117-161.

218. Kramer, К. Antioxidanzien in der Onkologie // Onkologie. -1994. №3. - P. 76-83.

219. Kuppusamy, P. Characterization of free radical generation by xanthine oxidase. Evidence for hydroxyl radical generation / P. Kuppusamy, J.L. Zweier // J. Biol. Chem. 1989. - Vol. 264,- P. 9880-9884.

220. Lai, G. Contribution of glutathione and glutathione-dependent enzymes in the reversal of adriamycion resistance in colon carcinoma cell lines. / G. Lai., I.A. Moscow, M.G. Alvarez // Int. J. Cancer. 1991. - Vol. 49. - P. 588-695.

221. Levrat, C. Tumour necrosis factor induces activation of mitochondrial succinate dehydrogenase / C. Levrat, J.W. Larrick, S.C. Wright // Life Sci. -1991.- Vol. 49.-P. 1731-1737.

222. Marx, G. Site-specific modification of albumin by free radicals. Reaction with copper (11) and ascorbate / G. Marx, M. Chevion // Biochem J. 1986. -Vol. 236.-P. 397-400.

223. Naqui, A. Reactive oxygen intermediates in biochemistry / A. Naqui, B. Chance // Ann. Rev. Biochem. 1986. - Vol. 55. - P. 137-166.

224. Norman, A. Working atlas of infrared spectroscopi. Boston. - 1978. -73 p.

225. Oxidative inactivation of enzymes: Implication in protein turnover and aging, in Cellular Regulation and Malignant Growth (S. Ebashi, ed.) / C.N. Oliver et al. // Tokyo: Japan Science Society Press. 1985. - P. 320-331.

226. Oxidative stress in preterm neonates at birth and on the seventh day of life / G. Buoncore et al. // Pediatric Research. 2002. - Vol. 52. - P. 46-49.

227. Pass, H.I. Photodynamic therapy in oncology: mechanisms and clinical use // J. Natl. Cancer Inst. 1993. - Vol. 85, № 6. - P. 443-456.

228. Phagocytes, 02 reduction, and hydroxyl radical / M.S. Cohen et al. // Revs Infect. Dis. 1988. - Vol. 10. - P. 1088-1096.

229. Photodynamic diagnosis of breast tumors after oral application of aminolaevulinic acid / D.P. Ladner et al. // Br. J. Cancer, 2001. Vol. 84. -P. 33-37.

230. Polydock, M.E. Inhibiting effect of dehydroascorbic acid on cell division in ascites tumors in mice / M.E. Polydock, D.R.J. Rice, L. Aleandri // Exp.Cell. Biol. 1982. - Vol. 50, №1. - P. 34-38.

231. Rapid accumultaion of genome rearrangements in liver but not in brain of old mice / M.E.T. Dolle et al. // Nature Genetics, 1997. Vol.17. - P. 431434.

232. Rashba-Step, J. ESR studies on the production of reactive oxygen intermediates by rat liver microsomes in the presence of NADPH or NADH / J. Rashba-Step, N.J. Turro, A.I. Cederbaum // Arch. Biochem. and Biophys. 1993. - Vol. 300. - P. 401-408.

233. Romasarma, T.V. Generation of H202 in biomembranes // Biochim. et biophys. acta. 1982. - Vol. 694, № 1. - P. 69-93.

234. Sakagami, H. Comparative study of the antitumor action between sodium 5,6-bensilidene-L-ascorbate and sodium ascorbate (minireview) / H. Sakagami, K. Satoh, M. Kochi // Anticancer Reasearch. 1997.- Vol. 17, № 6d.-P. 4451-4452.

235. Shacter, E. Quantification and significance of protein oxidation in biological samples // Drug metabolism reviews. 2000. - Vol. 32(3&4). - P. 307-326.

236. Shapot, V.S. On the multiform relationships between the tumor and host // Adv. Cancer Res. 1979. - Vol. 30. - P. 89-150

237. Shingu, M. Влияние аскорбиновой кислоты на мышей с асцидной опухолью Эрлиха / М. Shingu, Т. Sumi,Y. Araki // J. Kurume Med. Assoc. 1975. - Vol. 38, № 10. - P. 1009-1013.

238. Silverstein, M. Hypoglycemia associated with neoplasma / M. Silverstein, K. Wakin, R. Bahn // Am. J. Med. 1964. - Vol. 64. - P. 415-423.

239. Sinha, B.K. Free radicals and anticancer drug resistance oxygen free radicals in the mechanisms of drug cytotoxicity and resistance by certain tumours / B.K. Sinha, E.G. Mimnough // Free Radical Biol, and Med. -1990.-Vol. 8. P.567-581.

240. Slater, T. Concluding remarks // Am. J. Clin. Nutr. 1991. - Vol. 53, № 1. -P. 394-396.

241. Stadtman, E.R. Oxidation of proteins by mixed-function oxidation systems: Implication in proteinturnover, ageing and neutrophil function // Trends Biochem. Sci. 1986. - №11.-P. 11-12.

242. Stadtman, E.R. Covalent modification reactions are marking steps in protein turnover// Biochemistry/ 1990a. - № 29. - P. 6323-6331.

243. Stadtman, E. R. Metal ion-catalyzed oxidation of proteins: Biochemical mechanism and biological consequences // Free Radical Biol. Med. 1990b. -№ 9. -P. 315-325.

244. Stadtman, E.R. Metal-catalyzed oxidation of proteins: Physiological consequences / E.R. Stadtman, C.N. Oliver // J. Biol. Chem. 1991. - Vol. 266.-P. 2005-2008.

245. Stadtman, E.R. Oxidation of free amino acids and amino acid residues in proteins by radiolysis and by metal-catalyzed reactions // Annu. Rev. Biochem. 1993. - № 62. - P. 797-821.

246. Stadtman, E.R. Role of oxidized amino acids in protein breakdown and stability // Methods in Enzymol. 1995. - № 258. - P. 379-393.

247. Tappel, A.L. Measurement of and protection from in vivo lipid peroxidation // Free Radicals in Biol. 1980. - Vol. 4. - P. 1-47.

248. The reaction of peroxynitrite with tert-butyl hyroperoxide produces singlet molecular oxygen / P. Dimascio et al. // Biol. Chem. 1997. - Vol. 378. -P. 1071-1074.

249. The role of hemoglobin in generating oxyradicals / J.M. Rifkind et al. // Oxygen Radicals in Biology and Medicine.- N.Y.; L., 1988.- P. 157-162.

250. Torrielli, M.V. Free radicals in inflammatory disease / M.V. Torrielli, M.U. Dianzani // Free Radicals in molecular Biology, Aging and Diesease. N.Y.: Raven Press, 1984. - P.355-379.

251. Total hydroperoxide and advanced oxidation protein products in preterm hypoxic babies / G. Buoncore et al. // Pediatr. Res. 2000. - 47. - P. 221224.

252. Trenfield, K. Masters C. Patterns of synthesis and degradation of lactate dehydrogenase during the cell cycle of Burlcitt's lymphoma cells // J. Biochem. 1980. - Vol. 11, №1. - P. 55-67.

253. Upadrashta, S.M. Chitosan as tablet binder / S.M. Upadrashta, P.R. Katikaneni, N.O. Nuessle // Drug. Devel. Ind. Pharm. 1992. - Vol. 18,- P. 1701-1708.

254. Use of M4PO and oxygen-17 in the study on hydroxyl radical generation in the hypoxanthine-xanthine oxidase reaction / H. Mori H. et al. // Biochem. and Mol.Biol.Int. 1994. - Vol. 32. - P. 523-529.

255. Weber, G. The molecular correlation concept of neoplasia /G. Weber, M.A. Lea//Adv. EnrymeRegul. 1966. -Vol. 4. - P. 115-145.

256. Weber, G. Enryme-pattern directed chemotherapy and cell proliferation rate // Meeting of the Europ. Study group for cell proliferation. Budapest. -1983.-P.46.

257. Wendel, A. Enzymes acting against reactive oxygen // Enzymes: Tools and Targets. Basel: Karger, 1988. - P. 161-167.

258. Winterboum, C.C. Free radical reactions of the blood // Chem. N. Z. 1989. -Vol. 53.-P. 10-11.

259. Witz, G. Biological interaction of a, (3- unsaturated aldehydes // Free Radic. Biol. Med. 1989. - Vol. 7. - P. 333-349.

260. Wolff, S.P. Fragmentation of proteins by free radicals and its effect on their susceptibility to enzymic hydrolysis / S.P. Wolff, R.T. Dean // Biochem. J. -1986.-№234.-P. 399-403.

261. Yu, B.P. Cellular defenses against damage from reactive oxygen species //

262. Physiol. Revs. 1994. - Vol.74. - P. 139-162.

Информация о работе

Московцева, Ольга Михайловна
кандидата биологических наук
Нижний Новгород, 2006
ВАК 03.00.00

Диссертация

Влияние янтарной кислоты и ее производных на состояние свободнорадикальных процессов экспериментальных животных - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы