Влияние инфракрасного низкоинтенсивного лазерного излучения на соматические ткани животных при ГБО-индуцированном окислительном стрессе

Пономарева, Марианна Дмитриевна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Влияние инфракрасного низкоинтенсивного лазерного излучения на соматические ткани животных при ГБО-индуцированном окислительном стрессе
ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Влияние инфракрасного низкоинтенсивного лазерного излучения на соматические ткани животных при ГБО-индуцированном окислительном стрессе"

На правах рукописи

Пономарева Марианна Дмитриевна

ВЛИЯНИЕ ИНФРАКРАСНОГО НИЗКОИНТЕНСИВНОГО ЛАЗЕРНОГО ИЗЛУЧЕНИЯ НА СОМАТИЧЕСКИЕ ТКАНИ ЖИВОТНЫХ ПРИ ГБО-ИНДУЦИРОВАННОМ ОКИСЛИТЕЛЬНОМ СТРЕССЕ

03.00.04 - биохимия 03.00.15 - генетика

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Ростов-на-Дону 2005

Диссертация выполнена в НИИ Биологии ГОУ ВПО «Ростовский государственный университет»

Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор

Е.П. ГУСЬКОВ

кандидат биологических наук, доцент Н.П. МИЛЮТИНА

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор

В.Г. МИТРОФАНОВ доктор биологических наук, профессор A.M. МЕНДЖЕРИЦКИЙ

Ведущая организация: Ростовский государственный

медицинский университет (г. Ростов-на-Дону)

Защита диссертации состоится » l^f-O^í^l 2005 г. в $ часов на заседании диссертационного совета по биологическим наукам Д 212.208.07 при Ростовском государственном университете (344006, г. Ростов-на-Дону, ул. Б.Садовая, 105, РГУ, ауд. JjQ Ь ).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Ростовского государственного университета по адресу: 344006, г. Ростов-на-Дону, ул. Пушкинская, 148.

Автореферат разослан « 2005 г.

Ученый секретарь диссертационного совета,

д.б.н. В.В. Бабенко

ЬЪОЪ

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Механизмы действия низкоинтенсивного гелий-неонового лазера (ГНЛ) на организм, биологические эффекты и его терапевтическая эффективность изучены достаточно полно (Кати, 1990; Корочкин, Бабенко, 1990; Владимиров, 1994, 2004; Клебанов и др., 2003). В последнее время получили широкое распространение полупроводниковые лазерные приборы, излучающие в ближнем инфракрасном диапазоне, и показано, что при использовании инфракрасных (ИК) лазеров с большой импульсной мощностью лечебный эффект зачастую значительно лучше, чем после воздействия красной области спектра, в том числе и ГНЛ. Эффективность ИК лазерной терапии при различных заболеваниях обоснована (Зубкова, 1995; Кару, 2000; Загускина, 2003; Васильев и др., 2003; Микусев и др., 2003). Вместе с тем, многие аспекты, касающиеся механизмов биологического действия инфракрасного низкоинтенсивного лазерного излучения (ИНИЛИ), остаются неясными. В частности, практически не исследована проблема механизма формирования стойких, длительно сохраняющихся структурно-функциональных изменений в органах и тканях после проведенного курса низкоинтенсивной ИК лазеротерапии.

Электромагнитная природа ИНИЛИ предполагает возможность его взаимодействия с одной из важнейших регуляторных систем организма - с системой свободнорадикальных процессов (СРП). Исследованию роли свободных радикалов в патогенезе многих заболеваний в последние годы уделяется особое внимание (Чичук и др., 1999; Волотовская, 2001; Клебанов, 2002). Окислительное повреждение ДНК является наиболее распространенным типом повреждения аэробных клеток и играет важную роль в патологических процессах, таких как мутагенез, канцерогенез, кластогенез, апоптоз и старение (Jaruga, 1996). Проблема окислительного стресса (ОС) является высокоактуальной в связи с тем, что активные формы кислорода (АФК) занимают ведущее место в патогенезе радиационного поражения, воспалительных реакций, бронхолегочных, сердечно-сосудистых и генетически обусловленных заболеваний (Halliwell, 1984; Chiu, Liu, 1997; Bauer, 1999; Toyokuni, 1999).

АФК играют ведущую роль в генезе токсического эффекта повышенного давления кислорода (Мс Cord, Fridovich, 1988; Halliwell, Gutteridge, 1990; Kohen, Nyska, 2002), использованного нами в работе в качестве модели ОС. Выбор этой модели стрессорного воздействия связан с необходимостью изучения механизмов ОС и адаптации к нему организма как наиболее сложной

проблемы биологии и медицины. Особого внимания заслуживает, в связи с антиоксидантным и мембраностабилизирующим действием, ИНИЛИ, применяемое для коррекции окислительного стресса, вызванного ГБО.

В общетеоретическом плане и в практическом отношении выяснение молекулярных механизмов действия ИНИЛИ, его участия в регуляции важнейших процессов жизнедеятельности клеток может оказаться ключом к решению одной из актуальных проблем, связанной с расширением сферы использования низкоэнергетических лазеров. Все это определяет необходимость углубленного изучения эффективности ИНИЛИ, его влияния на структуру клеточных мембран при ОС с целью применения лазерного излучения в лечебной и профилактической медицине.

Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы явилось изучение роли ИНИЛИ в регуляции свободнорадикальных процессов в тканях и мембранах эритроцитов крыс, их структурно-функционального состояния, а также его влияние на генетический аппарат в норме и после ГБО-индуцированного окислительного стресса.

В соответствии с целью были поставлены следующие задачи исследования:

1. Исследовать влияние ИНИЛИ на интенсивность хемилюминесценции (ХЛ) и процессов ПОЛ, активность антиоксидантных ферментов, структурное состояние мембран эритроцитов, показатели эндогенной интоксикации и мутационные процессы в различных тканях интактных животных.

2. Изучить влияние ИНИЛИ на индукцию свободнорадикальных процессов, оцениваемых по интенсивности Н202-индуцированной люминолзависимой хемилюминесценции, содержание молекулярных продуктов ПОЛ и активность компонентов антиоксидантной системы - супероксиддисмутазы, каталазы, церулоплазмина в различных тканях животных, предварительно подвергнутых ГБО-индуцированному окислительному стрессу.

3. Исследовать действие ИНИЛИ на стабильность и структурное состояние мембран эритроцитов животных (с помощью флуоресцентного зонда пирена), предварительно подвергнутых ГБО-индуцированному окислительному стрессу.

4. Изучить влияние ИНИЛИ на показатели эндогенной интоксикации в крови крыс по уровню фракций молекул средней массы, мочевины и лейкоцитарному индексу интоксикации после ГБО-индуцированного окислительного стресса.

5. Оценить генотоксичность ИНИЛИ по уровню SOS-ответа Е. coli С 600 и уровень аберраций хромосом в тканях животных, подвергнутых ГБО-индуцированному окислительному стрессу.

Научная новизна результатов исследования. Впервые проведено комплексное генетико-биохимическое исследование влияния ИНИЛИ на различные ткани животных после воздействия стресса, индуцированного ГБО. Впервые показано, что ИНИЛИ снижает интенсивность СРП в различных тканях животных в норме и в условиях окислительного стресса и может выполнять функции «антиоксиданта» физической природы. Показано, что ИНИЛИ способствует нормализации структурного состояния эритроцитарных мембран животных, нарушенного окислительным стрессом, и обладает выраженным мембраностабилизирующим и мембранокорригирующим действием. Установлено, что ИНИЛИ способствует купированию синдрома эндогенной интоксикации, вызванного окислительным стрессом. Обоснована возможность применения ИНИЛИ для реабилитации после окислительного стресса.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Низкоинтенсивное инфракрасное лазерное излучение может функционировать как «антиоксидант» физической природы, на что указывает нормализация параметров ХЛ в виде снижения величины быстрой вспышки и светосуммы в тканях животных в условиях окислительного стресса.

2. ИНИЛИ способствует восстановлению динамического равновесия в системе ПОЛ <-> АО, и его сдвигу в сторону повышения АО потенциала, что приводит к снижению уровня ПОЛ ниже нормы в постгипероксический период у животных.

3. Проведение с помощью курса ИНИЛИ реабилитации животных в постгипероксический период способствует нормализации структурного состояния мембран эритроцитов и умеренному повышению гидрофобности их липидного бислоя.

4. Проведение курса ИНИЛИ животным, перенесшим ГБО-индуцированный окислительный стресс, способствует более эффективному купированию синдрома эндогенной интоксикации по сравнению с группой крыс, не получавших реабилитацию в последействии.

5. ИНИЛИ не обладает кластогенным и генотоксичным эффектами и снижает уровень аберраций хромосом в соматических тканях животных, индуцируемых окислительным стрессом.

Теоретическая и практическая значимость работы. В

общетеоретическом плане выполненная работа расширяет существующие представления о влиянии ИНИЛИ на антиоксидантный статус тканей животных в условиях нормально функционирующего организма и в условиях ОС. Изученные молекулярные механизмы действия и биологические свойства ИНИЛИ вносят существенный вклад в понимание процессов регуляции метаболизма в организме в норме и при стрессовых состояниях. В работе представлены данные о способности ИНИЛИ участвовать в регуляции СРП, стабилизировать структурное состояние мембран, купировать СЭИ и снижать спонтанный и мутационный процесс.

Данные представляют существенный интерес для разработки реабилитационных мероприятий в практической медицине. Полученные результаты являются существенным вкладом в решение частных проблем клеточной биологии и открывают новые перспективы их практического применения в физиотерапии и реабилитологии. Полученные в работе новые экспериментальные данные могут быть использованы в курсах лекций «Биофизика», «Свободные радикалы в живых системах», «Мутагены окружающей среды».

Апробация работы. Материалы диссертации были доложены на научных сессиях биолого-почвенного факультета РГУ (Ростов-на-Дону, 2002, 2003), на заседании Ростовского-на-Дону общества ВОГиС (Ростов-на-Дону, 2004), на третьем Всероссийском съезде ВОГиС (Москва, 2004).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 4 работы. Личный вклад автора в опубликованном материале - 62,5%, объем - 0,52 п.л.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 191 страницах печатного текста, иллюстрирована 13 таблицами, 26 рисунками. Работа состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов исследования, обсуждения результатов исследования, выводов, списка литературы. Список литературы включает 387 источников, из них 153 - зарубежных.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Эксперименты проводили на белых беспородных крысах самцах ИдИш поносив массой 180-200г.

Все подопытные животные были разделены на 5 групп: 1 группа -контроль, интактные животные, содержавшиеся в стандартных условиях вивария; 2 группа - крысы, получавшие курс ИНИЛИ в течение 5 суток (по

одному сеансу ежедневно) и декапитированные через сутки после окончания курса; 3 группа - крысы, обработанные ГБО в режиме 0,5 МПа в течение 1 часа и декапитированные сразу после окончания воздействия. Подопытных животных помещали в барокамеру объемом 25 литров, снабженную системой регенерации (поглотитель углекислого газа - концентрированный раствор щелочи). Компрессия проводилась в течение 5 мин со скоростью 0,1 МПа Ог в минуту, изопрессия - 0,5 МПа, 1ч и декомпрессия в течение 15 минут; 4 группа - крысы, подвергнутые действию ГБО (0,5 МПа, 1 ч), но декапитированные на 6-е сутки после воздействия; 5 группа - крысы, подвергнутые действию ГБО (0,5 МПа, 1 ч) и получавшие в течение последующих 5 суток курс ИНИЛИ (по методике 2 группы) и декапитированные через сутки после реабилитации, т.е. на 6-е сутки после ГБО.

Для проведения ИНИЛИ использовали аппарат лазерной терапии «Мустанг БИО-021» с излучающей матрицей (10 лазерных диодов, длина волны 0,89 мкм, длительность импульса 100 не, суммарная мощность в импульсе до 60 Вт). Облучение проводили контактной стабильной методикой на область проекции сердца, крупных сосудов и печени (продолжительность воздействия - 4 мин, частота импульсов 3000 Гц, доза 0,4 Дж/см2).

После декапитации контрольных и подопытных животных, кровь собирали в гепаринизированные пробирки для получения плазмы и эритроцитов, извлекали мозг, печень и гомогенизировали их для биохимических и генетических исследований. Эритроцитарную массу трижды отмывали охлажденным физиологическим раствором. Лимфоциты и нейтрофилы выделяли из цельной крови в градиенте плотности фиколл-верографина методом Boyum (1968). Исследуемые показатели определяли в эритроцитах, плазме крови, гомогенатах и супернатантах 10%-ных гомогенатов тканей печени и мозга (вес/объем), приготовленных на физиологическом растворе и обработанных тритоном Х-100 (конечная концентрация 0,1%).

Комплексная оценка состояния крыс в контрольной и исследуемых группах включала биохимические, биофизические и генетические методы исследования. Содержание первичных продуктов ПОЛ - ДК определяли методом И.Г. Стальной (1977), вторичных (МДА) - методом И.Г. Стальной, Т.Д. Гаришвили (1977), конечных продуктов ПОЛ (ШО) - методом W. Bidlack, A. Tappel (1973). Активность СОД определяли методом R. Fried (1975), каталазы - методом М.А. Королюка и др. (1988). Содержание гемоглобина определяли модифицированным методом A.B. Каракашова, В.В. Вичева (1973) с помощью набора фирмы «Реагент» (Россия), оксидазную активность

церулоплазмина - модифицированным методом Ревина (Колб, Камышников, 1982). Содержание молекул средней массы (МСМ) определяли методом Н.И. Габриэлян, В.И. Липатовой (1984), мочевины - стандартным диацетилмонооксимным методом, используя коммерческий набор Био-Ла-Тест «Urea 450» фирмы «Lachema» (Чехия) Активность ХЛ плазмы крови в системе Н202-люминола определяли методом В.А. Шестакова и др. (1979), люминолзависимой ХЛ цельной крови - методом В.Н. Прокофьева и др. (1995) на сцинтилляционном спектрометре «22028 RFT» (Германия). В качестве детектора использовали фотоэлектронный умножитель ФЭУ-37 Влияние ИНИЛИ на структурное состояние МЭ крыс определяли по эффективности беэызлучательного переноса энергии с остатков триптофана мембранных белков на пирен, микровязкости зон белок-липидных контактов, относительной микровязкости и полярности липидного бислоя мембран методом латеральной диффузии флуоресцентного зонда пирена (Владимиров, Добрецов, 1980; Добрецов, 1989). Интенсивность флуоресценции зондов регистрировали на спектрофлуориметре «Hitachi 650-60» (Япония). Уровень активности репарационных систем в крови крыс определяли методом биолюминесцентного анализа SOS-ответа клеток E.coli С 600 (pPLS -1) Л.Р. Птицына (1996). Уровень АХр в клетках костного мозга и эпителиоцитах роговицы глаз крыс определяли анафазным методом.

Достоверность различий между опытными и контрольными группами оценивали по t - критерию Стьюдента.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ Влияние ИНИЛИ и ГБО-индуцировапного окислительного стресса на Н2Ог-индуцированную люминолзависимую хемнлюминесценцию в различных

тканях крыс

В этом разделе работы была исследована Н202-индуцированная люминолзависимая ХЛ в различных тканях крыс, как надежный и чувствительный показатель соотношения взаимодействия про- и антиоксидантных систем. Полученные результаты показали, что действие ИНИЛИ на интактных животных достоверно снижает показатели ХЛ в ткани мозга - амплитуду вспышки (Н) на 45%, а светосумму (Sm) - на 20% (рис.1) Проведение курса ИНИЛИ крысам, подвергнутым ОС, также достоверно снижает уровень СРП в мозге животных, соответственно на 33% и 15% по сравнению с контролем.

Иная динамика показателей НгОг-индуцируемой люминолзависимой ХЛ наблюдается при исследовании тканей печени. ГБО-индуцированный ОС значительно повышает интенсивность СРП, что подтверждается увеличением (Н) на 40% и (вш) на 343% В период последействия повышенный уровень СРП в печени сохраняется. Действие ИНИЛИ на интактных крыс показало увеличение интенсивности вт на 54%. Проведение курса ИНИЛИ животным 5 группы существенно снижало продукцию АФК в печени и приближало к контрольным значениям.

Высота быстрой вспышки - Н

[□ИНИЛИ ИГБО~ □ ГБО-бсут □ГБО+ИНИЛИ]

Светосумма свечения - Эт

[□ИНИЛИ ОГБО □ ГБО-бсут ПГБСНИНИЛИ |

Рис.1 Изменение показателей НгОг-индуцированной люминолзависимой ХЛ в различных тканях животных (в % к контролю) (А - высота быстрой вспышки (Н) в мм; Б - светосумма свечения (Эш) за 100 сек).

Примечание, статистически достоверные различия по сравнению с контролем' * - р<0,05; **-р<0,01, ***-р<0,001.

Особенности СРП в плазме крови крыс, подвергнутых ГБО-индуцированному ОС, сопоставимы в целом с процессами в мозге и печени. После действия ГБО отмечено повышение интенсивности показателей ХЛ в плазме крови (Н на 86% и Йгп на 44%) по сравнению с контролем и снижение образование АФК в период последействия. Воздействие ИНИЛИ на интактных животных достоверно не меняло интенсивность ХЛ. Проведение курса ИНИЛИ в постгипероксический период способствовало нормализации показателей ХЛ относительно контроля.

Влияние ИНИЛИ на интенсивность ПОЛ и активность антиоксидантной системы в различных тканях крыс при ГБО-индуцированном окислительном стрессе Действие ИНИЛИ на интактных животных не повышало уровень молекулярных продуктов ПОЛ в головном мозге крыс (рис.2). При этом активность СОД, важнейшего антирадикального фермента, в ткани мозга также

оставалась в пределах контроля В условиях ГБО наблюдали накопление продуктов ПОЛ в мозге крыс от 47 до 81% и отмечали снижение активности СОД на 42% по сравнению с контролем. В постгипероксический период интенсивность ПОЛ в мозге крыс сохраняется на повышенном уровне и наблюдается дальнейшее ингибирование СОД. Проведение курса ИНИЛИ крысам, подвергнутым ОС, приводило к существенному снижению интенсивности ПОЛ в мозге в среднем на 80% относительно 4 группы животных и стимулировало активность СОД, уровень которой увеличился от 36% относительно контроля до 239% относительно 4 группы животных. Достоверное снижение уровня ПОЛ в мозге крыс, получавших курс ИНИЛИ, по сравнению с группой крыс без реабилитации свидетельствует об интенсификации антиоксидантного метаболизма в ткани мозга под действием ИНИЛИ.

Мозг

§ 100

& 80

0 60 * 40 | 20 8 0

1 -20

8 -40

.е

[□дк ом да ашо] А

5 о

Мозг

я 60 —

1 40

£ 20

К 0

1 -20 _

1 а -40

г) X -60

а« -80

|-аМ!*®' >Д

...

[Б ИНИЛИ □ ГБО РГБО-бсут ОГБМ1НИЛИ]

Рис.2 Изменение интенсивности ПОЛ в мозге крыс (в % к контролю) (А - ДК, МДА и ШО, Б-СОД)

Примечание- статистически достоверные различия по сравнению с контролем' * - р<0,05; ** - р<0,01; *** -р<0,001.

Действие ИНИЛИ на интактных крыс приводило к снижению на 31% МДА в печени. При этом активность ферментов первичного звена АО защиты -СОД и каталазы в печени оставалась в пределах нормы (рис.3).

Пребывание животных в условиях ГБО сопровождается интенсификацией ПОЛ в печени, что выражается в существенном и достоверном повышении содержания продуктов ПОЛ на 44 - 118% относительно контроля. При этом наблюдается нарушение сопряженности функционирования АО ферментов' ингибирование на 53% активности СОД и увеличение активности каталазы на 78%. В постгипероксический период высокая интенсивность ПОЛ и ингибирование СОД сохраняются. Проведение курса ИНИЛИ крысам 5 группы приводит к существенному и достоверному

снижению уровня ПОЛ в печени на 29-52% относительно контроля и на 41-62% относительно 4 группы. Также происходит нормализация активности СОД и каталазы (активность СОД возрастает на 81% по сравнению с 3 группой и на 116% по сравнению с 4 группой, а активность каталазы близка к уровню контроля).

Печень

140

а 120 § 100 | 80 | 60

* 40 | 20 | 0 1 -20 ! -40

* -во

одк амдА оию

[□ИНИЛИ И ГБО □ ГБО-бсут РГБО+ИНИЛИ |

А Б

Рис.3. Изменение интенсивности ПОЛ в печени крыс (в % к контролю) (А - ДК, МДА и ШО; Б - СОД, каталаза).

Примечание статистически достоверные различия по сравнению с контролем: * - р<0,05; ♦*-р<0,01; *** -р<0,001.

Особенности липопероксидации в плазме крови и эритроцитах крыс, подвергнутых ГБО-индуцированному ОС, сопоставимы в целом с процессами ПОЛ в мозге и печени. В условиях ГБО в эритроцитах крыс наблюдается активация ПОЛ и угнетение СОД и каталазы (рис.4).

Эритроциты

I 140

I 120 | 100

I 60

« 60

| 40

£ 20

| 0

5 -20

а! -40

I Ьи

[□дк~аию|

Эритроциты

200

! 150

X г 100

к 50

« £ 0

X -50

а«

-100

...

ш >д

...

□ ИНИЛИ а ГБО □ ГБО-бсут РГБО+ИНИЛИ |

Рис.4. Изменение интенсивности ПОЛ в эритроцитах крыс (в % к контролю) (А - ДК, ШО; Б - СОД, каталаза).

Примечание' статистически достоверные различия по сравнению с контролем' * - р<0,05; ♦*-р<0,01,*"-р<0,001.

В постгипероксический период сохраняется повышенный уровень ПОЛ в мембранах эритроцитов крыс, но при этом наблюдается чрезмерная активация СОД (на 151%) на фоне нормализации каталазы, что приводит к резкой дисфункции в работе АО ферментов. Проведение ИНИЛИ в постгипероксический период приводит к снижению интенсивности ПОЛ в мембранах эритроцитов в среднем на 30% и повышении СОД в среднем на 50%, при этом активность каталазы в эритроцитах крыс нормализуется. Таким образом, воздействие ИНИЛИ значительно уменьшает дисбаланс соотношения активностей сопряженных АО ферментов СОД и каталазы в эритроцитах и тем самым препятствует избыточной генерации высокореакционных АФК.

При проведении ИНИЛИ интактным крысам содержание продуктов ПОЛ и оксидазная активность церулоплазмина (ЦП) в плазме крови остаются на стационарном уровне. После ГБО зафиксировано повышение интенсивности ПОЛ и оксидазной активности ЦП. В постгипероксический период в плазме крови обнаружено незначительное снижение продуктов ПОЛ и умеренное повышение оксидазной активности ЦП, что можно рассматривать как компенсаторную реакцию, направленную на повышение АО емкости плазмы крови и торможение СРО в условиях ОС. Проведение курса ИНИЛИ в постгипероксический период способствует значительному снижению уровня первичных и конечных продуктов ПОЛ на 35^46% по сравнению с 3 группой животных и нормализации оксидазной активности ЦП в плазме крови.

Таким образом, проведение курса ИНИЛИ в постгипероксический период для коррекции антистрессорного состояния животных, подвергнутых ГБО-индуцированному окислительному стрессу, оказывает выраженное АО действие, которое характеризуется существенным снижением интенсивности ПОЛ в различных тканях Причем, содержание продуктов ПОЛ после проведения курса ИНИЛИ в постгипероксический период опускается даже ниже стационарного уровня в головном мозге и печени, что свидетельствует о возрастании емкости АО системы.

Влияние ИНИЛИ на стабильность и структурное состояние мембран эритроцитов крыс при ГБО-индуцированном окислительном стрессе Следующим этапом нашего исследования явилось изучение структурного состояния МЭ как адекватной модели плазматических мембран в условиях ГБО-индуцированного ОС и оценка возможности коррекции структурных нарушений путем проведения курса ИНИЛИ в постгипероксический период.

Для оценки стабильности МЭ крыс при ГБО-индуцированном ОС и последующей реабилитации путем применения ИНИЛИ определяли содержание ВЭГ и уровень СПА в плазме крови крыс (рис.5). Действие ИНИЛИ на интактных крыс не приводило к увеличению уровней ВЭГ и СПА. Нами зарегистрировано значительное повышение уровней ВЭГ на 201% и СПА на 138% в плазме крови в условиях ГБО и сохранение этих изменений в постгипероксический период. Проведение курса ИНИЛИ в постгипероксический период способствовало значительному снижению этих показателей в плазме крови.

ВЭГ и СПА

ВЭГ СПА

[□ЙНИЛИ В ГБО ПГБОбсут ОГБО+ИНИЛИ]

Рис.5. Изменение содержания ВЭГ и СПА в Рис 6 Изменение параметров зонда пирена и плазме крови крыс (в % к контролю) окислительной модификации белков

эритроцитов крыс (в % к контролю). Примечание' статистически достоверные различия по сравнению с контролем' * - р<0,05; ** -р<0,01; *** -р<0,001.

Структурные параметры МЭ при проведении курса ИНИЛИ интактным крысам оставались в пределах нормы (рис.6). В условиях ГБО наблюдали снижение параметра Р-/Ры(334) на 31%, что свидетельствует об увеличении микровязкости липидного бислоя МЭ, и неизменность параметра Рэ/Рм(282), характеризующего текучесть аннулярных (пограничных) липидов. При этом отмечали снижение на 28% эффективности безызлучательного переноса энергии электронного возбуждения с триптофановых остатков мембранных белков на зонд пирен (параметр Р0 - Р/Р0), что указывало на структурные перестройки в мембранных белках эритроцитов. Это подтверждается увеличением на 45-87% уровня белков, содержащих внутри- и межмолекулярные поперечные сшивки, образованные продуктами ПОЛ типа МДА и белков, содержащих окисленные аминокислоты (Тир, Три, Фен) и тирозин-тирозиновые димеры. В постгипероксический период микровязкость липидного бислоя нормализуется, а микровязкость белок-липидных контактов

повышается при снижении параметра Р„ - Р/Р„ на 32%, что свидетельствует о снижении текучести аннулярных липидов, составляющих микроокружение мембранных белков, приводящих к нарушению барьерной и матричной функций МЭ. На фоне проведения курса ИНИЛИ в постгипероксический период отмечена нормализация параметров РУРМ(334), р,/рм(282) и величины эффективности переноса энергии Р0 - Р/Р0, что свидетельствует об уменьшении содержания гидрофильных перекисных группировок в мембранных липидах как вследствие торможения ПОЛ, так и за счет их распада под действием низкоинтенсивного лазерного облучения Это подтверждается уменьшением уровня белков, подвергнутых окислительной модификации.

Таким образом, проведение курса ИНИЛИ в постгипероксический период способствует нормализации интенсивности флуоресценции белков суспензии эритроцитов и приводит к элиминации структурных перестроек в белках эритроцитов, вызванных окислительной модификацией. Это может быть связано, вероятно, как со стимуляцией эритропоэза и обогащением популяции эритроцитов молодыми, структурно и функционально полноценными клетками, так и с активизацией систем репарации, которые избирательно удаляют дефектные молекулы.

Влияние ИНИЛИ на показатели синдрома эндогенной интоксикации в крови крыс при ГБО-индуцированном окислительном стрессе Синдром эндогенной интоксикации (СЭИ) является патологическим процессом и представляет собой структурно-метаболический ответ организма на острую токсическую агрессию как эндогенной, так и экзогенной природы (Костюченко и др., 1997). СЭИ характеризуется накоплением в тканях и биологических жидкостях эндогенных токсических субстратов - избытка продуктов нормального или патологического метаболизма, в частности МСМ (Малахова, 2000; Зубаткина, Малахова, 2002).

Как следует из полученных результатов (рис.7), после воздействия ИНИЛИ на интактных крыс содержание трех фракций МСМ в плазме крови остается в пределах контроля. Однако при этом наблюдается изменение соотношения пептидной - МСМ(280) и непептидной - МСМ(254) составляющих пула МСМ в сторону увеличения уровня компонентов пептидной природы. Вероятно, воздействие ИНИЛИ стимулирует адаптационно-приспособительные реакции и приводит к изменению качественного спектра пептидного континиума, играющего важную роль в поддержании структурно-метаболического гомеостаза.

После действия ГБО зафиксировано повышение содержания фракций МСМ(254) и МСМ(280) на 35% и 17% соответственно по сравнению с нормой. Установлено, что содержание МСМ в крови коррелирует с тяжестью состояния, степенью выраженности эндогенной интоксикации и летальностью (Волчегорский и др., 1999; Волчегорский, 2003). Можно полагать, что обнаруженное нами повышение в плазме крови уровня среднемолекулярных веществ как пептидной, так и непептидной природы связано с развитием ОС после действия 0,5 МПа кислорода вследствие усиления ПОЛ и выходом кислых протеиназ, которые атакуют эндогенные субстраты (Внуков, 1978; Петровский и др., 1987).

мсм

| 30

£ 20

8 ю

5 0

I -10 ф

I -20 8

St -30

м [2!

МСЛ/ [210)

ггт.

/254)

Мочевина

□ ИНИЛИ И ГБО ОГБО-есут РГБО+ИНИЛИ

S 20

к ж

I о

| -20 Z

? -40

[□ИНИЛИ СЗГБО □ ГБО-бсут ОГБО+ИНЙЛЙ]

Рис.7 Изменение содержания фракций Рис.8. Изменение содержания мочевины в МСМ в плазме крови крыс (в % к различных тканях крыс (в % к контролю) контролю)

Примечание- статистически достоверные различия по сравнению с контролем: * - р<0,05; ♦♦-р<0,01,***-р<0,001

В период последействия в плазме крови наблюдали снижение на 25% содержания МСМ(254), нормализацию содержания МСМ(280), что указывало на возрастание доли соединений пептидной природы. На фоне проведения курса ИНИЛИ в постгипероксический период в плазме крови уровень фракций МСМ(254) и МСМ(280) снижается на 30% и 20% относительно нормы При этом величина К(280/254) в 5 группе крыс увеличивается на 15% относительно контроля и на 33% по сравнению с ГБО. Это может свидетельствовать о повышении уровня пептидной составляющей в среднемолекулярном пуле веществ.

Не менее важную роль, чем МСМ в развитии СЭИ играют мочевина и другие продукты азотистого катаболизма (Малахова, 2000).

Нами установлено, что после действия ИНИЛИ на интактных крыс уровень мочевины снижается на 16% в плазме крови, а в мозге и печени

остается в пределах контроля (рис.8). В условиях ГБО содержание мочевины увеличивается на 54%, 28% и 30% во всех исследованных тканях с наибольшей выраженностью изменений в плазме крови. Нарастание уровня мочевины, конечного продукта азотистого метаболизма, в плазме крови и тканях может быть следствием активации протеолиза и автолиза, что показано при гипероксии в работах различных авторов (Карташева, 1974; Внуков, 1978; Лукаш и др., 1996). Вместе с тем доказано, что мочевина проявляет и антиоксидантные свойства и может играть защитную роль при ГБО (Лукаш и др., 1996). В период последействия сохраняется повышенный уровень мочевины, содержание которой превосходит норму на 39%, 19% и 21% в плазме, мозге и печени соответственно. По-видимому, это может свидетельствовать о поддержании повышенного уровня протеолиза в постгипероксический период. Проведение курса ИНИЛИ в период последействия приводит к нормализации содержания мочевины в мозге и снижению её уровня на 27% и 40% в плазме крови и печени по сравнению с контролем. Мы полагаем, что динамика мочевины в плазме и тканях реабилитированных крыс в период последействия в определенной мере может отражать снижение интенсивности протеолиза.

Наиболее реактивными клетками организма являются лейкоциты, и поэтому исследование клеточной реакции белой крови при действии ИНИЛИ на интактных животных и животных, перенесших ОС, представляет несомненный интерес. После действия ИНИЛИ у интактных животных наблюдали снижение лейкоцитарного индекса интоксикации (ЛИИ) на 72% по сравнению с нормой. Проведение курса ИНИЛИ в постгипероксический период, в целом, способствует нормализации клеточных реакций белой крови. Кроме того, в крови данной группы животных, как и в группе интактных крыс, получавших курс ИНИЛИ, обнаруживаются метамиелоциты, что свидетельствует о стимуляции миелопоэза. При этом проведение ИНИЛИ в постгипероксический период способствует снижению на 82% величины ЛИИ по сравнению с контролем и уменьшению на 46% данного показателя по сравнению с 4 группой животных. Это, в целом, может свидетельствовать о значительных компенсаторных возможностях лейкона.

Цитогенетические последствия воздействия ГБО и ИНИЛИ в соматических тканях животных

Структурно-метаболический ответ организма на действие повреждающих факторов, в том числе токсических режимов ГБО, сопровождается развитием

синдрома эндогенной интоксикации, при котором в тканях и биологических жидкостях накапливаются токсические продукты. Эти продукты могут влиять как на структуру ДНК, так и на процессы репарации. Для оценки генотоксичности ГБО и ИНИЛИ мы использовали SOS-lux тест (Птицын, 1996; Буров и др. 1998). Генотоксичность тканей оценивали по индукции ДНК-репарационного ответа клеток E.coli ПТ-1 в присутствии гомогенатов тканей.

Как следует из полученных результатов, действие ИНИЛИ на интактных крыс приводит к снижению величины фактора индукции SOS-репарации в мозге, печени и плазме крови в среднем на 17-18%. Пребывание животных в условиях ГБО-индуцированного окислительного стресса сопровождается накоплением метаболитов, индуцирующих SOS-сигнал в клетках, количество которых достоверно отличается от их уровня у интактных животных. Величина фактора индукции (1с) SOS-репарации клеток, индуцируемого гомогенатами всех исследованных нами тканей достоверно возрастает относительно контроля: в печени на 17%, в мозге на 44% и достигает своего максимума в плазме крови на 146%, которая оказалась наиболее мощным SOS-индуктором (рис. 10). После обработки животных ГБО в плазме крови происходит накопление метаболитов, вызывающих повреждения ДНК и влияющих на уровень процессов репарации, о чем свидетельствует достоверное увеличение величины 1с. Таким образом, показано, что пребывание животных в условиях ГБО приводит к накоплению метаболитов в плазме крови, влияющих на уровень ДНК-репарационного SOS-ответа у E.coli сразу после окончания ГБО. Исследование генотоксичности тканей животных, находящихся в постгипероксический период, показало, что плазма крови, а также гомогенаты мозга и печени крыс достоверно уменьшают величину фактора индукции SOS-репарации. Падение уровня SOS-ответа может являться следствием накопления в тканях животных метаболитов, обладающих цитотоксическими свойствами, и развитием синдрома эндогенной интоксикации. Проведение 5 сеансов ИНИЛИ крысам в постгипероксический период приводит к достоверному снижению интенсивности биолюминесценции по сравнению с фоновым в среднем на 1824%. Таким образом, установлено, что после пребывания животных в условиях ГБО-индуцированного ОС, в исследованных тканях обнаруживаются метаболиты, оказывающие влияние на усиление ДНК-репарационного SOS-ответа клеток E.coli и вызывающие достоверные, по сравнению с контролем, изменения величины фактора индукции SOS-репарации. Проведение курса ИНИЛИ существенно снижает количество токсических продуктов, индуцируемых ОС.

Следующим этапом нашей работы было изучение цитогенетических последствий воздействия ИНИЛИ на соматические ткани животных, подвергнутых воздействию ГБО-индуцированного окислительного стресса. Спонтанный уровень хромосомных перестроек в эпителиоцитах роговицы глаз у интактных животных имел показатели (от 1,5% до 3,2%), которые составляли в среднем 2,2%. Проведенное нами исследование показало, что после окончания действия ГБО на животных (0,5 МПа, 1 ч) уровень хромосомных аберраций в эпителиоцитах роговицы глаз крыс достоверно возрос практически вдвое и составил 4,2%. Через 6 дней после окончания воздействия ГБО была отмечена тенденция к увеличению уровня АХр - на 37% относительно животных в условиях ГБО (3 группа) и на 165% относительно контроля. Действие ИНИЛИ на интактных крыс не увеличивало спонтанный уровень АХр. Проведение 5 сеансов ИНИЛИ крысам, подвергнутым ГБО-индуцированному ОС, приводило к существенному и достоверному снижению уровня АХр в эпителиоцитах роговицы глаз животных (рис.9). При этом уровень АХр снижался на 45% по отношению к спонтанному и был почти в 5 раз меньше, чем в группе крыс в постгипероксический период без реабилитации (4 группа).

АХр и МИ

3 150 |

8 100 Ж

« 50 z

1 о в

2 -60 /

-100

—

Ч§1 о|_Г —1---Й-» — П -р

SOS-lux тест

¡□Эпит рог глаз ЕЖостмозг СШИ j

¡□ИНИЛИ РГВО □ГБО-бсут РГвО+ИНИЛИ]

Рис 9. Изменение АХр и МИ в клетках крыс (в % к контролю) Примечание' статистически достоверные различия по сравнению с контролем** -р<0,01; *** -р<0,001.

Рис 10 Изменение генотоксичности в различных тканях крыс (в % к контролю).

р<0,05;

У интактных животных уровень АХр в клетках костного мозга зафиксирован в пределах адаптивной нормы и составлял 2,5%. Пребывание животных в условиях ГБО приводило к увеличению уровня АХр на 81%. В постгипероксический период отмечали достоверное снижение уровня АХр в клетках костного мозга в 2 раза относительно животных, перенесших ОС

(рис.9). Различный ответ в реакции клеток костного мозга и эпителиоцитов роговицы глаз очевидно можно объяснить различной пролиферативной активностью этих тканей Возможно, что более чувствительными к действию ГБО оказываются старые клетки, которые уже вступили на путь запрограммированной гибели, в связи с чем регистрируется низкий уровень АХр. Как и в случае с эпителиоцитами роговицы глаз при проведении ИНИЛИ интактным крысам уровень АХр снизился на 29% и составлял 1,8%. Проведение сеансов ИНИЛИ крысам в постгипероксический период приводило к снижению уровня АХр в клетках костного мозга крыс. При этом уровень АХр был ниже на 57% относительно контроля и в 2 раза ниже, чем у животных, не прошедших реабилитацию с помощью ИНИЛИ.

Во всех вариантах опыта основная доля хромосомных нарушений представлена хроматидными фрагментами. Общий вклад хромосомных и хроматидных фрагментов составлял в контрольной группе 94%. При проведении ИНИЛИ интактным крысам общий вклад фрагментов снижался до 72%. В условиях ГБО-индуцированного окислительного стресса и в постгипероксический период общий вклад фрагментов составлял 96-97% и существенно снижался после воздействия ИНИЛИ. Увеличение перестроек обменного типа (хромосомные и хроматидные мосты) регистрируется в вариантах ИНИЛИ и ГБО+ИНИЛИ. Эти результаты свидетельствуют о возможном усилении репарационных процессов в клетках после воздействия ИНИЛИ.

Ранее было показано, что окислительный стресс модифицирует пролиферативную активность тканей: в зависимости от параметра давления задерживает или ускоряет митотический цикл (Гуськов, 1989). Поэтому мы сочли целесообразным изучить влияние ИНИЛИ при ГБО-индуцированном ОС на пролиферацию клеток эпителия роговицы глаз крыс. В зависимости от величины давления и времени обработки кислород может быть ингибитором или стимулятором митозов. Особенностью режима 0,5 МПа 1ч является ингибирующее воздействие на пролиферативную активность различных тканей (Гуськов, 1982; Шкурат, 2000). Проведение ИНИЛИ крысам в постгипероксический период приводит к повышению пролиферативной активности клеток эпителия роговицы глаз в 2 раза относительно гипероксических животных (3 группа) и достоверно превышает контрольные значения на 34%.

Таким образом, воздействие лазерного излучения (}. = 0,89 мкм, 4 мин, 5 сеансов) на интактных животных достоверно снижает уровень АХр и

интенсивность процессов репарации по сравнению с контрольными значениями в соматических тканях животных и стимулирует клеточную пролиферацию. После 5 сеансов ИНИЛИ у животных, подвергшихся ОС, уровень АХр в соматических тканях достоверно снижается как по сравнению с контролем, так и по сравнению с постгипероксическими животными, не прошедшими курс реабилитации, и нормализуется митотический цикл после ингибирующего действия ГБО.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Представленные результаты свидетельствуют о том, что ИНИЛИ в условиях физиологической нормы оказывает умеренный антиоксидантный эффект на этапе генерации АФК в ткани мозга и ингибирования вторичных и конечных продуктов ПОЛ в печени и эритроцитах. Умеренные изменения, вызванные действием ИНИЛИ на интактных животных, достигают максимальной выраженности при ИК лазерном воздействии на крыс, подвергнутых окислительному стрессу. Причем, стресс-лимитирующее действие ИНИЛИ в постгипероксический период проявляется как в регуляции свободнорадикальных процессов и антиоксидантных систем, так и в снижении мутационных процессов.

Одним из объяснений механизма антиоксидантного действия ИНИЛИ может служить гипотеза о структурной альтерации биожидкостей, согласно которой эффект лазерного воздействия опосредован изменением метастабильных структурно-неэквивалентных состояний воды (Минц, Скопинов, 1989;. Загускин, 2001). Для инфракрасной области (0,85 - 0,9 мкм) характерно возникновение не возбужденных, а колебательно-возбужденных состояний, когда происходит повышение колебательной энергии отдельных областей макромолекулы за счет перехода электрона на более высокие колебательные подуровни, тем самым, вызывая в биомакромолекулах конформационные перестройки (Добкин, 1989; Владимиров и др., 2004). Еще одним аспектом биоэффекта инфракрасных лазеров является воздействие на кислород. В результате поглощения фотона молекулярный кислород переходит в очень короткоживущий синглетный кислород '02, который может стимулировать синтез ДНК и РНК и, как следствие, в тканях индуцирует синтез антиоксидантных ферментных систем таких, как СОД, каталаза и др. (Клебанов, 2002; Владимиров и др., 2004). Что же касается первичных хромофоров для ИНИЛИ, то ими могут быть: цитохромы дыхательной цепи

митохондрий (Каги, 1999), тетрагидроптерины (Бриль, Бриль, 1997), и, возможно, продукты деградации эндогенных порфиринов.

В нашем исследовании проведение курса ИНИЛИ в постгипероксический период способствовало нормализации структурного состояния эритроцитарных мембран, нарушенного окислительным стрессом, т.е. проявлялся выраженный мембраностабилизирующий и мембранокорригирующий эффекты. Можно полагать, что ИК лазерное воздействие в постстрессорный период выступает в роли триггера, запускающего конформационные перестройки на мембранном уровне с коррекцией процессов свободнорадикального окисления при участии антиоксидантных систем и с активацией генома клетки, что обеспечивает стимуляцию стресс-лимитирующих систем и повышение мощности адаптационных механизмов ИНИЛИ стимулирует восстановительные процессы в клетках и тканях при патологических состояниях и укрепляет резервные возможности организма.

ВЫВОДЫ

1. Воздействие ИНИЛИ на интактных животных проявляет умеренное антиоксидантное действие путем снижения показателей индуцированной ХЛ в мозге, уровня МДА в печени и содержания ШО в эритроцитах на фоне активации СОД в эритроцитах и снижения в них доли белков, модифицированных окислением. ИНИЛИ приводит к снижению уровня хромосомных аберраций (на 18-29%).

2. Проведение курса ИНИЛИ после ГБО (0,5 МПа, 1 ч) способствует уменьшению продукции АФК и интенсивности ПОЛ в тканях, на что указывает значительное снижение показателей ХЛ (на 5-63%) и уровня молекулярных продуктов ПОЛ (на 40-62%) в мозге, печени и плазме крови по сравнению с нереабилитированными животными. В постгипероксический период ИНИЛИ приводит к активации СОД в мозге на 36%, в эритроцитах -на 49%, нормализации ее активности в печени, что свидетельствует о тушении свободнорадикальных процессов после воздействия ИНИЛИ.

3. После проведения курса ИНИЛИ в период последействия ГБО наблюдается восстановление структурного состояния мембран эритроцитов, которое реализуется различными путями: нормализацией микровязкости липидного бислоя; элиминацией повреждений, вызванных окислительной модификацией белков и умеренным снижением полярности липидного бислоя. Это свидетельствует о том, что ИНИЛИ влияет не только на первичные процессы снижения активности свободных радикалов, но и

участвует во вторичных процессах, определяющих регенеративные процессы в мембранах.

4. У животных, подвергшихся воздействию ГБО, после проведенного курса ИНИЛИ, повышается уровень пептидной составляющей в среднемолекулярном пуле веществ на 15-23%, снижается уровень мочевины на 27-40%) относительно контроля, а величина ЛИИ снижается на 82% по сравнению с контролем и на 46% по сравнению с группой животных, не проходивших реабилитацию в период последействия. Это свидетельствует об уменьшении накопления токсических метаболитов в крови животных и купировании синдрома эндогенной интоксикации.

5. Воздействие ИНИЛИ на животных, подвергшихся окислительному стрессу, снижает уровень генотоксичности продуктов, оцененных по SOS-lux тесту на 14%, 26%, 140% в мозге, печени и плазме соответственно, по сравнению с нереабилитированными животными Воздействие ИНИЛИ снижает уровень аберраций хромосом в эпителиоцитах роговицы глаз в 4,8 раза, в клетках костного мозга в 2 раза по сравнению с постгипероксическими животными, не прошедшими курс реабилитации, и нормализует митотический цикл после ингибирующего действия ГБО.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Пономарева М.Д., Богачева М.А. Цитогенетические последствия лазерного излучения в пролиферирующих тканях животных // В сб. «Актуальные проблемы медицины и биологии». - Томск. - 2003. - Т.2. - С. 51-52. (Процент участия - 75%; объем - 0,08 п.л.).

2. Пономарева М.Д., Богачева М.А., Милютина Н.П., Гуськов Е.П. Влияние инфракрасного низкоинтенсивного лазерного излучения на соматические ткани животных. // В сб. «Генетика в XXI веке: современное состояние и перспективы развишя». III съезд ВОГиС. - Москва. - 2004. - Т.2. - С. 466. (Процент участия - 50%; объем - 0,04 п.л.).

3. Пономарева М.Д., Милютина Н.П., Гуськов Е.П. Влияние инфракрасного низкоинтенсивного лазерного излучения на интенсивность свободнорадикальных процессов в различных тканях крыс при ГБО-индуцированном окислительном стрессе // Известия ВУЗов. СевероКавказский регион. Естественные науки. - Ростов-на-Дону. - 2005. -Приложение № 3. - С. 67-72. (Процент участия - 50%; объем - 0,32 п.л.).

4. Пономарева М.Д., Сало А.Д., Милютина Н П. Влияние инфракрасного низкоинтенсивного лазерного излучения на показатели синдрома эндогенной

интоксикации в эксперименте // В сб. «Оптимизация деятельности детских стационаров в условиях реформирования здравоохранения» Тезисы Всерос. совещания глав.врачей республиканских, краевых, областных, городских детских больниц. - Ростов-на-Дону. - 2005. - С. 130-131. (Процент участия -75%; объем - 0,08 п.л.).

Список сокращений:

АФК - активные формы кислорода

АО, АОС - антиоксиданты, антиоксидантная система

АХр - аберрации хромосом

ВЭГ - внеэритроцитарный гемоглобин

ГБО - гипербарическая оксигенация

ГНЛ - гелий-неоновый лазер

ДК - диеновые конъюгаты

ИК - инфракрасный

ИНИЛИ - инфракрасное низкоинтенсивное лазерное излучение

МДА - малоновый диальдегид

МИ - митотический индекс

МСМ - молекулы средней массы

МЭ - мембраны эритроцитов

НИЛИ - низкоинтенсивное лазерное излучение

ОС - окислительный стресс

ПОЛ - перекисное окисление липидов

СОД - супероксиддисмутаза

СПА - суммарная пероксидазная активность

СРП - свободнорадикальные процессы

СЭИ - синдром эндогенной интоксикации

ХЛ - хемилюминесценция

ЦП - церулоплазмин

ШО - шиффовы основания

Печать цифровая. Бумага офсетная Гарнитура «Тайме» Формат 60x84/16 Объем 1,0 уч-изд-л Заказ № 556. Тираж 100 экз. Отпечатано в КМЦ «КОПИЦЕНТР» 344006, г. Ростов-на-Дону, ул. Суворова, 19, тел. 247-34-88

»11107

РНБ Русский фонд

2006-4 6303

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Пономарева, Марианна Дмитриевна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Действие низкоинтенсивного лазерного излучения (НИЛИ) на биологические объекты.

1.2. Биологический и терапевтический эффекты НИЛИ.

1.3. Биохимические последствия окислительного стресса в живых системах.

1.4. Генетические последствия окислительного стресса в живых системах.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Постановка эксперимента.

2.2. Получение биологического материала.

2.2.1. Получение плазмы крови.

2.2.2. Приготовление суспензии эритроцитов и гемолизатов.

2.2.3. Приготовление гомогенатов тканей.

2.3. Биохимические и биофизические методы исследования.

2.3.1. Хемилюминесцентный анализ. а) Измерительная аппаратура. б) Определение активности хемилюминесценции плазмы крови в системе НгОг-люминол. в) Определение люминолзависимой хемилюминесценции цельной крови.,.

2.3.2. Определение содержания диеновых конъюгатов.

2.3.3. Определение содержания шиффовых оснований.

2.3.4. Определение содержание малонового диальдегида.

2.3.5. Определение содержания белка.

2.3.6. Определение активности супероксиддисмутазы.

2.3.7. Определение активности каталазы.

2.3.8. Определение концентрации гемоглобина.

2.3.9. Определение оксидазной активности церулоплазмина.

2.3.10. Определение суммарной пероксидазной активности (СПА).

2.3.11. Определение содержания внеэритроцитарного гемоглобина.

2.3.12. Определение содержания молекул средней массы.

2.3.13. Определение концентрации мочевины.

2.3.14. Определение эффективности безызлучательного переноса энергии с остатков триптофана мембранных белков на пирен.

2.3.15. Определение относительной микровязкости липидного бислоя и микровязкости зон белок-липидных контактов мембран.

2.3.16. Определение полярности липидной фазы и зон белок-липидных контактов мембран.

2.4. Генетические методы исследования.

2.4.1. Приготовление препаратов для подсчета анафаз в клетках костного мозга крыс.

2.4.2. Приготовление препаратов для подсчета анафаз в эпителиоцитах роговицы глаз крыс.

2.4.3. Изучение генотоксичности тканей с помощью SOS-lux теста.

2.5. Определение лейкоцитарной формулы крови.

2.6. Статистическая обработка результатов исследования.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

3.1. Влияние инфракрасного низкоинтенсивного лазерного излучения (ИНИЛИ) на Н2О2-ЛЮМ ин олз а в исимую хемилюминесценцию в различных тканях крыс при ГБО-индуцированном окислительном стрессе.

3.2. Влияние ИНИЛИ на интенсивность перекисного окисления липидов (ПОЛ) и активность антиоксидантной системы в различных тканях крыс при ГБО-индуцированном окислительном стрессе.

3.3. Влияние ИНИЛИ на структурное состояние мембран эритроцитов крыс при ГБО-индуцир о ванном окислительном стрессе.

3.4. Влияние ИНИЛИ на показатели эндогенной интоксикации в крови крыс при ГБО-индуцированном окислительном стрессе.

3.5. Влияние ГБО и ИНИЛИ на мутационный процесс в соматических тканях животных.

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ.

ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Влияние инфракрасного низкоинтенсивного лазерного излучения на соматические ткани животных при ГБО-индуцированном окислительном стрессе"

Низкоинтенсивное лазерное излучение (НИЛИ), получившее в последнее десятилетие широкое применение в клинической практике в России, в странах СНГ и ряде других зарубежных стран, используется в медицине в двух основных направлениях: при фотодинамической терапии (ФДТ) опухолей, где используется поражающий эффект НИЛИ (Dougherty, 1993; Соколов и др., 1995) и при лечении широкого круга различных воспалительных заболеваний (Илларионов, 1992; Козлов, 1997; Утц, Волнухин, 1998; Fujimaki е.а., 2003). Его позитивные клинические эффекты отмечены при лечении различных заболеваний и патологических процессов и подтверждены в контролируемых клинических исследованиях, в том числе с использованием двойного слепого метода (Cowen е.а., 1997; Bensadoun е.а., 1999; Hirschl е.а., 2002).

При взаимодействии НИЛИ с организмом человека регистрируются разнообразные биологические эффекты. Вместе с тем многие аспекты, касающиеся механизмов биологического действия лазерного излучения в инфракрасном спектре, на сегодняшний день остаются неясными. В частности, не получил пока четкого освещения в литературе вопрос о механизме формирования стойких, длительно сохраняющихся структурно-функциональных изменений в органах и тканях после проведенного курса низкоинтенсивной инфракрасной (ИК) лазеротерапии. Однако многолетний врачебный опыт убеждает в том, что изменения, возникающие в биосистеме при ИК лазерном воздействии, в принципе могут сохраняться в течение длительного времени. Выяснилось, что при использовании инфракрасных лазеров с большой импульсной мощностью лечебный эффект бывает зачастую значительно лучше, чем при использовании красной области спектра, в том числе и гелий-неонового лазера. Для анализа механизма лечебного действия инфракрасного низкоинтенсивного лазерного облучения (ИКЛО) очень важно иметь экспериментальные доказательства схожести эффектов действия ИКЛО и ГНЛО на клеточных и молекулярных моделях in vitro и in vivo.

Если оценивать общую направленность изменений, обеспечивающих положительный клинический эффект от ИНИЛИ, то можно отметить, с одной стороны, стимуляцию репаративных и адаптивных процессов, составляющих основу восстановления структуры и функции пораженной ткани, а с другой - повышение общей резистентности организма за счет стимуляции комплекса местных и системных саногенетических механизмов. При этом очевидно, что необходимым условием для реализации биостимулирующего эффекта НИЛИ (рост, размножение, дифференцировка, повышение функциональной активности) является активация механизмов, осуществляющих синтез и доставку пластических материалов и энергетическое обеспечение усиленной клеточной функции. Иными словами, в результате фотовоздействия на организм должен сформироваться стойкий структурный след в биоткани, основу которого составляет наработка новых белковых молекул (ферментов, структурных, транспортных, рецепторных и других), вследствие активации генетического аппарата клетки.

Положения, изложенные выше, являются теоретическим обоснованием возможности реализации ряда биоэффектов ИНИЛИ через вовлечение генетического аппарата клетки. Совершенно очевидно, что действие ИНИЛИ на живой организм может проявляться на разных уровнях его структурно-функциональной организации. Однако, поскольку усиление биологической функции и повышение мощности адаптивных систем требуют своего пластического обеспечения, особенно важным представляется взаимодействие лазерного излучения с первичной информационной системой клетки - ее геномом (Бриль, Панина, 2000).

Электромагнитная природа НИЛИ предполагает возможность его взаимодействия со множеством регуляторных механизмов в живых системах. Важнейшей регуляторной системой организма является система свободнорадикальных процессов (СРП). С ней связаны такие биологические явления, как окислительное фосфорилирование в митохондриях, генерация и проведение нервного импульса, клеточное деление, синтез ряда гормонов, механизмы регуляции мембранной проницаемости и активности мембранных ферментов (Владимиров, 1989).

Действие ИНИЛИ на процессы, происходящие в организме, может не проявляться на фоне оптимального функционирования физиологической или биохимической системы, но может быть выражено при сдвигах функционального состояния этих систем, например, при действии экстремальных факторов среды. Для изучения молекулярных механизмов антистрессорного действия ИНИЛИ в нашей работе использована модель ГБО-индуцированного окислительного стресса. Выбор этой модели стрессорного воздействия связан с необходимостью изучения механизмов окислительного стресса и адаптации к нему организма как наиболее сложной проблемы биологии и медицины. Актуальность данной проблемы обусловлена тем, что случаи кислородной интоксикации встречаются в практике ГБО-терапии при передозировке кислорода или повышенной индивидуальной чувствительности организма (Лукаш и др., 1991). Особого внимания заслуживает, в связи с антиоксидантным и мембраностабилизирующим действием, низкоинтенсивное инфракрасное излучение лазера, применяемое для коррекции окислительного стресса, вызванного ГБО.

Основными и универсальными механизмами развития стрессорной реакции, возникающей при действии на организм различных факторов, и, в частности, ГБО-индуцированного окислительного стресса, являются интенсификация перекисного окисления липидов (ПОЛ) на фоне повышенной активности прооксидантной системы, истощения потенциала эндогенной антиоксидантной системы (АОС) и дестабилизации структуры клеточных мембран. Мембраны клеток являются мишенью для действия стресс-факторов и фармакологических веществ. В связи с этим изучение молекулярных механизмов функционирования биомембран в норме, при стрессорных процессах и в условиях корригирующего влияния ИНИЛИ необходимо, прежде всего, для разработки современных методов и критериев оценки нарушений нативного структурно-функционального состояния компонентов биомембран, а также поиска эффективных способов профилактики и лечения различных стрессорных состояний. В этом плане определенный интерес представляет изучение механизма реализации биологической активности ИНИЛИ, регулирующего СРП.

В связи с этим целью настоящей работы явилось изучение роли ИНИЛИ в регуляции свободнорадикальных процессов в тканях и мембранах эритроцитов (МЭ) крыс, их структурно-функционального состояния, а также его влияние на генетический аппарат в норме и после ГБО-индуцированного окислительного стресса.

В соответствии с поставленной целью были определены следующие задачи исследования:

2. Изучить влияние ИНИЛИ на индукцию свободнорадикальных процессов, оцениваемых по интенсивности Н202-индуцированной люминолзависимой хемилюминесценции, содержание молекулярных продуктов ПОЛ и активность компонентов антиоксидантной системы -супероксиддисмутазы, каталазы, церулоплазмина в различных тканях животных, предварительно подвергнутых ГБО-индуцированному окислительному стрессу.

5. Оценить генотоксичность ИНИЛИ по уровню SOS-ответа E.coli С 600 и уровень аберраций хромосом в тканях животных, подвергнутых ГБО-индуцированному окислительному стрессу.

В общетеоретическом плане и в практическом отношении выяснение молекулярных механизмов действия ИНИЛИ, его участия в регуляции важнейших процессов жизнедеятельности клеток в результате разрешения поставленных задач может оказаться ключом к решению наиболее актуальной проблемы медицины, связанной с расширением сферы использования низкоэнергетических лазеров. Весьма интересным и практически значимым представляется исследование антиоксидантной эффективности ИНИЛИ при стрессе с целью дальнейшего применения в лечебной и профилактической медицине, по крайней мере, в тех диапазонах доз и режимах воздействия, которые обычно применяются в курсовой лазеротерапии.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Пономарева, Марианна Дмитриевна

150 ВЫВОДЫ

2. Проведение курса ИНИЛИ после ГБО (0,5 МПа, 1 ч) способствует уменьшению продукции АФК и интенсивности ПОЛ в тканях, на что указывает значительное снижение показателей ХЛ (на 5-63%) и уровня молекулярных продуктов ПОЛ (на 40-62%) в мозге, печени и плазме крови по сравнению с нереабилитированными животными. В постгипероксический период ИНИЛИ приводит к активации СОД в мозге на 36%), в эритроцитах - на 49%, нормализации ее активности в печени, что свидетельствует о тушении свободнорадикальных процессов после воздействия ИНИЛИ.

3. После проведение курса ИНИЛИ в период последействия ГБО наблюдается восстановление структурного состояния мембран эритроцитов, которое реализуется различными путями: нормализацией микровязкости липидного бислоя; элиминацией повреждений, вызванных окислительной модификацией белков и умеренным снижением полярности липидного бислоя. Это свидетельствует о том, что ИНИЛИ влияет не только на первичные процессы снижения активности свободных радикалов, но и участвует во вторичных процессах, определяющих регенеративные процессы в мембранах.

4. У животных, подвергшихся воздействию ГБО, после проведенного курса ИНИЛИ повышается уровень пептидной составляющей в среднемолекулярном пуле веществ на 15-23%), снижается уровень мочевины на 27-40% относительно контроля, а величина ЛИИ снижается на 82% по сравнению с контролем и на 46% по сравнению с группой животных, не проходивших реабилитацию в период последействия. Это свидетельствует об уменьшении накопления токсических метаболитов в крови животных и купировании синдрома эндогенной интоксикации.

5. Воздействие ИНИЛИ на животных, подвергшихся окислительному стрессу, снижает уровень генотоксичности продуктов, оцененных по SOS-lux тесту на 14%, 26%, 140% в мозге, печени и плазме соответственно по сравнению с нереабилитированными животными. Воздействие ИНИЛИ снижает уровень аберраций хромосом в эпителиоцитах роговицы глаз в 4,8 раза, в клетках костного мозга в 2 раза по сравнению с постгипероксическими животными, не прошедшими курс реабилитации и нормализует митотический цикл после ингибирующего действия ГБО.

152

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Пономарева, Марианна Дмитриевна, Ростов-на-Дону

1. Аврова Н.Ф. Биохимические механизмы адаптации к изменяющимся условиям среды у позвоночных: роль липидов // Журнал Эволюционной биохимии и физиологии. 1999. - Т.35, № 3. - С. 170-180.

2. Авруцкий М.Я., Катковский Д.Л., Мусихин Л.В., Гусейнов Т.О. Влияние низкоинтенсивного лазерного излучения на основные биологические процессы и гомеостаз больных // Анестезиология и реаниматология. -1991.-№5.-С. 74-79.

3. Александров М.Т., Кудрина Л.Н. Состояние проблемы и перспективы развития лазерной медицины и лазерной медицинской техники // Актуальные вопросы лазерной медицины. Тезисы докладов 1 Всероссийской конференции. М., 1991. С. 151-154.

4. Алексеева М.Н., Зубкова С.М., Миненкова А.А. и др. Устранение стрессорных изменений в тимусе при действии лазерного излучения на эндокринные железы. // Бюл. ЭБМ, 1993. Т. CXVI, № 10. - С. 360-362.

5. Арчаков А.И. Микросомальное окисление// М., Наука. 1975. - 327 с.

6. Афанасьев И.Б. Кислородные радикалы в биологических процессах (обзор) // Химикофармацевтич. журнал. 1985. - Т. 19, № 1. - С. 11-22.

7. Ашмарин И.П., Стукалов П.В. Нейрохимия. М.: Изд-во Инст. Биомед.химии РАМН, 1996.

8. Бабенко Г.А., Гонский Я.И., Антоник И.М. и др. О роли металлов в процессах свободнорадикального окисления в тканях организма по данным спонтанной и инициированной хемилюминесценции // Биохемилюминесценция. М.: Наука, 1983. - С. 164-169.

9. Бакуев М.М., Саидов М.З., Зурхаева Р.З. // Иммунология. 1993. - № 1. -С. 55-56.

10. Барабой В.А., Орел В.Э. Спонтанная хемилюминесценция сыворотки крови в норме и при воздействии ионизирующей радиации. // Биохемилюминесценция. М.: Наука, 1983. - С. 222-239.

11. Барабой В.А., Чеботарев Е.Е. Хемилюминесценция крови в экспериментальной и клинической онкологии. Киев: Науковадумка., 1984.- 184 с.

12. Барабой В.А. Механизмы стресса и перекисное окисление липидов // Успехи совр. биологии. 1991. - Т.111, Вып. 6. - С. 923-931.

13. Безлепкина Н.А., Коробов A.M. Молекулярно-мембранные механизмы воздействия низкоинтенсивного лазерного излучения на биообъекты // Матер. XIV Межд. науч.-практ. конф. «Применение лазеров в мед. и биологии», Харьков. 2000. - С. 6-7.

14. Белоконева О.С., Зайцева С.В., Варфоломеев С.Д. Изучение с помощью доксильных зондов изменений вязкостных характеристик липидов мембран клеток головного мозга мышей под действием форболовых эфиров // Биол. мембраны. 1991. - Т.8, № 7. - С. 694-703.

15. Биленко М.В. Ишемические и реперфузионные повреждения органов. М: Медицина, 1989. - 208 с.

16. Биленко М.В., Каган В.Е., Велиханова Д.М., Комаров П.Г. Защитное действие антиоксидантов и индукторов микросомальных монооксигеназ при ишемическом и реоксигенационном повреждении печени // Бюл.эксп.биол. и мед. 1983. - № 4. - С. 30-32.

17. Болдырев А.А. Двойственная роль свободнорадикальных форм кислорода в ишемическом мозге (обзор) // Нейрохимия. 1995. - Т.12., № 3.- С. 3-13.

18. Болдырев А.А. Роль активных форм кислорода в жизнедеятельности нейрона // Успехи физиол. наук. 2003. - Т.34, № 3. - С. 21-34.

19. Брень А.Б. Генетико-биохимические особенности преадаптации млекопитающих к окислительному стрессу. Автореф. дисс. .канд. биол. наук., Ростов-на-Дону, 1997. 20 с.

20. Брилль Г.Е. «Панацейность» клинического действия низкоинтенсивного лазерного излучения. Миф или реальность? // Проблемы лазерноймедицины. Материалы 4 Межд. конгресса. М., Видное, 1997. С. 160161.

21. Бриль Г.Е., Бриль А.Г. Гуанилатциклаза и NO-синтетаза возможные первичные акцепторы энергии низкоинтенсивного лазерного излучения // Лазерная медицина. - 1997. - Т. 1, № 2. - С. 39-42.

22. Бриль Г.Е., Романова Т.П., Прошина О.В., Беспалова Т.А. Применение низкоинтенсивного лазерного излучения в качестве физичесого адаптогена при действии на организм стрессорных факторов. Учебное пособие. Саратов, 1998.

23. Бриль Г.Е., Петросян В.И., Синицын Н.И. Поддержание структуры водного матрикса важнейший механизм гомеостатической регуляции в биосистемах // Новые технологии в медицине. Саратов, 1999. - С. 28-31.

24. Брилль Г.Е. Новые данные о первичных акцепторах и молекулярных механизмах биологического действия низкоинтенсивного лазерного излучения. // Лазер и здоровье-99. Матер. Междун. конгресса. - М., 1999.-С. 429-431.

25. Бриль Г.Е., Панина Н.П. Влияние низкоинтенсивного лазерного излучения на генетический аппарат клетки. Изд-во Саратовского мед. университета., 2000. 34 с.

26. Бриль Г.Е., Бриль А.Г. // 8-я Межд. науч.-практ. конф. по квантовой медицине. Блед, Словения, 2001. М., 2002 - С. 67-74.

27. Бурлакова Е.Б., Голощапов А.Н., Горбунова Н.В. и др. Особенности биологического действия малых доз облучения // В сб. Последействия Чернобыльской катастрофы. Здоровье человека. М., 1996. С. 149-182.

28. Бурлакова Е.Б. Биоантиоксиданты: новые идеи и повторение пройденного // В мат. Межд.симпоз. «Биоантиоксидант», Тюмень, 1997. -С. 3-4.

29. Бурлакова Е.Б. Биоантиоксиданты: вчера, сегодня, завтра. // В мат. V Межд.конф. «Биоантиоксидант», М., 1998. С. 1.

30. Буйлин В.А. Лазерная рефлексотерапия в абдоминальной хирургии // Электронная промышленность. 1984. - № 3. - 10. - С. 51-53.

31. Буйлин В.А., Москвин С.В. Низкоинтенсивные лазеры в терапии различных заболеваний. М., 2001.-52 с.

32. Быкова Л.П., Жукова Т.П. Действие этанола и лимонтара в антенатальном периоде развития на перекисное окисление липидов и ферменты антиоксидантной защиты в ткани мозга и печени потомства крыс // Бюл.эксп.биол. и мед. 1994. - № 1. - С. 41-44.

33. Васильев А.П., Стрельцова Н.Н., Киянок Н.С. Стресслимитирующее действие низкоинтенсивного лазерного излучения у больных ишемической болезнью сердца // Вопросы курортологии. 1997. - №6. -С.3-5.

34. Васильев А.П., Стрельцова Н.Н., Сенаторов Ю.Н. Эффективность лазеротерапии больных ишемической болезнью сердца // Вопр. курорт. -2003.-№5.-С. 10-13.

35. Велижанина И.А., Шабалина М.С., Гапон Л.И., Камалова Н.Н., Сергейчик О.И. Лазеротерапия больных гипертонической болезнью в начальных стадиях // Вопросы курортологии. 1998. - № 1. - С. 9-11.

36. Виноградов А.Ю. Свободнорадикальные процессы и продукты азотистого катаболизма в крови при гипоксии и гипероксии. Автореф. дисс. .канд. биол. наук, Ростов-на-Дону, 1994. 22 с.

37. Владимиров Ю.А., Арчаков А.И. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. М., Наука., 1972. - 252 с.

38. Владимиров Ю.А., Добрецов Г.Е. Флуоресцентные зонды в исследовании биологических мембран. М., Наука, 1980. - 320 с.

39. Владимиров Ю.А. Свободнорадикальное окисление липидов и физические свойства липидного слоя биологических мембран // Биофизика. 1987. - Т.32, № 5. - С. 830-843.

40. Владимиров Ю.А. Роль нарушений свойств липидного слоя мембран в развитии патологических процессов // Пат.физиол. и эксп. терапия. -1989.-№4.-С. 7-18.

41. Владимиров Ю.А., Азизова О.А., Деев А.И., Козлов А.В., Осипов А.Н., Рощупкин Д.И. Свободные радикалы в живых системах // Итоги науки и техники. ВИНИТИ. Биофизика, М., 1992. Т.29. - С. 3-250.

42. Владимиров Ю.А. Три гипотезы о механизме действия лазерного облучения на клетки и организм человека // В сб. Эфферентная медицина. М: ИБМХ РАМН, 1994. С. 51-67.

43. Владимиров Ю.А. Три гипотезы о механизме действия красного (лазерного) света // Эфферентная медицина // Ред. С.Я. Чикин. М.: НИИ физ.-хим. медицины, 1994. С. 23-35.

44. Владимиров Ю.А. Свободные радикалы и антиоксиданты // Вестник РАМН. 1998. - № 7. - С. 43-51.

45. Владимиров Ю.А. Лазерная терапия: настоящее и будущее (доклад) // Биология. 1999.-С. 1-9.

46. Владимиров Ю.А. Свободные радикалы в биологических системах // Биология. 2000.

47. Владимиров Ю.А., Осипов А.Н., Клебанов Г.И. Фотобиологические основы терапевтического применения лазерного облучения // Биохимия. 2004. - Т.69, № 1. - С. 103-113.

48. Внуков В.В. Железосодержащие белки и протеолитическая активность в сыворотке крови при гипероксии и защитном действии мочевины. Автореф. дисс. .канд. биол. наук, Харьков, 1979. 26 с.

49. Водолажский В.И. Биохимические аспекты ДНК-деструктивного действия повышенного давления кислорода. Автореф. дисс. .канд. биол. наук, Ростов-на-Дону, 2002. 22 с.

50. Волотовская А.В. Мембраноклеточные эффекты лазерного облучения крови. Автореф. дисс. .канд.мед.наук, Минск, 2001. 24 с.

51. Волотовская А.В., Улащик B.C., Филиппович В.Н. Антиоксидантное действие и терапевтическая эффективность лазерного облучения крови у больных ишемической болезнью сердца // Вопр. курортол. 2003. - № 2 -С. 22-25

52. Волчегорский И.А., Колесников O.JL, Цейликман В.Э. Влияние когнетивного и некогнетивного воздействий на чувствительность к стрессорным гормонам и выбор адаптационной стратегии // Журнал Изв. АН. Сер. Биология. 1999. - № 2. - С. 201-210.

53. Волчегорский И.А., Тишевская Н.В., Кузнецов Д.А. Влияние средних молекул, выделенных из плазмы крови интактных и обожженных животных, на клеточный состав культур эритробластических островков костного мозга // Вестник РАМН. 2002. - № 2. - С. 30-36.

54. Габриэлян Н.И., Дмитриев А.А., Кулаков Г.П. Диагностическая ценность определения средних молекул в плазме крови при нефрологических заболеваниях // Клиническая медицина. 1983. - № 10. - С. 38-42.

55. Габриэлян Н.И., Липатова В.И. Опыт использования показателя средних молекул в крови для диагностики нефрологических заболеваний у детей // Лаб.дело. 1984. - № 3. - С. 138-140.

56. Горбатенкова Е.А., Азизова О.А., Владимиров Ю.А. Реактивация суперокидцисмутазы излучением гелий-неонового лазера // Биофизика. -1988. -№33. -С. 717-718.

57. Горбатенкова Е.А., Владимиров Ю.А., Парамонов Н.В. и др. Красный свет гелий-неонового лазера реактивирует супероксиддисмутазу. // Бюл. ЭБМ. 1989. - Т. CVII, № 3. - С. 302-305.

58. Гринченко С.Н., Загускин С.Л. Механизмы живой клетки: алгоритмическая модель. М., 1989.

59. Гуляева Н.В. Ингибирование свободнорадикального окисления липидов в механизмах срочной и долговременной адаптации к стрессу // Биол. науки. 1989.-№3.-С. 5-14.

60. Гуськов Е.П., Шкурат Т.П. Цитогенетические последствия гипербарической оксигенации в ряду клеточных циклов лимфоцитов периферической крови человека // Генетика. 1985. - Т.21, № 8. - С. 1361-1367.

61. Гуськов Е.П., Федоренко Г.М., Шкурат Т.П. Ультраструктура клеток меристемы пшеницы в норме и после гипербароксигенации // Цитология.- 1985.- Т.27, №1. С. 94-96.

62. Гуськов Е.П. Генетические эффекты гипербарической оксигенации. Дисс. .д-ра биол. наук, М., 1989. 303 с.

63. Гуськов Е.П., Шкурат Т.П., Шиманская Е.И., Янушевич С.В. Цитогенетические последствия оксигенобаротерапии. // Космическая биология и авиакосмическая медицина. 1990. - №4. - С. 48-50.

64. Гуськов Е. П., Гуськова С. И., Шиманская Е. И., Шкурат Т. П. Влияние гипербарической оксигенации на соматические и генеративные клетки крыс. // Цитология и генетика. 1990. - Т.24, №2. - С. 25-30.

65. Гуськов Е.П., Милютина Н.П., Тимофеева И.В., Шкурат Т.П. Влияние гипербарической оксигенации на антиоксидантный статус Xenopus laevis после предварительной адаптации к кислороду // Онтогенез. 1999. -Т.85,№2. -С. 91-95.

66. Е. П. Гуськов, М.Е.Клецкий, И.В.Корниенко, Л.П.Олехнович, В.А.Чистяков, Т. П. Шкурат, В.Н.Прокофьев, Ю.А.Жданов. Аллантоин как тушитель свободных радикалов // ДАН. 2002. - Т.383, №3. - С. 105107.

67. Девятков Н.Д., Зубкова С.М., Лапрун И.Б., Макеева Н.С. Физико-химические механизмы биологического действия лазерного излучения // Успехи совр. биол. 1987. - № 103. - С. 31-43.

68. Деев А.И., Еремина Т.В., Спиричев В.Б. Влияние ретинола на перекисное окисление в фосфолипидных мембранах // Вопр. мед. химии. 1978.-Т.24, №6.-С. 795-798.

69. Добкин В.Г., Андреев Е.М., Александров М.Т., Бондарев Г.Б. и др. Измерение оптических характеристик биологических тканей для низкоэнергетического лазерного излучения с Д=0,89мкм // Межд. конф. "Лазеры и медицина". Ташкент-М., 1989. - С. 38-39.

70. Добрецов Г.Е. Флуоресцентные зонды в исследовании клеток, мембран и липопротеинов. М.: Наука, 1989. - 277 с.

71. Добротина Н.А., Рутницкий А.Ю., Гладышева М.В. и др. Полифункциональность церулоплазмина, обоснование применения // Успехи соврем, биол. 1999. - Т.119, №4. - С. 375-379.

72. Дремина Е.С., Шаров B.C., Владимиров Ю.А. Определение антиоксидантной активности биологических и лекарственных препаратов: методологические аспекты (обзор) // Пульмонология. 1995. - № 1. - С. 73-75.

73. Дубинина Е.Е. Антиоксидантная система плазмы крови // Укр. Биохим. журн. 1992. - Т.64, №2. - С. 3-15.

74. Дудкевич И.Г., Марченко А.В. Квантовая терапия // Альтернативная медицина // Ред. Н.А. Беляков, Архангельск: Сев.-Зап. кн. изд-во, 1994. -С. 266-298.

75. Дудкин С.И. Металлосодержащие белки плазмы крови при гипероксии. Дисс. .канд. биол. наук, 1983. 180 с.

76. Егоров С.Ю., Таубер А.Ю., Красновский А.А., Нижник А.Н., Нокаль А.Ю., Миронов А.Ф. Фотогененрация синглетного молекулярного кислорода компонентами производного гематопорфирина. // Бюлл. эксп. биол. мед. 1989. - Т.108, №10. - С. 440-442.

77. Ерин А.Н., Гуляева Н.В., Нукушкин Е.В. Свободнорадикальные механизмы в церебральных патологиях // Бюл. эксп. биол. и мед. 1994. -№ 10. - С. 343-348.

78. Ефимова Е.Г., Чейда А.А. Каплан М.А. Влияние инфракрасного лазерного излучения низкой интенсивности на систему гемостаза // Вопр. Курортологии. 2003. - № 3. - С 36-39.

79. Жуманкулов М.С., Шабуневич JI.B., Басиладзе Л.И., Александрова Л.А. Фотореактивация церулоплазмина как один из механизмов действия гелий-неонового лазера на кровь // В кн. Лазеры и медицина. М., 1989. - С. 73-74.

80. Журавлев А.И. Развитие идей Б.Н. Тарусова о роли цепных процессов в биологии // Биоантиокислители в регуляции метаболизма в норме и патологии. М., Наука, 1982. - 240 с.

81. Журавлев А.И., Пантюшенко В.Т. Свободнорадикальная биология: Лекция. М.: Моск. вет. акад., 1989. - 60 с.

82. Загускин С.Л.,Никитенко А.А.,акад.Овчинников Ю.А., акад. Прохоров A.M., Савранский В.В., Дегтярева В.П., Платонов В.Н. О диапазоне периодов колебаний микроструктур живой клетки // Докл.АН СССР. -Т.277, №6. 1984. - С. 1468-1471.

83. Загускин С.Л. Причины и клеточные механизмы терапевтических эффектов лазера. // 5 Респуб. научно-практич. конф. "Применение лазеров в медицине и биологии". Ялта. Харьков. 1995. - С. 38-40.

84. Загускин С.Л., Затускина С.С. Роль кальцийрегулирующей системы отрицательных кристаллов клетки в направленности ее реакций на лазерное воздействие // III междун. конф. Колосовские чтения-97. СПб.- 1997. -С. 36.

85. Загускин С.Л. Лазерная терапия мифы и реальность, возможные пути развития // ЛАЗЕРИНФОРМ. Информационный бюллетень лазерной ассоциации. - Вып.2 (161) - 1999. - С. 1-6.

86. Загускин С.Л. Биоритмологическое биоуправление. Глава 17. // Хронобиология и хрономедицина (под ред. Ф.И. Комарова и С.И. Рапопорта) М., 2000. - С. 317-328.

87. Загускин С.Л. Методические рекомендации по применению магнито-инфракрасного лазерного аппарата квантовой терапии РИКТА-05-био /под редакцией Любимовой И.П. и Хейфеца Ю.Б. М. ПКП ГИТ. 2001. -254 с.

88. Зайчик А.Ш., Чурилов Л.П. Механизмы развития болезней и синдромов. СПб.: ЭЛБИ СПб, 2002. - 507 с.

89. Зенков Н.К., Меньщикова Е.Б. Активированные кислородные метаболиты в биологических системах // Успехи соврем.биологии. -1993. Т.113, №> 3. - С. 286-296.

90. Зенков Н.К., Ланкин В.З., Меньшикова Е.Б. Окислительный стресс: биохимический и патофизиологический аспекты. М.: МАИК «Наука. Интерпериодика», 2001. - 343 с.

91. Зенков Н.К., Кандалинцева Н.В., Ланкин В.З. и др. Фенольные биоантиоксиданты. Новосибирск: СО РАМН, 2003. - 328 с.

92. Зилов В.Г., Судаков К.В., Эпштейн О.И. Элементы информационной биологии и медицины. М.: МГУЛ, 2000. - 248 с.

93. Зимон И.Н., Агзамов А.И., Хорошаев В.А., Камин Ю.И., Далимов И.З. Влияние внутрисосудистого лазерного облучения крови на стереоструктуру эритроцитов при лечении разлитого гнойного перитонита//Хирургия. 1992. - № 9. - С. 35-39.

94. Зиньковская Т.М. Состояние гемостаза у больных ишемической болезнью сердца до и после ифракрасной лазерной терапии // Проблемы лазерной медицины. Материалы 4 межд.конгресса. М., Видное. - 1997. - С. 258-259.

95. Зубаткина О.В., Малахова М.Я. Критерии метаболической стабильности // Эфферентная терапия. 2002. - Т.8, № 4. - С. 55-60.

96. Зубкова С.М. О механизме биологического действия излучения гелий-неонового лазера // Биол.науки. 1978. - № 7. - С. 30-37.

97. Зубкова С.М., Соколова З.А., Попов В.И., Лапрун И.Б. // Вопр. курортологии, физиотерапии и лечеб.физкультуры. 1983. - № 6. - С. 2529.

98. Зубкова С.М. Биологическое действие электромагнитных излучений оптического и микроволнового диапазонов. Автореф. дисс. .докт. биол. наук. М, 1990.-49 с.

99. Зубкова С.М., Михайлик JI.B., Чабаненко С.С. Некоторые аспекты стресс-лимитирующего действия импульсного инфракрасного лазерного излучения // Вопросы курортологии. 1995. - № 1. - С. 3-4.

100. Зубкова С.М. Антиоксидантные и биоэнергетические эффекты лазерной терапии // Физиотерапия, бальнеология и реабилитация. 2003. - № 3. -С. 3-12.

101. Ивков В.Г., Берестовский Г.Н. Липидный бислой биологических мембран. М.: Наука. 1982. - 224 с.

102. Илларионов В.Е. Основы лазерной терапии. М.: Респект, 1992. 122 с.

103. Иллариошкин С.Н. Конформационные болезни мозга. М.: «Янус-К», 2003. 248 с.

104. Каган B.C., Орлов С.Н., Прилипко Л.Л. Проблема анализа эндогенных продуктов ПОЛ. Биофизика. (Итоги науки и техники ВИНИТИ АН СССР).-М., 1986.- 18.- 133 с.

105. Калмыков С.В., Романовская В.Г., Фиалковский В.И. // Лаб.дело. 1989. -№ 11.-С. 72-73.

106. Каракашов А.В., Вичев Е.П. Микрометоды в клинической лаборатории. София.: Медицина и физкультура, 1973. 256 с.

107. Карандашев В.И., Петухов Е.Б., Финько И.А., Попов Ю.А., Сличенко С.И. Экстракорпоральное облучение полного обьема циркулирующей крови низкоэнергетическим гелий-неоновым лазером // Вестн. РАМН. -1994.-№4.-С. 51-54.

108. Карташева Л.Д. Протеолитические процессы в мозгу при кислородной интоксикации и защитном действии мочевины. Автореф. дисс. .канд. биол. наук, Ростов-на-Дону, 1974. 22 с.

109. Кару Т.Й. // Низкоинтенсивная лазерная терапия. М., 2000. - С. 71-114.

110. Кару Т.Й., Смольянинова Н.К., Мантейфель В.М. и др. Дерепрессия генома в лимфоцитах из периферической крови человека после облучения He-Ne лазером // Низкоинтенсивные лазеры в медицине. -Ч.1., Обнинск, 1991. С. 47-50.

111. Кару Т.Й., Афанасьева Н.И. // Докл. РАН. 1995. - Т.342, №5. с. 693695.

112. Кения М.В. Динамика свободнорадикальных процессов и продуктов азотистого катаболизма в тканях системы крови при гипероксии. Дисс. .канд. биол. наук, Ростов-на-Дону, 1991. 118 с.

113. Клебанов Г.И., Страшкевич И.А., Чичук Т.В. и др. Влияние эндогенных фотосенсибилизаторов на лазер-индуцированный прайминг лейкоцитов крови // Биол. мембраны. 1998. - Т. 15, №3. - С. 273-285.

114. Клебанов Г.И., Ю.А. Владимиров. Клеточные механизмы прайминга и активации фагоцитов. // Успехи соврем, биол. 1999. - Т.119, №5. - С. 462-475.

115. Клебанов Г.И. // 9-я межд. Науч.-практ. конф. по квант, медицине. М., 2002. - С. 27-40.

116. Клебанов Г.И., Крейнина М.В., Мархолия М.Г., Христофоров В.Н., Вайнер Б.Г., Беленький В.Я. Лазеротерапия: клиническая эффективность и молекулярно-клеточные механизмы. РГМУ, ИФП СО РАН, Москва -Новосибирск, 2003. 24 с.

117. Кобеляцкий Ю.Ю. Лазерное облучение крови и состояние мембран эритроцитов у больных с тяжелой черепно-мозговой травмой в остром и отдаленном периодах. Автореф. дисс. .к.м.н., Днепропетровск, 1996. -24 с.

118. Кожевников Ю.Н. О перекисном окислении липидов в норме и патологии (обзор) // Вопр.мед.химии. 1985. - № 5. - С. 2-7.

119. Козлов В.И., Литвин Ф.Б., Терман О.А. Влияние низкоэнергетического лазерного излучения на микроциркуляцию крови // Медико-социал.аспекты проблемы «Человек-океан»: Материалы конф. Владивосток, 1988.-С. 308-309.

120. Козлов В.И., Антоновская JI.B. Морфофункциональная характеристика микроциркуляции в коже у девочек 5-17 лет // Архив АГЭ. 1989. - Т.97, №12. - С. 71-80.

121. Козлов В.И., Соболева Т.М., Азизов Г.А., Ленькова Н.А., Елфимов А.И.,Искакова Ж.Т. Состояние микроциркуляции у больных с артериальной ишемией нижних конечностей в процессе лазеротерапии. // Физиол журнал им. И.М. Сечеенова. 1991. - №77. - С. 55-67.

122. Козлов В.И, Буйлин В.А. Лазеротерапия. М.: Центр Астр., 1992. 164 с.

123. Козлов В.И., Буйлин В.А., Самойлов Н.Г., Марков И.И. Основы лазерной физио- и рефлексотерапии. Самара, Киев: Самар. мед. ун-т здоровья, 1993, 216 с.

124. Козлов В.И. Современные направления в лазерной медицине. 1997. - № 1.-С. 6-12.

125. Колб В.Г., Камышников B.C. Справочник по клин.химии. Минск: Беларусь, 1982. 328 с.

126. Колосова Н.Г., Колпаков А.Р., Панин Л.Е. Содержание токоферола и перекисное окисление липидов в тканях крыс Вистар в динамике адаптации к холоду // Вопр.мед.химии. 1995. - Т.41, № 6. - С. 16-19.

127. Конвай В.Д., Лукошкин А.В., Поспелов B.C. Нарушение обмена глутатиона в печени реанимированных крыс и его коррекция // Вопр.мед.химии. 1988. - № 1. - С. 65-68.

128. Конторщикова К.Н., Перетяган С.П. Влияние низкоинтенсивного лазерного излучения на некоторые метаболические показатели кровипостреанимационного периода. // Бюл. ЭБМ. 1992. - Т. CXIV, № 10. -С. 357-359.

129. Копытова Т.В., Добротина Н.А., Боровков Н.Н., Четверкина О.В. Значение среднемолекулярных пептидов сыворотки крови при острых формах ишемической болезни сердца // Лаб.дело. 1991. - № 10. - С. 1821.

130. Корепанов В.И. Техника полизональной лазерной терапии (практическое руководство). М., 1995.

131. Королев Ю.Н., Гениатулина М.С. // Вопр. курортол. 1997. - № 6. - С. 57.

132. Королюк М.А., Иванова Л.И., Майорова И.Г., Токарев В.Е. Метод определения активности каталазы // Лаб.дело. 1988. - № 1. - С. 16-19.

133. Корочкин И.М., Чапидзе Г.Э., Капустина Г.М., Бохуа М.Р., Марсагинишвили Л.А., Беркинбаев С.Ф., Барбараш О.Л., Катаев М.И. Применение излучения гелий-неонового лазера для лечения острого инфаркта миокарда. Методические рекомендации М.: МЗ РСФСР. -1989.

134. Корочкин И.М., Бабенко Е.В. Механизмы терапевтической эффективности излучения гелий-неонового лазера // Советская медицина. 1990. - № 3. - С. 3-8.

135. Костюченко А.Л., Белоцерковский М.В., Соколов А.А. Острый эндотоксикоз // В кн.: Медицинская лабораторная диагностика (программы и алгоритмы). Справочник (под ред. А.И. Карпищенко), СПб.: Инермедика, 1997. С. 246-264.

136. Красновский мл. А.А., Дроздова Н.Н., Иванов А.В. и др., Активация молекулярного кислорода инфракрасным лазерным излучением в аэробных системах, не содержащих пигментов. // Биохимия. - 2003. -Т.68, №9. - С. 1178-1182.

137. Кричевская А.А., Лукаш А.И., Броновицкая З.Г. Биохимические механизмы кислородной интоксикации. Ростов-на-Дону, РГУ, 1980. -120 с.

138. Кричевская А.А., Лукаш А.И., Шугалей B.C., Бондаренко Т.И. Аминокислоты, их производные и регуляция метаболизма. РГУ, 1983. -112 с.

139. Кульчавени Е.В. Лазеры против туберкулеза // Лазер-Информ. 1999. -№17-18.-С. 12-13.

140. Курзанов А.Н. Пептидергическая гипотеза терапевтического действия низкочастотного лазерного излучения // Актуальные вопросы лазерной медицины. Тезисы докл. 1 Всеросс. конф. М., 1991. - С. 6-7.

141. Ланкин В.З., Тихазе А.К., Беленков Ю.Н. Свободнорадикальные процессы в норме и патологических состояниях. Пособие для врачей. М., 2001.-78 с.

142. Ларский Э.Г. Методы определения и метаболизм металлобелковых комплексов // Итоги науки и техники. ВИНИТИ. Сер. Биохимия. 1990. -Т.41.-С. 198.

143. Левин A.M. Металлосодержащие соединения и свободнорадикальные процессы в сыворотке крови при изменениях кислородного режима организма. Автореф. дисс. .канд. биол. наук, Ростов-на-Дону, 1988. -25 с.

144. Лешаков С.Ю. Клинико-патогенетические аспекты терапевтического эффекта низкоэнергетического гелий-неонового лазера у больных ИБС: Автореф. дис. канд. мед. наук, М., 1987. 23 с.

145. Ли B.C., Халилов Э.М., Сабурова В.И. и др. Липидный состав и структурно-функциональные свойства мембран эритроцитов разного возраста // Вопр.мед.химии. 1982. - № 6. - С. 66-71.

146. Лисиенко В.М., Минц Г.И., Скопионов С.А. Альтерация биологических жидкостей при лазеротерапии у хирургических больных. Тез докл. Межд. симп. «Применение лазеров в хирургии и медицине». Ред O.K. Скобелкин. МЗ СССР, М., 1989. С. 529-530.

147. Лукаш А.И., Карташев И.П., Антипина Т.В. Торможение мочевиной перекисного окисления липидов в тканях // Известия СКНЦ ВШ. Естеств.науки. 1980. - № 1. - С. 102-105.

148. Лукаш А.И., Ананян А.А., Менджерицкая Л.Г., Внуков В.В. Железосодержащие белки в плазме и сыворотке крови больных при гипербарооксигенотерапии // Анестезиология и реаниматология. 1991. - №2. - С. 27-29.

149. Лукаш А.И., Внуков В.В., Прокофьев В.Н., Ходакова А.А. Хемилюминесцентный анализ микрообъемов плазмы крови // Современные проблемы биологии. Ростов-на-Дону: Полиграф, 1994. -75 с.

150. Лукаш А.И., Внуков В.В., Ананян А.А. и др. Металлосодержащие соединения плазмы крови при гипербарической оксигенации. Ростов-на-Дону, 1996. -107 с.

151. Малахова М.Я. Эндогенная интоксикация как отражение компенсаторной перестройки обменных процессов в организме // Эфферентная терапия. 2000. - Т.6, №4. - С. 3-14.

152. Малышев И.Ю., Манухина Е.Б. Стресс, адаптация и оксид азота // Биохимия. 1998. - Т.63, № 7. - С. 992-1006.

153. Мантейфель В.М., Андрейчук Т.Н., Кару Т.Н. и др. Активация транскрипционной функции в лимфоцитах под влиянием облучения Не-Ne лазером // Мол. Биология, 1990. Т.24, № 4. - С. 1067-1075.

154. Матвеев В.И., Холодов С.Е., Евстигнеев А.Р., Рэдбиль О.С. Механизмы действия низкоинтенсивного лазерного излучения // Пат физиол. и эксперим. терапия. 1987. - №2. - С. 57-58.

155. Маурер Г. Диск-электрофорез. Теория и практика электрофореза в полиакриламидном геле. Перевод с немец. М.: Мир, 1971. 190 с.

156. Маянский А.Н., Маянский Д.Н., Очерки о нейтрофиле и макрофаге. Новосибирск: Наука, 1983. 264 с.

157. Маянский А.Н., Невмятуллин А.Д., Чеботарь И.В. Реактивная хемилюминесценция в системе фагоцитоза // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1987. - № 7. - С. 109-115.

158. Маянский Д.Н. Хроническое воспаление. М.: Медицина, 1991. - 272 с.

159. Меерсон Ф.З., Долгих В.Т., Мержинский В.Е. Активация перекисного окисления липидов и ее предупреждение ионолом при механической асфиксии и последующей реанимации // Бюл. эксп. биол. и мед. 1983. -№ 11.-С. 33-35.

160. Меерсон Ф.З. Адаптационная медицина: концепция долговременной адаптации. М.: Дело, 1993. 138с.

161. Меньшиков В.В. Лабораторные методы исследования в клинике. М., 1987.-350 с.

162. Меньшикова Е.Б, Зенков Н.К. Окислительный стресс при воспалении // Успехи соврем, биологии. 1997. - Т. 117, № 2. - С. 155-171.

163. Мжельская Т.И. Биологические функции церулоплазмина и их дефицит при мутациях генов, регулирующих обмен меди и железа // Бюл. эксперим. биол. и мед. 2000. - Т.130, №8. - С. 124-133.

164. Микусев Ю.Е., Яушева М.В., Матвеева Т.В. Влияние низкоинтенсивного лазерного излучения на иммунологическую реактивность. // Физиотер., бальнеология и реабилитация. 2003. - № 3. - С. 39-43.

165. Милютина Н.П., Ананян А.А., Шугалей B.C. Антирадикальный и антиоксидантный эффект аргинина и его влияние на активность перекисного окисления липидов при гипоксии // Бюл.эксп.биол. и мед. -1990.-№9. -С. 263-265.

166. Минц Р.И., Скопинов С.А. Структурная альтерация биологических жидкостей и их модели при информационных воздействиях // Действие электромагнитного излучения на биологические объекты и лазерная медицина. Владивосток, 1989. С. 6-41.

167. Михайлов Ю.Е., Герасимов A.M., Гусев В.А. и др. Исследование активности супероксиддисмутазы эритроцитов крыс при токсическом режиме прерывистой гипербарической оксигенации // Бюл. эксперим. биол. и мед. 1976. - Т.82, № 8. - С. 959-961.

168. Могильницкая Л.В., Фан Ан, Баранова Н.Ю., Шугалей B.C. Влияние аргинина на свойства эритроцитарных мембран в условиях гипоксии // Бюл. эксп. биол. и мед. 1992. - № 5. - С. 497-498.

169. Монцевичуте-Эрингене Е.В. Упрощенные математическо-статистические методы в медицинской исследовательской работе // Пат.физиол. и эксп.терапия. 1964. - № 4. - С. 71-78.

170. Моргулис Г.Л. Свободнорадикальные процессы в крови и ткани легких и состояние мембран эритроцитов при гипероксии и в постгипероксический период: Автореф. дис. . канд. биол. наук, Ростов-на-Дону, 1992. 23 с.

171. Николаев С.Н. и соавт. Лазеротерапия в комплексном лечении нейрогенной дисфункции мочевого пузыря у детей с синдромом каудальной регрессии // Вестник РАМН. 1994. - № 3. - С. 12-16.

172. Никушкин Е.В. Перекисное окисление липидов в ЦНС в норме и при патологии //Нейрохимия. 1989. - Т.8, № 1. - С. 124-145.

173. Одыванова Л.Р., Сосунов А.А., Гатчев Я., Цервос-Наварро Дж. Окись азота в нервной системе // Успехи совр. биологии. 1997. - Т.117, №3. -С. 374-389.

174. Онуфриев М.В., Степаничев М.Ю., Лазарева Н.А., Гуляева Н.В. Постреанимационные изменения активности синтазы окиси азота и радикалообразования в отделах мозга крыс // Анестиозиол. и реаниматол. 1996. - № 5. - С. 58-61.

175. Осипов А.Н., Азизова О.А., Владимиров Ю.А. Активные формы кислорода и их роль в организме // Успехи соврем, биологии. 1990. -Т.31.-С. 180-208.

176. Острахович Е.А., Ильич-Стоянович О., Афанасьев И.Б. Активные формы кислорода и азота в клетках крови у больных ревматоидным артритом: эффект лазерной терапии // Вестник Росс. Акад. мед. наук, 2001.-№5.-С. 23-27.

177. Перелыгина Л.А., Самойлов Н.Г., Стеченко Л.А. Радиация, сердце и лазер. Полтава, 1996. 206 с.

178. Пескин А.В., Збарский И.Б., Константинов А.А. Докл. АН СССР. 1976. -№229.-С. 751-754.

179. Пескин А.В. Биохимия, 1996. № 61. - С. 65-72.

180. Пескин А.В., Шарова Н. П., Димитрова Д.Д., Столяров С.Д., Филатова Л.С. Докл. РАН. 1997. - № 355. с. 262-265.

181. Петровский Б.В., Ефуни С.Н., Демуров Е.А., Родионов В.В. Гипербарическая оксигенация и сердечно-сосудистая система. М.: Наука, 1987.-328 с.

182. Пирожков С.В., Панченко Л.Ф. Внутриклеточные перекисные процессы при хронической алкогольной интоксикации (обзор) // Укр.биохим.журн. 1989. - Т.61, № 4. - С. 3-15.

183. Покудина И.О. Модификация низкомолекулярными азотистыми катаболитами мутагенного эффекта окислительного стресса и их влияние на антиоксидантный статус клеток и тканей. Автореф. дисс. .канд. биол. наук, Ростов-на-Дону, 2001. 24 с.

184. Пономаренко Г.Н., Свистов А.С., Обрезан А.Г., Морозов С.Л., Власенко С.В. Инфракрасная лазеротерапия в комплексном лечении больных ИБС после аортокоронарного шунтирования. // Вопросы курортологии и физиот. 2003. - № 2. - С. 18-21.

185. Пономаренко Г.Н., Обрезан А.Г., Яковлев А.Ф. и др. Роль генетических факторов в формировании эффектов низкоинтенсивной магнитолазерной терапии у кардиологических больных // Вопр. курортол. 2003. - № 5. - С. 13-20.

186. Попов В.Д. Современные аспекты квантовой теории в клинической медицине. Киев, 1996. 133 с.

187. Прокофьев В.Н., Могильницкая Л.В., Лукаш А.И. Динамика люминолзависимой хемилюминесценции цельной крови крыс приразличных кислородных режимах // Вопросы мед. химии. 1995. - №5. -С. 39-42.

188. Птицын J1.P. Биолюминесцентный анализ SOS- ответа клеток Escherichia coli // Генетика. 1996. - Т.32. - №3. - С. 354-358.

189. Радионов В.В., Колосов Ю.А., Коновалов Е.П. Влияние лазерного излучения малой интенсивности на кровь и сосуды в клинике и эксперименте // Советская медицина. 1991. - № 1. - С. 27-29.

190. Рубин А.Б. Биофизика. М.: Высшая школа, 1987. Т.2. - 303 с.

191. Рудик Д.В., Тихомирова Е.И., Бугаева И.О. Влияние низко-интенсивного лазерного излучения на активность процесса фагоцитоза. // Кафедра микробиологии Саратовского Гос.университета, 2002.

192. Самецкий Е.А. Пластичность нейрональных структур при действии пирацетама и дельта-сон индуцирующего пептида в условиях гипероксии. Дисс. .канд. биол. наук, 1996. 151 с.

193. Самойлов Н.Г. Современное состояние проблемы изучения механизма действия низкоинтенсивного лазерного излучения // Фотобюлопя та фотомедицина. 2000. - № 1,2. - С. 76-83.

194. Серебренникова Э.Г., Мамаев А.Т., Ахмедов И.Г. Особенности процессов перекисного окисления и антиоксидантной активности липидов белых крыс при глубоком многократном переохлаждении // Вопр.мед. химии. 1992. - № 3. - С. 28-30.

195. Соколовский В.В. Антиоксиданты в профилактике и терапии заболеваний // Межд. мед. обзоры. 1993. - Т.1, № 1. - С. 11-14.

196. Скулачев В.П. Возможная роль активных форм кислорода в защите от вирусных инфекций // Биохимия. 1998. - Т.63, № 12. - С. 1691-1694.

197. Стальная И.Д., Гаришвили Т.Д. Метод определения малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты // Современные методы в биохимии. М.: Медицина, 1977. С. 66-68.

198. Степаненко И.Л. Регуляция генных сетей стрессового ответа активными формами кислорода // Экологическая генетика. 2004. - T.II, № 1. - С. 412.

199. Странадко Е.Ф. Фотодинамическая терапия злокачественных опухолей и неопухолевых заболеваний // Фотодинамическая терапия злокачественных новообразований. Материалы 2 Всерос. симпозиума с междун. участием. М., 1997. - С. 20-23.

200. Ступакова М.В., Лобышева И.И., Микоян В.Д., Ванин А.Ф., Васильева С.В. Роль ионов железа в индукции оксидом азота SOS-ответа в клетках Escherichia coli // Биохимия. 2000. - Т.65, Вып.6. - С. 810-816.

201. Тарусов Б.Н., Поливода А.И., Журавлев А.И. Изучение сверхслабой спонтанной хемилюминесценции животных клеток // Биофизика. 1961. -Т.6, № 4. С. 490-492.

202. Теселкин Ю.О., Бабаенкова И.В., Любицкий О.Б. Клебанов Г.И., Владимиров Ю.А. Ингибирование сывороточными антиоксидантами окисления люминола в присутствии гемоглобина и пероксида водорода // Вопр. мед. химии. 1997. - Т.43, № 2. - С. 87-93.

203. Титов В.И. Лечение прогрессирующей стенокардии // Применение низкоинтенсивных лазеров в клинической практике. М., 1997-а. - С. 5761.

204. Титов В.И. Лечение гипертонической болезни // Применение низкоинтенсивных лазеров в клинической практике. М., 1997-6. - С. 6163.

205. Туликова З.А., Осипович В.К. Влияние средних молекул, выделенных из сыворотки крови обожженных пациентов, на состояние процессов перекисного окисления липидов в тканях животных // Вопр.мед.химии.1990. Т.36, № 3. - С. 24-26.

206. Турпаев К.Т. Активные формы кислорода и регуляция экспрессии генов // Биохимия. 2002. -1.61, № з. - С. 339-352.

207. Федосеева Г.Е., Смольянинова Н.К., Кару Т.И., Зулунин А.В. Изменение структуры хроматина лимфоцитов после облучения He-Ne лазером // Радиобиология, 1987. № 5. - С. 605-609.

208. Филлипова Т.М., Алексеев С.И. Влияние электромагнитного излучения радиочастотного диапазона на хеморецепторные структуры // Биофизика. 1995. - Т.40, № 3. - С. 624-638.

209. Хатиашвили Е.Б., Хатиашвили Н.К., Хачапуридзе Г.Г. // Применение лазеров в хирургии и медицине: Материалы симпозиума. М., 1988. -4.1.-С. 268-269.

210. Чаленко В.В. Возможные причины повышения концентрации молекул средней массы при патологии // Пат. физиол. и эксперим. терапия.1991.-№4.-С. 13-14.

211. Чудновский В.М., Бондарев И.Р., Оратовская С.В. // Лазеры и медицина. Ташкент, 1989. - 4.1. - С. 142-143.

212. Шаповалов О.Э. Влияние облучения крови гелий-неоновым лазером на течение перитонита. Автореф. дисс. .канд.мед.наук, Ростов-на-Дону, 1997.-24 с.

213. Шепотиновский В.И. Обменные процессы в эритроцитах при стрессе и экстремальных воздействиях // Пат.физиол. и эксп.терапия. 1984. - №2. - С. 70-74.

214. Шестаков В.А., Бойчевская Н.О., Шерстнев М.П. Хемилюминесценция плазмы крови в присутствие перекиси водорода // Вопр.мед.химии. -1979.-№2.-С. 132-137.

215. Шкурат Т.П. Генетические последствия действия кислорода газовых смесей под давлением на животных и человека. Автореф. дисс. .докт.биол.наук, Москва, 2000. 47 с.

216. Шугалей B.C. Система аргинин-аргиназа-мочевина мозга и печени при действии повышенного давления кислорода и низкой температуры. Дисс. .докт.биол.наук, 1980. 321 с.

217. Юрах Е.М. О влиянии гелий-неонового лазера на кровеносное русло периферических нервов // Всесоюз. конф. по примен. лазера в мед.: Тез.докл. -М.: Б.и., 1984. С. 169-180.

218. Яхно Т.А. Временные особенности фотомодификации крови низкоинтенсивным светом разных диапазонов длин волн // Проблемы лазерной медицины. М., Видное, 1997. С. 321-322.

219. Al-Moutairy AR., Tariq М. Effect of vitamin E and selenium on hypothermic restraint stress and chemically-induced ulcers // Digestivt Diseases & Sciences. 1996. - V.71, Suppl. - P. 40-46.

220. Ames B.N., Shigenaga, M.K. // Ann. N. Y. Acad. Sci. 1992. - № 663. - P. 85-96.

221. Ames B.N., Cathcart R., Schwiers E., Hochstein P. Uric acid provides an antioxidant defense in yumans against oxidant and radical-caused againg and cancer: A hypothesis // Proc.Natl.Acad.Sci. USA. 1981. - V.78, № 11. - P. 6858-6862.

222. Bensadoun R.J. Low level laser therapy: a real hope in the management of chemo-induced and radiation-induced mucositis // Cancer J. 2002. - V.8, № 3.-P. 236-238.

223. Bert P. La pression barometrique, recherch de phisiologie. Paris. 1878. -104 p.

224. Bhuyan K.C., Bhuyan D.K. // Biochim. et biophys.ata. 1977. - V.497. - P. 641-651.

225. Bidlack W.R., Tappel A.L. Fluorescent products of phospholipids during lipid peroxidation //Lipids. 1973. - V.8, № 4. - P. 203-209.

226. Bielsky B.H., Arudi R.L., Sutherland M.W. // J. Biol. Chem. 1983. - V.258. -P. 4759-4761.

227. Bligh E., Dyer W.G. Rapid methods of total lipid extraction and purification // Can. J. Biochem. Physiol. 1959. - V.37, № 8. - P. 911-917.

228. Borders C.L., Fridovich I. Comparison of the effects of cyanide hydrogen peroxide and phenylglyoxal on eucariotic and procariotic Cu, Zn superoxide dismutases // Arch. Biochem. Biophys. - 1985. - V.241. - P.472-476.

229. Boulton M., Marshall J. Repigmentation of human retinal pigment epithelial cells in vitro // Exp. Eye Res. 1985. - V.41, № 2. - P. 209-218.

230. Boulton M., Marshall J. He-Ne laser stimulation of human fibroblast proliferation and attachment in vitro. // Lasers in the Life Science. 1986. - № 1.-P. 125-134.

231. Bradley M.O., Erickson L.C. Comparison of the effects of hydrogen peroxide and X-ray irradiation on toxicity, mutation, and DNA damage/repair in mammalian cells (V-79) // Biochim. Biophys. Acta. 1981. - V.654. - P. 135141.

232. Briehl M.M., Baker A.F. Cell Death and Differentiation. 1996. - № 3. - P. 63-70.

233. Brill G.E., Panina N.P., Sonin V.K., Belyanina S.I. Influence of He-Ne laser irradiation on giant chromosomes // Effect of Low-Power Light on Biological Systems. Proc. SPIE. 1995. - V.2630. - P. 51-59.

234. Browne P., Shalev O., Hebbel R. The molecular pathobiology of cell membrane iron: the sickle red cell as a model // Free Radic. Biol. Med.1998. V.24, № 6. - P. 1040-1048.

235. Bugas N., Drlfrassy J.-F., Tardien M. Immune regulatory role of nitric oxide . within the central nervous system // Res.Immunol. 1995. - V.146, № 9. - P.707.710.

236. Bunn H., Poyton R. Oxygen sensing and molecular adaptation to hyperoxia // Physiological Reviews. 1996. - V.76, № 3. - P. 839-885.

237. Bunout D., Cambiazo V. Nutrition and aging // Revista medica de chile.1999.-V. 127, № l.-P. 82-88.

238. Burdon R.n., Gill V., Alliangana D. // Free Radic. Res. 1996. - V.24. - P. 8193.

239. Cantoni O., Sestili P., Cattabeni F., Bellomo G., Pou S., Cohen M., Cerutti P. // Eur. J. Biochem. 1989. - V. 182. - P. 209-212.

240. Cheng I.W., Zhang L.P., Li F. Hemin-promoted peroxidation of erythrocyte membranes // Blood. 1991. - V.78, № 10. - P. 404 a.

241. Chiu DTY, Kuypers FA, Lubin B. Lipid peroxidation in human red cells // Semin Hematol. 1989. - V.26. - P. 257-276.

242. Chiu DTY, Liu TZ. Free radical and oxidative damage in human blood cells // J. Biomedical Scienc. 1997. - № 4. - P. 256-259.

243. Chiu DTY, Lubin В., Shohet SB. Peroxidative reactions in red cell biology. In: Pryor WA // Free Radicals in Biology. New York, Academic Press. -1982.-P. 115-160.

244. Cleveland L. The whole life cycle of the chromosomes and their clase systems // Trans. Am. Phil. Soc. New series. 1949. - V.39. - P. 1-100.

245. Crawford D.K., Amstad P., Yin Foo D.D., Cerutti P.A. // Mol. Carcinog. -1989.-№2.-P. 136-143.

246. Cross M., Milgrom L. Chemicals and laser combat cancer // New Sci. 1984. - V.104. - P. 1435-1436.

247. Davies K.I.A., Lin S.W., Pacifici R.E. Protein damage and degradation by oxygen radicals.II. Degradation of denatured protein // J. Biol.chem. 1987. -V.262. - P. 9914-9920.

248. Demple В., Harrison L. // Ann. Rev. Biochem. 1994. - V.63. - P. 915-948.

249. Distel L.V., Shussler H. // Curr. Topics Biophys. 1996. - V.20. - P. 42-46.

250. Dizdaroglu M. // Mutat. Res. 1992. - V.275. - P. 331-342.

251. Dong H., Xiong L., Zhu Z., Chen S., Hou L., Sakabe T. Preconditioning with hyperbaric oxygen and hyperoxia induces tolerance against spinal cord ischemia in rabbits // Anesthesiology. 2002. - V.96, № 4. - P. 907-912.

252. Dougherty T.J. Use of hematoporphyrin in photodynemic terapy // Photochem Photobiol. 1993. - V.58. - P. 895-900.

253. Droge W. Free radicals in the physiological control of cell function // Physiol. Rev. 2002. - V.82. - P. 47-95.

254. Ере B. Genotoxicity of singlet oxygen // Chemico-biological interaction. -1991. V.80, № 3. - P. 239-260.

255. Erenberg L., Moutsehen J., Moutsehen-Dahmen M. Aberrations chromosomiques produites dans des graines par de hautes pressions d'oxygene // Acta chemica scandinavica. 1957. - V.l 1, № 8. - P. 1428-1429.

256. Evansstorms R.B., Cidlowski J.A. // Exp. Cell Res. 1997. - V.230. - P. 121132.

257. Fenn W.O., Gershman R., Gilbert D.L. Mutagenic effects of high oxygen tension on Echerichia coli // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1957. - V.43, № 3. -P. 1027-1031.

258. Forman H. J., Rotman E.I., Fisher A.B. Roles selenium and sulfur-containing ami-noacids in protection against oxygen toxity // Lab. Invest. 1983. - V.49. -P. 148-156.

259. Fridovich I. Oxygen radicals, hydrogen peroxide, and oxygen toxicity // Free radicals in biology. New York: Acad. Press. 1976. - V.l. - P. 239-277.

260. Fridovich I. Overview: biological sources of O2" // Meth. Enzymol. 1984. -V.105.-P. 59-61.

261. Fried R. Enzymatic and non-enzymatic assay of superoxide dismutase // Biochem. 1975. - V.57, № 5. - P. 657-660.

262. Fuchs D., Baier-Bitterlich G., Wede I., Wachter H. Oxidative Stress and the Molecular Biology of Antioxidant Defenses // CSHL Press. 1997. - P. 139167.

263. Fujimaki Y., Shimoyama Т., Liu Q., Umeda Т., Nakaji S., Sugawara K. Low-level lader irradiation attenuates production of reactive oxygen species by human neutrophils // J. Clin. Laser Med. Surg. 2003. - V.21, № 3. - P. 165170.

264. Funk J.O., Kruse A., Kirchner H. Cytokine production after helium-neon laser irradiation in culture of human peripheral blood mononuclear cells // J Photochem Photobiol 1992. - V.16, № 3. - P. 347-355.

265. Funk J.O., Kruse A., Neustock P., Kirchner H. Helium-neon laser irradiation induces effects on cytokine production at the protein and the RNA level // Exp. Dermatol. 1993. - V.2, № 2. - P. 75-83.

266. Gagliardi S., Atlante A., Passarella S. A novel property of adenine nucleotides: sensitivity to helium-neon laser in mitochondrial reactions // Biochem Mol Biol Int. 1997. - V.41, № 3. - P. 449-460.

267. Gibian M.J., Galaway R.A. Steady-state kinetics of lipoxygenase oxygenation of unsaturated fatty acids // Biochemistry. 1976. - V.15, № 19. - P. 42094214.

268. Goranova V., Marinckiev M., Goranova M., Sapunarova K. Application of low intensity laser radiation in extravasal infiltrates caused by cytostatics in children with acute leukemia // Folia Med (Plovdiv). 1999. - V.41, № 1. - P. 92-95.

269. Grisham M.B. Myoglobin catalyzes the oxidation of GHS using Admamyum stimulated production of hudrogen peroxide // Circulation. 1989. - V.80, № 4.-P. 11-29.

270. Grossman N., Schmid N., Reuveni H., Halevy S., Lubart R. 780 nm low power laser irradiation stimulate proliferation of keratinocyte culture: involment of reactive oxygen species // Laser Surg Med. 1998 - V.22, № 4. -P. 212-218.

271. Guskov E.P., Shkurat T.P., Malkhosyan S.R. DNA dependent consequences of oxidative stress // YIII International Meeting on High Pressure Biology, Moskow, Russian, 2-6 June. - 2003. - P. 53-54.

272. Guskov E.P., Shkurat T.P., Shimanskaya E.I., Guskova S.S. Genetics effects of GBO therapy // Mutation Research. 1990. - V.241. - P. 341-347.

273. Haina D., Brunner R., Landthaler M., Braun-Falco O., Waidelich W. Animal experiments on Light-Induced wound-healing // Development of Laser. 4th Congr. of Inter, Soc. For Laser Surgery. Japan, Tokyo. 1981. - Session 22. -P. 1-3.

274. Halliwell B. Antioxidant characterization. Methodology and mechanism // Biochem. Pharmacol. 1995. - V.49. - P. 1341-1348.

275. Halliwell B. Can oxidative DNA damage be used as a biomarker of cancer risk in humans? Problems, resolutions and preliminary results from nutritional supplementation Studies // Free radical research. 1998. - V.29, № 6. - P. 469-486.

276. Halliwell В., Gutteridge J.M.C. The importance of free radicals and catalytic metal ions in human diseases // Molec. Aspects Med. 1985. - № 8. - P. 89193.

277. Halliwell В., Gutteridge J.M.C. The antioxidants of human exstracellular fluids // Archives of Biochem. and Biophys. 1990. - V.280, № 1. - P. 1-8.

278. Hildebrandt G. Wirkprinzipien in der Physikalischen Therapie // Hrsg. M. Buhring. R.Saller, Berlin. 1986. - P. 33-55.

279. Hirase H., Nikolenko V., Goldberg J.H., Yuste R. Multiphoton stimulation of neurons // J Neurobiol, Columbia University, New York. 2002. - V.51, № 3. - P. 237-247.

280. Hirschl M., Katzenschlager R., Ammer K., Melnizky P., Rathkolb O., Kundi M. Double-blind, randomised, placebo controlled low level laser therapy study in patients with primary Raynaud's phenomenon // Vasa. 2002. - V.31, № 4. - P. 280.

281. Hockenbery D.M., Oltavai Z.N., Yin X.-M., Milliman C.L., Korsmeyer S.J. // Cell. 1993. - V.75. - P. 241-251.

282. IARC. Hydrogen peroxide, in: Monographs on the Evaluation of the Carcinogenic Risk of Chemicals to Humans // International Agency for Research on Cancer, Lyon. 1985. - V.36. - P. 285-314.

283. Itzkan I., Tang S. Laser wound healing can be explained by the photodissociation of oxyhemoglobin // Lasers in Surgery and Medicine. -1988.-№8.-P. 175.

284. Joenje H. Genetic toxicology of oxygen. // Mutat. Res. 1989. - V.219. - P. 193-208.

285. Joenje H., Ostra A. Oxygen-induced cytogenetic instability in normal human lymphocytes. //Hum. Genet. 1986. - V.74. - P. 438-440.

286. Johnson G.L., Kaslow H.R., Farfel Z., Bourine H.R. Genetic analysis of gormon-sensitive adenylate cyclase // Advances in Cyclic Nucleotide Research., New-York, Raven. 1980. - V.9. - P. 171-206.

287. Jones D.P., McConcey D.J., Nicotera P., Orrenius S. // J. Biol. Chem. 1989. -V.264.-P. 6398-6403.

288. Kamikawa K., Tawa M. Clinical application of low-intensity lasers. Therapy of pain and inflammation // Nippon Rinsho. 1987. - V.45, № 4. - P. 756-761.

289. Kandolf-Sekulovic L., Kataranovski M., Pavlovic M.D. Immunomodulatory effects of lowointensity near-infrared laser irradiation on contact hypersensitivity reaction // Photoderm. Photoimmunol. Photomed. 2003. -V.19, № 4. - P. 203-212.

290. Kaplan J.H., Somlyo A.P. Flash photolysis of caged compounds: new tools for cellular physiology // Trends Neurosci. 1989. - V.12, № 2. - P. 54-59.

291. Karu T.I. Photobiology of low-power laser therapy. London, Paris, New York, Harward Acad. Pablishers, 1989. 187 p.

292. Karu T.I. Effect of Visible Radiation on Cultured Cells // Photochem. Photobiol. 1990. - V.52, № 6. - P. 1089-1098.

293. Каш T.I. Primary and secondary mechanisms of action of visible and near infra red radiation on cells // J. Photochem Photobiol, 1999. V. 49, № 1. - P. 1-17.

294. Karu T.I., Pyatibrat L.V., Kalendo G.S. Cell attachment modulation by radiation from a pulsed light diode and various chemicals // Lasers in Surg. Med. 2001. - V.28, № 3. - p. 227-236.

295. Karu Т., Smolyaninova N., Zelenin A. Long-term and Short-term Responses of human Lymphocytes to He-Ne Laser Irradiation // Laser in Life Sci. -1991.- V.4,№3.-P. 167-178.

296. Kim J., Linn S. // Nucl. Acids Res. 1988. - V.16. - P. 1135-1141.

297. Klebanov G.I., Teselkin Y.O., Babenkova I.V., Bashkueva T.Y., Chichuk T.V., Vladimirov Y.A. Low Power Laser Irradiation Induces Leukocyte Priming // Gen. Physiol Biophys. 1998. - V.17, № 4. - P. 365-376.

298. Klebanov G.I., Kreinina M.V., Poltanov E.A., Khristoforova T.V., Vladimirov Y.A. Mechanism of therapeutic effect of low-intensity infrared laser radiation // Bull Exp Biol Med. 2001. - V. 131, № 3. - P. 239-241.

299. Kohen R., Nyska A. Oxidation of biological systems: oxidative stress phenomena, antioxidants, redox reactions, and methods for their quantification // Toxicol. Pathology. 2002. - V.30, № 6. - P. 620-650.

300. Korkushko A.O., Chupryna G.N. Low intensity laser irradiation in therapy of elderly patients with occlusive artery diseases // Lik Sprava, 2002. № 8. - P.96.98.

301. Kosumbo W.J., Cerutti P.A. Antitumorogenesis and anticarcinogenesis mechanisms // Plenium Press, New York. 1986. - P. 491-509.

302. Kovalchuk L.V., Klebanov G.I., Ribarov S.R., Kreinina M.V., Aptsiauri N.E., Gankovskaya L.V., Vladimirov Yu.A. Priming of phagocytes by cytokins and water soluble products of lipid peroxidation // Biomed Sci. 1991. - V.2, № 3. -P. 11-21.

303. Kuzin В., Roberts I., Peunova N., Enikolopo G. // Cell. 1996. - V.87. - P. 639-649.

304. Lammerant J., Huynh-Thu T. Blunted response of mean coronary resistance to hyperoxia after coronary reperfiision: Program and Hbstr // Inter. Meet. Int. Soc. Heart. Res, Glasgon. 1990. - V.22, № 3. - P. 52.

305. Li-Xul Z, Kunihiko I, Kazuhisa T, Masana O. Inhibitory effect of a-tocopherol on methemoglobin formation by nitric oxide in normal and acatalasemic mouse hemolysates // Physiol.Chem.and Phys. and Med. NMR. -1993. V.25, № 4. - P. 253-260.

306. Lowry O.H, Rosenbrough N.I, Farr A.L, Randall R.J. Protein measurement with folin phenol reagent // J. Biol. Chem. 1951. - V. 193, № 1. - P. 265-275.

307. Luo Y„ Henle E.S, Linn S. // J. Biol. Chem. 1996. - V.271. - P. 2116721176.

308. Macdonald A. Homeostasis, adaptation and high pressure // Basic and Applied High Pressure Biology. University of Rochester Press. 1994. - P. 259-276.

309. Malomed S. Gastrular blockage of frogs eggs produced by oxygen at atmospheric pressure // Exp. Cell Res. 1957. - V. 13. - P. 391-442.

310. Minetti M., Mallozzi L., Scorra G., Scott M., Kuypers E. Role of carboncentered radicals in the conversion of hemoglobin to hemicromes // Free Radic. Biol. And Med. 1990. - V.5, № 5. - P. 87.

311. Morehouse L.A., Thomas C.E., Aust S.D. // Arch. Biochem. Biophys. 1984. - V.232. - P 366-377.

312. Morel F., Doussiere J., Vignais P.V. The superoxide-generating oxidase in phagocytic cells. Physiological, molecular and pathophysiological aspects. Review//Eur J Biochem. 1991. - V.201, № 3. - P. 523-546.

313. Moutschen-Dahmen M., Moutschen J., Erenberg L. Chromosome disturbances and mutation produced in plant seeds by oxygen at high pressures // Hereditas. 1959. - V.45. - P. 230.

314. Muller P.J., Wilson B.C. Photodynamic therapy of malignant brain tumours // Can. J. Neurol Sci. 1990. - V.l7, № 2. - P. 193-198.

315. Murerell G.A.C., Francis M.J.O., Bromly L. Modulation of fibroblast proliferation by oxygen free radicals // Biochem J. 1990. - V.265, № 3. - P. 659-665.

316. Nguyen Т., Brunson D., Crespi C.L., Penman B.W., Wishnok J.S., Tannenbaum S.R. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1992. - V.89. - P.3030-3034.

317. Nguyen Т., Sherratt P.J., Pickett C.B. Regulatoiy mechanisms controlling gene expression mediated by the antioxidant response element // Annu Rev Pharmacol Toxicol. 2003. - V.43. - P 233-260.

318. Nicotera P., Bellomo G., Orrenius S. // Chem. Res. Toxicol. 1990. - № 3. -P. 484-494.

319. Nissan M., Rochkind S., Razon N., Bartal A. He Ne Laser Irradiation Delivered Transcutaneously: Its Effect on the Sciatic Nerve of Rats // Lasers in Surgery and Medicine. 1986. - № 6. - P. 435-438.

320. Oasevich I.A., Shargorodskii A.G. Low-intensity infrared laser radiation in the diagnosis and combined treatment of acute nonspecific lymphadenitis ofthe face and neck in children // Stomatologiia, Mosk. 1999. - V.78, № 2. - P. 28-30.

321. Ocana Q.J.M., Gomez V.R. Moreno M.M., Santisteban VJ.M. Sister chromatid exchage induction in sheep peripheral blood mononuclear cells by helio-neon laser radiation // Mutat. Res. 1997. - V.377, № 1. - P. 69-75.

322. Ohshiro Т., Calderhead R.G. Low Level Laser Therapy: A Practical Introduction // Chichester-New York, «John Willy and Sons», 1988. 137 p.

323. Onkoshi A., Abe K., Kodera Y., Inada Y. Oxidation of 11-deoxycorticosterone in methanol with hemin and hydrogen peroxide // Agr. And Biol. Chem. 1989. - V.53, № 7. - P. 2013-2014.

324. Packer J.E., Kettle A.J. Free radical research and the society from radical research // Chem. N.Z. 1994. - V.58, № 4. - P. 14.

325. Parshad R., Sanford K. Oxygen supply and stability of chromosomes in mouse embryo cells in vitro // J. Natl. Cancer Inst. 1971. - V.47. - P. 10331035.

326. Pavlovic D.D., Uzunova P., Galabova T. Polyamines as modulators of lipoperoxidation // Gen. Physiol.and Biophys. 1992. - V. 11, № 2. - P. 203211.

327. Peskin, A.V. //Biosci. Rep. 1997. - № 17. - P. 85-89.

328. Phillips В., James Т., Anderson D. Genetic damage to CHO cells exposed to enzymically generated active oxygen species // Mutation Res. 1984. - V.126. -P. 265-271.

329. Povirk L.F., Houlgrave C.W., Han Y.-H. // J. Biol. Chem. 1988. - V.263. -P. 19263-19266.

330. Prehn H., Kampmann R., Rehwald V. Quantitativer wirkungsnachweis der konservativen Infrarot-Laseatherapie auf das meuromuskulare system des menschem // L. Phys. Mad. 1985. - V.24, № 5. - P. 296.

331. Rank H., Chirico S., Grootveld M., Halliwell B. UMC acid «an endogenous marker probe» for generation of reactive oxygen species ? // Free Radic. Biol.and Med. 1990. - V.5, № 1. - P. 190.

332. Richter C., Frei B. Free Radic. // Biol. Med. 1988. - № 4. - P. 365-375.

333. Rosen G.M., Finkelstein E., Rauckman E.J. // Arch.Biochem. and Biophys. -1982.-V.215.-P. 367-379.

334. Rosen G.M., Rauckman E.J., Wilson R.L. Jr, Tschanz C. Production of superoxide during the metabolism of nitrazepam // Xenobiotica. 1984. -V.14,№ 10.-P. 785-794.

335. Rothfuss A., Dennog C., Speit G. Adaptive protection against the induction of oxidative DNA damage after hyperbaric oxygen treatment // Carcinogenesis. -1998. V.19,№ 11. -P. 1913-1917.

336. Sahnoun Z., Jamoussi K., Zeghal K.M. Free radicals: fundamental notions and methods of exploration // Therapie. 1997. - V.52, № 4. - P. 251-270.

337. Sahnoun Z., Jamoussi K., Zeghal K.M. Free radicals: fundamental notions and methods of exploration. Part 2 // Therapie. 1998. - V.53, № 4. - P. 315339.

338. Sancar A., Sancar G.B. // Ann. Rev. Biochem. 1988. - V.57. - P. 29-67.

339. Saran M., Bors W. Radical reactions in vivo an overview // Radiat Environ Biophys. - 1990. - V.29. - P. 249-262.

340. Savill P.J., Halliman Т., Gor J. ATP and glutathione mediated inhibition of lipid peroxidation in rat liver systems // Biochem. Soc. Trans. 1992. - V.20, №2.-P. 127-129.

341. Schindl A., Schindl M., Schon H., Knobler R., Havelec L., Schindl L. Low-intensity laser irradiation improves skin circulation in patients with diabetic microangiopathy // Diabetes Care, Austria. 1998. - V.21, № 4. - P. 580-584.

342. Schreck R., Rieber P., Baeuerle P.A. // EMBO J. 1991. - V. 10. - P. 22472258.

343. Schulze-Osthoff K., Los M., Bauerle P.A. Redox signalling by transcription factors NF-kb and AP-1 in lymphocytes // Biochem Pharmacol. 1995. -V.50, № 6.-P. 735-741

344. Shafman T. et al. //Nature. 1997. - V.387. - P. 520-523.

345. Shigenaga M.K., Gimeno C.J., Ames B.N. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1989.-V.86.-P. 9697-9701.

346. Skulachev V.P. // Quart. Rev. Biophys. 1996. - V.29. - P. 169-202.

347. Sidorov V.D., Mamiliaeva D.R., Derevnina N.A., Reformatskaia S.I. The combined laser therapy of rheumatoid arthritis // Vopr Kurortol Fizioter Lech Fiz Kult. 2000. - № 2. - P. 13-18.

348. Simunovic Z., Ivankovich A.D., Depolo A. Wound healing of animal and human body sport and traffic accident injuries using low-level laser therapy treatment //J Clin Laser Med Surg. 2000. - V.18, № 2. - P. 67-73.

349. Slupphaug G., Kavli В., Krokan H.E. The interacting pathways for prevention and repair of oxidative DNA damage // Mutat Res. 2003. - V.531, № 1-2. -231-51.

350. Sturrock J., Nunn J. Chromosomal damage and mutations after exposure of Chiness hamster cells to high concentrations of oxygen // Mutation Res. -1978.-V.57.-P. 27-33.

351. Tappel A.L. Lipid peroxidation damage to cell components // Fed. Proc. -1973. V.32, № 8. - P. 1870-1874.

352. Thacker J. The molecular nature of mutations in cultured mammalian cells: a review. Mutat Res. 1985 Jun-Jul;l50(1-2):431-42

353. Tsai J.C., Kao M.C. The biological effects of low power laser irradiation on cultivated rat glial and glioma cells // Clin Laser Med Surg., Taiwan, 1991.1. V.9,№ l.-P. 35-41.

354. Vaca C.E., Wilhem J., Harms-Ringdahl M. Interactions of lipid peroxidation products with DNA // Mutat. Rez. Rev. Genet. Toxicol. 1988. - V.195. - P. 137-139.

355. Vacca R.A., Marra E., Quagliariello E., Greco M. Increase of both transcription and translation activities following separate irradiation of the in vitro system components with He-Ne laser // Biophys. Res. Commun. 1994.- V.203, № 2. P. 991-997.

356. Vinck E.M., Cagnie B.J., Cambier D.C. Increased fibroblast proliferation induced by light emitting diode and low power laser irradiation // Lasers Med.Sci. 2003. - № 18. - P. 95-99.

357. Vladimirov Iu.A. Free radicals and antioxidants // Vest.Ross.Akad.Med.Nauk.- 1998.-№7.-P. 43-51.

358. Winrow V.R., Winyard P.G., Morris C.J., Blake D.R. Free radicals in inflammation: second messengers and mediators of tissue destruction // Br. Med Bull. 1993. - V.49, № 3. - P. 506-522.

359. Yu W., Xu L.H., Nairn J.O. et al. // Lasers in Surg.Med. 1997. - V.21, № 3. -P. 262-268.

360. Yusa T. Chromosomal and teratogenic effects of oxygen in the mouse // Br. J. Anaesth. 1981. - V.53. - P. 505-510.

361. Zimmerman R., Cerutti P. Active oxygen acts as a promoter of transformation in mouse embryo C3H/10T1/2/C18 fibroblasts // Proc Natl Acad Sci USA. -1984. V.81, № 7. - P. 2085-2087.

Информация о работе

Пономарева, Марианна Дмитриевна
кандидата биологических наук
Ростов-на-Дону, 2005
ВАК 03.00.04

Диссертация

Влияние инфракрасного низкоинтенсивного лазерного излучения на соматические ткани животных при ГБО-индуцированном окислительном стрессе - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы