Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Влияние бишофитсодержащей рапы соленого озера "Малое Лиманское" Астраханской области на функциональное состояние и свободнорадикальный гомеостаз самцов крыс

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Влияние бишофитсодержащей рапы соленого озера "Малое Лиманское" Астраханской области на функциональное состояние и свободнорадикальный гомеостаз самцов крыс"

На правах рукописи

□03473Э52

Мухамедова Наталья Анатольевна

Влияние бишофитсодержащей рапы соленого озера «Малое Лиманское» Астраханской области на функциональное состояние и свободнорадикальный гомеостаз самцов крыс

03.00.13 - физиология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

1 2!Ш;;200Э

Астрахань-2009

003473952

Работа выполнена на кафедре молекулярной биологии, генетики и биохимии Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Астраханский государственный университет»

Научный руководитель - доктор биологических наук, профессор

Кондратенко Елена Игоревна

Официальные оппоненты - доктор биологических наук, доцент

Лазько Марина Владимировна

доктор биологических наук, доцент Котельников Андрей Вячеславович

Ведущая организация — Ставропольский государственный

университет

Защита состоится 26 июня 2009 года в 14 часов на заседании диссертационного совета ДМ 212.009.01 при Астраханском государственном университете по адресу: 414000, Астрахань, пл. Шаумяна, д.1

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Астраханского государственного университета по адресу: 414000, Астрахань, пл. Шаумяна, Д.1

Автореферат разослан 25 мая 2009 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор биологических наук

АКТУАЛЬНОСТЬ РАБОТЫ

Неблагоприятная экологическая обстановка, а также стресс-обусловленная нагрузка на живой организм являются причиной развития макро- и микрополиэлементозов. Все это приводит к биохимическим и функциональным изменениям, которые негативно отражаются на состоянии здоровья, работоспособности и качестве жизни человека. Поэтому исследование зависимости физиологических процессов от обеспеченности их макроэлементами стало предметом изучения многих известных ученых (Carl, G, 1994; А.П. Авцин, 1991; H.A. Агаджанян, Н.В. Ермакова, 1997; А.В.Скальный, А.Т.Быков, 2003)

Одним из основных макроэлементов в организме человека является магний. Существующие средства восполнения недостатка магния в организме представляют собой лекарственные препараты и пищевые добавки, которые принимаются перорально (Tsuji Н. Et. Fl., 1994; Компанцева Е.В., и соавт., 2002; Забелина В.Д., 2003; Скальный A.B., 2004). Отличительной особенностью магнийсодержащих препаратов при их наружном применении является их способность снимать воспалительные реакции и болевой синдром при различны заболеваниях ОДС, оказывать мощный седативный эффект и улучшать физико-химические показатели кожи при его наружном применении (Стрельцов Д.А., 2001, 2002; Мотов A.A., 2003, 2004, 2005).

Магнийсодержащие минералы эффективно применяются в бальнеологии и косметологии ( Dyckner, Webster, 1984; Nigam S. с соавт., 1986; Смирнова, JI.A., 1994; Спасов, A.A., 2003; Щава С.Н., 2001). В этой связи особое внимание привлекает минерал бишофит, содержащий максимальное количество магния хлорида (до 95-96 % в сухом остатке). Условия существования бишофитсодержащей рапы при непосредственном контакте с окружающей средой формируют сложную органоминеральную композицию, физиологические особенности, действия которой не исследованы. В зарубежной практике данный минерал, а также содержащая его рапа Поморийского озера (Болгария) и Мертвого моря (Израиль, Иордания), используется как основа для противовоспалительных средств наружного применения. Подземные залежи бишофита

меются в Прикаспийской впадине. В Астраханской области также имеются апасы магнийсодсржащих веществ в многочисленных соленых озерах, дним из которых является озеро «Малое Лиманское». Физиологические собеииости действия Астраханского озерного бишофита не исследованы, иологическая активность озерной рапы «Малое Лиманское» должна иметь яд определенных особенностей по сравнению с подземным минеральным ишофитом. В связи с этим изучение функционального состояния организма од влияиием рапы озера «Малое Лиманское» является актуальным.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ

Установить влияние бишофитсодержащей рапы соленого озера Малое Лиманское» Астраханской области на физиологические параметры свободнорадикальный гомеостаз самцов крыс.

" ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ . Оценить токсикологическую безопасность рапы Астраханского озера

«Малое Лиманское». . Исследовать влияние физиологически адекватного разведения раствора

рапы, вводимого внутрижелудочно, на показатели крови крыс. . Изучить влияние рапы соленого озера «Малое Лиманское» на

ориентировочно-исследовательское поведение крыс. . Оценитьэффектрастворарапына интенсивность перекисного окисления липидов (ПОЛ) по следующим показателям: содержание малонового диальдегида (МДА), скорость спонтанного и аскорбатзависимого ПОЛ в гомогенатах тканей печени, почек, миокарда; уровень промежуточных продуктов ПОЛ (ацилгидроперекиси, кетодиены и сопряженные триены, диеновые конъюгаты) в липидных экстрактах плазмы крови и степень перекисного гемолиза эритроцитов. . Изучить влияние раствора рапы на процессы окислительной модификации белков (ОМБ) плазмы крови и миокарда (кетодини трофенилгидразоны, алифатические альдегидо- и кетонопроизводные динитрофенилгидразонов основного характера) и сопоставить характер изменения интенсивности ПОЛ и ОМБ. Изучить изменения активности ферментативного звена антиоксидантной

системы самцов крыс и активность антиоксидантного белка крови - церулоплазмина - под воздействием растворов бишофитсодержащей рапы (PAP) и Волгоградского бишофита (РВБ). 7. Провести сравнительный анализ эффектов воздействия растворов бишофитсодержащей рапы соленого озера «Малое Лиманское» Астраханской области и Волгоградского бишофита на физиологические параметры и показатели свободнорадикального гомеостаза самцов крыс.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА

Впервые исследован химический состав рапы соленого озера «Малое Лиманское» Астраханской области. В рапе обнаружены бальнеологически значимые количества бишофита, соединений калия, брома и бора, органические компоненты и установлена ее токсикологическая безопасность.

Обнаружено влияние внутрижелудочного введения бишофитсодержащей рапы на структуру ориентировочно-

исследовательского поведения самцов крыс, заключающееся в снижении показателей тревожности.

Впервые установлены тканеспецифические изменения интенсивности перекисного окисления липидов и окислительной модификации белков в условиях внутрижелудочного введения бишофитсодержащей рапы.

Показано, что бишофитсодержащая рапа соленого озера «Малое Лиманское» Астраханской области способствует активации ферментативного звена антиоксидантной системы самцов крыс. Специфика влияния бишофитсодержащей рапы соленого озера «Малое Лиманское» Астраханской области заключается в значительном снижении интенсивности окислительной модификации белков миокарда. Она не является полным аналогом Волгоградского бишофита.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ

Экспериментально доказана целесообразность использования рапы соленого озера «Малое Лиманское» в качестве бальнеологического средства.

Разработанытехническиеусловиянаприменениебишофитсодержащей

рапы и качестве косметического сырья.

Созданы рецептуры и отработана технология введения бишофитеодержащей рапы в косметические средства для волос и кожи головы.

Физиологически обоснована целесообразность применения бишофитеодержащей рапы соленого озера «Мал оеЛиманское» Астраханской области в бальнеологической практике.

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ

1. Рапа озера «Малое Лиманское» при внутрижелудочном введении в изоосмотическом разведении неявляется токсичной,тканеспецифически изменяет про- и антиоксидантное равновесие в организме самцов крыс, способствуетизменениюструктуры ориентировочно-исследовательского поведения животных и уменьшения уровня тревожности.

2. Физиологические аспекты бальнеологической реакции, развивающейся под воздействием внутрижелудочного введения рапы озера «Малое Лиманское» Астраханской области, заключается в активации ферментативного звена антиоксидантной системы и уменьшении интенсивности окислительной модификации белков миокарда.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ

Результаты исследования доложены на конференциях и опубликованы в материалах IX международной научной конференции «Эколого-биологические проблемы бассейна Каспийского моря» (2006), II Всероссийской научной конференции «Экологические проблемы природных и урбанизированных территорий» (Астрахань, 2008), VI международной практической конференции «Человек и животные» (Астрахань, 2008), Всероссийского форума «Здравница» (Москва, 2008), XVI Российского национального конгресса «Человек и лекарство» (Москва, 2009), IV Международной (XIII Всероссийской) Пироговской студенческой научной медицинской конференции (Москва, 2009), X Всероссийской научно-практической конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Молодежь и наука XXI века», посвященная 85-летию со дня рождения В.П. Астафьева (Красноярск, 2009), научной конференции с международным участием «Научный прогресс на рубеже

тысячелетий - 2009» (Прага, 2009), Каспийском инновационном форуме (Астрахань, 2009).

ПУБЛИКАЦИИ

По теме диссертации опубликовано 8 работ.

СТРУКТУРА И ОБЪЕМ ДИССЕРТАЦИИ

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, изложения и обсуждения результатов собственных исследований, выводов. Работа изложена на 125 стр., содержит 14 таблиц, 2 рисунка, список литературы включает 143 источника, из которых 57 иностранных.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Санитарно-микробиологические показатели рапы соленого озера «Малое Лиманское» Лиманского района Астраханской области соответствуют установленным нормам. Токсичные компоненты содержатся в количествах, значительно меньших допустимых концентраций. Содержание в рапе радионуклидов не превышает пределов, установленных нормами радиационной безопасности (Бальнеологическое заключение ФГУ «РНЦ ВМиК Россздрава» № 14/98 от 04.03.2008 г.).

Изучение химического состава рапы проводили лазерным масс-спектральным методом на приборе ЭМАЛ-2.

Изучение токсикологической безопасности магнийсодержащей рапы озера Малое Лиманское Астраханской области проводилось двумя способами: 1) по санитарно-микробиологической оценке (инфузории-парамеции) («Методы определения токсичности» ГОСТ 13496.7-97); 2) при помощи методики определения токсичности в биопробе на лабораторных животных (мыши) («Методические указания по определению токсичности кормов, кормовых добавок и сырья для производства кормов в биопробе на лабораторных животных» », № 13-5-02/0795 от 26.06.2003г.).

Схема эксперимента. Исследования проводились на 60 белых беспородных крысах-самцах со средней массой 250 г. Возраст животных составлял 6 месяцев.

В качестве препарата сравнения был выбран хорошо изученный минеральный бишофит Волгоградского месторождения. Использовался

раствор минерала бишофит, очищенный от техногенных примесей. Самцы крыс были разделены на три группы: 1) животные, получавшие внутрижслудочно NaCI (0,9% раствор); 2) животные, получавшие внутрижелудочно раствор рапы Астраханского соленого озера в физиологически адекватном разведении; 3) животные, получавшие внутрижелудочно раствор Волгоградского бишофита. Процедура введения исследуемых веществ продолжалась в течение 10 дней (ежедневно, однократно). Внутрижелудочные введения производили с помощью зонда в дозе 3 мл/кг. Все животные содержались в стандартных условиях вивария со свободным доступом к воде и пище. Умерщвление животных декапитацией проводили после предварительной наркотизации внутрибрюшинным введением этаминала натрия в дозе 4 мг/100 г массы тела.

Приготовление растворов. Раствор Астраханской рапы (PAP) и раствор Волгоградского бишофита (РВБ) разводили до получения изотонического раствора. Точку изотоничности находили с помощью теста на осмотическую резистентность эритроцитов (Кошев В.И., 2004).

До и после эксперимента оценивали вес животных. Определяли изменения относительной массы надпочечников и щитовидной железы. В крови определяли уровень гемоглобина (с помощью набора «LACHEMA») и цветовой показатель, количество эритроцитов и лейкоцитов (подсчет производили стандартным способом с помощью камеры Горяева).

Ориентировочно-исследовательская активность. Влияние раствора Астраханской рапы на ориентировочно-исследовательское поведение изучалась в условиях теста «открытое поле» (Bureä Y., Bureäovä О., 1983), при котором регистрировали следующие показатели: количество пересеченных квадратов (горизонтальная двигательная активность), количество вставаний на задние лапы (вертикальная двигательная активность), количество обследованных отверстий (ориентировочно-исследовательская активность), число выходов в центральную зону, количество актов груминга, количество фекальных болюсов (эмоциональный фактор).

Определение активности щелочной фосфатазы в плазме крови при внутрижелудочном введении раствора Астраханской рапы проводили унифицированным методом по «конечной точке». Метод основан на

образовании п-нитрофенола из п-нитрофенилфосфата в реакции со щелочной фосфатазой.

Определение активности церулоплажина в сыворотке крови. Определение активности основного медьпротеида крови - церулоплазмина проводили по ускоренной методике, предложенной Э.В. Ten (2007). Метод основан на реакции окисления парафенилендиамина. Активность церулоплазмина измеряли в единицах оптической плотности.

Интенсивность свободнорадикального окисления определяли по скорости перекисного окисления липидов в гомогенатах тканей печени, почек, миокарда по методу И.Д. Стальной и Т.Г. Гаришвили (1977). Критериями оценки ПОЛ в тканях были содержание МДА, скорость спонтанного и аскорбатзависимого ПОЛ. Промежуточные продукты ПОЛ в плазме крови определяли по методу И.А. Волчегорского и соавторов (1989). В изопропанольной и гептановой фракциях плазмы крови определяли уровень ацилгидроперекисей, диеновых конъюгатов, кетодиенов и сопряженных триенов. Активность каталазы определяли в тканях почек, миокарда и в плазме крови при помощи методики М.А. Королюка и соавторов (1988). Для определения перекисного гемолиза эритроцитов использовали модификацию метода определения степени перекисного гемолиза эритроцитов A.A. Покровского и A.A. Абрарова (1964), которую предложили А.Е. Лазько, Р.И. Асфандияров и A.A. Рязаев (1993). Оценку степени окислительной модификации белков проводили по методике Е.Е. Дубининой и соавт. (1995) метод оценки и принцип которого основан на цепи взаимодействия окисленных аминокислотных остатков белков с 2,4-динитрофенилгидразином, в результате чего образуются 2,4-динитрофенилгидразоны, алифатические альдегидо- и кетонопроизводные динитрофенил гидразонов основного характера. Для определения активности СОД в биологических материалах использовали адаптированный метод, предложенный С. Чевари и соавт. (1984). Метод основан на способности СОД конкурировать с нитросиним теетразолием (HCT) за супероксидные анионы. Полученные данные были подвергнуты статистической обработке с использованием критерия Стьюдента и коэффициента корреляции.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Исследовавшийся образец рапы был отобран в конце лета (17.08.0 г.) при минимальном уровне вод и, соответственно, при максимально значении минерализации - 368 г/л.

Таблица

Лазерный масс-спектральный анализ элементного состава рапы соленого озера «Малое Лиманское» Астраханской области

Элемент Содержание в атом. % Содержание в масс. %

В 0,0045 0,0018

С 0,7701 0,3463

N 0,0082 0,0043

О 34,5686 20,7082

Р 0,0625 0,0445

Ыа 1,6250 1,3993

16,0770 14,6390

А1 0,0054 0,0055

0,0085 0,0089

с 0,0034 0,0039

Б 0,0555 0,0666

С1 42,5840 56,5362

К 4,1724 6,1081

Са 0,0183 0,0274

П 0,0004 0,0006

V 0,0001 0,0002

Сг 0,0003 0,0007

Мп 0,0005 0,0010

Ре 0,0103 0,0215

Со 0,0001 0,0002

N1 0,0002 0,0005

Си 0,0004 0,0010

Хп 0,0014 0,0033

Ga 0,0002 0,0006

As 0,0001 0,0002

Se 0,0003 0,0009

Br 0,0185 0,0185

Примечание: жирным шрифтом выделены бальнеологически значимые элементы

Реакциясредыслабокислая(рН=5,3),что, видимо,обусловленоналичием рапе повышенного содержания органических кислот. Органолептические войства: вода полупрозрачная, светло-коричневая, с небольшим коричневым садком и слабым своеобразным морским запахом. Токсичные компоненты винец, ртуть, нитраты и другие) содержатся в количествах, значительно еньших допустимых концентраций. Содержание радионуклидов не ревышает пределов, установленных нормами радиационной безопасности РБ-99). Санитарно-микробиологические показатели рапы благополучные, ему способствует её высокая минерализация.

В соответствии с Классификацией минеральных вод Минздрава России ana озера Лиманское при максимальных величинах минерализации (>300 л) относится к бромным (Вг 1096 мг/л), борным (НЗВОЗ 644 мг/л) крепким ассолам хлоридно-магниевого состава. В пересчете на гипотетические соли рапе содержится в подавляющем количестве бишофит (MgC12 . 6Н20) -4,1 %, в качестве примесей - кизерит (MgS04. Н20) - 7,6 %, галит (NaCl) 4,6 %, карналлит (КС1. MgC12. 6Н20) - 1,7 %, а также гидрокарбонат агния (Mg(HC03)2) - 1,6 % и бромид натрия (NaBr) - 0,4 % (таблица 2).

Таблица 2

Минеральный состав исследуемой рапы

№ п/п Минеральные соли Химический состав Содержание в %

1 бишофит MgC12. 6Н20 84,1

2 кизерит MgS04. Н20 7,6

3 галит NaCl 4,6

4 карналлит КС1. MgC12.6H20 1,7

5 гидрокарбонаг магния Mg(HC03)2 1,6

6 бромид натрия NaBr 0,4

Итого - 100

Помимо минеральных солей рапа данного озера содержит большое количество органических компонентов: гуминовые кислоты и их соли, а также битумы, составляющих основную часть разницы между сухим остатком (390,43 г/л) и минерализацией (386,0 г/л). Высокий удельный вес рапы - 1,2 г/смЗ (весной) и 1,4 г/смЗ (в конце лета) способствует сохранению в её составе планктона после его переработки и разложения в растворенном (водорастворимые и легкогидролизуемые вещества) и во взвешенном состоянии (гуминовые кислоты и их соли, битумы). В этом основное бальнеологическое отличие озёрных рассолов от подземных (ископаемых)

(Бальнеологическое заключение ФГУ «РНЦ ВМиК Россздрава» № 14/98 от 04.03.2008 г.).

Токсикологическая безопасность Астраханской рапы проверялась по санитарно-микробиологической оценке (инфузории-парамеции) и при помощи методики определения токсичности в биопробе на лабораторных животных (мыши). Степень токсичности исследуемого образца методом санитарно микробиологической оценки определяли по выживаемости инфузорий через 1 час экспозиции в вытяжке исследуемого образца. В результате эксперимента обнаружено, что выживаемость инфузорий составила 88 %.

В результате определения токсичности в биопробе на лабораторных животных (мыши) было установлено, что в дозе 3 мл/кг изотонический раствор Астраханской рапы оказался не токсичным: все животные живы, клинические признаки интоксикации отсутствуют. Изменений в поведенческих показаниях животных контрольной и подопытных групп не выявлено, отказа от корма не было. После окончания исследования животные были вскрыты. Видимых патологических изменений не обнаружено.

Проведенные исследования показали, что раствор Астраханской рапы в физиологически адекватном разведении, вводимый внутрижелудочно, не влияет на относительную массу щитовидной железы и надпочечников, а также на изменение массы тела. Прирост массы тела был равномерным и различий в весе органов не обнаружено (таблица 3).

Показатели массы крыс и относительной массы желез внутренней секреции при внутрижелудочном введении физиологического раствора,

PAP и РВБ

Исследуемый показатель Внутрижелудочное введение NaCI, (контроль), п=20 Внутрижелудочное введение раствора Астраханской рапы, п=20 Внутрижелудочное введение Волгоградского бишофита, п=20

U я Ii в начале эксперимента 257,6±8,06 261,1±8,75 229,4±7,87

§ ё § 8 2 к в конце эксперимента 359,0± 10,92 368,4±8,25 320,7±12,8

относительный вес надпочечников, мг/г 0,0592*0,003 0,0559±0,002 0,05033±0,004

относительный вес щитовидной железы, мг/г 0,02344±0,002 0,0297±0,003 0,02бб2±0,002

Данные о влиянии Астраханской рапы на гематологические исследования приведены в таблице 4.

Из данных, представленных в таблице, видно, что существенного влияния на состояние крови физиологическое разведение рапы и минерала бишофита не оказывают. В группе, принимавшей раствор Астраханской рапы, уровень гемоглобина остался без изменений. У группы, принимавшей раствор Волгоградского бишофита, наблюдалось небольшое снижение гемоглобина.

Гематологические показатели крови крыс при внутрижелудочном введении ЫаС1, раствора Астраханской рапы и раствора бишофита Волгоградского

Показатели крови Внутрижелудочное введение NaCl, (контроль) п=20 Внутрижелудочное введение раствора Астраханской рапы, п=20 Внутрижелудочное введение Волгоградского бишофита, п=20

Гемоглобин, г/л 134,4±6,19 133,5±4,254 114,5±5,22*

Эритроциты,10" 5,27±0,37 5,05±0,39 5,17±0,65

Лейкоциты, 10' 4,48±0,81 2,9±0,3 2,83±0,8

Цветовой показатель 0,79±0,07 0,81 ±0,04 0,71±0,08

Условные обозначения: *-достоверность различиймеждугруппамиживотных контрольной группы и животными, получавшими раствор Астраханской рапы и раствор Волгоградского бишофита (по Стьюденту); * - р<0,05; ** - р<0,01;*** -р<0,001.

J - достоверность различий между группами животных, получавшими PAP и РВБ (по Стьюденту); J-p<0,05; JJ -р<0,01; JJJ - р<0,001.

Количество эритроцитов - на уровне контроля, количество лейкоцитов имело тенденцию к снижению, цветовой показатель, характеризующий среднее содержание гемоглобина в одном эритроците, оставался без изменений.

Таким образом, согласно классификации токсичности веществ Саноцкого И.В. и Улановой И.П. (1975), рапа озера «Малое Лиманское» относится к малотоксичным веществам.

В ходе экспериментов было показано, что после перорального введения раствора Астраханской рапы горизонтальная двигательная активность крыс в открытом поле не изменяется (таблица 5). Наблюдалось незначительное снижение посещения центральных квадратов у крыс, принимавших Волгоградский бишофит. Количество посещений периферических квадратов осталось таким же, как и в контроле.

Количество центральных стоек в обеих группах, получавших раствор рапы и раствор бишофита, имела тенденцию к снижению, что может быть обусловлено специфическим действием ионов магния. Исследовательский компонент поведения (наибольшее число заглядываний в отверстия) у крыс обеих групп, получавших PAP и РВБ, более выражен.

Таблица 5

Показатели двигательной активности в «открытом поле» при внутрижелудочном введении крысам NaCl, PAP и РВБ

Показатели двигательной активности Внутрижелудочное введение NaCl, (контроль) п=20 Внутрижелудочное введение раствора Астраханской рапы, п=20 Внутрижелудочное введение Волгоградского бишофита, п=20

Латентный период (сек) 3,2±0,57 2,37±0,18 Д 3,78±0,49

Центральные квадраты 10,8±2,34 10,8±2,34 7,56*1,53

Периферические квадраты 33,5±2,72 34,3±2,«7 34,2±2,92

Центральные стойки 3,125±1,34 1,857±0,55 1,4±0,4

Периферические стойки 6,2±0,9 5,1 ±0,99 4,78±0,46

Норки 3,44±0,29 4,6±0,82 3,89±0,77

Груминг 8±0,91 5,44±0,58* 4 9,67±1,84

Болюсы _ 6,0±0 2,0±1,0

Частота актов груминга, достоверно уменьшалась у группы, получавшей PAP. Количество болюсов у экспериментальных животных значительно увеличивалось по сравнению с животными, получавшими раствор хлорида натрия, что может быть обусловлено действием ионов магния, стимулирующим перистальтику кишечника.

Таким образом, существенного влияния на показатели ориентировочно-исследовательской активности крыс получавших внутрижелудочно раствор Астраханской рапы и раствор бишофита Волгоградского в тесте открытого поля не имеют.

Индикатором элементного статуса магния может быть определение активности щелочной фосфатазы (табл.6).

Таблица 6

Определение активности щелочной фосфатазы в плазме крови при пнутрижелудочном введении №С1, раствора Астраханской рапы и Волгоградского бишофита самцам крыс

Активность фермента, нмоль/с*л

Внутрижелудочное введение NaCI, (контроль^ Внутрижелудочное введение раствора Астраханской рапы Внутрижелудочное введение раствора Волгоградского бишофита

1357 ± 11,13 1351 ±9,56"" 1536 ± 14,73***

Изменение количественного содержания элементного магния при введении PAP не происходило, тогда как в группе, получавшей раствор Волгоградского бишофита наблюдался достоверный рост показателей активности щелочной фосфатазы.

Существенного влияния на степень перекисного гемолиза эритроцитов относительно контроля раствор рапы Астраханского месторождения не оказывал. Изменения содержания продуктов перекисного окисления липидов в гептан-изопропанольных экстрактах следующие: в изопропаноловой фазе содержание ацилгидроперекисей при введении раствора рапы озера Малое Лиманское оставалось без изменения, а в группе, получавшей раствор Волгоградского бишофита, наблюдалось достоверное увеличение содержания ацилгидроперекиси. Аналогично изменялись показатели по содержанию диеновых конъюгатов. Содержание кетодиенов и сопряженных триенов повышалось в обеих сравниваемых группах.

Результаты, полученные при изучении процессов ПОЛ в разных органах, позволяют проанализировать тканеспецифические эффекты в изменении про- и антиоксидантного равновесия при внутрижелудочном введении раствора рапы Астраханского месторождения.

По величине исходного уровня малонового диальдегида изучаемые органы у животных контрольной группы располагались в следующей последовательности: почки > миокард > печень (рис. 1). Исходя из значений данного параметра, раствор рапы Астраханского соленого озера проявляет прооксидантные свойства в миокарде и почках, в печени просматривается тенденция к снижению исходного уровня МДА.

Почскь ri NaCI

Почки Q PAP

Миокард @РВБ

Рис. 1. Динамика исходного уровня МДА в различных органах при внутрижелудочном введении PAP и РВБ

Условные обозначения (здесь и далее к рис 2 - 7): * • достоверность различий между группами животных контрольной группы и животными, получавшими PAP и РВБ (по Стьюденту); *-р<0,05; **-р<0,01;*** -р<0,001.

J - достоверность различий между группами животных, получавшими PAP и РВБ (по Стьюденту); J-р<0,05; и-р<0,01; ш-р<0,001-

Рис. 2. Изменение скорости спонтанного ПОЛ в различных органах при внутрижелудочном

введении PAP и РВБ

Это подтверждают и кинетические показатели, где наблюдается динамика увеличения скорости спПОЛ и аскПОЛ у животных, получавших раствор Астраханской рапы. Показатели спПОЛ в тканях миокарда увеличивались и в группе животных, получавших PAP и РВБ (рис. 2). В ткани почек достоверный рост спПОЛ наблюдался в группе получавших РВБ.

Рис. 3. Изменение скорости аскорбатзависимого ПОЛ в различных тканях при внутрижелудочном введении PAP и РВБ

При изучении аскПОЛ наиболее высокими кинетическими показателями обладала ткань миокарда, несколько меньшей скорость аскПОЛ была в почках (рис 3). В печени этот процесс протекал с достаточно низкой скоростью, на уровне контроля.

При сравнении показателей, характеризующих ПОЛ, с таковыми в контроле выявлено, что прооксидантный эффект от внутрижелудочного введения раствора Астраханской рапы проявился в миокарде: скорость аскПОЛ увеличилась в 3 раза по отношению к контролю, спПОЛ - в 2,4 раза, а исходное МДА - в 2,3 раза. Это позволяет утверждать, что внутрижелудочное введение рапы соленого озера Малое Лиманское оказывает тканеспецифические эффекты. В частности, раствор рапы Астраханского озера и раствор Волгоградского бишофита оказывают кардиоспецифический прооксидантный эффект. Прооксидантный эффект наблюдался и при исследовании тканей почек у группы, получавшей раствор Волгоградского бишофита.

Окислительная модификация белков и нуклеиновых кислот в большей степени является отражением функционирования внутриклеточных систем (Вьюшина A.B., 2004). Учитывая большую и очень разнообразную функциональную нагрузку белков в тканях, их окислительная модификация может носить в отличие от пероксидации липидов более избирательный и специфический характер при различных функциональных нагрузках и патологических состояниях. (Дубинина Е.Е. и соавт., 2000).

0.90 ' 0,80 0,70 0,60 0.50 0,40 0J0 OJO 0,10 0,00

Рис.4

Внутрижелудочное введение крысам рассола Астраханской рапы снижает содержание как начальных, так и конечных продуктов ОМБ в миокарде почти в 2 раза (рис. 4). У крыс, получавших внутрижелудочно раствор Волгоградского бишофита, прослеживалась тенденция к снижению содержания начальных продуктов ОМБ в миокарде. Достоверных изменений содержания продуктов ОМБ в плазме не обнаружено.

Биологическая функция каталазы состоит в защите биохимических систем клетки от токсического воздействия перекиси водорода. Активность каталазы (рис. 5) в гомогенатах почек и сердца достоверно снижалась у групп, получавших раствор Астраханской рапы и раствор Волгоградского бишофита. В плазме крови активность каталазы в группах, получавших внутрижелудочно раствор Астраханской рапы и раствор Волгоградского бишофита, достоверно увеличивалась.

^Nad QPAP ЭРВБ

. Изменение скорости окислительной модификации белков в миокарде при внутрижелудочном введении PAP и РВБ

ÜäNaCI

□ PAP

ЗРВБ

Рис.5. Изменение активности каталазы (1 - почки; 2 - миокард; 3 - плазма крови) при внутрижелудочном введении PAP и РВБ

Церулоплазмин является белком плазмы крови, выполняющим в организме ряд важных биологических функций: повышает стабильность клеточных мембран, участвует в иммунологических реакциях, ионном обмене, оказывает антиоксидантное действие, тормозит перекисное окисление липидов, стимулирует гемопоэз.

Рис.б. Изменение активности церуплазмина в плазме крови при внутрижелудочном введении PAP и РВБ

Активность церуплазмина в исследуемых группах достоверно возрастает (рис. 6), что связано, возможно, с проявлением антиоксидантных эффектов. Голдстэйн и др. ( Goldstain et al., 1979) ранее показали, что церулоплазмин утилизирует супероксид, а, следовательно, служит

антиоксидантом. Антиоксидантная функция церулоплазмина может быть связана с его способностью связывать ионы меди. Ионы меди являются хорошо известными катализаторами прооксидантов, а их связывание церулоплазмином приводит к снижению окисления.

Важнейшим ферментом системы антиоксидантной защиты является супероксидцисмутаза, которая катализирует превращение высоко реакционного аниона радикала кислорода (супероксид анион, 02-.) в относительно менее активную перекись водорода и молекулярный кислород.

Активность этого фермента в эритроцитах исследуется с целью выяснения состояния антиоксидантной системы защиты организма в условиях патологического процесса (Терехина Н. А., 1992; Б^Бйчнп К., 1991; гнпаТ., 1996).

60 50 | 40 9 30 20 10 0

Рис.7. Изменение активности СОД в плазме крови при внутрижелудочном введении PAP и РВБ

Результаты изменения активности супероксиддисмутазы представлены на рис. 7. Повышение активности СОД рассматривается как фактор, увеличивающий общую антиоксидантную защиту клетки и препятствующий развитию патологии (Кумерова А.О., 1996; Zhu C.S., 1994; Карагезян К.Г., 1989).

Анализ полученных данных показывает, что влияние раствора Астраханской рапы на свободнорадикальные процессы в организме крыс не однозначно. Проведенные исследования выявили изменения показателей системы ПОЛ, ОМБ и антиоксидантной защиты. Бальнеологическая реакция проявилась в увеличении продуктов ПОЛ, таким образом, организм

***

***

iNaCI QPAP

¡РВБ

адаптировался к комплексному воздействию антиоксидантов, содержащих в PAP. Возможно, что активация систем перекисного окисления липид развивается как физиологический механизм модификации структуры функции биологических мембран, индуцированная поступлением в органи крыс антиоксидантов в составе PAP. Вероятно, это связано с присутстви в рапе Астраханского месторождения гуминовых соединений. Гуминов вещества накапливают элементы питания и энергию, участвуют в миграц катионов, снижают негативное действие токсических веществ (Агапов А.И соавт., 1988, Холопов А.П. и соавт., 2002). Гуминовые веществаобеспечива активность рапы в отношении окислительно-восстановительных, кислотн основных и комплексообразовательных процессов (Холопов А.П. и coa 2002, Авакумова Н.П. и соавт., 1994).

Бальнеологический эффект от введения PAP подтверждается снижением показателей ОМБ в миокарде. По мнению рядау ченых (Дубини Е.Е. и др., 1993; Mickel H.S. и др.) уровень окисленных белков мож считать своего рода индикатором тканевого поражения. При введении Р уровень ОМБ в миокарде снижался, следовательно, процессы, запущенн ПОЛ простимулировали обновление клеточной мембраны, а не разрушен ткани миокарда. Это подтверждается достоверно значимой обрати корреляцией между показателями МДА и ОМБ по количеству конечн продуктов окисления (г = - 0,75 ).

Достоверный рост показателей активности катал-супероксиддисмутазы и церулоплазмина в плазме крови подтвержд активацию ферментативного звена антиоксидантной системы крыс.

При изучении антиоксидантной активности PAP целесообразно им в виду не только многообразие механизмов антиоксидантной активное входящих в ее состав отдельных биологически активных веществ (гуминов кислоты и их соли), но и то, что роль каждого из них может существе различаться при различных способах активации свободнорадикальн процессов, при этом они способны иметь одновременно несколько то приложения. Возможно, физиологический механизм, который явля действующим или доминирующим в эффектах, вызванных раствором ра соленого озера «Малое Лиманское» Астраханской области, зависит

словий реакции и определяет выраженность антиоксидантной активности.

ВЫВОДЫ

1. Методами санитарно-микробиологической оценки и в биопробе на лабораторных животных (мыши) доказана токсикологическая безопасность рапы Астраханского соленого озера«МалоеЛиманское», что согласуется с данными бальнеологического заключения ФГУ ВМиК Росздрава № 14/98 от 04.03.2008.

2. Вес животных, относительная масса эндокринных органов и уровень гемоглобина самцов крыс, получавших внутрижелудочно физиологически адекватное разведение рапы Астраханского соленого озера «Малое Лиманское» и Волгоградского бишофита, не отличались от соответствующих показателей в контроле.

3. Структура ориентировочно-исследовательского поведения самцов крыс, получавших раствор рапы соленого озера «Малое Лиманское» Астраханской области изменялась в направлении уменьшения уровня тревожности.

4. Внутрижелудочное введение раствора рапы соленого озера Малое Лиманское не изменяет интенсивность ПОЛ в гомогенатах ткани печени и почек. Уровень промежуточных продуктов ПОЛ (содержание ацилгидроперекисей, кетодиенов, сопряженных триенов и диеновых конъюгатов) в липидных экстрактах плазмы крови не изменяется.

5. Рапа Астраханского озера «Малое Лиманское» оказывает кардиоспецифический прооксидантный эффект на уровне ПОЛ, в тоже время ингибирует процесс окислительной модификации белков в миокарде крыс.

6. Факт активации ферментативного звена антиоксидантной системы подтверждается ростом показателей каталазы и СОД, а также увеличением активности церулоплазмина в плазме крови. Общая неспецифическая каталазная активность имеет тканеспецифические особенности: в тканях почек и сердца она снижается, в плазме крови - повышается.

7. Специфика влияния бишофитсодержащей рапы соленого озера «Малое Лиманское» Астраханской области заключается в

значительном снижении интенсивности окислительной модификации белков миокарда.

Список научных работ, опубликованных по теме диссертации

1. Мухамедова H.A. Изучение физико-химических свойств и антиоксидантных эффектов сульфидно-иловой грязи Астраханской области [Текст] / С.К. Касимова, Е.И. Кондратенко, H.A. Ломтева, H.A. Мухамедова // Актуальные проблемы восстановительной медицины, курортологии и физиотерапии: М. - 2008. - С. 102.

2. Мухамедова H.A. Исследование рапы озера «Малое Лиманское» Астраханской области [Текст]/Е.И.Кондратенко,H.A. Мухамедова,С.К. Касимова, H.A. Ломтева // Актуальные проблемы восстановительной медицины, курортологии и физиотерапии: М. - 2008. — С. 106-107.

3. Мухамедова H.A. Физиолого-биохимическое обоснование использования Астраханского озерного бишофита в качестве лечебного и косметического средства [Текст] / H.A. Мухамедова // Естественные науки. - 2009. - № 2,- с.16-22. ISSN 1818-507Х.

4. Мухамедова H.A. Оценка влияния рапы соленого озера «Малое Лиманское» Астраханской области на динамику показателей крови у белых крыс [Текст] / H.A. Мухамедова // Вестник РГМУ. 2009. - № 3. -С.54.

5. Мухамедова H.A. Влияние рапы соленого озера «Малое Лиманское» Астраханской области на свободнорадикальные процессы у крыс [Текст] / H.A. Мухамедова // Сборник материалов XVI Российского национального конгресса «Человек и лекарство» (6-10 апреля 2009 г., г. Москва). М.: ЗАО РИЦ «Человек и лекарства», 2009. - С. 704.

6. Мухамедова H.A. Исследование биохимических аспектов влияния бишофитсодержащей рапы Астраханских соленых озер [Текст] / H.A. Мухамедова // Фундаментальные исследования в биологии и медицине: сборник научных трудов - Вып. 6. - Ставрополь: Изд. СевКавГТУ, 2009. C.-U5-122. ISBN 978-5-9296-0431-7.

7. Мухамедова H.A. Исследование влияния бишофитсодержащей рапы на про- и антиоксидантные эффекты у крыс при внутрижелудочном введении [Текст] / H.A. Мухамедова // Сборник материалов научно-

учно-практической конференции «Молодежь и наука XXI века» 009г„ г. Красноярск), 2009. - С.522.

ухамедова H.A. Влияние внутрижелудочного введения рассола пы соленого озера на интенсивность окислительной модификации лков в миокарде крыс [Текст] / H.A. Мухамедова, С.К. Касимова Сборник материалов научной конференции с международным астием «Научный прогресс на рубеже тысячелетий - 2009» (2009г., г. para), 2009.-С. 427-430.

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Мухамедова, Наталья Анатольевна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ГОМЕОСТАЗ МАГНИЯ В ОРГАНИЗМЕ: БИОДОСТУПНОСТЬ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ МАГНИЙСОДЕРЖАЩИХ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИХ

ПРЕПАРАТОВ.

1.1 Физиологическии механизм действия ионов магния.

1.2 Роль Mg2+ в функционировании ЦНС.

1.3 Потребность организма в магнии. Способы введения и биодоступность препаратов магния.

1.4 Физиологический механизм действия и области применения магнийсодержащих фармацевтических препаратов, биологически активных добавок и нутрицевтиков.

1.5 Изучение токсичности магнийсодержащих препаратов.

1.6 Физиологический механизм действия ионов калия.

1.7 Влияние минерала бишофит на липидный состав крови крыс и интенсивность перекисного окисления липидов.

1.8 Бальнеологическая реакция и механизм ее возникновения.

1.9 Особенности бальнеологической реакции, развивающиеся под влиянием рапы.

1.10 Биохимический состав рапы и физиологические аспекты ее влияния на организм.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

ГЛАВА 3. СОСТАВ РАПЫ АСТРАХАНСКОГО СОЛЕНОГО ОЗЕРА «МАЛОЕ ЛИМАНСКОЕ» И ПЕРСПЕКТИВЫ ЕЁ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ.

ТОКСИКОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

3.1 Бальнеологическая ценность рапы соленого озера

Малое Лиманское» Астраханской области.

3.2 Масс-спектральный анализ элементного состав рапы озера «Малое Лиманское» Астраханской области.

3.3 Изучение токсичности магнийсодержащей рапы озера «Малое Лиманское» Астраханской области.

ГЛАВА 4. ВЛИЯНИЕ ФИЗИОЛОГИЧЕСКИ АДЕКВАТНОГО РАЗВЕДЕНИЯ РАСТВОРА АСТРАХАНСКОЙ РАПЫ НА ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ И НА ОРИЕНТИРОВОЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКОЕ ПОВЕДЕНИЕ КРЫС.

4.1 Показатели массы крыс и относительной массы желез внутренней, секреции при внутрижелудочном введении физиологического раствора, PAP и РВБ.

4.2 Ориентировочно-исследовательская активность крыс, получавших внутрижелудочно раствор NaCl, раствор Астраханской рапы и раствор Волгоградского бишофита в тесте открытого поля.

4.3 Определение активности щелочной фосфатазы в плазме крови крыс при внутрижелудочном введении NaCl, раствора Астраханской рапы и раствора Волгоградского бишофита

ГЛАВА 5. ВЛИЯНИЕ РАСТВОРА РАПЫ СОЛЕНОГО ОЗЕРА «МАЛОЕ ЛИМАНСКОЕ» АСТРАХАНСКОЙ ОБЛАСТИ НА ИНТЕНСИВНОСТЬ СВОБОДНОРАДИКАЛЬНЫХ ПРОЦЕССОВ.

5.1 Изменение интенсивности перекисного окисления липидов различных тканей крыс при внутрижелудочном введении раствора NaCl, раствора Астраханской рапы и раствора Волгоградского бишофита.

5.2 Определение продуктов перекисного окисления липидов в гептан-изопропанольных экстрактах плазмы крови крыс, получавших внутрижелудочно раствор NaCl, раствор Астраханской рапы и раствор Волгоградского бишофита

5.3 Изменение степени перекисного гемолиза эритроцитов крыс, получавших внутрижелудочно раствор NaCl, раствор Астраханской рапы и раствор Волгоградского бишофита

5.4 Изменение интенсивности окислительной модификации белков при внутрижелудочном введении раствора NaCl, раствора Астраханской рапы и раствора Волгоградского бишофита.

ГЛАВА 6. ВЛИЯНИЕ РАСТВОРА РАПЫ СОЛЕНОГО ОЗЕРА «МАЛОЕ ЛИМАНСКОЕ» АСТРАХАНСКОЙ ОБЛАСТИ НА ПОКАЗАТЕЛИ АНТИОКСИДАНТНОЙ СИСТЕМЫ САМЦОВ КРЫС.

6.1 Определение активности каталазы в гомогенате тканей почек, миокарда и в плазме крови при внутрижелудочном введении №С1, раствора Астраханской рапы и раствора Волгоградского бишофита крысам.

6.2 Определение активности церулоплазмина в плазме крови при внутрижелудочном введении №С1, раствора Астраханской рапы и раствора Волгоградского бишофита крысам.

6.3 Определение активности супероксиддисмутазы в плазме крови при внутрижелудочном введении №С1, раствора Астраханской рапы и раствора Волгоградского бишофита крысам.

ГЛАВА 7. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Влияние бишофитсодержащей рапы соленого озера "Малое Лиманское" Астраханской области на функциональное состояние и свободнорадикальный гомеостаз самцов крыс"

АКТУАЛЬНОСТЬ РАБОТЫ

Неблагоприятная экологическая обстановка, а также стресс-обусловленная нагрузка на живой организм являются причиной развития макро- и микрополиэлементозов. Все это приводит к биохимическим и функциональным изменениям, которые негативно отражаются на состоянии здоровья, работоспособности и качестве жизни человека. Поэтому исследование зависимости физиологических процессов от обеспеченности их макроэлементами стало предметом изучения многих известных ученых (Carl, G, 1994; А.П. Авцин, 1991; H.A. Агаджанян, Н.В. Ермакова, 1997; A.B.Скальный, А.Т.Быков, 2003)

Одним из основных макроэлементов в организме человека является магний. Существующие средства восполнения недостатка магния в организме представляют собой лекарственные препараты и пищевые добавки, которые принимаются перорально (Tsuji Н. Et. Fl., 1994; Компанцева Е.В., и соавт., 2002; Забелина В.Д., 2003; Скальный A.B., 2004). Отличительной особенностью магнийсодержащих препаратов при их наружном применении является их способность снимать воспалительные реакции и болевой синдром при различны заболеваниях ОДС, оказывать мощный седативный эффект и улучшать физико-химические показатели кожи при его наружном применении (Стрельцов Д.А., 2001, 2002; Мотов A.A., 2003, 2004, 2005).

Магнийсодержащие минералы эффективно применяются в бальнеологии и косметологии (Dyckner, Webster, 1984; Nigam S. с соавт., 1986; Смирнова, JI.A., 1994; Спасов, A.A., 2003; Щава С.Н., 2001). В этой связи особое внимание привлекает минерал бишофит, содержащий максимальное количество магния хлорида (до 95-96 % в сухом остатке). Условия существования бишофитсодержащей рапы при непосредственном контакте с окружающей средой формируют сложную органоминеральную композицию, физиологические особенности, действия которой не исследованы. В зарубежной практике данный минерал, а также содержащая его рапа Поморийского озера (Болгария) и Мертвого моря (Израиль, Иордания), используется как основа для противовоспалительных средств наружного применения. Подземные залежи бишофита имеются в Прикаспийской впадине. В Астраханской области также имеются запасы магнийсодержащих веществ в многочисленных соленых озерах, одним из которых является озеро «Малое Лиманское». Физиологические особенности действия Астраханского озерного бишофита не исследованы. Биологическая активность озерной рапы «Малое Лиманское» должна иметь ряд определенных особенностей по сравнению с подземным минеральным бишофитом. В связи с этим изучение функционального состояния организма под влиянием рапы озера «Малое Лиманское» является актуальным.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ

Установить влияние бишофитсодержащей рапы соленого озера «Малое Лиманское» Астраханской области на физиологические параметры и свободнорадикальный гомеостаз самцов крыс.

ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ

1. Оценить токсикологическую безопасность рапы Астраханского озера «Малое Лиманское».

2. Исследовать влияние физиологически адекватного разведения раствора рапы, вводимого внутрижелудочно, на показатели крови крыс.

3. Изучить влияние рапы соленого озера «Малое Лиманское» на ориентировочно-исследовательское поведение крыс.

4. Оценить эффект раствора рапы на интенсивность перекисного окисления липидов (ПОЛ) по следующим показателям: содержание малонового диальдегида (МДА), скорость спонтанного и аскорбатзависимого ПОЛ в гомогенатах тканей печени, почек, миокарда; уровень промежуточных продуктов ПОЛ (ацилгидроперекиси, кетодиены и сопряженные триены, диеновые конъюгаты) в липидных экстрактах плазмы крови и степень перекисного гемолиза эритроцитов.

5. Изучить влияние раствора рапы на процессы окислительной модификации белков (ОМБ) плазмы крови и миокарда (кетодинитрофенилгидразоны, алифатические альдегидо- и кетонопроизводные динитрофенилгидразонов основного характера) и сопоставить характер изменения интенсивности ПОЛ и ОМБ.

6. Изучить изменения активности ферментативного звена антиоксидантной системы самцов крыс и активность антиоксидантного белка крови - церулоплазмина - под воздействием растворов бишофитсодержащей рапы (PAP) и Волгоградского бишофита (РВБ).

7. Провести сравнительный анализ эффектов воздействия растворов бишофитсодержащей рапы соленого озера «Малое Лиманское» Астраханской области и Волгоградского бишофита на физиологические параметры и показатели свободнорадикального гомеостаза самцов крыс.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА

Впервые исследован химический состав рапы соленого озера «Малое Лиманское» Астраханской области. В рапе обнаружены бальнеологически значимые количества бишофита, соединений калия, брома и бора, органические компоненты и установлена ее токсикологическая безопасность.

Обнаружено влияние внутрижелудочного введения бишофитсодержащей рапы на структуру ориентировочноисследовательского поведения самцов крыс, заключающееся в снижении показателей тревожности.

Впервые установлены тканеспецифические изменения интенсивности перекисного окисления липидов и окислительной модификации белков в условиях внутрижелудочного введения бишофитсодержащей рапы.

Показано, что бишофитсодержащая рапа соленого озера «Малое Лиманское» Астраханской области способствует активации ферментативного звена антиоксидантной системы самцов крыс. Специфика влияния бишофитсодержащей рапы соленого озера «Малое Лиманское» Астраханской области заключается в значительном снижении интенсивности окислительной модификации белков миокарда. Она не является полным аналогом Волгоградского бишофита.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ

Экспериментально доказана целесообразность использования рапы соленого озера «Малое Лиманское» в качестве бальнеологического средства.

Разработаны технические условия на применение бишофитсодержащей рапы в качестве косметического сырья (ТУ 9154-001-93934149-08).

Созданы рецептуры и отработана технология введения бишофитсодержащей рапы в косметические средства для волос и кожи головы.

Физиологически обоснована целесообразность применения бишофитсодержащей рапы соленого озера «Малое Лиманское» Астраханской области в бальнеологической практике.

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ

1. Рапа озера «Малое Лиманское» при внутрижелудочном введении в изоосмотическом разведении не является токсичной, тканеспецифически изменяет про- и антиоксидантное равновесие в организме самцов крыс, способствует изменению структуры ориентировочно-исследовательского поведения животных и уменьшения уровня тревожности.

2. Физиологические аспекты бальнеологической реакции, развивающейся под воздействием внутрижелудочного введения рапы озера «Малое Лиманское» Астраханской области, заключается в активации ферментативного звена антиоксидантной системы и уменьшении интенсивности окислительной модификации белков миокарда.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ

Результаты исследования доложены на конференциях и опубликованы в материалах IX международной научной конференции «Эколого-биологические проблемы бассейна Каспийского моря» (2006), II Всероссийской научной конференции «Экологические проблемы природных и урбанизированных территорий» (Астрахань, 2008), VI международной практической конференции «Человек и животные» (Астрахань, 2008), Всероссийского форума «Здравница» (Москва, 2008), XVI Российского национального конгресса «Человек и лекарство» (Москва, 2009), IV Международной (XIII Всероссийской) Пироговской студенческой научной медицинской конференции (Москва, 2009), X Всероссийской научно-практической конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Молодежь и наука XXI века», посвященная 85-летию со дня рождения В.П. Астафьева (Красноярск, 2009), научной конференции с международным участием «Научный прогресс на рубеже тысячелетий - 2009» (Прага, 2009), Каспийском инновационном форуме (Астрахань, 2009).

ПУБЛИКАЦИИ

По теме диссертации опубликовано 8 работ.

СТРУКТУРА И ОБЪЕМ ДИССЕРТАЦИИ

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, изложения и обсуждения результатов собственных исследований, выводов. Работа изложена на 110 стр., содержит 14 таблиц, 12 рисунков, список литературы включает 149 источника, из которых 57 иностранных.

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Мухамедова, Наталья Анатольевна

выводы

1. Методами санитарно-микробиологической оценки и в биопробе на лабораторных животных (мыши) доказана токсикологическая безопасность рапы Астраханского соленого озера «Малое Лиманское», что согласуется с данными бальнеологического заключения ФГУ ВМиК Росздрава № 14/98 от 04.03.2008.

2. Вес животных, относительная масса эндокринных органов и уровень гемоглобина самцов крыс, получавших внутрижелудочно физиологически адекватное разведение рапы Астраханского соленого озера «Малое Лиманское» и Волгоградского бишофита, не отличались от соответствующих показателей в контроле.

3. Структура ориентировочно-исследовательского поведения самцов крыс, получавших раствор рапы соленого озера «Малое Лиманское» Астраханской области изменялась в направлении уменьшения уровня тревожности.

4. Внутрижелудочное введение раствора рапы соленого озера Малое Лиманское не изменяет интенсивность ПОЛ в гомогенатах ткани печени и почек. Уровень промежуточных продуктов ПОЛ (содержание ацилгидроперекисей, кетодиенов, сопряженных триенов и диеновых конъюгатов) в липидных экстрактах плазмы крови не изменяется.

5. Рапа Астраханского озера «Малое Лиманское» оказывает кардиоспецифический прооксидантный эффект на уровне ПОЛ, в тоже время ингибирует процесс окислительной модификации белков в миокарде крыс.

6. Факт активации ферментативного звена антиоксидантной системы подтверждается ростом показателей каталазы и СОД, а также увеличением активности церулоплазмина в плазме крови. Общая неспецифическая каталазная активность имеет тканеспецифические особенности: в тканях почек и сердца она снижается, в плазме крови — повышается.

7. Специфика влияния бишофитсодержащей рапы соленого озера «Малое Лиманское» Астраханской области заключается в значительном снижении интенсивности окислительной модификации белков миокарда.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Мухамедова, Наталья Анатольевна, Астрахань

1. Аарон-Маор, И. Все, что известно о магнии Текст. / И. Аарон-Маор, Й.Шейнфельд // Междунар. Мед. журн. -1998; - №1: - С.74-77.

2. Абушинова, Н. Н. Влияние грязевых аппликаций на состояние ацетатной язвы у белых крыс Текст. / Н. Н. Абушинова, Г. Е. Самонина, JI. П. Яшина // Вопр. курортол. 2001. - №3. - С. 27-28.

3. Авцин, А.П Микроэлементозы человека: этиология, классификация, органопатология Текст. / А.П. Авцин, A.A. Жаворонков, М.А. Риш, Л.С. Строчкова; АМН СССР. -М.: Медицина. 1991, 496с.:ил.

4. Агаджанян, H.A. Экологический портрет человека на Севере. Текст. / H.A. Агаджанян, Н.В. Ермакова // М.: Крук, -1997. -207 с.

5. Арцукевич , А.Н., Биохимич. аспекты жизнедеятельности биол. систем / А.Н. Арцукевич, А.Н. Мальцев, В.В Зинчук. // Сбор. науч. трудов съезда биохим. Беларуссии, Гродно. — 2000. С. 19-23

6. Барабой, В.А. Перекисное окисление и стресс./ В.А. Барабой, И.И.Брехман, В. Г.Голоткин, Ю.Б Кудряшов., // Санкт-Петербург. -Наука. -1992. С. 292

7. Бальнеологическое заключение на рапу озера Малое Лиманское Астраханской области.// ФГУ «РНЦ ВМиК Росздрава» г. Москва, № 14/98. 2008.-8 с.

8. Бачев, С.А. Полиминерол (Polyminerol) Текст./ С.А. Бачев, Ю.В. Писарев, Я.Н. Бондаренко // Материалы научно-практической конференции. София, 1970. - №120. - С. 5.

9. П.Березовский, В.А. Гипоксия и индивидуальные особенности резистентности Текст. / В.А. Березовский, Киев: Наукова думка, 1987. -С.916.

10. Бударин, Л.П. Биологические аспекты координационной химии Текст. / Л.П. Бударин, Э.Д. Романенко, Р.В. Сучкова, И.С. Чекман // Киев: Наукова думка,-1985.-С. 181-198.

11. Бурчинский, С.Г. Проблема дефицита магния в организме: методы фармакологической коррекции Текст. / С.Г. Бурчинский // Здоровье Украины, -2005. -2 апреля. С.5-6.

12. Вьюшина A.B. Перекисное окисление белков в сыворотке крови у пренатально стрессированных крыс Текст. / A.B. Вьюшина, И.А. Герасимова, М.А. Флерова // БЭБиМ, 2004, - Т.138, - № 7, - С.41-44.

13. Громова, O.A. Роль и значение магния в патогенезе заболеваний нервной системы Текст. / Громова O.A., Никонов A.A. // Неврология и Психиатрия им. С.С. Корсакова. 2002; - 12: - С.45^9.

14. Деревягин, B.C. Бишофиты Нижнего Поволжья Текст. / B.C. Деревягин, В.Н. Седлечкий., В.А. Ермаков //. Ростов на Дону.: издательство Ростовского университета, - 1989. - 96 с.

15. Джабарова, Н.К. Витаминные комплексы как один из показателей биологической активности пелоидов Текст. / Н.К Джабарова, О.А Карелина, Н.Г. Клопотова // Вопросы курортологии, физиотерапии и леч. физ. культуры. 1997. - № 2. - С. 25-27.

16. Диксон, М. Ферменты Текст. / М. Диксон, Э. Уэбб; перевод с англ. -М.: Мир, 1982.-Т. 1.392 с.

17. Дриневский, Н. П. Исторические аспекты в изучении лечебного действия пелоидов Текст. / Н. П. Дриневский // Детская курортология и физиотерапия: Тр. Украинского НИИ детской курортологии и физиотерапии. Вып. 5. Евпатория, — 1997. С. 3-9.

18. Дубинина, Е.Е. Окислительная модификация белков сыворотки крови человека, метод её определения. Текст. / Е.Е. Дубинина, С.О. Бурмистров и др. // Вопросы медицинской химии. 1995. - Т.41. - № 1. — С. 24-26.

19. Дубинина, Е.Е. Окислительная модификация белков плазмы крови больных психическими расстройствами (депрессия, деперсонализация) Текст. / Е.Е. Дубинина, М.Г. Морозова, Н.В. Леонова и др. // Вопросы медицинской химии, 2000, - Т. 46, - № 4, - С. 398 - 409.

20. Дунаев, В.В. Токсикологические последствия окислительной модификации белков при различных патологических состояниях Текст. / В.В. Дунаев, Ю.И. Губский, И.Ф.Беленичев, С.И. Коваленко и др. // Современные пробл. токсикологии. —2004. —№1. —С. 14—26.

21. Ефимов, A.C., Перекисное окисление липидов в эритроцитах больных сахарным диабетом с диабетическими ангиопатиями / A.C. Ефимов, В.Г. Науменко, Текст. //Пробл. Эндокринол. 1985. — №1. - С. 6-9.

22. Журавлев А. И. Свободнорадикальная терапия в приложении к действию физических факторов Текст. / А.И. Журавлев //Вопросыэкспериментальной и клинической курортологии и физиотерапии: Тр. Центрального НИИКиФ. Т. 25. 1970. - С. 20-29.

23. Забелина, В.Д. Магний и магнийсодержащие препараты. С магнием по жизни Текст. / В.Д Забелина. // Consilium Medicum. 2003. - Т. 3. - №5.

24. Зиновьева, В.Н. Гомеостаз магния: механизмы и наследственные нарушения Текст. / В.Н. Зиновьева, И.Н. Иежица, А.А. Спасов // Биомед. Химия. 2007. - Т. 53, - Вып 6. - С. 600-623.

25. Златопольска Э. Патофизиология обмена кальция, магния и фосфора. Под ред. С.Кларра. Почки и гомеостаз Текст. / Э. Златопольска // Клиническая фармакология и терапия. Пер. с англ. М.: Медицина, -1987;- С. 217-278.

26. Зленко, Е.Т. Фармакология и научно-технический прогресс Текст. / Е.Т. Зленко, П. А.Неруш, В.В. Колдунов // Тез. докл. VI Вс. съезда фармакологов 25-27 октября. Ташкент, — 1988. С. 106.

27. Иежица, И.Н. Калий-магниевый гомеостаз: физиология, патофизиология, клинические последствия дефицита и особенности фармакологической коррекции Текст. / И.Н. Иежица, А.А. Спасов // Успехи физиол. наук 2008. - Т. 39, - № 1. - С. 23-41.

28. Калинин, С. В. Физиология грязелечения как частный случай неспецифической адаптации организма Текст ./ С. В. Калинин.// Вопросы курортологии, физиотерапии и лечебной физ.культуры. — М., -2003 . № 4 - С.52-54

29. Карчевски, Я. Магний и тяжелые металлы. Текст./ Я. Карчевски // Вестник АМН СССР, 1991, - 2, - С. 16-18.

30. Коломиец, В.В. Физиологические механизмы регуляции метаболизма магния. Текст./ В.В. Коломиец, Е.В. Боброва // Укр. кардиол. журн.-1998. -4: — С.54-8.

31. Комов, В.П. Биохимия Текст. / В.П. Комов, В.Н. Шведов // М.: Дрофа, 2006.-638с.

32. Королюк М.А. Метод определения каталазы Текст. / М.А. Королюк, Л.И. Иванова, И.Г. Майорова, и др. // Лабораторное дело — 1988. — № 1. -С. 16-19.

33. Кумерова А.О. Процессы свободно-радикального окисления Текст. / А.О. Кумерова, В.И. Петухов, А.П. Шкестер и др.//Вопр.мед химии, -1996,-№42, С. 144-147.

34. Лазько, А.Е. Состояние мембран эритроцитов при воздействии серосодержащего газа Текст. / А.Е. Лазько, Р.И. Асфандияров, A.A. Рязаев // Актуальные вопросы медицинской фармакологии, 1993. — С. 41-47.

35. Ланкин, В.З. Антиоксиданты и атеросклероз: Критический анализ проблемы и направление дальнейших исследований Текст. / В.З Ланкин, А.К Тихазе, А.И, Каминный, Ю.Н. Беленков // Патогенез, -2004 №1.- С. 71-86

36. Лисицина, Т.А., Текст. / И.М.Васильева, А.Д. Дурнев, и др.// Докл. РАН.-1999.-Т.365. — № 2. С. 263-266.

37. Маныиина Н.В. Курортология для всех. За здоровьем на курорт. Текст. / Н.В. Маныпина // М. : Вече, - 2007. - 592 с. (83-94)

38. Меркулова, Е.В. Оптимизация состава и технологии стоматологических пленок с бишофитом Текст. / Е.В. Меркулова, Л.М.Ганичева // Материалы 59 межрегиональной науч.-практ. конф. Пятигорск, 2004. -С. 78-79.

39. Москалев, Ю.И. Минеральный обмен. Текст. / Ю.И. Москалев // -М.: Медицина, 1985. - с.288. - ISBN 5-03-003645-8.

40. Муравлева, Р. Е. Рациональное использование иловой сульфидной грязи озера Тамбукан Текст. / Р. Е. Муравлева, Н.Г. Кривобокое, и соавт. // Метод, рекоменд. Пятигорск, 1984.

41. Нацименто, Л. Гиперкалиемия и гипокалиемия Текст. / Под ред. Р.Б. Тейлора//Трудный диагноз: М., Медицина, 1992,- Т.1.- С.302-322.

42. Осипов, А.Н. Активные формы кислорода и их роль в организме Текст. / А.Н. Осипов, O.A. Азизова, Ю.А. Владимиров // Журн. Успехи биологической химии. 1990. - Т.31. - С. 180-208.

43. Павлова, Е.С. Особенности формирования иммунного ответа в эксперименте при различных способах пелоидотерапии. Текст. /Е.С Павлова, Л.И. Позднякова // Вопр курортол физиотер. и ЛФК. -1986 -2: С.50-52.

44. Панова О.С. Современная косметология — проблемы, поиски, решения Текст. / Экспер. и клин, дерматокосметология // М.: Изд.дом. «Русский врач» 2003. - №1. - С.2-5.

45. Пузаков, С.А Общая химия. Текст. / С.А Пузаков, В.А. Попков // М.: ГЭОТАР-Медиа, 2007. - Гл.11. - ISBN 978-5-9704-0539-0.

46. Раюшкин, В.А. Опыт повышения эффективности антидепрессивной терапии препаратом Магне В6. Текст. / Материалы научно-практ. конф. с междунар. участием, 7-8 апреля. М.: 1998; С.383—385.

47. Ребров, В.Г. Витамины и микроэлементы. Текст. / В.Г. Ребров, O.A. Громова // Нейрохимия макро- и микроэлементов, М.: Алев-В, 2003; — С.648.

48. Сатоскар, Р.С, Фармакология и фармакотерапия. Текст. / P.C. Сатоскар, С.Д. Брандаркар // пер. с англ. А. Я. Ивлевой. Москва : Медицина, - 1986. - 22.

49. Саноцкий, И.В. Критерии вредности в гигиене и токсикологии при оценке опасности химических соединений. Текст. / И.В. Саноцкий, И.П. Улонова.// М.: Медицина, 1975. - С.54-60.

50. Симонян, A.B. Антиоксиданты в современном здравоохранении Электронный ресурс. / Медицинский вестник — 2008. —№ 16 (443) — Режим доступа: http://medvestnik.ru, свободный.

51. Скальный А.В.Микроэлементозы человека: Диагностика и лечение: Практическое руководство для врачей и студентов медицинских вузов Серия: Школа биотической медицины Текст. / — 1999 . — 96 с. — ISBN 5-87317-071-1

52. Скальный, A.B. Магний. Энергия жизни, уверенность, сила. Текст./ Москва: Мед.ЭкспертПресс, -2004. -102 с. ISBN 5-329-00930-8.

53. Скальный, А. В., Биоэлементы в медицине. Текст. / А. В. Скальный, И. Ф. Рудаков // М.: Издательский дом «ОНИКС 21 век»: Мир, - 2004, -272 с. - ISBN 5-329-00930-8

54. Спасов, A.A. Магний в медицинской практике Текст.: Монография -Волгоград: ООО «Отрок», 2000 - с. 272. - ISBN 5-88928-005-8.

55. Стальная, И.Д. Современные методы биохимии Текст. / И.Д. Стальная, Т.Г. Гаришвили [Текст] //. М.: Медицина, — 1977. С.66-67.

56. Старичков A.A., Роль лейкоцитов в механизме действия бальнеопелоидотерапии. Текст. / A.A.Старичков, З.Г. Бондарева // Вопр курортол физиотер и ЛФК. 2004; 5: - С.29-31.

57. Стрельцов, Д.А. Биофармацевтическая оценка мазей на основе бишофита Текст. / Д.А. Стрельцов, Т.Ф. Маринина // Региональная конференция по фармации, фармакологии и подготовке кадров. Материалы. Тез.докл. Пятигорск, -2001. С. 112.

58. Сусликов, В.П. Геохимическая экология болезней. Текст.: в 3 т. / В.П. Сусликов Т. 2., Атомовиты. М.: Гелиос АРВ. - 2000; - С. 672.

59. Тен, Э.В. Экспресс-метод определения активности церулоплазмина в крови Текст. / Э.В. Тен // Лаб. дело. 1981. - № 6. - С. 334-335.

60. Терехина, H.A. Свободнорадикальное окисление и антиоксидантная система (теория, клиническое применение, методы) Текст. / Н.А.Терехина, Ю.А. Петрович // Пермь. -1992. с.34.

61. Титов В.Н. Клиническая и лабораторная диагностика. Текст. М.: Медицина, 1995. - №2. - С, 3-7.

62. Тутельян, В.А. Микронутиенты в питании здорового и больного человека Текст. / В.А. Тутельян, В.Б. Смиричев, Б.И.Суханов, В.А. Кудашева Москва: «Колос», — 2002. - с.442.

63. Ушаков, В. Г. Определение коэффициентов диффузии в лечебной грязи Текст. / В. Г. Ушаков // Изв.Сев.-Кав. научного центра высшей школы. Технические науки. 1985. - №3. - С.35-38.

64. Чевари, С. Роль супероксиддисмутазы в окислительных процессах клетки и метод определения ее в биологических материалах Текст. / С. Чевари, И. Чаба, И. Секей. Лабораторное дело—1985 — №11. — с. 678-681

65. Чевари, С. Свободнорадикальные реакции и рак Текст. / С.Чевари, Т.Андял, К.Бенке, Я.Штренгер // Вопр. мед. химии. — 1992. 38, N5 : 0042-8809. - С. 4-5.

66. Чекман, И.С. Магний в медицине Текст./ И.С. Чекман, H.A. Горчакова, С.Л. Николай // Кишинев, 1992. - с. 101 .

67. Шевцов, В.И., Структурные основы биомеханических свойств кожи при растяжении Текст. / В.И. Шевцов, Л.А. Гребенюк, В.А. Щуров // Успехи физиол.наук. 2003. - Т.34. - №3. - С.78-88.

68. Шилов, А.М. Синдром дефицита магния в практике первичного звена здравоохранения Текст. / Медицинский вестник, 2008, - № 30 (457)

69. Школьникова, М.А., Метаболизм магния и терапевтическое значение его препаратов: пособие для врачей. Текст. / М.А. Школьникова, С.Н. Чупрова, JI.A. Калинин и др. М: Медпрактика-М, 2002. - С. 1-28

70. Щава, С.Н., Экспериментально-клиническое обоснование применения минерала бишофит в дерматологической практике Текст. / С.Н. Щава, A.A. Спасов, А.Ю. Родин, Э.С. Темкин // Вестник дерматол. 2001. -№ 1. - С.24-28

71. Федотова, Л.Э. Дефицит магния у детей с минимальной мозговой дисфункцией и его коррекция препаратом Магне В6. Текст.: Автореф. дисс. канн, мед.наук./ Иваново, — 2003. - 17с.

72. Хакимов, Х.Х. Периодическая система и биологическая роль элементов Текст. / Х.Х. Хакимов, А.З. Татарская // Ташкент: Медицина, 1985. -С.18.

73. Хватова, Е.М., Общие принципы метаболической адаптации мозга к стрессорной гипоксии. Текст. / Е.М. Хватова, A.C. Корякин // Нейрохимия. 1988. - № 4. - Т. 7-е. - С. 538-545. ISSN(p): 1027-8133

74. Холопов, А. П. Новые методики пелоидотерапии Текст. / А.П Холопов // Тр. V Всерос. съезда физиотерапевтов и курортологов и Российского науч. форума "Физические факторы и здоровье человека". М.: Авиаиздат, 2002. - С. 353-354.

75. Холопов, А.П. Грязелечение. Текст./ А.П Холопов, В.А. Шашель, Ю.М. Перов, В.П. Настенко.// Р-на-Д: газетное издательство «Периодика Кубани», 2002. - с.284. - ISBN 5-331-00018-5.

76. Хугаева, В.К., Анатомо-физиологические особенности крово- и лимфообращения кожи Текст. / В.К. Хугаева, А.В. Ардасенов, С.Б. Ткаченко, Н.Н. Потекаев // Экспер. и клин, дерматокосметология. М.: Изд.дом. «Русский врач» - 2003. - №2. - С.4-10.

77. Эфендиева, Ф.М. Лечебные грязи Азербайджанской ССР. Текст ./ Ф.М. Эфендиева // Баку, — 1971; — с. 181.

78. Altura, В.М. Basic biochemistry and physiology of magnesium: a brief review. / B.M. Altura // Magnesium & Trace Elements. 1991. - V. 10. - P. 167-171.

79. Altura, B.M. Hypertension, Physiopathology, Diagnosis and Management / B.M. Altura, B.T. Altura // in: J.H. Laragh, B.M. Brenner (Eds.), second ed., Raven Press, New York, 1995. - P. 1213-1242.

80. Banki, C.M. Cerebrospinal tluid magnesium and calcium related to amine metabolites, diagnosis, and suicide attempts. / C.M. Banki, M. Vojnik, Z. Papp et al. // Biol. Psychiatry. 1985. - Vol. 20. - P. 163-171.

81. Bernardini, D. Magnesium and microvascular endothelial cells: a role in inflammation and angiogenesis. / D. Bernardini, A. Nasulewiez., A. Mazur, J.A. Maier // Front. Biosci. 2005. - Vol.10. - P. 1177-1182.

82. Bongarzone E.R., Pasquini J.M., Soto E.F. // J. Neurosci Res. 1995. - V. 41.-P. 213-221.

83. Bures, Y. Techniguts and basic experiments for the study of brain and behavior. / Y. Bures, O. Buresova, J.P. Huston // Amsterdam, New York: Elsevier Science Publishers B.V. — 1983.

84. Cernak I., Savic V., Kotur J., Prokic V., Kuljic В., Grbovic D.,Veljovic M. Alterations in magnesium and oxidative status during chronic emotional stress // Magnes Res. 2000; Mar; - 13: 1. -P.29-36.

85. Carl, G Reversible hypokalemia and hypomagnesemia during alcohol withdrawal syndrome. / G. Carl, E. Holzbach // Der Nervenarzt. — 1994. 4; -65(3):206-l 1. - ISSN: 0028-2804

86. Cox I., Cambell M., Dowson D. // Lancet. 1991. - Vol.337. - P.757-760.

87. Crune Т., Michel p., Sitte N., et all. // Free Radic. Biol. Med. 1997. - V. 23.- P. 357-360.

88. Davies K.J.A., Delsignore M.E. / J.Biol.Chem., 1987. - Vol.262. -P.9908-9913.

89. Durlach J. // J. Rapport-Vittel. -1971. -Vol. 1. P.25I-275.

90. Durlach J., Pages N., Вас P., Вага M., Guiet-Bara A Biorhythms and possible central regulation of magnesium status, phototherapy, darkness therapy and chronopathological forms of magnesium depletion // Magnes Res. -2002: Mar; Vol.15: 1-2. -P.49-66.

91. Durlach J., Pages N., Bac P., Bara M., Guiet-Bara A., Agrapart C. Chronopathological forms of magnesium depletion with hypofunction or with hyperfunction of the biological clock // Magnes Res. -2002; Dec; Vol.15: 34: -P.263-268.

92. Durlach J., Pages N., Bac P., Bara M., Guiet-Bara A. Beta-2 mimetics and magnesium: true or false friends? // Magnes Res. -2003; Sep; -Vol.16: 3. -P.218-233.

93. Durlach J., Pages N., Bac P., Bara M., Guiet-Bara A. Magnesium depletion with hypo- or hyper- function of the biological clock may be involved in chronopathological forms of asthma // Magnes Res. -2005; Mar; -Vol.18: 1.1. P. 19-34.

94. Durlach J., Guiet-Bara A., Pages N., Bac P., Bara M. Magnesium chloride or magnesium sulfate: a genuine question // Magnes Res. -2005; Sep; -Vol. 18:3.-P. 187-192.

95. Dyckner T., Webster P.O.// Am.Heart J. -1984. № 97. -P. 12-18.

96. Eby, G.JI. Rapid recoyery from major depression using magnesium treatment. / GA. Eby, K.L. Eby // Med. Hypotheses. -2006. -Vol. 67, -№ 2.- P.362-370.

97. Firoz M., Graber M. Bioavailability of US commercial magnesium preparations. Magnes. Res. -2001; -Vol. 14(4). P. 257-262.

98. Fromm, L. Magnesium attenuates post-traumatic depression/anxiety following diffuse traumatic brain injury in rats. / L. Fromm, D.L. Heath, R. Vink // J. Ani. Coll. Nutr. -2004. -Vol. 23, -N25. -P. 529S-533S.

99. Fry C, Hall S., Blatter L. et al. // Exp. Phys. -1990. -Vol. 75. P.187-198.

100. Grafe S., Saluz H.P., Grimm B., Hanel F. Mg-chelatase of tobacco: the role of the subunit CHL D in the chelation step of protoporphyrin DC // Proc-Natl-Acad-Sci-U-S-A. -1999; Mar 2; - Vol. 96: 5. - P. 941-1946.

101. Grases G., Perez-Castello J.A., Sanchis P., Casero A., Perello J., Isern B., Rigo E., Grases F. Anxiety and stress among science students. Study of calcium and magnesium alterations // Magnes Res. -2006; —Jun; Vol. 19: 2. -P. 102-106.

102. Gunther T. // Magnesium -1986. № 5. p.53-59.

103. Guzik, T.J., Korbut, R., Adamek-Guzik, T. (2003) Nitric oxide and superoxide in inflammation and immune regulation, Journal of Physiology and Pharmacology, Vol. 54 (4), - P.469-487.

104. Hallivel B., Packer L., Prilipko L. In Free Radicals in the Brain Aging, Neurological and Mental Disordes. Berlin: Springer—Verlag. —1992. P. 40.

105. Heinecke G., Li W., Daehnke H.L. et al. // G. Biol. Chem. 1993. - Vol. 25, — №3. — P. 8752-8759.

106. Jones L.A., Holmes J.C., Seligman R.B./ Anal.Chem. -1956. Vol.28, -P.191-198.

107. Kiss Z. Clinical importance and bioavalaibility of different magnesium sails afier oral administration tu humans / -Z. Kiss // Magnes. Res. 2006. -Vol 19, — № l.-P. 72.

108. Landeghem, G.F. Manganese-containing superoxide dismutase signal sequence polymorphism associated with sporadic motor neuron disease./ G.F. Landeghem, P. Tabatabaie, G. Beckman, L. Beckman, P. Andersen // Europ. J. of Neurol. 1999, - №6: - P.639-644.

109. Landrey M., Nuttal S., Maxwell S. R. // Ann. Clin. Biochem. 1998. -Vol.35, - №4. - P. 553-554.

110. Lavioe, P.JI. Tricyelic antidepressants inhibit voltage-dependentcalcium channels and Na-Ca exchange jn rat. brain cortex synaptosomes / P.A.1.vioe, G. Beauchamp, R. Elie // Can. J. Physiol. Pharmacol. 1990. — Vol.68.- P. 1414-1418.

111. Levine J., High scrum andcorebrospinal fluid Ca/Mg ratio in recently hospitalized acufely depressed patients. / Levine J., Slein D., Rapoport A., Kurtzman I // Neuropsychobiology. 1999. - Vol.39. - P. 63-70.

112. Ma, B., Dairy, magnesium, and calcium intake in relation to insulin sensitivity: approaches to modeling a dose-dependent association / B. Ma, A.B. Lawson, A.D. Liese, R.A. Bell, E.J.Mayer-Davis // Am J Epidemiol. -2006;-Sep; l;-Vol. 164: 5:449-458.

113. Mayr M., Kiechl S., Willeit J. et al. Infections, immunity and atherosclerosis // Circulation. 2000. - Vol. 102, - № 8. - P. 833-839.

114. Mickel H.S. Effect of hyperoxia differs during ischemia and reperfusion / HS. Mickel // Stroke. -1990 Jan; Vol.21(l). - P.l 19-23.

115. Mocci F. et al. The effect of noise on serum and urinary magnesium and catecholamines in humans // Occup Med. 2001; - Vol. 5. — P. 55-61.

116. Murck H., Magnesium and affective disorders./ Murck H.// Nutr. Neurosci. 2002. - Vol.5. - P. 375-389.

117. Nigam S., Prostaglandins, leicotriens and medicine. / S. Nigam, R.R. Averdunk, F. Gunter // Biochemical pharmacology 1986. - №23. - P.l-10.

118. Poleszak E. et al. Immobility stress induces depression-like behaviour in the forced swim test in mice: effect of magnesium and imipramine // Pharm reports. 2006; - Vol. 58. - P.746-752.

119. Prasad A.S., The base binding property of the serum proteins with respect to magnesium/ A.S. Prasad, E.B.Flink, H.H. Zinneman//J. Lab. Clin. Med. -1959.-№54.-P. 357-364.

120. Rasmussen H.H., Depression and magnesium deficiency / Rasmussen H.H., Mortensensen P.B., Jensen I.W. 1989. - Vol. 19. - P. 57-63.

121. Tsuji H., Quantitative relationship between atrial refractoriness and dispersion of refractoriness in atrial vulnerability./ H.Tsuji, A.Fujiki, M.Tani et al. // Pacing. Clin. Elektrophysiol., -1992, -Vol.15, a 4 Ptl, P. 403-410.

122. Schwinger, R.H. Heart failure and electrolyte disturbances./ R.H. Schwinger, E.Erdmann // Methods Find. Exp. Clin. Pharmacol. 1992. -Vol 14, -№ 4. - P.315-325.

123. Seelig M.S. Magnesium Requirements in Human Nutrition/ M.S. Seelig. // Magnesium Bull. 1981. -№ 3. - Suppl. 1A. - P.26-47.

124. Seelig M.S. Magnesium Deficiency in the Pathogenesis of Disease: Early Roots of Cardiovascular, Skeletal and Renal Abnormalities. / M.S. Seelig. // New York: Plenum Pub. Corp., 1980.

125. Seelig M. S. Magnesium metabolism and perturbations in the elderly/ M.S. Seelig, H.G. Preuss // Geriatric Nephrology and Urology. 1994 - Vol. 4. -P.101-111.

126. Schimatschek H.F., Prevalence of hypomagnesemia in an unselected German population of 16,000 individuals / H.F. Schimatschek, R. Rempis // Magnes Res. 2001; Dec; - Vol. 14: 4. - P.283-290.

127. Sjostrom K., Tolerance and cross-tolerance using N02 and 02. I. Toxicology and biochemistry. / K Sjostrom, RT.Drew, Crapo JD // Appl Physiophath. Res., -1981, Vol. 17, - P.31-41.

128. Wagner, D. Effect of protein kinase-C activation on the Mg2+-sensitivity of cloned NMDA receptors / D. Wagner // Neuropharmacology, 1996, - Vol. 35 (1), -P.29-36.

129. Wacker W.E.C., Magnesium metabolism. / W.E.C. Wacker, A.F. Parisi // New Engl. J. Med. 1968. - № 278. - P.658-663.

130. Whang, R. Refractory potassium repletion: a consequence of magnesium deficiency / R. Whang, D. Whang, M. Ryan // Arch. Intern. Med. -1992. -Vol. 152.-P. 40-5.

131. Zima, T. Lipid peroxidation and activity of antioxidative enzymes in patients with multiple myeloma./ T. Zima, I. Spicka, S. Stipek, et al. / Cas. Lek. Cesk. 1996 - Vol. 135. - P. 14-17.i