Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Субмикроскопические аспекты всасывания витаминов в тонкой кишке

ВАК РФ 03.00.11, Эмбриология, гистология и цитология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Хвыля, Сергей Игоревич

ВВВДЕЖЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Морфология энтероцита, как основной единицы абсорбтивного аппарата тонкой кишки

1.2. Механизмы всасывания витаминов в тонкой кишке

1.2.1. Транспорт тиамина.

1.2.2. Транспорт витамина В^.

1.2.3. Транспорт ретинола.

1.2.4. Транспорт витамина Е.

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Общая характеристика экспериментального материала. Методика экспериментов.

2.1.1. Материал исследований.

2.1.2. Методика экспериментов in situ

2.1.3. Методика изучения транспорта витаминов

2.1.4. Методика экспериментов in vitro

2.1.5. Эксперимент с естественным кормлением

2.2. Методы исследований.

2.2.1. Общая схема обработки тканей для электронной микроскопии.

2.2.2. Приготовление коллоидного лантана.

2.2.3. Прямой метод идентификации радиоактивных изотопов в срезах ткани.

2.2.4. Метод ОТО - контрастирования.

2.2.5. Метод морфометрического анализа микроворсинок.

Условные обозначения.

3. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ОБОСНОВАНИЕ МОДЕЛИ ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ ПРОЦЕССОВ ВСАСЫВАНИЯ В ТОНКОЙ КИШКЕ

3.1. Изучение взаимодействия коллоидного лантана со слизистой оболочкой тонкой кишки в экспериментах in situ

3.2. Влияние ишемии на проницаемость и сорбционные свойства эпителия тонкой кишки

3.3. Сорбционные свойства и проницаемость эпителия ворсин отрезка тонкой кишки в условиях in vitro

4. МЕХАНИЗМЫ ВСАСЫВАНИЯ И ТРАНСПОРТА МЕЧЕНЫХ РАДИОАКТИВНЫМ ИЗОТОПОМ ВИТАМИНОВ.

4.1. Всасывание водорастворимых витаминов.

4.2. Всасывание жирорастворимых витаминов

5. ВСАСЫВАНИЕ ПРИ ЕСТЕСТВЕННОМ КОРШГЕНИИ (МЕШАННОЙ ПИЩЕЙ

6. ДИНАМИКА ИЗМЕНЕНИЯ МИКРОВОРСИНОК АБСОРБТИВНЫХ ЭНТЕРОЦИТОВ

В ПРОЦЕССЕ ВСАСЫВАНИЯ.

7. ОБСУЖДЕНИЕ.

ВЫВОДЫ.

НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ

Введение Диссертация по биологии, на тему "Субмикроскопические аспекты всасывания витаминов в тонкой кишке"

В последние десятилетия широко изучаются и привлекают к себе все большее внимание процессы абсорбции в желудочно-кишечном тракте пищевых веществ различной химической природы. Однако подавляющая часть проводимых в различных странах исследований освещают лишь метаболизм нутриентов в ходе процесса всасывания. Значительный интерес в этом плане представляет детальное изучение механизмов и путей проникновения пищевых веществ через слизистую оболочку стенки тонкой кишкив организм в особенности таких, как витамины.

Витамины являются широко распространенными и обязательными компонентами пшци для всех представителей животного мира. В зависимости от химической природы, их подразделяют на жирорастворимые и водорастворимые ( или коферментные ). Все витамины выступают в организме в роли дополнительных биохимических компонентов, необходимых для метаболических реакций, протекание которых без них было бы затруднено или же вообще невозможно. Большинство витаминов не могут синтезироваться в организме животных и поступают лишь с пищей. Содержатся они в естественной пище в ограниченных количествах. Вследствие этого в клетках необходимо наличие транспортных систем, позволяющих быстро и достаточно полно обеспечить потребности в витаминах организма. Полное отсутствие или же выраженный недостаток в пище этих компонентов приводят к развитию тяжелой патологии как у животных, так и у человека. Поэтому весьма существенным является выяснение механизмов первого этапа проникновения этого класса веществ из внешней среды ( пищи ) в организм - механизмов всасывания витаминов через слизистую оболочку кишки.

При исследовании всасывания витаминов различной химической природы в тонкой кишке используются самые различные модели in vitro и in situ , в которых часто присутствует элемент ишемизации тканей кишки, влияние которой на объем и механизмы проникновения веществ через пласт энтероцитов и стенку кишки далеко не всегда возможно учесть. Б то же время хорошо известно, что интенсивность всасывания витаминов ( как, впрочем, и других пищевых веществ ) может зависеть от снабжения кишки кислородом [2 ] и от многих других факторов, например гормонального и нервного влияния [224] . Данные, опубликованные в литературе по этому вопросу, посвящены, в основном, рецепторному аппарату адсорбции или же касаются суммарного транспорта витаминов из просвета кишки в кровь или лимфу [50,51,133 ] . Демонстрируемые результаты часто неоднозначны: механизмы переноса витаминов в одних работах считаются активными [ 106,133,138 ] , в других [ 128,131,135 ] - пассивными. Б значительной степени это связано с тем, что подавляющая часть проведенных исследований выполнена на кишке, инкубируемой в условиях in vitro . Б то же время было показано [ 154 ] , что в указанных условиях наблюдаются выраженные морфологические изменения эпителия стенки кишки. Кроме того, причиной неоднозначности имеющихся данных могут служить следующие факторы. Во-первых, разные концентрации витаминов при изучении их всасывания и, во-вторых, изучение механизмов транспорта только на больших сроках после начала всасывания витаминов. А в этот момент кроме транспорта витаминов из химуса в кровь реально имеется и встречный поток - из крови в химус [ 61 J .

Биохимические и такие рутинные морфологические методы исследования, как световая и трансмиссионная электронная ми

- 6 кроскопия не позволяют проследить тонкие механизмы проникновения витаминов поэтапно через структуры энтероцитов из химуса в организм. Предлагаемые на настоящий момент исследователями различные механизмы переноса витаминов через слизистую оболочку кишки гипотетичны и не имеют достаточно четких доказательств,

При отсутствии физиологичности условий эксперимента при исследовании всасывания в тонкой кишке ( например, на препаратах кишки in vitro или при наличии ишемизации тканей кишки ) может происходить извращение механизмов всасывания витаминов. Вследствие этого необходим обоснованный выбор модели для изучения проникновения витаминов через стенку кишки с целью соблюдения максимального приближения к естественным физиологическим условиям всасывания. Без знания же реальных путей и механизмов транспорта витаминов через пласт энтероцитов и далее в собственную пластинку слизистой оболочки кишки невозможно полное понимание процессов всасывания и метаболизма витаминов различной химической природы. тч о о

В настоящий момент значительная часть исследователей придерживается мнения о том, что главной функцией микроворсинок является увеличение всасывающей поверхности кишки. Однако до сих пор всасывание веществ через мембрану микроворсинок никем достоверно не подтверждено. В то же время ряд последних работ с применением высоко чувствительных методов имглуно-электронно-микроскопического исследования убедительно продемонстрировали наличие сложного сократительного комплекса в апикальной зоне и микроворсинках энтероцитов £ 101,169,193 J , что свидетельствует об их подвижности. В других работах было показано, что длина микроворсинок и площадь их поверхности зависят от того, было ли экспериментальное животное сытым или же голодным [^80, 81,212] . Какова же истинная роль микроворсинок энтероцитов в

- 7 реализации основной функции кишки - всасывания и какова динамика изменения параметров этих органелл в ходе этого процесса - до сих пор не установлено.

Целью настоящей работы явилось выяснение путей и механизмов проникновения некоторых витаминов различной химической природы ( водорастворимых и жирорастворимых ) из просвета кишки во внутреннюю среду организма в условиях максимально приближенных к естественным, а также выяснение роли апикального сократительного комплекса абсорбтивных энтероцитов в этом процессе.

Поставленная цель определила следующие задачи:

1) Экспериментально обосновать оптимальную модель для изучения механизмов всасывания в тонкой кишке.

2) Изучить пути и механизмы транспорта витаминов через слизистую оболочку тонкой кишки в условиях модельного эксперимента.

3) Изучить механизмы проникновения веществ, с которыми витамины поступают в желудочно-кишечный тракт в естественных условиях.

4) Изучить реакцию микроворсинок при активации Функции всасывания после естественного кормления и, тем самым, выяснить роль апикального сократительного комплекса абсорбтивных энтероцитов в реализации основной функции тонкой кишки - всасывания.

Научно-практическая значимость такого исследования состоит в том, что оно позволяет углубить наши знания о фундаментальных вопросах механизмов всасывания и транспорта витаминов в желудочно-кишечном тракте. Полученные результаты могут помочь в обосновании оптимальных способов применения витаминов в клинической практике, а также подойти с новых позиций к разработке методов коррекции синдрома пониженного всасывания веществ в клинике.

В результате проведенных исследований впервые получены морфологические данные, демонстрирующие эндо- и экзоцитозный путь транспорта витаминов различной химической природы через энтероциты тонкой кишки. Кроме того, показана несостоятельность модели in vitro для исследований процессов всасывания в тонкой кишке. Также впервые указано на важную роль сократительного актомиозинового аппарата микроворсинок и терминальной зоны абсорбтивных энтероцитов в процессах всасывания.

I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение Диссертация по теме "Эмбриология, гистология и цитология", Хвыля, Сергей Игоревич

выводы

1. Начальным этапом всасывания витаминов в тонкой кишке является их сорбция на гликокаликсе микроворсинок энтероцитов. Связывание с рецепторными молекулами гликокаликса абсорбтивных энтероцитов является фактором, лимитирующим всасывание.

2. Витамины различной химической природы проникают через апикальную поверхность энтероцитов с помощью пиноцитозного механизма. Образование транспортных пиноцитозных везикул происходит между основаниями микроворсинок при активном участии акто-миозинового комплекса микроворсинок и терминальной сети.

3. В ходе процесса всасывания у активно функционирующих энтероцитов уменьшается длина микроворсинок. Это происходит вследствие работы сократительного комплекса клеток и расхода мембранного материала на образование транспортных и секреторных везикул.

4. На ранних этапах активации процессов всасывания транспорт витаминов через энтероциты осуществляется в пиноцитозных транспортных везикулах транзитом, без включения во внутриклеточный метаболизм. Частичное включение транспортируемых витаминов в клеточный обмен возможно на более поздних сроках путем слияния пиноцитозных пузырьков с клеточными органеллами: лизо-сомами, эндоплазматическим ретикулумом, комплексом Гольджи.

5. Выход витаминов из энтероцитов осуществляется по механизму экзоцитоза содержимого транспортных везикул в интерэпителиальное пространство. При этом водорастворимые витамины часто сохраняют временную связь с латеральной мембраной энтероцитов, жирорастворимые - могут транспортироваться в составе хиломикро-нов.

6. Эпителий слизистой оболочки тонкой кишки крыс характеризуется непрерывностью функционирования и гетерогенностью популяции абсорбтивных энтероцитов, выражающейся в наличии клеток, невовлеченных в процессы всасывания. Проявления гетерогенности максимальны при уменьшении пищевой нагрузки на кишку или ее отсутствии и минимальны в период наибольшей функциональной активности.

7. Для изучения всасывания в тонкой кишке адекватными являются условия in vivo и in situ . Применение инкубируемой в условиях in vitro тонкой кишки для изучения процессов всасывания должно быть ограничено, вследствие грубых нарушений проницаемости мембран энтероцитов и межклеточных контактов.

8. Нарушения проницаемости мембран энтероцитов являются первым признаком инволютивных изменений кишечного эпителия. Морфологические проявления этих изменений вторичны и выявляются позднее.

НАУЧНО - ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ

В результате решения поставленных задач получены новые данные о механизмах всасывания витаминов в тонкой кишке в условиях модельного эксперимента и из комплекса смешанной пищи при естественном кормлении.

Впервые получены морфологические данные, демонстрирующие пути и механизмы транспорта водо- и жирорастворимых витаминов через эпителиальный пласт тонкой кишки. Полученные результаты указывают на пиноцитозный механизм транспорта и не подтверждают трансмембранный перенос витаминов через энтероциты. Одновременно обоснована оптимальные модели для изучения процессов всасывания в тонкой кишке и показана несостоятельность модели in vitro для этих исследований.

Pia основании проведенного комплексного исследования с применением ультраструктурных, электронногистохимических и морфо-метрических методов исследования было показано значение сократительного аппарата апикальной зоны энтероцитов в процессе всасывания и продемонстрировано, что функционирование этого аппарата способствует реализации пиноцитозного механизма всасывания.

Полученные данные являются важными для понимания интимных механизмов функционирования всасывающего аппарата тонкой кишки. Сведения о везикулярном характере транспорта витаминов различной химической природы через энтероциты и об участии в этом процессе сократительного аппарата микроворсинок и терминальной сети позволяют составить более полную картину морфо-физиологических процессов, происходящих во время всасывания витаминов в тонкой кишке в естественных условиях. Результаты данного исследования позволяют подойти с новых позиций к разработке методов коррекции "скрытых" авитаминозов и коррекции синдрома пониженного всасывания веществ в клинике.

1. Адо А.Д.

2. Амиров Н.Ш.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Хвыля, Сергей Игоревич, Москва

1. Всасывание из тонкой кишки и ее кровоснабжение. В кн.: Физиология всасывания. Л. Наука. 1977, с. 588-618.

2. Вальдман A.C., Всасывание витаминов. В кн.: Физиология вса-Циеленс Э.С., сывания. Л. Наука. 1977, с. 423-488.

3. Озол А.Я., Андрушайте Р.Я.

4. Вальдман А.Р. Всасывание витаминов на уровне эпителия тонкой кишки. В кн.: Проблемы белково-витамин-ных взаимодействий в норме и патологии. Латв. респ. симп. 1978. Тезисы докладов. Рига. 1978, с. 16-20.

5. Электронная микроскопия слизистой оболочки тонкой кишки. ДАН,1956,т.106,№ 4,с.721-724.5. Гольдин Л.С.

6. Елецкий ГО.К., Ультраструктурные и молекулярные основы Цибулевский А.Ю. транспорта веществ через щеточную кайму энтероцита тонкой кишки. Усп. совр. биол. 1979, т. 87, вып. 2, с. 304-320.

7. Ермаков В.В., Ковальский В.В.

8. Заварзин A.A., Харазова А.Д.9. Зуфаров К.А.

9. Зуфаров К.А., Шишова Е.К., Ташходжаев П.И.

10. Зуфаров К.А., Ташходжаев П.И. Шишова Е.К., Хамидов Д.Х.

11. Биологическое значение селена. М. 1975.

12. Основы общей цитологии. Изд. Ленинградского университета. 1982.

13. Значение мембранных структур клеток в процессах всасывания. В сб.: Структура и функция биологических мембран. М. 1975, с. 327339.

14. Атлас. Электронная микроскопия пищеварительной системы. Ташкент. 1969.

15. Атлас. Электронная микроскопия органов и , тканей. Ташкент. 1971.

16. Каган B.E*, Азизова O.A.,.-АрхипенкоЮ.В., Клаан Н.К., Козлов Ю.П.,. . Владимиров Ю.П.13. Кахаров А.

17. Комиссарчик Я.10. Уголев А.М.15. Колотенко В.П.

18. Комиссарчик Я.Ю. Левин С.В.17. Крюкова Л.В.18. Кулик В.П., Шалыгина Н.Б.19. Кушак Р.И.20. Лаврова B.C.21.Ленинджер А.

19. Лисочкин В.Г., Хмельницкий O.K.23. Лодиш X., Ротмен Да.

20. Взаимосвязь структурных и функциональных перестроек в мембранах саркоплазматического ретикулума при перекисном окислении липидов, Биофизика, 1977, № 4, с. 625-630.

21. Локальные особенности лимфатической и кровеносной системы брыжеечной части тонкой кишки. Автореф. канд. дисс. М. 1963.

22. Ультраструктура и возможное функциональное значение гликокаликса микроворсинок кишечных клеток. ДАН. 1970, т.194, № 3, с. 731-733.

23. Действие преднизалона на барьерные свойства эпителиальных тканей. Автореф. канд. дисс. Днепропетровск. 1977.

24. Примембранные структуры клеток животных. Структурная и химическая организация толстых мембран.Цитология.1974,т.16, J®,с.528-535

25. Всасывание желчных кислот и их печеночно-ки-шечная циркуляция.В кн.:Физиология всасывания. Л. Наука. 1977, с. 385-422.

26. Морфология тонкой кишки. В кн.: Физиология всасывания. Л. Наука. 1977, с. 5-81.

27. Пищеварительно-транспортная система энтеро-цитов. Рига. Зинатне. 1983.

28. Обмен витамина Bj^ при выключении различных видов пищеварительной секреции. В кн.: Материалы III пленума патофизиологов Сибири и Востока, i960, с. II-I7.

29. Биохимия. Молекулярные основы структуры и функций клетки. М. Мир. 1976.

30. Ультраструктура клеток слизистой оболочки тонкой кишки. В кн.: Физиология всасывания. Л. Наука. 1977, с. 82-121. Сборка клеточных мембран. В кн.: Молекулы и клетки. Вып. 7.М. 1982, с. 149-175.24. Лысенко А.И.

31. Лысиков Ю.А., Хвыля С.И., Морозов И.А.

32. Лысиков Ю.А,, Соколова М.В., Морозов PL А.27. Морозов И.А.28. Морозов И.А.

33. Морозов И.А., Спиричев В.Б., Лысиков Ю.А.

34. Морозов И.А., Лысиков Ю.А.31. Морозов И.А. Morozov I.A.32. Натансон A.A.33. Никольский Н.Н

35. Покровский A.A. Тутельян В.А.35. Розанов А.Я.

36. Электронномикроскопическое выявление и диф-ференцировка кислотных группировок надмемб-ранного слоя эпителия тонкой кишки. В сб.: Ультраструктурные аспекты морфогенеза и регенерации в номе и патологии.M.1976,с.46-51.

37. Электронномикроскопическое и авторадиографическое исследование процессов проникновения веществ через апикальную поверхность энтеро-цита. В кн.: Фундаментальные проблемы гастроэнтерологии. Киев. 1981, с. 156.

38. Везикулярный транспорт пероксидазы эпителиальными клетками тонкой кишки взрослых крыс. Билл.эксп.биол.мед.1983,т.45,M,с.II4-II8. Морфологические аспекты секреции соляной кислоты желудком в норме и патологии. Докт. дисс. M. 1977.

39. Гипотеза единого механизма всасывания пищевых веществ в тонком кишечнике.В кн.¡Теоретические и практические аспекты изучения питания человека. M. 1980, т. I, с. 59-60.

40. Изучение субклеточной локализации Са при его всасывании.эпителием тонкой кишки крыс. Билл. эксп. биол .мед. 1980, т.42 ,М2, с. 736-738.

41. Динамика метаболизма тиамин,его биологическое значение и зависимость от функций пищеварительной системы.В кн.: Тиамин. Обмен, механизм действия. М. Наука. 1978,с. 27-34.36. Скляров Я.П., Яремко Е.Е.

42. Скородинский.З.П Шатурный Г.П., Маркевич С.О.

43. Спиричев В.Б., Барашнев Ю.И.

44. Спиричев В.Б., Матусис И.И.,. Бронштейн Л.М.

45. Степанова.Л.Н., Розанов А.Я.

46. Сугоняева Н.П., Хвыля JI.A.,. . Васнецова Е.Б.

47. Ташходжаев П.И. Мавриди Д.И.43. Труфанов A.B.44. Уголев A.M.

48. Уголев A.M., Тимофеева Н.М., Иезуитова H.H., Груздков A.A., Лесогор В.М.

49. Уголев A.M., Паршков Е.М., Егорова В.В.,. Иезуитова H.H., Митюшова Н.М., Смирнова Л.Ф., Тимофеева Н.М., Дветкова В.А.

50. Особенности ультрастроения кутикулы эпителиальных клеток слизистой оболочки тонкого кишечника.собаки, крысы и человека. Бюлл. .эксп.биол.мед. 1968, t.65,JI> I,c. II2-II5.

51. Особенности ультраструктуры цилиндрических эпителиальных клеток тонкого отдела кишечника у крупного рогатого скота и овец. В сб.: Физиология и патология тонкой кишки. Рига. 1970,. с. 25-26.

52. Врожденные нарушения обмена витаминов. М. Медицина. 1977.

53. Витамин Е. В кн.: Экспериментальная витаминология. Минск. Наука и техника.1979, с. 1857.

54. Распределение и секреция s -тиамина в пищеварительной системе крыс разного возраста .Вопр. мед. химии .1980, т. 26, J« 5, с. 663-668.

55. К вопросу о пространственной организации самообновления фолликула Пейеровой бляшки крысы. В сб.: Фундаментальные проблемы гастроэнтерологии. Киев. 1981, с. 245-246.

56. Распределение адсорбированных и собственно кишечных ферментов между клетками слизистой тонкой.кишки и отделенным от них гликока-ликсом. ДАН. 1978,т. 241, й 2, с. 491-494.

57. Уголев A.M., Физиология мембранного (пристеночного) пи-Иезуитова H.H., щеварения. В кн.: Физиология пищеварения. Тимофеева Н.М. JI. Наука. 1974, с. 542-570.

58. Файтельберг P.O.,Ультраструктура клеток слизистой оболочки Нгуен Taii Лыонг. кишечника и энергетика всасывания. В кн.:

59. Матер. 2 Всес.симпоз.по физиологии и патологии всасывания в желудочно-кишечном трак. . те. Одесса. 1973, с. 130.

60. Файтельберг P.O. Всасывание в желудочно-кишечном тракте. М.1. Медицина. 1976.

61. Халмурадов А.Г., Транспорт жирорастворимых витаминов. Киев. Тоцкий В.Н., Наукова Думка. 1980.1. ЧаговецР.В. .

62. Халмурадов А.Г., Мембранный транспорт коферментных витаминов Тоцкий В.Н., и коферментов. Киев. Наукова Думка. 1982. Чаговец Р.В.

63. Хвыля С.И., Механизмы энтероцитарного этапа всасывания Лысиков Ю.А. веществ в тонкой киже крыс. В сб. :Национална младежка конференция по гастроэнтерология и хранене.Резумета на доклади.София. 1982.

64. Червова И.А. Организация процессов жизнедеятельностисердца.В кн.: Организация специфического метаболизма органных клеток.М. 1976, с. 7-26.

65. Чуич H.A. Роль межклеточных контактов в генезе стрессорных язв. Автореф. канд. дисс. Днепропетровск. 1974.

66. Шаров В.Г., Сравнительное изучение дефектов проницае-Дженингс Р.Б., мости мембран кардиомиоцитов при глубокой Хокинс Х.К. ишемии и при воздействии изопротеренола спомощью.коллоидного лантана. Арх.патол.1980, Je 10, с. 35-44.

67. Шатерников В.А. Витамин Е. В кн.: Витамины.М. 1974,с. 125-150

68. Шестопалова Н.М., Электронномикроскопическое изучение плас-Авакян A.A., тических процессов кишечного эпителия неко-Рейнгольди В.Н., торых млекопитающих. Архив анат.гист.эмбр. Ткаль В.В. I960, т. 38, й 3, с. 34-44.

69. Шлыгин Г.К. Секреторная деятельность тонкого кишечника.

70. В кн.:Физиология пищеварения.Л.Наука.1974, с. 453-473.59. Яремко Е.Е.60. Яремко Е.Е.

71. Abels I., Vegter I.I.M., Wol'drlng M.G., Jans I.H.62. Adams I.P., Boggy Keith.63. Akerib M., Sterner W.

72. Akhtar IvI., Blosse P.T., Dewhurst P.B.65. Allen J.66. Aoki I.I., Tavassoli M.

73. Asworth C.T., Chears W.C., Sanders E., Pearce M.B.

74. Begg D.A., Rodewald R., Rebhun L.J.69. Bennet H.S.70. Bennet H.S.

75. Ультраструктурные факторы всасывания жира в.тонком кишечнике. Вопр. питания. 1968, т. 27, № I, с. 67-72.

76. Изменение ультраструктуры микроворсинок кишечного эпителия при всасывании глюкозы. Физиол.ж.СССР. 1968, т. 54, & 5, с. 603-606 The physiologic mechanism of vitamin B^ absorption.Acta Med.Scand.1959,v.l65,№ 2, p. 105-113.

77. Metabolic equilibrium of fracer and natural vitamin B12. J. Lab. Clin. Med. 1968,v.72, N0 3, p. 392-396.1.hibition of vitamin E absorption by a lipid fraction. Int. J. Vit. Nutr. Res. 1971,v.41, No 1, p. 42-43.

78. Morphologycal aspects of extracellular poly saccharides.J.Histochem.Cytochem.1963, v.11,1, p. 14-23.

79. Bloom V., A textbook of histology.Phyladelphia.1968. Pawcett D.W.

80. Blomstrend R.,Labelled tocoferols in man. Intern.Z.Vitamin-Porsgrin L. forsch. 1968,v. 36,N0 3-4, p. 328-344.

81. Bouhours J., Effect on fasting on carbohydrate moiety of Andre P., guinea pig intestinal brush border.Digestion. Gnignard H., 1973, v. 9, No 4, p. 309-316.1.mpert R.

82. Bretscher A., Localisation of actin and microfilament asso-Weber K. ciated proteis in the microvilli and terminalweb of the intestinal brush border by immunofluorescence microscopy. J. Cell Biol. 1978, v. 79, No 4, p. 839-845.

83. Bretscher A., Purification of microvilli and on analysis of Weber K. the protein components of the microvilamentcore bundle.Exprtl.Cell.Res.1978,v.116,p.397-407.

84. Brown A.L. Microvilli of the human jejunal epithelialcell. J. Cell Biol. 1962,v.12,U03,p.623-627.

85. Brunser 0., Pine structure of the apex of absorptive cells Luft J.H. from rat small intestine.J. Ultrast. Res.1970,v; 31, p. 291-311.

86. Buschman R.J.,Morphometric analisis of the membranes and or-Manke D.J. ganelles of small intestinal enterocytes.I.

87. Pasted Hamster. J.Ultrastr.Res.1981,v. 76, No 1, p. 1-14.

88. Buschman R.J., II. Lipid-fed Hamster. Ibid. p. 15-26. Manke D.J.

89. Buschman R.J. Morphometry of the small intestinal enterocytesof the fasted rat and effects of colchicine. Cell Tissue Res.1983,v.231,ND2,p.289-299.

90. Carchon H., Bury F., Karczmarski M. Eggerment E. 84. Castle W.B.85. Clark S.L.

91. Corcino J.J., Waxman S., Herbert V.87. Crane R.K.

92. Crawford В., Cloney R.A., Cahn R.D.89. Creamer B.90. Creamer В., Heller M.D.91. Dalton A.J.92. Dalton A.J.93. Dalton A.J., Felix M.D.94. De Duve C.95. De Duve C.96.Desnuelle P.

93. The intestinal brush border membrane. Acta Gastroenterologyca Belgica. 1978, v. 41, 1T0 1-2, p. 28-31.

94. A concept of the digestive-absorptive surface of the small intestine. In:Handboock of physiology.1968.Washington.Sect.6,v.5,p.2535 -2542.

95. Cloned pigmented retinal cells; the effect of cytocholasin B on ultrastructure. Z.Zell-forschung Micr.Anat.1972,v.130,No2,p.135-151. Mainly about structure.In: The small intestine. W.Heinemann Med.Boocks.LTd.London.1974, p. 1-23.

96. Mainly about function. Ibid. p. 24-46.

97. A comparative study of the Golgy complex.J.

98. Bioph.Bioch.Cytol. 19 56,v.2,Uo4,P.79-84.

99. The lysosome.Sei.Amer.1963.v.208,p.64-72.

100. Die Rolle der Lysosomen in der Zellpethologie.Triangel.1970,v;9,Uo6,p.200-209.

101. The tenth sir Hans Krebs lecture.Intestinaland renal aminopeptidase: a model of a transmembrane protein.Eur.J.Bioch.1979,v;101,p.1-11

102. Dobbins W.O. Morphologic and functional correletes of intestinal brush borders. Am. J. Med. Scien. 1969, v. 258, p. 150-171.

103. Donaldson R.M.»Studies of intestinal microvilli intrinsic McKezie J.L., factor mediated attechment of vitamin to Trier J.S. brush border and microvillous membranes /abst/

104. J. Clin. Invest. 1966, v. 45, No 8, p. 1001.

105. Doscherholmen A., A duel mechanism of vitamin plasma abHagen P.S., sorption. Ibid. 1957,v.36,N012, p.1551-1557. Lin M.,1. Olin J.

106. Doumeng Ch., Aminopeptidase, a cytosol enzyme from rabbit Maroux S. intestinal mucosa.Bioch.J.1979,v.177,p.801-808

107. Drenckhalm D., Immunocytochemical localisation of myosin in Steffens R., the brush border region intestinal epithelium. Groschel- Cell Tissue Res. 1980, v. 205, p. 163-166. Stewart U.

108. Drenckhahn D., Localisation of myosin,actin and tropomyosin Groschel- in rat intestinal epithelium:Immunochemichemi-Stewart U. cal studies at the light and electron microscope levels.J.Cell Biol. 1980,v.86,N03,p.475-482.

109. Farquhar M.G.,Junctional complex in various epithelia. Pallade G.E. Ibid.1963,v.17,No3,p.375-412.

110. Fawcett D.W. Surface specialisation of absorbing cells.

111. J. Histochem. Cytochem. 1965,v. 13,p.75-91.

112. Feracci H., Rabbit intestinal aminopeptidase purification Maroux S. and molecular properties. Biochim. biophys.acta. 1980, v. 599, p. 448-463.

113. Ferrari G., Transporto intestinale in vitro della thiami-Ventura U., na influenza del lTa+. Boll. Soc. Ital. Biol. Rindi G. Sper. 1969, v. 45, No 12, p. 1546-1549.

114. Fisher R.B., A preparation of surwiving rat small intesti-Parsons D.S. ne for the study of absorption. J. Physiol.1949, v. 110, No 1, p. 36-46.

115. Fleischer S., Membrane associeted proteins. In: Biomembra-Zahler W., nes. N.Y.-London,Plenum Press. 1971, v. 2, Orawa H. p. 105-119.

116. Flemming W.H.,The site of absorption of orally administered60

117. Ring E.R. Co labelled vitamin ±n dogs: the effectof dose.Gastroenterology.1962,v.42,No2,p.164-168.

118. Friedman H.J. Cardeil R.R.

119. Friedman H.J. Cardeil R.R.112. Flinke 0.113. Friend D.S., Gilula H.B.114. Gallo-Torres H.E.115. Gassman B., Ketz H.A.

120. Gassman B., Ketz H.A., Haenel H.117. Gassman B., Sander E.118. Gibaldi M., Grundhofer B,119. Glass G.B.J.120. Golgi C.121. Gozaler-Licea A.122. Granger B., Baker R.F.

121. Obligatory role of bile for the intestinal absorption of vitamin E. Lipids. 1970, v;5, Ho 4, p. 379-384.

122. Untersuchungen über Resorption und Stoffwechsel des Vitamin B^ in Magen-Darm-Kanal. Isotopentechnik. 1960/1961,v.1,Ho 7, p. 197-198. Vitamin B^ im Magen-Darmtrakt der Ratte Resorption und Excretion. Biochem. Z. 1961, v. 334, Ho 3, p. 245-254.

123. Hajjar J.J., Khuri R.N., Curran P.P.125. Ham A.W., Cormack D.H.126. Hartman R.S.

124. An electron microscopic investigation of je

125. Butterworth C.E., junal epithelium in sprue. Gastroenterology. 1960, v. 38, N0 4, p. 506-516. Ferritin-containing bodies in human small intestinal epithelium. Blood, v. 22, No 3, p. 397-405.

126. Amer.J.Physiol. 1977,v.232,No 5,p.E471-S477.1. Hartman R.E. ,127. Hartman R.S., Conrad M.E.

127. Hayashi K., Yoshida S., Kawasaki T.129. Heinz D.130. Henle J.131. Herbert V.131. Hicks R.M.133. Hines Ch.

128. Hiñes J.D., Rosenberg A., Harris J.W.135. Hollander D., Rim E. ,

129. Hoyumpa A.M., MidcLleton H.M. Wilson P.A., Schenner S.

130. Hoyumpa A.M., Nichols S., Schenner S., Wilson P.A.139. Hull B.E., Staehelin L.A.

131. Ishikawa H., Bischoff R., Holtrr H.141. Ito S.142. Ito S.143. Ito S.144. Ito S., Revel J.P.

132. Jenkins W.J., Empson R., Jewell D.R., Taylor K.B.

133. Kalin J.R., Starling M.E., Hill D.L.

134. Kania R.J., Santiago N.A., Gray G.M.

135. Keilson B., Lewis K., Underwood B.A. Loerch J.D.

136. Thiamine transport across the rat intestine. , Gastroenterology.1975,v.68,No5,p.1218-1287.

137. Thiamine transport in thimine defifient rat. I.Role of the unstriared water layar. Bio-chim.Biophys. acta.1976, v; 436, No 2, p. 438-447.

138. The terminal web. A réévaluation of its structure and function. J.Cell Biol.1979,v.81, No 1, p. 67-82.

139. Structure and function of the glycocalix. Fédérât. Proc. 1969, v. 28, No1, p. 12-25. Autoradiographic studies of the enteric surface coat. In: Gastrointestinal Radiation In-j ury. Reidel,Dordrecht,Netherl ands.1968, p. 27-41.

140. Subcellular localisation of vitamin B^g during absorption in the guinea-pig ileum. GUT. 1981, v. 22, No 8, p. 617-622.

141. Komai T., Metabolic fate and mechanism of action of Shindo H. chlorethylthiamine.III.Active transport ofthiamine from chick intestine and competitive inhibition by chlorethylthiamine. J. Vitamin. 1972, v. 18, Ho 1, p. 55-62.

142. Кръстев Л.П. Лизозоми. София. 1972.

143. Кръстев JI.П., Основи на ультраструктурнана патология.

144. Вълков И., София. 1982. Раичев Р., Прокопанов X.

145. Lasarov J. La resorption de la vitamine Б^. I. L'influence du glucose et de l'insuline sur la resorp35tion intestinale de la thiamine-S . Acta vitaminol. 1970, v. 24, No 3, p. 65-69.

146. Leblond O.P., Identification of stem cells in the small in-Cheng H. testine of mouse. In: Stem Cells of Renewing

147. Cell Populations.N.Y.Academic Press. 1976, P. 7-31.

148. Levine R.R., Histologycal réévaluation of everted gut tech-McNary W.F., nigue for studyng intestinal absorption. Koruguth P.J., Eur. J. Pharmacol. 1970, v. 9, No 2, p. 65-Le Blanc R. 69.

149. Loehry C.A., Vitamin excretion by the rat small intes-Creamer B. tine. GUT, 1969, v. 10, p. 662-664.

150. Losowsky M.S. Vitamin E in human nutrition. In: Importanceof vitamins to human health. Proc. 4th Kellog Nutr.Symp.London.1978;Lancaster,1979,p.101-110.

151. Lundgren 0. Circulatory factors in intestinal absorption.

152. Acta physiol.scand.1973,v.89,suppl.396,p.1-45.

153. Machlin L.D., Linoleic acids as a causative agent of ence-Meisky- phalomalocia.Poultry Sci.1959,v.38,No5,p.1224. Knicherbocher K.A.,1. Gordon R.S.

154. McKezie J .R., Vitamin B^ absorption and the intestunal cell Donaldson R.M. surface.Feder.Proced.1969,v.28,No1,p.41-45.

155. McKenzie J.R., Effect of divalent cations and pH on intrin-Donaldson R.M. sic factor-mediated attechment of vitamin B^to intestinal microlillous membranes. J. Clin.Invest. 1972, v. 51, Ho 9, p. 2465-2471.

156. McManus J.P.A.,Effect of fasting versus feeding on the rat Isselbacher K.J. small intestine.Gastroenter.1970,v.59,No1,p. 214-221.

157. Madara J.I., Structural chages in the plasma membrane ac-Trier J.S., companying différenciation of epithelial Neutra M.R. cells in human and monkey small intestine.

158. Gastroenterology. 1980, v. 78,ITo4,p.963-975.

159. Maroux S., On the hydrophobic part of aminopeptidase and Louvard D. maltases which bind the enzyme to the intestinal brush-border membrane. Biochim.Biophys. acta. 1976, v. 419, p. 189-195.

160. Matsudaira P.T., Organisation of the cross-filament in in-Burgess D.R. testinal microvilli. J. Cell Biol. 1982,v. 92, n; 3, p. 657-664.

161. Mooseker M.S., Organisation of an actin filament-membrane Tilney L.G. complex.Filament polarity and membrane attachment in the microvilli of intestinal epithelial cells.J.Cell Biol.1975,v.67,Ho4,p.725-743.

162. Mooseker M.S. Brush border motility.Microvillar contraction in Triton-treated brush border isolated from intestinal epithelium. J.Cell Biol. 1976, v. 71, No 3, p. 417-433.

163. Mooseker M.S., Characterisation and localisation of miosin Pollard T.D., in the brush border of intestinal epithelial Fujiwara K. cells.Ibid.1978,v.79,N03,p.444-453.

164. Mukherjee T.M., A comparative study of the ultrastructure Wynn W. of microvilli in the epithelium of smalland large intestine of mice. J. Cell Biol.1967, v. 34, No 3, p. 447-461.

165. Mukherjee T.M. Staehelin L.A.173. Munck B.G., Schultz S.G.

166. Muralidhara K. Hollander D.

167. Hakamura T. Aoyama Y., Pujita T., Katsui G.

168. Niscgi Y., Tamura R., Takesue Y.177. Nor en 0., Sjostrom H.178. Normandin D.K.

169. Novikoff A.B. Essner E., Biempica L., Jaciofano P.

170. Okuda K., Kurashige 1.1., Takamatsu H.

171. Okuda K., Katazaki T., Morokuma M.182. Palade G.P.

172. The endotelial reticulum. J. Bioph. Bioch. Cytol. 1956, v. 2, No 4,s. 2, p. 85-98.1831841851861871881891901911921931941951961. Palay S.L., Karlin L.J.1. Palay S.L., Karlin L.J.

173. Patrini C., Cusaro G., Ferrari G., Rindi G. Pat zeit V.1. Pearson O.K., Barnes M.M.

174. Phillips A.D. Prance U.E., Walker -Smith J. A. Polin D., Loukides M., Wynosky E.R., Porter C.C. Revel J.P., Karnovsky M.J

175. Rhodin J.A. Rindi G., Ventura U.1. Rindi G., Ventura U.

176. Robinson J.W. Antonioli J.A, Mircovitsch V, Rodewald R., Newman S.B., Karnovsky M.J, Rose R.C.

177. Thiamine countertransport in rat small intestine. Pflugers Arch.Ges.Physiol.1969, v. 310, No 2, p. 185-188.

178. The intestinal response ishemia. Arch. Phar-, macol. und Exptl. Pathol. 1966, v. 255,

179. Schade S.G., Schilling R.F.203. Schaller K., Holler H.

180. Seligman A.M., Wasserkrug H.L. Hanker J.S.205. Shindo H., Ko mai T.206. Shindo H., Komai T.

181. Transport and metabolism of water-soluble vitamins in intestine.Am.J.Physiol.1981, v. 240, p. G97-G101.

182. Effect of pepsin on the absorption of food vitamin B^g and iron. Am. J. Clinic. Nutr. 1967, v. 20, p. 636.

183. Metabolic fate and mechanism of action of chlorethylthiamine.II.Movement and fate of chlorethylthiamine along intestinal lumen after oral administration to chick.Ibid.p.45-54

184. Sidky M., Local and general alteration of blood COg Been J. and anfluence of intestinal motility in regulation of intestinal blood flow. Am. J. Physiol. 1951, v. 167, No 2, p. 413-425.

185. Sjostrand F.S. A comparison of plasma membrane,cytomembranes and mitochondrial membrane elements with respect to ultrastruetural features. J. Ultras tr. Res. 1963, v. 9, No 5-6, p. 561-580.

186. Sjostrand F.S. A simple and rapid method to prepere dispersion of columnar epithelial cells from rat intestine. Ibid.1968,v.22,N05-6,p.424-444.

187. Solokannel S.J., Malabsorption of vitamin during treat-Pal va J.B., ment with slow-release potession-chloride. Takkanen J.T. Acta med. scand.1970, v.187, p.431-439.

188. Staehelin L.A., Freesa-etch appearence of tight junctions in Mukherjee T.M., the epithelium of small and large intestine Williams A.W. of mice. Protoplasma. 1969;v.67,p.165-184.

189. Stanling R., Stereological studies on the small intestinal Hellander H.F. epithelium of the rat.Cell and Tissue Res.1981, v. 217, p.11-21.

190. Strauss E.W., Factors controling B^2 uptake by intestinal Wilson Т.Н., sacs in vitro. Am. J. Physiol. 1960, v. 198, Hotchkiss A. No 1, p. 103-107.

191. Strauss E.W. Electron microscopic study of intestinal fatabsorption in vitro from mixed micelles containing linoleic acid,monoolein and bile salt.J.Lipid.Res.1966,v.7,No3,p.307-323.

192. StRauss Е.У/. Morphological aspects of triglyceride absorption. In: Handbook of physiology.Washington 1968,sect.6,v.3, p. 1377-1406.

193. Sullivan L.W., Studies on the minimum daily requirement for Herbert V. vitamin B^.Hematopoetic responses to 0,1microgramm of cyancobalamin or coenzyme B^2 and comparison of their relative potency. New Engl.J. Med. 1965, v. 272, No 7, p.340-346

194. Swift J., Demonstration of the furry surface coat of Mukherjee T. rat intestinal microvilli by freese-etching.

195. J. Cell Biol. 1976, v. 69, No 2, p. 491-494.

196. Taylor A.N., Immunofluorescent localisation of vitamin D Wasserman R.H. dependent calcium-binding protein.J.Histochem.Cytochem. 1970, v.18, N02, p. 107-115.219.220.221. 222.223.224.225.226.227.228.

197. Thuneberg L., Rostgaard J. Trier J.S.35

198. Thompson A.D., Patterns of S -thiamine hydrochloride absor-Baker H., ption in the malnourished alcoholic patient.1.evy M. J.Lab.Clin.Med. 1970, v.76, No1, p.34-45.

199. Thompson J.N., Impaired lipid and vitamin E absorption reScott M.L. lated to atrophy of the pancreas in seleniumdeficient chicks.J.Nutr.1970,v.100,No7,p.797 -810.

200. Ventura U., Gialone E., Rindi G. Ventura U., Rindi G. Verzar P., McDougall E.J.

201. The role of Golgi complex in fat absorptionas studied with the electron microscopewith observations on the cytology of duodenal absorptive cells.J.Exprtl.Med.1955,v.102,1. No 6, p. 775-782.

202. Weisberg H., Rhodin J., Glass G.B.J.235. Whaley W.G.236. Wilson T.H.237. Wilson T., Hastings A.238. Winne D.

203. Yamaguchi IT., Weisberg H., Glass G.B.J.

204. Yamaguchi IT., Weisberg H., Glass G.B.J.241. Zètterquist H.1.testinal vitamin B^2 absorption in the dog. III.Demonstration of the intracellular pathway of absorption by light and electron microscopic autography.Labor.Invest. 1968, v.19, p. 516-525.

205. The ultrastructural organisation of the columnar absorption cells of the mouse jejunum. Stockholm. 1956.