Структурно-функциональные изменения коры большого мозга при острой ишемии и их коррекции с использованием перфторана

Максимишин, Сергей Валентинович

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Структурно-функциональные изменения коры большого мозга при острой ишемии и их коррекции с использованием перфторана
ВАК РФ 03.00.25, Гистология, цитология, клеточная биология

Автореферат диссертации по теме "Структурно-функциональные изменения коры большого мозга при острой ишемии и их коррекции с использованием перфторана"

На правах рукописи

Максимишин Сергей Валентинович

СТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ КОРЫ БОЛЬШОГО МОЗГА ПРИ ОСТРОЙ ИШЕМИИ И ИХ КОРРЕКЦИЯ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ПЕРФТОРАНА (экспериментально-клиническое исследование)

0X00.25 - гистология, цитология, клеточная биология 14.00.37 — анестезиология и реаниматология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Томск - 2004

Работа выполнена в Омской государственной медицинской академии (кафедра гистологии, цитологии и эмбриологии, центральная научно-исследовательская лаборатория), НИИ Общей реаниматологии РАМН

Научные руководители: доктор медицинских наук, профессор В.В.Семченко, доктор медицинских наук, член-корреспондент РАМН, профессор В.В .Мороз

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор А.С.Пуликов доктор медицинских наук, профессор В.Е.Шипаков

Ведущее учреждение:

Пермская государственная медицинская академия

Защита состоится «_»_2004 г.

в_часов на заседании диссертационного совета Д 208.096.03

при Сибирском государственном медицинском университете МЗ РФ по адресу 634050, г. Томск, Московский тракт, 2

С диссертацией можно ознакомиться в научно-медицинской библиотеке Сибирского государственного медицинского университета (634050, г. Томск, пр. Ленина, 107).

Автореферат разослан «_»_2004 г.

Ученый секретарь диссертационного совета

А.В.Герасимов

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Выяснение закономерностей структурно-функциональных изменений головного мозга при острой ишемии является важной проблемой современной нейроморфологии. Более глубокое системное изучение реакции мозга на острую ишемию необходимо для теоретического обоснования целенаправленной коррекции механизмов пато- и саногенеза в процессе реабилитации больных в постишемическом периоде (Боголепов Н.Н., 1979; Аврущенко М.Ш., 1994; Семенов В.Н., Гур-вичА.М., 1994;НеговскийВ.А.,МорозВ.В., 1999; Самойлов М О., 1999; Семченко В.В. и др., 1999; Гусев Е.И., Скворцова В.И., 2001; Kuroda S., Siesjo B.K., 1997; IadecolaC, 1999;Neumar R.W., 2000; Leker R.R., Shohami E., 2002 Narayan R.K. et al., 2002).

Одной из основных причин ишемического повреждения головного мозга человекаявляется острое нарушение мозгового кровообращения (ОНМК) по ишемическому типу (ишемический инсульт) (Гусев Е.И., Скворцова В.И., 2001). По своему медико-социальному значению ОНМК остается одной из актуальных проблем современной медицины. Это связано с неуклонно возрастающей частотой и тяжестью ОНМК, сложностью диагностики, высокими показателями смертности и инвалидизации больных во всех странах мира. Заболеваемость инсультом составляет 2,5-3 случая на 1000 населения в год, смертность -1 случай на 1000 населения в год. Летальность в остром периоде инсульта в России достигает 35%, увеличиваясь на 1215% к концу первого года после перенесенного инсульта. Постинсультная инвалидизация занимает первое место среди всех причин инвалидизации и составляет 3,2 на 10000 населения (Верещагин Н.В., 1993).

Внедрение новых методов нейровизуализации (преждевсего компьютерной и магнитно-резонансной томографии) принципиально изменило подходы к постановке диагноза ОНМК, трансформировало тактику ведения больных на всех этапах заболевания. Тем не менее конечные результаты лечения этой категории больных, в силу особенностей повреждения и восстановления головного мозга, остаются неудовлетворительными, требуют дальнейшего изучения закономерностей структурно-функциональной реорганизации и функционирования поврежденного мозга, а также поиска новых иейропротекторных препаратов (Хлуновский А.Н., Стар-ченко А.А., 1999; White B.C. et al., 2000). Особое значение при этом имеет изучение структурно-функционального состояния коры большого мозга, которая обеспечивает высшие функции ЦНС и обладает высокой чувствительностью к ишемии (Семченко В.В. и др., 1999).

еос. национальная]

БИБЛИОТЕКА

CQm^ 09 КЗ

жт

конечном итоге активируют механизмы некроза и апоптоза (Siesjo В.К. et al., 1995; Кос R.K. et al., 1999; Shohami E. et al., 1999; Katsura K. et al.,. 2000; Kulkarni M., Armstead W.M., 2000; Levven Л. et al., 2000). При ОНМК формируется своеобразный «порочный круг» патологических механизмов, разорвать который можно только воздействуя на все его звенья при нормализации церебральной и системной гемодинамики (Плотников М.Б. и др., 1991,1994; Рыжов А.И., Логвинов СВ., 1991;БаркаганЗ.С, 1992; Логвинов С.В.идр., 1994; Попова Л.М., 1994; Семенов В.Н.,Гурвич A.M., 1994; Золотокрылина Е.С., 1999; Семченко В.В. и др., 1999; Лебедев В.В., Крылов В.В., 2000; Пугаченко Н.В., 2000; Астахов А.А., Бубнова И.Д., 2001; Гусев Е.И., Скворцова В.И., 2001; Neuraann-Haefelin T. etal., 2000).

Перспективным в этом плане является системное использование в качестве средства инфузионно-трансфузионной терапии перфторана (Мороз В.В., 1995), который обладает выраженной газотранспортной функцией, положительным влиянием на микроциркуляцию, реологические свойства крови и системную гемодинамику, антиоксидантным, мембра-ностабилизирующим, противоишемическим, кардиопротекторным действием и повышает иммунологическую реактивность организма (Белоярцев Ф.Ф., 1984; Голубев A.M., 1993; Усенко Л.В. и др., 2000). Кузнецова И.Н.,ГербутК.А., 1987; Хонда К. и др., 1993; Мороз В.В., 1995; Хрупкий В.И. и др., 1997; Усенко Л.В. и др., 2000).'

Имеются лишь единичные фрагментарные работы по использованию перфторана в практике лечения больных с ОНМК по ишемическому типу.

В связи с этим с позиций доказательной медицины необходимо изучение влияния этого препарата на структурно-функциональную организацию головного мозга для обоснования его клинического применения в комплексной схеме интенсивной терапии ОНМК.

Цель исследования. Изучить влияние перфторана на структурно-функциональные изменения коры большого мозга при острой ишемии для обоснования его использования в комплексном лечении пациентов с острым нарушением мозгового кровообращения по ишемическому типу.

Задачи:

1. Изучить структурно-функциональные изменения коры большого мозга белых крыс в постишемическом периоде без использования и с использованием перфторана.

2. Оценить неврологический статус и биоэлектрическую активность головного мозга пациентов с острым нарушением мозгового кровообращения по ишемическому типу без использования и с использованием перфторана.

3. Определить основные закономерности изменения гемодинамики, гемостаза, системы транспорта кислорода у пациентов с острым нарушением мозгового кровообращения по ишемическому типу без использования и сиспользованием перфторана.

Научная новизна.

Впервые в эксперименте выявлено положительное влияние перфтора-на на ангио-, цито- и синаптоархитектонику коры большого мозга при острой ишемии. Выявлены структурно-функциональные механизмы ней-ропротекторного действия препарата и обосновано его положительное влияние на психоневрологический статус животных в постишемическом периоде. У пациентов с острым нарушением мозгового кровообращения по ишемическому типу впервые показано положительное влияние перф-торана на психоневрологический статус, магнитно-резонансную томографическую картину ишемического инсульта, гемодинамику, гемостаз, систему транспорта кислорода.

Практическая ценность. Результаты проведенного исследования показали целесообразность включения в комплексную терапию ОНМК по ишемическому типу кровезаменителя с газотранспортной функцией - пер-фторана. Оптимальным временем для начала использования перфторана являются первые 6 часов с момента начала заболевания. Применение пер-фторана в эти сроки улучшает микроциркуляцию головного мозга, предотвращает повреждение и гибель нейронов, межнейронных синаптичес-ких контактов, улучшает прогноз и исход ОНМК по ишемическому типу.

Внедрение в практику. Результаты исследования внедрены в учебный процесс на кафедрах гистологии, цитологии и эмбриологии Омской государственной медицинской академии при изучении разделов «Нервная ткань» и «Органы нервной системы», анестезиологии и реаниматологии с курсом скорой медицинской помощи последипломного образования Омской государственной медицинской академии при изучении разделов «Постреанимационной болезнь» и «Профилактика и лечение ишемичес-ких повреждений мозга»; использованы при написании монографий: Алексеева Г.В., Гурвич A.M., Семченко В.В. «Постреанимационная энцефалопатия (патогенез, клиника, профилактика и лечение)»: 2-е изд., доп. и пе-рераб. - Омск: Омская областная типография, 2002. - 152с; 3-е изд., доп. и перераб., 2003. - 152 с; Семченко В.В., Воинов А.Ю., Голевцова З.Ш., Говорова Н.В., Щербаков П.Н. «Гемостаз и сосудистый эндотелий при черепно-мозговой травме». -Омск-Надым: Омская областная типография, 2003. -168 с; внедрены в практическую работу отделений реанимации и интенсивной терапии МУЗ городская клиническая больница скорой медицинской помощи №1 г.Омска, МУЗ городская клиническая больница скорой медицинской помощи №2 г.Омска, МУЗ городская клиническая больница№ 1 г.Омска.

Положения, выносимые на защиту:

ных нейронов и синапсов, уменьшает дефицит их общей численной плотности в коре большого мозга экспериментальных животных.

2. Включение перфторана в комплексную интенсивную терапию пациентов с ОНМК по ишемическому типу улучшает общее состояние организма, нормализует психоневрологический статус, МРТ картину головного мозга, гемодинамику, гемостаз, систему транспорта кислорода и сокращает срок пребывания пациентов в отделении реанимации.

Апробация. Материалы диссертационной работы представлены на выездном пленуме Межведомственного Научного совета по проблемам скорой медицинской помощи РАМН и Минздрава России (Москва-Омск 2000), научно-практической конференции «Сосудистые заболевания головного и спинного мозга» (Омск, 2000), научной конференции «Морфологические основы гистогенеза и регенерации тканей» (Санкт-Петербург, 2001), XXXV юбилейной межвузовской научной конференции «Актуальные проблемы теоретической, экспериментальной и клинической медицины» (Тюмень, 2001), Российской научной конференции «Организация и пластичность коры больших полушарий головного мозга» (Москва, 2001), 4-й Международной конференции по функциональной нейро-морфологии «Колосовские чтения 2002» (Санкт-Петербург, 2002), IV конгрессе международной ассоциации морфологов (Санкт-Петербург,

2002), межрегиональной научно-практической конференции «Актуальные вопросы базовой и клинической фармакологии» (Омск, 2002), на выездных заседаниях проблемных комиссий «Гипоксия критических состояний», «Гипоксия мозга» РАМН (Омск, 2002), VIII Всероссийском съезде анестезиологов и реаниматологов (Омск, 2002), международной научной конференции «Критические технологии в реаниматологии» (Москва,

2003), межрегиональной научно-практической конференции «Актуальные проблемы гемостазиологии и эндотелиологии» (Омск, 2003), Всероссийской научной конференции «Реактивность и пластичность гистологических структур в нормальных, экспериментальных и патологических условиях» (Оренбург, 2003), научно-практической кноференции «Неотложные состояния в неврологии и нейрохирургии» (Омск, 2003).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 14 научных работ, получено удостоверение Омского областного ВОИР на рационализатореЛ кое предложение.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 230 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материала и методов исследования, главы собственных исследований, обсуждения результатов, выводов и результатов внедрения в практику. Фактические данные иллюстрированы 49 рисунками и 27 таблицами. Список литературы включает 301 источник (183 отечественных и 118 иностранных авторов). Все материалы, представленные в диссертации, получены, обработаны и проанализированы лично автором.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

I. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ

1. Экспериментальное исследование.

Экспериментальная модель. Исследование проведено на 102 беспородных белых крысах самцах массой 200-250 г под ингаляционным эфирным наркозом с соблюдением принципов гуманного обращения с экспериментальными животными (Приложение к приказу МЗ СССР от 1977 г.) и в соответствии с рекомендациями Международного комитета по науке о лабораторных животных, поддержанных ВОЗ. Животные находились в виварии Омской государственной академии при стандартных условиях.

Общие сонные артерии пережимались лигатурами до полного прекращения кровотока на 20 минут (Плотников М.Б., Ваизова О.Е., 1994; Пугачен-ко Н.В., 2000). Одновременно проводилась катетеризация правой подключичной вены с целью измерения ЦВД и последующего введения препаратов. По истечении 20 минут ишемии лигатуры убирались. После восстановления кровотока в общих сонных артериях животным группы I (п=25) в катетеризированную подключичную вену вводили физиологический раствор хлорида натрия в дозе 20 мл/кг, а животным группы II - перфторана в дозе 20 мл/кг (п=25). Затем подключичный катетер удалялся, рана на шее послойно ушивалась. Все хирургические манипуляции выполнялись в асептических условиях. После выхода из наркоза животные помещались в клетку, где содержались до взятия материала. В качестве контроля использовались интактные наркотизированные крысы (п=10). Животные выводились из эксперимента под ингаляционным эфирным наркозом.

Определение психоневрологического статуса. Ориентировочно-исследовательскую деятельность и эмоциональный статус животных изучали с помощью теста открытого поля. Наблюдения за животными проводились в утренние часы, в течение 3 минут. Учитывали число пересеченных квадратов (горизонтальную активность), количество вставаний на задние лапы (вертикальная активность), заглядывание в норки, продолжительность умывания и чесания (груминг), число дефекаций по количеству болюсов и уринаций, латентный период (время нахождения в центральном квадрате и общую неподвижность) (Буреш Я. и др., 1991). Закономерности изменения ориентировочно-исследовательской деятельности и эмоционального статуса у экспериментальных животных изучались в динамике постишемического периода.

Морфологическое исследование коры большого мозга. Материал для морфологического исследования забирали через 1, 3, 7, 14 и 30 суток после острой ишемии. Головной мозг фиксировали путем транскарди-альной перфузии смеси 4% раствора параформальдегида, 1% раствора глютарового альдегида, 5% раствора сахарозы на 0,1 М фосфатном буфере (рН=7,4) в течение 15-20 минут под давлением 90 мм рт.ст. После

перфузии мозг извлекали и дофиксировали в аналогичной смеси фиксатора при +4°С в течение одних суток. Затем материал промывали в фосфатном буфере и готовили светооптические (заключали в парафин) и элек-тронномикроскопические препараты (заключали в смесь эпона и аралди-та). Для электронномикроскопического исследования выделяли сенсо-моторную область коры (СМК) большого мозга (поля Fpa и Fpp) с использованием стереотаксических атласов мозга взрослой крысы (Свету-хина В.М., 1962; Paxinos G., Watson Ch., 1982). Затем ориентированные в виде пирамид кусочки СМК (по 5 кусочков на случай) обрабатывали для осмий -уранилацетат- цитрат свинцового контрастирования с использованием методики, принятой в лаборатории ультраструктуры и патомор-фологии института молекулярной биологии научного центра «Вектор» МЗ РФ (зав. лабораторией доктор биологических наук Е.И.Рябчикова).

Для электронной микроскопии использовали ультратонкие (70-100 нм) срезы верхнего этажа СМК (1-Ш слои), а для световой - тонкие серийные фронтальные срезы всего мозга на уровне СМК. Срезы для светоопти-ческого исследования помещали на предметные стекла и окрашивали 0,1% толуидиновым синим.

При светооптическом исследовании проводили общую оценку СМК и ее морфометрический анализ. Для этого в каждой серии эксперимента на фронтальных срезах при увеличении х40 с помощью микрометра (окуляр х15) на площади 126660 мкм2 (10 полей зрения) подсчитывали количество нормохромных, гиперхромных несморщенных, пшерхромных сморщенных, пшохромных нейронов и клеток-теней (Miller M.W., Potempa G., 1990). С помощью микрометра определяли продольный (D1) и поперечный (D2) диаметры тела нейронов, высчитывали средний диаметр нейронов (Dcp). Для определения численной плотности нейронов в единице объема (Nv, 1 мм3) использовалась формула: Nv=NsrT/(Dcp+T), где Ns -численной плотности нейронов в единице площади, Т-толщина среза, толщина определялась методом перефокусировки (Блинков СМ., Глезер И.И., 1964; АвтандиловГ.Г., 1984).

Для электронномикроскопического исследования ультратонкие срезы готовили на ультрамикротоме "Ultracut-E" (фирма Reichert-Jung). Срезы помещали на сетки без подложки и контрастировали уранилацетатом и цитратом свинца. Просмотр и фотографирование препаратов производив ли на электронном микроскопе "Hitachi-600H". ;

Проводили обзорную оценку состояния микрососудов, нейропиля и клеток. Для морфометрического исследования СМК в каждом случае фотографировали по 50 полей зрения нейропиля при увеличении 700025000. Дальнейший анализ проводили на сканированных электроннограм-мах при конечном увеличении 30000 с помощью компьютерной программы Adobe Photoshop 6.0. Численная плотность изученных структур (Ns) пересчитывалась на 100 мкм2 нейропиля.

Измерялись следующие параметры: 1) площадь сечения аксонной тер-минали; 2) периметр аксонной терминали; 3) число аксонныхтерминален на микрофотографии; 4) суммарная площадь сечения митохондрий в аксонной терминали; 5) периметр митохондрий в аксонной терминали; 6) число митохондрий в аксонной терминали; 7) площадь сечения постси-наптического уплотнения; 8) периметр постсинаптического уплотнения; 9) длина постсинаптического уплотнения; 10) толщина (ширина) постсинаптического уплотнения; 11) площадь сечения шипика; 12) периметр шипика; 13) число шипиков. Стереологический анализ проводили на основе измерения перечисленных выше линейных и плоскостных параметров. Оценивались следующие стереологические показатели: 1) объемная плотность (Vv); 2) поверхностная плотность (Sv); 3) численная плотность (Nv). Указанные стереологические параметры вычисляли для аксонных терминалей, митохондрий в аксонных терминалях, постсинаптических уплотнений и шипиков (Mayhew Т. М, 1979,1992). Кроме того, подсчи-тывалось процентное соотношение выпуклых, вогнутых и плоских синапсов, «перфорированных» и «неперфорированных» синапсов (Семчен-коВ.В. и др., 1995).

2. Клиническое исследование..

Группы. Проведен ретроспективный и проспективный анализ результатов лечения больных с ОНМК по ишемическому типу в МУЗ БСМП № 1 г. Омска. По степени тяжести выделяли пациентов со среднетяжелым (п=40) и тяжелым (п=40) ОНМК. Для проспективного анализа влияния перфторана на течение ОНМК путем рандоминизации (случайные числа) среди больных со среднетяжелыми и тяжелыми формами ОНМК формировали группу I (п=30), в комплексном лечении которой использовали традиционные инфузионные среды, и группу II (п=10), для лечения которой кроме традиционных инфузионных сред применяли перфторан. Пер-фторан вводили в дозе 6-8 мл/кг в первые 6 часов, через 2 и 5 суток от начала развития инсульта.

Определение психоневрологического статусау пациентов с ОНМК проводилось с использованием 60-бальной Скандинавской шкалы (Scandinavian Stoke Study Group, 1985).

Инструментальные методы исследования пациентов с ОНМК. ЭКГ регистрировали во II стандартном отведении с использованием усилителя биопотенциалов УБФ 4-03, самописца Н-338-4П, визуальный контроль осуществляли на индикаторе ОС 8-01.

Для оценки показателей центральной гемодинамики использовали монитор анестезиолога-реаниматолога компьютеризированный для гемоди-намического мониторинга МАРГ 10-01 «Микролюкс», аппараты для ре-ографии 4РГ-2М и Р-4-02. Рассчитывали ударный объем сердца (УО, мл), минутный объем кровообращения (МОК, мл/мин), общее периферическое сопротивление сосудов (ОПСС, дин х сек х см5). Сердечный ин-

деке (СИ, л х мин* Ум2) и индекс доставки кислорода (ИД К, мл х мин'/м2) определяли с помощью монитора МАРГ 10-01 «Микролюкс» и пакета компьютерных программ «Кентавр» фирмы «Микролюкс».

Для оценки газового состава крови и КОС применяли анализатор рН/газов крови Rapid lab 248 фирмы «Вауеп>. Определяли рО2 и рСО2 (мм рт. ст.), рН, АВ и BE (мМ/л) и концентрацию молочной кислоты (мМ/л).

Магнитно-резонансную томографию головного мозга осуществляли на магнитно-резонансном томографе фирмы Bruker «Tomikon S50» с напряженностью магнитного поля 0,5 Тесла. МРТ выполнялась по стандартной методике на основе протоколов, разработанных фирмой "Bruker". Программа включала в себя исследование в трех проекциях с получением Т1 и Т2 взвешенных изображений.

Статистический анализ. Статистическую обработку полученного материала осуществляли с помощью пакета прикладных программ "STATISTICAL" (Боровиков В.Н., 2001; Реброва О.Ю., 2001) и EXCEL, согласно современным требованиям к проведению анализа медицинских данных (Гланц С, 1998). После определения основных статистических характеристик изучаемых параметров (средняя, медиана, квартили, дисперсия, стандартное отклонение, стандартная ошибка, асимметрия и эксцесс) проводили тест на нормальность распределения. В зависимости от распределения использовали параметрические и непараметрические методы статистики. При нормальном распределении использовали дисперсионный анализ, t-критерий для зависимых и независимых выборок. Степень связи между двумя переменными устанавливали с помощью корреляции Пирсона и линейного регрессионного анализа. Во всех остальных случаях применяли критерии Вальда-Вольфовица, Манна-Уитни, Колмогорова-Смирнова, ранговый дисперсионный анализ Краскела-Уоллиса и медианный тест, критерий знаков и W-критерий Вилкоксона парных сравнений, а также ранговый дисперсионный анализ Фридмана. Степень связи между двумя переменными устанавливали с помощью корреляции Спир-мена и логистического регрессионного анализа. При множественном сравнении использовали поправку Бонферрони.

Количественный материал представлен в виде графиков и таблиц. Во всех случаях при сравнении групп предпочтение отдавалось наиболее чувствительному из использованных критериев. В зависимости от метода исследования в таблицах материал был представлен как среднее ± стан-i дартное отклонение средней (M±s) (параметрический анализ) или как медиана ± среднее квартальное отклонение (Me±Q) или как Me и Qt -Q2 (непараметрический анализ). Q=\/2 (Qt - Me) + (Me - <9,), где - верхний квартиль, Л-нижний квартиль (Урбах В.Ю., 1963; Гланц С, 1998).

Все эксперименты и исследования выполнены на базе Омской государственной медицинской академии (ЦНИЛ, кафедра гистологии, цитологии и эмбриологии, кафедра патофизиологии), частично в лаборатории ультра-

структуры и патоморфологии института молекулярной биологии научного центра «Вектор» МЗ РФ (зав. лабораторией доктор биол. наук Е.И.Рябчи-кова) и в цент ре экстренной неврологии МУЗ Городская клиническая больница скорой медицинской помощи №1 г.Омска. Экспериментальная часть работы выполнена при участии заочного аспиранта кафедры гистологии ОГМА А.А.Бутина, и врача исследователя Д.Д.Поташова.

II. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

1. Структурно-функциональная организация сенсомоторной коры большого мозга белых крыс при острой ишемии без использования и с использованием перфторана

Психоневрологический статус В раннем постишемическом периоде у экспериментальных животных группы I и II было выявлено угнетение сознания вплоть до глубокой комы. Неврологические проявления пости-шемической энцефалопатии отмечались у 87% животных. Общая летальность в течение всего эксперимента составила 47,4%. В группе I летальность составила 53,7, а группе II - 39,0% (р<0,01, здесь и ниже приводится критерий Колмогорова-Смирнова - К-С). Наибольшая летальность отмечалась в первые 3 суток после ишемии.

В группе I после ишемии у 25,8% выживших крыс наблюдалось спонтанное двигательное возбуждение и у 8,1% - спонтанные судорожные пароксизмы. Пик высокой двигательной активности приходился на 3-й сутки постишемического периода. В группе П-соответственноу 19,5 и 4,5% животных, что было статистически значимо ниже, чем в группе I (/т<0,05 ир<0,01). Это свидетельствовало о том, что после ишемии у исходно высокопороговых крыс без использования перфторана более значительно повышалась судорожная готовность мозга.

В течение первых суток постишемического периода поведение крыс обеих групп было однообразным и обедненным. Животные становились малоподвижными, исследовательская активность у них была очень незначительной. Число пробежек и пересечение квадратов снизилось в 1,8 раза (р<0,01), при этом уменьшилось количество вертикальных стоек. Возросла длительность латентного периода. Крысы затрачивали в 2 раза больше времени (р<0,01), по сравнению со здоровыми животными, для того, чтобы покинуть ярко освещенную центральную площадку. Животные проявляли нерешительность и страх при пересечении черты, отделявшей площадку от остального поля. Доминирующим актом поведения у крыс являлись реакции чистки (груминг), выраженность которого отражает повышенный уровень «тревожности» в поведении животных. Интенсивность и продолжительность груминговых движений превышала контрольные значения в 2,8 раза(р<0,01).

Через 3 суток после ишемии животные группы I были возбуждены и проявляли высокую двигательную активность. Активация поведения происходила за счет увеличения как горизонтального, так и вертикального компонентов, роста числа перемещений и вертикальных стоек. Уменьшилось время полной неподвижности животных (р<0,05). Продолжительность латентного периода снизилась (р<0,05), но оставалась выше, чем у контрольных животных (р<0,05). Использование перфторана приводило к статистически значимому снижению проявлений двигательной гиперактивности за счет всех компонентов - горизонтального (р<0,05) и вертикального (р<0,01). При этом продолжительность латентного периода у этих животных статистически значимо не отличалась от таковой контрольных животных (р<0,05). У животных группы I сохранялся более высокий уровень эмоциональной напряженности - продолжительность и интенсивность груминга возросли и превышали показатели контроля в 4,2 раза(р<0,01), увеличилось число дефекаций (р<0,05).

Через 7 суток большинство элементов исследовательского поведения крыс группы II соответствовали показателям группы здоровых животных. У животных группы I достижение целесообразного поведенческого результата было затруднено, что подтверждалось частым переключением ориентировочно-исследовательской деятельности на другой вид моторной активности - груминг. Продолжительность груминга по-прежнему превышала уровень контроля (р<0,05).

Через 14 суток после ишемии у крыс группы I отмечалось вторичное снижение ориентировочно-исследовательской деятельности. Число пробежек и заглядываний в норки стало ниже, чем у интактных животных (£><0,01). Животные этой группы дольше находились в состоянии неподвижности (р<0,05). При этом уровень «тревожности» крыс возрастал. Ориентировочно-исследовательские реакции в 2,5 раза чаще, чем у животных группы I сменялись другими видами деятельности (р<0,01). Для животных группы II подобные изменения не были характерны.

Через 30 суток у животных группы I сохранялись нарушения эмоционального статуса, а у животных группы II все показатели были на уровне контрольных животных.

Таким образом, использование перфторана в первые 6 часов после острой ишемии головного мозга уменьшало проявления нарушений ориентировочно-исследовательской деятельности и эмоционального статуса животных в постишемическом периоде.

Ангиоархитектоника СМК. В СМК животных группы I, где перфто-ран не использовался, выявлялись выраженные ультраструктурные признаки повреждения всех элементов сосудистой стенки, гипоперфузия была обусловлена альтерацией сосудистой стенки и отеком-набуханием элементов гематоэнцефалического барьера, имелись структурные признаки зна-

чительной дисфункции системы регуляции агрегатного состояния крови и значительного нарушения микроциркуляции.

Инфузия иерфторана в первые 6 часов после ишемии (группа И) приводила к уменьшению па 15,6% (р<0,05, К-С) площади очагов вторичного незаполнения капилляров, на21,4%(р><0,01) площади периваскулярного отека. При этом снижалась степень адгезии форменных элементов крови к сосудистому эндотелию, уменьшались проявления ишемического повреждения, отека эндотелиоцитов, снижалось количество плазматических капилляров на 34,7% (р<0,01), увеличивалась устойчивость эритроцитов к гемолизу. Все это вероятно связано с тем, что перфторан уменьшает вязкость системы «эритроциты-плазма-эмульсия», стабилизирует трансмембранный градиент К+, Са2+, Н+ и воды, повышает устойчивость клеточных мембран к действию осмотических и химических повреждающих агентов, уменьшает гемолиз и степень агрегации эритроцитов (Мороз В.В., 1994; Усенко Л.В. и др., 2000).

Кроме уменьшения деструктивных изменений, использование перфто-рана усиливало компенсаторно-восстановительные процессы на уровне микрососудов мозга в отдаленном постишемическом периоде, что проявлялось более быстрым восстановлением ультраструктуры поврежденных капилляров и новообразованием капилляров на базе уже существующих. Особенно это было характерно для капилляров, в которых сохранилась базальная мембрана и перициты. На этом каркасе образовывался новый пласт эндотелия, замещавший погибшие эндотелиальные клетки.

Таким образом, перфторан способствовал значительному улучшению микроциркуляции коры большого мозга после острой ишемии.

Цитоархитектоника СМК. После 20-минутной острой ишемии развивалось диффузно-очаговое ишемическое повреждение сенсомоторной коры. Имели место: острое набухание нейронов, различные проявления гидропической дистрофии нервных клеток, очаговый и тотальный хроматолиз, появление клеток-теней, эктопия ядер, гиперхроматоз, гомогенизация ядра и цитоплазмы, распад ядра и ядрышка, кариоцитолизис, сморщивание гиперхромных клеток, нейронофагия.

Через 1 и 3 суток после ишемии в верхнем этаже СМК животных группы I (без перфторана) содержание гиперхромных нейронов увеличилось до 70% от общего количества нейронов. Затем через 7 суток их содержание уменьшалось на 17%, через 14 суток - на 10% и через 30 суток - на 18% (соответственно -/?<0,005,/7<0,001,/?<0,001 в сравнении с предыдущим сроком, К-С). При этом содержание сморщенных нейронов достигало максимального уровня (22%) через 3 суток и сохранялось на этом уровне через 7 (19%) и 14 (17%) суток после ишемии. Статистически значимое снижение содержания сморщенных нейронов (до 8%) отмечалось только через 30 суток после ишемии (/?<0,01, критерий К-С) (рис. 1 а, б).

Рис. 1. Содержание гиперхромных (а), гиперхромных сморщенных (б), гипохромных (тотальный хроматолиз, клетки-тени) (в) и общая численная плотность нейронов (г) в верхнем этаже сенсомоторной коры большого мозга белых крыс группы I (без перфторана) и II (с перфтораном) в постишеми-ческом периоде. Статистическая значимость различий для независимых выборок (парный критерий Колмогорова-Смирнова) рассчитана между группами по срокам. Различия статистически значимы при/?<0,05. Данные представлены как медиана и квартили.

Максимальное содержание (23%) нейронов с крайней степенью хроматолиза и клеток-теней в СМК у животных группы I было отмечено через 3 суток после ишемии, а через 7 суток выявлялось статистически значимое (р<0,005, критерий К-С) снижение их содержания на 7%. Через 30 суток содержание подобных нейронов было на уровне 8%, что выше контрольного уровня (р<0,001, критерий К-С) (рис. 1 в).

У животных группы I общая численная плотность нейронов верхнего этажа СМК имела тенденцию к уменьшению (на 4,4%) уже через 1 сутки после ишемии (р<0,05, критерий К-С). Через 3 суток дефицит нейронов составил 15,3,7 суток-21,2,14 суток-24,1 и 30суток-32,1%(£к0,001, критерий К-С). При этом, по данным дисперсионного анализа, общая плотность нейронов значительно различалась между разными участками СМК

(р<0,0), Краскел-Уоллис), что свидетельствовало о наличии очагов выпадения нейронов.

По данным дисперсионного анализа (Краскел-Уоллис), в сравнении с группой I, инфузия перфторана у животных группы II приводила к появлению статистически значимых различий содержания гиперхромных (р<0,01), гиперхромных сморщенных (р<0,01), необратимо измененных гипохромных (тотальный хроматолиз, клетки-тени) (р<0,0\) нейронов и общей численной плотности нейронов (р<0,0\) СМК в постишемичес-ком периоде.

Парный сравнительный анализ независимых выборок (критерий К-С) показал, что максимальные различия содержания гиперхромных нейронов в СМК у животных разных групп были через 3 суток (25%,р<0,01), сморщенных нейронов - 3-14 суток (10-11%,р<0,025), необратимо измененных гипохромных нейронов- 3 суток (10%,р<0,001) после ишемии (рис. 1 а-в). Максимальное различие (19,4%,/?<0,001) общей численной плотности нейронов в группах I и II было выявлено через 7 суток после ишемии.

У животных группы II уже через 3 суток после введения перфторана появлялись нейроны со структурными признаками высокой функциональной активности и проявлениями внутриклеточной репаративной регенерации (гиперплазия структурных компонентов), а у животных группы I появление подобных нейронов отмечалось только через 7 и 14 суток.

Использование перфторана приводило к тому, что у животных группы II не было выявлено статистически значимых различий общей численной плотности между разными участками СМК (р>0,05, Краскел-Уоллис), что свидетельствовало об отсутствии очагов выпадения нейронов.

Таким образом, использование перфторана в раннем постишемическом периоде уменьшало содержание реактивно и необратимо измененных нейронов, что наиболее контрастно проявлялось в первые 7 суток, и способствовало сохранению популяции нейронов верхнего этажа СМК большого мозга белых крыс в более отдаленном периоде (14,30 суток) (рис. 1).

Сипаптоархитектоника СМК. После острой 20-минутной ишемии в нейропиле СМК животных обеих групп было выявлено увеличение содержания деструктивно измененных синапсов (светлый тип деструкции), уменьшение общей численной плотности синапсов и реорганизация сохранившихся синаптических устройств. Однако динамика и степень этих изменений существенно отличались (рис. 2).

У животных группы I через 1 сутки содержание деструктивно измененных синапсов составило 28% от всех синапсов, а у животных группы II - 20%, что было статистически значимо ниже (/?<0,001, критерий К-С). На этом уровне различия между группами поданному показателю сохранялись через 3 и 7 суток, а через 14 и 30 суток - уменьшались до 2-3% (рис. 2 а).

Общая численная плотность синапсов у животных группы I через 1 сутки после ишемии снижалась на24,4%(р<0,001, критерий К-С), а группы 11-только на \3,2%(р<0,0\, критерий К-С), что статистически значимо ниже на 11,2% (р<0,001, критерий К-С). Через 3 суток дефицит синапсов СМК у животных группы I достигал своего максимума (38,3%, /?<0,001, критерий К-С), что на 22,3% (р<0,001, критерий К-С) выше, чем в группе с перфтораном. Более высокой общая численная плотность синапсов в группе II.была через 7 и 14 суток после ишемии. Через 30 суток значимых различий выявлено не было (рис. 2 б). Все это свидетельствовало о сохранении при использовании перфторана популяции межнейронных синапсов СМК в постишемическом периоде.

Рис. 2. Содержание аксонных терминален, измененных по светлому типу деструкции (а), общая численная плотность терминалей (б) и содержание перфорированных синапсов (в) в нейропиле верхнего этажа сенсомоторной коры большого мозга белых крыс в постишемическом периоде без перфторана и с перфтораном. Статистическая значимость различий для независимых выборок (критерий Колмогорова-Смирнова) рассчитана между группами. Различия статистически значимы при/т<0,05. Данные представлены как медиана и квартили.

с У животных группы I сохранившиеся синапсы подвергались выраженной компенсаторной реорганизации в постишемическом периоде. Об этом свидетельствовало прогрессивное увеличение содержания перфорированных синапсов через 3 суток на 23,4%, а через 7 суток- на 36,4%. На фоне использования перфторана содержание перфорированных синапсов в этот период увеличивалось только на 16,9 и 23,4%, что было статистически значимо ниже, чем у животных без перфторана (соответственно -/?<0,05 и р<0,01, критерий К-С).

Таким образом, при использовании перфторана в раннем постишеми-ческом периоде сохранялись уже существующие нейронные цепи и снижалась вероятность их патологической реорганизации. Все это обеспечивало более полноценную структурно-функциональную реабилитацию поврежденного мозга.

2. Клинико-лабораторная характеристика пациентов с острым

нарушением мозгового кровообращения по ишемическому типу без использования и с использованием перфторана

Неврологический статус. У пациентов со среднетяжелой формой ОНМК первое (через 6 часов после травмы) введение перфторана приводило к статистически значимому (р=0,04, здесь и далее - ^критерий для независимых выборок)улучшению функции кисти (баллы по Скандинавской шкале - 3,7±1,6 —5,1±2,8). После второго (через 2 суток) введения перфторана улучшалась функция руки (4,8± 1,6 —> 5,8±1,5,/?=0,04). После третьего введения препарата положительная динамика сохранялась, стабилизировалось общее состояние больных, что выразилось в регрессе очаговой неврологической симптоматики и увеличении общего количества баллов по Скандинавской шкале на 6,3% (в сравнении с началом лечения).

У пациентов с тяжелой формой ОНМК первое введение перфторана приводило к статистически значимому улучшению речи (6,3±2,6 7,3+3,6,/7=0,02), функции руки (3,2+1,9 4,6+2,2,/7=0,03) и ноги (3,9+1,8 —> 4,8± 1,9, /5=0,045). После второго введения перфторана улучшались функции кисти (3,5+1,4 4,6+2р, /т=0,03) и стопы (1,3+0,3 1,8+0,5, р=0,04), при статистически значимом увеличении общего количества баллов по Скандинавской шкале (31,2±3,8 —> 39,1 ±3,8/7=0,02). После третьего введения препарата отмечалось улучшение сознания (3,8±1,2 4,6± 1,1, /7=0,04), а общее количество баллов увеличивалось с 32,4± 1,6 до40,2±1,5(/7=0,04).

Применение перфторана, в сравнении с традиционной терапией ишеми-ческого инсульта, позволило уменьшить среднее пребывание пациентов в отделении нейрореанимации с 7,8±2,3 до 5,4± 1,2 (р=0,041) и общее пребывание пациентов в стационаре с 15,2± 1,8 до 11,3± 1,7 суток (р=0,033).

Энцефалографичекий мониторинг. Наряду с быстрым и отчетливым регрессом неврологической симптоматики у больных при применении перфторана выявлена более выраженная положительная динамика ЭЭГ в виде уменьшения очаговых и диффузных общемозговых патологических изменений (на 20-30%,/7<0,01).

Центральная гемодинамика и транспорт кислорода. Наиболее наглядно положительное влияние перфторана проявлялось при его использовании у пациентов с тяжелой формой ишемического инсульта. Так, первая инфузия перфторана приводила к увеличению ударного объема на

14,2% (р<0,0\, здесь и далее - ^критерий Стьюдента для независимых выборок). Параллельно с увеличением ударного объема увеличивались минутный объем кровообращения (на 12,6%,р<0,01) и центральное венозное давление (на 30,6%,р<0,001). Данные изменения достигали максимума через 1 час после окончания инфузии перфторана. На этом фоне снижалось общее периферическое сосудистое сопротивление (на 37,7%, /к0,001), частота сердечных сокращений (на 9,5%, р<0,05), диастоли-ческое давление достоверно не изменялось, но оно было ниже, чем в группе больных без перфторана (на 9,4%,р>0,05). Систолическое и среднее артериальное давление снижалось незначительно. Сердечный индекс после инфузии перфторана увеличивался (на 15,6%, р<0,00\). Индекс доставки кислорода в группе с применением перфторана был выше (на 12,3%,/К0,001), достигал нормальных значений уже через 2,1±0,6 сутки от начала заболевания, в группе пациентов получающих традиционную инфузионную терапию нормализция индекса доставки кислорода происходила только через 5,2±0,4 (р<0,001) суток.

Положительное влияние на состояние системной гемодинамики и транспорта кислорода при использовании перфторана было выражено сильнее, чем после обычной инфузионно-трансфузионной терапии (р<0,01, АКОУА).

Гемостаз. У пациентов с тяжелой формой ОНМК имелись выраженные исходные нарушения в системе гемостаза. Использование перфтора-на у этих пациентов более значительно (1,7±0,4 мин —» 5,4±0,8 мин), чем обычная интенсивная терапия (2,1±0,6 мин—> 3,6±О,8 мин), увеличивало время свертывания крови (р<0,0\, ^критерий для зависимых выборок), но в меньшей степени снижало количество тромбоцитов в крови (210±29х 10/л —> 182+21 х 107л и 198+32 х 107л 179+22 х 107л, р<0,01), что свидетельствовало в пользу реализации антитромбогенного действия пер-фторана. Снижение содержания фибриногена при использовании перф-торана было статистически значимо меньше, чем при обычном лечении (3,8+0,8 г/л -> 2,9+0,8 г/л и 4,1+0,8 г/л -» 2,2+0,5 т/л, р<0,0Х). Протром-биновый индекс снижался уже после первого введения перфторана, а у пациентов без перфторана-только на 5-е сутки. После первого, второго и третьего введений перфторана активированное частичное тромбоплас-тиновое время было статистически значимо выше (р<0,01, АКОУА), чем без перфторана. Тромбиновое время при использовании перфторана также было выше, чем без этого препарата (р<0,01, АКОУА). При использовании перфторана уже после второго сеанса из крови исчезали продукты деградации фибрина, а при обычной терапии — только на 5-е сутки лечения. Все это свидетельствует в пользу того, что при стандартной интенсивной терапии у больных с тяжелой формой ОНМК имелась тенденция развития гиперкоагуляции, а при использовании перфторана - гипокоа-гуляции. Умеренная гипокоагуляцйя в условиях нарушения микроцирку-

ляции мозга положительно влияет на его кровоснабжение (Семченко В.В. и др., 2003).

Таким образом, при ОНМК по ишемическому типу имеет место выраженное нарушение гемостаза (особенно при тяжелых формах), что неизбежно приводит к постишемической микроангиопатии, а положительное гемостаз-регулирующее действие перфторана реализуется посредством его гипокоагуляционного действия.

Парциального напряжения газов крови и кислотно-основное состояние (КОС). При оценке газового состава крови, КОС у больных с тяжелой формой ОНМК был выявлен метаболический ацидоз на фоне артериальной гипоксемии в стадии субкомпенсации (следствие циркулятор-ной и смешанной гипоксии). В результате развивался дыхательный алкалоз при наличии признаков напряжения метаболического звена компенсации нарушения КОС. Использование перфторана более значительно, чем интенсивная терапия без перфторана, увеличивало рО2 артериальной крови, приводило к нормализации рН и показателей, характеризующих буферную систему артериальной и венозной крови (р<0,0\, ANOVA). Все это также свидетельствовало о целесообразности использования перфторана при лечении больных с ОНМК.

Выявленное нами положительное влияние перфторана на структурно-функциональное состояние неокортекса обусловлено, вероятно, тем, что этот препарат 1) улучшает снабжение кислородом ткани мозга через наиболее мелкие капилляры, увеличивая тем самым эффективную площадь сосудов и минутный кровоток, 2) создает условия для более быстрого и полного освобождения кислорода из эритроцитов, 3) уменьшает вязкость крови, 4) стабилизирует трансмембранный градиент К+, Са+, Н' и воды, 5) повышает устойчивость клеточных мембран к действию осмотических и токсических повреждающих агентов, 6) уменьшает гемолиз и степень агрегации эритроцитов, 7) обладает антиокислительным действием (Кокоз Ю.М. и др., 1983;Фрейдин А.А. и др., 1983; Воробьев СИ., 1993; Крылов Н.Л., Мороз В.В., 1994;УсснкоЛ.В.,КлигуленкоЕ.Н., 1994,1997,2001).

ВЫВОДЫ

1. Использование перфторана в раннем постишемическом периоде уменьшило степень дистрофических и некробиотических изменений ге-мокапилляров, нейронов, их отростков и синапсов в коре большого мозга, способствовало восстановлению ориентировочно-исследовательской деятельности и эмоционального состояния экспериментальных животных, снижало летальность на 14,7%.

2. В коре мозга экспериментальных животных, которым вводили пер: фторан, площадь очагов вторичного незаполнения капилляров уменьшилась на 15,6%, площадь периваскулярного отека - на 21,4%, количество

плазматических капилляров - на 34,7%, снизилась степень адгезии форменных элементов крови к сосудистому эндотелию, отека эндотелиоци-тов, увеличилась устойчивость эритроцитов к гемолизу, активировались компенсаторно-восстановительные процессы микроциркуляторного русла.

3. Применение перфторана привело к уменьшению содержания ги-перхромных нейронов в коре большого мозга на 25%, а необратимо измененных нейронов - на 10%, при этом дефицит численной плотности нейронов снизился на 19,4%. После введения перфторана нейроны со структурными признаками высокой функциональной активности и проявлениями внутриклеточной репаративной. регенерации (гиперплазия структурных компонентов) появлялись через 3 суток, а без перфторана -только через 7 суток.

4. Использование перфторана сопровождается снижением (в сравнении с группой без перфторана) содержания деструктивно измененных синапсов на 8,0%, дефицита общей численной плотности синапсов - на 22,3% и препятствует прогрессивному увеличению содержания перфорированных синапсов (на 13,0%) в коре большого мозга, что способствует сохранению структурно-функциональной целостности нейронной популяции коры большого мозга.

5. Включение перфторана в комплексное лечение ишемического инсульта улучшает общее состояния и неврологический статус больных с острым нарушением мозгового кровообращения по ишемическому типу, уменьшает тяжесть очаговых неврологических расстройств, нормализует биоэлектрическую активность головного мозга, снижает среднее пребывание пациентов в отделении иейрореанимации с 7,8±2,3 до 5,4± 1,2 суток, а общее пребывание пациентов в стационаре (центр экстренной неврологии Омской ГКБСМП№1)- с 15,2+1,8 до 11,3± 1,7 суток.

6. Перфторан в составе комплексной интенсивной терапии больных с острым нарушением мозгового кровообращения более эффективно, чем традиционная терапия, нормализует состояние системной гемодинамики, гемостаза, газовый состав крови. Положительное лечебное действие перфторана в большей степени проявляется при тяжелых формах острого нарушения мозгового кровообращения по ишемическому типу.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

• Оптимальное время для начала использования перфторана - первые 6 часов с момента начала заболевания. Инфузию перфторана целесообразно проводить трижды: в первые 6 часов от начала заболевания, на третьи и пятые сутки острого ишемического инсульта. Это позволяет в течение всего острого периода заболевания оптимизировать доставку кислорода, и создать оптимальные условия для кровоснабжения головного мозга.

• Оптимальная доза перфторана в схеме комплексного лечения составляет 6-8 мл/кг массы тела. Более высокая доза приводит к перегрузке большого и малого кругов кровообращения, что нежелательно для пациентов с выраженной сопутствующей патологией сердечно-сосудистой системы, а меньшая доза не вызывает статистически значимых клинических эффектов и не улучшает неврологический статус пациентов.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Основные направления фармакологической защиты мозга при ишемии (соавт. Волосатое С.Н., Алексеева Г.В.) //Организационные, диагностические и лечебные проблемы неотложных состояний.-Мос-ква-Омск: Омская областная типография, 2000. - С. 375-379.

2. Особенности интенсивной терапии при остром нарушении мозгового кровообращения в условиях нейрореанимации (соавт. Новицкий Н.А.) // Сосудистые заболевания головного и спинного мозга. - Омск: ООО "Издатель-Полиграфист", 2000. - С. 65-69.

3. Коррекция процесса структурно-функционального восстановления коры большого мозга белых крыс перфтораном при моделировании ишемического инсульта (соавт. Волосатое С.Н., Семченко В.В.) //Морфологические основы гистогенеза и регенерации тканей. - Санкт-Петербург: Типография ВМедА., 2000. - С. 375-379.

4. Применение перфторана в терапии ишемического инсульта (соавт. Бу-тин А.А., Поташов Д.Д.) //Материалы XXXV юбилейной межвузовской научной конференции «Актуальные проблемы теоретической, экспериментальной и клинической медицины».-Тюмень: Издательство «Вектор Бук», 2001. - С. 15-16.

5. Коррекция нарушений микроциркуляции коры большого мозга белых крыс при ишемическом инсульте (соавт. Волосатое С.Н., Семченко В.В.) // Организация и пластичность коры больших полушарий головного мозга.-М.: Москва, 2001.-С. 50-51.

6. Комплексная оценка структурно - функционального состояния головного мозга человека (соавт. Семченко В.В., Доровских Г.Н.) // Морфология. - 2002. - Т. 121, №2-3.-С. 142-143.

7. Структурно-функциональная характеристика сосудистого русла мозга белых крыс в зоне ишемического нарушения кровообращения (со-

авт. Бутин А.А., Степанов С.С.) // Матер. IV международной конф. по функциональной нейроморфологии (Колосовские чтения, 29-31 мая 2002г., Санкт-Петербург): Тез. докл. - Санкт-Петербург, 2002. - С. 66. .

8. Алгоритм лечебных мероприятий при ишемическом повреждении мозга (соавт. Алексеева Г.В., Волосатое С.Н., Шелепов В.А., Новицкий Н.А., Семченко В.В.)// VIII Всероссийский съезд анестезиологов и реаниматологов (11-15 сентября 2002, Омск): Тез. докл.-Омск,

2002.-С.167.

9. Нарушение транспорта кислорода у пациентов с локальным ишеми-ческим повреждением головного мозга, и пути их коррекции (соавт. Мороз В.В., Семченко В.В., Волосатое С.Н., Бутин А.А., Поташов Д.Д., Шелепов В.А.) //VIII Всероссийский съезд анестезиологов и реаниматологов (11-15 сентября 2002, Омск): Тез. докл. -Омск, 2002. -С. 167.

10. Изменения сосудистого русла большого мозга белых крыс в зоне ише-мического инсульта (соавт. Бутин А. А., Семченко В.В., Степанов С.С.) // VIII Всероссийский съезд анестезиологов и реаниматологов (11-15 сентября 2002, Омск): Тез. докл. - Омск, 2002. - С.206-207.

11. Влияние малых доз перфторана на процесс структурно-функционального восстановления коры большого мозга белых крыс при моделировании ишемического инсульта (соавт. Мороз В.В., Семченко В.В.) // Критические технологии в реаниматологии: Матер, междунар. конф. (17-21 марта 2003, Москва). - М.: ГУНИИ Общ. реан-и РАМН, 2003. -С.61.

12. Коррекция гемодинамических нарушений при ишемических повреждениях головного мозга тяжелой степени с помощью перфторана (со-авт. Мороз В.В., Семченко В.В.)//Актуальные проблемы гемостази-ологии и эндотелиологии: Матер, науч.-практ. конф. (28-29 октября

2003, Омск). - Омск: Омский научный вестник, приложение №24. 2003.-С. 117-122.

13. Влияние перфторана на течение острой фазы ишемического повреждения мозга (экспериментально-клиническое исследование) (соавт. Новицкий Н.А., Мороз В.В., Семченко В.В.) // Неотложные состояния в неврологии и нейрохирургии: Матер, науч.-практ. конф. - Омск, 2003.-С. 53-56. .

14. Закономерности реализации структурных механизмов пластичности в сенсомоторной коре большого мозга белых крыс в постишемичес-ком периоде на фоне применения перфторана (соавт. Семченко В.В., Поташов Д.Д., Пилипенко Т.П.) //Морфология. -2003. -Т. 124, №5. -С. 72.

На правах рукописи

Максимишин Сергей Валентинович

03.00.25 - гистология, цитология, клеточная биология 14.00.37-анестезиология и реаниматология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Томск - 2004

Лицензия ЛР № 020845

Подписано в печать 07.04.04 Формат 60x84/16 Бумага офсетная П.л.-1,0 Способ печати - оперативный Тираж 100

Издательско-полиграфический центр ОмГМА 644099, г. Омск, ул. Ленина, 12, тел: 23-05-98

í - 7 4 4 4

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Максимишин, Сергей Валентинович

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. ОСТРОЕ НАРУШЕНИЕ МОЗГОВОГО КРОВООБРАЩЕНИЯ ПО ИШЕМИЧЕСКОМУ ТИПУ (обзор литературы).

1.1. Частота, эпидемиология и исходы острого нарушения мозгового кровообращения.

1.2. Структурно-функциональные механизмы повреждения и восстановления головного мозга при остром нарушении мозгового кровообращения.

1.3. Фармакологическая коррекция ишемических повреждений головного мозга при остром нарушении мозгового кровообращения

1.4. Использование перфторана как перспективное направление лечения ишемических повреждений.

1.4.1. Свойства перфторана.

1.4.2. Перфторан в экспериментальной и клинической медицине

Глава 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Экспериментальная модель.

2.2. Методы исследования.

2.3. Клиническая характеристика больных.

2.4. Статистический анализ.

Глава 3. СТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ СЕНСОМОТОРНОЙ КОРЫ БОЛЬШОГО МОЗГА БЕЛЫХ КРЫС ПРИ ОСТРОЙ ИШЕМИИ БЕЗ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ И С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ПЕРФТОРАНА.

3.1. Психоневрологический статус.

3.2. Ангиоархитектоника.

3.3. Цитоархитектоника.

3.4. Синаптоархитектоника.

Глава 4. КЛИНИКО-ЛАБОРАТОРНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ПАЦИЕНТОВ С ОСТРЫМ НАРУШЕНИЕМ МОЗГОВОГО

КРОВООБРАЩЕНИЯ ПО ИШЕМИЧЕСКОМУ ТИПУ БЕЗ

ИСПОЛЬЗОВАНИЯ И С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ПЕРФТОРАНА

4.1. Неврологический статус и энцефалографичекий мониторинг

4.2. Центральная гемодинамика.

4.3. Гемостаз.

4.4. Парциальное напряжение газов крови и кислотно-основное состояние.

4.5. Клинические примеры применения перфторана.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Структурно-функциональные изменения коры большого мозга при острой ишемии и их коррекции с использованием перфторана"

Актуальность темы. Выяснение закономерностей структурно-функциональных изменений головного мозга при острой ишемии является важной проблемой современной нейроморфологии. Более глубокое системное изучение реакции мозга на острую ишемию необходимо для теоретического обоснования целенаправленной коррекции механизмов пато- и саногенеза в процессе реабилитации больных в постишемическом периоде (Боголепов H.H., 1979; Аврущенко М.Ш., 1994; Семенов В.Н., Гурвич A.M., 1994; Неговский В.А., Мороз В.В., 1999; Самойлов М.О., 1999; Семченко В.В. и др., 1999; Гусев Е.И., Скворцова В.И., 2001; Kuroda S., Siesjo В.К., 1997; Iadecola С., 1999; Neumar R.W., 2000; Leker R.R., Shohami E., 2002 Narayan R.K. et al., 2002).

Одной из основных причин ишемического повреждения головного мозга человека является острое нарушение мозгового кровообращения (ОНМК) по ишемическому типу (ишемический инсульт) (Гусев Е.И., Скворцова В.И., 2001). По своему медико-социальному значению ОНМК остается одной из актуальных проблем современной медицины. Это связано с неуклонно возрастающей частотой и тяжестью ОНМК, сложностью диагностики, высокими показателями смертности и инвалидизации больных во всех странах мира. Заболеваемость инсультом составляет 2,5-3 случая на 1000 населения в год, смертность - 1 случай на 1000 населения в год. Летальность в остром периоде инсульта в России достигает 35%, увеличиваясь на 12-15% к концу первого года после перенесенного инсульта. Постинсультная инвалидизация занимает первое место среди всех причин инвалидизации и составляет 3,2 на 10000 населения (Верещагин Н.В., 1993).

Внедрение новых методов нейровизуализации (прежде всего компьютерной и магнитно-резонансной томографии) принципиально изменило подходы к постановке диагноза ОНМК, трансформировало тактику ведения больных на всех этапах заболевания. Тем не менее конечные результаты лечения этой категории больных, в силу особенностей повреждения и восстановления головного мозга, остаются неудовлетворительными, требуют дальнейшего изучения закономерностей структурно-функциональной реорганизации и функционирования поврежденного мозга, а также поиска новых нейропротекторных препаратов (Хлуновский А.Н., Старченко А.А., 1999; White B.C. et al., 2000). Особое значение при этом имеет изучение структурно-функционального состояния коры большого мозга, которая обеспечивает высшие функции ЦНС и обладает высокой чувствительностью к ишемии (Семченко В.В. и др., 1999).

Согласно доминирующей в настоящее время концепции, центральное место в повреждении нейронов мозга при острой ишемии занимают прогрессирующее нарушение внутриклеточного кальциевого гомеостаза, механизмы эксайтотоксичности и окислительный стресс, которые у больных с ОНМК реализуются на фоне вторичных нарушений микроциркуляции и в конечном итоге активируют механизмы некроза и апоптоза (Siesjo В.К. et al., 1995; Кос R.K. et al., 1999; Shohami E. et al., 1999; Katsura К. et al.,. 2000; Kulkarni M., Armstead W.M., 2000; Lewen A. et al., 2000). При ОНМК формируется своеобразный «порочный круг» патологических механизмов, разорвать который можно только воздействуя на все его звенья при нормализации церебральной и системной гемодинамики (Плотников М.Б. и др., 1991, 1994; Рыжов А.И., Логвинов C.B., 1991; Баркаган З.С., 1992; Логвинов C.B. и др., 1994; Попова Л.М., 1994; Семенов В.Н., Гурвич A.M., 1994; Золотокрылина Е.С., 1999; Семченко В.В. и др., 1999; Лебедев В.В., Крылов В.В., 2000; Пугаченко Н.В., 2000; Астахов А.А., Бубнова И.Д., 2001; Гусев Е.И., Скворцова В.И., 2001; Neumann-Haefelin T. et al., 2000).

Перспективным в этом плане является системное использование в качестве средства инфузионно-трансфузионной терапии перфторана (Мороз В.В., 1995), который обладает выраженной газотранспортной функцией, положительным влиянием на микроциркуляцию, реологические свойства крови и системную гемодинамику, антиоксидантным, мембраностабилизирующим, противоишемическим, кардиопротекторным, действием и повышает иммунологическую реактивность организма (Белоярцев Ф.Ф., 1984; Голубев A.M., 1993; Усенко Л.В. и др., 2000). Кузнецова И.Н., Гербут К.А., 1987; Хонда К. и др., 1993; Мороз В.В., 1995; Хрупкин В.И. и др., 1997; Усенко Л.В. и др., 2000).

Задачи:

Научная новизна. Впервые в эксперименте выявлено положительное влияние перфторана на ангио-, цито- и синаптоархитектонику коры большого мозга при острой ишемии. Выявлены структурно-функциональные механизмы нейропротекторного действия препарата и обосновано его положительное влияние на психоневрологический статус животных в постишемическом периоде. У пациентов с острым нарушением мозгового кровообращения по ишемическому типу впервые показано положительное влияние перфторана на психоневрологический статус, магнитно-резонансную томографическую картину ишемического инсульта, гемодинамику, гемостаз, систему транспорта кислорода.

Практическая ценность. Результаты проведенного исследования показали целесообразность включения в комплексную терапию ОНМК по ишемическому типу кровезаменителя с газотранспортной функцией -перфторана. Оптимальным временем для начала использования перфторана являются первые 6 часов с момента начала заболевания. Применение перфторана в эти сроки улучшает микроциркуляцию головного мозга, предотвращает повреждение и гибель нейронов, межнейронных синаптических контактов, улучшает прогноз и исход ОНМК по ишемическому типу.

Внедрение в практику. Результаты исследования внедрены в учебный процесс на кафедрах гистологии, цитологии и эмбриологии Омской государственной медицинской академии при изучении разделов «Нервная ткань» и «Органы нервной системы», анестезиологии и реаниматологии с курсом скорой медицинской помощи последипломного образования Омской государственной медицинской академии при изучении разделов «Постреанимационной болезнь» и «Профилактика и лечение ишемических повреждений мозга»; использованы при написании монографий: Алексеева Г.В., Гурвич A.M., Семченко В.В. Постреанимационная энцефалопатия (патогенез, клиника, профилактика и лечение): 2-е изд., доп. и перераб. - Омск: Омская областная типография, 2002. - 152с.; 3-е изд., доп. и перераб., 2003. - 152 е.; Семченко В.В., Войнов А.Ю., Голевцова З.Ш., Говорова Н.В., Щербаков П.Н. Гемостаз и сосудистый эндотелий при черепно-мозговой травме. - Омск-Надым: Омская областная типография, 2003. - 168 е.; внедрены в практическую работу отделений реанимации и интенсивной терапии МУЗ городская клиническая больница скорой медицинской помощи №1 г.Омска, МУЗ городская клиническая больница скорой медицинской помощи №2 г.Омска, МУЗ городская клиническая больница №1 г.Омска.

Положения, выносимые на защиту:

1. Использование перфторана в раннем постишемическом периоде более быстро восстанавливает ориентировочно-исследовательскую деятельность и эмоциональное состояние экспериментальных животных, улучшает микроциркуляцию, снижает содержание необратимо поврежденных нейронов и синапсов, уменьшает дефицит их общей численной плотности в коре большого мозга экспериментальных животных.

Апробация. Материалы диссертационной работы представлены на выездном пленуме Межведомственного Научного совета по проблемам скорой медицинской помощи РАМН и Минздрава России (Москва-Омск 2000), научно-практической конференции «Сосудистые заболевания головного и спинного мозга» (Омск, 2000), научной конференции «Морфологические основы гистогенеза и регенерации тканей» (Санкт-Петербург, 2001), XXXV юбилейной межвузовской научной конференции «Актуальные проблемы теоретической, экспериментальной и клинической медицины» (Тюмень, 2001), Российской научной конференции «Организация и пластичность коры больших полушарий головного мозга» (Москва, 2001), 4-й Международной конференции по функциональной нейроморфологии "Колосовские чтения 2002" (Санкт-Петербург, 2002), IV конгрессе международной ассоциации морфологов (Санкт-Петербург,

Публикации. По теме диссертации опубликовано 14 научных работ, получено удостоверение Омского областного ВОИР на рационализаторское предложение.

Заключение Диссертация по теме "Гистология, цитология, клеточная биология", Максимишин, Сергей Валентинович

ВЫВОДЫ

1. Использование перфторана в раннем постишемическом периоде уменьшило степень дистрофических и некробиотических изменений гемокапилляров, нейронов, их отростков и синапсов в коре большого мозга, способствовало восстановлению ориентировочно-исследовательской деятельности и эмоционального состояния экспериментальных животных, снижало летальность на 14,7%.

2. В коре мозга экспериментальных животных, которым вводили перфторан, площадь очагов вторичного незаполнения капилляров уменьшилась на 15,6%, площадь периваскулярного отека - на 21,4%, количество плазматических капилляров - на 34,7%, снизилась степень адгезии форменных элементов крови к сосудистому эндотелию, отека эндотелиоцитов, увеличилась устойчивость эритроцитов к гемолизу, активировались компенсаторно-восстановительные процессы микроциркуляторного русла.

3. Применение перфторана привело к уменьшению содержания гиперхромных нейронов в коре большого мозга на 25%, а необратимо измененных нейронов - на 10%, при этом дефицит численной плотности нейронов снизился на 19,4%. После введения перфторана нейроны со структурными признаками высокой функциональной активности и проявлениями внутриклеточной репаративной регенерации (гиперплазия структурных компонентов) появлялись через 3 суток, а без перфторана -только через 7 суток.

5. Включение перфторана в комплексное лечение ишемического инсульта улучшает общее состояния и неврологический статус больных с острым нарушением мозгового кровообращения по ишемическому типу, уменьшает тяжесть очаговых неврологических расстройств, нормализует биоэлектрическую активность головного мозга, снижает среднее пребывание пациентов в отделении нейрореанимации с 7,8±2,3 до 5,4±1,2 суток, а общее пребывание пациентов в стационаре (центр экстренной неврологии Омской ГК БСМП №1) - с 15,2±1,8 до 11,3+1,7 суток.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Учитывая, что ведущими нарушениями транспорта и потребления кислорода у пациентов с ОНМК по ишемическому типу являются сниженный ударный объем и сердечный индекс, повышенное периферическое сосудистое сопротивление, низкое центральное венозное давление, низкий минутный объем кровообращения, гиперкоагуляция целесообразно наряду с традиционной инфузионной терапией включить в комплексную терапию кровезаменитель с газотранспортной функцией -перфторан. Оптимальное время для начала использования перфторана — первые 6 часов от момента начала заболевания. Оптимальная доза перфторана составляет 6-8 мл/кг массы тела. Большая доза приводит к перегрузке большого и малого кругов кровообращения, что нежелательно у пациентов с выраженной сопутствующей патологией сердечно-сосудистой системы, меньшая доза не вызывает статистически значимых клинических эффектов, и не улучшает неврологический статус пациентов.

Инфузию перфторана целесообразно проводить трижды: в первые 6 часов от начала заболевания, на третьи и пятые сутки острого инсульта. Это позволяет в течение всего острого периода заболевания оптимизировать доставку кислорода, и создать оптимальные условия для кровоснабжения головного мозга.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Максимишин, Сергей Валентинович, Томск

1. Аврушенко М.Ш. Изучение популяции клеток Пуркинье коры мозжечка собак, перенесших остановку системного кровообращения // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1982. -№ 1. - С. 8-11.

2. Аврущенко М.Ш. Изменения гетерогенных нейронных популяций в постреанимационном периоде после остановки сердца у крыс // Анестезиология и реаниматология. 1994. - N 5. - С.41-44.

3. Автандилов Г.Г. Введение в количественную патологическую морфологию. М.: Медицина, 1980. - 216 с.

4. Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрия: Руководство. — М.: Медицина, 1990. 382 с.

5. Алексеев A.A., Лавров В.А., Дутиков В.Н. Ожоговый шок: патогенез, клиника, лечение // Вестник интенсивной терапии. 1995. - №2. - С. 31-36.

6. Алиев О.И., Васильев A.C. Коррекция гемореологических расстройств экстрактом левзеи сафроловидной // Актуальные проблемы фармакологии и поиска новых лекарственных препаратов. 1999. -Т.10.-С. 170-172.

7. Архипова JI.B. и др. Влияние ПФОС на некоторые биохимические показатели головного мозга крысы. Пущино: ОНТИ НЦБИ АН СССР. - 1980.-С. 106-108.

8. Аскерханов Г.Р. С.А. Абусуев, С.Г. Адильханов и др. Перфторан в комплексном лечении диабетической стопы // Перфторорганические соединения в биологии и медицине. Пущино: ОНТИ ПНЦ РАН. -1999.-С. 136-137.

9. Ю.Астахов A.A., Бубнова И.Д. Повреждение головного мозга и регуляция кровообращения. Екатеренбург: УрО РАН, 2001. - 129 с.

10. П.Баркаган З.С. Узловые вопросы комплексной терапии острого и подострого ДВС-синдрома //Вестник интенсивной терапии. 1992. - N. 1. - С.11-17.

11. Багненко С.Ф., Стойко Ю.М., Нохрин С.П. Опыт применения перфторана при лечении окклюзирующих заболеваний артерий нижних конечностей в стадии критической ишемии. Пущино: ОНТИ ПНЦ РАН.-2001.-С.128.

12. Бадалян JI.O. Неврологические синдромы при болезнях сердца. М.: Медицина, 1975. - 416 с.

13. Н.Баженова Т.Г., Плотников М.Б., Плотникова Т.М., Саратиков A.C. Цереброкраст как корректор постишемических феноменов при острой транзиторной ишемии мозга // Бюл. эксперим. биологии и медицины. -1992. Т. 114, №10. - С. 378-380.

14. Баркаган З.С. Очерки антитромботической фармакопрофилактики и терапии. М.: Ньюдиамед, 2000. - 148 с.

15. Белоярцев Ф.Ф., Иваницкий Г.Р., Исламов Б.И. и др. Замещение больших количеств крови газопереносящей средой на основе эмульсии перфторуглеродов // Докл. АН СССР. 1983. - Т.270, № 2. - С. 487-491.

16. Биленко М.В. Ишемические и реперфузионные повреждения органов. — М.: Медицина, 1989. 368 с.

17. Богданов А.Н., Кравцов Ю.И. Эпидемиология и факторы риска ишемического инсульта в среднем приобье по данным проспективного исследования // Неврологический журнал. 1998. - № 2. - С. 39-42.

18. Боголепов Н.К. Церебральные кризы и инсульт. М.: Медицина, 1971. -392 с.

19. Боголепов H.H. Ультраструктура синапсов в норме и патологии. М.: Медицина, 1975. - 96 с.

20. Боголепов H.H. Ультраструктура мозга при гипоксии. — М.: Медицина, 1979.-167 с.

21. Боровиков В. STATISTICA: искусство анализа данных на компьютере. Для профессионалов. СПб.: Питер, 2001. - 656 с.

22. Брустовецкий H.H., Маевский Е.И. Влияние перфорированных соединений на митохондрии. Пущино: ОНТИ НЦБИ АН СССР, 1980. -С. 85-89.

23. Буреш Я., Бурешова О., Хьюстон Д. Методика и основные эксперименты по изучению мозга и поведения: Пер. с англ. М.: Высш. школа, 1991.-399 с.

24. Верещагин Н.В. Нейронауки и клиническая ангионеврология: проблемы гетерогенности ишемических поражений мозга // Вест. РАМН. 1993. -№ 7. - С. 40-42.

25. Верещагин Н.В. Нейронауки и клиническая ангионеврология: проблемы гетерогенности ишемических повреждений мозга // Вестник РАМН. -1993.-№2.-С. 69-72.

26. Верещагин Н.В. Патология вертебробазилярной системы и нарушения мозгового кровообращения. М.: Медицина, 1980. - 310 с.

27. Верещагин Н.В., Гулевская Т.С., Миловидов Ю.К. Актуальные проблемы кардионеврологии // Клин, медицина. 1991. - № 3. - С. 3-6.

28. Виленский Б.С. Инсульт. СПб: Медицинское информационное агенство, 1995. - 228 с.

29. Воробьев С.И. Создание перфузионной среды с газатранспортной функцией для противоишемической защиты изолированного сердца: Автореф. дис. . канд.мед.наук. М., 1989. - 18 с.

30. Воробьев С.И., Иваницкий Г.Р., Макаров К.Н., Архипова В.В. Спрвнительное изучение некоторых перфторуглеродных эмульсий //Физиологическая активность фторсодержащих соединений (эксперимент и клиника). Пущино: ОНТИ ПНЦ РАН. - 1995. — С. 3341.

31. Воробьев С.И., Исламов Б.И., Ладилов Ю.В. Возможное применение перфторуглеродной эмульсии для длительного сохранения донорского сердца // Грудная хирургия. 1990, № 4. - С. 38-43.

32. Воробьев С.И., Ладилов Ю.В., Образцов В.В., Иваницкий Г.Р., Предварительное введение эмульсии перфторуглеродов новый метод противоишемической защиты миокарда // Бюл. экперимент. биологии и медицины. - 1990. -№ 6. - С. 19-21.

33. Гансбургский А.Н. Эпителиальные ткани: Руководство по гистологии. В 2 т. Т I. СПб.: СпецЛит., 2001. - 495 с.

34. Герасимов Л.И. Основные принципы лечения больных в острый периодах ожеговой болезни // Анестезиология и реаниматология. — 1995. -№4.- С. 19-24.

35. Гланц С. Медико-биологическая статистика. Пер. с англ. — М.: Практика, 1998.-459 с.

36. Голубев A.M. Итоги и перпективы влияния фторуглеродных кровезаменителей на биологические системы //Петфторуглеродные активные среды для медицины и биологии (новые аспекты исследования). Пущино: ОНТИ ПНЦ РАН. 1993. - С. 88-93.

37. Гурвич A.M., Алексеева Г.В., Семченко В.В. Постреанимационная энцефалопатия (патогенез, клиника, профилактика, лечение). — Омск: ИПК"Омич", 1996.-76 с.

38. Гусев Е.И. Динамика функционального состояния коры головного мозга при острой локальной ишемии // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 1992. - № 4. - С. 44-46.

39. Гусев Е.И., Бурд Г.С., Боголепов H.H. Сосудистые заболевания головного мозга. М.: Медицина, 1979. - 142 с.

40. Гусев Е.И., Скворцова В.И. Ишемия головного мозга. М.: Медицина, 2001.-328 с.

41. Гусев Е.И., Скворцова В.И., Чекнева Н.С. и др. Лечение острого мозгового инсульта (диагностические и терапевтические алгоритмы). — М., 1997.-123 с.

42. Дамбинова С.А. Нейрорецепторы глутамата. — Л.: Наука, 1989. 144 с.

43. Ерин А.Н., Скрыпин В.Н., Коган В.Е. Образование комплексов а-токоферола со свободными жирными кислотами. Природа комплексов // Докл. АН СССР. 1983. - Т. 273, № 2. - С. 489-493.

44. Иваницкий Г.Р. Как перфторан обеспечивает газотранспорт // Перфтоорганические соединения в биологии и медицине. Пущино: ОНТИ ПНЦ РАН. - 1999. - С. 229-243.

45. Иваницкий Г.Р. Биофизические основы создания перфторуглеродных сред и газотранспортных кровезаменителей (обзор). -Пущино: ОНТИ ПНЦ РАН. 2001.-С. 4-49.

46. Иваницкий Г.Р., Белоярцев Ф.Ф., Исламов Б.И. Влияние эмульсии перфторуглеродов на защитные свойства кардиоплегических растворов // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1986. — № 8. — С. 183-185.

47. Иваницкий Г.Р., Воробьев С.И. Образование подвижных структур в кровотоке основа функционирования перфтруглеродной «искусственной крови» // Биофизика. — 1996. - Т.41, №1. - С. 178-190.

48. Иваницкий Г.Р., Воробьев С.И. Кровезаменитель «Перфторан» // Вестник РАН. 1997. - Т.67, №11.- С.998-1008.

49. Иванов К.П. Основы энергетики организма: Теоретические и практические аспекты. Т. 2. Биологическое окисление и его обеспечение кислородом. — СПб.: Наука. — 1993. 272 с.

50. Иванов К.П. Современные проблемы дыхательной функции крови и газообмена в легких // Физиол. журнал им. Сеченова. 1992. - Т.78, № 11.-С. 11-26.

51. Исламов Б.И. Противоишемическая защита миокарда эмульсией перфторуглеродов: Автореф. дис. . докт.мед.наук. М., 1987. - 58 с.

52. Исмаилов Б.И., Ладилов Ю.В., Буевич В.А., Бобровский Р.В. Эмульсия фторуглеродов как средство противоишемической защиты миокарда // Вестн. АМН СССР. 1991. -№ 3. - С. 39-43.

53. Исмаилов С.А., Аскерханов Г.Р., Абусуев С.А., Адильханов С.Г. Внутриартериальные перфузии перфторана в комплексном лечении диабетической стопы // Перфторорганические соединения в биологии и медицине. Пущино: ОНТИ ПНЦ РАН. - 2001. - С. 190-192.

54. Караськов A.M. Гипотермия в хирургии открытого сердца. -Новосибирск, 1999. 200 с.

55. Караськов A.M., Литасова Е.Е., Нароушвили Т.И. Перфторорганические соединения в клинической и экспериментальной кардиохирургии и кардиологии // Перфторорганические соединения в биологии и медицине. Пущино: ОНТИПНЦРАН.- 2001.-С. 152-155.

56. Каро К., Педли Т., Шротер Р., Сид У. Механика кровообращения. М.: Мир, 1981.-289 с.

57. Клигуленко E.H., Кравец О.В., Гулега И.Е. Стресс-протекторные эффекты перфторана // Перфторорганические соединения в биологии и медицине. Пущино: ОНТИ ПНЦ РАН. - 1999. - С. 70-76.

58. Клигуленко E.H., Лещев Д.П. Транспорт кислорода при применении перфторана у больных с ожоговым шоком // Перфторорганические соединения в биологии и медицине. Пущино: ОНТИ ПНЦ РАН. -1999. - С.123-131.

59. Клигуленко E.H., Слинченков В.В. Обмен биогенных аминов и гемодинамика у больных с ожоговым шоком // Перфторорганические соединения в биологии и медицине. — Пущино: ОНТИ ПНЦ РАН. — 1999. С.112-123.

60. Клигуленко E.H., Сорокина Е.Ю., Рожко В.И., Никитченко H.H. Местное применение перфторана в комплексном лечении длительно заживающих ран // Перфторорганические соединения в биологии и медицине. Пущино: ОНТИ ПНЦ РАН. - 1999. - С.146-150.

61. Клиническое руководство по черепно-мозговой травме: Т1 / Под ред. А.Н. Коновалова. М.: Антидор, 1998. - 550 с.

62. Коваль Е.А., Маевский Е.И. Калиевая проницаемость и устойчивость эритроцитарных мембран при контакте с перфторированными углеродами // Перфорированные углероды в биологии и медицине. -Пущино: ОНТИ ПНЦ РАН. 1980. - С.81-85.

63. Кожура В.JI. Острое реперфузионное повреждение мозга: Новые мишени для профилактики и терапии // Реаниматология и интенсивна терапия (Информационный сборник новости науки и техники). — 1998. — №1. С. 11-13.

64. Кокоз Ю.М., Карбинский Е.М., Фрейдин и др. Действие газопереносящей эмульсии перфторуглеродов на миокард (ионный транспорт, сократительная чуствительность к медиаторам) // ДАН. -1983. Т. 270, № 2. - С. 459-462.

65. Колтовер А.Н., Верещагин Н.В., Любковская Н.Г. Патологическая анатомия нарушений мозгового кровообращения. М.: Медицина, 1975. - 256 с.

66. Конвай В.Д. Острое нарушение пуринового обмена // Омский науч. вестн. — 1997. -N1. С.58-61.

67. Конвай В.Д. Роль острого нарушения метаболизма пуринов в патогенезе ишемического повреждения мозга // Актуальные проблемы неврологии. 1997. - С. 1-4.

68. Кондрашова М.Н., Маевский Е.И., Бабаян Г.В. и др. Адаптация к гипоксии посредством переключения метаболизма на превращения янтарной кислоты // Митохондрии. Биохимия и ультраструктура. М., 1973. - С.112-129.

69. Корнеев A.A., Комиссарова И.А., Нарциссов Я.Р. Использование глутатиона в качестве протекторного средства при гипоксическом воздействии // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1993. - Т. 116.— №9.-С. 261-263.

70. Кривошапкин А.Л., Семенычева Т.В., Питерская Е.П. Физиологическая активность фторорганических соединений. — Пущино: ОНТИ НЦБИ АН СССР. 1995.-С.149-153.

71. Крыжановский Г.Н. Общая патофизиология нервной системы: Руководство. М.: Медицина, 1997. - 352 с.

72. Крылов Н.Л., Мороз В.В. Опыт клинического применения перфторана -кровезаменителя на основе перфторуглеродов // Физико-химические иклинические исследования перфторорганичесиких соединений. -Пущино: ОНТИ ПНЦ РАН. 1994. - С. 33-50.

73. Кудинова О.В. Профилактика и коррекция нарушений кислородотранспортной функции крови в острый период ожоговой болезни // Общая и неотложная хирургия. Киев, Здоровья, 1989. -№19.-С. 15-19.

74. Кузнецова И.Н., Гербут К.А. Коррекция показателей физико-химического гомеостаза инфузией эмульсии перфторуглеродов при лечении геморрагического шока у собак // Гематол. и трансфузиол. -1987. № 7. - С.36-40.

75. Лайтфут Э. Явления переноса в живых системах (биомедицинские аспекты переноса количества движения и массы). М.: Мир, 1997. - 278 с.

76. Лебедев В.В., Крылов В.В. Неотложная нейрохирургия: Руководство для врачей. М.: Медицина, 2000. - 568 с.

77. Лебедзевич Ю.С., Иванова Л.В. Дифференциальный подход к лечению некоторых доброкачественных заболеваний шейки матки // Перфторорганические соединения в биологии и медицине. Пущино: ОНТИ ПНЦ РАН, - 1999. -С. 139-140.

78. Лебединская О.В., Средняков В.А. О целесообразности применения перфторана в комплексном лечении некоторых форм наследственных офтальмопатий // Перфторорганические соединения в биологии и медицине.-Пущино: ОНТИ ПНЦ РАН. 1999. - С. 181-183.

79. Левицкий Д.О. Кальций и биологические мембраны. М.: Высшая школа, 1990,- 124 с.

80. Логвинов C.B., Зуев В.Г., Ушаков И.Б., Тютрин И.И. Очерки неионизирующей радионейробиологии: структурно-функциональный анализ. Томск: Изд-во Том. ун-та, 1994. - 208 с.

81. Лорд Волтон. Декада мозга: достижения неврологии: Пер. с анг. // Журн. невролог, и психиатр. 1998. - № 4. - С. 4-10.

82. Луйк А.И., Лукьянчук В.Д. Сывороточный альбумин и биотранспорт ядов. М.: Медицина, 1984. - 224 с.

83. Лукьянова Л.Д. Методические рекомендации по отбору антигипоксантов. -М.: Медицина, 1991. 130 с.

84. Лукьянова Л.Д. Современные подходы к поиску антигипоксантов // Актуальные проблемы фармакологии и поиска новых лекарственных препаратов. 1999. - Т. 10. - С. 59-67.

85. Лукьянова Л.Д. Фармакологическая коррекция гипоксических состояний. -М.: Медицина, 1989. С. 5-44.

86. Луцевич А.Н., Царева Е.Ю. Особенности кинетики лекарственных веществ в присутствии перфторуглеродных кровезаменителей // Эксперим. и клинич. фармакология. 1992. - Т.55, №3. - С. 74-77.

87. Маевский Е.И. Кррекция гипоксических состояний путем поддержания функций митохондрий: Автореф. дис. . докт.мед.наук. М. - 1998. — 34с.

88. Мирошников А.И. и др. Влияние эмульсии ПФОС на электрофоретическую подвижность эритроцитов. Пущино: ОНТИ НЦБИ АН СССР. - 1984. - С.152-156.

89. Моисеенко О.М., Захаров В.Д., Средняков В.А. и др. Эффективность перфторана в лечении увеитов различной этиологии // Перфторорганические соединения в биологии и медицине. Пущино: ОНТИ ПНЦ РАН. - 1999.-С. 170-175.

90. Мороз B.B. Перфторан в профилактике и лечении гипоксии критических состояний // Физиологическая активность фторсодержащих соединений (эксперимент и клиника). Пущино, 1995.-С. 46-52.

91. Неговский В.А., Гурвич A.M., Золотокрылина Е.С. Постреанимационная болезнь. М.: Медицина, 1987. - 480 с.

92. Неговский В.А., Мороз В.В. Актуальные вопросы реаниматологии // Анестезиология и реаниматология. 1999. - № 1. - С.6-9.

93. Новиков B.C. Программированная клеточная гибель. СПб., 1996. -276 с.

94. Образцов В.В., Гришанова А.Ю., Грудкова Д.Г., ШехтманД.Г. Механизм ингибирования цитохром P-450-зависимой монооксидазной системы печени фторуглеродами // Биохимия. 1992. - Т.57, № 7. - С. 1011-1019.

95. Образцов В.В., Гришанова А.Ю., Мишин В.И. и др. Индукция микросомной монооксигеназы полностью фторированными органическими соединениями (обзор) // Вопр. мед. химии. 1989. - №3. -С. 9-18.

96. Образцов В.В., Гришанова А.Ю., Шехтман Д.Г. и др. Взаимодействие перфтороктилбромида с микросомальной монооксигеназой печени // Биохимия. 1993. - Т.58, № 8. - С. 12341239.

97. Образцов В.В., Шехтман Д.Г., Скифас А.Н., Макаров К.Н. Анализ физико-химических фторуглеродных индукторов цитохрома Р-450 в мембранах эндоплазматического ретикулума // Биохимия. 1988. -Т.53,№4.-С. 613-619.

98. Оленев С.Н. Конструкция мозга. Л.: Медицина, 1987. - 208 с.

99. Онищенко H.A., Иваницкий Г.Р., Вазагашвили М.О. и др. Целесообразность введения фторуглеродной эмульсии в организм трупного донора перед забором почек для трансплантации // Вестн. хирургии. 1989. - Т. 143, № 7. - С. 94-95.

100. Онищенко H.A., Серняк Н.С., Коваленко H.B. и др., Использование перфторуглеродной эмульсии при трансплантации почек // Хирургия. -1990,-№6.-С. 98-101.

101. ИЗ. Орловская Д.Д., Клещинов В.Н. Нейрон в гиперхромном состоянии // Журнал невропатологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. 1986. -№ 7.-С. 981-988.

102. Островская Т.А. и др. Влияние некоторых фторуглеродов на мембрану эритроцитов. Пущино: ОНТИ НЦБИ АН СССР. - 1980. - С. 90-93.

103. Пальцев М.А., Иванов A.A. Межклеточные взаимодействия. — М.: Медицина, 1995. 224 с.

104. Пермяков Н.К., Хучуа A.B., Туманский В.А. Постреанимационная энцефалопатия. М.: Медицина, 1986. - 240 с.

105. Перфторан в интенсивной терапии критических состояний: Методические рекомендации / Под ред. Л.В.Усенко, Е.Н.Клигуненко. -Днепропетровск, 1999. 56 с.

106. Плотников М.Б., Ваизова O.E. Сравнительный анализ двух моделей хронической ишемии головного мозга у крыс // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 1994. - № 2. - С. 59-60.

107. Плотников М.Б., Ваизова O.E., Суслов Н.И. Анализ изменений спектра мощности электроэнцефалограммы на новой модели ишемии мозга у крыс // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1994. - № 12. -С. 565-567.

108. Плотникова Т.М., Плотников М.Б., Баженова Т.Г. Оценка эффективности при острой ишемии мозга антигипоксантов, уменьшающих сродство гемоглобина к кислороду // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1991. - №2. - С. 65-67.

109. Повстяной Н.Е., Козинец Г.П., Сосюра Т.В. Патогенез и лечение пострадавших в остром периоде ожоговой болезни: Методические рекомендации. — Киев, 1989. — 23 с.

110. Покручин В.И., Арисенко В.В., Савинов П.А. Использование перфтоуглеродной эмульсии при лечении гнойных ран //

111. Физиологическая активность фторсодержащих соединений (эксперимент и клиника). Пущино: ОНТИ ПНЦ РАН. - 1995. - С. 218219.

112. Попова JI.M. Интенсивная терапия при заболеваниях нервной системы // Вестник интенсивной терапии. 1994. - № 2. - С. 4-9.

113. Пугаченко Н.В. Структурные изменения коры большого мозга при ишемии и их коррекция препаратами растительного происхождения: Автореф. дисс. канд. мед. наук. Томск: Сибирский гос. университет, 2000.- 19 с.

114. Пылова С.И. Состояние рецепторных систем, регулирующих содержание вторичных посредников в ткани головного мозга, при остановке кровообращения и в постреанимационном периоде: Дисс. . д-ра биол. наук. М., 1993. - 234 с.

115. Реброва О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA. М.: МедиаСфера, 2002. - 305 с.

116. Ромоданов А.П., Зозуля Ю.А., Спасиченко П.А., Морозов А.П. Перфторуглеродные активные среды для медицины и биологии. -Пущино: ОНТИ ПНЦ РАН, 1993. С. 63-69.

117. Рыжов А.И., Логвинов C.B. Ранние ультраструктурные реакции в различных отделах зрительного анализатора у морских свинок после термогенного микроволнового облучения // Архив анатомии, гистологии, эмбриологии. 1991. - Т. 101, № 7. - С. 30 -36.

118. Рябов Г.А. Синдромы критических состояний. М.: Медицина, 1994. -368 с.

119. Самойлов М.О. Мозг и адаптация: молекулярно-клеточные механизмы. СПб.: Ин-т физиологии им. И.П.Павлова РАН, 1999. - 272 с.

120. Светухина В.М. Цитоархитектоника новой коры мозга в отряде грызунов (белая крыса) // Архив анатомии, гистологии и эмбриологии. -1962.-Т.17,№2.-С. 31-44.

121. Семенов В.Н., Гурвич A.M. Неврология терминальных состояний // Вестник РАМН. 1994. - №1. - С. 15-20.

122. Семченко В.В., Боголепов H.H., Степанов С.С. Синаптоархитектоника коры большого мозга (морфометрические аспекты). Омск, 1995. - 167 с.

123. Семченко В.В., Войнов А.Ю., Голевцова З.Ш. и др. Гемостаз и сосудистый эндотелий при черепно-мозговой травме. Омск-Надым: Омская областная типография, 2003. - 168 с.

124. Семченко В.В., Степанов С.С. Система субсинаптических единиц как универсальный системообразующий и регулирующий фактор синапсов головного мозга // Бюл. эксперим. биологии и медицины. -1997.-Т. 124, №7.-С. 4-12.

125. Семченко В.В., Степанов С.С. Структурная организация синапсов как детерминирующий фактор избирательной чувствительности и пластичности нейронов мозга в постаноксиченском периоде // Вестн. Рос. АМН. 1999. - №7. - С.36-40.

126. Семченко В.В., Степанов С.С., Десятченко А.К. Гипертрофия синапсов как фактор формирования устойчивых патологических систем мозга в позднем постреанимационном периоде // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 2000. - Т. 129, № 5. - С. 532-535.

127. Середенко М.М. Механизмы развития и компенсации гемическойгипоксии. Киев: Наукова думка, 1987. - 199 с.

128. Сингаевский А.Б. Нарушение транспорта кислорода кровью при тяжелой сочетанной травме и его значение для дифференцированной лечебной тактики в постшоковом периоде: Автореф. дисс. канд. мед. наук. — Воен.-мед. акад. С.-Петербург, 1996. -25 с.

129. Софронов Г.А., Селиванов Е.А., Ханевич М.Д. и др., Применение перфторана при операциях на органах брюшной полости // Перфторорганические соединения в биологии и медицине. Пущино: ОНТИ ПНЦ РАН. - 1999. - С. 32-37.

130. Софронов Г.А., Ханевич М.Д., и др., Применение перфторана в военной медицине // Перфторорганические соединения в биологии и медицине. Пущино: ОНТИ ПНЦ РАН. - 1999. - С. 21-25.

131. Средняков В.А., Моисеенко О.М., Туляев А.П., и др. Адаптогенные свойсива перфторана // Перфторорганические соединения в биологии и медицине. Пущино: ОНТИ ПНЦ РАН. - 1999. - С. 175-181.

132. Степанов С.С. Система субсинаптических единиц межнейрональных синапсов головного мозга в норме, при ишемических состояниях и в восстановительном периоде: Автореф. дис. . докт. мед. наук. — Новосибирск, 1999. 32 с.

133. Суду с A.A. Перфодекалиновая гемопротекция в хирургии открытого сердца: Автореф. дис. . канд. мед.наук. СПб., 1998. - 26 с.

134. Тарабарко В.И. Обеспечение донорскими органами при клинической трансплантологии: Автореф. дисс. . докт. мед.наук. М., 1997. - 59 с.

135. Тахчиди Х.П., Казайкин В.Н. Особенности хирургии тракционной отслойки сетчатки при пролиферативной диабетической ретинопатии // Перфторорганические соединения в биологии и медицине. Пущино: ОНТИ ПНЦ РАН. - 1999. - С.192-195.

136. Тахчиди Х.П., Костин В.Н. Применение силиконовой томпонады в лечении гигантских ретинальных разрывов // Перфторорганические соединения в биологии и медицине. Пущино: ОНТИ ПНЦ РАН. -1999. — С.192-195.

137. Узбеков М.Г., Карпачевская И.К. Действие глутатиона на энергетический обмен мозга при антенатальной гипоксии // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 1991. -№5.-С. 11-13.

138. Урбах В.Ю. Математическая статистика для биологов и медиков. -М.: Изд. академии наук СССР, 1963 323 с.

139. Усенко Л.В., Клигуленко E.H. Механизмы адаптации при использовании перфторана в лечении тяжелой травмы головного мозга // Физико-химическое и клиническое исследование перфторорганических соединений. Пущино: ОНТИ ПНЦ РАН. - 1994. -С. 95-117.

140. Усенко Л.В., Клигуленко E.H. Перспективы и возможности использования перфторана в комплексном лечении критических состояний // Физиологическая активностьфторсодержащих соединений (эксперимент и клиника). Пущино: ОНТИ ПНЦ РАН. - 1995. - С. 173176.

141. Усенко Л.В., Клигуленко E.H., Белоярцев Ф.Ф. Наш опыт применения негемоглобиновых кислородонесущих кровезаменителей при острой нейротравме // Материалы 6 научно-практической конференции анестезиологов-реаниматологов. — Кустанай, 1986. С. 101-103.

142. Усенко JI.B., Клигуненко E.H., Криштофор A.A., Царев A.B. Перфторуглероды в биологии и медицине. Перфторуглеродные эмульсии (ПФУЭ) в хирургии // Провизор. 2000. - № 14. - С. 23-26.

143. Усенко JI.B., Криштафор A.A. Влияние перфторана на качество психоневрологического восстановления после перенесенной клинической смерти // Перфторорганические соединения в биологии и медицине. Пущино: ОНТИ ПНЦ РАН. - 1999. - С. 87-94.

144. Усенко JI.B., Криштафор A.A. Перфторан в профилактике постгипоксической энцефалопатии // Перфторорганические соединения в биологии и медицине. Пущино: ОНТИ ПНЦ РАН. - 1999. - С. 76-87.

145. Усенко JI.B., Эстрин A.A., Перцева Т.А., Черкасова О.Г. Противоишемические эффекты перфторана у больных острым инфарктом миокарда // Перфторорганические соединения в биологии и медицине. Пущино: ОНТИ ПНЦ РАН. - 1997. - С. 174-187.

146. Усов Л.А., Суфланова Г.З. и др. К вопросу о соотношении фармакокоррекции мозгового кровообращения и церебропротекторного эффекта // Актуальные проблемы фармакологии и поиска новыхлекарственных препаратов. 1999. - Т. 10. - С. 216-217.

147. Фейгин B.JI. Проблемы цереброваскулярной патологии в Сибири: репринт доклада на заседании Президиума СО РАМН (1998, Новосибирск). Новосибирск: СО РАМН, 1998. - С. 10.

148. Фрейдин A.A., Кокоз Ю.М., Кобринский Е.М. и др. Влияние неионогенных поверхностно-активных веществ (проксанолов) на натриевые и калиевые токи в миокарде // ДАН. 1983. - Т. 270, №3. -С. 728-731.

149. Фторуглеродные газопереносящие среды / Под ред. Ф.Ф.Белоярцева. -Пущино, 1984.-179 с.

150. Хлуновский А.Н., Старченко A.A. Концепция болезни поврежденного мозга. Методологические основы / Под ред. В.А.Хилько. СПб.: Издательство "Лань", 1999. - 256 с.

151. Хонда К., Усуба А., Миязава М. и др. Искусственная кровь: от Флюозола-ДА до искусственных эритроцитов // Биосовместимость. — 1993. Т.1, № 2. - С.81-94.

152. Хрупкин В.И., Мороз В.В., Филиппов А.Ю. Клиническое применение перфторана при сочетанной боевой травме // Физиологически активные вещества на основе перфторуглеродов в военной медицине. -СПб, 1997. С. 76-81.

153. Хучуа A.B. Морфологические изменения головного мозга в постреанимационном периоде: Автореф. дис. . докт. мед. наук. — М., 1982.-48 с.

154. Черников B.C. Возможности поддержания газообмена в легких с помощью жидких переносчиков кислорода и углекислоты: Автореф. дис. . канд. мед. наук. 1980. - 18с.

155. Шехтман Д.Г. Индукция цитохром P-450-зависимой монооксидазной системы печени полностью фторированными органическими соединениями: Автореф. дис. . канд. биол. наук. Ташкент, 1991. - 17 с.

156. Шикунова Л.Г., Миротворская Г.Н. Патофизиологическая и морфологическое исследование центральной нервной системы после продолжительной клинической смерти // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 1981. - № 3. - С. 14-18.

157. Шилов В.В., Андреева Н.Б., Щирица H.H. и др. Особенности кинетики жирорастворимых ксенобиотиков при воздействии перфторуглеродов // Перфтоорганические соединения в биологии и медицине. -Пущино. 1999. - С. 50-61.

158. Шматко В.Г., Багирь В.Н. К клинике геморрагического инсульта // Неотложная неврология: Матер, ежегодной научно-практической конференции. Омск, 1998.-С. 105-106.

159. Шумаков В.И., Онищенко H.A. и др. О повышении результативности пересадок почек в клинике при подготовке донора перфтораном // Физико-химические и клинические исследования перфторорганических соединений. Пущино: ОНТИ ПНЦ РАН. - 1994. - С. 50-55.

160. Шумаков В.И., Онищенко H.A., Саитгареев Р.Ш. Применение перфторуглеродной эмульсии при трансплантации легких (экспериментальное исследование) // Биосовместимость. 1993. - Т.1, № 2. - С. 56-57.

161. Шумаков В.И., Онищенко H.A., Саитгареев Р.Ш., Тарабарко Н.В. Использование перфторуглеродных эмульсий при трансплантации органов (итоги и респективы) // Перфторорганические соединения в биологии и медицине. Пущино: ОНТИ ПНЦ РАН. - 2001. - С. 127-134.

162. Шумаков В.И., Онищенко Н.А., Саитгериев Р.Ш. и др., Применение перфторуглеродных эмульсий в трансплантологии // Материалы Всероссийской конференции «Гипоксия: механизмы, адаптация, коррекция». -М., 1997.-С. 121-127.

163. Ярочкин B.C., Козинер В.Б. Кислородное снабжение организма при введении перфторорганических эмульсий (патофизиологический анализ) // Патол. физиол. и экспер. терап. 1988. - №3. - С 81-86.

164. Aakalu G., Smith W.B., Nguyen N. et al. Dynamic visualization of local protein synthesis in hippocampal neurons // Neuron. 2001. - V.30, N2. -P.489-502.

165. Au A.M., Chan P.H., Fischman R.A. Stimulation of phospholipase A2 activity by oxygen derived free radicals in isolated brain capillaries // J. Cell Biochem. 1985. - V.27. - P.449-453.

166. Aubert I., Ridet J.L., Gage F.H. Regeneration in the adult mammalian CNS: guided by development // Curr. Opin. Neurobiology. 1995. - V.5. -P. 625-635.

167. Babbs C.F., Ralston S.H., Badylak S.F. et al. Evidence of preventable lipid peroxidation in brain and heart four after cardiac arrest and reperfusion in rats abstract. // Am. J. Emerg. Med. 1986. - V.4. - P.414.

168. Babbs C.F., Steiner M.G. Stimulation of free radical reactions in biology and medicine: a new two-compartment kinetic model of intracellular lipid peroxidation//Free Radic. Biol. Med. 1990. - V.8. - P.471-485.

169. Bazan N.G., Rodriguez de Turco E.B., Allan G. Mediators of injury in neurotrauma: intracellular signal transduction and gene expression // J. Neurotrauma. 1995. - V. 12, N5. - P.791-814.

170. Beloyartssev F.F., Islamov B.I., Vayevsky E.I., Perfusion and Nonperfusion Methods of Myokardium Protection with Perfluorocarbon Emulsion. Preprint. Puschino. 1983. - 23 p.

171. Bickler P.E., Hansen B.M. Cause of calcium accumulation in rat cortical brain slices during hypoxia and ischemia: role of ion channels and membrane damage // Brain Res. 1994. - V.665, N2. - P.269-276.

172. Brenner B.M., Troy J.L., Baltermann B.J. Endothelium-dependent vascular responses: mediators and mechanisms // J. Clin. Invest. 1989. -V.84. - P.1373-1379.

173. Bromont C., Marie C., Bralet J. Increased lipid peroxidation in vulnereble brain regions after transient forebrain ischemia in rats // Stroke. 1989. - V.2. - P.918-924.

174. Carverley R.K.S., Jones D.G. Contribution of dendritic spines and perforated synapses to synaptic plasticity // Brain Res. Rev. 1990. - V. 15. -P.215-249.

175. Choi D.W., Koh J.Y. Zinc and brain injury // Annu. Rev. Neurosci. -1998. V.21. - P.347-375.

176. Czeh G., Aitken P.G., Somjen G.G. Membrane currents in CAI pyramidal cells during spreeding depression (SD) and SD-lire hypoxic depolarisation // Brain Res. 1993. - V. 632, N1-2. - P. 195-208.

177. Das D.K., Engelman R.M., Rousou J.A. et al. Role of membrane phospholipids in miocardial injury induced by ischemia and reperfusion // J. Physiol. (Lond).- 1986.- V.251.-P.H71-H79.

178. Devon R.M., Jones D.G. Synaptic terminal parameters in unanaesthetized rat cerebral cortex // Cell Tissue Res. 1979. - V. 203. - P.189-200.

179. Dos-Santos W.L., Rahman J., Klein N., Male D.K. Distribution and analysis of surface charge on brain endothelium in vitro and in situ // Acta Neuropathol. Berl. 1995. - V.90, N3. - P.305-311.

180. Dyson S.E., Jones D.G. Protective effect of mild hypothermia on brain ischemia // Brain Res. 1976. - V.l 14, № 3. - P. 365-378.

181. Dyson S.E., Jones D.G. Quantitation of terminal parameters and their interrelationships in maturing central synapses: a perspective for experimental studies // Brain Res. 1980. - V.l83, №1. - P.43-59.

182. Dyson S.E., Jones D.G. Synaptic remodelling during development and maturation: junction differentiation and splitting as a mechanism for modifying connectivity// Brain Res. 1984. - V.315, №1. - P. 125-137.

183. Ekholm A., Katsura K.I., Kristian T. et al. Coupling of cellular energy state and ion homeostasis during recovery following brain ischemia // Brain Res. 1993. - V. 604. - P.185- 191.

184. Espinoza M.I., Parer J.T. Mechanism of asphyhial brain damage and possible pharmacological interventions in the fetus // Am. J. Obstet. Gynecol. 1991. - V.164. - P.1582-1591.

185. Folbergrova J., Kiyota Y., Pahlmark K. et al. Does ischemia with reperfusion lead to oxidative damage to proteins in the brain? // J. Cereb. Blood Flow Metab.- 1993,- V.13. P.145-152.

186. Gajkowska В., Mossakowski M.J. Calcium accumulation in synapses of the rat hippocampus after cerebral ischemia // Neuropat. Pol. 1992. - V.30, N.2.-P. 111-125.

187. Gajkowska В., Viron A. Protracted elevation of endothelin immunoreactivity in hypothalamo-neurohypophysial system after ischemia // Folia Neuropathol. 1997. - V.35, N2. - P. 107-114.

188. Geinisman Y. Perforated axospinous synapses with multiple, completely partitioned transmission zones: probable structural intermediates in synaptic plasticity// Hippocampus. 1993. - V.3, N4. - P.417-433.

189. Geinisman Y., de Toledo-Morrell L., Morrell F. et al. Structural synaptic correlate of long-term potentiation: formation of axospinous synapses with multiple, completely partitioned transmission zones // Hippocampus. 1993. - V.3,N4.-P.435-445.

190. Geinisman Y., de Toledo-Morrell L., Morrell F. et al. Synapse restructuring associated with the maintenance phase of hippocampal long-term potentiation // J. Сотр. Neurol. 1996. - V.368, N3. - P.413-423.

191. Geinisman Y., Gundersen H.J., van der Zee E., West M.J. Unbiased stereological estimation of the total number of synapses in a brain region // J. Neurocytol. 1996. - V.25, N12. - P.805-819.

192. Giese H., Mertsch K., Blasig I.E. Effect of MK-801 and U83836E on a porcine brain capillary endothelial cell barrier during hypoxia// Nturosci. Lett. 1995. - V.191, №3. - P.169-172.

193. Goodin T.N., Grossbord E.B., Richard T.J. et al. A perfluorochemical emulsion for prechospital resuscitation of experimental hemorrhagic shock: a prospective, randomized, controlled study // Critical Care Medicine. 1994. - V.22, N 4. - P.680-689.

194. Hall E.D. Inhibition of lipid peroxidation in central nervous system trauma and ischemia // Central Nervous System Diseases Research, Upjohn Company, Kalamazoo, MI 49001, USA. J-Neurol-Sci. 1995. - V.134 Suppi.-P. 79-83.

195. Huttenlocher P.R., Courten Ch.de. The development of synapses in striate cortex of man // Hum. Neurobiol. 1987. - V.6, №1. - P. 1-9.

196. Iadecola C. Cerebral circulatory dysregulation in ischemia. In: Cerebrovascular Diseases (Ginsberg M.D., Bogousslavsky J. eds.). Blackwell, Cambridge, MA 1998. - P.319-332.

197. Iadecola C. Mechanisms of cerebral Ischemic damage. In: Cerebral Is (Wolfgang Walz ed.). New Jersey, Totowa, Humana Press. 1999. - P.3-33.

198. Jing J., Aitken P.G., Somjen G.G. Role of calcium channels in spreading depression in rat hippocampal slices // Brain Res. 1993. - V.604, N1-2. -P.251-259.

199. Johnson G., Marcoux F.W. Local cerebral ischemia and reperfusion in rats //Ann. Rep. Med.Chem. 1986. - V.21. - P. 109-118.

200. Jones D.G., Harris R.J. An analysis of contemporary morphological concepts of synaptic remodelling in the CNS: perforated synapses revisited // Rev. Neurosci. 1995. - V.6, №3. - P. 177-219.

201. Katoh A., Ishibashi C., Shiomi T. et al. Ischemia-induced irreversible deficit of memory function in gerbils // Brain Res. 1992. - V.577. - P.57-63.

202. Katsura K., Rodriguez de Turco E.B., Kristian T. et al. Alterations in lipid and calcium metabolism associated with seizure activity in the postischemic brain // J. Neurochem. 2000. - V.75, N6. - P. 2521-2527.

203. Kil H.Y., Zhang J., Piantadosi C.A. Brain temperature alters hydroxyl padical production during cerebral ischemia/reperfusion in rats // Department of Anesthesiology, Duke University Medical Center, Durham, North

204. Carolina 27710, USA. J-Cereb-Blood-Flow-Metab. 1996. - V. 16, № 1. -P.100-106.

205. Kishida A., Akatsuka Y., Yanagi M. et al. In vivo and ex vivo evaluation of the antithrombogenicity of human thrombomodulin immobilized biomaterials // ASAIO J. 1995. - V.41, N3. - P.369-374.

206. Koc R.K., Kurtsoy A., Pasaoglu H. et al. Lipid peroxidation and oedema in experimental brain injury: comparison of treatment with methylprednisolone, tirilazad mesylate and vitamin E // Res. Exp. Med. (Berl). 1999. - V.199, N1. - P. 21-28.

207. Koistinaho J., Flokfelt T. Altered gene expression in brain ischemia // Neuroreport. 1997. - V.8, N2. - P.l-8.

208. Kontos H.A. Oxygen radicals in cerebral vascular injury // Circ. Res. -1985.-V.57.-P.508-516.

209. Krause G.S., De Gracia D.J., Skjaerlund J.M., O'Neil B.J. Assessment of free radical-induced damage in brain proteins after ischemia and reperfusion // Resuscitation. 1992. - V.23. - P.59-69.

210. Krause G.S., Nayini N.R., White B.C. et al. Natural course of iron derealization and lipid peroxidation during the first eight hours following a 15-minute cardiac arrest in dogs // Ann. Emerg. Med. 1987. - V.16. -P.1200-1205.

211. Kristian T., Siesjo B.K. Calcium in ischemic cell death // Stroke. 1998. - V.29, N3. - P.705-718.

212. Kulkarni M., Armstead W.M. Superoxide generation links nociceptin/orphanin FQ (NOC/oFQ) release to impaired N-methyl-D-aspartate cerebrovasodilation after brain injury // Stroke. 2000. - V.31, N8. -P. 1990- 1996.

213. Kuroda S., Siesjo B.K. Reperfusion damage following focal ischemia: pathophysiology and therapeutic windows // Clinical Neuroscience. 1997. -V.4. - P.199-212.

214. Laptook A.R., Corbett R.J., Sterett R. et al. Modest hypothermia provides partial neuroprotection when used for immediate resuscitation after brain ischemia // Department of Pediatrics, UT-Southwestem Medical Center at

215. Dallas, Texas, USA. Pediatr-Res. 1997. - V.42, N1. - P. 17-23.

216. Lazarewicz J.W. Calcium transients in brain ischemia: role in neuronal injury // Acta Neurobiol. Exp. Warsz. 1996. - V.56, N1. - P.299-311.

217. Leker R.R., Shohami E. Cerebral ischemia and trauma-different etiologies yet similar mechanisms: neuroprotective opportunities // Brain Res. Brain Res. Rev. 2002. - V.39, N1. - P.55-58.

218. Lewen A., Matz P., Chan P.H. Free radical pathways in CNS injury // J. Neurotrauma. 2000. - V.17, N10. - P. 871-890.

219. Lipton P., Raley-Susman K.M. Autoradiographic measurements of protein synthesis in hippocampal slices from rats and guinea pigs // Methods.- 1999. V.18, N2. - P.127-143.

220. Luer M.S., Rhoney D.H., Hughes M., Hatton J. New pharmacologic strategies for acute neuronal injury // Pharmacotherapy. 1996. - V.16, N5.- P.830-848.

221. Marion D.W., Leonov Y., Ginsberg M. et al. Resuscitative hypothermia // Department of Neurological Surgery, Presbyterian University Hospital, University of Pittsburgh Medical Center, USA. Crit-Care-Med. 1996. -V.24, N2.-P. 81-89.

222. Mattson M.P., Culmsee C., Yu Z.F. Apoptotic and antiapoptotic mechanisms in stroke // Cell Tissue Res. 2000. - V.301, N1. - P. 173-187.

223. Mayhew T. M. A review of recent advances in stereology for quantifying neural structure // J. Neurocytol. 1992. - V.21. - P.313-328.

224. Mayhew T.M. Stereological approach to the study of synapse morphometry with particular regerg to estimating number in volum and a surface // J. Neurocytol. 1979. - V.8, N2. - P. 121-138.

225. McCord J.M. Oxygen derived free radicals in postischemic tissue injury // N. Engl. J. Med. 1985. - V.312. - P.159-163.

226. Mela L. Mitochndrial function in cerebral ischemia and hipoxia: comparsion of inhibitori and adaptive responses // Neurol. Res. 1979. -V.l, N1. -P. 51-63.

227. Miller M.W., Potempa G. Numbers of neurons and glia in mature rat somatosensory cortex: effects of prenatal exposure to ethanol // J. Comp. Neurol. 1990. - V.293. - P. 92-102.

228. Mitani A., Yanase H., Namba S. et al. In vitro ischemia-induced intracellular Ca2+ elevation in cerebellar slices: a comparative study with the values found in hippocampal slices // Acta Neuropathol. Berl. 1995. -V.89, N1. -P.2-7.

229. Naito R., Yokoyama K. An improved perfluoredecalin emulsion // Blood Substitutes and Plasma Expanders. NY. Alan R Liss Inc., 1978. P. 78-86.

230. Neumar R.W. Molecular mechanisms of ischemic neuronal injury // Ann. Emerg. Med. 2000. - V.36, N5. - P. 483-506.

231. Norden J.J. The relative accurancy and effeciency of various stereological methods for quantitating synapses // Acta Stereol. (SFRJ). 1986. - V.6, N3/1.-P.l 17-122.

232. Pang Z., Geddes J.W. Mechanisms of cell death induced by the mitochondrial toxin 3-nitropropionic acid: acute excitotoxic necrosis and delayed apoptosis // J. Neurosci. 1997. - V.l7, N9. - P.3064-3073.

233. Paxinos G., Watson Ch. AThe rat brain in stereotaxic coordinates. -Toronto: Acad. Press, 1982. 90 p.

234. Perry D., Wei H., Rosenthal R.E., Fiskum G. Autoradiographic analysis of L- and N-type voltage-dependent calcium channel binding in canine brainafter global cerebral ischemia/reperfusion //Brain Res. 1994. - V.657. -P.65-72.

235. Peruche B., Krieglstein J. Mechanisms of drug actions against neuronal damage caused by ischemia-an overview // Prog. Neuro-Psychopharmacol. & Biol. Psychiat. 1993. - V.17. - P.21-70.

236. Phillips L.L., Reeves T.M. Interactive pathology following traumatic brain injury modifies hippocampal plasticity // Restor. Neurol. Neurosci. -2001. V.19, N3,4. - P. 213-235.

237. Plateel M., Dehouck M.P., Torpier G., Hypoxia increases the susceptibility to oxidant stress and the permeability of the blood-brain barrier endothelial cell monolayer // J. Neurochem. 1995. V.65, N5. - P.2138-2145.

238. Pluta R., Lossinsky A.S. Early blood-brain barrier changes in rat following transient complite cerebral ischemia induced by cardiac arrest // Brain Res. 1994. - V.633, N3. - P.41-52.

239. Poirazi P., Mel B.W. Impact of active dendrites and structural plasticity on the memory capacity of neural tissue // Neuron. -2001. V.29, N3. -P.779-796.

240. Raley-Susman K.M., Barnes J.R. The effects of extracellular pH and calcium manipulation on protein synthesis and response to anoxia/aglycemia in the rat hippocampal slice // Brain Res. 1998. - V.782, N1-2. - P.281-289.

241. Razdan B., Marro P.J., Tammela O., Delivoria-Papadopoulos M. et al. Selective sensitivity of synaptocomal membrane function to cerebral cortical hypoxia in newborn piglets // Brain Res. 1993. - V.600, N2. - P.308-314.

242. Rosemary M. L. Experimental neuronal protection in cerebral ischemia. Part II: Potential neuroprotective drugs // J. Clin. Neurosci. 1997. - V.4, N3. - P.290-310.

243. Rosenberg G.A. Ischemic brain edema // Prog. Cardiovasc. Die. 1999. -V. 42, N3.-P. 209-216.

244. Sakamoto A., Ohnishi S.T., Ogava R. Relationship between free radical prodaction and lipid peroxidation during ischemia-reperfusion injury in rat brain // Brain Res. 1991.- V. 554.-P.186- 192.

245. Schmidt-Kastner R., Freund T.F. Selective vulnerability of the hippocampus in brain ischemia // J.Neurosci. — 1991. V.40. — P. 599-636.

246. Semchenko V.V., Stepanov S.S., Akulinin V.A. Structural basic of information capacity changes of sensory-motor cerebral cortex of rat brain during post-resuscitation period // Resuscitation. 1996. - V.31. - P. 151158.

247. Shohami E., Gati I., Beit-Yannai E. et al. Closed head injury in the rat induces whole body oxidative stress: overall reducing antioxidant profile // J. Neurotrauma. 1999. -V. 16, N5. - P. 365-376.

248. Siesjo B.K. Pathophysiology and theatment of local cerebral ischemia. Part II: Mechanisms of damage and theatment // J. Neurosurg. 1992. - V. 77. - P.337-354.

249. Siesjo B.K. Basic mechanisms of traumatic brain damage // Ann. Emerg. Med. 1993. - V.22, N6. - P.959-969.

250. Siesjo B.K. Calcium in the brain under physiological and pathological condicions // 4-h Int. Symp., Calcium Antagonists.-Florence, 1989. P. 1822.

251. Siesjo B.K. Pathophysiology and theatment of local cerebral ischemia. Part I: Pathophysiology // J. Neurosurg. 1992. - V. 77. - P.169-184.

252. Siesjo B.K., Bengtsson F. Calcium fluxes, calcium antagonists, and calcium-related pathology in brain ischemia, hypoglycemia, and spreading depression: a unifying hypothesis // J. Cereb. Blood Flow Metab. 1989. -V. 9, N2. - P.127-140.

253. Siesjo B.K., Elmer E., Janelidze S. et al. Role and mechanisms of secondary mitochondrial failure // Acta Neurochir Suppl. 1999. - V.73. -P.7-13.

254. Siesjo B.K., Katsura K., Kristian T. The biochemical basis of cerebral ischemic damage // J. Neurosurg. Anesthesiol. 1995. - V.7, N1. - P. 47-52.

255. Siesjo B.K., Siesjo P. Mechanisms of secondary brain injury // Eur. J. Anaesthesiol. 1996,- V. 13, N3. - P.247-268.

256. Steiner M.G., Babbs C.F. Hydroxyl radical generation by postischemic rat kidney slices in vitro // Free Radic. Biol. Med. 1990. - V.9. - P.67-77.

257. Sun J.Y., Wu L.G. Fast kinetics of exocytosis revealed by simultaneous measurements of presynaptic capacitance and postsynaptic currents at a central synapse //Neuron. 2001. - V.30, N1. - P. 171-182.

258. Sur C., Triller A., Korn H. Morphology of the release site of inhibitory synapses on the soma and dendrite of an identified neuron // J. Comp. Neurol.- 1995.-V.351, N2.-P.247-260.

259. Suzuki R., Yamaguchi T., Kirino T. et al. The effect of 5-minute ischemia in mongolian gerbils: I. Blood-brain barrier, cerebral blood flow and local cerebral glucose utilization changes // Acta Neuropathol. 1983. - V.60. -P.207-216.

260. Szatkowski M., Attwell D. Triggering and execution of neuronal death in brain ischaemia: two phases of glutamate release by different mechanisms // Trends Neurosci. 1994. - V.17, N9. - P.359-365.

261. Szumanska G., Mossakowski M.J., Januszewski S. Changes in the activity of alkaline phosphatase and adenylate cyclase in the brain vaslular network in experimental postresuscitation syndrome // Neuropatol. Pol. 1988. -V.26. - P.335-357.

262. Tanahashi N. Cerebral microvascular reserve for hyperemia. In: Cerebral hyperemia and ischemia (Tomita M., Sawada T., Naritomi H., Heiss W-D. eds.). Amsterdam, ICS 764, Excerpta Medica 1988. P.173-182.

263. Tominaga T. Kure S., Narisawa K., Yoshimoto T. Endonuclease activation following focal ischemic injury in the rat brain // Brain Res. -1993. V.608. N1. -P.21-26.

264. Tomita M. Microcirculatory stasis in the brain. In: Microcirculatory stasis in the brain (Tomita M., Mchedlishvili G., Rosenblum W.I., Heiss W-D., Fukuuchi Y. eds.). Amsterdam, ICS 1031, Excerpta Medica 1993. -P.l-7.

265. Tomita M. Significance of cerebral blood volume. In: Cerebral hyperemia and ischemia (Tomita M., Sawada T., Naritomi H., Heiss W-D. eds.). Amsterdam, ICS 764, Excerpta Medica 1988. P.3-31.

266. Umemura A. Regional difference in free fatty acids release and the action of phospholipase during ischemia in rat brain // No To Fkei. 1990. -V.42. - P.979-986.

267. Ussenko L.V., Chrishtafor E.N., Neuroprotective action of perftoran in patient with primari and secondari damage of brein // 10th European Congress of Anaesthesiology. Franfurkt-Main, 1998. - P. 461.

268. Vrensen G., Nunes C.J., Muller L. et al. The presynaptic grid: a new approach // Brain Res. 1980. - V.l84, N1. - P.23-40.

269. Warlow C.P., Dennis M.S. van Gijn J. et al. Stroke. A practical guide to management. Oxford, Blackwell Science Ltd, 1996. - P.6.

270. Waschke K.F., Riedel M., Albercht D.V. et al. Effect of a perfluorocarbon on regional cerebral blood flow and metabolism after resuscitation from hemorrage in conscious rats // Anestesia & Analgesia. 1994. - V.79, N5. -P.874-882.

271. White B.C., De Gracia D.J., Krause G.S. et al. Brain nuclear DNA survives cardiac arrest and reperfusion // Free Radie. Biol. Med. 1991. -V.10. - P.125-135.

272. White B.C., Grossman L.I., Krause G.S. Brain injury by global ischemia and reperfusion: A. theoretical perspective on membrane damage and repair // Neurology. 1993. - V.43. - P. 1656-1665.

273. White B.C., Sullivan J.M., DeGracia D.J. et al. Brain ischemia and reperfusion: molecular mechanisms of neuronal injury // J.Neurol. Sei. -2000. V.179, N1-2. - P. 1-33.

274. Xie Y., Dengler K., Lacharias E., Wilffert A., Tegtmeier F. Effects of the sodium channel blocker tetrodotoxin (TTX) on cellular ion homeostasis in rat brain subjected to complete ischemia // Brain Res. 1994. - V.652, N2. — P.216-224.

275. Xu Z.C., Wilson C.J., Emson P.C. Restoration ofithalamostriatal projections in rat neostriatal grafts: an electron microscopic analysis // J. Compar. Neurol. 1991. - V.303, N1. - P.22-34.

276. Yamashiro T., Mitsuhata H., Tamagawa K. et al. Réévaluation of protective effect of mild hypothermia on brain ischemia following massive bleeding // Department of Anesthesiology, Jichi Medical School, Tochigi. Masui. 1995. - V. 44, N9. - P.1273-1276.

Информация о работе

Максимишин, Сергей Валентинович
кандидата медицинских наук
Томск, 2004
ВАК 03.00.25

Диссертация

Структурно-функциональные изменения коры большого мозга при острой ишемии и их коррекции с использованием перфторана - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы