Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Стероидные гормоны в осуществлении репродуктивной функции русского осетра (Acipenser gueldenstaedtii Br.) в природе и в искусственных условиях

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Стероидные гормоны в осуществлении репродуктивной функции русского осетра (Acipenser gueldenstaedtii Br.) в природе и в искусственных условиях"

САНКТ-ПЕТЕРБУРГСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ

На правах рукописи

ГРУСЛОВА Александра Борисовна

СТЕРОИДНЫЕ ГОРМОНЫ В ОСУЩЕСТВЛЕНИИ РЕПРОДУКТИВНОЙ ФУНКЦИИ РУССКОГО ОСЕТРА (АС1РЕ^Е1Ч СиЕЮЕЫЗТАЕОТП В!* ) В ПРИРОДЕ И В ИСКУССТВЕННЫХ УСЛОВИЯХ

03.00.13 - Физиология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Санкт-Петербург 2004

Работа выполнена в лаборатории эволюционной физиологии ФНИИ им. A.A. Ухтомского Санкт-Петербургского государственного университета и в Центральной лаборатории по воспроизводству рыбных запасов Государственного Комитета Российской Федерации по рыболовству

Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор

Ирина Алексеевна Баранникова

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, заслуженный деятель науки, профессор Вера Георгиевна Шаляпина

кандидат биологических наук, доцент Марина Павловна Чернышева

Ведущее учреждение-

Институт эволюционной физиологии и биохимии им И М. Сеченова РАН

Защита состоится " S " (ХУМр&ЛЙ. 2004 г. в 1С часов на заседании Диссертационного совета Д 212.232.10 по защите диссертаций на соискание ученой степени доктора биологических наук при Санкт-Петербургском государственном университете по адресу 199034, Санкт-Петербург, Университетская наб., 7/9.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке им A.M. Горького Санкт-Петербургского государственного университета

Автореферат разослан "_Д_" .Лл-в-^>7<>-2004 г.

Ученый секретарь Диссертационного совета доктор биологических наук, профессор

Н.П. Алексеев

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Одной из основных проблем физиологии является выяснение механизмов гормонального контроля половых циклов у позвоночных. В регуляции репродуктивной функции низших позвоночных, в том числе и у рыб, существует ряд особенностей по сравнению с млекопитающими (Баранникова, 1981; Баранникова и др., 1991, Баранникова, Дюбин, 1992; Peter, 1986; Nagahama, 1987; King, Millar, 1990; Kime, 1993). Исследование этого вопроса у рыб представляет особый интерес, так как существует множество видов с различной экологией и разными типами жизненного цикла. Даже в пределах популяций одного вида (например, в сем. осетровых, лососевых) могут образовываться биологические группы, отличающиеся состоянием половых желез в начале нерестовой миграции (Берг, 1948; Гербильский, 1951, 1957; Баранникова, 1966,1975).

Известно, что осуществление развития и созревания половых желез происходит на основе комплексного взаимодействия внешних и внутренних факторов. Одним из возможных подходов к изучению гормональной регуляции созревания гонад у рыб является исследование содержания гормонов в крови в зависимости от сезона, стадии репродуктивного цикла, а также с учетом экологических особенностей исследуемого вида. В частности, представляет интерес изучение динамики половых стероидов в крови, которые являются важным звеном в эндокринной регуляции размножения. Они участвуют в регуляции репродуктивного цикла, выполняя ряд функций для обеспечения нормального хода гаметогенеза, развития половых признаков, подготовки и осуществления нерестовой миграции, полового и родительского поведения (Баранникова, 1975; Никитин и др., 1991; Foster et al., 1983; Kime, 1993; Borg, 1994; Yaron, 1995).

Одним из представителей осетровых является русский осетр (Acipenser gueldenstaedtii Brandt). Этот вид, как и большинство рыб из этой группы, относится к проходным рыбам, совершающим миграции из морей в реки для размножения. В пределах волго-каспийской популяции существуют яровые и озимые группы, которые мигрируют в реки в различные сезоны и с разным состоянием воспроизводительной системы (Берг, 1948; Гербильский, 1951, 1957; Баранникова, 1957, 1975). В этой связи особое значение для понимания гормональной регуляции гаметогенеза у осетровых приобретает сравнительное исследование уровней стероидных гормонов в крови рыб одного вида, относящихся к разным биологическим группам.

В свою очередь исследования, проводимые на различных представителях осетровых, тесно связаны с проблемами сохранения видов этих ценных рыб, В настоящее время поддержание численности осетровых в Волго-Каспийском бассейне в значительной мф^

осуществляется за счет работы рыбоводных заводов. До недавнею времени, основным объектом волжского осетроводства являлся яровой осетр, мигрирующий с близкими к зрелости гонадами. Озимые мигранты практически не использовались при разведении, так как они заходят в реки с гонадами далекими от зрелости, что требует их длительного выдерживания (от 6 до 11 месяцев) в условиях рыбоводных заводов до созревания.

На фоне снижения численности осетровых, все чаще среди них встречаются особи с нарушениями обмена веществ и процессов созревания гонад (Романов, 1992; Корниенко и др., 1996; Дудкин и др, 1997, Моисеева и др., 1997, Рубан, 1999; Саенко, 2000, Баранникова и др, 2002). Характеристика уровней стероидных гормонов в крови может служить одним из показателей, огражающих физиологическое состояние рыб, поскольку концентрация стероидов в крови изменяется под воздействием стрессорных факторов (Donaldson, 1981, Epplc et al., 1982, Barton, Peter, 1987, Pickering et al, 1987; Pickering, 1989, Дюбин, 1989; Баюнова, Семенкова, 1999, Consten et al., 2002).

В связи с этим изучение динамики стероидных гормонов на разных этапах репродуктивного цикла осетровых имеет не только теоретическое значение, но и представляет большой интерес для совершенствования воспроизводства русского осетра на рыбоводных заводах.

Цели и задачи исследования. Цель настоящей работы заключалась в комплексном исследовании состояния репродуктивной системы и уровней стероидных юрмонов у самок и самцов русского осетра (Acipenser gueldenstaedtii Brandt) на разных этапах полового цикла как в естественных условиях обитания (море, река), гак и в условиях осе грового рыбоводного завода (ОРЗ)

В соответствии с этой целью были поставлены следующие задачи. 1 ) провести гистологический анализ половых желез и анализ содержания стероидных гормонов - кортизола (К), тестостерона (Т), 11-кетотестостерона (KT), эстрадиола-17ß (Э) в сыворотке крови осетра с гонадами на разных стадиях зрелости в морской период жизни и в период анадромной миграции;

2) определить концен фации стероидных гормонов у осетра разных биологических групп на завершающем этапе созревания,

3) изучить влияние длительного периода выдерживания в искусственных условиях на сос гояние воспроизводительной системы осетра;

4) сравнить уровни стероидов в крови и гонадотропную активность гипофизов у самок осе фа после применения глицеринового гипофизарного препарата осетровых и сурфагона,

5) исследовать содержание К, Т, КТ и Э в сыворотке крови у самок осетра после гормональных воздействий при нормальном созревании и при нарушениях функции гонад.

Основные положения выносимые на защиту:

1. В процессе развития гонад и осуществления анадромной миграции происходит увеличение содержания стероидов в сыворотке крови осетра Наблюдаемая динамика Т, КТ и Э является зависимой от пола.

2. Изменения концентраций половых стероидов в сыворотке крови после гормональной стимуляции созревания происходят по единой схеме для преде 1авш елей разных биологических групп осетра- при овуляции снижаются уровни Т и Э, а при спермиации - Т и КТ.

3 У созревших и отдавших сперму самцов осетра после повторной индукции спермиации происходит дальнейшее снижение уровня Т в крови.

4 На уровни стероидных гормонов у самок осетра после овуляции влияет тип и метод введения гормонального препарата

5. Различные отклонения в репродуктивной фупкции осетра отражаются на исследованных гормональных показателях Поэтому определение уровней стероидных гормонов в крови может являться индикатором физиологического состояния особей.

Научная новизна. В настоящей работе на основании данных последних лет (19982002 гг) проведено комплексное исследование содержания стероидных гормонов (К, Т, КТ, Э) в сыворотке крови осетра методом твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА) с одновременным гистологическим анализом состояния половых желез

Получены новые данные об изменениях уровней К, Т, КТ и Э в сыворотке крови самок и самцов русского осетра в морской период жизни и в начале анадромной миграции в Волгу при различном состоянии половых желез Они свидетельствуют об участии этих гормонов в регуляции репродуктивного цикла осетровых

С помощью ИФА исследованы изменения уровней К и половых стероидов у производителей осетра при гормональных стимуляциях созревания на ОРЗ, при этом учитывались реакция на гормональную стимуляцию и качество получаемых половых клеток Особый интерес представляют результаты, полученные при работе с производителями осетра разных биологических групп, выявляющие у них общие принципы гормональной регуляции созревания половых желез

Теоретическое я практическое значение работы. Полученные данные на примере русского осетра позволяют лучше понять механизмы гормональной регуляции размножения осетровых Результаты работы с производителями осетра в условиях

рыбоводного завода помимо теоретического интереса, касающегося содержания стероидов в сыворотке крови на завершающих этапах созревания половых желез, имеют и практическое значение. Они могут быть использованы для усовершенствования методов разведения производителей осетровых в условиях рыбоводных заводов.

Апробация работы. По теме диссертации опубликовано 11 работ в отечественных и зарубежных изданиях.

Результаты исследований были представлены на 4-ой Всероссийской медико-биологической конференции молодых исследователей (С-Петербург, 2001), Научно-практической конференции «Проблемы и перспективы развития аквакультуры в России» (Адлер, 2001), 2-ой Международной научно-практической конференции «Аквакультура осетровых рыб: достижения и перспективы развития» (Астрахань, 2001), 6-ой Путинской школе- конференции «Биология - наука XXI века» (Пущино, 2002), 21-ой конференции европейских сравнительных эндокринологов (Бонн, 2002), 4-ой Российской научно-практической конференции «Актуальные вопросы эндокринологии» (Пермь, 2002), Международной конференции «Современные проблемы Каспия» (Астрахань, 2002), на 7-ой международной конференции по репродуктивной физиологии рыб (Япония, 2003).

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов, обсуждения, выводов и списка цитируемой литературы, содержащего 201 публикаций. Работа изложена на 127 страницах, содержит 25 таблиц, 11 рисунков и 19 фотографий.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Исследования проводились иа одном из представителей сем. осетровых (Acipenseridae) - русском осетре (Acipenser gueldenstaedtii Brandt) волго-каспийской популяции. Всего в работе было использовано 459 разновозрастных особей осетра (278 самок и 181 самцов), характеристики которых приведены в таблице 1.

Для проведения исследования на рыбах из естественных мест обитания в период 1998-2001 г с апреля по сентябрь проводился их отлов в северной части Каспийского моря и в низовьях р. Волги. На завершающих этапах созревания гонад осетра сбор материала производился в апреле-мае 2000-2002 гг. на Александровском ОРЗ (АОРЗ) в период работ по искусственному воспроизводству осетра.

На АОРЗ самок и самцов осетра выдерживали в бассейнах объемом 90 м3. Период выдерживания для ярового осетра составлял от 3 до 20 дней, озимого - от 6 до 11 месяцев. При наступлении нерестовых температур рыб переводили в бассейны объемом 15 м3, где осуществлялась i ормопальпая стимуляция созревания. Для индукции созревания рыбам

вводили глицериновый птофизарный препарат осетровых (ТТЛ) или сурфагон, представляющий собой синтетический суперактивный аналог гонадотропин-рилизинг гормона (Гн-РГ)

Таблица 1. Характеристика самок и самцов осетра, использованных при выполнении работы.

Место сбора материала Масса, кг Абсолютная длина, см Кол-во рыб (гистологический анализ) Кол-во рыб (ИФА)

самки самцы самки самцы самки самцы самки самцы

Море 14,5+1,3 9,5±0,57 164,1 ±37,7 116,7+2,23 52 26 99 63

Река 19,5±1,66 10,9+1,04 145,4±3,1 123,2±6,31 24 21 65 39

АОРЗ 20,8±0,б8 17,3±3,21 147,3+1,51 133,5±4,58 51 19 114 79

При обработке данных, собранных от осетра на завершающих этапах созревания учитывались: 1) наличие или отсутствие созревания после гормональной стимуляции, 2) качество зрелых половых клеток. Для оценки качества икры определяли процентное содержание нормально развивающихся эмбрионов (%НРЭ) на стадии гаструляции, а для оценки спермы производили тестирование по пяти-бальной шкале (Гинзбург, Детлаф, 1969) с определением времени подвижности спермиев после добавления воды.

Для оценки состояния половых желез у исследованных рыб производился сбор кусочков гонад, которые фиксировали в смеси Бучна, заливали в парафин и обрабатывали с применением стандартных гистологических методик (Роскин, Левинсон, 1957). При гистологическом исследовании оценивали морфофункциональное состояние тканей половых желез и степень возможных нарушений.

Стадии зрелости (СЗ) гонад определяли по шкале В 3. Трусова (1964). При оценке гонадотропной активности ацетонированных гипофизов рыб использовали тест-реакцию спермиации у самцов лягушки Rana temporaria L. (Травкин, Боев, 1969).

Сбор проб крови у исследуемых особей осуществляли из жаберной артерии в момент забоя. После осаждения эритроцитов отбирали пробы сыворотки, которые замораживали и хранили при температуре -18-20° С до проведения ИФА. Для ИФА использовали модифицированные к осетровым коммерческие наборы (Алкорбио, Санкт-Петербург). Определение оптической плотности образцов производилось на спектрофотометре E-Lisa МАТ 3000 (DRG, США).

Все полученные данные были обработаны статистически с помощью методов, применяемых в биоло! ических исследованиях (Лакин, 1990) Данные представлены в виде M±SE.

Автор выражает свою благодарность сотрудникам КаспНИРХа П.П. Гераскину, А.А Романову, Г.К. Шелухину за помощь в сборе материала в Каспийском море и в низовьях р. Волги, и сотрудникам Центральной лаборатории по воспроизводству рыбных запасов Т.Б Семенковой и JT.B. Баюновой за помощь в проведении ИФА

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ Анализ содержания стероидных гормонов в сыиоршке крови русского осетра на разпых СЗ гонад. Проведенное исследование содержания К в сыворотке крови у самок и самцов осетра в разные периоды жизни (море, река) показало, что наиболее низкие концентрации эюю гормона наблюдаююя у рыб с гонадами на II СЗ (рис.1) Их значения колебались в пределах 22-44 нг/мл У особей, в половых железах которых активно протекали процессы гаметогепеза (Ш-1У СЗ), отмечалось достоверное увеличение уровня К в 2-6 раз, при этом между самками и самцами не было существенных различий Сходная динамика уровня К в крови наблюдалась ранее на севрюге и белуге (Вагапшкоуа е1 а1, 1999, Семенковаи др., 2000)

Киртизол (нг/вл)

Сдмки С ямки II СЗ Г lll.IV

езг

Рис 1 Содержание кортизола (нг/мл) в сыворотке крови русского осетра в морской и речной периоды жизни Разлития достоверны при сравнении по СЗ гонад у самок при р<0,001 (***), у самцов при р<0,05 (*), р<0,01 (**), по месту вылова - самцы и самки с Ш-ГУ СЗГ при р<0,001 («<).

Несмотря на то, что Т и КТ являются основными андрогенами рыб, они выявляются и у самок, но в гораздо меньших концентрациях (Заки и др, 1994; К1те е1 а!., 1996; Ье Мепп ег а!, 1999; Баранникова и др , 2000) У самок осетра со II СЗ гонад, выловленных в море, концентрация Т в сыворотке крови была в 2 раза ниже, чем у самцов (р<0,05) В сыворотке крови у особей обоего пола, гонады которых находились на Ш-/У СЗ, наблюдалось достоверное повышение концентрации Т (рис 2)

Рис. 2. Содержание тестостерона (нг/мл) в сыворотке крови русского осетра в морской и речной периоды жизни. Различия достоверны: при сравнении по СЗ гонад в морской период: у самок при р<0,05 (*), у самцов при р<0,01(**), в реке у самок при р<0,01(**); между самками и самцами - со П СЗ гонад при р<0,05 (Л), с Ш-ГУ СЗ гонад при р<0,01 (лл); от места вылова у самок с Ш-ГУ СЗ гонад прир<0,01 («).

У рыб, мигрирующих в реку, наблюдалась сходная динамика уровня Т в крови. Увеличение концентрации Т при созревании яичников, по-видимому, может быть связано с тем, что этот гормон является предшественником эстрогенов. Учитывая, однако, что содержание Т у мигрирующих самок достоверно выше, чем у нагуливающихся (р<0,01), можно говорите о самостоятельной роли этого гормона в регуляции повышенного уровня метаболизма при анадромной миграции осетра.

С помощью ИФА было установлено, что содержание КТ в сыворотке крови русского осетра выявляется в значительно меньших количествах относительно Т, что согласуется с результатами, полученными ранее на севрюге (Баранникова и др., 2000). У самок осетра со II СЗ гонад, как в морской, так и в речной период определены одинаково низкие уровни КТ в крови (1,5-3 нг/мл). У самцов осетра его содержание колебалось от 4,4 до 29,3 нг/мл, что было достоверно выше (р<0,05), чем у самок (рис.3).

Рис. 3. Содержание 11-кетотестостерона (нг/мл) в сыворотке крови русского осетра в морской и речной периоды жизни. Различия достоверны: при сравнении по СЗ гонад у самок при р<0,01(**); между самками и самцами со II СЗ гонад при р<0,05 (Л), с Ш-ГУ СЗ гонад при р<0,001 (ллл); от места вылова у самцов II СЗ гонад при р<0,05 (<).

У рыб с гонадами на Щ-ГУ СЗ наблюдалось повышение уровня КТ, однако его концентрация составляла около 40% от уровня Т. Характер половых различий сохранялся. В динамике КТ прослеживалась

тенденция к повышенному содержанию этого гормона у мигрирующих рыб обоих полов относительно рыб в период нагула в море.

Динамика содержания Э в сыворотке крови русского осетра демонстрирует закономерные для представителей разных таксономических групп низших позвоночных изменения уровня этого гормона при созревании гонад (Postier et al., 1983, Баранникова и др , 1995; 2000). Концентрация Э в крови у самок осетра на всем протяжении гаметогенеза достоверно выше (р<0,001), чем у самцов (рис.4).

Рис. 4. Содержание эстрадиола (пкг/мл) в сыворотке крови русского осетра в морской и речной периоды жизни Различия достоверны при сравнении по СЗ гонад у самок при р<0,001 (***), между самками и самцами - при р<0,001 (ллл)

В период вителлогенеза содержание Э в сыворотке крови самок увеличивается в 20 раз (р<0,001), в го время как у самцов (Ш-ГУ СЗ гонад) этот показатель остается на прежнем низком уровне

Анализ полученных данных позволил придти к заключению, чю динамика стероидных гормонов в сыворотке крови русского осетра соответствует закономерностям, отмеченным на других представителях осетровых.

Анализ содержания стероидных гормонов в сыворотке крови русского осетра на завершающих этапах созревания. Одним из возможных подходов к изучению роли стероидных гормонов на завершающих этапах полового цикла осетровых является исследование гормональных характеристик у особей, используемых для воспроизводства на ОРЗ

Содержание стероидов в крови при овуляции или спермиашга. Как было показано рядом авторов, перед нерестом в крови рыб содержатся стероиды в высоких концентрациях При созревании происходит снижение содержания стероидов (Баранникова, 1984; Баранникова и др , 1989, 2000; Уагоп, 1995; Нои е( а1, 2001)

По нашим данным, у яровых и озимых самок осетра, созревших после гормональной стимуляции, уровни К, Т и Э были существенно ниже, чем в период анадромной миграции (10-15 нг/мл, 12-22 нг/мл и 0,11-0,35 нг/мл, соответственно). Содержание КТ в крови

Эстрадно л (пкг/мл)

□ Море ■ Река

•ш

СЭРЛКИ С^мки

II СЭГ III-ГЧУ

езг

Саглщ^ с^мцы 11СЗГ III-IV езг

оставалось на том же уровне (15-26 нг/мл) Наблюдаемое снижение концешраций гормонов отражает их необходимость интенсивного использования в осуществлении завершающих этапах гаметогенеза

У яровых и озимых самцов осетра, не подвергавшихся гормональному воздействию, содержание Т и КТ в сыворотке крови находилось на высоком уровне (100-130 нг/мл и 50150 нг/мл, соответственно) (рис 6) После спермиации у инъецированных самцов было отмечено снижение уровней обоих андрогенов (яровые - р< 0,05, озимые - р< 0,001).

В крови самцов, как показано на костистых рыбах (виг-иЬ & а1, 1997; Нои е1 а1, 2001), концентрация Т начинает увеличиваться за несколько месяцев до созревания, в то время как уровень КТ поднимается непосредственно перед спермиацией После спермиации отмечается существенное падение концентрации обоих андрогенов

После повторной гормональной стимуляции спермиации у самцов осетра происходило дальнейшее снижение уровня Т (рис 6А), а после трехкратного гормонального воздействия (которое приводило к полному истощению семенников) концентрация Т в крови снижалась более чем в 40 раз по сравнению с интактными рыбами (рис 6Б) Полученные данные свидетельствуют о важном значении Т и КТ в регуляции заключительного этапа сперматогенеза у самцов осетра.

260 200 150 100 50 I

А. Яровые самцы

Иитагтные 1гпермиация И спермиацгя

140 120 100 80 60 40 20 0

Б. Озимые самцы

«ч

Интактньм 1 сл«рмиация Ш спврмиация

Рис 6 Динамика содержания Т и КГ (нг/мл) у яровых (А) и озимых (Ь) самцов осетра после гормональной стимуляции созревания Отличия достоверны при р< 0,05 - *, при при р< 0,01 - **, при при р< 0,001 - ***.

У интактных самцов ярового и озимого осетра выявлены сравнительно низкие концентрации К в сыворотке крови (9-15 нг/мл) Уровни К при первой, второй или трегьей спермиации достоверно не отличались от ¿тих показателей у интактных особей и оставались в пределах физиологической нормы Вместе с тем, изменение уровня К может

рассматриваться как показатель стресса (Billard et al., 1981 ; Pickering et al., 1987; Pickering, 1989; Баюнова, Семенкова, 1999; Semenkova et al., 1999,2002).

Учитывая полученные данные, можно предположить, что многократное получение спермы от одних и тех же самцов не оказывает резкого отрицательного влияния на физиологическое состояние производителей.

Содержание кортизола и половых стероидов в сыворотке крови самок русского осетра после стимуляции созревания ГГП и сурфагоном. Традиционно для стимуляции созревания производителей осетровых на ОРЗ использовались гипофизарные инъекции (Гербильский, 1941) Однако в современном рыбоводстве ведутся разработки новых методик инъецирования и, в том числе с использованием иных гормональных препаратов, например, сурфагона (синтетического аналога ЛГ-РГ).

Исследование гонадотропной активности гипофизов самок осетра показало, что у созревших рыб активность гипофизов снижается по сравнению с интактными рыбами. В свою очередь, степень снижения активности находилась в прямой зависимости от применяемого для стимуляции гормонального препарата. Так, после применения сурфагона активность гипофизов была ниже в 2-3 раза по сравнению с введением ГГП. Наблюдаемые закономерности связаны с тем, что после введения ГГП созревание происходит в основном за счет экзогенного гонадотропного гормона (ГТГ), содержащегося в вводимом препарате, тогда как под воздействием Гн-РГ или его синтетического аналога происходит выведение ГТГ из собственного гипофиза рыб (Баранникова, Буковская, 1984; Баранникова и др., 1985).

Разные механизмы действия сурфагона и ГГП объясняют полученные нами различия в концентрациях стероидных гормонов у самок осетра, созревших под влиянием этих препаратов. После инъекций ГТП уровень К в сыворотке крови был достоверно ниже по сравнению с самками, созревшими от введения сурфагона (р<0,05).

В то же время у самок после инъекции ГГП, в некоторых случаях, содержание Т и Э было выше по сравнению с их уровнями после введением сурфагона Это может объясняться тем, что при использовании ГГП в организм рыб вводятся более высокие концентрации ГТГ, чем содержится в собственном гипофизе самок перед овуляцией

Несмотря на некоторые выявленные различия в уровнях стероидных гормонов между самками осетра, созревшими от введения ГТП или сурфагона, в обоих случаях после овуляции мы наблюдали довольно низкие концентрации исследованных гормонов. Это свидетельствует о том, что ГГП и сурфагон сходным образом влияют на гормональный статус самок осетра на завершающем этапе созревания.

Анализ содержания стероидных гормонов у осетра с нормальным состоянием половых клеток и при нарушениях репродуктивной функции гонад. Известно, что у осетровых рыб с гонадами, достигшими преднерестовой стадии зрелости (IV СЗ) введение разрешающих доз гонадотропных препаратов вызывает переход гонад в нерестовую стадию (V СЗ) Ответ на инъекцию (овуляция или спермиация) происходит у разных рыб в пределах одного опыта не одновременно и зависит в значительной степени от исходного состояния гонад. В наших экспериментах разрыв во времени наступления овуляции после введения ГТП иногда достигал 10 час

Анализ содержания стероидных гормонов у овулировавших самок осетра с разными сроками созревания не выявил достоверных различий между быстро- и медленно-созревающими особями Это позволяет предполагать, что пезависимо от периода созревания гормональная регуляция завершающего этапа проходит по единой схеме, а наблюдаемые различия в сроках овуляции могут объясняться индивидуальными физиологическими особенностями.

В то же время, отсутствие овуляции или спермиации после истечения ожидаемых сроков созревания может свидетельствовать о нарушениях в репродуктивной системе Выполненные нами исследования показали, что для несозревших самок и самцов осетра были характерны более высокие уровни Т по сравнению с созревшими рыбами.

При гистологическом анализе яичников у части несозревших самок были обнаружены признаки нарушения развития овариальных фолликулов на разных стадиях резорбции (ранняя - резорбция желтка, поздняя - скопления пигмента).

Ранее у осетровых с нарушениями функции половых желез было установлено более низкое содержание Т по сравнению с особями с нормальным состоянием гонад. Кроме того, отмечалось повышение концентрации К в крови у рыб, в яичниках которых присутствовали овариальные фолликулы на ранних фазах резорбции (Баранникова и др , 1997; 2002). Концентрации К в крови у несозревших после гормональной инъекции самок осетра, независимо от фазы резорбции, достоверно не различались и находились на том же уровне (10-15 нг/мл), что и у нормально созревших рыб.

У самок, не ответивших на гормональную стимуляцию из-за ранней резорбции оошггов, содержание Т в сыворотке крови было таким же низким, как у созревших особей, и находилось в пределах от 15 до 24 нг/мл Самки с ооцитами в фазе поздней резорбции подразделялись на две труппы - с низкими (-7 нг/мл) и высокими (>100 нг/мл) концентрациями Т в крови, что, вероятно, было связано с индивидуальными физиологическими особенностями.

Уровень КТ у всех несозревших самок осетра (в том числе и с разной стадией атрезии овариальных фолликулов) существенно не отличался от этого показателя у нормально созревших особей. Это является еще одним свидетельством того, что этот андроген, по-видимому, не играет существенной роли в регуляции завершающих этапов созревания ооцитов.

Рядом авторов предпринимались попытки связать уровни половых гормонов в крови у самок рыб с жизнестойкостью получаемых от них эмбрионов при искусственном воспроизводстве. У некоторых видов была выявлена положительная корреляция между концентрацией половых стероидов в крови самок и выживаемостью эмбрионов (Бурлаков и др., 1991; Подлесных, Сахапов, 1993).

Нами была установлена тенденция к снижению выживаемости эмбрионов (до О %НРЭ) у самок осетра с пониженным содержанием Т В отношении К такой закономерности установить не удалось.

Исследование на самцах осетра показало, что у рыб с «плохой» спермой (3-4 балла, подвижность спермиев 1-5 мин) уровни К в крови были достоверно ниже, чем у самцов, давших «отличную» сперму (5 баллов, подвижность спермиев более 10 мин). В группе самцов с «плохой» спермой наблюдались большие индивидуальные колебания по уровню Т. Было установлено, что после введения стимулирующего препарата у самцов осетровых рыб происходило повышение концентраций андрогенов в крови, сменяющееся резким снижением при завершении созревания (Ьешепкоуа е! а!., 2002).

Таким образом, на основании приведенных данных можно заключить, что уровни стероидных гормонов взаимосвязаны с различными процессами нарушений на завершающих этапах гаметогенеза.

Гормональный статус осетра разных биологических групп, используемых в рыбоводстве В современных условиях для рыбоводных целей используются производители осетра разных биологических групп. Сроки резервирования на ОРЗ производителей осетра варьируют в зависимости от принадлежности к той или иной биологической группе. Так, яровой осетр с близкими к зрелости гонадами заходит в реку весной непосредственно перед нерестом, поэтому после вылова выдерживается на заводе до начала гормональной стимуляции не более 1 месяца В отличие от него озимый осетр, проводящий в реке до нереста 6-12 месяцев, отлавливается летом (озимый осетр летнего хода) или осенью (озимый осетр осеннего хода) предыдущего года, и нуждается в длительных сроках выдерживания.

При исследованиях содержания стероидных гормонов у рыб, принадлежащих к разным биологическим группам, наблюдалось пониженное содержание К в крови у самок

Я самцов озимого осетра по сравнению с яровыми рыбами Для интактных самцов озимого осетра после длительного содержания в условиях рыбоводных заводов были характерны пониженные уровни К по сравнению с яровыми самцами (р<0,001) У самок озимого осетра летнего хода, созревших после введения ГГП, уровень К был ниже по сравнению с яровыми самками (р<0,05), несмотря на то, что дозы вводимого гормонального препарата и условия эксперимента были одинаковыми. Та же закономерность наблюдалась при сравнении этого показателя у озимой и яровой белуги после созревания (Семенкова, Баюнова, 1998).

В свою очередь, у интактных самцов озимого осетра наблюдалось и достоверно более низкое содержание КТ (р<0,05) в сыворотке крови по сравнению с яровыми самцами. После спермиации подобные различия между озимыми и яровыми самцами были отмечены в отношении Т (р<0,05).

Полученные результаты позволяют предположить, что наблюдаемые различия в содержании стероидных гормонов у осетров различных биологических групп возникли под влиянием выдерживания рыб озимой формы в искусственных условиях

Несмотря на влияние длительного выдерживания на гормональный статус озимого осетра летнего хода, в целом уровни исследованных стероидов в сыворотке крови остаются в пределах физиологической нормы Это подтверждается тем, что ооциты у озимых самок весной достигают дефинитивных размеров, которые не отличаются от таковых у яровых рыб Таким образом, можно считать, что даже при прерывании естественного хода анадромной миграции на ее ранних этапах (у озимого осетра летнего хода) у значительной части особей возможно нормальное функционирование органов воспроизводительной системы, что позволяет использовать этих рыб для искусственного воспроизводства после выдерживания на ОРЗ в течение 10-11 месяцев

ВЫВОДЫ

1. В сыворотке крови русского осетра выявляются половые различия в содержании тестостерона, 11-кетотестостерона и эстрадиола, начиная с ранних стадий зрелости гонад (IIСЗ).

2 У самок и самцов русского осетра развитие гонад и анадромная миграция сопровождается увеличением уровня кортизола и половых стероидов в сыворотке крови.

3 После созревания русского осетра под воздействием ГТП или сурфагона снижаются уровни половых стероидов' тесюстерона и эстрадиола у самок, тестостерона и 11-кетотестостерона у самцов Для самок, созревших после введения

ГГП, характерны более низкие уровни кортизола по сравнению с самками, созревшими от сурфагона

4 Г'онадотропная активность гипофизов самок русского осетра, созревших после введения сурфагона в среднем в 2 раза ниже активности гипофизов самок, созревших от ГТП.

5 У одних и тех же самцов русского осетра возможна неоднократная индукция спермиации с интервалом в 3-5 дней Каждое последующее созревание сопровождается снижением концентрации тестостерона в сыворотке крови. После третьей гормональной стимуляции уровень тестостерона понижается примерно в 40 раз по сравнению с исходными значениями

6 Изменение уровней стероидных гормонов в сыворотке крови русского осе фа разных биологических групп на завершающем этапе созревания идут по единой схеме.

7 Уровни кортизола и половых стероидов в сыворотке крови русского осетра на заключительных этапах созревания зависят от продолжительности их выдерживания в искусственных условиях до гормональной стимуляции.

8. Нарушения функции гонад отражаются на уровнях стероидных гормонов в сыворотке крови русского осетра.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1 Учитывая влияние длительного выдерживания на гормональный статус производителей озимого осетра (осеннего и летнего периодов хода) следует оптимизировать условия их резервирования на рыбоводных заводах

2 Введение сурфагона не приводит к нарушениям гормонально! о етагуса созревающих особей осетра, что позволяет использовать этот препарат для искусственной стимуляции овуляции или спермиации.

3. При заготовке гипофизов от самок русского осетра, созревших под влиянием сурфагона, необходимо учитывать резкое снижение их гонадотропной активности. 4 При дефиците производителей русского осетра на рыбоводных заводах ношожна неоднократная (2-3 раза) гормональная стимуляция спермиации у одних и тех же самцов через 3-5 дней

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ 1 А.Б. Груслова Содержание половых стероидных гормонов в сыворотке крови русского осетра (Аярегаег gueldeпstaedti Вг ) на различных этапах созревания гонад 4-ая

Всероссийская медико-биологическая конференция молодых исследователей, С-Петербург, 2001, с.77-79.

2 И А. Баранникова, Е Н Артюхин, А.А. Герасимов, А.Б. Груслова, И.В. Тренклер. Внутрипопуляционная дифференциация у осетровых и возможности ее использования в формировании популяций при искусственном воспроизводстве Научно-практич. конференция «Проблемы и перспективы развития аквакультуры в России», Адлер, 24-27 сент , 2001, с. 13-14

3 А.Б. Груслова, И В Тренклер Возможности повторного использования самцов русского осетра (Acipenser gueldenstaedti Br) для рыбоводных целей. 2-я Международ научно-практич конф «Аквакультура осетровых рыб- достижения и перспективы развития», Астрахань, 21-22 нояб., 2001, с 22-23

4 А.Б. Груслова, Л В. Баюнова. Содержание половых стероидных гормонов в сыворотке крови русского осетра (Acipenser gueldenstaedti Br) при различном состоянии гонад б-я Пущинская школа-конф «Биология - наука XXI века», 2002, с. 71-72.

5 А.Б. Груслова, JI В. Баюнова Содержание половых стероидов в сыворотке крови самок русскою осетра (Acipenser gueldenstaedti Br) различных биологических групп на завершающих этапах созревания. 4-ая Российская науч -практич конф. «Актуальные вопросы эндокринологии», Пермь, 20-22 мая, 2002, с. 239

6 I A. Barannikova, L.V. Bayunova, А.В. Gruslova, Т.В Semenkova. Serum androgens m male beluga and russian sturgeon (Acipensendae) at final maturation, 21-st Conference of European Comparative Endocrinologists, Bonn, 2002, p. 69

7 А.Б. Груслова, И В Тренклер Влияние повторной гормональной стимуляции на уровни кортизола и тестостерона в сыворотке крови самцов русского осетра (Acipenser gueldenstaedti Br) Международ конф «Современные проблемы Каспия», Астрахань, ноябрь 2002, с. 87-89

8 IA Barannikova, LV Bayunova, А.В. Gruslova, ТВ Semenkova «Steroids in sturgeon's migration regulation», 7th Internat. Symp. On Reproductive Physiology of Fish, Japan, 2003, p. 69.

9 L V Bayunova, IA Barannikova, V P Dyubin, A.B. Gruslova, T В Semenkova and I V Trenkler «Sex steroids concentrations in sturgeon (Acipenser gueldenstaedti Br) serum and coelomic fluid at final maturation», 7th Internat. Symp. On Reproductive Physiology of Fish, Japan, 2003, p. 82.

10 А.Б. Груслова, Jl В Баюнова, И В Тренклер Содержание стероидных гормонов в сыворотке крови самок русского oceipa (Acipenser gueldenstaedti Br) после гормональных

воздействий при нормальном созревании ооцитов и при нарушении функции гонад. Рос. физиолог, журнал им. Сеченова, 2003, т. 89, № 11, с. 1388-1395.

11. И.А. Баранникова, Л.В. Баюнова, Т.Б. Семенкова, АЛ. Груслова. Стероиды в регуляции миграции у рыб. Рос. физиолог, журнал им. Сеченова, 2003, т. 89, № 11, с. 1380-1387.

Лицензия ЛР № 020593 от 7.08.97 Налоговая льгота — Общероссийский классификатор продукции ОК 005-93, т. 2; 953004 научная и производственная литература

Подписано в печать ОЛ Я0О9 Объем в п л Тираж 100 экз_Заказ № 94

Отпечатано с готового оригинал-макета, предоставленного автором, в типографии Издательства СПбГПУ 195251, Санкт-Петербург, Политехническая ул, 29.

Отпечатано на ризографе 1Ш-2000 РР Поставщик оборудования — фирма "Р-ПРИНТ" Телефон: (812) 110-65-09 Факс:(812)315-23-04

РНБ Русский фонд

2007-4 6446

О 5 MAP 2004

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Груслова, Александра Борисовна

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Нейрогормональная регуляция репродуктивной функции у рыб

1.2. Стероидогенная ткань гонад и половые стероидные гормоны рыб

1.3. Интерреналовая железа и функция кортизола у рыб

1.4. Нарушение функций половых желез у рыб

1.5. Биология размножения русского осетра

1.6. Гормональная регуляция созревания гонад у рыб

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1. Характеристика материала

2.2. Методы исследований

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Результаты исследований русского осетра в различные периоды жизни

3.1.1. Краткая характеристика состояния половых желез русского осетра в морской и речной периоды жизни

3.1.2. Содержание кортизола и половых стероидных гормонов в сыворотке крови русского осетра в морской период жизни

3.1.3. Содержание кортизола и половых стероидных гормонов в сыворотке крови русского осетра в период миграции

3.2. Результаты исследований русского осетра па завершающих этапах созревания гонад

3.2.1. Сравнительное исследование осетров разных биологических групп

3.2.1.1. Размеры ооцитов у самок русского осетра разных биологических групп

3.2.1.2.Гистологический анализ гипофизов самок озимого осетра после длительного периода выдерживания

3.2.1.3. Уровни стероидных гормонов в сыворотке крови русского осетра разных биологических групп на завершающем этапе созревания гонад

3.2.1.4. Оценка гонадотропной активности гипофизов у созревших самок русского осетра разных биологических групп

3.2.2. Уровни кортизола и тестостерона'в сыворотке крови самцов русского осетра после повторных гормональных стимуляций спермиации

3.2.3. Содержание кортизола и половых стероидов в сыворотке крови самок русского осетра с разным периодом созревания после гормональной стимуляции

3.2.4. Результаты исследования самок русского осетра, созревших после стимуляции гипофизарным препаратом осетровых и сурфагоном

3.2.4.1.Содержание кортизола и половых стероидов в сыворотке крови самок русского осетра после стимуляции овуляции гипофизарным препаратом осетровых и сурфагоном

3.2.4.2. Биотестирование гипофизов самок русского осетра после стимуляции овуляции гипофизарным препаратом осетровых и сурфагоном

3.2.5. Уровни стероидных гормонов при нарушении процессов созревания гонад русского осетра

3.2.5.1. Содержание кортизола и половых стероидных гормонов у самок русского осетра с разным ответом па гормональную стимуляцию

3.2.5.2. Содержание кортизола и андрогенов у самцов русского осетра с разным ответом на гормональную стимуляцию созревания

3.2.5.3. Содержание стероидных гормонов в сыворотке крови самок русского осетра после гормональных воздействий при нормальном созревании ооцитов и на разных фазах атрезии овариальных фолликулов

4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

4.1. Стероидные гормоны в регуляции гаметогенеза у русского осетра в разные периоды жизни

4.1.1. Кортизол

4.1.2. Тестостерон

4.1.3. 11-кетотестостерон

4.1.4. Эстрадно л

4.1.5. Связь уровней гормонов в крови с отсутствием ответа на гормональную стимуляцию

4.1.6. Связь уровней гормонов с ухудшением качества зрелых половых клеток

4.1.7. Связь уровней стероидных гормонов с атрезией овариальных фолликулов 96 4.2. Возможности применения результатов исследования для рыбоводных целей

4.2.1. Гормональный статус производителей осетра различных биологических групп в связи с их воспроизводством

4.2.2. Зависимость гормонального статуса самок осетра после овуляции от типа гормонального препарата

4.2.3. Влияние повторной гормональной стимуляции самцов осетра на уровни кортизола и тестостерона в сыворотке крови

ВЫВОДЫ

Введение Диссертация по биологии, на тему "Стероидные гормоны в осуществлении репродуктивной функции русского осетра (Acipenser gueldenstaedtii Br.) в природе и в искусственных условиях"

Одной из основных проблем физиологии позвоночных животных является выяснение механизмов гормонального контроля половых циклов. У низших позвоночных, в том числе и у рыб, по сравнению с млекопитающими существует ряд особенностей в регуляции репродуктивной функции (Баранникова, 1981; Peter, 1986; Nagahama, 1987; King, Millar, 1990a, b; Баранникова и др., 1991a, Баранникова, Дюбин, 1992; Kirne, 1993). Исследование этого вопроса у рыб представляет особый интерес, так как у иих значительно шире разнообразие в способах размножения, чем у всех других позвоночных. Существует множество видов с различной экологией и разными типами жизненного цикла. Даже в пределах популяций одного вида, как, например, у осетровых (Acipenseridae) или лососевых (Salmonidae) могут образовываться внутрипопуляционные биологические группы, отличающиеся состоянием половых желез в начале нерестовой миграции (Берг, 1948; Гербильский, 1951; 1957, Баранникова, 1966, 1975а).

Известно, что развитие и созревание половых желез рыб происходит на основе комплексного взаимодействия внешних и внутренних факторов. Одним из возможных подходов к изучению механизмов регуляции созревания гонад является исследование содержания гормонов в сыворотке крови рыб в зависимости от сезона, репродуктивного цикла, а также с учетом экологических особенностей исследуемого вида. В частности, представляет интерес изучение динамики половых стероидных гормонов в крови, которые являются важным звеном в эндокринной регуляции размножения. Они участвуют во всех этапах репродуктивного цикла, выполняя ряд функций для обеспечения нормального хода гаметогенеза, развития половых признаков, подготовки и осуществления нерестовой миграции, полового и родительского поведения (Баранникова, 19756; Fostier et al., 1983; Никитин и др., 1991; Kirne, 1993; Yaron, 1995).

Наиболее интенсивно в этом направлении ведутся работы на представителях костистых рыб (Tclcostei), в то время как осетровым (Acipenseridae), которые относятся к более древней группе - хрящевым ганоидам (Chondrostei), ne уделено достаточного внимания. Изучение особенностей гормональной регуляции размножения осетровых представляет большой интерес с точки зрения эволюционной физиологии.

Одним из представителей осетровых является русский осетр (Acipenser gueldcnstaedtii Brandt). Этот вид, как и большинство рыб из этой группы, относится к проходным рыбам, совершающим миграции из морей в реки для размножения. Начало созревания гонад проходит в морской период жизни, а окончательное дозревание - по мере продвижения по реке и на нерестилищах.

В пределах ряда популяций выделяют две основные биологические группы -яровую и озимую, которые мигрируют в реки в различные сезоны и с разным состоянием воспроизводительной системы (Берг, 1948; Гербильский, 1951, 1957; Баранникова, 1966, 1975а). В этой связи особое значение для понимания гормональной регуляции гаметогенеза у осетровых приобретает сравнительное исследование уровней стероидных гормонов в крови рыб одного вида, относящихся к разным биологическим группам.

В настоящее время поддержание численности осетровых в Волго-Каспийском бассейне в значительной мере осуществляется за счет работы волжских рыбоводных заводов, работа которых включает в себя получение половых продуктов от половозрелых особей, с последующим их искусственным оплодотворением и выращиванием личинок.

Однако все представители осетровых обычно не созревают в неволе без дополнительных стимулирующих воздействий. Поэтому для индукции созревания гонад рыб и получения от них жизнестойкого потомства в условиях рыбоводного завода применяют гормональные инъекции. Традиционно для этих целей использовали препараты ацетоиированных гипофизов осетровых рыб (Гербильский, 1941; Боев, Артюхин, 1978; Баранникова и др., 1983). Однако, из-за уменьшения биологических ресурсов для получения гипофизов осетровых ведется поиск новых гормональных препаратов. В частности предполагается использовать синтетические аналоги гормонов, регулирующих синтез и секрецию гонадогропинов гипофиза (Баранникова и др., 1983, 1985а, 1989а; Гончаров, 1984, 1990, 1991; Colombo et al., 1988). В связи с этим, данные об уровнях стероидов в крови у рыб, созревающих после применения разных гормональных препаратов, могут быть использованы при разработке новых научно-обоснованных методов стимуляции гаметогенеза и созревания.

До недавнего времени, основным объектом волжского осетроводства являлся яровой осетр, мигрирующий в близком к зрелости состоянии. И хотя еще в 50-х годах была показана принципиальная возможность созревания озимого осетра в искусственных условиях (Гербильский, 1951; Баранникова, 1954; Казанский, 1962), эта группа рыб практически не использовалась, так как до начала работ по получению зрелых половых продуктов требовала длительного выдерживания (от 6 до 11 месяцев). В настоящее же время в связи с резким снижением численности всей популяции русского осетра его воспроизводство на рыбоводных заводах основывается па озимом осетре различных периодов хода. Эти формы осетра (озимый осетр осеннего хода и озимый осетр летнего хода), в отличие от ярового, имеют другие биологические особенности. Например, озимый осетр летнего хода, заходит в реки с гонадами, далекими от зрелости, и завершение гаметогенеза проходит в период миграции. При длительном содержании озимых рыб до созревания в условиях рыбоводных заводов прерывается естественный ход их анадромной миграции. Это приводит к различиям в физиологическом состоянии особей из разных биологических групп. Благодаря данным о влиянии длительного содержания в искусственных условиях на физиологическое состояние рыб станет возможным успешное разведение разных форм осетра и, соответственно, сохранение генетического разнообразия воспроизводимой популяции.

Одной из проблем в изучении гормональной регуляции гаметогенеза осетровых является то, что в последнее время, среди осетровых все чаще встречаются особи с различными нарушениями обмена веществ и процессов созревания гонад (Романов, Шевелева, 1992; Моисеева и др., 1997; Рубан, 1999; Саепко, 2000; Баранникова и др., 2002 и др.). В данном случае характеристика уровней стероидных гормонов в крови может служить одним из показателей, отражающим их физиологическое состояние. Это обусловлено тем, что содержание стероидов в крови может изменяться не только в зависимости от стадии созревания гонад (Баранникова, 19756; Баранникова и др., 2000а), но и под действием внешних стрессорных факторов (Donaldson, 1981; Epple et al., 1982; Barton, Peter, 1987;

Pickcring et al., 1987; Pickering, 1989; Дюбин, 1989; Баюнова, Семенкова, 1999; Шаляпина, Ордян, 2000).

Проведение комплексного анализа концентраций стероидных гормонов в крови у осетровых разных внутрипопуляционных биологических групп, в различные сезоны, на разных этапах созревания гонад, а также при нарушениях нормального развития половых желез, позволит лучше понять механизмы гормональной регуляции размножения осетровых и будет способствовать усовершенствованию методов их разведения.

В связи с вышеизложенным, цель настоящей работы заключалась в исследовании состояния репродуктивной системы и содержания стероидных гормонов в сыворотке крови у самок и самцов русского осетра на разных этапах полового цикла как в естественных условиях обитания (море, река), так и в условиях рыбоводного завода.

В соответствии с этой целью были поставлены следующие задачи:

1. Провести гистологический анализ половых желез и анализ уровней стероидных гормонов (кортизола, тестостерона, 11-кетотестостерона, эстрадиола-1713) в сыворотке крови осетра с гонадами на разных стадиях зрелости в морской период жизни и в период анадромной миграции.

2. Определить концентрации стероидных гормонов у осетра разных биологических групп на завершающем этапе созревания.

3. Изучить влияние длительного периода выдерживания в искусственных условиях на состояние воспроизводительной системы осетра.

4. Сравнить уровни стероидов в крови и гонадотропную активность гипофизов у самок осетра после применения глицеринового гипофизарного препарата осетровых и сурфагоиа.

5. Исследовать содержание кортизола и половых стероидов в сыворотке крови у самок осетра после гормональных воздействий при нормальном созревании ооцитов и при нарушениях функции гонад.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Груслова, Александра Борисовна

104 ВЫВОДЫ

В сыворотке крови русского осетра выявляются половые различия в содержании тестостерона, 11-кетотестостерона и эстрадиола, начиная с ранних стадий зрелости гонад (II СЗ).

У самок и самцов русского осетра развитие гопад и анадромная миграция сопровождается увеличением уровня кортизола и половых стероидов в сыворотке крови.

После созревания русского осетра под воздействием ГГП или сурфагона снижаются уровни половых стероидов: тестостерона и эстрадиола у самок, тестостерона и 11-кетотестостсропа у самцов. Для самок, созревших после введения ГГП, характерны более низкие уровни кортизола по сравнению с самками, созревшими от сурфагона.

Гонадотропная активность гипофизов самок русского осетра, созревших после введения сурфагона в среднем в 2 раза ниже активности гипофизов самок, созревших от ГГП.

У одних и тех же самцов русского осетра возможна неоднократная индукция спермиации с интервалом в 3-5 дней. Каждое последующее созревание сопровождается снижением концентрации тестостерона в сыворотке крови. После третьей гормональной стимуляции уровень тестостерона понижается примерно в 40 раз по сравнению с исходными значениями. Изменение уровней стероидных гормонов в сыворотке крови русского осетра разных биологических групп на завершающем этапе созревания идут по единой схеме.

Уровни кортизола и половых стероидов в сыворотке крови русского осетра на заключительных этапах созревания зависят от продолжительности их выдерживания в искусственных условиях до гормональной стимуляции. Нарушения функции гонад отражаются на уровнях стероидных гормонов в сыворотке крови русского осетра.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Учитывая влияние длительного выдерживания на гормональный статус производителей озимого осетра (осеннего и летнего периодов хода) следует оптимизировать условия их резервирования на рыбоводных заводах.

Введение сурфагона не приводит к нарушениям гормонального статуса созревающих особей осетра, что позволяет использовать этот препарат для искусственной стимуляции овуляции или спермиации.

При заготовке гипофизов от самок русского осетра, созревших под влиянием сурфагона, необходимо учитывать резкое снижение их гонадотропной активности.

При дефиците производителей русского осе-фа на рыбоводных заводах возможна неоднократная (2-3 раза) гормональная стимуляция спермиации у одних и тех же самцов через 3-5 дней.

Выполнить исследования по теме диссертации было бы невозможно без материла, собранного в Каспийском море и низовьях р. Волги сотрудниками КаспНИРХа П.П. Гераскиным, A.A. Романовым, Г.К. Шелухиным. Большое содействие в работе оказали сотрудники Центральной лаборатории по воспроизводству рыбных запасов JI.B. Баюнова, Т.Б. Семенкова, И.В. Тренклер. Всем этим коллегам я выражаю свою искреннюю признательность.

Глубокую благодарность выражаю заведующему кафедрой общей физиологии, академику Александру Даниловичу Ноздрачеву и моему научному руководителю профессору Ирине Алексеевне Баранниковой.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Груслова, Александра Борисовна, Санкт-Петербург

1. Баранникова И. А. Биологическая дифференциация стада волго-каспийского осетра // Ученые записки ЛГУ. 1957. Вып. 44. № 228. Т. 1. С. 54-71.

2. Баранникова И.А. Изучение реакции популяции осетровых на нарушение условий миграций и нереста // Тр. ЦНИОРХ. 1967. Т. 1. С. 53-64.

3. Баранникова И.А. Новые данные о реакции популяции осетровых на нарушение условий миграции и размножения //Тр. ЦНИОРХ. 1970. Т. 12. С. 12-19.

4. Баранникова И.А. Идентификация кортикотропных клеток в гипофизе осетровых и гипофизарно-интерреналовые взаимосвязи у этих рыб // «ДАН СССР». 1974. Т. 217. №5. С. 218-1220.

5. Баранникова И.А. Функциональные основы миграций рыб. Л.: Наука, 1975а. С. 210.

6. Баранникова И.А. Гонадотропныс и половые гормоны и их роль в регуляции функции воспроизводительной системы у пойкилотермных позвоночных.-Тр. ВНИРО. 19756. Т. 111. С. 34-54.

7. Баранникова И.А. Гипофизарно-овариальные взаимосвязи у осетровых при нормальном половом цикле и при его нарушениях // Тр. ВНИРО. 1975в. Т. 111. С. 86-96.

8. Баранникова И.А. Гормональная регуляция размножения у осетровых // Тр. ВНИРО. 1978а. Т. 130. С. 6-17.

9. Баранникова И.А Гистофизиологические основы применения повторных и однократных гипофизарных инъекций в осетроводстве // Тр. ВНИРО. 19786. Т. 130. С. 85-92.

10. Баранникова И.А. Механизмы гормональной регуляции репродуктивной функции низших позвоночных. В кн.: Механизмы гормональных регуляций и роль обратных связей в явлениях развития и гомеостаза. М.: Наука. 1981. С. 186202.

11. И. Баранникова И.А. Гормональная регуляция репродуктивной функции у рыб с различной экологией // Биологические основы рыбоводства. М.: Наука. 1984. С. 178-218.

12. Баранникова И.А., Баюнова J1.B., Дюбин В.П., Саенко И.И., Семенкова Т.Б. Содержание кортизола в сыворотке крови и функция интеррсналовой железы в жизненном цикле осетра Acipenser gucldenstaedti // Вопр. ихтиологии. 20006. Т. 40. №3. С. 379-388.

13. Баранникова И.А., Баюнова J1.B., Саенко И.И. Динамика половых стероидных гормонов у осетра Acipenser gueldenstaedtii при различном состоянии гонад в начале анадромной миграции в Волгу // Вопр. ихтилогии. 1997. Т. 37. Вып. 3. С. 400-406.

14. Баранникова И.А., Баюнова JI.B., Семенкова Т.Б., Груслова. А.Б. Стероиды в регуляции миграции у рыб // Рос. физиолог, журнал им. Сеченова, 2003.Т. 89. № U.C. 1380-1387.

15. Баранникова И.А., Боев A.A., Аршавская C.B., Дюбин В.П. Особенности гормональной регуляции репродуктивной функции миноги Lampetra fluviatilis в завершающей период полового цикла // Вопр. ихтиологии. 1995. Т. 35. Вып. 4. С. 525-532.

16. Баранникова И.А., Боев A.A., Буковская О.С., Ефимова H.A. Гормональная регуляция репродуктивной функции у осетровых и биотехника стимуляции созревания производителей в осетроводстве // Биологические основы осетроводства. М.: Наука. 1983. С. 22-41.

17. Баранникова И.А., Боев A.A., Буковская О.С., Ефимова H.A. Особенности гонадогроппой функции гипофиза осетра и севрюги после воздействия люлиберином // VI Всес. Конф. экол. физиол. и биохимии рыб. Вильнюс, 1985а. С. 358-369.

18. Баранникова И.А., Боев A.A., Дюбин В.П., Травкин Б.Г. Стимуляция созревания ряда костистых рыб с помощью синтетических гормональных препаратов // Вестн. Ленингр. ун-та. 19916. Сер. 3. № 3. С. 53-60.

19. Баранникова H.A., Буковская О.С. К вопросу о наличии гонадотропин-рилиз-ингибирующего фактора (ГРИФ) в гипоталамусе осетровых // Экологические и морфофункциональные основы адаптации гидробионтов. JI. 1990а. С. 19-20.

20. Баранникова H.A., Буковская О.С. Влияние люлиберина на состояние гонадотропоцитов гипофиза и динамику содержания гонадотропного гормона в сыворотке крови севрюги (Acipenser stellatus Pallas) // Вопр. ихтиологии. 19906. Т. 30. № i.e. 126-136.

21. Баранникова И.А., Буковская О.С., Боев A.A., Дюбин В.П. Гормональная регуляция репродуктивной функции рыб (теоретические и практические аспекты) // Сб. Репродуктивная физиология, Л.: Наука. 1991а. С. 147- 190.

22. Баранникова И.А., Васильева Е.В., Тренклер И.В., Цепелован П.Г. Иитсрреналовая железа в жизненном цикле проходных осетровых (сем. Acipenseridae) // Вопр. ихтиологии. 1978. Т. 18. Вып. 4. С. 719-734

23. Баранникова H.A., Дюбин В.П. Становление регуляции гонадотропной функции гипофиза в эволюции позвоночных // Сравнительная биология развития. 1992. Т. 23. №3. С. 260-267.

24. Баранникова H.A., Дюбин В.П., Баюнова JI.B., Семенкова Т.Б. Стероиды в регуляции репродуктивной функции рыб // Рос. физиологич. журнал им. И.М.Сеченова. 2000а. Т. 86. № 8. С. 968-978.

25. Баранникова И.А., Поленов AJI. Эколого-гистофизиологический анализ преоптико-гипофизарной нейросекреторной системы у осетровых // Докл. АН СССР. 1961. Т 133. №8. С. 906-915.

26. Баюнова JI.B., Семенкова Т.Б. Влияние динамической нагрузки на содержание кортизола, половых стероидов, белка, глюкозы и холестерина в сыворотке крови у самок севрюги (Acipenser stellatus Pallas) // Вестник СпбУ. 1999. Сер. 3. Вып. 3. № 17. С.44-52.

27. Берг Л.С. Рыбы пресных вол СССР и сопредельных стран. М.-Л., Изд. АН СССР. 1948. Изд. 4-е. Т.1. С. 466.

28. Боев A.A., Артюхин E.H. Нахождение оптимальных доз тестировнного прапарата ацетонированных гипофизов для стимуляции созревания производителей осетра на Нижней Волге//Труды ВНИРО. 1978. Т. 130. С.93-97

29. Буковская О.С. Радиоиммунологическое определение содержания гонадотропина и половых гормонов в сыворотке крови севрюги на некоторых этапах полового цикла // Рациональные основы ведения осетрового хозяйства. Волгоград. 1981а. С. 31-32.

30. Буковская О.С. Содержание гонадотропного и половых гормонов в4сыворотке крови русского осетра на некоторых этапах полового цикла // Тез. совет. «Рациональные основы ведения осетрового хозяйства». Волгоград. 19816. С. 33-34.

31. Буковская О.С., Баюнова Л.В. Содержание половых гормонов в сыворотке крови русского осетра в морской и речной периоды жизненного цикла // Осетровое хоз-во водоемов СССР. Астрахань. 1989. С. 39-40.

32. Буковская О.С., Фадеева Т.А. Некоторые гормональные показатели у русского осетра при созревании половых желез в морской период жизни // Тез. докл. VII Всесоюз. конф. «Экологическая физиология и биохимия рыб». Ярославль. 1989. Т. 1. С. 59-61.

33. Бурлаков А.Б. Половая специфичность гипофизарных гонадотропинов у икромечущих рыб//М.: Из-во МГУ. 1997а. 208 С.

34. Бурлаков А. Б., Белова Н. В., Годович П. Л., Цибезов В.В. Роль эндокринной системы в формировании качества икры белого толстолобика Hypophthalmchthys Molotrix при искусственном воспроизводстве // Вопр. ихтиологии. 1991. Т. 31. Вып. 5. С. 839-850.

35. Бурлаков А.Б., Федоров К.Е. Становление гипофизарно-гонадальных взаимосвязей у рыб на ранних этапах онтогенеза// В сб.: Экологические проблемы онтогенеза рыб. Изд.: МГУ. 2001. С. 73-82.

36. Бурцев И.А. Некоторые данные по гаметогепезу гибридов осетровых рыб // Тр. ЦНИОРХ. 1967. Т. 1. С. 252 257.

37. Ванякина Е.Д. Генетика определения пола и некоторые вопросы гормональной регуляции пола у костистых рыб // Генетика, селекция и гибридизация рыб. М. 1969. С. 11-29.

38. Васильева Е.В. Ультраструктура стероидогенных клеток в яичнике русского осетра у рыб до и после созревания под воздействие люлиберина // Цитология. 1988. Т. 30. № 9. С. 1063-1066.

39. Гарлов П.Е., Поленов A.JI. Функциональная цитоморфология прсоптико-гипофизарной пейросскреторной системы рыб// Цитология. 1996. Т. 38. С. 275-299.

40. Гербильский H.J1. Метод гипофизарных инъекций и его роль в рыбоводстве // В сб.: Методы гипофизарных инъекций и его роль в воспроизводстве рыбных запасов. Изд.: ЛГУ. 1941. С. 5-35.

41. Гербильский Н.Л. Внутривидовые биологические группы осетровых и их воспроизводство в низовьях рек с зарегулированным стоком // Рыбное хозяйство. 1951. Т. 27. №4. С. 24-27.

42. Гербильский Н.Л. Внутривидовая биологическая дифференциация и ее значение для вида в мире рыб // Вестник ЛГУ. 1957. №21. .

43. Гербильский Н.Л. Теория биологического прогресса осетровых и ее применение в практике осетрового хозяйства // Ученые записки ЛГУ. 1962. №311. Вып. 48. Ч. 11.

44. Гербильский Н.Л. Элементы теории и биотехники управления ареалом осетровых//Тр. ЦНИОРХ. 1967. Т. 1.

45. Гинзбург A.C., Детлаф Т.Л. Развитие осетровых рыб. М.: Наука. 1969. С 134.

46. Гончаров Б.Ф. К вопросу о закономерностях возникновения чувствительности гонад к гонадотропным гормонам гипофиза // В сб.: Современное состояние метода гипофизарпых инъекций. Астрахань. ЦНИОРХ. 1969. С.39-44.

47. Гончаров Б.Ф., Кузнецов A.A., Бурзава-Жерар Э. Анализ гетерогенности гонадотропного гормона гипофиза севрюги // Биохимия. 1980. Т. 45. С. 455-462.

48. Гончаров Б.Ф., Кузнецов A.A. Различия в биологическом действии изоформ гонадотропного гормона севрюги (Acipenser stellatus Pall.) и идентичность их спектра в гипофизах самцов и самок // Докл. АН СССР. 1981. Т. 258. С. 243-246.

49. Гончаров Б.Ф. Синтетический аналог люлиберина новый перспективный стимулятор созревания половых продуктов осетровых рыб // Докл. АН СССР. 1984. Т. 276. № 4. С. 1002-1006.

50. Гончаров Б.Ф. Новый способ получения зрелых половых продуктов от производителей осетровых рыб // В сб.: Фундаментальные науки народному хозяйству. М. Наука. 1990. С. 297-300.

51. Гончаров Б.Ф., Игумнова JI.B., Полупан И.С., Савельева Э.А. Сравнение действия синтетического аналога гонадотропин-рилизинг гормона и гипофизов осетровых рыб на созревание половых продуктов у осетровых рыб // Онтогенез. 1991. Т. 22. №5. С. 514-524.

52. Груслова А.Б., Баюнова JI.B. Содержание половых стероидных гормонов в сыворотке крови русского осетра (Acipenser gueldenstaedti Br.) при различном состоянии гонад // 6-я Пущинская школа-конф. «Биология наука XXI века». 2002. С. 71-72.

53. Детлаф Т.А. Межклеточные влияния в процессе созревания ооцитов осетровых рыб // В кн.: Межклеточные взаимодействия в дифференцировке и росте. 1970. С. 241-243.

54. Дюбин В.П. Гистохимическое исследование стероидогенной ткани гонад русского осетра // Цитология. 1986. Т. 28. № 4. С. 448-451.

55. Дюбии В.П. Физиологические реакции рыб на воздействие стрессовых факторов//Ярославль. 1989. С. 103-110.

56. Егорова А.Е., Кузик В.В. Люлиберинергическая иннервация нейрогипофиза осетровых рыб // Экологические и морфофункциональные основы адаптации гидробионтов. СПб. 2000. С. 47-48.

57. Заки М.И., Эль-Гарабави М.М., Камиль С.С. Сезонные изменения гонадотропного и половых стероидных гормонов в сыворотке крови лобана Mugil cephalus в лагуне Эль-Бардавиль Средиземного моря // Вопр. ихтиологии. 1994. Т. 34. Вып. 5. С. 176-180.

58. Зенкевич Г.А., Лаце З.М. Выделение и характеристика препарата гоиадотропного гормона из гипофизов осетровых рыб // Вопр. ихтиолог. 1979. Т. 19. №6. С. 883-889.

59. Зенкевич Г.А., Сланке В.П., Лаце З.М., Боев A.A. Препарат гипофизарного гонадотропного гормона сазана (Cyprinus carpio L.) // Изв. AH ЛатвССР. 1980. № 1 (390). С. 100-103.

60. Игумнова Е.В., Гончаров Б.Ф. Получение зрелых половых продуктов от самок белуги с помощью синтетического аналога люлибсрина // Тез. Всесоюз. совещ. по осетровым. Астрахань. 1986. С. 111.

61. Казанский Б.Н. Экспериментальный анализ сезонности размножения осетровых волги в связи с явлением внутривидовой биологической дифференциации //Ученые записки ЛГУ. 1962. Вып. 48. №311. Т. 2. С. 19-45.

62. Казанский Б.Н., Фекдов Ю.А., Подушка С.Б., Молодцов А.Н. Экспресс-метод определения степени зрелости гонад у производителей осетровых // Рыбное хоз-во. 1978. №2. С. 24-27.

63. Касимов Р.Ю., Рустамова Ш.А. Влияние нефти и нефтепродуктов на осетровых и других рыб//Тр. ЦНИОРХ. 1971. Т. 3. С. 191-195.

64. Кирстукас И.П., Зенкевич Г.А. Изучение структурно-функциональной организации гонадотропных гормонов рыб // Изв. АН ЛатвССР. 1987. № 7 (480). С. 61-73.

65. Коваленко Р.И. Эпифиз// Сб.: Нейроэндокринология. Спб. 1993. Т.1. С.300-324.

66. Лакин Г.Ф. Биометрия // М. Высш. шк. 1990.

67. Лукин A.B. Основные черты экологии осетровых в Средней Волге // Тр. Общ. естествоисп. при Казанском ун. УП. 1949. Ч. 2. Вып. 3-4. С. 39-143.

68. Максимович A.A. Гормональная регуляция углеводного обмена у тихоокеанских лососей. Л.: Наука. 1990. С. 224.

69. Моисеева Е.Б., Золотницкий А.П. Характеристика типов клеток адеиогипофиза и анализ состояния гонадотропных элементов в течение репродуктивного цикла у черноморской камбалы калкана (Scophthalmus maeoticus Pall.)//Тр. ВНИРО. 1978. Т. 130. С. 25-33.

70. Моисеева Е.Б., Федоров С.И., Парфенова H.A. О нарушениях строения половых желез у самок осетровых (Acipenseridae) Азовского моря // Вопр. ихтиологии. 1997. Т.37. № 5. С. 660-666.

71. Никитин А.И., Воробьева O.A., Китаева Э.М. Эндокринная регуляция фолликуло- и гамстогенеза // Сб. Репродуктивная физиология. JI.: Наука. 1991. С. 80-117.

72. Павлов А. В., Распопов В. М. Анализ нерестовых популяций осетра и белуги в р. Волге в 1970 г // Мат. объединенной науч. сессии Центральн. НИИ осетрового рыб. хоз-ва и АЗНИИРХ. Ч. 1. Астрахань. Изд. ЦНИРОХ. 1971. С. 8688.

73. Персов Г.М. Дифференцировка пола. Изд. ЛГУ. 1975. С. 148.

74. Подлесных A.B., Сахапов 3. И. Влияние плотности посадки на эндокринные изменения производителей нерки и выживаемость их потомства // Биол. моря. 1993. № 3. С. 68-76.

75. Поленов А.Л. Гипоталамический контроль процессов размножения у рыб // Тр. ВНИРО. 1975. Т. 111. С. 54-69.

76. Поленов А.Л. Эволюция гипоталамо-гипофизарного нейроэндокринного комплекса // Руководство по физиологии. Эволюционная физиология. Л: Наука. 1983. Ч. 2. С.53-109.

77. Поленов А.Л. Морфо-функциональная организация нейросекреторных клеток гипоталамуса// Нейроэндокринология. 1993. СПб. С. 31-70.

78. Розен В.Б. Основы эндокринологии. М. Высш. шк. 1984. С. 158.

79. Романов A.A. Нарушения морфогенеза половых желез, половых клеток, печени осетровых Каспия в морской период жизни // Экологические и морфофункциональные основы адаптации гидробионтов. Л. 1990. С. 83-85.

80. Романов A.A., Шевелева H.H. Нарушение гонадогенеза у каспийских осетровых (Acipenseridae) // Вопр. ихтиологии. 1992. Т. 35. Вып. 5. С. 176-180.

81. Ромейс Б. Микроскопическая техника. М.: иностранная литература. 1953. С. 719.

82. Роскин Г.И., Левинсон Л.Е. Микроскопическая техника. М.: Сов. наука. 1957. С. 467.

83. Рубан Г.И. Сибирский осетр Acipenser baerii Brandt (структура вида и экология). М. 1999. С. 235.

84. Савченко О.Н., Данилова O.A. Центральные механизмы регуляции репродукции // Сб. Репродуктивная физиология. Л.: Наука. 1991. С.5-41.

85. Саенко H.H. Анализ состояния воспроизводительной системы русского осетра (Acipenser gueldenstaedtii Вг.) в начале анадромной миграции // Тез. конф. «Осегровые па рубеже XXI века» КаспНИРХ. Астрахань. 2000. С. 191-193.

86. Семспкова Т.Б., Баранникова H.A., Баюнова Л.В., Дюбин В.П. Динамика содержания стероидных гормонов в сыворотке крови осетровых в репродуктивном цикле // Межд. конферен. «Осетровые на рубеже XXI в.». Астрахань. 2000. С. 193194.

87. Травкин Б.Г., Боев A.A. Опыт определения гонадогропной активности гипофизов различных видов рыб с помощью тест-объектов // В сб.: Современное состояние метода гипофизарных инъекций. Астрахань. 1969. С. 71-77.

88. Трусов В.З. Некоторые особенности созревания и шкала зрелости половых желез осетра//Труды ВНИРО. 1964. Т. 56. С. 69-78.

89. Фалеева Т.Н. Нарушения полового цикла проходных и туводных рыб при нарушении условий миграции и нсрсста в связи с задачей их рыбоводного освоения // Отчет центр, лаб. по воспроизводству рыбных запасов. 1965а. С. 76-88.

90. Фалеева Т.И. Анализ атрезии ооцитов у рыб в связи с адаптивным значением этого явления // Вопр. ихтиологии. 19656. Т. 5. Вып. 3. С. 455-470.

91. Фалеева Т.И. Некоторые данные о природе так называемой перебитой икры в осетроводстве//Тр. ЦНИОРХ. 1971. Т. 2. С. 132-136.

92. Христофоров O.JI. Изменения в состоянии гонад и гипофиза сайки (Boreogadus saida Lep.), связанные со старением // Тр. ВНИРО. 1975. Т. 111. С. 160172.

93. Христофоров O.JI. Функциональные основы старения и естественной смертности (на примере сайки Boreogadus saida (Lep.)) // Изв. ВНИОРХ. 1978. Т. 137. С. 120-131.

94. Чернышева М.П. Гормоны животных. Введение в физиологическую эндокринологию. Уч. пособ. СПб. 1995. С. 296.

95. Шаляпина В.Г., Орданян Н.Э. О многообразии фенотипических модификаций индивидуальной реактивности к стрессу // Экологические и морфофункциональные основы адаптации гидробионтов. СПб. 2000. С.21-22.

96. Шевелева H.H. О нарушении гаметогенеза каспийских осетровых в современных условиях // Экологические и морфофункциональные основы адаптации гидробионтов. JI. 1990. С. 107- 108.

97. Barannikova I.A. Sex steroids in the serum of Caspian sturgeons and their specific cytosol binding in brain and gonads during the migratory cycle // J. Appl. Ichtyol. 1999. V. 15. P. 193-195.

98. Barannikova I.A., Bayunova L.V., Gruslova A.B., Semenkova T.B. Serum androgens in male beluga and russian sturgeon (Acipcnseridae) at final maturation //21-st Conference of European Comparative Endocrinologists. Bonn. 2002. P. 69.

99. Barannikova I.A., Bayunova L.V., Gruslova A.B., Semenkova T.B. «Steroids in sturgeon's migration regulation» // 7th Internat. Symp. On Reproductive Physiology of Fish. Japan. 2003. P. 69.

100. Barannikovva I.A., Bukovvskaya O.S., Efimova N.A. Hormonal control of reproductive function of sturgeons (Chondrostei) // Proc. Intern. Symp. Repr. Phys. Fish. Wageningen. 1982. P. 49.

101. Barton B.A., Peter R.E. Plasma Cortisol stress response in fingerling rainbow trout, Salmo gaidneri Richardson, to various transport conditions, anaesthesia, and cold chock // J. Fish Biol. 1987. V. 20. P. 39-51.

102. Bayunova L., Barannikova I., Semenkova T. Sturgeon stress reactions in aquaculture // J. Appl. Ichtiol. 2002. V.18. P. 397-404.

103. Billard R. Testicular feed back on the hypothalamo-pituitary axis in rainbow trout (Salmo gairdneri R.) // Ann. Biol. Anim., biochim., biophys. 1978. V. 18 (4). N 8. P. 813-818.

104. Billard R., Bry C., Gillet C. Stress, environment and reproduction in teleost fish // Stress and Fish. 1981. P. 185-208.

105. Borg B. Androgens in teleost fishcs//Comp. Biochem. Physiol. 1994. V. 109C. N3. P. 219-245.

106. Bukovskaya O.S., Lambert J.G.D., Kime D.E. In vitro steroidogenesis by gonads of the Russian sturgeon, Acipcnser gueldenstaedti Brandt // Fish Physiol. Biochem. 1997. V. 16. P. 345-353.

107. Burzawa-Gerard E. Chemical data on pituitary gonadotropins and their implication to evolution // Can. J. Fish Aquat. Sci. 1982. V. 39. P. 80-91.

108. Chang I.P., Peter R.E. Effects of dopamine on gonadotropin release in female goldfish, Carassius auratus //Neuroendocrinology. 1983. V. 36. P. 351-357.

109. Colombo L., Belvedere P., Barbaro A., Francescon A., Simontacci C., Arlati G. Use of spawning in fish // Boll. Zool. 1988. V.55. P.16.

110. Consten D., Bogerd J., Komen H., Lambert J.G.D., Goos H.J.Th. Long-term Cortisol treatment inhibits pubertal development in male common carp, Cyprinus carpio L. // Biology of reprodaction. 2001. V. 64. P. 1063-1071.

111. Consten D., Lambert J.G.D., Komen H., Goos H.J.Th. Corticosteroids affect the testicular androgen production in male common carp (Cyprinus carpio L.) // Biology of reprodaction. 2002. V. 66. P. 106-111.

112. Copeland P.A., Thomas P. Control of gonadotropin release in the Atlantik Croaker (Micropogonias undulatus): Evidence for lack of dopaminergic inhibition // Gen. and Compar. Endocrinol. 1989. V. 74. P. 474-483.

113. Cavaco J.E.B., Vilrokx C., Trudeau V.L., Schulz R.W., Goos H.J.Th. Sex steroids and the initiation of puberty in male African catfish (Clarias garicpinus) // J. Physiol. 1998. V. 44. P. 1793-1802.

114. Crim L.W., Evans D.M. Influence of testosterone and/or luteinizing hormone releasing hormone analogue on precocions sexual development in the juvenile rainbow trout//Biol. Reprod. 1983. V. 29. №1. P. 137-142.

115. Cuisset B., Fostier A., Williot P., Benneteu-Pelissero C., Le Menn F. Occurence and in vitro biosynthesis of 11-ketotestosterone in Siberian sturgeon, Aeipenser baeri Brandt maturing females // Fish Physiol. Biochem. 1995. V. 14. P. 313322.

116. De Leeuw R. Regulation of gonadotropin secretion in the african catfish, Clarias gariepinus (Burchell)//Ph. D. Thesis. Utrecht. 1985. P. 192.

117. Donaldson E.M. The pituitary interrenal axis as an indicator of stress in fish // Stress and Fish. London. 1981. P. 11-48.

118. Doroshev S.I., Lutes P.B. Preliminaty data on the induction of ovulation in white sturgeon (Aeipenser transmontanus Richardson) // Aquaculture. 1984. V. 30. №3. P. 221-227.

119. Epple A., Katz Y., Dashw L. Stress effects on circulating steroids and catecholamines in fishes // Gen. Comp. Endocrinol. 1982. V. 99. P. 382-387.

120. Fontaine M. Hormonal control of reproduction in aguaculture // Fish. Res. Board Canada. 1976. V. 66. №4. P. 422-439.

121. Fostier A., Jalabert B., BiMard R. et al. The gonadal steroids // Fish physiology/ Eds. W. S. Hoar, D. J. Randall, E. M. Donalson. New York: Acad. Press. 1983. V. 9. Pt A. P. 277-373.

122. Fradinger E.A., Von Schalburg K., Schcrwood N.M. An evolutionary perspective on GnRH in Fish // Reproductive Physiology of fish. Bergen. 1999. P. 35-38.

123. Geraskin P.P. Sturgeon (Acipenseridae) responses to new ccological conditions in the Caspian sea // Proc. Intern. Symp. On sturgeons. M.: VNIRO. 1995. P. 173-178.

124. Hoar W.S. Reproduction // Fish Physiology. Academic Press. New York. 1969. V3. P. 1-72.

125. Horvath L., Peteri A., Kouril J. Successfal sterlet, Acipenser ruthenus L., propagation with synthetic LH-RH hormone // Aquaculture and fish manag. 1986. V. 17. №2. P. 113-116.

126. Hou Y., Han X., Suzuki Y. Annual changes in plasma levels of Cortisol and sex steroid hormones in male rainbow trout, Oncorhynchus mykiss // Chinese J. of Oceanology and Limnology. 2001. V. 19. N.3. P. 217-221.

127. Idler D.R., Macnab H.C. The biosynthesis of 11-ketotestosterone and lip-hydroxy-testosterone by atlantic salmon tissues in vitro // Can. J. Biochem. 1967. V 45. P. 581-589.

128. Idler D.R., Nog T.B. Teleost gonadotropins isolation. Biochemistry and function // Fish physiology/ Eds. W. S. Hoar, D. J. Randall, E. M. Donaldson. New York: Acad. Press. 1983. V. 9. Pt A. P. 187-222.

129. Kanamori A., Kagawa II., Nagahama J. Gonadotropin rcccptors in the postovulatory ovary of amago salmon (Oncorhynchus Orhodurus) // Gen. Comp. Endocrinol. 1987. V. 66. № 2. P. 210-217.

130. Kime D.E. "Classical" and "non-classical" reproductive steroids in fish // Reviews in Fish Biology and Fisheries. 1993. V. 3. P. 160-180.

131. Kime D.E, Lambert J.G.W.E., Bukovskaya O. Steroid syntcsis by gonads of the Russian sturgeon, Acipenser gueldenstaedti // Ann. D'Endocrinol. 1996. V. 57. Suppl. 4. P.22.

132. King J., Millar R.P. Genealogy of the Gn-Rh family // Progress in Comparative Endocrinology. 1990a. Willey-Liss. Inc. P. 54-59.

133. King J., Millar R.P. Comparative aspects of lutcinizig hormone releasing hormone structure and function in vertebrate phylogeny // Endocrinology. 1990b. V. 106. №3. P. 707-717.

134. Le Menn F., Pelissero-Benettou C., Williot P., Cuisset-Davail B. Female Siberian sturgeon, Acipenser baeri: an interesting model for reproductive physiology studies in fish//J. Appl. Ichtiol. 1999. V. 15. N 4-5. P. 315-316.

135. Liley N.R., Stacey N.E. Hormones, pheromones and reproductive begavior in fish // Fish Physiology, Academic Press, Eds. W.S. Hoar, D.J. Randall, E.M. Donaldson, New York. 1983. V. 9. Pt B. P. 1-65.

136. Linares-Casenave J., Van Eencnnaam, Doroshcv S.I. Ultrastructural and histological observations on temperature-induced follicular ovarian atresia in the white sturgeon //J. Appl. Ichthyol. 2002. V. 18. P. 382-390.

137. Lou S.W., Aida K., Hanyu I. Et al. Endocrine profiles in the females of a twice annually spawning strain of rainbow trout // Gen. Comp. Endocrinol. 1986. V. 64. P. 212219.

138. Lutes P.B. Oocyte maturation in white sturgeon, Acipenser transmontanus: some mechanisms and applications // Environ. Biol. Fish. 1985. V. 14. P. 87-92.

139. Nagahama Y. The functional morphology of teleost gonads. Fish physiology/ Eds W. S. Hoar, D. J. Randall, E. M. Donaldson // New York: Acad. Press. 1983. V. 9. Pt A. P. 223-277.

140. Nagahama Y. Gonadotropin action on gametogenesis and steroidogenesis in teleost gonads // Zool. Sci. 1987. V. 4. №2. P. 209-222.

141. Naito N., Hyodo S., Okumoto N. et al. Differential production and regulation of gonadotropins (GTH I and GTH II) in the pituitary gland of rainbow trout, Oneorhynchus mykiss during ovarian development// Cell. Tissue Res. 1991. V. 266. N 4. P. 457-467.

142. Nozaki M., Naito N., Swanson P. et al. Salmonid pituitary gonadotropins. I. Distinct cellular distribution of two gonadotropins, GTH I and GTH II// Gen. Compar. Endocrinol. 1990a. V. 77. N 3. P. 348-357.

143. Nozaki M., Naito N., Swanson P. et al. Salmonid pituitary gonadotropins. II. Ontogeny of GTH I and GTH II cells in the rainbouw trout (Salmo gaidneri irideus)// Gen. Compar. Endocrinol. 1990b. V. 77. N 3. P. 358-367.

144. Olivereau M., Chambolle P. Ultrastructure of gonadotrophs in the eel following oestradiol treatment // Proc. Indian nath. Sci. Acad. 1979. Ser. B, V. 45. №5. P. 478-482.

145. Oztan N. The effects of gonadotropic and steroid hormones on the gonads of sterile hybrid fishes // Rav. Fac. Sci. Uni. Istanbul B. 1960. V. 25. P. 27-56.

146. Peter R.E. The brain and neurohormones in teleost reproduction // Fish physiology. Eds. W.S. Hoar, D.J. Randall, E.M. Donaldson. New York: Acad. Press. 1983. V. 9. PtA. P. 97-135.

147. Peter R.E. Structure activity studies on gonadotropin-releasing hormone in teleosts, amphibians, reptiles and mammals // Progress in clinica; and biological research. New York. 1986. V. 205. P. 75-95.

148. Peter R.E., Chang J.P., Nahornlak C.S. et al. Interactions of catecholamines and GnRH in regulation of gonadotropin secretion in telcost fish // Res. Prog. Horm. Res. 1986. V. 42. P. 513-548.

149. Peter R.E., Crim L.W. Reproductive endocrinology of fishes: gonadal cycles and gonadotropin in teleosts // Ann. Rev. Phusiol. 1979. V. 41. P. 323-335.

150. Peter R.E., Habibi H.R., Chang J.P., Nahorniak C.S., Yu K.L., Huang Y.P., Marchant T.A. Action of Gonadotropin-realeasing Hormone (Gn-RH) in the goldfish // Progress in Comparative Endocrinology. 1990. Wilcy-Liss. Inc. P. 393-398.

151. Peter R.E., Trudeu V.L., Sloley B.D., Peng C., Nahorniak C.S. Actions of catecholamines peptides and sex steroids in regulation of gonadotropin II in the goldfish // Reproductive physiology of fish. Norwich. July. 1991. P. 30-34.

152. Pickering A.D. Hasbundry and stress in fish // Satellite symposium on applications of comparative endocrinology to fish culture. Almuecar-Granada. 22-23 May. 1989. P. 157-167.

153. Pickering A.D., Pottinger T.G., Carrgher I.F., Sumpter J.P. The effects of acute and chronic stress on the levels of reproductive hormones in the plasma of mature brown trout Salmo trutta L // Gen. Comp. Endocrinol. 1987. V. 68. P. 249-259.

154. Scott A.P., Baynes S.M. Plasma levels of sex steroids in relation to ovulation and spermiation in rainbrow trout (Salmo gairdneri)// Proceedings of the International Symp. Reprod. Physiol, of Fish. Wageningen. 1982. P. 103-106.

155. Semenkova T., Barannikova I., Bayunova L., Dyubin V, Kolmakov N. Sex steroids profiles in Stellate sturgeon famales and males at final maturation under hormonal treatment//4 th Inter. Sympos. on Sturgeon. Oshkosh. Wisconsin. USA. 2001.

156. Semenkova T.B., Bayunova L.V., Boev A.A., Dyubin V.P. Stress influence on serum Cortisol levels in sturgeon aquaculture // J. Appl. Ichtiol. 1999. V. 15. N 4/5. P. 270-272.

157. Sherwood N.M., Parker D.B., Mc Roiy J.E., Lesheid D.W. Molecular evolution of growth hormone-releasing hormone and gonadotropin-relcasing hormone // Fish Physiolgy. 1994. V. 13. P. 3-66.

158. Sumter J.P., Follet B.K., Dodd J.M. Studies on the purification of gonadotropin from dogfish (Scyliorhinus canicula L.) pituitary gland // Ann. biol. anim., biochim., biophys. 1978. V. 18(4). P. 787-791.

159. Suzuki Y., Otaka N., Sato S. et al. Reptrodaction related immunoglobulin changes in rainbow trout // Fish Physiol. Biochem. 1997. V. 17. P. 415-421.

160. Tanck M.W.T., Booms G.H.R., Eding E.H., Wenderlaar Bonga S.E., Komcn J. Gold shocks: a stressor for common carp // J. Fish Biol. 2000. V. 54. P. 881 -894.

161. Van der Kraak G., Suzuki K., Peter R.E., Itoh H. and Kawauchi H. Properties of common carp gonadotropin I and gonadotropin II // Gen. comp. Endoer. 1992. V. 85. P. 217-229.

162. Wcndelaar Bonga S.E. The stress response in fish. Physiol. Rev. 1997. V. 77. P. 591-625.

163. Yaron Z. Endocrine control of gametogencsis and spawning induction in the carp // Aquaculture. 1995. V. 129. P. 49-73.