Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Состояние энкефалинергетической системы мозга крыс при воздействии этанола

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Беляев, Николай Андреевич

Сокращения.

Введение. б

Часть I. Обзор литературы.

ГЛАВА 1# Энкефалины: современные представления о биосинтезе, высвобождении, механизме действия и функциях.

ГЛАВА 2. Ферментная инактивация энкефалинов.

ГЛАВА 3. Энкефалинергическая система мозга и этанол. 4

3.1. Некоторые аспекты действия этанола на ВДС. 4

3.2. Фармакологические доказательства вовлечения опиоидных пептидов в патогенез алкоголизма.

3.3. Нарушение этанолом компонентов ШП.

Чаоть 2. Экспериментальная часть.

ГЛАВА I. Материалы и методы исследования.

1.1. Экспериментальные животные и уоловия проведения опыта.

1.2. Подготовка биологического материала для исследований.

1.3. Радиоизотопные методы исследования.

1.4. Другие методы.

ГЛАВА 2. Исследование активности энкефалиназы А в неочищенном мембранном материале мозга крыс.

ГЛАВА 3. Ферментная инактивация энкефалинов и ее роль в механизме действия этанола на ШП.

3.1. Активность энкефалиназы А у крыо о различным предпочтением к этанолу и воде.

3.2. Влияние острого и хронического введения этанола на активность энкефалиназы А мозга крыс.

3.3. Исследование механизма активации энке-фалияазы А этанолом.

3.4. Исследование способности конденоатов ацетальдегида с энкефалинами модулировать активность энкефалиназы А. Ю

ГЛАВА 4. Влияние этанола на энкефалинергическую опиоидную сиотему мозга крыс.

4.1.Содержание энкефалинов и связывание с опиоидными рецепторами мозга крыс при остром введении этанола.

4.2. Нейрохимические показатели состояния энкефалинергической одиоидной системы мозга при экспериментальном алкоголизме у крыс.

Часть 3. Обсузвдение результатов.

Выводы.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Состояние энкефалинергетической системы мозга крыс при воздействии этанола"

В числе'первостепенных задач, стоящих перед современной медициной, одно из главных мест занимает проблема разработки эффективных способов терапии алкоголизма на основании знания патогенеза этого заболевания (Г.В.Морозов, 1976, 1981).

Согласно существующим представлениям ведущая роль в развитии алкоголизма принадлежит расстройотвам функций мозга, вызванным нарушениями функциональной активности, нейромедиаторных систем, из которых особо выделяют натехоламиновые системы мозга (Г.В.Морозов, И.П.Анохина, 1983). Однако, низкая эффективность существующих средств и методов лечения алкоголизма (Ю.В. Буров, 1982) делает необходимым дальнейшее изучение патогенеза этого заболевания.

Предпосылки для развития исследований в этом направлении были созданы после отбытия опиоидных пептидов мозга - нового класса биологически активных соединений, способных выполнять нейромедиаторную, нейрогуморальную и нейромодуляторную функции (И.П.Ашмарин, 1982, Miller ,1981). В настоящее время можно полагать установленным существование в нервной системе позвоночных животных и человека опиоидных систем, включающих в себя специфические опиоидные рецепторы, эндогенные лиганды опиоидных рецепторов (энкефалины и эндорфины), ферменты их синтеза и катаболизма и характеризующиеся морфофункциональным единством своих частей (И.П.Анохина и соавт., 1981). Опиоидные системы регул!фуют нейрогуморалышй ответ, ряд вегетативных функций и способны влиять на эмоциональную сферу человека. Полагают, что такой широкий спектр физиологического действия эндогенных опиоидных пептидов является следствием их модулирующего влияния на функционирование других нейромедиаторных систем Atwen, Kuhar, 1983).

В связи с этим было высказано предположение о том, что этанол оказывает свое действие на аминергические структуры мозга посреде твом влияния на опиоидные системы (И.П.Анохина и соавт., 1982)♦ Эту точку зрения поддерживают, в частности, данные, свидетельствующие о вовлечении последних в патогенез алкоголизма, Так, показано, что стимуляция опиоидных рецепторов экзогенным мет-энкефалином и морфином снижает добровольное потребление этанола животными (Но, Rossi , 1982). Наоборот, потребление этанола возрастает в состоянии опиатной аботинеяции и при введении антагонистов опиоидных рецепторов животным с этаяоль-ной зависимостью (И.П.Анохина и соавт., 1982, ,1980). Обнаружено, также, что налоксон (антагонист опиоидных рецепторовПредотвращает снижение болевой чувствительности, возникающее при введении этанола, а этанол снимает гиперальгезию, вызванную на-локсоном фавв et al. t 1978, Boada et al. ,1981). Имеются сведения об однонаправленном влиянии этанола и энкефалинов на обмен кальция и ц-АМФ в мозге (И.А.Сытинский,1980, Blum efc al., 1977, west, Miller, 1983). В пользу участия опиоидных систем мозга в патогенезе алкоголизма свидетельствуют и данные о возможности взаимодействия ТШХ алкалоидов с опиоидными рецепторами мозга (Л.Ф.Панченко и соавт., 1982).

Таким образом, становится все более очевидным, что воздействие на опиоидные системы мозга с целью устранения влечения к этанолу, является одним из перспективных направлений поиска средств и методов лечения алкоголизма. К сожалению, эти исследования в значительной степени сдерживаются отсутствием конкретных сведений о биохимических механизмах влияния этанола на энкефалинергическую опиоидную систему мозга, в том чиоле на синтез, высвобождение и катаболизм энкефалинов. Возможно, это связано о тем, что до настоящего времени не проведено комплексного исследования основных нейрохимических парамезров энкефалинерги-ческой системы на одной модели животных в условиях воздействия этанола •

В соответствии со всем вышеизложенным целью настоящей работы явилось изучение влияния этанола на эякефалинергическую ней-ропередачу в эксперименте на крысах. В качестве критериев функциональной активности ЭНП было изучено связывание %-морфина, и %-ДАДЛЭ с опиоидными рецепторами, содержание мет- и лей-эн-кефалина и активность энкефалиназы А в стриатуме и среднем мозге (включая гипоталамус) животных.

- 9 -ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Беляев, Николай Андреевич

ВЫВОДЫ

1. У животных,иоходно предпочитающих этанол, в сравнении с животными полностью его отвергающими, активность энкефалиназы А среднего мозга и гипоталамуса достоверно понижена, что может быть одной из причин различия алкогольной мотивации у крыс этих двух групп.

2. Этанол, при его введении крысам, приводит к активации энкефалиназы А. Обнаруженное увеличение активности фермента не опосредовано продуктами метаболизма этанола или функционированием опиоидных рецепторов, а связано с прямым действием этанола на фермент.

3. Величина активации энкефалиназы А при хронической алкогольной интоксикации значительно ниже, чем при однократном введении этанола интактным животным. Снижение активирующего действия этанола на фермент свидетельствует о его адаптации к длительному воздействию этого соединения.

4. Модификация энкефалинов путем конденсирования с аце-тальдегидом in vitro вызывает снижение сродства этих пептидов к активному центру энкефалиназы А (в 1,5 раза для ацеталь-дегид-лей-энкефалина и в 3,5 раза для ацетальдегид-мет-энкефа-лина). Конденсаты ацетальдегида с энкефалинами способны инги-бировать катализируемую этим ферментом деградацию нативных нейропептидов.

5. Однократное введение этанола интактным крысам приводит к увеличению функциональной активности энкефалинергичеокой ней-ропередачи в среднем мозге (включая гипоталамус) и стриатуме, заключающемуся в увеличении поступления энкефалинов к опиоид-ным рецепторам <5-типа и в повышении скорости катаболизма этих пептидов энкефалиназой А.

6. При хроническом введении этанола крысам, по сравнению с его однократным введением интактным животным, наблюдается тенденция к нормализации специфического связывания %-(Д-ала2, с

Д-лей°)- энкефалина, активности энкефалиназы А и содержания энкефалинов в исследованных отделах мозга, что свидетельствует о возникновении толерантности энкефалинергической нейропереда-чи к этанолу,

7. Прекращение потребления этанола крысами после хронической (8 месяцев) алкоголизации вызывает уменьшение поступления энкефалинов in situ и снижение скорости их утилизации энкефалиназой А в среднем мозге (включая гипоталамус) в стриатуме, которое сопровождается накоплением этих пептидов в стриатуме.

- 140

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Беляев, Николай Андреевич, Москва

1. Алкоголизм: (Руководство для врачей)/Под ред. Морозова Г.В., Рожнова В.Е., Бабаяна Э.А. - М,:Медицина, 1983, 432 о.

2. Анохина И.П., Маньковская И.В., Машилов К.В.,Кудинова Е.В. Нейромодуляторы катехоламинов лри алкоголизме,- В кн.: Фармакология экспериментального алкоголизма/Под ред.Бурова Ю.В. М.,1982, с.42-54.( Сб. тр.н.-и.ин-та фармакологии АМН СССР).

3. Ашмарин И.П. Малые пептиды в норме и при патологии: Обзор . Натол.физиол.и эксп.терапия, 1982, №4, с.13-27.

4. Балашов A.M. Некоторые особенности энкефалиновой рецепции головного мозга крыс при хроническом введении морфина и этанола: Автореф.дис. канд. биол.наук. И.,1983. - 16 с.

5. Биологические аспекты наркоманий/А.И.Майокий, Н.В.Ведерникова,- В.В.Чистяков, В.В.Дакия.- М.:Медицина,1982.- 256 с.

6. Борисов М.М., Мафузанова Т.П., Меткалова С.Е. Экспериментальная оценка пристрастия к алкоголю у крыс.- Хим.фарм.ж., 1978, т.12,с.84-88.

7. Буров Ю.В. Фармакологические вещества для лечения алкоголизма. (Аналитический обзор и тенденции научного поиска).- 141

8. В кн.: Фармакология экспериментального алкоголизма/Под ред. Бурова Ю.В. М.,1982,с.7-28. (Сб.зр.н.-и.ин-та фармакологии АМН СССР).

9. Буров Ю.В., Юхананов Р.Ю., Майский А.И„ Влияние этанола на концентрацию энкефалинов в головном мозге крыс с различным уровнем алкогольной мотивации. Бюлл.эксп,.биол.мед., 1983, вып.7, с.48-51.

10. Вальдман А.В. Пептиды как модуляторы моноаминергичес-ких процессов. В кн.: Фармакология нейропептидов/Под ред. Вальдмана А.В.- М.,1982, с.9-30. (Сб.зр.н-.и.ин-та фармакологии АМН СССР).

11. Власова Н.В. Особенности кинетики этанола в крови крыс при экспериментальном алкоголизме,- В кн.: Фармакология экспериментального алкоголизме/Под ред.Бурова Ю.В.- М.,1982, с.119-124. (Сб. зр.н-.и.ин-та фармакологии АМН СССР).

12. Зайцев С.В., Породенко Н.В., Варфоломеев С.Д. Влияние опиатов на транспорт Са?+ в синаптосомы. Биоорг.химия, 1983, т.9,с.849-853.

13. Кампов-Полевой А.Б. Изучение особенностей формирования алкогольной мотивации у крыс.- В кн.: Фармакология экспериментального алкоголизма/Под ред.Бурова Ю.В.- М.,1982, с.130-136. (Сб.тр.н.-и.ин-та фармакологии АМН СССР).

14. Кирхнер Ю. Тонкослойная хроматография: В 2-х т. М.: Мир, 1981.- т.I,с.261.

15. Кравцов Г.М., Ряжский Г.Г., Орлов С.Н. Транспорт кальция в синаптосомы и субклеточные мембраны фракций головного мозга: влияние опиоидных пептидов.- Биохимия, 1982, т.47, с.2006-2015.

16. Методические рекомендации по экспериментальному (фар- 142 макологическому) изучению препаратов, предлагаемых для клинической апробации в качестве средств для лечения и профилактики алкоголизма/Фармакологический комитет МЗ СССР. М.,1980.- 24 с.

17. Морозов Г.В. Об основных направлениях научных исследований в области алкоголизма.- В кн.: Патогенез, клиника и лечение алкоголизма/Под ред.Морозова Г.В. М.,1976, с.3-6. (Сб.тр.ВНИИ общей и судебной психиатрии им.В.П.Сербского).

18. Морозов Г.В. Основные направления и перспективы развития советской судебной психиатрии.- В кн.: Тез.докл. УП

19. Всее.съезда невропатологов и психиатров. М.,1981,с.340-342.

20. Морозов Г.В., Анохина И.П. Этиология и патогенез алкоголизма. В кн.: Алкоголизм:(Руководство для врачей)/Под ред.Морозова Г.В., Рожнова В.Е., Бабаяна З.А. - М.,1983,с.210-225.

21. Нечаев Н.В. Особенности обмена дофамина и серотонина при хроническом алкоголизме: Автореф.дис.канд.мед.наук. -М.,1980.- 16 с.

22. Панченко Л.Ф., Брусов О.С., Балашов A.M., Гриневич В.П., Островский Ю.М. Взаимодействие некоторых тетрагидроизо-хиновых алкалоидов с опиатными рецепторами гипоталамуса и среднего мозга крыс. Вопр.мед.химии, 1982, т.28,с.88-92.

23. Сытинский И.А. Биохимические основы действия этанола на центральную нервную систему.- М.:Медицина, 1980, 192 с.- 143

24. Чард Т. Радиоиммунологические методы.- М.:Мир,1981.-248 с.

25. Ширинский П.П., Томилин В.В. Фармакокинетика алкоголя. В кн.: Алкоголизм: (Руководство для врачей)/Под ред.Морозова Г .В., Рожнова В.Е., Бабаяна Э.А. - М. ,1983,с.21-30.

26. Юхананов Р.Ю. Содержание энкефалинов и dsip в мозгу крыс с различной предрасположенностью к потреблению этанола.

27. В кн.:Фармакология экспериментального алкоголизма/Под ред.Бурова Ю.В. М.,1982,с.54-60. (Сб.тр.н.-и.ин-та фармакологии АМН СССР).

28. Agarvml N.S., Hruby V.S., Katz R., Klee W., Nirenberg M.Synthesis of leucine-enkephalin derivatives: Structure/function study.- Biochem.Biophys.Res.Comm.,I976,v.76,p.129-135*

29. Airaksinen M.M., Kari I.- Carbolines, psychoactivecompounds in the mammalian body. Part II: Effects.- Med.

30. Biol., 1981, v. 59, p.190-211.29* Algery S., Altstein M., De Simone G.M„, Guardobasso2

31. V.In vivo potentiation D-Ala Met-enkephalin amide central effects after administration of an enkephalinase inhibitor.-Sur.J.Pharmacol., 1981, v. 74, p.261-263.

32. Almenoff J., Wilk S., Orlowski M. Membrane bound pituitary metalloendopeptidase: apparent identity to enkepha-linase.- Biochem.Biophys.Res.Comm. ,1981, v.102., p.206214.

33. Altstein M., Blumberg S., Vogel Z. Phosphoryl-Leu-Phe: A potent inhibitor of the degradation of enkephalin by enkephalinase.- Eur. J.Pharmacol., 1981, v.76, p.299-300.

34. Badawy A.A.B., Evans M. The mechanism of the antagonism by naloxone of acute alcohol intoxication.- Brit.J.Pharmacol., 1981, v. 74, p.514-516.37» Badawy A.A.B., Evans M. Naloxone in ethanol intoxication .let tei.- Ann. Intern.Med., 1983, v.98, p.672.

35. Barnard E.a., Demoliou-Mason c.Molecular properties of opioid receptors.-Brit.Med.Bull., 1983, v. 39, p.37-45.39* Bass M.B., Friedman H.J., D.Lester.Antagonism of naloxone hyperalgesia by ethanol.- Life Sci.,1978, v.22, p.1939-1946.

36. Benuck M., Marks N. Characterization of a distinct membrane bound dipeptidyl carboxypeptidase inactivating enkephalin in brain.- Biochem.Biophys.Res.Comm.,1980, v.95» p.822-282.

37. Berger т., French E.d., Siggins g.r., Shier w.t., Bloom F.E. Ethanol and some tetrahydroisoquinolines after the- 145 discharge of cortical and hippocampal neurons: relationship to endogenous opioids.- Pharmacol. Biochem.Behav., 1982, v.17, p.813-82I,

38. Blum E., Sar M., Sheridan P.J.,Briggs A.H., Elston S.F.A.,DeLallo L. Reduction of basal ganglia enkephalin following long-term ethanol consumption in hamsters.- Fed. Proc., 1980, v. 39, p.605.

39. Blumberg S., Vogel Z., Altstein M. Inhibition of en-kephalin-degrading enzymes from rat brain and of thermolysin by amino acid hydroxamates.- Life Sci., 1981, v. 28, p.30I-306.

40. Blume A.J., 1980- цяг.до /38/.

41. Boada J., FeriaM. ,Sanz E. Inhibitory effect of naloxone on the ethanol-induced antinociception in mice.- Pharmacol. Res.Comm., 1981, v. 13, p.673-678.

42. Bosio A., Lucchi L., Spano P.P., Trabucchi M. Central toxic effect of chronic ethanol treatment: actions on GABA and benzodiazepine recognition sites.- Toxicol.Lett., 1982,v. 13, p.99-104.

43. Bonnet K.A., Engelberg L., Gusik S.A. Calmodulin increases in selective brain regions with opioid dependence.-Life Sci., 1982, v.31, p.2295-2298.

44. Bradbury A.F., Smyth D.C., Snell C.R., Birdsall N.J., Hulme iS.C. C-fragment of lipitropin has high affinity for brain opiate receptors.- Nature, 1976, v.260, p.793-795*

45. Burnstock G., Hokfelt 'J?., Gershon M.D., Iverson L.L., Kosterlitz H.W., Szurzewski J.H. Non-adrenergic, non-choliner-gic autonomic neurotransmission mechanisms.- Neurosci.Res. Prog.Bull., 1979, v.7, p.379-519.

46. Cardenas H.L., Ross D.H. Morphine induced calcium depletion in discrete regions of rat brain.-J.Neurochem., 1975, v. 24, p.487-493*

47. Catley D.M., Jordan C., Frith C.D., Lehane J.R., Rhodes A.M., Jones J.G. Alcohol induced discoordination is not reversed by naloxone.- Psychopharmacol., 1981, v. 75, p.65-68.

48. Chang K.J., Eckel R.W.,Blachard S.G.Opioid peptides induce reduction of enkephalin receptors in cultured neuroblastoma cells.- Nature, 1982, v.296, p.446-448.

49. Chang K.J., Cuatrecasas P. Multiple opiate receptors: Enkephalins and morphine bind to receptors of different specificity.- J.Biol.Chem., 1979, v. 254, p.26I0-26I8.- 147

50. Cheng Y.C., Prusoff W.H. Relationship betwen the inhibition constant (Kj) and the concentration of inhibitor which causes 50 per cent inhibition (IC^q) of an enzymatic reaction.- Biochem.Pharmacol., 1973, v. 22, p.3099-3108.

51. Childers S.R., Snyder S.H. Different regulation by guanine nucleotides of opiate agonist and antagonist receptor interactions.- J.Neurochem., 1980, v. 34, p.583-593.

52. Chretien M., Grossard F., Grine P., Gianoulakis C., Seidah N.G. Structure and maturation process of proopiomela -nocortin: A model for other neuropeptides.- In: Neural peptides and neuronal communication/ ed.E.Costa, M.Trabucci.- N.Y., 1980, p.153-166.

53. Clement-Jones V., Besser G.M» Clinical perspectives in opioid peptides.- Brit.Med.Bull.,1983, v.39,P«95-IOO.

54. Clouet D.H., 01Callaghan J.P.,Williams N. The effect of opiate on endogenous phosphorylation of proteins in the synaptic plasma membranes of rat striatum.- Prog.Clin.Biol. Res.,1979, v.27, p.I07-I2l.

55. Clouet D.H., Williams N. The effect of opioids on striatal calmodulin levels.- Life Sci., 1982, v.31, p.2283-2286.

56. Collier H.O.J. Agonist and antagonist actions of narcotic analgesic drugs.- Proc. 5th Int.Cong. Pharmacol.,1973, v.I, p.65-76.

57. Comb M., Seeburg P.H., Adelman J., Eidon L., Herbert E. Primari structure of the human Met- and Leu-enkephalin precusor and its mRNA.- Nature, 1982, v. 295, Р»663-666,

58. Cowan A., Gmerek D.E. In vivo studies with ICI 154.129, a putative delta receptor antagonist.- Life Sci,. ,1982, v.3I,p.2213-2216.

59. Сох В.М., Goldstein A., Li С.Н. Opioid activity of а peptide, jS-lipo tropin- (61-91), derived from J>-lipotropin.- Proc, Natl. Acad.Sci. USA,1976, v.73, p.I82I-I823.

60. Critcher E.C., Lin C.I., Patel J., Myers R.D.Attenuation of alcohol drinking in tetrahydroisoquinoline-treated rats by morphine and naltrexone.- Pharmacol.Biochem.Behav., 1983, v. 18, p.225-231.

61. Cuello A.C.Central distribution of opioid peptides.-Brit.Med.Bull., 1983, v. 39» p.II-16.

62. Dawson G., McLawhon R.,Miller R.J. Opia.tes and enkephalins inhibit synthesis of gangliosides and membrane glycoproteins in mouse neuroblastoma cell line К'4-TGI.- Proc. Natl.Acad.Sci.USA, 1979, v.76, p.605-609.

63. Dawson G.,McLawhon R., Miller R.J.Inhibition of sialoglycosphingolipid (ganglioside) biosynthesis in mouse clonal lines N 4TGI and NG 108-15 by beta-endorphin, enkephalins, and opiates.- J.Biol.Chem.,1980, v.255, p.129-137*

64. De La Baume S., Patey G., Schwartz J.C„ Subcellular distribution of enkephalin-dipeptidyl carboxypeptidase (enkephalinase) in rat brain.- Neurosci., 1981, v.6,p.315-321.

65. Delitala G., Grossman A., Besser G.M. Opiate peptides control growth hormone through a cholinergic mechanism in man.- 149

66. Clin.Endocrinol., 1983, v.18,p.401-405.75* Descarries L., Beadet A.,Watkins K. Serotonin nerve terminals in adult rat neocortex.- Brain Res., 1975, v.100, p.536-598.

67. Editorial 1982, v.2, p.80.

68. Noloxone for alcohol poisoning? Lancet,

69. Ei-Fakahany E.F., Miller E.R., Abbasy M.A., Eldefra-wi A.T., Eldefrawi M.E. Alcohol modulation of drug bindingto the channel sites of the nicotinic acetylcholine receptor.-J.Pharmacol.Exp.Ther.,1983, v.224, p.289-296.

70. Elde R., Hokfelt Т., Johansson 0. ,Tereciius L. Immu-nohistochemical on the nervous system of the rat.- Neurosci., 1976, v.5, p.349-351.

71. Erdos E.G.,Johnson A.R., Boyden N.T. Hydrolisis of enkephalin by cultured human endothelial cells a.nd by purified peptidyl dipeptidase.- Biochem.Pharmacol,,1978, v.27,p.843-848.

72. Erickson С.К., Regional distribution of ethanol in rat brain.- Life Sci., 1976, v.19, p.I439-I446.85» Feuerstein G., Faden A.I.Differential cardiovascupothalamic sites in the anesthetized rat.- Life Sci.,1982, v. 51, p.2197-2200.

73. Fournie-Zaluski M.C., Chaillet P., Soroca-Lucas E., Marcais-Collado H., Costentin J., Roaues B.P. New carboxyalkyl inhibitors of brain enkephalinase: synthesis, biological activity, and analgesic properties.- J.Metf.Chem., 1983, v.26, p.60-66.

74. Fournie-Zaluski M.C., Perdrisot R.,Gacel G., Swerts J.P.,Roqucs B.P., Schwartz J.C. Inhibitory potency of various peptides on enkephalinase activity from mouse striatum.-Biochem.Biophys.Res.Comm., 1979, v.91, p.130-135.

75. Freund G. Induction of physical dependence on alcohol in rodents.- In :Biochem. Pharmacol.Ethanol. N.-Y.- London, 1975, p.311-325.

76. Friedman M.B., Erickson O.K., Leslie S.W. Effect of acute and chronic ethanol administration on whol mouse brain synaptosomal calcium influx.- Biochem.Pharmacol,,1980, v. 29, p.1903-1908.andKopiate agonists and discrete hy- 151

77. Fulcher I.S., Matsas R., Turner A,J., Kenney A.J» Kidney neutral endopeptidase and the hydrolisys of enkephalin by synaptic membranes show similar sensitivity to inhibitors.- Biochem.J., 1982, v. 203, p.519-523.

78. Geller E.B., Hawk C., Tallarida R.J., Adler M.W. Postulated thermoregulatory roles for different opiate receptors in rats.- Life Sci., 1982, v. 31, p.2241-2244.

79. George S.G., Kenny A.J. Studies on the enzymology of purified preparations of brush border from raboit kidney.-Biochem.J., 1973, v. 134, p.43-57.

80. Gianoulakis C., Woo N., Drouin J.N. , SeidahN.G., Kalant H., Chretien M. Biosynthesis of beta-endorphin by the neurointermediate lobes from rats treated with morphine or alcohol.- Life Sci., 1981, v.29, p.1973-1982.

81. Gidley M.J.,Hall L.D., Sanders J.K.M., Summers M.C. Acetaldehyde-enkephalinssStructure proof and some conformational deductions from one- and two-dimensional proton nuclear magnetic resonance spectra.- Biochem.,1981, v.20, p.3880-3881.

82. Gilbert P.E., Martin W.R. The effect of morphine- and nalorphine-like drugs in the nondependentj morphine-dependent and cyclozocine-dependent chronic spinal dog.-J.Pharmacol. Exp.Ther., 1976, v.I98, p.66-82.

83. Goldstein A., Goldstein T.S., Cox B.M. A synthetic peptide with morphine-like pharmacologic action.- Life Sci., 1975, v.I7, p.I643-I654.

84. Goldstein A., Lovmey L.I., Pal B.K. Stereospecific and nonspecific interactions of the morphine congener levo-rphanol in subcellular fractions of mouse brain.- Proc.Natl. Acad.Sci., USA, 1971» v. 68, p.I742-I747.

85. Gorenstein C., Snyder S.H. Two distinct enkephalina-ses: solubilization, partial purification and separation from angiotensin converting enzyme.- Life Sci., 1979, v. 25, p.?065-?070.

86. Gorenstein C., Snyder S.H. Enkephaliriases.- Proc. E.Soc.Lond.,1980, v.210, p.123-132.

87. Greene L.W., Hollander C.S. Alcohol and the hypota-lamus.- Prog.Biochem. Pharmacol. ,1981, v.18, p., 15-23.105» Grossman A., Ress L.H. The neuroendocrinology of opioid peptides.- Brit.Med.Bull., 1983, v.39, p.83-88.

88. Gruol D.L. Ethanol alters synaptic activity in cultured spinal cord neurons.- Brain.Res. ,1982, v. 243, P»25-33«

89. Guerin J.M., Friedberg G.Naloxone and ethanol intoxication. Latter.- Ann. Int. Med.,1982, v. 97, p.932.

90. Guillemin R., Ling N., Burgus R. Endorphines, peptides, d'origine hypotalamique et neurohypophisaire a acti-vite morphinomimetique. Isolement et structure moleculaire de l'endorphine.- C.R.Acad.Sci.,1976, v.282, p.783-785»

91. Hamrook J.M., Morgan В.д., Ranee M.J., Smith C.F.C. Mode of deactivation of the enkephalins by rat and human plasma and rat brain homogenates.- Nature, 1976, v.262, p.782-783.у

92. Hertz L. Possible rol of neuroglia: a potassium mediated neuronal neuroglia neuronal impuls transmission system.- Nature, 1965, v. 206, p.I09I-I094.

93. Hiller J.M., Angel L.M., Simon E.J. Multiple opiate receptors: alcohol selectively inhibits binding to delta receptors.- Science, 1981, v. 214, p. 468-469.

94. Hirata F., Axelrod J. Phospholipid metihylation and biological signal transmission.- Science, 1980, V.2O9, p.1082-1090.

95. Ho A.K.S., I98O цит.ДО /118/.118 . Ho A.K., Rossi H. Suppression of ethanol consumptionby Met-enkephalin in rats.- J.Pharm.Pharmacol.,1982, v.54, p.118-119.

96. Hoffman P.L., Urwyler S., Tabakoff B. Alterations in opiate receptor function after chronic ethanol exposure.- J. Pharmacol. Exp.Ther., 1982, v. 222, p.182-189.

97. Holaday J.W.,Hitzemann R.J., Curell J., Tortella

98. F.C., Belenky G.L. Repeated electroconvulsive shock or chrox 2nic. morphine treatment increases the number of • H-D-Ala ,D-Leu^-enkephalin binding sites in rat membranes.-Life Sci., 1982, v.3I, p.2359-2362.

99. Hollt V. Multiple endogenous opioid peptides.-Trends in Neurosci., 1983, v.6, p.24-26.

100. Holman R.B. Ethanol and cerebral neuroregulators.-Biochem.Soc.Trans., 1983, v.II, p.62-63.

101. Hughes J. Isolation of an endogenous compound from the brain with pharmacological properties similar to morphine.- Brain Res.,1975a, v.88, p.295-308.

102. Hughes J. Search for the endogenous ligand of the opiate receptor.- Neurosci.Res.Programm.Bull.,1975 B,v.I3, p.55-58.

103. Hughes J. Biogenesis, release and inactivation of enkephalins and dynorphins.- Brit.Med.Bull.,1983, v.39,p.I7-24.

104. Hughes J., Smith T.W. Kosterlitz H.W.„ Forthergill L.A., Morgan B.A., Morris H.R.Identification of two related pentapeptides from the brain with potent opiate agonist activity.» Nature, 1975, v. 258, p.577-579.

105. Hudgin R.L., Charleson S.E.,Zimmerman M.,Mumford R.,Wood P.L. Enkephalinases selective peptide inhibitors.- 155 1.fe Sci., 1981, v. 29, p.2593-2603.

106. Khanna J.M., Mayer J.M., Kalant H., Shah G. Effect of naloxone on ethanol-and pentobarbital-induced narcosis.-Can.J.PhysioI.Pharmacol.,1982, v.60, p.1315-1318.

107. Killion A.R., Schuster C.R. , House J,.Т., Sholl S., M.Connors, Wainer B.H. A non-peptide morphine-like compound from brain.- Life Sci., 1981, v. 28, p.8II-8I7.

108. Kimball C.D., Huang S.M., Toget C.E. ., Houck J.C. Plasma ethanol, endorphin and glucose experiment.- Lancet,1980, v.2, р.418-419.

109. Klee W.A., Sharma S.K., Nirenberg M. Opiate receptors as regulators of adenylate cyclase.- Life Sci., 1975» v.I6, p.1869-1877»

110. Klee W.A., Simonds W.F., Sweat F.W., Burke jr.T.R., Jacobson A.E., Rice K.C. Identification of a M.58000 glycoprotein subunit of the opiate receptor.- FEBS Lett., 1982, v.150, p.125-129.

111. Kosterlitz H.W. Opioid peptides and their receptors.-Prog.Biochem.Pharmacol.,1980, v.I6, p.3-I0.

112. Lewis M.E., Pert A., Pert C.P., HerkenhamVOpiate receptor localization in rat cerebral cortex.- J.Comparative Neurology, 1983, v. 216, p.339-358.

113. Lewis R.V., Stern A.S., Ximura S., Stein S. Uden-friend S. Enkephalin biosynthetic pathway: proteins of 8000 and 14000 daltons in bovine adrenal medulla.- Proc.Natl. Acad.Sci. USA, 1980, v.77, p.5018-5020.

114. Li C.H. Lipotropin: A new active peptide from pituitary glands.- Nature, 1964, v. 201, p.924-928.1ST, Lieber C.S., DeCarli L.M. Animal models of ethanol dependence and liver injury in rats and baboons.- Fed.Proc., 1976, v.35, p.1232-1236.

115. Little,ton J.M. Cell-membrane lipids in ethanol-to-lerance and -dependence.- Biochem. Soc.trans., 1983, v.II, p.61-62.

116. Llorens C,, Schwartz J.C. Enkephalinase activity in rat peripheral organs.- Eur.J.Pharmacol.,1981, v. 69, p.113-116.

117. Lord J.A.H., Waterfield A.A., Hughes J., Kosterlitz H.W. Endogenous opioid peptides: Multiple agonists and receptors.- Nature, 1977, v. 267, p.495-499.

118. Lowry O.H., Rosenbrough N.J., Farr A.L., Randall R.J. Protein measurement with the Folin phenol reagent.- J.Biol. Chem., 1951, v. 193, p.265-275.- 159

119. Lynch M.A., Littleton J.M. Possible association of2+alcohol tolerance with increased synaptic Ca sensitivity.-Nature, 1983, v. 303, p.175-176.

120. Lyon L.J., Antony J, Reversal of alcoholic coma by naloxone.- Ann.Int.Med., 1982, v.96, p.464-465„

121. Malfroy В., Schwertz J.C. Purification and substrate specificity of rat kidney "enkephalinase".- Life Sci., 1982a, v.3I, p.1745-174-8.

122. Malfroy В., Schwartz J.C. Properties of "enkephalinase" from rat kidneys Comparison of dipeptidyl-oarboxypeptidase and endepeptidase activities.- Biochem.Biophis.Res.Comm.,1982 в,v.I06, p.276-286.

123. Malfroy B., Swerts J.P., Guyon A., Roques B.P., Schwartz J.C. High-affinity enkephalin-degrading peptidase in brain is increased after morphine.- Nature,1978, v.276,p.523-526.

124. Martin W.R., Eades C.C., Tompson J.A«. ,Huppler R.E., Gilbert P.E. The effect morphine- and n alorphi.ne-like substances in the non-dependent and morphine-dependent chronic spinal dog.- J .Pharmacol. Exp .Ther. , 1976, v. 197 ,P* 5^-7- 532.

125. Martin R., Voigt K.H. Enkephalins co-exist with oxytocin and vasopressin in nerve terminals of rat; neurofcypophysis.- Nature, 1981, v.289, p.502-504.

126. Noda M., Furutani Y., Takahashi H., Toyosato M., Hirose Т., Inayama S., Nakanishi S., Numa S. Isolation and structural organization of the human proenkephalin gene.-Nature, 1982, v. 297, p.431-434.

127. Nordberg A., Wahlstrom G. Tolerance, physical dependence and changes in muscarinic receptor binding sites afterchronic ethanol treatment in the rat.- Life Sci., 1982, v. 31» p.277-278.

128. Orenberg E.K., Renson J., Barchas J.D. The effect of alcohol on cyclic AMP in mouse brain.- Neurochem.Res., *976, v.I, p.659-667.

129. Orlowski M., Wilk S. Purification and specificity of a membrane-bound metalloendopeptidase from "bovine pitui-taries.- Biochemistry, 1981, v. 20, p.4942-4950.

130. Panerai A.E., Martin A., De Rosa A., Salerno F. , Bi Giulio A.M., Mantegazza P. Plasma J>-endorphin and met-enkephalin in phisiological and pathological conditions.- Adv. Bio-chem. Psychopharmacol., 1982, v.33, p.I39-I49.

131. Pasternak G.W., Carroll-Buatti M., Spiegel K. The binding and analgesic properties of a sigma opiate, SKF 10,047.- J.Pharmacol.Exp.Ther., 1981, v. 219, p.192-198.

132. Pasternak G.W.,Snyder S.H. Opiate receptor binding: Effect of enzymatic treatment.- Mo1.Pharmacol., 1973» v. 10, p.183-193.

133. Paterson S.J., Robson L.E., Kosterlitz H.W. Classification of opioid receptors.- Brit.Med.Bull.,1983, v. 39, p.31-36.

134. Patey G., De La Baume S., Schwartz J,.C.,Gros C., Ro-ques B.P., Fournie-Zaluski M.C., Saroca-Lucas E. Selective protection of methionine enkephalin released from brain slices by enkephalinase inhibition.- Science,1981, v. 212, p.1153-1155.

135. Pelletier G., Le Clerc R. Localization of leu-en** kephalin in dense core vesicles of axon terminals.- Neurosci. Lett., 1979, v.I2, p.159-I63.- 163

136. Phillips S.C., Cragg B.G. Chronic consumption of alcohol by adult mice: effect on hippocampal cells and synapses.» Exp. Neurol., 1983, v. 80, p.218-226.

137. Pickel V.M., Joh Т.Н., Reis D.J., Leeman S.E., Miller R.J. Electron microscopic localization of substance P and enkephalin in axon terminals related to dendrites of catecholaminergie neurons.- Brain Res., 1979, v.160, p.387-400.

138. Presiosi P., Vacca M., Cerrito F. Serotoninergic and endogenous opiates interplay in the contio 1 of ACTH and prolactin release.- Arch.Int.Pharmacodyn.Ther., 1983, v.263, p.325-327.

139. Puget A., Meunier J.C. Opiate receptor(s) in frog brain membranes:Evicence for agonist and antagonist macro-molecular complex of different size.- Comptes Rendus,I983, v.296, p.475-479.- 164

140. Rabin R.A., Wolfe B.B., Dibner M.D., Zahnisser N.R.,Melchior C., Molinoff P.B. Effects of ethanol administration and withdrawal on neurotransmitter receptor systems in G 57 mice.- J.Pharmacol.Exp.Ther., 1980, v.213, p.49I-496.

141. Raff M. Self regulation of membrane receptors.-Nature, 1976, v. 259, p.265-266.

142. Rodbard D., Lewald J.E., 1970 цигФдо /24/.

143. Roques B.P., Fournie-Zaluski M.C., Soroca E., Lecomte J.M., Malfroy В., Liorens C., Schwartz J.C. The enkephalinase inhibitor thiorphan shows antinociceptive activity in mice.- Nature, 1980, v. 288, p.286-288.

144. Roques B.P., Lucassoroca E., Chaillet P., Costentin J., Fourniezaluski M.C. Complete differentiation between enkephalinase and angiotensin-converting enzyme inhibition by retro-thiorphan.- Proc.Natl.Acad.Sci. USA, 1983, v.80,p.3178-3182.

145. Ross D.H., Medina M.A., Cardenas H.L. Morphine and ethanols Selective depletion of regional brain calcium.-Science, 1974, v. 186, p.63-64.

146. Rush R.S., Hersch L.B. Multiple molecular forms of rat brain enkephalinase.- Life Sci., 1982, v. 3I, p.445-453.- 165

147. Sarne Y., Azov R., Weissman B.A. A stable enke-phalin-like immunoreactive substance in human CSF.- Brain Res., 1978, v. 151, p.399-402.

148. Schier B.K., Thompson E.J. On the role of glial cells in the mammalian nervous system.- J.Biol.Chem., 1974, v. 249 »P•1769-1780.

149. Schulz R., Wuster M., Herz A. Supersensetivity to opioids following the chronic blokade of endorphin action by naloxone.- Naun.- Schmied. Arch.Pharmacol., 1979, v. 306, p.93-96.

150. Schulz R., Wuster M., Krenss H., Herz A. Selective development of tolerance without dependence in multiple opiate receptors of mouse vas deferens.- Nature, 1980, v. 285,p.242-243.

151. Schulz R., Wuster M., Rubini P., Herz A. Functional opiate receptors in the guinea-pig ileum:their differentiation by means of selective tolerance development.-- J.Pharm. Exp.Ther.) 1981 в , v.2l9, p.547-556.

152. Schwartz J.C., Maifroy В., De La Baume S. Mini-review: Biological Inactivation of enkephalins and the role of enkephalin-dipeptidyl-carboxypeptidase ("enkephalinase")as neuropeptidase.- Life Sci., 1981, v. 29, p.l7I5-I74I.

153. Sharma S.K., Klee W.A., Nirenberg M. Opiate-dependent modulation of adenilat cyclase.- Proc.Natl. Acad .Sci. USA, 1977, v. 74, p.3365-3369.

154. Simantov R., Amir S. Regulation of opj.ate receptors in mouse brain: arcuate nuclear lesion induces receptor up-regulation and supersensitivity to opiates.- Brain Res., 19®, v. 262, p.168-171.

155. Simantov R., Childers S.R., Snyder S.H. Opiate receptor binding interactions of ^H-methionine-enkephalin, opioid peptide.- Mo 1.Pharmacol., 1978a, v.47, p«.3l9-33I.

156. Simantov R., Childers S.R., Snyder S.H. The opia3te receptor binding interactions of H-methionine enkephalin, an opioid peptide.- Eur.J.Pharmacol., 1978 В ,v.47, p.319-331.

157. Simantov R., Levy R., Baram 0. Down-regulation of enkeplain<5 ) receptors. Demonstration in membrane-bound and solubilized receptors.- Biochem.Biophys.Acta, 1982, v.721,-16 7 p.478-485.

158. Simon E.J., Bonnet K.A., Crain S.M., Groth J., Hiller J.M., Smith J.R. Recent studies of interaction between opioid peptides and their receptors.- In : Neural Peptides and Neuronal Communications.- N.-Y., 1980, p.335-346.

159. Simon E.J., Hiller J.M., Edelman I. Stereospecific binding of the potent narcotic analgesic ^H-etorphine to rat brain homogenate.- Proc. Natl.Acad.Sci. USA, 1973, v.70,p.I947-I949.

160. Summers M.C., Gidley M.S., Sanders J.K.M. "Acetal-dehyde- enkephalins"; Elucidation of the structure of the acetaldehyde adducts of methionine-enkephalin and leucine-enkephalin.- PEBS Lett., 1980, v.III, Р.3О7-3Ю.

161. Swerts J.P., Perdrisot R.,Malfroy В., Schwartz J.C. Is "enkephalinase" identical with angiotensin-converting enzymes?- Eur.J.Pharmacol.,1979, v.53, p.209-210.

162. Swerts J.P., Perdrisot R., Patey G., De La Baume S., Schwartz J.C. "Enkephalinase" is distinct from brain "angio-tensin-converting enzyme".- Eur.J.Pharmacol., 1979, v.57,p.279-281.

163. Tabakoff В., Hoffman P.L. Alcohol interactions with brain opiate receptors.- Life Sci., 1983, v. 32, p.197-204.- 169

164. Vogel Z., Altstein M. The adsorption of enkephalin to porous polystirene beads:a simple assay for enkephalin hydrolysis.- PEBS Lett., 1977» v.80, p.332-335.

165. Vogel Z., Altstein M. Inactivation of enkephalin by brain enzymes.- Prog.Biochem.Pharmacol.,1980, v.,16, p.49-59*

166. Watson S.J., Akil H., Fischli W., Goldstein A., Zimmerman E., Nilaver G., Van Wimersma Gredanus T.B.Dynorphinand vasopressins common localisation in magnocellular neurons.-Science, 1982, v. 216, p.85-87.

167. Weber E., Roth K.A., Barchas J.D. Immunohistochemical distribution of alpha-neo-endorphin/dynorphin neuronal systems in rat brain: Evicence for colocalization.- Proc. Natl.Acad. Sci. USA, 1982, v. 79, p.3062-3066.

168. West R.E., Miller R.J. Opiates, second messengers and cell response.- Brit.Med.Bull.,1983, v. 39, p.53-58.

169. Whalley L.J., Freeman C.P., Hunter J. Rule of endogenous opioids in alcoholic intoxication.- Lancet, I98I, v.II, p.89.

170. Williams N., Clouet D.H. The effect of acute opioid administration on the phosphorylation of rat striatal synaptic membrane proteins.- .Pharmacol.лхр.Тиег.,1^82, v.220, p.278-266.- IVI

171. Wood P.L., Charleson S.E., Lane D., Hudgin R.L. Multiple opiate receptors: differential binding of mu, kappa and delta agonists.- Neuropharmacol., 1981, v. 20, p.I2I5-1220.

172. Yang H.Y., Hong J.S.,Costa E, Regional distribution of leu- and met-enkephalin in rat brain.- Neuropharmacol., 1977, v.I6, p.303-307.

173. Yang H#I., Hong J.S., Eratta W., Costa E. Rat brain enkephalins: Distribution and biosyntesis.- Adv. Biochem Psycho-pharmacol., 1977, v.18, p.149-159.

174. Zajac J.M., Gacel G., Petit P., Dodey P*.? Rossignol P., Roques B.P, Deltakephalin, Tyr-D-Thr-Gly-Phe-Leu-Thr:

175. A new highly potent and fully specific agonist for opiate $ receptors.- Biochem. Biophys.Res.Comm.,1983, v.Ill, p.390-397.

176. Zhang A.Z., Yang H.Y.T., Costa E. Nociception, enkephalin content and dipeptidyl carboxypeptidase activity in brain of mice treated with exQpeptidase inhibitors.- Neuropharmacol., 1982, v.2l, p.625-630.