Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Содержание биологически активных веществ у культивируемого зверобоя продырявленного

ВАК РФ 03.00.05, Ботаника

Автореферат диссертации по теме "Содержание биологически активных веществ у культивируемого зверобоя продырявленного"

РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ НАУК

СИБИРСКОЕ ОТДЕЛЕНИЕ ЦЕНТРАЛЬНЫЙ СИБИРСКИЙ БОТАНИЧЕСКИЙ САД СО РАН

На правах рукописи УДК 581.19: 582.824.3

х

; Ваяндина Ирина Ивановна ^ __

СОДЕРЖАНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ У КУЛЬТИВИРУЕМОГО ЗВЕРОБОЯ ПРОДЫРЯВЛЕННОГО

<£)сс.JUj 03.00.05 - Ботаника

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Новосибирск 1995

Работа выполнена в Центральном сибирском ботаническом саду Сибирского отделения РАН

Научные руководители: ¡д.б.н. В.Г.Минаева д.б.н. Е.В.Тюрина

Официальные оппоненты:

д.б.н. проф. Р.Я.Пленник к.с.-х.н. А.И.Широченкова

Ведущая организация:

Институт цитологии и генетики СО РАН (г.Новосибирск)

Защита состоится /¿¿w^S/ut 1995 г. в /У" часов на заседании диссертационного совета Д 002.90.01 по ващите диссертаций на соискание степени доктора наук при Центральном сибирском ботаническом саду СО РАН по адресу:

630090, Новосибирск, Золотодолинская, 101.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке

Центрального сибирского ботанического сада СО РАН.

Автореферат разослан fJ^^ri^e 1995 г.

Ученый секретарь диссертационного совета кандидат биологических наук

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСтаКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Среди лекарственных растений, широко применяемых в прошлом и в настоящее время, видное место занимает зверобой продырявленный - Hypericum perforatum L., который является официнальным растением по Государственной фармакопее СССР (1990). Потребности медицинской и пищевой промышленности в сырье зверобоя непрерывно возрастают, тогда как природные запасы ввиду нерационального потребления - истощаются, поэтому становится актуальным создание промышленных плантаций зверобоя продырявленного. В ЦСБС СО РАН с 1983 года ведутся работы по введению зверобоя в промышленную культуру для медицинской и пищевой промышленности. Методами отбора на урожайность и семенную продуктивность д.б.н. Е.В.Тю-риной была получена выровненная чемальская популяция, которая послужила основой для первого сорта-стандарта Золотодо-линский зверобоя продырявленного (А.с.4742,1988). В свяви с этим для решения интродукционных и селекционных задач возникла необходимость изучения биологически активных веществ (гиперицинов, флаЕоноидов и дубильных веществ) у культивируемого зверобоя продырявленного.

Цель и задачи исследования. Основная цель работы заключалась в биохимическом обосновании способов создания высокопродуктивных форм зверобоя продырявленного на основе изучения и анализа индивидуальной изменчивости содержания биологически активных веществ в процессе отбора при интродукции перспективных популяций.

Для выполнения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

1. Определить качественный состав гиперицинов и флаво-ноидов зверобоя продырявленного на модели сорта Золотодо-линский.

2. Разработать методы количественного определения биологически активных веществ зверобоя продырявленного.

3. Выявить закономерности динамики накопления биологически активных веществ в целом растении и в отдельных органах зверобоя сорта Эолотодолинский в зависимости от фаз вегетации.

4. Изучить индивидуальную и популяционную изменчивость содержания биологически активных веществ в растениях из перспективных популяций в сравнении с сортом Золотодолинс-кий.

5. Исследовать индивидуальную изменчивость содержания биологически активных веществ в семьях, выделенных из сорта Золотодолинский.

6. Изучить значение апомиктического способа размножения при первичном отборе и дальнейшей интродукции и селекции.

Научная исшизна работа.

1. Зверобой продырявленный сорта Золотодолинский имеет тот же качественный состав гиперицинов и флавоноидов, что и зверобой продырявленный, собранный в природе, что позволяет использовать культивируемый зверобой продырявленный как полноценное лекарственное сырье.

2. Разработана экспресс-методика определения гиперицинов в зверобое продырявленом на принципах, ранее не использованных в методах определения биологически активных веществ растений.

3. Впервые одновременно изучена динамика содержания гиперицинов, флавоноидов и дубильных веществ в целом растении и отдельных органах зверобоя продырявленного, выявлены сходство и различия в их накоплении.

4. Впервые изучена изменчивость биологически активных веществ в индивидуальных растениях, семьях и популяциях в процессе интродукции и селекции зверобоя продырявленного.

5. Установлено, что зверобой продырявленный сорта Золотодолинский является факультативным псевдогамным апомиктсм.

Практическая значимость работы.

1. Нами разработаны методы количественного определения гиперицинов, флавоноидов и дубильных веществ и экстрактивных веществ в одном экстракте, что позволяет с одной стороны провести анализ содержания веществ в индивидуальном растении, а с другой стороны дает возможность проведения большого количества серийных исследований.

2. Предложен метод определения фазы оптимального соотношения биологически активных веществ в растениях. Определе-

ны оптимальные сроки заготовки сырья зверобоя продырявленного.

3. Определена адаптивная норма и пределы изменчивости для зверобоя продырявленного в условиях культуры для оценки качества сырья по содержанию гиперицинов, флавоноидов,дубильных и экстрактивных веществ.

4. Показано, что зверобой продырявленный сорта Золотодолинский имеет саше стабильные и высокие показатели по содержанию биологически активных веществ и урожайности по сравнению с пятнадцатью интродукционными популяциями.

Защщаееыив положения.

1. Состав биологически активных ве^естЕ зверобоя продырявленного сорта Золотодолинский и методы их определения.

2. Сорт Золотодолинский выделяется стабильными и высокими показателями по содержанию биологически активных веществ и урожайности.

3. Метод определения фазы оптимального соотношения биологически активных веществ позволяет получить лекарственное сырье необходимого состава.

4. Ззерсбсй сорта Золотодолинский является факультативным псегдогамным алсмиктом.

Материалы и методы. В качестве объектов исследования были использованы индивидуальные растения сорта Золотслс-линский и других кнтродуаированкых популяций. Основные методы нашего исследования - методы количественного определения - были нами разработаны самостоятельно (метод определения гиперицинов) или модифицированы применительно к зверобою прсдьгрявлеяио,уу (методе определения флавоноидов и дубильных веществ) совместно с д.фармац,я.В.В.Беликовым и другими сотрудниками лаборатории аналитической химии ВНШХТЛС (г.Харьков) (Беликов и др.,1990),и поэтому описаны в главе 3 диссертации. В целях цельности изложения специфические методы,применяемые для решения конкретных задач, мы описывали в соответствующей главе. Все материалы статистически обработаны (Глотов и др.,1682, Зайцев,1984).

Работа выполнена в 1934-1993 гг. в лаборатории фитохимии ЦСБС СО РАН в сотрудничестве с лабораторией лекарственных и пряноароматических растений ЦСБС, лабораторией цитоло-

гии апомиксиса Биологического института СО РАН, лабораторией аналитической химии ВНИИХТЛС (г.Харьков) и лабораторией фитохимии ВИЛР (г.Москва).

Апробация работы. Материалы, изложенные в диссертации, докладывались на Второй республиканской конференции по медицинской ботанике (Киев,1988), Всесоюзной конференции "Состояние и перспективы интродукции лекарственных растений" (Москва,1990) и на научной сессии ЦСБС СО РАН (Новосибирск, 1995).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 5 печатных работ.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, 6 глав, выводов и списка литературы. Работа изложена на 143 страницах машинописного текста, содержит 9 таблиц и 23 рисунка.Список литературы содержит 160 наименований.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Глава 1. Современное состояние изученности

зверобоя продырявленнкого

В главе излагаются литературные сведения о биологии и химии зверобоя продырявленного. В подглаве 1.1. рассматривается систематическое положение, ареал, экология и морфология зверобоя продырявленного. Географический ареал и экологическая приуроченность свидетельствуют о широкой пластичности этого вида и о высокой амлитуде приспособляемости к различным условиям произрастания. В подглаве 1.2. описаны история интродукции зверобоя продырявленного, онтогенез в культуре и разработанная в ЦСБС интенсивная технология возделывания зверобоя продырявленного. В подглаве 1.3. обобщены и критически осмыслены литературные данные о составе биологически активных веществ: компонентов эфирного масла,каротиноидов и полифенольных веществ (кумаринов, фенолкарбоновых кислот,ги-перицинов.флавоноидов и дубильных веществ). Наличие каждой группы веществ увязано с соответствующими лечебными свойствами зверобоя. На основании анализа литературных сведений сделано заключение о наибольшей значимости определения гипе-

рицинов, флавоноидов и дубильных веществ и о перспективности изучения их состава, разработки методик их определения и

изучения изменчивости их содержания в течение вегетационного периода и индивидуальной, семейной и внутри- и межпопуляци-

онной изменчивости содержания этих биологически активных у культивируемого зверобоя продырявленного.

Глава 2. Изучение состава гиперицинов и флавоноидов зверобоя щюдырявлэиного сорта Зодотодешшский

Нами изучен состав гиперицинов зверобоя продырявленного сорта Золоюдоликскп*! методами тонкослойной, колоночной и высокоэффективной жидкостной хроматографии и УФ-спектроско-пии. Показано, что зверобой продырявленный содержит гипери-цин и псевдогиперицин, причем гиперицина в 10 раз больше, чем псевдогиперицина. Нами были ввделены с помощью колоночной хроматографии и идентифицированы с помощью УФ-спектроскопии флавоноиды и было показано, что зверобой продырявленный сорта Золотодолинский содержит кверцеуин и его гликозиды: гипе-рин, рутин, кверцитркн и изокверцитрин. Таким образом зверобой продырявленный сорта Золотодолинский имеет тот же качественный состав гиперицинов и флавоноидов, что и зверобой продырявленный, собранный з природе, что позволяет использовать культивируемый зверобой как полноценное лекарственное сырье.

Глаза 3. Мэтоди количественного определения биологически активных веществ зверобоя продырявленного

Нами разработаны методы количественного определения гиперицинов .флавоноидов и дубильных веществ в одном экстракте, что позволяет провести анализ содержания веществ в индивидуальном растении. Для определения гиперицинов применен спект-рофотометрический метод, использующий измерение при трех длинах волн,для определения флавоноидов - спектрофотометри-ческий метод с использованием реакции комплексообразования флавоноидов с хлоридом алюминия,а для определения дубильных веществ - комплексонометрический метод титрования, основан-

ный на осаждении дубильных веществ аммиачным раствором окиси цинка и титровании катионов цинка раствором трилона Б. Эти методы дают достоверные и сопоставимые результаты при доступности и дешевизне реактивов и оборудования и небольшом количестве времени, затраченном на анализ, что позволяет проводить серийные исследования. Методы определения флавоно-идов и дубильных веществ модифицированы нами применительно к зверобою продырявленному совместно с д.фармац.н. В.В.Беликовым и сотрудниками лаборатории аналитической химии ВНИИХТЛС (Беликов и др.1990), а метод определения гиперицинов разработан самостоятельно на принципах, ранее не использованных е методах определения биологически активных веществ растений. С помощью метода обращения кривизны (Берштейн,Каминский, 1986) нами было показано, что примесь поглощает линейно е облзсти максимума поглощения гиперицинов.Нами для анализе содержания гиперицинов выбраны три длины волны,лежащие б области линейного поглощения примеси.Для повышения воспроизводимости метода центральную волну мы выбрали на максимуме поглощения основного вещества - гиперицина в 'используемо)* рамсворителе (592 нм). Так как используемый максимум поглощения симметричен, нами выбраны две равноотстоящие от центральной длины волны длины волн 582 и 602 нм.Метод математической обработки полученных данных позволяет элиминировав ошибку, вносимую поглощением примеси для каждого определения. Расчет метрологических характеристик методик анализе показывает, что относительная ошибка количественного определения гиперицинов при проведении анализа в трех повторностя> не превысила 3,85%, флавоноидов - 4,84%,а дубильных вещестз - 3,95% (доверительный уровень 95%). Нами создана программ^ для персонального коммпьютера для пересчета экспериментальных данных в процентное содержание гиперицинов, флавоноидов, дубильных и экстрактивных веществ.

Глава 4. Динамика содержания биологически активных веществ зверобоя продырявленного

Выявление закономерностей накопления действующих ве-

ществ в процессе вегетации имеет большое значение для установления рациональных сроков сбора сырья. Анализ литературных данных (Ражинскайте, 1970; Ражинскайте, 1971; Алюкина, 1977; Маковецкая и др. 1991) показывает, что ни в одной работе для зверобоя продырявленного не изучалась одновременно динамика содержания гиперицинов, флавоноидов и дубильных веществ по органам и в целом растении с учетом роста биомассы и ке определена фаза развития растений с максимальным накоплением всех действующих веществ.

Мы исследовали растения зверобоя продырявленного сорта Зояотсдодинский второго года жизни. Пробы собирались в следующие фазы развития растений: вегетация, поздняя вегетация, бутонизация, начало цветения, массовое цветение, отцветэлие, начало плодоношения, плодоношение.

Максимальное содержание гиперицинов во всех органах приурочено к цветению зверобоя продырявленного (от фазы бутонизации до стадии отцветания). При переходе от фазы вегетации к фазе бутонизации содержание гиперицинов возрастает в общем образце почти в 12 раз, при переходе к плодоношению происходит резкое падение содержания гиперицинов - более чем е 13 раз. Наибольшим содержанием гиперицинов обладают генеративные органы во время цветения - 1,8% .листья во время цветения максимально накапливают 1,1%, а стебли - 0,3%. Максимальное содержание гиперицинов в общей пробе - 0,8% - в начале цветения. Содержание флавоноидов в стеблях, листьях и общем образце почти не изменяется в фазы вегетации и цветения и несколько уменьшается в фазу плодоношения. Наибольшим содержанием флавоноидов обладают бутоны - 6,3%, листья максимально накапливают флавоноиды в фазу отцветания - 5,8%, а стебли в зту же фазу - 1,1%. Наибольшее содержанке флавоноидов в общем образце - 3,3% - в фазу вегетации и 3,2% - в фазу бутонизации. Исследуя накопление дубильных веществ в листьях, стеблях и общем образце зверобоя продырявленного мы выявили в их содержании три максимума - в фазу вегетации, бутонизации к отцветания. Наибольшее содержание дубильных веществ в общем образце зверобоя было в фазу бутонизации -8,2%,а наименьшее в фазу плодоношения - 2,8%. Листья л стебли имеют схожие динамики содержания гиперицинов, флавоноидов

и дубильных веществ. Максимум содержания гиперицинов в этих органах приурочен к фазам цветения, а флавоноиды и дубильные вещества имеют максимум содержания в фазе бутонизации или начала цветения и в фазе отцветания. Динамика содержания биологически активных веществ в генеративных органах имеет другие закономерности: максимальное количество имеют бутоны, а затем происходит снижение содержания всех биологически активных веществ во всех органах.

Целью выращивания лекарственного сырья в конечном итоге является получение наибольшей массы действующих веществ с единицы площади, поэтому мы решили оценить изменение выхода действующих веществ в течение вегетационного периода. Для оптимизации таких показателей, как процентное содержание биологически активных веществ, соотношение органов в побеге и масса побега наш введен показатель - накопление биологически активных веществ на средний побег (в мг).Динамика накопления веществ и в листьях, и в стеблях имеет вид двухвершинной кривой, а накопление веществ в генеративных органах имеет один максимум в фазе качала цветения. Все органы вносят примерно равный вклад в накопление биологически активных веществ, поэтому максимальный выход действующих веществ с единицы площади получается при уборке на сырье всего побега зверобоя продырявленного.Фазой максимального накопления всех действующих веществ в общем образце является фаза начала цветения. Весь период цветения характеризуется значительным накоплением биологически активных веществ и может быть рекомендован для заготовки растительного сырья.

Глава 5.Изменчивость хозяйственно-ценных признаков

у иктродукционньк популяций зверобоя продырявленного

Наметившийся в последние годы популяционный подход в интродукции растений предполагает повышение ее эффективности за счет более полного охвата генофонда вида. Изучение популяций в интродукционном эксперименте позволяет сравнивать популяции в относительно одинаковых условиях среды. Для сравнительного изучения были привлечены наиболее перспективные популяции: 1) сорт Золотодолинский, 2) Страсбургская по-

пуляция, 3) популяция из Брно, 4) популяция из Вацратота, 5) Рижская популяция, б) Московская популяция, 7) Хорогская популяция, 8) Алма-атинская популяция, 9) популяция из Голубого залива, 10) популяция из Кузнецкого Алатау, 11) Коёнская популяция, 12) Юстикская популяция, 13) Чойская популяция, 14) Верх-уймонская популяция, 15) Кайтанакская популяция, 16) синтетическая популяция, созданная Е.В.Тюриной из семян наиболее продуктивных интродуцированных популяций. Растения выращивались в течение трех лет. Морфометрический анализ и определения содержания биологически активных веществ осуществлялись на вторсй(1990 г.) и на третий(1991г.) годы жизни. Морфометрический анализ проводился индивидуально на £5 побегах растений, а биохимический анализ - на 15 из них. Для всех биохимических признаков вычислены средние значения, стандартные отклонения и коэффициенты вариации. Наибольшей изменчивостью обладает содержание гиперицкнов (СУ= 39,07%), наименьшей - содержание экстрактивных веществ (СУ= 18,34%). Содержание дубильных веществ (СУ=25,17%) более изменчиво, чем флавскоидов (С\'=22,27%). Для каждой из 15 исследованных популяций были определены средние значения, стандартные отклонения и пределы варьирования для содержания гиперицинсв. флавоноидов, дубильных и экстрактивных веаеств. Одномерный дисперсионный анализ показал, что по содержанки гиперицинсв нет ни одной пспуляиш5 в которой было бы достоверно больнее содержание, чем в сорте, достоверно меньшее содержание было в одиннадцати популяциях, а различия с четырьмя популяциями недостоверны. По содержанию флавоноидов от сорта достоверно отличаются Страсбургская, Юстикская и синтетическая популяции, причем выше содержание только у Юстиксксй популяпии. По содержанию дубильных веществ от сорта достоверно отличаются Чойская, Верх-уймонская и Кайтанакская популяции и популяция из Голубого залива, из них содержание дубильных веществ выше у Чойской и у популяции из Голубого зализа. По содержанию экстрактивных веществ сорт имеет достоверно большее значение, чем у 14 популяций, различия же между сортом и Коёнской популяцией недостоверны. Таким образом, нет ни одной популяции, которая была бы лучше сорта Золотодолинский по содержанию биологически активных веществ.

Урожайность зверобоя в 1990 г. была самая высокая з< все годы испытания, при этом были реализованы почти все потенциальные возможности растений. Осень 1990 г. была очей неблагоприятной для многолетних растений. Многие популяции выпали полностью на третий год жизни, некоторые на 50%, сорг же оказался более устойчивым (выпадение растений бьш 15-30%). В 1991. году были исследованы шесть выживших популяций. По содержанию гиперицинов и экстрактивных веществ ни одна из популяций достоверно не отличается от сорта Золотодо-линский, по содержанию флавоноидов от сорта отличается Алма-атинская популяция, в которой достоверно большее содержание флавоноидов, а по содержанию дубильных веществ от сортг отличаются Алма-атинская и популяция из Голубого залива, которые имеют достоверно большее содержание дубильных вещестз. Нами проведено сравнение между средними значениями, полученными для шести популяций во второй и третий год жизни пс критерию Стьюдента и между стандартными отклонениями по критерию Фишера. Между данными, полученными в 1930 и 1991 году, имеются значительные различия. Из всех исследованных популяций сорт Золотодолинский показал саше стабильные биохимические показатели: достоверно отличаются только содержание гиперицина, а по содержанию флавоноидов, дубильных и экстрактивных веществ отличия недостоверны. Рижская и Алма-атинская популяции, а также популяции из Коёна к Голубого залива имеют недостоверные различия по двум из четырех биохимических признаков, и популяция из Брно - только по содержанию гиперицинов. Из биохимических признаков выделяется содержание флавоноидов, так как зто единственный признак, по которому достоверно различаются дисперсии у всех популяций. Только флавоноиды сохраняют стабильное среднее значение в различные годы, но реагируют изменением дисперсии на изменение условий произрастания год от года. Одним из важнейших показателей, характеризующих продуктивность растений, является урожайность. Стабильные и высокие показатели имеют сорт Золотодолинский (85,9 ц/га на второй год жизни и 68,0 - на третий), Рижская популяция (75,6 ц/га на второй год жизни и 68,0 - на третий) и популяция из Брно (70,1 ц/га на второй год жизни и 36,4 - на третий). Таким образом двухлетний инт-

родукционный эксперимент показал, что стабильные и высокие показатели по содержанию биологически активных веществ и урожайности имеет сорт Золотодолинский.

Для выявления корреляционных связей между биохимическими признаками - содержанием гиперицинов, флавоноидов, дубильных и экстрактивных веществ - нами проведен корреляционный анализ данных, полученных в 1991 году для индивидуальных растений, выделенных из исследованных популяций. Полученные значения коэффициентов корреляции свидетельствуют о положительной корреляции между содержанием флавоноидов и экстрактивных веществ (г=0,67), флавоноидов и гиперицинов (г=0,б5), флазсясидоз и дубильных веществ (г=0,53) и гиперицинов и экстрактивных веществ (г=0,55). Существование положительной корреляции между биохимическими признаками позволяет нам, определив содержание даже одного биологически активного вещества, оценить содержанке других биологически актизных веществ, что может упростить массовые анализы при селекционной работе. Используя данные двухлетнего интродукционного эксперимента мы можем определить биохимическую норм1/ по содержанию гиперицинов, флавоноидов, дубильных и экстрактивных веществ. Нам представляется наиболее подходящим понятие "адаптивная норма", предложенное Ю.П.Алтуховым (Алтухов и др., 1979). Адаптивные нормы для культивируемого зверобоя продырявленного составляют: по содержанию гиперицинов - 0,36 -О,49% ; флавоноидов - 2,8 - 3,5%; дубильных веществ - 4,9 -5,6%; экстрактивных веществ - 27 -28%.

Глава 6. Апомиксис у зверобоя продырявленного и его

значение для интродукции и селекции

Создание стабильных продуктивных популяций зверобоя продырявленного с высоким содержанием биологически активных веществ - цель интродукции и селекции этой культуры, поэтому важно знать систему размножения этого вида. Наши дачные по популяционной изменчивости показывают, что зверобой продырявленный имеет небольшие коэффициенты вариации по содержанию биологически активных веществ, поэтому мы предположили, что существуют биологические особенности этого вида, умень-

тающие изменчивость количественных признаков.Немецкий исследователь Конрад Нок (Ыоаск,1939) выяснил, что зверобой продырявленный является факультативным апомиктом. Мы исследовали систему размножения зверобоя продырявленного сорта Золо-тодолинский. Нами проведены опыты по изоляции части соцветия индивидуальных растений и было показано, что при этом развиваются семена, то есть системы самонесовместимости нет. Трехлетние опыты показывают, что после кастрации и при последующей изоляции, то есть при беспыльцевом режиме, завязывания семян не наблюдается. Без опыления семяобразование невозможно, а оплодотворение эндосперма является предпосылкой для партенокарлического развития яйцеклетки. Эмбриологическое исследование, проведенное на временных препаратах зародышевых мешков, выявило массовое замещение дегенерирующих мейотических зародышевых мешков апоспорическими, развивающимися из клеток нуцеллуса. Таким образом, нами подтверждено, что зверобой продырявленный является факультативным псевдо-гамным апомиктом. Поскольку уровень апомиксиса сильно зависит от экологических условий, было необходимо изучение вов-можности аломиктического размножения для сибирских популяций зверобоя продырявленного в сравнении с европейскими. Нами был проведен антморфологический анализ по методике Хохлова -Куприянова (Хохлов и др., 1978; Куприянов, 1969) зверобоя продырявленного сорта Золотодолинский и одиннадцати интроду-цированных популяций. Школой эмбриологов Саратовского университета показано, что если степень дефектности пыльцы (СДП) больше 11%, то это достоверно доказывает возможность аломиктического развития вида. Сорт имеет СДП=17,5%, а Кай-танакская популяция - 37,8%. Все исследованные интродуциро-ванные алтайские популяции обладают высокой степенью дефектности пыльцы. Две из одиннадцати популяций имели степень дефектности пыльцы меньше, чем 11% - популяция из Вацратота -4,3% и Алма-атинская популяция.- 9,0%.

Нами проведен анализ индивидуальной изменчивости содержания флавоноидов и дубильных веществ в четырех семьях растений, выделенных из сорта Золотодолинский.Все семьи имеют среднее значение флавоноидов и дубильных веществ больше среднего для сорта Золотодолинский, правда эти различия не

всегда достоверны. Исходные для семей растения отбирались и по признаку содержания дубильных веществ, и такой отбор дал возможность повысить содержание флавоноидов и дубильных веществ в потомках растений. Следует отметить, что семьи имеют небольшую индивидуальную изменчивость по содержанию флавоноидов и дубильных веществ. Такое единообразное потомство от растения перекрестноопыляемого вида при свободном опылении является одним из индикаторов апсмиксисаСНаппа.ВазЬои, 1987). Апомиксис издавна интересует селекционеров множеством преимуществ, которые он дает для селекции, и они пытаются перенести элементы апомиксиса в культурные растения. Похоже зверобой продырявленный - зхо нервоз культивируемое лекарственное растение с таким еысоким процентом апомиксиса, к зто позволит во много раз ускорить селекцию данного вида на содержание биологически активных веществ.

ВЫВОДЫ

1. зверобой продырявленный сорта Золотодолинский обнаружил стабильные и высокие показатели по содержаний биологически активных веществ и по урожайности в сравнении с пятнадцатью интродукциоккыми популяциями.

2. Культивируемый зверобой продырявленный содержит ги-перицин и псевдогиперицин и кверцетин и его гдикозиды - ги-перин, рутин, кверцитрин и изокверцитрик, что позволяет его использовать как полноценное лекарственное сырье.

3. Разработанные нами методы количественного определения гиперицинов, флавоноидов и дубильных веществ у зверобоя продырявленного позволяв? проводить анализ содержания биологически активных веществ в отдельном растении и проводить серийные исследования.

А. Фазой максимального накопления всех действующих веществ в отдельных органах и целом растении зверобоя продырявленного является фаза качала цветения. По нашим данным, весь период цветения может быть рекомендован для заготовки лекарственного сырья.

5. Между содержанием флавоноидов и экстрактивных веществ, флавоноидов и гиперицинов, флавоноидов и дубильных

веществ, гиперицинов и экстрактивных веществ существует положительная корреляция.

6. Зверобой продырявленный сорта Золотодолинский является факультативным псевдогамным апомиктом, поэтому особенности системы размножения и ограниченность изменчивости пс содержанию действующих веществ позволят ускорить интродукции и селекцию этой культуры.

Основное содержание работы изложено в следующих работах:

1. Баяндина К.И. Значение апомиксиса у зверобоя продырявленного для интродукции и селекции // Состояние и перспективы научных исследований по интродукции лекарственны) растений: Тез. докл. Всесоюзн. науч. конф. - М., 1990. -С.9-10.

2. Баяндина И.И., Валуцкая А.Г. Экспресс-метод определения флавоноидов в зверобое продырявленном // Вторая республиканская конференция по медицинской ботанике: Тез. докл.

- Киев, 1988. - С.197-198.

3. Баяндина И.И., Долгов В.К., Валуцкая А.Г. Влияни< возрастающих доз азота на накопление флавоноидов, танинов ] урожайность зверобоя продырявленного // Состояние и перспективы научных исследований по интродукции лекарственных растений: Тез. докл. Всесоюз. науч. конф. - М., 1990. - С.10-1:

4. Беликов В.В., Точкова Т.В., Шатунова Л.В., Колесим Н.Т., Баяндина И.И. Количественное определение основны: действующих веществ у видов Hypericum L. // Растит, ресурсы

- 1990.- Т.26. Вып.4. - С.571-578.

5. Возделывание зверобоя продырявленного по интенсивно; технологии / Е.В.Тюрина, И.И.Баяндина, А.П.Долгих и др. Новосибирск, 1992. - 40 с.