Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Сочетанные инфекции грызунов в Волго-Уральском степном очаге чумы

ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Автореферат диссертации по теме "Сочетанные инфекции грызунов в Волго-Уральском степном очаге чумы"

РГ6 иа 1 7

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН

АЛМАТИНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ ИНСТИТУТ

На правах рукописи УДК 616.981.452—036. 21 : 599, 32 : 616

ЦЕПКО Ирина Николаевна

СПЧЕТАННЫЕ ИНФЕКЦИИ ГРЫЗУНОВ В ВОЛГО-УРАЛЬСКОМ СТЕПНОМ ОЧАГЕ ЧУМЫ

(03.00.07 — микробиология)

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

АЛМАТЫ 1993

Работа выполнена в Казахском противочумном научно-исслэдовательском институте Министерства здравоохранения Республики Казахстан и на Уральской противочумной станции.

Науный руководитель — доктор медицинских наук, профессор В. М. Степанов.

Научный консультант — кандидат медицинских наук Л. Е. Некрасова.

Официальные оппоненты — доктор медицинских наук, профессор Б. В. Каралышк и доктор медицинских наук, профессор И. Л. Мартиневский.

Ведущее учреждение, давшее отзелв о научло-практиче-ской ценности работы — Иркутский научно-исследовательский противочумный институт Сибири и Дального Востока.

Защита состоится « » 1993 г.

в « » часов на заседании специализированного совета Д 079.04.03 в Алматинском государственном медицинском институте Министерства здравоохранения Республики Казахстан (480012, г. Алматы, ул. Толе би, 83).

Автореферат разослан « » 1993 года.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Алма-тинского государственного медицинского института Министерства здравоохранения Республики Казахстан.

Ученый секретарь '

специализированного совета кандидат медицинских наук,

доцент Р. Ф. СИДОРЕНКО

• - 2 -А?стуальность пробя&ш. Распространение многих видов "возбудигелей шфекдюкяьи заболеваний на территории природных очагов чуш ставст бсгцх-с о взаимодействии их в организуй грызунов-носителей ,чуш к о 'влияний такого взаимодействия За развитие основного инфекционного процесса и характер иммунного ответа

На сегодняшний' день в определенной мэре изучены взаимоотношения чумного ь&гкроба с возбудкте.яякй'псевдотуберкулеза, киезчкого изрсшкоаа, ; сальконеллеза при совместном пребывании их in vitro et in vivo(Хрусцелеаская, 1971; Бэз-pyjcoBa о соавт-, 1S85; Некрасова, 1985 п 1989). Актуальность подобных исследований заключается'в том,. что эпизоотии различных инфекционных заболеваний з' очагах чумы могут накладывать свой отпечаток яа чумной эпизоотический процесс (Радь, 1S58; Хрусцелевский, 1955; Дубровский, 1977) и затруднять лабораторную диагностику чумы С Некрасова, 1S89).

йнтерес представляет такяе вопрос о совместной циркуляции в природе чумного и. пастереллезного ьшкробов. Однако сведения о распространенное^! пастерелл в . автоношых очагах чумы немногочисленны (Барулина, 1961; Сешотрочев с соавт. ,1965; Шзрзпкова, с соавт.-, 1965; Гордненко с соавт. ,1967; Занина с соаит. ,1970; В>ронова с ссавг. ,1975), а изучение возбудителей пзетереллеза а чуш в качестве инициаторов тксттф&кти. проводилось в относительно немногочисленных опытах и практически не увязывалось с природными оча-гаш чуш • (Хрусцелевс:сзя. с соавт., 1975 и 1977; Быков с соавт. , 1967; Стручшеа, . 1S85 й др.}.

"" Дедь.работы. 'Изучить распространение я свойства возбудителей 'сочетаяных ийфэкцкй - на определенном -участка. Вол-

' -з - ■ _

га-Уральского степного автономного- очага , Прикаспийского

степного очага чумы. . Вшстюъ роль, которую . могут - играть

пает&реашгв элшэотиях чуш.. .

Основные гэдачи исследования: .

- Еыавит-ь б Еолго-Уральском стопном очаге чуш среда грызунов и их эгаопаразитов вдркуляци» возбудителей инфекционных заболеваний человека

- Исследовать свойства выделенных щташов шкроорганиэмов.

- Изучить особенности патогенеза при заражении отдельных -видов грызунов возбудителями чумы и пастерегяеэа.

- Установить характер взаимоотношений ыеэду чумными микробами и паетередлами in vitro et in vivo.

- Изучить показатели ишукяого ответа подопытных ответных на комбинированное' эараяенйо возбудителями этих заболеваний при различных сроках ми введения.

- Установить особенности лабораторной диагностики чуш в условиях взаимодействия с возбудителем пастаредлеэа.

Взучяая новизна:

- Бйерзш на территории Болг'о-Уральского степного очага чууы установлена шиашщацяя грызунов я их эктопаразитов воз-'

, будмегани псеадагуберкулез?*., кигх-чного нерсизкоэа, ■ саль-

• ьше&веза, лизтеркоза,■' зриззшедада»; .пастередлеза.,

- Устаповлгко,. «то ¿-;зй-эд5£'Тб,кьноох-ь - Есгбудй?е;щ чумы в ао--wammt-'o' яаегадхдоа» оозфааядхся.. дольеэ * как та аскус-oTSSHHia. сроках,' *ш%).вр8. опрёдедачшг уело-

свойств чушюго микро' йа ъ:,оргтщшу, ibpcKa/c^b'^ sapajsaa-;

ных пастереляаш.

- Отмечен факт, что б ряде случаев - сметанное■ .инфицирование малых сусликов смертельными дозат чумного и пастереллез-ного микробов заканчивается .выздоровлением яивоишх.

- Показано, что в результате заражения .грызунов пасиереллат в организме.животных могут Вырабатываться антитела, поло-.чительяо реагирущие с чумными эрлтроцитарнкш диапгости-кумат

- Обнаружено совпадение- во времени окончания эпизоотии чумы в изучаемом природном очаге с прекращением выделения от грызунов и эктопаразитов культур.других патогенных микроорганизмов..

Теоретическое значение. Обнаружение совместной циркуляции возбудителей инфекционных-заболеваний на одной и той же территории природного очага чумы и их связь с эпизоотией чумы помимо практического'значения представляв? научный интерес, в частности, для углубленного, изучения к выяснения некоторых сторон проблемы сохранения чумного 'микроба в природе.

Кали исследования позволят предположить наличке у чун-иого микроба особызг адаптационных механизмов, позеолящих. не только выживать в.конкурентных условиях, но и использовать пастереллы в качестве сти^шруюс?сс раэмяояйиие факторов..

Практическая' ценность:

1. Обнаружение нами- прз1роднюс очагов всевдотубгркулеза, кишечного иерспшюаа, садъмоиеллзза, зризнпелонда, пастеред-леза, диитериоза имеет практическое значение -для работников , здравоохранения и ветеринаркой слузябн в алане более э#ек~

- б -

тивиой организации - мероприятий по профияшсзикз н борьбе- , с инфекционные .заболевашшга. •

Z. : Разные адаптивные свойства • шкробоз чуш и паогерел-леза. приводят яри миксшнфзкции -к 'кзшиени» течения ннфекци*? онасго процесса и морфологических признаков вссоциантов, что ■негативно влияет на.качество .бактериологической диагностик» чумы

а Еажное значение для диагностики чуш у малых сусликов при еочетачном заражении возбудителями чумы и пастерел-леза имеет изменение характера.иммунного отвэта при исследовании сывороток крови в РПГА н РЕАг. Так,- обнаружено, что тигры РИГА с антигенным чумным ■ эритрсцитарнш диагностику-мом в некоторых случаях могу? .превышать титры РЕ4г. Кроме этого установлено, что в организме грызунов, зараженных пзс-теремаш, .шгут "зырабаткватьея антитела,. положительно реа-глрувде с творческими чуйтши аритроцитаркшм двагаостк-кумаш. Эгн факты доданы учитываться при оценке росультаяоя серологического исследования и-послужить поводом дла поиска ковш,-более совершенных ¿.специфичных, -диагностических.пре-. паратое.''-' ... » . ' ■ .4 * . ■

'4..' Реадзь-тгагу кадок наследований по изучение чистых кульгур возбудителей еооиозов воши в "Методические '

■ давди для работы СГОВа но лабораторной диагностика ла?лудоч~ ногзейч>шх звбодаваний"/С1930) к в " Руководство со леччшз, эпидемиологии, профилактике .и лабораторной дкагнос-ти!се я&с!гередл№&"(1993>, утвервдешше Ученш Советом Казахского противочумного,... научко-,нейладоь£1тедьского . института (протокол.Н10 от 6.12.20 г. и протокол N1 о? 11.02.93 г. со-, одагств&шю), -V, : •.. . г ' . " -

Основные положения выносимые на защиту: 1. В Волго-Урап-ском степном очаге чуш среди грызунов- носителей чуш циркулируют возбудители псевдотуберкулеза, кишечного иерсиниоза, сальмонеллеза, лиотериоза,- пасте-реллеза;' эрйзипелоида ..

2.. Совместное пребывание возбудителей чуш и пастерел-леза в организме грызунов нолэт приводить-к' изменению фенотипов чумного - микроба и тем'.еашм затруднять бактериологическую диагностику чуш.

3. Комбинированное заражение ..грызунов микробаш чумы . ж . пастереллеэа может изменять характер серологического' ответа на чуму. ' ' / - : - .

. 4. Конец.эпизоотии чумы совпадает с освобоздением грызунов от- ряда сопутствующих инфекций. ■

. Апробация работы. Основные результаты наших исследований доложены на Всесоюзной научно-практической конференции

по иерсиниозам (Владивосток, 1989), на региональном совеиз-

' .. с

нии противочумных учреждений по эпидемиологии, эпизоотологии и профилактике особо опасных инфекций (Уральск, 1990), на.З с'езде географического общества Казахской ССР (Алма-Ата, .1990), на 13 конференции противочумных учреждений Средней Азии и Казахстана (Алма-Ата, 1990), на 5 об'единенном с'езде гигиенистов, эпидемиологов, микробиологов, паразитологов и инфекционистов Казахстана (Алма-Ата,' 1931), на расширенном заседаний научно-пройэводственного Совета Уральской противочумной станции (Уральск, 1991), на 8 Всесоюзной, конференции по медицинской географии ( Ленинград, : 1991), на межгосударс-т т венной. научно-практической коя^ренвди по организации эпид-надзора йри чу>.:з и мерам ее йрофнлактикя .(№а- Ата, .1992). В

' - 7 -

амерщенном мзде диссертация -доложена на ■ научной конференщш Казахского противочумного. научно-исследовательского институ- .

та, '.

' 1?убл«кз1зд:. По земз диссертации л публиковано 10 статей.

Структура и o¿' ем работы. Диссертация состоит из введения, четырех глав, заклвчения и.выводов, иллюстрирована 10 рисунками, 10 таблицами. Список цитируемой литературы включает 186 работ отечественных и 33 - иностранных авторов. Диссертация изложена ка 164, страницах машинописного текста.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИИ

При исследовании полевого материала и изучений выделенных культур мы руководствовались . инструктивно-методическими документами разных лет издания, а тает©, работами И. Е Дома-радского (1971}, Е Л, Сешотрочева с соавт. (1985), У. Freds-riksen (1973), ■£. PospisU (.1988), G. Wagner et al. (1983) И

В опытах было испольйовано' 5 штаммов PastourelJa , multocidaЧШ 979 , 512 , 279,' 280, 5S8), б штаммов Pasteurel-la haeMlytioa (Ш ESO,269, 232, 100, 575) и 2 даашз Yersinia pe>stis, (Ш 1216, . 1Б84) / ■ выделенных от грызунов в .ход^епйа^о^ичвскЬгр; \Ь&у»довайяя,. типичных , для .'Вол-го-Уральского шждурочьй, ;.т ':осковньш свойствам, ■ а также, ■ ггйсдашвй отамк У. pestfs EV. 'в качество основных питательных . ср^д лрлул-ияж ДУС (Сгапанс© с соавт., 1937), агар и бульон лотгингора. . \ . '

...Вйашодеймвий; - №робон; .и, ластереляаш на

- в -

питательных средах иеучали по методикам й И. Мельникова ( 1962), Е С. Егорова (1955) „ при -этом определяли антагонистический индекс (Ай) по методикё Л Г. Перегца в модификации JL Б. Некрасовой (1989). Чтобы сгладить различия, вызванные особенностями .жизнедеятельности микроорганизмов, мы-исполь-' вовали разработки кинетического анализа (Эмануэль с соав., -1970; Васильева, 1982) для описания роста злокачественна новообразований, который уж ■ применялись ■ ранее в практике микробиологических исследований ( Безрукова, ,1975; Некрасова, 3989; Радучева с соавт., 1Э89).

На белых мышах, ' морских свинках 'и малых сусликах (Citellus pygmaeus Pafl. ) определяли вирулентность, чувствительность и восприимчивость животных к возбудителям чуш и ■ пастереллеза; характер взаимоотношений, микроорганизмов различных видов при совместном пребывании з одном и том из организме .животных. -Кая этих .целей было использовано 391 белых мышей, 677 морских свинок и 393 малых сусликов, отловленных на незпизоотийной по чуме территории.

При изучении взаимодействия возбудителей чу^а* и пастереллеза в организме , теплокровных гаязотиых а первую очередь оценивали восприимчивость* инфекционную чувствительность и характер иммунного ответа на инфицирование зверьчов двумя видами микроорганизмов, а также, избиение основных свойств ассоциантов. С этой целью на® было поставлено две серии опытов. В первом случае осуществляли' одновременное заражение различными сочетаниями доз возбудителей чуш и пастереллеза, во втором - последовательное с разными интервалам:. В качестве контроля брали такие лз групгш ' подопытных яшотных одного и того р» вида,' эараамгада иаиокультуршс! испитуеыкх зтяшов з тех' пз дозах, и 'з одно и то гзэ врекя, -что и огаетюо

жйвотны&. / ' /.v ;'.;/• •

. По числу обсемененных органов, определяли состояние дис-семикацшг, .а таю», интенсивность их обсеменения воабудите-лями (число шкробянх клеток, высеянных иа равных навесок),., показатель интегральной обсемзненности (ПИО) - сумму всех . колоний, выросших на чашках Бри -посеве внутренних оргайов (Котова с соавт., 2989).

Дяя определения а;»логического сходства чумнЬго микроба и пастерелл использовали коэффициент Жаккарда, который позволяет характеризовать взаимоотношения микроорганизмов различных видов по частоте ввделения ассоциаций бактерий из органов зараженных животных (Шньшиков с соавт, , 1990).

При проведении серологических исследований пользовались " Инструктивно-методическими материалами по. применению серологических методов диагностики при зпизоотологическоы обследовании природных' очагов чумы" (Шсква, 1883)..

Статистическую обработку; поденных результатов прово--дили- по методикам, опиеаннда И. П. Ашмариным с соавт. "С 1962) и -йЯ.Белицкйп* (1972), . '

. . РЕЗУЛЬТАТЫ -ИССЖДОВАШ И .ИХ ОВСУНДЕНИЕ' :

• Б течение 398&-1990 г.:г.' нами.исследовано 9400 животных ., (грызунов, хищников,:: насекомоядных, птиц) и 12090 зктопара-;витов, пр>$,.8тои . определена их зараганнооть возбудителями • псевдотуберкулеэа,"кивечного?иероиниоаа, еальшаеллеза, пас- > херел?й?а, дийгерйоза, :эризквелоидаи/- В;.Еолго-Урадьеком отен-лом очаг* ■. чут \ зги шкрооргздиаш были изолированы впервые, -'вч псевдотуберкудеаа и

•: '^'Фщшяозщ была апачеиа. ранее"другими. авторами (Горбунова •'

с соавт., 1967; Гражданов с соавт., 1989). Всего изолировано 412 ¡зтаммов патогенных микроорганизмов, в том числе, один штаьол Yersinia interned! а, .ранее не встречавшейся'на тер-

■ риторлях -природных очагов чумы Республики Казахстан.

Наиболее часто в исследуемом материале выявляли возбудителей кишечного .нерсинкоза (44,2% выделенных культур) и сальконеллеза (<И,СХ), реяв - пастереллэза (4,6%), лкстерш-за (4,3%) и чуш (3,62), единичными' были находки псёвдоту-бвркулевтго шшроба, эрттелоида и третий интермедиа'(в сумме - 2,0%). .'

Зараженность грызунов кишечных ■ керсинкозом в среднем была 7,26% как в степном очаге, так и в песчаном, поражен-ность блох составляла 0,15%. . Бое культуры"возбудителя этого заболевания;были получены в 1988 году,в последующее годы

■ кишечный иерсиниоз нам обнаружить не удавалось. Среда виде-, ленных штаммов превалировали культуры первого биовара (86,0%) и пятого серовара (51,0 ¿3,11). ,•

В ряде случаев т внутренних органов одного и того ае животного мы изолировали одновременно ■ два видй патогенных бшетерий: возбудитель кишечного иерешшоза встречался в смеси с чумным микробом, сальмонеллами, пастерелламн, возбуди- . телем псездотуберкулеаа Особого внимания, на нал взгляд, заслуживает изменение при этом свойств ассоциантов, которые мы наблюдали, в частности, у чумного микроба и возбудителя кндачного иерсиншза, одновременно паразитлруюилх яа малом суслике. Культуру были получены после второго пассака исследуемого материала на белых кьшх, соотношение.микробных.«леток разных видов микроорганизмов было в пельзу возбудителя кишечного иерсиниоаа. Последний имея ряд отклонений в биохи-кических показателях, а у чумного микроба обнаруживались

- 1-1 -

признаки поражения бактериофагом. - '

Сальыонеллы были представлены треда видами, , иг' которых наиболеа- часто встречались ■ 5. .typhi muri um..' Территориально • сальмонеллы 6шт.'распространены практически повсехжстно. Ш наблюдали в- Волго-Уральском степном очаге чуш эцизоотиэ ■ саяьмонедяееа с пиком в 1989 г., , когда варшшнность этими бактериями малого суслика ьозраела. за один год в 40 раз (р < 0,05), при зтоы снижения численности грызунов отыечеко не было. Интересно, что затухание сальшнеллеэной эпизоотии по срокам (1990г.) .совпало с началом шжзпизоотического периода чуш в очаге.

Анализ частоты выделения лиетеркй из исследуемого материала- «оказал, что эаражгяшость грпзуиов в Волго-Уральскоы crem/ом очаге (выделен всего. 1 штамм) значительно нлда (р < 0,05),чем в гесчаном (1,6 + 0,2Z). Наиболее часто(50,0%-всех, рта:,иов)' лйстерии были выделены из внутренних органов гребенщиковых. песчанок.

• Возбудитель псевдотуберкулева встречался ■ с одинаковой частотой.в обоих изученных очагах чуш, в отдельных•случая* - у одних и тех дз носителей. 'В- ходе зпиэоотологическаго •обследования территории ш- подтвердили нащечие здесь второго ,оч&га-,пеевдотуберкул&эй, впервые выявленного J3« й'Горбуновой с cosibt. (1967), Находки возбудителя зркзипелоида, в ис-'следуемом материале -была, единичным. (4 теть}, что не позволяет.делать, 'каких-либо определенных выводов о циркуля, т.1ии бактерий этого вида ка территории 'исследованных. очагов. ; - Среди'иасте'релл преобладали P.rrultecicia (78,QZ штаммов). Остальные.были;ртнесены к виду P.hecwlytica ' Видовую, при-надлойн&ота их."определяли- во, совокупности дифференциальных-•' Ьртиаюв\ув$ду1&ш ио которых являлись гемолитическая ак- -

тньпоотъ 1: шщолобрязозгкгп. Огобеяяостыз географической ус?речае«оегк пастэрелдеза явилась его приуро-

ченность к определенный территориям Очагя этой инфекции были обнаружена преи.тугаетвекяо з леечаяоа и вжой части степного очага» где ча::;с- всего • ош: сочетались с • ареалом распространения возбудителей килечного кереияиоза и сальмэ-неллеза, реле - зр»чзкпелоада, лргеркоза, Ксевдотуберкулеза, чу».«. Обращает на себя внимание чрезвычайно низкая- зарахен-яость паетерелдаш малого суслика - основного носителя в Волго-Уральском степном очаге чуш (0,02%), • в связи с че» была изучена восприимчивость и инфекционная чувствительность грызунов этого вида к лаете редлам. Оказалось; что пастеред-лы, независимо от видовой принадлежности штаммов, проявляет вксочайду». вирулентность по отнозгэшт к малому суслику, вн-зьгвая 1С0,0% гибель зверьков при попадании в их организм единичны« микробных клеток. В связи с тем, - что пастереллы имеют ряд сходных свойств с чумным микробом (морфология микробной клетки, высокую избирательную вирулентность для определенных видов .тавотных, способность вырабатывать антитела положительно реагирукзд/е с чумными эритроцктарш!ми диагнос-т,гя«у:.«аю1), № провели подробное изучение взаимоотношений этих дпух ш-крооргатэмоа а различных условиях существования.

В ходе экспериментов било установлено, что патологоана-гошческие изменения у различных вадов гшвотных яря чуме и паетерелдеэе носили в основной период • однотипный характер, 'различия выявлялись лишь в поздниэ срокгг наблюдения.-

В течение первых двух-грех дней после эараяэпмя культуру зсзбудитедл ?ге -удавалось'получить. даяз яз места введения, причем у чугшого микроба этот срок бш несколько больше. Мы

набцщали, что проникновение чумного микроба во внутренние органы грызунов происходит постепенно, сначала лимфогенныы, а затем - гематогенным путями, в то' время как при пастерел-леэе обсемененность внутренних органов наступала сразу после • "латентной", фаз ч. Пастереллы для сусликов из Волго-Уральского степного 'очага чуш оказались дада Солее вирулентными, чем чумной кжроб. Генерализация пастереллезной инфекции у малых сусликов и их гибель наступала раньее, чем при чуме, в то время., как патологоанатошческие изменения были незначительными.

Изучение характера взаимодействия возбудителей чуш и паетереллеза in vitro мы проводили используя искусственные питательные среды. Результаты опытов показали, что совмеет- ■ ное пребывание пастерелл и чумного (.шкроба на твердых питательных средах не оказывает какого-либо вдания на рост микроорганизмов. Для количественной оценки. размножения бактериальных клеток и изучения динамики этого процесса мы использовали бульонные культуры, причем, с цель» нивелировки флюктуация, которые могла вызвать различная скорость, роста бактерий, наш был применен кинетический анализ.

■ Сравнение: абсолютных -дай) содержания.микробных клеток в . одном миллилитре бульонной культуры' показало,. что в период ■ накопления бактериальной .массы в смесях возбудителей - двух •видов преобладали пастереялы, что когда быть связано с большей скорость» их;роста; однако,1 все ю в присутствии'чумного микроба шотередлы развивались, быстрее, чем в контроле, осо-беиво ''.а '.¿масй.Д- мк^дам'-'иташо»« EV. При этом отмечалась •\тКг$ .¿взсхсзггочнаа1.: \8адер«кз. : рзамноюнш '•'< вакцинного теша --EV. {по сраакоякз,е'юга(юты),:. Во втором,периоде роста-еиру-1 »тм'тяфыполяостм пощвт'л'в:ot№tmmix культурах

жизнедеятельность пасторелл (отсутствие их роста при высеве на контрольную срэду), а атш,в1 EV стал активно размножаться (АИ ластерелл возрос от 0,093 до 811,16). йэвгненйя основных свойств микрооргапизьюв пойла s« васишдействиа в смешанных культурах нами не отазчзио.

При анализ® полулогери&лгчесгепс аяаыорфэз кинетически* кривых количественных изменений отдельных микробных популяций нами были выявлены определенные еакопокзрности, в частности, преобладание пастарэдл а скесашилс посевах икэло ¡.гас-то не в связи о т алтагонистичесшйги свойства!.« по отноаеии» к чужому гсикройу или больпэй старость» роста, а за счет более быстрого "включения" различных адаптационных механизмов, направленных. на гшазшшэ вида. Что касается возбудителя чует, то ' пэрлод адаптация у кэго в ассоциациях оказался несколько больпги, чем .у пасторалл, ко с поякгзниын "запасом лрочгюсти", поело первоначальной аалерязет- роста он быстро начинал равшюгзпвя, а яоояэяу*®»» синюю» его концентрации в прксугтйи иасторояя происходило иэдвеннеа, чем в контроле, что позгохлло ^тата о более зьюоках резервных и

I

адаптационных воа,чо<%"ео?да. чукдаго шгрсба в сравнеши с ;паствредяаш. '

Исследование. »оая®о711каяий. мгеду микроорганизмами в емзшашгых культурах на. ксиусстэзяяшс питательных средах, ха~ . рактериэуя эдаптианнз сяойотаа С-ак?еряЯ, ко даст, однако, полного представления о протекании этих-, процессов в: ёстеот-. венных условиях, .в первую оузродь в оргачтоьй? теплокровных мивотных. В свявн с эчш наьа! . бто т^тю Егашэдейстбяа . между-возбудителями чущ K.-msrepdju&88 im 'шротах езинках п малых сусликах, иеиольэованиых в качеоюе' 'еотесшйшх• модо* лей, Мы наблюдали за течением смешанной инфекция при ОДМОЗ-

реыеккоы -инфицирований пвоткьс: • чукзГ. к . пагтерелламк; аа развитием чукного иафэедгюйЕоГО процесса у зверьков, - рапсе икфицаров&впых возбудителе« паотерелдеза, и аа развитием пастереллега у гзшагкьи, первоначально быарх е- контакте с чушкм ыикрсбок.

Заражение животных сыесь» чумного микроба к вастерелл'ь 60,0л случаев вызывало развитие микстйнфэкщге. При этом было отмечено, что одномоментное эарах&кние морских свинок воабу- > дителями чумн и пастереллеза удлиняет • срою; - их жизни по сравнению с контрольной группой животных на насколько дней (р < 0,05)- В этих случаях диссемннация микроорганизмов во внутренние органы, происходила более активно, а интенсивность обсеменения была выше почти в 10 раз (р < 0,05). Мы наблюдали изменение морфологических свойств чукчог~> микроба под ' влиянием вастерелл при их совместном пребывании в организме животных, что в определенной мере затрудняло лабораторную диагностику. Колонии, возбудителя чумы были двух типов: . 1} грубо исчерченные с плохо выраженной зочой кружевного роста и сглаженной поверхностью и 2) гладкие с "растрескавшейся" поверхностью. В то же время последовательное заражение этими бактернямн зверьков приводило иногда к ватажному течению инфекционного процесса (увеличивались с рот? кпаш! животных) или к их выздоровление Предварительный контакт использованных нами' в опытах гашотных с пастерелгазл: в больяинотве случаев заканчивался ренскбшкзацией, или -осла&сенаем, организма. градуяов, . что . проявлялось . _яри • заражении аверьков возбудителем чуш буршш рээшй&ги- чушого инфекционного процесса и одновременным - обостренней пгигередлс-гшой -инфек--ции. . - . .' '■' ' " ;."■.' •,'■•''>.■'.'■ ''.-■■ • ;

' ■ С помодм> коз ^гкуггита'' л^эгарла -к* оценквалк ■ шшги-

ческую обсесть возбудителей яуш ?: пзстерэллеса &гот показатель для разя:яп;ш - органов трскях евпяок варьировал от 19,0 до 100,©С, "«гго свядотельстЕогать об изменении• характера £зш??.:?от!гоке;шй ыелду ижрооргенизиаья • а зависимости о? среды обитания. Гак, в тканях из песта введения возбудители чуны и пастереллгза, очевидно, г.ступалн в антагонистические относенп'л, ко-тсрыз, при попадании Оасгерий в крозь, легкие и селезенку скопились сикергяктасгсяш, а в лимфатических узлах - ыутуалкстический!.

Ион проведении зпизоотолопгческого обследования- изучаете территории в качестве дополгплегыгаго был нсполыюван серологический .ус-то д. При этом о отдельных случаях нама было егкечено превышение титров РИГА над Щг, воэ.моэтю обусловленное кеслецифичесгай еттцляцкей шшлёдогенеэа (Оганян с соавт., 1370; Стручком» 1985; ' Некрасова, 1569) с преину-№етве»икм накоплением 19- н 7- Б- - »«уиоглобужшов (Еасо-сова, 1970). Серологичесюое исследование, как и бактериологическое, подтвердило- наличие из ксбледованнай территория онешяяш очагов. Об этом говорят' выявление • у грызунов антител к возбудителям псевдотуберкулеза, книачного иерскнкоэа, сальмопеллеза. Лри посадотуберкулезо серологический метод: сказался даже более информативным,чем багетеркодогнческйй', напротив/ для кда?члого.нереинио<*а и аальмпкедявэа. отиэча-лась обратная картина, -когда''-количество, евделеяных. культур превышало число -обнаружениях. сероиозимвнмх -авэрько». й* считаем, .что в -данном случае несоответствие. реэугьтатов-се-, рологичесюто и Саге,криологического методов исследования было емвано с использованием дн-згясстикуыоэ для -'ограниченного' числи сероз&ра». . - . . ■■

■ Вряд« сывороток.т.©дмовре-м-'шо выявляли спэш^^л^скш,'

антитела к различным видам микроорганизмов, налрщгэр, возбудителям кишчного-керсиниоэа .и сальконеллза (0,9% всех положительно реагирующих сывороток), .псевдотуберкулеза и ккдач-ного иерсиниоза (15,4%), псевдотуберкулеза, кикечного иерои-ниозэ и сальмояелдеза (1,92). .■

Наши исследования были бы- не полными без экспериментального изучения гуморальных показателей иммунитета при раздельном . и смешанном инфицировании грызунов возбудителями чумы и пастереллеаа В ходе экспериментов у 36,3 .+ 1,0% морских свинок.и 1,7% малых сусликов,-'зараженных пастерелла- . ми, были выявлены антитела, положительно реагирующие в РНАг с аятительныы чумным эритроцитарным дкагкостикуюм. Однако, как показали результаты наших опытов,' - эти антитела не -обла- . дали кротективными свойствами по опадению к шумному микробу. Несмотря на то, что последующее заратэнке этих .гоаотных возбудителем чумы вызывало значительный выброс в кровь "ге-маггкя'ининов" (средний геометрический титр 1:5440 ± 2,0), 90,0% из них погибали. Напротив, последовательный контакт животных с паотереллами, а затем, через двое суток - с. возбудителем чуш приводил к выздоровлении большинства из них, хотя в крови этих зверьков содержались иммуноглобулины к Ф1 в относительно низких концентрациях (средние геометрические титры: РИГА - 1:166±1,0, РНАг - 1:437 ± 1,2). Увеличение разрыва между инфицирование« разными видами бактерий до четырех и более суток способствовало усиленной продукции антител, что; однако, не всегда предохраняло их от гибели. В экспериментальных условиях было отмечено у отдельных животных нарушение иммуногенеза, которое .выражалось в превышений литров РИГА над титрами РНАг и выявлении у некоторых малых —пайков РИГА антител :к' Ф1 чумного микроба уде на следующий

. - 18 -

день пойле, инфицирования возбудителями чумы. Вероятно, пас-тереллы могут выступать в роди стимулятора аптителогенеза при чумной инфекции.

Отмечено, что в тех случаях, когда контакт морских сви-йок с чумным ннкробом предгоствовал их заражения пастерелла-ми, чуинне иммуноглобулины выявлялись у ыеньсего числа сывороток зверьков, чем в контроле, а Солью? половины вызяшпмх животных (60,ОХ) не имели'специфических антител в крови. Это свидетельствует о развитии имыунопараляча при вараяении пас-тереллами больных'чумой животных. Аналогичным^ были результаты опытов в группах морских свинок, эарая&нкйх одномоментно обеими микроорганизмами, при этом мы наблюдали' уменьшение примерно в два раза числа зверьков со специфическим}) антителами в • крови по сравнению с контрольными группами аивотных, при. одновременном общем удлинении сроков начала антйтелсге-неэа. Было замечено, что увеличение дозы пастередл в смеси их с. чумным микробом способно активизировать иммуногенез.

С 198а по 1990 г. г. на изучаемой, нами территории было отмечено снижение- процента эверьков с аитителаыи в крови .■ к чумному:и псевдотуберкулезному микробам, возбудителям гсн-;вечного иёрсиююза-и сальмонеллеэз вплоть до полного их . 'от-, сутствия. Одновременно; а этим зарегистрировано- ватухаийё эпизоотии чумы в Болго-Урмьском с-тагшом очаге и врекрадание выделения из исследуемого материала возбудителей.сопутстЕут> да инфекций. Таким образом, полученвые, нами- экоперйшртэда-ш» данные»- свидетельствую?: об; определен»; йа^^ ности эпизоотических;процессов я природных- очагах е^Еэдябго типа, дальвейа^е изучение- к^горой?•рададрюь• 'еоьрй; мснные пронотамени* о саморегуляции |1а5ййИ?ар)ШХ-; еистеь* тем самым ..приблизить \ решение ■ проблема :

'•' " 1® -микроба в межэпиэоогический период.

; ВЫВОДЫ ;

1. Ейервые на территории Болго-Уралъских степного и. песчаного меэоочагов.чумы выявлена циркуляция среди .грызунов и их эктопатааитов возбудителей пеевдотуберкулеза» кишечного иереиниоэа, еальминеллеза, пастереллеза, листериоза и эризи-пелоида. Впервые на территории природных очагов чумы Казахстана установлена спонтанная зараженность * грызунов 'У. тЬег-"'.-сЬ а

2. Кйигый суслик из популяции Волго-Уральского степного очага чумы имеет высокую инфекционную чувствительность к

. ьоьбудителю пастереллеза, циркулирующее на д?чной территории, вследствии чего при определенных условиях пастереллы могут выступать регуляторами численности, естественных носителей чумы.

3. Большая часть выделенных культур (78, Б%) возбудителя пастереллеза была представлена Р. ти1Ьсю1(1а, остальные 21,5?.-Р. Кза/кЯуМса. Все они имели типичные.морфологические и биохимические свойства.

4. Взаимоотношения возбудителей чуни и пастереллеза на искусственных питательных средах носят индиферентный характер. После незначительной задержки чушюП микроб бистро увеличивает микробную массу, а последуккэе снижение его концентрации в присутствии яасгерелл происходит медленее, чем в контроле. '

5. Смешанное нйфйцировакие грыгушь •' воебуднтелямн • нуш и пастереллеза, • каи: правиго,;'.усугубляет тй1еоть течения чум-

кнфекциоиаого. провеса,'- что сокращает сроки лош; • ж-

вотных, по сравнению с контролем.

6. В ряде случаев последовательное инфицирование грызунов возбудителями чуш н пасгереллеза,приводит к эатяакому течению чугшого инфекционного процесса» часто заканчивашэ--пуса выздоровлением ливотных..

7. Совместное пребывание возбудителей чуш и паегерел-Ееза в организме чувствительного гавотного можт приводить к Мотипичес!к>й изменчивости юрфо логических признаков чумного микроба я тем самк?.1 затруднять лабораторную диагностику ¡умы.

8. В результате контакта грызунов с пастереллами в их (рганиэме вырабатывается антитела, положительно реагируюаде

чумными эритрсцитарньш днагностикуш.'.ш, Эти глобулина не бладаюг протектнвнш® свойсг-вагт по отисгеншо к чуиному икробу и даю? лакну» информацию при серологической диагностике чумн.

С1ШС0К РАБОТ, ОПУБЖШЕАНКЬК ГО ТЕ® ДИССЕРТАЦИЙ •

1. Некрасова Л.Е., Степанов &II, Цэпко И. Н., Безрукова , С, •' Вйгленке возбудителей яерсиниоэов на ■ фоке . эпизоотии укы » Волго-Уральском степном очаге// Мерсмниоэы (нихрсбио-эгяя, эпидемиология, кядаяка, патогенез, лабораторная диаг->етика): тезисы Ееесогоиой научно-пра}т1ческой1юн^рэиця:: ИЗ сентября- 1989 г. - -Владивосток, 1989. - 1; 1. - С. 100-юз.' ,'■ . . ■•, ■ ■.■

2. Некрасова Л В., Цепко Е й/,, &ззрукога Л С. К вопросу ¡учения взаимного влияния вогбуднтелеО чукы и лаотередз^а/,« сериалы регионального совещания .протйвачиукнх учреждений

• эпидемиологии, эпизоотологии И| п{х>(|илак?йк&.особо:опасшг;

;V/'-V- 21V '■•*';, " ; ' ., " -Г ' 'I

инфекций. -Куйбышев, 1990. - С. 163-155.

3. Степанов В. Ы , .Цепко JLR , Некрасова Л. Е., Безрукова Я С О выделении возбудителя ясевдотуберкулезз в Бол-го- Уральском междуречье// Материалы регионального совеарния противочумных учреждений по эпидемиологии, эпизоотологии и профилактике особо опасных инфекций. .- -■ Куйбышев, 199а "С. 19^-197. ' : ..'v ■■ -' V

4. Степанов ЕМ., Безрукова JL С. , : Некрасова JLЕ., Головко а Н., Билялов а А.Цепко И. Е и др. Распространение лиетериоза среда грызунов на, территории Казахстана и Средней Азии// Экологические проблемы Казахстана;, тезисы докладов 3 с' езда Географического обдеетва Казахской. ССР часть 2, -медицинская география; -Алма-Ата: Наука, 1990. ~ С. 83-85. .

5. Цепко й. Е О выделении возбудителей'псездотуберкуле-эа, кишечного иерсияиоэа, сальмонеллеза,; пастереллеза, зри-зипелоида и лиетериоза в.Волго-Уральском степном очаге чумы // Современные аспекты эпиднадзора еа.'ООИ: тезисы 13 конференции противочумных учреждений Средней Азии и Казахстана. - Алма-Ата., 1990. - С. 199-202.

6. Степанов В.М. , Безрукова Я. С., Ая«анияаова К К. .Копиров а К , Туякбаева Б. Ы.. Тимонина й С, , Абеноза ЫС, Некрасова Л. Е., Цепко И. EL я др. Проблемы фиродной.очаговости лиетериоза в Казахстане// здравоохранение Казахстана. -1991.:- N 0. - 0.6-?. .'.".

7. Цепко И ,Н , Некрасова Д. Е., Отручкова a 5L . Характер веаимодейетвля возбудителей' чуш и п^стереллева В:организме малых сусликов//. Мэтериалн У-об'«ценного с'езда гигиекис-■ Тos, эпидемиологов, юкройиодогов.-, йэраэитологов И инфекционистов ;• ч..--.О'; 92*94'

.-'' •• &Цепко % Я V Йэйредова -^е&^ко&и ' Х Q. - ■ % ^вопросу

о медико-географическом значении совместного течения зпизоо-тий чумы и других - инфекций в Волго-Уральском степном очаге // Реализация и пути повышения эффективности. мэдико-географических исследований. - Ленинград, 1991..- С. 67.

. 9. Степанов Е М., Безрукова Л. С. Некрасова Д. £., Цепко И. Е , Карпова 1-1X , Продан О. Й , }.йка-Шчекко Т. а , Туякбаэ-ва Е И., Новикова Т. А. Географическое распространение возбудителей некоторых инфекционных заболеваний среди грмзунов Казе1Хстана//0рганизпция -згшднадзора при чу^е и ьюры ее. профилактики (материалы межгосударственной научно-практической конференции). - Алма-Ата, 1992. - Т. 3. - С. 4Б4-4Б6.

Ю.Степанов ЕМ, Цепко И. Я, Некрасова • Л. Е., Безрукова .1 С. Кинетика размножения в .жидких искусственных питательных средах возбудителей чуш и пастереллеэа/УОрганизация эпид-надзора при чуме и меры ее профилактики'' (материалы межгосударственной научно-практической конференции). - Алма-Ата, 1992. - Т. 1. - С. 150-162. /

у///

'ф —

/У«*"*1-* ■